Значение клинико-биохимических показателей в прогнозе течения диабетической ретинопатии и экспериментальное обоснование применения ликопина для их коррекции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат медицинских наук Григорьев, Андрей Владимирович

• Григорьев, Андрей Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Григорьев, Андрей Владимирович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Основные патогенетические звенья развития диабетических микроангиопатий.

1.1.2.Нарушение углеводного обмена при сахарном диабете.

1.1.3. Нарушение липид-транспортной системы крови.

1.1.4. Протеолитические ферменты при сахарном диабете.

1.1.5. Ренин-ангиотензиновая система и её роль в развитии диабетической ретинопатии.

1.2. Каротиноид ликопин - свойства и функции.

Экспериментальные модели сахарного диабета, используемые для изучения ретинопатии.

I.4.Диагностика и лечение диабетической ретинопатии.

ГЛАВАМ. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

II.1. Общая характеристика обследованных больных

П.2. Общая характеристика экспериментального материала Н.З.Общая характеристика использованных методов.

11.3.1. Методы забора материала для исследований.

11.3.2. Препаративное ультрацентрифугирование плазмы крови для выделения липопротеидов различных классо.

11.3.3. Экспериментальные модели и биохимические тесты.

Моделирование аллоксанового диабета у кроликов.

Определение содержания глюкозы в сыворотке крови.

Определение содержания глюкозы в слёзной жидкости кроликов глкжозооксидазным методом.

Определение содержания гликозилированного гемоглобина в крови пациетов с пролиферативной диабетической ретинопатией.

Определение липидного состава сыворотки крови пациентов с диабетической ретинопатией и кроликов с экспериментальным аллоксановым диабетом.

Определение концентрации ТБК-активных продуктов в сыворотке крови.

Определение антиокислительной активности сыворотки крови.

Методы измерения трипсиноподобной, антитриптической активности и уровня а2- макроглобулина в сыворотке крови и слезной жидкости пациентов с диабетической ретинопатией и кроликов.

Определение активности ангиотензин-превращающего фермента в слёзной жидкости и сыворотке крови кроликов.

Определение концентрации белка в сыворотке крови и слёзной жидкости.

Определение концентрации ликопина в липопротеидах сыворотки крови.

Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА III. ИЗУЧЕНИЕ КЛИНИКО-БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У БОЛЬНЫХ И КРОЛИКОВ С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ДИАБЕТОМ. (РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ).

III. 1.Связь показателей липидного и белкового обмена у группы больных пролиферативной диабетической ретинопатией. II 1.1.1 Общая группа

III.1.2. Показатели протеиназно-ингибиторного баланса крови и типы гиперлипопротеидемий при кровоизлияниях в стекловидное тело.64 ИИ.З.Показатели протеиназно-ингибиторного баланса крови и ги-перлипопротеидемии при наличии "твердых" экссудатов в сетчатке.

III.2.Исследование биохимических показателей крови и слезной жидкости кроликов, и состояния микрососудистого русла перилимбальной зоны и сетчатки в динамике развития экспериментального диабета и на фоне применения ликопин-содержащего препарата.

111.2.1. Состояние микрососудов перилимбальной зоны и сетчатки.

Ш.2.2. Глюкоза в сыворотке крови и слезной жидкости.

Ш.2.3.Показатели протеиназно-ингибиторного баланса в сыворотке крови и слезной жидкости.

Ш.2.4.Показатели окислительной и антиокислительной активности крови.

Ш.2.5.Активность ангиотензин-превращающего фермента в крови и слезной жидкости.

Ш.2.6.Показатели липид-транспортной системы крови.

Ш.З.Изучение распределения ликопина в липопротеидах плазмы крови человека.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Значение клинико-биохимических показателей в прогнозе течения диабетической ретинопатии и экспериментальное обоснование применения ликопина для их коррекции»

В последние годы практически во всех странах отмечается неуклонный рост заболеваемости сахарным диабетом. Как причина смерти сахарный диабет (СД) занимает третье место после болезней сердечно-сосудистой системы и онкологических заболеваний. По данным ВОЗ в настоящее время в мире насчитывается более 150 млн. больных, страдающих этим недугом. Распространенность СД в промыш-ленно-развитых странах составляет 4-5%, и ежегодно число больных увеличивается на 5-7%, а каждые 10-15 лет удваивается [5]. В России в течение последних лет зарегистрировано более 2 млн. больных, и ежегодный прирост за последние 5 лет составляет 5%. Эпидемиологические исследования, проведенные в Москве и по России в 90-ч годах XX века, показывают, что истинное количество больных СД в России составляет около 6-8 млн. [13,14,36, 37].

Диабет характеризуется нарушением обменных процессов, приводящих к макро- и микроангиопатиям, которые в конечном итоге являются непосредственной причиной развития тяжелых осложнений и смерти [44]. Диабетическая ретинопатия (ДР) является одной из наиболее частых и прогностически неблагоприятных проявлений диабетических микроангиопатий [17, 18, 22, 34]. Диабетическая ретинопатия до сих пор остается основной причиной развития слепоты не только при инсулинзависимом СД (ИЗСД, СД I типа), но также и при инсулин-независимом СД (ИНСД, СД II типа). Эпидемиологические исследования свидетельствуют, что ДР развивается у 50-98% пациентов, страдающих СД более 15 лет [5, 57, 58, 62]. У 15,2% больных СД слепота развивается вследствие прогрессирования ДР, и около 5-10% больных СД через 20 лет полностью теряют зрение [57, 62].

