Включение дельта-сон-индуцирующего пептида в биосовместимые носители тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Суханова, Татьяна Владимировна

• Суханова, Татьяна Владимировна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Суханова, Татьяна Владимировна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биологически активные пептиды

1.2. Дельта-сон индуцирующий пептид

1.3 Инкапсулирование пептидов

1.4 Включение белков и пептидов в биосовместимые матрицы для тканевой инженерии

1.5 Сшивающие агенты в тканевой инженерии

1.6 ПАВ, стабилизирующие наноэмульсию, применяемую для капсулирования ДСИП

1.7 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 МАТЕРИАЛЫ

2.2 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Включение ДСИП в водную фазу обратной наноэмульсии

3.2 Иммобилизация ДСИП на полимерных подложках

3.3 Влияние ионной силы на динамику пространственной структуры ДСИП

4 ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

5 ВЫВОДЫ

6 ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

7 РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ

ВЫВОДОВ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Список сокращений

bFGF - основной фактор роста фибробластов

Со-ДМАЭМА-МБАА - сополимер диметиламиноэмилметакрилата и метиленбисакриламида

FBS - fetal bovine serum, эмбриональная бычья сыворотки

GABA - gamma-aminobutyric acid (гамма-аминомасляная кислота)

HSP - heat shock protein (белок теплового шока)

NMDA - N-methyl D-aspartate (N-метил-О-аспартат)

o/w - oil in water (простая эмульсия)

PBS - фосфатно-солевой буферный раствор

PEG - полиэтиленгликоль

PLA - полимер молочной кислоты

PLGA - сополимер лактида и гликолида

PLLA - поли-Ь-лактид

s/o/o - solid in oil in oil (твердое соединение, растворенное в системе двух органических фаз)

w/o - water in oil (обратная эмульсии) w/o/w - water in oil in water (двойная эмульсии)

AOT - Aerosol ОТ, натриевая соль ди-(2-этил) гексилового эфира сульфоянтарной кислоты

БАВ - биологически активное вещество ДГК - дигидрокверцетин ДСИП - дельта-сон индуцирующий пептид ИС - ионная сила

ПАВ - поверхностно-активное вещество ПВС - поливиниловый спирт

ПВС-ГМА - сополимер глицидилметакрилата и поливинилового спирта ПЭИ - полиэтиленимин

Со-АА-МБАА - сополимер акриловой кислоты и метиленбисакриламида

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Включение дельта-сон-индуцирующего пептида в биосовместимые носители»

ВВЕДЕНИЕ

Пептидные препараты широко применяются в современной медицине. К ним относятся неГфопептиды, пептиды, участвующие в восстановлении тканей, гормоны пептидной природы. Часто также используются функционально значимые фрагменты белков или искусственно созданные пеггпщы.

При введении в кровь нейропептиды не всегда не проходят через гематоэнцефалический барьер (Ballabh et al., 2004; Aktas et al., 2005) или претерпевают быструю деградацию в физиологических условиях под действием протеаз. Частое введение больших доз пептидных препаратов для достижения нужного терапевтического эффекта может привести к различным побочным эффектам (Graf et al., 1987; Tan et al., 2010) и существенно увеличить стоимость лечения. Включение пептидных препаратов в состав микро- и наноносителей, позволяющее пролонгировать выход препаратов пептидной природы и защитить их от действия протеаз, может решить часть проблем.

Полимерные носители могут использоваться для пероралыюш или шпраназального введения лекарственных препаратов белковой и пептидной природы, требующих частого инъекционного введения, например, инсулина [Qian et al, 2006, Silva et al, 2006, Sarmentó et al, 2007, Pinto Reis et al, 2007]. Кроме того, инкапсулирование лекарственных препаратов позволяет снизить скорость их выхода при введении в организм, не допуская токсичной концентрации. С этой целью используются альпшатные микрокапсулы [Dhoot and Wheatley, 2003], микрочастицы PLGA, [Mandal et al, 2002], двухслойные микросферы (double-walled microspheres) [Lee et al, 2002], двухслойные минипилюли (double-layered minipellets) [Maeda et al, 2003], микросферы с покрытием (coated microspheres) [Huang et al, 1999; Hurteaux et al, 2005] и т.д., формирующие стабильный профиль выхода препарата. Этого эффекта позволяет достигнуть также поперечное сшивание молекул поверхности частицы, создавая дополнительные препятствия для выхода препарата [Thote et al, 2005].

Микрочастицы, приготовленные из смеси полимеров, обладающих различной вязкостью, молекулярной массой и степенью набухания, могут также

модифицировать профиль выхода препарата по сравнению с частицами, приготовленными из одного полимера [Sheikh Hasan et al., 2007]. Другим способом пролонгирования выхода препарата является включение содержащих его наночаспщ в состав гидрогеля, например, наночаспщ PLGA, содержащих инсулин, введенных в ПВС-пщрогель [Liu et al., 2007].

Для пролонгирования действия белков и пептидов, а также увеличения их физиологического эффекта используют различные микро- и наноносители, например, частицы сополимера полилактида и гликолида (PLGA) [Mundargi et al., 2007; Yin et al., 2008; Waeckerle-Men et al., 2006; Stashevskaya et al., 2007; Rusanova et al., 2006; Dugina et al., 2004, Du et al., 2006], альпшата nomi(N-biiniln капролактам) кальция [Strukova et al., 2001], модифицированного гликоль-хитозана [Kim et al., 2008], полиарилата [Schachter, Kohn, 2002], Eudragit® RS 100/циклодекстрина [Lopedota et al., 2009], коацерватные микрокапсулы [Zhang et al., 2009], липосомы, покрьпые ко1п>югатом хитозана и апотишша [Werle, Takeuchi, 2009], моноконыогаты с полимерной матрицей [van Dijk-Wolthuis et al., 1999], углеродные нанотрубки [Kang et al., 2008]. В обзоре Narang et al. (2007) приводятся сведения о введении в организм пептидов в составе обратных микроэмульсий. В качестве примеров можно привести нонапептид лейпролид ацетат [Zheng et al., 2006] и дипептид N-ацеп шглюкозамш нm-N-ацеп шмурамовую кислоту [Lyons et al., 2000].

Как известно, биомолекулы, включенные в состав различных носителей, например, наночаспщ, микро- и нанокапсул, приобретают новые свойства. Например, включение ферментов в обратные наноэмульсии приводит к их стабилизации по сравнению с введением в водных растворах [Klyachko et al., 2003, Rariyetal., 1995].

Используются различные способы формирования микроносителей, например, микросферы PLGA, метод двойной эмульсии (W/O/W) с последующим выпариванием [Stashevskaya et al., 2007, Du et al., 2006, Wieber et al., 2011], простой эмульсии (OAV) [Du et al., 2006], введение твердого препарата в двойную органическую фазу (S/O/O) [Du et al., 2006] и другие. Пептид может быть связан

также с поверхностью полимерного носителя с помощью ковалентных [Matsuda et al, 2004] либо нековалентных (водородных гидрофобных, Ван-дер-Ваальсовых) связей. Иммобилизация пептидов с помощью ковалентных связей позволяет сформировать прочные связи между пептидом и носителем, что может как повысить устойчивость к денатурирующим факторам, так и привести к ухудшению их биологических свойств [Штильман, 1998], а в случае регуляторных пептидов - к их полной инактивации. По этой причине особенно актуально разработать метод нековалентного обратимого связывания пептида с матрицей с максимально пролонгированным выходом.

Пептидные препараты, например RGD [Lee et al., 2009; Yan et al., 2008], также применяются в тканевой инженерии и регенеративной медицине. Связывание белков и пептидов с поверхностью полимерных матриц в подавляющем большинстве случаев используется для повышения биосовместимости материала, улучшения его адгезивных свойств и стимулирования пролиферации клеток, в т.ч. стволовых [Delong et al, 2005; Mann et al, 2001; Tsai et al, 2009].

В данной работе в качестве модельного пептида использовался дельта-сон индуцирующий пептнд (ДСИП, TrpAlaGlyGlyAspAlaSerGlyGlu). ДСИП относится к регуляторным нейропептидам и обладает стресс-протективным и адаптогенным действием. ДСИП увеличивает резистентность подопытных животных к экспериментальным стрессогенным манипуляциям, в том числе, смягчая их последствия [Коплик и др, 2007; Nurbakov et al, 2009], проявляет антиоксидантные свойства, снижая, в частности, перекисное окисление липидов, ускоряет фосфорилирование АТФ [Khvatova et al, 2003]. Выявлено его благоприятное действие при лечении ожогов. Вместе с этим исследования in vitro и in vivo показали, что молекула ДСИП проявляет низкий уровень стабильности, так как при введении в организм в водном растворе разрушается протеазами в течение нескольких минут [Graf et al, 1987; Прудченко, Михалева, 1994; Graf et al, 1985]. ДСИП является действующим веществом лекарственного препарата Дельтаран (10% ДСИП и 90% глицин) и используется в виде водного раствора

интраназально; аналоги ДСИП обладают более высокой антистрессорной активностью и антиметастатическим действием [Khvatova et al., 2005]. Разработка системы пролонгированного действия для капсулирования и доставки ДСИП в организм является актуальной задачей.

Однозначных данных о попадании ДСИП в мозг через гематоэцефалический барьер нет. В работе Kastin et al. (1982) такая возможность предполагается, однако вместе с этим в клетках сосудов головного мозга обнаружены ферменты, быстро расщепляющие ДСИП [Augustijns et al., 1995].

Малые размеры пептида, наличие всего 3-х заряженных групп и наличие на N-конце триптофана создает дополнительные трудности для формирования обратимого связывания данного пептида с носителем и успешного пролонгирования его выхода.

Целью данной работы было разработать системы доставки ДСИП в организм на основе наноэмульсий и полимерных матриц.

В ходе выполнения работы решались следующие задачи:

1 .Разработать методы включения ДСИП в обратные наноэмульсии и оптимизировать их состав.

2. Изучить стабильность пептида в наноэмульсиях при хранении в различных условиях.

3.Исследовать кинетику выхода ДСИП из полученных наноэмульсий в in vitro модели.

4.Разработать методику включения ДСИП в полимерные матрицы на основе различных биосовместимых полимеров.

5. Изучить кинетику выхода пептида из полимерных матриц различного состава в модели in vitro.

6. Исследовать динамику структуры ДСИП в зависимости от ионной силы раствора.

Научная новизна. Впервые были разработаны системы включения для шпраназального введения ДСИП (обратные наноэмульсии на основе эвкалиптового масла и лимонена). Для использования в тканевой инженерии ДСИП впервые был

включен в биосовмесгнмые матрицы на основе модифицированного поливинилового спирта (ЛВС), сополимера ЛВС и глицидилметакрилата (ПВС-ГМА) и сополимера димепшамшюэтилметакрилата и метшен-бис-акриламида (Со-ДМАЭМА-МБАА). Впервые была разработана методика модификации матриц Со-ДМАЭМА-МБАА полифенольными соединениями с целыо замедления выхода пептида и снижения токсичности матрицы. Оптимизирована кинетика выхода пептида в модели in vitro из носителей различного состава (наноэмульсий и полимерных матриц) с целью равномерного выхода ДСИП и достижения стабильного во времени воздействия на окружающие ткани (для матриц) и организм в целом (для наноэмульсий).

Практическая значимость работы. Полученные результаты рекомендуется использовать для разработки новых систем доставки лекарственных препаратов на основе ДСИП и пептидов со схожей структурой и свойствами, а также создания новых биоактивных имплантатов либо раневых покрытий с включенными в них пептидами. Предлагаемые подходы запатентованы (приложения А и В) и внедрены в педагогическую и лабораторную практику кафедры биотехнологии РХТУ им. Д.И. Менделеева, Москва (приложение С).

Личный вклад соискателя. Все экспериментальные и теоретические исследования по теме диссертации проведены лично соискателем. Соискатель принимал непосредственное участие в выборе направления научного поиска, разработке цели и задач исследований по теме диссертационной работы; проведения биотехнологических, биохимических и цитологических исследований; анализе полученных результатов.

