Фитохимическое исследование Rhododendron adamsii Rehder тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат химических наук Рогачев, Артем Дмитриевич

• Рогачев, Артем Дмитриевич
• кандидат химических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат химических наук Рогачев, Артем Дмитриевич

1. Введение.

2. Химический состав и биологическая активность экстрактов растений рода Rhododendron (обзор литературы).

2.1. Введение.

2.2. Неполярные компоненты рододендронов.

2.2.1. Эфирные масла.

2.2.2. Алканы, алифатические спирты, жирные кислоты.

2.3. Изопреноиды растений рода Rhododendron.

2.3.1. Дитерпеноиды рододендронов.

2.3.2. Тритерпеноиды рододендронов.

2.4. Ароматические соединения рода Rhododendron.

2.4.1. Фенолы, фенолокислоты и другие производные бензола.

2.4.2. Кумарины.

2.4.3. Флавоноиды.

2.5. Биологическая активность некоторых суммарных экстрактов и вторичных метаболитов рододендронов.

3. Исследование качественного и количественного химического состава Rhododendron adamsii Rehder (обсуждение результатов).

3.1. Подготовка и экстракция сырья.

3.2. Сравнительный анализ химического состава эфирных масел листьев и стеблей Rhododendron adamsii Rehder, Rhododendron aureum Georgi и Rhododendron dauricum L.

3.3. Качественный состав и количественное содержание жирных кислот в листьях и стеблях рододендрона Адамса.

3.4. Количественное определение урсоловой и олеаноловой кислот в некоторых представителях семейства Ericaceae.

3.5. Другие вторичные метаболиты рододендрона Адамса.

3.5.1. Количественное содержание основных флавоноидов листьев и стеблей Rhododendron adamsii.

3.5.2. Мио-инозитол и ацетамид в листьях Rh. adamsii.

3.6. Некоторые пренилированные производные фенолов, выделенные из листьев рододендрона Адамса Rhododendron adamsii Rehder.

4. Фармакологические испытания некторорых ввеществ, выделенных из рододендрона Адамса.

4.1. Исследование фармакологической активности метилового эфира каннабигерорциновой кислоты.

4.2. Коагулометрическое исследование на фоне введения метилового эфира КГК и нового соединения.

4.3. Изучение гипотермического действия нового соединения и его смеси с метиловым эфиром КГК.

5. Экспериментальная часть.

5.1. Разработка экстракционной методики.

5.2. Выделение и анализ эфирных масел.

5.2.1. Растительный материал и процедура выделения масла.

5.2.2. Процедура анализа масла.

5.3. Количественное определение жирных кислот.

5.3.1. Растительное сырье и процедура выделения ЖК.

5.3.2. Анализ жирных кислот методом ГЖХ и ГХ/МС.

5.4. Определение содержания урсоловой и олеаноловой кислот.

5.4.1. Растительный материал и процедура выделения.

5.4.2. Хроматографические анализы методом ВЭЖХ, ГЖХ и ГХ/МС.

5.5. Выделение мио-инозитол а и ацетамида.

5.6. Выделение и идентификация флавоноидов.

5.6.1. Стандартные образцы и хроматографические анализы.

5.6.2. Определение приведенной весовой экстинкции стандартных образцов.

5.6.3. Содержание нативных флавоноидов в сырье.

5.6.4. Определение суммы флавоноидов после гидролиза.

5.6.5. Анализ углеводов методом ВЭЖХ.

5.7. Выделение пренилированных фенолов из листьев Шг. айатяи и их химическая модификация.

5.7.1. Выделение метилового эфира (Е)-3-(3,7-диметилокта-2,6-диенил)-2,4-дигидрокси-6-метилбензойной (каннабигерорциновой) кислоты.

5.7.2. Получение диацетата метилового эфира каннабигерорциновой кислоты

5.7.3. Получение дибензоата метилового эфира каннабигерорциновой кислоты.

5.7.4. Выделение даурихроменовой кислоты.

5.7.5. Выделение 1 -(3-метилбутаноил)-1 а,4а,7-триметил-1Д а,1 а1,2,3,4,4а, 9Ь-октагидроциклобута[к1]ксантен-9-ола.

5.7.6. Получение 9-(2-(4-бромфенил)-2-оксоэтокси)-1 -(3-метилбутаноил)- 1 а,4а,7-триметил-1Д аД а1,2,3,4,4а,9Ь-октагидроциклобута[к1] ксантена.

5.7.7. Получение 6,8-дибром-1 -(3-метилбутаноил)-1 а,4а,7-триметил-1Д а, 1а1,2,3,4,4а,9Ь-октагидроциклобута[к1]ксантен-9-ола.