Основными методами -профилактики слепоты, развивающейся вследствие ДР, являются максимально стабильная компенсация углеводного обмена у больных СД и своевременная лазеркоагуляция сетчатки [13, 14]. Лазеркоагуляция сетчатки остается и сегодня единственно эффективным способом лечения ДР, что подтверждено рядом б исследований [85, 86]. Этот, хирургический по своей сути, метод эффективен в плане предотвращения дальнейшего ухудшения зрения, но не приводит к его улучшению. При далеко зашедшей ДР эффективным может быть лишь хирургическое вмешательство на стекловидном теле - витрэктомия. Но следует отметить, что потенциальный риск осложнений при витрэктомии (отслойка сетчатки, катаракта, не-оваскулярная глаукома, кровоизлияния и послеоперационные инфекционные осложнения) достаточно высок [81, 82, 137]. По результатам проспективных исследований было установлено, что достижение нормального уровня глюкозы в крови при СД и предотвращение развития ДР осложнено с одной стороны ограниченностью терапевтического выбора, а с другой - индивидуальными (психо-эмоциональными) особенностями больных. Хороший контроль прогрессирования СД с помощью интенсивной инсулинотерапии дается высокой ценой с возрастанием риска возникновения гипогликемии. Даже при интенсивной терапии лишь у 5% пациентов достигается нормальный уровень глико-зилированного гемоглобина, что является необходимым условием эффективной профилактики диабетических осложнений. Таким образом, практически во всех случаях лечения СД в настоящее время невозможно предотвратить развитие диабетических осложнений, а ДР остается основной причиной развития слепоты [5, 13, 58].

В 1990г. Сент-Винсентская декларация определила задачей современной диабетологии снижение частоты всех осложнений диабета с помощью социальных программ и обязательного регулярного скрининга для выявления ранних осложнений и своевременного их лечения для всех больных СД [183]. Поэтому разработка методов поддержания зрительных функций у больных СД на ранних стадиях ретинопатии, а также работа по прогнозированию и профилактике развития осложнений ДР являются актуальными задачами современной офтальмологии. В дополнение к оптимизации основной противо-гликемическоой терапии, проблема предотвращения диабетических осложнений остается ключевой в разработке методов по улучшению прогноза и качества жизни больных диабетом. 7

Гипергликемия при сахарном диабете является ведущим фактором, обуславливающим изменения в различных метаболических системах, и приводящим к развитию функциональных и структурных изменений в сосудах, в том числе в микрососудах сетчатки. Развитие ишемии сетчатки в первую очередь связывают с накоплением внутриклеточного сорбитола, но и другие обменные нарушения, в том числе в структуре липопротеидов крови, усугубляют поражения сетчатки при СД [18, 138, 134].

Вопрос о том, можно ли только путем хорошего гликемического контроля задержать развитие диабетической ретинопатии остается дискутабельным. Многолетние проспективные исследования, проводимые в различных странах по контролю за лечением больших групп больных СД, не дают однозначного ответа на этот вопрос [117, 118, 119], с одной стороны по причине неясности его патогенеза, а с другой из-за присутствия значительного числа сочетанных осложнений и сопутствующих заболеваний. Одну из ведущих ролей в патогенезе ДР играют процессы активации свободно-радикального окисления, приводящие к структурным и функциональным нарушениям клеточных мембран и мембраноподобных структур [30]. Поэтому, представляется весьма важным изучение процессов торможения развития ПОЛ при СД и повреждения мембран эндотелия сосудов сетчатки с помощью жирорастворимых антиоксидантов, способных встраиваться в мембраны форменных элементов крови, эндотелия и липопротеидов. Безусловно, к таковым относятся токоферолы и каратиноиды. Среди последних, ликопин характеризуется высокой антиокислительной активностью, не токсичностью и выраженным гиполипидемическим эффектом [23, 24, 40].

Цель работы: исследовать взаимосвязь между развитием проявлений диабетической ретинопатии, приводящих к снижению зрения, и характером изменения клинико-биохимических показателей крови, и экспериментально изучить целесообразность применения антиоксидантов для коррекции метаболических нарушений, участвующих в развитии ДР.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить у больных пролиферативной диабетической ретинопатией взаимосвязь между характером изменения клинико-биохимических показателей крови и наличием проявлений диабетической ретинопатии, ведущих к снижению зрения (гемофтальм и "твердые" экссудаты в сетчатке).

2. На ранних стадиях экспериментального аллоксанового диабета у кроликов изучить метаболические изменения в крови и слезной жидкости и состояние микрососудов глаза.

3. Оценить влияние ликопина на состояние микрососудов глаза и биохимические показатели крови и слезной жидкости у кроликов на ранних стадиях экспериментального аллоксанового диабета.

4. Изучить влияние ликопина на липопротеиды плазмы крови человека при его пероральном поступлении в организм.

Научная новизна. Показано существование корреляции между проявлениями СД (гемофтальм, "твердые" экссудаты), ведущими к потере зрения, и характером изменения в крови показателей липидного обмена и протеиназно-ингибиторного баланса. На ранних стадиях экспериментального аллоксанового диабета у кроликов выявлено, что на фоне нарушения состояния микрососудов глаза происходит изменение активности протеолитических ферментов и основных плазменных ингибиторов протеаз, активности ангиотензин-превращающего фермента в крови и слезной жидкости, а так же показателей липид-транспортной системы крови. Установлено нормализующее влияние на состояние микрососудов глаза и на исследуемые биохимические показатели диеты, обогащенной ликопином.

Практическая значимость. Сопоставление характера изменений клинико-биохимических показателей крови и слезной жидкости с клиническими проявлениями диабетической ретинопатии позволили определить круг клинико-биохимические критериев для оценки риска снижения зрительных функций при СД.

