Влияние рекомбинантного растворимого рецептора интерлейкина-5 (А-цепь) на интерлейкин-5-опосредованные эффекты при экспериментальной бронхиальной астме тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Попова, Ирина Сергеевна

• Попова, Ирина Сергеевна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Попова, Ирина Сергеевна

Оглавление

Список используемых сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Патогенез бронхиальной астмы

1.1.1. Роль эозинофилов в развитии аллергического воспаления при 21 бронхиальной астме

1.1.2. Роль интерлейкина-5 в патогенезе бронхиальной астмы

1.2. Функциональный рецептор интерлейкина

1.2.1. Генетические аспекты, структура и функции рецепторного 36 комплекса интерлейкина

1.2.2. Клонирование отдельных субъединиц рецептора 39 интерлейкина

1.3. Проведение специфического сигнала в клетку

1.4. Анти-интерлейкин-5 терапия

1.5. Модели аллергического воспаления in vivo

1.6. Молекулярное клонирование

1.6.1. Эндонуклеазы рестрикции

1.6.2. Векторы для клонирования

1.6.3. Введение молекул ДНК в клетки

1.6.4. Методы отбора гибридных клонов 60 Заключение

Глава 2. Материал и методы

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы

2.2.1. Выделение тотальной РНК

2.2.2. Амплификация РНК в RT-ПЦР

2.2.3. Реакция рестрикции

2.2.4. Лигирование векторной и ПЦР-амплифицированной ДНК

2.2.5. Трансформация E.coli плазмидной ДНК

2.2.6. Микровыделение плазмидной ДНК

2.2.7. Секвенирование ДНК методом химической деградации по 72 Максаму - Гилберту

2.2.8. Электрофорез в агарозных и полиакриламидных гелях

2.2.9. Белковый электрофорез в ПААГ

2.2.10. Выделение белка на Ni NTA агарозе

2.2.11. Получение эозинофилов на градиенте плотности фиколла и 75 35% раствора урографина

2.2.12. Методы оценки жизнеспособности клеток

2.2.13. Цитоморфологический анализ апоптотической гибели клеток

2.2.14. Метод индукции и ингибирования апоптотической гибели

2.2.15. Исследование сократительной активности гладких мышц 77 бронхов морских свинок

2.2.16. Гистологическое исследование слизистой оболочки бронхов

2.2.17. Морфометрическое исследование слизистой оболочки 82 бронхов

2.2.18. Анализ экспрессии мРНК ИЛ-5 и его растворимого рецептора

2.2.19. Статистическая обработка результатов

Глава 3. Результаты собственных исследований и их обсуяедение 85 Введение 85 3.1. Моделирование бронхиальной астмы на морских свинках и оценка биологических эффектов ИЛ

3.1.1. Внешние признаки бронхоспазма

3.1.2. Гистологическая характеристика слизистой оболочки 88 бронхов в контрольной группе животных

3.1.3. Гистологическая характеристика слизистой оболочки 91 бронхов в группе животных с моделью бронхиальной астмы

3.1.4. Морфометрические исследования слизистой оболочки 95 бронхов в группе животных с моделью бронхиальной астмы

3.1.5. Морфометрический анализ клеточных популяций в собственной пластинке бронхов у морских свинок при моделировании астматического приступа

3.2. Особенности влияния ИЛ-5 на эозинофилы периферической 99 крови морских свинок с экспериментальной бронхиальной астмой

3.2.1. Характеристика экспрессии мРНК ИЛ-5 и его рецептора (а- 99 субъединицы) на эозинофилах периферической крови морских свинок с экспериментальной бронхиальной астмой

3.2.2. Влияние ИЛ-5 на апоптоз клеточной культуры эозинофилов 101 периферической крови морских свинок с экспериментальной бронхиальной астме

3.3. Особенности взаимодействия ИЛ-5 с гладкомышечными 104 клетками на примере гладкомышечных клеток бронхов морских свинок с экспериментальной бронхиальной астмой

3.3.1. Изучение эффектов действия гистамина, ИЛ-5 на 104 сократительную активность гладкомышечных клеток бронхов морских свинок с экспериментальной бронхиальной астмой

3.3.2. Храктеристика экспрессии мРНК ИЛ-5 и его рецептора (а- 108 субъединицы) на гладких мышцах бронхов морских свинок с экспериментальной бронхиальной астмой

3.4. Получение рекомбинантной растворимой изоформы 111 рецептора ИЛ-5 (а- субъединицы)

3.4.1. Клонирование мРНК рИЛ-5Ра в клонирующий вектор

3.4.1.1. Подбор и синтез специфичных праймеров для ИЛ-5 Ра

3.4.1.2. Выбор клонирующего вектора

3.4.1.3. Подготовка вектора и фрагмента для клонирования

3.4.1.4. Отбор клонов, содержащих целевую плазмиду pBLSK-рИЛ

3.4.2. Клонирование фрагмента рИЛ-5Ра в экспрессирующий 126 плазмидный вектор рЕТ15Ь

3.4.3. Получение рекомбинантного белка рИЛ-5Ра

3.4.4. Анализ экспрессии рекомбинантного белка рИЛ-5Ра 130 3.5. Оценка биологических эффектов рекомбинантного растворимого рецептора ИЛ-5Ра на модели аллергического воспаления

3.5.1. Оценка биологических эффектов рекомбинантного 132 растворимого рецептора ИЛ-5Ра на эозинофилы периферической крови морских свинок с экспериментальной бронхиальной астмой

3.5.2. Изучение эффектов действия рекомбинантного растворимого 134 рецептора ИЛ-5Ра на сократительную активность сегментов гладкомышечных клеток бронхов морских свинок с экспериментальной бронхиальной астмой

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние рекомбинантного растворимого рецептора интерлейкина-5 (А-цепь) на интерлейкин-5-опосредованные эффекты при экспериментальной бронхиальной астме»

Актуальность проблемы

По социально-экономическому ущербу, влиянию на уровень здоровья и качество жизни пациентов, аллергические заболевания вышли в число первых трех патологий в структуре болезней человека. Согласно последним данным ВОЗ, около 15% взрослого и 25% детского населения планеты страдают различными аллергическими заболеваниями, существенный вклад в которые вносит бронхиальная астма (БА). БА относится к группе мультифакториальных заболеваниий, этиология и патогенез которых определяется сложным взаимодействием факторов окружающей среды и генетических факторов [49]. Эпидемиологические исследования указывают на рост заболеваемости БА не только в Российской федерации, но и в других, преимущественно европейских странах [9, 14, 15]. Причин этому может быть несколько - ухудшение экологической обстановки, нарушение иммунного статуса, возросшие стрессовые нагрузки, рост числа острых респираторных инфекций и многие другие, которые часто являются провоцирующими факторами в развитии БА.

Широкая распространенность БА, ежегодный прирост количества пациентов с данной патологией, усиление тяжести клинического течения и снижение качества жизни пациентов превратили БА из исключительно медицинской в глобальную медико-социальную проблему [9, 14, 15]. Все эти факторы побуждают к интенсивному изучению различных аспектов данного заболевания в клинике и эксперименте.

Изучение патогенетических основ БА является предметом исследования многих ученых. Установлено, что ключевыми клетками, участвующими в развитии аллергического воспаления при БА являются эозинофилы [121]. Инициируя позднюю фазу воспаления, эозинофилы обеспечивают развитие гиперреактивности и ремоделирование бронхов [113]. Эозинофилы являются источником огромного количества токсических и провоспалительных продуктов, приводящих к повреждению тканей легких.