Апробация работы. Результаты диссертации были представлены на следующих конференциях: XV Международная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых по фу1щаментальным наукам "Ломоносов-2008", Химия (Москва, 2008), III International conference on colloid chemistry and physicochemical medians (Москва, 2008), XXI и XXII зимняя молодежная научная школа «Перспективные направления физико-

jL iL J^ Л.

химической биологии и биотехнологии» (Москва, 2009 и 2010), 34 , 35 , 36ш и 37 FEBS Congress (Prague, 2009, Gothenbuig, 2010, Torino, 2011, Seville, 2012), IV Российский симпозиум Белки и пептиды (Казань, 2009), Международная научная

конференция по биоорпшической химии, биотехнологии и бионанотехнологии, посвященная 75-летию со дня рождения академика Юрия Анатольевича Овчинникова (Москва, 2009), Биология - наука XXI века. 14-я Международная Пущинская школа-конференция молодых ученых (Пущино, 2010).

Публикации. По материалам диссертации было опубликовано 5 печатных работ, в т.ч. 3 статьи в журналах, рецензируемых ВАК, и 2 патента.

Структура диссертации. Работа изложена на 152 страницах, включает 68 рисунков и 4 таблицы. Список литературы содержит 255 источников, в том числе 245 иностранных авторов. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы.

Основные положения и результаты, выносимые на защиту:

1. Обратные наноэмульсии на основе ЭМ/вода и лимонен/вода сохраняют 90% биологической активности ДСИП в течение 2 месяцев.

2. Наноэмульсия ЭМ/вода в 7 раз лучше, чем лимонена/вода пролонгирует выход ДСИП.

3. Полимерные матрицы на основе ДМАЭМА, ПВС и ПВС-ГМА позволяют получить депонированную форму ДСИП для тканевой инженерии.

4. Ионная сила окружающей микросреды влияет на стабильность ДСИП и его взаимодействие с полимерной матрицей.

5. Поперечная сшивка положительно заряженной матрицы полифенолами позволяет не только замедлить выход ДСИП в раствор, но и снизить токсичность применяемых матриц.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биологически активные пептиды

Биологически активные пептиды образуются из белков-предшественников в результате процессинга и выполняют, прежде всего, регуляторную функцию. К ним относятся опиоидные (а- и Р-лакторфин), иммуномодулирующие (фрагменты а- и Р-казеина), минерал-связывающие, антитромботические, антимикробные, антиоксидантные, антигипертензивные, нейропептиды и т.д., пептидные гормоны (в т.ч. нейропептиды), например, адрепокортикотропин, вазопрессин, гастрин, меланоцитстимулирующий гормон, окситоцин, опиоидные пептиды и др., пептиды-регуляторы иммунитета (гормоны тимуса, тетрапептид Thr—Lys—Pro—Arg, являющийся фрагментом иммуноглобулина G), антибиотики пептидной природы, ионофоры (депсипептиды), токсины (яды пчел, ос, бледной поганки (фаллоидин, аманитины), нейротоксины яда змей) [Caprini et al., 2013; Chretioen et al., 1989; Sharma et al., 2011].

В свою очередь, некоторые нейропептиды расщепляются до меньших молекул, действие которых количественно и качественно отличается от действия исходных соединений. Нейропептиды отвечают за регуляцию практически всех функций центральной нервной системы (болевую чувствительность, состояние сон-бодрствование, половое поведение, процессы фиксации информации и др.) и управляют вегетативными реакциями организма (температура тела, дыхание, артериальное давление, мышечный тонус и т.д.).

Нейропептиды взаимодействуют с рецепторами, расположенными на поверхности клеток-мишеней, инициируя ряд физико-химических процессов в клеточной мембране, в цитоплазме клетки или в постсинаптической мембране нейронов. Размер активного центра нейропептидов, взаимодействующего с рецептором, не превышает обычно 4-5 аминокислотных остатков. Остальные участки нейропептидов выполняют дополнительные функции, например, обеспечивают устойчивость к действию протеолишческих ферментов (период

полураспада нейропептидов колеблется от нескольких секунд до минут) [Mains, Eipper, 1999; Flicker, 2012].

1.2 Дельта-сон индуцирующий пептид

Физические и биологические свойства

ДСИП относится к нейропептидам и обнаруживается в ряде структур головного мозга (гипоталамус, пшокамп, септум и другие лимбические структуры); имеются данные о его наличии в других органах и тканях [Charnay et al., 1989].

Первоначально ДСИП был обнаружен в 1977 г. в венозной крови спящих кроликов [Schoenenberger, Monnier, 1977], чем обусловлено его историческое название. Однако дальнейшие исследования не подтвердили сомногеннош эффекта ДСИП, но выявили ряд полезных свойств (модуляция боли, регуляция циркадианных циклов, стрессоустойчггвости, снижение уровня лишщов в сыворотке крови, возможность использования при лечении алкоголизма и наркомании) [Bondarenko et al., 2013; Graf, Kastin, 1986, Sudakov etal., 1995].

Молекула ДСИП (ТфА1аС1уС1уА5рА1а8еЮ1у01и), как гг молекулы многих коротких пептцдов, в водном растворе находггтся в состоянии динамического равновесия между упорядоченной и неупорядоченной формой. Структура ДСИП, по литературным данным, зависит также от состава растворителя. ДСИП присутствует в растворе как в виде разверггутой, так и квазициклической структур [Овчинников, 1987]. Согласгго Gray et al. (1994) в водном растворе фосфатного буфера молекула содержит 2 участка, содержащих несколько р-поворотов (Рисунок 1А), а в трифторэтаноле принимает вид спиралеподобной структуры (Рисунок 1 Б). ДСИП проявляет значительные антиоксцдантные свойства гг шггибирует индуцироватюе стрессом возрастание перекисного окислегпгя лишщов гг содержания свободтгых радикалов в тканях мозга гг друпгх органов. При этом аншоксидантное действие может быть непрямым гг основываться отчасти на активацшг защитных агпиоксидантных ферментов [Khvatova et al., 2003; Бондаренко гг др., 2011].

Рисунок 1. А - Модель структуры ДСИП в водном растворе фосфатного буфера, Б - Модель структуры ДСИП в трифторэтаноле [Gray et al,

1994].

Эндогенный ДСИП снижает содержание малонового диальдегида, увеличивая при этом содержание каталазы и супероксиддисмутазы в мозговых тканях, печени и плазме крови подопытных крыс и циррулоплазмина в плазме крови, умеренно увеличивая при этом содержание мочевины и мочевой кислоты в тех же тканях [Бондаренко и др., 2011]. Данный пептид влияет на работу нейроиммунной системы [Yehuda and Carasso, 1988; Kruger and Karnovsy, 1995], терморегуляцию, локомоцию, частоту сердечных сокращений и кровяное давление [Yeguda et al., 1980,1988], увеличивает активность моноаминоксадазы А и уровень серотонина в головном мозге [Khvatova et al., 1995; Ouichou et al., 1992], оказывает влияние на выход в кровь гормонов гипоталамуса и передней доли гипофиза [Bjartelletal, 1990].

Кроме того, ДСИП снижает интенсивность абстинентного синдрома у морфин-зависимых мышей [Dick et al., 1984; Scherschlicht et al., 1984], а также обладает антиметастатической активностью [Прудченко и др., 1993]. Было показано, что иммунореактивный Met-энкефалин, выделяющийся из медуллярных синаптосом у грызунов, также стимулируется ДСИП в концентрации 10"'°-10"9 М. Вместе с этим ДСИП стимулирует вход Са2+ в нервные окончания [Nakamura et al., 1991]. Выявлено также, что ДСИП стимулирует синтез бежов и нуклеиновых кислот в нервных клетках, снижает активность рибонуклеотидредуктазы, что в свою очередь определяет пролиферативную

активность клеток [Rikhireva et al., 2010; Schoenenberger, 1984; Бондаренко и др, 2011], влияет на экспрессию гена c-fos [Umrukhin et al., 2012].

Функциональные особенности ДСИП: белки-предшественники, рецепторы, взаимодействие с гемато-энцефалическим барьером, расщепление пептидазами.

Точный механизм взаимодействия ДСИП с клеткой неизвестен, однако выявлено, что он может переноситься через гематоэнцефалический барьер по механизму пассивного транспорта [Gray et al., 1994]. Вместе с этим в клетках эпителия микрососудов головного мозга найдены аминопептидаза и пептидилдипептидаза, расщепляющие ДСИП [Augustijns et al., 1995].

После предварительного ионофореза ДСИП отмечается меньшее число активированных глутаматом нейронов, что дает основания полагать, что ДСИП связывается с NMDA-рецепторами (Рисунок 2), т.к. связывание ДСИП с сайтом мембраны нейрона препятствует активации рецептора глутаматом. В работах Umryukhin et al. (2004, 2012) также высказывается предположение, что ДСИП взаимодействует с NMDA-рецептором по С-концевой аминокислоте Glu, которая может выполнять функции антикон вульсанта [Piotrovskii, 1992], либо возможно непрямое взаимодействие.

Рисунок 2. Модель структуры рецептора NMDA.

По данным Grigor'ev et al. (2006), ДСИП взаимодействует с рецепторами GABA (Рисунок 3) нейронов гиппокампа и мозжечка, при этом пептид значительно и доз-зависимо усиливает ток в этих нейронах. Согласно работе Nakamura et al. (1991), ДСИП связывается с опиоидными рецепторами (Рисунок 4). Так, опиоидный антагонист налоксон ингибирует противоболевое действие ДСИП [Nakamura et al.,

1986, 1988, Nakamura and Shiomi, 1990; Shiomi and Nakamura, 1990]. Кроме того, ДСИП снижает уровень стресс-индуцированной экспрессии гена c-fos в паравентрикулярных ядрах гипоталамуса [Sudakov et al., 2001, Umriukhin, 2002], что увеличивает стресс-устойчивость крыс [Sudakov et al., 1991].

Рисунок 3. Структура рецептора GABA(B).

Ьш1 tnmc ltinl Ml

Рисунок 4. Модель опиоидного рецептора.

При исследовании взаимодействия ДСИП, меченного по Тгр 1-оксил-2,2,5,5-тетраметилмирролин-З-карбоновой кислотой, с мембранами эритроцитов были выявлены изменения в плазматической мембране, в частности в статусе ее липидных компонентов [Rikhireva et al., 1995].

Белок-предшественник ДСИП до сих пор не выявлен. Исследования показали, что в клетках передней доли гипофиза мыши образуются три предположительных белка-предшественника ДСИП (50-60 кДа), которые последовательно расщепляются до двух относящихся к ДСИП фрагментов промежуточных соединений массой 35-45 кДа и одной группы 9-16,5 кДа. В итоге следующего расщепления образуются фрагменты менее 3 кДа, содержащие Gly, но не включающие Ala и Arg [Bjartell et al., 1990].

В базах данных аминокислотных последовательностей белков и кодирующих их ДНК и РНК (про- и эукариот) обнаружены последовательности, отличающиеся от последовательности ДСИП, по крайней мере, на 1 аминокислоту. Анализ аминокислотных последовательностей эукариот выявил последовательность WKGGNASGE близкую по составу ДСИП в составе JmjC-домена в составе деметилазы шстонов, кодируемой геном JMJD1B. Данная последовательность кодирует KND пептид, который обладает схожими с ДСИП свойствами [Mikhaleva et al., 2011; Mikhaleva et al., 2013].

Диффузия через гематоэнцефалический барьер является условием нормального функционирования нервной системы. Плотные межклеточные контакты препятствуют прохождению через него гидрофильных веществ, однако низкомолекулярные липофильные соединения, такие как 02 и СО2, свободно проходят через него по градиенту концентрации. Более крупные молекулы (белки и аминокислоты) проходят через гематоэнцефалический барьер с помощью переносчиков [Ballabh et al., 2004].

