Фармакогностическое изучение травы сабельника болотного тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук малюк, Екатерина Валерьевна

• малюк, Екатерина Валерьевна
• кандидат фармацевтических наук
• 0

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук малюк, Екатерина Валерьевна

ГЛАВА Г. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Ботаническая характеристика и географическое распространение Comarum

PALUSTRE L .'.!.

1.2. Изученность объекта исследования

1.2.1. Биологически активные вещества сабельника болотного.

1.2.2. Примениние видов рода Comarum L. в традиционной и научной медицине

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Выделение биологически активных веществ травы сабельника болотного

2.2 Физико-химические методы анализа.

2.2.1 .Хроматографические методы.

2.2.2. Атомно-абсорбционная спектрография.

2.2.3. Спектрофотометрия.

2.2.4. Титриметрия.

2.3. Технологические методы

2.3.1. Определение технологических характеристик сырья.

2.3.2. Оценка качества и определение микробиологической чистоты экстракта сабельника болотного жидкого (1:1)

2.4. Фармакологические методы.

2.4.1. Изучение острой токсичности.

2.4.2. Изучение противовоспалительной активности.

2.5. Методы стандартизации сырья.

ГЛАВА 3. ВЫДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ОСНОВНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ТРАВЫ САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО.

3.1 Изучение полифенольных соединений.

3.1.1.Выделение и идентификация полифенольных соединений травы сабельника болотного.

3.1.2. Количественное определение полифенольных соединений в траве сабельника болотного.:.

3.2.изучение тритерпеновых сапонинов.

3.2.1. Качественный анализ.!.

3.2.2. Количественное определение тритерпеновых сапонинов.

3.3. Изучение каротиноидов.

3.3.1. Качественный анализ.

3.3.2. Количественное определение каротиноидов.

3.4 Изучение полисахаридов травы сабельника болотного.

3.4.1. Качественный анализ полисахаридов.

3.5. Изучение макро- и микроэлементного состава травы сабельника болотного

3.6. Качественное и количественное определение органических кислот.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 3.

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА НОРМАТИВНОЙ ДОКУМЕНТАЦИИ НА ТРАВУ САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО.

4.1. Определение товароведческих показателей сырья.:.

4.2. Морфолого-анатомические исследования.

4.3. Микроскопический анализ.

4.4. Качественные реакции.

4.5. Хроматография.

4.6. Числовые показатели.

4.7. Изучение сроков годности сырья - травы сабельника болотного.

4.8. Микробиологическая чистота

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. ПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО ЭКСТРАКТА ЖИДКОГО.

5.1. Определение технологических характеристик сырья, используемого для изготовления экстракта.

5.2. Определение коэффициента съема готовой продукции.

5.3. Разработка технологической схемы получения сабельника болотного экстракта жидкого.

5.4. Оценка качества экстракта.

5.4. Сравнительный анализ сабельника болотного экстракта жидкого и настойки «Сабельник Эвалар».

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 5.:.

ГЛАВА 6. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСТРАКТА САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО ЖИДКОГО И СУММЫ ТРИТЕРПЕНОВЫХ САПОНИНОВ ИЗ ТРАВЫ САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО.

6.1 Определение острой токсичности исследование экстракта сабельника болотного жидкого и суммы тритерпеновых сапонинов из этого вида . 120 6.2. Изучение противовоспалительной активности экстракта сабельника болотного жидкого и суммы тритерпеновых сапонинов сабельника болотного.:.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 6.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое изучение травы сабельника болотного»

Актуальность проблемы. Одной из важных проблем современной медицины является лечение заболеваний опорно-двигательного аппарата. Несмотря на большие различия в причине возникновения (перенесенная инфекция, аутоиммунный конфликт, нарушения обмена мочевой кислоты и т.д.), заболевания суставов имеют в своей основе общие механизмы- развития. Основным патогенетическим механизмом в данном случае является воспаление, в результате которого наступает повреждение тканей суставов, выделение экссудата (воспалительной жидкости) и замещение поврежденных тканей рубцом. Чередование.этих процессов или одновременное их протекание и формирует клиническую картину болезни: заболевания суставов характеризуются болью, покраснением, отеком, повышением температуры- в области поражения, а также нарушением функции соответствующего сустава.

Поскольку, для этой группы заболеваний, боль является, основной причиной, заставляющей обратиться за медицинской помощью, то вполне* естественно, что группа нестероидных противовоспалительных препаратов является - одной из ведущих и успешно применяемых при лечении вышеуказанных заболеваний в сочетании: с глюкокортикостероидами и иммуномодуляторами. Однако их использование вызывает ряд негативных явлений, в том числе, вредное воздействие на желудочно-кишечный тракт, а одновременное, использование нескольких противовоспалительных нестероидных препаратов повышает риск сердечных заболеваний в 6 раз. Это следует принимать во внимание, учитывая тот факт, что заболевания опорно-двигательной системы наблюдаются в зрелом и пожилом возрасте, а применение противовоспалительных препаратов является длительным или постоянным.

