Фармокогностическое изучение травы шалфея мускатного (Salvia sclarea L.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат фармацевтических наук Губанова, Елена Анатольевна

• Губанова, Елена Анатольевна
• кандидат фармацевтических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Губанова, Елена Анатольевна

Введение.

Глава 1. Растения рода Salvia L., ботаническая характеристика, химический состав, применение.

1.1 Ботаническая характеристика растений рода Salvia L. Сравнительная ботаническая характеристика Salvia sclarea L. и Salvia officinalis L.

1.2 Химический состав некоторых растений рода Salvia L. флоры России.

1.3 Применение видов рода Salvia L. в научной и народной медицине.

Выводы по обзору литературы.

Глава 2. Объекты и методы исследования.

2.1. Объекты исследования.

2.2 Методы исследования биологически активных соединений.

2.2.1 Качественные реакции.

2.2.2 Бумажная хроматография.

2.2.3 Тонкослойная хроматография.

2.2.4 Высокоэффективная жидкостная хроматография.

2.2.5 Газо-жидкостная хроматография.

2.2.6 Атомно-абсорбционная спектрография.

2.2.7 Дифференциальная спектрофотометрия.

2.2.8 Прямая спектрофотометрия.

2.2.9 Титриметрические методы.

2.2.10 Методика выделения полисахаридов.

2.2.11 Изучение моносахаридного состава полисахаридов.

2.3 Методы определения норм качества сырья - шалфея мускатного травы.

2.4 Фармакологические методы.

2.5 Интродукционные исследования. I > ' г,

Глава 3. Фитохимическое исследование шалфея мускатного травы . 62 • 3.1 Изучение эфирного масла шалфея мускатного.

3.1.1 Получение и изучение динамики накопления эфирного масла.

3.1.2 Изучение качественного состава эфирного масла методом гжх.:. бз

3.2 Изучение фенольных соединений шалфея мускатного травы.

3.2.1 Идентификация фенольных соединений методом бумажной и тонкослойной хроматографии.

3.2.2 Идентификация фенольных соединений методом ВЭЖХ.

3.2.3 Количественное определение суммы флавоноидов методом дифференциальной спектрофотометрии.

3.2.4 Количественное определение фенолкарбоновых кислот методом прямой спектрофотометрии.

3.3 Изучение качественного состава и количественного содержания тритерпеновых соединений.

3.4 Определение количественного содержания и качественный анализ полисахаридов, фракционный состав. 833.5 Определение количественного содержания дубильных веществ.

3.6 Изучение качественного состава и4количественного содержания органических кислот в траве шалфея мускатного.

3.7 Изучение аминокислотного состава травы шалфея мускатного

3.8 Изучение элементного состава травы шалфея мускатного.

Выводы по главе

Глава 4. Интродукционные исследования шалфея мускатного в условиях Ставропольского края

4.1 Характеристика сортов шалфея мускатного.

4.2 Характеристика климатических условий Ставропольского края.

4.3 Изучение лабораторной и грунтовой всхожести семян шалфея мускатного.

4.4 Изучение фенологических фаз развития шалфея мускатного условиях Ставропольского края.

4.5 Определение оптимальных сроков заготовки сырья — шалфея мускатного травы.

Выводы по главе.

Глава 5. Разработка норм качества шалфея мускатного травы.

5.1 Внешние признаки сырья.

5.2 Микроскопические признаки сырья.

5.3 Качественные реакции. Установление подлинности сырья методом тонкослойной хроматографии.

5.4 Установление норм качества сырья по содержанию действующих веществ.

5.4.1 Количественное определение эфирного масла.

5.4.2 Разработка и валидационная оценка методики определения количественного содержания суммы флавоноидов.

5.5 Числовые показатели сырья.

5.6 Определение микробиологической чистоты. Изучение стабильности шалфея мускатного травы при хранении

5.7 Изучение острой токсичности и противовоспалительной активности настоя шалфея мускатного травы.

5.7.1 Определение острой токсичности.

5.7.2 Изучение противовоспалительной активности настоя шалфея мускатного травы.

Выводы по главе.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармокогностическое изучение травы шалфея мускатного (Salvia sclarea L.)»

Актуальность темы. Одним из приоритетных методов поиска новых источников биологически активных соединений является принцип филогенетического родства. Большой интерес с точки зрения практического использования в медицине представляют виды рода Salvia L. (Шалфей^ В Государственную фармакопею XI издания включен только шалфей лекарственный, препараты из листьев ^ которого применяются в качестве противовоспалительных и антисептических средств при заболеваниях верхних дыхательных путей. Трава шалфея эфиопского входит в состав сбора М.Н. Здренко, применяемого при некоторых опухолевых заболеваниях, анацидном гастрите, язве. Однако многие виды рода Salvia L. еще недостаточно изучены и не востребованы для медицинского использования. Одним из» перспективных и малоизученных растений является шалфей мускатный {Salvia sclarea L.). Ценным и дорогим на мировом рынке является эфирное масло соцветий шалфея мускатного, которое используется в парфюмерии как фиксатор запаха, заменяющий мускус и амбру, в пищевой промышленности для придания* винам аромата муската [43, 48, 65, 73]. Эфирное масло шалфея мускатного ранее было включено в ГФ VIII издания, в настоящее время входит в Европейскую фармакопею [106], используется в фармацевтической и косметической промышленности как ароматическое, антисептическое, противогрибковое, дезодорируещее средство в составе ранозаживляющих бальзамов, ополаскивателей и зубных паст. Кубовой остаток после выделения эфирного масла используют для получения «Салмуса» - концентрата шалфея мускатного, который с 1985 года был внесен в Реестр лекарственных средств и рекомендован к применению в бальнеологической практике при заболеваниях периферической нервной системы (полиневриты, радикулит), опорно-двигательного аппарата (ревматоидный артрит, остеоартроз) [47,67]. В настоящее время «Салмус» выпускается на Украине и в Молдове. Однако шалфей мускатный представляет интерес массивной надземной частью, которая, помимо соцветий, остается невостребованной.

