Апоптоз-модулирующие эффекты биназы в фагоцитирующих клетках тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат биологических наук Миронов, Владислав Алексеевич

• Миронов, Владислав Алексеевич
• кандидат биологических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Миронов, Владислав Алексеевич

СОДЕРЖАНИЕ стр.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Клеточная гибель

1.1.1. Формы гибели клетки

1.1.2. Апоптоз

1.1.3. Регуляция механизмов апоптотической гибели

1.1.4. Некроз

1.1.5. Роль липидов в программируемой клеточной гибели

1.1.6. Активные формы кислорода

1.1.7. Токсическое действие активных форм кислорода

1.1.8. Окислительный стресс и клеточная гибель

1.2. Фагоцитирующие клетки. Особенности функционирования

1.2.1. Защитная функция фагоцитирующих клеток

1.2.2. Моноциты/макрофаги

1.2.3. Гетерогенность моноцитов/макрофагов

1.2.4. Моноциты/макрофаги во врожденном иммунитете

1.2.5. Регуляция клеточной смерти и выживаемости

моноцитов и макрофагов

1.2.6. Гранулоциты

1.2.7. Модуляция апоптоза нейтрофилов

1.3. Биологическая активность экзогенных рибонуклеаз

1.3.1. Некоторые особенности биологического

действия экзогенных рибонуклеаз

1.3.2. Реализация цитотоксичности РНКаз

1.3.3. Олигомеризация как один из критериев цитотоксичности РНКаз

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Объект исследования

2.2. Биологические материалы

2.2.1. Выделение суспензии лейкоцитов периферической крови

2.2.2. Выделение перитонеальных макрофагов крысы

2.3. Проточная цитометрия

2.3.1. Подготовка клеточных проб для анализа апоптоза

2.3.2. Определение экспрессии фосфатидилсерина и

проницаемости цитоплазматической мембраны

2.3.3. Детекция АФК в тесте РЬа§оЬиг81®

2.4. Влияние биназы и Н2О2 на жизнеспособность,

апоптоз и некроз макрофагов

2.5. Оценка интенсивности реакций перекисного окисления липидов в макрофагах методом Бе -индуцированной хемилюминесценции

2.6. Исследование основного фазового перехода фосфолипидных

везикул БРРС методом ДСК

2.6.1. Приготовление образцов

2.6.2. Калориметрические измерения

2.7. Получение и характеристика химически "сшитого" димера биназы

2.7.1. Методика получения

2.7.2. Определение РНКазной активности

2.7.3. Распределение в двухфазной системе бутанол/вода

2.8. Влияние мономера и димера биназы на

апоптоз перитонеальных макрофагов крысы

2.9. Атомно-силовая микроскопия

2.10. Расчет феноменологических параметров

2.11. Статистическая обработка результатов

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Действие биназы на апоптоз субпопуляций лейкоцитов

крови человека

3.2. Действие биназы на апоптоз и некроз макрофагов крысы в модели пероксид-индуцированного окислительного стресса

3.3. Сравнение протекторного эффекта биназы в

мононуклеарных фагоцитах крысы и моноцитах человека

3.4. Оценка интенсивности реакций ПОЛ в макрофагах методом

Бе -индуцированной хемилюминесценции

3.5. Изучение взаимодействия фосфолипидных везикул с биназой методом ДСК

3.6. Влияние биназы на индукцию активных форм кислорода в гранулоцитах и моноцитах

3.7. Исследование влияния биназы на ФМА-индуцированный

апоптоз в гранулоцитах и моноцитах

3.8. Оценка апоптогенного эффекта мономера и димера биназы в перитонеальных макрофагах крысы

3.8.1. Свойства димера биназы

3.8.2. Влияние на апоптоз

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Избирательное действие биназы на спонтанный и пероксид-индуцированный апоптоз моноцитов

4.2. Протекторный эффект биназы в перитонеальных макрофагах крысы

4.3. Влияние биназы на свойства цитоплазматической мембраны

4.4. Гипотетическая модель протекторного и апоптоз-модулирующего эффектов биназы в мононуклеарных фагоцитах

4.5. Влияние биназы на индукцию АФК в гранулоцитах и моноцитах

4.6. Влияние биназы на ФМА-индуцированный апоптоз в гранулоцитах и моноцитах

4.7. Проапоптогенный эффект мономера и димера биназы в

перитонеальных макрофагах крысы

ВЫВОДЫ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

БЛАГОДАРНОСТИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

AIF - фактор индукции апоптоза Apaf - апоптоз-активирующий фактор

Bi-100 - РНКаза Bacillus intermedins в концентрации 100 мкг/мл Bi-200 - РНКаза Bacillus intermedins в концентрации 200 мкг/мл Bi-40 - РНКаза Bacillus intermedins в концентрации 40 мкг/мл Bi-400 - РНКаза Bacillus intermedins в концентрации 400 мкг/мл CSF-1 - колониестимулирующий фактор 1 DAG - диацилглицерол DD - домен смерти

DED - летально-эффекторные домены

DHR123 - дигидрородамин

DPPC - дипальмитоилфосфатидилхолин

ERK - внеклеточная сигнал-регулирующая киназа

FAD - флавинмононуклеотид

FADD - Fas-ассоциированный белок с летальным доменом

G-CSF - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор

GM-CSF - гранулоцитарно-моноцитарный колониестимулирующий фактор

ICAD - ингибитор каспаза-активированной ДНКазы

IP3 - инозитол-1,4,5-трифосфат

M-CSF - макрофагальный колониестимулирующий фактор

MHC-I - молекулы главного комплекса гистосовместимости I класса

МНС-II - молекулы главного комплекса гистосовместимости II класса

PI-3K - инозитол-фосфатидил-3-киназа

PIP2 - фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат

Rhl23 - родамин

RIP - рецептор-взаимодействующий белок TLR - То11-подобный рецептор

TRADD - TNF-рецептор ассоциированный белок с летальным доменом

ACM - атомно-силовой микроскоп

АТФ - аденозинтрифосфат

АФК - активные формы кислорода

БАС - биологически активные соединения

БТШ - белки теплового шока

ГГК - главный комплекс гистосовместимости

ДАГ - диацилглицерол

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ДСК - дифференциальная сканирующая калориметрия

ИЛ - интерлейкин

ЛПС - липополисахарид

МФ - макрофаг

ОАМ - опухоль-ассоциированные макрофаги

ПКС - протеинкиназа С

ПОЛ - перекисное окисление липидов

РНКаза - рибонуклеаза

COA - супероксид-анион

СОД - супероксиддисмутаза

ФМА - форболмиристатацетат

ФС - фосфатидилсерин

ЭПР - эндоплазматический ретикулум

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Апоптоз-модулирующие эффекты биназы в фагоцитирующих клетках»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. В течение последнего десятилетия регуляция и медикаментозный контроль апоптоза становятся областью пристального внимания биологов и клиницистов [Caputo et al.,2012; Scatena, 2012; Sreedhar et al.,2004]. Восстановление чувствительности клеток к индукции апоптоза имеет терапевтическое значение при неоплазиях, лимфопролиферации и аутоиммунных болезнях. Напротив, если ведущим компонентом патологического процесса является клеточная гибель (ишемия тканей, нейродегенерация, депрессия гемопоэза, ВИЧ-инфекция, ожоговая болезнь и др.), то патогенетически обосновано подавление апоптоза. Учитывая социальное значение апоптоз-зависимых заболеваний, поиск соединений с направленным воздействием на программированную клеточную гибель, является актуальной проблемой современной медико-биологической науки [Vasanth Raj et al., 2010; Penna et al., 2009; Yoshida et al., 2009; Chandrashekhar et al, 2001].

В настоящей работе исследуются апоптоз-модулирующие эффекты биназы в фагоцитирующих клетках. Фагоцитирующие клетки крови -гетерогенная популяция, опосредующая антиинфекционную резистентность в рамках естественного иммунитета (гранулоциты) и адаптивного иммунитета (процессинг и представление антигенов моноцитами) [Яргшгш, 2010]. Накоплено много данных об участии моноцитов и гранулоцитов в развитии соматических заболеваний, например, ишемической болезни сердца и атеросклероза, а также в формировании злокачественных новообразований [Granot et al., 2011., Garlichs et al., 2004; Libby et al., 2002]. При этом в ряде работ отмечается положительная или отрицательная корреляция апоптотической гибели фагоцитирующих клеток с течением заболевания [.Нестеренко, 2010; Sica et al., 2007]. Кроме того, фагоциты генерируют активные формы кислорода (АФК), и в случае нарушения своих функций становятся источником повреждения и гибели клеток [Morel et al., 1991]. В

8

связи с этим работы по изучению соединений, способных модулировать апоптоз и функциональную активность фагоцитов, считаются одними из приоритетных в области медицинской биологии.

Поиск регуляторов апоптоза имеет предпочтительные шансы на успех в тех группах веществ, представители которых обладают широким спектром биологических эффектов в различных тканях-мишенях. В этом аспекте заслуживают внимания рибонуклеазы. На сегодняшний день известен целый ряд эффектов этих ферментов (противовирусный, противоопухолевый, апоптогенный, иммуносупрессорный и другие), в связи с чем рибонуклеазы привлекают к себе внимание как потенциальные лекарственные средства нового поколения [Fang et al., 2011; Ardelt et al., 2009; Makarov et al., 2008; Edelweiss et al., 2008; Илытская и др., 2005; Spaletti-Cernia et al, 2004;].

Объект настоящего исследования - РНКаза Bacillus intermedius (биназа). Выбор биназы для изучения потенциальной апоптоз-модулирующей активности в клетках крови не случаен. Он обусловлен тем, что биназа принадлежит к одному из наиболее хорошо изученных микробных ферментов и обладает способностью избирательно подавлять рост некоторых линий онкотрансформированных клеток, переводя их на путь апоптоза. Молекулярные механизмы селективного апоптогенного действия биназы на опухолевые клетки интенсивно изучаются [Mitkevich et al., 2013; Кабрера Фуентес и др., 2010; Зелешаан и др., 2005]. Кроме того, биназа обладает комплексом биологических эффектов на клеточном уровне, «триггерные» механизмы которых локализованы в мембране клеток. К ним относятся: индукция пролиферации, стимуляция дифференцировки Т-лимфоцитов, метаболическая активация нейтрофилов и др. [.Куриненко, 1991]. Эти феномены не зависят от каталитической активности фермента. Несмотря на обилие экспериментальных работ, влияние биназы на апоптоз и функциональную активность фагоцитирующих клеток крови человека ex vivo не изучено.

Цель работы - анализ апоптоз-модулирующих эффектов биназы в фагоцитирующих клетках венозной крови человека и перитонеальных макрофагах крысы.

Задачи работы

1. Исследовать влияние биназы на развитие спонтанного и пероксид-индуцированного апоптоза в субпопуляциях лейкоцитов венозной крови человека.

2. Изучить действие биназы на апоптоз и некроз перитонеальных макрофагов крысы в условиях Н202-индуцированного окислительного стресса.

3. Оценить влияние биназы на интенсивность перекисного окисления липидов перитонеальных макрофагов крысы.

4. Охарактеризовать действие биназы на параметры основного фазового перехода DPPC гель-жидкий кристалл.

5. Исследовать влияние биназы на индукцию АФК и ФМА-индуцированный апоптоз в моноцитах и гранулоцитах крови человека.

6. Сравнить проапоптогенные эффекты мономера и химически «сшитого» димера биназы.

Научная новизна. Впервые установлено, что биназа избирательно модифицирует спонтанный и пероксид-индуцированный апоптоз моноцитов крови человека и не влияет на программированную клеточную гибель лимфоцитов и гранулоцитов. В условиях окислительного стресса биназа в зависимости от концентрации увеличивает жизнеспособность моноцитов и тормозит переход клеток из стадии раннего в стадию позднего апоптоза.

Впервые продемонстрировано, что биназа избирательно и дифференцированно действует на Е. coli- и ФМА-зависимый окислительный взрыв в гранулоцитах и не влияет на эти процессы в моноцитах.

Выявлен синергизм действия биназы с форболмиристатацетатом в гранулоцитах и моноцитах крови человека в модели ФМА-индуцированного апоптоза.

Дальнейшая идентификация молекулярных механизмов цитопротекторного и апоптоз-модулирующего эффектов биназы в мононуклеарных фагоцитах позволит приблизиться к пониманию избирательности действия биназы на клетки, в том числе и опухолевые, что будет способствовать разработке подходов к управлению программированной гибелью клеток.

Практическая значимость. Обнаруженные протекторный и апоптоз-модулирующий эффекты биназы в фагоцитирующих клетках открывают новые перспективы её применения и позволяют рассматривать биназу в качестве потенциального биофармацевтического модулятора апоптоза фагоцитов при воспалении, аутоиммунных заболеваниях и иммунодефицитах.