В то же время; в ряде случаев при заболеваниях суставов могут оказаться эффективными растительные препараты. Для лечения заболеваний суставов выбирают растения, обладающие противовоспалительным, мочегонным (противоотеч-ным), регулирующим обменные процессы, обезболивающим, седативным, общеукрепляющим, десенсибилизирующим действием. Среди растений, применяемых при заболеваниях этих нозологических групп, в традиционной медицине и в виде биологически» активных добавок к пище широко применяется сабельник болотный -! Comarum palustre Е., сем; Rosaceae. Преимуществом» использования растительных препаратов является отсутствие серьезных побочных явлений, что позволяет применять их длительное время.

Однако ^широкое' использование: сабельника болотного сдерживается тем, что недостаточно данных по-фармакогностическому изучению и фармакологическому подтверждению эффективности препаратов из него. ,В частности, нет данных по со-'I держанию:основных- групп биологически активных соединений,, не изучены товароведческие показатели, сырья, не исследована противовоспалительная активность препаратов сабельника;

Поэтому фармакогностическое исследование травы сабельника болотного является актуальной темой фармацевтической науки и практики.

Цель работы

Щелью настоящих исследований являлось фармакогностическое изучение травы; сабельника болотного, разработка технологии и нормативной; документации на сырье и сабельника болотного экстракт жидкий;

Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Провести качественное и количественное определение основных групп биологически активных соединений травы сабельника болотного (БАС):

2. Выделите и идентифицировать индивидуальные соединения, содержащиеся в траве сабельника; болотного и определяющие его биологическую активность.

3. Установить основные морфолого-анатомические признаки и товароведческие показатели сырья. .

4. Разработать проект фармакопейной статьи на сырье (траву) сабельника болотного.

5. Разработать технологию сабельника болотного экстракта жидкого (1:1)'и t методы:его стандартизации; 6 ■ '

6. Изучить противовоспалительную активность сабельника болотного экстракта жидкого (1:1).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО Пятигорской государственной фармацевтической академии Росздрава (№ госрегистрации 01.200.213550) в рамках проблемы «Фармация» Ученого совета Министерства здравоохранения и социального развития РФ, секция №38.

Впервые установлен компонентный состав полифенольного комплекса травы сабельника болотного методом ВЭЖХ. С помощью этого метода выделено и идентифицировано 15 компонентов, 9 из которых идентифицированы для исследуемого вида впервые: флавоноиды - гесперидин, лютеолин-7-гликозид, робинин, виценин, дигидрокверцетин, гиперозид; оксикоричные кислоты - цикоревая, кофейная; кума-рины - умбеллиферон. Преобладающими компонентами являются: апигенин, дигидрокверцетин, робинин и рутин.

Установлено, что тритерпеновые сапонины травы сабельника болотного представлены 4 гликозидами, агликоном которых является олеаноловая кислота, которая также присутствует в растении в свободной форме. Методом ВЭЖХ доказано, что агликоном тритерпеновых сапонинов травы сабельника болотного является олеаноловая кислота.

Впервые проведена количественная оценка содержания в траве сабельника болотного фенолкарбоновых кислот, тритерпеновых сапонинов, кумаринов. Изучен моносахаридный состав полисахаридов травы сабельника болотного.

Разработаны основные показатели, определяющие качество сырья. Предложены критерии оценки качества и идентификации сырья по его основным морфологическим и анатомическим признакам. Проведена валидация предлагаемых методик качественного и количественного анализа сырья по показателям «специфичность», «линейность», «правильность», «предел обнаружения», «отсутствие систематической ошибки».

Впервые разработана технологическая схема получения сабельника болотного экстракта жидкого (1:1). Разработаны методики количественного определения основных групп биологически активных веществ.

Установлена специфическая фармакологическая активность сабельника болотного экстракта жидкого (1:1), подтвердившая его противовоспалительное действие.

Практическая значимость результатов исследования.

Установлены характерные диагностические признаки сырья (травы) сабельника болотного.

Проведена стандартизация травы сабельника болотного с учетом современных требований, предъявляемых к качеству лекарственного растительного сырья.

Обоснована целесообразность применения травы сабельника болотного для получения сабельника болотного экстракта жидкого (1:1) и. его дальнейшего изучения с целью внедрения его в медицинскую практику в качестве противовоспалительного средства.

Внедрение результатов исследования.

Проект ФС «Сабельника болотного трава - Comari palustris herba» принят на экспертизу в Институт стандартизации и контроля лекарственных средств Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (письмо №5273 от 27.12.06) для рассмотрения и утверждения.

