Uersinia pestis EV как индуктор синтеза цитокинов, регулирующих кооперативное взаимодействие поли- и мононуклеарных фагоцитов в процессе формирования противочумного иммунитета тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Иванова, Инна Александровна

• Иванова, Инна Александровна
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Иванова, Инна Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Цитокины: биологические эффекты и их значение.

I.E. Цитокинопосредованная регуляция кооперативного взаимодействия макрофагов и нейтрофилов.,,.,,

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Бактериальные штаммы.

2.2. Экспериментальные животные.

2.3. Клеточные линии.

2.4. Получение цитокинсодеожащих оуперкатантов.

2.4.1. Получение оуперкатантов, содержащих комплекс монокиков, синтезируемых суммарным пулом мшфофагов перитонеального экссудата морских свинок.

2.4.2. Получение супернатантов, содержащих комплекс моко-ккнов, синтезированных оубпопуляциями макрофагов морских свинок.

2.4.3. Выявление монокмнов в супернатантах продуцирующих их клеток иммуноферментным методом.

2.5. Изучение изменений Функциональной активности нейтрофилов при воздействии комплекса монокинов.

2.5.1. Получение нейтрофилов.

2.5.2. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов.

2,5,3, Оценка экспрессии Fe-рецепторов на поверхности нейтрофилов.

Характеристика активности лизосом нейтрофилов

3,5,5, Определение хемотактичеокой активности нейтрофилов

2.6, Получение супернатантов, содержащих комплекс нейт-рофшгакиков.

2.7, Изучение изменений функциональной активности макрофагов при воздействии кейтрофилокиноодержащих супернатантов

2,7Л. Определение фагоцитарной активности макрофагов,,,,,

2.7.2, Оценка экспрессии Fe-рецепторов на поверхности макрофагов.

2.7.3, Определение миграции макрофагов,.

2.7.4, Характеристика активности лизисом макрофагов,,,,,,,

2.7.5, Определение индекса исчезновения макрофагов,,,,,,,,

2.7.6, Определение показателя макрофагальной трансформации моноцитов.

Определение индекса перераспределения субпопуляций перитонеальных макрофагов,.

Статистическая обработка результатов исследования.,

ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ КОМПЛЕКСА МОНОКННОВ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ИНТАКТНЫХ И ИММУННЫХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ.,,,,,.

3.1. Исследование влияния монокиноодермшдах супернатантов на фагоцитарную активность нейтрофилов.

3.1.1, Исследование влияния монокинсодержащих супернатантов, полученных в разные сроки от начала стимуляции макрофагов, на фагоцитарную активность нейтрошилов,.

3.1.3. Сравнительная характеристика регулирующего действия монокинов ка фагоцитов чумного микроба при первичном и вторичном иммунном ответе.

3.3. Изучение влияния монокинсодержащих оупернатантов на хемотактичеокую активность нейтрофилов.

3.3. Исследование действия монокинов на экспрессию Рс-рецепторов на поверхности нейтрофилов.

3.4. Оценка влияния монокинов на лабилизацию лизосомных мембран нейтрофилов.

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ГЕТЕРОГЕННОСТИ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫК МАКРОФАГОВ Пи ИК СПОСОБНОСТИ ОСУЩЕСТВЛЯТЬ ДИСТАНТНУЮ РЕГУЛЯЦИЮ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ.

4.1. Характеристика гетерогенности субпопуляций перито-неалъных макрофагов по их способности синтезировать монокины, модулирующие фагоцитарную актив--нооть нейтрофилов.

4.2. Исследование гетерогенности субпопуляций перитоне-альных макрофагов по их способности осуществлять дистантную регуляцию хемотаксиса нейтрофилов.

4.3. Характеристика гетерогенности субпопуляций перито-неалышх макрофагов по их способности продуцировать монокины, регулирующие экспрессию Рс-рецепторов на поверхности нейтрофилов.

ГЛАВА 5, ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ КОМПЛЕКСА НЕЙТРОФИЛОКИНОВ цд фун?

6.1. Изучение влияния комплекса нейтрофилокинов на фагоцитарную активность макрофагов, IOS

5.2. Исследование влияния комплекса нейтрофшюкинов на миграцию макрофагов.

5.3. Изучение влияния комплекса нейтрофилокинов на экспрессию Fe-рецепторов макрофагов,. Л

5.4. Исследование влияния комплекса нейтрофилокинов на лизосомный аппарат макрофагов.

5.5. Характеристика влияния комплекса нейтрофилокинов на дифференцйровку клеток системы мононуклеаюных фагоцитов.

5.6. Изучение способности нейтрофилокинов влиять на перераспределение оубпопуляций перитонеальных макрофагов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Uersinia pestis EV как индуктор синтеза цитокинов, регулирующих кооперативное взаимодействие поли- и мононуклеарных фагоцитов в процессе формирования противочумного иммунитета»

Актуальность проблемы. Совершенствование специфической профилактики и лечения чумы продолжает оставаться актуальной проблемой, успешное решение которой неразрывно связано с изучением тонких механизмов формирования противочумного иммунитета. В настоящее время большинством исследователей признается доминирующая роль клеточного иммунитета в формировании резистентности к чуме

Исупов И.В. и др., 1982, 1997; Горькова А.В. и др., 1987; Тихо ,/ мирова А.А., 1У8У; Васильева Г.и., lyyu; Назарова A.Ü. и др., '

1990; Ледванов М.Ю. и др., 1993; Стукова И.Ю. и др., 1997). Изу- " чены отдельные механизмы участия клеток СШ) и .ЛФЦ в противочумном иммунитете (Васильева Г.И. и др., 1983-1998; Задумина С.Ю. и др., 1985; Герасимова К.Й., 1990; Ледванов М.Ю. и др., 1991, 1995; Са- и япина Л.В. и др., 1991). Однако взаимодействие этих и других клеток, принимающих участие в развитии резистентности к чуме, мало изучено. Имеются отдельные сообщения о способности вакцинного штамма чумного микроба и некоторых его антигенов индуцировать синтез моно- и лимфокинов, обеспечивающих кооперацию клеток СМФ и ЛФЦ (Исин Ж.М. и др., 1989; Васильева Г.И., 1990; Прокопьева Е.Д. и др., 1990; Емельянова Н.В. и др., 1991; Киселев Ю.А. и др., 1991; Ледванов М.Ю. и др., 1991, 1993, 1997; Беспалова И.А., 1996; Шмелев В.А. и др., 1997). Вместе с тем, учитывая, что основными зффекторными клетками, осуществляющими реализацию противочумного иммунитета, являются клетки фагоцитарной системы, представляет интерес изучение возможности цитокинопосредованной регуляции кооперативного взаимодействия между моно- и полинукле-арными фагоцитами в процессе формирования резистентности к чуме.

Предпосылкой проведения исследований в этом направлении ц — явился нарастающий поток сообщений, свидетельствующий о том, что низкомолекулярные регуляторные пептиды (цитокины) синтезируются клетками многих типов и представляют собой единую систему гомеоо-татичеокой регуляции Функциональной активности клеток различной тканевой принадлежности5 являясь частью сложнейшей цепи взаимоо-вязанных сигналов, обеспечивающих работу различных систем в живом организме, в том числе фагоцитарной (Суслов А.П., 1990; Кулинский В.И., Колесниченко Л.С., 199?; Зимина И.В. и др., 1994; Ковальчук Л.В. и др., 1995; Ярилин А.А., 199?; Smith R.S., 1991, 1992; Dan-tzer R., 1992; Agaoe W. et al, 1993; Henderson B. et al, 1996),

Исследования последних лет показали, что регуляция взаимодействия клеток внутри системы фагоцитоза может осуществляться цитокинами не только макрофагального, но и нейтрофильного происхождения (Адаменко Г.П., 1992-1995), опровергнув традиционный взгляд на нейтрофилы как сугубо эффекторные клетки (Долгушин И.И., 1986-199?), Однако этот вопрос только начинает изучаться и до настоящего времени нет сообщений о проведении исследований комплекса монокинов и комплекса нейтрошилокинов, продуцируемых МФ и Нф под влиянием антигенов инфекционной природы, в том числе чумного микроба, и их действия на отдельные функции фагоцитов. Отсутствуют какие-либо сведения о синтезе нейтрофилокинов и их действии на мф при формировании противочумного иммунитета. Нет также сообщений о влиянии монокинов, индуцированных вакцинным штаммом чумного микроба и его антигенами, на функции Нф.

Проведение исследований в этом направлении представляется актуальным, так как позволит расшифровать неизвестные до настоящего времени механизмы Формирования резистентности к чуме и откроет принципиально новые подходы к совершенствованию вакцинопро-Филактики этой инфекции и иммунокоррекции сопровождающих ее иммунопатологических реакций.

Цель и задачи мшу «едавшим. Цель настоящей работы - выяснить возможность цитокинопооредовалной регуляции кооперативного взаимодействия моно- и полинуклеарных Фагоцитов в процессе формирования первичного и вторичного иммунного ответа на антигены Yersinia Pestis EV-76 и определить монокин- и нейтроФилокининдуцирующую способность вакцинного штамма чумного микроба и его антигенов.

В соответствии с поставленной целью были сформулированы следующие основные задачи исследования:

1. Получить супернатантьц содержащие комплекс монокинов, синтезируемых in vitro перитонеальными макрофагами интактных и V иммунных экспериментальных животных} стимулированными вакцинным штаммом чумного микроба и его антигенами (FIA, JïïIC). g. Охарактеризовать влияние полученного комплекса монокинов на функциональную активность нейтрофилов интактных и иммунных животных.

3. Определить способность человеческих моноцитоподобных клеток линии Ü937 продуцировать комплекс монокинов, регулирующих функциональную активность нейтрофилов.

4. Определить гетерогенность субпопуляций макрофагов по их способности синтезировать монокины, модулирующие Функции нейтрофилов .

5. Получить супернатантьц содержащие комплекс нейтрофилоки-нов5 синтезируемых in vitro перитонеальными нейтсофилами интактных и иммунных экспериментальных животных5 стимулированными микробными клетками вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами (FIAj ЛЕЮ).

6. Определить регулнторное влияние полученных нейтрошилоки-нов на функциональную активность макрофагов.