Полученный в работе химически «сшитый» димер биназы, сохраняющий до 50% удельной активности и обладающий более выраженным проапоптогенным действием на клетки по сравнению с мономером, представляет интерес как потенциальный противоопухолевый препарат.

Положения, выносимые на защиту

1. Биназа избирательно модулирует апоптоз и индукцию АФК в фагоцитирующих клетках периферической крови человека. Конечный эффект биназы зависит от субпопуляционной принадлежности клеток-мишеней, а также от природы используемых индукторов апоптоза и АФК.

2. Биназа проявляет протекторный и апоптоз-модулирующий эффекты в моноцитах человека в модели пероксид-индуцированного окислительного стресса.

3. Мембранотропность биназы - один из значимых факторов, определяющих механизмы ее цитопротекторного и апоптоз-модулирующего эффектов.

Апробация работы

Основные положения диссертации были доложены на «First Interuniversity Conference on Modern Biology» (Казань, 2008), «XIV International Conference "Microbial Enzymes in Biotechnology and Medicine» (Казань, 2009), XIV Международной научной школе «Когерентная оптика и оптическая спектроскопия» (Казань, 2010), Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2012» (Москва, 2012), Международной школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2012) а также на итоговых конференциях КФУ (2010-2012).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 4 статьи в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК.

1. Миронов В.А. Влияние биназы на индукцию активных форм кислорода в гранулоцитах и моноцитах венозной крови человека / В.А. Миронов, Ф.В. Ширшиков, Н.В. Калачева, Г.В. Черепнев // Фундаментальные исследования. - 2012. - Т.11, 4.4. - С. 855-857. (перечень ВАК) - автора - 0,2 пл

2. Миронов В.А. Влияние биназы на некроз и апоптоз макрофагов в модели оксидативного стресса / В.А. Миронов, A.B. Филиппов, Ф.В. Ширшиков, Г.В. Черепнев, Н.В. Калачева // Учен. зап. Казан, ун-та, Естеств. науки. - 2012. -Т. 154, кн.2. - С. 66-76. (перечень ВАК) - автора - 0,67 пл

3. Миронов В.А. Влияние биназы на форболмиристатацетат-индуцированный апоптоз в гранулоцитах и моноцитах венозной крови человека / В.А. Миронов, Ф.В. Ширшиков, Н.В. Калачева, Г.В. Черепнев // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2012. - Т.7, №3. - С. 108-111. (перечень ВАК) - автора - 0,24 пл

4. Миронов В.А. Избирательное действие биназы на апоптоз субпопуляций лейкоцитов крови человека / В.А. Миронов, Ф.В. Ширшиков, Н.В. Калачева, Г.В. Черепнев // Фундаментальные исследования. - 2012. - Т.9, 4.1. - С. 53-59. (перечень ВАК) - автора - 0,4 пл

5. Гоенко И.А. Атомно-силовая микроскопия в исследовании морфологии поверхности перитонеальных макрофагов при апотозе, вызванном рибонуклеазой Bacillus intermedius / И.А. Гоенко, O.A. Коновалова, В.А. Миронов, Н.В. Калачева // Сб.статей XIV Международной научной школы "Когерентная оптика и оптическая спектроскопия". - 2010. - С.49-52. - автора - 0,23 пл

6. Миронов В.А. Влияние биназы на некоз и апоптоз макрофагов в условиях экспериментального оксидативного стресса / В.А. Миронов, JI.A. Борисова // XIX Международная конференция студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2012». - 2012. - С. 173-174. - автора-0,12 пл

7. Миронов В.А. Избирательное влияние биназы на апоптоз субпопуляций лейкоцитов крови человека / В.А. Миронов, Л.А. Борисова, Г.В. Черепнев, Н.В. Калачева // Международная школа-конференция молодых ученых «Биология - наука XXI века». - 2012. - С. 431. - автора - 0,06 пл

8. Kalacheva N.V. Investigation of action of monomeric and dimeric Bacillus intermedius RNase on cytoplasmic membrane of macrophage in vitro / N.V. Kalacheva, I.R. Efimova, V.A. Mironov, O.A. Konovalova, G.V. Cherepnev, B.M. Kurinenko // Abstracts XIV International Conference "Microbial Enzymes in Biotechnology and Medicine". - 2009. - P. 86-87. - автора - 0,12 пл

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, изложения результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 132 страницах текста и содержит 5 таблиц и 20 рисунков.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. КЛЕТОЧНАЯ ГИБЕЛЬ

1.1.1. Формы гибели клетки

Изучение клеточной гибели является одной из стремительно развивающихся областей биологии. На протяжении всей жизни многоклеточного организма клеточная гибель играет решающую роль в его функционировании. Возникновение многих тяжелых заболеваний также часто бывает связано с нарушением контроля организмом над клеточной гибелью. Различают две основные формы клеточной гибели: некроз и программируемая гибель.

Некроз - это патологическая форма клеточной смерти, при которой происходит неспецифическое набухание клетки и ее органелл, завершающееся нарушением их целостности. В результате разрывов плазматической мембраны разрушаются органеллы, высвобождаются лизосомальные ферменты, происходит кариолиз ядра и выход содержимого цитоплазмы в межклеточное пространство [Проскуряков и др., 2002]. Некроз, происходящий в многоклеточном организме, сопровождается воспалительным ответом.

Программированная клеточная гибель или апоптоз - эволюционно консервативный механизм, необходимый для нормального развития. Программируемая клеточная гибель отличается от некроза главным образом тем, что в процессе апоптоза цитоплазматическая мембрана остается малопроницаемой, и фрагменты клетки поглощаются макрофагами. В таком случае не развивается генерализованный ответ организма в виде воспалительных реакций. Керр и соавторы [Kerr et al, 1972] назвали этот вид клеточной гибели апоптозом (греч. - осеннее опадание листьев). Клеточное постоянство регулируется генетическими программами организма, одна из

которых определяет интенсивность клеточного деления, другая - клеточную гибель [Скулачее, 1999].

Различают три типа программированной клеточной смерти: апоптоз, аутофагию и программированный некроз [Ogier Denis et al., 2003; Edinger et al., 2004]. Апоптоз в свою очередь также разделяют на внемитотический апоптоз клеток и митотическую катастрофу [Castedo et al., 2004; Roninson et al., 2001; Moreira et al, 2004].

Необходимо отметить, что процесс реализации одной программы на каком-то этапе может смениться другой. Так, например, начавшуюся аутофагию может заменить апоптоз, который затем завершится постапоптотическим некрозом. В связи с этим сложилось представление о существовании некой общей сети, связывающей разные события в клеточном цикле [Туег, 2004]. Очевидно, чем подробнее будут изучены точки переключения различных программ клеточной гибели, тем эффективнее будет выбор стратегии борьбы с патологиями, связанными с нарушением этих программ.

В настоящем разделе мы ограничиваемся рассмотрением общих вопросов регуляции апоптоза и некроза.

1.1.2. Апоптоз

Апоптоз состоит из нескольких этапов: 1) индукция; 2) активация про-апоптотических белков; 3) запуск каспаз; 4) деструкция внутриклеточных органелл; 5) фрагментация содержимого клетки на апоптотические тельца; 6) подготовка к поглощению МФ. Реализация апоптоза осуществляется с помощью различных органелл, но основные функции выполняются плазматической мембраной и митохондриями [Bras et al., 2005].

Первые два этапа (индукция апоптоза и активация проапоптотических белков) приводит к активации цистеиновых протеиназ (каскад каспаз). Каспазы расщепляют белки, участвующие в поддержании клеточного

гомеостаза. В итоге наблюдается разрушение цитоскелета, аппарата Гольджи и ДНК-ассоциированных белков [Wang et al, 2002].

На конечном этапе апоптоза происходит уплотнение цитоплазмы, фрагментация клеток на апоптотические тельца, на поверхности которых экспонируется фосфатидилсерин и другие сигнальные молекулы, способствующие поглощению данных телец макрофагами.

Наблюдаемые при апоптозе уплотнение и деформация наружной и внутриклеточных мембран, формирование устойчивых к действию детергентов мембран, сморщивание цитоплазматических гранул связывают с перекрестным сшиванием белков, обусловленным активацией Са -зависимой трансглутаминазы типа II. Эти изменения формируют характерный биохимический признак апоптоза [Fesns, 1991].

1.1.3. Регуляция механизмов апоптотической гибели

Апоптоз может быть запущен 2 основными путями: через рецепторы ('внешний' путь) или митохондриально-опосредованным механизмом ('внутренний' путь). Внешний путь вызывается связыванием лигандов "рецепторами смерти" клетки, принадлежащими к семейству рецепторов ФНО, CD95 или FasR [Ashkenazi et al, 1998]. Fas-рецепторы инициируют апоптоз через С-концевой внутриклеточный домен (так называемый death domen, DD) [Takemura et al, 1998]. Fas/APOl (CD95) индуцирует в клетке апоптоз после взаимодействия со своим лигандом (FasL). Семейство рецепторов Fas/APOl экспрессируется практически во всех типах тканей. Показано, что при некоторых онкологичеких заболеваниях функциональное состояние системы Fas/FasL изменяется в сторону усиления Fas-зависимого апоптоза [Atasoy et al, 2003]. Связывание Fas с FasL приводит к активации каспазы 8 и способствует инициации начальной стадии Fas индуцированного апоптоза, которая называется индукторной. Эффекторная фаза развития апоптоза обусловлена активацией каспазы 1 и является общей при многих способах индукции апоптоза. Каспаза 1 повышает проницаемость

16

митохондриальной мембраны, что сопровождается выделением в цитоплазму целого ряда апоптогенных факторов, в том числе цитохрома С. Эти факторы самостоятельно или в комплексе приводят к активации каспазы 3, что влечет за собой активацию дальнейшей цепочки каспаз и эндонуклеаз и заканчивается деградацией ДНК.

Наряду с активацией каспазы 8 образование комплекса FasR/FasL приводит к транслокации кислой сфингомиелиназы в область мембраны и образованию церамида. Последний способствует фосфорилированию антиапоптических белков семейства Ьс12. Церамид один из наиболее важных регуляторов апоптоза, - образуется в клетке в ответ на действие разнообразных факторов: TNF, активация Fas-рецептора, монооксид азота, и др. [Tepper et al., 2000]. Церамид активирует протеинкиназу С и фосфолипазу А. Это приводит к экспонированию на мембране молекул ФС, которые распознаются специальными рецепторами фагоцитов (белок Аннексии V), после чего апоптотические клетки ими поглощаются [Martin et al., 1995].

Распознание и последующая элиминация клеток, подвергающихся апоптозу, осуществляется благодаря появлению на их поверхности аннексинов специфических молекул кальций-зависимых фосфолипид-связующих белков. Эти белки в норме выполняют сигнальную функцию и экспрессируются только на внутренней поверхности цитоплазматической мембраны. Один из них - аннексии V - связывает протеинкиназу С, модулируя тем самым ее активность [Martin et al., 2012]. Кроме того, аннексии V, способен образовывать комплекс с прокоагулянтными фосфолипидами с высокой аффинностью, преимущественно с ФС, транслоцируя последний на клеточную поверхность [Fadok et al., 1992].

В качестве модуляторов апоптоза могут выступать интенсивно изучаемые То11-подобные рецепторы [Лавров и др., 2009; Гаиковская и др., 2010]. TLR - это класс клеточных рецепторов, которые распознают консервативные структуры микроорганизмов и активируют клетки естественного иммунитета, реализующие острый воспалительный ответ:

17

макрофаги, нейтрофилы, моноциты, дендритные клетки [Яршин, 2010]. В последнее время опубликовано много работ, свидетельствующих об участии TLR в клеточной гибели. Получен флагеллин-подобный полипептид, активирующий один из TLR рецепторов, "запрещая" клеткам, поврежденным радиацией, вступать в апоптоз [Burdelya et al, 2008]. Также показано, что бактериальные эндотоксины способны модулировать экспрессию TLR4 и TLR9 рецепторов в опухолевых клетках, снижая таким образом чувствительность последних к апоптотическим сигналам [Bilko, 2008]. Toll-подобные рецепторы интересны еще и тем, что могут проводить противоположные по действию сигналы. Так, бактериальный липополисахарид в результате взаимодействия с То11-подобными рецепторами не только подавляет, но и индуцирует апоптоз. Эрлихии и риккетсии через То11-подобные рецепторы в результате активации транскрипционного фактора NF-кВ могут останавливать апоптоз [Joshi et al., 2003].