Получены акты апробации технологии и методов анализа сабельника болотного экстракта жидкого (1:1) на базе экспериментального участка фитоцеха ФГУП «Пятигорская фармацевтическая фабрика» от 29.05.2006 г. Положения, выдвигаемые на защиту.

1. Результаты изучения химического состава травы сабельника болотного методами ТСХ, ВЭЖХ, БХ и препаративной хроматографии.

2. Данные качественного и количественного анализа основных групп биологическа активных соединений сырья (травы) сабельника болотного.

3. Выявленные характерные морфолого-анатомические диагностические признаки сырья (травы) сабельника болотного.

4. Основные положения стандартизации сырья (травы) сабельника болотного, сабельника болотного экстракта жидкого и настойки «Сабельник Эвалар».

5. Результаты изучения фармакологической активности суммы тритерпеновых сапонинов и сабельника болотного экстракта жидкого (1:1).

Апробация работы и публикации.

Основные положения диссертационной работы апробированы на межрегиональной конференции по фармации и фармакологии (г. Пятигорск, 2003, 2004, 2005 гг.).

Объём и структура диссертации.

Работа изложена на 153 страницах машинописного текста, содержит 45 таблицу, 29 рисунков и 20 расчётных формул. Состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 150 источников, в том числе 11 иностранных и приложения.

СОКРАЩЕНИЯ

Б АД - биологически активная добавка

БАС - биологически активные соединения

БХ - бумажная хроматография

ВРПС - водорастворимые полисахариды

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ГК - глюкокортикоиды

ГЦ - гемицеллюлоза

НПВС - нестероидные противовоспалительные средства

ПВ - пектиновые вещества

РА - ревматоидный артрит

РСО - рабочий стандартный образец

ТСХ - хроматография в тонком слое сорбента

ФС - фармакопейная статья

Б - г. Бийск, Алтайского края;

БЧ - Бакчарский район;

Т - Томск,

А - Алтайский район

Кор» - коричневая окраска зоны адсорбции;

Красно - кор» - красно-коричневая окраска зоны адсорбции;

Ж» - желтая окраска зоны адсорбции;

Г» - голубая окраска зоны адсорбции;

Син» - синяя окраска зоны адсорбции;

Син-Ф» - сине-фиолетовая окраска зоны адсорбции;

Ярко-г» - ярко-голубая окраска зоны адсорбции;

Светло-г» - светло- голубая окраска зоны адсорбции;

Зел-г» - зеленовато-голубая окраска зоны адсорбции;

Ж-Зел» - жёлто-зелёная окраска зоны адсорбции.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», малюк, Екатерина Валерьевна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Впервые установлено присутствие в траве: сабельника болотного:, флавоноидов: гесперидина, лютеолин-7-гликозида, робинина, виценина, дигидрокверце-тина, гиперозида; фенолкарбоновых кислот::цикоревой кислоты; кумаринов: умбёл-лиферона; органических кислот: лимонной, щавелевой и винной:

2: Выделены и идентифицированы на основании изучения;физико-химических I и спектральных характеристик кверцетин,. кемпферол (флавоноиды); кофейная? кислота (оксикоричные кислоты); олеаноловаяжислота (тритерпеновые сапонины):

3. Установлено количественное содержание.в сырье (траве) сабельника болот-f ного дубильных веществ (11.9 - 14.7%); оксикоричных кислот (0.391 - 0.459%); флавоноидов (0:51, - 0.59%); кумаринов (0:57 - 0:67 %) тритерпеновых сапонинов^

0.98 - 1.01%); каротиноидов (11.3 - 12.5мг%); свободных органических кислот (2.51 - 3.54%); полисахаридов (0.14%). | 4. Изучен аминокислотный состав растения. Главными компонентами являюте ся аспарагиновая, глютаминовая кислоты и лейцин; Bi траве: сабельника болотного^ обнаружено 28 микроэлементов; доминирующие из которых К, Са, Mg, Na, Fe, Р,

Mn.

5; Определены^ основные морфолого-анатомические признаки сырья; позволяющие достоверно ^идентифицировать сырье - травусабельника болотного.

6. Подобраны оптимальные: условия получения? экстракта травы сабельника» болотного жидкого (1:1), определены технологические показатели сырья. Установлены показатели-качества экстракта. $

7. Проведен сравнительный анализ экстракта жидкого сабельника болотного и : настойки «Сабельник Эвалар» по содержанию флавоноидов,. тритерпеновых сапонинов, дубильных веществ и свободных органических, кислот.

8. Установлена противовоспалительная активность сабельника болотного экстракта жидкого и суммы тритерпеновых сапонинов, выделенных из травы сабельни-, ка болотного на крысах на модели адъювантного артрита. Сабельника болотного экстракт жидкий оказал достоверно значимое противовоспалительное действие, превышающее в 2,4 раза эффект настойки^ «Сабельник; Эвалар».

