Молекулярные механизмы реализации геропротекторной активности пептида дельта-сна тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат биологических наук Кутилин, Денис Сергеевич

• Кутилин, Денис Сергеевич
• кандидат биологических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кутилин, Денис Сергеевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1.Современные представления о молекулярных механизмах старения и геропротекции.

1.2.Строение и биологическая активность дельта-сон индуцирующего пептида (ДСИП).

ГЛАВА 2.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1.Постановка эксперимента.

2.2.Получение биологического материала.

2.2.1.Приготовление гемолизата эритроцитов.

2.2.2.Приготовление гомогенатов тканей.

2.2.3.Выделение и очистка суммарных белков тканей.

2.2.4.Выделение и очистка тотальной РНК.

2.2.4.Выделение и фиксация роговицы глаза.

2.3.Методы исследования.

2.3.1 .Препаративные методы исследования.

2.3.1.1.Выделение фракции, обогащенной лизосомами.

2.3.1.2.Выделение митохондриальной фракции.

2.3.2.Биохимические методы исследования.

2.3.2.1.Определение активности глутатионпероксидазы.

2.3.2.2.Определение активности глутатион-8-трансферазы.

2.3.2.3.Определение активности глутатионредуктазы.

2.3.2.4.Определение содержания восстановленного глутатиона.

2.3.2.5.Определение содержания белка.

2.3.2.6.0пределение концентрации гемоглобина.

2.3.2.7.Определение содержания БН-групп в суммарных белках тканей.

2.3.2.8.Определение содержания карбонильных групп в суммарных белках тканей.

2.3.2.9.Определение содержания битирозина в суммарных белках тканей.

2.3.2.10.Определение активности НАДН-дегидрогеназы в митохондриальной фракции.45 2.3.2.11.Определение активности сукцинатдегидрогеназы в митохондриальной фракции.

2.3.2.12.Определение активности кислых пептидгидролаз (рН 4,5) в субклеточных фракциях.

2.3.2.13.Электрофорез РНК в денатурирующем формамидном геле агарозы.

2.3.2.14.Определение профиля экспрессии генов супероксиддисмутазы 1 (СОД 1) и глутатионпероксидазы 1 (ГПО 1). VIIV ж жж жV 1тжV д и/ди» иуъ^аъдииинпл. феделение числа хромосомных аберраций в эпителии роговицы глаза. феделение митотического индекса в эпителии роговицы глаза. гическая обработка результатов исследования.

ЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. е ДСИП на состояние глутатионзависимого звена антиоксидантной разных тканях и эритроцитах крыс при физиологическом старении е ДСИП на профиль экспрессии генов СОД 1 и ГПО 1 в мозге и крови тарении организма. е ДСИП на активность ферментов электронтранспортной цепи ий разных тканей крыс при старении организма. яние ДСИП на активность НАДН - дегидрогеназы в митохондриальной мозга, сердечной мышцы и печени крыс разного возраста.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярные механизмы реализации геропротекторной активности пептида дельта-сна»

Актуальность исследования. Старение, по современным представлениям, представляет собой многопричинный разрушительный процесс возрастзависимого увеличения числа отклонений от гомеостаза на молекулярном, субклеточном, клеточно-тканевом и системном уровнях, определяемый генетически детерминированной биологической организацией живой системы (Фролькис В.В., 1992; Москалев A.A., 2010). Этому процессу присуще нарушение хрупкого баланса прооксидантно-антиоксидантного равновесия и адаптационных возможностей в различных тканях и органах, что в итоге приводит к развитию ряда патологических состояний, свойственных пожилому возрасту, таких, как атеросклероз, сахарный диабет, нейродегенеративные, иммунологические и эндокринные нарушения, онкологические заболевания и др. (Хавинсон В.Х. и др., 2003; Серова Л.Д. и др., 2003; Halliwell В., Gutteridge J.M.C., 2007). Окислительный стресс, при старении имеющий необратимый и нарастающий характер (Терешина Е.В., 2003), вызывает повреждение основных макромолекул клетки - белков, липидов и ДНК, что ведет к инактивации ферментов, повреждению мембран, нарушению стабильности передачи генетической информации и клеточного деления, а также накоплению аберрантных балластных полимеров (Harman D., 2006). Детальное изучение старения на молекулярном и клеточном уровнях, а также изучение роли апоптоза и генетической нестабильности в возрастных патологиях позволили в настоящее время осуществить переход от понимания старения как пассивного накопления ошибок к представлениям о регуляторных эпигенетических изменениях, влияющих на экспрессию генов (Москалев A.A., 2008).

Рост числа пожилых и старых людей в составе общества высокоразвитых стран приводит к возникновению крупных социально-экономических проблем. При этом возрастные нарушения функций организма человека становятся одной из основных причин его смерти (Рыжак Г.А., Коновалов С.С., 2004; Анисимов В.Н., 2008). В связи с чем, одной из приоритетных задач современной биомедицины является профилактика ускоренного старения и возрастной патологии, направленная на сохранение активного долголетия, увеличение средней продолжительности жизни и достижения видового предела жизни человека (Hayflik L., 2000; Анисимов В.Н., 2008).

В настоящее время у геронтологов особый интерес вызывает изучение геропротекторных свойств разнообразных пептидов. Исследования последних десятилетий выявили, что регуляторные пептиды могут быть наиболее перспективными фармакологическими средствами в плане замедления возрастных и стресс-индуцированных изменений в организме (Karelin A.A. et al., 1998). В результате многолетних исследований Морозов В.Г. и Хавинсон В.Х. (1996, 1997, 2000) обосновали концепцию биорегулирующей терапии, основанной на применении пептидных биорегуляторов при различных заболеваниях, патологических состояниях и старении организма, а также предложили молекулярную модель, лежащую в основе биологических эффектов этих пептидов (Хавинсон В.Х. и др., 2005, 2009, 2012). Спектр регуляторных пептидов чрезвычайно широк. Одним из них является дельта-сон индуцирующий пептид (ДСИП), имеющий следующую первичную структуру - WAGGDASGE. Изучение биологической активности ДСИП выявило уникальные антистрессорные и адаптогенные способности пептида, его кардио- и нейропротекторные эффекты, антиметастатическое, антитоксическое, антидепрессивное и противосудорожное действие, антигипоксические и др. свойства (Sudakov K.V. et al., 1983; Бондаренко Т.И. и др., 1984-2012; Менджерицкий A.M. и др., 1987-2007; Ульянинский Л.С. и др., 1990; Khvatova I.L.et al., 2003; Михалева И.И., Войтенков Б.О., 2007; Mikhaleva I.I. et al., 2011). Интересным открытием явилось установление геропротекторной активности ДСИП (Попович И.Г и др., 2003), позже подтвержденное в работах других авторов (Майборода Е.А., 2009; Войтенков В.Б. и др., 2009). Вместе с тем, механизм геропротекторного действия ДСИП в настоящее время окончательно не известен.

В связи с этим целью нашей работы явилось изучение молекулярных механизмов реализации геропротекторной активности ДСИП.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи исследования:

1. Исследовать влияние ДСИП на состояние глутатионзависимого звена антиоксидантной системы (активность глутатионпероксидазы (ГПО), глутатион-S-трансферазы (Г-S-T), глутатионредуктазы (ГР) и концентрацию восстановленного глутатиона (GSH)) в разных тканях (мозге, сердечной и скелетной мышцах, печени, почках, селезенке и семенниках) и эритроцитах крыс в возрасте 4-24 месяца.

2. Исследовать влияние ДСИП на экспрессию генов супероксиддисмутазы 1 (СОД 1) и глутатионпероксидазы 1 (ГПО 1) в мозге и крови крыс в процессе физиологического старения организма.

3. Установить влияние ДСИП на активность ферментов электронтранспортной цепи (ЭТЦ) митохондрий (НАДН-дегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназы) в мозге, сердечной мышце и печени крыс при физиологическом старении организма.

4. Изучить влияние ДСИП на окислительную модификацию суммарных белков (по содержанию сульфгидрильных, карбонильных групп и битирозина) разных тканей крыс мозга, сердечной и скелетной мышц, печени, почек, селезенки, семенников) в ходе постнатального развития.

5. Исследовать влияние ДСИП на состояние мембран лизосом и интенсивность лизосомального протеолиза в мозге, сердечной мышце и печени крыс в постнатальном онтогенезе.

6. Изучить влияние ДСИП на уровень хромосомных аберраций и митотическую активность в эпителии роговицы глаза крыс в условиях физиологического старения организма.

Научная новизна работы. В работе впервые показано, что ДСИП участвует в регуляции возрастного окислительного стресса, обладая мощным антиоксидантным эффектом, реализующимся через стимуляцию активности ключевых антиоксидантных ферментов посредством влияния на экспрессию их генов, а также через стабилизацию активности ферментов ЭТЦ митохондрий и снижение окислительной модификации белков разных тканей. На основе анализа метаболических эффектов ДСИП при физиологическом старении организма предложена схема, объясняющая молекулярные механизмы реализации его геропротекторного действия. Обоснована возможность использования синтетического аналога эндогенного ДСИП в профилактике метаболических нарушений стареющего организма и преждевременного старения.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. ДСИП повышает ёмкость глутатионзависимого звена антиоксидантной системы в тканях крыс на разных этапах онтогенеза, причем это влияние имеет наиболее выраженный характер в постмитотических необновляемых тканях.

2. В основе модулирующего влияния ДСИП на активность антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы) в мозге и ядросодержащих клетках крови лежит его способность увеличивать экспрессию генов супероксиддисмутазы 1 и глутатионпероксидазы 1 в соответствующих клетках животных при физиологическом старении организма.

3. ДСИП оказывает стабилизирующее действие на активность НАДН-дегидрогеназы в митохондриальной фракции разных тканей крыс при старении, что в совокупности с увеличением ёмкости антиоксидантной системы (АОС) должно снижать выработку свободных радикалов и их негативное действие на макромолекулы клеток.

4. ДСИП приводит к снижению окислительной модификации суммарных белков тканей крыс при старении, в разной степени влияя на уровень сульфгидрильных, карбонильных групп и битирозина, причем степень влияния данного пептида имеет тканеспецифический и хронологически зависимый характер. В основе этого эффекта, вероятно, лежит способность ДСИП повышать емкость АОС организма и увеличивать интенсивность лизосомального протеолиза, последнее должно способствовать деградации аберрантных белков.

5. ДСИП обладает стабилизирующим влиянием на мембраны лизосом мозга, сердечной мышцы и печени крыс разного возраста, что может быть важной составной частью мембранопротекторного действия пептида при старении.

6. Введение ДСИП животным в течение их жизни приводит к снижению числа хромосомных аберраций и увеличению пролиферативной активности эпителия роговицы глаза крыс разных возрастных групп, что может быть следствием снижения окислительной модификации ДНК.

Теоретическая и практическая значимость работы. В теоретическом плане выполненная работа вносит существенный вклад в понимание роли регуляторных пептидов в поддержании гомеостаза при физиологическом старении организма, а также позволяет углубить и расширить наши представления о молекулярных механизмах реализации геропротекторной активности ДСИП. Результаты исследования свидетельствуют о несомненном потенциале ДСИП в качестве геропротектора, сочетающего свойства разных групп геропротекторных препаратов. Действие ДСИП осуществляется на молекулярном, клеточном, органном и организменном уровне, купируя проявления окислительного стресса, играющего важную роль в нарушении гомеостаза при старении организма. Изученные метаболические эффекты ДСИП при старении организма являются основой его геропротекторной активности и дают объяснение ряду обнаруженных ранее положительных эффектов ДСИП, в частности, раскрывают механизм его онкопротекторного действия. Особенности изменения ряда биохимических параметров в сердечной мышце под влиянием ДСИП, безусловно, свидетельствует о его кардиопротекторной функции при старении организма. Способность повышать пролиферативную активность показывает возможность применения этого пептида в терапии в качестве митогенного стимулятора для заживления тканей. А интенсификация лизосомального протеолиза под влиянием ДСИП позволяет прогнозировать возможность его применения с лечебно-профилактической целью при так называемых лизосомальных болезнях накопления. Всё это имеет большое значение в реализации эндогенных механизмов замедления старения организма и обосновывает возможность применения ДСИП для коррекции широкого спектра метаболических нарушений, развивающихся в процессе старения организма, а также для повышения качества жизни. Результаты, полученные в работе, используются на кафедре биохимии и микробиологии Южного федерального университета при чтении курсов «Биохимия»,

Биология старения», «Биохимия аминокислот и пептидов», «Основы патологических процессов» и «Биохимия внутри- и межклеточных коммуникаций».

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на V национальном конгрессе геронтологов и гериатров Украины (Киев, 2010), Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2011), 7-Международном конгрессе «Нейронаука для медицины и психологии» (Судак, 2011), 7-Международной научно-практической конференции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2011), 4-Международной научной конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологии и медицины» (Ростов-на-Дону, 2011), Всероссийской научной конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение» (Астрахань, 2011), Всероссийской научной конференции «Модернизация науки и образования» (Махачкала, 2011), II Международной научно-практической конференции «Постгеномные методы анализа в биологии, лабораторной и клинической медицине» (Новосибирск, 2011), XII международном конгрессе "Здоровье и образование в XXI веке" (Москва, 2011), 16-ой Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2012), II Всероссийской с международным участием молодежной научной школе-конференции «Биология будущего: традиции и новации» (Екатеринбург, 2012), III Съезде геронтологов и гериатров России (Новосибирск, 2012), на научной сессии факультета биологических наук ЮФУ (Ростов-на-Дону, 2012).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ, из них 2 - в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Общий объем публикаций составил 1,77 п.л., личный вклад - 66 %.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Кутилин, Денис Сергеевич

172 Выводы

1. Стимулируя активность глутатионпероксидазы, глутатион-Б-трансферазы, глутатионредуктазы и увеличивая концентрацию восстановленного глутатиона в тканях и эритроцитах крыс при старении организма, ДСИП повышает ёмкость и регулирует согласованное действие ферментативного и неферментативного звена АОС. ДСИП в разной степени влияет на компоненты глутатинозависимой АОС и это влияние имеет наиболее выраженный характер в постмитотических необновляемых тканях.