5.7.8. Получение 6,8-дибром-1 -(3 -метилбутаноил)-9 -(2-(4-бромфенил)-2-оксоэтокси)-1а,4а,7-триметил-1Да,1а1,2,3,4,4а,9Ь-октагидроцикло-бута[к1]ксантена.

5.7.9. Получение 1 а,4а,7-триметил-1 -(3-метилбутаноил)-1,1 аД а1,2,3,4,4а, 9Ь-октагидроциклобута[к1]ксантен-9-илбензоата.

6. Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фитохимическое исследование Rhododendron adamsii Rehder»

В настоящее время в мире происходит постоянное расширение арсенала лекарственных препаратов за счет внедрения в медицинскую практику новых агентов растительного происхождения. Это обусловлено доступностью и возобновляемостью используемого сырья, многообразием продуцируемых метаболитов, широким спектром их действия. При этом зачастую препараты природного происхождения обладают большей активностью и меньшей токсичностью, чем их синтетические аналоги, что оказывается незаменимым при лечении хронических заболеваний. Исследование природных метаболитов, в частности, веществ растительного и микробиального происхождения — одна из важнейших областей медицинской химии, а если судить по числу и регулярности присуждения нобелевских премий в области химии, то эта область исследований стала в XX столетии весьма престижной.

Мощнейшим источником природных биологически активных соединений является растительное сырье. Вещества растительного происхождения используются во многих сферах жизнедеятельности человека и, в частности, в здравоохранении. Биологические активные композиции и добавки, приготовленные на основе растительного сырья, широко применяются для общего укрепления здоровья населения, профилактики преждевременного старения организма человека, повышения его сопротивляемости различным неблагоприятным природным и антропогенным факторам. Все большее внимание уделяется таким проблемам, как поиск и разработка лекарственных препаратов для лечения сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний, ВИЧ, гепатита, гиперхолестеринемии, и в этой области некоторые отечественные разработки достигли значительных успехов.

В настоящее время в Российской Федерации более 95% лекарственных субстанций являются предметом импорта, в связи с чем назрела острая необходимость создания и производства отечественных лекарственных препаратов. Поиск новых природных источников, в частности, растений, произрастающих на территории нашего государства, исследование их качественного и количественного состава, препаративная наработка основных растительных метаболитов для фармакологических исследований и последующих химических трансформаций является актуальной задачей. При этом, несмотря на то, что количество лекарственных растений очень велико, только незначительная их часть была подвергнута современному фотохимическому анализу.

Практически все биологически активные экстракты растений — многокомпонентные смеси. Основной целью фитохимических исследований является идентификация максимально возможного количества веществ, содерi жащихся в экстрактивных смесях, а также разработка способов их выделения в индивидуальном состоянии. Ввиду близости их по химическим и физическим свойствам эта задача является весьма сложной и часто требует дорогостоящего оборудования и материалов.

Объектом нашего исследования является рододендрон Адамса Rhododendron adamsii Rehder, широко применяемый в тибетской и монгольской медицинах. Бурятское население применяет это растение в качестве стимулирующего и тонизирующего средства, при сердечных заболеваниях, отеках сердечного происхождения, в качестве мочегонного, при простудных заболеваниях. Среди биологически активных веществ надземной части этого растения были обнаружены дубильные вещества, кумарины, флавоноиды, эфирное масло, урсоловая и олеаноловая кислоты, простые фенольные соединения, а первые фармакологические испытания некоторых экстрактов этого растения, выполненные еще в 50-х гг. прошлого века, показали перспективность работ по его фотохимическому изучению. Следует заметить, что основные работы по изучению состава рододендрона Адамса были выполнены в 60-70-х гг. прошлого столетия, когда приборная база, использовавшаяся в исследованиях, была недостаточно мощной.

Представленная работа посвящена исследованию качественного и количественного состава листьев и стеблей Rh. adamsii. В ее рамках была представлена последовательность растворителей, позволяющая упростить составы получаемых экстрактов.

В результате настоящей работы изучен компонентный состав полярных и липофильных экстрактов Rh. adamsii. Подробно исследован химический состав и идентифицированы основные компоненты эфирных масел листьев и стеблей данного растения, а также проведен сравнительный анализ с составом эфирным масел родственных ему рододендронов.

В листьях и стеблях рододендрона Адамса впервые установлен состав свободных и связанных жирных кислот и определено их содержание. Наряду с жирными кислотами, определено количественное содержание таких важных метаболитов как урсоловая и олеаноловая кислоты.