На основании изучения на модели аллоксанового диабета у кроликов метаболических изменений в крови и слезной жидкости, состояния микрососудов глаза и влияния на них препарата, содержащего ли-копин, сформулированы рекомендации по включению в комплексную терапию СД препаратов, содержащих ликопин. Результаты экспериментального исследования показали, что при приеме ликопина на ранних стадиях СД снижается интенсивность ПОЛ, нормализуются показатели липидного обмена, протеиназно-ингибиторный баланс в крови и слёзной жидкости, снижается в крови активность АПФ и улучшается состояние капиллярной сети конъюнктивы.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Григорьев, Андрей Владимирович

выводы

1. На ранних стадиях экспериментального аллоксанового диабета (до 3-х месяцев) развиваются, характерные для сахарного диабета капиллярные микроангиопатии в перилимбальной зоне. В крови происходит: а) усиление процессов перекисного окисления липидов со снижением антиокислительной активности, б) увеличение активности трипсиноподобных ферментов и ангиотензин-превращающего фермента, сопровождающееся постепенным увеличением антипротеолитической активности, в) увеличение содержания общего холестерина и триглицеридов. В слезной жидкости увеличивается концентрация глюкозы, активность трипсиноподобных ферментов и ангиотензин-превращающего фермента.

2. При экспериментальном аллоксановом диабете под влиянием диеты, обогащенной ликопином, отмечено снижение выраженности микроангиопатий в перилимбальной зоне глаза; уменьшение интенсивности перекисного окисления липидов на фоне значительного усиления антиокислительной активности крови; нормализация показателей липидного обмена и некоторых показателей протеиназно-ингибиторного баланса в крови и слезной жидкости; уменьшение активности ангиотензин-превращающего фермента в крови.

3. У больных с пролиферативной диабетической ретинопатией при наличии в сетчатке гемофтальма и "твердых" экссудатов в крови значительно возрастает трипсиноподобная активность, а при гемофтальме уровень а2-макроглобулина, в сочетании с гиперлипидемией Пб и IV типа.

4. Ликопин при пероральном поступлении в организм в крови связывается преимущественно с липопротеидами низкой плотности и приводит к значительным изменениям в системе транспорта и межтканевого обмена липидов крови, что сопровождается достоверным снижением уровня общего холестерина.

5. Полученные данные указывают на целесообразность включения препаратов, содержащих каротиноид ликопин, в комплексную терапию больных сахарным диабетом для поддержания зрительных функций.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендуется включение в клинико-биохимическое обследование больных СД определение трипсиноподобной активности и основных плазменных ингибиторов протеолиза в сочетании с определением типа гиперлипидемий для прогноза неблагоприятного развития ДР.

2. В качестве средства для профилактики метаболических нарушений при СД, ведущих к развитию ДР и соответственно снижению зрения, рекомендуется прием каротиноида ликопина.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Григорьев, Андрей Владимирович, 2005 год

1. Александровский А .Я. // Молекулярные механизмы развития диабетических осложнений. // Биохимия. 1998. -Т.63. - вып.11. -С.1470-1479.

2. Андреева Л.И., Кожемякин, Кишкун A.A. // Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобаобитуровой кислотой. //Лабораторное дело. -1988.-№11,- С.41-43.

3. Аронов Д.М. // Лечение и профилактика атеросклероза. // Москва. Издательство "Триада-Х", 2000. С.412.

4. Астахов Ю.С., Шадричев Ф.Е., Лисочкина А.Б. // Проблемы диагностики и лечения диабетической ретинопатии. // Ученые записки. 1997. - Т.4. - №1. - С. 74-81

5. Балаболкин М.И. Диабетология. М.: Медицина, 2000, С.434-435.

6. Баранов Б.Б. Экспериментальный диабет. Роль в клинической диабетологии. Л.: Наука, 1983.

7. Бобырев В.Н. // Свободнорадикальное окисление в патогенезе заболеваний, сопряженных со старением. // Патофизиология. -1989-№5-С. 90-94.

8. Бобырев В.Н., Почерняева В.Ф., Думенко И.Л., Бобырева Л.Н. // Свободнорадикальные процессы в патогенезе аллоксанового диабета.// Проблемы эндокринологии. 1992. -т.38. - №6. - С.55-57.

9. Ю.Владимиров Ю.А., Азизова O.A., Деев А.И. // Свободные радикалы в живых системах. // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. Москва -1991 -Т. 29 С.249.

10. Гулидова О.М., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Чеснокова Н.Б.

11. Измерение антиокислительной активности слезной жидкости при экспериментальной ожоговой болезни глаз. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. -Т. 128. -№11. -С.571-574.

12. Гуревич B.C., Шаталина Л.В. с соавт. // Роль холестерина в активации перекисного окисления липидов в тромбоцитах. // Биохимия. 1992. - Т.57. - вып.2. - С.267-275.

13. Досон Р., Д. Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс. Справочник биохимика. М: Мир,1991, С. 196.

14. Елисеева Ю.Е., Орехович В.Н., Павлихина Л.В. Биохимия.1976.Т.41,№3,С.506-512.

15. Ефимов A.C. // Некоторые аспекты патогенетической терапии диабетических ангиопатий. // Клиническая медицина. 1994. - №1,-С.20-23.

16. Ефимов A.C. Диабетические ангиопатии. М.: Медицина, 1989. - С.288.

17. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньщикова Е.Б. // Окислительный стресс. Биохимический и патофизиологический аспекты. // МАИК "Интерпериодика" 2001 - С. 246.

18. Капитанов А.Б., Пименов A.M. // Каротиноиды как антиокси-дантные модуляторы клеточного метаболизма. // Успехи современ101ной биологии. 1996 - Т. 116 - Вып. 2 - С. 179 - 193.

19. Кацнельсон Л.А., Фарофонова Т.И., Бунин А .Я. Сосудистые заболевания глаза. М., 1990.

