Генетико-эпидемиологическое исследование фенилкетонурии в популяции Краснодарского края тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Зинченко, Людмила Васильевна

• Зинченко, Людмила Васильевна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Зинченко, Людмила Васильевна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Клинико-генетическая характеристика фенилкетонурии.

1.1.1. История изучения фенилкетонурии.

1.1.2. Метаболизм фенилаланина в организме человека и его нарушения.

1.1.3. Классификация форм болезни.

1.1.4. Диетотерапия.

1.1.5. Структура гена и белка фенилаланингидроксилазы.

1.1.6. Изучение гено-фенотипических корреляций при ФКУ.

1.2. Эпидемиологические исследования ФКУ.

1.2.1. Распространенность ФКУ в различных популяциях.

1.2.2. Распространенность мутаций в гене РАН в европейских популяциях.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Краткий очерк демографической истории Краснодарского края.

2.2. Структура и объем материала.

2.3. Характеристика методов исследования.

2.3.1. Биохимические методы анализа.

2.3.2. Молекулярно-генетические методы исследования.

2.3.3. Статистические методы.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Распространенность мутаций в гене РАН в Краснодарском крае.

3.1.1. Встречаемость наиболее частых при ФКУ мутаций в Краснодарском крае.

3.1.2. Этническая специфичность в спектре и частоте мутаций в гене РАН.

3.1.3. Территориальное распределение мутаций в гене РАН. 84 3.2. Анализ динамики уровня фенилаланина в крови больных

3.2.1. Характеристика уровня и динамики фенилаланина в крови больных ФКУ.

3.2.2. Оценка эффекта изученных факторов, на динамику уровня ФА в крови больных ФКУ.

3.2.3. Взаимодействие факторов, влияющих на динамику фенилаланина в крови больных ФКУ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Генетико-эпидемиологическое исследование фенилкетонурии в популяции Краснодарского края»

Фенилкетонурия (ФКУ; MIM 261600) - аутосомно-рецессивное заболевание, вызванное нарушением обмена аминокислоты фенилаланин (ФА), поступающей в организм человека с белковой пищей. Заболевание было впервые описано как метаболическое нарушение в 1934 г. норвежским врачом и биохимиком Феллингом [Foiling I., 1934]. В настоящее время ФКУ диагностируют у новорожденных при помощи биохимического теста. Однако такой подход позволяет лишь фиксировать нарушения метаболизма фенилаланина, не позволяя проводить профилактику заболевания. В 1985 г. впервые была определена мутация гена РАН (локализован в длинном плече 12 хромосомы (12q22-q24.1)), обусловливающая классическую форму фенилкетонурии [Woo S.L.C. et al., 1985]. В настоящее время известно более 500 мутаций в гене РАН, спектр и распространенность которых имеет межпопуляционные и этнические особенности [Чарикова Е.В., 1995; Барановская С.С., 1996; Смагулова О.Ф. и соавт., 2000; Одино-кова О.Н. и соавт., 2000; Ахметова B.JT. и соавт., 2003; Амелина С.С. и соавт., 2004; Степанова А.А., 2005; Обабкова JI.B. и соавт., 2005; Guldberg Р. et al., 1993а; Scriver C.R. et al., 2003].

Идентификация мутаций в гене РАН позволила подойти к решению вопроса о влиянии генотипа на биохимический и клинический фенотип. Используя информацию о структуре белка, предпринимаются попытки предсказать эффекты уже известных и вновь открытых мутаций [Kas-nauskine J. et al., 2003; Angel L. et al., 2003]. Большое количество мутаций, приводящих к заболеванию, и их сочетание, вызывают сложный метаболический фенотип в организме больного. Показано, что генотип первично может определять изменчивость уровня ФА в организме больных [Scriver C.R. et al., 1988; Kayaalp E., 1997; Guldberg P. et al., 1998]. С другой стороны, отмечено, что пациенты с одинаковым генотипом могут иметь различные клинические и метаболические фенотипы [Scriver C.R. et aL, 1999; Waters P.J. et al., 2001; Pey A.L. et al., 2003]. Раннее начало диетотерапии и соблюдение диеты не всегда сочетается с нормализацией уровня ФА в крови и, как следствие, с нормальным показателем интеллекта ребенка [Красно-польская К.Д., 1987; Копылова Н.В. и соавт., 2004; Ramus S.J. et al., 1999; Enns G.M., 1999; Griffiths P. et al., 2000;]. Несмотря на то, что исследования ФКУ в отношении клинических и молекулярно-генетических особенностей больных проводятся довольно активно, до настоящего времени ряд вопросов, касающихся причин клинической гетерогенности данного заболевания, не решены окончательно.

В европейских странах средняя частота ФКУ составляет 1 на 10 000 новорожденных [Scriver C.R. et al., 2001]. По данным массового скрининга в среднем по России частота ФКУ среди новорожденных составляет 1:7297 [Новиков П.В., 2002]. В Краснодарском крае фенилкетонурия встречается с частотой 1:8250 новорожденных [Голихина Т.А., 2004]. Высокая частота заболевания в Краснодарском крае, многонациональный состав населения, исторические особенности формирования народонаселения указывают на необходимость проведения молекулярно-генетического изучения заболевания в регионе. Такое исследование актуально, так как позволит оценить территориальную и этническую специфичность в распространении мутаций гена РАН, что важно для разработки профилактических мероприятий по снижению распространенности заболевания в регионе с наименьшими затратами.

Цель исследования: Изучить распространенность мутаций R408W, R158Q, P281L, IVS12ntl, R252W, R261Q, IVS10nt546, I65T гена РАН на территории Краснодарского края и определить факторы, влияющие на динамику уровня фенилаланина в крови больных.

Задачи исследования:

1. Изучить распространенность мутаций гена фенилаланингидроксилазы (11408\У, 11158(2, Р281Ь, 1У812т1, Я252\У, Ъ26Щ, 1У810т546, 165Т) у больных фенилкетонурией, проживающих на территории Краснодарского края.

2. Определить территориальную и этническую специфичность в спектре и частоте мутаций в гене фенилаланингидроксилазы на территории Краснодарского края.

3. Оценить влияние миграционных процессов и особенностей брачной структуры на частоту, спектр мутаций и генотипов гена РАН на территории Краснодарского края.

4. Исследовать динамику уровня фенилаланина в крови больных и оценить ее зависимость от генотипа по гену РАН, пола, возраста, национальности и региона проживания больного, возраста начала диетотерапии, строгости соблюдения диеты, также мест рождения родителей пробандов.

Новизна исследования: Впервые получены данные о встречаемости мутаций гена РАН (Я408\У, 11158(2, Р281Ь, 1У812пП, Я252Ш, 11261(3, 1У810Ш:546,165Т) у больных ФКУ в Краснодарском крае. Определена мажорная для краснодарской популяции мутация -11408\¥. Показано, что регионы края различаются по спектру и частоте зарегистрированных мутаций гена РАН Оценена значимость миграционных процессов в формировании генетического разнообразия по спектру мутаций гена РАН на территории Краснодарского края.

Проведен анализ динамики уровня фенилаланина в крови у больных классической формой ФКУ из Краснодарского края в зависимости от генотипа по гену РАН, пола, возраста, национальности и региона проживания больного, возраста начала диетотерапии, строгости соблюдения диеты, а также мест рождения родителей пробандов. Установлено, что динамика уровня фенилаланина в крови зависела от генотипа больного (более благоприятная динамика отмечалась у больных с генотипами R408W/R261Q, Я4(^/Р281Ь, 1У812пП/1У810^546 гена РАН), возраста начала диетотерапии и строгости соблюдения диеты.

Практическая значимость: Полученные новые данные о распространенности мутаций К408\У, Ш58С>, Р281Ц 1У812пП, R252W, 1126К}, 1У810Ш;546,165Т в гене РАН на территории Краснодарского края, их спектре у представителей различных национальностей, что может быть использовано при проведении геногеографических исследований, а также в генетической эпидемиологии для оценки величины генетического груза и генетической гетерогенности фенилкетонурии.

Создан краевой банк крови и ДНК семей, отягощенных ФКУ. Выявлены гетерозиготные носители изученных мутаций заболевания среди сиб-сов пробандов. Результаты выполненного исследования могут быть использованы в работе медико-генетических консультаций (медико-генетическое консультирование, прогноз рождения здорового ребенка, прогноз динамики уровня фенилаланина в крови, проведение пренаталь-ной диагностики в отягощенных семьях, семьях родственников пробандов, выявление гетерозиготных носителей в популяции) и в настоящее время применяются в практической работе Кубанской межрегиональной медико-генетической консультации, в том числе и при проведении пренатальной ДНК-диагностики в отягощенных семьях.