Растворимые медиаторы, которые влияют на функциональную активность эозинофилов, исследуются относительно недавно. К одним из наиболее значимых в развитии Б А относится интерлейкин-5 (ИЛ-5). Он является определяющим в инициации и регуляции эозинофил -опосредованных воспалительных реакций. ИЛ-5 обладает широким спектром биологических эффектов, играя ключевую роль в дифференцировке, созревании и активации эозинофилов при Б А [112].

Эффекты ИЛ-5 на эозинофилы опосредуются через его рецепторный аппарат (рецептор ИЛ-5 (ИЛ-5Р)), который является мембранным гликопротеином и состоит из 2-х субъединиц: а-субъединицы, отвечающей за специфичное связывание с ИЛ-5, и Р-субъединицы, необходимой для внутриклеточного проведения сигнала. Альтернативный сплайсинг а-субъединицы может приводить к образованию нескольких изоформ: мембраносвязанной или растворимой форм, которые опосредуют либо являются антагонистами активности ИЛ-5, соответственно [99, 137], однако могут связывать ИЛ-5 с достаточно высокой аффинностью. Таким образом, чтобы предотвратить воспаление при БА необходимо блокировать действие ИЛ-5 на эозинофилы, то есть блокировать взаимодействие между ИЛ-5 и его клеточным рецептором.

Высокий системный (в периферической крови) и местный (в мокроте) уровень ИЛ-5 ассоциирован с различными формами заболевания. Патофизиологическая роль ИЛ-5 при астме выглядит очевидной -поддержание эозинофильного воспаления. Однако известно, что эозинофилы являются самостоятельными продуцентами ИЛ-5. Анализ причинно-следственной связи развития эозинофилии при БА представляет большой интерес.

Другой ключевой клеткой-мишенью, задействованной в формировании патологических проявлений БА, является гладкомышечная клетка бронхов дыхательных путей. Причем гладкие мышцы могут являться «не только объектом, но и субъектом воспаления» [5]. Современная концепция предполагает, что наличие пула гладкомышечных клеток секреторного типа, обеспечивает соответствующее цитокиновое микроокружение при Th2 воспалительном процессе. Таким образом, ИЛ-5 может действовать на гладкие мышцы опосредованно, через повышение продукции эозинофил -ассоциированных медиаторов воспаления, и непосредственно, включаясь в систему «эпителий - гладкомышечная клетка». Но его роль в этом процессе не до конца понятна.

В настоящее время достигнуты значительные успехи в понимании патогенеза БА, взаимосвязи иммунных механизмов воспаления и манифестации клинических проявлений астмы. Применение традиционных терапевтических подходов с использованием кортикостероидных препаратов эффективно для контроля большинства симптомов астмы, но не позволяет проводить целенаправленную коррекцию функции клеток-эффекторов. В связи с этим большое значение приобретает поиск новых фармакологических стратегий, направленных на регуляцию сложного взаимодействия между эозинофилами и ИЛ-5. Одним из возможных подходов в блокировании эффектов ИЛ-5 на клетки - мишени является использование растворимой формы рецептора ИЛ-5, которая способна образовывать комплекс с ИЛ-5, тем самым инактивируя его. Таким образом, получение растворимой изоформы рецептора и использование его в качестве регулятора эффектов ИЛ-5 является актуальной задачей для решения вопросов разработки новых направлений в терапии БА.

Цель: Установить механизм регуляции ИЛ-5-опосредованных изменений в эозинофилах и гладкомышечных клетках бронхов с использованием рекомбинантного растворимого рецептора ИЛ-5 в экспериментальной модели бронхиальной астмы. Задачи:

1. С использованием морфологических критериев оценить валидность модели бронхиальной астмы на морских свинках.

2. Изучить действие ИЛ-5 на эозинофилы (апоптоз, экспрессию мРНК ИЛ-5 и его рецептора) и гладкомышечные клетки бронхов (сократимость, экспрессию мРНК ИЛ-5 и его рецептора), полученные от интактных животных и животных с экспериментальной бронхиальной астмой.

3. Разработать систему экспрессии, выделения и очистки рекомбинантного растворимого рецептора интерлейкин-5 (а-цепь).

4. Исследовать влияние рекомбинантного растворимого рецептора ИЛ-5 в отношении эффектов ИЛ-5 на эозинофилы и гладкомышечные клетки бронхов, полученных от интактных животных и животных с экспериментальной бронхиальной астмой.

Научная новизна

Впервые in vitro установлен механизм действия ИЛ-5 на гладкие мышцы дыхательных путей, основанный на взаимодействии цитокина с его клеточным рецептором, и проявляющийся повышением бронхиальной гиперреактивности. Показано, что ИЛ-5 непосредственно не вызывает сокращения гладких мышц, но приводит к гиперреактивности, значительно повышая чувствительность гладких мышц к гистамину. Впервые обнаружено, что в гладких мышцах экспрессируется только мРНК мембраносвязанной изоформы рецептора ИЛ-5.

Впервые показано, что сенсибилизация морских свинок овальбумином приводит к снижению апоптоза эозинофилов периферической крови и увеличению в них уровня мРНК ИЛ-5 и его рецептора.

Впервые осуществлено клонирование полноразмерной кДНК растворимой изоформы рецептора ИЛ-5 человека (ИЛ-5Ра) по сайтам рестрикции эндонуклеаз FauNDI и Sfr2741 в экспрессирующую плазмиду. Получен бактериальный штамм, несущий плазмиду рЕТ15Ь+/рИЛ-5Ра, продуцирующий рекомбинантный растворимый рецептор к ИЛ-5.

Доказано, что рекомбинантный растворимый рецептор ИЛ-5Ра блокирует ИЛ-5-опосредованные эффекты в отношении бронхиальной гиперреактивности и антиапоптотического действия на эозинофилы. Причем рекомбинантный рИЛ-5Ра может связывать как эндогенный, так и экзогенный ИЛ-5 по конкурентному механизму.

Теоретическое и практическое значение работы Получены новые данные об участии ИЛ-5 в формировании бронхиальной гиперреактивности по эозинофил-независимому пути и эффектах ИЛ-5 в отношении эозинофилов in vitro. В результате проделанной работы получен бактериальный штамм, продуцирующий рекомбинантный растворимый рецептор ИЛ-5Ра. Возможность использования полученого белка в качестве ингибитора эффектов ИЛ-5, обоснована на экспериментальной модели БА. Дальнейшее использование разработанной технологии создания рекомбинантного белка возможно не только для получения растворимого рецептора ИЛ-5, но и для получения других рекомбинантных продуктов.

Положения, выносимые на защиту

1. Сенсибилизация морских свинок овальбумином приводит к формированию экспериментальной бронхиальной астмы, которая характеризуется воспалением с развитием эозинофилии ткани легких, повышенным уровнем мРНК ИЛ-5 и его рецептора, снижением активности апоптоза эозинофилов периферической крови, а также повышенной чувствительностью гладких мышц бронхов к гистамину.

2. Культивирование эозинофилов, полученных от интактных животных, с экзогенным ИЛ-5 не влияет на образование мРНК ИЛ-5 и его рецептора в этих клетках. Культивирование эозинофилов, полученных от животных с экспериментальной бронхиальной астмой, приводит к снижению уровня мРНК обеих изоформ рецептора. Культивирование эозинофилов морских свинок с ИЛ-5 вызывает уменьшение числа клеток с морфологическими признаками апоптоза.

