Молекулярная эпидемиология и современные методы генодиагностики фенилкетонурии в регионах России тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Бреннер, Евгений Владиславович

• Бреннер, Евгений Владиславович
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бреннер, Евгений Владиславович

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Введение.

2.1.1. Метаболизм феншаланина в норме.

2.1.2. Нарушение метаболизма фенилаланина как причина фенилкетонурии.

2.1.3. Материнская фенилкетонурия.

2.1.4. Современная классификация форм фенилкетонурии.

2.2. Распространенность фенилкетонурии.

2.3. Структура фенилаланингидроксилазы.

2.4. Структура гена ФАГ.

2.5. Мутации гена ФАГ.

2.6. Влияние мутаций гена фенилаланингидроксилазы на проявления фенилкетонурии

2.6.1. Моделирование влияния мутаций гена ФАГ на структуру фенилаланингидроксилазы.

2.6.2. Экспрессия in vitro как метод исследования эффекта мутаций на активность ФАГ.

2.6.3. Модель общего механизма влияния мутаций гена ФАГ.

2.7. Нейтральные полиморфизмы и гаплотипы гена ФАГ, популяционная генетика фенилкетонурии.

2.7.1. Исследование полиморфизма сайтов рестрикции гена ФАГ.

2.7.2. Исследование полиморфизма STR и VNTR повторов гена ФАГ.

2.7.3. Исследование происхождения мутантных аллелей.

2.8. Перспективные подходы к терапии фенилкетонурии.

2.8.1. Диетотерапия.

2.8.2. Генотерапия фенилкетонурии.

2.8.3. Медикаментозная терапия фенилкетонурии.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Материалы.

3.2. Методы.

3.2.1. Обследованная группа.

3.2.2. Консервирование крови.

3.2.3. Выделение геномной ДНК из крови по МйИег.

3.2.4. Полимеразная цепная реакция.

3.2.4.а) ПЦРрайонов гена ФАГ.

3.2.4.6) РеПЦР STR и VNTR гена ФАГ.

3.2.5. Электрофорез в агарозном геле.

3.2. б. Электрофорез в полиакриламидном геле.

3.2.7. Очистка продуктов ПЦР.

3.2.7.а) Очистка продуктов ПЦР сорбцией на стекловолокне.

3.2.7.6) Гелъфгшътрация продуктов ПЦР на колонках Centrisep Spin Columns.

3.2.7.в) Гелъфилътрация продуктов ПЦР на колонках с сорбентом Sephadex G-5058 3.2.7.г) Гелъфилътрация продуктов ПЦР на колонках с сорбентом Sephadex G

3.2.8. Реакция Сэнгера.

3.2.9. Очистка продуктов реакции Сэнгера.

3.2.10. Фрагментный анализ продуктов ПЦР на автоматических генных анализаторах.

3.2.10. а) Фрагментный анализ продуктов ПЦР с использованием флуоресцентно меченных нуклеозидтрифосфатов.

3.2.10.6) Фрагментный анализ продуктов ПЦР с использованием флуоресцентно меченных праймеров.

3.2.10.в) Спектральная калибровка генных анализаторов для выполнения фрагментного анализа.

3.2.10.г) Определение поправки между реальными и наблюдаемыми при фрагментном анализе размерами.

3.2.11. Компьютерная обработка данных.

3.2.11.а) Анализ электрофореграмм.

3.2.11.6) Анализ секвенограмм автоматических генных анализаторов.

3.2.11.в) Анализ электрофореграмм при фрагментном анализе.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Полиморфизм гена фенилаланингидроксилазы у больных фенилкетонурией Западной Сибири Алтайского края и Саратовской области.

4.1.1. Спектр и частота мутаций гена ФАГ, обуславливающих фенилкетонурию в Новосибирской, Кемеровской, Саратовской областях и Алтайском крае.

4.1.2. Минигаплотипы гена ФАГ, ассоциированные с мутациями, обуславливающими ФКУ в Западной Сибири и Саратовской области.

4.2. Рекуррентное возникновение мутации гена фенилаланингидроксилазы Y168H.

4.3. Пренатальная диагностика фенилкетонурии в семьях больных фенилкетонурией

4.4. Универсальный метода идентификации однонуклеотидных замен.

5. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярная эпидемиология и современные методы генодиагностики фенилкетонурии в регионах России»

Фенилкетонурия (ФКУ) является одним из распространенных наследственных заболеваний человека. Большое клиническое и биохимическое разнообразие форм этой болезни обусловлено большим разнообразием обуславливающих его мутаций (известно более 500 мутаций гена ФАГ, приводящих к ФКУ). Помимо тяжести заболевания в каждом случае генотип больного ФКУ определяет эффективность традиционной диетотерапии и возможность использования альтернативных способов терапии ФКУ (например, фенилаланинаммиаклиазой).

Спектры мутаций и нейтральных полиморфизмов гена ФАГ значительно различаются в разных популяциях и географических регионах мира. Это, по всей видимости, является отражением особенностей формирования этих популяций и различного влияния факторов естественного отбора на больных ФКУ, имеющих разный жизненный уклад, традиции питания и т.п. Для того чтобы более точно определить происхождение и клинические последствия той или иной мутации, необходимо как можно более полно охарактеризовать носителей этой мутации в каждой популяции. Дополнение таких исследований идентификацией гаплотипов гена ФАГ позволяет делать выводы о генетической структуре популяции, выявлять потоки генов, её формирующих, а также оценивать степень вероятности возникновения той или иной мутации de novo.

Успешность всех подходов к лечению фенилкетонурии полностью определяется своевременностью её диагностики и возможностью получить сведения о типе мутаций, обуславливающих каждый конкретный случай заболевания. Чем раньше происходит диагностика болезни, тем лучше прогноз её терапии. Оптимальной является пренатальная диагностика фенилкетонурии, поскольку она делает возможной не только максимально эффективную терапию, но и принятие решения о целесообразности сохранения беременности.

В. то же время многообразие обуславливающих фенилкетонурию мутаций делает её своевременную диагностику трудновыполнимой и дорогостоящей, поскольку требует привлечения, методов1 массового типирования точковых мутаций, либо секвенирования гена фенил ал анингидроксил азы у каждого пациента. Таким образом, существует насущная- потребность, в недорогих, быстрых и достоверных методах идентификации обуславливающих фенилкетонурию мутаций, применимых в условиях клинических лабораторий, в. том числе для пренатальной диагностики.

