Зависимость реализации программы экстракорпорального оплодотворения от количества и сродства гестагенных рецепторов мононуклеаров крови к прогестерону и дидрогестерону у пациенток с бесплодием тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат наук Сукновалова, Мария Владимировна

• Сукновалова, Мария Владимировна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Сукновалова, Мария Владимировна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1 Эпидимиология бесплодия, эффективность

методов лечения

1.2 Причины низкой эффективности ВРТ и возможные пути ее повышения

1.3 Критерии прогноза эффективности программы 22 ЭКО

1.4 Прогестерон как основное координирующее звено процесса пролонгации гестации

1.4.1 Молекулярный механизм действия женских половых стероидов

1.4.2 Женские половые гормоны и иммунитет

1.5 Заключение 39 ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1 Характеристика клинического материала

2.2 Лабораторное оборудование и используемые химические реактивы

2.3 Методы исследования

2.4 Статистическая обработка результатов 62 ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований

3.1 Концентрация рецепторов половых стероидов в пайпель биопсии эндометрия при первичном обследовании

3.2 Данные лабораторного исследования крови пациенток

3.3 Относительная связывающая активность

прогестерона и дидрогестерона с РП мононуклеаров периферической крови пациенток,

включенных в программу ЭКО

3.4 Сравнительный анализ данных связывающей активности радиолигандов и сопутствующих факторов

3.5 Результаты проведенного цикла ЭКО и ПЭ 109 ГЛАВА 4. Обсуждение собственных результатов 114 ВЫВОДЫ 122 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 124 СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 125 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Условные обозначения.

аГнРГ - агонист гонадотропин-релизинг гормона

антГнРГ - антагонист гонадотропин-релизинг гормона

БСА - бычий сывороточный альбумин

БНГ — бесплодие неясного генеза

ВРТ - вспомогательные репродуктивные технологии

ГЧЭ - гормон чувствительный элемент

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ИКСИ - интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида

ИЛ - интерлейкины

ИМТ - индекс массы тела

ИПФР - инсулиноподобный фактор роста

ИПФРСП - инсулиноподобный фактор роста связывающих протеинов ИФН - интерферон

КСФ — колониестимулирующий фактор

ЛГ - лютеонизирующий гормон

ЛИФ (ЫБ) - лейкемия - ингибирующий фактор

ММ - молекулярная масса

МНФ - мононуклеарная фракция

МНФК - мононуклеарная фракция клеток

НГЭ - наружный генитальный эндометриоз

ПИБФ - прогестерониндуцированный блокирующий фактор

ПМ - плазматическая мембрана

ПП14 - плацентарный протеин с мм

ПЦР - полимеразная цепная реакция

ПЧЭ - прогестерон чувствительный элемент

ПЭ - подсадка эмбриона

РНК — рибонуклеиновая кислота

РП - рецептор прогестерона

РЭ - рецептор эстрадиола

СГСЯ - синдром гиперстимуляции яичников

СПКЯ - синдром поликистозных яичников

СЭФР (VEGF) - сосудисто-эндотелиальный фактор роста

Тх1 - Т-хелпер

Тх2 - Т-хелпер

УЗИ - ультразвуковое исследование

ФНО - фактор некроза опухолей

ФРП - фактор роста плаценты

ФСГ — фолликулостимулирующий гормон

ХГ - хорионический гонадотропин

ХГЧ — хорионический гонадотропин человека

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

ЭКО — экстракорпоральное оплодотворение

AF - транскрипционная активационная функциональная единица СОХ-2 - циклооксигеназа 2 Е2-эстрадиол 17 р

HLA - главный комплекс гистосовместимости МСР-1 - моноцит - хемотаксический пептид 1 NC — клетки - натуральные киллеры NLS — ядерные локализованные сигналы Р4— прогестерон

TORCH - токсоплазма, краснуха, цитомегаловирус, герпес и другие внутриутробные инфекции

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Зависимость реализации программы экстракорпорального оплодотворения от количества и сродства гестагенных рецепторов мононуклеаров крови к прогестерону и дидрогестерону у пациенток с бесплодием»

Введение.

Бесплодный брак является одной из наиболее актуальных проблем современной медицины. Отмечается постоянная тенденция к росту частоты трубных и трубно-перитонеальных форм бесплодия, доля которых составляет 20-40% в структуре причин женского бесплодия. У женщин с непроходимостью маточных труб единственным способом реализации генеративной функции является экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) [12]. Однако эффективность этого метода не достаточно высока, составляет в среднем 32,3% [17, 108], при этом 30% из общего числа женщин понесших имплантацию сталкиваются с проблемой выкидышей и не вынашивания [1], что диктует необходимость более глубокого изучения механизмов не только инициации, но и пролонгации гестации.

Главная задача программы ЭКО это беременность и рождение здорового ребенка. Данная задача осуществляется множеством действий, из которых основным является получение большого числа (10, 20) зрелых жизнеспособных ооцитов для дальнейшего оплодотворения их in vitro. Для этого проводят стимуляцию суперовуляции, воздействуя на процесс фолликулогенеза большими дозами экзогенных гонад отропинов [61]. Процесс имплантации эмбриона зависит от адекватного действия женских половых гормонов. Женские половые стероиды реализуют свою гормональную активность через рецепторы, относящиеся к суперсемейству ядерных рецепторов NR [11]. Эффективность гормональной терапии зависит от рецепторного статуса ткани-мишени. С одной стороны, уровень РЭ и РП (РП/РЭ) в эндометрии перед подготовкой к имплантации влияет на эффективность переноса бластоцисты [5]. С другой стороны, ответная иммунная реакция организма матери на отцовские антигены эмбриона находится под контролем женских половых гормонов [18, 73]. Строго координированный гормональный контроль функции, как эндометрия, так и иммунокомпетентных клеток является абсолютно необходимым условием

успешной имплантации. В литературе представлены скудные данные о рецепции женских половых стероидов в эндометрии и отдельных фракциях клеток белой крови при имплантации [52, 88, 113, 114,]. Однако, представленные данные весьма противоречивы, носят качественный и статичный характер. Следовательно, актуальным является динамический количественный анализ рецепции эстрадиола и прогестерона в клетках эндометрия и МНФК в предимплантационный период в зависимости от исхода ВРТ, а так же поиск возможности персонализованного подхода к назначению гормональной терапии с целью поддержания гестации наранних сроках и повышения эффективности ВРТ.

Цель исследования.

Изучение роли специфического связывания половых стероидов в эндометрии и мононуклеарах периферической крови пациенток в реализации программы ЭКО. Поиск фармако-биохимических критериев для персонализации гестагенной терапии у пациенток на ранних сроках беременности, включенных в программу ЭКО. Задачи.

1. Определение уровня прогестерона и эстрадиола в плазме крови до начала стимуляции суперовуляции и в предимплантационный период у пациенток программы ЭКО.

2. Определение уровня цитозольных рецепторов прогестерона и эстрадиола радиолигандным методом в эндометрии до начала стимуляции суперовуляции у пациенток программы ЭКО в зависимости от ее успеха.

3. Определение уровня специфического связывания 3Н-прогестерона и Н-эстрадиола радиолигандным методом в мононуклеарной фракции клеток периферической крови пациенток, включенных в программу экстракорпорального оплодотворения в динамике.

4. Анализ специфического связывания 3Н-прогестерона и 3Н-эстрадиола радиолигандным методом в мононуклеарной фракции клеток периферической крови на 21-23 день менструального цикла, у пациенток программы ЭКО в зависимости от ее успеха.