В народной медицине широко используют настой из листьев и травы шалфея мускатного в,качестве спазмолитического, противовоспалительного, антимикробного и мочегонного средства при почечнокаменной болезни, как полоскание при стоматитах и катарах верхних дыхательных путей [19, 43, 65, 77].

Таким образом, обоснование возможности применения травы шалфея мускатного в медицине, наряду с соцветиями, является актуальным, так как будет решена проблема комплексного и рационального-использования всей надземной части растения.

Для создания препаратов на основе травы шалфея мускатного имеются объективные предпосылки в плане сырьевой базы, так как данное растение культивируется во многих странах мира, в том числе в Российской Федерации в Краснодарском крае, где районированы селекционные образцы - «В-24», «Татьяна». Исследования по интродукции эфирномасличных растений в новые районы возделывания в, настоящее время достаточно востребованы.

Таким образом, фармакогностическое изучение травы шалфея мускатного для обоснования возможности комплексного использования растения и разработки лекарственных препаратов на его основе, является актуальной современной проблемой и определяет цели и задачи настоящего исследования.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось фармакогностическое изучение шалфея мускатного травы, обоснование возможности комплексного использования сырья для получения лекарственных средств и разработка нормативной документации (НД) на шалфея мускатного траву.

В задачи исследования входило:

1. Проведение общего фитохимического анализа надземной части шалфея мускатного с целью выявления основных групп БАС.

2. Изучение качественного состава и количественного содержания доминирующих групп БАС надземной части шалфея мускатного.

3. Изучение возможности культивирования шалфея мускатного в условиях Ставропольского края.

4. Разработка проекта нормативной документации (ФСП) на сырье и инструкции по сбору и сушке шалфея мускатного травы.

5. Определение острой токсичности и противовоспалительной активности настоя шалфея*- мускатного травы в сравнении с настоем шалфея.лекарственного листьев.

Научная новизна и теоретическая значимость работы. Проведен фитохимический анализ одного * неселекционного и двух селекционных образцов шалфея мускатного: «Популяция 4-79» и «Татьяна», интродуцированных в условиях Ставропольского края. Определено количественное содержание основных групп БАС: эфирного масла (0,190,38%), флавоноидов в пересчете на цинарозид (1,63-2,37%), фенолкарбоновых кислот в пересчете на' кислоту галловую (2,13-2,36%), тритерпеновых соединений в пересчете на кислоту урсоловую (0,78-1,44%), дубильных веществ в пересчете на танин (8,66-11,17%), органических кислот в пересчете на кислоту яблочную (1,21-1,43%). Проведено выделение фракций полисахаридов и изучен их моносахаридный состав.

Методом ВЭЖХ в надземной части шалфея мускатного было идентифицировано 15 соединений фенольной природы: галловая, хлорогеновая, кофейная, цикориевая, феруловая и розмариновая кислоты, цинарозид, рутин, кверцетин, дигидрокверцетин, кемпферол, апигенин, танин, умбеллиферон, кумарин. Из них впервые были идентифицированы:

- флавоноиды: дигидрокверцетин, рутин;

- фенолкарбоновые кислоты: галловая, цикориевая и феруловая;

- кумарины: кумарин, умбеллиферон.

Методом ГЖХ был изучен качественный состав эфирного масла соцветий и травы шалфея мускатного. С помощью стандартных веществ во всех образцах масел идентифицированы, линалоол, линалилацетат, гераниол, цитраль, терпинеол.

Изучена динамика накопления эфирного масла и флавоноидов^ по органам растения- и фазам вегетации.

Проведены предварительные скрининговые испытания по изучению противовоспалительной- активности и острой токсичности настоя травы шалфея мускатного.

В эксперименте на животных впервые установлено, что настой травы шалфея мускатного является малоопасным лекарственным- средством (ЬБ5о>240 мл/кг) и. проявляет противовоспалительное действие,, более выраженное, чем настой листьев шалфея лекарственного.

В- результате интродукционных исследований, изучены, посевные качества семян сорта «Татьяна» шалфея мускатного (лабораторная' и грунтовая всхожесть), сроки наступления фенологических фаз, урожайность надземной- массы и семенная« продуктивность. Определены, оптимальные-сроки заготовки, условия сушки-и срок годности сырья.