Из полярных экстрактов листьев и стеблей рододендрона Адамса получены и охарактеризованы 4 флавоноида, являющимися мажорными для данного растения (мирицетин, кверцетин, дигидрокверцетин и рутин), а также впервые определено их массовое содержание. Рутин и дигидрокверцетин из Rh. adamsii были выделены впервые. Также были выделены и охарактеризованы мио-инозитол и ацетамид.

Впервые из листьев Rhododendron adamsii Rehder выделены три соединения, принадлежащие классу пренилированных фенолов: даурихроменовая кислота, метиловый эфир каннабигерорциновой кислоты, а также новое, ранее не описанное соединение циклобутаоктагидроксантенового типа. Метиловый эфир каннабигерорциновой кислоты является новым природным соединением. Исследовано гидрирование, бромирование, бензоилирование и ацилирование метилового эфира каннабигерорциновой кислоты, а также бромирование и бензоилирование 1-(3-метилбутаноил)-1а,4а,7-триметил-1,1а,1а1,2,3,4,4а,9Ь-октагидроциклобута[к1]ксантен-9-ола, в результате чего были получены новые вещества, для которых планируется провести фармакологические исследования.

Результаты выполненной работы обсуждались на всероссийских и международных конференциях («Химия и технология растительного сырья», г. Сыктывкар и г. Уфа; «Новые достижения в химии и технологии растительного сырья», г. Барнаул; «Современные проблемы органической химии», г. Новосибирск; «Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений», Алма-Ата.).

Автор выражает искреннюю благодарность сотрудникам ЛФМИ к.х.н. Корчагиной Д. В. и д.х.н. Гатилову Ю. В. за помощь в установлении структур выделенных соединений, сотруднику ЛЛиПБАС к.х.н. Фоменко В. В., сделавшему много ценных предложений к работе, зав. ЛФИ НИОХ СО РАН д.б.н. Толстиковой Т. Г. и сотрудникам лаборатории за проведенные биологические испытания выделенных соединений, сотрудникам ЛЭИХА НИОХ и лично Морозову С. В. за выполнение газохроматографических анализов и обсуждение полученных результатов. Отдельно автор благодарит ведущего инженера ЛЛиПБАС Комарову Н. И., внесшую неоценимый вклад в работу, за выполнение хроматографических анализов и постоянную поддержку. Также автор благодарит научного руководителя д.х.н. Салахутдинова Н. Ф. за проявленное терпение и внимательное отношение.

Заключение диссертации по теме «Биоорганическая химия», Рогачев, Артем Дмитриевич

6. Выводы

1) Впервые проведено систематическое исследование качественного и количественного химического состава рододендрона Адамса Rh. adamsii Rehder. Предложена экстракционная последовательность растворителей, позволяющая достаточно эффективно извлекать метаболиты данного растения.

2) Исследован химический состав и определено количественное содержание эфирного масла в листьях и стеблях Rh. adamsii, а также, для сравнения, Rh. aureum и Rh. dauricum. Установлено, что основными компонентами масел являются моно- и сесквитерпены и терпеноиды, среди которых в рододендроне Адамса преобладают (3-фарнезен, аромадендрен и транс-неролидол. Показано, что эфирные масла исследованных рододендронов различаются по своим макрокомпонентам.

3) Впервые исследован качественный состав и определено массовое содержание жирных кислот листьев и стеблей Rh. adamsii, которое составило 6.2% и 2.4% соответственно. Установлено, что среди свободных кислот в листьях растения преобладает бегеновая, а в стеблях - линолевая кислоты (относительное содержание 1.9% и 2.4% соответственно). В связанном состоянии в листьях растения наибольшим относительным содержанием обладает линоленовая (12.6%), в стеблях - линолевая (31.0%) кислоты. Впервые в представителе рода Rhododendron обнаружены кислоты с цик-лопропановым фрагментом (относительное содержание 0.1-0.5%).

4) В листьях и стеблях рододендрона Адамса определено массовое содержание урсоловой и олеаноловой кислот, которое составило 0.09% и 0.04% соответственно.

5) Методом ВЭЖХ показано, что основными флавоноидами рододендрона Адамса являются мирицетин, кверцетин, дигидрокверцетин и рутин,и определено их массовое содержание. Установлено, что в листьях растения преобладают мирицетин и кверцетин, а в стеблях - дигидрокверцетин (1.1%, 1.0% и 2.5% от массы сырья соответственно). Впервые в рододендроне Адамса обнаружены дигидрокверцетин и рутин, а также мио-инози-тол и ацетамид.