3. В эпителизированных фрагментах гладких мышц бронхов морских свинок определяется одновременно мРНК ИЛ-5 и мРНК его рецептора.

При экспериментальной бронхиальной астме оба показателя повышены по сравнению с контролем. Деэпителизированные фрагменты характеризуются экспрессией мРНК рецептора ИЛ-5 в контрольной группе, повышенным уровнем мРНК рецептора ИЛ-5 и незначительным уровнем мРНК ИЛ-5 в группе животных с экспериментальной бронхиальной астмой. Гладкие мышцы бронхов характеризуются экспрессией мРНК только мембраносвязанной изоформы рецептора. Экзогенный ИЛ-5 повышает чувствительность гладкомышечных клеток бронхов к гистамину. 4. Клонирование кДНК рецептора ИЛ-5 по сайтам рестрикции FauNDI и Sfr2741 в плазмиду рЕТ15Ь+ позволяет получить рекомбинантный растворимый рецептор ИЛ-5, соответствующий нативному растворимому рецептору. Инкубация с рекомбинантным растворимым рецептором ИЛ-5 блокирует ИЛ-5 опосредованное увеличение жизнеспособности эозинофилов и повышение чувствительности гладких мышц бронхов к гистамину. Апробация работы

Материалы диссертации доложены на международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (г. Томск, 2003, 2004); на Европейском респираторном конгрессе (г. Вена, 2003, г. Копенгаген, 2005); на конкурсе молодых ученых СибГМУ (г. Томск, 2004); на Всероссийском конгрессе «Фундаментальные науки в медицине» (г. Новосибирск, 2005).

Внедрение результатов исследований

Полученные результаты используются в учебном процессе на кафедре биофизики, на кафедре биохимии, на кафедре патофизиологии Сибирского государственного медицинского университета. Методы молекулярного клонирования и RT-ПЦР растворимого рецептора к ИЛ-5 адаптированы и внедрены в практику научных исследований Центральной научноисследовательской лаборатории Сибирского государственного медицинского университета.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 15, из них 7 - в журналах рекомендованных. ВАК РФ.

Объем и структура диссертации

Работа изложена на 158 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, изложения материалов и методов, главы собственных результатов и выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 38 рисунками и 8 таблицами. Список источников цитируемой литературы включает в себя 194 работы, из которых 19 отечественных и 175 - зарубежных авторов.

Работа выполнена на базе отдела молекулярной биологии (зав. отд. -д.м.н. И.И. Иванчук) Центральной научно-исследовательской лаборатории Сибирского государственного медицинского университета (зав. ЦНИЛ -профессор, д.м.н. А.Н. Байков), кафедры патофизиологии Сибирского государственного медицинского университета (зав. каф. - акад. В.В. Новицкий), кафедры морфологии и общей патологии Сибирского государственного медицинского университета (зав. каф. - д.м.н. И.В. Сухо до ло), кафедры биофизики Сибирского государственного медицинского университета (зав. каф. - д.м.н. М.Б. Баскаков), лаборатории фармакогеномики (зав. лаб. - М.Л. Филипенко) СО РАН Новосибирского института биоорганической химии (директор института - В.В. Власов).

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Попова, Ирина Сергеевна

Выводы

1. Моделирование бронхоспазма у морских свинок с использованием овальбумина приводит к формированию морфологической картины легких, характерной для бронхиальной астмы у человека, развитию гиперреактивности бронхов, проявляющейся увеличением амплитуды сократительных реакций на гистамин.

2. Развитие экспериментальной бронхиальной астмы у морских свинок приводит к снижению апоптоза эозинофилов, повышению экспрессии ИЛ-5, мембраносвязанной и растворимой изоформ рецептора ИЛ-5. Сократимость гладких мышц на фоне экспериментальной бронхиальной астмы повышается, эпителизированные фрагменты гладких мышц демонстрируют повышение эксперессии мРНК ИЛ-5 и мембраносвязанной изоформы рецептора, тогда как деэпителизированные фрагменты - только мембраносвязанной формы рецептора,

3. Экспрессирующая система в E.coli, содержащая гибридную плазмиду рЕТ15Ь+ с фрагментом кДНК растворимой изоформы рецептора ИЛ-5 человека, включенным по сайтам рестрикции FauNDI и Sfr2741 позволяет получать рекомбинантный белок, демонстрирующий биологические свойства, характерные для нативного растворимого рецептора.

4. Использование рекомбинантного растворимого рецептора ИЛ-5 ингибирует эффекты как экзогенного, так и эндогенного ИЛ-5 в отношении апоптоза эозинофилов периферической крови и сократимости гладких мышц бронхов.

Заключение

В результате проведенного исследования разработана адекватная модель БА на животных, что позволило использовать ее для изучения патофизиологических аспектов БА.

На экспериментальной моделе БА изучено непосредственное действие ИЛ-5 на эозинофилы периферической крови и гладкомышечные клетки бронхов.

Установлено, что эозинофилы, полученные от животных с экспериментальной БА, экспрессируют мРНК ИЛ-5 и изоформ его рецептора более выраженно, чем в контрольной группе животных. Культивирование с ИЛ-5 практически не изменяло исследуемых значений в контрольной группе, тогда как на фоне экспериментальной БА происходило снижение экспрессии мРНК обеих изоформ рецептора до контрольных значений.

Показано, что эозинофилы, полученные из периферической крови сенсибилизированных животных, в меньшей степени подвержены апоптозу, чем клетки, полученные из крови контрольных животных. Кроме того, в культуре эозинофилов, полученных от животных обеих групп на фоне низких показателей апоптотической гибели в интактной культуре, добавление ИЛ-5 вызывает значительные изменения в активности апоптоза эозинофилов в сторону уменьшения числа клеток с морфологическими признаками апоптоза.

Исследования, проведенные на гладкомышечных препаратах показали, что у сенсибилизированных животных развивалась более выраженная гиперреактивность гладких мышц воздухоносных путей на воздействие гистамина, по сравнению с группой интактных животных, что проявлялось в значительном снижении пороговых концентраций и увеличении максимальной амплитуды сокращения. Инкубация сегментов в присутствии ИЛ-5 приводила к значительному повышению сократительной реакции гладких мышц бронхов в ответ на действие гистамина по сравнению с неинкубированными сегментами. Полученные результаты дают основание предположить, что ИЛ-5 оказывает непосредственное влияние на функциональное состояние гладкомышечных клеток бронхов, вероятно через соответствующие рецепторы на поверхности этих клеток, что было подтверждено присутствием повышенной экспрессии ИЛ-5 и мембраносязанной изоформы его рецептора.

Полученный в системе экспрессирующего вектора рекомбинантный растворимый рецептор ИЛ-5 челокека соответствовал нативному рецептору и был применен для блокирования эффектов ИЛ-5 в отношении апоптоза эозинофилов и сократительной активности гладких мышц бронхов морских свинок с моделью БА. Было показано, что инкубирование эозинофилов и сегментов гладких мышц в присутствии ИЛ-5 и его рекомбинантного рецептора приводит к восстановлению апоптотической активности клеток и снижению сократимости гладких мышц, соответственно.

Таким образом, полученные результаты могут послужить толчком для разработки новых стратегий целенаправленной, патогенетически обоснованной терапии бронхиальной астмы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Попова, Ирина Сергеевна, 2006 год

1. Беклемишев Н.Д. Т-хелпер 2 ключевая клетка противометазойного иммунитета и реакций аллергии немедленного типа / Н. Д. Беклемишев // Иммунология. - 1995. - № 5. - С. 4-9.