Митохондриально-опосредованный запуск апоптоза (внутренний путь) начинается с того, что факторы, индуцирующие апоптоз, блокируют действие антиапоптозного белка Вс1-2, встроенного в мембрану митохондрий. Это способствуют открытию пор (каналов) в митохондриальной мембране и приводит к ее частичному повреждению, что, в свою очередь, обеспечивает выход в протоплазму цитохрома С и AIF. При этом снижается мембранный потенциал митохондрий. Цитохром С и AIF являются активаторами прокаспаз, которые инициируют завершающий механизм апоптоза через каскад эффекторных каспаз [Vempati et al., 2007].

Активация прокаспаз происходит, когда от прокаспазы отделяется регуляторный продомен (N-концевой домен). После этого молекула делится на две неравномерные субъединицы: малую (около 10 кДа) и большую (около 20 кДа). При взаимодействии их друг с другом образуется сначала гетеродимер и затем тетрамер, который имеет два каталитических участка [Chang et al„ 2000].

Контроль за выходом из митохондрий проапоптозных факторов осуществляет система белков семейства Ьс12, имеющих четыре гомологичных домена (ВН1-ВН4). Среди них выделяют белки с проапоптогенными (bax, bak, bad, bid и др.) и антиапоптогенными (bcl2, bclX, bclw) свойствами. Равновесие между этими белками определяет судьбу клетки [Кгоетег, 1997]. Деградация bel 2 приводит к выходу в цитоплазму цитохрома С, способствующего олигомеризации цитозольного белка -апоптоз-активирующего фактора (Apaf). Последний выполняет роль "арматуры", на которой происходит протеолитический процессинг каспазы 9 [Ferri et al., 2001].

В регуляции митохондриально зависимого апоптоза может принимать участие белок bid, активная форма которого (tbid), встраиваясь в мембрану митохондрий, также приводит к выходу цитохрома С [.Heibein et al, 2000].

Критический момент в реализации программы апоптоза - активация каспаз. Функционально каспазы разделены на 2 группы: провоспалительные и апоптотические. Провоспалительные каспазы включают каспазы 1, 4, 5, 11, 12, и 13. Роль каспазы-1 в воспалении чётко доказана. Каспаза-1, идентифицированная первоначально в моноцитах, ответственна за расщепление воспалительных цитокинов IL-1 и IL-18. У мышей, нокаутированных по каспазе-1, снижен воспалительный ответ при инфицировании бактериями. Провоспалительные каспазы собираются во временные мультипротеиновые комплексы 'инфламасомы1, образование которых сопровождает активацию каспаз. Инфламасомы и провоспалительные каспазы в моноцитах человека играют ведущую роль в патогенезе воспалительных болезней [Fahy et al., 2008].

Апоптотические каспазы делят на инициаторные (каспазы 1, 2, 8, 9 и

10) и эффекторные каспазы (каспазы 3, 6 и 7). Каспазы способны

активировать друг друга, образуя разветвленный протеолитический каскад.

На стадии активации инициирующих каспаз еще существует возможность

заблокировать апоптоз [Elmore, 2007]. Инициирующие каспазы стимулируют

19

эффекторные. Так, каспаза 8 активирует эффекторную каспазу 3. Каспаза 3 образуется из прокаспазы 3 в результате протеолиза. После этого процесс апоптоза становится необратимым. Каспаза-3 проникает в ядро и расщепляет ингибирующую субъединицу ICAD в двух местах. Либерация CAD приводит к расщеплению ДНК. В активации прокаспаз могут участвовать и некоторые другие вещества, например, цитохром С, содержащийся в митохондриях. В конечном итоге активные "казнящие" каспазы обеспечивают фрагментацию ядра и цитоплазмы клетки и распад клетки на апоптозные тельца. На ранних стадиях программируемой клеточной гибели защитить клетки от действия каспазы 3 способны катионы Zn" . Они блокируют переход прокаспазы 3 в активную форму фермента [Chai et al., 1999]. Инициаторные каспазы 1, 2, 4, 5 и 9 осуществлют белок-белковое взаимодействие через каспазный домен, расположенный на амино-конце. Каспазы 8 и 10 содержат летальные эффекторные домены (DED), участвующие в белок-белковых взаимодействиях. У эффекторных каспаз также есть короткий продомен.

Процесс клеточной гибели приводит к гидролизу регуляторных белков, в том числе ответственных за контроль клеточного цикла (р-21, р-27, pRb), и ламинов, которые армируют ядерную мембрану, что приводит к конденсации хроматина. Также происходит инактивация белков, участвующих в репарации и репликации ДНК и сплайсинге мРНК. В частности, апоптотическая гибель клетки сопровождается расщеплением каспазами фермента поли [ADP-рибоза] полимеразы (ПАРП), участвующего в репарации ДНК. С другой стороны, при наличии массовых разрывов ДНК избыточная активация ПАРП приводит к дефициту АТФ и переходу клетки на путь некротической гибели \Graziani et al., 2005].

Регуляция активности каспаз в клетке осуществляется разными путями.

Это может быть взаимодействие индуктора апоптоза со специальными

рецепторами. Например, взаимодействие Fas-лиганда с Fas-рецептором

приводит к активации каспазы 8. В другом случае при образовании белками

семейства Вс1-2 гетеродимеров может активироваться каспаза 9. Еще один

20

путь - активация каспаз с помощью гранзимов В (сериновые протеазы), секретируемых цитотоксическими Т-лимфоцитами [Elmore, 2007].

Апоптоз - генетически детерминированный процесс. Активность каспаз модифицируют белки генов семейства Вах (промоторы апоптоза: Bad, Bah, Вах и Mtd) и Вс1-2 (ингибиторы апоптоза: AI, Bcl-W, Bcl-XI) [Cohen et al., 1998]. Эти белки - важное звено в регуляции апоптоза. Они располагаются на мембране митохондрий и контролируют процессы пролиферации и апоптоза, регулируя проницаемость митохондриальных мембран и выход цитохрома С в цитозоль. Подобная регуляция осуществляется с помощью конкурентного связывания между собой проапоптозных и антиапоптозных белков семейства Bel с образованием гомо- и гетеродимеров за счет наличия гомологичных доменов в структурах этих протеинов. Клетка вступает либо в апоптоз - если образуются димеры Bak/Bad, Bax/Bid, Вах/Вах, либо в пролиферацию - если образуются димеры Bcl-2/Raf, Bcl-2/Bcl-XL, Bcl-2/Bcl-2, взаимодействующие с цитохромом С [Cory et al., 2002].

Модуляция белков семейства Вс1-2 хорошо изучена. Лучше других исследован механизм, связанный с фосфорилированием белка Bad. ИЛ-3 через специфический рецептор активирует специфические киназы, осуществляющие фосфорилирование белка Bad. У фосфорилированного белка Bad увеличивается сродство к цитоплазматическому белку, вследствие чего гетеродимер Bcl-2/Bad не образуется, и апоптоз не развивается. Отсутствие ИЛ-3 приводит к активации фосфатазы, инициирующей дефосфорилирование Bad. В результате образуются гетеродимеры Bcl-2/Bad и высвобождаются митохондриальные факторы, включая цитохром С. Высвобождение этих факторов приводит к распаду комплекса Bcl-2/Apaf-1/Прокаспаза-9, что в итоге вызывает активацию каспазы-9 и запуск апоптоза [Decaudin et al, 1997].

Гены семейства Bel способны также активироваться с помощью механизмов апоптоза, которые включаются в результате повреждения генетического материала. В этом случае ключевое значение в реализации

21

апоптического сигнала играет транскрипционный фактор белок р53 с молекулярной массой 53 ООО Д [Uo et al, 2007]. Повреждение ДНК стимулирует повышенную экспрессию р53. Это приводит к репрессии ряда генов, регулирующих транскрипцию и задерживающих клетки в фазе клеточного цикла G1. Белок р53 способен останавливать клеточный цикл при помощи активации гена р21, являющегося ингибитором большинства циклинзависимых киназ. Кроме того, р53 может взаимодействовать с комплексами, которые определяют как синтез, так и репарацию ДНК, либо с белками, которые модулируют апоптоз [Uo et al., 2007]. Белок р53 способен также стимулировать гены некоторых «киллерных» рецепторов, воспринимающих команду об апоптозе |Ding et al., 1998; Moll et al., 1998]. Один из таких - Fas-белок (Fas-рецептор). p53 производит активацию генов белков Bad и Вах и инактивацию генов белков Bcl-Х и Bcl-2 [Currach et al., 1997; Polyak et al., 1997]. В итоге происходит высвобождение проапоптозных факторов: флавопротеина AIF, цитохрома С и прокаспаз 2,3, 9. Флавопротеин AIF транслоцируется в ядро и активирует нуклеазы. Вызванный этим фактором апоптоз происходит без участия каспаз [Новиков и др., 1997]. Активацию каспаз 3 и 9 способен индуцировать другой митохондриальный фактор - APAF-1 [Jabs, 1999]. Кроме того, р53 может поступать из ядра к митохондриям [Arima et al, 2005] и запускать развитие апоптоза по митохондриальному пути [Moorjani et al., 2007]. Иногда апоптоз осуществляется в результате комбинации обоих путей: при участии митохондриального цитохрома и рецепторов плазматической мембраны [Козначеев и др., 2001; Хансон, 1997]. Таким образом, решающую роль в судьбе клетки играет баланс между про- и антиапоптогенными представителями семейства Вс1-2.

По действию на апоптоз гены Bcl-2 b Bcl-XL являются антагонистами гена р53. Ген Bcl-2 препятствует развитию ранних событий программируемой клеточной гибели и его повышенная экспрессия способна предотвратить гибель клеток путем апоптоза. Наиболее вероятным

22

механизмом действия белка Вс1-2 является ингибирование Ca - зависимых внутриклеточных протеаз. Вс1-2 локализуется в эндоплазматическом ретикулуме, митохондриальной и ядерной мембранах. В ЭР локализована также прокаспаза 12. Нарушение внутриклеточного Ca -гомеостаза ведёт к апоптозу, вызываемому превращением прокаспазы 12 в каспазу 12. Таким образом, этот сигнальный путь апоптоза опосредован ЭР [Nakagawa et al, 2000; Sun et al, 2008].

1.1.4. Некроз

Некротическая гибель клеток в отличие от апоптотической не является генетически детерминированной и АТФ-зависимой. Некротическая гибель может быть спровоцирована гипотоническим шоком, физическими или химическими повреждениями клеток. Из химических факторов в организме наиболее активными индукторами некроза являются АФК, генерируемые фагоцитирующими клетками. АФК - обязательные участники воспалительных процессов.

Важнейшими медиаторами воспалительных процессов являются цитокины, которые секретируются клетками пораженной ткани. Цитокины способны запускать некротические программы. ФНО-рецепторы в зависимости от условий могут инициировать как апоптотическую, так и некротическую гибель клетки. Аналогично, Fas рецептор (CD95) может инициировать некротическую программу по каспазо-независимым механизмам.

Доказательство существования каспазо-независимой клеточной гибели (программированный клеточный некроз) основано на критической роли серин-треонин киназы RIP1 (RIPK1) для развития FasR-опосредованного некроза в Т лимфоцитах человека [Holle, 2000] и TNFR-опосредованного некроза в эмбриональных фибробластах мыши [Lin, 2004]. Впоследствии RIP1 и RIP3 были определены как ключевые медиаторы каспазо-независимой клеточной гибели [Cho, 2009; Не, 2009; Zhang, 2009]. Кроме RIP1 и RIP3 в

23

некротический комплекс, так называемую некросому, входят TRADD, FADD и каспаза-8 [Vandenabeele, 2010]. Каспаза-8 в некросомах может инактивировать RIP1 и RIP3 прямым расщепление этих двух киназ. Таким образом, ингибирование или удаление каспазы-8 будет способствовать некрозу [Chen, 2011; Kaiser, 2011; Zhang, 2011; Oberst, 2011; Welz, 2011; Lit, 2011].

TNFR - наиболее хорошо изученный рецептор, запускающий некроз. Помимо TNFR обнаружены другие рецепторы, активация которых вызывает некроз. Например, патоген-распознающие рецепторы, включая Toll-подобные рецепторы (TLR) и рецепторы вирусной ДНК и РНК [Feoktistova, 2011; Upton et al., 2010; Martinon et al., 2007; Kalai, 2002]. Липополисахарид, компонент клеточных стенок грамотрицательных бактерий, взаимодействует с TLR4 и индуцирует макрофагальный некроз, когда активность каспазы-8 подавлена [Zhang, 2009; Ma et al., 2005]. Грамотрицательные бактерии шигеллы Флекснера вызывают некроз нейтрофилов [Francois et al., 2000] и человеческих макрофагов, полученных из моноцитов [Koterski et al., 2005]. Вирусные двухцепочечные РНК, скорее всего, через TLR3, вызывают некротическую гибель мышиных фибробластов L929 [Kalai, 2000].