Положения, выносимые на защиту: 1. Больные фенилкетонурией в Краснодарском крае характеризуются специфичностью в распределении частот мутаций гена РАН в сравнении с другими популяциями России: распространенность мутаций убывает в ряду Я408\У, 11158(2, Р281Ь, 1У812пИ, R252W, 11261(2,1У81(М546; общая информативность хромосом по изученному спектру мутаций составила 65,7%.

2. Для Краснодарского края свойственны территориальные и этнические различия в спектре и частоте мутаций в гене РАН, которые определяются миграционными процессами и национальной принадлежностью мигрантов, особенностью их расселения по территории края.

3. Мигрантами в краснодарскую популяцию привнесены 37,4% мутаций гена РАН, уровень информативности по исследованным мутациям в данной группе составил 70,2%; мутация 1У810п1546 регистрировалась только среди мигрантов.

4. Динамика уровня фенилаланина в крови больных ФКУ зависела от генотипа по гену РАН, возраста начала диетотерапии и строгости соблюдения диеты.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Зинченко, Людмила Васильевна

выводы

1. В популяции Краснодарского края у больных фенилкетонурией определены семь из восьми изученных типов мутаций гена РАН со следующими частотами: 11408\У - 51,9%; Ш58(2 - 3,8%; Р281Ь - 3,3%; 1У812пИ - 2,4%; №52У/ - 1,9%; 11261(2 - 1,4%; 1У810т546 - 1,0%. Мутация 165Т не была зарегистрирована.

2. Установлена территориальная гетерогенность в частоте и спектре изученных мутаций в гене РАН в Краснодарском крае. Мутация 11408\У регистрировалась во всех регионах с частотой от 42,3% в Южном регионе до 76,0% в Приазовском регионе. Спектр других выявленных мутаций в регионах отличался: в Приазовском регионе зарегистрированы мутации Р281Ь и Ш58(2; в Восточном - мутации Р281Ь, Ш58(2, Я252\У и 1У812пП; в Южном - Я252\У, 1У810т546 и 1У812т1; в Причерноморском - 1У810п1546,11261(2 и Ш58(2; в Центральном и Северном регионах -11261(2, КЛ58(2 и 1У812пи. Общая информативность хромосом по изученному спектру мутаций составила 65,7% и варьировала от 57,1% в Причерноморском регионе до 88,5%) в Приазовском регионе.

3. Больные ФКУ в 78,0% зарегистрированы в одноэтнических семьях (среди них 71% - в однонациональных русских семьях) и 22,0% - в межнациональных семьях. Потомками от браков между жителями Краснодарского края являются 43,9% больных (из них в 19,8% случаев родители представлены выходцами одного района), в 18,7% - между уроженцами различных регионов России и стран СНГ. В зависимости от типа браков родителей отмечается различная информативность хромосом по изучаемому спектру мутаций: в семьях между уроженцами края информативны 60,0% хромосом, в семьях, где только один из родителей происходит из Краснодарского края - 72,8% и в семьях мигрантов - 68,8%.

4. Выявлена этническая специфичность частоте и спектре по некоторым изучаемым мутациям и генотипам. Мутация К408\У из десяти представленных национальностей чаще всего регистрировалась у русских (61,5%). В армянской этнической группе с высокой частотой регистрировались мутации Р281Ь (21,0%), 1У812пП (10,5%) и 1У810т546 (10,5%). Генотипы Р281Ь/Р281Ь, 1У812т1/1У810п1546, 1У810Ш546/Х встретились только в армянских семьях.

5. Динамика ФА в крови больных ФКУ, исследованная в регрессионном анализе, характеризуется большим разнообразием (значения показателя «а», характеризующего общий уровень фенилаланина в организме варьирует в пределах от -12,9 до +73,8), границы изменчивости коэффициента линейной регрессии, отражающего направление изучаемой динамики составляют от -1,16 до 0,45, а величина дисперсии отклонений от линии регрессии меняется в пределах от 0,25 - до 39,8.

6. Установлено, что динамика уровня фенилаланина в крови больных фе-нилкетонурией определяется генотипом больного (более благоприятная динамика отмечалась у больных с генотипами Я408\\711261С), Я408\У/Р281Ь, 1У812пи/1У810т546 гена РАН); строгостью соблюдения диеты (в группе детей со строгим соблюдением диеты среднее значение показателя «а», отражающего общий уровень фенилаланина равен 7,7±0,5; в группе, соблюдающей диету с нарушениями - 7,9±4,2, среди детей, не соблюдающих диету - 19,7±2,4) и сроками начала диетотерапии (важен не только возраст начала диетотерапии, а также соблюдение ее в дальнейшем).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В связи с разработкой эффективных методов диагностики и профилактики фенилкетонурии с использованием биохимических и молекуляр-но-генетических методов особый интерес для нашей страны, имеющей очень разнообразный этнический состав, представляют геногеографиче-ские исследования с определением региональных особенностей в частоте мутаций в гене РАН, территориальной распространенности заболевания. Огромные расстояния, существование географических и иных (языковых, родовых, национальных) барьеров способствует множественной подразделенное™ населения страны с региональными особенностями груза наследственной патологии. Хотя эта подразделенность частично начала нивелироваться в последние десятилетия вследствие нарастающей панмиксии, тем не менее, региональные особенности отягощенности генофонда популяций патологическими мутациями значительны и представляют не только теоретический, но и практический интерес для планирования лечебных и профилактических мероприятий в системе здравоохранения.

Массовое обследование новорожденных на фенилкетонурию имеет особое значение, поскольку, кроме ранней диагностики заболевания позволяет формировать контингенты, требующие систематического медико-генетического консультирования, а также способствует обнаружению гетерозиготного носительства мутантного гена и проведению пренатальной диагностики. Неонатальный скрининг на фенилкетонурию в Краснодарском крае поэтапно стал внедряться с 1983 года. Семьи, имеющие больных ФКУ, находятся на учете в медико-генетической консультации. В настоящее время компьютерная база данных Кубанской межрегиональной медико-генетической консультации содержит сведения о 204 больных ФКУ из 183 семей, проживающих на территории края.

В ходе выполнения настоящего исследования происхождение му-тантных генов ФКУ на территории края у больных и носителей оценено генеалогическим и молекулярно-генетическим анализами. При анализе родословных семей был подтвержден установленный ранее факт аутосомно-рецессивного наследования фенилкетонурии. В результате проведенного молекулярно-генетического исследования получены данные о частоте, территориальном и этническом распределении мутантных аллелей гена РАН в Краснодарском крае.

Установлено, что мажорной является мутация R408W (51,9%), высокая частота встречаемости которой отмечается во всех исследованных российских популяциях, варьируя при этом от 50,% в Самарской области до 75,7% в Свердловской области [Степанова A.A., 2005]. При сравнении частоты мутации R408W в краснодарской популяции с другими изученными ранее российскими популяциями, оказалось, что наиболее схожие частоты отмечены в популяции больных ФКУ Московской (54,3%), Самарской (50,0%) областей [Степанова A.A., 2005] и Башкортостане (53,0%) [Ахме-това B.JL, 2003], при средней частоте встречаемости мутации R408W в России 61,4% [Степанова A.A., 2005]. Второй по частоте встречаемости в исследуемой выборке (3,8%) была мутация R158Q, которая регистрировалась реже, чем в отдельных популяции больных ФКУ, например, Санкт-Петербурга (4,3%) [Барановская С.С., 1996], Новосибирской (4,4%) [Сма-гулова Ф.О., 2000] и Воронежской областях (4,4%) [Степанова A.A., 2005], но чаще, чем в среднем в изученных российских популяциях (1,7%) [Степанова A.A., 2005]. Частота мутации P281L (3,3%) в краснодарской популяции оказалась близкой к частоте этой мутации в Башкортостане (2,7%) [Ахметова B.JL, 2003] и Ростовской области (2,6%) [Амелина С.С. с соавт., 2004]. Мутация IVS12ntl, которая выявлялась почти во всех ранее изученных популяциях России, у больных ФКУ из Краснодарского края регистрировалась с частотой 2,4%, при суммарной частоте мутации после исследования ряда регионов России 2,3% [Степанова A.A., 2005]. Другие мутации в гене РАН, рассматриваемые как наиболее частые в европейских популяциях, в краснодарской выборке регистрировались редко. Мутация R252W встречалась с частотой 1,9%, что согласуется с данными по частоте встречаемости данной мутации в соседней с Краснодарским краем Ростовской области (1,95%>) [Амелина С.С. с соавт., 2004], Московской области (2,1%) [Степанова A.A., 2005], Норвегии (2,1%) [Eiken H.G. et al., 1996] и почти в 2 раза реже, чем в Самарской (4,4%>), Архангельской областях (4,2%) [Степанова A.A., 2005] и Франции (4,0%) [Abadie V. et al., 1993]. 1,4% всех мутантных аллелей в краснодарской выборке несли мутацию R261Q, встречающуюся во всех европейских популяциях. Сходные частоты этой мутации отмечались в Московской (1,1%) и Воронежской (1,1%) [Степанова A.A., 2005] областях и Чехии (1,65) [Kozak L. et al., 1995]. Мутация сплайсинга IVS10nt546, зарегистрированная нами в 1,0% случаев, что согласуется с данными по частоте встречаемости данной мутации в Санкт-Петербурге (1,2%) [Барановская С.С., 1996]. В некоторых популяциях больных ФКУ России (Удмуртии, Вологодской области) мутация IVS10nt546 вообще не встречалась, в других частота мутации IVS10nt546 была различной: от 2,2% в Курской до 8,7%) в Самарской областях [Степанова A.A., 2005]. Высокая частота мутации зарегистрирована в Турции (39,2%) [Hennermann J.B. et al., 2000], Италии (12,4%) [Dianzani I. et al., 1995]. В обследуемой выборке больных ФКУ из Краснодарского края мутация I65T не обнаружена, также как и в большинстве обследованных российских популяциях (Московской, Ростовской, Самарской, Архангельской, Вологодской, Курской областях) [Амелина С.С. с соавт., 2004; Степанова A.A., 2005].