Практическая значимость результатов исследования. Установлены нормы качества травы, шалфея- мускатного. Разработана методика количественного определения, суммы флавоноидов в траве шалфея мускатного й проведена ее валидационная оценка.

Результаты фитохимического исследования использованы при разработке проекта ФСП на новый вид лекарственного растительного сырья «Шалфея мускатного трава», который рекомендуется для внедрения в медицинскую практику в качестве противовоспалительного средства.

На основании результатов изучения динамики накопления основных БАС в траве шалфея мускатного, биологических исследований, проведенных при интродукции шалфея мускатного в условиях Ставропольского края, составлена инструкция по сбору и сушке шалфея мускатного травы. выполненные интродукционные исследования позволяют сделать Ч вывод о возможности введения в культуру шалфея мускатного («Татьяна») в условиях Ставропольского края с выходом свежей сырьевой массы — травы до 200 ц/га и содержанием эфирного масла до 0,38% в траве, что- является важным показателем рентабельности культуры.

Внедрение результатов исследования. По результатам исследований разработана Инструкция по сбору и сушке травы шалфея мускатного, которая одобрена и апробирована в условиях ГНУ «Вознесенская опытная станция» (акт апробации от 10.03.2010 г). Разработаны методики установления норм качества сырья — шалфея мускатного травы, которые включены в проект ФСП. Методики анализа апробированы в лаборатории ГУП Ростовской области «Фармацевтический центр» (акт апробации от 11.11.2009 г.)

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО Пятигорской, государственной фармацевтической академии Росздрава (номер государственнойрегистрации 01200112164).

Положения, выдвигаемые на защиту:

1. Результаты фитохимического изучения надземной части шалфея мускатного на присутствие и количественное содержание основных групп БАС.

2. Результаты интродукционных исследований шалфея мускатного в условиях Ставропольского края.

3. Показатели подлинности и нормы качества шалфея мускатного травы, необходимые для разработки проекта нормативной документации.

4. Результаты изучения острой токсичности и противовоспалительной активности настоя травы шалфея мускатного

Апробация работы и публикации. Основные результаты диссертационной работы были доложены и обсуждались на ежегодных научных конференциях Пятигорской государственной фармацевтической академии в 2007-2010 гг. По теме диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 3 работы в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 156 страницах машинописного текста, содержит 47 таблиц и 28 рисунков, состоит из «Введения», «Обзора литературы», раздела «Объекты и методы исследования», трех глав экспериментальных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 135 источников, из них 39 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Губанова, Елена Анатольевна

Общие выводы

1. В результате общего фитохимического анализа неселекционного и двух селекционных образцов шалфея мускатного, интродуцированных в Ставропольском крае («Популяция 4-79» и «Татьяна»), определено количественное содержание основных групп БАС в траве: эфирного масла (0,19 - 0,25%), флавоноидов (1,63 - 2,37%), фенолкарбоновых кислот (2,13 -2,36%), полисахаридов (15,3 - 17,9%) тритерпеновых сапонинов (0,72 -1,32%), дубильных веществ (8,66 - 11,17%), органических кислот (1,21 -1,43%). Установлено, что образцы «Популяция 4-79» и «Татьяна» являются наиболее перспективыми по накоплению основных групп БАВ и сырьевой массы.

2. В траве шалфея мускатного впервые были идентифицированы: 1

- флавоноиды: дигидрокверцетин, рутин (у сорта «Татьяна» не был обнаружен);

- фенолкарбоновые кислоты: галловая, цикориевая и феруловая;

- кумарины: кумарин, умбеллиферон;

- органические кислоты: винная, щавелевая, яблочная и янтарная;

- аминокислоты: глютаминовая кислота, гистидин, глицин, лейцин, аланин, лизин, аспарагиновая кислота, серин, треонин, аргенин, фенилаланин, тирозин, валин, изолейцин, метионин.

Методом бумажной и тонкослойной хроматографии, ВЭЖХ подтверждено наличие в надземной части шалфея мускатного кислоты хлорогеновой, кофейной и розмариновой, цинарозида, кверцетина, кемпферола, апигенина, урсоловой и олеаноловой кислоты.

3. Методом ГЖХ изучен компонентный состав эфирного масла соцветий и травы шалфея мускатного. С помощью стандартных веществ в эфирном масле шалфея мускатного идентифицированы, основные компоненты — линалоол, гераниол, а-терпинеол, цитраль. Качественный состав Х-х селекционных форм шалфея* мускатного различается^ по количественному содержанию* компонентов: в масле,, полученном из соцветий, больше линалилацетата (до 70%), а в масле, выделенном из травы, содержание линалилацетата и линалоола примерно одинаково (около 30%).

4. Показана возможность культивирования шалфея мускатного (сорт «Татьяна») в условиях Ставропольского края. Проведены фенологические наблюдения* за1 растениями на 1-ом и 2-году вегетации, выращенных в условиях КМВ и Кочубеевского'района Ставропольского-края: определены основные фенофазы развития, растений и их биометрические показатели. Определена урожайность, свежей сырьевой массы - травы (160-200'ц/га в зависимости от района интродукции) и семян (1,2-1,8 ц/га). На основании изучения динамики накопления эфирного масла, флавоноидов по органам растения и фазам вегетации определены, сроки сбора1 сырья.- фаза,массового-цветения - начала плодоношения.

