Участие многофункционального белка YB-1 в регуляции Р-гликопротеина и в ответе клетки на стресс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Вайман, Андрей Владимирович

• Вайман, Андрей Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Вайман, Андрей Владимирович

Введение.

I. Обзор литературы.il

1.1. Мультифункциональный белок YB-1.И

1.1.1. Структура YB-1.И

1.1.2. Функции YB-1.

1.1.3. YB-1 и пролиферация клеток.

1.1.4. Активация YB-1 при стрессе.

1.2. Множественная лекарственная устойчивость опухолевых клеток.

1.2.1. Лекарственная устойчивость, обусловленная снижением накопления препарата внутри клетки.

1.2.1.1. Множественная лекарственная устойчивость, обусловленная

Р-гликопротеином.

1.2.1.2. Множественная лекарственная устойчивость, определяемая белками семейства MRP.-.

1.2.1.3. Множественная лекарственная устойчивость и белок BCRP.

1.2.1.4. Множественная лекарственная устойчивость, определяемая белком LRP.

1.3. Роль белка YB-1 в регуляции множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток.

1.3.1. Экспрессия и внутриклеточная локализация YB-1 в культурах опухолевых клеток, резистентных к химиопрепаратам.

1.3.2. Исследование участия YB-1 в регуляции генов и белков МЛУ.

1.3.3. Исследование взаимосвязи между уровнем экспрессии и внутриклеточной локализацией белка YB-1 с экспрессией белка Pgp и прогнозом лечения больных.

IL Материалы и методы.

11.1. Линии клеток, использованные в работе.

11.2. Препапаты, использованные в работе.

11.3. Выделение РНК и ОТ-ПЦР.

11.4. Иммуноцитохимическое определение экспрессии YB-1 и белков МЛУ.

11.5. Иммуноцитохимическое определение внутриклеточной локализации

YB-1 и окраска клеток на белки МЛУ.

11.6. Иммунологический анализ клеточныхлизатов (Western-blot анализ).

II. 7. Трансфекция клеток КВЗ-1 и НСТ116 кДНК YB-1.

II. 8. Синтез и трансфекция siRNA/YB-1.

II.9. Определение чувствительности клеток к цитостатикам.

III. Результаты.

III.1. Исследование экспрессии и локализации белка YB-1 в культивируемых линиях чувствительных и резистентных к лекарственным препаратам опухолевых клеток.

III. 1. 1. Модели исследования.

III. 1.2. Анализ уровня экспрессии мРНК/белка YB-1 в клетках с разными уровнями лекарственной устойчивости.

III. 1.3. Исследование локализации белка YB-1 в парах чувствительных и резистентных опухолевых клеток.

III. 1.4. Сопоставление уровня экспрессии и локализации белка YB-1 в парах чувствительных и резистентных опухолевых клеток с экспрессией генов/белков МЛУ.

III. 1.4.1. Анализ уровня экспрессии MDRl/Pgp.

III. 1.4.2. Определение уровня экспрессии генов/белков MRP 1, BCRP, LRP.

111.2. Влияние повышения экспрессии YB-1 на экспрессию генов/белков МЛУ и лекарственную устойчивость опухолевых клеток.

111.2.1. Исследование влияния транзиторного введения YBна лекарственную устойчивость опухолевых клеток.

111.2.2. Исследование влияния транзиторного введения YB-1 на экспрессию

Pgp в условиях действия цитостатиков.

111.2.3. Анализ влияния стабильной гиперэкспрессии YB-1 на экспрессию генов/белков МЛУ.

111.2.4. Определение скорости пролиферации клонов клеток с гиперэкспрессией YB-1.

111.3. Влияние подавления экпрессии YB-1 на экспрессию генов/белков

МЛУ (эффекты siRNA/YB-1). j III.3.1. Подавление экспрессии эндогенного YB-1 и экспрессия генов МЛУ.

III. 3.2. Влияние подавления эндогенного YB-1 на пролиферацию клеток.

111.4. Влияние химиотерапевтических препаратов на локализацию YBв клетках и на экспрессию генов МЛУ.

III.4.1. Влияние препаратов на локализацию YB-1 в клетках.

III. 4.2. Активация экспрессии генов МЛУ под действием цитостатиков.

111.5. Определение уровня экспрессии мРНК YB-1 и белков МЛУ у больных острым нелимфобластным лейкозом (ОНЛЛ).

IV, Обсуждение.

V, Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Участие многофункционального белка YB-1 в регуляции Р-гликопротеина и в ответе клетки на стресс»

Множественная лекарственная устойчивость опухолевых клеток (МЛУ) является серьезным препятствием на пути химиотерапии злокачественных новообразований. МЛУ - это система защиты популяции опухолевых клеток от множества лекарств, различающихся по химической структуре и механизму действия на клетку (Glavinas Н. et al2004; Ставровская А., 2000). Повышенная активность белка Р-гликопротеина (Pgp) была первым обнаруженным механизмом, определяющим МЛУ. В последующие годы были найдены другие молекулярные механизмы МЛУ и стало ясно, что лекарственная устойчивость опухолевых клеток — сложный феномен, в основе которого лежит целый ряд молекулярных изменений, и что в одной и той же клетке могут функционировать одновременно несколько механизмов, модулирующих чувствительность опухолевых клеток к лечению. Таким образом, на первый план в области изучении МЛУ выходят исследования молекулярных механизмов' координированной регуляции разных защитных систем клетки, которые могут определять многофакторную МЛУ. С целью решения этой задачи мы исследовали роль белка YB-1 в регуляции МЛУ.

YB-1 клеток млекопитающих является членом мульти функционально го семейства ДНК/РНК связывающих белков с эволюционно консервативным доменом холодового шока (Kohno К. et al., 2003; Evdokimova V. et al., 1999). В бактериальных клетках члены этого семейства, известные как главные белки холодового шока, определяют адаптацию бактерий к росту при низких температурах. YB-1 млекопитающих, связываясь с ДНК, функционирует в качестве фактора транскрипции и регулирует экспрессию генов, содержащих Y-бокс, в том числе, экспрессию гена главного комплекса гистосовместимости II (Didier D. et al., 1988), гена множественной лекарственной устойчивости MDR1 (Ohga Т. et al., 1998) и генов циклинов (Jurchott К. et al., 2003). Наряду с этим, YB-1 участвует в репарации, рекомбинации и репликации

ДНК (Gaudreault I. et al., 2004). Взаимодействуя с мРНК, этот белок принимает участие в альтернативном сплайсинге мРНК в ядре (Raffetseder U. et al., 2003), является основным упаковочным белком для мРНК в цитоплазме и регулирует время жизни (Evdokimova V. et al., 2001) и матричную активность мРНК в белковом синтезе (Evdokimova V. et 1998). Показано, что YB-1 может быть вовлечен в определение устойчивости клеток к действию ионизирующей радиации и химических агентов, повреждающих ДНК (Ohga Т. et al., 1996). Высказывают мнение, что он может претендовать на роль раннего маркера множественной лекарственной устойчивости опухолей.

