Влияние структуры полярных аналитов на факторы удерживания и селективность в условиях высокоэффективной жидкостной хроматографии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Григорьев, Андрей Михайлович

• Григорьев, Андрей Михайлович
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Григорьев, Андрей Михайлович

Основные принятые обозначения.

Введение.

1. ГЛАВА 1 Обзор литературы

1.1 Основные модели удерживания в нормально-фазовом режиме на силикагеле.

1.2 Вопросы разделения изомеров полиеновых соединений.

1.3 Факторы, влияющие на удерживание ионогенных соединений в условиях обращенно-фазовой хроматографии.

1.4 Антоцианы: равновесия в водных растворах и поведение в условиях ВЭЖХ.

2. ГЛАВА 2 Объекты и методы исследования

2.1 Хроматографическое оборудование.

2.2 Нормально-фазовый режим.

2.3 Обращенно-фазовый режим.

2.4 Дополнительное оборудование.

3. ГЛАВА 3 Нормально-фазовая ВЭЖХ соединений с кратными связями, расположенными возле полярной группы

3.1 Хроматографическое поведение непредельных третичных спиртов.

3.2 Расчетные оценки различий хроматографического поведения спиртов.

3.3 Хроматографическое поведение халконов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние структуры полярных аналитов на факторы удерживания и селективность в условиях высокоэффективной жидкостной хроматографии»

Актуальность проблемы. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) - один из наиболее востребованных инструментов современной аналитической и фармацевтической химии. Непрерывное появление новых сорбентов и модификация известных способов разделения, расширение и усложнение инструментальной базы, появление принципиально новых (для ВЭЖХ) типов детекторов свидетельствует о пристальном внимании, проявляемом к данному методу анализа. Развитие теории жидкостной хроматографии привело к созданию адекватных моделей удерживания соединений различного строения в условиях как обращенно-фазовой, так и нормально-фазовой ВЭЖХ, и следовательно, к возможности прогнозирования хроматографического поведения полифункциональных соединений. Следует отметить, что теоретическая трактовка тонких эффектов взаимодействий сорбата, сорбента и компонентов подвижной фазы в адсорбционном слое в большинстве случаев неоднозначна, и потому носит дискуссионный характер. Изучение этих эффектов, выявление закономерностей их проявления приводит не только к уточнению известных или к появлению ^ новых толкований наблюдаемых процессов, но и позволяет непосредственно управлять селективностью разделения, упрощает поиск оптимальных условий анализа специфических многокомпонентных систем: таких, например, как поливитаминные препараты, экстракты натуральных красителей, природных и искусственных смесей, содержащих физиологически активные соединения.

Актуальность таких исследований обостряется наличием проблем фальсификации фармацевтических препаратов и пищевой продукции, определения качества и безопасности промышленных продуктов и исходного сырья. Подавляющее количество биологически активных соединений характеризуются высокой полярностью или способностью ионизироваться, и поэтому можно заключить, что знание факторов, влияющих на их удерживание не только способствует снижению времени, затрачиваемому на подбор условий разделения, но и предохраняет от возможных аналитических ошибок.

Целью работы явилось изучение влияния структуры геометрических изомеров природных и синтетических непредельных соединений на их хроматографическое поведение в зависимости от состава элюента и состояния адсорбционного слоя; выявление факторов, определяющих удерживание ионогенных органических и неорганических веществ в зависимости от рН, солевого фона и добавок модификаторов подвижной фазы.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

• экспериментальное определение параметров удерживания 40 непредельных соединений в 36 нормально-фазовых хроматографических системах;

• экспериментальное определение параметров удерживания 62 ионогенных и неионогенных соединений (антоцианы, флавилиевые соли, халконы, сульфонаты, амины, неорганические соли и пр.) в 15 обращенно-фазовых системах;

• синтез, препаративное ВЭЖХ-разделение ряда геометрических изомеров полиеновых соединений и подтверждение их структур спектроскопическими методами: ИК, ЯМР 'Н и 13С, УФ и видимой области;

• расчет геометрических и энергетических характеристик структур использованных соединений и образуемых ими модельных водородных связей методами квантовой химии и молекулярной механики;

• расчет факторов, влияющих на удерживание антоцианов и их равновесных форм в условиях обращенно-фазовой ВЭЖХ с кислыми подвижными фазами.

Научная новизна работы. На основе наблюдаемого поведения в условиях нормально-фазовой (НФ) и обращенно-фазовой (ОФ) ВЭЖХ дана новая трактовка механизмов удерживания без непосредственного применения инкрементных моделей и (для НФ) - без использования общих физико-химических свойств сорбатов.

Показано, что в присутствии полярных апротонных модификаторов подвижной фазы в условиях НФ на силикагеле (ацетон, сложные эфиры) основной вклад в механизме заместительной сорбции трех непредельных изопреноидных спиртов вносят карбонильные группы модификаторов.

С помощью квантовохимического (и молекулярно-механического) расчета характеристик молекул сорбатов обоснован порядок их удерживания (НФ). В основу расчетов положено формирование водородных связей между гидроксильными группами спиртов и поверхностными функциональными группами сорбента при учете их стерической доступности и подвижности.