Однозначного ответа на вопрос, проходит ли ДСИП через гематоэнцефалический барьер, до сих пор не существует. Согласно ряду работ, амфифильная молекула ДСИП частично проходит через гематоэнцефалический барьер так же, как и сквозь клеточные мембраны. Перенос происходит как диффузно, так и с помощью механизма, расположенного, предположительно, в дне 4-го желудочка [Graf et al. 1984, 1986; Schoenenberger 1984; Inoue, 1988; Yehuda et al. 1988; Gray et al. 1994; Polverini et al., 1998; Strekalova, 1998]. Согласно исследованиям Sudakov et al. (2004), при микроионофорезе ДСИП происходит активация некоторых отделов мозга, прежде всего, дорсального гиппокампа и переднего вентрального таламического ядра.

Не исследованы досконально биохимические пути утилизации ДСИП в организме. Обнаружена содержащаяся в спинномозговой жидкости аминопептцдаза (ок. 80 kD), способная расщеплять ДСИП и другие нейропеппщы, например, энкефалины [Nybag et al., 1990]. По данным Augustijns et al. (1995), ДСИП

разрушается пептид! щцппегтшдазой А и аминопегтпщазой, локализованных в клетках эпителия микрососудов головного мозга. Данный фермент отщепляет ди- и трипеппщы с С-конца молекулы ДСИП. Распад ДСИП после введения его в организм начинается с отщепления N-концевого Tip с последующим отщеплением Ala [Graf et al. 1984, 1986; Schoenenberger 1984; Inoue, 1988; Yehuda et al. 1988; Прудченко, Михалева 1994; Strekalova 1998]. Именно Тф способствует более позднему выходу ДСИП при ВЭЖХ-анализе [Bjartell et al., 1990]. На устойчивость ДСИП и его аналогов к действию аминопегтшдазы оказывает влияние его конформация, так [N-

О "У

MeAla]DSIP и [5-А1а ]DSIP обладают большей амшюпеппщазной устошшвостыо, но различной гибкостью цепи (peptide bone) [Kovalzon et al, 2006].

Аналоги ДСИП

Существуют искусственно синтезированные аналоги ДСИП (Таблица 1). Замена Ala (позиция 2) на D-аминокислоту сделана с целью повышения устойчивости к протеазам [Прудченко и др., 2003].

Таблица 1 - Аналоги ДСИП

1 2 3 4 5 6 7 8 9

DSIP Tip Ala Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-I Тф DVal Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-3 Тф DAla Gly Gly Asp Tyr Ser Gly Glu

ID-4 Тф DLeu Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-5 Туг Pro Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-7 Тф DAla Gly Gly Asp Pro Ser Gly Glu

ID-8 Туг DAla Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

1D-10 Тф DAla Gly Gly Asp

1D-11 Тф Pro Gly Gly Asp Pro Ser Gly Glu

ID-13 Тф DPhe Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-15 Тф Tyr Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-16 Тф Leu Pro Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-17 Тф DSer Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

ID-25 Ас-Тгр Ala Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

1D-26 DPro Ala Gly Gly Asp Ala Ser Gly Glu

Khvatova et al. (1995) исследовали 6 аналогов ДСИП (ID-1, ID-3,1D-4, ID-5, ID-8, ID-13) на предмет сгресспротекшрной активности при гипоксии. Было показано, что аналоги ID-3 и ID-5 в большей степени, чем ДСИП, предотвращают индуцируемые стрессом изменения акшвносли М1ггохондриальной моноаминоксидазы А и содержать серотонина в головном мозге крыс.

Замена Tip на Туг совместно с введением Pro (ID-5) значительно повышает эффективность пептида. Замена Ala на Туг (позиция 6) и Ala на DAla (позиция 2) в аналоге Ю-3 также повышает активность пептида, однако замена Tip на Туг и Ala на DAla (позиция 2) в аналоге ID-8, наоборот, приводит к значительной потере активности. Возрастание пщрофобности в позиции 2 (замена Ala на DVal, DPhe или DLeu) не влияет на их активность (ID-4 и ID-13) или приводит к ее потере (Ю-1) [Khvatova et al., 1995].

Циклическое производное ДСИП (циклону-ДСИП)) предупреждает вызванное стрессом снижение активности нормальных Т-киллеров.

ДСИП и его аналоги обладают антиметастатическим эффектом в следующей последовательности по уменьшению их активности ID-10, ДСИП, ID-16, ID-7, ID-13, ID-3, ID-1. Аналога Ю-10, ID-3 и ДСИП тормозят инвазию опухолевых клеток. Аналог ID-25 (ацетилированный ДСИП), напротив, усиливает метастазирование [Прудченко и др., 2003].

1.3 Инкапсулирование пептидов

Связи, образуемые инкапсулируемыми пептидами и матрицей.

Различия в свойствах инкапсулируемых белков и пептидов предопределяют разнообразие методов их капсулирования. Белки и пептиды образуют с матрицей различные типы связей, что определяется целью работы и особенностями белка (пептида) и носителя. Пептиды могут выделяться в окружающую среду (солевой раствор, кровь, межклеточная жидкость) при разрушении частицы, будучи механически включенными в нее, через поры в ее объеме или в оболочке (микро- и нанокапсулы PLGA, полиэлектролитные микрокапсулы, полученные методом layer-by-layer), т.е. быть включенными

механически, взаимодействовать с матрицей электростатически, образовывать ионные, водородные связи, или же быть необратимо иммобилизованными ковалентными связями [Штильман, 1998].

Включение биологически активных веществ (БАВ) в системы с контролируемым выходом позволяет вводить их в организм в малых дозах, регулируя скорость за счет варьирования строения системы доставки. Данный подход позволяет устранить такие недостатки свободных БАВ, как побочная токсичность, быстрое расходование введенной дозы препарата и т.д.

Сложности капсулирования пептидов

Несмотря на значительное и очевидное сходство в строении белков и пептидов, не все методы капсулирования белков подходят для успешного капсулирования пептидов. Особенно это касается пролонгирования выхода олигопептидов (2 - 20 аминокислот), т.к. по своим свойствам они ближе к свободным аминокислотам, чем к белкам. Одним из ограничивающих факторов выбора материалов и методов капсулирования коротких пептидов является размер пор, образуемых полимерным материалом. Кроме того, короткие пептиды содержат значительно меньше групп, образующих с носителем ионные или гидрофобные связи, что ускоряет их отделение от носителя. В подавляющем большинстве работ пептиды либо вводят в PLGA; ковале! шю пришивают к носителю или пришивают пептид к полимерному соединению [Matsuda et al., 2005; Sexton et al., 2009], что увеличивает его массу и таким образом, уменьшает подвижность.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Суханова, Татьяна Владимировна, 2015 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Механизм реализации гетеропротекторной активности дельта-сон индуцирующего пептида / Т.И. Бондаренко, Е.А.Майборода, И.И.Михалёва и др. // Успехи геронтол. -2011.- Том. 24, - № 1. - С. 80-92.

2. Дебу, К. Энциклопедический словарь Брокгауза и Ефрона: В 86 томах (82 т. и 4 доп.) / К Дебу. - СПб. - С. 1890—1907.

3. Дельта-сон индуцирующий пептид и препарат дельтаран: потенциальные пути антистрессовой протекции / Е.В. Коплик, П.Е. Умрюхин, И.Л. Конорова и др. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2007. - Том. 107, - № 12. - С. 50-54.

4. Музафаров, E.H. Механизм действия и физиологические функции флавоноидов при фотосинтезе высших растений / E.H. Музафаров // Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук, Пущино. - 1990. - С. 21 - 24,31,39 - 44,47 - 52,165 -174.

5. Овчинников, Ю.А. Биоорганическая химия / Ю.А. Овчинников. М: «Просвещение». - 1987. - С. 270-271.

6. Прудченко, И.А. Проблема эндогенности пептнда дельта-сна / И.А. Прудченко, И.И. Михалева // Успехи современной биологии. - 1994. - Т. 114, -№ 6. - С. 728-740.

7. Синтез и биологические свойства аналогов пептида дельта-сна. 2. Антиметастатическое действие / И.А. Прудченко, Л.В. Сташевская, E.H. Шепель и др. // Биоорганическая химия. - 1993. - Т. 19, №12. - С. 1177-1190.

8. Ускорение фибриллообразования и температурная стабилизция фибрилл коллагена в присутствии таксифолина (дигидроверцетина) / Ю.С. Тараховский, И.И. Селезнева, H.A. Васильева и др. // Бюлл. эксп. биол. и мед. - 2007. - Т. 144, - №12. - С. 640-644.

9. Штильман, М.И. Полимеры в биологически активных системах / М.И. Штильман // Соросовский образовательный журнал. -1998. - Т.4, -№5. -С. 48-53.

10. Emulsification by ultrasound: drop size distribution and stability / B. Abismail, J.P. Canselier, A.M. Wilhelm, et al. // Ultrason. Sonochem. - 1999.-№6. - P. 75-83.

11. Agnihotri, S.A. Recent advances on chitosan-based micro- and nanoparticles in drug delivery / S.A. Agnihotri, N.N. Mallikarjuna T.M. Aminabhavi // J. Contr. Rel. - 2004.- Vol. 100, - №1. - P. 5-28.

12. Photopolymerized injectable RGD-modified fumarated poly(ethylene glycol) diglycidyl ether hydrogels for cell growth / Z.S. Akdemir, H. Akcakaya, M.V. Kahraman, et al. // Macromol. Biosci. - 2008 - Vol.8, -№9. - P. 852-862.

13. Preparation and in vitro evaluation of chitosan nanoparticles containing a caspase inhibitor / Y. Akta§, K. Andrieux , M.J. Alonso, et al. // Int. J. Pharm. -2005. - Vol. 298, - №2. - P. 378-383.

14. Al-Tahami, K. Smart Polymer Based Delivery Systems for Peptides and Proteins / K. Al-Tahami, J. Singh // Recent Patents on Drug Delivery & Formulation. -2007.-№1.-P. 65-71.

15. Alonso, M.J. The potential of chitosan in ocular drug delivery / M.J. Alonso, A. Sanchez // J. Pharm. Pharmacol. - 2003. - Vol. 55, №11. - p. 1451-1463.

16. Encapsulation of Curcumin in Self-Assembling Peptide Hydrogels as Injectable Drug Delivery Vehicles / A. Altunbas, S.J. Lee, S.A. Rajasekaran, et al. // Biomaterials. - 2011. - Vol. 32, -№25. - P. 5906-5914.

17. Alvarez-Barreto, J.F. Improved mesenchymal stem cell seeding on RGD-modified poly(L-lactic acid) scaffolds using flow perfusion / Alvarez-Barreto J.F., Sikavitsas V.I. // Macromol Biosci. - 2007. - Vol. 7, № 5. - P. 579-588.

18. Chitosan-based delivery systems for protein therapeutics and antigens / M. Amidi, E. Mastrobattista, W. Jiskoot, et al. // Adv. drug deliv. rev. - 2010. - Vol.62, -№ 1. - P. 59-82.

19. Anton, N. Design and production of nanoparticles formulated from nano-emulsion templates - A review / N. Anton, J.-P. Benoit, P. Saulnier // J. Control. Release. - 2008. -Vol. 128, -№3. - P. 185-199.

20. Macroporous polymeric hydrogels formed from acrylate modified polyvinyl alcohol macromers / A.A. Artyukhov, M.I. Shtilman, A.N. Kuskov, et al. // J. Polym. Res. -2010. - Vol. 18. -№.4. - P. 667-673.

21. Chitosan as a nasal delivery system: the effect of chitosan solutions on in vitro and in vivo mucociliary transport rates in human turbinates and volunteers / TJ. Aspden, J.D. Mason, N.S. Jones, et al. // J. Pharm. Sci. - 1997. - №4. - P. 509-513.