В феномене МЛУ опухолевых клеток могут играть роль как повышение количества YB-1 в клетках, так и его перемещение из цитоплазмы в ядра клеток (Kohno К. et al., 2003; Kuwano М. et al., 2004). В различных опухолях (раках молочной железы, раках легкого, остеосаркомах и др.) повышено количество клеток с ядерной локализацией YB-1 по сравнению с нормальными тканями, и найдено, что такое повышение коррелирует с неблагоприятным течением заболеваний и устойчивостью новообразований к терапии (Bargou R. et al., 1997; Shibahara К. et al., 2001). Показано, что ряд химиотерапевтических препаратов индуцирует перемещение YB-1 в ядра клеток (Ohga Т. et al., 1996). Найдено, что введение YB-1 в клетки рака молочной железы может приводить к гиперэкспрессии гена MDR1, кодирующего Pgp, и к возникновению МЛУ (Bargou R. et al., 1997). Однако роль YB-1 в возникновении и развитии МЛУ остается недостаточно ясной. В частности, отсутствуют систематизированные исследования резистентных опухолевых клеток. Немногочисленные работы, в которых сравнивались отдельные резистентные линии опухолевых клеток с соответствующими клетками дикого типа, показывают, что количество белка YB-1 повышено в ядрах культур резистентных клеток рака кишечника НСТ15, рака яичников KFr и рака молочной железы MCF-7/ADR по сравнению с их чувствительными вариантами (Stein U. et al., 2001; Yahata H. et al., 2002). После введения в культивируемые клетки GSEs (генетических супрессорных элементов) и последующего отбора в среде с цитостатиком культура клеток приобрела МЛУ, что сопровождалось увеличением уровня экспрессии мРНК нескольких генов, в том числе и YB-1 (Levenson V. et al., 2000). Неясно, однако, насколько часто связаны гиперэкспрессия и/или ядерная локализация YB-1 с конститутивной гиперэкспрессией генов и белков МЛУ, действительно ли гиперэкспрессия YB-1 в резистентных опухолевых клетках влияет одновременно на экспрессию нескольких разных генов МЛУ. Эти сведения позволили ли бы судить о том, вовлечен ли YB-1 в регуляцию сложной, многофакторной МЛУ. Нет данных относительно связи YB-1 с уровнем резистентности культур опухолевых клеток различного тканевого происхождения. Результаты таких опытов позволили бы оценить, насколько широко YB-1 участвует в формировании МЛУ, на каких этапах развития МЛУ необходимо участие YB-1. Недостаточно исследовано влияние химиотерапевтических препаратов разных типов на локализацию YB-1 в клетке и на экспрессию генов МЛУ.

Целью данной работы является исследование молекулярных механизмов регуляции экспрессии белков, определяющих множественную лекарственную устойчивость опухолевых клеток, при участии многофункционального белка YB-1.

В задачи данного исследования входило следующее:

- Исследовать уровень экспрессии и локализацию гена/белка YB-1 в шести парах чувствительных и резистентных клеточных линий различного гистогенеза.

- Исследовать взаимосвязь уровня экспрессии YB-1 в резистентных клетках с экспрессией генов/белков МЛУ: Pgp, MRP1, BCRP, LRP.

- Исследовать влияние повышенного уровня экспрессииYB-1 на возникновение лекарственной устойчивости опухолевых клеток.

- Исследовать влияние активации или подавления экспрессии УВ-1 на базальный уровень экспрессии нескольких генов/белков МЛУ.

- Исследовать влияние активации или подавления экспрессии УВ-1 на клеточную пролиферацию.

- Исследовать стресс-индуцированную транслокацию УВ-1 в ядра опухолевых клеток и активацию экспрессии генов МЛУ при воздействии на клетку химиотерапевтических препаратов.

Новизна: в настоящей работе впервые исследована взаимосвязь уровня экспрессии и локализации УВ-1 с экспрессией нескольких генов МЛУ, а также с уровнями лекарственной устойчивости клеток одновременно в достаточно большом наборе чувствительных и резистентных клеточных линий различного гистогенеза. Впервые показано, что хотя в резистентных линиях разного происхождения количество клеток с локализацией УВ-1 в ядрах повышено по сравнению с родительскими чувствительными вариантами, однако, это количество может значительно различаться в разных линиях. Впервые обнаружено, что уровень экспрессии УВ-1 в резистентных вариантах клеток повышен иногда, но не всегда и не коррелирует с уровнем лекарственной устойчивости клеток. Впервые показано, что повышение количества УВ-1 может коррелировать с повышенным уровнем экспрессии нескольких генов/белков МЛУ. Впервые найдено, что увеличение (в результате стабильной трансфекции клеток конструкцией, содержащей УВ-1) или подавление в клетках уровня экспрессии гена УВ-1 (под влиянием з11ША/УВ-./) сопровождается, соответственно, либо активацией, либо супрессией базального уровня экспрессии нескольких генов МЛУ. Впервые показано, что введение в клетки полноразмерного гена УВ-1 приводит к повышению экспрессии генов МЛУ МЯР1, ВСЯР, ЬЯР и повышению количества кодируемых ими белков. Получены оригинальные данные, показывающие, что количество мРНК гена МйЯ! при этом не повышается. Впервые найдено, что некоторые химиотерапевтические препараты (винбластин и цисплатин) индуцируют перемещение белка УВ-1 в ядра клеток, в то время как другие препараты (цитарабин и доксорубицин) не оказывают этого действия. Впервые показано, что лишь препараты, вызывающие перемещение УВ-1 в ядра клеток, индуцируют повышение количества мРНК гена МЯР1, в то время как количество мРНК гена МИШ повышается всеми препаратами, независимо от их способности индуцировать транслокацию УВ-1 в ядра. Впервые исследован материал от больных острым нелимфобластным лейкозом и показано, что повышенному количеству белка УВ-1 сопутствует повышенное количество белка MR.P1 в лейкозных клетках.