5. Анализ специфического связывания дидрогестерона в мононуклеарах периферической крови пациенток программы ЭКО.

Научная новизна.

Впервые была определена количественная составляющая рецепторного профиля МНФК у пациенток, участвующих в программе ЭКО.

Продемонстрирована тесная положительная корреляция между уровнем рецепторов прогестерона в мононуклеарной фракции клеток периферической крови и цитозоле эндометрия пациенток программы ЭКО.

Предложен способ позволяющий персонализировать гестагенную поддержку первого триместра беременности у пациенток программы ЭКО.

Практическая значимость работы.

Предложен новый способ прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона в стандартном длинном протоколе стимуляции суперовуляции (патент на изобретение №2430379).

Предложен алгоритм введения пациенток в длинный протокол программы ЭКО, для повышения эффективности данной технологии, основанный на малоинвазивном методе определения уровня рецепторов половых стероидов в МНФК.

Выявлены вариации специфического связывания дидрогестерона с МНФК, которые могут позволить индивидуализировать подбор препаратов гормональной терапии.

Внедрение полученных результатов исследования в практику.

Результаты исследования по повышению эффективности лечения бесплодия методом ЭКО и ПЭ, основанном на анализе специфического связывания прогестерона в мононуклеарной фракции периферической крови пациенток программы ЭКО, внедрены в практическую деятельность ЭКО КДО ГБУЗ ЦПСиР ДЗ, а так же используются в материалах лекций для студентов кафедры молекулярной фармакологии и радиобиологии им. академика П.В. Сергеева медико-биологического факультета РНИМУ им. Н.И. Пирогова.

Апробация диссертации.

Основные положения диссертации доложены на заседании совместной научно-практической конференции коллектива кафедры молекулярной фармакологии и радиобиологии им. академика П.В. Сергеева ГОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава РФ, 07 марта 2012 года, протокол № 20.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1 Эпидемиология бесплодия, эффективность методов лечения.

Состояние репродуктивного здоровья населения России относится к наиболее острым проблемам развития общества, в связи с этим снижение материнской и младенческой смертности, стабилизация численности народонаселения и улучшение в целом медико-демографической ситуации провозглашены приоритетными задачами государственной национальной политики России. Сохранение репродуктивного здоровья женщин и научное планирование семьи, предупреждение и лечение гинекологических заболеваний вошли в число важнейших направлений деятельности в сфере медицины [108].

Частота бесплодных браков в России превышает 20% что, по мнению экспертов ВОЗ, считается критическим уровнем [17, 19, 133,]. Способы решения проблемы бесплодия зависят от его типа, который определяется причинами его вызывающими.

Наиболее частой причиной бесплодия является полная или частичная непроходимость маточных труб, в результате перенесенных заболеваний органов малого таза. По частоте встречаемости данный тип стоит на первом месте и составляет 40-60% от общего числа существующих форм бесплодия [133]. Практически единственным способом восстановления репродуктивной функции в этой ситуации являются методы вспомогательной репродуктивной технологии (ВРТ) - экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), подсадка эмбриона (ПЭ) и интрацитоплазматическая (внутриклеточная) инъекция сперматозоида (ИКСИ). Однако эффективность экстракорпорального оплодотворения зависит как от успеха имплантации, так и от обеспечения пролонгирования гестации, и в среднем составляет 30-50% [1]. Программа ЭКО подразумевает прохождение женщиной определенных этапов, включающих стимуляцию суперовуляции и получение большого числа

ооцитов, пункцию этих ооцитов, дальнейшую подсадку эмбрионов. Все этапы могут сопровождаться нежелательными явлениями, но наиболее частым осложнением программы является синдром гиперстимуляции яичников (СГЯ). Поэтому актуальным остается поиск путей повышения эффективности и безопасности ВРТ.

1.2. Причины низкой эффективности ВРТ и возможные пути ее повышения.

Репродуктивная система женщины представляет собой совокупность анатомических структур и эндокринных механизмов, функционирование которых строго скоординировано в пространстве и времени. Эндокринная составляющая представлена белково-пептидными и стероидными гормонами. Основную роль, так или иначе, играют гонадотропные и стероидные гормоны, которые регулируют как менструальный цикл женщины, так и механизмы, связанные с имплантацией и дальнейшей гестацией. Однако, помимо «основных» гормонов не маловажную функцию осуществляют ингибины и активины, роль которых изучена достаточно хорошо.

Ингибины представляют собой димерные белки, состоящие из 2 цепей альфа и бета. Предшественник цепи альфа (про-а-С), ранее считавшийся собственно ингибином, и определяемый в крови в высоких концентрациях, не обладает высокой активностью, и не имеет диагностической ценности. Цепь бета представлена двумя вариантами: А и В. Каждый из этих вариантов может быть ковалентно соединен с цепочкой альфа и соответственно образует ингибины альфа - бета А (ингибин А) и альфа - бета В (ингибин В). Молекулярная масса обоих ингибинов составляет примерно 31-32 кДа. Две цепочки бета могут образовывать димеры, которые называются активинами и соответственно существуют активины А, В и АВ. Основная роль ингибинов состоит в торможении выделения ФСГ клетками передней доли гипофиза, в то время как активины - способствуют выбросу ФСГ. Синтез ингибинов и

активинов происходит в головном мозге человека, плаценте, костном мозге, гипофизе, яичках и яичниках, однако у женщины детородного возраста главным источником являются клетки гранул езы фолликулов [59]. Концентрации ингибина А, активина А в плазме крови увеличиваются во время беременности, достигая пика к 36 неделе беременности [67].

Долгое время оставались неизвестными механизмы регуляции уровня ФСГ в начале менструального цикла. Предположения о том, что это может происходить под воздействием эстрадиола не оправдались, так как уровень синтеза этого гормона значителен только после достижения фолликулом диаметра 10 мм и более [110]. Однако благодаря работам группы Огооше N. из Оксфордского университета показано, что клетки гранулезы предоминантных фолликулов (до 10 мм в диаметре) продуцируют ингибин В и именно он регулирует продукцию ФСГ в начале и середине менструального цикла. В то же время доминантный фолликул и желтое тело продуцируют ингибин А и эстрадиол, которые в свою очередь ингибируют выделение ФСГ гипофизом [73].

Контроль менструального цикла неразрывно связан с эстрогенами, синтез которых имеет свои особенности. Согласно современным данным, в растущих фолликулах начала менструального цикла, синтез андрогенов из холестерина происходит в клетках теки фолликулов под воздействием стимулирующего действия ЛГ. Тестостерон мигрирует в клетки гранулезы фолликулов, где с помощью фермента ароматазы конвертирует в эстрадиол. Основным стимулятором ароматазы является ФСГ. Уровень синтеза эстрадиола в фолликуле зависит от его размера - при диаметре до 10 мм он остается невысоким. При увеличении размера (доминантный фолликул более 10 мм) на клетках гранулезы появляются рецепторы не только к ФСГ, но и к ЛГ. Под воздействием ФСГ и ЛГ, синтез эстрадиола резко увеличивается. Высокая концентрация эстрадиола в крови вызывает, по принципу отрицательной обратной связи, снижение выделения ФСГ гипофизом. При

снижении уровня ФСГ, все фолликулы, которые не успели достигнуть 10 мм в диаметре, подвергаются атрезии. Данный механизм называется селекция доминантного фолликула, который характерен для моноовулярных млекопитающих [67, 100]. В то же время уровень синтеза эстрадиола в доминирующем фолликуле растет экспоненциально и тесно коррелирует с диаметром фолликула. При достижении фолликулом овуляторного диаметра (16-23 мм), высокий уровень эстрадиола вызывает, по принципу положительной обратной связи пик ЛГ, разрыв оболочек и овуляцию [106].