6) Впервые из Rhododendron adamsii Rehder выделены три соединения, принадлежащие классу пренилированных фенолов: даурихроменовая кислота, метиловый эфир каннабигерорциновой кислоты, впервые обнаруженный в природном источнике, а также новое соединение — 1-(3-метилбутаноил)-^^а^-триметшИДаДа1, 2,3,4,4а,9Ь-октагидроциклобута[к1]ксантен-9-ол, — которое проявляет гипотермическую и коагулирующую активность. Для метилового эфира каннабигерорциновой кислоты и впервые обнаруженного ксантенола была проведена химическая модификация, в результате которой получено 6 новых соединений.

110

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Рогачев, Артем Дмитриевич, 2008 год

1. Алексадрова, М. С. Рододендроны природной флоры СССР. М.: Наука,1975.-300 с.

2. Пояркова, А. И. Сем. CXIII. Вересковые Ericaceae DC. // Флора СССР.

3. Л.: Изд-во АН СССР, 1952. Т. 18. 802 с.

4. Мазуренко, М. Т. Рододендроны Дальнего Востока, структура и морфогенез. Москва Наука, 1980. - 232 с.

5. Arthur, H. R., Hui, W. H. An Examination of the Ericaceae of Hong Kong. Theoccurence of ursolic acid // J. Chem. Soc. 1954. - No. 12. - P. 4683.

6. Малышев, JI. И. Высокогорная флора Восточного Саяна. М., Л.: Наука,1965.-368 с.

7. Панкова, И. А. О некоторых рододендронах Саян. // Сб. науч. тр. института

8. Ботанический ин-т им. В. Л. Комарова. М., Л.: Изд-во АН СССР, 1961. -Сер. V. Вып. 9. - С. 221-241.

9. Усов, Л. А., Мирович, В. М., Левента, А. И., Минакина, Л. Н., Кичигина, Е.

10. Л. К сравнительной оценке тонизирующего и стимулирующего действия экстракта рододендрона Адамса // Сибирский мед. журн. 1995. - № 3. -С. 37-40.

11. Усов, Л. А., Мирович, В. М., Кичигина, Е. Л., Левента, А. И. К противовоспалительному действию рододендронов Прибайкалья // Сибирский мед. журн. 1997. - № 3. - С. 31-32.

12. Левента, А. И. Фармакогностическое исследование рододендрона Адамса,произрастающего в Восточной Сибири: Автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / А. И. Левента. Иркутский гос. мед. ун-т. Улан-Удэ, 1998. -20 с.

13. Мурашкина, И. А. Фитохимическое исследование Rhododendron aureum G. и получение на его основе лекарственных средств: Автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / И. А. Мурашкина. Иркутский гос. мед. ун-т. -Улан-Удэ, 2003.-23 с.

14. И Пат. 2118165 Российская Федерация, МГЖ6 А61 К35/78. Средство, обладающее тонизирующим и иммуностимулирующим действием / Мирович В. М.; заявитель Иркутский государственный медицинский институт. -опубл. 27.08.1998.

15. Hegnauer, R. Chemotaxonomie der Pflanzen. Basel und Stuttgart: Birkhaeuser, 1966.-Band4.-552 S.

16. Белова, H. В. К химическому исследованию растений рода Rhododendron Н Раст. ресурсы. 1968. - Вып. 2. - С. 258-272.

17. Harborne, J. В., Williams, С. A. Leaf survey of flavonoids and simple phenols in the genus Rhododendron II Phytochemistry. 1971. - Y. 10. - N. 11. - P. 2727-2744.

18. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeoniaceae — Thymelaeaceae. Л.: Наука, 1986. -336 с.

19. Белоусов, М. В., Басова, Е. В., Юсубов, М. С., Березовская, Т. П., Покровский, Л. М., Ткачев А. В. Эфирные масла некоторых видов рода Rhododendron // Химия растительного сырья. 2000. - № 3. - С. 45-64.

20. Пигулевский, Г. В., Белова, Н. В. Эфирные масла рододендрона Адамса (Rh. adamsii) II Вопросы химии терпенов и терпеноидов: Тр. Всесоюзного совещ. 4 6 июня 1959 г.-Вильнюс, 1960. - С. 159-163.

21. Пигулевский, Г. В., Ковалева, В. И., Белова Н. В. Некоторые рододендроны Саян // Сб. науч. тр. института / Ботанический ин-т им. В. Л. Комарова. М., Л.: Изд-во АН СССР, 1961. Сер. V. Вып. 9. - С. 242-250.

22. Пигулевский, Г. В., Белова, Н. В. К исследованию эфирного масла Rhododendron adamsii Rehd // ЖОХ. 1964. - T. 34. - № 4. - C. 1345-1348.