2. Введение ДСИП животным в течение их жизни увеличивает экспрессию генов супероксиддисмутазы 1 и глутатионпероксидазы 1 в мозге и ядросодержащих клетках крови, экспрессия которых снижается при физиологическом старении организма.

3. В митохондриальной фракции мозга крыс разного возраста под влиянием ДСИП обнаружено снижение активности НАДН-дегидрогеназы, что может оказывать лимитирующее действие на выработку свободных радикалов в ЭТЦ митохондрий, в то же время, поддерживая или не нарушая (в случае сукцинатдегидрогеназы) нормальное функционирование других ферментов ЭТЦ. Увеличение активности НАДН-дегидрогеназы в митохондриальной фракции сердечной мышцы и печени в группах животных с введением ДСИП наблюдается в те возрастные периоды, когда происходит максимальное снижение активности фермента у интактных животных соответствующего возраста. Это свидетельствует об общей тенденции на стабилизацию активности НАДН-дегидрогеназы на определенном уровне в митохондриальной фракции разных тканей при введении ДСИП.

4. Введение ДСИП приводит к снижению окислительной модификации суммарных белков тканей крыс при старении, причем степень влияния данного пептида имеет тканеспецифический и гетерохронный характер.

5. ДСИП оказывает стабилизирующее влияние на мембраны лизосом мозга, сердечной мышцы и печени крыс разного возраста, что сопровождается увеличением интенсивности лизосомального протеолиза и, вероятно, способствует деградации аберрантных белков.

6. Введение ДСИП животным в течение их жизни приводит к уменьшению числа хромосомных аберраций в эпителии роговицы глаза животных разных возрастных групп, что является важным фактором, снижающим риск развития спонтанных опухолей и повышающим выживаемость животных.

7. У животных разного возраста с введением ДСИП зафиксировано увеличение митотического индекса в эпителии роговицы глаза, что позволяет рассматривать данный пептид как потенциальный митогенный стимулятор, повышающий регенеративный потенциал ткани.

Заключение

С точки зрения нелинейной кинетики жизненный цикл многоклеточного организма можно рассматривать как трехстадийный процесс, включающий стадию роста и развития, стационарный период и стадию необратимого саморазрушения. В период роста и развития повреждающее действие кислорода нивелируется не только антиоксидантной системой, но и постоянным обновлением биомолекул. В стационарном периоде митоз соматических клеток ряда органов и тканей (мозг, сердечная и скелетные мышцы, и др.) ограничен. В них снижен темп обновления ДНК и не обновляются долгоживущие белки, которые становятся мишенью для спонтанного окисления. В определённый момент непрерывное нарастание стохастических повреждении биомолекул перекрывает возможности антиоксидантной системы, что ознаменовывает переход организма в стадию необратимого саморазрушения (Терешина Е.В., 2003).

Проведенный нами анализ возрастного изменения различных компонентов глутатионзависимого звена АОС, экспрессии генов СОД 1 и ГПО 1, активности ферментов ЭТЦ митохондрий, интенсивности лизосомального протеолиза, состояния лизосомальных мембран, окислительного повреждения белков и ДНК показывает, что различные органы и ткани подвергаются возрастзависимым нарушениям с разной скоростью и в разной степени, что согласуется с данными литературы (НеИапс! Б.Ь., 1поиуе Б.К., 2002; ОпагсЫ Р. е1 а1., 2006). Кроме того, нами обнаружен различный характер возрастных изменений самих компонентов глутатионзависимого звена АОС (ГПО, Г-8-Т, ГР и восстановленного глутатиона) в пределах одной ткани или органа. Так, например, в мозге и сердечной мышце активность ГПО снижается уже в раннем онтогенезе, а снижение активности Г-Б-Т и ГР наблюдается только начиная с 16 месячного возраста. Объяснение этому, вероятно, кроется в особенностях реакции каждого фермента и его генной регуляции в ответ на окислительный стресс, а также в особенностях катализируемой ферментом реакции, синергизмом и антагонизмом с другими компонентами АОС (Меныцикова Е.Б. и др., 2006).

Вопрос о первичности и взаимосвязи окислительного повреждения липидов, белков и ДНК рассматривается в работах многих исследователей. Так, Лущаком В.И.(2007) показано, что в ряде случаев сначала повышается уровень продуктов окисления липидов, а далее -белков. Сравнение наших результатов исследования и результатов, полученных ранее Бондаренко Т.И. с соавторами (2010, 2011), свидетельствует о том, что, по крайней мере, в мозге и печени окислительная модификация белков происходит раньше (в 4 и 8 месячном возрасте соответственно), чем регистрируется окислительная модификация липидов (повышение уровня МДА показано в этих органах только начиная с 6 и 16 месячного возраста соответственно).

Оценивая окислительную модификацию белков, нами фактически рассматривается окисление боковых аминокислотных остатков метионина и цистеина (снижение концентрации сульфгидрильных групп), гистидина, аргинина, пролина, лизина, треонина, аспарагиновой и глутаминовой кислот (образование карбонильных групп), и тирозина (образование битирозина). Интересен тот факт, что в белках мозга и сердечной мышцы повышение интенсивности окисления данных аминокислот начинается раньше, чем в других изучаемых органах и тканях. Проведенный нами корреляционный анализ свидетельствует о том, что между возрастным увеличением уровня окисления перечисленных выше аминокислотных остатков в белках всех исследованных тканей и органов существует положительная. взаимосвязь. Кроме того, увеличение с возрастом окислительно модифицированных белков положительно коррелирует с увеличением уровня МДА (Майборода Е.А., 2009), хромосомных аберраций и активностью кислых пептидгидролаз во внелизосомальной фракции, при этом наблюдается отрицательная корреляция с изменением активности компонентов АОС органов и тканей крыс.

Обнаруженные нами корреляционные связи (на основе собственных и литературных данных) и период онтогенеза, когда изменяется тот или иной показатель, позволяют предположить следующую схему возрастных нарушений. Окислительная модификация белков, фиксируемая уже на ранних этапах онтогенеза, постепенно усиливается, параллельно снижается активность антиоксидантных ферментов, как следствие реализации генорегуляторной программы (обнаружено возрастное снижение экспрессии генов Sod 1 и Gpx 1) и окислительного повреждения белкового и небелкового компонента ферментов. До определенного периода снижение активности или концентрации одного компонента АОС компенсируется другим компонентом АОС. Нарушение данного механизма компенсации приводит к увеличению концентрации МДА и окислительному повреждению ДНК, и ещё большему окислительному повреждению белков, что проявляется в дестабилизации структуры лизосомальных мембран и снижении лизосомального протеолиза, и увеличении уровня хромосомных аберраций. Значительное повышение уровня окислительно поврежденных белков (в зависимости от ткани на 200-460%) и хромосомных аберраций (150190%) приводит к снижению экспрессии ряда генов, в том числе и генов антиоксидантных ферментов, что всё в совокупности приводит к снижению активности этих ферментов. В таком случае обнаруженное нами возрастное снижение активности НАДН-дегидрогеназы в митохондриях тканей крыс может быть результатом как окислительного повреждения молекул фермента или нарушения экспрессии его гена, так и компенсаторным механизмом, направленным на снижение продукции свободных радикалов митохондриями, что для стареющей клетки со сниженной емкостью АОС и накапливающимися окисленными белками должно иметь важное биологическое значение.

На рубеже XX-XXI вв. в поисках способов замедления старения человека исследователи обозначили два подхода (стратегии). Первый - лечение и профилактика болезней, ассоциированных со старением (сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний, болезни Альцгеймера и др.), с использованием, в частности, технологии стволовых клеток, что в перспективе предполагает замену поврежденных частей тела. Второй - замедление процесса старения на молекулярном уровне при помощи соответствующих геропротекторных препаратов (Rose M.R., 1999; Хармон К., 2012). В этом плане перспективным геропротектором является ДСИП. Результаты нашего исследования свидетельствуют о том, что введение ДСИП животным в течение их жизни оказывает ряд положительных эффектов на метаболические процессы и параметры, нарушение которых имеет место при физиологическом старении организма.

Анализ влияния ДСИП на компоненты глутатионзависимого звена АОС в органах и тканях крыс разного возраста показал, что пептид в большей степени влияет на активность ГР, несколько слабее на активность Г-S-T и концентрацию восстановленного глутатиона, и наиболее слабо его модулирующее действие проявляется на активность ГПО. Следует отметить, что влияние ДСИП суммарно на глутатионзависимое звено АОС выражено больше в постмитотически необновляемых тканях, нежели в обновляемых.

Результаты нашего исследования позволяют также говорить о тканеспецифичных и асинхронных проявлениях влияния ДСИП на активность ГПО и глутатион-Б-трансферазы, антиперекисная активность которых, протекает с участием глутатиона, выступающего в качестве донора водорода. Следует отметить, что ДСИП наиболее эффективно увеличивает активность этих антиоксидантных ферментов в сердечной мышце, и менее эффективно в других тканях и органах. Устранение избытка перекисей сопровождается уменьшением восстановленной и увеличением окисленной форм глутатиона. Последняя восстанавливается за счет действия глутатионредуктазы, на которую введение ДСИП также оказывает влияние во всех тканях и органах, за исключением почек. Стимуляция активности ГР под действием ДСИП способствует увеличению уровня восстановленного глутатиона во всех исследованных нами тканях и органах, поддерживая тем самым тиол-дисульфидное равновесие в них. Его воздействие на содержание глутатиона также имеет тканеспецифичный и возрастзависимый характер. Также нами обнаружено, что максимальное влияние пептида на разные компоненты глутатионзависимой АОС не совпадает по времени, хотя изменения положительно коррелируют между собой.

Введение ДСИП повышает экспрессию генов Sod 1 и Gpx 1 в мозге и ядросодержагцих клетках крови, что положительно коррелирует с увеличением активности соответствующих антиоксидантных ферментов. Вероятно, что влияние ДСИП на экспрессию генов является ключевым моментом в реализации геропротекторного действия этого пептида.

Стимулируя активность СОД, каталазы (по данным Бондаренко Т.И. и соавт.(2011)), ГПО, Г-S-T и ГР, ДСИП повышает емкость и регулирует согласованное действие ферментативного и неферментативного звена АОС, что обеспечивает более высокий уровень неспецифической резистентности организма и его адаптивных возможностей к воздействию разнообразных по своей природе факторов при физиологическом старении организма.

Данные эффекты в совокупности с влиянием ДСИП на активность НАДН-дегидрогеназы в митохондриальной фракции мозга, сердечной мышцы и печени крыс должны регулировать уровень свободнорадикальных процессов в этих тканях и органах. Здесь необходимо отметить два важных факта. Во-первых, достоверное увеличение активности НАДН-дегидрогеназы в митохондриальной фракции сердечной мышцы и печени в группах животных с введением ДСИП наблюдается в те возрастные периоды, когда происходит максимальное снижение активности фермента у интактных животных соответствующего возраста. Во-вторых, несмотря на определенные различия в характере изменения активности НАДН-дегидрогеназы под влиянием ДСИП в разных тканях и органах, прослеживается общая тенденция на стабилизацию её активности на определенном уровне, более выраженная в сердечной мышце и менее выраженная, но раньше обнаруживаемая в мозге. Учитывая сопряженность переноса электронов в ЭТЦ митохондрий с окислительным фосфорилированием, становится очевидным необходимость наличия взаимосвязи между стационарным уровнем активности переносчиков ЭТЦ и стационарным уровнем АТФ, минимально необходимым для поддержания таких процессов в нейронах как генерация потенциала покоя, и таких процессов в кардиомиоцитах как поддержание трансмембранного потенциала и возбудимости (Самилов М.О., 1985; Кирова Ю.И., Бородулин В.Б., 2009). Согласно данным Cairns C.B. et al. (1998), митохондрии разных тканей отличаются количеством расходуемого кислорода и количеством производимого АТФ, а также коэффициентом эффективности, что также находит своё отражение в полученных нами данных.

В последние годы выдвигаются предположения, что посредством обратимого и необратимого окисления SH-групп в белках возможны изменения программ клеточного развития (Меныцикова Е.Б. и др., 2006). В этом свете, хронологически избирательное повышение уровня 8Н-групп в белках у животных с введением ДСИП, вероятно, имеет также важное биологическое значение. Максимальный эффект ДСИП наблюдается в сердечной мышце; менее сильно его действие проявляется в почках, селезенке, печени, в мозге и скелетных мышцах; а минимальная эффективность характерна для тестикул. При этом максимальное увеличение концентрации сульфгидрильных групп в суммарных белках печени и скелетных мышцах при введении ДСИП зафиксировано на ранних этапах онтогенеза, в селезенке в 16 месяцев, в мозге, почках и семенниках в 22 месяца, а в сердечной мышце в 24 месяца.

Максимальный эффект ДСИП по снижению концентрации карбонильных групп наблюдается в почках, слабее его действие проявляется в сердечной мышце, печени, селезенке, мозге, скелетных мышцах; и минимально его влияние на уровень СО- групп проявляется в белках семенников. При этом наибольший эффект ДСИП в регуляции уровня битирозина в белках проявляется в печени и селезенке, а минимальный в семенниках. Важно отметить тот факт, что, несмотря на то, что у животных с введением ДСИП во всех изученных нами тканях и органах наблюдается снижение уровня битирозиновых сшивок в белках, это снижение незначительно по сравнению с их возрастным накоплением. Это же касается и наблюдаемых эффектов ДСИП в отношении снижения карбонильных групп в белках тканей и органов. Но в тоже время, возрастное снижение концентрации сульфгидрильных групп в белках компенсируется при введении пептида. Известно, что с одной стороны, серосодержащие аминокислотные остатки легко окисляются, а с другой -возможно их восстановление до исходной формы. Это делает их пригодными для выполнения функции «встроенных в белки» антиоксидантов (Соколовский В.В., 1998; Лущак В.И., 2007), защищающих белки от других, более сильных повреждающих форм окислительной модификации (Белоногов Р.Н., 2009).