2. Беклемишев Н.Д. Иммунопатология и иммунорегуляция / Н.Д. Беклемишев. -М.: Медицина, 1986.

3. Бронхиальная астма: В 2-х т. / Под ред. А.Г. Чучалина. М.: Агар, 1997 -Т.1.-432 е.; Т.2.-450 с.

4. Брусиловский Е.С. Экспериментальное воспроизведение бронхиальной астмы с применением пневмоцитотоксической сыворотки / Е.С. Брусиловский // Цитотоксины в современной медицине. Киев, 1966. - С. 155 - 162.

5. Внутриклеточные сигнальные системы в эпителии и гладких мышцах воздухоносных путей / М.Б. Баскаков, Л.В. Капилевич, М.А. Медведев и др.// Пульмонология. 1997. - №2. - С.72-76.

6. Герасин В.А. Бронхофиброскопическая оценка воспалительных изменений и гиперреактивности бронхов у больных бронхиальной астмой / В.А. Герасин, Г.Ф. Паламарчук, А.П. Кизела // Терапевт, архив. 1994. -С. 15-19.

7. Глобальная стратегия и профилактика бронхиальной астмы. / Под ред. А.Г. Чучалина. -М.: Издательство «Атмосфера», 2002. 160с.

8. Глик Б. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение / Б. 1 лик, Дж. Пастернак. М.: Мир, 2002. - 592с.

9. Ильина Н. И. Аллергопатология в разных регионах России по результатам клинико-эпидемиологических исследований: Автореф. дис. .докт. мед. наук / Н. И. Ильина. Москва, 1996. - 24 с.

10. Ю.Маниатис Т. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук. М.: Мир, 1984.

11. И.Медуницын Н. В. Цитокины и аллергия, опосредованная IgE / Н. В. Медуницын // Иммунология. 1993. - № 5. - С. 11-13.

12. Меньшиков А. А. Популяционная характеристика эозинофильных гранулоцитов у больных атопическим дерматитом / А.А. Меньшиков, Д.С. Попова, Е.Ю. Носко // Акт. вопр. дерматологии. 1993. - С. 35-40.

13. Непомнящих Г.И. Патологическая анатомия и ультраструктура бронхов при хронических воспалительных заболеваниях легких / Г.И. Непомнящих. Новосибирск: Наука. - 1980. - 292 с.

14. Паттерсон Р. Аллергические болезни. Диагностика и лечение. / Р. Паттерсон, Л. К. Грэммер, П. А. Гринбергер. М.: Гэотар Медицина, 2000. - 768 с.

15. Пыцкий В. И. Аллергические заболевания / В. И. Пыцкий, Н. В. Адрианова, А. А. Артомасова. 3-е изд. перераб. и доп. - М.:Триада-Х, 1999.-470 с.

16. Роль ИЛ-5 в механизмах апоптотической гибели эозинофилов периферической крови больных БА / И.И. Иванчук, Ф.И. Петровский, А.Э. Сазонов и др.// Бюллетень сибирской медицины. 2003. - №2. -С.38-41.

17. Сократительные реакции гладких мышц воздухоносных путей при БА в эксперименте / Л.В. Капилевич, Е.Ю. Дьякова, А.Э. Сазонов и др. // БЭБИМ. 2003. - №1. - С.35-38.

18. Щелкунов С.Н. Генетическая инженерия: учебное пособие: в 2-х ч. 4.1. / С.Н. Щелкунов. Новосибирск: Изд-во Новосиб. Ун-та, 1994. - 304с.

19. Экспрессия мРНК мембаносвязанной и растворимой изоформ субъединицы рецептора ИЛ-5 в индуцированной мокроте и периферической крови больных БА / А.Э.Сазонов, И.И. Иванчук, И.С. Попова и др. // Бюллетень сибирской медициныю 2005. - Т.4, №1. -С.40-45.

20. A novel dimer configuration revealed by the crystal structure at 2,4 A resolution of human IL-5 / M. V. Milburn, A. M. Hassell, M. H. Lambert et al. //Nature. 1993.-Vol. 363.-P. 172-176.

21. A role for cysteinyl leukotrienes in airway remodeling in a mouse asthma / W.R. Henderson, L.O. tang, S.J. Chu et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. // 2002. Vol.165. - P.108-116.

22. A role for JNK/SAPK in proliferation, but not apoptosis / A. Smith, P. Ramos-Morales, A. Ashworth, M.A. Collins // Curr. Biol. 1997. - Vol. 7. - P.893-6.

23. Activation of c-jun N-terminal kinase by human GM-CSF in BA/F3 cells / R. Liu, T. Itoh, K. Arai, S. Watanabe // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1997.-Vol. 234.-P. 611-5.

24. Activation of p38 MAP kinase pathway by erythropoietin and IL-3 / Y. Nagata, T. Moriguchi, E. Nishida, K. Todokoro // Blood. 1997. - Vol.90. - P. 929-34.

25. Active vaccination against IL-5 bypasses immunological tolerance and ameliorates experimental asthma / M. Hertz, S. Mahalingam, I. Dalum et al. // J. Immunol. 2001. - Vol. 167. - P. 3792-3799.

26. Adachi T. The mechanism of IL-5 signal transduction / T. Adachi, R. Alam // Am. J. Physiol. 1998. - Vol. 275. - P. 623-33.

27. Adcock I.M. Interaction of glucocorticoids and b2-agonists / I.M. Adcock, D. A. Stevens, P.J. Barnes // Eur. Respir.J. 1996. - Vol.9. - P. 160-168.

28. Airway remodeling in asthma / J.A. Elias, Z. Zhu, G. Chupp, and R.J. Homer // J. Clin. Invest. 1999. - Vol.104. - P. 1001-1006.

29. Allergen-specific IgGl and IgG3 through Fc gamma Rii induce eosinophil degranulation / M. Kaneko, M. C. Swanson, G. J. Gleich, H. Kita // J. Clin. Invest. 1995. - Vol. 95, № 6. - P. 2813-2821.

30. Alting-Mees M. A. pBluescriptll: multifunctional cloning and mapping vectors / M.A. Alting-Mees, J.A. Sorge, J.M. Short // Meth. Enzymol. 1992. - Vol. 216.-P. 483-495.

31. Analisys of the survival of mature eosinophils: interleukin-5 prevents apoptosis in mature human eosinophils / Y. Yamaguchi, T. Suda, S. Ohata et al. // Blood. 1991.-Vol. 78.-P. 2542-2547.

32. Anti-IL-4 inhibits immunoglobulin E production in a murine model of atopic asthma / C-Y. Zhou, I.C. Crocker, G. Koenig et al. // J. Asthma. 1997. -Vol.97. -P.195-201.

33. Anti-IL-5 antibody inhibits allergic late phase bronchial eosinophilia in guinea-pig: a therapeutic approach // N. Chang, J. E. Harrison, S. Rooney et al. // Eur. J. Pharmacol. 1992. - Vol. 211. - P. 121-123.

34. Attenuation of allergic airway inflammation in 1L-4 deficient mice / G. G. Brusselle, J. C. Kips, J. H. Tavernier et al. // Clin. Exp. Allergy. 1994. - Vol. 24.-P. 73-80.