Инфицированная клетка макроорганизма погибает по механизму некроза, если Т-киллер своевременно её не уничтожил. Размножаясь, патогенный микроорганизм уничтожает клетку-хозяина и заражает соседние. В результате прогрессирует инфекционно-воспалительный процесс [Самуилов и др., 2000].

В заключение настоящего раздела следует подчеркнуть, что сигнальные пути инициации апоптоза и некроза часто оказываются общими [Проскуряков и др., 2002], а представление о некрозе как хаотичной нерегулиремой клеточной катастрофе постепенно уходит в прошлое.

1.1.5. Роль лнпндов в программируемой клеточной гибели

Липиды клетки принимают активное участие в процессах регулирования гомеостаза [Степанов и др., 1991].

Липиды клеточной мембраны играют важную роль в процессах передачи сигналов в ядро клетки [Alan et al., 2002; Yoshinori, 2002]. В ядре локализованы сфигномиелиновая и фосфоинозитидная сигнальные системы [Alan et al., 2002; Marshall, 1995]. Модификация липидного микроокружения приводит к изменению чувствительности этих систем [Проказова и др., 1998; Самуилов и др., 2000; Gordon et al., 1995]. Кроме того, липиды, обладая способностью образовывать комплексы с ДНК и тем самым влиять на молекулярную организацию ДНК, способны модулировать активность генетических процессов [Стручков, 2000; Ярилин, 1998].

Показательна роль липидов в регуляции активности протеинкиназы С. Ряд исследований свидетельствует о том, что на активность ПКС могут влиять ненасыщенные жирные кислоты, в частности, арахидоновая кислота, и полифосфоинозитиды. Экспериментальные данные показывают, что активированная ПКС не транслоцируется в искусственную мембрану из фосфолипидов, не содержащую ненасыщенных жирных кислот. Таким образом, как отдельные фракции липидов, так и их соотношение в составе мембран могут модулировать ПКС-опосредованный апоптоз [Alexandra et al., 1998].

Поскольку программируемая гибель клетки реализуется через большое количество внешних стимулов и внутренних регуляторов, качественные и количественные изменения в спектре липидов играют важную роль в контроле апоптоза [Егорова и др., 2001].

1.1.6. Активные формы кислорода

Многие процессы в организме, проходящие с участием молекулярного кислорода, как правило, сопровождаются образованием АФК. Образование АФК в клетке является нормой [Владимиров и др., 2009]. Обладая

25

выраженным бактерицидным действием, АФК выполняют в организме защитную функцию [Уа1ко е/ а1, 2005]. Биологически наиболее значимые

АФК: супероксид-анион (02 ), пероксид водорода Н202 и гидроксил-радикал ОН*.

Заметную часть кислорода клетки нашего организма восстанавливают до супероксидного радикала. Так, гранулоциты, моноциты крови и тканевые макрофаги выделяют супероксид в реакции, катализируемой НАДФН-оксидазой:

В активном состоянии ЫАБРН-оксидазный комплекс катализирует следующую реакцию:

ИАОРН + 2 02 2 02 + ЫАЭР+ + Н+

Судьба супероксидных радикалов может быть разной.

В норме супероксид-анион (СОА) может превращаться в перекись водорода в реакции, катализируемой супероксиддисмутазой (СОД)

2 02~ + 2Н+ -> Н202 + 02

Поскольку Н202 является менее реакционноспособным соединением, чем супероксид-анион, эта реакция имеет важное биологическое значение для защиты клетки от повреждения АФК.

Возможны различные нарушения метаболизма АФК при дисфункции систем, связывающих ионы железа в клетках и плазме крови (трансферрин, ферритин, церулоплазмин), и защитных антиоксидантных ферментов. В таких случаях Н202 и супероксидные радикалы вступают в альтернативные реакции:

Образование из трехвалентного железа двухвалентного:

Ре3+ + 02 —» Ре2++ 02

Реакция пероксида водорода и гипохлорита с ионами железа (двухвалентного):

Ре2+ + Н202 -» Ре3+ + НО" + ОН* (радикал гидроксила) - реакция Фентона

Бе2++ СЮ" + КГ -» Бе3* + СГ+ ОН« (радикал гидроксила)

1.1.7. Токсическое действие активных форм кислорода

Избыточное образование свободных радикалов в организме, называемое окислительным стрессом, может сопровождаться целым рядом серьезных нарушений свойств биологических мембран и, как следствие, клеточными дисфункциями [Зенков и др., 2001]. Наиболее значимые изменения свойств мембранных структур перечислены в таблице 1.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Миронов, Владислав Алексеевич

выводы

1. Биназа в токсичной концентрации избирательно активирует апоптоз моноцитов человека и не влияет на программированную клеточную гибель лимфоцитов и гранулоцитов. Апоптогенный эффект в моноцитах зависит от концентрации биназы.

2. В условиях окислительного стресса биназа в нетоксичной концентрации увеличивает субпопуляцию жизнеспособных моноцитов (цитопротекторный эффект), а в токсичной - меняет динамику Н202-индуцированного апоптоза, повышая долю моноцитов в стадии раннего апоптоза. Цитопротекторный и апоптоз-модулирующий эффекты биназы в моноцитах человека сохраняются в модели форболмиристатацетат-индуцированного апоптоза.

3. В условиях окислительного стресса биназа препятствует гибели перитонеальных макрофагов по механизму некроза, переключая их на доминирующий путь апоптоза.

4. В присутствие биназы снижается интенсивность реакций перекисного окисления липидов в мембранах перитонеальных макрофагов крысы и изменяются параметры основного фазового перехода DPPC гель-жидкий кристалл. Взаимодействие биназы с большими моноламеллярными везикулами DPPC сопровождается увеличением температуры фазового перехода липида и уменьшением доли жидкой фазы при фазовом переходе.

5. Биназа избирательно и дифференцированно действует на Е. coli- и ФМА-зависимый окислительный взрыв в гранулоцитах и не влияет на эти процессы в моноцитах.

6. В токсичной концентрации биназа обнаруживает синергизм с ФМА в моноцитах и гранулоцитах крови человека в модели ФМА-индуцированного апоптоза.

7. Химическая димеризация биназы сопровождается усилением её проапоптогенной активности в перитонеальных макрофагах крысы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Согласно многочисленным публикациям, особенностью биологической активности экзогенных РНКаз является избирательность их действия на клетки, конечный результат которого зависит как от типа клетки-мишени, так и от используемого фермента.

Мы показали, что действие биназы на гетерогенную популяцию фагоцитирующих клеток крови имеет селективный характер. Биназа проявляет цитопротекторный эффект и модулирует апоптоз в моноцитах, но не влияет на программированную гибель лимфоцитов и гранулоцитов. Наиболее значимым фактором, определяющим реализацию вышеперечисленных эффектов биназы, вероятнее всего, является её избирательная мембранотропность к мононуклеарным фагоцитам.

Обнаруженные в исследовании протекторный и апоптоз-модулирующий эффекты биназы в моноцитах имеют важное значение для биохимии человека, в частности, для регуляции программированной клеточной гибели моноцитов при различных патологиях (атеросклероз, системные аутоиммунные заболевания и др.). Недавнее осознание того, что моноциты/макрофаги играют фундаментальную биологическую роль в репаративной регенерации тканей, тканевом гомеостазе и прогрессии рака требует осмысления механизмов, которые определяют продолжительность жизни моноцитов/макрофагов. В указанном контексте представляется целесообразным дальнейшее изучение биназы как перспективного терапевтического регулятора клеточной гибели.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Миронов, Владислав Алексеевич, 2013 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Андреев А.Ю. Метаболизм активных форм кислорода в митохондриях / А.Ю. Андреев, Ю.Е. Кушнарева, А.А Старков // Биохимия. - 2005. - Т.74. - С. 246-264

2. Антонов В.Ф. Липидные мембраны при фазовых превращениях /

B.Ф. Антонов, Е.Ю. Смирнова, Е.В. Шевченко // М.: Наука. - 1992. -136 с.

3. Афанасенко Г. А. Первичная структура рибонуклеазы Bacillus intermedius / Г.А. Афанасенко, С.М. Дудкин, Л.Б. Каминир // Биоорган, химия. - 1979. - Т. 5, № 2.- С. 187-202

4. Баренбойм Г.М. Биологически активные вещества. Новые методы поиска / Г.М. Баренбойм, А.Г. Маленков // Наука. - 1986. - С. 340343

5. Березов Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин Б.Ф. //Изд-во «Медицина». - 2002. - С. 599-605

6. Болотина И.А. Рибонуклеаза Bacilius intermedius. Определение вторичной структуры в растворе методом КД / И.А. Болотина, С.М. Дудкин, В.Ю. Лугаускас и др. // Биоорган, химия. - 1979. - Т.5, № 2. -

C.203-209

7. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков // М. Наука. - 1972. -252 с.

8. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и клеточная хемилюминесценция / Ю.А. Владимиров, Е.В. Проскурнина // Успехи биологической химии. - 2009. - Т.49. - С.341-388

9. Ганковская O.A. Взаимодействие вирусов и То11-подобных рецепторов / O.A. Ганковская, В.В. Зверев // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2010. - Т. 2. - С. 101-105

10. Голубенко И. А. Рибонуклеаза Bacillus intermedins 7Р. Очистка хроматографией на фосфоцеллюлозе и некоторые характеристики гомогенного фермента / И.А. Голубенко, Н.П. Балабан, И.Б. Лещинская // Биохимия. - 1979. - Т. 44. - С.640-648

11. Данилова Л.А. Справочник по лабораторным методам исследований. Санкт-Петербург. - 2003. - 650 с.

12. Егорова А.Б. Повреждение цитоскелета и клеточных мембран при апоптозе / А.Б. Егорова, Ю.А. Успенская, С.В. Михуткина и др. // Усп.совр.биол. - 2001. - Т.5. - С.502-509

13. Зеленихин П.В. Апопто генные и иммуногенные свойства рибонуклеазы Bacillus intermedins / П.В. Зеленихин, Г.В. Черепнев, О.Н. Ильинская // Учен. зап. Казан, ун-та, Естеств. науки. - 2005. - Т. 147, кн. 2. - С. 80-89

14. Зенков Н.К. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Ланкин, Е.Б. Меньшикова//МАИК «Наука/Интерпериодика». - 2001. - С. 343-344

15. Иванченко О.Б. Антимутагенная активность ферментного препарата «биназа» в микробных системах / О.Б. Иванченко, О.Н. Ильинская, Н.С. Карамова//Микробиология. - 1995. - Т. 54, №2. - С. 234-238

16. Ильинская О.Н. Почему рибонуклеазы вызывают гибель раковых клеток / О.Н. Ильинская, А.А. Макаров // Мол.Биол. - 2005. - Т.39, №1. - С. 3-13

17. Кабрера-Фуентес Э.А. Сравнительная цитотоксичность биназы по отношению к опухолевым и нормальным клеткам / Э.А. Кабрера Фуентес, П.В. Зеленихин, А.И. Колпаков и др. // Учен. зап. Казан, унта. Естеств. науки. - 2010. - Т. 152, кн. 3. - С. 143-148

18. Кабрера-Фуентес Э.А. РНКаза с противоопухолевым действием (биназа) вызывает изменение клеточной проницаемости / Э.А. Кабрера-Фуентес, П.В. Зеленихин, А.И. Колпаков и др. // Клеточная

трансплантология и тканевая инженерия. - 2012. - Т. 7, № 3. - С. 7276

19. Калачева Н.В. Влияние рибонуклеаз и их модифицированных производных на функциональную активность перитонеальных макрофагов крысы / Н.В. Калачева, Б.М. Куриненко // Биомедицинская химия. - 2005. - Т.З. - С.303-309

20. Калачева Н.В. Особенности электростатического взаимодействия панкреатической и микробной рибонуклеаз с макрофагами in vitro / Н.В. Калачева, A.B. Наруллина, Б.М. Куриненко // Цитология. - 2007. - Т. 49, №4. - С. 296 - 300

21. Козначеев К.С. Функция гена р53 / К.С. Козначеев, Ф.Г. Румянцев, И.Г. Мустафин // Биохимия. - 2001, №2. - С 366-370

22. Коновалова O.A. Изучение особенностей электростатического взаимодействия РНКаз с поверхностью слюды методом атомно-силовой микроскопии / O.A. Коновалова, Н.В. Калачева, Ф.В. Ширшиков, М.Х. Салахов // Российские нанотехнологии. - 2011. -Т.6.-С. 122-125

23. Коркина Л.Г. Мембранный механизм активации клеток / Л.Г. Коркина, Т.Б. Суслова, Ж.Г. Гуляева и др. // Биол. мембраны. -1987. - Т.4, №10. - С. 1093-1101

24. Куриненко Б.М. Механизмы биологического действия нуклеаз / Б.М. Куриненко, И.Б. Лещинская, В.П. Варламов // Нуклеазы бактерий. -1991. - С.153-230

25. Куриненко Б.М. Стимуляция рибонуклеазами неспецифических факторов защиты в организме экспериментальных животных / Б.М. Куриненко, З.М. Нехорошкова, Р.Ш. Булгакова // Антибиотики и химиотерапия. - 1995. - Т. 40, №7. С. 30-34

26. Лавров В.Ф. Перспективная модель для тестирования функций Toll-

подобных рецепторов in vitro / В.Ф. Лавров, O.A. Ганковская, Г.Г.