I. Обзор литературы

Поскольку задачей нашей работы было исследование роли белка УВ-1 в регуляции множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток, мы включили в обзор литературы раздел, посвященный общей характеристике УВ-1, раздел, в котором излагаются общие сведения относительно множественной лекарственной устойчивоти опухолевых клеток, и раздел, посвященный данным литературы относительно роли УВ-1 в развитии МЛУ, которые были опубликованы к началу нашей работы.

I. 1. Мультифункциональный белок УВ-1.

За последние 10 лет было описано увеличивающееся число мульти-функциональных белков, которые вовлечены в регуляцию генной экспрессии на транскрипционном и посттранскрипционном уровнях.

Представителями таких белков является семейство белков, связывающих У-бокс. Характерным свойством У-бокс белков является их способность связывать инвертированный ССААТ-бокс или АТТСО последовательность, посредством высоко консервативного участка (70 А.К.), называемого СБО (домен холодового шока) (1Л \У а1., 1997). Это название связано с тем, что некоторые бактериальные белки, экспрессирующиеся в условиях пониженной температуры, обладают этим доменом. У-бокс белки представляют высоко консервативную группу белков, связывающих нуклеиновые кислоты и представленные в бактериях, растениях, животных и человеке (Бшатупайап Б е1 а1., 2002). В данном разделе будет подробно описан мультифункциональный, У-бокс связывающий белок УВ-1. Этот белок имеет ряд других названий, таких как: УВ1, ВР-8, Сзс1В, ОЬрВ, УЬх1, №ер-1,1ШЖ-ЫР1.

1.1.1. Структура УВ-1.

Также как некоторые другие эукариотические транскрипционные факторы, белок УВ-1 обладает несколькими доменами с различными функциями. Высоко консервативный центральный СБО содержит основные и ароматические аминокислотные остатки для присоединения остова нуклеиновых кислот в молекулах ДНК или РНК (газесЫекуа О е1 а1., 2002,1гшш Н е1 а1., 2001). СБО содержит ЯЫР-1 и 11ЫР-2 подобные мотивы, которые связывают двух- и одноцепочечные ДНК и РНК. Глицин-обогащенный И-конец этих белков довольно различен и обуславливает тканевую и функциональную специфичность членов этого семейства. На гидрофильном С-конце белков располагаются чередующиеся фрагменты кислотных и основных аминокислотных остатков, называемых заряженными зипперами (Юокэ С е! а!., 1998). Они отвечают за мультимеризацию при белок-белковом взаимодействии, а также за неспецифическое связывание ДНК и РНК. Человеческий ген белка УВ-1 содержит приблизительно 19 кЬр геномной ДНК, включающей 8 экзонов, локализованных на хромосоме 1, сайт 1р34 (К1окБ С е1 а!., 2002).

1.1.2. Функции УВ-1.

Разнообразные биологические роли белка УВ-1 включают: позитивную и негативную модуляцию транскрипции широкого ряда генов, модификацию хроматина, локализацию, трансляционную маскировку и сплайсинг мРНК, а также инициацию трансляции. Кроме этого он может обуславливать физиологический ответ клетки на стресс, регулировать множественную лекарственную устойчивость клеток, участвовать в развитии вирусной инфекции и др.

УВ-1 узнает участок ДНК, поврежденный цисплатином, и принимает участие в процессах репарации ДНК (МагетШет О е1 а1., 2001). Он вовлечен в активацию генов, участвующих в синтезе ДНК, таких как: тимидин киназа, РСИА/циклин, ДНК полимераза а, топоизомераза 2. Было показано, что УВ-1 и РСЫА взаимодейсвуют напрямую, участвуя в репарации ДНК при повреждении ее цисплатином (Гэе Т а1., 1999). Взаимодействие между основными ферментами эксцизионной репарации и трансфакторами было продемонстрировано на примере стимуляции человеческой эндонуклеазы 3 посредством YB-1 (Marenstein D, et al., 2001). Добавление YB-1 к эндонуклеазе 3 in vitro усиливало скорость ДНК-гликозилазной и апурин-апиримидин лиазной активности. Также было показано, что YB-1 проявляет 3-5' экзонуклеазную активность (Izumi Н et al., 2001).

Существует ряд работ, где была продемонстрирована способность YB-1 усиливать или подавлять транскрипцию различных генов самостоятельно или через взаимодействие с другими транскрипционными факторами. Партнерами для YB-1 могут служить следующие белки: YY-1, АР-2, Рига, NF-kB/ReIA, DbpA, NF-Y, р53, hnRNP К и мультивалентный фактор цинковые пальцы CTCF.

Рассмотрим несколько примеров такого взаимодействия. Так например, связывание AP-2/YB-1 комплекса с энхан сером приводило к образованию протяженного одноцепочечного ДНК участка и могло стабилизировать конформационные изменения ДНК. Такое взаимодействие приводило к синергическому усилению транскрипции этими факторами гена желатиназы А (металл-протеиназы 2), продукт которого играет важную роль в процессе инвазии и метастазирования. Есть данные, свидетельствующие в пользу того, что YB-1 может конкурировать с р53 за связывание сайта АР-2, который также оказывает синергический эффект совместно с АР-2 на активацию энхансерной последовательности гена желатиназы А (Mertens Р et al., 1998, Mertens Р et al., 2002). Кроме этого было показано, что супрессор опухолевых метастазов Nm-23 бета может блокировать активацию транскрипции гена желатиназы А, опосредованную YB-1 (Cheng S et al., 2002).

YB-1 может активировать транскрипцию человеческого полиомавируса JCV по нескольким механизмам: во-первых, посредством рекрутирования трансактиватора p65/RelA к вирусному промотору. Во-вторых, совместная экспрессия YB-1 и Рига синергически стимулирует активность промотора полиомавируса JCV (Safak М et al.,

1999, Chen N et al., 1995). Как уже говорилось ранее, помимо положительного эффекта, YB-1 может оказывать и негативный эффект на процесс транскрипции. YB-1 способен репрессировать экспрессию МНС1-А beta через связывание NF-YA, блокируя образование NF-YA и NF-YB комплекса, который необходим для активации транскрипции соответствующего гена. YB-1 транслоцируется в ядро при добавлении TGF-бета к крысиным фибробластам и может активировать там дистальный промотор гена коллагена альфа1, содержащий TGF-бета-респонсивный элемент . В то же время другими исследователями было показано, что YB-1 может супрессировать транскрипцию гена коллагена альфа 1 через регуляторный элемент в проксимальном промоторе (Norman J et al., 2001). Гиперэкспрессия YB-1 снижала уровень мРНК и белка коллагена альфа1 в различных типах клеток. У человеческого YB-1 было обнаружено 3 домена, которые могут связывать р53. При этом взаимодействии стимулировалось связывание специфических последовательностей для р53 (Okamoto Т et al., 2000). YB-1 при коэкспрессии с трансфактором CTCF, имеющим множественные сайты специфичности в ДНК, приводит к заметному усилению репрессии транскрипции CTCF-регулируемого гена c-myc (Chernukhin I et al., 2000). YB-1 является репрессором транскрипции гена fas (CD95 ассоциированного с клеточной смертью) и уменьшает уровень его базальной экспрессии (Lasham A et al., 2000). Таким образом, YB-1 может играть важную роль в контроле клеточного выживания. Также YB-1, связывая трансфактор YY-1, репрессирует усиление транскрипции гена grp78 (Са2+ связывающий белок) в клетках, подвергшихся стрессовому воздействию. (Li W et al., 1997).

