Совершенствование метода андрогенеза in vitro у земляники (Fragaria ananassa Duch.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат сельскохозяйственных наук Протасова, Екатерина Сергеевна

• Протасова, Екатерина Сергеевна
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Протасова, Екатерина Сергеевна

Введение.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Методы получения гаплоидов и их значение в 6 селекционно-генетических исследованиях.

1.2. Андрогенез растений в культуре in vitro.

1.2.1. Индукция каллусогенеза.

1.2.2. Морфогенез и регенерация растений.

1.2.3. Микроразмножение и укоренение регенерантов.

1.3. Методы адаптации пробирочных растений-регенерантов к нестерильным почвенным условиям.

1.4. Культура пыльников земляники.

ГЛАВА 2. ЦЕЛЬ, ЗАДАЧИ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДИКА

ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Цель и задачи исследований.

2.2. Объекты и методика проведения исследований.

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФАКТОРОВ НА ПРОЦЕСС КУЛЬТИВИРОВАНИЯ IN VITRO ПЫЛЬНИКОВ ЗЕМЛЯНИКИ.

3.1. Генотип растений-доноров.

3.2. Минеральный и гормональный состав питательных сред.

3.3. Стадия развития пыльцы.

3.4. Холодовая предобработка пыльников растений-доноров.

3.5. Морфологические особенности андрогенных каллусов.

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА ПРИЕМОВ РЕГЕНЕРАЦИИ РАСТЕНИЙ

В КУЛЬТУРЕ КАЛЛУСНОЙ ТКАНИ.

4.1. Индукция побегов-регенерантов в каллусных тканях.

4.2. Размножение и укоренение андрогенных побегов на искусственных питательных средах.

ГЛАВА 5. МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АНДРОГЕННЫХ

РАСТЕНИЙ-РЕГЕНЕРАНТОВ.

ГЛАВА 6. АДАПТАЦИЯ МИКРОРАСТЕНИЙ К УСЛОВИЯМ

ОТКРЫТОГО ГРУНТА.

ГЛАВА 7. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ВЫРАЩИВАНИЯ ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА АНДРОГЕННЫХ РАСТЕНИЙ ЗЕМЛЯНИКИ С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ.

Выводы.

Рекомендации для практического использования.

Список используемой литературы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование метода андрогенеза in vitro у земляники (Fragaria ananassa Duch.)»

Интенсификация современного сельскохозяйственного производства плодово-ягодной продукции требует разработки селекционно-генетических методов ускоренного создания новых, более высокопродуктивных и совершенных сортов ягодных растений, в частности земляники. Наряду с классическими методами, основанными на гибридизации, весьма актуальным является использование в решении данной проблемы современных биотехнологических методов, к которым, относится метод андрогенеза in vitro — культивирование на искусственных питательных средах пыльников и микроспор. Основной интерес к данному методу связан с тем, что это самый эффективный и быстрый способ получения гаплоидов, а на их основе — гомозиготных форм растений. Удвоение числа хромосом гаплоидов приводит всего за одну генерацию к достижению гомо-зиготности по всем локусам. Использование гомозиготных линий в гибридной селекции позволяет заранее предвидеть характер наследования признаков в потомстве, своевременно выбраковывать ненужный селекционный материал, быстро стабилизировать сорта и тем самым строго программировать селекционную работу, экономя время и материальные затраты. К настоящему времени этим способом удалось получить гаплоиды у многих однолетних и двулетних важнейших сельскохозяйственных культур.

Весьма актуально изучение проблемы получения гаплоидных и гомозиготных растений методом андрогенеза у земляники. Для этой ягодной культуры эффективные методы культивирования пыльников in vitro не разработаны. Это обусловлено, прежде всего, недостаточной изученностью механизмов каллусо-, эмбрио - и морфогенеза, влияния различных факторов на эти процессы и, как следствие этого, низким процентом образования каллусов или эмбриоидов. Большие трудности связаны с регенерацией растений и их плохой адаптацией к естественным почвенным условиям. Из отдельных, часто наиболее ценных генотипов, вообще не удается получить регенеранты при культивировании пыльников. Сложность решения этой проблемы связана с тем, что морфогенетиче-ский потенциал ягодных растений намного слабее по сравнению с однолетними культурами и поэтому труднее индуцировать регенеранты из изолированной ткани. Условия получения растений in vitro, разработанные для одних сортов и тем более видов, как правило, оказываются неэффективными для других и требуют существенных модификаций.