Найдено, что селективность разделения 2, ¿'-изомеров полиеновых соединений и халконов (НФ) определяется в большей степени структурой поверхности неподвижной фазы и в меньшей - составом элюента. Установлена тесная корреляция между селективностью и конформационными возможностями молекул и степенью доступности их якорных групп.

Показано, что в присутствии кислот и солей в адсорбционном слое обращенно-фазового сорбента может формироваться дополнительный заряд, » что позволило объяснить наблюдаемое поведение сорбатов - гидрофильных и гидрофобных ионов.

Обоснована возможность образования ионных пар в адсорбционном слое между неорганическими анионами и органическими катионами типа флавилия. Предложена математическая модель, адекватно описывающая характер удерживания антоцианов при варьировании кислотности и солевого состава подвижной фазы.

Практическая значимость работы. Разработан комплекс из 12 методик определения витаминов, полупродуктов их производства и кислот цикла Кребса методом ВЭЖХ, апробированных на Болоховском химкомбинате синтетических полупродуктов и витаминов, НПО "Витамины" (г. Москва), ПО "Биовитамины" (г. Белгород), ПО "Завод лимонной кислоты" (г. Белгород),

ОАО "Ай Си Эн Лексредства" (г. Курск), ООО "Технофарм" (г. Курск). Кроме того, выполнен ряд работ и разработан комплекс методик (17) для определения продуктов поисковых синтезов биологически-активных соединений. Перечень работ приведен в Приложении.

Положения, выносимые на защиту:

1. Обоснование закономерностей удерживания трех непредельных спиртов, обусловленных их геометрическими и конформационными характеристиками и хроматографическими свойствами полярных модификаторов подвижной фазы.

2. Обоснование механизма разделения геометрических изомеров полиеновых соединений и халконов, определяемого различием их структурных и конформационных свойств.

3. Обоснование удерживания органических ионов в присутствии органических и неорганических противоионов.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены на II Международном симпозиуме «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии» (Краснодар, 2005); II Школе-семинаре ( «Ионообменные процессы и выделение физиологически активных веществ»

Воронеж, 2006); 61 региональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2006); III всероссийской конференции «Физико-химические процессы в конденсированном состоянии и на межфазных границах» («ФАГРАН-2006», Воронеж, 2006).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 22 работы, в том числе 19 статей в периодических изданиях, рекомендованных ВАК и 3 в виде тезисов докладов.

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Григорьев, Андрей Михайлович

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Определено, что ключевую роль в процессе заместительной сорбции в условиях нормально-фазовой ВЭЖХ третичных изопреноидных спиртов при использовании сложных эфиров в качестве полярных модификаторов подвижной фазы играет карбонильная группа в структуре эфиров.

2. Порядок удерживания рассмотренных изопреноидных спиртов в значительной степени определяется конформационными характеристиками (подвижностью и доступностью якорной гидроксигруппы) а также энергетикой водородных связей, возникающей между этой группой и полярной поверхностью. Это подтверждено расчетом методами квантовой химии и молекулярной механики барьеров внутреннего вращения молекулярных фрагментов и характером образования модельных водородных связей между гидроксигруппами спиртов и молекулами воды как в донорном, так и в акцепторном вариантах.

3. Повышение селективности разделения 2, ^-изомеров полиеновых соединений и халконов в условиях нормально-фазовой ВЭЖХ является следствием снижения стерической доступности якорной группы 2-изомеров которая в свою очередь, определяется двумя факторами: уменьшением вероятности возникновения выгодных для сорбции 5-транс конформаций (определяемых энергией барьеров вращения молекулярных фрагментов) и площадью максимальной окружности, описываемой неполярными фрагментами молекул. Расчет этих факторов для каждого класса соединений позволяет предсказать селективность разделения без использования общих физико-химических свойств сорбатов.

4. Установлено, что добавки кислот и солей (с анионами СЮ4", СБзСОО", Б04 ) в водных элюентах при обращенно-фазовой ВЭЖХ могут приводить к увеличению отрицательной составляющей полного заряда поверхности сорбента, что объясняет изменение удерживания сорбатов: рост -для катионов и падение - для анионов. Размер этого заряда определяется природой и концентрацией анионов и при одинаковых концентрациях уменьшается в ряду от перхлората до сульфата.

5. Наблюдаемое сильное удерживание органических катионов (флавилия, бензиламинов, витамина В]) и слабое - сульфонатов (в условиях обращено-фазовой ВЭЖХ) связано с формированием отрицательного заряда и электростатическими взаимодействиями в этом слое. Для катионов возможен также ион-парный механизм.

6. Удерживание конверсируемых органических катионов (антоцианов) существенно определяется природой и концентрацией анионов (СЮ4", СР3СОО")„ присутствующих в подвижной фазе и может быть полностью описано в пределах ион-парной модели удерживания. Значительных различий между действием гидрофильного (СЮ4") и гидрофобного (гексансульфонат) анионов добавки не выявлено.