3 . 138

9. По классификации Ходжа и Стернера сабельника болотного экстракт жидкий и сумма тритерпеновых сапонинов этого растения относятся к веществам VI класса токсичности и являются безопасными для здоровья человека. Для сабельника болотного экстракта жидкого острая токсичность составила 28846,15 мг/кг; для суммы тритерпеновых сапонинов, выделенных из травы сабельника болотного — более 40000 мг/кг.

10. Разработана ФС «Сабельника болотного трава — Comari palustris herba» в соответствии с требованиями ОСТа 91500.05-001-00.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук малюк, Екатерина Валерьевна, 0 год

1. Азимова, М. А. Тритерпеновые гликозиды и их генины /М. А.Азимова, М. А., Исаев // Химия природ. соединений — 2000; №6.- С. 503 - 504:

2. Алексеев, В.В. Диагностика и лечение, болей в пояснице / В.В. Алексеев // Consilium Medicum. 2002! - Т 4; №2. - С.96-102.

3. Алексеев, В:В: Лечение люмбоишиалгического синдрома / В.В: Алексеев// Рос. мед. журн. 2003. - T.l 1, №10. - С.602-604.

4. Аналитические исследования по изучению взаимодействия пектинов с металлами /В.А. Компанцева>и др:. // Известие вузов Сев. Кав. регионов. Техн. науки: 1993.- №1-2: - С. 63 -67.

5. Арифходжаев, А.О. Полисахариды сапониноносных растений / А.О. Ариф-ходжаев, Х.А. Арифходжаев, ЕС. Кондратенко // Химия природ, соединений. -1985:-№6.- С 5 7.

6. Арифходжаев, А.О. Глюканы высших растений / А.О. Арифходжаев // Химия природ, соединений 1997. -№.}. - С. 3-15.

7. Балицкий, К.П. Лекарственные растения и рак / Балицкий К.Щ Воронцова АЛ.-Киев: Наукова Думка, 1982. 376 с.

8. Бандюкова, В. А. Зависимость биологической активности флавоноидов от их строения / В. А. Бандюкова, Г. Н. Геращенко, A. JI. Шинкаренко // Актуальные вопросы фармации. Ставрополь, 1974. - Вып. 2 — С.338 - 341.

9. Бандюкова, В.А. О гликозидных структурах флавонов и флавонолов / В.А. Бандюкова, Э.Т. Аванесов // Химия природ, соединений. — 1972. — № 4. — С. 415425. :

10. Бандюкова, В. А. Применение цветных реакций для обнаружения флавоноидов путем хроматографии на бумаге / В. А. Бандюкова // Раст. ресурсы. 1965. -Т. 1, №4.-С. 591 -597.

11. Бандюкова, В.А. Перспективы использования полисахаридов в медицине и фармации / В.А. Бандюкова, Л.В. Лигай // Химико-фармацевтическое производство -М., 1997.-15с.

12. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды / В:А. Бандюкова// Раст. ресурсы 1983. - №3. - С. 263-273.

13. Бандюкова, В.А., Качественный анализ флавоноидов в растительном материале при помощи хроматографии на бумаге: метод, рекомендации / В.А. Бандюкова, А. Л. Шинкаренко Пятигорск, 1972.-С. 24.

14. Беликов, В.В. Реакции комплексообразования в анализе флавоноидных препаратов / В.В. Беликов, Т.В. Точкова, Н.Г. Колесник //Состояние и перспективы создания новых лекарственных средств и фитохим. препаратов: тез. докл. Харьков, 1990.-С. 146- 147.

15. Беликов, В.В. Спектрофотометрия комплексных соединений флавоноловых смесей / В.В. Беликов, Т.В. Точкова // Современные проблемы фарм. науки и практики: тез. докл. 11 съезда фармацевтов Укр ССР. Киев, 1972. - С. 572 - 575.

16. Белова, О.И. Изучение отдельных стадий экстракционного процесса при изготовлении жидких галеновых препаратов/ О. И. Белова // Сб. науч.тр. ДАНИИ. -М.: Медицина, 1964. Т. 2 - С.57-60.

17. Берштейн, И.Я. Спектрофотометрический анализ в органической химии / Берштейн И Я., Калинский Ю.Я. Л.: Химия, 1986. - 200 с.

18. Биохимия фенольных соединений / под ред. Дж. Харборна. — М.: Мир, 1968.-451 с.

19. Блажей; А. Фенольные соединения растительного происхождения / А. Блажей, J1. Шутый М.: Химия, 1977. - 236 с.

20. Бочков, А.Ф. Углеводы / А.Ф.Бочков, В.А.Афанасьев, Г.Е. Заиков М:: Наука, 1980.-176 с. ,

21. Выделение и анализ: природных биологически активных веществ / под ред. B.C. Сироткина Томск: Изд-во Томск, ун-та, 1987. - 565 с.

22. Гацура, В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ / В.В. Гацура М.: Медицина, 1974. - 148 с.