20. Клебанов Г.И., Капитанов А.Б., Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Жамбалова Б.А., Любицкий О.Б., Нестерова O.A., Васильева О.В., Попов И.Н., Левин Г., Владимиров Ю.А. // Антиоксидантные свойства ликопина // Биол. мембраны. 1998. Т. 15., № 2, С. 227-237.

21. Клебанов Г.И., Олферьев A.M., Ильина М.В., Капитанов А.Б., Кисанова H.H. // Томатол новая пищевая добавка антиоксидантного действия. // Medica altera. -2001. - май - С. 13-15.

22. Княжев В.А., Суханов Б.П., Тутельян В.А. // Правильное питание. Биодобавки, которые вам необходимы. // ГЭОТАР Медицина, Москва, -1998- С. 204.

23. Князева Л.И. Внутрисосудистые и внесосудистые показатели нарушения микроциркуляции у больных сахарным диабетом. Автореферат канд. дис. М.: 1983.

24. Комаров Ф.И., Нестеров А.П., Бровкина А.Ф. Патология органа зрения при общих заболеваниях. М., 1982.

25. Кост O.A., Чеснокова Н.Б., Кузнецова Т.П. // // Вопросы медицинской химии. 1996. - Т.2. - №2. - С. 130-134.

26. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М. -1980. С.224-226.

27. Кубатиев A.A., Андреев C.B. // Перекиси липидов и тромбоз. Бюлл. Эксперим. Биол. и мед. 1979 - № 5 - С. 414-17.

28. Кухарчук В.В. // Атеросклероз. Актуальные вопросы профилактики и лечения. // Кардиовскулярная терапия и профилактика. 2003. Т.2, № 3, С.80-85.

29. Лабораторные методы исследования в клинике / Под ред. В.В.Меньшикова. M.: 1987.-С.230-234.

30. Маянский А.Н., Пикуза О.И. Клинические аспекты фагоцитоза.1. Магариф. Казань.

31. Нестеров А.П. // Роль местных факторов в патогенезе диабетической ретинопатии. // Вестник офтальмологии. 1994. -№4. - С.7-9

32. Нестерова O.A. Антиоксидантные и гиполипидемические свойства ликопина // Диссертация на соискание ученой степени к.б.н., Москва, 1997

33. Оганов Р.Г., Сидоренко Б.А., Грацианский H.A., Перова Н.В., Лякишев A.A. Клиническое значение гиперхолистеринемии и ее коррекция. Кардиология 1991, т.12., С.95-112.

34. Орехович В.Н., Локшина П.А, Елесеева O.E., Павлихина Л.В. //Роль протеолитических ферментов в регуляции физиологических процессов// Вестник АМН СССР.-1984.-№8.-С.З-11.

35. Панченко Е.П., Добровольский А.Б. // Тромбозы в кардиологии. Ме103ханизмы развития и возможности терапии. Москва, 1999.

36. Соколов Е.И. Сахарный диабет и атеросклероз. // Москва, "Наука", -1996.

37. Соколова Е., Шамарин В., Джибладзе Д., Перова Н., Берзак Н., Олферьев А., Тимофеева С., Кукушкин С. // Сочетание окклюзирующего поражения сонных артерий, коронарной болезни и нарушений липидного обмена. // Кардиология. 1999 - Т. 39,- № 10

38. С.15есШкин Ю.А., Бабенкова И.В., Любицкий О.Б. // Вопросы медицинской химии. 1990.-Т.36. - №3. - С.87-93.

39. Хегай М.Д., Зайчик С.Е. // Перекисное окисление липидов и гликозилирование белков в аорте кроликов с аллоксановым диабетом при инсулинокоррекции // Патолог. Физиология и эксперим. Терапия. 1995. -№4. - С.6-7.

40. Шашкина М.Я., Шашкин П.Н., Сергеев А.В. // Биодоступность каротиноидов. // Вопр. Мед. Химии. 1999. - Т.45. - вып.2. -С. 105115.

41. Шевченко О.П., А.О. Шевченко. // Статины ингибиторы ГМГ-КоА-редуктазы. //Реафарм. Москва. 2003. С. 112.

42. Шерстнев М.П., Сергиенко В.И. // Хемилюминесценция эритроцитов, насыщенных холестерином, в присутствии перекиси водорода. // Биофизика. 1982. - №2. - С.335-336.

43. Abbate S.L., Brimzel J.D., // Pathophisiology of hyperlipidemia in diabetus mellitus. //J. Cardiol. Pharm., 1990. -V. 16-P. S1-S7.

44. Akadi Y., Kador P.F., Kawabara T. // Aldose reductase localization in human retinal mural cells. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1983. -N24. -Pr1516-19.

45. Akadi Y., Terubayashi H., Millen J., Kador P.F. //Aldose reductase localization in dog retinal mural cells. // Curr. Eye Res. 1986. - N5. -P.833-86.

46. Assman G., Schriewer H., Schmitz G., Hagele E-O. // Quantification of high-density lipoprotein cholestrol by precipitation with phosphotungstic acid MgCl2- //Clin. Chem. 1983. - Vol.29. - N12. - P. 2026-2030.

47. Baynes J.W. // Role of oxidative stress in development of complications in diabetes mellitus // Diabetes. 1991. - Vol.40. P.405-12.

48. Berger H. // Diabetes and its complications may be caused by inadequate circulation. A new concept. // Med. Hypoth. 1993. - Vol.40. - N5. - P. 259-61.

49. Bobak M., Hense H.W., Kark J. An ecological stady of determinants of coronary heart disease rates: a comparison of Czech, Bavarian and Israeli men. Int.J. Epidimiol. 1999; 28(3).P. 437-444.,

50. Brandt C.R., Pumfery A.M., Micaeles B., Bindley C.D., et al.// Renin105mRNA is synthesised locally in rat ocular tissues.// Current Eye Reserche -1994.-Vol. 13. P.755-763.

