Значение биоспектрофотометрии нативной флуоресценции клеток покровных тканей и крови для медицинских исследований тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.13.01, кандидат биологических наук Сясин, Николай Иванович

• Сясин, Николай Иванович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Сясин, Николай Иванович

Введение.

Глава 1. Аутофлуоресценция, клеточное дыхание и современные возможности его неинвазивного исследования для оценки функционального состояния организма здоровых и больных людей (Обзор литературы).

1.1. Возможности использования аутофлуоресценции тканей и клеток в медицине при патологии дыхательной системы.

1.2. Значение изменений красного ростка крови в обеспечении функций внешнего и клеточного дыхания при заболеваниях дыхательной системы.

1.3 Нарушения внешнего и клеточного дыхания при неспецифических заболеваниях дыхательной системы и способы их определения.

1.4. Технологии оценки аутофлуоресценции и возможности спектрофотометрии в регистрации клеточного дыхания живых , биообъектов.

1.5. Значение эритроцитов в процессах биологического окисления

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика экспериментальных и исследовательских наблюдений.

2.2. Клннико-лабораторные наблюдения.:.А(> V

2.3.Приборная база и методы исследования клеточного дыхания.

2.3.Ход измерений и обработки результатов.

2.4. Методы статистической обработки.

Глава 3. Собственные исследования:

Экспериментальные исследования по оценке чувствительности и воспроизводимости спектров аутофлуоресценции живых биообъектов в зависимости от функционального состояния организма

Глава 4. Сопоставление изменений показателей внешнего и клеточного дыхания у больных с бронхиальной обструкцией и у практически здоровых людей.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Значение биоспектрофотометрии нативной флуоресценции клеток покровных тканей и крови для медицинских исследований»

Актуальность исследования.

Возросшие масштабы загрязнения окружающей среды различными отходами современных производств, техногенными электромагнитными излучениями и другими искусственно созданными человеком факторами среды способствуют возникновению существенных нарушений функций различных систем организма и состояния здоровья людей. Одной из ведущих причин смертности в промышленно развитых странах становится патология органов дыхания. Так, например, за последнее десятилетие смертность от хронических обструктивных1;:,болегме>?'легких (XQ6J1) выросла на 28 % [2, 107].

Болезни, входящие в группу XO?JI с годами прогрессируют [87, 113]. При этом накапливаются изменения в иммунной системе, функциональном статусе эритроцитов, возникают признаки аутоинтоксикаций, дизэргозов, нарушений функций газообмена- и биологического окисления (или клеточного дыхания) и гемореологические нарушения [37, 77, 122]. До сих пор, диагностика и наблюдение (мониторирование) за больными in situ и за изменениями дыхательных функций представляет во многом сложную' проблему [91, 92]. Ряд исследователей отмечает тесную связь между изменениями общесоматических функциональных показателей с симптоматикой ХОБЛ и выраженностью морфологических изменений в различных органах и системах, включая систему крови [87, 88]. Последняя оказалась высоко чувствительной к воздействию различных стресс-факторов [126, 136].

Установлено, что характер изменения функции дыхания при хронических заболеваниях зависит от реактивности организма конкретного человека. Важными компонентами такой реактивности являются ферментные системы, обеспечивающие клеточное дыхание, то есть процессы биологического окисления, сопряженные с энергообменом в покровных и внутренних тканях, а также клетках крови и, особенно, в ее самой многочисленной клеточной компоненте - эритроне [23, 26].

В последние годы определены зависимости основных функций эритроцитов и их движения по сосудам от электродинамических*/ механических и морфологических характеристик клеток. Установлено, что ч конфигурация эритроцитов в значительной степени влияет на кинетику крови в целом и имеет существенные связи с уровнем обмена веществ и энергии в тканях [43,45].

Изменение формы эритроцитов во многом определяет их структурнофункциональную полноценность, определяет реакцию эритроцитов в потоке < крови при воздействии на организм внешних электромагнитных полей, других физических факторов и при развитии патологии [31, 35,130, 153]. Показано, что между участками макро- и микрососудистого русла (мест основного функционирования эритроцитов) в здоровом организме имеют место гармоничные причинно-следственные отношения, которым I.W. Forrester дал название "петли обратных связей". В них, как в замкнутых цепочках взаимодействия, могут развиваться явления не тольк$„ находящиеся в связи с предшествующими событиями, но (по его мнению) и не находящиеся в такой связи. Указанные связи могут оказаться мишенями патологических процессов или внешних воздействий, способных влиять на дыхательную и другие системы и вызывать разнонаправленные реакции эритрона, изменения функций внешнего дыхания и газообмена в тканях [47, 63]. Так увеличение уровня гемоглобина и количества эритроцитов в крови наблюдаются в период адаптации человека к относительной гипоксии npiF нахождении в условиях Арктики, Антарктики или высокогорья и при длительном течении ХОБЛ [ 17, 18, 30 ].