Целью настоящей настоящей работы являлось исследование спектра мутаций, гена ФАГ, обуславливающих фенилкетонурию в Новосибирской, Кемеровской, Саратовской областях и Алтайском крае, а также исследование ассоциации этих мутаций с гаплотипами гена ФАГ, что позволило судить о популяционных событиях, формирующих этот спектр и- возможности возникновения- идентифицированных мутаций в исследованных регионах «

России de novo. В цели-настоящей-работы также входила разработка простых и достоверных методов1 идентификации обуславливающих ФКУ мутаций, в т.ч. пренатально.

Задачами работы,являлись:

Идентификация мутаций гена ФАГ у больных ФКУ и их родственников из указанных регионов России гипотезонезависимыми методами, позволяющими детектировать все, в т.ч. ранее неизвестные, мутации.

• Разработка на основе фрагментного анализа продуктов ПЦР автоматизированного' массового метода' идентификации аллельных вариантов^ТЯ h VNTR повторов гена ФАГ.

• Исследование сцепления идентифицированных мутаций с гаплотипами гена ФАГ, что при сравнении с аналогичными данными для других стран и регионов позволило судить о механизмах формирования наблюдаемого спектра мутаций.

• Разработка простого и достоверного метода пренатальной диагностики фенилкетонурии с контролем контаминации плодного биоматериала.

• Разработка простого универсального метода детекции точечных мутаций на основе аллель-специфичной ПЦР.

Научная новизна работы:

Исследован спектр мутаций гена фенилаланингидроксилазы (ФАГ) обуславливающих ФКУ в. Саратовской области, Алтайском крае и ряде j регионов Западной Сибири (Новосибирская, Кемеровская области). Впервые для регионов России идентификация обуславливающих ФКУ мутаций производилась гипотезонезависимым методом - определением нуклеотидных последовательностей районов гена ФАГ, позволило1 детектировать любые, в т.ч. ранее неизвестные, мутации.

Впервые проведено систематическое исследование сцепления всего спектра мутаций гена' ФАГ в указанных регионах России с гаплотипами этого гена, что позволило судить о популяционных событиях, формирующих этот спектр и возможности возникновения идентифицированных мутаций в исследованных регионах России de novo.

Доказано независимое повторное возникновение обуславливающей ФКУ редкой мутации Y168H гена ФАГ, что было неизвестно ранее.

Впервые показана возможность использования конъюгатов олигонуклеотидов с монометиловым эфиром полиэтиленгликоля в аллель-специфичной ПЦР для обеспечения дискриминации аллельных вариантов по наблюдаемой задержке при гель-электрофорезе продуктов ПЦР.

Практическая значимость работы. Идентифицированы генотипы больных ФКУ по локусу ФАГ в 73 семьях Новосибирской, Кемеровской, Саратовской областей и Алтайского края. Полученные результаты предоставлены врачам местных медико-генетических консультаций и перинатальных центров для контроля правильности выбранной стратегии терапии этих случаев ФКУ.

Разработаны методические рекомендации для выполнения фрагментного анализа на автоматических генных анализаторах с использованием реактивов отечественного производства, что сделало возможным внедрение этого метода на базе Центра коллективного пользования СО РАН «Секвенирование ДНК».

Разработан скрининговый метод идентификации точковых мутаций, основанный на использовании конъюгатов олигонуклеотидов с монометиловым эфиром полиэтиленгликоля в аллель-специфичной ПЦР.

Разработан и апробирован экспресс-метод пренатальной диагностики фенилкетонурии с контролем отсутствия контаминации плодного биоматериала тканями матери на основе гено- и гаплотипирования родителей и биоптата плодной части плаценты с помощью секвенирования и фрагментного анализа.

Публикации и апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 4 печатных работы. Результаты работы были представлены на международных конференциях: «3-я Международная конференция «Фундаментальные науки — медицине» (Новосибирск, 2007 г.), «Фундаментальные науки - биотехнологии и медицине» (Новосибирск, 2006 г.), «Фундаментальные науки - медицине» (Новосибирск, 2005 г.), International Conference "New information technology in medicine, biology, pharmacology and ecology" (Ялта-Гурзуф, 2003 г.),

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1. Введение

Фенилкетонурия (ФКУ, McKusick MIM 261600) является одним из распространённых и хорошо изученных наследственных заболеваний человека. Заболевание наследуется по аутосомно-рецессивному типу. Впервые ФКУ была описана в 1934 году норвежским врачом и биохимиком Феллингом (Foiling, 1934а). Им было установлено, что ФКУ развивается в результате нарушения нормального метаболизма незаменимой аминокислоты фенилаланина и накопления в тканях организма токсичных продуктов альтернативных путей его деградации. Феллинг предложил и первый метод диагностики фенилкетонурии, основанный на качественной реакции патологических метаболитов фенилаланина в моче больного фенилкетонурией с хлоридом железа (III) (Foiling, 1934b). В настоящее время этот метод применяется в отношении всех новорождённых большинства стран в т.ч. и России. Хотя он и не даёт представления о тяжести заболевания в каждом конкретном случае и является, по существу, поздней диагностикой фенилкетонурии (т.к. её диагностика происходит уже после формирования ЦНС и начала активации патологического метаболизма фенилаланина), он прочно занял место среди обязательных анализов новорожденных, в т.ч. и потому, что предъявляет минимальные требования к необходимому оборудованию и квалификации персонала.

2.1.1. Метаболизм фенилаланина в норме

В норме in vivo ключевой стадией метаболизма фенилаланина является его гидроксилирование с образованием тирозина. Было показано, что для гидроксилирования фенилаланина необходимо, как минимум, два белковых фактора (Mitoma, 1956). В последствии эти факторы были охарактеризованы

Kaufman, 1958a, 1959, 1963) как ферменты фенилаланингидроксилаза (ФАГ) и дигидроптеридинредуктаза (ДГПР). Первый из них непосредственно катализирует реакцию гидроксилирования фенилаланина. Второй осуществляет восстановление дигидробиоптерина до тетрагидробиоптерина - кофактора фенилаланингидроксилазы, окисляемого в процессе гидроксилирования фенилаланина.