Наличие описанных в нашем исследовании корреляционных взаимосвязей между уровнем карбонильных и сульфгидрильных групп, битирозиновых сшивок в белках тканей и органов, уровнем МДА, восстановленного глутатиона, активностью антиоксидантных и протеолитических ферментов в исследованных тканях и органах, свидетельствует о том, что обнаруженные эффекты ДСИП в регуляции окислительной модификации белков безусловно связаны с его способностью стимулировать антиоксидантную и лизосомальную протеолитическую системы.

Нами установлено, что ДСИП оказывает стабилизирующее влияние на мембраны лизосом мозга, сердечной мышцы и печени вследствие чего и снижается выход кислых пептидгидролаз в цитоплазму. В ходе исследования нами также обнаружена способность ДСИП влиять и на активность кислых пептидгидролаз в лизосомах с наибольшей эффективностью в мозге и менее значительно в сердечной мышце и печени. При этом, профиль возрастных изменений активности кислых пептидгидролаз лизосом мозга, сердечной мышцы и печени имеет схожие черты. Обнаруженная способность ДСИП повышать «когда необходимо» активность кислых пептидгидролаз (рН 4,5) в лизосомах, возможно, и не избавляет их от накопления липофусцина, но, вероятно, способствует лучшей деградации аберрантных белков. Учитывая это, можно предположить, что его применение при так называемых болезнях накопления окажет положительное влияние.

Важные результаты получены нами и при изучении влияния ДСИП на уровень хромосомных аберраций и митотический индекс в эпителии роговицы глаза. Так, нами показано, что введение этого пептида животным в течение их жизни приводит не только к уменьшению числа хромосомных аберраций в эпителии роговицы глаза, но и изменяет распределение их по типам. Снижение числа аберраций хромосом в разных возрастных группах животных под влиянием ДСИП, безусловно, является важным фактором, снижающим риск развития спонтанных опухолей и повышающим выживаемость животных и позволяет объяснить антиканцерогенное действие дельтарана (препарата на основе ДСИП) на мышей линии БНЯ, обнаруженное Попович И.Г. и соавторами (2003).

Обнаруженное нами увеличение митотического индекса у животных с введением ДСИП интересным образом соотносится с его способностью увеличивать на 50-60% в коре больших полушарий мозга крыс содержание полиаминов, которые участвуют в механизмах регуляции процессов воспроизведения генетической информации и регуляции роста, и увеличение их концентрации регистрируется в период активного деления клеток (Маклецова М.Г. и др., 2007). При этом увеличение клеточной пролиферации под действием ДСИП не сопровождается увеличением опухолеобразования, что позволяет рассматривать данный пептид как потенциальный митогенный стимулятор, повышающий регенеративный потенциал ткани.

Анализ суммированных выше эффектов ДСИП при старении, а так же данные литературы о других его эффектах, изученных ранее, позволяют предположить молекулярные механизмы его действия, по которым, в частности, может реализоваться его геропротекторная функция.

В разделе 3.2 данной работы уже упоминалась молекулярная модель взаимодействия коротких регуляторных пептидов и двойной спирали ДНК на промоторном участке гена, предложенная Хавинсоном В.Х. и соавторами (2003, 2005, 2009). Согласно этой модели, короткий пептид определённой структуры и аминокислотной последовательности может участвовать в активации транскрипции генов на этапе разделения цепей двойной спирали ДНК и активации РНК-полимеразы. Можно предположить, что ДСИП или часть его молекулы, переносится через цитоплазматическую и ядерную мембрану и так же взаимодействует с ДНК. Известно, что внутренний диаметр нуклеопор составляет порядка 42 нм, следовательно ядерная мембрана достаточно проницаема для низкомолекулярных веществ с молекулярной массой до 1000 Да (Lodish Н. et al., 2000). Такая способность для ряда пептидов была показана в работе Федореевой Л.И. с соавторами (2011) на примере флуоресцентно меченых пептидов. Молекулярная масса ДСИП составляет 848,9 Да, что позволяет ему проникать в ядро клетки.

Проникновение ДСИП или его модифицированной молекулы в ядро не означает, что имеет место непосредственное взаимодействие с теми участками ДНК, транскрипция мРНК с которых обеспечивает увеличение синтеза СОД 1 и ГПО 1. Михалевой И.И и Войтенковым Б.О. (2007) показано, что ДСИП оказывает модулирующее воздействие на экспрессию гена раннего ответа c-fos при действии стрессовых стимулов. Кодируемый им белок функционирует в сочетании с другим онкобелком - Jun. Гетеродимерные комплексы Fos/Jun являются звеном в системе передачи внешних, экстраклеточных сигналов, к транскрипционной машине, в результате чего в ответ на такой сигнал происходят изменения в экспрессии большой группы специфических генов - мишеней. Среди Fos/Jun -регулируемых генов имеются те, которые активируют JNK- и MST-1-зависимые каскады фосфорилирования, приводящие к активации определенного транскрипционного фактора из семейства FOXO (Москалева А.А., 2008), регулирующих такие гены продолжительности жизни, как гены супероксиддисмутазы и каталазы, глутатионтрансфераз, аполипопротеина C-III, белков теплового шока и белка репарации GADD45 (Giannakou М.Е., Partridge L., 2004; Wang M.C. et al., 2005). Можно предположить, что влияя на экспрессию c-fos по модели, предложенной Хавинсоном В.Х. и соавторами (2003, 2005, 2009), ДСИП через транскрипционные факторы FOXO изменяет экспрессию СОД 1, ГПО 1 и Г-S-T, генов лизосомальных катепсинов. Вероятно, что модулирующее действие ДСИП на активность НАДН-дегидрогеназы в ЭТЦ митохондрий также реализуется через FOXO зависимый механизм. Основанием этому служит сделанное Apfeld J. et al.(2004), Greer E. L. et al.(2007) и Москалевым A.A. (2008, 2009) предположение, что организм активно распознает изменения энергетического уровня и отвечает подстройкой продолжительности жизни, при этом цАМФ-активируемая протеинкиназа - АМРК, принадлежащая к консервативному семейству протеинкиназ, функционирует как энергетический сенсор, координируя ответ на стрессы, понижающие энергетический уровень, через регуляцию активности FOX О 3 путем фосфорилирования, что приводит к транскрипции генов репарации и антиоксидантной защиты, изменению экспрессии генов ND4 и ND5 НАД-Н - дегидрогеназы, а также к активации энергетических путей клетки, восстанавливающих нормальный уровень энергии, путем стимуляции поглощения глюкозы тканями (Apfeld .1. е1 а!., 2004). Как показано Майборода Е.А.(2009), ДСИП способен оказывать гипогликемическое действие, что является ещё одним фактом в пользу реализации его действия через РОХО зависимый механизм. Также не может быть исключено влияние ДСИП на экспрессию генов транскрипционных факторов из семейства РОХО и непосредственное влияние на экспрессию генов антиоксидантных ферментов, рассмотренных в нашей работе. На рисунке 1 представлен предполагаемый механизм реализации эффектов ДСИП, оказывающих протекторное действие на организм при физиологическом старении.

Эффекты, реализующиеся на уровне клетки Взаимодействие ДСИП с гипотетическим рецептором

Эффекты, реализующиеся на уровне клеточного ядра

Рис. 1. Механизм реализации геропротекторной активности ДСИП

Вероятность реализации геропротекторной активности ДСИП по JNK-FOXO-зависимому пути так же может быть возможной, если учесть ещё два важных фактора. Во-первых, известно, что этот пептид оказывает широкий спектр своих биологических эффектов у животных разного вида, филогенетически далеких друг от друга, а семейство транскрипционных факторов FOXO крайне консервативно и присутствует у животных разного вида от нематод до человека (Москалева A.A., 2008). Во-вторых, сам по себе столь широкий спектр биологических эффектов одной молекулы должен реализоваться через регуляцию звена метаболического каскада, способного обеспечить эти эффекты.

В ходе исследования нами обнаружено, что для всего спектра биологических эффектов ДСИП характерны хроно-, органо- и тканеспецифичность. Согласно данным Хавинсона В.Х. и др. (2012), один и тот же биологически активный пептид может по разному связываться с ДНК в зависимости от характера её метилирования, и поэтому он по-разному будет воздействовать на функции генов в клетках разных тканей, в ядре и митохондриях, в молодых и старых, в нормальных и раковых клетках.

Проведенное нами исследование свидетельствует о несомненном потенциале ДСИП в качестве геропротектора, стимулирующего глутатионзависимую АОС, снижающего уровень окислительной модификации белков и ДНК (отражается в снижении уровня хромосомных аберраций), оказывающего модулирующее действие на некоторые ферменты ЭТЦ митохондрий, повышающего стабильность лизосомальных мембран и интенсивность лизосомального протеолиза, последнее должно иметь немаловажное значение в терапии лизосомальных болезней накопления. Особая интенсивность изменения ряда биохимических параметров в сердечной мышце под влиянием ДСИП, безусловно, свидетельствует о его кардиопротекторной функции при старении организма. А способность повышать пролиферативную активность эпителия роговицы показывает возможность применения этого пептида в терапии для стимуляции заживления тканей, хотя здесь необходимы дополнительные исследования. В сумме же обнаруженные к настоящему времени нами и другими исследователями изменения биомаркеров старения под влиянием ДСИП не позволяют составить полную цепочку взаимодействий на молекулярном уровне, которая и приводит к реализации его геропротекторных свойств. Для её составления и подтверждения необходима серия дополнительных исследований, уже выходящая за рамки данной работы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кутилин, Денис Сергеевич, 2013 год

1. Абрамова Ж.И., Оксенгендлер Г.И. Человек и противоокислителъные вещества,- JI.: Наука, 1985,- 230 с.

2. Алейникова Т.Л., Авдеева Л.В., Андрианова Л.Е, Белушкина H.H. Биохимия: Учеб. для вузов. Под ред. Е.С. Северина. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. - 779 с.

3. Анисимов В.Н. Физиологические функции эпифиза (геронтологический аспект) // Российский физиол. ж. им. И.М. Сеченова. 1998. - Т. 83, № 8. - С. 1-10.

4. Анисимов В.Н., Соловьев М.В. Эволюция концепций в геронтологии. СПб.: Эскулап, 1999. - 130 с.

5. Анисимов В.Н. Современные представления о природе старения // Успехи современной биологии. 2000. - Т. 120, № 2. - С. 146.

6. Анисимов В.Н. Средства профилактики преждевременного старения (геропротекторы) // Успехи геронтологии. 2000. - № 4. - С. 55-74.

7. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. СПб.: Наука, 2003. - 468 с.

8. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. СПб.: Наука, 2008. - Т. 1. -481 с.

9. Анисимов C.B., Бохелер K.P., Хавинсон В.Х., Анисимов В.Н. Изучение действия пептидов вилона и эпиталона на экспрессию генов в сердце мыши с помощью технологии на основе микрочипов // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2002. - Т.133, №3. - С. 340-347.

10. Арутюнян A.B., Дубинина Е.Е., Зыбина H.H. Методы оценки свободно-радикального окисления и антиоксидантной системы организма. Методические рекомендации. -СПб.: ИКФ «Фолиант», 2000. 104 с.

11. Ахрем A.A., Галактионов С.Г., Голубович В.П., Кирнарский Л.И. Теоретический конформационный анализ нейропептида, индуцирующего дельта-сон // Биофизика. -1982. Т. 27, №2. - С. 324-325.

12. Бакеева Л.Е., Ясайтис A.A., Изменения структуры митохондрий в ответ на функциональные воздействия // В сб. Митохондрии. М.: Наука. - 1972. - С.56-64.

13. Баранов B.C., Баранова Е.В. Генетические аспекты старения // Успехи геронтологии. -2007. Т. 20, № 2. - С. 26-34

14. Белоногов Р.Н., Титова Н.М., Дыхно Ю.А., Лапешин П.В., Кудряшова Е.В., Савченко A.A. Окислительная модификация белков и липидов плазмы крови больных раком легкого // Сибирский Онкологический Журнал. 2009. - Т.34, №4. - С.48-51.

15. Биленко М.В. Ишемичсские и реперфузионные повреждения органов,- М.: Медицина, 1989.-368 с.

16. Бобырев В.Н., Воскресенский О.Н. Изменение активности антиоксидантных ферментов при экспериментальном синдроме пероксидации у кроликов // Вопросы мед. химии. 1982. - Т. 20, №2. - С. 75-78.

17. Бобырев В.Н., Почерняева В.Ф., Стародубцев С.Г., Дубинская Г.М. Специфичность систем антиоксидантной защиты органов и тканей основа дифференцированной фармакотерапии антиоксидантами // Эксперим. и клин, фармакол. - 1994. - Т. 57, №1. -С. 47-54.

18. Болдырев A.A. Биологическое значение карнозина и возможность применения в медицине. М.: Изд-во МГУ, 1998. - 320 с.

19. Болдырев A.A., Стволинский C.JI., Федорова Т.Н. Карнозин: эндогенный физиологический корректор активности антиоксидантной системы организма // Успехи физиол. наук. 2007. - Т. 38, №3. - С. 57-71.

20. Бондарь Т.Н., Панкин В.З., Антоновский В J1. Восстановление органических гидроперекисей глутатионпероксидазой и глутатион-8-трансферазой: влияние структуры субстрата // Докл. АН СССР. 1989,- Т. 304, №1. - С. 217-220.

21. Бондаренко Т.И., Кричевская A.A., Крупенникова Е.Ю., Михалева И.И. Влияние пептида дельта-сна на состояние мембран эритроцитов при действии низкой температуры // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1985. - Т. 71, № 3. - С. 279-282.

22. Бондаренко Т.И., Кричевская A.A., Горошинская И.А. Влияние пептида дельта-сна на активность моноаминооксидаз и содержание гистамина в мозгу и крови крыс при действии холодового стресса // Нейрохимия. 1986. - Т.5, №4. - С.408-412.

23. Бондаренко Т.И., Грищенко Е.С., Кричевская A.A. Влияние пептида дельта-сна на интенсивность автолитического расщепления белков в мозгу крыс // Нейрохимия. -1988. Т. 77, № 1.-С. 153-159.