7» Провести сравнительный анализ монокин- и нейтрофилокинин-дуцирующей активности микробных клеток вакцинного штамма чумного микроба, его антигенов (FIA, Ж1С) и классического индуктора цито-кинов - ЛПС Escherichia ooli.

Научная новизна:

- впервые выявлена кооперация моно- и полинуклеарных фагоцитов, опосредуемая моно- и нейтрофилокинами, в процессе формирования противочумного иммунитета

- установлена способность моноцитоподобных клеток человеческой линии U937 продуцировать комплекс монокинов, регулирующих функции нейтрофилов

- впервые выявлены и выделены субпопуляции макрофагов, отличающиеся по их способности синтезировать монокины, модулирующие определенные функции нейтрофилов

- показано влияние комплекса монокинов, индуцированных микробными клетками вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами (FIA, ЛПС)5 на фагоцитарную и хемотактическую активности нейтрофилов, содержание в них лизосом и экспрессию на их поверхности Fo~рецепторов

- впервые получены супернатанты, содержащие комплекс нейтро-филокинов, индуцированных микробными клетками вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами (FIA, ЛПС)

- установлено влияние нейтрофилокинов на дифференцировку моноцитов периферической крови в макрофаги, содержание в них лизосом, миграцию и киллерную активность мононуклеарных фагоцитов и их распределение в суммарном пуле

- подобраны условия стимуляции фагоцитирующих клеток для получения монокин- и нейтрофилокинсодержащих супернатантов с определенной биологической активностью

- установлено, что вакцинный штамм чумного микроба является мощным индуктором цитокинов, опосредующих кооперацию моно. и полинуклеарных Фагоцитов

- предложены клеточные модели для биологической характеристики антигенов чумного микроба по их способности индуцировать синтез цитокинов, влияющих на определенные звенья иммуногенеза в процессе формирования противочумного иммунитета

Теоретическая ценность м практическая значимость, В результате проведенного комплексного исследования цитокиновой регуляции кооперации клеток в системе фагоцитоза в процессе формирования поствакцинального противочумного иммунитета получена отсутствовавшая до настоящего времени базисная информация о вдеточно-меди-аторных взаимоотношениях поли- и мононуклеарных фагоцитов, опосредованных моно- и нейтрофилокинами, Впервые получены и охарактеризованы оупернатанты фагоцитов, содержащи ~ • кинов, индуцированных микробными клетками : ного микроба и его антигенами, модулирующих и 7 раны условия стимуляции фагоцитирующих клеток для получения моно-кин- и нейтрофилокиноодержащих супернатантов с определенной биологической активностью.

Впервые выявлена гетерогенность макрофагов по способности продуцировать монокины при воздействии микробных клеток вакцинного штамма чумного микроба и его антигенов, при этом идентифицированы субпопуляции макрофагов} отличающиеся по влиянию комплекса продуцируемых ими цитокинов на определенные функции нейтрофилов.

Установлена высокая монокин- и нейтрофилокининдуцирующая способность микробных клеток вакцинного штамма чумного микроба. v существенно превосходящая таковую классического индуктора цитоки-нов - ЛЕЮ Е.ооН,

Результаты исследований представляют существенный интерес для понимания механизмов формирования резистентности к чуме, комплексное изучение которых позволит в обозримом будущем выявить наиболее уязвимые звенья иммуногенеза и откроет новые перспективы для иммунокорригирущих воздействий.

Практическая значимость работы заключается в разработке и внедрении в практику научных исследований новых клеточных моделей для:

- биологической характеристики антигенов чумного микроба по их влиянию на цитокинопосредованную кооперацию клеток фагоцитарной системы

- скрининга иммунокпрректорОБ, целенаправленно стимулирующих или ингибйрующих субпопуляции макрофагов, продуцирующих комплекс монокинов, определяющих различную биологическую активность кде-ток-мишеней

- оценки торможения миграции макрофагов с помощью реакции исчезновения макрофагов.

Предложенные модели внедрены в практику научной работы Ростовского НИПЧИ и применяются при выполнении плановых научно-исследовательских тем.

Результаты исследований, представленные в диссертации, использованы при составлении "Методических рекомендаций по оценке нейтрофилокининдуцирующей активности антигенов чумного микроба55, утвержденных Ученым Советом РЕЧИ, протокол N5 от 7 мая 1998 года.

Основные тшмнении, швкхэшне- на защиту:

1. В процессе формирования первичного и вторичного иммунного ответа на антигены вакцинного штамма чумного микроба наблюдается взаимодействие поли- и мононуклеарных фагоцитов, опосредуемое моно- и нейтрофилокинами.

2. Микробные клетки Yersinia pestis EV-78 являются мощным индуктором синтеза моно- и нейтрофилокинов, регулирующих кооперацию моно- и полинуклеарных фагоцитов, превосходящим по своей активности классический индуктор цитокинов - ЛПС E.coli.

3. Клетки системы мононуклеарных фагоцитов гетерогенны по своей способности продуцировать монокины при воздействии микробных клеток вакцинного штамма чумного микроба и его антигенов, при этом различные субпопуляции макрофагов отличаются по влиянию комплекса продуцируемых ими цитокинов на определенные функции нейтрофилов.

4. Регуляторный эффект комплекса продуцируемых монокинов в отношении различных функций нейтрофилов зависит от времени индукции их синтеза.

5. Новые экспериментальные модели, позволяющие оценивать влияние антигенов чумного микроба на цитокинопосредованное кооперативное взаимодействие клеток фагоцитарной системы, могут применяться для уточнения их роли в пато- и иммуногенезе чумы.

Апробации работа. Материалы, полученные в ходе проведения исследований, были представлены на научных конференциях:

- Современные достижения биотехнологии (Всероссийская конференция), Ставрополь, 1996;

- XII съезд Всероссийского общества эпидемиологов и паразитологов, Москва, 1997;

- Актуальные вопросы профилактики чумы и других инфекционных заболеваний (межгосударственная научно-практическая конференция, посвященная 100-летию образования противочумной службы России), Саратов, 1997;

- American Academy of Allergy, Asthma & Immunology Joint Meeting, San-Francisko, USA, 1997;

- American Academy of Allergy, Asthma & Immunology 54 Annual Meeting, Washington, USA, 1998;

- Joint African Immunological Society Congress, Cape Town, South Africa, 1997; а также обсуждались на 4 научных конференциях РДЧЙ.

По материалам исследований опубликовано 10 работ, в том числе 4 - в зарубежной печати.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Иванова, Инна Александровна

Результаты исследования показали, что поглотительная активность Нф под влиянием всех изученных СН не изменялась. Установлено более существенное усиление киллерной активности Нф, обрабо Контроль

0,15 М NaCI

ЛПС Е. coli

ИУ.pestis EV + ЛПС Е. coli

ШY.pestis EV

EU м

Рис.7. Влияние монокинов "иммунных" макрофагов на поглотительную активность нейтрофилов иммунных экспериментальных животных

Рис.8 Сравнительная оценка регулирующего действия монокинов на килерную активность нейтрофилов в отношении чумного микроба при первичном и вторичном иммунном ответе

В Y. pestis EV+ "иммунные" Мф

И Y. pestis Е\Аинтактные Мф

В У. pestis EV+ ЛПС Е. coii+иммунные" Мф

Y.pestis EV + ЛПС Е. coli+интактные Мф ЛПС Е. coli + "иммунные" Мф

ЕЗЛПС Е. соНжнтактные Мф

И 0,15 М NaCh "иммунные" Мф

0 0,15 М NaCI* интактные Мф

Контроль^'иммунные" Мф

Ш Контроль+интактные Мф i 3 I ш У.резЫэ ЕУ+ "иммунные" Нф и У.резИ8 ЕУ+ интактные Нф а у .резне ву + ппс

В. Св11 + иммунные" Нф Ш У.резНв ЕУ + ЛПС Е, со1^нта1П ные НФ ЛПС Е, соН + "иммунные" Нф

ИЭЛПСЕ.со!| + интактные Нф 0,15 М МаС1+ "иммунные" Нф

Iв 0,15 М ЫаСк интактные Нф

ЕВ Контроль + "иммунные" Нф

Н Контроль* интактные Нф

СП сл

Рис.9.Сравнительная оценка регулирующего действия монокинов, синтезируемых макрофагами иммунных животных, на киллерную активность интактных и "иммунных" нейтрофилов

- ее тайных ОН клеток;, примированных FIA, Y.pestis EV-76 к ЛПС E.coli в сравнении с ЛПС Y.pestis EV-75 (табл.7). Указанное явление, по всей видимости, обусловлено более высокой дитотоксичностью ЛПС Y.pestis EV-76 в сравнении с ЛПС E.coli.

-"j — ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последнее время появились сообщения о цитокинопосредован-ной коопераций клеток внутри системы фагоцитоза между поли- и мо-нонуклеарами (Адаменко Г.П., 1991). Имеются сведения о способности Мн периферической крови человека дифференцированно восстанавливать функциональные свойства Нф (Адаменко F.IL , 1993; Васильева Г.И. и др., 1995; Baggiolini М., 1991) и влиянии монокинов на хе~ мотактическую активность этих клеток (Адаменко Г.П., 1991; Конусов .В.Г. и др., 1992; Yoshimura Т., 1987). С другой стороны, появились работы, в которых имеются доказательства того, что секреторные продукты Нф (нейтрофилокины) оказывают, в свою очередь, влияние на адгезию, хемотактическую, фагоцитарную, лизосомальную и ферментативную активности Мф (Адаменко Г.П., 1992; Долгушин И.И. и др., 1990).

Однако этот вопрос только начинает изучаться. В доступной нам литературе нет сведений о проведении исследований цитокино-пооредованной кооперации Мф и Нф в процессе формирования противочумного иммунитета. Проведение исследований в этом направлении представляется актуальным, так как позволит расшифровать неизвестные до настоящего времени механизмы формирования резистентности к чуме и откроет принципиально новые подходы к совершенствованию вакцинопрофилактики этой инфекции и иммунокоррекции сопровождающих ее иммунопатологических реакций.