Проведенное исследование позволило установить семь типов мутаций гена РАН и позволило идентифицировать 65,7%) всех мутантных хромосом, что несколько ниже, чем информативность хромосом по аналогичному спектру мутаций среди больных ФКУ в большинстве исследованных популяциях: Московской (71,3%), Воронежской (78,3%), Ростовской (80,52%), Самарской (82,6%), Курской (82,6%), Архангельской (85,4), Свердловской (87,9%) областях, Удмуртии (94,6%) [Амелина С.С. с соавт., 2004; Степанова А.А., 2005; Ахметова В.Л., 2003]. Полученные результаты свидетельствуют о межпопуляционных различиях в частотах мутаций гена РАН, и о необходимости определения спектра наиболее частых мутаций у больных ФКУ в каждой популяции для проведения максимально эффективной диагностики заболевания с наименьшими затратами.

Большинство больных ФКУ в краснодарской популяции оказались компаундными гетерозиготами по разным мутациям. Полученные данные позволяют провести пренатальную диагностику заболевания и поиск гетерозиготных носителей с использованием прямых методов ДНК - диагностики в 39 семьях (42,9%). В остальных семьях для возможности проведения пренатальной диагностики необходимо применение дополнительных исследований (поиск более редких мутаций гена РАН, исследование полиморфных маркеров, расположенных внутри или в непосредственной близости от гена РАН, в неинформативных семьях, где не выявлены частые мутации гена РАН, необходимо исключить вариантные формы заболевания (исследование генов С®Р11 и РТ8 и др.).

Заболевание зарегистрировано в 41 (из 44) территориально- административной единице края. Установлена неравномерность территориального распределения ФКУ в Краснодарском крае. Приазовский регион, расположенный в Западной части края, оказался наиболее информативным по исследованным мутациям (88,5%) за счет высокой частоты (76,9%) мутации Я408\У Наименее информативным оказался Причерноморский регион (57,1%), в Восточном регионе информативными были 68,2% хромосом от всех анализируемых в регионе, в Центральном - 64,0%, в Северном -61,1% (из них 52,8% составляет мутация 11408\\0 и в Южном - 57,7%. Выявленные различия можно объяснить более ранним заселением западной и северной частей правобережной Кубани переселенцами из Черноморского казачьего войска и наличием среди них носителей мутантного гена.

Как известно, одним из важных факторов, изменяющих генные частоты, является миграция, поэтому нами проведен анализ мест рождений пробандов и их родителей, характеризующих миграцию. Анализ происхождения 91 семьи с ФКУ показал, что в 40 (43,9%) семьях оба родителя и прародители были уроженцами Кубани. В 34 семьях (37,4%) один из родителей происходил из-за пределов Краснодарского края и в 17 (18,7%) семьях обе родительские ветви были родом из различных областей России и бывшего СССР. В 24 семьях (26,3%) из всех обследованных оба родителя являлись жителями одного района, что повышает вероятность инбридинга. Неслучайно большинство таких семей выявлено в территориях с высокой встречаемостью заболевания - в Тихорецком, Брюховецком, Приморско-Ахтарском районах. 37,4% мутаций в гене РАН были привнесены в краснодарскую популяцию мигрантами из-за пределов края.

С целью оценки этнической специфичности в распределении мутаций гена РАН и мутантных генотипов в популяции Краснодарского, края с помощью молекулярно-генетических методов были обследованы 172 родителя больных ФКУ, которые являлись представителями десяти различных национальностей. 78% больных ФКУ являлись потомками однонациональных браков, среди которых преобладали браки между русскими 71,0%, 6,0% составили армянские и 1,0% турецкие семьи. Межнациональные браки составили 22%. В русских семьях зарегистрировано шесть типов мутаций гена РАН из них 61,5% от всех хромосом в данной этнической группе содержали мутацию Я408\\^. Кроме русских мутация Я408\\^ регистрировалась у украинцев (50,0%) и казахов (100,0%). У потомков армян с высокой частотой регистрировались мутации Р281Ь (21,0%), 1У812пН (10,5%) и 1У810т546 (10,5%). В доступных литературных источниках не удалось найти данные о распространенности и наиболее частых мутациях гена ФКУ среди лиц армянской национальности. Однако, полученные в ходе выполнения настоящего исследования результаты, позволяют предположить в армянской этнической группе, данное заболевание имеет высокое распространение, а спектр мутаций вызывающий ФКУ может иметь существенные этнические отличия.

Неинформативными по изучаемым мутациям были 30,1% «русских» хромосом, среди остальных национальностей не удалось идентифицировать 40,0% и более хромосом. Результаты показывают, что в популяциях смешанного этнического состава увеличивается разнообразие мутантных аллелей гена РАН.

Несмотря на то, что заболевание давно известно врачам, анализ литературы показал, что некоторые важные вопросы, связанные с корреляцией генотипа с клиническим и биохимическим фенотипом не решены до настоящего времени. Большое количество мутаций, приводящих к заболеванию, и их сочетание, вызывают сложный метаболический фенотип в организме больного. Но, даже имея с одинаковый генотип, пациенты могут иметь различные клинические и метаболические фенотипы. Отмечено также, что раннее начало диетотерапии и соблюдение диеты не всегда сочетается с нормализацией уровня ФА в крови.

С целью выявления факторов, влияющих на динамику уровня ФА в крови больных, была сформирована группа из 80-ти человек, (44 мальчика и 36 девочек), в которую были включены только больные с «классической» формой ФКУ, что подтверждалось выявлением мутаций, характерных для данной формы заболевания.

На первом этапе проводился анализ уровня ФА в крови больных ФКУ, и оценивалась его динамика с помощью регрессионного анализа. Различия типов динамики содержания ФА у обследуемых больных ФКУ подтверждены результатами кластерного и дисперсионного анализов. Были выделенные 6 кластеров больных, статистически достоверно отличающихся друг от друга как по общему уровню ФА в крови, так и по отрицательной или положительной динамике содержания ФА, а также по оценке регулярности ответа организма на диетотерапию (или ее отсутствие). Этот факт свидетельствует о существовании факторов, объединяющих больных ФКУ в группы по уровню ФА.

С целью установления факторов, возможно влияющих на динамику уровня ФА в крови больных ФКУ, были изучены следующие характеристики: территория проживания (административно-территориальных разделение); регион проживания больного; национальность больного; происхождение родителей; генотип больного; строгость соблюдения диеты; пол больного; его возраст, а также время начала диетотерапии. Для анализа использовалась однофакторная модель дисперсионного анализа, в ходе которого статистически достоверные межгрупповые различия установлены для территории проживания больного, его генотипа, соблюдения диеты и времени начала диетотерапии.

При оценке результатов дисперсионного анализа в ряде случаев предполагалось, что положительный результат дисперсионного анализа обусловлен в действительности не собственным эффектом изучаемого фактора, а его связью с другим, реально действующим. На третьем этапе проведен анализ взаимодействия между собой всех факторов, эффекты которых на динамику ФА изучались в данном исследовании. В основу исследований был положен метод анализа двумерных распределений, основанный на оценке парных корреляций всех факторов, взятых во всех возможных сочетаниях. Статистически достоверная связь признаков-факторов установлена для пар признаков: «территория - мутация» (К=0,58); «национальность - мутация» (К=0,50); «национальность - начало диетотерапии» (К=0,31); «происхождение - начало диетотерапии» (К=0,25); «соблюдение диеты - начало диетотерапии» (К=0,39).