Выраженное изменение числа циркулирующих по сосудистой системе эритроцитов, хотя и вызывает включение компенсаторных реакций (транзиторное усиление пролиферации эритроцитов и гиперплазию красного костного мозга и др.), но нередко, сопровождается нарушениями капиллярного кровотока (спазмами и парезами артериол, полнокровием венул, расширением капилляров со сладжированием и стазированиелг' кровотока в них). Подобные изменения микроциркуляции изменяют электрический заряд эритроцитов, активность характерных для них гликолитических процессов и ведут к изменениям их формы [3, 23]. В итоге, все это закономерно приводит к нарушению газообмена и клеточного дыхания различных тканей. Однако до сих пор конкретные характеристики нарушения этих процессов у больных исследованы недостаточно.

Ряд работ Б.Чанса и его последователей [94, 97, 108, 123] обусловил возможность использования биоспектрофотометрии для оценки функциональных изменений состояния клеточного дыхания живых клеток и -систем различного уровня организации с использованием их ультрафиолетового зондирования с последующим измерением их нативной флуоресценции (аутофлуоресценции). Однако в настоящее время лишь в небольшом числе исследований даются конкретные рекомендации nq„ использованию аутофлуоресценции для оценки изменения клеточного дыхания. Такие рекомендации практически отсутствуют для больных с бронхолегочной патологией, хотя фундаментальными исследованиями установлено, что нарушения процессов внешнего дыхания и газообмена и у таких больных закономерно приводят к изменениям обмена веществ на тканевом и клеточном уровне [47, 79].

В работах, в которых исследовались изменения функции внешнего" дыхания (ФВД) при XQ67I показано, что уменьшение ОФВь нарушение вентиляционно-перфузионных отношений, транссосудистого обмена, дисбаланс кровотока между суженными и расширенными легочными сосудами, нарушения гистоструктуры воздухоносных путей, возникновение деформаций аэрогематического барьера существенно осложняют насыщение крови кислородом, а также тканевой обмен, включая процессы внутриклеточного биологического окисления. [108, 121]. Вместе с тем, вне поля зрения исследователей, как правило, оказываются возможности использования для оценки изменений клеточного дыхания, анализа спектров флуоресценции живых клеток и тканей больного организма.

Это обусловливает необходимость изучения взаимосвязи между характером хронических заболеваний дыхательной системы и спектрофотометрическими показателями аутофлуоресценции, сопряженными с клеточным дыханием для целей неинвазивного мониторинга за t» состоянием организма больных X06JI.

Цель исследования: оценить диагностическую значимость ряда характеристик спектра аутофлуоресценции клеток покровных тканей и л крови практически здоровых, а также больных хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ).

Задачи исследования

1. На основе экспериментально-клинических наблюдений оценить чувствительность и информативность спектрофотометрического метода исследования аутофлуоресценции, а также возможность его использования для мониторинга изменения состояния здоровья больных с хроническими обструктивными заболеваниями легких.

2. Исследовать взаимосвязь изменений спектров аутофлуоресценции клетои кожных покровов и эритроцитов периферической крови при использовании функциональных нагрузочных проб, применяемых в клинике.

3. Выявить особенности аутофлуоресценции клеток покровных тканей и эритроцитов у больных с бронхолегочной патологией и определить диагностически значимые спектрофотометрические маркеры нарушения клеточного дыхания.

Научная новизна.

Впервые уточнены спектрофотометрические параметры КД, наиболее чувствительные к нарушениям ФВД у больных ХОБЛ.

На основе статистического анализа результатов установлена взаимосвязь изменений спектра АФ кожных покровов у больных ХОБЛ с показателями внешнего дыхания. Эти связи могут быть использованы при диагностике и контроле за лечением ХОБЛ. С помощью параметра С выявлена f» возможность верификации некоторых болезней органов дыхания.

Установлена зависимость спектральных характеристик АФ эритроцитов периферической крови от степени нарушения ФВД.

-> Положения, выносимые на защиту

1. Определение в реальном масштабе времени параметра С и других параметров спектра АФ может быть использовано для динамического** наблюдения за работой «клеточного дыхательного конвейера» у больных ХОБЛ легкой и средней степени тяжести в процессе лечения.

2. Параметр С более информативен для определения нарушения функции клеточного дыхания у больных ХОБЛ по сравнению с параметром ^.

3. Изменение аутофлуоресценции кожных покровов коррелирует с нарушением ФВД у больных ХОБЛ в отличие от аналогичных показателей, определяемых у больных БА.

Практическая значимость работы и ее реализация

При исследовании клеточного дыхания у практически здоровых людей и больных ХОБЛ спектрофотометрическим методом целесообразно учитывать изменения параметра С.

Для верификации необратимой (или частично обратимой) обструкции у больных ХОБЛ легкой и средней степени тяжести целесообразно дополнить исследование показателей функций внешнего дыхания (ОФВ1 и др.) параметрами АФ, характеризующими клеточное дыхание.

Апробация работы

Проблемы оценки и прогнозирования здоровья военнослужащих в условиях современной военной реформы. - Науч.- практ. конф. 16-17 февраля 1995 г.- СПб.: ВМедА.