51. Brasil-Vita J., Anderson J.A., Hulem C.D.// ACE activity in ocular fluids.// Investgative Ophtalmology Visual Science//-1981.-Vol.20.1. P.2555-2557.

52. Brinchmann-Hansen O., Dahl-Jorgensen K., Sandvik L., Hanssen K.F. // Blood glucose concentrations and progression of diabetic retinopathy: the seven year results of the Oslo study. // BMJ. 1992. -Vol. 304. (6818)-P. 19-22.

53. Britton G. // Carotenoids in chloroplast pigment-protein complex. // In: Pigment-protein comlex in plastids: syntesis and assembly. (Eds.: Sundqvist C., Ryberg M.) Acad. Press, San Diego, - 1993- P. 447-484.

54. Brownlee M., Cerami A. // The biochemistry of the complications of diabetes mellitus //Annu Rev Biochem. 1981 - 50 - P.385-432.

55. Brownlee M., Cerami A., Vlassara H. // Advanced glucosylation end prodacts in tissue and the biochemical basis of diabetic complication // New Engl. J. Med. 1988.- N318. - P.1315-21.

56. Brownlee M., Vlassara H., Cerami A., // Nonenzymatic glycosylation reduces the susceptibility of fibrin to degradation by plasmin.// Diabetes. 1983. - Vol.32. - N 7. - P.680-4.

57. Bucolo G., David H. // Quantitative determination of serum triglycerides by the use of enzymes. //1973, 19, p. 476-482.

58. Bunn HF, Gabbay KH, Gallop PM. // The glycosylation of hemoglobin: relevance to diabetes mellitus. // Science. 1978. - Vol.7. -N200.-P.21-7.

59. Cantrell,-A; McGarvey,-D-J; Truscott,-T-G; Rancan,-F; Bohm,-F // Singlet oxygen quenching by dietary carotenoids in a model membrane environment. //Arch-Biochem-Biophys. 2003-Apr 1; 412(1): 47-54

60. Carmo A., Lopes C., Santos M., et al. // Nitric oxyde synthase activity and L-arginine metabolism in the retina from streptozotocineinduced diabetic rats. // Gen. Pharmacol. 1998. - Vol.30. - N3.-P.319-24.

61. Carrell R.W., Owen M.C. // Plakalbumin, alpha 1-antitrypsin, antithrombin and the mechanism of inflammatory thrombosis. // Nature. -1985.-N317.-P.730-32.

62. Ceriello A., Giugliano D., Quatraro A. //Acute hyperglycemia induces nitrotyrosine formation and apoptosis in perfused heart from rat. // Diabetes. 2002. - N.4. - P. 1076-82.

63. Cerielo A., Quararo A., Giulgliano D. // Metabolic control may influence the increased speroxide anione generation in diabetic serum. // Diabet. Med. 1991. - Vol.8. - P.265-66.

64. Clinton S.K., Emenhiser C., Erdman J.W.Jr. // Cis-trans isomers, carotinoids, and retinol in the humane prostate. // Cancer epidemiol. Biomarkers prev. -1996 . Vol.5. - N10. - P.823-833.

65. Conn P.F., Schalh W., Truscott T.G. // The singlet oxigen and carotenoids interaction. // J. Photochem. Photobiol. Part B. Biology. -1991-Vol.11 -N.1-P. 41-47.i

66. Costa A., Igual I., Bedini J., Quinto L., Conget I. // Uric acid concentration in subjects at risk of type 2 diabetes mellitus: relationship to components of the metabolic syndrome // Metabolism. 2002. - Vol. 51. -N. 3 - P. 372-375.

67. Danser A.H.J., Dorpel M.A., Franken A.A.M. et al. // Renin, prorenin and immunoreactive renin in vitreous fluid from eyes with and without diabetic retinopathy // Journal Clinical Endocrinology Metabolisme.-1989.-Vol.68.-P. 160-166.

68. Deinum J., Derkx F.H., Danser A.H., Schalekamp M.A. // Identification and quantification of renin and prorenin in the bovine eye. // Endocrinology. 1990. - Vol.126. - P.1673-1682

69. Diabetes Control and Complication Trial. // The relationship of glicemic exposure to risk of development and progression of retinopathy in the diabetes control and complication trial. // Diabetes. 1995. - N44. - P.968-83.

70. Diabetic rethinopathy vitrectomy study research group early vitrectomy for severe vitreous hemorrage in diabetic rethinopathy. // Diabetic rethinopathy vitrectomy study report №5 // Arch. Ophthalmol.1990.-№108.-P.958.

71. Ditzel J. // Functional microangiopathy in diabetes mellitus. // Diabetes. 1968. - Vol. 17. - P.388-97.

72. Dvornik D., Simrad-Duquesne N., Krami N. // Polyol accumulation in galactosemia and diabetics rats. Control by an aldose reductase inhibitor. //Science. 1973. - Vol.182. - P.1146-47.

73. Early Treatment Diabetic Retinopathy Study Research Group. // Early Treatment Diabetic Retinopathy Study Research design and baseline patient caracteristics. ETDRS report №7 // Ophthalmology.1991. N.98. - P.741-56.

74. Ehlers M.R.W., Riodan J.F. // Angiotensin-converting enzyme: new concepts concerning its biological role. // Biochemistry. 1989. - Vol.28.1081. P.5311-5318.

75. Engerman R.L., Kern T.S. // Experimental Diabetic retinopathy in dogs. // Arch. Ophthal. 1965. - Vol. - N3. - P.209-11.

76. Erdos E.G. // Kinins, the long march a personal view. // Cardiovasc Res. -2002. - Vol.54. - N3. - P485-91.

77. Fang.L., Pajkovic. N., Wang. Y., Gu. C., van-Breemen. R. B. // Quantitative analysis of lycopene isomers in human plasma using highperformance liquid chromatography-tandem mass spectrometry // Anal-Chem.,- 2003 V. 15; N. 75(4), 812-817.