106

Кривцов и др. // Ж. физиология и патология иммунной системы. -

2009. - Т. 13, №12. - С.3-6

27. Лещинская И.Б. Методы определения нуклеаз и родственных ферментов / И.Б. Лещинская, Н.П. Балабан, М.Н. Капранова и др. // Современные методы изучения нуклеиновых кислот и нуклеаз микроорганизмов. - 1980. - Т.1. - С. 53-60

28. Мальцева В.Н. Наблюдение в динамике модификации функциональной активности периферических нейтрофилов и ее регуляции при росте опухоли in vivo / В.Н. Мальцева, Н.В. Авхачева, Б.Ф. Санталов и др. //Цитология. - 2006. - Т.48. - С. 12-18

29. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский // Изд-во «Наука», Новосибирск. - 1989. - С. 34-40

30. Маянский H.A. Апоптоз нейтрофилов / H.A. Маянский, М.И. Заславская, А.Н. Маянский // Иммунология. - 2000. - Т 2. - С. 11-13

31. Меньшиков В.В. Клиническая лабораторная аналитика // Москва. -1999.-Т.2.-375 с.

32. Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньшикова, В.З. Ланкин, Н.К. Зенков // Слово. - 2006. - С.556-559

33. Нестеренко А.Н. Апоптоз циркулирующих нейтрофилов при хирургическом сепсисе: патогенетическое значение и прогностические возможности // Украинский журнал хирургии. -

2010. Т.1. - С.122-131

34. Нехорошкова З.М. Влияние рибонуклеаз на гуморальный иммунитет экспериментальных животных / З.М. Нехорошкова, И.В. Мирошниченок, Б.М. Куриненко и др. // Антибиотики и химиотерапия. - 1988. - Т. 30, № 9. - С.676-681

35. Новиков B.C. Физиологические аспекты апоптоза / B.C. Новиков,

B.Н. Цыган // Российский физиол. журн. им. И.М. Сеченова. - 1997. -Т.4. - С.344-350

36. Новицкий В.В. Роль нейтрофилов в деструкции сосудистого эндотелия при операциях реваскуляризации миокарда в условиях искусственного кровообращения / В.В. Новицкий, С.П. Чумакова, О.И. Уразова и др. // Бюллетень сибирской медицины. - 2005. - Т. 4. -

C. 49-53

37. Октябрьский О.Н. Редокс-регуляция клеточных функций / О.Н. Октябрьский, Г.В. Смирнова // Биохимия. - 2007. - Т. 72, №2. - С. 158-174

38. Патутина O.A. Противоопухолевое и антиметастатическое действие РНКазы А и ДНКазы I / O.A. Патутина, H.JI. Миронова, Е.И. Рябчикова и др. // Acta naturae. - 2010. - Т2, №1(4). - С. 95-101

39. Платэ Н. Ф. Физиологически активные полимеры / Н.Ф. Платэ, А.Е. Васильев // Москва: Химия. - 1986. - 382 с.

40. Проказова Н.В. Влияние лизофосфатидилхолина на передачу трансмембранного сигнала внутрь клетки / Н.В. Проказова, Н.Д. Звездина, A.A. Коротаева//Биохимия. - 1998. - Т.1.- С.38-46

41. Проскуряков С.Я. Некроз - активная управляемая форма программируемой клеточной гибели / С.Я. Проскуряков, B.JI. Габай, А.Г. Конопляников // Биохимия. - 2002. Т.67, вып. 4. - С. 467-491

42. Рукша Т.Г. Модуляция апоптоза форболмиристатацетатом осуществляется независимо от уровня экспрессии TsPO в клетках плоскоклеточного рака кожи // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2012. - Т. 1. - С. 40-43

43. Салганик Р.И. Противовирусное действие дезоксирибонуклеазы и рибонуклеазы / Р.И. Салганик, A.A. Трухачёв, Т.А. Баталина // Ингибиторы вирусной активности. Наука. - 1972. - С.147-152

44. Самуилов В.Д. Программируемая клеточная смерть / В.Д. Самуилов, A.B. Олексин, Е.М. Лагунова // Биохимия. - 2000. - Т.8. - С.1029-1046

45. Скулачев В.П. Феноптоз: запрограммированная смерть организма // Биохимия. - 1999. - Т.12. - С. 1679-1688

46. Скулачев В.П. Явления запрограммированной смерти. Митохондрии, клетки и органы: Роль активных форм кислорода // Соросовский образовательный журнал. - 2001. - Т.7, №6. - С. 4-11

47. Степанов А.Е. Физиологически активные липиды / А.Е. Степанов, Ю.М. Краснопольский, В.И. Швец // Наука. - 1991. - Т.1. - С.136-137

48. Стручков В.А. Структурные и функциональные аспекты ядерных липидов нормальных и опухолевых клеток // Биохимия. - 2000. -Т.65, №5. - С. 620-643

49. Трофимов В. А. Влияние перекиси водорода на спектр липидов в перитонеальных макрофагах и их ядрах / В.А. Трофимов, A.A. Дудко, А.П. Власов и др. // Современные наукоемкие технологии. -2004. - Т.З. - С. 92-93

50. Хансон К.П. Программированная клеточная гибель (апоптоз): молекулярные механизмы и роль в биологии и медицине // Вопр.мед и химии. - 1997. - Т.5. - С. 402-415

51. Часовских Н.Ю. Апоптоз и окислительный стресс / Н.Ю. Часовских, Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий // Сибирский медицинский университет. - 2009. - 148 с.

52. Ченцов Ю.С. Введение в клеточную биологию // Изд-во «Академкнига», Москва. - 2004. - С. 239-250

53. Эдельвейс Э.Ф. Иммунобарназные конъюгаты для диагностики и терапии рака // Автореферат дисс. - 2010

54. Ярилин A.A. Апоптоз // Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1998. -Т. 8. - С. 38-48

55. Ярилин, А. А. Иммунология: учебник // Москва: ГЭОТАРМедиа. -2010.- 752 с.

56. Akira S. Toll-like receptors: critical proteins linking innate and acquired immunity / S. Akira, K. Takeda, T. Kaisho // Nat Immunol. - 2001. - V.2. - P. 675-680

57. Alan W. Signalling shortcuts: cell-surface receptors in the nucleus / W. Alan., M. Ulrich // Nat.Rev.Molecular Cell Biology. - 2002. - V.3. - P. 697-702

58. Alexandra C. Protein kinase C: a paradigm for regulation of protein function by two membrane-targeting modules / C. Alexandra, A.C. Newton, J.E. Johnson // Biochim.Biophys. acta. - 1998. - V. 1376. - P. 155-172

59. Aliprantis A.O. The apoptotic signaling pathway activated by Toll-like receptor-2 / A.O. Aliprantis, Y. Ruey-Bing, S.W. David et al // The EMBO Journal. - 2000. - V. 19. - P. 3325-3336

60. Ambruso D.R. NADPH oxidase activity of neutrophil-specific granules: requirements for cytosolic components and evidence of assembly during cell activation / D.R. Ambruso, N. Cusack, G. Thurman // Mol. Genet. Metab. 2004. - V. 81. - P. 313-321

61. Antignani A. Antitumor action of seminal ribonu- clease, its dimeric structure, and its resistance to the ribonuclease inhibitor / A. Antignani, M. Naddo, M.V. Cubellis et al // Biochemistry. - 2001. - V.40. - P. 34923496

62. Ardelt B. Cytotoxic ribonucleases and RNA interference (RNAi) / B. Ardelt, W. Ardelt, Z. Darzynkiewicz // Cell Cycle. - 2003. - V.2. - P. 1012

63. Ardelt W. Ribonucleases as potential modalities in anticancer therapy / W. Ardelt, B. Ardelt, Z. Darzynkiewicz // Eur. J. Pharmacol. - 2009. - V. 625. - P. 181-189

64. Arima Y. Transcriptional blockade induces p53-dependent apoptosis associated with translocation of p53 to mitochondria / Y. Arima, M. Nitta, S. Kuninaka // Biol. Chem. - 2005. - V. 280, №19. - P. 19166-19176

65. Aschoff L. Das reticulo-emdotheliale system // Ergeb Inn Med Kinderheilkd. - 1924. - V.26. - P. 1-118

66. Ashkenazi A. Death receptors: signaling and modulation / A. Ashkenazi, V.M. Dixit // Science. - 1998.-V. 281.-P. 1305-1308

67. Atasoy D. Fas-mediated pathway and apoptosis in normal, hyperplastic, and neoplastic endometrium / D. Atasoy, O. Bozdogan, S. Erekul // Gynecologic Oncology. - 2003. - V. 91, №2. - P. 309-317

68. Auffray C. Blood monocytes: development, heterogeneity, and relationship with dendritic cells / C. Auffray, M.H. Sieweke, F. Geissmann // Annu Rev Immunol.- 2009. - V. 27. - P. 669-692

69. Batey R.T. Structural and energetic analysis of metal ions essential to SRP signal recognition domain assembly / R.T. Batey, J.A. Doudna // Biochemistry. - 2002. - V. 41. - P. 11703-11710

70. Beere H.M. The stress of dying: the role of heat shock proteins in the regulation of apoptosis // J. Cell Sci. - 2004. - V. 117, № 13. - P. 26412651.

71. Begg S.K. Delayed hematopoietic development in osteopetrotic (op/op) mice / S.K. Begg, J.W. Pollard, O.T. Chisholm et al // J. Exp Med. - 1993. - V. 177. - P. 237-242

72. Bellavite P. Immunology and Homeopathy. Cells of the Immune System and Inflammation / P. Bellavite, A. Conforti, F. Pontarollo et al // Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. - 2006. V.3. -P. 13-24

73. Bilko D. Toll-like receptor expression in cell lines and primary tumour material / / Scientific notes of NAUKMA. - 2008. - V. 80. - P. 15-17

74. Blaszczyk J. Noncatalytic assembly of ribonuclease with double-stranded RNA / J. Blaszczyk, J. Gan, J.E. Tropea et al // Structure (Camb). - 2004. - V.12. - P. 457-466

75. Borregaard N. Neutrophils, from Marrow to Microbes //Immunity. -2010.-V. 33.-P. 657-670

76. Borsig L. Synergistic effects pf L- and P-selectin in facilitating tumor metastasis can involve non-mucin ligands and implicate leucocytes as enhancers of metastasis / L. Borsig, R. Wong, K. Hynes et al // Proc. Nad. Acad. Sci. - 2002. - V. 99. - P. 2193-2198

77. Bortoluci K.R. Control of infection by pyroptosis and autophagy: role of TLR and NLR / K.R. Bortoluci, R. Medzhitov // Cell Mol Life Sci. -2010. V.67, №10. - P. 1643-1651

78. Bosch M. A nuclear localization sequence endows human pancreatic ribonuclease with cytotoxic activity / M. Bosch, A. Benito, M. Ribo et al //Biochemistry. - 2004. - V. 43. - P. 2167-2177

79. Bracale A. Essential stations in the intracellular pathway of cytotoxic bovine seminal ribonuclease / A. Bracale, D. Spalletti-Cemia, M. Mastronicola et al // Biochem. J.- 2002. - V. 362. - P. 553-560

80. Bras M. Programmed cell death via mitochondria: different'modes of dying / M. Bras, B. Queenan, S.A. Susiin // Biochemistry. - 2005. - V. 70. -P. 231-239

81. Bredesen D.E. Apoptosis: overview and signal transduction pathways // Journal of Neurotrauma. - 2000. - V. 17. - P. 801-810

82. Brinkmann V. Beneficial suicide: why neutrophiles die to make NETs / V. Brinkmann, A. Zychlinsky // Nature Reviews Microbiology. - 2007. - V. 5. - P. 577-582

83. Burdelya L.G. An agonist of Toll-like receptor 5 has radioprotective activity in mouse and primate models / L.G. Burdelya, V.I.