Дальнейшие исследования показали, что гидроксилирование фенилаланина достаточно сложный процесс, в котором участвуют ещё дополнительно не менее 4-х ферментов и их кофакторов. Схематически этот процесс приведён на рисунке 1.

GTP

02 +

GTP-CH н I сн,—с—соон * I

NH2

L-фенилаланин

НО' н I сн2—с—соон I nh2 L-тирозин

DHNP

6-PTS

6-РТ

NADPH+H

H,N Н

NAD

4R

N « ^

4а-карбиноламин

4а-карбиноламин дегидратаза н2о А

NADH+H+ IIzN [j qBH2

Рис. 1. Гидроксилирование фенилаланина, включая синтез и регенерацию птеридинового кофактора. Обозначения: GTP- гуанозин-трифосфат, GTP-CH- GTP-циклогидролаза, DHNP- d -эритро-дигидронеоптерин трифосфат, 6-PTS- 6-пирувоил тетрагидробиоптерин, 6-РТ—пирувоил тетрагидробиоптерин, qBH2~ хиноидный дигидробиоптерин, ВН4Х-эритро-тетрагидробиоптерин

Фенилаланингидроксилаза . катализирует гидроксилирование фенилаланина до тирозина и сопутствующее этому окисление кофактора тетрагидробиоптерина (ВЩ) до 4а-карбиноламина. Регенерация ВЩ осуществляется в1 две стадии 4а-карбиноламин дегидратазой и дигидроптеридинредуктазой. Синтез ВЩ de novo осуществляется из гуанозинтрифосфата в несколько стадий с участием GTP - циклогидролазы, 6-пирувоилтетрагидробиоптеринсинтазы (6-PTS) и сепиаптеринредуктазы.

Следует отметить, что ВН4 является кофактором не только ФАГ, но и тирозингидроклилазы - ключевым: . ферментом метаболизма катехоламиновых нейромедиаторов, а также триптофангидроксилазы — ферментом, участвующем1 в метаболизме сератониновых медиаторов: Таким образом, суммарный уровень биосинтеза и регенерации ВН4 должен соответствовать суммарной потребности этих ферментов в кофакторе.

Первоначально в экспериментах с клетками печени эмбрионов крысы было показано, что гидроксилирование фенилаланина преимущественно происходит в печени (Crawfurd et al, 1981). Однако в более поздних работах демонстрируется важная роль почек в этом процессе. Было также высказано предположение; что; почки являются основным источником тирозина (Moller et al, 2000). .

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Бреннер, Евгений Владиславович

5. ВЫВОДЫ

1. Определён спектр обуславливающих фенилкетонурию мутаций гена ФАГ в Саратовской, Новосибирской, Кемеровской областях и Алтайском крае. У 256 человек из 71 семьи идентифицировано 20 обуславливающих ФКУ типов мутаций гена ФАГ в 111 аллелях этого гена.

2. Впервые для больных ФКУ этих регионов исследована ассоциация обуславливающих ФКУ мутаций и аллельных вариантов STR и VNTR повторов гена ФАГ. В большинстве случаев показана типичная для других регионов России с преимущественно славянским населением ассоциация обуславливающих ФКУ мутаций и аллельных вариантов STR и VNTR повторов гена ФАГ.

3. Показано, что на формирование спектра обуславливающих в Западной Сибири и Саратовской области ФКУ мутаций гена ФАГ в значительной мере оказали влияние потоки генов из Восточной Европы (R408W, R252W), Скандинавии (IVS12ntl, Y414C), Западной Европы (Е280К, R158Q), Южной Европы (Р281), Турции (R261Q), и, в значительно меньшей степени поток генов из Азии (R243Q). Ряд идентифицированных мутаций (IVS2-13T>G, IVS2+19T>C) не типичен ни для европейских, ни для азиатских стран, или описан в мировой литературе в единичных случаях (P407L, Y168H).

4. Показан факт независимого повторного возникновения обуславливающей ФКУ редкой мутации Y168H гена ФАГ, не затрагивающей «горячей точки» мутагенеза (CpG динуклеотид).

5. Разработан и апробирован экспресс-метод пренатальной диагностики фенилкетонурии с контролем отсутствия контаминации плодного биоматериала тканями матери на основе гено- и гаплотипирования родителей и биоптата плодной части плаценты методами секвенирования и фрагментного анализа.

6. Разработан универсальный скрининговый метод идентификации точковых мутаций, основанный на использовании конъюгатов олигонуклеотидов с монометиловым эфиром полиэтиленгликоля в аллель-специфичной ПЦР.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бреннер, Евгений Владиславович, 2009 год

1. Барановская С.С., Шевцов С.П., Максимова С.П., Кузьмин А.И., Шварц Е.И. Спектр мутационных повреждений гена фенилаланингидроксилазы у больных фенилкетонурией г. Санкт-Петербурга. // Доклады Академии наук. 1995. Т.340. №5. С.709-711.

2. Викторова Т.В., Мурзабаева С.С., Карунас А.Ю., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Е.К. Молекулярно- генетический анализ фенилкетонурии в Башкирии. // Генетика. 1997. Т.ЗЗ. №7. С.992-995.

3. Патрушев Л.И., Зыкова Е.С., Каюшин A.JL, Коростелёва М.Д., Мирошников А.И., //Биоорган, химия. 1998. Т.24. С. 194-200

4. Смагулова Ф.О. Молекулярная природа фенилкетонурии в новосибирской области. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук, Новосибирск, 2000

5. Abadie V, Lyonnet S, Melle D, Berthelon M, Caillaud C, Labrune P, Rey F, Rey J, Munnich A. Molecular basis of phenylketonuria in France.// Dev Brain Dysfunct 1993. V.6: P. 120-126.

6. Aoki K, Wada Y. Outcome of the patients detected by newborn screening in Japan. // Acta Paediatr. 1993. V.30. P.429-414.

7. Aulehla-Scholz: Communication to PAHdb to CR Scriver Jan. 22 1999

8. Aulehla-Scholz С, Heilbronner H. Mutational spectrum in German patients with phenylalanine hydroxylase deficiency. // 2003 .Hum Mutat V. 21.1. P.399-400.

9. Baranovskaya S, Shevtsov S, Maksimova S, Kuzmin A, Schwartz E. The mutations and VNTRs in the phenylalanine hydroxylase gene of phenylketonuria in St Petersburg.// J Inherit Metab Dis. 1996. V.19(5). P.705.