Хотелось бы отметить, что транскрипционная активность YB-1 сильно зависит от клеточного контекста. Например синергическая активность YB-1 и Pura на энхансерно-промоторный участок полиомавируса JCV наблюдали в глиальных клетках, но не в других типах клеток. Трансактивационные свойства YB-1 на промотор гена легкой цепи миозина 2v обнаружены в сердечных миоцитах, но не в клетках почки мартышки. Средний уровень транскрипционной активации YB-1 промотора матриксной металл-протеиназы-2 наблюдали в мезенхимальных, но не в эпителиальных клетках.

Многие патогенные вирусы обладают способностью использовать Y-бокс-белки клетки хозяина для активации транскрипции своих генов через вирусный промотор в инфицированных клетках. Например, HTLV-1 и HIV-1 регулируются YB-1 (Sawaya В et al., 1998). Также известно, что репликация полиомавируса человека JCV контролируется YB-1, который может взаимодействовать с вирусными белками: агнопротеином и большим Т-антигеном (Safak М et al., 2002). Белок аденовируса Е1В и YB-1 действуют совместно, чтобы способствовать репликации аденовируса 5 типа (Holm Р et al., 2002). El В вовлечен в перемещение трансфактора YB-1 в ядро, где он облегчает вирусную репликацию посредством индукции экспрессии гена Е2. Гиперэкспрессия YB-1 усиливает tat-индуцированную активацию HIV-1 минимального промотора, содержащего TAR-последовательность (Ansari S et al., 1999).

Помимо регулирования транскрипции YB-1 также принимает участие в регуляции трансляции. YB-1 является мажорным белком цитоплазматических RNP в различных соматических клетках. YB-1 обладает высокой аффинностью к м-РНК. Соматический YB-I является интегральным компонентом как трансляционно неактивных mRNP, так и активных mRNP, произошедших из полисом, хотя последние содержат в 2 раза меньший уровень белка (Skabkin М et al., 2001). Было показано, что YB-1 ингибирует или стимулирует трансляцию в зависимости от соотношения YB-1/м-РНК в т-RNP. Увеличение концентрации YB-1 приводило к ингибированию инициации трансляции in vitro, а гиперэкспрессия в клетках вызывала репрессию трансляции in vivo. Этот белок может играть роль в транспорте, заякоривании и локализации м-РНК на актиновых филаментах в клетке через N-конец. Было показано, что YB-1 проявляет свой эффект на уровне инициации трансляции, а не на уровне элонгации или терминации полипептидного синтеза.

YB-1 может осуществлять сплайсинг пре-м-РНК аденовируса El А преимущественно при образовании в 13S изоформы. YB-1 связывает А/С обогащенные экзоновые энхансеры и стимулирует сплайсинг (вырезание) альтернативного экзона v4 CD44 (Stickeler Е et al., 2001).

Было показано, что YB-1 необходим для стабилизации м-РНК интерлейкина-2 во время активации Т-клеток. Стабилизация происходит посредством образования т-RNP комплекса, отвечающего за специфические сигналы стабилизации м-РНК. Добавление или гиперэкспрессиия YB-1 значительно увеличивали стабильность кэпированных м-РНК in vitro, in vivo, тогда как исчезновение YB-1 приводило к ускорению разрушения м-РНК (Evdokimova V et al., 2001). YB-1 обеспечивает выживание эозинофилов путем стабилизации м-РНК гранулоцит-махрофаг колоний-стимулирующего фактора, что приводит к увеличению синтеза этого фактора (Capowski Е et al., 2001). Важно отметить, что стабилизация м-РНК носит независимый от последовательности характер.

YB-1 способен плавить вторичную структуру м-РНК, а также обеспечивать быстрый отжиг комплиментарных цепочек нуклеиновых кислот. Также он ускоряет отжиг дуплексов РНК и ДНК и катализирует обмен нитями между двухцепочечными и одноцепочечными РНК. Фосфорилирование YB-1 казеин киназой 2 селективно ингибирует отжиг ДНК. Небольшое количество YB-1 обеспечивает образование дуплексов нуклеиновых кислот, а избыток вызывает разворачивание двухцепочечных форм. Можно предположить, что изменение конформации нуклеиновых кислот является основным механизмом регуляции YB-1 генной экспрессии. ДНК-отжиговая активность белка может быть важна для репарации и рекомбинации ДНК.

Таким образом, YB-1 может регулировать активность белков, регулирующих жизненно важные процессы клетки, действуя на разных уровнях их синтеза. В связи с этим исследование роли YB-1 в регуляции различных сторон жизнедеятельности клетки представляется перспективным.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Вайман, Андрей Владимирович

V. Выводы

1. В популяциях опухолевых клеток, резистентных к химиопрепаратам, наблюдается повышение уровня экспрессии и/или повышение числа клеток с УВ-1 в ядре. При значительной гиперэкспрессии УВ-1 в резистентных клетках зачастую наблюдается повышенный уровень экспрессии генов/белков М11Р1, ВС11Р, ЬЯР.

2. Усиление или подавление экспрессии гена УВ-1 в опухолевых клетках сопровождается, соответственно, увеличением или уменьшением базального уровня экспрессии генов/белков МЭИЛ, MR.P1, 1ЛР.

3. Изменение экспрессии УВ-1 в опухолевых клетках сопровождается соответствующим изменением (стимуляцией или подавлением) клеточной пролиферации.

4. Винбластин и цисплатин вызывают перемещение УВ-1 из цитоплазмы в клеточное ядро, что сопровождается индукцией экспрессии гена MR.P1.

I. Усиление экспрессии гена МИШ не зависит от способности лекарств вызывать перемещение УВ-1.

5. Транзиторная трансфекция клеток кДНК УВ-1 способствует возникновению у клеток селективного преимущества в среде с лекарствеными препаратами. В популяции значительно возрастает количество клеток, экспрессирующих белок множественной лекарственной устойчивости Р-гликопротеин.