Krivokrysenko, T.C. Tallant et al // Science. - 2008. - V. 320. - P. 226230

84. Caputo F. Redox modulation of the DNA damage response / F. Caputo, R. Vegliante, L. Ghibelli // Biochemical Pharmacology. - 2012. - V.84. P. 1292-1306

85. Cardone M.H. Regulation of cell death protease caspase-9 by phosphorylation / M.H. Cardone, N. Roy, H.R. Stennicke et al // Science. - 1998. -V. 282. - P. 1318-1321

86. Castedo M. The cell cycle checkpoint kinase Chk2 is a negative regulator of mitotic catastrophe / M. Castedo, J.Z. Perfettini, T. Roumier et al // Oncogene. - 2004. - V.23. - P. 2825-2837

87. Chai F. Regulation of capsase activation and apoptosis cellular zine fluxes and zine deprivation / F. Chai, A.Q. Truong-Tran // A rewiew. Immunol. Cell Biol. - 1999. - V.77. - P. 272-278

88. Chandrashekhar Y. Gene therapy and pharmaceutical modulation of apoptosis / Y. Chandrashekhar, S. Sen // Cardiol. Clin. - 2001. - V. 19. -P. 173-190

89. Chang H.Y. Proteases for cell suicide: functions and regulation of capsases / H.Y. Chang, X. Yang // Microbiology and Molecular Biology Rewiews. - 2000. - V. 64. - P. 821-846

90. Chen I.L. Mechanisms of necroptosis in T cells / I.L. Chen, J.S. Tsau, J.D. Molkentin et al // J. Exp. Med. - 2011. - V. 208. P. 633-641

91. Cho S. Ribonuclease inhibitor from pig brain: purification, characterization, and direct spectro- photometric assay / S. Cho, J.G. Joshi //Anal. Biochem. - 1989. - V. 176. - P. 175-179

92. Cho Y.S. Phosphorylation-driven assembly of the RIP1-RIP3 complex regulates programmed necrosis and virus-induced inflammation // Cell. -2009.-V. 137.-P. 1112-1123

93. Cohen I.I. The mechanism of apoptosis / I.I. Cohen, R.C. Duke // J.Immunol. - 1998. - V.l. - P. 1824-1830

94. Cory S. The Bcl2 family: regulators of the cellular life-or-death switch / S. Cory, J.M. Adams // Nat. Rev. Cancer. - 2002. - V. 2, № 9. - P. 47-56

95. Couzin J. Small RNAs make big splash // Science. - 2002. - V. 298. - P. 2296-2297

96. Currach M.E. Bax-deficiency promotes drug resistance and oncogenic transformation by attenuating p53-dependent apoptosis / M.E. Currach, T.M. Connor, C.M. Knudson // Proc.Natl.Acad.Sci USA. - 1997. - V. 94. - P. 2345-2349

97. Debby G. Bouten Evolutin of a continuous quantification method of apoptosis and necrosis in tissue culturs / G. Debby, W.J. Cess, P.T. Frank et al // Cytotechnology. - 2004. - V. 46. - P. 139-150

98. Decaudin D. Bcl-2 and Bcl-Xl antagonize the mitochondrial dysfunction preceding nuclear apoptosis induced by chemotherapeutic agents / D. Decaudin, S. Geley, T. Hirsh et al // Cancer research. - 1997. - V.57. - P. 62-67

99. Ding H.F. Mechanisms of p53-mediated apoptosis / H.F. Ding, D.E. Fisher // Crit.Rev.Oncog. - 1998. - V. 9. - P. 83-98

100. Doseff A.I. Apoptosis: the sculptor of development // Stem Cells Developm. - 2004. - V.13. - P. 473-483

101. Edelweiss E. Binase as a new therapeutic agent triggering apoptosis in human cancer cells / E. Edelweiss, T.G. Balandin, J.L. Ivanova // PLoS. -2008. - V. 3.-P. 24-34

102. Edinger A.Z. Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy / A.Z. Edinger, C. Thompson // Curr. Opin. Cell Biol. - 2004. - V. 16. - P. 663669

103. Elmore S. Apoptosis: A Review of Programmed Cell Death // Toxicol Pathol. - 2007. - V. 35, №4. - P. 495-516

104. Eubank T.D. Granulocyte macrophage colony-stimulating factor inhibits breast cancer growth and metastasis by invoking an anti-angiogenic program in tumor-educated macrophages / T.D. Eubank, R.D. Roberts, M. Khan et al // Cancer Res. - 2009. - V. 69. - P. 2133-2140

105. Fadok V.A. Exposure of phospatidylserine on the surface of apoptotic lymphocytes triggers specific recognition and removal by macrophages / V.A. Fadok, D.R. Volker, P.A. Campbell // J. Immunol. - 1992. - V.148. -P.22157-22164

106. Fahy R.J. Inflammasome mRNA expression in human monocytes during early septic shock / R.J. Fahy, M.C. Exline, M.A. Gavrilin et al // Am J. Respir Crit Care Med. - 2008. - V. 177. - P. 983-988

107. Fahy R.J. Spontaneous human monocyte apoptosis utilizes a caspase-3-dependent pathway that is blocked by endotoxin and is independent of caspase-1 / R.J. Fahy, A.I. Doseff, M.D. Wewers // J. Immunol. - 1999. -V. 163.-P. 1755-1762

108. Fang E.F. Ribonucleases of different origins with a wide spectrum of medicinal applications / E.F. Fang, T.B. Ng // Biochim. Biophys. Acta. -2011.-V. 1815, №1. - P.65-74

109. Feoktistova M. cIAPs block ripoptosome formation, a RIPl/caspase-8 containing Intracellular cell death complex differentially regulated by cFLIP isoforms // Mol. Cell. - 2011. - V. 43. - P. 449-463

110. Ferdinandy P. Nitric oxide, superoxide and peroxynitrite in myocardial ischemia-reperfusion injury and preconditioning / P. Ferdinandy, R. Schulz // Br. J. Pharmacol. - 2003. - V. 138. - P. 532-543

111. Ferri K.F. Organelle-specific initiation of cell death pathways / K.F. Ferri, G. Kroemer//Nat. Cell Biol. - 2001. - V.3, №11. - P. 255-263

112. Fesus L.P. Apoptosis: Molecular mechanismsin pragrammed cell deth // J. Immunol. - 1991. - V. 2. - P. 38-42

113. Francois M. Induction of necrosis in human neutrophils by Shigella flexneri requires type III secretion, IpaB and IpaC invasins, and actin polymerization / M. Francois, V. Le Cabec, M.A. Dupont et al // Infect. Immun. - 2000. -V. 68.-P. 1289-1296

114. Frantz S. Role of TLR-2 in the Activation of Nuclear Factor kB by oxidative stress in Cardiac Myocytes / S. Frantz, R.A. Kelly, T. Bourcier // The Journal of Biological Chemistry. - 2001. - V. 276, №7. - P.5197-5203

115. Fuchs T.A. Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps / T.A. Fuchs, U. Abed, C. Goosmann et al // The J. of Cell Biol. -2007.-V. 176.-P. 231-241

116. Futami J. Optimum modification for the highest cytotoxicity of cationized ribonuclease / J. Futami, E. Nukui, T. Maeda et al // J. Biochem. - 2002. -V. 132. - P. 223-228

117. Garlichs C.D. Delay of neutrophil apoptosis in acute coronary syndromes / C.D. Garlichs, S. Eskafi, I. Cicha et al // J. Leukoc. Biol. - 2004. - V. 75, №5.-P. 828-835

118. Gaur D. Glucine 38 is crutial for the ribonucleolytic activity of human pancreatic ribonuclease on double-stranded RNA / D. Gaur, D. Seth, J.K. Batra // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2002. - V. 297. - P. 390-395

119. Gaur U. Regulation of proliferation, survival and apoptosis by members of the TNF superfamily / U. Gaur, B.B. Aggarwal // Biochem Pharmacol. -2003.-V.66.-P. 1403-1408

120. Gonzalez-Guerrico A.M. Phorbol ester-induced apoptosis in prostate cancer cells via autocrine activation of the extrinsic apoptotic cascade: a key role for protein kinase C delta // J.Biol. Chem. - 2005. - V. 280. - P. 38982-38991

121. Gonzalez-Mejia E. Regulation of monocytes and macrophages cell fate / E. Gonzalez-Mejia, A.I. Doseff // Front Biosci. - 2009. - V.14. - P. 24132431

122. Gordon S. Molecular immunobiology of macrophages: recent progress / S. Gordon, S. Clarke, D. Greaves et al // Curr. Opin. in Immun. - 1995. -V. 7. - P. 24-33

123. Goyal A. Monocyte survival factors induce AKT activation and suppress caspase-3 / A. Goyal, Y. Wang, M.M. Graham et al // J. Respir Cell Mol Biol. - 2002. - V. 26. - P. 224-230

124. Grage-Griebenow E. Heterogeneity of human peripheral blood monocyte subsets / E. Grage-Griebenow, H.D. Flad, M. Ernst // J. Leukoc Biol. -2001. -V.69. -P.l 1-20

125. Granot Z. Tumor entrained neutrophils inhibit seeding in the premetastatic lung / Z. Granot, E. Henke, A. Elizabeth // Cancer Cell. - 2011. - V. 20, № 3.-P. 300-314.

126. Graziani G. Clinical perspectives of PARP inhibitors / G. Graziani, C. Szabo // Pharmacol. Res. - 2005. - V. 52. - P. 109-118

127. Haigis M.C. Secretory ribonucleases are internalized by a dynamin-independent endocytic pathway / M.C. Haigis, R.T. Raines // J. Cell Sci. 2003. - V. 116, № 2. - P.313-324

128. Halicka D.H. Enhancement of activation-induced apoptosis of lymphocytes by the cytotoxic ribonuclease (rapimase) / D.H. Halicka, P. Pozarowski, W.J. Ardelt et al // Int. J. Oncol. - 2002. - V. 21. - P. 12451250

129. Hanna N. Mechanisms underlying reduced apoptosis in neonatal neutrophils /N. Hanna, P. Vasquez, P. Pham // Pediatr. Res. - 2005. - V. 57, № 1. - P.56-62

130. He S. Receptor interacting protein kinase-3 determines cellular necrotic response to TNF-a // Cell. - 2009. - V. 137. - P. 1100-1111

131. Heibein J.A. Granzyme B-mediated cytochrome c release is regulated by the Bcl-2 family members Bid and Bax / J.A. Heibein, I.S. Goping, M. Barry // J. Exp. Med. - 2000. - V.192. - P. 1391-1402

132. Henderson L.M. Internal pH changes associated with the activity of NADPH oxidase of human neutrophils. Further evidence for the presence of an H+ conducting channel / L.M. Henderson, J.B. Chappell, O.T. Jones // Biochem. J. - 1988. - V. 251. - P. 563-567

133. Hill K.J. A role of protein kinase C in signalling from the human adenosine A1 receptor to the nucleus / K.J. Hill, A.S. Webber, S.J. Hill // Br. J. Pharmacol. - 2003. - V. 139, №4. - P. 721-732

134. Hofman P. Molecular regulation of neutrophil apopto sis and potential targets for therapeutic strategy against the inflammatory process // Curr. Drug Targets In flamm. Allergy. - 2004. - V. 3. - P. 1-9

135. Holler N. Fas triggers an alternative, caspase-8-independent cell death pathway using the kinase RIP as effector molecule // Nat. Immunol. - 2000. -V. 1.-P. 489-495

136. Huang J.M. Cutting FEMS Immunol / J.M. Huang, M.L. Roberto, A. Ragione et al //Med. Microbiol. - 2008. - V. 53. - P. 195-203

137. Ilinskaya O. Bacillus intermedins ribonuclease as inhibitor of cell proliferation and membrane current / O. Ilinskaya, K. Decker, A. Koschinski et al // Toxicology. - 2002. - V. 156. - P. 101-107

138. Ilinskaya O. Cytotoxicity of RNases is increased by cationization and counteracted by KCa channels / O. Ilinskaya, A. Koschinski, V. Mitkevich et al //Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2004. - V. 314. - P. 550-554

139. Ilinskaya O.N. Changing the net charge from negative to positive makes ribonuclease Sa cytotoxic / O.N. Ilinskaya, F. Dreyer, V.A. Mitkevich et al // Protein Sci. - 2002. - V. 11, №10. - P. 2522-2525

140. Jabs T. Reactive oxygen interneediates as mediators of programmed cell death in plants and animals // Biochem.Pharmacol. - 1999. - V.3. - P. 231245

141. Joshi S.G. Nuclear factor kappa B protects against host cell apoptosis during Rickettsia rickettsii infection by inhibiting activation of apical and effector caspases and maintaining mitochondrial integrity / S.G. Joshi, C.W. Francis, D.J. Silverman et al // Infect Immun. - 2003. - V.71. - P. 4127-4136

142. Kaiser W.J. RIP3 mediates the embryonic lethality of caspase-8-deficient mice // Nature. - 2011. - V. 471. - P. 368-372