7. Разработано 27 методик определения витаминов, полупродуктов их производства, части кислот цикла Кребса и соединений, участвующих в цепях синтеза перспективных биологически-активных соединений.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Григорьев, Андрей Михайлович, 2006 год

1. Snyder L.R., Kirkland J.J. I I Introduction to Modern Liquid Chromatography. Toronto: John Willey & Sons Inc. 1979. P. 409.

2. Snyder L.R. Principles of adsorption chromatography.- New York: Dekker, 1968.- 413 p.

3. Soczewinski E. Solvent compozition effect in thin-layer chromatography systems of the type silica gel electron donor solvent//Anal.Chem.- 1969.-Vol. 41.-№ 1.- P. 179-182

4. Scott R.P.W., Kucera P. Solute-solvent interaction on the surface of silica gel // J. Chromatogr.- 1978,- Vol. 149.- № 1.- P. 93-110

5. Scott R.P.W., Kucera P. Solute-solvent interaction on the surface of silica gel, II // J. Chromatogr.- 1979,- Vol. 171.- № 1.- P. 37-48

6. Шатц В.Д., Сахартова O.B. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Рига: Зинатне. 1988. 391 с.

7. Березовский, В.М. Химия витаминов. М: Пищевая промышленность.- 1973. 632 с

8. Григорьев, A.M. Хроматографический анализ изофитола / A.M. Григорьев, JI.A. Высочина, З.В. Половинко, В.П. Романенко, В.И. Дейнека, В.М. Староверов // Хим.-фарм. журн.- 1990.- Т. 24.- № П.- С. 81-83

9. O.Becker, R.S. The visual process: photophysics ant photoisomerization of model visual pigments and primary reaction / R.S. Becker // Photochem. Photobiol.- 1988.- V. 48,- P. 369-399

10. Liu R.S.H., New geometric isomers of vitamin A and carotenoids / R.S.H. Liu, A.E. Asato // J. Am. Chem. Soc.- 1977.- V. 99. -№ 24,- P. 8095-8097.

11. Zonta, F. HPLC of retinals, retinols (vitamin A) and their dehydro homologues (vitamin A) / F. Zonta, B. Strancher // J. Chromatogr.1984.- V.301.-P. 65-75

12. Bruening, R.C. Rapid HPLC analysis of retinal mixtures / R.C. Bruening, P. Derguini, K. Nakanishi // J. Chromatogr.- 1986.- V.361.-P. 437-461

13. Bruening, R.C. Preparative scale isolation of 11-cis retinal from isomeric retinal mixture by centrifugal partition chromatography / R.C. Bruening, P. Derguini, K. Nakanishi // J. Chromatogr.- 1986.-V.357.- P. 340-343

14. Landers, G.M. Absence of isomerization of retinyl palmitate, retinol and retinal in chlorinated and nonchlorinated solvents under gold light / G.M. Landers, J.A. Olson // J. Assoc. Off. Anal. Chem.- 1986.-V.69. -№ 1. P.-50-55

15. Tsukida, K. HPLC analysis of cis-trans stereoisomeric 3-dehydroretinals in the presence of retinal isomers / K. Tsukida, R. Masahara, M. Ito // J. Chromatogr.- 1980.- V. 192.- P. 395-401

16. Дейнека, В.И. О механизме образования Z,E изомеров ретиналя / В.И. Дейнека, А.П. Высочин, В.М. Староверов, A.M. Григорьев // Хим.-фарм. журн.- 1992.- Т. 26.- № 11.- С. 90-93.

17. Григорьев, A.M. Новые экспресс-методики определения жирорастворимых витаминов в сиропе «Олиговит» и таблетках «Алфавит» методом ВЭЖХ / A.M. Григорьев, В.М. Староверов // Сорбционные и хроматографические процессы.- 2006.- Т. 6.-Вып. 5,- С. 62-69

18. Модифицированные кремнеземы в сорбции, катализе и хроматографии. Под ред. Г.В. Лисичкина. // М: Химия.- 1986.248 с

19. Фадеев, А.Ю. Распределение по поверхности и динамическое поведение органических молекул, закрепленных на кремнеземе.: дисс. на соискание степени канд. хим. наук: 02.00.04 / Фадеев Александр Юрьевич.- М., 1999.- 226 с

20. Водородная связь / Под ред. Н.Д.Соколова. // М., Наука.- 1981.288 с

21. Рудаков, О.Б. Экспертная система для жидкостной хроматографии: принципы построения и применение вхимическом анализе.: дисс. на соискание степени доктора химических наук: 02.00.02 / Рудаков Олег Борисович.- Воронеж, 2004,- 400 с

22. Snyder, L.R. Solvent-strength selectivity in reversed-phase HPLC / L.R. Snyder, M.A. Quarry, J.L. Glajch // Chromatographia- 1987.- V. 24.- P. 33-44

23. Sentell, K.B. Retention mechanisms in reversed-phase chromatography. Stationary phase bonding density and solute selectivity / K.B. Sentell, J.G. Dorsey // J. Chromatogr.- 1989.- V. 461.-P. 193-207