Положения, выносимые на защиту:

1. Приемы индукции каллусной ткани и регенерация растений в культуре пыльников земляники.

2. Условия размножения и укоренения полученных побегов-регенерантов.

3. Морфологическая и цитологическая оценка растений-регенерантов.

4. Способы адаптации растений-регенерантов к условиям открытого грунта.

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Протасова, Екатерина Сергеевна

Выводы

1. Наибольший андрогенетический потенциал выявлен у сортов земляники отечественной селекции, в первую очередь полученные во ВНИИГиСПР им. И.В. Мичурина (Урожайная ЦГЛ, Фейерверк, Привлекательная), а также сорт Золушка селекции ВСТИСП.

2. Разработана методика получения андрогенных растений-регенерантов у сортов Золушка, Урожайная ЦГЛ, Фейерверк, адаптированных к условиям открытого грунта.

3. Присутствие в инициальной среде 1,0 мг/л 2,4-Д позволяет получать каллусы из пыльников, хотя и с разной частотой, у всех изученных генотипов земляники. Для повышения частоты каллусообразования у сортов Урожайная ЦГЛ, Десертная, Кама лучше использовать в инициальных питательных средах в качестве цитокинина зеатин. У сортов Львовская ранняя, Фестивальная ромашка, Редгонтлит — 6-БАП. Для сортов Золушка и Привлекательная лучшие результаты даёт наличие в среде как 6-БАП, так и кинетина, а у сорта Фейерверк можно использовать все три цитокинина (6-БАП, кинетин и зеатин). Концентрация всех цитокининов при этом составляет — 2,0 мг/л.

4. Для индукции андрогенеза in vitro следует использовать пыльники с пыльцой на одноядерной стадии развития. Холодовая предобработка пыльников с экспозицией в 3 суток оказывает положительное влияние на выход андрогенных образований.

5. По морфологическому показателю выявлены два типа андрогенных каллусов: I — морфогенные, которые чаще всего встречаются у сортов Урожайная ЦГЛ, Фейерверк, Золушка; II - неморфогенные отмечены у сортов Фестивальная ромашка, Десертная, Привлекательная. Лучшими по интенсивности пролиферации каллусной массы являются сорта Урожайная ЦГЛ (4,2 балла), Фейерверк (3,9 балла) и Привлекательная (3,7 балла).

6. Отмечено, что на среде для каллусогенеза (6-БАП 2,0 мг/л + НУК 0,5 мг/л) сорта земляники Фейерверк и Урожайная ЦГЛ способны образовывать побеги-регенеранты с частотой 12,7% и 7,2% соответственно. Сорт Золушка на данной среде образует регенеранты до 2%.

7. Выявлены две наиболее продуктивные регенерационные среды для сорта Золушка следующего состава (в мг/л): 6-БАП 2,0 + зеатин 2,0 + НУК 1,0 и 6-БАП 2,0 + ИУК 1,0. Отмечено влияние сред для каллусогенеза (6-БАП 2,0 мг/л + НУК 0,5 мг/л и кинетин 2,0 мг/л + НУК 0,5 мг/л), оказывающие благоприятное воздействие на последующую морфогенную активность андроген-ных каллусов.

8. На этапе микроразмножения земляники наиболее эффективными являются концентрации в питательной среде 6-БАП 1,0 и 2,0 мг/л. При укоренении лучшие результаты дает присутствие в среде 3,0 мг/л ИМК. Среди полученных регенерантов сорта Золушка отмечено около 20 % гаплоидных.

9. При переносе пробирочных растений земляники в открытый грунт лучше использовать укорененные in vitro растения. Однако возможно использование побегов без корней, но обработанных раствором ИМК, так как в данном случае преимуществом является отсутствие этапа укоренения в условиях in vitro.

10. Использование метода клонального микроразмножения при получении посадочного материала андрогенных растений земляники сорта Золушка обеспечивает увеличение рентабельности производства на 47,8 %.