5. Показано, что настой травы, шалфея мускатного проявляет противовоспалительное действие, более выраженное, чем настой листьев шалфея лекарственного, и по результатам изучения острой токсичности, является малоопасным лекарственным средством (ЬБ50>240 мл/кг).

6. Установлены основные морфолого-анатомические диагностические признаки и нормы качества сырья. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в траве шалфея мускатного и проведена ее валидационная оценка.

7. Результаты фитохимического исследования использованы при разработке проекта ФСП на новый вид лекарственного растительного сырья «Шалфея мускатного трава». На основании результатов исследования динамики накопления основных БАС в траве шалфея мускатного, биологических исследований, проведенных при интродукции шалфея мускатного в условиях Ставропольского края, разработана инструкция по сбору и сушке травы шалфея мускатного.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Губанова, Елена Анатольевна, 2010 год

1. Алимходжаева, Н.З. Фармакогностическое изучение 3-х видов шалфея, произрастающих в Узбекистане: автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / Алимходжаева Н.З.- Львов, 1974.- 17с.

2. Андреева, В.Ю. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной Alchemilla vulgaris L.S.L. /

3. B.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина // Химия раст. сырья.- 2002.- №1.1. C.85-88.

4. Арасимович, В.В. Методы анализа пектиновых веществ, гемицеллюлоз и пектамических ферментов в плодах / В.В. Арасимович, В.В. Балтага, Н.П. Пономарева.- Кишинев, 1970.- С.38.

5. Арзамасцев, А.П. Проект ОФС «Валидация фармакопейных методов» / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Ю.Я. Харитонова // Ведомости науч. центра экспертизы и гос. контроля лек. средств 2002.- №1.- С.28-30.

6. Базилевская, H.A. Теория и методы интродукции растений / H.A. Базилевская.- М.: ЛГУ, 1964.- С.51-52.

7. Байкова, Е.В. Компонентный состав эфирных масел некоторых видов рода Salvia L., выращенных в условиях Новосибирска (Россия) / Е.В.

8. Байкова, Е.А. Королюк, А.В. Ткачев // Химия раст. сырья.- 2002.- №1.-С.37-42.

9. Бандюкова, В.А. Тонкослойная хроматография- флавоноидов / В.А. Бандюкова, A.JI. Шинкаренко // Химия природ, соед.- 1973.- №1.-С.20-25.

10. Бандюкова, В.А. О вероятности обнаружения флавонов, флавононов и изофлавоноидов в некоторых семействах высших растений. Сообщ. 2 /

11. B.А. Бандюкова, Э.Т. Аванесов // Раст. ресурсы.- 1973.- Т.9, вып. 4,1. C.508-515.

12. Ю.Бейдман, И.Н Методика изучения фенологии растений и растительныхсообществ / И.Н. Бейдман.- Новосибирск, 1974.- С.8-11. П.Беликов, В.В. Методы анализа флавоноидных соединений / В.В. Беликов, М.С. Шрайбер,// Фармация:- 1970.- С.66-72.

13. Бодруг, М.В. Некоторые химические данные о составе эфирных масел из дикорастущих видов рода Salvia L. Молдавии / М.В. Бодруг, Г.М. Петов // Раст. ресурсы.- 1970.- Т.6, вып. 2.- С.250-255.

14. Валидация аналитических методик. Содержание и методология: Руководство ICH Q 2(R1) // Фармация.- 2008.- №4.- G.3-10.

15. Валидация аналитических методик: теория и практика (часть I) / П. Носырев и др. // Ремедиум.- 2003.- №10.- С.69-71.

16. Валидация аналитических методик: теория и практика (часть I) / П. Носырев и др. // Ремедиум.- 2003.- №11.- С.62-64.

17. Валидация аналитических методик: теория и практика (часть И, практика) / П. Носырев и др. // Ремедиум,- 2003,- №12.- С.65-67.

18. Влияние цинарозида на азотистый обмен и функциональное состояние почек при их экспериментальном поражении в опытах на лабораторных животных / В.Н. Сыров и др. // Хим.-фармац. журн.-1993.-№7.- С.60-63.

19. Вовк, И.Ф. Экстракт мускатного шалфея в терапии больных псориазом /И.Ф. Вовк // Здравоохранение.- 1961.- №4,- С.47-50.

20. Гончарова, Т.А. Энциклопедия лекарственных растений: лечение травами: в 2-х т. / Т.А. Гончарова. М., 1997.- Т.2.- С.136-139.

21. Горяев, М.И. Эфирные масла флоры СССР / М.И. Горяев.- Алма-Ата, 1952.- 380с.

22. Государственная^ фармакопея СССР / МЗ СССР.- 8-е изд.- М.: Медгиз, 1952.- С.368.

23. Государственная фармакопея Российской Федерации.- М.: НТДЭСМП, 2008.- Вып.1.- 704с.