24. Welsch, T. Silanol effects in reversed-phase liquid chromatography / T. Welsch, H. Frank // J. Chromatogr.- 1990.- V. 506,- P. 97108

25. Horvath, C. Surface Silanols in Silica-Bonded Hydrocarbonaceous Stationary Phases. I. Dual Retention Mechanism in Reversed-Phase / A. Nahum, C. Horvath // J. Chromatogr.- 1981.- V. 203.- P. 53-63

26. Nikitas, P. Effect of the organic modifier concentration on the retention in reversed-phase liquid chromatography II. Tests usingvarious simplified models / P. Nikitas, A. Pappa-Louisi, P. Agrafiotou // J. Chromatogr. A- 2002.- V. 946.- P. 33-45

27. Ко, J. Comparison of selected retention models in reversed-phase liquid chromatography / J. Ко, J.C. Ford // J. Chromatogr. A- 2001.-V.913.-P. 3-13

28. Рудаков, О.Б. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии. / О.Б. Рудаков, И.А. Востров, С.В. Федоров, А.А. Филиппов, В.Ф. Селеменев, А.А. Приданцев.-Воронеж: «Водолей», 2003.- 527 с

29. Григорьев, A.M. Быстрое определение пантенола методом ВЭЖХ / A.M. Григорьев, В.М. Староверов, А.П. Высочин, В.И. Дейнека // Хим.-фарм. журн.-1991.- Т. 25.- № 2.- С. 84-86.

30. Knox, J.N. Theory of Solvent Disturbance Peaks and Experimental Determination of Thermodynamic Dead-Volume in Column Liquid Chromatography / J. H. Knox, R. Kaliszan // J. Chromatogr.- 1985.-V. 349.-P. 211-234

31. Karraker, K.A. Disjoining pressures, zeta potentials and surface tensions of aqueous non-ionic surfactant/electrolyte solutions: theory and comparison to experiment / K.A. Karraker, C.J. Radke // Adv. in Coll. and Int. Sci.- 2002,- V. 96,- P. 231-264

32. Netz, R.R. Debye-Hückel theory for interfacial geometries / R.R. Netz //Phys. Rev.- 1999.- V. 60,- P. 3174-3182

33. Levin, Y. Surface tension of strong electrolytes / Y. Levin, J.E. Flores-Mena // Europhysics Lett.- 2001.- V. 56.- P. 187-192

34. Stillinger, F.H. Interfacial Solutions of the Poisson-Boltzmann Equation / F.H. Stillinger // J. Chem. Phys.- 1961.- V. 35.-№ 5,- P. 1584-1589

35. Ландау, JI. Д. Теоретическая физика. В 10 ч. Ч. 8. Электродинамика сплошных сред / Л.Д. Ландау, Е.М. Лифшиц.-М.: Наука, 1982.- 620 с

36. Оно, С. Молекулярная теория поверхностного натяжения в жидкостях / С. Оно, С. Кондо.- М.: Изд. иностр. лит., 1963.- 290 с. (пер.)

37. Крестов, Г.А. Ионная сольватация / Г.А. Крестов, Н.П.

38. Новоселов, И.С. Перелыгин и др.- М.: Наука, 1987.- 320 с 46.Эрдеи-Груз, Т. Явления переноса в водных растворах / Т. Эрдеи-Груз,- М.: Мир, 1976.- 595 с. (пер.)

39. Гордон, Дж. Органическая химия растворов электролитов / Дж. Гордон.- М.: Мир, 1979.- 712 с. (пер.)

40. Измайлов, Н.А. Электрохимия растворов / Н.А. Измайлов.- М.: «Химия», 1976.- 488 с

41. Добош, Д. Электрохимические константы / Д. Добош.- М.: Мир, 1980.- 365 с. (пер.)

42. Knox, Н. Theory of Solvent Disturbance Peaks and Experimental Determination of Thermodynamic Dead-Volume in Column Liquid Chromatography / H. Knox, R. Kaliszan // J. Chromatogr.- 1985.- V. 349.-P. 211-234

43. Rimmer, C.A. The measurement and meaning of void volumes in reversed-phase liquid chromatography / C.A. Rimmer, Carolyn R. Simmons, J.G. Dorsey // J. Chromatogr.- 2002.- V. 965.- P. 219-232

44. Scott, R.P.W. Chromatography theory / R.P.W. Scott.- Marcel Dekker.: New York, Basel, 2002,- 475 p

45. Horvath, C. Liquid Chromatography of Ionogenic Substances with Nonpolar Stationary Phases / C. Horvath, W. Melander, I. Molnar // Anal.Chem.- 1977,- V. 49.- P. 142-153

46. Melander, W. Reversed-Phase Chromatography. In vol. 2. Vol. 2. High-Performance Liquid Chromatography: Advances and Perspectives / W. Melander, C. Horvath.- New York: Academic Press, 1980,-319 p

47. Chen, G. Electrical Double-Layer Models of Ion-Modified (ion-pair)reversed-phase liquid chromatography / G. Chen, S. G. Weber, L.L. Glavina, F. F. Cantwell // J. Chromatogr.- 1993.- V. 656.- P. 549576

48. Stahlberg, J. Quantitative Evaluation of the Electrostatic Theory for Ion Pair Chromatography / J. Stahlberg // Chromatographia.- 1987.-V. 24,- P. 820-826 57. Stahlberg, J. Retention models for ions in chromatography / J.