Рекомендации для практического использования

Рекомендуем методы получения растений-регенерантов в культуре пыльников in vitro у сортов земляники Урожайная ЦГЛ, Фейерверк и Золушка. Они; включают: сбор бутонов размером не более 4—5 мм, которые содержат пыльники: с пыльцой на одноядерной стадии развития, холодовую предобработку пыльников продолжительностью 3 суток, их посев на питательные среды по MS еле— дующего состава: 6-БАП 2,0 мг/л + НУК 0,5 мг/л и зеатин 2,0 мг/л + НУЬС; 0,5мг/л. Для сортов Урожайная ЦГЛ и Фейерверк эти среды являются такж<^ морфогенными. У сорта Золушка для индукции морфогенеза каллусы следует^ переносить на среды (в мг/л): 6-БАП 2,0 мг/л + зеатин 2,0 мг/л + НУК 1,0 мг/л 6-БАП 2,0 мг/л + ИУК 1,0 мг/л.

Размножение полученных андрогенных побегов-регенерантов рекомендуй ем проводить на среде с 6-БАП 1,0 и 2,0 мг/л по MS. Для их укоренения следу использовать среду с ИМК в концентрации 3,0 мг/л. Адаптацию пробирочные растений необходимо осуществлять в пленочной теплице с воздушно-капельно^ установкой. Высаживать лучше укорененные в условиях in vitro растения, hji^j использовать не укорененные побеги, обработав их концы раствором (1,0 ivxr ИМК в 1,0 мл воды) в течение 5-7 секунд. В целях повышения рентабельности производства селекционно-ценного посадочного материала земляники следу применять метод клонального микроразмножения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Протасова, Екатерина Сергеевна, 2010 год

1. Абрамов, С. Н. Статусы пыльника пшеницы при холодовом стрессе: Докл. Годичное собрание Всерос. общ-ва физиологов раст. (ВОФР) Уфа, 19-22 июня, 2001. / С. Н. Абрамов // Вестн. Башк. ун-та. 2001. - №2. - С. 100-102.

2. Азиходжаев, А. Влияние мезоинозита на морфогенез недоразвитых зародышей хлопчатника in vitro / А. Азиходжаев, 3. М. Умаров // Узбекский биологический журнал. 1985. - №5. - С. 49-50.

3. Анапиляев, Б. Б. Влияние генотипа на частоту регенерации растений в культуре микроспор ТгШсит аезйуит, Ь. / Б. Б. Анапиляев // Генетика. — 2000. Том 36, №4. - С. 505-509.

4. Атанасов, А. Биотехнология в растениеводстве / А. Атанасов. — Новосибирск : ИЦиГ СО РАН, 1993.-241 с.

5. Батыгина, Т. Б. Хлебное зерно / Т. Б. Батыгина. — Л. : Наука, 1987. — 103 с.

6. Батыгина, Т. Б. Культура изолированных пыльцевых злаков с позиции эмбриологии растений (Методологические разработки) / Т. Б. Батыгина, Н. Н. Круглова, В. Ю. Горбунова. Уфа: БНЦ УрО РАН, 1992. - 32 с.

7. Батыргожин, Б. А. Генетические механизмы устойчивости растений к неблагоприятным факторам среды: Тез. сообщ. / Б. А. Батыргожин, Б. Б. Анапиляев, Н. Л. Богуслаев / Иркутск, 8-12 июля, 1991. Иркутск, 1991.-С. 86.

8. Бобков, С. В. Получение корнесобственных регенерантов в культуре пыльников проса / С. В. Бобков // Вестник РАСХН. 2000. - №5. - С. 41.

9. Бобков, С. В. Получение корнесобственных регенерантов растений проса в культуре незрелых соцветий и пыльников / С. В. Бобков // С.-х. биол. Сер. Биол. раст. 2002. - №5. - С. 65-68.

10. Бобков, С. В. Культуры изолированных пыльников и микроспор гороха Pisum sativum L./ С. В. Бобков // Биология клеток растений in vitro и биотехнология: тезисы X Междунар. конф. (Звенигород, 8-12 сент. 2008 г.). — М., 2008. С. 48.