78. Ferrari-Dileo G., Ryan J.W., Rockwood E.J. //Angiotensin converting enzyme in bovine? Feline and human ocular tissues // Investgative Ophtalmology Visual Science.-1988.-Vol.29.-P.876-881

79. Ford,-E-S; Mokdad,-A-H; Giles,-W-H; Brown,-D-W. // The metabolic syndrome and antioxidant concentrations: findings from the Third National Health and Nutrition Examination Survey.// Diabetes. 2003 Sep; 52(9): 2346-52.

80. Friedwald W.T., Levy R.I., Fredrickson D.S. // Estimation of the concentration of low density lipoprotein cholesterol in plasma without use preparative ultracentrifuge. // Clinical Chemistry. 1972. - Vol.18. -P.499.

81. Frusciante,-L; Barone,-A; Carputo,-D; Ercolano,-M-R; della-Rocca,-F; Esposito,-S. // Evaluation and use of plant biodiversity for food and pharmaceuticals.// Fitoterapia. 2000 Aug; 71 Suppl 1: S66-72

82. Fuhrman B, Oiknine J, Aviram M. // Iron induces lipid peroxidation in cultured macrophages, increases their ability to oxidatively modify LDL, and affects their secretory properties.// Atherosclerosis. 1994. -Vol.111.-N1.-P.65-78.

83. Gabbay K.H. // Glycosylated hemoglobin and diabetes mellitus. // Med. Clin. North. Am. 1982. - Vol.66. - N6. -P. 1309-15.

84. Garcia Trade L.J., de la Calle H., Alava I., Navarro J.L., Creight109

85. J., Gafney L.J. // Diabetus mellitus as an hypercoagulable state: its relationship with fibrin fragments and vascular damage. // Thromb. Res. -1987-Vol. 47,-P. 533-540.

86. Gavioli R., Spisani S., Traniello S. // Dual mechanism in induction of human neutrophil cytotoxicity: activation of protein kinase C and elevation in intracellular calcium. // Clin. Exp. Immunol. 1990. - Vol.80.- N2. P.247-51.

87. Goel A.K., Jabbour N.M.// Vitreous levels of angeotensin II in patients with diabetic retinopathy // Investgative Ophtalmology Visual Science.-1991 .-Vol.32.-P. 1027.

88. Goldstein J.L., Basu S.K., Brown M.S. // Receptor-mediated endocytosis of low density lipoprotein in cultured cells. // Meth. Enzymol. -1983-Vol. 98-P. 241-260.

89. Green D.A., Lattimer S.A., Sima A.A. // Sorbitol, phosphoinositides and sodium-potassium-ATPase in the pathogenesis of diabetic complications // N. Eng. J. Med. 1987. - Vol. 316. - P.599-606.

90. Grigoryev A.V., Nesterova O.A., Olferiev A.M., PimenovA.M., Chesnokova N.B., Perova N.V. // Effect of "Tomatol" on human serum lipoprotein. // Abstr. Of the XI Intern. Symp. Of Atherosclerosis, Paris. -1997.-P.206.

91. Guenther E., Schmid S., Hewing B.,// Two-fold effect of angiotensin II on voltage-dependent calcium currents in rat retinal ganglion cells // Brain Reserch.-1996.-N29.-Vol.718.-P. 112-116.

92. Heber,-D; Lu,-Q-Y. // Overview of mechanisms of action of lycopene. // Exp-Biol-Med-(Maywood). -2002- Nov; 227(10): 920-3

93. Higgins PJ, Garlick RL, Bunn HF. // Glycosylated hemoglobin in human and animal red cells. Role of glucose permeability. // Diabetes. -1982. -Vol.31. -N9. P.743-8.

94. Hohman T.C., Nishimura C., Robinson W.G. // Aldose reductase and poliol in cultured pericytes of human retinal capillaries. // Exp. Eye res. 1989. - N49. - P.55-60.

95. Hohman T.C., Nishimura C., Robinson W.G. //Aldose reductase in cultured human and canine retinal capillary pericytes. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1986. - N40. - P.439-44.

96. Idem. The pathogenic role of nonenzymatic glycosilation in diabetic complication. In: Crabble M.J.C., ed. Diabetic complications: scintific and clinical aspects. London: Churchill Livingstone. 1987. P.94-139.

97. Juklies B., Eckstein A., Jacobi P., Kohler K. // The renin-angiotensin system a possible neuromodulator in the humam retina. // Germany journal Ophthalmology. 1995.-Vol.4. - P. 144-150.

98. Kador P.F., Akadi Y., Takahashi Y., Wyman // Prevention of retinal vessel changes associated with dibetic retinopathy in galactose-fed dogs by aldose redutase inhibitors //Arch. Ophthalmol. 1990 - Vol.108.1. P.1301-09.

99. Kennedy L., Mehl T.D., Elder E., // Nonenzymatic glycosylation of serum and plasma proteins. // Diabetes 1982. - V.31. - P.52-56.

100. Kern TS, Engerman RL. // Vascular lesions in diabetes are distributed non-uniformly within the retina.// Exp. Eye res. 1995. - Vol. 60. - N5. P.545-9.

101. Klein R. // Hyperglycemia and microvascular and macrovascular disease in diabetes. // Diabetes Care. 1995. - Vol.18. - N2. - p.258-68.

102. Klein R., Klein BEK, Moss S.E. // The Wisconsin Epidemiologic Study of Diabetic retinopathy. XIV. Ten year incidence and progression of diabetic retinopathy//Arch. Ophthalmol. 1994. - N112. - P.1217-28.