6. УВ-1 принимает участие в развитие МЛУ в популяции опухолевых клеток. МЛУ, связанная с УВ-1, является многофакторной - она определяется несколькими белками МЛУ и может быть связана с изменением скорости размножения клеток.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Вайман, Андрей Владимирович, 2005 год

1. Ambudakar S.V., Dey, S., Hrycyna С. A., Ramachandra, M., Pastan, I., Gottesman, M.M. Biochemical, cellular, and pharmacological aspects of the multidrug transporter. 1999, Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., 39,361-398.

2. Ansari SA, Safak M, Gallia GL, Sawaya BE, Amini S, Khalili K. Interaction of YB-l with human immunodeficiency virus type 1 Tat and TAR RNA modulates viral promoter activity. 1999, J Gen Virol., 80, 2629-38.

3. Ashizuka M, Fukuda T, Nakamura T, Shirasuna K, Iwai K, Izumi H, Kohno K, Kuwano M, Uchiumi T. Novel translational control through an iron-responsive element by interaction of multifunctional protein YB-l and IRP2. 2002, Mol Cell Biol, 22, 6375-83.

4. Bader AG, Felts KA, Jiang N, Chang HW, Vogt PK. Y box-binding protein 1 induces resistance to oncogenic transformation by the phosphatidylinositol 3-kinase pathway. 2003, Proc Natl Acad Sci USA., 100, 12384-9.

5. Bader AG, Vogt PK. An essential role for protein synthesis in oncogenic cellular transformation. 2004, Oncogene., 23, 3145-50.

6. Baldwin AS Jr. The NF-kappa В and I kappa В proteins: new discoveries and insights. 1996, Annu Rev Immunol., 14, 649-83.

7. Bayarsaihan D, Enkhmandakh B, Lukens LN. Y-box proteins interact with the SI nuclease-sensitive site in the chicken alpha 2(1) collagen gene promoter. 1996, Biochem J., 319,203-7.

8. Borst P, Evers R, Kool M, Wijnholds J. A family of drug transporters: the multidrug resistance-associated proteins. 2000, J Natl Cancer Inst., 92, 1295-302.

9. Capowski EE, Esnault S, Bhattacharya S, Malter JS. Y box-binding factor promotes eosinophil survival by stabilizing granulocyte-macrophage colony-stimulating factor mRNA. 2001, J Immunol., 167, 5970-6.j

10. Carobbio S, Realini C, Norbury CJ, Toda T, Cavalli F, Spataro V. Sequence of •i Crml/exportin 1 mutant alleles reveals critical sites associated with multidrug resistance.2001, Curr Genet., 39, 2-9.

11. Chansky HA, Hu M, Hickstein DD, Yang L. Oncogenic TLS/ERG and EWS/Fli-1 fusion proteins inhibit RNA splicing mediated by YB-1 protein. 2001, Cancer Res., 61, 3586-90.

12. Chen CY, Gherzi R, Andersen JS, Gaietta G, Jurchott K, Royer HD, Mann M, Karin M. Nucleolin and YB-1 are required for JNK-mediated interleukin-2 mRNA stabilizationi *during T-cell activation. 2000, Genes Dev., 14, 1236-48.

13. Cheng S, Alfonso-Jaume MA, Mertens PR, Lovett DH. Tumour metastasis suppressor, nm23-beta, inhibits gelatinase A transcription by interference with transactivator Y-box protein-1 (YB-1). 2002, Biochem J., 366, 807-16.

14. Diamond P, Shannon MF, Vadas MA, Coles LS. Cold shock domain factors activate the granulocyte-macrophage colony-stimulating factor promoter in stimulated Jurkat T cells. 2001, J Biol Chem., 276, 7943-51.

15. Didier DK, Schiffenbauer J, Woulfe SL, Zacheis M, Schwartz BD. Characterization of the cDNA encoding a protein binding to the major histocompatibility complex class II Y box. 1988, Proc Natl Acad Sci USA., 85, 7322-6.

16. Dhalla AK, Ririe SS, Swamynathan SK, Weber KT, Guntaka RV. chk-YB-lb, a Y-box binding protein activates transcription from rat alpha 1(1) procollagen gene promoter. 1998, Biochem J., 336, 373-9.

17. Doyle LA, Ross DD. Multidrug resistance mediated by the breast cancer resistance protein BCRP (ABCG2). Oncogene., 22, 7340-58.

18. Duh JL, Zhu H, Shertzer HG, Nebert DW, Puga A. The Y-box motif mediates redox-dependent transcriptional activation in mouse cells. 1995, J Biol Chem., 270, 30499-507.

19. En-Nia A, Yilmaz E, Klinge U, Lovett DH, Stefanidis I, Mertens PR. Transcription factor YB-1 mediates DNA-polymerase alpha gene expression. 2005, J Biol Chem., 280, 7702-11.

20. Evdokimova V, Ruzanov P, Imataka H, Raught B, Svitkin Y, Ovchinnikov LP, Sonenberg N. The major mRNA-associated protein YB-1 is a potent 5' cap-dependent mRNA stabilizer. 2001, EMBO J., 20, 5491-502.

21. Fischer DC, Noack K, Runnebaum IB, Watermann DO, Kieback DG, Stamm S, Stickeler E. Expression of splicing factors in human ovarian cancer. 2004, Oncol Rep., 11, 1085-90.

22. Fogt F, Poremba C, Shibao K, Itoh H, Kohno K, Zimmerman RL, Gortz HG, Dockhorn-Dworniczak B, Urbanski SJ, Alsaigh N, Heinz D, Noffsinger AE, Shroyer KR.

23. Expression of survivin, YB-1, and KI-67 in sporadic adenomas and dysplasia-associated lesions or masses in ulcerative colitis. 2001, Appl Immunohistochem Mol Morphol., 9, 1439.

24. Fukada T, Tonks NK. Identification of YB-1 as a regulator of PTP1B expression: implications for regulation of insulin and cytokine signaling. 2003, EMBOJ., 22, 479-93.

25. Fukuda T, Ashizuka M, Nakamura T, Shibahara K, Maeda K, Izumi H, Kohno K, Kuwano M, Uchiumi T. Characterization of the 5'-untranslated region of YB-1 mRNA and autoregulation of translation by YB-1 protein. 2004, Nucleic Acids Res., 32, 611-22.

26. Gallia GL, Johnson EM, Khalili K. Puralpha: a multifunctional single-stranded DNA-and RNA-binding protein. 2000, Nucleic Acids Res., 28, 3197-205.