23. Белова, H. В. Эфирные масла рододендронов // Химия и технология эфирных масел и душистых веществ: Материалы 4-го международного конгресса по эфирным маслам, сентябрь 1968 г. М.: Пищевая промышленность, 1971.-Т. 1,-С. 31-33.

24. Satar, S. Analyse der atherishen Ole aus drei Rhododendron-Arten der Mon-golishen Volkrepublik // Pharmazie. 1985. - V. 40. -H. 6. - S. 432.

25. Медведева, Р. Г., Клец, Э. И. О фитонцидных свойствах сибирских рододендронов // Тр. Иркутского н.-и. противочумного ин-та Сибири и Дальнего Востока. 1957. - Т. 14. - С. 232-247.

26. Пигулевский, Г. В., Белова, Н. В. Углеводородный состав эфирного масла Rhododendron dauricum II Журн. прикл. хим. 1964. - Т. 37. - Вып. 12. -С. 2772-2775.

27. Bahuguna, R. P., Jangwan, J. S. Constituents of Rhododendron barbatum I I J. Nat. Prod. 1987. - V. 50. - N. 2. - P. 309.

28. Белоусов, M. В., Слижов, Ю. Г. Монокарбоновые кислоты эфирного масла Rhododendron mucronulatum и Rh. sichotense II ХПС. 1994. - № 6. - С. 825-826.

29. Plügge, P. Fortgezetze Untersuchungen ur die Verbreitung des Andromedoto-xins in der Familie der Ericaceae // Arch. Pharmazie. 1889. - S. 27.

30. Takemoto, T., Nishimoto, Y., Meguri, H., Katayama, К. On the indentity of Rhodotoxin, Andromedotoxin and Grayanotoxin I // J. Pharm. Soc. Japan. -1955.-P. 75.

31. Tallent, W. H., Riethof, M. L., Horning, E. C. Studies on the occurence and structure of acetylandromedol (andromedotoxin) // J. Am. Chem. Soc. 1957. -V. 79. - N. 16. - P. 4548-4554.

32. Белова, H. В. Андромедотоксин в рододендронах // ХПС. 1970. - № 3. -С. 388-389.

33. Фокина, Г. А. Тритерпеновые кислоты растений Rhododendron флоры

34. СССР // ХПС. 1979. - № 5. - С. 734-735.

35. Белова, Н. В., Фокина, Г. А. Тритерпеноиды некоторых видов Rhododendron // ХПС. -1970. № 1. - С. 137-138.

36. Фокина, Г. А., Белова, Н. В. Тритерпеноиды и стероиды некоторых отечественных видов Rhododendron II ХПС. 1974. - № 6. - С. 800.

37. Фокина, Г. А., Белова, Н. В. Газожидкостная хроматография тритерпенои-дов. П. Производные пентациклических спиртов и кислот. Анализ кислот из растительных экстрактов // ХПС. 1975. - № 6. - С. 735-739.

38. Фокина, Г. А., Белова, Н. В. Тритерпеноиды из Rhododendron caucasicum и Rh. ledebourii. Газо-жидкостная хроматография экстрактов рододендронов // ХПС. 1971. - № 1. - С. 30-33.

39. Фокина, Г. А., Белова, Н. В., Горовой, П. Г. Тритерпеноиды из Rh. кат-tschaticum и Rh. ferrugineum II ХПС. 1971. - № 3. - С. 377.

40. Sakakibara, J., Kaiya, T. Terpenoids of Rhododendron japonicum II Phytoche-mistry. 1983. - V. 22. -N. 11. - P. 2547-2552.

41. Wood, H. В., Jr.; Stromberg, V. L., Keresztesy, J. C., Horning, E. C. Androme-dotoxin. A potent hypotensive agent from Rhododendron maximum II J. Am. Chem. Soc. 1954. - V. 76. -N. 22. - P. 5689-5692.

42. Bao, G.-H., Wang, L.-Q., Cheng, K.-F., Feng, Y.-H., Li, X.-Y., Qin, G.-W. Di-terpenoid and phenolic Glycosides from the Roots of Rhododendron molle II Planta Medica. 2003. - V. 69. P. 434-439.

43. Тушишвили, JI. Ш., Замбахидзе, H. Е., Кикелидзе, H. A. Стерины листьев Rhododendron ponticum и Laurocerasus officinalis II ХПС. 1977. - № 5. -С. 709-710.

44. Arthur, H. R., Hui, W. H. Products from some plants of Hong Kong // J. Chem. Soc. 1954. - N. 8. - P. 2782-2784.

45. Alpin, R. T., Arthur, H. R., Hui, W. H. The Structure of Triterpene Simiarenol (a E:B-friedo-Hop-5-ene) from the Hong Kong Species of Rhododendron simi-arum II J. Chem. Soc., C.-1966.-N. 14.-P. 1251-1255.