Третий международный симпозиум по электромагнитной экологии (ЭМС - 97). - СПб.-1997, Проблемы терапевтической и хирургической пульмонологии. - СП6.//МЗ РФ, ГНЦП, РАМН. -1997.

5-ая Российская научно-техническая конференция «Электромагнитная совместимость технических средств и биологических объектов. - ЭМС-98. - СПб / РАН, РАЭлТН, РАМН, Воннно-инженерный технический университет и др.- 1998.

Научно-практический конгресс «Интегративная медицина - новая идеология здравоохранения России» . - СПб.: ВМедА, 2002.

Проблемы гармонии, симметрии и золотого сечения в природе, науке и искусстве. Конференция Винницкого государственного аграрного университета. Винница. - 2003.

Международная научно-практическая конференция «Проблемы обеспечения безопасности при чрезвычайных ситуациях». - СПб.: ГПС, 27 - 28 октября 2004 г. - С.43.

По теме диссертационного исследования опубликовано 14 научных работ.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования и основные положения диссертации используются во ФГУЗ «Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины» МЧС России ( г.Санкт-Петербург) и в ГУП НИИ новых медицинских технологий (г.Тула).

Структура и объем диссертации:

Объем диссертации 147 с. Она состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственного исследования, обсуждения материалов, заключения, выводов, 8 приложений и списка литературы {113 отечественных и 41 зарубежных источников), 8

Заключение диссертации по теме «Системный анализ, управление и обработка информации (по отраслям)», Сясин, Николай Иванович

Результаты исследования свидетельствуют о более интенсивном свечении ладонной поверхности в области БАТ Лаогун, чем снаружи кисти в зоне анатомической табакерки или на наружно-боковой поверхности мизинца.

Прнложснпе 4

Изменение аутофлуоресценции (АФ) тканей и клеток крови живых организмов при воздействии электромагнитных волн низкочастотного диапазона

Все живое на Земле и, особенно, человек находится под постоянным воздействием малоинтенсивного искусственного электромагнитного поля в диапазоне от крайне низких до крайне высоких частот, что может сказываться на работе клеток различных систем [52, 152, 176]^.

Не вызывает сомнений факт эффективности воздействия слабых нихкочастотных электромагнитных полей (НЧ ЭМП) на живые организмы (в частности на человека) [13, 22,165]. НЧ-терапия успешно используется при различных заболеваниях пищеварительной, сердечно-сосудистой системы, опорно-двигательного аппарата, дыхательной системы, урогенитального тракта, кожных заболеваниях, эндокринной патологии, в стоматологической практике, педиатрии [98,111].

Оценка АФ при слабых воздействиях на биообъект переменных НЧ ЭМИ проведена с учетом того, что в отношении макроорганизма является установленным факт влияния ЭМИ на перемещение ионов, на свойства иммунной системы, свойства китайской акупунктурной системы меридианов, которая объединяет во взаимодействии циркуляторную, нервную, эндокринную и иммунную системы [26,148, 176].

Ниже представлены материалы по аутофлуоресценции клеток покровных тканей, формы и характера флуоресценции клеток крови при воздействии на организм человека НЧ ЭМИ.

На описанном в Главе 2 стенде, состоящем из катушек , соединенных с генератором сигналов специальной формы Г6-36 и позволявшем генерировать низкоинтенсивные ЭМИ различной частоты в аутоэксперименте исследованы изменения АФ клеток кожи под воздействием в течение 1 минуты на область предплечья или кисти руки человека (обследовано 6 человек) низкочастотного ЭМИ с частотами, соответствующими начальным числам гармонического ряда Фибоначчи - от 1 до 34 Гц.

Обычными лабораторными методами (подсчет лейкоцитограммы) оценить ответную реакцию в процессе облучения не удалось. Очевидно, что это было связано с тем, что прокол пальца для забора крови представлял собой более интенсивный стресс-агент, чем воздействие НЧ ЭМИ указанной низкой интенсивности. УФ-флуоресцентная биоспектрофотометрия оказалась более чувствительным методом регистрации влияния НЧ, чем определение гемограммы. Воздействие НЧ ЭМП на локальный участок тела (на пальцы или предплечья рук) было абсолютно безболезненным. Однако и оно вызывало индивидуальные ответные реакции АФ в ответ на УФ-возбуждение их кожных покровов, что регистрировалось спектрофотометрией на протяжении 5 минут, с интервалами в 1 минуту.

2>s>

Так у С. (рис. >) наиболее выраженное увеличение АФ кожи наблюдалось после облучения руки НЧ ЭМИ с частотой 13 Гц, а наиболее выраженное снижение свечения выявлялось на частоте 21 Гц.

Рис/30. Изменение аутофлуоресценции кожи в аутоэксперименте с НЧ ЭМП у практически здоровых мужчин С. и К.

К фоновым значениям уровни интенсивности аутофлуоресценции покровных тканей возвращались у всех испытуемых (6 чел) в интервале 7-9 минут после облучения НЧ ЭМП.

Таким образом, в этом исследовании обнаружена индивидуальность ответной реакции живого организма на НЧ ЭМИ.