23. Государственная фармакопея-СССР: Выт 1. Общие методы анализа. / МЗ СССР. 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1987. - 334 с.

24. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие- методы анализа. Лекарственное растительное сырьё. / МЗ СССР. 11-е изд., доп. - Ml: Медицина, 1991.-397с.

25. Гребнёва, НЛО. Оценка качества корневищ- с корнями Polemonium caeruleum L. по содержанию суммы сапонинов / Н.Ю. Гребнёва, Н.П. Харитонова, М.П. Блинова // Раст. ресурсы. 1995. - Т.31, вып. 3.-С.111-115.

26. Грецкий, В.М. Руководство к практическим занятиям по технологии лекарственных форм / В.М.Грецкий, В: С.Хоменок — М.: Медицина, 2000. — 465 с.:

27. Гроссгейм, А.А. Флора Кавказа: В 10 т. / А.А. Гроссгейм- Баку: Аз. ОТД,, ЗАК. ФИЛ. АК. НАУК, 1934 Т. 4. - С. 304

28. Гэлли, Р.Л. Неотложная-ортопедия. Позвоночник: пер. с англ. / P. J1. Гэлли, Д: У. Спайт, Р. Р: Симон:.-,М»: Медицина, 1995. С. 376-418:

29. Давидянц, Э.С. Кумарины Ptarmica impatiens и Ptarmica plarmicifolia / Э.С. Давидянц // Химия природ, соединений 1983. - № 1. - G. 103.

30. Джапаридзе, Л.И. Практикум по микроскопической химии растений / Л.И. Джапаридзе.-М.: Сов. Наука, 1953. 151с.

31. Джонстон, Р. Руководство по масс-спектрометрии для химиков органиков: пер. с англ/Р. Джонстон.-М;: Мир, 1975. - 236 с.

32. Дубровкин, И.М Производная спектрофотометрия / В.Г. Беликов, И.М. Дубровкин.-Ростов: Изд-во ростовск. ун-та, 1988 G.16-18.

33. Запромётов, М.Н. Биохимия катехинов (биосинтез, превращения и практическое использование) / М.Н. Запромётов. М:: Наука, 1964: - 295 с.

34. Запромётов, М.Н. Основы биохиимии фенольных соединений / М.Н. Запромётов М.: Высш. шк., 1974. - 214 с.

35. Землинский, С.Е. Лекарственные растения СССР/ С.Е. Землинский— М.:Медгиз, 1958-С. 520-521.

36. Зенкевич, И.Г. Метод определения содержания гликозидов в суммарных экстрактах флавоноидов / И.Г. Зенкевич, В.М. Косман, С.П. Зиновьева// Раст. ресурсы. 1997. - Т. 32, №2 - С. 91 - 97.

37. Изменение №3 от 19.06.2003 г. к статье ГФ XI издания «Методы микробиологического контроля лекарственных средств» // Фармация. 2003. - №3. — С. 3 - 4.

38. Калашникова, Н.А. О противовоспалительной активности некоторых флавоноидов / HIA; Калашникова, Г.И. Геращенко // Актуальные вопросы, фармации^ Ставрополь, 19741 - Вып. 2.-С. 353 - 354.

39. Кардиопротекторное действие кверцетина / Ю.Н. Колчин и. др. // Фарг. макология и токсикология. 1991.-№6. -С. 20 - 23

40. Кемертелидзе, ЭЛ. Физико-химические методы анализа некоторых биологически активных веществ растительного происхождения / Э.П. Кемертелидзе, В.П. Георгиевский -Тбилиси: Мецниереба, 1976. 222 с.

41. Кирхнер, 10. Тонкослойная хроматография: пер. с англ.: в 2 т. / Ю. Кирх-нер -М;: Химия, 1981. Т.1.- 616 с; Т.2 - 535 с.

42. Клышев, Л.Л. Флавоноиды растений. Распространение, физико-химические свойства, методы исследования. / Л.Л". Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюкина. Алма-Ата: Наука Каз. ССР, 1978. - 220 с.

43. Ковалев, И.П. Исследование флавоноидных гликозидов. I. Моногликозиды / И.П. Ковалев, В.И. Литвиненко // Химия природ, соединений 1965. - №4. - С. 233 -241.

44. Количественное определение тритерпеновых сапонинов в пятикомпонент-ной композиции / Т.Г. Заркуа и др. // Современные аспекты изучения лекарственных растений: сб. науч. тр. ВНИИФ: М., 1995. -Т.34.-С.177-180.

45. Комисаренко, В.Н. Пектины их свойства и применение / В.Н. Комисса-ренко, С.Н. Спиридонов // Раст. ресурсы. - 1998. - Т. 34, №1.-С 111 - 118.