В результате анализа взаимодействия факторов, показано, что эффект признаков «территория проживания - мутация», «национальность -мутация» на динамику ФА обусловлен тем, что имеет место территориальная и этническая гетерогенность в распределении мутантных аллелей гена РАН.

Взаимодействие факторов «национальность и начало диетотерапии» существенных различий по времени начала диеты в обследованных русских, армянских и смешанных семьях не выявило. Основная группа детей всех национальностей была выявлена в ходе массового неонатального скрининга и диета начата в первые месяцы жизни.

При описании взаимодействия пары признаков «происхождение родителей - начало диеты» было отмечено, что родители больных ФКУ, строго соблюдающих диету и выявленных при массовом скрининге, чаще всего являлись местными жителями (93,3%) или, по крайней мере, один из родителей был местным (79,3%). В случае, когда семья относилась к приезжей, лишь в 42,8% диета соблюдалась строго.

Согласно полученным данным при описании пары признаков «строгость соблюдения диеты - начало ее введения», можно отметить, что если диета ребенку была назначена в первые месяцы жизни, то родители ребенка пытались соблюдать ее достаточно строго. В группе детей, строго соблюдающих диету, 96,8% составили дети, выявленные в ходе массового скрининга новорожденных. Среди детей, выявленных в ходе селективного скрининга и в группе приезжих детей, с участием родителей диета соблюдается далее с нарушениями или не соблюдают вообще. Доля случаев, когда в этих группах родители придерживаются строгого соблюдения диеты, составляет 3,2%, не соблюдается диета при позднем начале лечения в 62,5% случаях.

Современный мировой и отечественный опыт показывают, что не-онатальный скрининг, установление молекулярно-генетического дефекта гена РАН и своевременно начатая диетотерапия в большинстве случаев могут обеспечить пациентам с ФКУ нормальное физическое и психическое развитие. Но эта цель может быть достигнута только в результате совместных усилий врачей-генетиков, а также родителей больных детей, участие которых в строгом соблюдении детьми диеты имеет большое значение.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Зинченко, Людмила Васильевна, 2006 год

1. Амелина С.С., Кривенцова Н.В., Поляков A.B., Зинченко P.A. Мо-лекулярно-генетическое типирование больных с фенилкетонурией в Ростовской области // Мед. генетика. 2004. - Т. 3. - № 2. - С. 139144.

2. Аничкина A.A., Осипова Е.В., Зинченко P.A. и др. Анализ наиболее часто встречающихся мутаций в гене ФАГ у больных ФКУ в ряде регионов России // Мед. генетика. 20036. - Т.2. - № 10. - С. 403.

3. Ахметова B.JL, Викторова Т.В., Мурзабаева С.Ш. и др. Анализ мутаций гена ФАГ у больных фенилкетонурией из Башкортостана // Мед. генетика. 2003. - Т. 2. - № 4. - С. 182-187.

4. Барановская С. С. Молекулярно-генетический анализ фенилкетону-рии в Санкт-Петербурге: Автореф. дисс. уч. степени к.б.н. Санкт-Петербург. - 1996. - 21с.

5. Блюмина М.Г., Лебедев Б.В., Копылова Н.В. и др. Зависимость тяжести поражения мозга при фенилкетонурии от степени гиперфе-нилаланинемии // Ж. невропатол. и психиатр. 1980. - Вып. 12. - С. 1778-1781.

6. Вельтищев Ю.Е., Бочков Н.П. Наследственная патология человека. Itom.- 1992.-М. -С. 52-57.

7. Виноградов В.Б. Формирование традиционных групп населения средней Кубани,- Армавир.: Армавирский гос. пед. ин-т. 1994. - 17 с.

8. Гаврилюк А.П. Полиморфизм ДНК области 12q24.1, сцепленной с геном фенилаланингидроксилазы, в популяции республики Молдова: Автореф. дисс. уч. степени д.б.н. Кишинев. - 2004. - 21с.

9. Герасимова Н.С., Стеклова И.В., Тууминен Т. Методы определения фенилаланина в плазме и пятнах крови, высушенных на бумаге //

10. Лабораторное дело. 1995. - № 3. - С. 38-41.

11. Гинтер Е.К. Медицинская генетика. М.: Медицина. - 2003.- С. 379389.

12. Голихина Т.А. Фенидкетонурия у детей в Краснодарском крае (клинико-эпидемиологическое исследование): Автореф. дисс. уч. степени к.м.н. Краснодар. - 2004. - 23 с.

13. Григорьева Н. К. Лечение фенилкетонурии у детей // Здравоохр. Белоруссии. 1980. - № 4. - С. 25-26

14. Дементьева Т.Г., Евсеева Т.Н., Алимбаева В.П. и др. Состояние и перспективы развития медико-генетической службы пермского региона / 2 (4) Рос. съезд мед. генетиков: Тез. докл. Курск. - 2000. -Т.2. - С.129-131.

15. Иващенко Т.Э. Белова Е.Г., Баранов B.C. Простой метод детекции мутации R408W 12-го экзона гена фенилаланингидроксилазы // 3-я конф. «Геном человека-93». М. 1993. - С.77.

16. Итоги Всероссийской переписи населения 2002г. по Краснодарскому краю. Национальный состав и владение языками, гражданство. -2005.-Т. 4.-С. 7-12.

17. Клекка У.Р. Дискриминантный анализ. Факторный, дискриминант-ный и кластерный анализ. М.: Финансы и статистика. - 1989. -С.78-138.

18. Климова М. И., Федотов В.П., Шувакина В.И., Белослудцева Т.М. Итоги неонатального скрининга на фенилкетонурию в Центральном Черноземье / 1(3) Рос. съезд мед. генет. М. - 14-16 дек. - 1994. -Тезисы докл. - М. - 1994. -часть I. - С. 106-107.

19. Кобцева Н.М., Аксянова Х.Ф., Сотникова Е.А. Результаты неонатального скрининга на фенилкетонурию в Нижегородской области // Мед. генетика. 2003. - Т. 2. -. № 10. - С. 421.

20. Копылова Н.В. Фенилкетонурия: классификация, диагностика, диетотерапия // Вопросы детской диетологии. 2004. - Т. 2. - № 6. - С. 31-46.

21. Копылова Н.В., Байков А.Д., Ходунова A.A. Геногеография фенил-кетонурии в России / Сб. науч. тр. «Медико-генетическое консультирование в профилактике наследственных болезней». Тез. докл. Рос. науч.-практ. конф. М. - 1997. - С. 16-23.

22. Костюк А.К., Елизарьева Т.Ю. Неонатальный скрининг на фенилкетонурию в Красноярском крае / В кн.: Актуальные проблемы диагностики, лечения и профилактики наел, забол. у детей. М. -1998.-С.115.

23. Краснопольская К. Д. Программы ранней диагностики наследственных болезней обмена веществ у новорожденных / Профилактиканаследственных болезней. Под ред. Н. П. Бочкова. Москва. 1987. -С. 38-47.

24. Кусова С.О., Лагкуева Ф.К., Овсянникова И.И. Медико-генетическая служба республики Северная Осетия-Алания: первые шаги / 2 (4) Рос. съезд мед. генет. Тез. докл. Курск. - 2000. - Т. 2. -С. 147-148.

25. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа. - 1999. - 280 с.

26. Лебедев Б. В., Блюмина М. Г. Фенилкетонурия у детей. М.: Медицина. 1972.-С. 160.

27. Марри Р., Тренер Д., Мейес П. Биохимия человека: пер. с англ / Под ред. Л.М. Гинодмана. 1993. - Т. 2. - С. 414.

28. Матулевич С.А., Зинченко Л.В., Голихина Т.А., Голубцов В.И. Анализ мутаций гена ФАГ у больных фенилкетонурией в Краснодарском крае // Мед. генетика. 2004. - № 10. - С.466-469.

29. Мощинецкий А.Ю. Врожденные пороки развития и наследственные болезни у детей в Хабаровском крае и возможности их профилактики: Автореф. дисс. уч. степени к.м.н. Хабаровск. - 1998. - 27 с.

30. Мурзабаева С.Ш. Фенилкетонурия в республике Башкортостан

31. Клинико-эпидемиологическое и молекулярно-генетическое изучение): Автореф. дисс. уч. степени к.м.н. Пермь. - 1997. - 25 с.

32. Николаева Е.А. Современное состояние проблемы фенилкетонурии у детей // Актуальные проблемы современной педиатрии. М. -2002. - 4-5. - С. 29-36.

33. Новиков П.В., Корсунский A.A., Ходунова A.A. Медико-генетическая служба Российской Федерации: некоторые итоги и перспективы // Мед. генетика. Т. 1. -№ 4. - 2002. - С. 150-155.