В связи с этим целью настоящей работы являлось изучение ци-токинопосредованной кооперации моно- и полинуклеарных фагоцитов в процессе формирования первичного и вторичного иммунного ответа на антигены Yersinia pestis EV-76 и определение монокин- и нейтрофи-локининдуцирующей способности вакцинного штамма чумного микроба и его антигенов,

Одной из задалs решение которых было необходимо для достижения поставленной цели, являлось получение и характеристика моно-кинсодержадщх СН Уф, стимулированных м.к. вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами (FIA, ЛПС), по их способности регулировать функциональную активность Нф при первичном и вторичном иммунном ответе. В качестве продуцентов монокинов использовали суммарный пул и субпопуляции (А, С, Л) перитонеальных Мф, полученные методом адгезии в градиенте температур, интактных и иммунных морских свинок, а также клетки моноцитоподобной линии человека U937. Монокиноодержащие СН сравнивали по способности регулировать Функции Нф с СН Мф, стимулированных ЛПС E.coli - классическим индуктором синтеза цитокинов. В качестве контролей использовали СН Мф и клеток линии U937, к которым вместо индукторов добавляли 0,15 M раствор хлорида натрия и интактные клетки (без добавления СН).

Проведенные исследования показали, что вакцинный штамм чумного микроба является мощным индуктором синтеза монокинов, регулирующих функциональную активность Нф при первичном и вторичном иммунном ответе. Изучение влияния комплекса монокинов, содержащихся в СН перитонеальных Мф, стимулированных м.к. Y.pestis EV-76, на фагоцитарную активность Нф продемонстрировало, что они, не оказывая воздействия на поглотительную активность этих клеток как при первичном, так и вторичном иммунном ответе, существенно стимулируют киллинг чумного микроба Нф, особенно при вторичном иммунном ответе. При этом не выявлено существенной разницы между действием монокинов, синтезируемых Мф иммунных животных, на кил-лерную активность Нф. полученных как от интактных, так и иммунных морских свинок. Несмотря на более высокую переваривающую способность "иммунных" Нф, ¡гримированных СН Мф иммунных животных, в сравнении с интактными Нф, обработанными зтими же СН, наблюдаемая степень их активации была практически одинакова, так как исходный уровень киллерной активности интактных Нф ниже, чем иммунных.

Аналогичным регуляторным влиянием обладали СН Мф, стимулированных антигенами Y.pestis EV-76 (FIA и ЛПС). Однако их действие, особенно в случае применения в качестве индуктора синтеза моноки-нов ЖС, было выражено слабее. При этом комплекс монокинов, синтез которых был индуцирован in vitro FIA вакцинного штамма чумного микроба, в большей степени повышал киллерную активность Нф в сравнении с таким же комплексом, полученным при воздействии на Мф ЛПС E.coli. Сравнительная оценка препаратов ЛПС Y.pestis EV-76 и E.coli показала, что по своей монокиншдуцирующей активности первый уступает второму. Обнаруженное явление, по всей видимости, обусловлено более высокой токсичностью ЛПС Y.pestis EV-76 в сравнении с ЛПС E.coli.

Костимуляция Мф, примированных м.к. Y.pestis EV-76, о помощью ЛПС E.coli обеспечивала незначительное увеличение активности получаемых монокинсодержажих СН только в случае использования Мф интактных животных в ранние сроки от начала стимуляции (4-18 час). В СН, полученных через 48 час, костимулирующий эффект ЖС E.coli не обнаруживался.

Таким образом, вакцинный штамм чумного микроба является сильным индуктором синтеза монокинов, регулирующих киллерную активность Нф в отношении чумного микроба, превосходящим в этом плане ЛПС Е. coli, особенно при вторичном иммунном ответе.

Изучение влияния длительности примирования Мф индукторами синтеза монокинов на результирующий эффект получаемого комплекса монокинов позволило установить, что наибольшим усиливающим переваривающую активность Нф влиянием обладают СН, полученные в ранние сроки инкубации М® с препаратами (4-18 час). Это явление, как было показано в экспериментах о блокадой цикла арахидоновой кис. лоты индометацином, объясняется в значительной степени накоплением в ОН в более отдаленные сроки от начала стимуляции Мф простат-ландинов, осуществляющих отрицательную регуляцию синтеза моноки-ное « стимулирующих переваривающую способность Н#. Этот процесс является одним из биологически целесообразных механизмов ауток-ринной регуляции Функциональной активности клеток СШ, обеспечивающих быстрые адекватные изменения функциональной активности Мф в очаге воспаления (Громыхика Н.Ю. , 1992).

Исследование влияния комплекса монокинов, содержащихся в ОН перитонеальных Мф} стимулированных м.к> вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами (FIA и ЛПС), на другие Функции Нф при первичном и вторичном иммунном ответе показало, что они резко усиливают хемотаксис Нф и экспрессию на их поверхности FcR, а также повышают проницаемость лизосомных мембран. Хелперные эффекты монокинов наиболее выражены при вторичном иммунном ответе. Как и в случае изучения влияния монокинов на кидлерную способность Нф» наиболее аг : т "а. * - ' т цинного штамма ч,р ~ ' г л ' i - ' т ~ ' вали изученные r - ' " ~ z,T- * * вергнуты воздействию не только FIA и ЛПС Y < peste s EV-76,. но к ЛПС Е.соН.

Сравнительная оценка препаратов ЛПС Y.pestîs EV-Уб и Е.соН показала, что но своей способности индуцировать синтез факторов, усиливающих хемотаксис Нф и экспрессию на их поверхности FcR ЛПС Е.соН превосходит ЛПС Y.pestis EV-76. В то же время оба препарата не стимулировали продукцию фактора(ов).4 модулирующего проницаемооть лизооомных мембран, Коотимулирующий эффект ДПО Е,ооН при совместном использовании с у. ив У, резНя ЕУ-78 наблюдался только при изучении влияния полученных моношнсодержащих СН на хемотаксис Ни при первичном иммунном ответе, В остальных случаях этот эффект отсутствовав. Изучение ± ": т .примирсвания с: индукторами синтеза монокикс- - с " получаемого комплекса иммунорегуляторных молекул позволило установить, что максимальная стимулирующая различные функции Нф активность определялась в СН, полученных в равные периоды от начала стимуляции Уф, Так, максимальная усиливающая хемотаксис Нф и лабилизацжз лизооомных мембран активность определялась в 4-часовых ОН, в то время как 48-часовые СН обладали максимальной активностью регуляторов экспрессии Рек,

Результаты наших исследований показали также, что клетки мо-ноцитоподобной клеточной линии человека 11937 способны продуцировать монокины, регулирующие функции Нф (киллинг, хемотаксис, экспрессию РсР и проницаемость лизооомных мембран),

Известно, что клетки СМФ обладают вырешенной функциональной гетерогенностью (Манько В,М,, Хаитов Р,М,, 1985; Вигзикег Т,, СЗоХагпап Р, , 1983), Они отличаются в зависимости от вида и линии животных, тканевой локализации в пределах одного организма, а тяю;<;е Б Пр перитонеальных, з морфологическим * " " " " ~ " ----- 'ИВНООТЙ и своей "специализации" в процессе поддержания гомеоотаза.

Учитывая вышеизложенное, мы провели исследование с целью изучения гетерогенности субпопуляций мф по способности оказывать монокинопосредованное иммунорегуляторное з ие на фагоцитарную активность Нф, - . ~ , ; цто ншдолее активными в суммарном пуле перитонеальных Мф в процессе формирования противочумного иммунитета являются субпопуляции А, Си IL выделенные в градиенте температур (2и, 28й и 37и0) (Васильева Г,И,, 1990), мы изучили СН этих субпопуляций Мф3 стимулированных in vitro м.к, вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами.

Исследование влияния ОН отдельных субпопуляций Мш на различные Функции Нф подтвердило изучения иммунорегуляторного влияния монокинов из СН суммарного пула перитонеальных Мф, которые свидетельствовали о том, что вакцинный штамм чумного микроба - мощный индуктор монокинов, стимулирующих киллеоную и хемотактическую активности Нф, экспрессию на их поверхности FoR и регулирующих проницаемость лизооомных мембран в зтих клетках. По своей способности индуцировать продукцию монокинов, регулирующих указанные функции Нф, м.к. Y.pestis EV-76 существенно превосходят ЛЕЮ E.coli, особенно при вторичном иммунном ответе.

Проведенные исследования впервые выявили существование функциональной гетерогенности перитонеальных МФ по их способности продуцировать монокины в ответ на воздействие м.к. Y.pestis EV-76, которые осуществляют регуляцию киллерной и хемотактичеокой активности Нф и экспрессию на их поверхности FgR. В то же время нам не удшшоь выя перитонеальных Мф по лизации лизооомных мембран.

В результате проведенных исследований показано также, что хелперный эффект СН суммарного пула перитонеальных МФ в отношении различных Функций Нф при первичном и вторичном иммунном ответе обеспечивают равные субпопуляции этих клеток. Так, например, Мф субпопуляции С являются основными продуцентами монокинов, осу-протвляющих позитивную регуляцию киллерной активности Нф, a li субпопуляции А при первичном иммунном ответе и субпопуляции див меньшей степени А при вторичном иммунном ответе продуцируют моно-кины, регули:рующие хемотаксис Нф и экспрессию на их поверхности FoR. Активное участие в процессах дистантной регуляции иммуногенеза мф субпопуляции А не только при вторичном иммунном ответе, как у клеток субпопуляции Д, но и при первичном, обусловлено, по-видимому, тем, что Мф субпопуляции А представляют собой, по данным Васильевой Г,И. (1990), преактивированные к чумному микробу мф, которые уже при первой встрече о этим микроорганизмом синтезируют монокины, обеспечивающие приток Нф в очаг антигенного раздражения и их активацию, одним из признаков которой является усиленная экспрессия ка поверхности полиморфноядерных фагоцитов FoR,