Результаты этого эксперимента показывают, что при исследовании спектров АФ биообъекта необходимо исключить воздействие на него промышленных ЭМП НЧ (от 1 до 50 гц) и не начинать эти исследования ранее, чем через 10 минут после такого воздействия.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Сясин, Николай Иванович, 2005 год

1. Агроскин Л. С Папаян Г. В. Цитофотометрия. Л., Наука, 1

2. Физический практикум электричество и оптика. 1968.- 665-679.

3. Антонов Н.С, Стулова факторы риска, О.Ю., Зайцева О.Ю. Эпидемиология, В кн.: Хронические профилактика. М. Наука, обструктивные заболевания легких. М.: ЗАО «Изд-во Бином», 1998.-С. 6 6 8 1

4. Алексанин С., Лесничий В.В. и др. Морфофункциональная характеристика клеток крови у людей, длительное время проживающих на радиоактивно-загрязненной местности Отчет о НИР 8-95-В2 "Вагранка": ВМедА. СПб. -1995. 133 с.

5. Аронов Д.М. Функциональные пробы с физической нагрузкой. Руководство для врачей Под ред. Е.И. Чазова. М. -1992.,Т.1 350 с.

6. Архипов М.Е., Субботина Т.И., Яшин А. А. Киральная асимметрия биоорганического мира: теория, эксперимент. Тула: «Тульский полиграфист». 2002. 242 с.

7. Айсанова З.Р., Кокосов А.Н., Овчаренко СИ. и др. Хронические обструктивные болезни легких. Федеральная программа. М.: МЗРФ, ВНО Пульмонологов. Б.г., 6.N.

8. Акоев И.Г., Мотлох Н.Н. Биофизический анализ предпатологических и 1984.-288 с.

9. Айсанова З.Р. Механизмы ограничения физической работоспособности у больных хроническими обструктивными заболеваниями легких.: Автореф. дисд ра мед.наук. М., 1994. -235 с.

10. Барановский А.Ю. Способ определение деструктивнопредлейкозных состояний. М.: Наука,

11. Бретшнайдер Б., Курфюрст И. загрязнений: 1989. -288с.

12. Биолюминесценция медузы Aequorea t1p://www.fbm.msu.rii/Academics/Manuals/BioPhvs/BPh01/hem m eth /hemBS.html) 14. 15

13. Берстон М. Гистохимия ферментов. М.: Мир, 1965. 464 с. Браун Г. Уолкен Дж. Брумберг Жидкие кристаллы и биологические структуры: М.: «Мир», 1982. 198 с. Е.М., Барский И.Я., Папаян Г.В. Двухволновой микрофлуориметр Оптико-механическая промышленность. 1967.-N 9, с. 62.

14. Бурлакова Е.Б. Особенности действия сверхмалых доз биологически активных веш,еств и физических факторов низкой интенсивности//Росс. химический жури. 1999, Т. XLIII. 5. 3-11. 18.

15. Васильев Е.П.Хронический бронхит в условиях Якутии//Автореф. дис. д-ра мед. наук, М., 1992. 28 с. Величковский Б. Т. Молекулярные и клеточные 9 1 8

16. Владимиров Ю. А., Добрецов Г. Е. Флуоресцентные зонды в основы экологической пульмонологии Пульмонология.- 2000.— 3.— Охрана воздушного бассейна от Технология и контроль:Пер.с англ. Л.:Химия, //Оптико-механическая промышленность.-

17. Владимиров В.А., Измалков В.И. Катастрофы и экология. М.: ЦСИГЗ, 2000. 380 с.

18. Владимиров Ю.А., Бурштейн Э.А. Спектры люминесценции ароматических аминокислот и белков Биофизика. 1960. Т.5, N 4 C 3 8 5 391.

19. Воробьев А. И. (ред.). Руководство по гематологии. М.: Медицина, 1985.- Т. 1 2 370 390.

20. Гречканев О.М., Сенников П.Г., Татарский А.А. спектральных методов анализа в Применение оценке биологического действия промышленного загрязнения //Измерительная техника.1992.-№3.-С.61-62.

21. Государственный (правильность и стандарт Р ИСО 5725-2-2002 методов и «Точность результатов прецизионность) измерений. Часть 22. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений. М.: Изд. официальное.

23. Горяйнов И. И., Князева Л. А., Князева Л. И., Конопля А. И., Конопля Е. Н. Иммуномодулирующее действие эритроцитов после магнито-лазерного облучения ВПМТ.— 1996.- Т. 3, 1. 34-36.

24. Гублер Е.В., Генкин А.А., Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. Л.: Медицина, 1973. 110 с.

25. Гурвич А.А., Еремеев В.Ф., Карабчиевский Ю.А. Энергетические основы митогенетического излучения и его регистрация на фотоэлектронных умножителях. М. —1974, 98 с. 34. 35.

27. Жилина Н.М. Прогностический индекс эндогенной интоксикации Вестник новых медицинских технологий. 1998.- Т.5, 3 4. 81- 84. 38.