34. Одинокова О.Н., Пузырев В.П., Диденко Л.И. и др. Анализ растро-страненности мутации R408W гена фенилаланингидроксилазы у больных фенилкетонурией в Сибирском регионе // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. - Т. 129. - С. 53-54.

35. Олдендерфер М.С., Блэтфилд С.К. Кластерный анализ. Факторный, дискриминантный и кластерный анализ. М.: Финансы и статистика. -1989. - С. 139-210.

36. Райлян Г.П. Влияние специфической диеты на динамику клинических симптомов и нарушений аминокислотного обмена при фенилкетонурии у детей. Автореф. дисс. уч. степени к.м.н. - М. - 1992. -25с.

37. Ракачев В.Н., Ракачева Я.В. Краснодарский край: этносоциальные и этнодемографические процессы (вторая половина 1980-х-начало 2000-х гг.). Краснодар. - КубГУ. - 2003. - С. 239.

38. Рыбакова Е. П., Копылова Н. В. Диетическое лечение детей, больных фенилкетонурией // Вопр. питания. 1979. - № 3. - С. 17-20.

39. Сарычева Е.А. Молекулярно-генетический анализ семей больных фенилкетонурией г. Курска / Материалы конференции «Актуальные проблемы медицины и фармации». Курск. - 1999. - С. 211.

40. Скрябин Б.В., Хальчицкий С.Е., Кузьмин А.И., Шварц Е.И. Определение мутационных повреждений в гене ФАГ среди больных в Латвии / 2 Всосоюз. съезд мед. ген. Тез. докл. - Алма-Ата. - 1990. -С.401.

41. Смагулова Ф., Масленников А., Морозов И., Китайник Г. Мутации в структуре экзона 7 гена фенилаланингидроксилазы у больных фе-нилкетонурией Новосибирской области // Генетика. 2000. - Т. 36. -№ 6. - С. 849-852.

42. Смагулова Ф.О., Морозов И.В. Молекулярная генетика фенилкето-нурии у жителей Новосибирской области // Ж. эволюционной биохимии и физиологии. 2002. - № 1. -Т.38. - С.32-35.

43. Степанова A.A. Исследование молекулярно-генетической природы фенилкетонурии в выборках российских больных. Автореф. дисс. уч. степени к.м.н. - М.- 2005.- 23 с.

44. Строганова И.А., Мирошникова И.В., Ашихмина М.А. и др. Скри-нирующая программа в лечении больных фенилкетонурией в Ставропольском крае // Современные мед. технологии. Новосибирск.-1999. - С.337-339.

45. Трехбратов Б.А. Энциклопедический словарь по истории Кубани с древнейших времен до 1917 года / Краснодар.: Куб. книжное изд-во.- 1997.-600 с.

46. Трехбратов Б.А. История Кубани / Краснодар.: Куб. книжное изд-во. 2000. - 440 с.

47. Цукерман Г.Л., Кучинский А.Л., Васюк С.А., Гусина Н.Б. Опыт массовой диагностики наследственных нарушений обмена веществ в Белорусской ССР. В кн.: Профилактика наследственных болезней / Под ред. Н. П. Бочкова. - М.: Медицина. - 1987. - С. 67-87.

48. Цыпина Л. Г. Динамика неврологических проявлений у больных фенилкетонурией в процессе лечения: Автореф. дисс. уч. степеник.м.н. Уфа. - 2002. - 23 с.

49. Чарикова Е.В. Изучение спектра точечных мутаций в гене ФАГ у больных фенилкетонурией в Москве и Московской области: Авто-реф. дисс. уч. степени к.б.н. Москва. - 1995. - 19 с.

50. Шувакина В.В., Климова М.И., Федотов В.П., Качанова Т.И. Итоги 10-летнего неонатального скрининга на фенилкетонурию в Центральном Черноземье // Актуальные проблемы диагностики, лечения и профилактики наел, забол. у детей. М. - 1998. - С.71-72.

51. Abadie V., Lyonett S., Melled D. et al. Molecular basis of phenylketonuria in Franse // Dev. Brain Dysfimct. 1993. - V. 6. - P. 120-126.

52. Angel L. P., Lourdes R. D., Alejandra G. et al. Genotype-phenotype correlations based on expression analysis of structural and functional mutations in PAH // Hum. Mutat. 2003. - V. 21. - P. 370-378.

53. Azen C., Koch R., Friedman E. et. al. Summary of findings from the United States Collaborative Study of children treated for phenylketonuria // Eur. J. Pediatr. 1996. - V. 155. - Suppl 1. - P. 29-32.

54. Baric I., Mardesic D., Gjuric G. et al. Haplotype distribution and mutations at the PAH locus in Croatia // Hum. Genet. 1992. - V. 90. - P. 155-157.

55. Berg K., Saugstad. A linkage study of phenylketonuria // Clin. Gen. -1974.-V. 6.-P. 147-152.

56. Bick U., Fahrendorf G., Ludolph A. C. et al. Ullrich K. Disturbed myeli-nation in patients with treated hyperphenylalaninemia: Evaluation withmagnetic resonance imaging // Eur. J. Pediatr. -1991. V. 150. - P. 185189.

57. Bickel H. Influence of phenylalanin intake on phenylketonuria // Lancet. -II.- 1953.-P. 812.

58. Burgar P., Rey F., Rupp A. et al. Neuropsychologic functions of early treated patients with phenylketonuria, on and off diet: results of a cross-national and cross-sectional study // Germany Pediatr. Res. 1997. - V. 41. -№ 3. - P. 368-374.

59. Burgard P., Bremer H.J., Buhrdel P. et al. Rationale for the German recommendations for phenylalanine level control in phenylketonuria 1997// Eur. J. Pediatr. 1999. - V. 158. - № 1. - P.46-54.

60. Cabalska B. Postery wrozpoznawanii i leczeniu fenilketonurii // Pediat. Pol. 1984.-V.59.-№ 11. - P.905-915.

61. Caillaud C., Vilarino L., Vilarino A. et.al. Linkage disequilibrium between phenylketonuria and RFLP haplotype 1 and at the phenylalanine hydroxylase locus in Portugal // Hum. Genet. 1992. - V.89. - P. 69-72.

62. Cechak P., Hejcmanova L., Rupp A. Long-term follow-up of patients treated for phenylketonuria (PKU). Results from the Prague PKU Center // Eur. J. Pediatr. -1996. №155. - Suppl 1. - P. 59-63.

63. Chehin R., Thorolfsson M., Knappskog P. M. et al. A. Domain structure and human phenylalanine hydroxylase inferrend spectroscopy // FEBS Letters. 1998. - V. 422. - P. 225-230.

64. Chiesa A., Prieto L., Keselman A. et al. Neonatal screening program for PKU and hyperphenylalaninemia (HPA): recall and efficiency / 5th

65. Meeting of the Intern. Society for Neonatal Screening "Neonatal screening from the spot to diagnosis and treatment". Genova. - 2002. - P.54.

66. Costello P. M., Beasley M. G., Tillotson S. L. et al. Intelligence in mild atypical phenylketonuria // Eur. J. Pediatr. 1994. - V. 153. - № 4. - P. 260-263.

67. Crawfurd M., Cibbs D., Sheppard D. Studies on human phenylalanine hydroxylase: Restricted expression // J. Inher Metab. Dis. 1981. - V. 4. -P. 191-195.

68. Crone M.R., Spronsen F.J. Oudshoorn K. et al. Behavioural factors related to metabolic control in patients with phenylketonuria // J. Inherit Metab. Pis. 2005. - V. 28(5). - P.627-37.

69. Dasovich M., Konecki D., Lichter-Konecki U. et al. Molecular characterization of PKU allele prevalent in Southern Europe and Poland // Som.Cell Mol.Genet. -1991. V. 17. -P. 303-309.

70. Davis M.D., Parniak M.A., Kaufman S., Kempner E. The role of phenylalanine in structure-function relationships of phenylalanine hydroxylase revealed by radiation target analysis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997.-V. 94.-P.491-495.

71. Dianzani I., Giannattasio S., Sanctis L., Alliaudi C. Characterization of phenylketonuria alleles in the Italian population // Eur.J.Hum.Genet. -1995. V. 3. - P. 294-302.

72. DiLella A. G., Kwok S. C. M., Ledley F.D. et al. Molecular structure and polymorphic map of the human phenylalanine hydroxylase gene //

73. Biochemistry. 1986. - V. 25. - P. 743-749.

74. DiLella A. G., Marvit J., Brayton K., Woo S. L.C. An amino-acid substitution involved in phenylketonuria is in linkage disequilibrium with DNA haplotype 2 // Nature. 1987. - V. 327.- P. 333-336.