Таким образом, нами впервые выявлена кооперация моно- и по. дйнукдеарных фагоцитов, опосредованная монокинами, в процессе формирования первичного и вторичного иммунного ответа на антигены Y.pestis EV и охарактеризованы по иммунорегуляторной активности монокинсодержащие ОН не только суммарного пула, ко и отдельных субпопуляций перитонеальных Мф интактных и иммунных морских свинок, стимулированных in vitro м.к. вакцинного штамма чумного мик. роба и его антигенами. Выявлены оптимальные сроки продукции комплекса монокинов о определенной биологической активностью. Установлена возможность использования клеток моноцитоподобной линии, человека 1193? в качестве продуцентов монокинов, функции Нф. Впервые показана гетерогенность субпопуляций МФ по их способности' продуцировать монокины, осуществляющие регуляцию функциональной активности Кф, Показано иммунорегулпторное влияние монокинов, синтез которых индуцирован м.к. вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами, на фагоцитарную и хемотактическую активности Нф, содержание в них лизисом и экспрессию на их поверхности Fc-рецепторов. Установлено, что по своей способности • г""./;. : : .:> продукцию монокинов, регулирующих функциональную активность Нф, Y.pestis EV существенно превосходит ЛПС Е. соИ, особенно при вторичном иммунном ответе. Показано также, что клеточные модели, предложенные и апробированные в наших исследованиях для оценки влияния антигенов чумного микроба на монокинопосре-диванную регуляцию функциональной активности Нф, могут быть использованы для уточнения роли и других антигенов в пато- и иммуногенезе чума, а изменение соотношения субпопуляций перитонеаль-ных МФ под влиянием различных препаратов позволяет использовать эту моделькую систему для осуществления скрининга иммунокорректо-ров, целенаправленно стимулирующих или ингибирующих активность Мф различных субпопуляций, продуцирующих монокины с определенной биологической активностью,

Поскольку исследования последних лет показали возможность регуляции взаимодействия клеток внутри системы фагоцитоза, осуществляемой цйтокмнами не только макрошагального, но и кейтро.

Шильного происхождения (Адаменко Г.П., 1992-1995), одной из задач настоящего исследования явилось изучение участия нейтрофилокинов, синтез которых индуцирован м.к. Y,pestis v ыстгеувв;::-: "с но- и полинуклеарных Фагоцитов в процессе ^осмвссввнив счумного иммунитета. Исследования такого рода до настоящего времени не проводились ни в нашей стране, ни за рубежом.

Для решения поставленной задали нами впервые получены и охарактеризованы по кммунорегуляторной активности нейтрофилокинсо-™ держащие ОН Нф морских свинок, стимулированных in vitro м.к, вакпинного штамма чумного микроба, ого антигенами (FIA и JïiiC) и первым совместно с . E.coli 055:В5. В качестве положительного контроля использовали СН Нф, примированных только Ж1и Е.соП, являющимся активным индуктором синтеза нейтрофилокинов, а в качестве отрицательных - СН Нф, к которым вместо индукторов добавляли 0,15 M апирогенный раствор хлорида натрия и интактные клетки (без добавления СН).

Длительность инкубации Нф всегда составляла 4 часа, так как по полученным нами предварительным данным именно этот срок контакта является оптимальным для проявления иммунорегуляторной активности всех продуцируемых нейтрофилокинов, синтез которых индуцирован м.к. вакцинного штамма чумного микроба. Исключение составили СН, иммунорегуляторное влияние которых оценивалось по уровню экспрессии FoR на поверхности j от длительности инкубации Нф с м.к, у.реяыя ev~75 получаемые СН не изменяли интенсивность экспрессии FoR (процент ЕЛ-РОК и ЕЛ/Юи Мф оставались на уровне контроля). В противоположность этому, иммунорегуляторное влияние монокинов, в отличие от нейтрофилокинов, отмечалось при использовании СН, полученных в разные сроки от начала стимуляции Мф.

В результате исследования цитокинопосредованной регуляции Нф функций Мш в процессе формирования противочумного иммунитета установлено, что м.к, вакцинного штамма чумного микроба и его антигены (FIA и Ж1С) индуцируют синтез нейтрофилокинов, стимулирующих ккллинг возбудителя чумы Мф при первичном и вторичном иммунном ответе, но не оказывающих влияния на их поглотительную активность. Хелперный эффект в отношении киллерной активности Мш более выражен у СН "иммунных" Нф, чем интактных, особенно при взаимодействии их с клетками интактных животных. По своей способности индуцировать продукцию нейтрофилокинов, стимулирующих переваривающую способность МФ и обеспечивающих завершенный характер фагоцитоза» м.к, Y,Pestis EV-76 и FIA существенно превосходят Ши Е,coli, особенно при вторичном иммунном ответе.

Выяснение участия нейтрофилокинсв в регуляции феномена торможения миграции Мф из инфекционного очага показало, что при первичном иммунном ответе, как и следовало ожидать, изученные нейт-рофилокины не тормозят миграцию Мф, а, наоборот, усиливают ее. При вторичном иммунном ответе, в отличие от первичного, СН Нф, стимулированных м.к. вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами (FIA и ЛПС), содержат фактор(ы), ингибирующий миграцию Мф, СН Нш, примированных ЛПС E.coli, таким эффектом не обладали, что свидетельствует о строгой специфичности ПЧЗТ, одним из проявлений шторой является реакция торможения миграции Уф.

Учитывая литературные сведения о возможности регистрации МИФ о помощью более простого и быстрого по сравнению с PIMM теста -РИМ, мы изучили с его помощью иммунорегуляторное влияние нейт-рофилокинсодержащих СН на процесс торможения миграции Мф. Исследования показали, что введение нейтрофилокинсв "иммунных" Нф, стимулированных м.к. вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами (FIA и ЛПС), иммунизированным Y,Pestis EV-76 животным сопровождается выраженной РИМ. СН Нф, стимулированных ЛПС E.coli, таким эффектом не обладали, что объясняется строгой специфичностью РИМ, Введение интактным животным СН Нф, стимулированных любым индуктором, не вызывало исчезновения Мш из перитонеального экссудата, так как РИМ наблюдается только в сенсибилизированном организме,

Сравнительная оценка влияния нейтрофилокинов на миграцию Мф в двух тестах (РТММ и РИМ) показала строгую корреляцию результат toej полученных в этих исследованиях. Коэффициент корреляции рангов Спирмена приближается к щ то позволяет рекомендовать • ч т.■ т"те .г. миграции МФ как более простой тест в сравнении о PIMM,

Проведенные исследования продемонстрировали также существенное увеличение МТС перитонеальных мФ (Д/А) при введении интактным животным нейтрофшшкйнов, синтезируемых "иммунными" Нф при стимуляции м.к. У.pestis EV-76 ЩПС^й!), Такой высокий показатель ИПи наблюдается, по данным Васильевой Г,И, (1990), в результате формирования противочумного иммунитета под воздействием высокоимму. ногонкых препаратов. Таким образом, наблюдаемое в иммунном организме перераспределение субпопуляций перитонеальных Мф, по-видимому, " ~ индуцированными вакцинирующими препаратами,

GH интактных Нф, стимулированных м.к, Y,Pestis EV-76, прак-ияли на соотношение субпопуляций перитонеальных Мф ных и не отличались по своей активности от CK, посинтеза нейтро-СН, содержащие нейтрофилокины, синтезируемые !!иммункымкп Нф, различались между собой по своей активности в зависимости от использованного индуктора, Y.pestis EV-76 по своей способности индуцировать синтез

Фактора(ов), опосредующего перераспределение субпопуляций перито. неальных Мф, в 3 раза превосходил ЛПС Е.соН (Ш1С - 21 и 7 соответственно) . мененного относительного содержания клеток других Биологический смысл указанного явления заключается, по-видимому, в том, что о помощью нейтрофилокинов организм пытается удержать в очаге воспаления клетки субпопуляции Д, наиболее активной при Формировании противочумного иммунитета.

Введение иммунным животным нейтрофилокинов, синтезируемых как интактными, так и "иммунными" Нф независимо от индуктора, не изменяло показатели ИПС перитонеаяьных Мф. что объясняется наличием высокого ИПС у иммунных животных.

Таким образом, вакцинный штамм чумного микроба является сильным индуктором нейтрофилокинов, вызывающих перераспределение субпопуляций перйтонеальных Мф, превосходящим по своей активности ЛПС Е.coli.

Выяснение роли нейтрофилокинов, синтезируемых в ответ на воздействие антигенов вакцинного штамма чумного микроба, в регуляции дифференцировки Мн периферической крови в Мф при первичном и вторичном иммунном ответе в опытах in vitro и in vivo показало, что СН "иммунных" Нф, стимулированных м.к. вакцинного штамма чумного микроба или ЛПС E.coli, содержат фактор(ы), стимулирующий дифференцировку Мн в Уф, эффект которого проявляется только в опытах in vivo при использовании интактных животных. По своей способности индуцировать синтез этого фактора м.к. Y.Pestis EV-76 не отличались от ШС E.coli.

Проведенные исследования показали также, что м.к. вакцинного штамма чумного микроба и FIA У.pestis EV-76 индуцируют при вторичном иммунном ответе синтез нейтрофилокинов, регулирующих проницаемость лизосомных мембран Мф, в концентрациях, достаточных для их подготовки к слиянию с фагосомами и выходу лизосомных ферментов в образующуюся фаголизосому. MC Y.pestis EV-76 в качестве индуктора синтеза нейтрофилокинов, проявляющих описанную регуля-торную активность, превосходит не только вышеперечисленные препараты, но и ЖС E.ooli, Однако лабиливирующий эффект продуцируемых под его воздействием нейтрофилокинов выходит за рамки биологической целесообразности, поскольку сопровождается полным разрушением отдельных клеток, связанным с выходом лизосомальных ферментов в цитоплазму. Можно предположить, что одним из механизмов цитаток-сического действия ЛПО Y.Pestis EV-76 на Мф является его способность индуцировать продукцию Нф фактора(ов), лабилизирующего ли-зооомные мембраны Мф, в таких концентрациях, которые приводят к их повреждению и последующей гибели клеток. Во всех остальных случаях сравнительная оценка препаратов ЛПС показала, что ЛГЮ Y.pestis EV-76 в качестве индуктора синтеза нейтрофилокинов уступает по своей активности ЛПС Е.соН. При использовании всех изученных препаратов в качестве индукторов не выявлена продукция нейтрофилокинов, способных оказывать регуляторное влияние на экспрессию FcR на поверхности Мф,

Таким образом, в наших исследованиях впервые обнаружена кооперация моно- и полинуклеарных фагоцитов, опосредуемая нейтрофи-локинами, в процессе формирования первичного и вторичного иммунного ответа на антигены Y.pestis EV-76. Впервые охарактеризованы по иммунорегуляторной активности нейтрофилокинсодержащие СН, полученные в результате воздействия на Нф м.к. вакцинного штамма чумного микроба и его антигенов, установлено влияние нейтрофилокинов на дифференцйровку Мн в Мф и содержание в них лизосом, миграцию и киллерную активность мононуклеарных Фагоцитов и их распределение в суммарном пуле. Клеточные модели, использованные для оценки влияния антигенов чумного микроба на нейтрофилокинопосре-дованную регуляцию функциональной активности Мф, могут быть использованы для уточнения роли этих и других антигенов в пато- и иммуногенезе чумы.