28. Загрядский В.П., Сулимо-Самуйло З.К. Методы исследования в физиологии труда. Л.: ВМедА, 1991. 110 с. Захарова Н.Б., Хвостова Н.В., Шведова Р.Ф. Значение эритроцитарных повреждения белкового и липидного состава мембран в развитии снижения текучих свойств крови при экстремальных состояниях Вопросы мед. химии. 1991. Т. 1.

29. Заславская P.M., Векленко Г.В., Тейблюм М.М. Временная организация функции внешнего дыхания у больных хронической обструктивной 41. 42. болезнью легких пожилого возраста Клиническая медицина. 2004. -Т.82. №7. 36

30. Заидель А. Н., Островская Г. В., Островский Ю. И. Техника и практика спектроскопии. М. Наука, 1976., гл. 13. 333

31. Зуев B.C., Ушаков И.Б., Окунев A.M. Электромагнитные излучения как СИ-19. 43.

33. Игнатьев В.В., Кидалов В.Н. Образование эхиноцитов как релаксационный процесс.//Тез.док.1У международной технических конференции "Электромагнитная 493 495.

34. Информационные медико-биологические технологии/ Веревкин Е.Г. и др. под ред. Княжева В.А., Судакова К.В.. М.: ГЭОТАРМед.-2002.-280с. 47. 48.

35. Иржак Л.И. Дыхательные функции крови в индивидуальном развитии млекопитающих. М.-Л.:Наука. -1964. 184. с. Кадомцев.Б. Б. динамика и информация. М: Изд-во ред.журн. «Успехи физ. наук». 1997. 400 с. Калинина Н.М., Дунягина Н.М., Давыдова Н.И. и др. совместимость фактор геронтологического риска//Актуальные проблемы интегративной медицины. Воронеж-Москва., 2001. средств и биологических объектов." ЭМС-96. СПб. -1996.

36. Каманина Н.В., Кидалов В.Н. Изучение эффекта выравнивания эритроцитов в нематическои жидкокристаллической среде Письма в ЖТФ. 1996. Т.22, вып.14. 39 42.

37. Каманина Н. В. Отличие и взаимосвязь эффекта ориентирования эритроцитов в нематическои жидкокристаллической среде от электрических вибраций Frohlicha Письма в ЖТФ.- 1997.- Т. 23, 2 3 С 7 2 4

38. Карнаухов В. Н. Люминесцентный спектральный анализ клетки. М., 1978.-208 с.

39. Кетлинский А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. Спб.: Гиппократ. 1992. 256 с.

40. Кидалов В.Н. Красные клетки 1фови эритроциты в новых информационных технологиях контроля за состоянием здоровья.

41. Кидалов В. Н., Лысак В. Ф. Квантитативная эритрограмма и возможность ее использования в клинике и эксперименте Лабораторное дело.- 1989.- 8.- 3 6 40.

42. Кидалов В. П., Комаров А. П., Самойлов В. О. и др. Люминесцентный метод анализа воздействий слабых магнитных полей на организм Материалы 3-го международного симпозиума по электромагнитной экологии (ЭМС 97).- СПб.: ГК РФ по высш. образованию, Минсвязи РФ, МАНВШ и др., 1997.-С. 1 2 0 122.

43. Кидалов изменений В.Н., Якушина Г.Н. и Значение свечения дисгармонических эритроцитов при конфигурации выстраивании ими краевой линии. Матер.науч.конф., посвящ. 80-

44. Комлев А.Д., Калинина Н.М., Сысоев К.А. и др. Цитокиновый профиль у больных хронической обструктивной болезнью легких //Мед. иммунология. -2002. Т.4.№ 1. 87- 92

45. Кларк Дж. М. Токсическое действие кислорода Медицинские проблемы подводных погружений. Пер. с англ. 190- 246. 60.

46. Ютиорин Л.И., Тиунов Л.А. Функциональная неравнозначность эритроцитов. Л.: Наука, 197. 125 с. Коркушко О.В,, Иванов Л.А,, Вентиляционная функция легких у больных хроническим бронхитом пожилого старческого возраста //Терапевт.архив. 1995. №3. 11- 12.

47. Клячкин Л.М., Щегольков А.Л. Курортная терапия в практической

49. Кост Е.А.. Люминесцентная микроскопия в гематологии. Справочник по клинико-лабораторным методам исследования. М.: Медицина, 1975.- 191 -231

50. Хроническая обструктивная патология легких у взрослых и детей. Руководство для врачей Под редакций проф. Кокосова А.Н. СПб., СпецЛит, 2004. 304 с.

51. Корягин А. С, Ястребова А. А., Крылов В. Н., Корнаухов А. В. Влияние миллиметровых волн на устойчивость мембран эритроцитов, перекисное окисление липидов и активность ферментов сыворотки крови Миллиметровые волны в биологии и медицине".- 2000,- 2(18). 7- 9. Г.И. пульмонологии Интерпретация //Новые Санкт-Петербургские крови и мочи. М.1988. врачебные ведомости. -2000. 3. 67 -67 анализов ЬСлиническое значение анализов. М.: АОЗТ «САЛИТ» 1995.