75. Donlon J., Levy H., Scriver C.R. Hyperphenylalaninemia: Phenylalanine hydroxylase deficiency. In: Scriver C.R., Beaudet A.L., Sly S.W., et al., The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease, Online. McGraw-Hill, New York. 2004. - P. 157.

76. Dworniczak B., Kalaydjieva L., Aulehla Scholz C. et al. Recurrent nonsense mutation in exon 7 of the phenylalanine hydroxylase gene // Hum. Genet. -1991. V. 87. - P. 731-733.

77. Dworniczak B., Kalaydjieva L., Pankoke S. et al. Analysis of exon 7 of the human phenylalanine hydroxylase gene: A mutation hot spot? // Hum. Mutat. 1992. - V. 1. - P. 138-146.a,

78. Dzhura I., Naidenov V., Zhuravleva S. et al. Expression of Ca channels from rat brain with model phenylketonuria in Xenopus oocytes // Brain Research. 1998. - V. 783. - P. 280-285.

79. Eiken H.G., Knappskog P.M., Boman H. et al. Relative frequency, heterogeneity and geographic clustering of PKU mutatyons in Norway // Eur.J.Hum.Genet. 1996. - V. 4. - P. 205-213.

80. Eisensmith R.C., Okano Y., Dasovich M. Multiple origins for phenylketonuria in Europe//Am. J. Hum. Genet. 1992. - V. 51. - P. 1355-1365.

81. Erlandsen H., Fusetti F., Martinez A. et al. Crystal structure of the catalytic domain of human phenylalanine hydroxylase reveals the structural basis for phenylketonuria // Nat. Struct. Biol. 1997. - V. 4. - P. 9951000.

82. Erlandsen H., Stevens R. C. The structural basis of phenylketonuria // Mol. Genet. Metab. 1999. - V. 68. - P. 103-195.

83. Fisch R.O., Matalon R., Weisberg S., Michals K. Phenylketonuria: current dietary treatment practices in the United States and Canada // USA. J. Am. Coll. Nutr. 1997. - V. 16. - № 2. - P.147-151.

84. Foiling A. Uber Ausscheidung von Phenylbrenztraubensäure in den Harn als Stoff-wechselanomalie in Verbindung mit Imbezilliat // Ztichr. Ptysiol. Chem. 1934b. - V. 227. - P. 169-176.

85. Foiling A. Utskillese av fenylpyrodrisyre i urinen som stofikifteanomail i fortindelse med imbecillitet // Nord. Med. Tidskr. 1934a. - V. 8. - P. 1054-1059.

86. Frezal J., Farriaux J.P. Phenylketonuria yesterday and today. Evaluation of the work of systematic neonatal screening // Rev. Prat. 1992. - V. 18.№42. -P. 2316-2326.

87. Fusetti F., Erlandsen H., Fiatmark T., Stevens R. Structure of tetrameric human phenylalanine hydroxylase for phenylketonuria // J. Biol. Chem. -1998.-V. 273.-P. 16962-16967.

88. Gamez A., Wang L., Straub M., et al. Toward PKU enzyme replacement therapy: PEGylation with activity retention for three forms of recombinant phenylalanine hydroxylase // Mol. Ther. 2004. - V.9. - № 1. -P.124-129.

89. Goltsov A.A., Kouzmine A., Eisensmith R.C. et al. Abdel-Meguid N., Woo S.L.C., El-Awadi M. Molecular basis of phenylketonuria in Egypt //Am. J. Hum. Genet. 1994. - V. 55. - P. A221.

90. Greeves L.G., Patterson C.C., Carson D.J. et al. Effect of genotype on changes in intelligence quotient after dietary relaxation in phenylketonuria and hyperphenylalaninaemia // Arch. Dis. Child. 2000. - V. 82. - P. 216-221.

91. Griffiths P. Neuropsychological approaches to treatment policy issues in phenylketonuria // Eur. J. Pediatr. 2000. - V. 159. - Suppl 2: - P. 82-86.

92. Griffiths P., Ward N., Harvie A., Cockburn F. Neuropsychological outcome of experimental manipulation of phenylalanine intake in treated phenylketonuria // J. Inherit. Metab. Dis. 1998. - V. 21. - № 1. - P. 2938.

93. Gu Xue Fan. Neonatal screening in China / 5 Meeting of the Intern. Society for Neonatal Screening "Neonatal screening from the spot to diagnosis and treatment". Genova. - 2002. - P. 144.

94. Guldberg P., Henriksen K. F., Guttler F. Molecular analisis of phenylketonuria in Denmark: 99% of of the mutations detected by denaturing gradient gel electrophoresis // Genomics. 1993a. - V. 17. - P. 141-146.

95. Guldberg P., Levy L., Hanley W. B. et al. Phenylalanine hydroxylase gene mutations in the United States: report from the maternal PKU collaborative study // Am. J. Hum. Genet. 1996. - V. 59. - P. 84-94.

96. Guldberg P., Lou H. C., Henriksen K. F. A novel missense mutations in the phenylalanin hydroxylase gene of a homozygous Pakistani patient with non-PKU hyperphenylalaninemia // Hum. Molec. Genet. -1993b. -V.2.-P. 1061-1062.

97. Guttler F. Medical genetics in Denmark // Clin. Genet. 1989. - V. 35. -№.3,-P. 210-212.

98. Guttler F., Guldberg P. Mutation analysis anticipates dietary requirements in phenylketonuria // Eur. J. Pediart. 2000. - V.159. - P. 150-153.

99. Hennermann J.B. Vetter B. Wolf C. et al. Phenylketonuria and hyperphenylalaninemia in eastern Germany: a characteristic molecular profile and 15 novel mutations // Hum. Mutat. 2000. V. 15. - P. 254-260.

100. Hoang L., Byck S., Prevost. PAH mutation analysis Consortium Database: a database for disease producing and other allelic variation at the human PAH locus //Nucl. Acids. Res. - 1999. - V. 24. - P. 127-131.

101. Hofmann K.J., Steel G., Kazazian H.H., Valle D. Phenylketonuria in U.S. blaks: Molecular analysis of phenylalanine hydroxylase gene // Am. J. Hum. Genet. 1991. - V.48. - №4. - P.791-798.

102. Hommes F. A. On the mechanism of permanent brain dysfunction in hy-perphenylalaninemia // Biochem. Med. Metab. Iol. 1991. - V. 46. - P. 277-287.

103. Hufton S. E., Jennings I.G., Cotton R. G. H. Structurer function analysis of the domains required for the multimerissation of phenylalanine hydroxylase // Bioch. et Biophysica Acta. 1998. - V. 1382. - P. 295-304.

104. Hufton S.E., Jennings I.G, Cotton R.G.H. Structure and function of the aromatic amino acid hydroxylases // Biochem. 1995. - V. 311. - P. 353366.

105. Jaruzelska J., Matuszak R., Lyonnet S. et al. Genetic background of clinical heterofeneity of phenylketonuria in Poland // J. Med. Genet. -1993a.-V. 30.-P. 232-234.

106. Jaruzelska J., Melle D., Matuszak R. et al. A new 15 bp deletion in exon 11 of the phenylalanine hydroxylase gene in phenylketonuria // Hum. Mol. Genet. 1993b. - V. 1. - P. 763-764.

107. Jennings I. G., Cotton R.G.H., B. Kobe. Structural interpretation of mutations in phenylalanine hydroxylase protein aids in identifying geno-type-phenotype correlations in phenylketonuria // Genetics. 2000. -№8. - P. 683-696.

108. Jennings I. G., Teh T., Kobe B. Essential role of the N-terminal auto-regulatory sequence in the regulation of phenylalanine hydroxylase. FEBS Lett. 2001. - V.488. - P. 196-200.

109. Jervis G.A. Phenylpyruvic oligophrenia: Deficiency of phenylalanine oxidizing system // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1953. - V. 82. - P.514-515.

110. John S.W., Scriver C. R., Laframboise R, Rozen R., In vitro and in vivo correlations for 165T and MIV mutations at the phenylalanine hydroxylase locus // Hum. Mutat. 1992. - V.l. - № 2. - P.147-153.

111. Kadasi L., Polakova E., Hudegova S. et al. PKU in Slovakia: mutation skreening and haplotype analisis // Hum. Genet. 1995. - V. 1. - P. 112114.

112. Kalaydjieva L., Dworniczak B., Aulehlai- Sholz C. et al. Phenylketonuria mutation in southern Europeans // Lancet. 1991a. - V. 337. - P. 865.

113. Kalaydjieva L., Dworniczak B., Kucinskas V. et al. Geographical distribution gradients of the major PRU mutation and the linked Haplotypes // Hum. Genet. 1991. - Vol. 86. - P.411-413.