46. Косман, В.М; Информационное обеспеченте для идентификации феноль-ных соединений растительного происхождения / В.М. Косман, И.Г. Зинкевич // Раст. ресурсы. 1997. - №2. - С. 14 - 26,

47. Кузнецов, F.A. Природные кумарины и фурокумарины / Г. А. Кузнецов. -JI.: Наука, 1967.-248 с.

48. Куркин, В.А. Современные аспекты химической классификации биологически активных соединении лекарственных растений / В.А. Куркин // Фармация: — 2002.-№2.-С. 8-16.

49. Курочкин, Е.И. Лекарственные растения / Е.И. Курочкин — Самара: Парус, 1998-С. 242 243.

50. Кьосев' П.К!, Полный справочник лекарственных растений / П.К. Кьо-сев М.: ЭКСМО-Пресс, 2000. - С. 271 - 272.

51. Лекарственные растения дикорастущие / под ред. Гамерман А. Ф — Минск: Наука, 1968. С.281 -282. .

52. Ли гай, Л.В. Изучение углеводов Malva neglecta L. / Л.В. Лигай, Д. А. Рахимов, В;А. Бандюкова// Химия природ, соединений. 1989: — №2. - С. 280-281.

53. Люкшенкова, Е.Т. Фармакологическое изучение сабельника болотного / Е. Т. Люкшенкова, М. Георгиу, Э: А. Бурдыкина-Шехтер // Аптеч. дело. 1962. - Т. 32.-С. 34- 43.

54. Максютина, Н.П. Флавоноиды / Н.П. Максютина // Растительные лекарственные: средства Киев: Наука, 1985. - С.85-102.

55. Маркова, О.М. Использование оптических и хроматографических методов для стандартизации растительного сырья и лекарственных препаратов чабреца и тимьяна: автореф. дис . канд. фармац. наук:15.00.02 /О.М. Маркова-Пятигорск, 1979.-С. 23.

56. Методики идентификации различных пигментов и количественного спектрофотометрического определения суммарного содержания каротиноидов и белка в фитомассе SPIRULINA PLATENSIS (NORDS.) GEILT. / С.В. Первушкин и др. // Раст. ресурсы. Т. 38, №1 - С. 112-119.

57. Методы биохимического исследования растений / под ред. А.И. Ермакова. JI.: Агропромиздат, 1987. - 430 с.

58. Минаева, В.Г. Флавоноиды в онтогенезе растений и их практическое использование / В.Г. Минаева. Новосибирск, 1987. — 355 с.

59. Минеральный состав различных органов Comarum palustre / Н.П.'Хо-лопцева и др. // Раст. ресурсы. 1990. - Т. 26. №2. - С. 228 - 233.

60. Моисеева, Г.Ф. Иммуностимулирующие полисахариды высших растений / Г.Ф. Моисеева, В.Г. Беликов // Фармация. 1992. -№3. - С. 79 - 84.

61. Мусаева, Л.Д. Школа по флавоноидам / Л.Д. Мусаева, Г.П: Яковлев // Раст. ресурсы.- 1985. №2. - С. 249-250.

62. Насонов, Е.Л. Фармакотерапия ревматоидного артрита с позиций доказательной медицины: новые рекомендации / Е.Л. Насонов // Рос. мед. журн. 2004. -Т. 12, №5.-С. 28-35

63. Насонов, Е.Л. НПВП при ревматических заболеваниях: стандарт лечения / Е. Л. Насонов // Рос. мед. журн. 2001. - Т. 9, №7-8. - С.265-269

64. Насонов, Е.Л. Противовоспалительная терапия ревматических болезней / Е. Л. Насонов.-М.: М-СИТИ, 1996. -345с.

65. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / под ред. В.Л. Баги-ровой, В.А. Северцева. СПб.: Спецлит, 2001. - 223 с.

66. Наумчик, Г. Н. Исследование эфирного масла сабельника болотного / Г. Н.Наумчик, П. Е. Розенцвейг // Аптеч. дело 1963. - Т. 12, №5. - С. 24 - 27.

67. Наумчик, Г.Н.Изучение дубильных веществ Сабельника болотного (Comarum palustre) / Г.Н. Наумчик, П.Е. Розенцвейг // Аптеч. дело 1964. - Т. 12, №6. -С. 27-29.

68. Некоторые данные по изучению растений семейства розоцветных из флоры Западной Сибири / И.Д. Нешта и др. // Ресурсоведческое и фармакогноз-тическое изучение лекарственной флоры СССР: сб. науч. тр. М., 1987. - С. 412 -413.

69. Нешта, И.Д. Проблемы и некоторые результаты изучения лекарственной флоры центральной части Западносибирской равнины /И.Д. Нешта // Ресурсоведческое и фармакогнозтическое изучение лекарственной флоры СССР: сб. науч. тр. -М., 1987.- С. 20-25.

70. Норкулова, К.Т. Полидесперсность пектинов и некоторые физико-химические свойства их растворов 7 К.Т. Норкулова // Химия природ, соединений — 1998. №3.-С. 344-349.