52. Кукес В.Г., ЦойА.Н. Оценка клинической эффективности препарата тровентол при бронхоспазме различного генеза Новые возможности бронхорасширяющей терапии. -Л.:

53. Farmos Report (Farmos Group LTD, Finland. 1990. Vol.5. Ser.A.- 1 P 2 4 3 3

54. Кузнецова B.K., Кирюхина Л.Д. Диагностические возможности спировелоэргометрии в выявлении начальных нарушений газообмена Сб.матер. Всеросс. Науч.-практ. Конф. «Проблемы терапевтической и хирургической пульмонологии» СПб.: МЗ РФ, РАМН, ГНЦП МЗ РФ. 1997. 61 63.

55. Кулаков Ю.В. Диагностика и лечение магнитотропных заболеваний легких. Новые Санкт-Петербургские врачебные ведомости. 1999. №1. 56 58 70. 71.

56. Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии. М.: Мир, 1986.-250 с. Ленниджер А. Основы биохимии (пер. с англ.) 1985. Т 2 7 3 1 с. Левкова Е.А., Хомчук Т.Ф., Басова Е.А. и др. Дифференциальнодиагностические и лечебно-тактические аспекты хронических обструктивных заболеваний легких. Материалы третьего Всемрфного конгресса по иммунологии и аллргологии Аллергология и иммунология. 2004. -Т.5,

57. Лисовский В.А., В.В. Щедрунов, Барский И.Я. Напаян Г.В., и др. Люминесцентный анализ в гастроэнтерологии. Л.:Наука, 1984.-236 с.

58. Лисовский В. А., Кидалов В. Н., Гущ В. В. Трансформация эритроцитов как диагностический тест в клинической практике Лабораторное дело.- 1986.- 10.- 594- 598.

59. Луцик Т.К. Исследование промежуточных продуктов импульсного радиолиза флавоноидов: Дис. на соиск. уч. степени М.: Мир.

60. Методы проточной цитометрии в медицинских и биологических исследованиях Под. ред. М. Потапнева. Минск: Б АН. 2003. 305 с.

61. Муромцев В. А., Кидалов В. Н. Медицина в 21 веке. От древнейших традиций до высоких технологий. СПб.: ИНТАН, 1998.-131 с. 81.

62. Мусил Я., Новакова О., Кунц К. Современная биохимия в схемах.-М.: Мир. 1984.—214 с. Нефедов Е. И., Протопопов А. А., Хадарцев А. А., Яшин А. А. Биофизика полей и излучений. Часть

63. Физико-биологические основы информационных процессов в живом веш;еств. Тула, 1998.-С. 117-192

64. Нестеренко А.О., Кузнеченков В.П.,Симоненко В.Б. Новое в гигиеническом 84. нормировании неионизирующих излучений //Тез.докл.науч.конф. Л. 1989. 50

65. Немцева Е. В. Высшие электронно-возбужденные состояния в бактериальной исследования биолюминесценции: спектроскопические (http://asf.ur.ru/VNKSF/Tezis/v7/Base/Tesis.php-

66. Никифоров A.M., Каташкова Г.Д., Шишмарев Ю.Н. и др. Диагностика и медицинская реабилитация ликвидаторов аварии на ЧАЭС и других радиационных катастроф: Информационное письмо.— М.: 1995.- 66с.

67. Овчинников М.М., Подгорный Г.Н. Влияние нехроматичности излучения на отклонения от закона Бугера-Ламберта-Бэра при фотометрических измерениях в ультрафиолетовой, видимой и инфракрасной областях //Клиническая лабораторная диагностика. -2004,№3,С. 1 6 2 1

68. Овчаренко СИ. Хронические обструктивные заболевания легких (современны концепции и перспективные 88. направления) Терапевтический архив. 1996. 8. 86 —

69. Палеев Н. Р., Ильченко В. А. Болезни органов дыхания: Руководство для врачей Под ред. П. Р. Палеева.- М., 1989.- Т. З.-С. 110-176.-Т.1.-С.112-459.-Т.2.-С. 5 1 7

70. Петросян В. И., Лисенкова Л. А., Синицын Н. И., Киричук В. Ф. Теория и практика спектрально-волновой диагностики и прецизионно-волновой терапии Радиотехника. 1996.- 9. 35-43.

71. Печатников В. А., клеточных суспензий 1985.- 87-106. 91.

72. Путов И. В., Федосеев Г. Б. Руководство по пульмонологии. Л.: Медицина, 1984.-С. 20-

73. Путинцева О.В., Артюхов В.Г., Калаева Е.А. Оценка состояния фотоповреждения хромофоров гемового и глобинового компонентов УФ-облученных молекул и электрофоретических Корнеев В. Н., Афанасьев В, П., методом проточной цитофлуориметрии. Печатникова Л. М. Комплекс для статистического анализа Сб. Автоматизация цитологических исследований. Пущино.