24. Губанова, Е.А. Анатомическое изучение травы шалфея мускатного (Salvia sclarea L.) / Е.А. Губанова, О.И. Попова // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск, 2008.- Вып. 63.- С.24-26.

25. Губанова, Е.А. Опыт выращивания шалфея мускатного в условиях Ставропольского края / Е.А. Губанова, О.И. Попова» // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск, 2010.- Вып. 65.- С.28-30.

26. Губанова, Е.А. Количественное определение флавоноидов в траве шалфея мускатного / Е.А. Губанова // Фармация из века в век: сб. науч. тр. СПХФА.- Спб., 2008.- Ч. 3.- С.20-24.

27. Губанова, Е.А. Фенольные соединения некоторых видов рода Salvia (Lamiaceae) флоры России и их биологическая активность / Е.А. Губанова, О.И. Попова // Раст. ресурсы.- 2009.- Т.45, вып. 3,- С. 137160.

28. Дроздова, И.Л. Состав и противовоспалительная активность полисахаридных комплексов фиалки душистой и мальвы низкой / И.Л. Дроздова, P.A. Бубенчикова // Хим.-фарм. журн.- 2005.- Т.39, №4.-С.29-32.

29. Джумаев, Х.К. Биология цветения и плодоношения Salvia sclarea.L. и Origanum tuttanthum Gontsch. (Узбекская ССР) / X.K. Джумаев, P.M. Мухамеджанова // Раст. ресурсы.- 1990.- Т.26, вып. 4.- С.519-524.

30. Джумаев, Х.К. Антивирусная активность эфирного масла Salvia sclarea L. / Х.К. Джумаев, К.Г. Ткаченко // Международная конференция по медицинской ботанике (4; 1997; Киев): тез. докл.- Киев; 1997.- С. 444445.

31. Зенкевич, И.Г. Использование растворов неорганических солей для увеличения выхода эфирных масел методом гидродистилляции / И.Г. Зенкевич, К.Г. Ткаченко, М.М. Коробова // Раст. ресурсы.- 1998.-Вып.З.- С. 107-111.

32. Изучение противовоспалительной активности и острой токсичности настоя травы шалфея мускатного / Е.А. Губанова и др. // Клиническая фармакология-и терапия: материалы,науч.-практич. конф.- 2009: №6.1. G.267—268. "

33. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография: пер. с англ.; в 2-х т. / Ю;Кирхиер.- М.: Химия, 1981.- Т. 1.- 616с.; т.2.- 535с.

34. Клышев, Л.Л. Флавоноиды растений. Распространение, физико-химические свойства^ методы исследования. / Л;Л. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюкина,- Алма-ата: Наука КазССР, 1978.- 220с.

35. Королюк, Е.А. Состав эфирного масла двух- видов »рода шалфей; (Sal via deserta Schang. и Salvia, verticillata L.) из' Алтайского края / Е.А. Королюк, В. Кениг, А.В. Ткачев // Химия раст. сырья:- 2002.- С. 43-48. •

36. Кочетков, Н.К. Химия биологически активных природных соединений /

37. H.К. Кочетков.- М., 1970.- 378с.

38. Кьосев, П.А. Полный справочник лекарственных растений-; / П.А. Кьосев;- М;: ЭКСМО-Пресс, 2000Г- С.832-833.

39. Лазурьевский, Г.В. Практические работы по химии природных соединений / Г.В. Лазурьевский, И.В. Терентьева, А.А. Шамшурин. -М.: Высш. шк., 1966.- С.113-115.

40. Машанова, Н.С. Изменение качества шалфейного масла при хранении сырья / Н.С. Машанова, Д.А. Волошина // Раст. ресурсы.- 1969.- Т.5, вып. 2.- С.274—275.

41. Машковский; М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский.- 15-е изд., доп.- М., 2005.- 1200с.

42. Мелик-Гусейнов, В.В. Растения народной медицины флоры России и сопредельных государств /В.В. Мелик-Гусейнов.- Пятигорск, 2005.-663с.

43. Методики исследований при интродукции лекарственных растений / Н.И. Майсурадзе и др. // Лекарственное растениеводство/ ЦБНТИ.-М., 1984'.- № 3.- 32с.

44. Мустяца, Г.И. Факторы, влияющие на эфирномасличность сырья шалфея мускатного / Г.И. Мустяца, М.И. Маковский // Актуальные проблемы изучения эфиромасличных растений и эфирных масел: тез. 2 симпоз.- Кишинев, 1970.- С.112-113.

45. ОСТ 91500.05.001-00" Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения.- М., 2000.- 58с.52:ОФС 42-0013-03' Правила* приемки1 лекарственного растительного сырья и методы отбора проб.- М.: Изд-во стандартов, 2003.- 21с.

46. Патудин, A.B. Сезонные изменения содержания ройлеанонов в, корнях некоторых видов рода Salvia L., культивируемых в Подмосковье / A.B. Патудин, A.C. Романова, Е.Ф: Тропова // Раст. ресурсы.- 1976.- Т. 12, вып. 4.- С.531-536.

47. Пектиновые вещества эфирномасличных культур. III. Выделение и характеристикаi пектина Salvia sclarea / Е.П. Кухта и др. // Химия природ, соед.- 1979.-№2.- С.222.