114. Kasnauskiene J., Giannattasio S., Lattanzio P. et al. The molecular basis of phenylketonuria in Lithuania // Hum. Mutat. 2003. - V. 21. - № 4. -P.398.

115. Kaufman S. A model of human phenylketonuria metabolism in normal subjects and phenylketonuric patients // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1999.-V. 96.-P. 3160-3164.

116. Kaufman S. A new cofactor required for the enzymatic conversion of phenylalanine to tyrozine // J. Biol. Chem. 1958. - V. 230. - P. 931939.

117. Kaufman S. A protein that stimulutes rat liver phenylalanine hudroxy-lase //J. Biol. Chem. 1970. - V. 254. - P. 4751-4759.

118. Kaufman S. Studies on the mechanism of the enzymatic conversion of phenylalanine to tyrosine // J. Biol. Chem. 1959. - V.234. - P.2677-2682.

119. Kaufman S. The phenylalanine hydroxylating system. Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol. 1993. - V. 67. - P.77-264.

120. Kaufman S. The structure of the phenylalanine-hydroxylation cofactor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1963. - V. 50. - P.1085-1093.

121. Kayaalp E., Treacy E., Waters J. et al. Human phenylalanine hydroxilase mutation and hyperphenylalaninemia phenotypes: a metanalysis of geno-type-phenotype correlation // Am. J. Hum. Genet. 1997. - V.61. -P.1309-1317.

122. Kleiman S., Avigad S., Vanagaite L. et al. Origins of hyperphenylalaninemia in Israel // Eur.J.Hum.Genet. 1994. - V. 2. - P. 24-34.

123. Kobe B., Jennings I.G., House C.M. et al. Structural basis of autoregulation of phenylalanine hydroxylase // Nat. Struct. Biol. 1999. - V.6. - P. 442-448.

124. Koch R., Levy H., Hanley W. et al. Outcome implications of the International Maternal Phenylketonuria Collaborative Study (MPKUCS): 1994 // Eur. J. Pediatr. 1996. - V. 155. - Suppl 1. - P. 162-4.

125. Kozak L., Kuhrova V., Blazkova M. et al. Phenylketonuria mutations and their relation to RFLP haplotypes at the PAH locus in Czech PKU families // Hum.Genet. 1995. - V. 4. - P. 72-476.

126. Kuzmicheva N., Kalinenkova S. Neonatal screening in Moscow region / 5th Meeting of the Intern. Society for Neonatal Screening "Neonatal screening from the spot to diagnosis and treatment". Genova. - 2002. -P.62.

127. Kwok S. C. M., Ledley F. D., DiLella A. G. et al. Nucleotide sequenceof a full-length complementary DNA clone and amino acid sequence of human phenylalanine hydroxylase // Biochemistry. 1985. - V.24. - P. 556-561.

128. Lazarus R.A., Benkovic S.J. Kaufman S. Phenylalanine hydroxylase stimulator protein is a 4a- carbionolamine dehydrotase // J. Biol. Chem. -1983.-V.258.-P. 10960-10962.

129. Lenke R. R., Levy H. L. Maternal phenylketonuria and hyperphenyla-laninemia: An international survey of the outcome of untreated and treated pregnancies // N. Engl. J. Med. 1980. - V. 303. - P. 1202-1208.

130. Leuzzi V., Bianchi M.C., Tosetti M. et al. Clinical significance of brain phenylalanine concentratuin assessed by in vivo proton magnetic resonance spectroscopy in phenylketonuria // J.Inher Metab. Dis. 2000. -V.23. - P. 563-570.

131. Levy H. L. Phenylketonuria: old dissease, new approach to treatment // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - V. 96. - P. 1811-1813.

132. Lidsky A. S., Law M. L., Morse H. G. et al. Regional mapping of the phenylalanine hydroxylase gene and the phenylketonuria locus in the human genome // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - V. 82. - P. 62216225.

133. Martinez A., Knappskod P. M., Olatdottir S. et al. Expression of recombinant human phenylalanine hydroxylase as fusion protein in Escherichia coli circumvents proteolytic degradation by host cell proteases // Biochem. J. 1995. - V. 306. - P. 589-597.

134. Marvit J., DiLella A. G., Brayton K. et al. GT to AT transition at splice donor site causes skipping of the preceding exon in phenylketonuria // Nucl. Acid. Res. 1987. - V. 15. - P. 5613-5628.

135. Meijer H., Jongbloed R.J., Hekking M. et al. RFLP haplotyping and mutation analysis of the phenylalanine hydroxylase gene in Dutch Phenylketonurie families // Hum.Genet. 1993. - V. 92. - P. 588-592.

136. Merrick J., Aspler S., Schwarz G. Phenylalanine-restricted diet should be life long. A case report on long-term follow-up of an adolescent with untreated phenylketonuria // Int J Adolesc Med Health. 2003. - V.15. -№ 2. - P. 165-168.

137. Mioma C., Auld R.M., Udenfriend S. On the nature of enzymatic defect in phenylpyruvic oligophrenia // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1957. - V. 94.-P. 634-635.

138. McCabe E. R., McCabe L., Mocher G.A. et al. // Newborn screening for phenylketonuria: predictive valibity as a funetion of aga. Pediatrics. -1993.- V.72.- P. 390-398.

139. Moats R. A., Koch R., Moseley K. et al. Brain phenylalanine concentration in the management of adults with phenylketonuria // J.Inher Metab Dis.-2002.-V.23.1.-.P.7-14.

140. Moller N. E., Meek S., Bigelow M. et al. The kidney is an important sitefor in vivo Phenylalanine-to-tyrosine conversion in adult Humans: a metabolic roli of kidney // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - V. 97. -P. 1242-1246.

141. Nechiporenko M.V., Lalivshits L.A. Analysis of mutations in the phenylalanine hydroxylase gene in Ukrainian families at high risk for phenylketonuria // Tsitol. Genet. 2000,- V. 34. - № 6. - P. 59-63.

142. Nowacki P., Byck S., Prévost L., Scriver C. R. The PAH mutation analysis Consortium Database: update 1996 // Nucl. Acids Res. 1997. -V. 25.-P. 139-142.

143. ODonnell K.A., ONeill C., Tighe O. et.al. The mutation spectrum of hyperphenylalaninemia in the Republic of Ireland: the population history of the Irish revisited // Eur.J.Hum.Genet. 2002. - V. 10. - P. 530-538.

144. Okano Y., Asada M., Kang Y. et al. Molecular characterization of phenylketonuria in Japanese patients // Hum Genet. 1998. - V. 103. - P. 613-618.

145. Okano Y., Eisensmith R. C., Dasovich M. et al. A prevalent missense mutation in Nothern Europe associated with hyperhenylalalinemia // Eur. J. Pediatr. -1991. V. 150. - P. 347-352.

146. Okano Y., Hase Y., Lee D.H. et al. Frequency and distribution of phen-ylketonuric mutations in Orientals // Hum. Mutat. 1992. - V. 1. - P. 216-220.

147. Okano Y., Wang T., Eisensmith R. C. et al. Recurrent mutation in the human phenylalanine hydroxylase gene // Am. J. Hum. Genet. 1990. -V. 6.-P. 919-924.

148. Ounap K., Lillevali H., Metspalu A. et al. Development of the phenylketonuria screening programmer in Estonia // J. Med. Screen. 1998. - V. 5. -№ 1. - P. 22-23.

149. Ozalp Y., Koskun T., Ceyhan M. et al. Incedence of phenylketonuria and hyperphenylalaninemia in a sample of Turkisch newborn population // J. Inherit. Metab. Disease. 1986. - V. 9. - №2. - P. 237-239.

150. Paul T.D., Brandt I. K., Elsass L. J. et al., Linkaga analysis using heter-jzygote detection in phenylketonuria // Clin. Genet. 1979. - V. 16. - P. 217-232.

151. Penrose L. S., Quastel J. H. Metabolic studies in phenylketonuria // Bio-chem. J. 1937. - V. 31. - P. 266-274.

152. Perez B., Desviat L. R., Ugarte M. Analysis of phenylalanine hydroxylase gene in the Spanish population: Mutation profile and association with intragenic polymorphic markers // Am. J. Hum. Genet. 1997. - V. 60.-P. 95-102.

153. Perez M.E., Gonzalez C.R., Ortiz J. et al. Newborn screening for hyperthphenylalaninemia / 5 Meeting of the Intern. Society for Neonatal Screening "Neonatal screening from the spot to diagnosis and treatment". Genova. - 2002. - P. 102.

154. Pey A. L., Desviat L. R., Ga 'mez A. et al. Phenylketonuria: genotype-phenotype correlations based on expression analysis of structural and functional mutations in PAH // Hum. Mutat. 2003. - V. 21. - P. 370378.