Резюмируя результаты проведенных, исследований, можно сделать вывод, что вакцинный штамм чумного микроба является мощным индуктором синтеза моно- и нейтрофилокинов, опосредующих кооперативное взаимодействие поли- и мононуклеарных Фагоцитов в процессе формирования противочумного иммунитета.

1, В процессе формирования первичного и вторичного противочумного иммунитета наблюдается взаимодействие поли- и мононуклеа-ров, опосредованное моно- и нейтрофилокинами.

2, Вакцинный штамм чумного микроба является мощным индуктором синтеза моно- и нейтрофилокинов, регулирующих кооперацию моно- и полинуклеарных Фагоцитов, и превосходит по своей активности классический индуктор цитокинез - ЛПС E.coli.

3, ЛПС Y.pestis EV-76 уступает ЛПС E.coli по способности индуцировать синтез моно- и нейтрофилокинов, опосредующих взаимодействие фагоцитарных клеток,

4, Мококины, синтез которых индуцирован микробными клетками вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами, регулируют киллерную и хемотактическую активности нейтрсфилов, а также содержание в них лизосом и экспрессию на их поверхности Ее-рецепторов.

5, направленность и максимальная активность регуляторкого влияния продуцируемого комплекса монокинов в отношении различных Функций нейтрофилов зависит от длительности стимуляции макрофагов,

6, Клетки системы мононуклеарных фагоцитов гетеровенны по своей способности продуцировать монокины, осуществляющие регуляцию функциональной активности нейтрофилов, шинадлежит наиболее существен-~ -тттт активацию киллерной способности продуцентами монокинов , стиму-- " экспрессию на их поверхности

- ^ - * тм ответе макрофаги субпопулядни А. а при вторичном - оубпопуляции д.

8, Клетки перевиваемой моноцитоподобной линии человека 11937 продуцируют монокины, модулирующие Функциональную активность нейтрофилов.

9, Нейтрофилокинк, синтез которых индуцирован -:: клетками вакцинного штамма чумного микроба и его антигенами, осуществляют регуляцию дифференцировки моноцитов в макрофаги, их миграцию и распределение в суммарном пуде5 повышают проницаемость дизооомных мембран, стимулируют переваривающую способность макро. шагов, а также участвуют в Феномене "исчезновения'5 макрофагов из перитонеадьного экссудата сенсибилизированных животных.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Иванова, Инна Александровна, 1998 год

1. Адаменко Г.П. Изучение изменения миграции полиморфноядер-ных лейкоцитов под влиянием неотимулированных моноцитов/УИммуно-логия.-1991.-N6.-С.25-27.

2. Адаменко Г.П. Исследование некоторых поверхностных маркеров и функциональной активности моноцитов и нейтрофильных лейкоцитов в процессе совместного культивирования клеток//Иммуноло-гия.-1992(а).-N1.-0.32-35.

3. Адаменко Г.П. Продукция и свойства цитокинов в смешанной культуре поли- и мононуклеарных фагоцитов крови человека/УИммуно-логия.-1992(6).-N1.-0.35-37.

4. Адаменко Г.П. Изменение количества полиморфноядерных лейкоцитов и моноцитов, экспрессиоующих антигены гистосовместимости I и II классов в смешанной культуре клеток//Иммуноло-гия.-1992(в).-N5.-0.31-33.

5. Адаменко Г.П. Кооперативное взаимодействие поли- и мононуклеарных фагоцитов крови человека: влияние совместного культивирования клеток на их хемилюминесценцию и секрецию миелоперокси-дазы//Иммунология.-1993(б).-N5.-С.27-28.

6. Адаменко Г.П. Роль адгезии клеток в рецепторных механизмах взаимодействия поли- и мононуклеарных фагоцитов крови челове-ка//Иммунология.-1995(а).-N4.-С. 29-30.

7. Балаболкин И.И,, Намадова Л,С,, Ковальчук Л.В. и др. Ин-терлейкины 1 и 2 в патогенезе бронхиальной астмы у детей//йммуно-ллгия- —1994„ — Ml,— П.33~ 36.

8. Бахов Н.й., Александрова Л.3., Титов В.И, Роль нейтрофи-лов в регуляции метаболизма тканей//Лаб, дело.-1988.-N6.-С,3-12,

9. Беспалова И,А. Иммунохимическая и биологическая характеристика модифицированных производных липополисахарида чумного микроба: Автореф. дио. . канд.биол.наук.-Ростов-н/Д, 1996.-24 с.

10. Богдашин И.В., Дыгай А.М., Шерстоба Е.Ю. и др. Роль тимуса в регуляции синтеза цитокинов клетками костного мозга при отреоое/УИммунология,-1991.-N5,-С.30-32.

11. Барсук Г.И., Рублев Б.Д., Гераоюк Л.Г, Изменение некоторых показателей фагоцитоза и состояния клеток белой крови организма после иммунизации конъюгированными антигенами чумного мик-роба//Совр, аспекты профилакт. зооноз. инф.-Иркутск, 1984.~С,144-146,

12. Бутаков A.A., Оганезов В.К., Щельцына Т.Л., Патютко М.Ю. Влияние рекомбинантного человеческого интерлейкина-8 на функциональную активность фагоцитирующих клеток периферической крови здоровых индивидуалов in у11го//Иммунология.-1997.-N3.-С.30-33.

13. Васильева Г.И. Роль системы мононуклеарных фагоцитов в формировании противочумного иммунитета: Автореф дис. ., докт, мед. наук.- Саратов, 1990.-40 с.

14. Войтенок H.H. Интерлейкин 1: закономерности синтеза, биологическая активность//Усп. совр. биологии.-1988.-Т.106,N1.1. Р -i П9 •-; -1 л

15. Вядро М.М. Цитокины и их роль в патогенезе и терапии инфекции/Антибиотики и химиотер.-1990.-Т.35,Ш.- С.12-14.

16. Герасимова К.И. Показатели иммунного статуса людей, вакцинированных против чумы: Автореф. дис. . канд. мед. наук.-Саратов, 1990.-22 с.

17. Горькова A.B., Павлова Л.П., Тихомирова Е.И. Клеточные механизмы формирования иммунитета к чуме//Актуал. вопр. теорет. и приклад, инф. иммунол.-М., 1987,- С.38-39,

18. Громыхина Н.Ю. Механизмы комплексного участия макрофагов в регуляции гуморального иммунного ответа: Автореф. дис. докт. мед. наук.- С.-Петербург, 1992.-36 с.

19. Гублер Е.В., Генкин A.A. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях.- Л,: Медицина, 1973.-141 с.

20. Демченко Т.А., Джагинян А.И., Свитина H.H. Микрометод определения показателя макрофагалькой трансформации мононуклеа-ров//Лаб. дело.-1982.-N10.-С.41-43.у. дилгушин И.И., Зурочка A.B., Марачев С.И. влияние акти

21. Долгушин И.И. Биологические эффекты низкомолекулярных нейтрофилокинов//I съезд иммунол. России: Тез. докл.- Новосибирск, 1995!.- С- 143.

22. Долгушин И.И., Зурочка A.B., Власов A.B. и др. Иммуноре-гулирующие эффекты нейтрофилокинов//! Всесоюз. иммунол. съезд: Тез. докл.-Москва, 1989.-Т.1.- С.ЗОЕ.

23. Долгушин И.И.» Зурочка A.B., Власов A.B. Секреторные продукты нейтрофилов и иммунный ответ//Иммуноло-гия.-199u5n3.-С.35-37.29. flojвированных и интактных нейтрофилов на функции моноцитов периферической крови//Иммунология.-1986,N2.-С.79-80.

24. Долгушин И.И., Зурочка A.B., Чукичев A.B. Регуляторные пептиды нейтрофилов (нейтрофилокины) // Иммунология.-1995,N4.-С.40-45.

25. Долгушин И.Ж., Зурочка A.B., Зберт Л.Я. и др. Изучение влияния нейтрофилокинов на иммунные реакции организма при инфекции/ /Матер. VII съезда Всерос. общ. эпидемиол., микробиол. и паразитов . -Москва, 1997.-Т.1.-С,87-88.

26. Долгушин И.И., Колесников О.Л., Волчегорский И.А. и др. Нейтрофилокик как неспецифический иммуностимулятор//Иммуноло-гия.-1997,N3.-С.24-25.

27. Исупов И. В., Ляпин М.Н., Суриков H.H. Изучение взаимодействия чумного микроба in vitro с макрофагами селезенки грызунов/Литогенез, аллергия и иммунитет к возб, особо опасн. инф.-Саратов, 1982.-С.50-57.

28. Калиниченко Т.В., дозморов И.М., Сидоров И.А., Свирщево-кая Е.В. Роль цитокинов в регуляции взаимодействия между Т-хелпе-рами 1 и 2 на клональном уровне//Иммунология.-1996,N3.-С.25-29.

29. Кашуба Э, А., Дроздова Т.Г., Юшкова И. Ю., Дурягина З.В. Функциональное состояние системы нейтрофил-моноцит при генерализованных формах менингококковой инфекции у детей//1урн. микроби-ол., эпидемиол., иммунобиол.-1994,N6.-С.84-86.

30. Кетлинский С.А,, Калинина Н.М. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета//Иммунология. -1995, N3, -С,30-44.