24. Бондаренко Т.И., Кричевская A.A., Черногубова Е.А. Влияние пептида дельта-сна на содержание полиаминов в мозгу и печени крыс в норме и при действии холодового стресса // Нейрохимия. 1989. - Т. 8, №3. - С. 358-364.

25. Бондаренко Т.Н., Кричевская A.A., Папакина И.Г. Влияние пептида дельта-сна на содержание гомокарнозина в мозгу крыс при действии холодового стресса // Физиол. журн. СССР. 1989. - Т. 75, № 12. - С. 1788-1790.

26. Бондаренко Т.И., Кричевская A.A., Шейкина И.В. Влияние пептида дельта-сна на содержание адреналина в тканях крыс в норме и при действии холодового стресса // Укр. биохим. журн. 1990. - Т.62, № 5. - С. 34-38.

27. Бондаренко Т.И., Милютина Н.П., Михалева И.И., Шустанова Т.А Молекулярные механизмы действия антиоксидантов природных олигопептидов // В мат. Межд. симп. «Биоантиоксидант», Тюмень. - 1997. - С. 17.

28. Бондаренко Т.И., Милютина Н.П., Михалева И.И., Носкова Г. А. Мембраностабилизирующий эффект дельта-сон индуцирующего пептида при стрессе // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1998. - № 9. - С. 325-327.

29. Бондаренко Т.И., Милютина Н.П., Шустанова Т.А. Регуляторное влияние дельта-сон индуцирующего пептида на активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах и тканях крыс при холодовом стрессе // Рос. физиол. журн. 1999. - Т. 85. - С. 671-679.

30. Бондаренко Т.Н., Милютина Н.П., Шустанова Т.А. Влияние дельта-сон индуцирующего пептида на интенсивность липопереокисления и активность ксантинооксидазы в тканях крыс при холодовом стрессе // Рос. физиол. журнал. -1999. Т. 85, №8. - С. 1076-1080.

31. Бондаренко Т.И., Шустанова Т.А., Милютина Н.П. Регуляция дельта-сон индуцирующим пептидом перекисного окисления липидов в мозге крыс при холодовом стрессе //Нейрохимия. 1999,- Т.16, №3 - С. 218-226.

32. Бондаренко Т.И., Милютина Н.П., Шустанова Т.А., Михалева И.И. Регуляция ДСИП свободнорадикальных процессов в тканях крыс при холодовом стрессе // Биохимия. -2001.-Т.66,№6. -С. 780-789.

33. Бондаренко Т.И., Калмыкова Ю.А, Шустанова Т.А., Михалева И.И., Рябикина Е.В. Фармакологическая эффективность дельта-сон индуцирующего пептида при остромпанкреатите в эксперименте и клинике // Вопр. биол., мед. и фарм. химии,- 2003. № 3,- С. 50-57.

34. Бондаренко Т.И., Шустанова Т.А. Молекулярные эффекты дельта-сон индуцирующего пептида в регуляции гомеостаза при стрессе // Вопросы биол., мед. и фарм. химии. 2010. - №12. - С.45-62.

35. Бондаренко Т.И., Майборода Е.А., Михалёва И.И., Прудченко И.А. Механизм реализации геропротекторной активности дельта-сон индуцирующего пептида //Успехи геронтологии. 2011.- Т. 24, № 1. - С. 80-92.

36. Бурлакова Е.Б., Алесенко A.B., Молочкина Е.М., Пальмина Н.Т., Храпова Н.Г. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. М.: Наука, 1975. -211 с.

37. Быков B.J1. Цитология и общая гистология СПб: СОТИС, 1998 - 520 с.

38. Веревкина И.В., Точилкин А.И., Попова H.A. Современные методы в биохимии. Под редакцией В.Н. Ореховича. М.: «Медицина», 1977. - С. 223 - 231.

39. Виноградов А.Д. Сукцинат-убихинон редуктазный участок дыхательной цепи // Биохимия. 1986. - Т. 51, № 12. - С. 1944-1973.

40. Воскресенский О.Н., Жутаев И.А., Бобырев В.Н., Безуглый Ю.В. Антиоксидантная система, онтогенез и старение // Вопр. мед. химии. 1982.-Т. 28, №1. - С. 14-17.

41. Воскресенский О.Н. Влияние природных биоантиоксидантов на патологические процессы, связанные со старением // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Общие проблемы биологии. 1986. - Т. 5. - С. 163-201.

42. Гаврилов J1.A., Гаврилова Н.С. Биология продолжительности жизни. -М., 1986. 167с.

43. Газиев А.И., Ушакова Т.Е., Подлуцкий A.JI. Никонова JI.B., Безлепкин В.Г., Сирота Н.П. Диетические антиоксиданты увеличивают продолжительность жизни животных // Успехи геронтологии. -1997. Вып. 1. - С. 80-84.

44. Гмурман В.Е. Теория вероятностей и математическая статистика: Учебное пособие для вузов. 10-е издание, стереотипное. - Москва: Высшая школа, 2004. - 479 с.

45. Гидулянова К.В. Возрастные особенности модуляции активности антиоксидантных ферментов при индуцированном окислительном стрессе // «Весник Харьковского национального университета имени В.Н.Каразина. Серия: биология». 2008. - Вып. 7, №814,-С. 9-12.

46. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М.: Практика, 1998. - 459 с.

47. Гомазков О.А Физиологически активные пептиды: справочное руководство. М.: ИПГМ. 1995.- 144 с.

48. Гомазков O.A. Старение мозга и нейротрофины. Клеточные и молекулярные принципы нейротрофической терапии М.: ИКАР, 2011 - 92 с.

49. Гостимский С.А., Дьякова М.И., Ивановская Е.В., Монахова М.А. Практикум по цитогенетике. М.: МГУ, 1974. - 145 с.

50. Давыдов В. В., Божков А. И. Метаболизм эндогенных альдегидов: участие в реализации повреждающего действия оксидативного стресса и его возрастные аспекты // Биомед.химия. 2003. - Т. 49, № 4. - С. 374-387.

51. Дмитриев A.B. Биохимия лизосомальных кислых гидролаз // Биохимия на рубеже XXI века.: Межрегион, сб.науч.тр. Рязань, 2000. С. 121-129.

52. Дмитриев Л.Ф. Малоновый диальдегид может контролировать клеточное деление на стадии репликации ДНК (гипотеза) // Журнал эволюционной биохимии и физиологии. -1992. Т. 28, №6. - С. 720-730.

53. Дин Р. Процессы распада в клетке. М.: Мир, 1981. - 120 с.

54. Дурканаева О. А. Амидированность и окислительные модификации белков тканей крыс и сывороточного альбумина при модельном и физиологическом старении: Дис. . канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 2012. 148 с.

55. Епринцев А.Т., Попов В.Н., Федорин Д.Н.Идентификация и исследование экспрессии генов.Учебно-методическое пособие для вузов. Воронеж: Воронежский государственный университет, 2008. - 64 с.

56. Ещенко Н.Д., Вольский Г.Г. Определение активности сукцинатдегидрогеназы // Методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен). Под ред. М.И. Прохоровой. Л.: ЛГУ, 1982. - С. 210-212.

57. Журавлев А.И. Развитие идей Б.Н.Тарусова о роли цепных процессов в биологии // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М.: Наука, 1982. -С.3-37.

58. Заводник И.Б., Пилецкая Т.П., Степуро И.И. Осмотический и механический лизис эритроцитов человека// Биол. мембраны. 1995. - Т. 12, № 4. - С. 400-408.

59. Заводник И.Б., Лапшина Е.А., Брышевска М. Эффект свободных жирных кислот на состояние липидного и белкового компонентов мембран // Биол. мембраны. 1995. -Т. 12, №5. -С. 516-523.

60. Замотаев И.П. Особенности гериатрической фармакотерапии // Советская медицина. -1990,-№2.-С. 19-23.

61. Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах// Усп. соврем, биол. -1993. Т. 113, № 3. - С. 286-269.

62. Зенков Н.К., Кандалинцева Н.В., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б., Просенко А.Е. Фенольные биоантиоксиданты,- Новосибирск: СО РАМН, 2003,- 328 с.

63. Зоров Д.Б., Банникова С.Ю., Белоусов В.В., Высоких М.Ю., Зорова Л.Д., Исаев Н.К., Красников Б.Ф., Плотников Е.Ю. Друзья или враги. Активные формы кислорода и азота // Биохимия. 2005. - Т. 70, вып. 2. - С. 265-272.

64. Иванов М.Б., Башарин В.А., Бонитенко Е.Ю., Войтенков Б.О., Сидоров С.П., Иванов И.М. Влияние дельта-сон индуцирующего пептида на ГАМКд-рецепторные структуры в эксперименте// Иммунология 2005,- Т.6- С. 662-672.

65. Карузина И.И., Арчаков А.И. Выделение микросомной фракции печени и характеристика ее окислительных систем // В кн. «Современные методы в биохимии».- М.: Медицина, 1977.- С.5

66. Канунго М. Биохимия старения. М.: Мир, 1982. - 294 с.

67. Кветной И.М., Хавинсон В.Х., Трофимов A.B., Полякова В.О., Линькова Н.С. Пептидергическая регуляция дифференцировки, пролиферации и апоптоза тимоцитов при старении вилочковой железы//Бюлл. эксперим. биол. и мед.-2011.-№2.-С.203-206.

68. Кирова Ю. И., Бородулин В. Б. Биохимические основы единой теории старения. Часть 2. Аэробный статус клетки, устойчивость к гипоксии и пролиферация // Успехи геронтологии. 2009. - Т. 22, № 1. - С. 74-83.

69. Кишкун А. А. Современные технологии повышения качества и эффективности клинической лабораторной диагностики,- М.: РАМЛД, 2005. 528 с.

70. Ковальзон В.М. ДСИП: пептид сна или неизвестный гормон гипоталамуса? // Журнал эволюц. биохим. и физиол. 1994. - Т. 30, № 2. - С. 112.

71. Кольтовер В.К., Ноль Х.В. Возрастные особенности генерирования супероксидных радикалов в митохондриях сердца крыс // Пробл. старения и долголетия. 1992.-Т. 2,-С.355-361.

72. Колесниченко Л.С, Кулинский В.И. Глутатионтрансферазы // Успехи соврем, биол.-1989,- Т. 107, №2. С. 179-194.

73. Кондрашова М.Н. Выясненные и наметившиеся вопросы на пути исследования регуляции физиологического состояния янтарной кислотой // Терапевтическое действие янтарной кислоты. Пущино. 1976. - № 4. - С. 12.

74. Коровин М.С., Новицкий В.В., Васильева О.С. Роль лизосомальных цистеиновых протеиназ в опухолевой прогрессии// Бюллетень сибирской медицины,- 2009.-№ 2.-С. 85-91.

75. Коркушко О.В., Хавинсон В.Х., Бутенко Г.М., Шатало В.Б. Пептидные препараты тимуса и эпифиза в профилактике ускоренного старения. СПб.: Наука, 2002. - 202 с.

76. Крупенникова Е.Ю., Юхананов Р.Ю., Михалева И.И., Бондаренко Т. И. Содержание пептид дельта-сна-подобного материала в головном мозгу крыс в норме и при холодовом стрессе // Нейрохимия. 1986. - Т. 5. № 2. - С. 190-193.

77. Крупенникова Е.Ю. Метаболические эффекты пептида дельта-сна при холодовом стрессе: Дис. . канд. биол. наук, Ростов-на-Дону, 1985. 205 с.

78. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Биологическая роль глутатиона // Успехи совр. биол. 1990. - Т.110, № 1. - С.20-32.

79. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Структура, свойства, биологическая роль и регуляция глутатионпероксидазы//Успехи соврем, биол.-1993.-Т.113,№1.-С. 107-123.

80. Ланкин В.З. Ферменты перекисного окисления липидов // Украинский биол. журнал.- 1984. -№3. С. 317-331.

81. Ланкина В.З. Атеросклероз как пример свободнорадикальной патологии: механизмы нарушения ферментативной регуляции процессов свободнорадикального перекисного окисления липидов в биомембранах при атерогенезе // Биоантиоксидант. Тюмень,1997. - С. 51- 53.

82. Панкин В.З., Зенков H.K. Окислительный стресс: биохимические и патофизиологические аспекты. М.: Наука/Интерпериодика, 2001. - 342 с.

83. Ларкий Э.Г. Методы определения и метаболизм металлобелковых комплексов // Итоги науки и техники. Сер. Биологическая химия.- 1990.-Т.41.- С. 3-5.

84. Ленинджер А. Митохондрия.- М.: Мир, -1966.- 316 с.9+

85. Лысенко A.B., Менджерицкий A.M. Изменение активности Ca зависимых протеиназ и АТФ-аз при коррекции функционального состояния дельта-сон индуцирующим пептидом // Успехи физиол. наук. - 1994. - Т. 25, № 3. - С. 87-90.

86. Лысенко A.B., Менджерицкий A.M. Свойства и механизмы реализации биологических эффектов пептида, индуцирующего дельта-сон // Успехи совр.биол. -1995. Т. 115, № 6. - С. 729-739.

87. Лысенко A.B., Шейхова Р.Г., Алиев A.A., Козина Л.С. Антиоксидантные механизмы стресс- и геропротекторных эффектов дельта-сон индуцирующего пептида и его аналогов у крыс разного возраста // Новые лекарственные препараты. 2007. - Т. 34, №3. - С.44-56.

88. Льюин Б. Гены. М.: БИНОМ, 2011. - 896 с.

89. Лукаш А.И., Пушкина Н.В., Климова И.А., Назарова И.Н. Роль посттрансляционных модификаций белков в регуляции скорости старения клеток дрожжей Saccaromyces paradoxus // Биополимеры и клетка. -1994. Т. 10, №1 - С. 53-57.

90. Лущак В.И. Свободнорадикальное окисление белков и его связь с функциональным состоянием организма//Биохимия. 2007. - Т. 72, вып. 8. - С. 995-1017.

91. Майборода Е.А. Метаболические эффекты дельта-сон индуцирующего пептида в регуляции гомеостаза при старении организма: Дис. . канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 2009,- 192 с.