22. Peptidyl dipeptidase A-catalyzed metabolism of delta sleep-inducing peptide in bovine brain microvessel endothelial cells, a cell culture model of the blood brain barrier / P.F. Augustijns, K.Y. Ng, T.M. Williams et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1995. -№210. - P. 987-994.

23. Balabushevich, N.G. Fabrication and characterization of polyelectrolyte microparticles with protein / N.G. Balabushevich, N.I. Larionova // Biochemistry (Moscow). - 2004. - №69. - P. 757-762.

24. Ballabh, P. Blood-brain barrier: an overview, structure, regulation and clinical implication / P. Ballabh, A. Braun, M. Nedergaard // Neurobiol. Dis. - 2004. -№16.-P. 1-13.

25. Cyclic Peptide-Polymer Complexes and Their Self-Assembly / D. Belanger, X. Tong, S. Soumare, Y.L. Dory, Y. Zhao // Chem. Eur. J. - 2009. -№15. - P. 4428-4436.

26. Interleukin-2-containing liposomes: interaction of interleukin-2 with liposomal bilayers and preliminary studies on application in cancer vaccines / J.J. Bergers, W. Den Otter, H.F. Dullens, et al. // Pharm. Res. - 1993. -№10. - P. 1715-1721.

27. Precise control of PLG microsphere size provides enhanced control of drug release rate / C. Berkland, M. King, A. Cox, et al. // J. Contr. Rel. -2002. -№82.-P. 137-147.

28. Bjartell, A. Biosynthesis and processing of delta sleep-inducing peptide-like precursors in primary cultures of mouse anterior pituitary cells / A. Bjartell, R. Ekman, Y.P. Loh // Eur. J. Biochem. - 1990. -№190, - P. 131 -137.

29. Metabolie effects of delta-sleep inducing peptide during physiological aging of the organism / T.I. Bondarenko, E.A. Maiboroda, I.I. Mikhaleva, et al. // Eksp. Klin. Farmakol.- 2013. -Vol. 76, №9. - P. 22-26.

30. The effect of protein structure on their controlled release from an injectable peptide hydrogel / M.C. Branco, D.J. Pochan, N.J. Wagner, et al. // Biomaterials. -2010. -№31. - P. 9527 - 9534.

31. Incorporation of Biomaterials in Multicellular Aggregates Modulates Pluripotent Stem Cell Differentiation / A.M. Bratt-Leal, R.L. Carpenedo, M. Ungrin, et al. // Biomaterials. - 2011. -Vol. 32, -№1. - P. 48-56.

32. Polyethylene glycol)-coated hexadecylcyanoacrylate nanospheres display a combined effect for brain tumour targeting / I. Brigger, J. Morizet, G. Aubert, et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2002. -№303. - P. 928-936.

33. Bromberg, L. Polymeric micelles in oral chemotherapy / L.Bromberg // J. Control Release. - 2008. -Vol. 128, -№2. - P. 99-112.

34. Novel hydrophilic chitosan-polyethylene oxide nanoparticles as protein carriers / P. Calvo, C. Remunan-Lopez, J.L. Vila-Jato et al. // J. Appl. Pol. Sei.. -1997. -№63. - P. 125-132.

35. Long-circulating PEGylated polycyanoacrylate nanoparticles as new drug carrier for brain delivery / P. Calvo, B. Gouritin, H. Chacun, et al. // Pharm. Res.-2001.-№18.-P. 1157-1166.

36. Quantification and localization of PEGylated polycyanoacrylate nanoparticles in brain and spinal cord during experimental allergic encephalomyelitis in the rat /P. Calvo , B. Gouritin, H. Villarroya, et al. // Eur. J. Neurosci. - 2002. - Vol. 15,-№8.-P. 1317-1326.

37. Ocular and systemic bio-distribution of rhodamine-conjugated liposomes loaded with VIP injected into the vitreous of Lewis rats / S. Camelo, L. Lajavardi, A. Bochot, et al. // Mol. Vis. - 2007. -№13. - P. 2263-2274.

38. A novel bioactive peptide: assessing its activity over murine neural stem cells and its potential for neural tissue engineering. / A. Caprini, D. Silva, I. Zanoni, et al. // N Biotechnol. -2013. - Vol. 30, -№5. - P. 552-562.

39. Cartmell, S. Controlled Release Scaffolds for Bone Tissue Engineering / S. Cartmell // J. Pharm. Sci. - 2009. - Vol. 98, -№2. - P. 430-441.

40. Collagen Tissue Engineering: Development of Novel Biomaterials and Applications / L. Cen, W. Liu, L. Cui, W. Zhang, Y. Cao // Pediatric Research. - 2008. - Vol. 63, №5. - P. 492-496.

41. Effect of the composition of lecithin/n-propanol/isopropyl myristate/water microemulsions on barrier properties of mice skin for transdermal permeation of tetracaine hydrochloride: In vitro / M. Changez, M. Varshney, J. Chander, et al. // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. -2006. -№50. - P. 18-25.

42. Semi-degradable scaffold for articular cartilage replacement / D.C. Charlton, M.G.E. Peterson, K. Spiller, et al. // Tissue Eng. Part A. - 2008. - Vol. 14, №1.-P. 207-213.

43. Immunohistochemical distribution of delta sleep inducing peptide in the rabbit brain and hypophysis / Y. Charnay, C. Bouras, Vallet P.G., et al. // Neuroendocrinology. -1989.- №49. - P. 169-175.

44. Synergistic assembly of hyperbranched polyethylenimine and fatty acids leading to unusual supramolecular nanocapsules / Y. Chen, Z. Shen, H. Frey, et al. // Chem. Commun. -2005. - P. 755-757.

45. Chen, Y.F. UV-syntheses and properties of responsive hydrogels containing N,N-dimethylaminoethyl methacrylate / Y.F. Chen, M. Yi // Acta Polymerica Sinica. -2001. - №2. - P. 215-218.

46. Functional diversity of bioactive peptides in the nervous system itself: "How the brain may understand" /Chretien, R.A. Sikstrom, C. Lazure, et al. // Bioscience Reports. -1989. - Vol. 9, №6. - P. 693-700.

47. Induction of an in vitro reversible hypometabolism through chitosan-based nanoparticles / C. Colonna, R. Dorati, B. Conti, et al. // J. Microencapsul. -2011. - Vol. 28, - №4. - P. 229-39.

48. Extraction of a hydrophilic compound from water into liquid C02 using dendritic surfactants / A.I. Cooper, J.D. Londono, G. Wignall, et al. // Nature. -1997. - №389. - P. 368-371.

49. De Geest, B.G The pros and cons of polyelectrolyte capsules in drug delivery / B.G. De Geest, G.B. Sukhorukov, H. Mohwald // Expert Opin. Drug Deliv. -2009. - Vol. 6, -№6. - P. 613-624.

50. Dangles, O. Flavonoid-Protein Interactions / O. Dangles, C. Dufour // Flavonoids. Chemistry, Biochemistry and Applications, edited by Andersen Q.M., Markham K.R., Taylor & Francis Group. -2006.- P. 443-470.

51. Delong, S.A. Covalently immobilized gradients of bFGF on hydrogel scaffolds for directed cell migration / S.A. Delong, J.J. Moon, J.L. West // Biomaterials. -2005. - №26. - P. 3227-3234.

52. Denizli, A. Nonspecific Adsorption and Covalent Coupling of Heparin on Polyacrylate Based Microbeads / A. Denizli, M. Kiremitgi, E. Piskin // Artificial Cells, Blood Substitutes and Biotechnology. -1993. - Vol. 21, №2. - P. 183-198.

53. Polymeric Particles Conjugated With a Ligand to VCAM-1 Exhibit Selective, Avid, and Focal Adhesion to Sites of Atherosclerosis / S.P. Deosarkar, R. Malgor, J. Fu, et al. // Biotechnol. Bioeng. -2008.- №101, - P. 400-407.

54. Dhoot, N.O. Microencapsulated liposomes in controlled drug delivery: strategies to modulate drug release and eliminate the burst effect / N.O. Dhoot, M.A. Wheatley // J. Pharm. Sci. -2003. - №92. - P. 679-689.

55. DSIP in the treatment of withdrawal syndromes from alcohol and opiates / / P. Dick, C. Costa, K. Fayolle, et al. // Eur. Neurol. -1984. - №23. - P. 364-371.

56. Douglas, T. Perspective Viruses: Making Friends with Old Foes / T. Douglas, M. Young // Science. -2006. - Vol. 312, - №5775. - P. 873 - 875.

57. Drucker, D.J. Glucagon-like peptides: regulators of cell proliferation, differentiation, and apoptosis/D.J. Drucker//Mol. Endocrinol., 17,2003, - P. 161-171.

58. Biodegradable PLGA Microspheres as a Sustained Release System for a New Luteinizing Hormone-Releasing Hormone (LHRH) / L. Du, J. Cheng, Q. Chi, J. Qie, et al. // Chem. Pharm. Bull. - 2006. - Vol. 54, №9. - P. 1259—1265.

59. Nuclear delivery of a therapeutic peptide by long circulating pH-sensitive liposomes: Benefits over classical vesicles / E. Ducat, J. Deprez, A. Gillet, et al. // Int. J. Pharm. -2011. - Vol. 420, -№2. - P. 319-332.

60. Applications of Thermoreversible Pluronic F-127 Gels in Pharmaceutical Formulations / J.J. Escobar-Chävez, M. Lopez-Cervantes, A. Naik, et al. // J. Pharm. Pharmaceut. Sei. - 2006. - Vol. 9, №3. - P. 339-358.

61. Preparation of insulin nanoparticles and their encapsulation with biodegradable polyelectrolytes via the layer-by-layer adsorption / Y.F. Fan, Y.N. Wang, Y.G. Fan, et al. // Int. J. Pharm. -2006. - Vol. 324, -№2. - P. 158-167.

62. Fisher, O.Z. Enhanced Core Hydrophobicity, Functionalization and Cell Penetration of Polybasic Nanomatrices / O.Z. Fisher, T. Kim, S.R. Dietz // Pharm. Res. -2009. - Vol. 26, - №1. - P. 51-60.

63. Freiberg S. Polymer microspheres for controlled drug release / S. Freiberg, X.X. Zhu // Int. J. Pharm. - 2004. - №282. - P. 1-18.

64. Freitas, C. Correlation between long-term stability of solid lipid nanoparticles (sin) and crystallinity of the lipid phase / C. Freitas, R.H. Müller // Eur. J. Pharm. Biopharm. -1999. - Vol. 42, - №2. - P. 125-132.

65. Flicker, L.D. Neuropeptides and Other Bioactive Peptides: From Discovery to Function/L.D. Fricker// Colloquium Series on Neuropeptides. -2012. -122 p.

66. Gaucher, G. Block copolymer micelles: preparation, characterization and application in drug delivery / G. Gaucher, M.-H. Dufresne, V. Sant // J. Control. Release. -2005. - №109. - P. 169-188.

67. Drug Release from Pluronic F-127 Gels / J. Gilbert, J. Hadgraft, A. Bye, et al. // Int. J. Pharm. -1986. -№32. - P. 223-228.

68. Gololobov, G. Stabilization of vasoactive intestinal peptide by lipids / G. Gololobov, Y. Nöda, S. Sherman, // J. Pharmacol. Exp. Ther. -1998. - Vol. 285, №2. - P. 753-758.

69. Graf, M.V. Delta Sleep-Inducing Peptide (DSIP): a review / M.V. Graf, A.J. Kastin // Neurosci. Biobehav. Rev. -1984. -№8. - P. 83-93.

70. Graf, M.V., Delta-sleep-inducing peptide (DSIP): an update / M.V. Graf, A.J. Kastin // Peptides. -1986. - №7. - P. 1165-87.

71. Graf, M.V. Degradation and Aggregation of Delta Sleep-Inducing Peptide (DSIP) and Two Ananlogs in Plasma and Serum / M.V. Graf, B. Saegesser, G.A. Schoenenberger // Peptides. -1987. - №8. - P. 599-603.