74. Романовский Чернавский Математическая биофизика М.: Наука. —1984. 304 с. Рогаткин Д.А., Моисеева Л.Г., Современные методы биоспектрофотометри. Барыбин В.Ф., Черный В.В. лазерной в клинической биофотометрию Введение

75. Самойлов В.О. Элементы квантовой биофизики. СПб СПбГТУ, 2001.-43 с. Стандарты (протоколы) диагностики и лечения неспецифическими 97. заболеваниями легких. Приказу МЗ РФ 300 от 09.10.1998. 40 с. Соловьев В.Н., Самойлов В.О. Исследование люминесценции пиридин-нуклеотидов и флавопротеидов в зоне рецепторного эпителия языка лягушки.- Физиол. журн. СССР. -1977а. Т.63, N 10, с. 1476-1478.

76. Табеева Д.М. Руководство по иглорефлексотерапии. М.: больных с к Приложение

77. Таппоне М.В. КВЧ-пунктура. М.: Логос, Колояро. 1997. 314 с. Угарова Н. Н. Бровков Л. Ю. Взаимосвязь структуры белковой глобулы и спектров биолюминесценции люциферазы светляков Известия Академии наук. Серия Химическая. 2001, 1670 1679. 105.

78. Федосеев Г.Б. Хронический бронхит/ТНовости фармакотерапии. 2000.-№7.-С.11-

79. Хабибулова З.И., Вишневский А.А., Захаров Г.А. и др. Инфракрасный анализ структуры эритроцитарных мембран при бронхиальной астме//Медицинский академический журн. 2003. 3 С 166-167.

80. Чучалин А.Г., Шварц Г.Я. Тровентол в профилактике и лечении хронических 108. обструктивных болезней легких. М.: РЦ «Фарммединфо». 2003. 312 с. Черногрядская Н. А., Розанов Ю. М., Богданова М. С Боровиков Ю. Ультрафиолетовая флуоресценция клетки.М.: Наука, 1978. 280 с.

81. Щербаковский З.С.. Фотометрические характеристики элементов оптических систем и их измерение. Учебное пособие (ЛИТМО). Л 1990.- 90с. ПО.

82. Шмелёв Е. И. Хроническая обструктивная болезнь лёгких Терапевтический архив. 1999.- Т. 71, 12. 74—

83. Шевелкин А.В. Установка для прижизненной флуоресцентной микроскопии с системой компьютерного анализа изображения// Вестник новых медицинских технологий.-2003. Т. X, 4. 65 -66.

84. Эткинс П. Порядок и беспорядок в природе Пер. с англ. М. 1987.-218 с.

85. Aizava R. Endoscjpic detection of Hematoporphirin derivative fluorescein tumors/ZLasers and Hematoporphirin derivative in Cancer.Tokio. 1983. P.21 24.

86. Balode Z. Assessment of radio-frequency electromagnetic radiation by the micronucleus test in bovine peripheral erythrocytes Science of the Total Environment. 1996. Vol. 180, N. 1. P. 81 85. 116. 117. 118. 119.

87. Bolin B. The carbon cycle Scientific American. 1970.— Vol. 223, N.3.-P. 124-

88. Bohinski R.S. (Бохински) Современные воззрения в биохимии.— М.: Мир. 1987. 544 с. Buist A.S. Risk factors for COPD//Eur. Resp. Rev.-1996.-Vol.6. P 253-258. BTS guidelines for manegement of chronic obstructive pulmonary disease// Thorax. 1997. Vol.5. (Suppl), S.l 2 8 Eker C Montan S., Jaramillo E. et al. Clinical spectral characterization of colonic mucosal lesions using autofluorescence and delta aminolevulenic acid serialization//Gut. 1999. Vol. 44. P.511-518.

89. Chance В., Thorell B. Fluorescence measurements of mitochondria pyridine nucleotide in aerobiosis and anaerobiosis Nature. 1959. Vol. 184, N 4691. P.931. 122.

91. Structure, Mechanizm and Biochemistry/ Ed. P.R. Ortiz de Montellano. N.Y. London, 1988. P. 345 385, Chance В., Schoener В. Fluorometric studies of flavin component of

92. Chance В., Williams G.R. The respiratory chain phosphorylation// Adv. Enzymol. 1956. V. 17. P. 65

93. Global initiative for chronic obstructive lung diseases. NHLBJ/WHO Workshop.-2

94. Galvanovskis J., Sandblom J., Bergqvist В., Gait S., Hamnerius Y. The influence of 50-Hz magnetic fields on cytoplasmic Ca oscillations in human leukemia T-cells Science of the Total Environment. 1996. Vol. 180, N. 1. 127. 128. and New York. 1977. P.

95. Grundler G.,Kaiser F., Keilmann F. Walleczek J. Mechanisms of electromagnetic 129. interaction with cellular systems Naturwissenschaften. 1992. -Vol.79. P. 551 559. Han Z.Y., Chen M., Lu J.R. et all. Hypoxia induced increase of MDA and echinocytes fi"om etrythrocytes in rabbits blood with special reference to inhibition Physiologica. 130. 131.