35. Attenuation of IL-5-mediated signal transduction, eosinophil survival, and inflammatory mediator release by a soluble human IL-5 receptor / J. Monahan, N. Siegel, R. Keith et al. // J. Immunol. 1997,- Vol. 159. - P. 4024-4034.

36. Banchereau J, Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity / J. Banchereau, R.M. Steinman // Nature. 1998. - Vol.392. - Р.245-252/

37. Bazan J. F. Haemopoietic receptors and helical cytokines / J. F. Bazan // Immunol. Today. 1990. - Vol. 10. - P. 305-4.

38. Bazan J. F. Structural desing and molecular evolution of a cytokine receptor superfamily / J. F. Bazan // Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1990. - Vol. 87. - P. 6934-6938.

39. Beg A. A. An essential role for NFkB in preventing TNF-induced cell death / A. A. Beg, D. Baltimore // Science. 1996. - Vol. 274. - P. 782-784.

40. Blaber M. Web Page for Lecture 25 of Molecular Biology and Biotechnology Course: Prokaryotic Expression Vectors / M. Blaber // Электрон, ресурс.1998. Режим доступа: http://winel.sb.fsu.edu/bch5425/lect25/lect25.htm

41. Boulay J. L. The IL-4-related lymphokines and their binding to hematopoietin receptors / J. L. Boulay, W. E. Paul // J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267. - P. 20525-20528.

42. Bukantz S.C. IgE immediate hupersensitivity / S.C. Bukantz, R.F. Lockey // Bronchial asthma. Mechanisms and therapeutics / In : Weiss E.B., Stein M., eds . Boston:Little, Brown, 1993. - P.68-79.

43. C3a is a chemotaxin for human eosinophils but not for neutrophils. I. C3a stimulation of neutrophils is secondary to eosinophil activation / P. J. Daffern, P. H. Pfeifer, J. A. Ember, Т. E. Hugli // J. Exp. Med. 1995. - Vol. 181. - P. 2119-2127.

44. Cantley C.L. The phosphoinositide 3-kinase pathway / C.L. Cantley // Science. -2002.-Vol.296.-P. 1655-7.

45. Characterization of the human IL-5 receptors on eosinophils / M. Migita, N. Yamaguchi, S. Mita et al. // Cellular Immunology. 1991. - Vol. 133. - P. 484-497.

46. Cloning of cDNA for human T-cell replacing factor (IL-5) and comparison with the murine homologue / C. Azuma, T. Tanable, M. Konishi et al. // Nucleic Acids Research. 1986.-Vol. 14.-P. 9149-9158.

47. Cloning of Rat IL-5Ra gene: analysis of 5'-upstream region and expression by В cells / C. Pierrot, A. Begue, C. Szpira et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001 - Vol. 288. - P. 328-339.

48. Cookson B. The alliance of genes and environment in asthma and allergy / B. Cookson // Nature. 1999. - Vol.402. - P.5-11.

49. Corrigan C. J. T cells and eosinophils in the pathogenesis of asthma / C. J. Corrigan, A. B. Kay // Immunol. Today. 1992. - Vol. 13, № 12. - P. 501507.

50. Cytokines, allergy, and asthma / P.L. Ngoc, D.R. Gold, A.O. Tzianabos, et al. // Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. 2005. - Vol.3-5. - P.307

51. Dahlen S.E. Leukotrienes as common mediators of airway obstruction evoked by many trigger factors in asthma / S.E. Dahlen // Eur Respir Rev. 1998. -Vol. 8.-P. 369-373

52. Damage of airway epithelium and bronchial reactivity in patients with asthma / L. A. Laitinen, M. Heino, A. Laitinen et al. // Am. Rev. Respir. Dis. 1985. -Vol. 131.-P. 599-606.

53. Denburg J.A. The origins of basophils and eosinophils in allergic inflammation / J.A. Denburg // J. Allergy Clin. Immunol. 1998. - Vol.102. - P.74-76.

54. Dent G. Receptors for platelet-activating factor / G. Dent, D. Ukena, P. J. Barnes // Platelet-Activating Factor and Human Diesease / edited by P. J. Barnes, C. P. Page, M. P. Henson. -Oxford: Blackwell Scientific, 1989. P. 58-81.

55. Dvorak A. M. Subcellular morphology and biochemistry of eosinophils / A. M. Dvorak // Blood Cell Biochemistry: Megakaryocytes, Platelets, Macrophages and Eosinophils / edited by J. R. Harris. London: Plenum Press, 1991. - P. 237-344.

56. Effect of anti-IL-5 monoclonal antibody on allergic responsiveness in mice / H. Nagai, S. Yamaguchi, N. Inagaki et al. // Life Sci. 1993. - Vol. 53. - P. 243247.

57. Effect of Sch 55700, a humanized monoclonal antibody to human IL-5, on eosinophilic responses and bronchial hyperreactivity / R.W. Egan, D. Athwahl, M.W. Bodmer et al. // Arzneimittelforschung. 1999. - Vol.49. - P.779-790.

58. Effects of an antibody to interleukin-5 in a monkey model of asthma / P. J. Mauser, A. M. Pitman, X. Fernandez et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1995. Vol. 152. - P. 467-472.

59. Effects of an interleukin-5 blocking monoclonal antibody on eosinophils, airway hyper-responsiveness, and the late asthmatic response / M. J. Leckie, A. ten Brinke, J. Khan et al // Lancet. 2000. - Vol. 356. - P. 2144-2148.

60. Effects of chronic anti-interleukin-5 monoclonal antibody treatment in a murine model of pulmonary inflammation / C. G. Garlisi, Т. T. Kung, P. Wang et al. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1999. - Vol. 20, № 2. - P. 248-255.

61. Elevated levels of the eosinophil granule major basic protein in the sputum of patients with bronchial asthma / S. Frigas, D. A. Loegering, G. O. Solley et al. // Mayo Clin. Proc. 1981. - Vol. 56. - P. 345-353.

62. Engineering of a functional interleukin-5 monomer: a paradigm for redesigning helical bundle cytokines with therapeutic potential in allergy and asthma / R.R. Dickason, J.D. English, D.P. Huston et al. // J. Mol. Med. 1996. - Vol.74. -P. 535-546.

63. Eosinophil apoptosis and the resolution of airway inflammation in asthma / K. L. Woolley, P. G. Gibson, K. Carty et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1996.-Vol. 154.-P. 237-243.

64. Eosinophil major basic protein induces degranulation and 1L-8 production by human eosinophils / H. Kita, R. I. Abu Ghazaleh, S. Sur, G. J. Gleich // J Immunol. 1995. - Vol. 154. - P. 4749-4758.

65. Eosinophils in allergy: role in disease, degranulation, and cytokines / L. B. Martin, H. Kita, К. M. Leiferman, G. J. Gleich // Int. Arch. Allergy Immunol. -1996.-Vol. 109.-P. 207-215.

66. Eosinophils promote allergic disease of the lung by regulating CD4+ Th2 lymphocyte function / J. R. MacKenzie, J. Mattes, L. A. Dent, P. S. Foster // J. Immunol.-2001.-Vol. 167. P. 3146-3155.

67. Epitope-labeled soluble human IL-5 receptors. Affinity cross-link labeling, IL-5 binding, and biological activity / P. M. Brown, P. Tagari, K. R. Rowan et al. // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270, № 49. - P. 29236-29243.

68. Fryer A.D. Muscarinic receptor dysfunction in asthma / A.D. Fryer, R.W. Costello, D.B. Jacoby // Allergy Clin Immunol Internat. 2000. - Vol.12. - P. 63-67.