10. Baric I., Mardesic D., Gjuric G., Sarnavka V., Gobel-Schreiner В., Lichter-Konecki U., Konecki, Trefz F.K. Haplotype distribution and mutations at the PAH locus in Croatia. // Hum Genet. 1992. V.90. P. 155-157

11. Betts S, Haase-Pettingell C, King J. Mutational effects on inclusion body formation. /Лn: 1997 Richards FM, Eisenberg DF, Kim PS, editors. Advances in protein chemistry 50: protein misassembly. New York: Academic Press, p 243-264.

12. Bickel H., Bachmann C., Beckers R. Neonatal mass screening for metabolic disorders.// Eur. J. Pediatr. 1981. V.137. P133-139i

13. Bonora GM, Ivanova E, Zarytova V, Burcovich B, Veronese FM. Synthesis and characterization of high-molecular mass polyethylene glycol-conjugated oligonucleotides.// Bioconjug Chem. 1997 Nov-Dec V.8(6). P.793-797.

14. Bosco P, Cali F, Meli C, Mollica F, Zammarchi E, Cerone R, Vanni C, Palillo L, Greco D, Romano V. Eight new mutations of the phenylalanine hydroxylase gene in Italian patients with hyperphenylalaninemia.// Hum Mutat 1998. V. 11. P.240-243

15. Bross P, Corydon TJ, Andresen BS, Jorgensen MM, Bolund L, Gregersen N. Protein misfolding and degradation in genetic diseases.// 1999. Hum Mutat V.14. P.186-198.

16. Byck S, Morgan К, Tyfield L, Dworniczak B, Scriver CR. Evidence for origin, by recurrent mutation, of the phenyla-laninehydroxylase R408W mutation on two haplotypes inEuropean and Quebec populations. // Hum Mol Genet 1994. V.3. P.1675-1677.

17. Byck S., Tyfield L., Carter K., Scriver C.R. Prediction of Multiple Hypermutable Codons in the Human PAH Gene: Codon 280 Contains Recurrent Mutations in Quebec and Other Populations. // Hum Mutat 1997. V.9. P.316-321.

18. Charikova E.V., Khalchitskii S.E., Antoshechkin A.G., Schwartz E.I. Distribution of some point mutations in the phenylalanine hydroxylaase gene of phenylketonuria patients from the Moscow region. // Hum. Hered. 1993. V.43.P.244-249.

19. Chehin R., Thorolfsson M., Knappskog P. M., Martinez A., Flatmark Т., Arrondo J.L.R. , Muga A. Domain structure and stability of human phenylalanine hydroxylase inferred from infrared spectroscopy.//FEBS Letters. 1998. V.422. P.225-230

20. Chesnoy S., Huang L., Structure and function of lipid-DNA complexes for gene delivery// Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 2000. V.29. P. 27-47.

21. Chien YH, Chiang SC, Huang A, Chou SP, Tseng SS, Huang YT, Hwu WL. Mutation spectrum in Taiwanese patients with phenylalanine hydroxylase deficiency and a founder effect for the R241C mutation.// Hum Mutat. 2004 V.23(2). P.206.

22. Christensen R., Kolvraa S., Blaese R.M., Jensen T.G., Development of a skin-based metabolic sink for phenylalanine by overexpression of phenylalanine hydroxylase and GTP cyclohydrolase in primary human keratinocytes// Gene Ther. 2000. V.7. P.1971-1978.

23. Christensen R., Guttler F., Jensen T.G., Comparison of epidermal keratinocytes and dermal fibroblasts as potential target cells for somatic gene therapy of phenylketonuria// Mol. Genet. Metab. 2002. V.76 P.313-318.

24. Cristiano R.J., Smith L.C., Woo S.L., Hepatic gene therapy: adenovirus enhancement of receptor-mediated gene delivery and expression in primary hepatocytes// Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1993. V.90. P.2122-2126.

25. Crawfiird M., Cibbs D., Sheppard D. Studies on human phenylalanine monooxygenase: Restricted expression. // J. Inher Metab. Dis. 1981. V.4. P.191-195.

26. Daiger S. P., Lidsky A. S, Chakraborty R., Koch R., Cuttler F., Woo S.L.C. Effective use of polymorpic DNA haplotypes at the phenylalanine hydroxylase (PAH) locus in prenatal diagnosis of phenylketonuria.// Lancet. 1986. V.l. P.229-232.

27. Daiger SP, Reed L, Huang S-Z et al. Polymorphic DNA haplotypes at the phenylalanine hydroxylase (PAH) locus in Asian families with phenylketonuria (PKU). // Am J Hum Genet. 1989 V.45(2). P.319-324.

28. Davis M. D., Parniak M. A., Kaufman S., Kempner E. The role of phenylalanine in structure-function relationships of phenylalanine hydroxylase revealed by radiation target analysis. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. V.94. P.491-495

29. De La Vega, Isaac F.M., H., Scafe, C.R. A Tool for Selecting SNPs for Association Studies Based on Observed Linkage Disequilibrium Patterns. //Pacific Symposium on Biocomputing 2006 V.l 1. P.487-498

30. Dianzani I, Giannattasio G, de Sanctis L, Alliaudi C, Lattanzio P, Dionisi Vici C, Burlina A, Burroni M, Sebastio G, Carnevale F, et al. Characterization of phenylketonuria alleles in the Italian population.// Eur J Hum Genet 1995. V.3. P.294-302.

31. DiLella AG, Marvit J, Brayton K, Woo SL. An amino-acid substitution involved in phenylketonuria is in linkage disequilibrium with DNA haplotype 2.//Nature 1987. V.327. P.333-336.

32. Doskeland AP, Flatmark T. Recombinant human phenylalanine hydroxylase is a substrate for the ubiquitinconjugating enzyme system. //Biochem J 1996. V.319. P.941-945.

33. Dutton C, Sommer SS. Simultaneous detection of multiple single-base alleles at a polymorphic site.// Biotechniques. 1991 Dec;l l(6):700-2.

34. Dworniczak B, Aulehla-Scholz C, Horst J: Phenylalanine hydroxylase gene: silent mutation uncovers evolutionary origin of different alleles. // Clin Genet. 1990 V.3 8(4). P.270-273.