49. Stahlberg // J. Chromatogr. A- 1999,- V. 855,- P. 3-55 58.Stahlberg, J. Electrostatic Retention Model for Ion-Exchange Chromatography / J. Stahlberg // Anal. Chem.- 1994.- V. 66.- P. 440449

50. Cecchi, T. Extended Thermodynamic Approach to Ion Interaction Chromatography / T. Cecchi, F. Pucciarelli, P. Passamonti // Anal. Chem.-1991.- V. 73,- P. 2632-2639

51. Cecchi, T. Extended thermodynamic approach to ion interaction chromatography: a thorough comparison with the electrostatic approach, and further quantitative validation / T. Cecchi // J. Chromatogr. A- 2002.- V. 958.- P. 51-58

52. Janosa, P. Reversed-phase high-performance liquid chromatography of ionogenic compounds: comparison of retention models / P. Janosa, J. Skoda//J. Chromatogr. A- 1999.- V. 859.- P. 1-12

53. Roses, M. Influence of mobile phase acid-base equilibria on the chromatographic behaviour of protolytic compounds / M. Roses, E. Bosch // J. Chromatogr. A- 2002.- V. 982.- P. 1-30

54. Espinosa, S. Retention of ionizable compounds on high-performanceliquid chromatography XI. Global linear solvation energy relationships for neutral and ionizable compounds / S Espinosa, E. Bosch, M. Roses // J. Chromatogr. A- 2002.- V. 945,- P. 83-96

55. Dong, M.W. Factors affecting the ion-pair chromatography of water-soluble vitamins / M.W. Dong // J. Chromatogr.- 1988.- V. 442,- P. 81-95

56. Григорьев, A.M. Высокоэффективная жидкостная хроматография синтетического витамина В1 / A.M. Григорьев, JI.A. Высочина, В.М. Староверов, В.И. Дейнека, А.П. Высочин, В.М. Белова // Журн. аналит. химии.- 1992.- Т. 47.- Вып. 10.- С. 1904-1909

57. Староверов, В.М ВЭЖХ анализ водорастворимых витаминов в составе поливитаминного сиропа «Олиговит» / В.М. Староверов, В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, Е.Ф. Прохода, М.В. Покровский, В.В. Иванов. // Хим.-фарм. журн.- 2004,- Т. 38.- № 3,- С. 33-35

58. Roshal, A.D. Luminescent properties of 2-phenylbenzopyrillium salts / A.D. Roshal, D.Y Minaev, V.L. Koval, A.I. Novikov // Optics and Spectroscopy.- 1998.- V. 85.- № 5.- P. 705-710

59. Bonch-Bruevich, A.M. Adsorption and fluorescent properties of pyrillium compounds / A.M. Bonch-Bruevich, R. Gadonas, E.N. Kalitteevskaya etc. // Optics and Spectroscopy.- 2000.- V. 89.- № 5.-P. 712-720

60. Рошаль, А.Д. Нуклеофильная сольватация как причина образования TICT-конформации фенилбензопириллиевых катионов в возбужденном состоянии. // Вестник Харьковского университета.- 1999.- № 454,- С. 125-129

61. Pina, F. Structural transformations of the synthetic salt 4',7-dihydroxyflavylium chloride in acid and basic aqueous solutions. Part 1 Ground state / F. Pina; M. Benedito, M. Lina, P. A. Joao, etc // An.Quim. - 1997,- V. 93,- P. 111-118

62. Pina, F. Photochromism of 4'-Methoxyflavylium Perchlorate. A

63. Write-Lock-Read-Unlock-Erase" Molecular Switching System / F. Pina, M. J. Melo, M. Maestri, R. Ballardini, V. Balzani // J. Am. Chem. Soc. 1997.- V. 119.- P. 5556

64. Figueiredo, P. Photochromism of the Synthetic 4',7-Dihydroxyflavylium Chloride / P. Figueiredo, J. C. Lima, H. Santos, M.-C. Wigand, R. Brouillard, F. Pina, A. Macanita // J. Am. Chem. Soc. 1994.-V. 116.-P. 1249-1254

65. Pina, F. Photochemistry of 3,4 -dimethoxy-7-hydroxyflavylium chloride. Photochromism and excited-state proton transfer / F. Pina, L. Benedito, M. J. Melo, A. J. Parola, M. A. Bernardo // J. Chem. Soc. Faraday Trans. 1996.- V. 92.- № 10.- P. 1693-1699

66. Схунмакерс, П. Оптимизация селективности в хроматографии / П. Схунмакерс. -М.: Мир, 1989.- 399 с

67. Maestria, М. Light and рН switching between the various forms of the 4'-methylflavylium cation / M. Maestria, F. Pina, A. Roque, P. Passaniti // J. Photochem. Photobiol. 2000.- V. 137.- № 1.- P. 21-28

68. Pina, F. Photochromic flavylium compounds as multistate/multifunction molecular-level systems / F. Pina, M. Maestri, V. Balzani // Chem. Commun. 1999.- P. 107-114

69. Илиел, JT. Конформационный анализ / Э. Илиел, Н. Аллинджер, С. Энжиал, Г. Моррисон.- М.: Мир, 1969.- 592 с. (пер.)