143. Kalai M. Tipping the balance between necrosis and apoptosis in human and murine cells treated with interferon and dsRNA // Cell Death Differ. - 2002. -V. 9. P. 981-994

144. Kerr J.F.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics / J.F.R. Kerr, A.H. Wyffie, A.R. Currie // Brit. J. Cancer. - 1972. - V. 26. - P. 239-257

145. Kishimoto A. Activation of calcium and phospholipid-dependent protein kinase by diacylglycerol, its possible relation to phosphatidylinositol turnover / A. Kishimoto, J. Takai, T. Mori et al // J.biol. - 1980. - V.255. -P. 2273-2276

146. Kloner R.A. Influx of neutrophils into the walls of large epicardial coronary arteries in response to ischemia/reperfusion / R.A. Kloner, F. Giacomelli, K.J. Alker//Circulation. - 1991. - V. 84. - P. 1758-1772

147. Koterski J.F. Virulent Shigella flexneri causes damage to mitochondria and triggers necrosis in infected human monocyte-derived macrophages / J.F. Koterski, M. Nahvi, M.M. Venkatesan et al // Infect. Immun. - 2005. - V. 73. P. 504-513

148. Kroemer G. The proto-oncogene Bcl-2 and its role in regulating apoptosis //Nature Medicine. - 1997. - V.3. - P. 614-620

149. Laakko T. Versatility of merocyanine 540 for the flow cytometric detection of apoptosis in human and murine cells / T. Laakko, L. King, P. Fraker//J. Immunol. Meth. - 2002. - V. 261. - P. 129-139

150. Laktionov P.P. Cell-surface-bound nucleic acids: Free and cell-surface-bound nucleic acids in blood of healthy donors and breast cancer patients / P.P. Laktionov, L. Rifas // Ann Acad Sci. - 2004. - V. 1022. - P. 221-227

151. Lekkou A. Cytokine production and monocyte HLA-DR expression as predictors of outcome for patients with community-acquired severe infections / A. Lekkou, M. Karakantza, A. Mouzaki et al // Clin Diagn Lab Immunol. - 2004. - V. 11. - P. 161-167

152. Leland P. Cancer chemotherapy - ribonucleases to the rescue / P. Leland, R. Raines // Chim. Biol. - 2001. - V.8, №5. - P. 405-413

153. Libby P. Progress and challenges in translating the biology of atherosclerosis / P. Libby, P.M. Ridker, A. Maser // Circulation. - 2002. -V. 105.-P. 1135-1139

154. Libonati M. Biological actions of the oligomers of ribonuclease A / M. Libonati, L. Rifas // Cellular and Molecular life sciences. - 2004. - P. 102107

155. Libonati M. Molecular aggregates of ribonucleases. Some enzymatic properties / M. Libonati, L. Rifas // Ital. J. Biochem. - 2001. - V.22. -P.407—417

156. Lin Y. Tumor necrosis factor-induced nonapoptotic cell death requires receptor-interacting protein-mediated cellular reactive oxygen species accumulation // J. Biol. Chem. - 2004. - V. 279. - P. 10822-10828

157. Lu J.V. Complementary roles of Fas-associated death domain (FADD) and receptor interacting protein kinase-3 (RIPK3) in T-cell homeostasis and antiviral immunity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2011. - V. 108. P. 15312-15317

158. Luo Y. Targeting tumor-associated macrophages as a novel strategy against breast cancer / Y. Luo, H. Zhou, J. Krueger et al // J. Clin Invest. -2006.- V. 116.-P. 2132-2141

159. Ma Y. NF-kB protects macrophages from lipopolysaccharide-induced cell death: the role of caspase 8 and receptor-interacting protein / Y. Ma, V. Temkin, H. Liu et al // J. Biol. Chem. - 2005. - V. 280. - P. 41827^1834

160. Maeda T. RNase 3 (ECP) is an extraordinarily stable protein among human pancreatic-type RNases / T. Maeda, K. Mahara, M. Kitazoe et al // J. Biochem. - 2002. - V.132. - P. 737-742

161. Maianski N.A. Tumor necrosis factor a induces a caspase independent death pathway in human neutrophils / N.A. Maianski, D. Roos, T.W. Kuijpers // Blood. - 2003. - V. 101. - P. 1987-1995

162. Makarov A.A. Binase and other microbial RNases as potential anticancer agents / A.A. Makarov, A. Kolchinsky, O.N. Ilinskaya // BioEssays. -2008.-V. 30, №8.-P. 781-90

163. Makarov A.A. Cytotoxic ribonucleases: molecular weapons and their targets / A.A. Makarov, O.N. Ilinskaya // FEBS Lett. - 2003. - V. 540. - P. 15-20

164. Malavez Y. PKC8 / Y. Malavez, M.E. Gonzalez-Mejia, A.I. Doseff // Atlas Genet Cytogenet Oncol Haematol. - 2010. - URL: http://AtlasGeneticsOncology.org/Genes/ PRKCDID42901 ch3p21 .html

165. Mantovani A. Neutrophils in the activation and regulation of innate and adaptive immunity / A. Mantovani, M.A. Cassatella, C. Coctanini et al // Immunology. - 2011. - V. 11. - P. 519-531

166. Margio B. Effect of calcium ions on the thermotropic behaviour of neutral and amonic glycosphingolipids / B. Margio, J.M. Sturtevant // Biochim. biophys. acta. - 1987. - V. 901. - P. 173—183

167. Marshall C.J. Specificity of receptor tyrosine kinase signalindg // Cell. -1995.-V. 64. - P.310-319

168. Martin M. Annexin A2 and A5 serve as new ligands for Clq on apoptotic cells / M. Martin, J. Leffler, A.M. Blom // J Biol Chem. - 2012. V. 287, №40.-P. 33733-33744

169. Martin S J. Early redistribution of plasma membrane phosphatidylserine is a general feature of apoptosis regardless of the initiating stimulus: inhibition by overexpression of Bcl-2 and Abl / S.J. Martin, C.P. Reutelingsperger, A.J. McGahon // J. of Exp. Med. - 1995. - V.182. - P. 1545-1556

170. Martinon F. NALP inflammasomes: a central role in innate immunity / F. Martinon, O. Gaide, V. Petrilli et al // Semin. Immunopathol. - 2007. - V. 29.-P. 213-229

171. Matousek J. Antitumor and other biological actions of oligomers of ribonuclease A / J. Matousek, G. Gotte, P. Pouskova et al // J. Biol. Chem. - 2003. - V. 278. - P. 23817-23822

172. Matousek J. Ribonucleases and their antitumor activity / J. Matousek, D.L. Newton // Comp.Biochem.Physiol.C.Toxicol.Pharmacol. - 2001. -V.l. - P.175-191

173. Matousek J. The binding ofbull seminal ribonuclease and its carboxymethylated derivative to human leukaemic cells / J. Matousek, J. Soucek // Folia Biol. - 1979. - V. 25. - P. 142-144

174. McManus M.T. MicroRNAs and cancer // Cancer Biol. - 2003. - V. 13. -P. 253-258

175. Michael V.L. Intracellular TLR Signaling: A Structural Perspective on Human Disease / V.L. Michael, K.N Satish // The Journal of Immunology. - 2006. - V.177, №1. - P. 11-16

176. Mikulski S.M. Phase n trial of a single weekly intravenous dose of rapimase in patient with unresectable malignant mesothelioma / S.M. Mikulski, J.J. Costanzi, N.J. Vogelzang et al // J. Clin. Oncol. - 2002. - V. 20.-P. 274-281

177. Mitkevich V.A. Ribonuclease binase apoptotic signature in leukemic Kasumi-1 cells / V.A. Mitkevich, O.V. Kretova, I.Y. Petrushanko et al // Biochimie.-2013.P. 1-6

178. Moll U.M. p53 - an acrobat in tumorigenesis / U.M. Moll, L.M. Schramm // Crit.Rev.Oral.Biol.Med. - 1998. - V.9. - P. 23-37

179. Moorjani N. Upregulation of Bcl-2 proteins during the transition to pressure overload-induced heart failure / N. Moorjani, P. Catarino, D. Trabzuni //Int. J. of Cardiol. - 2007. - V. 116, № 1. - P. 27-33

180. Moreira M.E. Apoptotic cell phagocyte interplay: recognition consequences in different cell systems / M.E. Moreira, M.A. Barcinski // An Acad. Bras. Cienc. - 2004. - V. 76. - P. 93-115

181. Morel F. The superoxide-generating oxidase of phagocytic cells. Physiological, molecular and pathological aspects / F. Morel, J. Doussiere, P. Vignais // Europ.J.Biochem. - 1991. - V. 201, №.3. - P. 523-546.

182. Muppidi J.R. Life and death decisions: secondary complexes and lipid rafts in TNF receptor family signal transduction / J.R. Muppidi, J. Tschopp, R.M. Siegell // Immunity. - 2004. - V. 21. - P. 461-465

183. Nagata S. Fas Iigand-induced apoptosis // Annu Rev Genet. - 1999. - V. 33. - P. 29-55

184. Nakagawa T. Caspase-12 mediates endoplasmic-reticulum-specific apoptosis and cytotoxicity by amyloid-beta / T. Nakagawa, H. Zhu, N. Morishima et al // Nature. - 2000. - V. 403. - P. 98-103

185. Newton A.C. Regulation of protein kinase C // Curr. Opin. in Cell Biol. -1997.-V. 9.-P. 161-167

186. Newton D.L. RNA damage and inhibition of neoplastic endothelial cells growth: effects of human and amphibian ribonucleases / D.L. Newton, G. Kaur, J.S. Rhim et al // Radiat. Res. - 2001. - V.155. - P. 171-174

187. Nicholas C. Apigenin blocks lipopolysaccharide-induced lethality in vivo and pro-inflammatory cytokines expression by inactivating NF-kB through the suppression of p65 phosphorylation / C. Nicholas, S. Batra, M.A. Vargo et al //J. Immunol. - 2007. - V. 179. - P. 7121-7127

188. Nishizuka Y. The role of protein kinase C in cell surface signal transduction and tumor promotion // Nature Loud.- 1984. - V.308. -P.693-697

189. Notomista E. The role of electrostatic interactions in the antitumor activity of dimeric RNases / E. Notomista, J.M. Mancheno, O. Crescenzi et al // FEBS J. - 2006. - V. 273. - P. 3687-3697

190. Obeid L.M. Apoptosis and senescence of hematopoietic and immune cells / L.M. Obeid, Y.A. Hannun // Inflammation. - 1999. - V.l. - P. 819-834

191. Oberst A. Catalytic activity of the caspase-8-FLIPL complex inhibits RIPK3-dependent necrosis // Nature. - 2011. - V. 471. - P. 363-367

192. Ogawa Y. Effect of replacing the aspartis acid / glutamic acid residues of bullfrog sialic acid binding lectin with asparagine / glutamine and arginine on the inhibition of cell proliferation in murine leukemia P388 cells / Y. Ogawa, M. Iwama, K. Ohgi et al // Biol. Pharm. Bull. - 2002. - V. 25. - P. 722-727

193. Ogier D.E. Autophagy: a barrier or an adaptive response to cancer / D.E. Ogier, P. Codogno // Biochem. Biophys Acta. - 2003. - V.1603. - P. 113128

194. Olmo N. Cytotoxic mechanism of the ribotoxin alpha-sarcin. Induction cell death via apoptosis / N. Olmo, J. Tumay, G. Gonzalez de Butitrago et al //Eur. J. Biochem. - 2001. - V. 268. - P. 2113-2123

195. Ostolaza H. Balance of electrostatic and hydrophobic interactions in the lysis of model membranes by E. coli a-haemolysin / H. Ostolaza, L. Bakas, F.M. Goni // J. Membr. Biol. - 1997. - V. 158, № 2. - P. 137-145

196. Parahadjopoulos D. Effect of bivalent cations and proteins on thermotropic properties of phospholipid membranes // J. Colloid Interface Sei. - 1977. - V.58. - P. 459-470

197. Parihar M.S. Association of mitochondrial nitric oxide synthase activity with respiratory chain complex I / M.S. Parihar, R.R. Nazarewicz, E. Kincaid et al // Biochem Biophys Res Commun. - 2008. - V.366. - P. 2328

198. Penna F. Mechanism of Clofibrate-induced Apoptosis in Yoshida AH-130 Hepatoma Cells / F. Penna, P. Reffo, G. Musio et al // Biochemical pharmacology. - 2009. V. 77, № 2. P. 169-176

199. Perl M. Contribution of antiinflammatory / immune suppres sive processes to the pathology of sepsis / M. Perl, C.S. Chung, M. Garber et al // Front Biosci. - 2006. - V. 11. - P. 272—299