31. Кетлинский С.А., Симбирцев A.C., Воробьев A.A. Эндогенные иммуномодуляторы.-С.-Петербург: Гиппократ, 1992.-256 с.

32. Киселев Ю.А., ИсинЖ.М., Тугамбаев Т.И., Дмитровский A.M. Зависимость индуцирующего действия антигенов Yersinia pestis на синтез и продукцию кахектина мононуклеарными фагоцитами мы-шей//Журн. микробиол., зпидемиол., иммунобиол.-1993,N6.-С.81-82.

33. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В. Иммуноцитокины и локальная иммунокоррекция//Иммунология.-1995(a).-N1.-C.4-7.

34. Ковальчук Л.В., Ганковская Л,В., Крайнева I.A. и др. Естественный комплекс цитокинов в лечении проникающих ранений роговицы глаза кролика в эксперименте//Бюл. экспер. биол. и мед,-1993,N3,-С.284-286=

35. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Соколова Е.В., Титовец

36. P.E. Цитокины в регуляции противоопухолевой активности макрофагов; экспериментальное обоснование адаптивной макрофаготерапии при злокачественном росте//йммунология.-1995(б).-N3.-С.52-54.

37. Ковальчук Л.В., Хорева М.В., Иванюшко Т.П. Комплекс естественных иммунопептидов в лечении раневого процесса//! Съезд иммунол. России: Тез. докл.-Новосибирск, 1992.-С.220.

38. Колесников О.Л., Волчегорский И.А., Цейликман В.Э. и др. Нейтрофилокины как индукторы отресоа//Еюл. эксперим. биол. и мед.-1994,N3.-С.257-258.

39. Конусов В.Г., Симбирцев A.C., Кетлинский С.А. Влияние рекомбинантного интерлейкина-1 на подвижность нейтрофилов//I Съезд иммунол. России; Тез. докл.-Новосибирск, 1992.-С.236.

40. Коробков Г.Г., Борсук Г.И. Фагоцитарная реакция лейкоцитов крови как показатель иммунитета к чуме//Микробиол. и иммунол. особо опасн. инф.-Саратов, 1964.-С.149-150.

41. Коробков Г.Г., Борсук Г.И., Лясоцкий Л.Л. Некоторые аспекты иммунологии чумы // Пробл. особо опасн. инф.-1973,-Вып.1(29).-С.59-83.

42. Коробков Г.Г., Борсук Г.И., Самойлова Л.М. Изучение завершенности фагоцитарной реакции в процессе противочумной иммуни-зации//Микробиол. и иммунол. особо опасн. инф.-Саратов, 1964.-С.144-149.

43. Кулинокий В.И., Колесниченко Л.С. Актуальные и дискуссионные аспекты гормонологии//Биохимия.-1997.-Т.625Вып.10.-С.1369-1372.

44. Ледванов М.Ю., Емельянова Н.В. Пронин A.B. и др. Индукция интерлейкина-1 различными антигенами и штаммами бактерии Yersinia pestis у иммунизированных мышей//1урн. микообиол., зпидеми-ол., иммунобиол.-1993,N4.-С,10-13.

45. Маянский А.Н. Актуальные проблемы фагоцитоза/УМоделиро-вание и клинич. характер, фагоцитар. реакций,-Горький, 1989,-С.3.

46. Маянский А.Н, Современная эволюция идеи И.И, Мечникова о внутрисосудистом воспалении//Иммунология,-1995.-N4.-С.8-14.

47. Маянский Д.Н, Проблемы хронического воспаления в современной патофизиологии//Пат, физиол.-1994,-N2,-0,51-55,

48. Медуницин Н.В. Повышенная чувствительность замедленного типа.-М.: Медицина, 1983.-132 с,

49. Медуницин Н.В. Цитокины и аллергия, опосредованная I ^//Иммунология. -1993. -N5. -С, 11-12,

50. Мечников И.И. Невосприимчивость в инфекционных болезнях." М.: Медгиз, 1947,-698 с.

51. Михайлова А.А, Участие медиаторов иммунитета в нейроим-мунном взаимодейотвии//Иммунология.-1992.-N4.-С.4-8.

52. Морозов В.Г,, Хавинсон В.Х. Выделение и изучение свойств регуляторных пептидов иммунной системы//I Всесоюз. иммунол, съезд: Тез, докл,-Москва, 1989.-Т.1,-С,72,

53. Нестерова Ж»В.,Колесникова Н.В., Чудилова Г.А, и др. Влияние рекомбинантного интерлейкина 10 на функции интактных и поврежденных нейтрофильных гранулоцитов в системе in vivo//MMMy-нология.- 1993.-N7-8,-0,36-39,

54. Останин A.A., Леплина О.Ю., Шевела Е.Я. и др. Изменение иммунологических показателей у онкологических больных при проведении адоптивной иммунотерапии//Иммунология.-1996.-N1.-С.29-32.

55. Панков Ю.А. 0 фундаментальной эндокринологии//Биохи-мия.-1997,-Т,62,Вып.10.-С.1373-1375.

56. Петров О,В., Павлкж А,С,, Ковадьчук Л.В. и др. Жнтерлей-кинзависимые иммунодефициты человека//Иммуноло-гия.-1987.-N4.-С.20-24.

57. Петяев Ж.М., Кульберг А,Я., Сычева Ж.М. Регуляция Fe-рецепторами метаболизма активированного кислорода перитонеальных макрофагов//Жммунология.-1988.-N1.-C.35-37,

58. Печковский Д.В., Пстапнев М.П., Вознюк А,В, Усиление бактерицидности, но не фагоцитарной активности нейтрофилов человека под действием интерлейкина-6//Жммунология.-1993.-N6.-С.29-30.

59. Пигаревский В.Е, Зернистые лейкоциты и их свойства.-М.: Медицина, 1978.-127 с,

60. Покровский В.И., Годованный Б.А., Ющук Н.Д, Актуальные вопросы клеточного иммунитета при бактериальных инфекциях//1урн. микробиол,, зпидемиол., иммунобиол.-1985,-N10,-С,95-102.

61. Потапыев M,П. В-лимфоциты. Цитокинобразующая функ-ция//Иммунология.-1994.-N4.-C.4-8.

62. Потапнев М.П. Цитокиновая сеть нейтрофилов при воспалении/ /Иммунология ,-1995,-N4,-С.34-40.

63. Потапнев М.П., Печковский Д.В. Влияние цитокинов воспаления на фагоцитоз и бактерицидную активность нейтрофилов челове-ка//Иммунология.-1992.~N3.-C.34-36.

64. Родионов C.B., Щербухин В.В., Николаева Е.Н., Земсков В.М. Перераспределение субпопуляций перитонеальных макрофагов, несущих Fc~рецепторы, под влиянием иммуномодудятора//!урн. микро-биол.зпидемиол., иммунобиол. -1988. N1. - С. 97-107.

65. Ромашевокая Е.И., Хасман З.Л. Роль разных фракций прилипающих клеток селезенки в индукции антителообразования у облученных мышей//Журн. микробиол., зпидемиол., иммунобиол. -1980. -N8. -С. 91-94.

66. Ромашевокая Е.И., Хасман З.Л., Каулен Д.Р. Влияние разных субклассов перитонеальных макрофагов на антителообразоваыие в культуре in ¥1уо//Иммунология.-1981,-N2,-С,21-25.

67. Саяпина Л.В. Пролиферация и популяционный состав иммуно-компетентных клеток в динамике вакцинального и инфекционного процессов при чуме: Автореф. дис. . канд. мед. наук.- Саратов, 1991.-19 о,

68. Стрелков Р.Б. Статистические таблицы для экспресс-обработки экспериментального и клинического материала.- Обнинск,1980.-15 с.

69. Отукова Н.Ю., Шведун Г.П., Фиротова В,В. и др. Значение процессов фагоцитоза в формировании противочумного иммуните-та//Матер. науч.-практ. конф., посвящ. 100-лет. образов, противо-чум. службы России: Тез. докл.-Саратов, 1997,-Т.1.-С.245.

70. Суслов А.П. Макрофаги и противоопухолевый иммунитет/Итоги науки и техники/Онкология,-М.:ВИНИТИ, 1990(а).-Т.19.-С.56-60.

71. Суслов А.П. Фактор некроза опухолей (ФНО) структура и функции//Итоги науки и техники/Онкология.-М.:ВИНИТИ,1.Qpf'fn -Т -1Q ~Г) рД-ЯЙ

72. JL --J V, W Ja ¿ a */ » •• i LJS. L-'5J e

73. Тюкавкина С.Ю. Механизмы взаимодействия коклюшных препаратов с клетками системы мононуклеарных фагоцитов и их роль в формировании противококлюшного иммунитета: Автореф, дис. канд. мед. наук.-Ростов-н/Д, 1994,-22 с.

74. Учитель И.Я. Макрофаги в иммунитете.-М.: Медицине -i Q7P; -"Ppn пdl * -i. D i --J t J-! W W •

75. Фрейдлин И,С, Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуляторной сети//Иммунология.-1995,-N3,-С.44-48,

76. Фрейдлин И.С., Артеменко Н.К., Фрейдлин Г.С. Скрининг иммуномодуляторов с использованием мононуклеарных фагоцитов//Ан-тибиотики и химиотер.-1988.-Т.33,N12.-С.906-909.

77. Щепеткин И.А,, Чердынцева Н.В., Васильев Н.В. Регуляция функциональной активности нейтрофилов цитокинами//Иммуноло~ гия.-1994.-N1.-C.4-?.

78. Ярилин A.A. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патодогии//Иммунодогия.-1997.-N5.-С.7-14.

79. НО. Agace W., Hedges S., Andersson H, et al. Selective cytokine production by epithelial cells following1 exposure to Escherichia coli//Infect. Immun.-1993.-Vol.61,N2.-P.602-609.

80. Alexander H.R., Doherty G.M., Buresh u.M. et al. A recombinant human receptor antagonist to interleukin 1 improves survival after lethal endotoxemia in mioe//J. Exp. Med.-1991,-Vol.173,N4.-P.1029-1035.

81. Atkins E. Fever: historical aspects//Interleukin-1,inflammaion and disease/Eds. R.Bomford, B.Henderson.-Amsterdam qrq ~p я--1й

82. Bagglolini M. Biological properties of NAP-1/11-8 and related ohemotactio oytokines//J. Cell. Biol. -1991.-Suppl.,N15E.-P.148.