70. Молекулярные взаимодействия Под ред. Г. Ратайчак, У. Орвилл-Томас //М.: Мир, 1984.- 600 с. (пер.)

71. Thermodynamic Study of Proton Transfer, Hydration, and Tautomeric Reactions of Malvidin 3-Glucoside / R. Brouillard, B. Delaporte. // J. Am. Chem. Soc.- 1977.- V. 99.- P. 8461-8468

72. Brouillard, R. Origin of the exceptional colour stability of the Zebrina anthocyanin / R. Brouillard, B. Delaporte. // Phytochemistry.- 1981.-V. 20.-P. 143-155

73. Cheminât, A. PMR Investigation of 3-0-(b-D-glucosyl)malvidin. Structural Transformation in Aqueous Solutions / A. Cheminât, R. Brouillard. // Tetrahedron Lett.- 1986.- V. 27.- P. 4457-4460

74. Brouillard, R. The hemiacetal-cis-chalcone equilibrium of malvin, a natural anthocyanin / R. Brouillard, L. Jacques. // Canadian Journal of Chemistry.- 1990,- V. 68,- № 5,- P. 5755-5761

75. Figueiredo, P. Photochromism of the Synthetic 4',7-Dihydroxyflavylium Chloride / P. Figueiredo, J. C. Lima, H. Santos, M.-C. Wigand, R. Brouillard, F. Pina, A. Macanita. // J. Amer. Chem. Soc.- 1994.- V. 116,- № 4.- P. 1249-1254

76. Merlin, J. C. Resonance Raman Spectroscopic studies of anthocyanins and anthocyanidins in aqueous solutions / J. C. Merlin, A. Statoua, J. P. Cornard, M. Saidi-Idrissi, R. Brouillard. // Phytochemistry.- 1994.-V. 35,- № l.-P. 227-232

77. Dangles, O. Kinetic and thermodynamic investigation of the aluminium-anthocyanin complexation in aqueous solution / O. Dangles, M. Elhabiri, R. Brouillard. // Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 2.- 1994.- № 12.- P. 2587-2596

78. Goiffon, J.-P. High-performance liquid chromatography of red fruit anthocyanins / J.-P. Goiffon, M. Brun, M.-J. Bourrier // J. Chromatogr. A. -1991.- V. 537.- P. 101-121

79. Goiffon, J.-P. Anthocyanic pigment determination in red fruit juices, concentrated juices and syrups using liquid chromatography / J.-P. Goiffon, P.P. Moulyb, E.M. Gaydouc // Anal. Chim. Acta. 1999.- V. 382.-P. 39-50

80. Дейнека, В.И. Основные антоцианы некоторых растений семейства Grossulariaceae / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, В.М.

81. Староверов, A.A. Сиротин 11 Химия природн. соедин.- 2003.- № 4.- С. 324-325

82. Дейнека, В.И. Основные антоцианы лепестков семи сортов Tulpa / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, В.М. Староверов, В.В. Фесенко // Химия природн. соедин.- 2003.- № 5.- С. 414

83. Дейнека, В.И. Антоцианы некоторых растений Белгородской флоры / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, A.M. Ермаков // Химия природн. соедин.- 2003.- № 5.- С. 412-413

84. Дейнека, В.И. ВЭЖХ в исследовании флавоноидов. Определение рутина / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, В.М. Староверов // Хим.-фарм. журн.- 2004,- Т. 38.- № 9.- С. 23-25

85. Дейнека, В.И. Относительный анализ удерживания гликозидов цианидина / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев // Журн. физ. химии.- 2004.- Т. 78.- № 5,- С. 923-926

86. Дейнека, В.И. Исследование антоцианов черники в плодах и препаратах на ее основе / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, JI.A. Дейнека, Е.И. Шапошник, В.М. Староверов // Зав. лаб.- 2006.- № З.-С. 16-20

87. Дейнека, В.И. Инкрементный подход в анализе антоцианов методом ВЭЖХ / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, В.М. Староверов, О.Н. Борзенко // Химия природн. соедин.- 2003.- № 2,-С. 137-139

88. Дейнека, В.И. ВЭЖХ в анализе антоцианов: исследование цианидиновых гликозидов плодов растений рода Prunus / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев, О.Н. Борзенко, В.М. Староверов, М.А. Трубицын // Хим.-фарм. журн,- 2004.- Т. 38.- № 8,- С. 29-31

89. Дейнека, В.И. Определение антоцианов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Некоторые закономерности удерживания / В. И. Дейнека, А. М. Григорьев // Журн. аналит. химии.- 2004,- Т. 59.- Вып. 3,- С. 305-309