27. Gessner C, Woischwill C, Schumacher A, Liebers U, Kuhn H, Stiehl P, Jurchott K, Royer HD, Witt C, Wolff G. Nuclear YB-1 expression as a negative prognostic marker in nonsmall cell lung cancer. 2004, Eur Respir J., 23, 14-9.

28. Gimenez-Bonafe P, Fedoruk MN, Whitmore TG, Akbari M, Ralph JL, Ettinger S, Gleave ME, Nelson CC. YB-1 is upregulated during prostate cancer tumor progression and increases P-glycoprotein activity. 2004, Prostate., 59, 337-49.

29. Glavinas, H., Krajcsi, P., Cserepes, J. and Sarkadi, B. (2004) Current Drug Delivery, 1, 27-42.

30. Gottesman, M.M., Fojo, T. and Bates, S.E. Multidrug resistance in cancer: role of ATP-dependent transporters. 2002, Nat. Rev. Cancer, 2, 48-58.

31. Grant CE, Deeley RG. Cloning and characterization of chicken YB-1: regulation of expression in the liver. 1993, Mol Cell Biol., 13,4186-96.

32. Jurchott K, Bergmann S, Stein U, Walther W, Janz M, Manni I, Piaggio G, Fietze E, Dietel M, Royer HD. YB-1 as a cell cycle-regulated transcription factor facilitating cyclin A and cyclin B1 gene expression. 2003, J Biol Chem., 278,27988-96.

33. Hasegawa SL, Doetsch PW, Hamilton KK, Martin AM, Okenquist SA, Lenz J, Boss JM. DNA binding properties of YB-1 and dbpA: binding to double-stranded, single-stranded, and abasic site containing DNAs. 1991, Nucleic Acids Res., 19, 4915-20.

34. Hayakawa H, Uchiumi T, Fukuda T, Ashizuka M, Kohno K, Kuwano M, Sekiguchi M. Binding capacity of human YB-1 protein for RNA containing 8-oxoguanine. 2002, Biochemistry., 41, 1273 9-44.

35. He XH, Li JJ, Xie YH, Tang YT, Yao GF, Qin WX, Wan da F, Gu JR. Altered gene expression profiles of NIH3T3 cells regulated by human lung cancer associated gene CT 120. 2004, Cell Res., 14, 487-96.

36. Higashi K, Inagaki Y, Fujimori K, Nakao A, Kaneko H, Nakatsuka I. Interferon-gamma interferes with transforming growth factor-beta signaling through direct interaction of YB-1 with Smad3. 2003, J Biol Chem., 278, 43470-9.

37. Hu Z, Jin S, Scotto KW. Transcriptional activation of the MDR1 gene by UV irradiation. Role of NF-Y and Spl. 2000, J Biol Chem., 275,2979-85.

38. Huang X, Ushijima K, Komai K, Takemoto Y, Motoshima S, Kamura T, Kohno K. Co-expression of Y box-binding protein-1 and P-glycoprotein as a prognostic marker for survival in epithelial ovarian cancer. 2004, Gynecol Oncol., 93, 287-91.

39. Huang J, Tan PH, Li KB, Matsumoto K, Tsujimoto M, Bay BH. Y-box binding protein, YB-1, as a marker of tumor aggressiveness and response to adjuvant chemotherapy in breast cancer. 2005, Int J Oncol., 26, 607-13.

40. Kamura T, Yahata H, Amada S, Ogawa S, Sonoda T, Kobayashi H, Mitsumoto M, Kohno K, Kuwano M, Nakano H. Is nuclear expression of Y box-binding protein-1 a new prognostic factor in ovarian serous adenocarcinoma? 1999, Cancer, 85,2450-4.

41. Kashanchi F, Duvall JF, Dittmer J, Mireskandari A, Reid RL, Gitlin SD, Brady JN. Involvement of transcription factor YB-1 in human T-cell lymphotropic virus type I basal gene expression. 1994, J Virol., 68, 561-5.

42. Kauffmann HM, Vorderstemann B, Schrenk D. Basal expression of the rat, but not of the human, multidrug resistance protein 2 (MRP2) gene is mediated by CBF/NF-Y and Spl promoter-binding sites. 2001, Toxicology., 167,25-35.

43. Kerr D, Chang CF, Chen N, Gallia G, Raj G, Schwartz B, Khalili K. Transcription of a human neurotropic virus promoter in glial cells: effect of YB-1 on expression of the JC virus late gene. 1994, J Virol., 68, 7637-43.

44. Klein I, Sarkadi B, Varadi A. An inventory of the human ABC proteins. 1999, Biochim Biophys Acta., 1461,237-62.

45. Kloks CP, Hoffmann A, Omichinski JG, Vuister GW, Hilbers CW, Grzesiek S. Resonance assignment and secondary structure of the cold shock domain of the human YB-1 protein. 1998, JBiomol NMR., 12, 463-4.

46. Kloks CP, Spronk CA, Lasonder E, Hoffmann A, Vuister GW, Grzesiek S, Hilbers CW. The solution structure and DNA-binding properties of the cold-shock domain of the human Y-box protein YB-1. 2002, JMol Biol., 316, 317-26.

47. Kloks CP, Tessari M, Vuister GW, Hilbers CW. Cold shock domain of the human Y-box protein YB-1. Backbone dynamics and equilibrium between the native state and a partially unfolded state. 2004, Biochemistry., 43, 10237-46.

48. Koike K, Uchiumi T, Ohga T, Toh S, Wada M, Kohno K, Kuwano M. Nuclear translocation of the Y-box binding protein by ultraviolet irradiation. 1997, FEBS Lett., 417, 390-4.

49. Kohno K, Izumi H, Uchiumi T, Ashizuka M, Kuwano M. The pleiotropic functions of the Y-box-binding protein. YB-1. 2003, Bioessays, 25, 691-8.

50. Kudo S, Mattei MG, Fukuda M. Characterization of the gene for dbpA,.a family member of the nucleic-acid-binding proteins containing a cold-shock domain. 1995, Eur J Biochem., 231, 72-82.

51. Kuwano M, Uchiumi T, Hayakawa H, Ono M, Wada M, Izumi H, Kohno K. The basic and clinical implications of ABC transporters, Y-box-binding protein-1 (YB-1) and angiogenesis-related factors in human malignancies. 2003, Cancer Sci., 94, 9-14.

52. J, Hawkins IC, Harvey CD, Jennings JL, Link AJ, Patton JG. Regulation of alternative splicing by SRrp86 and its interacting proteins. 2003, Mol Cell Biol., 23, 7437-47.