35. Dworniczak В., Kalaydjieva L., Aulehla-Scholz C., Ullrich K., Kremcnsky I., Radeva В., Horst J. Recurrent nonsense mutation in exon 7 of the phenylalanine hydroxylase gene. // Hum. Genet. 1991. V.87. P.731-733.

36. Eiken HG, Knappskog PM, Apold J, Flatmark T. PKU mutation G46S is associated with increased aggregation and degradation of the phenylalanine hydroxylase enzyme.// Hum Mutat 1996a. V.7. P.228-238.

37. Eiken HG, Knappskog PM, Boman H, Thune KS, Kaada G, Motzfeldt K, Apold J. Relative frequency, heterogeneity and geographic clustering of PKU mutations in Norway.// Eur J Hum Genet 1996. V.4. P.205-213.

38. Eisensmith R.C., Woo S.L.C. Molecular basis of phenylketonuria and related hyperphenylalaninemias: Mutations and polymorphisms in the human phenylalanine hydroxylase gene. // Hum. Mutat. 1992a. V.l. P.13-21.

39. Eisensmith R.C., Okano Y., Dasovich M., Wang T, Guttler F., Lichter-Konecki U., Konecki D. S., Svensson E., Hagenfeldt L., Rey F., Munnich

40. Eisensmith R.C., Woo S.L., Somatic gene therapy for phenylketonuria and other hepatic deficiencies// J. Inherit. Metab. Dis. 1996. V.19. P.412^23.

41. Ellingsen S., Knappskog P.M., Jaran A., Eiken H.G. Diverse PAH transcripts in lymphocytes of PKU patients with putative nonsense (G272X, Y356X) and missense (P281L, R408Q) mutations. // FEBS Letters. 1999. V.457. P.505-508

42. Erlandsen H and Stevens RC, The Structural Basis of Phenylketonuria.// Mol Genet Metab. 1999 V.68(2). P. 103-125.

43. Fiege B, Blau N. Assessment of tetrahydrobiopterin (BH4) responsiveness in phenylketonuria.// J Pediatr. 2007 V. 150(6). P.627-630.

44. Foiling A. Utskillelse av fenylpyrodriesyre i urinen som stoflikifteanomali i fortindelse med imbecillitet.//Nord. Med. Tidskr. 1934a.V.8. P.1054-1059

45. Foiling A. Uber Ausscheidung von Phenylbrenztraubensaure in den Ham als Stoff-wechselanomalie in Verbindung mit Imbezillitat.// Ztichr. Ptysiol. Chem. 1934b V. 227. P. 169-176.

46. Forrest SM, Dahl HH, Howells DW, Dianzani I, Cotton RGH. Mutation detection in phenylketonuria by using chemical cleavage of mismatch: Importance of using probes from both normal and patient samples. // Am J Hum Genet. 1991 V.49(l). P.175-183.

47. Fusetti F., Erlandsen H., Flatmarki Т., Stevens R. C. Structure of tetrameric human phenylalanine hydroxylase and its Implications for phenylketonuria.// The Journal of biological chemistry. 1998. V. 273, P.l 6962-16967.

48. Gamez A, Perez B, Ugarte M, Desviat LR. Expression analysis of phenylketonuria mutations: effect on folding and stability of the phenylalanine hydroxylase protein. //J Biol Chem 2000. V.275. P.29737— 29742.

49. Garcia-Diaz M, Bebenek K, Krahn JM, Pedersen LC, Kunkel ТА. Structural analysis of strand misalignment during DNA synthesis by a human DNA polymerase.// Cell. 2006 V. 124(2). P.331-342.

50. Giannattasio S, Dianzani I, Lattanzio P, Spada M, Romano V, Cali F, Andria G, Ponzone A, Marra E, Piazza A. Genetic heterogeneity in five Italian regions: analysis of PAH mutations and minihaplotypes. //Hum Hered. 2001. V.52(3). P.154-159.

51. Goltsov AA, Eisensmith RC, Konecki DS, Lichter-Konecki U, Woo SL. Associations between mutations and a VNTR in the human phenylalanine hydroxylase gene. //Am J Hum Genet. 1992 V.51(3). P.627-636.

52. Gramer G, Burgard P, Garbade SF, Lindner M. Effects and clinical significance of tetrahydrobiopterin supplementation in phenylalanine hydroxylase-deficient hyperphenylalaninaemia.// J Inherit Metab Dis. 2007 V.30(4). P.556-562. Epub 2007 Aug 6

53. Grenett H.E., Ledley F.D., Reed L.L., Woo S.L.C. Full-length cDNA for rabbit tryptophan hydroxylase: Functional domains and evolution of aromatic amino acid hydroxylases. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. V.4. P.5530-5534.

54. Guldberg P, Henriksen KF, Guttler F. Molecular analysis of phenylketonuria in Denmark: 99% of the mutations detected by denaturing gradient gel electrophoresis.// Genomics 1993. V.17. P. 141-146.

55. Guldberg P, Mallmann R, Henriksen KF, Guttler F. Phenylalanine hydroxylase deficiency in a population in Germany: mutational profile and nine novel mutations.// Hum Mutat 1996. V.8. P.276-279.

56. Harding C.O., Wild K., Chang D., Messing A., Wolff J.A., Metabolic engineering as therapy for inborn errors of metabolism-development of mice with phenylalanine hydroxylase expression in muscle// Gene Ther. 1998. V.5 P.677-683.

57. Harding C.O., Neff M., Jones K., Wild K., Wolff J.A., Expression of phenylalanine hydroxylase (PAH) in erythrogenic bone marrow does not correct hyperphenylalaninemia in Pahenu2 mice// J. Gene Med. 2003. V.5. P.984-993.

58. Hashem N, Bosco P, Chiavetta V, Cali F, Ceratto N, Romano V. Preliminary studies on the molecular basis of hyperphenylalaninemia in Egypt.// Hum Genet 1996. V.98. P.3-6

59. Hennermann JB, Vetter B, Wolf C, Windt E, Buhrdel P, Seidel J, Monch E, Kulozik AE. Phenylketonuria and hyperphenylalaninemia in eastern Germany: a characteristic molecular profile and 15 novel mutations.// Hum Mutat 2000. V.l5. P.254-260.

60. Hufton S. E., Jennings I. G.,. Cotton R. G. H. Structurer function analysis of the domains required for the multimerisation of phenylalanine hydroxylase.// Biochimica et Biophysica Acta. 1998. V.1382. P.295-304.