200. Piccoli R. A dimeric mutant of human pancreatic ribonuclease with selective cytotoxicity toward malignant cells / R. Piccoli, S. Di Gaetano, C. De Lorenzo et al // Proc. Natl. Acad. Sei. - 1999. - V. 96. - P. 77687773

201. Polyak K. A model for p53-induced apoptosis / K. Polyak, Y. Xia, J.L. Zweier //Nature. - 1997. - V. 389. - P. 300-305

202. Ran S. Increased exposure of anionic phospholipids on the surface of tumor blood vessels / S. Ran, A. Downes, P.E. Thorpe // Cancer Res. -2002. - V.62. -P. 6132-6140

203. Reibarkh M.Y. Three-dimensional structure of binase in solution / M.Y. Reibarkh, D.E. Nolde, L.I. Vasilieva et al // FEBS Lett. -1998. -V. 431. -P. 250-254

204. Roninson I. B. If not apoptosis, then what? Treatment-induced senescence and mitotic catastrophe in tumor cells /1. B. Roninson, E.V. Broude, B.D. Chang //DrugRes. Updates. - 2001. - V.4. - P. 303-313

205. Ryan K.A. Reactive oxygen and nitrogen species differentially regulate Toll-like receptor 4-mediated activation of NF-kappa B and interleukin-8 expression / K.A. Ryan, M.F. Smith, M.K. Sanders et al //Infect Immun. -2004. - V. 72, №4. - P. 2123-2130

206. Savill J. Corpse clearance defines the meaning of cell death / J. Savill, V. Fadok //Nature. - 2000. - V.407. - P. 784-788

207. Saxena S.K. Onconase and its therapeutic potential / S.K. Saxena, K. Shogen, W. Ardelt //Lab. Med. - 2003. V. - 34. - P. 380-387

208. Scatena R. Mitochondria and drugs // Advances in experimental medicine and biology. - 2012. - V. 942. - P. 329-346

209. Scheel-Toellner D. Clustering of death receptors in lipid rafts initiates neutrophil spontaneous apoptosis / D. Scheel-Toellner, K. Wang, L.K. Assi et al // Biochemical Society Translacation. - 2004. - V. 23. - P. 679681

210. Schultz D.R. Apoptosis: programmed cell death at a molecular level / D.R. Schultz, W.G. Harrington // Seminars in Arthritis and Rheumatism. -2003. - V. 32. - P. 345-347

211. Segal A.W. The subcellular distribution and some properties of the cytochrome b component of the microbicidal oxidase system of human neutrophils / A.W. Segal, O.T. Jones // Biochem. J. - 1979. - V. 182. - P. 181-188

212. Sevcik J. X-Ray structure of two crystalline forms of a Streptomycete ribonuclease with cytotoxic activity / J. Sevcik, L. Urbanikova, P.A. Leland et al // J. Biol. Chem. - 2002. - V. 277, №49. - P. 47325-47330

213. Sheppard F.R. Structural organization of the netrophil NADPH oxidase: phosphorilation and translocation during priming and activation / F.R. Sheppard, M.R. Kelher, E.E. Moore et al // J. of Leukocyte Biol. - 2005. -V.78. - P. 1025-1042

214. Sica A. Altered macrophage differentiation and immune dysfunction in tumor development / A. Sica, V Bronte // J. Clin Invest. - 2007. - V.l 17. -P.1155-1166

215. Skrzeczynska-Moncznik J. Peripheral blood CD14high CD16+ monocytes are main producers of IL-10 / J. Skrzeczynska-Moncznik, M. Bzowska, S. Loseke et al // Scand J Immunol. - 2008. - V. 67. - P. 152-159

216. Snyder M. R. Eosinophil-associated ribonucleases / M.R. Snyder, G.J. Gleich //Academic Press. - 1997. - V.l. - P. 425-444

217. Sorrentino S. Degradetion of double-stranded RNA by human pancreatic ribonuclease: crucial role of noncatalytic basic amino acid residues / S. Sorrentino, M. Naddeo, A. Russo, G. D'Alessio // Biochemistry. - 2003. -V.42.-P. 10182-19190

218. Spalletti-Cernia D. Higly selective toxic and proapoptotic effects of two dimeric ribonucleases on thyroid cancer cells compared to the effects of doxorubicin / D. Spaletti-Cernia, S. Sorrentino, S. Gaetano et al // Brit. J. Cancer Res. - 2004. - V.90, №1. - P. 270-277

219. Sreedhar A.S. Heat shock proteins in the regulation of apoptosis: new strategies in tumor therapy. A comprehensive review / A.S. Sreedhar, P. Csermely // Pharmacology & Therapeutics. - 2004. - V. 101. - P. 227-257

220. Stanley E. Granulocyte/macrophage colony-stimulating factor-deficient mice show no maor perturbation of hematopoiesis but develop a characteristic pulmonary pathology / E. Stanley, G.L. Lieschke, D. Grail et al // Proc Natl Acad Sci USA. - 1994. - V. 91. - P. 5592-5596

221. Sun Y. Upregulation of GRP78 and caspase-12 in diastolic failing heart / Y. Sun, G. Lin, W. Kong et al // Acta Biochimica Polonica. - 2008. - V. 55,№3. -P. 511-516

222. Suzuki M. Oxidative stress increases Fas ligand expression in endothelial cells / M. Suzuki, K. Aoshiba, A. Nagai // J. Inflamm. (Lond). - 2006. - V. 3. P. 1116-1117

223. Takemura G. Role of apoptosis in the disappearance of infiltrated and proliferated interstitial cells after acute myocardial infarction / G. Takemura, M. Ohno, Y. Hayakawa // Circ. Res. - 1998. - V. 82, № 11. -P.l 130-1138

224. Tepper A.D. Sphingomyelin hydrolysis to ceramide during the execution phase of apoptosis results from phospholiSid scrambling and alters cell-surface morphology / A.D. Tepper, P. Ruurs, T. Wiedmer // The J. of Cell Biol. - 2000. - V. 150, № 1. - p. 155-164

225. Traoekia M. Formation of unilamellar vesicles by repetitive freeze-thaw

'X 1

cycles: characterization by electron microscopy and P-nuclear magnetic resonance / M. Traoekia, D.E. Warschawski, M. Recouvreur // Eur Biophys. - 2000. - V. 29. - P. 184 - 195

226. Tyer M. Life and death decisions // Curr Opin Cell Biol. - 2004. - V. 16. -P.602-613

227. Uo T. Apoptotic Actions of p53 require transcriptional activation of PUMA and do not involve a direct mitochondrial/cytoplasmic site of action in postnatal cortical neurons / T. Uo, Y. Kinoshita, R.S. Morrison // J. Neurosci. - 2007. - V. 27. - P. 12198-12210

228. Upton J.W. Virus inhibition of RIP3-dependent necrosis / J.W. Upton, W.J. Kaiser, E.S. Mocarski // Cell Host Microbe. - 2010. - V. 7. P. 302-313

229. Vagin V.V. The RNA interference proteins and vasa locus are involved in the silencing of retrotransposons in the female germline of Drosophila melanogaster RNA / V.V. Vagin, M.S. Klenov, A.I. Kalmykova et al // Biology. - 2004. - V. 1. - P. 54-58

230. Valko M. Metals, toxicity and oxidative stress / M. Valko, H. Morris, M.T. Cronin // Current Medicinal Chemistry. - 2005. - V. 12, № 10.-P. 1161-1208

231. Van den Berg J.M. Divergent effects of tumor necrosis factor a on apoptosis of human neutrophils / J.M. Van den Berg, S. Weyer, J.J. Weening et al // J. Leu koc. Biol. - 2001. - V. 69. - P. 467-473

232. Van der Heide T. Osmoregulated ABC-transport system of Lactococcus lactis senses water stress via changes in the physical state of the membrane / T. Van der Heide, P. Poolman // PNAS. - 2000. - V. 97. - P. 7102-7107

233. Van Furth R. The origin and kinetics of mononuclear phagocytes / R. Van Furth, Z.A. Cohm//J. Exp Med. - 1968. - V. 128. - P. 415-435

234. Vandenabeele P. The role of the kinases RIP1 and RIP3 in TNF-induced necrosis / P. Vandenabeele, W. Declercq, F. Herreweghe et al // Sci. Signal. - 2010. - V.3. P. 44-49

235. Vasanth Raj P. Protective role of catechin on d-galactosamine induced hepatotoxicity through a p53 dependent pathway / P. Vasanth Raj, K. Nitesh, S. Sagar Gang et al // Indian J Clin Biochem. - 2010. V. 25, №4. -P. 349-356

236. Vempati U.D. Role of cytochrome c in apoptosis: increased sensitivity to tumor necrosis factor alpha is associated with respiratory defects but not with lack of cytochrome c release / U.D. Vempati, F. Diaz, A. Barrientos // Molecular and Cellular Biology. - 2007. - V. 27, № 5. - P. 1771-1783

237. Voss O.H. Binding of caspase-3 prodomain to heat shock protein 27 regulates monocyte apoptosis by inhibiting caspase-3 proteolytic activation / O.H. Voss, S. Batra, S.J. Kolattukudy et al // J. Biol. Chem. -2007. - V. 282. - P. 25088-25099

238. Voss O.H. Regulation of monocyte apoptosis by the protein kinase C delta-dependent phosphorylation of caspase-3 / O.H. Voss, S. Kim, M.D. Wewers et al // J. Biol. Chem. - 2005. - V. 280. - P. 17371-17379

239. Waldburger J.M. Selective abrogation of major histocompatibility complex class II expression on extrahematopoietic cells in mice lacking promoter IV of the class II transactivator gene / J.M. Waldburger, T. Suter, A. Fontana et al // J. Exp. Med. - 2001. - V. 194. - P. 393^106

240. Wang D. Preparation of cross-linked dimers of pancreatic ribonuclease / D. Wang, G. Wilson, S. Moore // Biochem. - 1976. - V.15, № 3. - P.660-665

241. Wang X. Mechanisms of AIF-mediated apoptotic DNA degradation in Caenorhabditis elegans / X. Wang, C. Yang, J. Chai et al // Science. -2002.- V. 298. - P. 1587-1592

242. Welz P.S. FADD prevents RIP3-mediated epithelial cell necrosis and chronic intestinal inflammation // Nature. - 2011. - V. 477. P. 330-334

243. Werling D. Differential production of cytokines, reactive oxygen and nitrogen by bovine macrophages and dendritic cells stimulated with Tolllike receptor agonists / D. Werling, J.C. Hope, C.J. Howard et al // Immunology. - 2004. - V. 111, №1. - P. 41-52

244. Wiktor-Jedrzejczak W. Cytokine regulation of the macrophage (M phi) system studied using the colony stimulating factor-1-deficient op/op mouse / W. Wiktor-Jedrzejczak, S. Gordon // Physiol Rev. - 1996. - V. 76. - P. 927-947

245. Yoshinori N. Alarm lipids // J.Biochem. - 2002. - V. 131. - P. 283-284

246. Zhang B. Elu cidation of molecular events leading to neutrophil apo ptosis following phagocytosis: crosstalk between caspase 8, reactive oxygen species, and MAPK / ERK activation / B. Zhang, J. Hiranhashi, X. Cullere et al // J. Biol. Chem. - 2003. - V. 278. - P. 28 443- 28 454

247. Zhang D.W. RIP3, an energy metabolism regulator that switches TNF-induced cell death from apoptosis to necrosis // Science. - 2009. - V. 325. -P. 332-336

248. Zhang H. Functional complementation between FADD and RIP1 in embryos and lymphocytes // Nature. - 2011. - V. 471. - P. 373-376

249. Ziegler-Heitbrock L. The CD14+ CD16+ blood monocytes: their role in infection and inflammation // J. Leukoc Biol. - 2007. - V. 81. - P. 584-592

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает глубокую признательность своим научным руководителям Калачевой Наталии Васильевне, кандидату химических наук, старшему научному сотруднику кафедры микробиологии Казанского (Приволжского) федерального университета и Черепневу Георгию Валентиновичу, доктору медицинских наук, профессору, заведующему лабораторией иммунологии Республиканской клинической больницы РТ за ценные идеи и советы в процессе выполнения диссертационной работы.

Благодарность выражается

Филиппову Андрею Васильевичу, доктору физико-математических наук, профессору кафедры молекулярной физики Казанского (Приволжского) федерального университета - за предоставленную возможность измерения параметров фазового перехода БРРС на дифференциальном сканирующем калориметре,

Коноваловой Ольге Анатольевне, кандидату физико-математических наук, доценту кафедры оптики и нанофотоники Казанского (Приволжского) федерального университета - за плодотворное сотрудничество и получение высококачественных АСМ-изображений, а также

Ширшикову Фёдору Владимировичу - за помощь в оформлении рисунков к диссертации.