После овуляции яйцеклетка захватывается фимбриями и продвигается по маточной трубе, где происходит оплодотворение, дробление и формирование зиготы. Через 3-4 дня после формирования 4-8 клеточной стадии зиготы образуется морула, а через 5-6 дней - бластоциста, готовая к имплантации [125]. После оплодотворения яйцеклетки трофобласт наряду с другими гормонами начинает продуцировать ХГ (хорионический гонадотропин). Уровень ХГ - показатель успешной имплантации и жизнеспособности беременности. При уровнях в плазме крови меньше 50 МЕ/л (+14) - 14-е сутки после пика ЛГ и 200 МЕ/л (+21) - прогноз наступления беременности отрицательный. ХГ снижает концентрацию эндотелина-1, обеспечивая инвазию трофобласта [134]. ХГ стимулирует продукцию эстрогенов и прогестерона желтым телом.

Функция желтого тела - обязательное условие сохранения беременности в течение первых 8-10 недель. Трофобласт берет на себя функцию выработки прогестерона и эстрогенов, достаточных для поддержания беременности, после 10 нед. гестации. Залогом успешной имплантации и последующего развития плода является не только соответствие течения всех физиологических процессов: адекватным функционированием иммунной системы, оплодотворением и предимплантационным развитием оплодотворенного яйца, но и подготовка слизистой матки к приему бластоцисты. Данная подготовка заключается в

созревании эндометрия и дальнейшей способности принять оплодотворенную яйцеклетку , имплантации и гестации.

Имплантация бластоцисты происходит, как правило, на 7-8-й день после оплодотворения, при условии адекватного содержания в организме женщины эстрогенов, прогестерона и нормальной секреторной трансформации эндометрия.

Программа ЭКО воспроизводит все перечисленные стадии максимально приближенно к физиологическим процессам.

У человека процесс имплантации начинается с 5-7-го дня после овуляции, хотя его точное время остается до конца неизвестным. В начале имплантации бластоцист имеет 100-120 клеток [15, 65]. Эмбрион может имплантироваться только в определённый очень ограниченный промежуток времени, который называется "имплантационным окном" [76]. Время готовности эмбриона к имплантации и максимальной рецептивности эндометрия должны совпадать для осуществления успешной имплантации. Как правило «имплантационное окно» открыто на 5-6 сутки после овуляции. Но иногда оно смещается по времени вперёд или назад и тогда готовый к имплантации эмбрион не находит себе места и погибает.

В период имплантации главной анатомической особенностью покровного эпителия является появление микропротрузионов (микробугорков) от апикальной поверхности эпителия к слизистой оболочке матки [105]. Эти микропротрузионы называются «пиноподы». Они появляются на 6-й день после пика ЛГ (ЛГ+6, 20-21 день м.ц.) и обнаруживаются в течение 48-72 ч. По другим данным пиноподы сохраняются до 28-го дня м.ц. (малыми группами на большой площади) [30, 50].

Появление пинопод ингибируется эстрогенами и стимулируется прогестероном. Возникновение пинопод совпадает с окном имплантации. На стадии контакта бластоциста с эпителием, пиноподы находящиеся на апикальной поверхности покровного эпителия, выделяют особую жидкость, свободно распространяющуюся по полости матки. В результате бластоцист входит в тесный контакт с эпителием матки и прикрепляется к ней - стадия адгезии [132].

Адгезия бластоциста может быть определена как стадия тесных функциональных взаимодействий, между наружными мембранами клеток трофобласта и эндометрия. Синцитиотрофобласт прорастает между эпителиальными клетками (интерстициальный вид инвазии) в строму так глубоко, что покровный эпителий полностью смыкается над ним.

В течение предимплантационной фазы менструального цикла различные компоненты эндометрия: железистый эпителий, покровный эпителий, стромальные клетки, стромальные сосуды и межклеточная матрица, претерпевают морфологические, клеточные и молекулярные изменения. Некоторые их них имеют ограниченный жизненный цикл. Хотя каждый компонент эндометрия это отдельная анатомическая единица, в совокупности они функционально и паракринно взаимосвязаны.

В период имплантации увеличивается митотическая активность желез эндометрия. Толщина слизистой оболочки матки увеличивается от 5 мм на 1-й день пика ЛГ (ЛГ+0) до 10 мм на 8-й день после пика ЛГ (ЛГ+8) и положительно коррелирует с концентрацией эстрадиола в плазме крови. В это время секреторная активность желез достигает максимума. Только во время секреторной фазы видны 3 характерные структурные черты желез эндометрия: гигантские митохондрии, гликогеновые отложения и система ядерных каналов. Секрет эндометриальных желез содержит ряд. биологически активных веществ.

Плацентарный протеин 14 (ПП14) является главным секреторным продуктом желез эндометрия в течение второй половины лютеиновой фазы цикла и I (раннего) триместра беременности. ПП14 -гликопротеин с ММ 42 кДа, содержащий 17% углеводородов. Показано, что ПП14 -прогестеронзависимый эндометриальный белок, концентрация которого снижена при ановуляторных циклах [80]. Ген ПП14 содержит прогестерончувствительные элементы [143]. ПП14 проявляет выраженную иммуномодулирующую активность, в частности препятствует лимфопролиферации и тормозит Т - киллеры, которые присутствуют в больших количествах в эндометрии на стадии ранней беременности. Считается, что ПП14 защищает имплантируемый эмбрион от отторжения материнской иммунной системой [87]. Женщины, перенесшие повторные внутриматочные манипуляции, имеют пониженные концентрации ПП14 в маточной жидкости по сравнению со здоровыми ровесницами. ПП14 прямо ингибирует ФГА - стимулированную пролиферацию Т-клеток и секрецию цитокинов МНФК (ИЛ-2). Введение активаторов протеинкиназы С и ионофоров Са++ отменяет такое действие ПП14, что свидетельствует о рецептор — опосредованном его эффекте.

Взаимодействие клеток эндометрия между собой и трофобластом осуществляется с участием молекул адгезии. Молекулы адгезии являются клеточными поверхностными рецепторами. Существуют четыре главные группы молекул адгезии: интегрины, кадгерины, селектины и иммуноглобулины. Интегрины - трансмембранные гликопротеины, которые представлены двумя изоформами: интегрины аир. Они взаимодействуют с гликопротеинами межклеточной матрицы и молекулами клеточной мембраны.

Интегрины участвуют в клеточной миграции, взаимодействии клеток с межклеточной матрицей, а также в межклеточных коммуникациях, т. е. задействованы во всех стадиях имплантации [48, 69, 140] Появление пинопод

и эндометриальных интегринов является сигналом открытия рецептивной фазы эндометрия (имплантационного окна) [134]. Интегрины синтезируются и экспонируются различными клетками эндометрия в течение пролиферативной и лютеиновой фаз цикла [57, 62].

Наличие некоторых интегринов в эндометрии совпадает с периодом его максимальной рецептивной активности [43, 98]. Интегрин СХ4Р1 отсутствует в пролиферативном эндометрии, появляется сразу после овуляции в железистых эпителиальных клетках (14-й день м.ц.) и исчезает на 24-й день цикла.