155. Pietz J., Dunckelmann R., Rupp A. et al. Neurological outcome in adult patients with early-treated phenylketonuria // Eur. J. Pediatr. 1998.- V. 157.-№ 10. - P.824-30.

156. Pietz J., Kreis R., Rupp A. et al. Large neutral amino acid block phenylalanine transport into brain tissue in patients with phenylketonuria

157. J. Clin. Invest. 1999. - V. 103. - P. 1169-1178.

158. Popescu T., Blazkova M., Kozak L. et al. Mutation spectrum and phenylalanine hydroxylase RFLP/VNTR background in 44 Romanian Phenylketonurie alleles // Hum. Mutat. 1998. - V. 12. - P.314-319.

159. Potocnik U., Widhalm K. Long-term follow-up of children with classical phenylketonuria after diet discontinuation: a review // J. Am. Coll. Nutr. 1994. - V. 13. - № 3. - P.232-236.

160. Pronina N., Giannattasio S., Lattanzio P. et al. The molekular basis of phenylketonuria in Latvia // Hum. Mutat. 2003. - V. 21. - P. 398-399.

161. Rouse B., Azen C., Koch R. et al. Maternal phenylketonuria Collaborative Study (MPKUCS) offspring: facial anomalies, malformations, and early neurological sequelae // Am. J. Med. Genet. 1997. - V.69. - №1.-P. 89-95.

162. Sarkar G., Sommer S. Access to a messenger RNA sequence of its protein product is not limited by tissue or species specificity // Science. -1989.-V. 24.-P. 331-334.

163. Sarkissian C. N., Gamez A. Phenylalanine ammonia lyase, enzyme substitution therapy for phenylketonuria, where are we now? // Mol. Genet. Metab. 2005. - Sep. 13.

164. Sarkissian C. N., Shao Z., Blain F. et al. A different approach to treatment of phenylketonuria: Phenylalanine degradation with recombinant phenylalanine ammonia lyase // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1999. - V. 96. - P. 2339-2344.

165. Schüler A., Somogyi C., Toros I. et al. A longitudinal study of phenylketonuria based on the data of the Budapest Screening Center // Eur. J. Pe-diatr. 1996. - №155. - Suppl. 1. - P. 50-52.

166. Schüler A., Somogyi C., Toros I. et al. A longitudinal study of phenylketonuria based on the data of the Budapest Screening Center // Budapest. Eur. J. Pediatr. 1996. - V. -155. - Suppl. 1. - P. 50-52.

167. Scriver C. R. A database for geography and evidence for selection, drift, migration and reccurent mutation at the PAH locus in human populations // Abst. Human Genome Variation in Europe: DNA Markets, Barselona. 9-10 november. - 1995. - P. 38.

168. Scriver C. R., Hurtubise M., Konecki D. et al. PAHdb 2003: what a locus-specific knowledgebase can do // Hum. Mutat. 2003. - V. 21. - P. 333-344.

169. Scriver C. R., Johv S. W. M. Rozen. R. et al. Associations between populations. PKU mutations and RFLP haplotypes at the PAH locus: An overview // Dev. Brain Dys. 1993. - V. 6. - P. 11-25.

170. Scriver C.R., Kaufman S. The hyperphenylalaninemias. In: Scriver CR, Beaudet AL, Sly WS, Valle D (eds) The metabolic and molecular bases of inherited disease // McGraw-Hill. New York. 2001. - P. 1667-1724.

171. Shigematsu Y., Hata I., Tanaka Y. et al. Target diseases in newbornfViscreening by tandem MS in Japan // 5 Meeting of the Intern. Society for Neonatal Screening. "Neonatal screening from the spot to diagnosis and treatment". Genova. - 2002. - P.l 18.

172. Shiman R., Jones S.H., Gray D.W. Mechanism of phenylalanine regulation of phenylalanine hydroxylase // J. Biol. Chem. 1990. - V.265. - P. 11633-11642.

173. Svenson E., Dobeln U., Eisensmith R. C. et al. Relation between genotype and phenotype in Swedish phenylketonuria and phenylalanynemia patients // Eur. J. Ped. 1993. - V.152. - P. 132-139.

174. Teigen K., Froystein N., Martinez A. The structural basis of the recognition of phenylalanine and pterin cofaktors by phenylalanine hydroxylase: implications for the catalytic mechanism // J. Mol. Biol. 1999. - V. 29.- № 3. P. 807-823.

175. Thalhammer 0., Pollak A. Neuyeborenen-Screening auf angeborene Stoffwechselanomalien // MTA. 1986. - V. 1 - № 8. - P. 593-596.

176. Thompson A. J., Tillotson S., Smith, et al. Brain MRI changes in phenylketonuria: associations with dietary status // Brain. 1993. - V. 116.-P. 811-821.

177. Tiefenthaler M., Seidl R., Scheibenreiter S. et al. An adult patient with phenylketonuria before and one year after reinstitution of diet therapy // Wien Klin Wochenschr. 1999. - V. 111. - № 1. - P. 33-36.

178. Tighe 0., Dunican D., O'Neill C. et.al. Genetic diversity within the R408W phenylketonuria mutation lineages in Europe // Hum. Mutat. -2003.-V.4.-P. 387-393.

179. Traeger-Synodinos E., Kalogerakou M. Prelimitary mutation analysis in the phenylalanine hydroxylase gene in Grek PKU and HPA patients // Hum.Genet. -1994. V. 94. - P. 573-575.

180. Tsukerman G., Kirillova, Gusina N. et al. Population control of Genetics deseases in Belarus: Status and development // Brasillian Jour. Of Genet.- 1996. V.19. - № 2. - P.75-77.

181. Tyfield L. A., Stephenson A., Cockburn F. et. al. Seqence variation at the phenylalanine hydroxylase gene in the British Isles // Am. J. Hum. Genet. 1997. - V. 60. - P. 388-396.

182. Veale A. M. 0. Screening for phenylketonuria: Neonatal Screening Inborn Errors Metab. Berlin. - 1980. - P.7-18.

183. Venter J.C., Adams M.D., Myers E.W. et al. The sequence of human genome // Science. 2001. - V.291. - P. 1304-1351.

184. Waisbren S.E., Hanley W., Levy H.L. et al. Outcome at age 4 years in offspring of women with maternal phenylketonuria: the Maternal PKU Collaborative Study // JAMA. 2000. - V. 283. - № 6. - P.756-762.

185. Wang G.A., Gu P., Kaufman S. Mutagenesis of the regulatory domain of phenylalanine hydroxylase / Proc. Natl. Acad. Sci USA. 2001. - V. 98. -P. 1537-1542.

186. Web site http:// www.mcgill.ca/pahdb

187. Weglage J., Pietsch M., Feldmann R. et al. Normal clinical outcome in untreated subjects with mild hyperphenylalaninemia // Pediatr Res. -2001. V.49. - № 4. - P.532-536.

188. Williams K. Benefits of normalizing plasma phenylalanine: impact on behaviour and health. A case report.// J. Inherit Metab. Dis. 1998. - V. 21. -№ 8. - P.785-90.

189. Woo S.L.C., Guttler F., Ledley F.D. et al. The human phenylalanine hydroxylase gene // In: (K. Berg, ed.) Medical genetics Past. Ghtsent. Future. New York. - A.R. Liss. - 1985. - P. 123-135.

190. Zschocke J., Hoffman G. F. PAH gene mutation analysis in clinical practice comments in mutation analysis anticipates dietary requirements in phenylketonyria // Eur.J.Pediart. - 2000. - V.159. - P. 154-155.

191. Zschocke J., Hoffman G. F. Phenylketonuria mutation in Germany // Hum. Genet. 1999. - V. 104. - P. 390-398.

192. Zschocke J., Preusse A., Sarnavka V. et al. The molekular basis of phenylketonuria hydroxylase deficiency in Cloatia // Hum. Mutat. 2003. -V.21.-P. 399.

193. Zygulska M., Eigel A., Aulehlai- Sholz C. P., Horst J. Molekular analysis of PKU haplotype in the population of southern Poland // Hum. Genet. -1991. V. 86. - P. 292-294.

194. Blau N., Thony B., Renneberg A. et al. Variant of dihydropteridine reductase deficiency without hyperphenylalaninaemia: effect of oral phenylalanine loading // J. Inherit. Metab. Dis. 1999. - V.-22. - P. 216220.

195. Kaufman S., Berlow S., Summer G. K. et al. Hyperphenylalaninemia due to a deficiency of biopterin // New Eng. J. Med. 1978. - V.299. - P. 673-679.

196. Smith I., Clayton B. E., Wolff O. H. New variant of phenylketonuria with progressive neurological illness unresponsive to phenylalanine restriction // Lancet I. 1975. - P. 1108-1111.