61. Hwu W.L., H.Y. Yeh, S.W. Fang, H.S. Chiang, Y.W. Chiou, Y.M. Lee, Regulation of GTP cyclohydrolase I by alternative splicing in mononuclear cells// Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. V.306. P.937-942.

62. Jaruzelska J, Matuszak R, Lyonnet S, Rey F, Rey J, Filipowicz J, Borski K, Munnich A. Genetic background of clinical homogeneity of phenylketonuria in Poland.// J Med Genet 1993. V.30. P.232-234.

63. Jervis G. A. Studies on phenylpyruvic oligophrenia. The position of the metabolic error. // J. Biol. Chem. 1947. V.169. P.651-656.

64. Jervis G.A. Phenylpyruvic oligophrenia deficiency oi phenylalanine-oxidizing system. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1953. V.82. P.514-515.

65. John S.W.M., Scriver C.R., Laframboise R., Rozen R. In vivo and in vivo correlalions for the I65T and MIV mutation, at the phenylalanine hydroxylase locus.// Hum. Mut. 1992. V.l. P.147-153.

66. Kasnauskiene J, Giannattasio S, Lattanzio P, Cimbalistiene L, Kucinskas V. The molecular basis of phenylketonuria in Lithuania.// Hum Mutat 2003. V.21.P.398.

67. Kaufman S. A new cofactor required for the enzymatic conversion of phenylalanine to tyrosine.//J. Biol. Chem. 1958a. V.230. P.931-939.

68. Kaufman S. Studies on the mechanism of the enzymatic conversion of phenylalanine to tyrosine. // J. Biol. Chem. 1959. V.234. P.2677-2682.

69. Kaufman S. The structure of the phenylalanine-hydroxylation cofactor.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1963. V.50. P. 1085-1093.

70. Kayaalp E, Treacy E, Waters PJ, Byck S, Nowacki P, Scriver CR //Human phenylalanine hydroxylase mutations and hyperphenylalaninemia phenotypes: a metanalysis of genotype-phenotype correlations. Am J Hum Genet 1997. V.61. P. 1309-1317

71. Khidiiatova IM, Khusnutdinova EK. Genomic structure and DNA diagnosis of hereditary monogenic diseases in the Volga-Ural region/ Mol Biol (Mosk). 2004. V.38(l). P.139-149.

72. Koch R., Azen C., Friedman E.G., Williamson M.L. Paired comparisons between early treated PKU children and their matched sibling controls on intelligence and school achievement lest results at eight of age.// J. Inher. Metab. Dis. 1984. V.7. P.86-90.

73. Koch R., Moseley K. D., Yano S., Nelson M. Jr., Moats R. A. Large neutral amino acid therapy and phenylketonuria: a promising approach to treatment// Molecular Genetics and Metabolism 2003. V.79: P. 110-113

74. Krause W, Epstein C, Averbook A, Dembure P, Elsas L () Phenylalanine alters the mean power frequency of electroencephalograms and plasma L-dopa in treated patients with phenylketonuria.// Pediatr Res 1986. V.20. P.1112-1116

75. Kuzmin A.I., Eisensmith R.C., Goltsov A.A., Sergeeva N.A., Schwartz E.I., Woo S.L. Complete spectrum of PAH mutations in Tataria: presence of Slavic, Turkic and Scandinavian mutations// Eur J Hum Genet. 1995. V.3(4). P.246-255.

76. Latorra D, Campbell K, Wolter A, Hurley JM. Enhanced allele-speciflc PCR discrimination in SNP genotyping using 3' locked nucleic acid (LNA) primers.// Hum Mutat. 2003 V.22(l). P.79-85.

77. Kuzmin A.I., Eisensmith R.C., Goltsov A.A., Sergeeva N.A., Schwartz E.I., Woo S.L.C. Complete spectrum of PAH mutations in Tataria: presence of Slavic, Turkic and Scandinavian mutations. // Europ J Hum Genet. 1995. V.3. P.246-255.

78. Lee DH, Koo SK, Lee KS, Yeon YJ, Oh HJ, Kim SW, Lee SJ, Kim SS, Lee JE, Jo I, Jung SC. The molecular basis of phenylketonuria in Koreans.//J Hum Genet. 2004. V.49(ll). P.617-621. Epub 2004 Oct 16.

79. Lidsky AS, Guttler F, Woo SL. Prenatal diagnosis of classical phenylketonuria by DNA analysis. // Lancet. 1985 V. 1(8428). P.549-551.

80. Lillevali H., Ounap K., Metspalu A. Phenylalanine hydroxylase gene mutation R408W is present 84% of Estonian phenylketonuria chromosomes.// Eur J Hum Genet. 1996. V.4. P. 296-300

81. Lin C.M., Tan Y., Lee Y.M., Chang C.C., Hsiao K.J., Expression of human phenylalanine hydroxylase activity in T lymphocytes of classical phenylketonuria children by retroviral-mediated gene transfer//J. Inherit. Metab. Dis. 1997. V.20. P.742-754.

82. Liu T.J., Kay M.A., Darlington G.J., Woo S.L. Reconstitution of enzymatic activity in hepatocytes of phenylalanine hydroxylasedeficient mice, Somat. Cell.// Mol. Genet. 1992. V.18. P.89-96.

83. Liu Q, Thorland EC, Heit JA, Sommer SS. Overlapping PCR for bidirectional PCR amplification of specific alleles: a rapid one-tube methodfor simultaneously differentiating homozygotes and heterozygotes.// Genome Res. 1997 V.7(4). P.389-398.

84. Mallolas J, Vilaseca MA, Campistol J, Lambruschini N, Cambra FJ, Fuste ME, Mila M. Clinical, biomedical, neurological and molecular study of 11 patients with new mutations in PAH gene. // Rev Neurol. 2000 V.31(10). P.907-10.

85. Maniatis N, Collins A, Xu CF, McCarthy LC, Hewett DR, Tapper W, Ennis S, Ke X, Morton NE. The first linkage disequilibrium (LD) maps: delineation of hot and cold blocks by diplotype analysis.// Proc Natl Acad Sci USA. 2002. V.99. P.2228-2233.