83. Baggiolini M., Clark-Lewis J. Interleukin-8, a chemo-tactio and inflammatory cytokine//FEBS Lett.-1992.-Vol.307,N1.-P.97-100.

84. Baggiolini M.B., Dewald B., Moser B. Interleukin-8 and related ohemotaotio cytokines C-X-C and C-C ohemokines//Adv. Immunol.-1994.-Vol.55.-P.97-105.

85. Balkwill F. Cytokines in health and disease//Immunology Today.-1993.-Vol.14,N4,-P.149-150.

86. Baner I., Baner T.M., Kalb T. et al. Regulation of inter leukin 6 receptor expression in human monocytes and monocyte derived macrophages. Comparison with the expression in human he-patocytes//J, Exp. Med.-1989.-Vol.170,N5.-P.1537-1550.

87. Ben-Baruch A., Miohiel D.F., Oppenheim J.J. Signals and receptors involved in recruitment of inflammatory eelIs//J. Biol, Chem.-1995.-Vol.270,N20.-P.-11703-11706.

88. Berkrnan N., John M., Roesems G. et al. Inhibition of macrophage inflammatory protein lex expression by IL-10. Differential sensitivities in human blood monocytes and alveolar macrophages// J . Immunol,-1995.-Vol.155,N9.-P.4412-4418,

89. Berkow R,L., Wang D., Larrick J.W, et al. Enhancement of neutrophil superoxide production by preincubation with recombinant human tumor necrosis faotor//J, Immunol .-1987.-Vol.139,N11.-P.3783-3791.

90. Boraschi D., Niederhuber J.E. Regulation of macrophage supression and oytotoxity by interferon: role of la bearing macrophages// J . Immunol,-1982.-Vol.129,N5.-P.1854-1858,

91. Copeland K.T., Heeney J.L. T helper cell activation and human retroviral pathogenesis//Microbiol. Rev.-1995.-Vol. 60, N4.--P,724-742,

92. Cosman D. The hematopoietin receptor superfamily//Cyto-kine.-1993,-Vol.5,N1.-P.95-106.

93. Dalton D.K., Pitts-Meek S., Keshav I.S. et al. Multiple defects in immune cell function in mice with disrupted interferon- if genes//Science.-1993.-Vol.259,M5102.-P.1739-1742.

94. Dantzer R, L'immunologle monte a la tete//J. intern. Med,-1992.-Vol,245,N1.-P.33-36.

95. Davatelis G., Wolpe S.D. Sherry EL et al. Macrophage inflammatory protein-1: a prostaglandin-independent endogenous perogen/ZSoience,-1989,-Vol,243,N4894,-P,1066-1068,

96. Denis M. Growth of Mycobacterium avium in human monocytes: identification of cytokines which reduce and enhance intracellular microbial growth/ZEur,J,Immunol,-1991.-Vol.21,N2.-P.391-395,

97. Denis M., Campbell D., Gregg E.O. Cytokne stimulation of parasitic and microbial growthZZRes, Microbiol, -1991 (a) . -Vol. 142,N9. -P. 979-983,

98. Denis M,, Campbell D., Gregg E.O. Interleukin-2 and granulocyte-macrophage colony-stimulation factor stimulate growth of a virulent strain of Escherichia coli//Infect. Im-mun,-1991(o),-Vol,59,N5.~P,1853-1856.

99. Dinarello C,A. Fever//Interleukin-1, inflamination and disease/Eds. R.Bomford, B,Henderson.-Amsterdam, 1989,-P.175-190.

100. Dinarello C,A, Interleukin-1//Adv. Pharmacol. -1994, -Vol. 25. -P. 21-51.

101. Dieu J., Serbousek D., Blanchard D.K. Release of tumornecrosis factor by human polymorphonuclear leukooytes//Blo-od.-1990.-Vol.76,N7.-P.1405-1409.

102. Durum S.K., Oppenhelm J.J. Proinflammatory cytokines and irnrnunity//Fundarnental Immunology/Ed. W. Paul. -New York, 1993.-P.801-835.

103. Eisenberg S.P., Evans R.J., Arena W.P. et al. Primary structure and functional expression from complementary DNA of a human interleukin-1 receptor ant agonist//Nature, -1990, -Vol .343,N6256.-P.341-346.

104. Evans T.J., Cohen J, Immunotherapy of sepsis//J. Med. Microbiol.-1993.-Vol.38,N4,-P.237-239.

105. Faocioli L.H., Souza G.E., Cunha F.Q. et al, Recombinant interleukin-1 and tumor necrosis factor induce neutrophil migration "in vivo" by indirect mechanisms/ZAgents Action. -1990. -Vol . 30, N3-4. -P. 344-349.

106. Ferrick D.A., Lohoff M., Mittrucker H.-W. et al. Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) is essential for the generation of a T-helper-1 (Th-1) immune response//Tolerance and Autoimmunity. -Keystone, 1997.-P.37.

107. Finnegan A., Roebuck K.A., Nakai B.E. et al. IL-10 cooperates with TNF-ce to activate HIV-1 from latently and acutely infected cells of monocyte/macrophage lineage//J. Immunol .-1996,-Vol,156,N2.-P,841-851.

108. Fiorentino p.F., Zlotnik A., Mosmann T.R. et al. IL-10inhibits cytokine production by activated macrophages//J. Immunol .-1991.-Vol.147j N11.-P.3815-3826,

109. Fleischman J., Golde D.W.5 Weisbart R.H., Gasson J.u. Granulocyte macrophage colony-stimulating factor enhances phagocytosis of bacteria by human neutrophils//Blo-od.-1986.-Vol.68,N3.-P.708-711.

110. Gamble I.R., Harlan I.M., Klebanoff S.J., Vadas M.A. Stimulation of the adherence of neutrophils to umbilical vein endothelium by human recombinant tumor necrosis factor/ZProc, Natl, Acad, Sei. USA.-1985.-Vol,82,N24.-P.8667-8671.

111. Gause A,, Sahin U., Pfeundschuh M. Neue Perspektiven In der Immuntherapie: Adhasionsmolekule, Superantigene, Hitze-Schock Proteine und Zytokinantagonisten//Dtsch, Med, Woohens-chr.-1992.-Bd.117,N46,-S,1764-1773.

112. Gerard C., Bryuns C., Marchant A. et al, Interleukin 10 reduces the release of tumor necrosis factor and prevents lethality in experimental endotoxemIa//J. Exp. Med,-1993.-Vol.177,N1.-P.547-553.

113. Goeddell D.V. Signal transduction by TNF reoeptors/ZTo-lerance and Autoimmunity.-Keystone, 1997.-P.7.

114. Goh K,, Fukasawa S., Kawa Y. Production of IL-ltx and ß by human peripheral polymorphonuclear neutrophiIs//Int. Arch, Allergy Appl. Immunol,-1989.-Vol.88,N3,-P.297-302,

115. Goldman M., Thierry V, L'interleukine 10, une nouvelle cytokine immunosupressive et anti-f larnmatoi-re//Med.Sei,-1993.-Vol.9,N4.-P.453-455.

116. Gol-Winkler R, Parakrine action of transforming growth faotors//Olin. Endocrinol, Metab.-1986.-Vol.15,N1.-P.99-115.

117. Gorcsynski R.M., Mc Rae S,, Jennings I, A novel rolefor macrophage: antigen discrimination of distinct carbohydrate bonds//Cell. Immunol.-1979.-Vol.45,N2.-P.276-294.

118. Goto F., Goto K., Ohkawara M. et al. Purification and partial sequence of rabbit polymorphonuclear leukocyte-derived lymphocyte proliferation potentiating factor resembling IL 18//J. Immunol.- 1988.-Vol.140,N4.-P.1153-1158.

119. Goto F., Nakamura S., Goto K., Yoshinaga M, Production of a lymphocyte proliferating potentiating factor by purified polymorphonuclear leukocytes from mice and rabbits//Immunology. -1984. -Vol .53,N5.-P,683-692.

120. Gura T, Chemokines take center stage in inflammatory iilsz/Soience.-1996.-Vol.272,N5264.-P.954-956.

121. Haanen J.B.A.G., de Waal Malefit R., Res P.C.M, et al. Selection of a human T helper type 1-like T cell subset'by Mycobacteria// J, Exp. Med,-1991,-Vol.174,N2,-P.583-592.

122. Hannum C.H., Wilcox C.J,, Arena W.P. et al, Interleu-kin-1 receptor antagonist activity of a human interleukin-1 inhi-bitor/ZNature.-1990.-Vol.343,N6256.-P.336-340,

123. Harris S, Transgenic animals in rheumatoid arthritis research/ZMechanism and models in rheumatoid arthritis/Eds, B,Henderson, J,Edwards, E.Pettipher.-London, 1995,-P.507-525.

124. Henderson B. Interleukin-lZZText book of immunopharma-cologyZEds. M.Dale, J.Foreman, T.-P.Fan,-Oxford, 1994.-P,193-199,

125. Henderson B. Therapeutic modulation of cytokinesZZArin,

126. Rheum. Dis.-1995.-Vol.54,N8.-P.519-523.

127. Henderson B., Poole S. Modulation of cytokine function: therapeutic applications//Adv. Pharmacol.-1994.-Vol.25.-P.53-115.

128. Henderson B., Poole S., Wilson M, Bacterial modulins: a novel class of virulence factors which cause host tissue pathology by inducing cytokine synthesis/ZMicrobiol. Rev.-1996.-Vol.60,N2.-P.316-341.

129. Hirohito K., Tsukasa 0., Vochio 0, et al. Granulocyte/macrophage colony-stimulating factor and interleukin 3 release from human peripheral blood eosinophils and neutrophils//J, Exp, Med.-1991.-Vol,174,N3.-P,745-748.

130. Jinquan T,, Delenran B., Gesser B. et al. Regulation of human T lymphocyte chemotaxis in vitro by T cell-derived cytokines IL-2, IFN-r, IL-10 and IL-13//J, Immunol ,-1995,-Vol.154,N8.-P.3742-3752.