48. Победимова, Е.Г. Род шалфей Salvia.L. / Е.Г. Победимова // Флора СССР.- М., Л.: АН СССР, 1954.- Т.21.- С.244-363.

49. Поиски биологически активных веществ среди растений родов ясменник, карагана, шалфей, лаванда и вика / М.М. Литвиненко и др. // Всесоюз. съезд фармацевтов (3;1980; Кишинев).- Кишинев, 1980.- С. 195-196.

50. Поиск флавоноидных и иридоидных соединений в семействе губоцветных флоры Кавказа / Д.А. Пакалн и др. // Фармация.- 1976.-№5.- С.36-41.

51. Попа, Д.П. Маноол из Salvia sclarea / Д.П. Попа, JI.A. Салей // Химия природ, соединений. 1974. - № 3. - С. 405. (20)

52. Попа, Д.П. Динамика накопления дитерпеноидов в некоторых растениях сем. Губоцветных / Д.П. Попа, Г.С. Пасечник, Т.М. Оргиян // Раст. ресурсы.- 1974.- Т.10, вып. 3.- С.365-367.

53. Прокопенко, С.О. Бюлопчно активш сполуки рослин роду шавл1я / С.О. Прокопенко, B.I. Литвиненко // Фармац. журн.- 1985.- №6.- С.70.

54. Промышленные продукты переработки эфирномасличных растений как источники антисклеротических соединений / Ю.К. Василенко и др. // Респ. конф. по мед. ботанике (2; 1988; Киев): тез. докл.- Киев, 1988.-С.211-212.

55. Противовоспалительная активность настоя травы шалфея мускатного (Salvia sclarea L., Lamiaceae) / E.A. Губанова и др. / Вестн. ВГУ,-2009.-№2,-С. 165-166.

56. Пулатова, Т.П. Предварительное химическое изучение некоторых растений из семейства губоцветных / Т.П. Пулатова // Фармация.-1968.-№1.- С.69-70.

57. Пупыкина, К.А. Изучение возможности использования пряно-ароматических и эфирномасличных растений для экопротективной помощи населению / К.А. Пупыкина, Н.В. Кудашкина / Вестн. ВГУ.-2009.- №6.- С.499-502.

58. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Hippuridaceae Lobeliaceae.- СПб.: Наука, 1991.- С.72-83.

59. Руководство по экспериментальному (доклиническому изучению) новых фармакологических веществ / под. ред. В.П. Фисенко. М.: ИИА Ремедиум, 2000. - С. 234-241. (101)

60. Салмус: 42-1530-85 врем, фармакоп. ст..- М., 1985.- 2с.

61. Самылина, И.А. Современное состояние и перспективы стандартизации лекарственного растительного сырья / И.А. Самылина, В.А. Ермакова // Мед.-фармац. вестн.- 1996.- №6.- С. 19-22.

62. Санитарные правила и нормы Сан ПиН 2.3.2. 1778-01 Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов.- М.: Изд-во ФГУР Интрсэн; Изд-во Континент Торг, 2002.- 164с.

63. Сернов, JI.H. Элементы, экспериментальной фармакологии / JT.H. Сернов, В.В. Гацура.- М., 2000.- 352с.

64. Справочник биохимика /Р. Досон и др..-М.: Мир, 1991.- 554с.

65. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов: Полисахариды / Б.Н. Степаненко.- М.: Высш. шк., 1978,- 256с.

66. Танасиенко, Ф.С. Эфирные масла. Содержание и состав в растениях / Ф.С. Танасиенко.- Киев: Наук, думка, 1985.- С.89-122.

67. Травянистые растения СССР / под ред. Т.А. Работнова. М.: Мысль, 1971.-Т. 2.-С. 136-156.(45)

68. Турова, А.Д. Лекарственные растения СССР и их применение / А.Д. Турова, Э.Н. Сапожникова 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1982.-С. 227-237.

69. Уанкпо, Б.Б. Эфирномасличное лекарственное- растительное сырье и современные подходы к методам его стандартизации / Б.Б. Уанкпо,

70. Е.И. Саканян, А.О. Карасавиди // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 7 Междунар. съезда Фитофарм 3-5 июля. 2003 г.- Спб., 2003.- С.104-107.

71. Фотохимическое изучение шалфея пустынного, произрастающего в Алма-Атинской области / А.Г. Мухамедгалиев и др. // Съезд фармацевтов КазССР (3; 1987; Кустанай): материалы.- Кустанай, 1987.- С.346-347.

72. Флавоны некоторых видов Salvia / Л.П. Смирнова и др. // Химия природ, соединений.- 1976.-№5.- С.668-669.

73. Халматов, Х.Х. Диуретическое действие флавоноидов, выделенных из некоторых растений флоры Узбекистана / Х.Х Халматов // Симпоз. по фенольным соединениям (2; 1970; Алма-Ата): тез.докл.- Алма-Ата, 1970,- С.139.

74. Халматов, Х.Х. Растения флоры Узбекистана, обладающие диуретическим действием / Х.Х. Халматов // Раст. ресурсы.- 1973.- Т.9, вып. 2.- С. 161-167.