69. Fukuda Т. Heterogeneity of human eosinophils / T. Fukuda G.J., Gleich // J. Clin. Immunol. 1989. - Vol. 83. - P. 369-373.

70. Genomic cloning, heterologous expression and pharmacological characterization of a human histamine HI receptor / M.D. De Backer, W. Gommeren, H. Moereels et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. -Vol.197.-P.1601-1608.

71. Gleich G. The eosinophilic leukocyte / G. Gleich, C.R. Adolphson // Adv. Immunol. 1986.-Vol. 39.-P. 177-253.

72. Glucocorticoids inhibit proliferation and IL-4 and IL-5 secretion by aeroallergen-specific T-helper type 2 cell lines / I.C. Crocker, M.K. Church, S. Newton, R.G. Townley // Ann. Allergy Asthma Immunol. 1998. - Vol.80. -p.509-516.

73. Hogan S.P. Cytokines as targets for the inhibition of eosinophilic inflammation / S.P. Hogan and Foster P.S. // Pharmacol. Ther. 1997. - Vol. 74. - P.259-283.

74. Hogg J.C. The pathology of asthma / J.C. Hogg // Clin. Chest Med. 1984. -Vol.5, №3.-P. 567-571.

75. Holt P.G., Stumbles P.A., McWilliam A.S. Functional studies on dendritic cells in the respiratory tract and related mucosal tissues / P.G. Holt, P.A. Stumbles, A.S. McWilliam // J. Leukoc. Biol. 1999. - Vol.66. - P.272-275.

76. Human В cell express IL-5 receptor mRNA and respond to IL-5 with enhanced IgM production after mitogenic stimulation / M.M. Huston, H.J. Moore, H.J. Mettes et al. // J. Immunol. 1996. - Vol. 156. - P. 13902-1401.

77. Huston D. P. Interleukin-5: a therapeutic target in asthma / D. P. Huston // Int. J. Immunorehabilitation. 1997. - № 7. - P.7-12.

78. Identification of a 14-3-3 binding sequence in the common (3 chain of the GM-CSF, IL-3 and IL-5 receptors that is serine-phosphorylated by GM-CSF / F.C.

79. Stomski, M. Dottore, W. Winnall et al. // Blood. 1999. - Vol.94. - P. 193342.

80. IL-3 and GM-CSF, but not IL-4, induce tyrosine phosphorylation, activation and association of SHPTP2 with grb2 and phosphoatidylinositol З'-kinase / M. J. Welham, U. Dechert, K. Leslie et al. // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. -P. 23764-23768.

81. IL-3 -induced phosphorylation of BAD through the protein kinase Akt / L. del Peso, M. Gonzalez-Gareia, C. Page et al. // Science. 1997. - Vol. 278. - P. 278-9.

82. IL-4- and IL-5-secreting lymphocyte populations are preferentially stimulated by parasite-derived antigens in human tissue invasive nematode infections / S. Mahanty, C.L. King, V. Kumaraswami et al.// J. Immunol. 1993. - Vol.151. -P. 3704-3708.

83. IL-5 / G.T. F. Schwenger, V. A. Mordviniv, R.F.P. Czabotar et al. // - Vol. -P. 861-875.

84. IL-5 enhances the in vitro adhesion of human eosinophils, but not neutrophils, in a leucocyte integrin (CD1 l/18)-dependent manner. / G. M. Walsh, A. Hartnell, A. J. Wardlaw et al. // Immunology. 1990b. - Vol. 71. - P. 258-265.

85. IL5RA Электронный ресурс. Электр, дан. - Режим доступа: http://www.ncbi.nih.gov/IEB/Research/Acembly/av.cgi?db=34&c=Gene&l=IL 5RA

86. Inhibition of IgE antibody formation by plasmid DNA immunization is mediated by both CD4+ and CD8+ T cells / D. J. Lee, H. Tighe, M. Corr et al // Int. Arch. Allergy Immunol. 1997. - Vol. 113. - P. 227-230.

87. Inhibition of pulmonary eosinophilia and hyperreactivity by antibodies to IL-5 / R.W. Egan, D. Athwahl, C.C. Chou et al. // Int. Arch. Allerg. Immunol.- 1995.-Vol.107.-P.321-324.

88. Interleukin 5 synthesis by eosinophils: association with granules and immunoglobulin-dependent secretion / S. Dubucquoi, P. Desreumaux, A. Janin et al. // J. Exp. Med. 1994. - Vol. 179. - P. 703-708.

89. Interleukin-5 deficiency abolishes eosinophilia, airway hyperreactivity, and lung damage in a mouse asthma model / P. S. Foster, S. P. Hogan, A. J. Ramsay et al. //J. Exp. Med. 1996. - Vol. 183. - P. 195-201.

90. Interleukin-5 production by human airway epithelial cells / S. Salvi, A. Semper, A. Blomberg et al. // Am. J. Res. Crit. Care Med. 1999. - Vol. 20. -P. 984-991.

91. Interleukin-5 signaling in human eosinophils involves JAK2 tyrosine kinase and STAT1 alpha / T. Van der Bruggen, E. Caldenhoven, D. Kanters et al. // Blood. 1995. - Vol. 85. - P. 1442-1448.

92. Kay А. В. EosinophlLs and interleukin-5: the debate continues / A. B. Kay, A. Menzies-Gow // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine.-2003.-Vol. 167, № 12.-P. 1586-1587.

93. Kita H. Biology of eosinophils / H. Kita, C.R. Adolphson, G.J. Gleich // Allergy: Principles and ractice / in: Middleton E.Jr., Reed C.E., Ellis E.F., Adkinson N.F., Yunginger J.W., Busse W.W., eds. 5th ed. - St. Louis: Mosby, 1998.-P. 240-260. .

94. Kobayashi H. Effect of c-kit ligand (stem cell factor) in combination with interleukin-5, granulocyte/macrophage colony-stimulating factor, and interleukin-3, on eosinophil lineage / H. Kobayashi // Int. J. Hematol. 1993. -Vol. 58. -P.21-26.

95. Koike M. IL-5 and its receptor: which role do they play in the immune response / M. Koike, K. Takatsu // Int. Arch. Allergy Immunol. 1994. - Vol. 104.-P. 1-9.

96. Laemmli U.K. Clavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. - Vol.227. - P.680-685.

97. Leukotriene B4 receptors on guinea pig alveolar eosinophils / K. Maghni, A. J. de Brum Fernandes, E. Foldes Filep et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1991. -Vol. 258.-P. 784-789.

98. Interleukin-5 modulates eosinophil accumulation in allergic guinea pig lung / A. R. Gulbenkian, R. W. Egan, X. Fernandez et al. // Am. Rev. Respir. Dis. -1992.-Vol. 146.-P. 263-265.

99. Lukacs N.W. Chemokines and asthma: redundancy of function or a coordinated effort / N.W. Lukacs, S.H.P. Oliveira, C.M. Hogaboam // J. Clin. Invest. 1999. - Vol. 104. - P.995-9.

100. Lung eosinophilia is dependent on IL-5 and the adhesion molecules CD18 and VLA-4, in a guinea-pig model / A. M. Das, T. J. Williams, R. Lobb, S. Nourshargh // Immunology. 1995. - Vol. 84. - P. 41-46.j

101. Lymph node trafficking and antigen presentation by endobronchial eosiniphils / H. Z. Shi, A. Humbles, C. Gerard et al. // J. Clin. Invest. 2000. -Vol. 105.-P. 945-953.