53. MacDonald GH, Itoh-Lindstrom Y, Ting JP. The transcriptional regulatory protein, YB-1, promotes single-stranded regions in the DRA promoter. 1995, J Biol Chem., 270, 3527-33.

54. Makino Y, Ohga T, Toh S, Koike K, Okumura K, Wada M, Kuwano M, Kohno K. Structural and functional analysis of the human Y-box binding protein (YB-1) gene promoter. 1996, Nucleic Acids Res., 24, 1873-8.

55. Marenstein DR, Chan MK, Altamirano A, Basu AK, Boorstein RJ, Cunningham RP, Teebor GW. Substrate specificity of human endonuclease III (hNTHl). Effect of human APE1 on hNTHl activity. 2003, J Biol Chem., 278, 9005-12.

56. Matsumoto K, Tanaka KJ, Tsujimoto M. An Acidic Protein, YBAP1, Mediates the Release of YB-l from mRNA and Relieves the Translational Repression Activity of YB-1. 2005, Mol Cell Biol, 25, 1779-92.

57. Mertens PR, Harendza S, Pollock AS, Lovett DH. Glomerular mesangial cell-specific transactivation of matrix metalloproteinase 2 transcription is mediated by YB-1. 1997, J Biol Chem., 272, 22905-12.

58. Mertens PR, Alfonso-Jaume MA, Steinmann K, Lovett DH. A synergistic interaction of transcription factors AP2 and YB-1 regulates gelatinase A enhancer-dependent transcription. 1998, J Biol Chem., 273, 32957-65.

59. Mertens PR, Alfonso-Jaume MA, Steinmann K, Lovett DH. YB-1 regulation of the human and rat gelatinase A genes via similar enhancer elements. 1999, J Am Soc Nephrol., 10, 2480-7.

60. Nambiar A, Kandala JC, Svoboda J, Guntaka RV. Cloning of a novel Y-box homology protein (chkYB-lHP) cDNA lacking the cold-shock domain. 1998, Biochim Biophys Acta., 1395, 1-6.

61. Oda Y, Sakamoto A, Shinohara N, Ohga T, Uchiumi T, Kohno K, Tsuneyoshi M, Kuwano M, Iwamoto Y. Nuclear expression of YB-1 protein correlates with P-glycoprotein expression in human osteosarcoma. 1998, Clin Cancer Res., 4,2273-7.

62. Ohba H, Chiyoda T, Endo E, Yano M, Hayakawa Y, Sakaguchi M, Darnell RB, Okano HJ, Okano H. Sox21 is a repressor of neuronal differentiation and is antagonized by YB-1. 2004, Neurosci Lett., 358, 157-60.

63. Ohga T, Koike К, Ono M, Makino Y, Itagaki Y, Tanimoto M, Kuwano M, Kohno K. Role of the human Y box-binding protein YB-1 in cellular sensitivity to the DNA-damaging agents cisplatin, mitomycin C, and ultraviolet light. 1996, Cancer Res., 56,4224-8.

64. Ohga T, Uchiumi T, Makino Y, Koike K, Wada M, Kuwano M, Kohno K. Direct involvement of the Y-box binding protein YB-1 in genotoxic stress-induced activation of the human multidrug resistance 1 gene. 1998, J Biol Chem., 273, 5997-6000.

65. Ohmori M, Shimura H, Shimura Y, Kohn LD. A Y-box protein is a suppressor factor that decreases thyrotropin receptor gene expression. 1996, Mol Endocrinol. 10, 76-89.

66. Okamoto T, Izumi H, Imamura T, Takano H, Ise T, Uchiumi T, Kuwano M, Kohno K. Direct interaction of p53 with the Y-box binding protein, YB-1: a mechanism for regulation of human gene expression. 2000, Oncogene., 19, 6194-202.

67. Ozer J, Faber M, Chalkley R, Sealy L. Isolation and characterization of a cDNA clone for the CCAAT transcription factor EFIA reveals a novel structural motif. 1990, J Biol Chem., 265, 22143-52.

68. Raffetseder U, Frye B, Rauen T, Jurchott K, Royer HD, Jansen PL, Mertens PR. Splicing factor SRp30c interaction with Y-box protein-1 confers nuclear YB-1 shuttling and alternative splice site selection. 2003, J Biol Chem., 278, 18241-8.

69. Raj GV, Safak M, MacDonald GH, Khalili K. Transcriptional regulation of human polyomavirus JC: evidence for a functional interaction between RelA (p65) and the Y-box-binding protein, YB-1. 1996, J Virol., 70, 5944-53.

70. Rapp TB, Yang L, Conrad EU 3rd, Mandahl N, Chansky HA. RNA splicing mediated by YB-1 is inhibited by TLS/CHOP in human myxoid Iiposarcoma cells. 2002, J Orthop Res., 20, 723-9.

71. Robert J. Resistance to cytotoxic agents. 2001, Curr Opin Pharmacol., 4, 353-7.

72. Savvaya BE, Khalili K, Amini S. Transcription of the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) promoter in central nervous system cells: effect of YB-1 on expression of the HIV-1 long terminal repeat. 1998,JGen Virol., 79, 239-46.

73. Safak M, Gallia GL, Khalili K. Reciprocal interaction between two cellular proteins, Puralpha and YB-1, modulates transcriptional activity of JCVCY in glial cells. 1999, Mol Cell Biol., 19,2712-23.

74. Safak M, Khalili K. Physical and functional interaction between viral and cellular proteins modulate JCV gene transcription. 2001, JNeurovirol., 7, 288-92.

75. Safak M, Sadowska B, Barrucco R, Khalili K. Functional interaction between JC virus late regulatory agnoprotein and cellular Y-box binding transcription factor, YB-1. 2002, J Virol., 76, 3828-38.

76. Saji H, Toi M, Saji S, Koike M, Kohno K, Kuwano M. Nuclear expression of YB-1 protein correlates with P-glycoprotein expression in human breast carcinoma. 2003, Cancer Lett., 190, 191-7.

77. Samuel S, Twizere JC, Bernstein LR. YB-1 represses API-dependent gene transactivation and interacts with an AP-1 DNA sequence. 2005, Biochem J., 388, 921-8.

78. Scheffer GL, Schroeijers AB, Izquierdo MA, Wiemer EA, Scheper RJ. Lung resistance-related protein/major vault protein and vaults in multidrug-resistant cancer. 2000, Curr Opin Oncol., 12, 550-6.

79. Scotto KW. Transcriptional regulation of ABC drug transporters. 2003, Oncogene., 22, 7496-511.

80. Scotto KW, Johnson RA. Transcription of the multidrug resistance gene MDR1: a therapeutic target. 2001, Mol Interv., 1, 117-25.