Интегрин ауРз выделяется железистыми эпителиальными клетками после 19-го дня цикла, при открытии имплантационного окна. Интегрин сц,рз-адгезивная молекула лигандом, которой служит остеопонтин. Остеопонтин (локализован рядом с интегрином) обеспечивает связывание эмбриона с апикальной поверхностью эндометрия для инвазии [99]. На 24-й день интегрин ау Р1 впервые появляется в покровном маточном эпителии. Молекула интегрина (Х1Р1 экспрессируется эпителиальными клетками в период от 15-го до 28-го дня цикла. Появление всех трех интегринов - о^Рь (Х4Р1 и аур1 происходит в эпителиальных клетках только в течение 4 дней: от 20-го по 24-й день цикла. Следствием появления этих интегринов может служить признание эмбриона материнской иммунной системой и последующая успешная имплантация бластоциста [31,91]. У женщин с нарушениями репродуктивной функции отсутствует адекватный синтез интегринов в эндометрии. Эндометриальные железы и покровные эпителиальные клетки женщин с необъяснимым бесплодием не выделяют интегрин а4 во время лютеиновой фазы м.ц. Интегрин оцР[ связывется с фибронектином, компонентом, присутствующим на фетальных трофобластах.

Отсутствие интегрина оцРь на клетках железистого и покровного эпителия у женщин с необъяснимым бесплодием, может отражать неполное признание эмбриона материнской иммунной системой, прямым следствием которой является неудачная имплантация [89].

Интегрины активируются системой ИЛ-1. ИЛ-1р (экспрессирован в бластоцисте) индуцирует экспрессию УЕСБ в эндометрии, который в свою очередь стимулирует ангиогенез и экспрессию интегринов в эндометриальных клетках [134]. Интегрин ауРз представлен как в строме, так и в железистых клетках эндометрия, его концентрация варьирует у пациенток с необъяснимым бесплодием [44].

Ьеэзеу В. и соавторы [98] сообщили, что эндометрий женщин, страдающих от эндометриоза, не экспонирует интегрин (З3. Недостаток выделения данного интегрина также был выявлен в эндометрии у женщин с замедленным его развитием, а также у пациенток, перенесших как минимум 4 попытки ЭКО [92].

Низкий уровень интегринов (главным образом (Х4Р1 и ау(33 вырабатываемых эндометрием) у женщин, страдающих от неудачных попыток имплантации, необъяснимого бесплодия, эндометриоза или дефекта лютеиновой фазы цикла, указывает на то, что измененная рецептивная активность эндометрия и неудачная имплантация могут служить причиной необъяснимого бесплодия у женщин.

Индукция децидуальной трансформации стромальных фибробластов находится под контролем цитокинов. В течение преимплантационного периода в тканях эндометрия присутствует широкий спектр цитокинов и факторов роста. Они выделяются эпителиальными клетками, макрофагами и лимфоцитами. Хотя эндометрий человека имеет множество цитокинов, их роль в имплантации остается малоизученной [53]. Показано, что система ИЛ-1 состоит из двух цитокинов (ИЛ-1а и ИЛ-1р), являющихся агонистами, и

двух рецепторов (ИЛ-IR типов I и II), а также рецептора антагониста ИЛ-1 (РА-ИЛ). Последний связывается с ИЛ-IR типа I, предотвращая трансиндукцию многих функций, связанных с активацией ИЛ-IR типа I in vivo и in vitro.

В эндометрии человека ИЛ-1 и ИЛ-1(3 обнаруживаются в макрофагах и эндометриальных клетках. Экспрессия ИЛ-1р активируется в среднюю лютеиновую фазу цикла [131].

Клетки покровного эпителия содержат ИЛ-IR типа I, плотность которых увеличивается в предимплантационный период. Показано, что эмбриональный ИЛ-1 и эндометриальный ИЛ-IR типа I вовлечены на ранних стадиях в эмбрио - материнский «диалог» [58, 136].

Система ИЛ-1 способствует экспрессии интерферонов у в Т-лимфоцитах. Децидуальные натуральные киллеры взаимодействуют с трофобластом, вызывая образование LIF (ЛИФ), который индуцирует синтез желатиназы, принципиального фермента инвазии трофобласта [134].

ИЛ-15 - один из кандидатов на маркеры имплантационного окна, регулирует функцию натуральных киллеров. Прогестерон стимулирует экспрессию ИЛ-15 в строме эндометрия. Оказалось, что провоспалительный цитокин ИЛ-ip значительно ингибирует прогестерон-зависимую экспрессию ИЛ-15 и стимулирует - ИЛ-8 (провоспалительный цитокин) [116].

Миграция лейкоцитов в эндометрий осуществляется под контролем ИЛ-8. Активация антигена CD40 приводит к увеличению экспрессии СОХ-2 и ИЛ-8 в фибробластах эндометрия. Лиганды для CD40 поступают из матки и тромбоцитов. В норме процесс контролируется прогестероном, который в высоких концентрациях предотвращает активацию CD40 [85] Ил-6 стимулирует пролиферацию стромальных клеток в лютеиновую фазу [146].

ИЛ-8 - хемокин стимулирующий нейтрофилы и Т-клетки. Ил-1 и ФНОа время- и дозозависимо стимулируют синтез ИЛ-8.

В литературе имеются сведения об изменении профиля цитокинов, экспрессируемых в натуральных киллерах периферической крови у пациенток с привычными абортами и нарушением имплантации. Пропорция ИФНу/ФНОа и ФНОа/гранулоцит-макрофаг колониестимулирующий фактор (КСФ) в клетках СВЬпб1и значительно выше у пациенток с спонтанными абортами по сравнению со здоровыми женщинами. В этих же клетках ИЛ-4/ИЛ-10 (менее 2%) значительно ниже в опытной группе [62].

Другой цитокин хорошо изученный при бесплодии и имеющий доказанное значение - К8Р-1 (колоний стимулирующий фактор). Является гликопротеином с ММ 60 кДа. Первоначально он был описан как фактор роста, индуцирующий пролиферацию и дифференциацию моноядерных фагоцитов.

Роль К8Р-1 в имплантации была продемонстрирована в модельных экспериментах на мышах с остеопорозом [121]. Было предположено, что взаимодействие эмбрионального рецептора для К8Р-1 и эндометриального белка К8Б-1 облегчает инициальную стадию имплантации бластоциста [142].

Уровень К8Р-1 увеличивается от пролиферативной к секреторной фазе цикла и достигает максимума в I триместре беременности. Главное место синтеза К8Б-1 - маточный эпителий. К8Г-1 также синтезируется цитотрофобластом [137]. Рецепторы К8Р-1 присутствуют и на эндометриальных клетках и на клетках эмбриона.

В процессе имплантации активно задействованы стромальные клетки слизистой матки. Строма эндометрия состоит главным образом из 2 различных популяций клеток: фибробластов и лейкоцитов [19].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Сукновалова, Мария Владимировна, 2014 год

Список литературы.

1. Аржанова О.Н., Жаворонкова Н.В., Пайкачева Ю.М. Невынашивание беременности после экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).// Акуальные вопросы физиологии и патологии репродуктивной функции женщины. Мат. XXV науч. Сессии НИИ акуш. и гин - С-П - 1996-1997.-С. 17-19

2. Бассалык Л.С. Рецепторы стеродных гормонов в опухолях человека М. //Медицина, 1987. - 223 С.

3. Бехбудова JI.X., Горенкова О.С., Карева Е.Н. Рецепция половых стероидов в мононуклеарах периферической крови пациенток с миомой матки. //Ж. Health & education millennium, 2014, том 16 № 2, C.l-3.