72. Grassi, M. Mathematical Modelling and Controlled Drug Delivery: Matrix Systems / M. Grassi, G. Grassi // Current Drug Delivery. -2005. - №2. - P. 97-116.

73. Delta-Sleep-Inducing-Peptide: solution conformational studies of a membrane-permeable peptide / R.A. Gray, D.G. Vander Velde, C. Burke, et al. //Biochemistry. -1994. -№33. - P. 1323-1331.

74. Biomimetic approach to tissue engineering / W.L. Grayson, T.P. Martens, G.M. Eng, et al. // Seminars in Cell & Developmental Biology. -2009. -№20. - P. 665-673.

75. Effects of delta sleep-inducing peptide on pre- and postsynaptic glutamate and postsynaptic GABA receptors in neurons of the cortex, hippocampus, and cerebellum in rats / V.V. Grigor'ev, T.A. Ivanova, E.A. Kustova et al. // Bull. Exp. Biol. Med. -2006. - Vol. 142, - №2. - P. 186-188.

76. Liposomal formulations of glucagon-like peptide-1: Improved bioavailability and anti-diabetic effect / J. Hanato, K. Kuriyama, T. Mizumoto, et al. // Int. J. Pharm. -2009. - Vol. 382, №1-2. - P. 111-116.

77. Hecht, E. Interaction of ABA copolymers with ionic surfactants in aqueous solution / E. Hecht, H. Hoffmann // Langmuir. -1994. - №10. - P. 86-91.

78. Site specific 1:1 opioid:albumin conjugate with in vitro activity and long in vivo duration / D.L. Holmes, K. Thibaudeau, B. L'Archeveque, et al. // Bioconjug. Chem. -2000. - №11. - P. 439^44.

79. Holmes, T.C. Novel peptide-based biomaterial scaffolds for tissue engineering / T.C. Holmes // TRENDS in Biotechnology. -2002. - Vol. 20, -№1. -P. 16-21.

80. Core Crosslinking of Biodegradable Block Copolymer Micelles Based on Poly(ester carbonate) / X. Hu, X. Chen, J. Wei, et al.// Macromol. Biosci. -2009. -№9. - P. 456^63.

81. Huang, Y.Y. A method using biodegradable polylactides/polyethylene glycol for drug release with reduced initial burst / Y.Y. Huang, T.W. Chung, T.W. Tzeng // Int. J. Pharm. -1999. - №182. - P. 93-100.

82. Coating alginate microspheres with a serum albumin-alginate membrane: application to the encapsulation of a peptide / R. Hurteaux, F. Edwards-Levy, D. Laurent-Maquin, et al. // Eur. J. Pharm. Sci., -2005. - №24. - P. 187-197.

83. Inoue, S. Sleep Peptides. Basic and Clinical Approaches. / edited by Schneider-Helmert D. / S. Inoue // Japan Scientific Societies Press/Springer Verlag, Tokyo /Berlin. 1988.

84. Development and in vivo evaluation of a new oral nanoparticulate dosage form for leuprolide based on polyacrylic acid / J. Iqbal, C. Vigl, G. Moser, et al. // Drug Deliv. -2011. - Vol. 18, - №6. - P. 432-440.

85. Izquierdo-Barba, I. Incorporation of antimicrobial compounds in mesoporous silica film monolith / I. Izquierdo-Barba, M. Vallet-Regir, N. Kupferschmidt // Biomaterials. -2009. - №30. - P. 5729-5736.

86. Jang, J.-H. Electrospun materials as potential platforms for bone tissue engineering / J.-H. Jang, O. Castano, H.-W. Kim // Adv. Drug Deliv. Rev. -2009.-№61.-P. 1065-1083.

87. Janes, K.A. Polysaccharide colloidal particles as delivery systems for macromolecules / K.A. Janes, P. Calvo, M.J. Alonso // Adv. Drug Deliv. Rev. -2001.-№47.-P. 83-97.

88. Heparinized poly(vinyl alcohol) - small intestinal submucosa composite membrane for coronary covered stents / T Jiang, G. Wang, J. Qiu, et al. // Biomed. Mater. -2009.- Vol.4, - №2 :025012.

89. Jones, M.-Ch. Reverse polymeric micelles for pharmaceutical applications / M.-Ch. Jones, H. Gao, J.-Ch. Leroux // J. Control. Rel. - 2008. -№132. -P. 208-215.

90. Effect of RGD-immobilized dual-pore poly(L-lactic acid) scaffolds on chondrocyte proliferation and extracellular matrix production / H.J. Jung, K. Park , J.J. Kim, et al. //Artif Organs. -2008.- Vol. 32, - №12. - P. 981-989.

91. Kakizawa, Y. Environment-sensitive stabilization of core-shell structured polyion complex micelle by reversible cross-linking of the core through disul-fide bond / Y. Kakizawa, A. Harada, K. Kataoka // J. Am. Chem. Soc. -1999. - №121. - P. 11247 -11248.

92. Kang, Y. Dynamic Mechanism of Collagen-like Peptide Encapsulated into Carbon Nanotubes / Y. Kang, Q. Wang, Y.-Ch .Liu // J. Phys. Chem. B. -2008.- №112. - P. 4801-4807.

93. Chitosan-coated poly(vinyl alcohol) nano fibers for wound dressings / Y.O. Kang, I.S. Yoon, S.Y. Lee, et al. // J. Biomed. Mater. Res. B Appl. Biomater. -2010. - Vol. 92, №2. - P. 568-576.

94. Kar S. Formation of Vesicles through Solvent Assisted Self-Assembly of Hydrophobic Pentapeptides: Encapsulation and pH Responsive Release of Dyes by the Vesicles / S. Kar, M.G. Drew, A. Pramanik // Protein Pept Lett. -2011.- Vol. 18, -№9, - P. 886-897.

95. Karakecili, A.G. Evaluation of L929 fibroblast attachment and proliferation on Arg-Gly-Asp-Ser (RGDS)-Immobilized chitosan in serum-containing/serum-free cultures / A.G. Karakecili, T.T. Demirtas, C. Satriano, M. et al. // J. Biosci. Bioeng. -2007. - Vol. 104, №1. - P. 69-77.

96. Adsorption of drugs onto a pH responsive poly(N,N-dimethyl aminoethyl methacrylate) grafted anion-exchange membrane in vitro / J. Karppi, S. Ákerman, K. Ákerman, et al. // Int. J. Pharm. -2007. - №338. - P. 7-14.

97. Differential penetration of DSIP peptides into rat brain / A.J. Kastin, W.A. Banks, P.F. Castellanos, et al. // Pharmacol. Biochem. Behav. -1982. -№17.-P. 1187-1191.

98. Effect of DSIP and some analogues on the activity of monoamine oxidase type A in rat brain under hypoxia stress / E.M. Khvatova, N.A. Rubanova, I.A. Prudchenko, et al.// FEBS Lett. -1995. - №368. - P. 367-369.

99. Delta sleep inducing peptide (DSIP): effect on respiration activity in rat brain mitochondria and stress protective potency under experimental hypoxia / E.M. Khvatova, V.N. Samartzev, P.P. Zagoskin, et al. // Peptides -2003. -№24.-P. 307-331.

100. Development of polyvinyl alcohol-sodium alginate gel-matrix-based wound dressing system containing nitrofurazone / J.O. Kim, J.K. Park, J.H. Kim, et al. // Int. J. Pharm., -2008.- №359. - P. 79-86. (1)

101. Kim, J.O. Development of Clindamycin-Loaded Wound Dressing with Polyvinyl Alcohol and Sodium Alginate /Kim J.O., Choi J.Y., Park J.K. // Biol. Pharm. Bull. -2008. -Vol. 31, -№12. - P. 2277—2282. (2)

102. Kim, J.H. Preparation and core-polymerization of MePEG/PDLLA block copolymer micelle (I) / J.H. Kim, Y. Nagasaki, K. Kataoka // J. Ind. Eng. Chem. -1998. -Vol. 4, №3.-P. 244 - 250.

103. Klyachko, N.L.// Surfactant Aggregates as Matrix Nanocontainers for Proteins (Enzymes) Entrapment and Regulation / N.L. Klyachko, A.V. Levashov // Curr. Opin. Colloid. Interface Sei. -2003. -№8. - P. 156-170.

104. Kovalzon, V.M. Delta sleep-inducing peptide (DSIP): a still unresolved riddle / V.M. Kovalzon, T.V. Strekalova // J. Neurochem. -2006. -№97. - P. 303-309.

105. Kratz, F. Drug conjugates with albumin and transferrin / F. Kratz // Exp. Opin. Ther. Pat. -2002. -№12. - P. 433-439.

106. Kratz, F. Albumin as a drug carrier: Design of prodrugs, drug conjugates and nanoparticles / Kratz F. // J. Control. Rel. -2008. -№132. - P. 171-183.

107. Kreuter, J. Colloidal Drug Delivery Systems / J. Kreuter // edited by Marcel Dekker, New York, 1994, Ch. Nanoparticles.

108. Kroll, J. Reactions of Plant Phenolics with Food Proteins and Enzymes under Special Consideration of Covalent Bonds / Kroll J., Rawel H.M., Röhn S. // Food Sei. Technol. Res. -2003. - Vol. 9, №3. - P. 205-218.

109. Kruger, J.M. Sleep as a neuroimmune phenomenon: a brief historical perspective / J.M. Kruger, M.L. Karnovsy // Adv. Neuroimmunol. -1995. - №5. - P. 5-12.

110. Kusumo, A. High Capacity, Charge-Selective Protein Uptake by Polyelectrolyte Brushes / A. Kusumo, L. Bombalski, Q. Lin // Langmuir. -2007.-№23. - P. 4448-4454.

111. Lee, J.Y. Neuroactive conducting scaffolds: nerve growth factor conjugation on active ester-functionalized polypyrrole / J.Y. Lee, J.-W. Lee, Ch.E. Schmidt // J. R. Soc. Interface -2009.- № 6. - P. 801-810.

112. Enhanced Chondrogenesis of Mesenchymal Stem Cells in Collagen Mimetic Peptide-Mediated Microenvironment / Lee H.J., Yu C., Chansakul T., et al. // Tissue Eng Part A. -2008. - Vol.14, -№11. - P. 1843-1851.

113. Estimation of cell proliferation by various peptide coating at the PPF/DEF 3D scaffold / J.W. Lee, J.H. Jung, D.S. Kim, et al. // Microelectronic engeneering. -2009. - Vol. 86, № 4-6. - P. 1451-1454.

114. Lee, T.H. Double-walled microspheres for the sustained release of a highlywater soluble drug: characterization and irradiation studies / T.H. Lee, J. Wang, C.H. Wang // J. Control. Rel. -2002. - №83. - P. 437-452.

115. Repair of Rat Cranial Bone Defects with nHAC/PLLA and BMP-2-Related Peptide or rhBMP-2 /J. Li, J. Hong, Q. Zheng, X. Guo // J. Ortoped. Res. -2011.- P. 1741-1752.

116. Li, J.K., Gelatin nano-encapsulation of protein/peptide drugs using an emulsifier-free emulsion method / J.K. Li, N. Wang, X.S. Wu // J. Microencapsul. -2006. - Vol. 15, -№2, - P. 163-72.

117. Li, M. Microencapsulation by solvent evaporation: State of the art for process engineering approaches / M.Li, O.Rouaud, D.Poncelet // Int. J. Pharm. -2008.- №363. - P. 26-39.

118. In vitro characteristics of poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres incorporating gelatin particles loading basic fibroblast growth factor / S. Li, S. Cai, B.Liui, et al. // Acta Pharmacol. Sin. -2006.- Vol. 27, №6. - P. 754-759.

119. Liang, M. Increasing entrapment of peptides within poly(alkyl cyanoacrylate) nanoparticles prepared from water-in-oil microemulsions by

copolymerization / M. Liang, N.M. Davies, I. Toth // Int. J. Pharm. -2008.- №10 362. -P. 141-146.