46. Arthur, H. R., Hui, W. H. A New Triterpene from the Hong Kong Ericaceae: an Epoxyglutinane from Rhododendron westlandii II J. Chem. Soc. 1961. - N. 2. -P. 551-554.

47. Li, C.-J., Wang, L.-Q., Chen, S.-N., Qin, G.-W. Diterpenoids from the Fruits of Rhododendron molle // J. Nat. Prod. 2000. -V. 63. - P. 1214-1217.

48. Chen, S.-N., Zhang, H.-P., Wang, L.-Q., Bao, G.-H., Qin, G.-W. Diterpenoids from the Flowers of Rh. molle II J. Nat. Prod. 2004. - V. 67. - P. 1903-1906.

49. Zhong, G., Hu, M., Wei, X., Weng, Q., Xie, J., Li, J., Wang, W. Grayanane Diterpenoids from the Flowers of Rh. molle with Cytotoxic Activity against a Spodopterafrugiperda Cell Line // J. Nat. Prod. 2005. - V. 68. - P. 924-926.

50. Rangaswami, S., Sambamurthy, K. Chemical examination of the leaves of Rhododendron campanulatum D. Don // Proc. Ind. Acad. Sei. 1961. - V. 50A. -P. 98-104.

51. Энциклопедический словарь лекарственных, эфирномасличных и ядовитых растений. М.: Сельхозгиз, 1951. - 488 с.

52. Комиссаренко, Н. Ф., Левашова, И. Г. Фенольные соединения Rhododendron luteum IIХПС. 1969. - № 4. - С. 321.

53. Белоусов, М. В., Грахов, В. П., Березовская, Т. П., Дмитрук, С. У., Комиссаренко, Н. Ф. Свободные фенолкарбоновыые кислоты видов сем. Ericaceae флоры Сибири и Дальнего Востока России // Раст. ресурсы. 1999. -Вып. З.-С. 74-81.

54. Cao, Y., Lou, С., Fang, Y., Ye, J. Determination of active ingredients of Rhododendron dauricum L. by capillarly electrophoresis with electrochemical detection // J. Chromatography, A. 2001. - V. 943. - P. 153-157.

55. Chosson, E., Chaboud, A., Chulia, A. J., Rayanoud, J. A phloroacetophenone glucoside from Rhododendron ferrugineum II Phytochemistry. 1998. - V. 47. -N. l.-P. 87-88.

56. Tallent, W. H. d-Betuligenol from Rhododendron maximum L // J. Org. Chem.- 1964. V. 29. - N. 4. - P. 988-989.

57. Sosa, A. // Compt. rend. 1933. -N. 196. - P. 1827.

58. Запесочная, Г. Г., Баньковский, А. И. Полифенолы растений. I. Изучение химического состава листьев Rhododendron aureum Georgi // ХПС. 1965.- № 4. С. 289-292.

59. Белоусов, M. В., Левашова, И. Г., Комиссаренко, Н. Ф., Старченко, В. М. Содержание арбутина в сибирско-дальневосточных видах сем. Ericaceae // Раст. ресурсы. 1992. - Вып. 4. - С. 53-55.

60. Комиссаренко, Н. Ф., Левашова, И. Г., Шнякина, Г. П. Фенольные соединения Rhododendron dauricum II ХПС. 1973. - № 5. - С. 665.

61. Белоусов, М. В., Комиссаренко, Н. Ф., Березовская, Т. П., Точкова, Т. В. Содержание флавоноидов и кумаринов в сибирско-дальневосточных видах сем. Ericaceae // Раст. ресурсы. 1994. - Вып. 4. - С. 44-47.

62. Wada, Е. On a flavonol glycoside isolated from flowers of a white azalea (Rhododendron mucronulatum G. Don) // J. Am. Chem. Soc. 1956. - V. 78.1. N. 18.-P. 4725-4726.

63. Мирович, В. M., Федосеева, Г. M., Левента, А. И., Макаренко, С. П. Определение суммарного содержания флавоноидов в надземной части Rhododendron adamsii (Ericaceae) спектрофотометрическим методом // Раст. ресурсы. 2005. - Вып. 4. - С. 67-73.

64. Шалашвили, А. Г. Флавоноиды рододендрона кавказского // Сообщ. АН ГССР. 1967. - Т. 46. - № 1. - С. 115-121.

65. Шалашвили, А. Г. Флавоноиды рододендрона кавказского // Сообщ. АН ГССР.-1967.-Т. 46. -№ 1.-С. 115-121.