4. Гланц С.А. Медико-биологическая статистика,- М. // «Практика» -1999-459 С.

5. Добротворцева О.А. Морфологические исследования эндометрия при различных формах бесплодия // Акушерство и гинекология - М. - 1987 -№11-С. 9-25.

6. Ицхоки О. Выбор модели и парадоксы прогнозирования // Квантиль -2006, № 1, С.43-51.

7. Карева Е. Н., Гаспарян Н. Д., Маняхина А. Е., Горенкова О. С. Рецепторы прогестерона и эстрадиола в мононуклеарной фракции клеток периферической крови у пациенток позднего репродуктивного возраста с миомой матки. // Психофармакология и биологическая наркология, Том 7, № 4 -2007.

8. Карева Е.Н., Шимановский H.JI. Молекулярная фармакология эстрогенов.// Молекулярная медицина - 2011, N1, С. 10-18

9. Карева Е.Н., Шимановский H.JI. // Молекулярные механизмы действия гестагенов. Ж. Эксп. и клиническая фармакология, 2011, т.74, №4, С.36-42.

Ю.Карева E.H. Механизмы действия прогестерона. // Вопросы

биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2003, № 2, С.3-10.

11. Карева E.H., Ганковская JI.B., Шимановский H.JL, Половые стероиды и иммунитет. // Российский иммунологический журнал, 2012, том 6(15), № 1, С. 3-13.

12.Кулаков В.И. Репродуктивное здоровье населения PoccHH/VConsilium medicum. - 2007. - №2,- С. 26

13.Михнина Е.А. Гормональная функция яичников и рецепция эстрадиола и прогестерона эндометрием у женщин с невынашиванием беременности ранних сроков: Автореф. дис. канд.мед.наук. - Санкт-Петербург ,1995.

14.МихнинаЕ.А. Морфофункциональное состояние эндометрия у женщин с бесплодием и невынашиванием беременности: Автореф. дис. доктора, мед.наук. - Санкт-Петербург, 2009.

15. Никитин А.И. Факторы неудач в программах вспомогательной репродукции. // Проблемы репродукции - М. - 1995 - №1(2) С. 36-A3.

16.Побединский Н.М., Балтуцкая О.И., Омельяненко А.И. Стероидные рецепторы нормального эндометрия. // Акушерство и гинекология — М. — 2000-№3 С. 5-7.

17.РАРЧ. Регистр центров ВРТ. Отчет за 2009 год. Проблемы репродукции №6-2011.

18.Розен В.Б. Основы эндокринологии. - М. - Медицина - 1994 - 384 С.

19. Савельева Г.М.// Акушерство, Геотар Медиа- Москва -2010 - 656 С.

20. Светлаков A.B., Яманова М.В., Салмина А.Б., Серебренникова O.A. Вероятность наступления имплантации у женщин с разными формами бесплодия при лечении методом ЭКО // Проблемы репродукции.-2002.-№3,- С. 61-66.

21. Сергеев П.В., Шимановский H.JL, Петров В.И. Рецепторы физиологически активных веществ: Монография- Волгоград: 7 ветров, 1999-638 С.

22. Сергеев П.В., Шимановский H.JI. Рецепторы. М. - 1987 - 400 С.

23. Сергеев П.В., Духанин А.С., Шимановский H.JI. Плазматическая мембрана клетки-мишени и стероидные гормоны: начало спора или его завершение. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1995 - т. 120 - №10 -С.342-348.

24. Серова О.Ф., Гормональные препараты в программе прегравидарной подготовки женщин с невынашиванием беременности // Consilium Medicum (экстра выпуск). - 2000- С. 11-12.

25. Смольникова В.Ю., Леонов Б.В. Аналоги гонадолиберина в программе ЭКО и переноса эмбрионов в полость матки. - 1996-№2-С. 82-84

26. Фисенко В.П. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ // Ремедиум, Москва -2000-398 С.

27. Флетчер Р.Ф., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология // Основы доказательной медицины. - 1998 - 352 С.

28. Шимановский Н.Л., Епинетов М.А., Мельников М.Я. Молекулярная и нанофармакология. М. // Физматлит - 2010 - 624С.

29. Асе С. I and Okulicz W. С. Differential gene regulation by estrogen and progesterone in the primate endometrium //Molecular and Cellular Endocrinology - 1995 - Vol. 115 - P. 95-103

30.Acosta A.A., Elberger L., Borghi M. et al. Endometrial dating and determination of the window of implantation in healthy fertile women // Fertility and Sterility - Vol. 73 - 2000 - P. 788-798

31.Aplin J., Spanswick C., Behzard F. et al. Integrins ЬЗ, b5 and av are apically distributed in endometrial epithelium. // Mol Hum Reprod - 1996 - 2-P. 527534.

32. Backer M.N.// Paper presented at the Int Conf Horm Steroids. - Milan -1962.

33.Barzel U.S. Estrogens in the prevention and treatment of postmenopausal osteoporosis // American Journal of Medicine - 1988 - 85-P.847-850.

34.Beato M. Gene regulation by steroid hormones // Cell - 1989 - 324- P. 335344

35.Beato M., Chaves S., Truss M. Transcriptional regulation by steroid hormones // Steroids - 1996 - 61-P. 240-251

36.Beato M., Klug J. Steroid hormone receptors: An update // Hum Reprod Update - 2000 - 6- P. 225-236.

37.Bergqvist A., Ferno M., Skoog L. Quantitative enzyme immunoassay and semiquantitative immunohistochemistry of oestrogen and progesterone receptors in endometriotic tissue and endometrium.// J Clin Pathol. -1997 Jun;50(6)- P.496-500.

38.Boomsma C.M., Kavelaars A., Eijkemans M.J., Lentjes E.G., Fauser B.C., Heijnen C.J., MacklonN.S. Endometrial secretion analysis identifies a cytokine profile predictive of pregnancy in IVF.// Hum Reprod. - 2009 Jun;24(6):P. 1427-1435.

39.Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow//Scand.J.Clin.Lab.Investing. - 1968 - 21(97) - P. 1-9.

40.Brodin T., Bergh T., Berglund L., Hadziosmanovic N., Holte J.High basal LH levels in combination with low basal FSH levels are associated with high success rates at assisted reproduction. //Hum Reprod. 2009 Nov;24(ll)-P. 2755-2759.

41.Brosens J., Verhoeven H., Campo R., Gianaroli L., Gordts S., Hazekamp J., Hagglund L., Mardesic T., Varila E., Zech J., Brosens I. High endometrial aromatase P450 mRNA expression is associated with poor IVF outcome.// Hum Reprod.- 2004 Feb;19(2) - P.352-356.

42. Butts C.L., Shukair S.A., Duncan K.M., Harris C.W., Belyavskaya E., Sternberg E.M. Evaluation of steroid hormone receptor protein expression in intact cells using flow cytometry.//Nucl Recept Signal.- 2007.

43.Bischof P., Haenggeli L., Campana A. Gelatinase and oncofetal fibronectin secretion are dependent upon integrin expression in human cytotrophoblast. // Mol Hum Reprod - 1995 - 10- P. 734-742.

44. Ceydeli N., Kaleli S., Calay Z. et al. Difference in avp3 integrin expression in endometrial stromal cell in subgroups of women with unexplained infertility // European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology - Vol. 126 - 2006 - P. 206-211

45. Christin-Maitre S., Chabbert-Buffet N., Bouhard Ph. Action of estrogen and progesterone at the cellular level. // In: "Estrogens and progestins in clinical practice"Ed. Fraser IS.-London - 1998 - P.l 19-134.