102. Matthias J. Antiinflamatorische Zytokine in der Pathogenese des Asthma bronhiale / J. Matthias // Das Arzt /die Zeitschrift/. 2002. - Vol. 22. - P. 137149.

103. Maxam A.M. A new method of sequencing DNA / A.M. Maxam, W. Gilbert // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1977. - Vol.74. - P. 560-564.

104. McDonald A.S. Immunology of Parasitic Helminth Infections / A.S. McDonald, M.I. Araujo, E.J. Pearce // Infect. Immun. 2002. - Vol.70, №2. -P. 427-433.

105. McEwen B.J. Eosinophils: A review / B.J. McEwen // Vet. Res. Commun. -1992.-Vol. 16.-P. 11-44.

106. McKay S. Autocrine regulation of asthmatic airway inflammation: role of airway smooth muscle / S. McKay, H.S. Sharma // BioMed Central Ltd Respir Res.-2002.-Vol. 3(1), № 11.-P.

107. Mechanisms of activation of the GM-CSF, IL-3, and IL-5 family of receptors / M.A. Gothridge, F.C. Stomski, D. Tomas et al. //Stern Cells. -1998.-Vol. 16.-P. 301-13.

108. Metabolism of lipid mediators in human eosinophils / M. Triggiani et al. // Human eosinophils. Biological and clinical aspects / In: Marone G, ed. Basel: Kargel, 2000. - P. 77-98.

109. Middleton G. Bax promotes neuronal survival and antagonizes the survival effects of neurotrophic factors / G. Middleton, G. Nunez, A. M. Davies / Development (Camb.). 1996. - Vol. 122. - P. 695-701.A

110. Mitra S.N. Role of eosinophil peroxidase in the origins of protein oxidation in asthma / S.N. Mitra, A. Slungaard, S.L. Hazen // Redox. Rep. 2000. -Vol.5, №.4-P.215-24.

111. Molecular basis of the membrane-anchored and two soluble isoforms of the human interleukin-5 receptor subunit / J. Tavernier, T. Tuypens, G. Plaetinck et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. 1992. - Vol. 89. - P. 7041-7045.

112. Molecular cloning and expression of the human interleukin-3 receptor / Y. Murata, S. Takaki, S. Migita et al. // J. Exp. Med. 1992. - Vol. 175. - P. 341351.

113. Molecular cloning of a second subunit of the receptor for human GM-CSF: reconstitution of a high-affinity GM-CSF receptor / K. Hayashida, T. Kitamura, D.M. Gorman et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - Vol.87, № 24. - P.9655-9659.

114. Molecular cloning of the guinea-pig IL-5 receptor a and (3 subunits and reconstitution of a high affinity receptor / C. W. Scott, N. J. Logsdon, D. E. Wilkins et al. // Cytokine. 2000. - Vol. 12, № 7. - P. 858-866.

115. Molecular organization of the cytokine gene cluster, involving the human IL-3, IL-4, IL-5 and GM-CSF genes, on human chromosome 5 / B.H. Van Leewen, M.E. Martinson, A.C. Webb, I.G. Young // Blood. 1989. - Vol.73. -P.l 142-1146.

116. Morphometry of eosinophils in human blood / R. J. Sokol, N. T. James, J. Wales, G. Hudson // Acta Anat. 1987. - Vol. 129. - P. 211-213.

117. Mosmann T. Two types of mouse helper T-cell clone. Implications for immune regulation / T. Mosmann, R. Coffman // Immunology Today. -1987. -Vol. 8.-P. 223-227.

118. Mucosal IFN-gamma-gene transfer inhibits pulmonary allergic responses in mice / X. M. Li, R. K. Chopra, B. Schofield et al. // J. Immunol. 1996. - Vol. 157.-P. 3216-3219.

119. Mucosal IL-12 gene delivery inhibits allergic airways disease and restores local antiviral immunity / S. P. Hogan, P. S. Foster, X Tan et al. // Eur. J. Immunol. 1998. - Vol. 28. - P. 413-423.

120. Multiple tyrosine residues in the intracellular domain of the common beta subunit of the interleukin-5 receptor are involved in activation of STAT5 / T.B. van Dijk, E. Caldenhoven, J.A. Raaijmakers et al. // FEBS Left. 1997. -Vol.412. -P.161-4.

121. Mutagenesis in the C-terminal region of human interleukin-5 reveals a central patch for receptor alpha chain recognition / T. Morton, J. Li, R. Cook, I. Chaiken // Proc Natl Acad Sci. USA 1995. - Vol.92. - P. 10879-10883.

122. Nicola N. A. Hemopoietic cell growth factors and their receptors / N. A. Nicola // Ann. Rev. Biochem. 1989. - Vol. 58. - P. 45-77.

123. Oettgen H.C. IgE in asthma and atopy: cellular and molecular connections / H.C. Oettgen, R.S. Geha // J. Clin. Invest. 1999. - Vol. 104. - P.829-35.

124. Organization and chromosomal localization of the human IL-5 receptor alpha-chain gene / T. Tuypens, G. Plaetinck, E. Baker et al. // Euro Cytokine Network. 1992. - Vol. 3. - P. 451-459.

125. Perkins G.R. The role of MAP kinase in interleukin-3 stimulation of proliferation / G.R. Perkins, C.J. Marshall, M.K. Collins // Blood. 1996. -Vol. 87.-P. 3669-75.

126. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of SB-240563, a humanized monoclonal antibody direct to human IL-5, in monkeys / P. Zia-Amirhosseini, E. Minthorn, L.J. Benincosa et al. // 1999. Vol.291. - P. 1060-1067.

127. Prin L. Polinucliiare eosinophile et recepteur glucocorticoide / L. Prin, P. Lefebvre, V. Gruart // Rev. fr Allergol. 1990. - Vol. 30. - P. 83-85.

128. Pulmonary expression of IL-13 causes inflammation, mucus hypersecretion, subepithelial fibrosis, physiologicabnormalities, and eotaxin production / Z. Zhu, R.J. Homer, Z. Wang we al. // J. Clin. Invest. 1999. - Vol.103. - P.779-788.

129. Pulmonary immune cells in health and disease: the eosinophil leukocyte (part 1) / C. Kroegel, J.C. Virchow, W. Luttman et al. // Eur. Respir. J. 1994. - Vol.7.-P.519-543.

130. Receptors for granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, interleukin-3, and interleukin-5 / A. Miyajima, A. L. Mui, T. Ogorochi, K. Sakamaki // Blood. 1993. - Vol. 82. - P. 1960-1974.

131. Recombinant human interleukin-5 is an eosinophil differentiation factor but has no activity in standard human В cell growth factor assays / E. Clutterbuck, J. G. Shields, J. Gorden et al. // Eur. J. Immunol. 1987. - Vol. 17. - P. 17431750.

132. Recombinant soluble human interleukin-5 (hIL-5) receptor molecules. Cross-linking and stoichiometry of binding to IL-5 / R. Devos, Y. Guisez, S. Cornells et al. // J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268, № 9. - P. 6581-6587.

133. Reconstitution of the functional receptors for murine and human interleukin-5 / S. Takaki, Y. Murata, T. Kitamura et al. // J. Exp. Med. 1993. - Vol. 177. -P. 1523-1529.