66. Оганесян, Э. Т., Бандюкова, В. А., Шинкаренко, А. Л. Флавонолы Rhododendron luteum и Rh. dauricum IIХПС. 1967. - № 4. - С. 279.

67. Chosson, Е., Chaboud, A., Chulia, A. J., Raynaud, J. Dihydroflavonol glycosides from Rhododendron ferrugineum II Phytochemistry. 1998. - V. 49. - N. 5.-P. 1431-1433.

68. Шварцман, А. Г. Глюкозид из листьев Rhododendron flavum Don II Журн. общ. хим. 1941. - T. XI. - Вып. 5-6. - С. 467-470.

69. Doss, R. P., Luthi, R., Edelman, R., Hrutfiord, B. F. Sitosterol and quercetin 3-galactoside obscure root weevil feedig stimulants from Rhododendron // J. Agric. Food. Chem. 1982. - V. 30. - P. 1079-1082.

70. Карпович, В. H. Предварительное исследование растений, входящих в восточные рецепты, применяемые при сердечно-сосудистых заболеваниях // Сб. науч. тр. института / Ленинградский химико-фармацевтическоий институт.-Л., 1961. T. XII. - С. 195-200.

71. Федосеев, А. П., Березовская, Т. П., Комиссаренко, Н. Ф., Ханина, М. А.

72. Кумарины сибирско-дальневосточных рододендронов подрода Rhodorast-rum (Maxim.) Drude // Физиолого-биохимические аспекты изучения лекарственных растений: Материалы междунар. совещания, посвящ. памяти

73. B. Г. Минаевой. 15-18 апреля 1998 г. Новосибирск, Изд-во СО РАН, 1998. - С. 83-84.

74. Пат. 2146937, Российская Федерация, МПК7 А61 К35/78. Способ выделения суммы действующих веществ, обладающих тонизирующим и стимулирующим действием / Левента А. И.; заявитель Иркутский государственный медицинский институт. опубл. 27.03.2000.

75. Пат. 2171685, Российская Федерация, МПК7 А61 КЗ5/7 8. Средство, обладающее антимикробной активностью / Федосеев А. П.; заявитель Иркутский государственный медицинский институт. опубл. 10.08.2001.

76. Минаева, В. Г. Лекарственные растения Сибири. 5-е изд. Новосибирск: Наука, 1991.-431 с.

77. Белоусов, М. В., Саратиков, А. С., Ахмеджанов, Р. Р., Березовская, Т. П., Юсубов, М. С., Дмитрук, С. Е., Басова, Е. В. Биологическая активность видов семейства Ericaceae флоры Сибири и Дальнего Востока // Раст. ресурсы. 2006. - Вып. 2. - С. 90-101.

78. Iwata, N., Wang, N., Yao, X., Kitanaka, S. Structures and histamine release effect of prenylated orcinol derivatives from Rhododendron dauricum II J. Nat. Prod. 2004. - V. 67. - P. 1106-1109.

79. Органикум. M.: Мир, 1979. T. 2, с. 249.

80. Агедимова, М. Т., Турмухамбетов, А. Ж., Казанцев, А. В., Шульц, Э. Э., Шакиров, М. М., Адекенов, С. М. Выделение и химические превращения вазацинона // ХПС. 2004. - № 3 - С. 230-231.

81. Стыскин, Е. JL, Ициксон, JI. Б., Брауде, Е. В. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография. М.: Химия, 1986. - С. 26.

82. Воробьева, А. Н., Рыбин, В. Г., Зарембо, Е. В., Болтенков, Е. В., Вербицкий, Г. А. Фитоэкдистероиды Serratula komarovii II ХПС. 2004. - № 4. -С. 550.

83. Химическая энциклопедия. М.: Советская энциклопедия, 1990. Т.2, с.376.

84. Рогачев, А. Д., Фоменко, В. В., Сальникова, О. И., Покровский, Л. М., Са-лахутдинов, Н. Ф. Сравнительный анализ химического состава эфирных масел листьев и стеблей Rhododendron adamsii, Rh. aureum и Rh. dauricum II ХПС. 2006. Вып. 4. - С. 344-347.

85. Tracey, R. P., Britz, T. J. Cellular fatty acid composition of Leuconostoc oenos I I J. Applied Bacteriology. 1989. - Vol. 66. - No. 5. - P. 445-456.

86. Endo, Y., Kamisada, S., Fujimoto, K., Saito, T. Trans fatty acids promote the growth of some Lactobacillus strains И J. Gen. Appl. Microbiol. 2006. - Vol. 52.-No. l.-P. 29-35.