90. Дейнека, В.И. Относительный анализ удерживания гликозидов цианидина / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев // Журн. физ. химии.- 2004.- Т. 78.- № 5.- С. 923-926

91. Дейнека, В.И. Удерживание антоцианов в обращенно-фазовой системе со смешанным элюентом ацетонитрил-муравьиная кислота-вода / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев // Журн. физ. химии.- 2005,- Т. 79.- № 5.- С. 900-903

92. Григорьев, A.M. Хроматографическое поведение антоцианов в кислых водно-ацетонитрильных подвижных фазах / A.M. Григорьев, В.И. Дейнека, О.Б. Рудаков // Сорбционные и хроматографические процессы.- 2005.- Т. 5,- Вып. 4.- С. 508-534

93. Hanai, Т. Quantitative structure-retention relationships of phenolic compounds without Hammett's equations / T. Hanai // J. Chromatogr. A. 2003,- V. 985.- № 1,- P. 343-349

94. Hanai, T. Simulation of chromatography of phenolic compounds with a computational chemical method / T. Hanai // J. Chromatogr. A. 2004.- V. 1027.- № i. p. 279-287

95. Amic, D. Application of topological indices to chromatographic data: Calculation of the retention indices of anthocyanins / D. Amic, D. Davidovic-Amic, N. Trinajstic. // J. Chromatogr. A. 1993.- У. 653.-№1.-P. 115-121

96. Tsao, R. Optimization of a new mobile phase to know the complex and real polyphenolic composition: towards a total phenolic index using high-performance liquid chromatography / R Tsao, R. Yang. // J. Chromatogr. A. 2003.- V. 1018,- № 1.- P. 29-40

97. Liu, X. Quantification and Purification of Mulberry Anthocyanins with Macroporous Resins / X. Liu, G. Xiao, W. Chen, Y. Xu, J. Wu // Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2004.-V. 5.- P. 326-331

98. Vendramini, A. Phenolic Compounds in Acerola Fruit (Malpighia punicifolia, L.) / A. Vendramini, L. Trugo // J. Braz. Chem. Soc. 2004.- V. 15.- № 5.- P. 326-331

99. Vendramini, A. Phenolic Compounds in Acerola Fruit (Malpighia punicifolia, L.) / A. Vendramini, L. Trugo // J. Braz. Chem. Soc. 2004.- V. 15.- № 5.- P. 326-331

100. Mondello, L. Determination of anthocyanins in blood orange juices by HPLC analysis / L. Mondello, A. Cotroneo, G. Errante, G. Dugo, P. Dugo // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. -2000.-V. 235.-P. 191-195

101. Su Noh Ryu. High Performance Liquid Chromatographic Determination of Anthocyanin Pigments in Some Varieties of Black Rice / Su Noh Ryu, Sun Zik Park, Chi-Tang Ho // J. Food Drug Anal. 1998,-V. 6.-№4,-P. 729-736

102. Revilla, E. Value of high-performance liquid chromatographic analysis of anthocyanins in the differentiation of red grape cultivars and red wines made from them / E. Revilla, E. Garcia-Beneytez, F.

103. Cabello, G. Martin-Ortega, J.-M. Ryan. // Journal of Chromatography A. 2001.- V. 915.- № 1.- P. 53-60

104. Revilla, E. Comparison of Several Procedures Used for the Extraction of Anthocyanins from Red Grapes / E. Revilla, J.M. Ryan, G. Martin-Ortega. // J. Agric. Food Chem. 1998,- V. 46.- № 11.- P. 4592-4597

105. Kiss, G. A. C. Solid-phase extraction and high-performance liquid chromatographic separation of pigments of red wines / G. A. C. Kiss, E. Forgacs, T. Cserhati, etc. // J. Chromatogr. A. 2000.- V. 889,-№ l.-P. 51-57

106. Johnston, T.V. Separation of anthocyanin pigments in wine by Low Pressure Column Chromatography / T.V. Johnston, J. R. Morris. //J. FoodSci.- 1996,-V. 61.-№ i.p. 109-111

107. Mozeti, B. Determination and Quantitation of Anthocyanins and Hydroxycinnamic Acids in Different Cultivars of Sweet Cherries

108. Prunus avium L.) from Nova Gorica Region (Slovenia) / B. Mozeti, P. Trebse, J. Hribar. // Food Technol. Biotechnol. 2002.- V. 40,- № 3.- P. 207-212

109. Brandt, K. Structure and biosynthesis of anthocyanins in flowers of Campanula / K. Brandt, T. Kondo, H. Aoki; T. Goto. // Phytochemistry. 1993,- V. 33.- № 1.- P. 209-212

110. Drdak, M. Analysis of anthocyanins in red wines by high-perfortance liquid chromatography using butylamines in the mobile phase / M. Drdak, P. Daucik, J. Kubasky. // J. Chromatogr. 1990.- V. 504.- P. 207-209