131. Kathleen T.M., Taylor L., Prado G. et al. Functional and ligand binding specificity of the rabbit neutrophil IL-8 receptor// J. Immunol,-1994,-Vol,154,N5.-P,2496-2500.

132. Kishimoto T., Akira S., Taga I. Interleukin-6 and its receptor: a paradigm for cytokines/ZSoience.-1992.-Vol.258,N5082.-P.593-597.

133. Kishimoto T., Rothlein R. Integrins, ICAMs and selek-tins role and regulation of adhesion molecules in neutrophil recruitment to inflammatory sites//Adv. Pharmacol. -1994. -Vol. 25. -P. 117-169.

134. Kjeldsen M.P., Holmstrup P., Bendzten R. Marginal periodontitis and cytokines: a review of the literature//!". Periodontal .-1993.-Vol.64,N11.-P.1013-1022.

135. Kuhn R., Lohler J., Rennick D. et al. Interleu-kin-lu-defioient mice develop chronic enteroooli-tis//Cell.-1993.-Vol.75,N2.-P.263-274.

136. Kuhns D.B., Gallin J.I. Increased cell-associated IL-8 in human exudative and A 23187-treated peripheral blood neutrop-hils//J.Immunol.-1995.-Vol.154,N11.-P.6556-6562.

137. Ku11berg B.-J., Vogels M.T.E., van der Meer J.W.M, Immunomodulators in bacterial and fungal infections. A review of their therapeutic potential//Clin. Immunot-her.-1994.-Vol.1,N1.-P.43-55.

138. Lantz M., Bjomberg F., Olsson I., Richter J. Adherence of neutrophils induces release of soluble tumor necrosis factor receptor forms//J. Immunol.-1994.-Vol.152,N3.-P.1362-1369.

139. Miller E.J., Brelsford W.G. Interleukin 8: The major neutrophil chemotaxin in a case of pseudogout//J. Rheumatol.-1993.-Vol. 20,N7.-P. 1250-1252.

140. Miller M.D., Krangel M.S. Biology and biochemiatry of the chemokines: a family of chemotactio and inflammatory cytoki-nes//Crit. Rev. Immunol.-1992.-Vol.12,N1.-P.17-46.

141. Miller G.A., Morachan P.S. Functional and biochemical heterogeneity among subpopulations of rat and mouse peritoneal macrophages//J. Reticuloendothel. Soc.-1982.-Vol.32,N2.-P.111-124,

142. Mitsuyama K,, Toyonaga A,, Sasaki E. et al. IL-8 asan important chemoattractant for neutrophils in ulcerative colitis and Crohn's disease // Clin. Exp, Immunol.-1994.-Vol.96,N3.-P,432-436.

143. Moreau J.L., Chastanger P., Tanaka T. et al. Control of the IL-2 responsiveness of B lymphocytes by IL-2 and IL-4//J. Immunol .-1995.-Vol.155,N7.-P.3401-3408.

144. Mosmann T.R., Fong T.A.T. Specific assays for cytokine production by T eelIs//J.Immunol.Meth.-1989.-Vol.116,Nl.-P.115-138.

145. Nakagawara A,, Nathan C.F., Cohn Z.A. Hydrogen peroxide metabolism in human monocytes during differentiation in vitro//J. Clin. Invest.-1981.-Vol.68,N3.-P.1243-1252,

146. Nathan C.F., Murray H.W., Cohn Z. The macrophage as an effector cell//N. Engl. J. Med,-1980,-Vol.303,N11.-P.622-626.

147. Nelson D.S., Boyden S,V, The loss of macrophages from peritoneal exudates following the injection of antigens into guinea pigs with delayed type hypersensitivity//Immunology, -1963, -Vol.6,N3.-P,264-275,

148. Nelson R.D., Qnie P.G., Simons R.Z. Chemotaxis under agarose; a new and simple method for measuring chemotaxis and spontaneous migration of human polymorphonuclear leukocytes and monocytes//J, Immunol.-1975,-Vol,115,N6.-P,1650-1656,

149. Neumann C. Sorg C, Seguential expression of functions during macrophage differentiation in murine bone marrow liquid cultures/ZEur, J, Immunol.-1980.-Vol.10,N11.-P.834-940.

150. Nicholson L.B., Waldner H., Carrizosa A.M., Kuchroo V.K. Superagonist: Altered peptides that hyperstimulate T cells and change their cytokine profile//Tolerance and Autoimmunity.-Keystone, 1997,-P.22,

151. Noach L.A., Bosma N.B., Jansen J, et al. Mucosal tumor necrosis factor-ex, interleukin-ls, and interleukin-8 production in patients with Helicobacter pylori infection//Scand. J, Gastroenterol .-1994.-Vol.29,N5.-P.425-429.

152. Norihiza J. The effects of interleukin-8 on the oxygen metabolism of human polymorphonuclear leukooytes//Med. J. Hiroshima Univ.-1993.-Vol,41,N5.-P.295-304.

153. Panzer S,, Madden M., Matsuki K. Interaction of IL-63, IL-6 and tumor necrosis factor-alpha (TNF-oc) in human T cells activated by murine antigenes/ZClin. Exp, Immunol ,-1993.-Vol,93,N3.-P.471-478.

154. Rappolee D.A., Mark D., Banda M.J., Werb Z, Wound macrophages express TGF-ot and other growth factors in vivo: analysis by mRNA phenotyping/ZSoience,-1988.-Vol.241,N4866,-P,708-712.

155. Sadlack B., Merz H., Schorle H. et al. Ulcerative colitis-like disease In mice with a disrupted interleukin-2 ge-ne//Cell.-1993.-Vol.75,N2.-P.253-261.

156. Schroden J.M,, Mrowietz U., Morita E. Christophers E. Purification and partial biochemical characterization of a human monocyte-derived, neutrophil-activating peptide that lacks inter-leukin 1 activity//J. Immunol.-1987.-Vol.139,N10.-P.3474-3483.

157. Segal S., Tzehoval E., Bactselier P. et al. The peritoneal antigen-presenting macrophage: Characteristics and regulation of maturation and function//Heterogeneity of mononuclear phagocytes/Eds. 0,Forster, M.Landy.-New York, 1981.-P.224-231,

158. Shalaby M.R., Aggarwal B.B., Rinderknecht E. et al. Activation of human polymorphonuclear neutrophils by tumor necrosis factor-alpha//J, Leukocyte Biol.-1987.-Vol.41,N3.-P.196-204.

159. Shalaby M,, Waage A., Aarden L., Espevik T. Endotoxin, tumor necrosis factor-« and interleukin 1 induce interleukin 6 production In vivo//Clin. Immunol. Immunopat-hol.-1989.-Vol.53,N3,-P.488-498.

160. Shieh J.-H., Peterson R.H.F., Moore M,A.S, Modulation of granulocyte colony-stimulating factor receptors on murine peritoneal exudate macrophages by tumor necrosis factor-«//J. Immunol .-1991.-Vol.146,N8,-P.2648-2653,

161. Shigeatsu E., Katsuya I., Yoshihiro I. et al. Two types of septic shock classified by the plasma levels of cytokines and endotoxin//Giro. Shock.-1992.-Vol.38,N4.-P.264-274.

162. Sibille V.5 Reynolds H. State of the art: macrophages and polymorphonuclear neutrophils in lung defence and intfu-ry//Amer. Rev. Respir. Dis.-1990.-Vol.141,N2.-P.471-501.

163. Smith R.S. The macrophage theory of depression//Med. Hypotheses.-1991(a).-Vol.35,N4.-P.298-306.

164. Smith R.S. Is schizophrenia caused by excessive production of interleukin-2 and interleukin-2 receptors by gastrointestinal lymphocytes?//Med. Hypotheses,-1991(0)»-Vol.34,N3.-P.225-229.

165. Smith R.S. The cytokine theory of headaohe//Med. Hypotheses .-1992(a).-Vol.39,N2.-P.168-174.

166. Smith R.S. A comprehensive macrophage-T-lymphocyte theory of sen i zophren i a//Med. Hypotheses.-1992(6).-Vol.39,N3.-P.248-257.

167. Smith W.B., Noack L.M., Vedas M.A., Gamble J.R. TGF-S reduces endothelial IL-8 production and neutrophil transendothe-lial migration//J. Cell Biochem.-1994.-Suppl.18A.-P.321.

168. Sonozaki H., Cohen S. The macrophage disappearance reaction: mediation of a soluble lymphocyte-derived faotor//Cell Immunol.-1971.-Vol.2,N3.-P.341-352.

169. Sporn M.B., Roberts A.B. Peptide growth factors are multifunctional/ZNature.-1988.-Vol.332,N6161.-P.217-219.

170. Tanaka T., Akira S., Yoshida K. et al. Targeted disruption of the NF-IL-6 gene discloses its essential role in bacteria killing and tumor cytotoxicity by macrophages//Cel1.-1995.-Vol.80,N2.-P.353-361.

171. E.J, Neutrophil ohemotactio factor produced by 1ipopolysaccharide (LPS)-stimulated human blood mononuclear leucocytes partial characterisation and separation from interleukin 1//J. Immunol .-1987.-Vol.139,N3.-P.788-793.

172. Zeman K. Wspotozesne poglady na role granulooytow obo-3etnochtonnych (neutrofilow) w procesach zapalnyoh, I. Patofizio-logiozne podstawy udzialu neutrofilow w zapaleniu//J, Immunol .-1993(a).-Vol,18,N1.-P.3-21.

173. Zeman K. Wspotozesne poglady na role granulooytow obo-3etnochtonnych (neutrofilow) w procesach zapalnich. II. Wspotzar leznosci pomiedzy neutrofi lami a komorkami i productami odpowied-zi odpornoscioweo//J, Immunol.-1993(6).-Vol,18,N1.-P.23-44.

174. Zimecki M. Cytokiny w regulacji odpowiedzi immunolo-gicznen//Kosmos (RP).-1992.-Vol.41,N4.-P.439-449.

175. Zwilling BlS., Campolito L.B., Reiches N.A. Alveolar macrophage subpopulations identified by differential centrifuga-tion on a discontinuous albumin density gradient//Amer. Rev. Res-pir. Dis.-1982,-Vol,125,N4,-P.448-452.