120. Liggins, R.T. Polyether-polyester diblock copolymers for the preparation of paclitaxel loaded polymeric micelle formulations / R.T. Liggins, H.M. Burt // Adv. Drug Deliv. Rev. -2002,- №54. - P. 191-202.

121. Effect of Sodium Carboxymethylcellulose and Fucidic Acid on the Gel Characterization of Polyvinylalcohol-based Wound Dressing / S.-J. Lim, J.H. Lee, M.G. Piao, et al. //Arch. Pharm. Res. -2010.- Vol. 33, - №7, - P. 1073-1081.

122. Lin, C.C. Cell-cell communication mimicry with poly(ethylene glycol) hydrogels for enhancing {beta}-cell function / C.C. Lin, K.S. Anseth // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. -2011. - Vol. 108, №16. - P. 6380-6385.

123. Liu, J. Controlled release of insulin from PLGA nanoparticles embedded within PVA hydrogels / J. Liu, S.M. Zhang, P.P. Chen, // J. Mater. Sei. Mater. Med. -2007. -№18. - P. 2205-2210.

124. The use of Eudragit® RS 100/cyclodextrin nanoparticles for the transmucosal administration of glutathione / A. Lopedota, A. Trapani, A. Cutrignelli, et al.// Eur. J. Pharm. Biopharm. -2009.- Vol. 72, -№3. - P. 509-520.

125. Loyd, A.V. Jr. Compounding gels, Current and Practical Compounding Information for the Pharmacist / Loyd A.V. Jr. // Secundum Artem. -1994.- Vol. 4, -№5. - P. 1-13.

126. Factors limiting the oral bioavailability of N-acetylglucosaminyl-N-acetylmuramyl dipeptide (GMDP) and enhancement of absorption in rats by delivery in a water-in-oil microemulsion / K.C. Lyons, W.N. Charman, R. Miller, et al. // Int. J. Pharm. -2000.- №199. - P. 17-28.

127. Development and characterisation of an agar-polyvinyl alcohol blend hydrogel / J.G. Lyons, L.M. Geever, M.J.D. Nugent, et al.// J. Mech. Behav. Biomed. Mater. - 2009. -Vol. 2, -№5. - P. 485-493.

128. Maeda, H. Design of long-acting formulation of protein drugs with a double-layer structure and its application to rhG-CSF / H. Maeda, T. Nakagawa, N. Adachi // J. Control. Rel. -2003.- №91. - P. 281-297.

129. Mains, R.E. Basic Neurochemistry: Molecular, Cellular and Medical Aspects. 6th ed. / R.E. Mains, B.A. Eipper//American Society for Neurochemistry. -1999.

130. Mandal, T.K. Poly(d,l-Lactide-Co-Glycolide) encapsulated poly(Vinyl Alcohol) hydrogel as a drug delivery system / T.K. Mandal, L.A. Bostanian, R.A. Graves // Pharm. Res. -2002.- №19. - P. 1713-1719.

131. Mann, B.K. Tethered TGF-ß increases extracellular matrix production of vascular smooth muscle cells / B.K. Mann, R.H. Schmedlen, J.L. West // Biomaterials. -2001, № 22. - P. 439-444.

132. Mao, H.Q. Chitosan-DNA nanoparticles as gene carriers: synthesis, characterization and transfection efficiency / H.Q. Mao, K. Roy, V.L. Troung-Le // J. Control. Release. -2001.- №70. - P. 399^21.

133. Lipid-based colloidal carriers for peptide and protein delivery -liposomes versus lipid nanoparticles / S. Martins, B. Sarmento, D.C. Ferreira, E.B. Souto // Int J Nanomedicine, -2007.- Vol. 2, -№4. - P. 595-607.

134. Chitosan-RGDSGGC conjugate as a scaffold material for musculoskeletal tissue engineering /Masuko T., Iwasaki N., Yamane S. et al. // Biomaterials. -2005. -Vol. 26. - №26. - P. 5339-5347.

135. Immobilization of laminin peptide in molecularly aligned chitosan by covalent bonding / A. Matsuda, H. Kobayashi, S. Itoh, et al.// Biomaterials. -2005. -№26. - P. 2273-2279.

136. JmjC-domain-containing histone demethylases of the JMJD1B type as putative precursors of endogenous DSIP /Mikhaleva I.I., Prudchenko I.A., Ivanov V.T., et al. // Peptides. -2011.- №32. - P. 826-831.

137. Olygopeptide KND as a putative endogenous prototype of delta sleep inducing peptide (DSIP). Comparative study of biological properties. // / I.I. Mikhaleva, V.T. Ivanov, V.B. Voitenkov, et al. / Bioorg Khim. -2013.- Vol. 39, №3. - P. 277-84.

138. Controlled Encapsulation of Multiple Proteins in Virus Capsids / Minten I.J., Hendriks L.J.A., Nolte R.J.M., et al.// J. Am. Chem. Soc. -2009.-№131.-P. 17771-17773.

139. Tumour targeted delivery of encapsulated dextran-doxorubicin conjugate using chitosan nanoparticles as carrier / S. Mitra, U. Gaur, P.C. Ghosh, et al. //J. Control. Release. -2001. - №6. - P. 317-323.

140. Pluronic F-127 gels as a novel vehicle for rectal administration of indomethacin / S. Miyazaki, Ch. Yokouchi, T. Nakamura, et al. // Chem. Pharm. Bull. -1986. -№34. - P. 1801-1808.

141. Percutaneous Absorption of Indomethacin from Pluronic F-127 Gels in Rats / S. Miyazaki, T. Tobiyama, M. Takada, et al. // J. Pharm. Pharmacol. -1995.-№47.-P. 455-457.

142. Moscato, S. Interaction of human gingival fibroblasts with PVA/gelatine sponges / S. Moscato, L. Mattii, D. D'Alessandro // Micron -2008. -№39. - P. 569-579.

143. Müller, R.H. The next generation after liposomes: solid lipid nanoparticles (sin, lipopearls) as dermal carrier in cosmetics / R.H. Müller, A. Dingier // Eurocosmetics. -1998. -№7-8. - P. 19-26.

144. Müller, R.H. Solid lipid nanoparticles (sin) for controlled drug delivery—a review of the state of the art / R.H. Müller, K. Mäder, S. Gohla // Eur. J. Pharm. Biopharm. -2000. -№50. - P. 161-178.

145. Müller, R.H. Nanostructured lipid matrices for improved microencapsulation of drugs / R.H. Müller, M. Radtke, S.A. Wissing // Int. J. Pharm. -2002. -Vol. 242, -№1-2. P. 121-128.

146. Study of the interaction between salivary proline-rich proteins and a polyphenol by 1H-NMR spectroscopy / N.J. Murray, M.P. Williamson, T.H. Lilley, et al. // Eur. J. Biochem. -1994. -№219. P. 923-935.

147.Naganawa, H. Cooperative effect of carbamoylmethylene phosphine oxide on the extraction of lanthanides(III) to water-in-oil microemulsion from concentrated nitric acid medium / H. Naganawa, H. Suzuki, S. Tachimori // Phys. Chem. Chem. Phys. -2000. - №14. - P. 3247-325.

148. Nakaniura, A. Delta-sleep-inducing peptide (DSIP) has potent analgesic activity in mice / A. Nakaniura, M. Nakashima, H. Kanemoto // Eur. J. Phurmucol. -1986.- №121. - P. 157-158.

149. Potent antinociceptive effect of centrally administered delta-slcep-inducing peptide (DSIP) / A. Nakamura, M. Nakashima, T. Sugao et al.// Eur. J. Pharmacol. -1988. -№155. - P. 247-353.

150. Characterization of Delta-Sleep-Inducing Peptide-Evoked Release of Met-Enkephalin from Brain Synaptosomes in Rats / A. Nakamura, K. Sakai, Y. Takahashi, H. Shiomi //J. Neurochem. -1991. -Vol. 57, -№3. - P. 1013-1018.

151. Nakamura, A. The mechanism of antinociceptive effects of DSIP. 1: Involvement of endogenous opioid systems / A. Nakamura, H. Shiomi // edited by Inoue S. and Krueger J.M., SPB Academic Publishing, The Hague. -1990. - P. 185-192.

152.Narang, A.S. Stable drug encapsulation in micelles and microemulsions / A.S. Narang, D. Delmarre, D. Gao // Int. J. Pharm. -2007. -№345. - P. 9-25.

153. Porous nano-HA/collagen/PLLA scaffold containing chitosan microspheres for controlled delivery of synthetic peptide derived from BMP-2 / X. Niu, Q. Feng, M. Wang, X. et al. // J. Control. Release. -2009. -№134. - P. 111-117.

154. Nurbakov, A.A. Effect of delta-sleep-inducing peptide on expression of heat shock protein 70 kDa in K562 cells / A.A. Nurbakov, I.I. Mikhaleva, A.M. Sapozhnikov // Bull. Exp. Biol. Med. -2009. -Vol.147, - №1. - P. 39-41.

155.Nyberg, F. Aminopeptidase in human CSF which degrades delta-sleep inducing peptide (DSIP) / Nyberg F., Thornwall M., Hetta J. // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1990. -Vol. 167, -№3. - P. 1256-1262.

156. Lipid-drug conjugate (ldc) nanoparticles as novel carrier system for the hydrophilic antitrypanosomal drug diminazenediaceturate / C. Olbrich, A. Gessner, O. Kayser, et al. // J. Drug Target. -2002. -Vol. 10, №5. - P. 387-396.

157. Delta-sleep-inducing peptide stimulates melatonin, 5-methoxytryptophol and serotonin secretion from perfused rat pineal glands / A. Ouichou, M. Zitouni, F. Raynaud, et al. // Biol. Signals. -1992. -№1. - P. 65 - 77.

158. Controlled Intracellular Release of Peptides from Microcapsules Enhances Antigen Presentation on MHC Class I Molecules / R. Palankar, A.G. Skirtach, O. Kreft, et al. // Small. -2009. -Vol.5, - №19. - P. 2168-2176.

159. Nanoparticulate delivery system for insulin: Design, characterization and in vitro/in vivo bioactivity / C. Pinto Reis, A.J. Ribeiro, S. Houng, et al.// Eur. J. Pharm. Sei. -2007. -Vol.30, -№5. - P. 392-397.

160. Piotrovskii, L.B. The search for substances with selective actions on mediator transmission by excitatory amino acids / L.B. Piotrovskii // Vestn. Ros. Akad. Med. Nauk. -1992. -№7. - P. 57-62.

161. Factors influencing the entrapment of hydrophilic compounds in nanocapsules prepared by interfacial polymerisation of water-in-oil microemulsions / T. Pitaksuteepong, N.M. Davies, I.G. Tucker, et al. // Eur. J. Pharm. Biopharm. -2002. -№53. - P. 335-342.

162. Conformational changes of neuromedin B and delta sleep-inducing peptide induced by their interaction with lipid membranes as revealed by spectroscopic techniques and molecular dynamics situation / E. Polverini, R. Casadio, Z.P. Neyro, L. Masotti //Arch. Biochem. Biophys. -1998. -№349. - P. 225-235.

163. Debeaujon Flavonoid oxidation in plants: from biochemical properties to physiological functions / L. Pourcel, J.-M. Routaboul, V. Cheynier, et al. // TRENDS in Plant Science. -2007. -Vol. 12, -№1. - P. 29-36.

164. The use of flow perfusion culture and subcutaneous implantation with fibroblast-seeded PLLA-collagen 3D scaffolds for abdominal wall repair / F. Pu, N.P. Rhodes, Y. Bayon, et al.// Biomaterials. -2010. -Vol.31, -№15. - P. 4330-4340

165. Encapsulation of Abl-15 in PLGA microparticles enhances serum antibody response in mice immunized by subcutaneous and intranasal routes / G. Puras, A. Salvador, M. Igartua, et al. // Eur. J. Pharm. Sei. -2011. -Vol.44, -№3. - P. 200-206.