86. McKinzie PB, Parsons BL. Detection of rare K-ras codon 12 mutations using allele-specific competitive blocker PCR.// Mutat Res. 2002 V.517(l-2). P.209-220.

87. McDonald J.D., Andriolo M., Cali F., Mirisola M., Puglisi-Allegra S., Romano V., Sarkissian C.N., Smith C.B., The phenylketonuria mouse model: a meeting review// Mol. Genet. Metab. 2002. V.76. P.256-261.

88. Michals-Matalon K, Bhatia G, Guttler F, Tyring SK, Matalon R. Response of phenylketonuria to tetrahydrobiopterin.// J Nutr. 2007 V.137. P.1564S-1567S; discussion P.1573S-1575S.

89. Mitoma C., Auld R.M., Udenfriend S. On the nature of enzymatic defect in phenylpyruvic oligophrenia. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1957. V.94.1. P.634-635.

90. Moller N.E , Meek S., Bigelow M., Andrews J., Nair K.S. The kidney is an important site for in vivo Phenylalanine-to-tyrosine conversion in adult

91. Humans: a metabolic role of the kidney. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. V.97. P.l242-1246

92. Morales G, Requena С. M., Jimenez-Ruiz A., Lopez M.C., Ugarte M., Alonso C. Sequence and expression of the Drosophila phenylalanine hydroxylase mRNA. // Gene. 1990. V.93. P.213-219.

93. Murphy ВС, Scriver CR, Singh SM. CpG methylation accounts for a recurrent mutation (с.1222С>Т) in the human PAH gene.// Hum Mutat. 2006 V.27(9). P.975.

94. Nagasaki Y., Matsubara Y., Takano H., Fujii K., Senoo M., Akanuma J., Takahashi K., Kure S., Нага M., Kanegae Y., et al., Reversal of hypopigmentation in phenylketonuria mice by adenovirus- mediated gene transfer//Pediatr. Res. 1999. V.45. P.465-473.

95. Nechyporenko MV, Livshits LA. Molecular and genetical study of phenylketonuria in Ukraine (abstract).// Eur J Hum Genet 2002. V.101 P.236.

96. O'Donnell K, O'Neill C, Tighe O, Bertorelle G, Naughten E, Mayne P, Croke D. The mutation spectrum of hyperphenylalaninaemia in the Republicof Ireland: the population history of the Irish revisited.// Eur J Hum Genet2002. V.10. P.530-538.

97. Okano Y., Wang T, Eisensmith R.C, Guttler F., Woo S.L.C. Recurent mutation in the human phenylalanine hydroxylase gene. // Am. J. Hum. Genet. 1990. V.46. P.919-924.

98. Okano Y, Eisensmith RC, Guttler F, Lichter-Konecki U, Konecki DS, Trefz FK, Dasovich M, Wang T, Henriksen K, Lou H, et al. Molecular basis of phenotypic heterogeneity in phenylketonuria.// N Engl J Med 1991a. V.324. P:1232-1238.

99. Okano, Y., Wang, Т., Eisensmith R. C., Longi R., Giovannini M, Cerone R., Romano C., Woo S.L.C. Phenylketonuria missense mutations in the Mediterranean. // Genomics. 1991b. V.9. P.96-103.

100. Ozalp L., Coskun T, Ceyhan M., Tokol S., Oran O., Erdem G., Tekinalp O., Durmus Z., Tarikahya Y. Incidence of phenylketonuria and hyperphenylalaninemia in a sample of the newborn population. // J. Inher. Metab. Dis. 1986. V.9. P.237-239.

101. Ozguc M, Yilmaz E, Erdem H, Coskun T, Tokatli A, Ozalp I: Association between mutations and the variable number tandem repeat alleles in sample of Turkish phenylketonuria patients.// J Inher Metab Dis 1994. V.17. P.373-374.

102. Penrose L.S., Quastel J.H. Metabolic studies in phenylketonuria. // Biochem. J. 1937. V.31.P 266-274.

103. Perez B, Desviat LR, Ugarte M. Analysis of the phenylalanine hydroxylase gene in the Spanish population: mutation profile and association with intragenic polymorphic markers.// Am J Hum Genet 1997. V.60. P.95-102.

104. Pey AL, Desviat LR, Gamez A, Ugarte M, Perez B. Phenylketonuria: genotype-phenotype correlations based on expression analysis of structural and functional mutations. //Hum Mutat 2003. V.21. P.370-378.

105. Pietz J, Dunckelmann R, Rupp A, Rating D, Meinck HM, Schmidt H, Bremer HJ Neurological outcome in adult patients with early-treated phenylketonuria. //Eur J Pediatr 1998. V.157. P.824-830

106. Pronina N, Giannattasio S, Lattanzio P, Lugovska R. The molecular basis of phenylketonuria in Latvia.// Hum Mutat 2003. V.21. P.398-399.

107. Ramus S., Forrest S.M., Saleeba J.A., Cotton R.G.H. CpG hotspot causes second mutation in codon 408 of the phenylalanine hydioxylase gene.// Hum. Genet. 1992. V.90. P.147-148.

108. Romano V, Lio D, Cali F, Scola L, Leggio L, D'Anna C, DeLeo G, Salermo A. A methodological strategy for PAH genotyping in populations with a marked molecular heterogeneity of hyperphenylalaninemia. //Mol Cell Probes. 2001 V.15(l). P.13-19.

109. Scriver CR, Kaufman S. The hyperphenylalaninemias. In: Scriver CR, Beaudet al, Sly SW, Valle D (eds) Childs B, Kinzler KW, Vogelstein В (assoc eds) The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease.// 2001, 8 ed. McGraw-Hill, New York, Ch. 77

110. Scriver CR, Hurtubise M, Konecki D, Phommarinh M, Prevost L, Erlandsen H, Stevens R, Waters PJ, Ryan S, McDonald D, Sarkissian C. PAHdb 2003: What a Locus-Specific Knowledgebase Can Do // Hum Mutat 2003. V.21. P.333-344

111. Smagulova FO, Brenner EV, Kotova Liu, Koren' OL, Nagaitsev YM, Zhabin SG, Morozov IV. Identification of mutation of the phenylalanine hydroxylase gene using an automated DNA sequencer. // Genetika. 2004 V.40(2). P.272-276.