75. Ходжиматов, К.Х. Исследование шалфея мускатного и, шалфея пустынного в УзССР / К.Х. Ходжиматов // Актуальные проблемы изучения эфирномасличных растений и эфирных масел.- Кишинев, 1970.- С.68-70.

76. Химический анализ лекарственных растений / под ред. Н.И. Гринкевич, Л.И. Сафронич.- М.: Высш. шк., 1984.- 176с.

77. Химия углеводов / Н.К. Кочетков и др..- М.: Химия, 1967.- 672с.

78. Цыганкова, Е.А. Фитохимическое изучение шалфея мускатного и перспективы его применения в медицине / Е.А. Цыганкова // Аптека 2007: тез. докл.- М., 2007.- С. 158-159.

79. Шевченко, C.B. Некоторые данные о составе эфирного масла Salvia sclarea L. / C.B. Шевченко, Л.И. Тихомирова // Раст. ресурсы.- 1973.- Т.9. вып. 3.- С.391—395.

80. Шевченко, C.B. Сезонная и суточная динамика содержания эфирного масла у Salvia sclarea L. / C.B. Шевченко // Раст. ресурсы.- 1973.- Т.9, вып. 4.- С.566-570.

81. Шевченко, C.B. Морфологические особенности Salvia sclarea L., произрастающего в Крыму / C.B. Шевченко // Раст. ресурсы.- 1974.- Т.10, вып. 4.- С.594-598.

82. Шепель, Д.Ф. Изучение состава препарата «Салмус» / Д.Ф. Шепель // Хим.-фармац. журн.- 2005.- Т.39, №8.- С.33-36.

83. Шешегова, Е.В. Фармакогностическое и фармакологическое изучение надземной части шалфея сухостепного Salvia tesquicola Klok. et Pobed: автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / Шешегова Е.В. Спб., 2004.- 26с.

84. Шешегова, Е.В. Флавоноиды надземной части шалфея сухостепного Salvia tesquicola Klok. et Pobed / Е.В. Шешегова, Л.С. Теслов // Раст. ресурсы.- 2004.- Т.40, вып. 1.- С.57-61.

85. Шутова, А.Г. Оценка антиоксидантной активности экстрактов и эфирных масел пряно-ароматических и лекарственных растений / А.Г. Шутова // Раст. ресурсы.- 2007.- Т.43, вып. 1.- С.112-125.

86. Эфирные масла из соцветий и листьев Salvia sclarea L., произрастающего на юге Узбекистана» / Х.К. Джумаев и др. // Раст. ресурсы.- 1989.- Т.25, вып. 3.- С.410-415.' . . .153;- . ' • :: •

87. Antibacterial and- cytotoxic activity of the acetone extract of the flowers of Salvia sclarea and some natural'products / E. Hayet et al., // Pak. J. Phann. Sen- 2007,- Vol.20, №2.- P. 146-148:.

88. Antioxidant activity of leaves of Salvia*; species; in enzyme-dependent and: enzyme-independent systems? of lipids peroxidation, and' their* phenolic constituents / I;-Zupko;et al!;. 7/ Planta Medi- 2001- VoR67.- P366--368;

89. Brieskorn, C.H. Salbei seine inhaltsstoffe und sein therapeutischer wert / C.H. Brieskorn // Z1 Phytotlier.- 199 №1»2 P:61—69.

90. Capek, P. Water-soluble polysaccharides from Salvia officinalis L. possessing immunomodulatory activity / P. Capek, V. Hribalova // Phytochem:-2004.-Vol.65, №13.-P11983-1992.

91. Clary sage oil // European pharmacopoeia. Monographs: Medicinal and pharmaceutical substances.- London, 2007.- Vol.VI.- 3 p;

92. Chemical composition and; antifungal activity of Salvia sclarea (Lamiaccac) essential oil / A. Dzamic et al. // Arch. Biol. Sci., Belgrade. -2008:- Vol-60,' №21- P:233-237.

93. Composition and antifungal activity on Soil-Borne pathogens of the essential oil of Salvia sclarea from Greece / D. Pitarokili et al. // J. Agric. Food Chem.- 2002.- Vol.50, №23.- P.6688-6691.

94. Composition and antifungal activity of essential oil of Salvia sclarea > from Italy / D. Fraternale et al. // Химия природ, соединений.- 2005.-№5.- C.495-496.

95. Composition of the essential oils from the flowers and leaves of Salvia sclarea L. (Lamiaceae) cultivated in Slovac Republic / P. Farkas et al. // J. Essent. Oil Res.- 2005.- Vol.17, №2.- P.141-144.

96. Constituents of sage (Salvia officinalis) with in vitro affinity to human brain benzodiazepine receptor / D. Kavvadias et al. // Planta Med.- 2003.-Vol.69, №2.- Р.Г13—117.

97. Cromatographic (GC-MS, HPLC) and virological evaluations of Salvia sclarea infected by BBWV-I/ M. Hudaib et al. // Farmaco.-2001.-Vol.56,№3.-P.219-227

98. Determination of major phenolic acids, phenolic diterpenes and triterpenes in Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) by gas chromatography and mass spectrometry / M.I Razborsek et al. // Acta. Chim. Slov.- 2007.-Vol.54.- P.60-67.