92. Маклецова М.Г., Прокофьев В.Н., Рихирева Г.Т., Михалева И. И., Маркво Л. И., Кураев Е. Г. Биологические эффекты дельта-сон индуцирующего пептида после ожоговой травмы // Новые лекарственные препараты. 2007. - №3. - С.33-43.

93. Меерсон Ф.З., Сухих Г.Т., Михалева И.И. Предупреждение стрессорного снижения активности естественных киллеров оксибутиратом натрия и пептидом дельта-сна //Докл. АН СССР. 1984. - Т. 274, № 2. - С. 482-484.

94. Менджерицкий A.M., Маклецова М.Г., Карпухина И.М. ГАМК, глутаматдекарбоксилазная активность и глутамат мозга крыс с интрацистернальным введением ДСИП // Нейрохимия. 1987. - Т.6, № 3. - С. 422-431.

95. Менджерицкий A.M., Ускова Н.И., Чораян И.О., Михалёва И. И. Хронобиологический эффект пептида дельта-сна и система ГАМК в мозгу крысы // Нейрохимия. 1990. - Т. 9, № 2. - С.582-585.

96. Менджерицкий A.M., Кураев Г.А., Михалева И.И, Повилайтите П.Э. Морфометрические доказательства аксо-соматических синапсов при введении дельта-сон индуцирующего пептида // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1992. - №2. - С 202-203.

97. Менджерицкий A.M., Михалева И.И., Мационис А.Е., Повилайтите П.Э. Дельта-сон индуцирующий пептид как модулятор ультраструктуры синапсов // Морфология.1994.-T. 106, №4-6. -С. 55-63.

98. Менджерицкий A.M., Лысенко A.B., Ускова Н.И., Самецкий Е.А. Исследование механизма противосудорожного эффекта дельта-сон индуцирующего пептида в условиях повышенного давления кислорода // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. -1996.-Т. 82,№ 1. С.59-63.

99. Менджерицкий A.M., Лысенко A.B., Ускова Н.И. Протеолитические процессы в мозге и сыворотке крови крыс при гипокинезии и адаптивном влиянии дельта-сон индуцирующего пептида // Биохимия,- 1997. -Т 60, № 4. -С. 585-591.

100. Менджерицкий A.M., Маклецова М.Г., Ускова НИ, Чароян И.О., Михалева И.И Антистрессорный эффект дельта-сон индуцирующего пептида при гипокинетическом стрессе // Укр. биохим. журнал. 1999. - Т.63. - № 1. - С. 34-37.

101. Менджерицкий A.M., Михалева И.И., Демьяненко C.B., Карантыш Г.В., Краснова И.Л. Адаптогенный эффект дельтарана в модели окклюзии сонных артерий.// Нейрохимия. 2007,- № 2. - С. 166-171.

102. Меныцикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов // Успехи соврем, биол. 1993.-Т. 113, № 4. - С. 442-445.

103. Меныцикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И. А, Кругловых Н.Ф., Труфакин В.А. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. М.: «Слово», 2006. - 556 с.

104. Микоян В.Д., Кубрина Л.Н., Манухина Е.Б., Малышев И.Ю., Ванин А.Ф. Различия в стимуляции синтеза NO при тепловом шоке у крыс генетически различных популяций // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1996. - Т. 121, №6. - С. 634-637.

105. Михалева И.И., Войтенков Б.О. Пептид дельта-сна и Дельтаран: от химико-биологических исследований к медицине // Новые лекарственные препараты. 2007. -№3. - С. 6-20.

106. Моин В.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах // Лаб. дело. 1986. - № 12. - С.724-727.

107. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения). СПб: Наука, 1996. - 74 с.

108. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы в профилактике и лечении возрастной патологии // Успехи геронтологии. 1997. - Т. 1, №7. - С. 74-79.

109. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Малинин В.В. Пептидные тиомиметики. СПб.: Наука, 2000,- 158 с.

110. Москалёв A.A. Перспективные направления генетики старения и продолжительности жизни // Успехи геронтологии. 2009. - Т. 22, № 1. - С. 92-103.

111. Москалёв A.A. Эволюционные представления о природе старения // Успехи геронтологии. 2010. - Т. 23, № 1. - С. 9-20.

112. Москалёв A.A. Старение и гены. СПб.: Наука, 2008. - 359 с.

113. Никитина Ю.В., Мухина И.В. Изменения окислительных процессов в ткани головного мозга и крови крыс в раннем онтогенезе // Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. 2009. - № 6 (1). - С. 124-131.

114. Ноздрачева А.Д. Анатомия крысы (Лабораторные животные). Учебник для ВУЗов. -СПб.: «Лань», 2001. 464 с.

115. Нурбаков A.A., Михалёва И.И., Сапожников A.M. Влияние дельта-сон индуцирующего пептида на уровень экспрессии белка теплового шока 70 кД в клетках линии К562 // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2009. Т. 147, № 1. - С. 40-42.

116. Обухова Л.К., Эмануэль И.М. Роль свободнорадикальных реакций окисления в молекулярных механизмах старения живых организмов // Успехи химии. 1983. - Т. 52.-С. 353-372.

117. Обухова Л.К. Вклад академика Н.М. Эмануэля в развитие отечественной геронтологии: свободнорадикальные механизмы в процессе старения // Успехи геронтол. 1999. - №. 3. - С. 27-31.

118. Озернюк Н. Д. Рост и воспроизведение митохондрий. М.: Наука, 1978. - 263 с.

119. Патрушев Л.И. Экспрессия генов. М.: Наука, 2000. - 830 с.

120. Падалко В. И., Леонова И. С., Козлова Е. В. Влияние 2,4-динитрофенола на интенсивность окислительных процессов в печени крыс в длительном эксперименте // Успехи геронтологии. 2010. - Т. 23, № 1. - С. 98-103.

121. Панченко Г.А. Влияние стабилизации мембран лизосом кардиомиоцитов на сократительную функцию и ультраструктуру миокарда при некоторых патологических состояниях: Автореф. дис. канд. мед. наук. Москва, 1987. 16 с.

122. Плешакова О.В., Рассказова Е,А., Сухарев С.А., Садовников В.Б., Мирошников А.И. Переваривание окислительно модифицированных белков протеолитическими ферментами из нейтрофилов мышей разного возраста // Докл. РАН. 2000. - Т. 374, №4.-С. 189-191.

123. Покровский A.A., Тутельян В.А. Лизосомы. М.: Наука, 1976.-382 с.

124. Покровский A.A., Арчаков А.И.Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1968.-218 с.

125. Попович И.Г., Войтенков Б.О., Анисимов В Н., Забежинский H.A. Михалева И.И., Иванов В.Т. Влияние пептида дельта-сна на продолжительность жизни и развитие спонтанных опухолей у мышей // Докл. РАН. 2003. - Т.338, № 5. - С. 701-703.

126. Прудченко И. А., Михалева И.И. Проблемы эндогенности пептида дельта-сна // Успехи соврем, биол. 1994. - Т. 114, №6. - С. 728-740.

127. Пушкина Н.В., Лукаш А.И. Легко- и трудногидролизуемые амидные группы в белках// Изв. СКНЦ ВШ. 1976. - №2. - С. 95-97.

128. Рихирева Г.Т., Пулатова М.К., Шарыгин В.Л., Маклецова М.Г., Михалева И.И. Механизм биологического действия дельта-сон-индуцирующего пептида включает процесс активации синтеза дезоксирибонуклеотидов // Изв. РАН. Сер. биол.- 2009.- № 4,- С. 462-467.

129. Рожанец В.В., Юхананов Р.Ю., Чижевская М.А., Наволоцкая Е.В. Радиологическое изучение локализации пептида дельта-сна подобного материала в различных органах и отделах головного мозга// Нейрохимия. 1983. - Т. 2, № 4. - С. 353-363.

130. Розенфельд C.B., Того Е.Ф., Михеев B.C., Попович И.Г., Забежинский М.А., Анисимов В.Н. Возрастная динамика частоты хромосомных повреждений у самцов мышей разных линий // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2001. - Т. 131, №5. - С. 568-570.

131. Розенфельд C.B., Того Е.Ф., Михеев B.C. Влияние эпиталона на частоту хромосомных повреждений у мышей SAM с ускоренным старением // Бюлл. эксперим. биол. и мед.2002. Т. 133, №5. - С. 320-322.

132. Романов Б.К. Активность лизосомальных ферментов новый диагностический и прогностический критерий оценки степени повреждения кардиомиоцитов // Рос. медико-биол. вестн. им.акад.И.П.Павлова 2004. -№ 1-2. - С. 155-163.

133. Резяпкин В.И. Основы молекулярной биологии. Гродно: ГрГУ, 2009. - 219 с.

134. Рукавишникова С. А. Современные подходы к коррекции состояний и профилактике раннего старения адаптогенами растительного происхождения // Успехи геронтологии. 2010. - Т. 23, № 2. - С. 301-303.

135. Рыжак Г.А., Коновалов С.С. Геропротекторы в профилактике возрастной патологии. -СПб.: прайм-ЕВРОЗНАК, 2004.-160 с.

136. Рыжак А. П., Кузник Б. И., Рутковская В. Н., Рыжак Г. А. Антиатеросклеротическое действие пептидного геропротектора // Успехи геронтологии. 2012. - Т. 25, № 1. - С. 139-143.

137. Самилов М.О. Реакции нейронов мозга на гипоксию. Л.: Наука, 1985. - 188 с.

138. Самецкий Е.А. Пластичность нейрональных структур при действии пирацетама и дельта-сон индуцирующего пептида в условиях гипотермии: Дис. .канд. биол. наук, 1996.-151 с.

139. Серова Л.Д., Силина З.Д., Кочеткова Л.П., Гаенко О.Н. Причины смертности населения и старческого возраста // Альманах. «Геронтология и гериатрия». М.:2003. Вып.2. С. 14-15.

140. Северин С.Е., Соловьева Г.А. Практикум по биохимии. М.:МГУ.-1989. - С.403-414.

141. Скулачев В.П. Старение организма особая биологическая функция, а не результат поломки сложной живой системы: биохимическое обоснование концепции Вейсмана // Биохимия,- 1997. - Т. 62. - С. 1369-1399.

142. Смолина Е.В., Авраамова Т.В. Влияние эффекторов на активность фосфофруктокиназы при старении эритроцитов // Коррекция гомеостаза. 1996.-С.111-112.

143. Соколовский В.В. Тиоловыс антиоксиданты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальное воздействие // Вопр. мед. химии. 1988. - № 6. - С. 2-11.

144. Сорокина И.А., Лукаш А.И., Дурканаева O.A. Возрастные изменения амидированности и карбонилирования белков тканей белых крыс // Изв. высших уч. зав. Северо-Кавказский регион. Естественные науки. 2009. - № 1. - С. 74-78.

145. Стрекалова T.B. Дельта-сон индуцирующий пептид (ДСИП): проблемы эндогенного происхождения и биологической активности // Нейрохимия. 1998. - Т. 15, № 3. - С. 227-238.

146. Тихова М.Г., Бакеева JI.E., Ченцов Ю.С. Изучение устойчивости межмитохондриальных контактов в процессе препаративного выделения митохондрий // Биол. мембраны. 1988. - № 5. - С.970-978.

147. Терешина Е.В. Старение организма как системный процесс // Альманах. «Геронтология и гериатрия». 2003. - Т. 2. - С. 47-53.

148. Турпаев К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов // Биохимия.2002. Т. 67. - С. 339-352.

149. Тутельян В.А., Васильев A.B. Лизосомы в деятельности клетки. Физиология и патология // Вестн. АМН СССР. 1990. - № 2. - С. 14-21.

150. Ульянинский JI.C., Звягинцев М.А, Пептид дельта-сна как модулятор действия медиаторов на сердце // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1990. - №5. - С. 419-420.

151. Умрюхин П.Е., Коплик Е.В., Терехина O.J1., Михалева И.И, Судаков К.В. Дельта-сон индуцирующий пептид: экспрессия ранних генов и активность нейронов гипоталамуса // Новые лекарственные препараты. 2007. - №3. - С. 72-79.

152. Фомина В.А. Клинико-экспериментальное исследование гиполипидемической и противоишемической активности маточного молочка и апикомпозиций с его включением: Дисс. .канд.мед.наук, Рязань, 2000. 152 с.

153. Фролькис В.В., Мурадян Х.К. Экспериментальные пути продления жизни. Л.: Наука,1988.-248 с.

154. Фролькис В.В. Долголетие: действительное и возможное. Киев: Наукова думка,1989.-248 с.

155. Фролькис В. В. Адаптационно-регуляторная теория возрастного развития // Изв. РАН. Сер. биол. 1992. - № 4. - С. 631-634.

156. Хавинсон В.Х., Анисимов В.Н. Пептидные биорегуляторы и старение. СПб.: Наука,2003. 223 с.

157. Хавинсон В.Х., Баринов В.А., Арутюнян A.B., Малинин В.В. Свободнорадикальное окисление и старение. СПб.: Наука, 2003. - 327 с.

158. Хавинсон В.Х., Анисимов C.B., Малинин В.В., Анисимов В.Н. Пептидная регуляция генома и старение М.: РАМН, 2005,- 208 с.

159. Хавинсон В.Х., Шатаева Л.К. Модель комплементарного взаимодействия олигопептидов с двойной спиралью ДНК//Мед. акад. журн.-2005.-Т. 5,№ 1. С. 15-23.

160. Хавинсон В.Х., Соловьев А.Ю., Шатаева Л.К. Плавление двойной спирали ДНК при связывании с геропротекторным тетрапептидом // Бюлл. эксперим. биол. и мед.- 2008. -Т. 146, № 11. С. 560-562.

161. Хавинсон В.Х. Пептидная регуляция старения. СПб.: Наука. 2009. - 54 с.

162. Хавинсон В.Х., Коркушко О.В., Шатило В.Б., Антонюк-Щеглова И.А. Пептидный геропротектор из эпифиза замедляет ускоренное старение пожилых людей:результаты 15-летнего наблюдения // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2011. - N 3. -С.343-347.