111. Merken, H.M. Liquid chromatographic method for the separation and quantification of prominent flavonoid aglycones / H. M. Merken, G. R. Beecher. // J. Chromatogr. A. 2000.- V. 897,- P. 177-184

112. Morais, H. Column Liquid Chromatography Stability of Anthocyanins Extracted from Grape Skins / H. Morais // Chromatographia. - 2002.- V. 56.- P. 173

113. Atanasova, V. Effect of oxygenation on polyphenol changes occurring in the course of wine-making / V. Atanasova, H. Fulcrand, V. Cheynier, M. Moutounet // Anal. Chim. Acta. 2002,- V. 458.- P. 15-27

114. Atanasova, V. Structure of a new dimeric acetaldehyde malvidin 3-glucoside condensation product / V. Atanasova, H. Fulcrand, V. Cheynier, M. Moutounet // Tetrahedron Letters. 2002.-V. 43.- P. 6151-6153

115. Froytlog, C. Combination of chromatographic techniques for the preparative isolation of anthocyanins applied on blackcurrant (Ribes nigrum) fruits / C. Froytlog, R. Slimestad, O.M. Andersen. // J. Chromatogr. A. - 1998.- V. 825.- № 1.- P. 89-95

116. Fossen, T. Characteristic anthocyanin pattern from onions and other Allium / T. Fossen, O.M. Andersen, D.O. Ovstedal, A.T. Petersen, A. Raknes. // J. Food Sci. 1996,- V. 61,- № 4.- P. 703-706

117. Francis, G. W. Droplet counter-current chromatography of anthocyanins / G. W. Francis, O.M. Andersen. // J. Chromatogr.1984.- V. 283.- P. 445-448

118. Andersen, O. M. Simultaneous analysis of anthocyanins and anthocyanidins on cellulose thin layers / O.M. Andersen, G. W. Francis. // J. Chromatogr. 1985.- V. 318.- P. 450

119. Andersen, O. M. Anthocyanins in fruits of Vaccinium-uliginosum L (Bog Whortleberry) / O.M. Andersen // J. Food Sci.1985.- V. 52.-№3.-P. 665

120. Andersen, O. M. NMR of anthocyanins assignments and effects of exchanging aromatic protons / A.T. Pedersen, O.M. Andersen, D.W. Aksnes, W. Nerdal // Magnetic Resonance in Chemistry.- 1993.- V. 31,- № 11- P. 972-976

121. Andersen, O. M. Acylated anthocyanins from petunia flowers / R. Slimestad, A. Aaberg, O.M. Andersen. // Phytochemistry.- 1999.-V. 50.- № 6- P. 1081-1086

122. Andersen, O. M. Chromatographic separation of anthocyanins in cowberry (Lingonberry) Vaccinium vites-idaea L / O.M. Andersen. // J. Food Sci.- 1985.- V. 50.- P. 1230

123. Cabrita, L. Colour and stability of the six common anthocyanidin 3-glucosides in aqueous solutions / L. Cabrita, T. Fossen, O.M. Andersen. // Food Chem.- 2000,- V. 68,- P. 101-107

124. Fossen, T. Delphinidin 3'-galloylgalactosides from blue flowers of Nymphaea caerulea / T. Fossen, O.M. Andersen. // Phytochemistry.- 1999.- V. 50.-№ 7-P. 1185-1188

125. Andersen, O. M. Anthocyanins from Maize (Zea mays) and Reed Canarygrass (Phalaris arundinacea) / T. Fossen, R. Slimestad, O.M. Andersen. // J. Agric. Food Chem.- 2001.- V. 49.- № 5- P. 23182321

126. Vivar-Quintana, A. M. Anthocyanin-derived pigments and colour of red wines / A.M. Vivar-Quintana, C. Santos-Buelga, J.C. Rivas-Gonzalo. // Anal. Chim. Acta.- 2002.- V. 458.- P. 147-155

127. Kennedy, J. A. Analysis of pigmented high-molecular-mass grape phenolics using ion-pair, normal-phase high-performance liquid chromatography / J.A. Kennedy, A.L. Waterhouse. // J. Chromatogr. A.- 2000.- V. 866.- № 1- P. 25-34

128. Kennedy, J. A. Composition of grape skin proanthocyanidins at different stages of berry development / J.A. Kennedy, Y. Hayasaka, S. Vidal, E.J. Waters, G.P. Jones. // J. Agric. Food Chem.- 2001.- V. 49.-№ 11-P. 5348-5355

129. Kennedy, J. A. Changes in grape seed polyphenols during fruit ripening / J.A. Kennedy, M.A. Matthews, A.L. Waterhouse. // Phytochemistry.- 2000.- V. 55.- № 1- P. 77-85

130. Kennedy, J. A. Analysis of proanthocyanidins by highperformance gel permeation chromatography / J.A. Kennedy, A.W. Taylor. // Journal of Chromatography A.- 2003.- V. 995.- № 1- P. 99107

131. УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор ОАО «НИИ ТМП»• \Ч/ . •■ ■ '.У/- • ¡\к.х.н;. В.М. Староверов ' L1 2006 г.