166. Chitosan Graft Copolymer Nanoparticles for Oral Protein Drug Delivery: Preparation and Characterization / F. Qian, F. Cui, J. Ding, et al. // Biomacromolecules. -2006. -№7. - P. 2722-2727.

167. Rajkannan, R. Development of hepatitis B oral vaccine using B-cell epitope loaded PLG microparticles / R. Rajkannan, M.D. Dhanaraju, D. Gopinath. // Vaccine. -2006. -Vol.24, -№24. - P. 5149-5157.

168. Non-woven PGA/PVA fibrous mesh as an appropriate scaffold for chondrocyte proliferation / M. Rampichovä, E. Kost'äkovä, E. Filova, et al. // Physiol. Res. -2010. -Vol. 59, -№5. - P. 773-781.

169. High-pressure stabilization of a-chymotrypsin entrapped in reversed micelles of Aerosol OT in octane against thermal inactivation / R.V. Rariy, N. Bee, J.-L. Saldana, et al. // FEBS Letters. -1995. -№364. - P. 98-100.

170. Ratty, A.K. Interaction of flavonoids with l,l-diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical, liposomal membranes and soybean lipoxygenase-1 / Ratty A.K., Sunamoto J., Das N.P.// Biochem. Pharmacol. -1988. -Vol. 37, -№6. - P. 989-95.

171. Rawel, H.M. Model studies on reactions of plant phenols with whey proteins / H.M. Rawel, J. Kroll, U.C. Hohl //Nahrung/Food. -2001. -Vol.45, -№2. - P. 72 - 81

172. Interaction of delta-sleep-inducing peptide with cell membranes in vitro / G.T. Rikhireva, I.N. Golubev, S.A. KopylovskiT, et al. // Bioorg Khim. -1999. -Vol.25, -№5. - P. 334-340.

173. Mechanism of Biological Effect of the Delta-Sleep-Inducing Peptide Includes Activation of Deoxyribonucleotide Synthesis / G.T. Rikhireva, M.K. Pulatova, V.L. Sharigin, et al.// Biology Bulletin. -2009. -Vol. 36, №4. - P. 388-392.

174. Eco -, geno- and human toxicology of bio-active nanoparticles for biomedical applications / J. Robbens, C. Vanparys, I. Nobels, et al.// Toxicology. -2010. -№269. - P. 170-181.

175.Rokusek, D. Interaction of human osteoblasts with bioinert and bioactive ceramic substrates. D. Rokusek, C. Davitt, A. Bandyopadhyay, S. Bose, H.L. Hosick // J. Biomed. Res. -2005. -№75, - P. 588-594.

176. Sachlos, E. Making tissue engineering scaffolds work. Review on the application of solid freeform fabrication technology to the production of tissue endineering scaffolds / E. Sachlos, J.T. // Czernuszka European Cells and Materials. -2003. - №5. - P. 29-40.

177. Peptide-surface modification of poly(caprolactone) with laminin-derived sequences for adipose-derived stem cell applications / L.Y. Santiago,

R.W. Nowak, J.P. Rubin, K.G. Marra // Biomaterials. -2006. - Vol. 27, №15. -P. 2962-2969.

178. Probing insulin's secondary structure after entrapment into alginate/chitosan nanoparticles / B. Sarmento, D.C. Ferreira, L. Jorgensen, et al. // Eur. J. Pharm. Biopharm. -2007. - Vol.65, -№1. - P. 10-17.

179. Hydrophobically modified poly(amidoamine) (PAMAM) dendrimers: their properties at the air-water interface and use as nanoscopic container molecules / Y. Sayed-Sweet, D.M. Hedstrand, R. Spinder, et al.// J. Mater. Chem. -1997. -№7. - P. 1199-1205.

180. Schallreuter, K.U. Hydrogen peroxide regulates the cholinergic signal in a concentration dependent manner / K.U. Schallreuter, S. Elwary// Life Sciences. -2007. -№80. - P. 2221-2226.

181. Some pharmacological effects of delta-sleep-inducing peptide (DSIP) / R. Scherschlicht, L. Aeppli, P. Pole, et al. // Eur Neurol. -1984. -Vol. 23, №5. -P. 346-52.

182. Schmolka, I.R. Artificial Skin I: Preparation and properties of Pluronic-127 gels for treatment of burns / I.R. Schmolka // J. Biomed. Mater. Res. -1972. -№6. - P. 571-582.

183. Schmolka, I.R. Pluronic polyols in skin lotions / Schmolka I.R. // Cosmet. Perfum. -1974. -№89. - P. 63-66.

184. Schoenenberger, G.A. Characterization of a delta-electroencephalogram (8-sleep)-inducing peptide / G.A. Schoenenberger, M. Monnier// Proc. Natl. Acad. Sei. USA. -1977. -№74. - P. 1282-1286.

185. Schoenenberger, G.A. Characterization, properties and multivariate functions of Delta-Sleep-Inducing Peptide (DSIP) / Schoenenberger G.A. // Eur. Neurol. 1984. -№23. - P. 321-345.

186. A Protective Vaccine Delivery System for In Vivo T Cell Stimulation Using Nanoengineered Polymer Hydrogel Capsules / A. Sexton, P.G. Whitney, S.-F. Chong, et al. // ACSNano. -2009. -Vol. 3, -№11. P. 3391 - 3400.

187. Sharma, S. Bioactive Peptides: A Review / S. Sharma, R. Singh, S. Rana // Int. J. Bioautomation. -2011. -Vol.15, -№4. - P. 223-250.

188. Effect of the microencapsulation of nanoparticles on the reduction of burst release / A. Sheikh Hasan, M. Socha, A. Lamprecht, et al.// Int. J. Pharm. -2007. -№344.-P. 53-61.

189. Shevchenko, R.V. A review of tissue-engineered skin bioconstructs available for skin reconstruction / R.V. Shevchenko, S.L. James, S.E. James // J. R. Soc. Interface. -2010. -№7. - P. 229-258.

190. Effect of surface preparation on the failure load of a highly filled composite bonded to the polymer-monomer matrix of a fiber-reinforced composite / H. Shimizu, F. Tsue, Z.X. Chen, et al. // J. Prosthodont. -2009. -Vol. 18, -№3. - P. 255-258.

191. Shin, D.H. Degree of conversion and color stability of the light curing resin with new photoinitiator systems / D.H. Shin, H.R. Rawls // Dent. Mater. -2009. -Vol. 25, №8. - P. 1030-1038.

192. Shiomi, H. The mechanism of antinociceptive effects of DSIP. 11: Involvement of bulbospinal inhibitory systems, in Endogenous Sleep Fuctors / H. Shiomi, A. Nakamura // edited by InouC S. and Krueger J. M., SPB Academic Publishing, The Hague. -1990. - P. 193-200.

193. Tissue response to the implantation of biodegradable polyhydroxyalkanoate sutures / E.I. Shishatskaya, T.G. Volova, A.P. Puzir, et al. // J. Mater. Sei.: Mater. Med. -2004. -№15. - P. 719 - 728.

194. Biocompatibility of polyhydroxybutyrate microspheres: in vitro and in vivo evaluation / E.I. Shishatskaya, O.N. Voinova, A.V. Goreva, h ,np. // J. Mater. Sei.: Mater. Med. -2008. -№19. - P. 2493-2502.

195. Insulin encapsulation in reinforced alginate microspheres prepared by internal gelation / C.M. Silva, A.J. Ribeiro, D. Ferreira, et al. // Eur. J. Pharm. Sei. -2006. -Vol.29, -№2. - P. 148-159.

196. Smith, D.C. Development of glass-ionomer cement systems / D.C. Smith // Biomaterials. -1998. -Vol. 19, -№6. - P. 467-478.

197. Smith, T.J. Development of a novel porous cryo-foam for potential wound healing applications / T.J. Smith, J.E. Kennedy, C.L. Higginbotham // J. Mater. Sci.: Mater. Med. -2009. -№20. - P. 1193-1199. (1)

198.Nanostructured polymer scaffolds for tissue engineering and regenerative medicine / O. Smith, X.H. Liu, L.A. Smith, et al. // Nanomed. Nanobiotechnol. -2009. -Vol. 1. - P. 225 - 236. (2)

199. Polymer carriers for drug delivery in tissue engineering / M. Sokolsky-Papkov, K. Agashi, A. Olaye, et al. // Adv. Drug Deliv. Rev. -2007. -№59.-P. 187-206.

200. Quaternized Cellulose Nanoparticles as Protein Carriers / Y. Song, J. Zhou, Q. Li, et al. // Macromol. Biosci. -2009, -№9. - P. 857-863.

201. Strekalova, T.V. DSIP: problems of its endogenous origin and biological activity / Strekalova T.V. //Neurokhimia. -1998. -№15. - P. 227-239.

202. Strukova, S.M. Immobilized thrombin receptor agonist peptide accelerates wound healing in mice / Strukova S.M., Dugina T.N., Chistov I.V., // Clin. Appl. Thromb. Hemost. -2001. -Vol. 7, №4. - P. 325-329.

203. Synthetic poly(amino acid) hydrogels with incorporated cell-adhesion peptides for tissue engineering / H. Studenovska, P. Vodicka, V. Proks, et al. // J. Tissue Eng. Regen. Med. -2010. -№4. - P. 454-463.

204. Su, Y.-L. The reorientation of poly(2-dimethylamino ethyl methacrylate) after environment stimuli improves hydrophilicity and resistance of protein adsorption / Y.-L. Su, C. Li//J. Colloid and Interface Science. -2007. -№316. - P. 344-349.

205. Sudakov, K.V. The antistress effects of delta sleep-inducing peptide / K.V. Sudakov // Fiziol. Zh. SSSR. -1991. -Vol. 77, №3. - P. 3-15.

206. Delta-sleep inducing peptide sequels in mechanisms of resistance to emotional stress / K.V. Sudakov, J.P. Coghlan, A.V. Kotov, et al. // Ann. N.Y. Acad. Sci. -1995. -№771. - P. 240-251.

207. Delta sleep-inducing peptide (DSIP) and ACTH(4-10) analogue influences Fos-induction in the limbic structures of the rat brain under emotional

stress / K.V. Sudakov, P.E. Umriukhin, E.V. Koplik, et al. // Stress. -2001. -Vol. 4, -№2. - P. 143-153.

208. Sudakov, K.V. Delta-sleep inducing peptide and neuronal activity after glutamate microiontophoresis: the role of NMDA-receptors / K.V. Sudakov, P.E. Umriukhin, K.S. Rayevsky // Pathophysiology. -2004. -№11. - P. 81-86.

209. Sunder, A. Molecular nanocapsules based on amphiphilic hyperbranched polyglycerol / A. Sunder, M. Krämer, R. Hanselmann, // Angew. Chem. Int. Ed. -1999. -№38. - P. 3552-3555.

210. Sung, J.H. Gel characterisation and in vivo evaluation of minocycline-loaded wound dressing with enhanced wound healing using polyvinyl alcohol and chitosan / J.H. Sung, M.-R. Hwang, J.O. Kim // Int. J. Pharm. -2010. -Vol. 392, -№1-2. - P. 232-240.

211. Tan, M.L. Recent development in liposomes, microparticles and nanoparticles for protein and peptide drug delivery / M.L. Tan, P.F.M. Choong, C.R. Dass // Peptides. -2010. -№31. - P. 184-193.

212. Esophageal Tissue Engineering: An In-Depth Review on Scaffold Design / J.Y. Tan, C.K. Chua, K.F. Leong, et al. // Biotechnol. Bioeng. -2012. -Vol. 109, -№ l.-P. 1-15.

213. Biodegradable polymer nanoparticles that rapidly penetrate the human mucus barrier / B.C. Tang, M. Dawson, S.K. Lai, et al.// PNAS. -2009. -Vol. 106, -№46. - P. 19268-19273.