46. Conneely O.M., Kettelberger D.M., Tsai M.J., Schrader W.T., O'Malley B.W. The chicken progesterone receptor A and B isoforms are products of alternate translation initiation event. // J Biol Chem - 1989 - 264- P. 14062-14064.

47. Conneely O.M., Mulac-Jericevic B., DeMyo F. Reproductive functions of the progesterone receptor isoforms: lessons from knock-out mice // Mol Cell Endocrinol-2001 - 179(1-2) - P.97-103

48.Creus M., Ordi J., Fabregues F. et al. //Hum Reprod- 2003; 18(4) - P. 683— 693

49. Cutolo M., CapellinoS., Montagna P., Ghiorzo P.,Sulli A; Villaggio B., Sex Hormone Modulation of Cell Growth and Apoptosis of the Human Monocytic/Macrophage// Cell Line Arthritis Res Ther. - 2005;7(5) -

P.l 124-1132

50. Coutifaris C., Myers E.R., Guzick D.S. et al. NICHD National Cooperative Reproductive Medicine Network. Histological dating of timed endometrial

biopsy tissue is not related to fertility status. //Fertility and Sterility 82, -2004- P. 1264-1272.

51. Cvoro A., Tatomer D., Tee M.K. et al. Selective estrogen receptor-beta agonists repress transcription of proinflammatory genes // Immunol. - 2008. - Vol.180, N1.-P.630-636.

52.Dekel N., Gnainsky Y., Granot I., Mor G. Inflammation and Implantation. //Am J Reprod Immunol.- 2010; 63(1) - P. 17-21.

53.Dosiou C., Hamilton A.E., Pang Y., Overgaard M.T., Tulac S., Dong J., Thomas P., Giudice L.C.: Expression of membrane progesterone receptors on human T lymphocytes and Jurkat cells and activation of G-proteins by progesterone.//J Endocrinol - 2008; 196-P.67-77.

54.Diedrich K., Fauser B.C., Devroey .P., Griesinger G. The role of the endometrium and embryo in human implantation.// Hum Reprod Update. 2007 Jul-Aug;13(4) -P.365-377.

55.Eaker E.D., Chesebro J.H., Sacks F.M., Wenger N.K., Whisnant J.P. AHA medical/scientific statement special report on cardiovascular disease in women.//Circulation - 1993;88(4)-P. 1999-2009.

56. Ermisch C., Markert U.R., Geburtshilfe Z.,//Neonatology, 215(3) ,P.93-97 -2011.

57.Erickson G. and Shimasaki S. The physiology of folliculogenesis: the role of novel growth factors. // Fertil Steril - vol. 76 - 2001 - P. 943-949.

58.E1-Zibdeh M.J. et al. Interferons in dermatology: Present-Day Standard // Fertil Steril 1998-70-P. 77-78.

59. Faddy M. and Gosden R. A mathematical model of follicle dynamics in the human ovary. // Human Reproduction - vol. 10 - 1995 - P. 770-775.

60. Falkenstein E., Tillman H.-C., Christ M., Feuring M., Wehling M Multiple actions of steroid hormones - a focus on rapid, nongenomic effects // Pharmacological Review - 2000 - 52 - P. 513-555

61.Freour T., Masson D., Mirallie S., Jean M., Bach K., Dejoie T., Barriere P. Active smoking compromises IVF outcome and affects ovarian reserve.// Reprod Biomed Online.- 2008- Jan;16(l)-P. 96-102.

62.Fukui A., Kwak-Kim J., Ntrivalas E. et al. Intracellular cytokine expression of peripheral blood natural killer cell subsets in women with recurrent spontaneous abortions and implantation failures // Fertility and Sterility - 2007 -P.427-431.

63.Funder J.W. Aldosterone and mineralocorticoid receptors: Orphan questions. // Kidney Int-2000-57-P. 1358-1363.

64.Genazzani A.R. Solvey Farmaceutical Sympoz. // Synergy Med. Education -2002-P. 11-13.

65. Giangrande H.P., Kimbrel E.A., Edwards DP, McDonell DP The opposing transcriptional activities of the two isoforms of hPR are due to differential cofactor binding.// Moll Cell Biol. - 2000 - 20 - P. 3102-3115.

66. Giangrande H.P., Pollio G., McDonell Mapping and characterization of the functional domains responsible for the differential activity of the A and B isoforms of the human progesterone receptor.// J Biol Chem - 1997 - 272 - P. 32889-32900.

67.Ginter O., Wiltbank M., Fricke P., Gibbons J. and Kot K. Immunological changes and stress are associated with different implantation rates in patients undergoing in vitro fertilization-embryo transfer // Fertility and Sterility, Vol. 76, 2001, P. 85-91

68. Glass C., Rosenfel M.G., The coregulator exchange in transcriptional functions of nuclear receptors. // Genes Dev - 2000 - 14 - P. 121-141.

69.Glasser S.R., Aplin J.D., Giudice L.C., Tabibzadeh S.// The Endometrium. London: Taylor&Francis- 2002; P. 675.

70. Gougeon A. Regulation of ovarian follicular development in primates: facts and hypotheses.//Endocrine Reviews - vol. 17 - 1996 - P. 121-155.

71. Greene G.L., Gilna P., Waterfield M., Baker A. et al. Sequence and expression of human estrogen receptor complementary DNA // Science -1986-231 -P. 1150-1154.

72. Griekspoor A., Zwart W., Neefjes J., Michalides R., Visualizing the action of steroid hormone receotors in living cells.// The Open Access journal of the Nuclear Receptor Signaling Atlas - 2007 - P. 1-9.

73. Groome N., Illingworth P., O'Brien M. et al. Measurement of dimeric inhibin B throughout the human menstrual cycle. // J Clin Endocrinol Metab -vol. 81 - 1996 -P.1401-1405.

74. Guerra-Araiza C., Camacho-Arroyo I. Progesterone receptor isoforms: funktion and regulation. // Rev.Invest.Clinica - 2000 - vol.52 - 6th - P.686-691.

75. Guiochon-Mantel A., Loosfelt H., Lescop P., Sar S., Atger M., Perrot-Applant V., Milgrom E. Mechanism of nuclear localization of the progesterone receptor: evidence for interaction between monomers. // Cell -1989-57-P. 1147-1154.

76. Guiochon-Mantel A., Lescop P., Christin-Maitre S. et al. Nucleo-cytoplasmic shuttle of the progesterone receptor. // EMBO J — 1991 — 10 — P. 3851-3859.

77. Gustafsson J.-A. Estrogen receptor b - a new dimension in estrogen mechanism of action. // J Endocrinol - 1999 - 163 - P.379-383.

78. Guzeloglu-Kayisli O., Kayisli U.A., Taylor H.S.. The role of growth factors and cytokines during implantation: endocrine and paracrine interactions.// Semin Reprod Med. -2009 Jan;27(l) - P.62-79.

79. Hasty L.A., Lambris J.D., Lessey B.A., et al. Hormonal regulation of complement components and receptors through the menstrual cycle. // Am J Obstet Gynecol - 1994 - 170 - P.168-175.

80.Heilmann L., Schorsch M., Hahn T. CD3-CD56+CD16+ natural killer cells and improvement of pregnancy outcome in IVF/ICSI failure after additional IVIG-treatment.// Am J Reprod Immunol. - 2010 Mar 1;63(3) - P.263-265.