71. Нохрина, Н.Э. Природа и свойства антикоагулянтов из сабельника болотного: автореф. дисканд. биол. наук: 15.00.00 / Н. Э. Нохрина. Уфа, 1993. —18с.

72. Обзор физико-химических методов стандартизации настоек, экстрактов и эликсиров в ведущих странах Европы и Америки /И.Г. Зенкевич и др. // Фармация. 2002. - №2. - С. 45 - 48.

73. ОФС 42-0013-03 Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб. М.: Изд-во стандартов, 2003.-21с.

74. Пектин. Производство и применение / под ред. Н. С. Карпович. Киев: Урожай, 1988.-85 с.

75. Пектин. Тенденция научных и прикладных исследований / И. Л. Новосельская и др. // Химия природ, соединений. 2000. - №1. - С. 3-11.

76. Перспективы создания лекарственных форм с использованием пектина / А. Л. Казаков и и др. //Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (51; 1996; Пятигорск).-Пятигорск, 1996. С. 29.

77. Пиняжко, P.M. Методы УФ-спектрофотометрии в фармацевтическом анализе / P.M. Пиняжко, Т.Г. Каленюк Киев: Из-во Здоров'я, 1976. - С. 3 - 16.

78. Почему растения лечат / Ловкова М.Я. и др. М.: Наука, 1989. - 256 с.

79. Правила сбора и сушки лекарственных растений (Сб. инструкций). — М.: Медицина, 1985.-328 с.93: Применение, мидокалма при купировании вертеброгенных болевых синдромов / Г. И. Авакян и др.7/ Журн. неврологии и психиатрии 2000. — № 5. - С. 26-31.

80. Прохазка, Ж. Фенолы и ароматические кислоты. Хроматография на бумаге /Ж. Прохазка-М.: Иностр. лит., 1962.-329 с. .

81. Пшуков, Ю.Г. Проблема стандартизации жидких экстрактов и настоек / Ю. Г. Пшуков// Регион, конф. по фармации и фармакологии: (47; 1992; Пятигорск): материалы:. Пятигорск, 1992. — С. 24

82. Пшуков, Ю.Г. Инженерные методы расчета промышленных способов экстрагирования: методические рекомендации / Ю.Г. Пшуков Пятигорск, 1996.-30 с.

83. Разработка методик количественного определения флавоноидов в растительном: материале / В. А. Бандюкова и др. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров: (52; 1997; Пятигорск): материалы. — Пятигорск, 1997. -С. 68 69.

84. Растительные дубильные вещества / LLLIO. Исламбеков и др. // Химия природ, соединений. 1990. - № 3. - С. 293 - 307.

85. Растительные лекарственные средства / под ред. Н.П. Максютина. Киев,1985.-270 с.

86. Руководство по экспериментальному, (доклиническому) изучению новых, фармакологических веществ / под ред. В.П. Фисенко. М.: Медицина, 2000. - 364 с.

87. Румшиский, JI.3. Математическая обработка результатов эксперимента / JI.3. Румшиский -М.: Наука,1971.- 192 с.

88. Рыбачук, И:3. Фармакогнозия / И.З. Рыбачук; М.А.Кузнецова М:: Медицина, 1984. - 350 с.i

89. Самылина, И.А. Современное состояние и перспективы стандартизации ' лекарственного растительного сырья / И.А. Самылина, В:А. Ермакова- // Мед.- \ фармац. вести. 1996.-№6.- С. 19-22.1. Г.1' f

90. Сернов, Л.Н; Элементы экспериментальной фармакологии / Л.Н. Сернов, В.В. Гацура М.: Медицина, 2000. - 352 с.

91. Сигидин, Я.А. Ревматоидный артрит / Я. А: Сигидин, Г. В. Лукина. М.: АНКО,2001. - 328с. ' .110; Сидоров, К.К. Методы определения острой токсичности и опасности хи-т мических веществ. (Токсикология) / К.К. Сидоров. М.: Медицина, 1970: -171с. .

92. Симонян, А. В. Использование цианидиновой реакции в анализе флавоноидов / А.В. Симонян, Э.Т. Оганесян: // Современные проблемы фарм. науки и практики: тез. докл. 11 съезда фармацевтов.Укр ССР. Киев, 1972. - С. 795 — 796;

93. Смирнова, Л.П. Количественное определение суммы флавоноидов^ в цветках бессмертника песчаного / Л.П. Смирнова, Л.Н. Первых // Хим-фармац. журн. 1998.-№6.-С. 35-38.

94. Спектральный:анализ чистых веществ 7 под ред. Н. Т. Зильберштейн. -. Л.: Химия, 1971.-460 с.