214. Taylor, P. Ostwald ripening in emulsions / P. Taylor // Adv. Colloid Interface Sei. -1998. -№75. - P. 107-163.

215.Thanoo, B.C.Controlled release of oral drugs from cross-linked polyvinyl alcohol microspheres / B.C. Thanoo, M.C. Sunny, A. Jayakrishnan // J. Pharm. Pharmacol. -1993. -Vol. 45, №1. - P. 16-20.

216. Effect of degree of quaternization of N-trimethyl chitosan chloride for enhanced transport of hydrophilic compounds across intestinal caco-2 cell monolayers / M.M. Thanou, A.F. Kotze', T. Scharringhausen, H.L. et al. //J. Control. Release. -2000. -№64.-P. 15-25.

217. Reduction in the initial-burst release by surface crosslinking of PLGA microparticles containing hydrophilic or hydrophobic drugs / A.J. Thote, J.T. Chappell, R.B. Gupta, et al. // Drug Dev. Ind. Pharm. -2005. -№31. - P. 43-57.

218. Electrochemical Oxidation of Quercetin in Hydro-Alcoholic Solution / A.K. Timbóla, C.D. de Souza, C. Giacomelli, A. Spinelli // J. Braz. Chem. Soc. -2006.-Vol. 17, -№1. - P. 139-148.

219. Polyelectrolyte multilayer films functionalized with peptides for promoting osteoblast functions / W.-B. Tsai, R.P.-Y.Chen, K.-L. Wei, et al. // Acta Biomaterialia. -2009. -№5. - P. 3467-3477.

220. Umriukhin, P.E. Cycloheximide prevents inhibition of expression of immediate early gene c-fos in paraventricular nuclei of rat hypothalamus produced by delta sleep-inducing peptide / P.E. Umriukhin // Bull. Exp. Biol. Med. -2002. -Vol. 134, -№3. - P. 218-220.

221. Umriukhin, P.E. Dizocilpine and cycloheximide prevent inhibition of c-Fos gene expression by delta sleep-inducing peptide in the paraventricular nucleus of the hypothalamus in rats with different resistance to emotional stress / P.E. Umriukhin, E.V. Koplik, K.V. Sudakov //Neurosci Lett. -2012. -Vol. 506, -№2. - P. 184-187.

222. Preparation and characterization of folate-targeted pEG-coated pDMAEMA-based polyplexes / J.H. van Steenis, E.M. van Maarseveen, F.J. Verbaan, et al. // J. Contr. Rel. -2003. -№87. - P. 167-176.

223. A Versatile Method for the Conjugation of Proteins and Peptides to Poly[2-(dimethylamino)ethyl methacrylate] / W.N.E. van Dijk-Wolthuis, P. van de Wetering, W.L.J. Hinrichs, et al. // Bioconjugate Chem. -1999. -№10. - P. 687-692.

224. Low molecular weight chitosan nanoparticles as new carriers for nasal vaccine delivery in mice / A. Vila, A. Sánchez, K. Janes, et al.// Eur. J. Pharm. -2004. -№57. - P. 123-131.

225. Viljanen, K. Protein oxidation and protein-lipid interactions in different food models in the presence of berry phenolics, / K. Viljanen // Academic dissertation, University of Helsinki Department of Applied Chemistry and Microbiology Food Chemistry. 2005.

226. Resorbable Glass-Ceramic Phosphate-based Scaffolds for Bone Tissue Engineering: Synthesis, Properties and, In Vitro Effects on Human Marrow Stromal Cells / C. Vitale-Brovarone, G. Ciapetti, E. Leonardi, et al. // J. Biomater. Appl. -2011. -Vol. 26, -№4. - P. 465-489.

227. Wan, A.C.A. Nanomaterials for in situ cell delivery and tissue regeneration / A.C.A. Wan, J.Y. Ying // Adv. Drug Deliv. Rev. -2010. -№62. - P. 731-740.

228. Wang, N. A novel approach to stabilization of protein drugs in poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres using agarose hydrogel / N. Wang, X.S. Wu // Int. J. Pharm. -1998. -№166. - P. 1-14.

229. Enhanced nerve regeneration through a bilayered chitosan tube: The effect of introduction of glycine spacer into the CYIGSK sequence / W. Wang, S. Itoh, A. Matsuda, et al. // J. Biomed. Mater. Res. Aio -2008. -Vol.85A, -№4. -P. 919-928.

230. Dual-drug delivery system based on hydrogel/micelle composites / L. Wei, Ch. Cai, J. Lin, et al. // Biomaterials. 2009. -Vol. 30, -№13. - P. 2606-2613.

231. Wieber. A. Characterisation and stability studies of a hydrophilic decapeptide in different adjuvant drug delivery systems: A comparative study of PLGA nanoparticles versus chitosan-dextran sulphate microparticles versus DOTAP-liposomes / A. Wieber, T. Selzer, J. Kreuter // Int. J. Pharm. -2011. -Vol. 421,-№1.-P. 151-159.

232. Wissing, S.A. Cosmetic applications for solid lipid nanoparticles (sin) / S.A. Wissing, R.H. Müller // Int. J. Pharm. -2003. -№254. P. 65-68.

233. Topical transport of hydrophilic compounds using water-in-oil nanoemulsions / H. Wu, Ch. Ramachandran, N.D. Weiner, et al. // Int. J. Pharm. -2001.-№220.-P. 63-75.

234. Chloride channel-mediated brain glioma targeting of chlorotoxin-modified doxorubicine-loaded liposomes / Y. Xiang, L. Liang, X. Wang, et al. // J. Control Release. -2011. -Vol. 152, -№3. - P. 402-10.

235. Yadav. S.C. Development of peptide and protein nanotherapeutics by nanoencapsulation and nanobioconjugation / S.C. Yadav, A. Kumari, R. Yadav //Peptides. -2011. -№32. - P. 173-187.

236. Potentiality of double liposomes containing salmon calcitonin as an oral dosage form / K. Yamabe, Y. Kato, H. Onishi, et al.// J. Control. Release. -2003.-№89.-P. 429-436.

237. Self-Assembly of Peptide-Inorganic Hybrid Spheres for Adaptive Encapsulation of Guests / B.X. Yan, P. Zhu, J. Fei, et al. // Adv. Mater. -2010. -№22. -P. 1283-1287.

238. Therapeutic Ultrasonic Microbubbles Carrying Paclitaxel and LyP-1 Peptide: Preparation, Characterization and Application to Ultrasound-Assisted Chemotherapy in Breast Cancer Cells / F. Yan, X. Li, Q. Jin, et al. // Ultrasound Med. Biol. -2011. -Vol.37, -№5. - P. 768-779.

239. Synthesis and RGD peptide modification of poly{(lactic acid)-co-[(glycolicacid)-alt-(L-lysine)]} / Q.J. Yan, J. Li, S.P. Li, et al. // E-Polymers, ARTN 28. 2008.

240. Polyelectrolyte Complexes Based on (Quaternized) Poly[(2-dimethylamino)ethylmethacrylate]: Behavior in Contact with Blood / E. Yancheva, D. Paneva, D. Danchev, et al. // Macromol. Biosci. -2007. -№7. - P. 940-954.

241. Yehuda, S. DS1P - a tool for investigating the sleep onset mechanism: a review / S. Yehuda, R. Carasso // International J. Neurosci. -1988. -№38. - P. 345-353.

242. Yeguda, S. Thermoregulatory and locomotor effect of DSIP: paradoxal interaction with amthetamine / S. Yeguda, A.J. Kastin, H. Coy // Pharmacol. Biochem. Behav. -1980. -№13. - P. 895-900.

243. Yeguda, S. The circadian cycle effects of DSIP on colonic temperature blood pressure and heat rate in control and area postrema lesioned rats / S. Yeguda, T. Caspi, R.L. Carasso // Int. J. Neurosci. -1988. -№42. - P. 259 - 265.

244. Yotsuyanagi, T. Theoretical treatment of diffusional transport into and through an oil-water emulsion with an interfacial barrier at the oil-water interface / T. Yotsuyanagi, W.I. Higuchi, A.H. Ghanem//J. Pharm. Sei. -1973. -№62. - P. 40-43.

245. You, Y. Effects of PVA sponge containing chitooligosaccharide in the early stage of wound healing / Y. You, W.H. Park // J. Mater. Sei. Mater. Med. -2004. -№15. - P. 297-301.

246. You, J.-O. Cross-Linking Density and pH Sensitivity Regulate Intracellular Gene Transfer / J.-O. You, D.T. Auguste // Nanocarrier Nano Lett. -2009. -Vol. 9, -№12. - P. 4467-4473.

247. New Chitosan Structures in the Form of the Thermosensitive Gels / R. Zarzycki, Z. Modrzejewska, P. Owczarz, et al. // Progress on chemistry and application of chitin and its ... Vol. XIII, 2008

248. Zhang, Y. Inhibition of Peptide Acylation in PLGA Microspheres with Water-soluble Divalent Cationic Salts / Y. Zhang, A.M. Sophocleous, S.P. Schwendeman // Pharm. Res. -2009. -Vol. 26, -№8. - P. 1986-1994.

249. Synthesis of Macroporous Thermosensitive Hydrogels: A Novel Method of Controlling Pore Size / Q. Zhao, J. Sun, Q. Ling, et al. // Langmuir. -2009. -№25. - P. 3249-3254.

250. Zheng, J.Y. Decrease of genital organ weights and plasma testosterone levels in rats following oral administration of leuprolide microemulsion / J.Y. Zheng, M.Y. Fulu // Int. J. Pharm. -2006. -№307. - P. 209-215.

251. On-line capillary electrophores is-mass spectrometry for determina ion of peptide mixture and protein mixture. / G.H. Zhou, G.An. Luo, K.Y. Zhou, Z.L. Gu // Chem. J. Chin. Univ. -1998. -№1. - P. 3353-3358.

252. Preparation of double-responsive Si02-g-PDMAEMA nanoparticles via ATRP / L. Zhou, W. Yuan, J. Yuan, et al. // Materials Letters. -2008. -№62. - P. 13721375.

253. Zhou, L. Synthesis, characterization, and controllable drug release of pH-sensitive hybrid magnetic nanoparticles / L. Zhou, J. Yuan, W. Yuan, // J. Magnetism Magnet Mater. -2009. -№321. - P. 2799-2804.

254. The effect of hydrophilic chain length and iRGD on drug delivery from poly(8-caprolactone)-poly(N-vinylpyrrolidone) nanoparticles / Z. Zhu, C. Xie, Q. Liu, et al. // Biomaterials. -2011. -№35. - P. 9525-35.

255. Drug-eluting medical implants / M. Zilberman, A. Kraitzer, O. Grinberg, et al. // Handb. Exp. Pharmacol. -2010. -№197. - P. 299-341.

149

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор сердечно благодарит своего научного руководителя Е.А. Марквичеву, руководителя магистерской работы И.И. Селезневу, а также коллег по работе Е.В. Свирщевскую, И.А. Прудченко, Н.Л. Клячко, М.И. Штильмана, A.A. Артюхова, Я.М. Гуревича, М.А. Семенихину, Д.А. Зубкова, A.B. Прохорова, Р.Х. Зиганшина, И.В. Назимова, У. Лангела, С. Линдберга, В.А. Олейникова, C.B. Сизову, М. Янга, П.Ю. Баранова, Т. Макела, М. Саарму, П. Рунеберг-Роос, М. Луме, М.С. Кондратьева, А.О. Чугунова, весь коллектив Лаборатории Полимеры для биологии, Лаборатории клеточных взаимодействий, Лаборатории молекулярной биофизики, Лаборатории роста клеток и тканей (ИТЭБ, г. Пущино), сотрудников кафедры нейрохимии Стокгольмского университета, сотрудников SERI, Federation of European Biochemical Societies за предоставленные гранты для участия в 35th и 37th FEBS Congress и возможность работать на кафедре нейрохимии Стокгольмского университета, GSK за предоставленный грант для работы в SERI (Бостон, США), и РФФИ за материальную поддержку работы.

150