81.Heng S., HannanN.J., Rombauts L..J, Salamonsen L.A., Nie G. PC6 levels in uterine lavage are closely associated with uterine receptivity and significantly lower in a subgroup of women with unexplained infertility.// Hum Reprod. - 2011- Apr;26(4) - P.840-846.

82. Hilary O. D. Critchley, Rodney W. K. Antiprogestins as a model for progesterone withdrawal // Steroids - Vol. 68 - 2003 - P. 1061-1068

83.Horwitz K.B., Alexander P.S. In situ photolinked nuclear progesterone receptors of human breast cancer cells: subunit molecular weight after transformation and translation. // Endocrinology - 1983 - 113 - P. 2195-2201.

84.Hovland A., Powell R., Takimoto G., Tung L., Horwitz K. An N-terminal inhibitory function, IF, supresses transcription by the A-isoform but not the B-isoform of hPR. // J Biol.Chem. - 1998 - 273 - P. 5455-5460.

85. Kelly R.W., King A.E., Critchley H.O. D. Inflammatory mediators and endometrial function—focus on the perivascular cell // Journal of Reproductive Immunology - Vol.57-2002 - P.81-93

86. Kimmins S., Lim H.C., Parent J. et al. The effects of estrogen and progesterone on prostaglandins and integrin beta 3 (p3) subunit expression in primary cultures of bovine endometrial cells // Domestic Animal Endocrinology - Vol. 25 - 2003 - P. 141-154

87. Klentzeris L.D., Bulmer J.N., Seppala M. et al. Placenta protein 14 in cycles with normal and retarded endometrial differentiation. // Hum Reprod - 1994 -9 - P. 394-398.

88. Klentzeris L.D., Bulmer J.N., Warren M.A. Lymphoid tissue in the endometrium of women with unexplained infertility: morphometric immunohistochemical aspects. // Hum Reprod - 1994 - 9 - P. 646-652.

89.Klentzeris L.D., Bulmer J., Trejdosiewicz L. bl integrin cell adhesion molecules in the endometrium of fertile and infertile women. // Hum Reprod -1993-8-P. 1223-1230.

90.Klentzeris L.D., Fishel S., McDermott H. A positive correlation between expression of bl integrin cell adhesion molecules and fertilizing ability of human spermatozoa in vitro. // Mol Hum Reprod - 1995 - 10 - P. 728-733.

91. Klentzeris L.D., Fishel S., MacDermott H. The role of sperm bl-integrin cell adhesion molecules in fertilization by intracytoplasmic sperm injection. // Proceedings of the 51st Annual Meeting of the American Society for Reproductive Medicine - 1995 - P.7—12

92. Klentzeris L.D., Moran V., Turner R.. The endometrial profile of women with recurrent implantation failure following embryo transfer in an IVF programme. // Hum Reprod - 1997 - 12 - P. 35.

93.Kurita T., Ki-jun L., Saunders P.T. Regulation of progesterone receptors and decidualization in uterine stroma of the estrogen receotor-a knockout mouse. // Biol Reprod - 2001-64-P.272-283.

94.Lange C.A., Shen T., Horwitz K.B. Phosphorilation of hPR at serine-294 by MAPK- signals their degradation by the 26S proteosome. // Proc Natl Acad Sci USA-2000-97-P. 1032-1037.

95.Ledee-Bataille N., Lapree-Delage G., Taupin J.L., Dubanchet S., Frydman R., Chaouat G. Concentration of leukaemia inhibitory factor (LIF) in uterine flushing fluid is highly predictive of embryo implantation.// Hum Reprod. -2002 Jan;17(l) -P.213-218.

96. Lee T.H., Liu C.H., Huang C.C., Hsieh K.C., Lin P.M., Lee M.S. Impact of female age and male infertility on ovarian reserve markers to predict outcome of assisted reproduction technology cycles.// Reprod Biol Endocrinol. - 2009- Sep 17-P.100-107.

97.Leonhard S.A., Altman M., Edwards D.P. Agonist and antagonist induce homodimerization and mixed ligand heterodimerization of hPR in vivo by

mammalian two-hybrid assay. // Mol. Endocrinol - 1998 - 12 - P. 19141930.

98.Lessey B., Castlebaum A., Sawin S. Aberrant integrin expression in the endometrium of women with endometriosis. // Fertil Steril - 1994 - 79 - P. 643-649.

99.Lessey B.A., Ilesanmi A.O., Castelbaum A.J. Characterization of the functional progesterone receptor in an endometrial adenocarcinoma cell line (Ishikawa): Progesterone-induced expression of the al integrin // The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology - Vol. 59 -1996 - P.31-39.

100. Lessey B.A. Two pathways of progesterone action in the human endometrium: implications for implantation and contraception // Steroids-Vol.68-2003, P.809-815

101. Levy D., Navarro J., Schattman G., Davis O., Rosenwaks Z. Exogenous LH: let's design the future. // Human Reproduction - vol. 15 - 2000 - P. 22582265.

102. Lonard D.M., Nawaz Z., Smith C.L., O'Malley B.W. The 26s proteosome is required for estrogen receptor-alpha and coactivator turnover and for efficient ER transactivation. // Mol. Cell - 2000 - 5 - P. 939-948.

103. Lopata A. Implantation of the human embryo. // Hum Reprod - 1996 -11-P. 175-184.

104. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L. et al. Protein measurement with the folin phenol reagent // J. Biol. Chem., 193 - 1951 - P.265-275.

105. Maubon A., Faury A., Kapella M., Pouquet M., Piver P. Uterine junctional zone at magnetic resonance imaging: A predictor of in vitro fertilization implantation failure.//J. Obstet. Gynaecol. Res. Vol. 36, No. 3-2010-P.611-618.

106. McGee E., Hsueh A. Initial and cyclic recruitment of ovarian follicles // Endocrine Reviews - vol. 21 - 2000 - P. 200-214.

107. McKenna N.J., Lanz R.B., O'Malley B.W. Nuclear receptor coregulators:Cellular and molecular biology. I I Endocr Rev - 1999 - 20 -P.321-344

108. Mouzon J, V. Goossens, S. Bhattacharya, J.A. at al. The European IVF-monitoring (EIM) Consortium, Assisted reproductive technology in Europe, 2006: results generated from European registers by ESHRE,// Human Reproduction 2010

109. Misrahi M., Atger M., d'Auriol L. et al Complete amino acid sequence of the human progesterone receptor deduced from cloned cDNA. // Biochemical and Biohyesical Research Communications - 1987 - 143 - P. 740-748.

110. Miller V.M., Duckies S.P. Vascular Actions of Estrogens: Functional Implications // Pharmacol. Rev. - 2008. - Vol. 60, N2. - P.210-241.

111. Mulac-Jericevic B., Mullinax R.A., DeMayo F.J., Lydon J.P., Conneely O.M. Subgroup of reproductive functions of progesterone mediated by progesterone receptor-B isoform. // Science - 2000 - 289(5485) - P.1751-1754.

112. Murphy C.R., Rogers A.W. Effects of ovarian hormones on cell membranes in the rat uterus. III. The surface carbohydrates at the apix of the luminal epithelium. // Cell Biol - 1981 - 3 - P. 305-320.

113. Noci I., Borri P., Coccia M.E., et al. Taddei-Hormonal patterns, steroid receptors and morphological pictures of endometrium in hyperstimulated IVF cycles. // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol - 1997 - 75(2) - P. 215-220.