134. Reed J. C. Double identify for proteins of the Bcl-2 family / J. C. Reed // Nature. 1997. - Vol. 387. - P. 773-776.

135. Regulation of bad phosphorylation and association with BCL-x by the MAPK/Erk kinase / M.P. Scheid, K.M. Schubert, V. Duronio et al. // J. Biol. Chem. 1999. - Vol.27. - P.31108-13.

136. Regulation of BAD phosphorylation at serine 112 by the Ras-mitogen-activated protein kinase pathway / X. Fang, S. Yu, A. Eder et al. // Oncogene. -1999.-Vol.18.-P. 6635-40.

137. Regulation of Bcl-2 expression by oncogenic Ras protein in hematopoietic cells / T. Kinoshita, T. Yokota, K. Arai, A. Miyajima // Oncogene. 1995. -Vol. 10.-P. 2207-12.

138. Regulation of human eosinophil production and function by interleukin-5 / A. F. Lopez, M. F. Shannon, M. M. Chia et al. // Immunol. Ser. 1992. -Vol. 57.-P. 549-571.

139. Results of a phase I trial with SCH5 a humanized anti-IL-5 antibody, in severe persistent asthma abstract. / J. C. Kips, B. J. O'Connor, S. J. Langley et al. // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 2000. -Vol. 161.-P. 505.

140. Ricci M. Pathogenetic mechanism and genetic aspects of bronchial asthma / M. Ricci, A. Matucci, O. Rossi // Allergy Clin. Immunol. Int. 1997. - Vol. 9. - P.141-148.

141. Roitt I.M. Immunology, physiology, pathology and clinic / I.M. Roitt. -London: Blackwell Scietific, 1992. 135pp.

142. Role of carbohydrate moiety of IL-5. Effect of of tunicamycin on the glycosylation of IL-5 and the biologic activity of deglycosylated of IL-5 / A. Tominaga, T. Takahashi, Y. Kikuchi et al. // J. Immunol. 1990. - Vol.144. -P.1345-1347.

143. Serine phosphorylation of death agonist BAD in response to survival factor results in binding to 14 -3-3 not BCL-XL / J. Zha, H. Harada, E. Yang et al. // Cell. 1996. -Vol. 87. - P. 619-628.J

144. Shakib F. In vitro basophil histamine releasing asthma patients and the demonstration that anti-IgE modulates allergen - induced basophil activation / F. Shakib, S. J. Smith // Clin. Exp. Allergy. - 1994. - Vol. 24, № 3. - P. 270275.

145. Shindo K. Paf induced eosinophil chemotaxis increases during an asthmatic attack and is inhibited by prednisolone in vivo and in vitro / К Shindo, K. Koide, M. Fukumura // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1997. -Vol. 237.-P. 146-151.

146. Signal transduction by the high-affinity GM-CSF receptor: two distinct cytoplasmatic regions of the common p subunit responsible for different signaling / N. Sato, K. Sakamaki, N. Terada et al. // EMBO. 1993. - Vol. 11. -P. 4181-4189.

147. Signaling through the hematopoietic cytokine receptors / J. N. Ihle, B. A. Witthuhn, F. W. Quelle et al. // Ann. Rev. Immunol. 1995. - Vol. 13. - P. 369-398.

148. Signaling through the JAK/STAT pathway, recent advances and future challenges / T. Kisseleva, S. Bhattacharya, J. Braunstein, C.W.Schindler // Gene. 2002. - Vol.285. - P. 1 -24.

149. Site-specific serine phosphorylation of the IL-3 receptor is required for hemopoietic cell survival / M.A. Guthridge, F.C. Stomski, E.F. Barry et al. // Mol. Cell. 2000. - Vol.6. - P. 99-108.

150. Structural comparisons among the short-chain helical cytokines / D.A. Rozwarski, A.M. Gronenborn, G.M. Clore, et al. // Structure. 1994. - Vol. 2. -P. 159-173.

151. Structure of recombinant human interleukin 5 produced by Chinese hamster ovary cell / Y. Minamitake, S. Kodama, T. Katayama et al. // J. Biochem. -1990. Vol. 107. - P. 292-297.

152. Successful transfer of late phase T cell eosinophil infiltration in the lung by infusion of helper T cell clones / O. Kaminuma, A. Mori, K. Ogawa et al. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1997. - Vol. 16. - 448-454.

153. Suppression of apoptotic death in hematopoietic cells by signaling through the IL-3/GM-CSF receptors / T. Kinoshita, T. Yokota, K. Arai, A. Miyajima // EMBO J.- 1995.-Vol. 14.-P. 266-75.

154. Takafuji S. Degranulation from human eosinophils stimulated with C3a and C5a / S. Takafuji, K. Tadokoro, K. Ito, C. A. Dahinden // Int Arch Allergy Immunol. 1994. - Vol. 104, Suppl 1. - P. 27-29.

155. Takizawa H. The interactions of eosinophils with bronchial epithelial cells in asthma / H. Takizawa, M. Sato, K. Ito // Allergy Clin Immunol. 1997. -Vol.9. - 149-155.

156. The chemotactic cytokine eotaxin acts as a granulocyte/macrophage colony-stimulating factor during lung inflammation / A. Peled, J.A. Gonzalo, C. Lloyd and J.C.Gutierrez-Ramos//Blood. 1998.-Vol. 91.-P. 1909-1916.

157. The GM-CSF promoter cis-acting element CLEO mediates induction signals in T cells and recognised by factors related to API to NFAT / E.S. Masuda, H. Tokumitsu, A. Tsuboi et al. // Mol. Cell. Biol. 1993. - Vol.13. - P. 73997402.

158. The regulation of interleukin-5 and interleukin-3 gene expression in human T cells / J. F. M. van Straaten, W. H. A. Dokter, В. K. Stulp, В. K. Vellenga // Cytokine. 1994. - Vol. 6. - P. 229-234.

159. Treatment of allergic airway inflammation and hyperresponsiveness by antisense-indused local blockade of GATA-3 expression / S. Finotto, G. T. De Sanctis, H. A. Lehr et al.//J. Exp. Med. 2001. - Vol. 193.-P. 1247-1260.

160. Tryptase inhibition blocks airway inflammation in a mouse asthma model / S.W. Oh, C.I. Рае, D.K. Lee et al. // J. Immunol. 2002 - Vol.168. - P.I 9922000.

161. Wang H. G. Bcl-2 targets the protein kinase Raf-1 to mitochondria / H. G. Wang, U. R. Rapp, J. C. Reed // Cell. 1996. - Vol. 87. - P. 629-638.

162. Wardlaw A. J. Eosinophils in the 1990-s: new perspectives in their role in the health and disease / A. J. Wardlaw // Postgrad. Med. J. 1994. - Vol. 70, № 826. - Зю 536-552.

163. Wardlaw A. J. Eosinophils: biology and role in disease / A. J. Wardlaw, R. Moqbel, A. B. Kay // Adv. Immunol. 1995. - Vol. 60. - P. 151 -266.

164. Weller P.F. Human eosinophils / P.F. Weller // J. Allergy Clin. Immunol. -1997. Vol.100.-P.283-287.

165. Wills-Karp M. Murine models of asthma in understanding immune dysregulation in human asthma / M. Wills-Karp // Immunopharmacology. -2000.-Vol.48.-P.263-268.Ji 36—,

166. Woodcock J.M. The functionabbasis of GM-CSF, IL-3 and IL-5 receptor activation, basis and clinical implications / J.M. Woodcock, C.J. Bagley, A.F. Lopez // Int. J. Biochem. Cell Biol. 1999. - Vol. 31. - P. 1017-25.