96. Hilton G. Effects of thermal trauma on dog erythrocyte ATP-ase and shape Bums. 1985. Vol. 12. N 2. P.78

97. Henry J. B. (Ed.)Clinical diagnosis fiid management by laboratory methods. 18* ed. Philadelphia: W.V.Sanders Co, 1991 860 p. Howard Petty http://www.fbm.msu.ru/Academics/Manuals/BioPhys/BPhO 1 /hem_me th/hemB6.html 133. 134. http://www.krugosvet.ru/articles/02/l 000292/1000292al .htm. Hursts the Hearyt. (USA, 10* ed.: Valentin Fuster, R.Wayne Alexander, Robert A.O Rourke). Companies Inc. 650 p. 2001:.The McGraw-Hill of the increase by MPEG-SOD.//Acta P. 19-

98. Chandrasekhar S. Liquid Crystals Cambridge Univ.Press, London

99. Ivkova М. N., Pechatnikov V. A. and Ivkov V. G. Mechanism of fluorescent Response of the Probe Dis. 1984, C. 3 7.

100. Kaiser F. Coherent oscillations their role in the interaction of weak ELM-fields with cellular systems// Neural Network World. 1995. Vol. 5 P 7 5 1 7 6 2

101. Kamanina N. V., Kidalov V. N. A studi of the lining up of red blood cells in a nematic crystal medium Tech. Phys. Lett. 1996. Vol. 22, N.

102. American Institute of Physics. P. 5 7 1 572.

103. Khodr Hicham, Hider Robert C Catherine A. Jonathan E. Brown, Riceevans. Structural dependence of flavonoid interactions with Cu2+ ions: implications for their antioxidant propertiesx Journal of Biochem. 1998, Vol. 330. P. 1173 1178.

104. Kreuzer F., Yahr W.Z. Influence of red cell membrane of diffusion oxigen Journal of Appl. Physiol. 1960. -V.15. N.6. P.1117 1122.

105. Marino A. A. Time-dependent hematological changes in workers exposed to electromagnetic fields American Industrial Hygiene Association Journal. 1995. Vol. 56, N. 2. P. 189 192.

106. Falk В., Owman C.H. Detailed metodoloqycal description of the fluorescence method for the cellular demonstration of bioloqical monoamines //Acta universitatis ludensis, section 11. 1965. P. 7 49.

107. Wanner A., Salathe M, ORiordan Т.О. Mucocilyare Clearence in the airways// Amer. Journal of Respir. Crit. Care Medicine. 1996. Vol.154.-P.1868-1902.

108. Petty, H. R., Worth, R. G., Kindzelskii, A. L. Imaging Sustained Dissipative Patterns in the Metabolism of Individual Living Cells Physical Review Letters. 2000, 84, P. 2754 2757).

109. Revina A.A. Proceedings. Radiation-chemical contribution to the study of polyfunctional activity of natural pigments The Ill-d Int.

110. Refvem Olav K, Morland L.Rehabilitation programme for chronic obstructive lung disease Joint Russian-Norwegian conference "Ac6tual Problems of Pulmonology" SPb. 4 5 June. 2004. -P.39.

111. Roshchupkin D. I., Kramarenko G. G., Anosov A. K. Effect of extremely low frequency electromagnetic radiation and ultra-violet radiation on aggregation of thymocytes and erythrocytes Biofizika. 1996.-Vol. 41, N. 4 P. 866-869.

112. Sidorov V., Mayackay M. The determinan on of blood in material evidence with luminescent methods// Medicina Legalis Baltica. 1999.-Vol.11.-P. 5 5 5 8

113. Siggaard-Andersen O., Ulrich A., Gothgen I.H. Classes of tissue hypoxia. //Acta Anaesthesiologica Scandinavica. Supplementum. 1995.-B.107.-P.137-142.

114. Sipoez Т., Urobaroba K. Influence of radiation on shape of Erythrocytes Acta Phys Univ Comenianae.- 1985.- V. 26.- 163 p.

115. Siafaras N.M.,Vermere P..Pride N. at al. Optimal assessment and management of chronic obstructive pulmonary Diseases (COPD)// Eur.Resp. Journal.- 1999. V o l 8 P.1398 1420.

116. Schmid-Schonbein H., Rieger H., Fischer T. Blood fluidity as consequence of cell fluidity: flow properties of blood and flow behavior of blood in vascular diseases// Angiology. 1980. V.31. P.99-121. 152. The British Guidelines of Asthma Management: 1995 review and position statement. Thorax, 1977.-52 suppl. I. P 1 2 1

117. Traikov L. L, Markov M. S., Kuzmanova M. A., Ivanov S. P. Use of lectins as indicators for magnetic field action on erythrocyte membranes Reviews on Environmental Health 1994.- Vol. 10, N.

118. Tweeddle P.M., Legget R.I., Fleney D.C. Effect of chronic hypercapnia on erythrocyte pH and oxygen binding of haemoglobin Bulletin European de Physiopathologie Respiratorie. 1976. N 12. 125 -127.

119. Tomasbarberan F,A., Blazquez F.F.M.A., Garciaviguera C, Tomaslorente F. HPLC of honey flavonoids Journal of Chrom. 1993.-Vol. 634.-P. 4 1 4 6