81. Shibao K, Takano H, Nakayama Y, Okazaki K, Nagata N, Izumi H, Uchiumi T, Kuwano M, Kohno K, Itoh H. Enhanced coexpression of YB-1 and DNA topoisomerase Ila genes in human colorectal carcinomas. 1999, Int J Cancer, 83, 732-7.

82. Shnyreva M, Schullery DS, Suzuki H, Higaki Y, Bomsztyk K. Interaction of two multifunctional proteins. Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K and Y-box-binding protein. 2000, J Biol Chem., 275, 15498-503.

83. Singal DP, Miller PC. Human Y-box transcription factors: sequences of two new YB-1 alleles. 1995, Gene., 154, 299-300.

84. Skabkin MA, Evdokimova V, Thomas AA, Ovchinnikov LP. The major messenger ribonucleoprotein particle protein p50 (YB-1) promotes nucleic acid strand annealing. 2001, J Biol Chem., 276, 44841-7.

85. Skabkin MA, Kiselyova OI, Chernov KG, Sorokin AV, Dubrovin EV, Yaminsky IV, Vasiliev VD, Ovchinnikov LP. Structural organization of mRNA complexes with major core mRNP protein YB-1. 2004, Nucleic Acids Res., 32, 5621-35.

86. Skabkina OV, Skabkin MA, Popova NV, Lyabin DN, Penalva LO, Ovchinnikov LP. Poly(A)-binding protein positively affects YB-1 mRNA translation through specific interaction with YB-1 mRNA. 2003, J Biol Chem., 278, 18191-8.

87. Skalweit A, Doller A, Huth A, Kahne T, Persson PB, Thiele BJ. Posttranscriptional control of renin synthesis: identification of proteins interacting with renin mRNA 31-untranslated region. 2003, Circ Res., 92, 419-27.

88. Stavrovskaya A, Turkina A, Sedyakhina N, Stromskaya T, Zabotina T, Khoroshko N, Baryshnikov A. Prognostic value of P-glycoprotein and leukocyte differentiation antigens in chronic myeloid leukemia. 1998, Leuk Lymphoma, 28, 469-82.

89. Stein U, Jurchott K, Walther W, Bergmann S, Schlag PM, Royer HD. Hyperthermia-induced nuclear translocation of transcription factor YB-1 leads to enhanced expression of multidrug resistance-related ABC transporters. 2001, J Biol Chem., 276, 28562-9.

90. Stein U, Bergmann S, Scheffer GL, Scheper RJ, Royer HD, Schlag PM, Walther W. YB-1 facilitates basal and 5-fluorouracil-inducible expression of the human major vault protein (MVP) gene. 2005, Oncogene., 24, 3606-18.

91. Stenina Ol, Poptic EJ, DiCorleto PE. Thrombin activates a Y box-binding protein (DNA-binding protein B) in endothelial cells. 2000, J Clin Invest., 106, 579-87.

92. Stickeier E, Fräser SD, Honig A, Chen AL, Berget SM, Cooper TA. The RNA binding protein YB-1 binds A/C-rich exon enhancers and stimulates splicing of the CD44 alternative exon v4. 2001, EMBO J., 20, 3821-30.

93. Sun W, Hou F, Panchenko MP, Smith BD. A member of the Y-box protein family interacts with an upstream element in the alpha 1(1) collagen gene. 2001, Matrix Biol., 20, 527-41.

94. Sundseth R, MacDonald G, Ting J, King AC. DNA elements recognizing NF-Y and Spl regulate the human multidrug-resistance gene promoter. 1997, Mol Pharmacol., 51, 96371.

95. Swamynathan SK, Varma BR, Weber KT, Guntaka RV. Targeted disruption of one allele of the Y-box protein gene, Chk-YB-lb, in DT40 cells results in major defects in cell cycle. 2002, Biochem Biophys Res Commun., 296, 451-7.

96. Ting JP, Painter A, Zeleznik-Le NJ, MacDonald G, Moore TM, Brown A, Schwartz BD. YB-1 DNA-binding protein represses interferon gamma activation of class II major histocompatibility complex genes. 1994, J Exp Med., 179, 1605-11.

97. Toh S, Nakamura T, Ohga T, Koike K, Uchiumi T, Wada M, Kuwano M, Kohno K. Genomic organization of the human Y-box protein (YB-1) gene. 1998, Gene., 206, 93-7.

98. Tsujimura S, Saito K, Nakayamada S, Nakano K, Tsukada J, Kohno K, Tanaka Y. Transcriptional regulation of multidrug resistance-1 gene by interleukin-2 in lymphocytes. 2004, Genes Cells., 9, 1265-73.

99. Uramoto H, Izumi H, Ise T, Tada M, Uchiumi T, Kuwano M, Yasumoto K, Funa K, Kohno K. p73 Interacts with c-Myc to regulate Y-box-binding protein-1 expression. 2002, J Biol Chem., 277, 31694-702.

100. Wang N, Yamanaka K, Inouye M. Acquisition of double-stranded DNA-binding ability in a hybrid protein between Escherichia coli CspA and the cold shock domain of human YB-1. 2000, Mol Microbiol., 38, 526-34.

101. Yahata H, Kobayashi H, Kamura T, Amada S, Hirakawa T, Kohno K, Kuwano M, Nakano H. Increased nuclear localization of transcription factor YB-1 in acquired cisplatin-resistant ovarian cancer. 2002, J Cancer Res Clin Oncol., 128,621-6.

102. Yao R, Wang Y, Lubet RA, You M. Differentially expressed genes associated with mouse lung tumor progression. 2002, Oncogene., 21, 5814-21.

103. Yokoyama H, Harigae H, Takahashi S, Kameoka J, Miyamura K, Ishizawa K, Kaku M, Sasaki T. High expression of YB-1 gene in erythroid cells in patients with refractory anemia. 2003, Int J Hematol., 78, 213-8.

104. Yokoyama H, Harigae H, Takahashi S, Takahashi S, Furuyama K, Kaku M, Yamamoto M, Sasaki T. Regulation of YB-1 gene expression by GATA transcription factors. 2003, Biochem Biophys Res Commun., 303, 140-5.

105. Zou Y, Chien KR. EFIA/YB-1 is a component of cardiac HF-1A binding activity and positively regulates transcription of the myosin light-chain 2v gene. 1995, Mol Cell Biol., 15,2972-82.

106. Ставровская А.А. Клеточные механизмы множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток. 2000, Биохимия, 65, 112-126.