103. Klein R., Klein BEK, Moss S.E., et al. //The relationship of hyperglycemia to long-tem incidence and progression of diabetic retinopathy//Arch. Intern. Med. 1994. - N154. - P.2169-78.

104. Kortlandt W., Benschop C., van Rijn H.J., Erkelens D.W. // Glycated low density lipoprotein catabolism is increased in rabbits with alloxan-induced diabetes mellitus. // Diabetologia. 1992. - Vol.35. - N3. - P.202-7.

105. Krinsky N.I. // Antioxidant function of carotenoids. // Free Rad. Biol. And Med. 1989-V.7, N.6, P. 617-635.

106. Krisky N.I. // Actions of carotcarotinoids in biological systems. // Ann. Rev. Nutr. 1993. - Vol.13. - p.561-87.

107. Kulkarni P.S., Hamid H., Barati M. //Angiotensin ll-induced constrictions are masked by bovine retinal vessels. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. .-1999.-V.40. N3. - P.721-8.

108. Lindren F.T. In: "Analysis of lipids and lipoproteins", ed. by E.G.Perkins. Champaign, Amer. Oil Chemisists Soc. - 1975. - P. 204224.

109. Lip P.L., Jones A.F., Price N. // Do intraocular angiotensin II levels, plasma factors and endothelial dysfunction contribute to proliferative diabetic retinopathy//Acta Ophthalmology Scand/-1998.-Vol.76.-N5.1. P.533-536.

110. Livny,-0; Kaplan,-I; Reifen,-R; Polak-Charcon,-S; Madar,-Z; Schwartz,-B. // Lycopene inhibits proliferation and enhances gap-junction communication of KB-1 human oral tumor cells. // J-Nutr. -2002- Dec; 132(12): 3754-9

111. Lopes-Virella M.F., Klein R.L., VirellaG. // Modification of lipoproteins in diabetes. // Diabetes/Metabolism reviews. 1996. -Vol.12.-N1.-P.69-90.

112. Lorenzi M., Cagliero E., Markey B. // Interaction of human endothelial cells with elevated glucose concentrations and native and glucosylated LDL. // Diabetologia. 1984. - N26. - P.218-222.

113. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. //J. Biol. Chem., -1951 -N. 193-P. 265-75.

114. Lyons T.J. // Glycoation and oxidation. A roleof pathogenesis of atherosclerosis. //Amr. J. Cardiol. 1993. - V.77. - P. 1326-31.

115. McLeod D. // Entry site neovascularisation after diabetic vitrectomy // BJO. -2000. Vol.84. - N38. - P.810-81.

116. Minhthy L. Nguyen, J.Schwartz // Lycopene: Chemical and biological properties // Foodtechnology. 1999. - Vol.53. - N2. - P.38-43.

117. Moss S.E., Klein R., Klein BEK. //The 14-year incidence of vision loss in a diabetic population // Ophthalmology. 1998. - N105. - P.998-1003.

118. Naeser P., Brolin S.E., Eriksson U.F. // Sorbitol metabolism in retina studied in vitro. // Graefs Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1989. -N227.-P. 180-183.

119. Nakamura H., Hamaguchi K., Ono J. // The endocrine pancreas of alloxan-diabetic rats: microangiopathy as revealed by electron microscopy.// Diabetes Res Clin Pract. // Diab. Res. Clin. Pract. 1989. -Sep 18. -N7(3). -P. 169-79.

120. Nesto R.CHD: A major burden diabetes. Acta Diabetol. 2001; 38 (1).P.S3-S8.

121. Nilsson,-S-E; Sundelin,-S-P; Wihlmark,-U; Brunk,-U-T // Aging of cultured retinal pigment epithelial cells: oxidative reactions, lipofuscin formation and blue light damage. // Doc-Ophthalmol. 2003 Jan; 106(1): 136

122. Olson J.A. // Overview. Carotenoids and vitamin A. // Lipid-Soluble Antioxidants: Biochemistry and Clinical Application. Basel. Birkhauser Verlag.-1992- P. 178-192.

123. Ottlecz A., Bensaoula T., Eichberg J. // ACE activity in retinas of streptozotocin-induced and Zucker diabetic rats. // Investigative Ophthalmology Visual Science.- 1996.-Vol.37.-N11.-P.2157-2164.

124. Palozza P., Krinsky N.I. // Antioxidant effects of carotinoids in vivo and in vitro // Methods in Enzymology. N.Y., Acad. Press. 1992 - Vol. 213-P. 403-420.

125. Pecsvarady Z., Fisher T.C., Darwin C.H., Fabok A., Maqueda T.S., Saad M.F., Meiselman H.J. // Decreased polymorphonuclear leukocyte deformability in NIDDM. // Diabetes Care. 1994. - Vol.17. - N1. - P.57-63.

126. Pinzani P., Petruzzi E., Orlando C. // Serum antioxidant capacity in healthy and diabetic subjects. // J. biolumin. Chemilumin. 1990. -Vol.13.-P.321-25.

127. Pirags V., Assert R., Haupt K., Schatz H., Pfeiffer A. // Activation of human platelet protein kinase C-beta 2 in vivo in response to acute hyperglycemia. // Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 1996. - N104.1. P.431-440.

128. Pirags V., Assert R., Pfeiffer A. // Regulation of protein kinase C by short term hyperglycaemia in human platelets in vivo and in vitro. // Diabetologia. -2001. Vol.44. - N2. - P. 188-95.

129. Porte D.J., Schwartz M.W. // Diabetes complications: why isglucose potentially toxic. // Science. 1996. - Vol.272. - P.699-700.

130. Rand LI, Krolewski AS, Aielo LM, et al. // Multiple factors in the prediction of risk of proliferative diabetic retinopathy // New Engl. J. Med. -1985. -N313. -P.1433-8.