163. Хавинсон В.Х., Линькова Н.С., Дудков А.В., Полякова В.О., Кветной И.М. Пептидергическая регуляция экспрессии генов, кодирующих антиоксидантные и противовоспалительные белки//Бюлл. эксперим. биол. и мед.-2011.-№ 11. С.548-551.

164. Хавинсон В.Х., Соловьёв А.Ю., Жилинский Д.В., Шатаева Л.К., Ванюшин Б. Ф.Эпигенетические аспекты пептидной регуляции старения // Успехи геронтологии.-2012.-Т. 25, № 1.-С. 11-22.

165. Хармон К. Дожить до 100 лет // В мире науки. 2012. - №11. - С. 40-43.

166. Хватова Е.М., Гайнуллин М.Р., Михалева И.И. Влияние пептида, индуцирующего дельта-сон, на каталитические свойства митохондриальной малатдегидрогеназы // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1995. - №2. - С. 141-143.

167. Шатаева Л. К., Хавинсон В.Х., Ряднова И.Ю. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы). СПб.: Наука, 2003. - 222 с.

168. Шустанова Т.А. Регуляция дельта-сон индуцирующим пептидом свободнорадикальных процессов в тканях и мембранах эритроцитов крыс при действии холода: Дис. . канд. биол. наук. Ростов-н/Д, 1999. -197 с.

169. Шустанова Т.А., Бондаренко Т.И, Милютина Н.П, Михалева И.И. Регуляция дельта-сон индуцирующим пептидом свободнорадикальных процессов в тканях крыс при холодовом стрессе // Биохимия. 2001. - Т. 66, № 6. - С. 780-789.

170. Шустанова Т.А., Бондаренко Т.И., Милютина Н.П. Особенности регуляции дельта-сон индуцирующим пептидом свободнорадикальных процессов в тканях и мембранах эритроцитов интактных животных и при стрессе // Успехи физиол. наук 2003. - Т. 34, № 1. - С.31-44.

171. Шустанова Т.А., Бондаренко Т.Н., Милютина Н.П. Свободнорадикальный механизм развития холодового стресса у крыс // Рос. физиол. журн. 2004. - Т. 90, №1.- С.73-82.

172. Юсупова Л.Б. О повышении точности определения активности глутатионредуктазы эритроцитов // Лаб. дело. 1989. - № 4. - С. 19-21.

173. Ярошенко Ю.Т., Коркушко О.В. Возрастная динамика максимального потребления кислорода у практически здоровых мужчин пожилого возраста с различным уровнемдвигательной активности // Проблемы старения и долголетия. 1995.-Т. 5, № 1-2. - С. 56-65.

174. Akerboom Т., Sies Н. Glutathione: metabolism and physiological functions // Ed. J. Vina. -Boston: GRG Press. 1990. - P.46-52.

175. Adams J.M., Cory S. The Bcl-2 protein family: arbiters of cell survival // Science. 1998. -Vol. 281.-P. 1322-1326.

176. Andziak В., Buffenstein R. Disparate patterns of age-related changes in lipid peroxidation in long-lived naked mole-rats and shorter-lived mice // Aging Cell. 2006. - Vol. 5. - P. 525-532.

177. Allops R.C., Vaziri H., Patterson C., Goldstein S., Younglai E.V., Futcher A.B., Greider C.W., Harley C.B. Telomere length predicts replicative capacity of human fibroblasts // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1992. Vol. 89. - P. 10114-10118.

178. Allen T.J., Waldron M.J., Casley D., Jerums G., Cooper M.E. Salt restriction reduces hyperfiltration, renal enlargement, and albuminuria in experimental diabetes //Diabetes. -1997.-Vol.46.-P.19-24.

179. Alberts B., Johnson A., Lewis J., Raff M., Roberts K., Walter P. Molecular Biology of the Cell, 4th edition. New York: Garland Science, 2002. - 1616 p.

180. Anisimov V.N. Carcinogenesis and Aging. V. 1-2. Boca Raton:CRC Press, 1987. - 313 p.

181. Anisimov V.N. Life span extension and cancer risk: myths and reality // Exp. Gerontol. -2001. Vol. 36. - P. 1101-1136.

182. Anisimov V. N. Biological interactions of aging and carcinogenesis // Cancer Treat. Res. -2005. Vol. 124. - P. 17-50.

183. Anisimov V.N. Premature ageing prevention: limitations and perspectives of pharmacological interventions // Current Drug Res. 2006. - Vol. 7. - P. 1485-1504.

184. Anisimov S.V., Boheler K.R., Khavinson V.Kh., Anisimov V.N. Elucidation of the effect of brain cortex tetrapeptide Cortagen on gene expression in mouse heart by microarray // Neuroendocrinology Lett. 2004. - Vol. 25, № 1/2. - P. 87-93.

185. Aging Methods and Protocols / Eds Y.A. Bamett, C.R. Barnett Totowa. NJ: Humana Press, 2000. 400 p.

186. Apfeld J., O'Connor G., McDonagh T., DiStefano P. S., Curtis R. The AMP-activated protein kinase AAK-2 links energy levels and insulinlike signals to lifespan in C. Elegans. // Genes and Develop. 2004. - Vol. 18. - P. 3004-3009.

187. Arnhold J., Hamrnerschmidt S., Arnold K. Role of functional groups of human plasma and luminol in scavenging of NaOCl and neutrophil-derived hypochlorous acid // Biochem. Biophys. Acta. 1991. - Vol. 1097. - P. 145-151.

188. Ayene I. S., Dodia C., Fisher A. B. Role of oxygen in oxidation of lipid and protein during ischemia/reperfusion in isolated perfused rat lung // Arch. Biochem. Biophys. 1992. - Vol. 296. -P. 183-189.

189. Babich H. Butylated hydroxytoluene (BHT): a review//Environ. Res.-1982.-V. 29.-P.1-29.

190. Baumeister R., Schaflitzel E., Hertweck M. Endocrine signaling in Caenorhabditis elegans controls stress response and longevity // J. Endocrinol. 2006. - Vol. 190. - P. 191-202.

191. Balaban R. S., Nemoto S., Finkel T. Mitochondria, oxidants and aging //Cell. 2005. - Vol. 120.-P. 483-495.

192. Bates T.E., Loesch A., Burnstock G., Clark J.B. Mitochondrial nitric oxide synthase: a ubiquitous regulator of oxidative phosphorylation?// Biochem. Biophys. Res. Commun. -1996. Vol. 218, №1. - P. 40-44.

193. Beckman K. B., Ames B. N. The free radical theory of aging matures: a review / Physiol. Rev. 1998. - Vol. 78. - P. 547-581.

194. Berlett B.S., Stadtman E.R. Protein oxidation in aging disease, and oxidative stress//J. Biol. Chem. 1997. - № 272. - P. 20313-20316.

195. Bernstein C., Bernstein H. Aging, Sex and DNA Repair. San Diego: Acad. Press, Inc., 1991.-P. 23- 25.

196. Bodyak N., Nekhaeva E., Wei J.Y., Khrapko K. Quant it at ion and sequencing of somatic deleted rntDNA in single cells: evidence for partially duplicated mtDNA in aged human tissues // Human Mol. Genetics. 2001. Vol. 10. - P. 17-24.

197. Bokov A., Chaudhuri A., Richardson A. The role of oxidative damage and stress in aging// Mech Ageing Dev. 2004. - Vol. 125. - P.811-826.

198. Brunk U.T., Terman A. The mitochondrial-lysosomal axis theory of aging: accumulation of damaged mitochondria as a result of imperfect autophagocytosis.// Eur. J. Biochem. -2002. Vol. 269(8). - P. 1996-2002.

199. Burkle A. In memoriam Bernard Strechler genomic instability in ageing: a persistent challenge // Mech. Ageing Dev. - 2002. - Vol. 123, №8 - P. 899-906.

200. Buard A., Clement M., Bourre J.M. Developmental changes in enzymatic systems involved in protection against peroxidation in isolated rat brain microvessels // Neurosc. Lett. 1992. - V. 141. - P. 72-74.

201. Carrillo M.C., Kanai S., Sato Y., Kitani K. Age-related changes in antioxidant enzyme activities are region and organ, as well as sex, selective in the rat // Mecli. Ageing Dev. -1992. Vol. 65. - P. 187-198.

202. Carter M. E., Brunet A. FOXO transcription factors // Curr. Biol. 2007,-Vol. 17, № 4. - P. 113-114.

203. Cairns C.B., Walther J., Harken A.H., Banerjee A. Mitochondrial oxidative phosphorylation thermodynamic efficiencies reflect physiological organ roles // Am. J. Physiol. 1998. - V.274 - P. 1376-1383.

204. Campisi J. Senescent cells, tumor suppression, and organismal aging:good citizens, bad neighbors // Cell. 2005. Vol. 120. - P. 513-522.

205. Campisi J., d'Adda di Fagagna F. Cellular senescence: when bad things happen to good cells // Nature Rev. 2007. - Vol. 8. - P. 729-740.

206. Camara A.K., Riess M.L., Kevin L.G., Novalija E., Stowe D.F. Hypothermia augments reactive oxygen species detected in the guinea pig isolated perfused heart.// Am. J. Physiol.Heart Circ. Physiol. 2004. - Vol. 286. - P. 1289-1299.

207. Chang K. T., Min K.-T. Regulation of lifespan by histone deacetylase // Ageing Res. Rev. -2002. Vol. 1. - P. 313-326.

208. Chiodera A.P., Volpi R„ Carpetti L., Giacalone G., Caffarri G., Davoli C., Nigra E., Coiro V. Different effects of delta-sleep-inducing peptide on arginine-vasopressin and ACTH secretion in normal men // Horm. Res. 1994. - Vol. 42. - P. 267-272.

209. Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction// Anal. Biochem.-1987. Vol. 162. - P. 156-159.

210. Chomczynski P., Sacchi N. The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction: twenty-something years on // Nature Protocols. -2006. Vol. 1, №2. - P. 581-585.

211. Ciechanover A., Heller H., Elias S., Haas A.L. and Hershko A. ATP-dependent Conjugation of Reticulocyte Proteins with the Polypeptide Required for Protein Degradation// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. - Vol. 77. - P.1365-1368.

212. Ciechanover A., Elias S., Heller H., Hershko A. "Covalent affinity" purification of ubiquitin-activating enzyme.// J. Biol. Chem. -1982. Vol.257, №5. - P.2537-2542.

213. Chevion M., Berenshtein E., Stadman E.R. Human studies related to protein oxidation: protein carbonyl content as a marker of damage//Free Radie. Res.-2000.-Vol.33.-P. 99-108.

214. Cong Zhang, Cuervo A.M. Restoration of chaperone-mediated autophagy in aging liver improves cellular maintenance and hepatic function//Nat Med.-2008. Vol. 14.-P.959-965.

215. Cuervo A.M. Autophagy and aging: keeping that old broom working.// Trends Genet. -2008. Vol. 24(12). - P. 604-612.

216. Cutler R.G. Oxidative stress: its potential relevance to human disease and longevity determinants // Age. -1995. Vol. 18. - P. 91-96.

217. Culter R.G. Evolutionary biology of aging and longevity in mammalian species // Ageing and cell function / Ed. J.E. Jonson. N.Y., L.: Plenum press. 1984. - P. 1-147.

218. Davies K.J.A. Protein damage and degradation by oxygen radicals. I. General aspects.// J.Biol.Chem. 1987. - Vol.262. - P. 9895-9901.

219. De Benedicts G., Tan Q., Jeunne B. Recent advances in human gene-longevity association studies // Mech. Ageing Dev. 2001. - Vol. 122. - P. 909-920.

220. De la Asuncion J.G., Millan A., Pia R., Bruseghini L., Esteras A., Pallardo F.V., Sastre J., Viña J. Mitochondrial glutathione oxidation correlates with age-associated oxidative damage to mitochondrial DNA // FASEB J. 1996. - Vol. 10, №2. - P.333-338.

221. Deleve L.D., Kaplowitz N. Importance and regulation of hepatic glutathione // Sim. Liv. Dis. 1990 - Vol.10, №4. - P. 251-266.

222. Dilman V.M., Anisimov V.N. Effect of treatment with phenofromin, diphenylhydantoin or L-DOPA on life span and tumor incidence in C3H/Sn mice // Gerontology. 1980. - Vol. 26.-P. 241-245.

223. Dilman V.M. Development, Aging and Disease. A New Rationale for an Intervention Strategy. Chun Harwood Academic Publ., 1994. - 387 p.

224. Dimarco T., Giulivi C. Current analytical methods for the detection of dityrosine, a biomarker of oxidative stress, in biological samples // Mass spectrometry reviews. 2007. -Vol. 26, №1. - P.108-120.

225. Dolle M. E. T., Snyder W. K., Gossen J. A., Lohman P.H., Vijg J. Distinct spectra of somatic mutations accumulated with age in mouse heart and small intestine // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 2000. - Vol. 97. - P. 8403-8408.

226. Druzhyna N.M., Wilson G.L., LeDoux S.P. Mitochondrial DNA repair in aging and disease // Mech. Ageing and Develop. 2008. - Vol. 129, Issues 7-8. - P. 383-390.

227. Ellman G.L. Tissue sulfhydryl groups // Arch. Biochem. 1959. - Vol. 82. - P. 70-77.

228. Englander E. W., Ma H. Differential modulation of base excision repair activities during brain ontogeny: Implications for repair of transcribed DNA // Mech. Ageing Develop. -2006. Vol. 127. - P. 64-69.

229. Fabien N., Cespuglio R., Burlet S., Pages M. P., Paulin C. Co-localization of 3 neuropeptides and NADPH diaphorase in a small-cell lung-carcinoma cell-line // Cancer J. -1994. Vol. 7. - P. 198-201.

230. Fiskesjo G. The Allium test as a standard in environmental monitoring // Hereditas. 1985. -Vol. 102. -P.92-112.

231. Filipovic D., Pajovic S.B. Differential regulation of CuZnSOD expression in rat brain by acute and/or chronic stress// Cell Mol. Neurobiol. 2009. - Vol. 29(5). - P.673-681.