114. Noyes N., Hampton B.S., Berkeley A., et al. Factors useful in predicting the success of oocyte donation: a 3-year retrospective analysis. // Fertil Steril -2001 -76(1)-P. 92-97.

115. Heng S., Hannan N.J., Rombauts .LJ., Salamonsen L.A., Nie G. PC6 levels in uterine lavage are closely associated with uterine receptivity and

significantly lower in a subgroup of women with unexplained infertility.// HumReprod. 2011 -4 - P.840-846.

116. O'Malley B.W., Schrader W.T., Mani S., Smith C. et al. An alternative ligand-dependent pathway for activation of steroid receptors // Recent Progress in Hormone Research - 1995-50-P. 333-347

117. Ozkan S., Jindal S, Greenseid K. at al. Replete vitamin D stores predict reproductive success following in vitro fertilization.// Fertil Steril. 2010 - 4 - P. 1314-1319.

118. Orvieto R, Nahum R, Meltcer S. at al. Ovarian stimulation in polycystic ovary syndrome patients: the role of body mass index. Reprod Biomed Online. -2009- 3 -P.333-336.

119. Oudendijk J.F., Yarde F., Eijkemans M.J.C., Broekmans F.J.M., and Broer S.L. The poor responder in IVF: is the prognosis always poor? A systematic review Hum. Reprod. Update - Jan 2012 - 1-P. 1-11.

120. Pasqualini J.R. Progestins: presents and future. // J Steroid Biochem

Molec Biol - 1996 - 59 - P.357-363.

121. Prapapanich V, Chen S, Nair SC, Rimermann RA et al. Molecular cloning of human p48 - a transient component of progesterone receptor complexes and an Hsp 70-binding protein. // Molecular Endocrinology - 1996 - 10 — P.420-431.

122. Pratt W.B., Toft D.O. Steroid receptor interactions with heat shock protein and immunophilin chaperones // Endocrinol Rev - 1997 - 18 - P. 306360.

123. Radhupathy R. Functions of embryonic interferons and of the main serum proteins specific for pregnancy // Hum Reprod - 2000 - 15 - P. 713718.

124. Ray R., Novotny N.M., Crisostomo P.R. et al. Sex Steroids and Stem Cell Function // Mol. Med. - 2008. Vol. 14, N (7-8). - P. 493-501.

125. Salha O., Abusheika N. and Sharma V. Dynamics of follicular growth and in vitro oocyte maturation. // Human Reproduction Update - vol.4 - 1998 -P. 816-832.

126. Sartorius C.A., Melville M.Y., Hovland A.R. A third transactivation function (AF-3) of human progesterone receptors located in the unique N-terminal segment of the B-isoform. // Molecular Endocrinology - 1994 — 8 — P. 1347-1360.

127. Schwabe J.W.R., Chapman L., Finch J.T., Rhodes D. The crystal structure of the estrogen receptor DNA-binding domain bound to DNA: how receptor discriminate between their response element. // Cell - 1993 - 75 - P. 567-578.

128. Selye H. Correlation between the chemical structure and the pharmacological actions of the steroids // Endocrinology - 1942 - 30 - P. 437453

129. Serafini PC, Silva ID, Smith GD, at al. Endometrial claudin-4 and leukemia inhibitory factor are associated with assisted reproduction outcome. Reprod Biol Endocrinol. 2009 - 19 - P.30-37.

130. Shoonen W.G., Dijkema R., de Ries R.J., Wagenaas J.L. et al. Human progesterone receptor A and B isoforms in CHO cells. // J Steroid Biochem Molec Biol-1998-64-P. 157-170.

131. Simon C., Piquette G.N., Frances A. et al. Interleukin-1 type I receptor messenger ribonucleic acid (mRNA) expression in human endometrium throughout the menstrual cycle. // Fertil Steril - 1993 - 59 - P. 791-796.

132. Singh M., Chaudhry P., and Asselin E., Bridging endometrial receptivity and implantation: network of hormones, cytokines, and growth factors,//Journal of Endocrinology, 2011 - P.2105-2114.

133. Speroff L. and Marc A. Fritz// Clinical gynecologic endocrinology and infertility, 7-th edition, Lippincott Williams & Wilkins - 2005.

134. Sunder S. and Lenton E.A. Endocrinology of the peri-implantation period // Best Practice & Research Clinical Obstetrics & Gynaecology - Vol. 14- 2000-P.789-800

135. Szekeres-Bartho J, Polgar B. PIBF: The Double Edged Sword. Pregnancy and Tumor.// Am J Reprod Immunol - 2010 - 64- P.77-86.

136. Tabibzadeh S. Patterns of expression of integrin molecules in human endometrium throughout the menstrual cycle. // Hum Reprod - 1992 - 7 - P. 876-888.

137. Tartakovsky B., Goldstein O., Broshi N. Colony stimulation factor-1 blocks early pregnancy in mice. // Biol Reprod - 1991 - 44 - P. 906-912.

138. Tavaniotou A., Bourgain C., Albano C.et al. Endometrial integrin expression in the early luteal phase in natural and stimulated cycles for in vitro fertilization// European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology - Vol. 108-2003-P.-67-71

139. Tetel MJ., Giangrande PH., Leonhardt SA.,Donald P. McDonnell, and Dean P. Edwards Hormone-Dependent Interaction between the Amino- and Carboxyl-Terminal Domains of Progesterone Receptor in Vitro and in Vivo II Molecular Endocrinology - 1999 - 13 - P.910-924.

140. Tei C., Maruyama T., Kuji N. at al. Reduced expression of alphavbeta3 integrin in the endometrium of unexplained infertility patients with recurrent IVF-ET failures: improvement by danazol treatment. // J Assist Reprod Genet. 2003 - 20 - P. 13-20.

141. Thum M.Y., Bhaskaran S., Bansal A.S. at al. Enumerations of peripheral blood natural killer (CD56+ NK) cells, B cells and T cells have no predictive value in IVF treatment outcome. //Hum Reprod. - 2005 - 20-P.1272-1276.

142. Quenby S., Kalumbi C., Bates M., Farquharson R., Vince G.Prednisolone reduces preconceptual endometrial natural killer cells in women with recurrent miscarriage. //Fertil Steril. - 2005 - 84- P.980-984.

143. Vegeto E., Shahbaz M., Wen X., Goldman M., O'Malley B.W. Human progesterone receptor A form is a cell- and promoter- specific repressor of human progesterone receptor B function. // Mol. Endocrinol. - 1993 - 7 - P. 1244-1255.

144. Walter P., Green S., Greene G. et al Cloning of the human estrogen receptor cDNA. // Proceedings of the National Academy of Science - USA -1985 - 82 - P.7889-7893.

145. Yaman C., Ebner T., Sommergruber M., et al. Role of three-dimensional ultrasono-graphic measurement of endometrium volume as a predictor of pregnancy outcome in an IVF-ET program: a preliminary study. // Fertil Steril -2000- 74(4) -P.797-801.

146. Yoshioka H., Harada T. Menstrual cycle-specific inhibition of the proliferation of endometrial stromal cells by interleukin 6 and its soluble receptor // American Journal of Obstetrics and Gynecology, Vol. 180 - 1999 -P.1088-1094.

147. Zhou L., Li R., Wang R., Huang H.X., Zhong K. Local injury to the endometrium in controlled ovarian hyperstimulation cycles improves implantation rates. //Fertil Steril. 89- 2007 - P. 11661176.