112. Smith S.C., Kemp В. E., McAdam W. J., Mercer J.E.B., Cotton R.G. Two apparent molecular weight forms of human and monkey phenylalaninehydroxylase are due to phosphorylation // J. Biol. Chem. 1984. V.259. P.l 1284-11289

113. Song F, Jin YW, Wang H, Zhang YM, Yang YL, Zhang T. Mutations in exon 7 of the phenylalanine hydroxylase (PAH) gene in Chinese patients with phenylketonuria (abstract). //Yi Chuan. 2005 V.27(l). P.53-56.

114. Spaapen J.M., Estela Rubio-Gozalbo M. Tetrahydrobiopterin-responsive phenylalanine hydroxylase deficiency, state of the art// Molecular Genetics and Metabolism 2003. V.78. P.93-99

115. Sueoka H., Moshinetsky A., Nagao M., Chiba S. Mutation screening of phenylketonuria in the Far East of Russia.// J Hum Genet 1999. V.44. P.368-371

116. Svensson E, Eisensmith RC, Dworniczak B, von Dobeln U, Hagenfeldt L, Horst J, Woo SL. Two missense mutations causing mild hyperphenylalaninemia associated with DNA haplotype 12. //Hum Mutat 1992. V.l.P.129-137.

117. Tighe O., Dunican D., O'Neill C. Genetic Diversity Within the R408W Phenylketonuria Mutation Lineages in Europe // Hum Mut 2003. V.21. P.387-393.

118. Thomas C.E., Ehrhardt A., Kay M.A., Progress and problems with the use of viral vectors for gene therapy// Nat. Rev. Genet. 2003. V.4. P.346-358.

119. Thony В., Auerbach G., Blau N. Tetrahydrobiopterin biosynthesis, regeneration, and functions// Biochem. J. 2000. V.347. P. 1-16.

120. Traiger-Synodinos J., Kanavakis E., Kalogerakou M. Preliminary mutation analysis in the phenylalanine hydroxylase gene in Greek PKU and HPA patients. //Hum. Genet. 1994. V.94. P.573-575.

121. Tsai T.-F., Hsiao K.-J., Su T.-S. Phenylketonuria mutation in Chinese haplotype 44 identical with haplotype 2 mutation in northern-Eiropean caucasian. //Hum. Genet. 1990. V.84. P.409-411.

122. Tyfield LA, Stephenson A, Cockburn F, Harvie A, Bidwell JL, Wood NA, Pilz DT, Harper P, Smith I. Sequence variation at the phenylalaninehydroxylase gene in the British Isles.// Am J Hum Genet 1997. V.60. P.388-396.

123. Viktorova TV, Murzabaeva SSh, Karunas AU, Magzhanov RV, Khusnutdinova EK. Molecular genetic analysis of phenylketonuria in Bashkiria /Genetika. 1997. V.33(7). P.992-995.

124. Villasana D, Butler IJ, Williams JC, Roongta SM. Neurological deterioration in adult phenylketonuria. // J Inherit Metab Dis 1989. V.12. P.451-457

125. Walitza S., Renner T.J., Dempfle A. Konrad K., et.al. Transmission disequilibrium of polymorphic variants in the tryptophan hydroxylase-2 gene in attention-deficit/hyperactivity disorder. // Mol. Psychiatry. 2005. V.10. P.1126-1132.

126. Wang T, Okano Y., Eisensmith R.C., Lo W.H.Y., Huang S. -Z., Zeng Y.T., Liu S-R., Woo S.L.C. Missense mutationns prevalent in Orientals with phenylketonuria: Molecular characterization and clinical implications.// Genomics. 1991b. V.10. P.449-456.

127. Waters PJ, Parniak MA, Hewson AS, Scriver CR. Alterations in protein aggregation and degradation due to mild and severe missense mutations

128. A104D, R157N) in the human phenylalanine hydroxylase gene (PAH).// Hum Mutat 1998. V.12. P.344-354.

129. Waters P.J. How PAH Gene Mutations Cause Hyper-phenylalaninemia and Why Mechanism Matters: Insights From In Vitro Expression. // Hum Mutat 2003. V.21.P.357-369.

130. Werner-Felmayer G., Golderer G., Werner E.R., Tetrahydrobiopterin biosynthesis, utilization and pharmacological effects// Curr. Drug Metab. 2002. V.3. P.159-173.

131. Wickner S, Maurizi MR, Gottesman S. Posttranslational Quality Control: folding, refolding, and degrading proteins.// Science 1999. V.286. P. 18881893.

132. Williams К Benefits of normalizing plasma phenylalanine: impact on behaviour and health. A case report. // J Inherit Metab Dis 1998. V.21. P.785-90

133. Woo SL, Lidsky AS, Guttler F et al. Cloned human phenylalanine hydroxylase gene allows prenatal diagnosis and carrier detection of classical phenylketonuria. //Nature. 1983. V.306(5939). P.151-155.

134. Woolf L.I., Vulliamy D.G. Phenylketonuria with a study of the effect upon it of glutamic acid. // Arch. Dis. Child. 1951. V.26. P.487-494.

135. Zekanowski C, Jurkowska M, Bal J. Association between minihaplotypes and mutations at the PAH locus in Polish hyperphenylalaninemic patients.// HumHered 2001. V.51. P.l 17-120.

136. Zekanowski C, Nowacka M, Zgulska M, Horst J, Cabalska B, Mazurczak T. Frequencies of the most common mutations responsible for phenylketonuria in Poland.//Mol Cell Probes 1994. V.8. P.323-324.

137. Zschocke J, Graham CA, Carson DJ, Nevin NC. Phenylketonuria mutation analysis in Northern Ireland: a rapid stepwise approach. //Am J Hum Genet 1995. V.57. P.1311-1317.

138. Zschocke J, Mallory JP, Eiken HG, Nevin NC. Phenylketonuria and the peoples of Northern Ireland. //Hum Genet 1997. V.100. P.189-194.

139. Zschocke J.,-Hoffmann G. Phenylketonuria mutations in Germany. // Hum Genet 1999. V.104. P.390-398

140. Zschocke J. Phenylketonuria Mutations in Europe. //Hum Mutat 2003. V.21. P.345-356.

141. Zygulska M, Eigel A, Pietrzyk JJ, Horst J. Phenylketonuria in southern Poland: a new splice mutation in intron 9 at the PAH locus.// Hum Mutat 1994. V.4. P.297-299.