95. Спектрофотометрический метод количественной оценки содержания, полифенолов в сухом экстракте из надземной части Melilotus officinalis. / И. И. Че-месовам и др. // Раст. ресурсы. Т. 36, №1. - С. 86 - 91.

96. Справочник.биохимика / Р. Досон и др.. М.: Мир, 1991.-554 с.

97. Тахтаджян, А.А. Система и филогения цветковых растений / А.А. Тах-таджян. М.; Наука, 1966. - С. 51.

98. Тутаюк, В.Х. Анатомия и морфология растений / В.Х. Тутаюк.- М.: Высш. 1ИК, 1980.-317 с.

99. Установление структуры органических соединений физическими и хиг мическими методами /под ред. М.И. Варшавский. М.: Химия, 1967. - 650 с.

100. Флора СССР / под ред. акад. B.J1. Комаров. М.: Изд-во АН СССР, 1941. - Т.10. - 350с.

101. Фурст, Г.Г. Методы анатомо-гистохимического исследования растительных тканей / Г. Г. Фурст. М.: Наука, 1986. - 392с.

102. Характер превращения олеаноловой кислоты в кислой среде / А.А. Савина и др:.// Химия природ, соединений. 1986. - №3. - С. 320-323.

103. Химический-:анализ лекарственных растений / под ред. 1LH. Гринкевич, JI.H. Сафронич. М.: Высш.шк., 1983. - 145 с.

104. Химия углеводов / Кочетков Н.К. и др. М.: Химия, 1967.-672 е.

105. Хроматография в тонких слоях / под ред. Э. Шталя М.: Химия, 1965508с.

106. Хроматография на бумаге / под ред. И.М. Хайса. М.: Изд-во иностр. лит-ры, 1962.-760 с.

107. Частичный кислотный гидролиз. Методы химии углеводов / под ред. Н;К. Кочеткова М: Мир, 1967. - 512 с.130; Черепанов, С.К. Сосудистые растения России и сопредельных государств / С.К. Черепанов СПб.: Мир и семья- 95, 1995. - 990 с.

108. Черепанов; С.К. Сосудистые растения СССР / С. К. Черепанов Ленинград: Наука; 1981.-780 с.

109. Шаршунова, М: Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии: в 2т. / М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалец М.: Мир, 1980. -2т.

110. Ширшов, А. В. Поясничный; остеохондроз: диагностика; клиника и лечение/ А. В. Ширшов // Рус. мед. журн. 2004. - Т. 12, №5. - С. 12 - 19.

111. Шталь, Э. Хроматография^ в тонких слоях: пер. с нем. / Э. Шталь М.: Мир, 1965.-508 с.

112. Эзау, К. Анатомия семенных растений: пер. с англ. / К.Эзау, А. Л.: Тах-таджян. М.: Мир, 1980. - 640с.

113. Юдина, В.Ф. Сезонная динамика продуктивности надземной фитомассьь и роста побегов Comarum palustre / В.Ф. Юдина; Т.Ю. Дьячкова, Т. И. Бразовская// Раст. ресурсы. 1994: - №3. - С. 43 -49

114. Chen; Н. Separation and determination of flavonoids and other phenolic compounds in cranberry juice by high-performance liquid chromatography/ H. Chen // J. Chromatogr. 2001 - Vol. 913, N6 - P. 387-395.

115. Daigle, D. J. Analysis of flavonoids by HPLC: An update / D. J. Daigle , E. J. Conkerton //J. Liq. Chromatogr. 1988.- Vol. 11, N2-P: 309-325.

116. Diagnostic blocks of: the lower back—A clinical- interpretation / J: M. Merry-man at al. // Techniques in regional anesthesia and pain management. 2000: — Vol.4, N4 - P. 109-119.

117. Glowniak, K. Solid-phase extraction and reverse-phase high-performance liquid chromatography of free phenolic acids in some Echinaceae species / K. Glowniak, G.Zgorka, M. Kozira // J. Chromatogr. 1996. - Vol. 730, N5 -. P. 25-29.

118. Mabry, T. J. / The Systematic Identification of Flavonoids/ Mabry T. J., Markham K. R. , Thomas iM. B. New York: Springer-Verlag, 1970.-P. 13-15.

119. Mannion, A. The role of paraspinal musle disfunction in low buck pain / A. Mannion // Rheumatology in Europe. 1999.-Vol. 28, №1. - P. 12-14.

120. Mense, S: Pathophysiology of low back pain and transition to the chronic state experimental data and new concepts / S. Mense // Schmerz. Der. - 2001. — Vol.15, N4 -P. 413-417.

121. Sacroiliac joint dysfunction in patients with imaging-proven lumbar disc herniation // R. Calm at al.J // European spine journal. 1998: - Vol.7, N2. - P.450-453.

122. Truchon, M. Biopsychosocial determinants of chronic disability and low-back pain: a review / M. Truchon // J: of occupational rehabilitation. — 2000. Vol. 10. -P. 117-142.