99. Dorman, M.J. Antioxidant properties of aqueous extracts from selected Lamiaceae species grown in Turkey / MJ. Dorman, O. Bachmayer // J. Agric. and Food Chem.- 2004.- Vol.52, №4.- P.762-770.

100. Evalution of sage phenolics for their antileishmanial activity and modulatory effects on interleukin-6, interferon and tumour necrosis factor-a-release in RAW 264.7 cells / O.A. Radtke et al. // Z. Naturforsch.- 2003.-Vol.58.- P.395-400.

101. Evalution of the antioxidant and antimicrobial activities of clary sage (Salvia sclarea L.) /1. Gulpn et al. // Turk. J. Agric. For.- 2004.- №28. P. 25-33.

102. Extraction of flavonoids from garden (Salvia officinalis L.) and glutinous (Salvia*glutinosa L.) sage by ultrasonic and classical maceration / D.T. Velickovic et al. // J. Serb. Chem. Soc.- 2007.- Vol.72, №1.- P.73-78.

103. Karakaya, S. Quercetin, luteolin, apigenin and kaempferoh contents of some foods / S. Karakaya, S. Nehir // Food Chem.- 1999.- Vol.66, №3.- P. 289-292.

104. Lu, Y. Rosmarinic acid derivatives from Salvia officinalis / Y. Lu, L.Y. Foo // Phytochem.- 1999.- Vol.51, №1.- P.91-94.

105. Lu, Y Sagecoumarin, a novel caffeic acid trimer from Salvia officinalis / Y. Lu, L.Y Foo, H. Wong // Phytochem.- 1999.- Vol.52, №6.- P. 1149-1152.

106. Lu, Y. Flavonoid and phenolic glycosides from Salvia officinalis / Y. Lu, L.Y. Foo // Phytochem.- 2000.- Vol.55, №3.- P.263-267.

107. Lu, Y. Salvianolic acid L, a potent phenolic antioxidant from Salvia officinalis / Y. Lu, L.Y. Foo // Tetrahedron Letters.- 2001.- Vol.42, №46.-P. 8223-8225.

108. Moretti, M.D.L. A study of antiinflammatory and peripheral analgesic actions of Salvia sclarea oil and its main constituents / M.D.L. Moretti, A.T. Peana, M.A. Satta // J. Essent. Res.-1997.-№9.- P. 199-204.

109. Peana, A.T. Chemical composition and antimicrobial action of the essential oils of S.desoleana and S.sclarea / A.T. Peana, M.D.L. Moretti, C. Juliano // Planta med.- 1999.- №65.- P. 752-754.

110. Peana, A.T. Pharmacological activities and applications of Salvia sclarea and Salvia desoleana essential oils / A.T. Peana, M. Moretti / Studies in natural product chemistry.- 2002.- Vol.26, №7.- P.391-423.

111. Salvia for dementia therapy: review of pharmacological activity and pilot tolerability clinical trial / N. Perry et al. // Pharmacology Biochem. and Behavior.- 2003.- Vol.75, №3.- P.651-659.

112. Salvipisone and aethiopinone from Salvia sclarea hairy roots modulate staphylococcal antibiotic resistance and express antibiofilm activity / E. Walencka et al. // Planta Med.- 2007.- Vol.73, №6.- P.545-551.

113. Stanassova-Shopova, S. Experimental studies on certain effects of the essential oil of Salvia sclarea L. on the central nervous system / S. Stanassova-Shopova, S. Roussinov // Izv. Ins. Fiziol (Sofia).- 1970.-№13.- P. 89-95.

114. Terpenoids from Salvia sclarea / A. Ulubelen et al. // Phytochem.-1994.- Vol.36, №4,- P.971—974.

115. The flavone hispidulin, a benzodiazepine receptor ligand with positive allosteric properties, traverses the blood-brain barrier and exhibits anticonvulsive effects / D. Kavvadias // British J. of Pharmacology.- 2004,-Vol.142, №5.- P.811-820.

116. Tomas-Barberan, F.A. Flavonoid aglycones from the leaf surfaces of some Labiatae / F.A. Tomas-Barberan, E. Wollenweber // Phytochem.-2002.- Vol.59, №2.- P. 117-140.

117. Ulubelen, A. Flavonoids and terpenoids from Salvia verticillata and Salvia pinnata / A. Ulubelen, G. Topcu // Lloydia.- 1984.- Vol. 47, №6.-P.1068.

118. Ulubelen, A. Diterpenoids from the roots of Salvia sclarea / A. Ulubelen, U. Sonmez, G. Topcu // Phytochem.- 1997.- Vol.44, №7.-P. 1297-1299.

119. Validation of analytical procedures: methodology Q2B / Intern. Conf. on harmonization of technical requirements for registration of pharmaceutical for human use.- Geneva: ICH Secretariat, 1996.- 8p.

120. Wollenweber, E. Flavones and flavonols in exudates of Salvia glutinosa / E. Wollenweber // Phytochem.- 1974.- Vol.13, №4.- P.753.