232. Finkel T., Holbrook N. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing.// Nature. -2000. Vol. 408. - P. 239-247.

233. Friedman T.C., Garcia-Borreguero D., Hardwick D., Akuete C.N., Doppman J.L. Decreased delta-sleep and plasma delta-sleep-inducing peptide in patients with Cushing syndrome // Neuroendocrinol. 1994. - Vol. 60. - P. 626-634.

234. Furuyama T., Kitayama K., Yamashita H., Mori N. Forkhead transcription factor FOXOl (FKHR)-dependent induction of PDK4 gene expression in skeletal muscle during energy deprivation // Biochem. J. 2003. - Vol. 375. - P. 365-371.

235. Ganesan Murali, Chinnakkannu Panneerselvam. Age-associated oxidative macromolecular damages in brain regions: role of glutathione monoester // J. of Gerontology. 2007. - Vol. 62, - № 8. - P. 824-830.

236. Garigan D., Hsu A.-L., Fraser A. G., Kamath R. S., Ahringer J., Kenyon C. Genetic analysis of tissue aging in Caenorhabditis elegans: A role for heat-shock factor and bacterial proliferation // Genetics. 2002. - Vol. 161. - P. 1101-1112.

237. Geiger H., Rermebeck G., Zant G. V. Regulation of hematopoietic stem cell aging in vivo by a distinct genetic element // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2005. - Vol. 102, № 14. - P. 5102-5107.

238. Girardot F., Lasbleiz C, Monnier V., Tricoire H. Specific age related signatures in Drosophila body parts transcriptome // BMC Genomics.- 2006. Vol. 7. - P. 69.

239. Giannakou M. E., Partridge L. The interaction between FOXO and SIRT1: tipping the balance towards survival // Trends Cell Biol. 2004. - Vol. 14, № 8. - P. 408-412.

240. Giorgio M., Trinei M., Migliaccio E., Pelicci P.G. Hydrogen peroxide: a metabolic byproduct or a common mediator of aging signals?//Nature Rev.-2007. Vol. 8. - P. 722-728.

241. Goldspink D.F., Burniston J.G. Cardiomycyte death and aging heart // Exp. Physiology. -2003. Vol. 88, №3. - P. 447-458.

242. Goto S., Nakamura A., Radak Z., Nakamoto H., Takahashi R., Yasuda K., Sakurai Y., Ishii N. Carbonylated proteins in aging and exercise: immunoblot approaches // Mechanisms of Ageing and Development. 1999. - Vol.107. - P.245-253.

243. Graber J., Schaffer S. The mitochondrial free radical theory of ageing- where we stand? // Frontiers in Bioscience. 2008. - Vol. 13. - P. 6554-6579.

244. Gray R.A., Velde D. G. V., Burke C., Manning M.C., Middaugh C.R. and Borchardt R.T. Delta-Sleep-Inducing-Peptide: solution conformational studies of a membrane-permeable peptide// Biochemistry.-1994.-Vol.-P. 1323-1331.

245. Graf M.V., Lores H.P., Gillessen D., Tobler H.I., Schoenenberger G.A. Distribution and specific binding of 3H-DSIP // Experientia. 1981. - Vol. 37, №6. - P. 625-627.

246. Graf M.V., Kastin A.J. Delta Sleep-Inducing Peptide (DSIP): update // Peptides. 1986. -Vol. 7. - P. 1165-1187.

247. Grimes A.J. Human red cell metabolism. London.: Blackwell Sci.Public.,1986. - 384 p.

248. Gutteridge J.M.C. Lipid peroxidation and antioxidant as biomarkers of tissue damage // Clinical Chemistry. 1995. - Vol.41, № 12. - P. 1819-1828.

249. Habig W.H., Pabst M.J., Iacoby W.B. Glutation-S-transpherase: the first step in mercapturic acid formation // J. Biol. Chem. 1974. - Vol. 249. - P.7130-7139.

250. Hayflick L. The coming of age of WI-38 // Adv. Cell Cult. 1984 - Vol. 3. - P.303-316.

251. Hayflik L. The future of ageing // Nature. 2000. - Vol. 408, № 6809. - P. 267-269.

252. Halliwell B. Antioxidants and human diseases: a general introduction //Nutr. Rev. 1997. - Vol. 55. - P. 544-548.

253. Halliwell B., Gutteridge J.M.C. Free Radicals in Biology and Medicine. Oxford: Oxford Science Publications, 2007. - 704 p.

254. Hamilton M.L., Van Rentmen H., Drake J.A. Does oxidalive damage to DNA increase with age? // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol. 98. - P. 10469-10474.

255. Harman D. Role of free radicals in aging and disease// Ann. N.Y. Acad. Sci. 1992. - Vol. 673. - P. 126-141.

256. Harman D. Extending functional life span // Exp. Gerontol. 1998. - Vol. 33. - P. 95-112.

257. Harman D. Free radical theory of aging: an update: increasing the functional life span // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2006. - Vol. 1067. -P. 10-21.

258. Helfand S. L., Inouye S. K. Rejuvenating views of the ageing process //Natura Rev. Genet. -2002. Vol. 3. - P. 149-153.

259. Helfand S. L., Rogina B. Molecular genetics of aging in the fly: is this the end of the beginning? // BioEssays. 2003. - Vol. 25. - P. 134-141.

260. Hipkiss A.R., Brownson C., Carrier M.J. Carnosine, the anti-ageing, anti-oxidant dipeptide, may react with protein carbonyl groups // Mech. Ageing Dev. 2001. - Vol. 122, № 13. -P. 1431-1445.

261. Holliday R., McFarland G.A. Ingibition of the growth of transformed and neoplastic cells by dipeptide carnosine // Br. J. Cancer. -1996. Vol. 73. - P. 966-971.

262. Huang H., Tindall D. J. FOXO factors: a matter of life and death // Future Oncol. 2006. -Vol. 2,№ 1. - P. 83-89.

263. Hutter E., Renner K., Pfister G., Stockl P., Jansen-Durr P., Gnaiger E. Senescence-associated changes in respiration and oxidative phosphorylation in primary human fibroblasts // Biochem. J. 2004. - Vol. 380. - P. 919-928.

264. Ivanov V.T., Karelin A.A., Philippova M.M., Nazimov I.V., Pletnev V.Z. Hemoglobin as a source of endogenous bioactive peptides: the concept of tissue-specific peptide pool // Biopolymers. 1997. - V. 43, №2. -P. 171-188.

265. Joeng K. S., Song E. J., Lee K.-J., Lee J. Long lifespan in worms with long telomeric DNA // Nature Genet. 2004. - Vol. 36, N 6. - P. 607-611.

266. Jonson T.E. Genetic influences on aging // Exp. Gerontol. 1997. - Vol. 32, - P. 1112.

267. Johnson D., Lardy H. Isolation of liver of kidney mitochondria // Methods in Enzymology / R. Esabrook, M. Pullmameds. Academ. Pres. N.Y. - 1967. - Vol. 10. - P. 94.

268. Karelin A.A., Blishchenko E.Yu., Ivanov V.T. A novel system of peptidergic regulation // FEBS Lett. 1998. - Vol. 428, № 1-2. - P. 7-12.

269. Kastin A.J., Gastellanos P.F., Fishman A.J., Proffitt J.K., Graf M.V. Evidence for peptide agregation // Pharmacol. Biochem. and Behav. 1984. - Vol. 21, №6. - P. 969-973.

270. Khvatova I.L., Samartzev V.N., Zagoskin P.P. Delta-sleep inducing peptide (DSIP): effects on respiration and in rat brain mitochondria and stress protective potency under experimental hypoxia // Peptides. 2003. - Vol. 24, №2. - P. 307-311.

271. Khrapko K., Nekliaeva K., Kraytsberg K., Kunz W. Clonal expansion of mitochondrial genomes: implicatons for in vivo mutaton spectra//Mutat. Res. 2003. - Vol.522. - P. 1319.

272. Khavinson V.Kh., Malinin V.V. Gerontological aspects of genome peptide regulation. -Basel (Switzerland): Karger AG, 2005. 104 p.

273. Kirkwood T. B. Evolution of ageing //Nature. -1977. -Vol. 270. P. 301-304.

274. Kirkwood T.B. Genes that shape the course of aging // Trends Endocrinol. Metab. 2003. -Vol. 14, №8.-P. 345-347.

275. Kirkman H.N., Gaetani G.F. Catalase tetrameric enzyme with four tighthy bound molecules of NADPH // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1984. - Vol. 81. - P. 4343-4347.

276. Klichkhanov N.K., Khalilov R., Khadun A. O., Saidov M. Effect of dalargin on intensity of lipid peroxidation in brain at hypothermia// J. Neurochem. 1998. - Vol. 71. - P. S45.

277. Kovalzon V.M., Strekalova T.V. Delta sleep-inducing peptide (DSIP): a still unresolved riddle // J. Neurochem. 2006. - Vol. 97, №2. - P.303-309.

278. Kohen R., Nyska A. Oxidation in biological systems: oxidative stress phenomena, antioxidants, redox reactions, and methods for their quantification// Toxicol. Pathol. -2002. Vol. 30. - P.620-650.

279. Korpelainen H. Genetic maternal effects on human life span through the inheritance of mitochondrial DNA//Hum. Hered. 1999. - Vol. 49. - P. 183-185.

280. Lam E. W.-F., Francis R. E., Petkovic M. FOXO transcription factors: key regulators of cell fate // Biochem. Soc. Transact. 2006. - Vol. 34, N 5. - P.722-726.

281. Lee J., Cltan S.L., LaneM. A., Mattson M.P. Phenformin suppresses calcium responses to glutamate and protects hippocampa. neurons against exictotoxicity // Exp. Neural. 2002. -Vol. 175,-P. 161-167.

282. Levine R.L., Garland D., Oliver C.N., Amici A., Climent I., Lenz A., Ahn B.W., Shaltiel S., Stadtman E.R. Determination of carbonyl content in oxidatively modified proteins // Methods Enzymol. 1990. - Vol.186. - P. 464-478.

283. Leenwenburgh C., Ji L.L. Glutathione depletion in rested and exercised mice: biochemical consequence and adaptation // Arch. Biochem. Biophys. 1995 - Vol. 316. - P. 941-949.

284. Lezhava T. Human chromosomes and aging. From 80 to 114 Years // Nova Biomedical. -2006. New York. - 177 p.

285. Linnane A. W., Marzuki S., Ozawa T., Tanaka M. Mitochondrial DNA mutations as an important contributor to ageing and degenerative diseases // Lancet. 1989. - Vol. 1, № 8639. - P. 642-645.

286. Lodish H., Berk A., Zipursky S. L., Matsudaira P., Baltimore D., Darnell J. Molecular Cell Biology. New York: W. H. Freeman, 2000. - 1084 p.

287. Lok E., Nera E.A., Iverson F., Scott F., So Y., Clayson D.B. Dietary restriction, cell proliferation and carcinogenesis: a preliminary study // Cancer Lett. 1988. - Vol. 38. - P. 249-255.

288. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farb A.L., Randall R.J. Protein measurement with the folin phenol reagent // J. Biol. Chem.- 1951. Vol.193, №1. - P.265-275.

289. Lu T., Pan Y., Kao S.-Y., Li C., Kohane I., Chan J., Yankner B. A. Gene regulation and DNA damage in the ageing human brain // Nature. 2004. - Vol. 429. - P. 883-891.

290. Mao Y., Zhao Y., Zhou L. F., Huang C.X., Shou X.F., Gong J.L., Lawton M.T., Yang G.Y. A novel gene mutation (1292 deletion) in a Chinese family with cerebral cavernous malformations //Neurosurgery. 2005. - Vol. 56, №5 - P. 1149-1153.

291. Matheu A., Maraver A., Klatt P., Flores I., Garcia-Cao I., Borras C, Flores J. M., Vina J., BlascoM. A., SerranoM. Delayed ageing through damage protection by the Arf/p53 pathway //Nature. 2007. - Vol. 448. - P. 375-380.

292. Mattson M.P., Dime W., Lee J. Progress in the development of caloric restriction mimetic dietary supplements // J. Anti-Aging Med. 2001. - Vol.4. - P. 225-232.

293. Martin G. M., Bergman A., Barzilai N. Genetic determinants of human health span and life span: progress and new opportunities // PLoS Genet. 2007. - Vol. 3, № 7. - P. 1121-1130.

294. Martin I., Grotewiel M. S. Oxidative damage and age-related functional declines // Mech. Ageing Develop. 2006. - Vol. 127. - P. 411-423.

295. Macip S., Igarashi M., Fang L., Chen A., Pan Z.-Q., Lee S. W., Aaronson S. A. Inhibition of p21-mediated ROS accumulation can rescue p21-induced senescence // EMBO J. -2002. Vol. 21, N 9. - P. 2180-2188.

296. Masek T., Vopalensky V., Suchomelova P., Pospisek M. Denaturing RNA electrophoresis in TAE agarose gels // Anal Biochem. 2005. - Vol.336, №1. - P. 46-50.

297. McCarroll S. A., Murphy C. T., Zou S., Pletcher S. D.Comparing genomic expression patterns across species identifies shared transcriptional profile in aging //Nature Genet. -2004. Vol. 36. - P. 197-204.

298. Medawar P. B. An unsolved problem of biology. London: Lewis a. Co, 1952. - 24 p.

299. Medvedev Z.A. Age changes of chromatin//Mech. Ageing Dev.-1984.-Vol. 28.-P. 139-154.

300. Mikhaleva 1.1., Prudchenko I.A., Ivanov V.T., Voitenkov V.B. JmjC-domain-containing histone demethylases of the JMJD1B type as putative precursors of endogenous DSIP // Peptides. 2011. - Vol. 32, №4. - P.826-831.

301. Miller R. A. A position paper on longevity genes // Sci. Ageing Knowl.Environm. 2001. -Vol. 2001, №9.-P. 6.

302. Morley A.A. The somatic mutation theory of ageing//Mutat. Res.-1995.-Vol.338.-P. 19-23.

303. Najimi M., Bennis M., Moyse E., Chigr F. Distribution of delta sleep-inducing peptide in the newborn and infant human hypothalamus: an immunohistochemical study // Biol. Res. -2001. Vol.34, №1. - P. 31-42.