131. Rao K.M., Hatchell D.L., Cohen H.J., De La Paz M.A. // Alterations in stimulus-induced integrin expression in peripheral blood neutrophils of patients with diabetic retinopathy. //Am. J. Med. Sei. 1997. - Vol.313. N3. - P.131-7.

132. Rao,-A-V; Balachandran,-B. // Role of oxidative stress and antioxidants in neurodegenerative diseases. // Nutr-Neurosci. -2002 -Oct; 5(5): 291-309

133. Re R.N. // Cellular biology of the renin-angiotensin systems. // Arch.Intern.Med. -1984. Vol.144. - P.2037-2041.

134. Roeschlau P., Berndt E., Gruber W. // Enzymatische bestimmung des gesamtcholestrines in serum. // Z. Scand. Klin. Chem. 1974. - N12. -P. 226-231.

135. Romanchik E.J., Morel D.W., Harrison EH. // Distributions of carotenoids and alphatocopherol among lipoproteins do not change when human plasms is incubated in vitro. // J. Nutr. -1995- V. 125 N. 10. -P.2610-2617.

136. Sato A, Tamura R, Shirai T. // Diabetes mellitus with intractable bacterial infections. // Nippon Rinsho. 1994. - Vol.52. - N2. - P.389-94.

137. Sies,-H; Stahl,-W // Non-nutritive bioactive constituents of plants: lycopene, lutein and zeaxanthin. //: Int-J-Vitam-Nutr-Res. 2003 Mar; 73(2): 95-100.

138. Simmons D. A., Winegrad A.I. // Elevated extracellular glucose inhibits an adenosine-(Na+,K+)-ATPase regulatory system in rabbit aortic wall. // Diabetologia. 1991. - N34. - P. 157-63.

139. Sims T.J., Rasmussen L.M., Oxlund H., Bailey A.J. // The role of glycation cross-links in diabetic vascular stiffening // Diabetologia. -1996.-Vol.39.-P.946-51.

140. Sinnhuber R.O., Yu T.C. // 2-Thiobarbituric acid method for the mesurment of rancidity in fishery products // Food Tech. 1958. -Vol.24. -N.7-P.659-661.

141. Skeggs L.T., Dorer F.E., Kahn J.R. In: Biochemical Regulation of blood pressure. Ed. By Soffer R.L., Wiley, New York.-1981.-P.4-38.

142. Skeggs L.T., Dorer F.E., Kahn J.R.//The biochemistry of the renin-angiotensin system. //Adv. Exp. Med. Biol. 1980. - N130. - P.1-27.

143. Solomon L.R., Cohen K. // Erythrocyte 02 transport and metabolism and effects of vitamin B6 therapy in type II diabetes mellitus. // Diabetes. 1989. - Vol.38. - N7. - P.881-6.

144. Sosula L. // Capillar radius and wall thickness. // Microvasc. Res. -1974. Vol. 7. - N2. - P.274-276.

145. Stahl,-W; Sies,-H. // Carotenoids and protection against solar UV radiation. // Skin-Pharmacol-Appl-Skin-Physiol. 2002 Sep-Oct; 15(5): 2916

146. Stehouwer C.D.A., Schaper N.C. //The pathogenesis of vascular complications of diabetes mellitus: one voice or many? // Eur. J.Clin.1171.vest. -1996- N26. P.535-543.

147. Stevens V.J., Vlassara H., Abati A., Cerami A. // Nonenzymatic glycosylate of hemoglobin. //J. Biol. Chem. 1977. - Vol.10. - N252. -P.2998-3002.

148. Stevens V.J.,Roazer C.A., Monnier U.M. // Diabetic cataract formation, potential role of glycosylation of lens crystallins. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1978. - N75. - P.2918-22.

149. Takayama K., Nakano M., Zinner K., Vidigal C.C., Duran N., Shimizu Y., Cilento G. // Generation of electronic energy in the myoglobin-catalyzed oxidation of acetoacetateto methylglyoxal. //Arch. Biochem. Biophys. -1976. Vol.176. - N2. - P.663-70.

150. Velmurugan,-B; Bhuvaneswari,-V; Nagini,-S. // Antiperoxidative effects of lycopene during N-methyl-N.-nitro-N-nitrosoguanidine-induced gastric carcinogenesis. // Fitoterapia. -2002- Dec; 73(7-8): 604-11

151. Wallow I.H.L., Pumfery A.M., Brandt C.R., et al.// Ocular renin angiotensin: PCR and in situ hybridisation show renin synthesis in rat eye.// Investigative Ophthalmology Visual Science, 1994.-Vol.35-P.1787.

152. Weinreb R.N., Sandman R.,Ryder M.I., Friberg T.R. //Angiotensin converting enzyme activity in human aqueous humor. // Archive Ophthalmology.-1985.-Vol. 103.-P. 34-36.

153. Weisburger,-J-H. // Lycopene and tomato products in health118promotion.// Exp-Biol-Med-(Maywood). 2002 Nov; 227(10): 924-7

154. WHO/IDF Europe. // Diabetes care and research in Europe: the St. Vinsent Declaration. // Diabetic medicine. 1990. - №7. - C.360.

155. Wu,-K; Schwartz,-S-J; Platz.-E-A; Clinton,-S-K; Erdman,-J-W Jr; Ferruzzi,-M-G; Willett,-W-C; Giovannucci,-E-L/ // Variations in plasma lycopene and specific isomers over time in a cohort of U.S. men. // J-Nutr. 2003 Jun; 133(6): 1930-6

156. Zielgler R. In " Carotinoids in humen health". Eds. L.M.Ganfield, N.I.Krinsky. N.Y.: N.Y.Acad. Aci., 1993.-Vol.691. P. 110.