87. K. J. Lie, S. F. Marcel, M. F. Chan, Litchi sinensis seed oil: a source of dehyd-rosterculic acid and cis-9,10-methylenehexadecanoic acid // J. Chem. Soc., Chemical Communication. 1977. - P. 78.

88. Novotny, L., Vachalkova, A., Biggs, D. Ursolic acid: an anti-tumorigenic and chemopreventive activity // Neoplasma. 2001. - Vol. 48. - P. 241-246.

89. Liu, J. Pharmacology of oleanolic acid and ursolic acid // J. Ethnopharmacolo-gy. 1995. - Vol. 49. - P. 57-68.

90. Liu, J. Oleanolic acid and ursolic acid: Research perspectives// J. Ethnopharma-cology. 2005. - Vol. 100. - P. 92-94.

91. Deepak, M., Handa, S. Quantitative determination of the major constituents of Verbena officinalis using high performance thin layer chromatography and high pressure liquid chromatography // Phynochem. Anal. 2000. - Vol. 11. - Is. 6. -P. 351-355.

92. Zhao, F., Sun, Y. High performance liquid chromatography/electrospray ioniza-tion-mass spectrometry analysis of Liuwei Dihuang pills // Sepu. 2003. - Vol. 21.-No. 5.-P. 500-502.

93. G. Janicsak, K. Veres, M. Kallai, I. Mathe, Gas chromatographic method for routine determination of oleanolic and ursolic acids in medicinal plants // Chromatographic -2003. Vol. 58. - No. 5/6. - P. 295-299.

94. Qi, S., Ding, L., Tian, K., Chen, X., Hu, Zh. Novel and simple nonaqueous capillary electrophoresis separation and determination bioactive triterpenes in Chinese herbs // J. Pharm. Biomed. Anal. 2006. - Vol. 40. - No. 1. - P. 3541.

95. Flavonoids: chemistry, biochemistry, and applications / Eds. 0. M. Andersen and K. R. Markham. Boca Raton-London-New York: CRC Press, Taylor &

96. Francis Group, 2006. 1237 p.

97. Государственная фармакопея СССР. XI-e издание, вып.2. М.: Медицина, 1990.-400 с.

98. Андреева, В. Ю., Калинкина, Г. И. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной Alchemilla vulgaris L. S. L. // Химия растительного сырья. 2000. - №1. - С. 85-88.

99. Лобанова, А. А., Будаева, В. В., Сакович, Г. В. Исследование биологически активных флавоноидов в экстрактах из растительного сырья // Химия растительного сырья. 2004. - №1. - С. 47-52.

100. Merken, Н. М., Beecher, G. R. Measurement of Food Flavonoids by high-performance liquid chromatography: a review // J. Agr. Food Chem. 2000. - Vol. 48.-No. 3.-P. 577-599.

101. The Sadtler standard spectra: Ultraviolet spectra. Philadelphia: Sadtler research lab., 1966-1990. Vol. 1, N 59UV; Vol. 71, N 18272UV; Vol. 104, N 29233UV.

102. Mabry, T. J., Markham, K. R., Thomas, M. B. The systematic identification of flavonoids. Berlin-Heidelberg-New York: Springer-Verlag, 1970. 354 p.

103. Клящицкий, Б. А., Соколов, С. Д., Швец, В. И. Инозитфосфатиды: строение, биохимия, синтез // Усп. хим. 1969. - Т. 38. - Вып. 4. - С. 758-775.

104. Packter, N. М. Studies on the biosynthesis of phenols in fungi. Conversion of14C.orsellinic acid and 14C]orcinol into fumigatol by Aspergillus fumigatus I.M.I. 89353 // Biochem. J. 1966. - Vol. 98. - P. 353-359.

105. Shoyama, Y., Hirano, H., Nishioka, I. Biosynthesis of propyl cannabinoid acid and its biosynthetic relationship with pentyl and methyl cannabinoid acids // Phytochemistry. 1984. - Vol. 23. - No. 9. - P. 1909-1912.

106. Pat. 0057028080 Japan. Novel chromene type compound / Mamoru E., Hiro-shi E. 15.02.1982, Jpn. Kokai Tokkyo Koho. - 4 pp.

107. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: ОАО Медицина, 2005. - 832 с.

108. Камышников, В. С. Справочник по клинико-химической лабораторной диагностике. Минск: Беларусь, 2000. - Т. 2, с. 207.

109. Плешков, Б. П. Практикум по биохимии растений. М.: Колос, 1976. -256 с.

110. Препаративная органическая химия / Под общ. ред. Н. С. Вульфсона. М.: Химия, 1964.-236 с.

111. Физер, Л., Физер, М. Реагенты для органического синтеза: в 2 т. М.: Мир, 1970.-Т. 1.-588 с.