304. Nekrasov A.N., Mikhaleva I.I., Cyclo(-Gly-DSIP). A cyclic analog of the DSIP: computer simulation of spatial structure involving NMR data // Biochem. Mol. Biol. Inter. 1996. -Vol. 38, №4. - P. 739-745.

305. Nuttall S.L. et al. An evaluation of the antioxidant activity of a standardized grape seed extract, Leucoselect. // J. Clin. Pharm. Ther. 1998. - Vol. 23, №5. - P.385-389.

306. Ono T., Okada S. Unique increase of superoxide dismutase in brains of long living mammals // Exp. Gerontol. 1984. - Vol. 19. - P. 349-354.

307. Ono T., Uehara Y., Saito Y., Ikehata H. Mutation theory of aging, assessed in transgenic mice and knockout mice // Mech. Ageing Dev. 2002. - Vol. 123. - P. 1543-1552.

308. Oliver C.N., Ahn B.W., Moerman S., Goldstein S., Stadtman E. Age-related changes in oxidized proteins // J. Biol. Chem. 1987. - Vol. 262. - P. 5488-5491.

309. Orrenius S., Moldeus P. The multiple role of glutathione in drug metabolism // Trends Pharmacol. Sci. 1984. - Vol. 5. - P. 432-435.

310. Patil C. K., Mian S., Campisi J. The thorny path linking cellular senescence to organismal aging // Mech. Ageing Develop. 2005. - Vol. 126. - P.1040-1045.

311. Partridge L., Gems D., Withers D. J. Sex and death: what is the connection? // Cell. 2005. -Vol. 120.-P. 461-472.

312. Piccinini G, Minetti G, Balduini C, Brovelli A. Oxidation state of glutathione and membrane proteins in human red cells of different age// Mech. Ageing Dev. 1995. - Vol. 78, №1. - P.15-26.

313. Pierpaoli W., Regelson W. Pineal control of aging: effect of melatonin and pineal grafting on aging mice // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1994. Vol. 91. - P. 787-791.

314. Poon H.F., Calabrese V., Scapagnini G., Butterfield D.A. Free radicals: key to brain aging and heme oxygenase as a cellular response to oxidative stress // J. Gerontol.: Medical. Sci.- 2004. Vol. 59A, №5. - P. 478-493.

315. Principles of Chemoprevention / Ed. by B.S. Stewart, D. McGregor, P. Kleihues. (IARC Sci. Publ. No. 139). Lyon: IARC. - 1996.-332 p.

316. Puig O., Tjian R. Transcriptional feedback control of insulin receptor by dFOXO/FOXOl // Genes and Develop. 2005. - Vol. 19. - P. 2435-2446.

317. Rand D. M., Fry A., Sheldahl L. Nuclear-mitochondrial epistasis and Drosophila aging: introgression of Drosophila simulans mtDNA modifies longevity in D. melanogaster nuclear backgrounds // Genetics. 2006. - Vol.172. - P. 329-341.

318. Rabbani N., Thomalley P.J. Dicarbonyls linked to damage in the powerhouse: glycation of mitochondrial proteins and oxidative stress // Biochem. Soc. Trans. 2008. - Vol. 36. - P. 1045-1050.

319. Rajawat Y.S, Bossis I. Autophagy in aging and in neurodegenerative disorders. // Hormones (Athens). 2008. - Vol. 7, №1. - P. 46-61.

320. Richardson B. Impact of aging on DNA methylation // Ageing Res. Rev. 2003. - Vol. 2. -P. 245-261.

321. Riabowol K., Schiff J., Gilman M. Transcription factor AP-1 activity is required for initiation of DNA synthesis and lost during cellular aging. // PNAS. 1992. - Vol.89, № 1.- P.157-161.

322. Reed D. Regulation of reductive processes by glutathione // Biochem. Pharmacol. 1986. -Vol. 35. - P. 7-13.

323. Reynolds M.R., Berry R.W., Binder L.I. Site-specific nitration and oxidative dityrosine bridging of the tau protein by peroxynitrite: implications for Alzheimer's disease // Biochemistry. 2005. - Vol. 44, №5. - P. 1690-1700.

324. Rose M.R. Can human aging be postponed? // Scientific American. 1999. - Vol. 281, № 6.-P. 106-111.

325. Ryazanov A.G., Nefsky B.S. Protein turnover plays a key role in aging// Mechanisms of Ageing and Development. 2002. - Vol.123. - P. 207-213.

326. Salo D.C., Pacifici R.E., Lin S.W., Giulivi C., Davies K.J. Superoxide dismutase undergoes proteolysis and fragmentation following oxidative modification and inactivation // J. Biol. Chem. 1990. - Vol. 265, №20. - P.l 1919-11927.

327. Sasazuki S., Hayashi T., Nakachi K., Sasaki S., Tsubono Y., Okubo S., Hayashi M., Tsugane S. Protective effect of vitamin C on oxidative stress: a randomized Controlled trial // Int. J. Vitam. Nutr. Res. 2008. - Vol. 78, № 3. - P. 121-128.

328. Sawant P. L., Shibko S., Kumta U. S., Tappel A. L. Isolation of rat-liver lysosomes and their general properties // Biochem. Biophys. Acta. 1964. - Vol. 6, №85. - P.82-92.

329. Schacterle G.R., Pollack R.L.A simplified method for the quantitative assy of small amount of protein in biologic material //Anal. Biochem. 1973.-Vol.51, №2.-P.654-655.

330. Schoenenberger G.A., Monnier M. Characterization of a delta-electroencephalogram(A-sleep)-inducing peptide // Proc. Nat. Acad. Sci. 1977. - Vol. 74. - P. 1282-1286.

331. Szczesny G., Veihelmann A., Massberg S., Nolte D., Messmer K. Long-term anaesthesia using inhalatory isoflurane in different strains of mice-the haemodynamic effects // Laboratory Animals. 2004. - Vol. 38, №1. - P. 64-69.

332. Sell D.R., Biemel K.M. Glucosepane is a major protein cross-link of the senescent human extracellular matrix. Relationship with diabetes// J. Biol. Chem. 2005. - Vol. 280, №13. -P. 12310-12315.

333. Semsei I., Rao G., Richardson A. Expression of superoxide dismutase and catalase in rat brain as a function of age // Mech. Aging Dev. 1991. - Vol. 58. - P. 13-19.

334. Sentman M. L., Granstrom M., Jakobson H., Reaume A., Basu S., Marklund S.L. Phenotypes of mice lacking extracellular superoxide dismutase and copper-and zinc-containing superoxide dismutase // J. Biol.Chem. 2006. - Vol. 281, №11. - P. 6904-6909.

335. Shacka J. J., Klocke B. J., Young C., Shibata M., Olney J.W., Uchiyama Y., Saftig P., Roth K.A. Cathepsin D deficiency induces persistent neurodegeneration in the absence of Bax-dependent apoptosis // J. Neurosci. 2007. -Vol. 27, №8. - P. 2081-2090.

336. Skulachev V.P. Programmes death phenomena- from organelle to organism // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2002. - Vol. 959. - P. 214-237.

337. Sies H., Graf P. Hepatic thiol and glutathione efflux under the influence of vasopressin, phenylephrine and adrenaline. // Biochem. J. 1985. - Vol. 226, №2. - P.545-549.

338. Smith D.P., Smith D.G., Curtain C.C., Boas J.F., Pilbrow J.R., Ciccotosto G.D., Lau T.L., Tew D.J., Perez K., Wade J.D., Bush A.I., Drew S.C., Separovic F., Masters C.L., Cappai

339. R., Barnham K.J. Copper-mediated amyloid-beta toxicity is associated with an intermolecular histidine bridge// J. Biol. Chem. 2006. - Vol. 281, №22. - P. 15145-15154.

340. Sohal R.S., Weindruch R. Oxidative stress, caloric restriction, and aging // Science. 1996. -Vol. 273. - P. 59-63.

341. Spencer C. C., Howell C. E., Wright A. R., Promislow D. E. L. Testing an «aging gene» in long-lived Drosophila strains: increased longevity depends on sex and genetic background // Aging Cell. 2003. - Vol. 2. - P. 123-130.

342. Spiteller G. Lipid peroxidation and aging and age-related diseases // Exp. Gerontol. -2001. -Vol. 36, №9. P. 1425-1456.

343. Stadtman E.R., Berlett B.S. Reactive oxygen-mediated protein oxidation in aging and disease // Chem. Res. Toxicol. 1997. - Vol. 10. - P. 485-494.

344. Steiger A., Holsboer F. Neuropeptides and human sleep // Sleep. 1997. - Vol. 20. - P. 1038-1052.

345. Sudakov K.V., Ivanov V.T., Koplik E.V., Vejaev D.F., Mikhaleva I.I., Sargsjan AS. Delta-sleep inducing peptide (DSIP) as a factor facilitating animals' resistance to acute emotional stress // Pavl. J. Biol. Sci. 1983. - Vol. 18. - P. 1-5.

346. Sudakov K.V., Umriyukhin P.E., Rayevsky K.S. Delta-sleep inducing peptide and neuronal activity after glutamate microiontophoresis: the role of NMDA-receptors // Pathophysiology. 2004. - Vol. 11, № 2. - P. 81-86.

347. Suh J.H., Shigeno E.T., Morrow J.D., Cox B., Rocha A.E., Frei B., Hagen T.M. Oxidative stress in the aging rat heart is reversed by dietary supplementation with (R)-(alpha)-lipoic acid.// FASEB J. 2001. - Vol. 15, №3. - P.700-706.

348. Syntin P., Robaire B. Sperm structural and motility changes during aging in the brown Norway rat // J. of Andrology. 2001. - Vol. 22. - P. 235-244.

349. Tavernarakis N., Driscoll M. Caloric restriction and lifespan: a role for protein turnover? // Mech. Ageing Develop. 2002. - Vol. 123. - P. 215-229.

350. Terman A., Gustafsson B., Brunk U. T. Autophagy, organelles and ageing // J. Pathol.-2007.-Vol. 211.-P. 134-143.

351. Thomas J.N., Smith-Sonneborn J. Supplemental melatonin increases clonal lifespan in the protozoan Paramecium tetraurelia // J. Pineal Res. 1997. -Vol. 23. - P. 123-130.

352. Tian L., Cai Q., Bowen R., Wei H. Effects of caloric restriction on age-related oxidative modifications of macromolecules and lymphocyte proliferation in rats.// Free Radic. Biol. Med. 1995. - Vol. 19. - P. 859-865.

353. Tolmasoff J.M., Ono T., Cutler R.G. Superoxide dismutase: correlation with life span and specific metabolic rate in primate species//Proc. Nat. Acad. Sci. 1980. - Vol. 77, №5. - P. 2777-2781.

354. Ulrich P., Cerami A. Protein glycation, diabetes, and aging//Recent Prog. Horm. Res. -2001. Vol.56, №1.-P.21

355. Vaupel J.W., Baudisch A., Dolling M., Roach D.A., Gampe J. The case for negative senescence // Theor. Population Biol. 2004. - Vol. 65. - P.339-351.

356. Vallet P.G., Charnay Y., Bouras C. Distribution and colocalization of delta sleep inducing-peptide and luteinizing hormone-releasing hormone in the aged human brain: an immunohistochemical study // J. Chem. Neuroanat. 1990. - Vol. 3 - P. 207-214.

357. Vermulst M., Bielas J. H., Kujoth G. C. Mitochondrial point mutaions do not limit the natural lifespan of mice // Nat. Genet. 2007. - Vol. 39. - P. 540-543.

358. Vijg J. Somatic mutations and aging: a re-evaluation // Mutat. Res. 2000. - Vol. 447. - P. 117-135.

359. Vijg J., Dolle M.E.T. Large genome rearrangements as a primary cause of aging// Mech. Ageing Dev. 2002. - Vol. 123. - P. 907-915.

360. Wang M.C, Bohmann D., Jasper H. JNK extends life span and limits growth by antagonizing cellular and organism-wide responses to insulin signaling // Cell. 2005. -Vol. 121. - P. 115-125.

361. Weindruch R., Sohal R.S. Caloric intake and aging // The New Engl. J. Med. 1997. - Vol. 337. - P. 986-994.

362. Wherret G.R., Tower D. B. Glutamyl, aspartyl and amide moieties of cerebral proteins: metabolic aspects in vitro// J. of Neurochem. 1971. - Vol. 18. - P. 1027-1042.

363. Williams G. C. Pleiotropy, natural selection and the evolution of senescence// Evolution. -1957. Vol. 11. - P. 398-411.

364. Wu Y., Elshimali Y., Sarkissyan M., Mohamed H., Clayton S., Vadgama J.V. Expression of FOXOl is associated with GATA3 and Annexin-1 and predicts disease-free survival in breast cancer // Am. J. Cancer Res. 2012. - Vol.2, №1. - P. 104-115.

365. Wojda A., Witt M. Manifestations of ageing at the cytogenetic level //J. Appl. Genet. -2003. Vol. 44, N 3. - P. 383-399.

366. Yang J., Ledaki I., Turley H., Gatter K. C., Montero J.C., Li J.L., Harris A.L. Role of Hypoxia-Inducible Factors in Epigenetic Regulation via Histone Demethylases // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2009. - Vol. 1177. - P. 185-197.

367. Yon L., Feuilloley M., Charnay Y., Vaudry H. Immunohistochemical localization of delta sleep inducing peptide-Iike immunoreactivity in the central nervous system and pituitary of the frog Ranaridibunda//Neurosci. -1992. Vol. 47. - P. 221-240.

368. Yuki K., Ozawa Y., Yoshida T., Kurihara T., Hirasawa M., Ozeki N., Shiba D., Noda K., Ishida S., Tsubota K. Retinal ganglion cell loss in superoxide dismutase 1 deficiency // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2011. - Vol. 52, №7. - P. 4143-4150.

369. Yoshino Y., Elliott K.A.C. Protein bound amide groups in brain. // Can. J. Biochem. -1970. -Vol. 48, №10. -P. 1175-1178.