11. Бондаренко, Е. Д. Особенности клонального размножения in vitro сортов земляники ананасной / Е. Д. Бондаренко, Н. И. Кисель // С.-х. биол. — 2002. № 1. - С. 81-84.

12. Бугара, А. М. Влияние холодовой предобработки на индукцию андрогенного развития в пыльниках кориандра / А. М. Бугара, Н. А. Егорова, С. А. Резников. // Физиология растений. — 1985. — Том 32, вып. 3. — С. 558-564.

13. Бугара, А. М. Культура неоплодотворенных завязей и семяпочек in vitro как способ получения гаплоидных растений / А. М. Бугара, Л. В. Русина // Физиология и биохимия культурных растений. — 1988. 20, №5. — С. 419-430.

14. Бургутин, А. Б. Микроклональное размножение винограда / А. Б. Бургу-тин // Биология культ, клеток и биотехнология растений. — М.: Наука, 1991. -С. 216-220.

15. Бутенко, Р. Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений / Р. Г. Бутенко. М.: Наука, 1964. — 272 с.

16. Бутенко, Р. Г. Экспериментальный морфогенез и дифференциация в культуре клеток растений / Р. Г. Бутенко. — М.: Наука, 1975. 51 с.

17. Бутенко, Р. Г. Выращивание клеток высших растений в суспензионной культуре / Р. Г. Бутенко // Изв. АН ССР. Сер. Биол. 1977. - № 5. - С. 697-709.

18. Вершкова, Л. П. Получение регенерантов земляники в культуре пыльников и листовых эксплантов / Л. П. Вершкова // Молодые ученые — садоводству России: Тез. докл. Всерос. совещ. -М., 1995. С. 154-156.

19. Высоцкий, В. А. Регенерация плодовых и ягодных растений в культуре каллусной ткани пыльников, листовых и стеблевых эксплантов Текст. / В. А. Высоцкий, Л. В. Алексеенко // Садоводство и виноградарство. — 2008.-№2.-С. 17-20.

20. Высоцкий, В. А. Возможности регенерации растений земляники и малины из каллусов различного происхождения / В. А. Высоцкий, Ф.Н. Хамукова // Ягодоводство в Нечерноземье. М., 1993. - С. 19-24.

21. Гаврикова, Jl. И. Культура пыльников земляники / Л. И. Гаврикова,

22. B. Г. Трушечкин // Проблемы интенсификации садоводства в нечерноземной зоне РСФСР. М., 1985. - С. 73-77.

23. Гаврилова, А. И. Культура пыльников как метод размножения земляники / А. И. Гаврилова // Проблемы вегетативного размножения в садоводстве: Сб. науч. тр.-М., 1985.-С. 128-132.

24. Гамбург, К. 3. Биохимия ауксина и его действия на клетки растений. — Новосибирск, 1976. — 272 с.

25. Гамбург, К.З. Ауксины в культурах тканей и клеток растений / К. 3. Гамбург, Н. И. Рекославская, С. Г. Швецов. — Новосибирск: Наука, 1990.-243 с.

26. Геринг, X. Преодоление витрификации и улучшение акклиматизации растений при клональном микроразмножении / X. Геринг // Биология культ, клеток и биотехнология растений. — М.: Наука, 1991. С. 197-200.

27. Говорова, Г. Ф. Иммунологическое улучшение сортимента земляники в России / Г. Ф. Говорова, М. Д. Калиженкова, В. В. Мазин, Д. Н. Говоров // Сельскохозяйственная биотехнология. М: Воскресенье, 2000. — Т. 1. —1. C. 115-131.

28. Голованова, И. В. Генетические ресурсы и эффективные методы создания нового селекционного материала сельскохозяйственных растений: тез. докл. / И. В. Голованова, Е. Д. Никитина. Новосибирск, 1994. - С. 20-22.

29. Горбунова, В. Ю. Генетические предпосылки спорофитного пути развития микроспор злаков в условиях in vitro / В. Ю. Горбунова. — Уфа: УНЦ РАН, 1993.- 104 с.

30. Горбунова, В. Ю. Андрогенез in vitro яровой пшеницы: Автореф. дис. .докт. биол. наук / В. Ю. Горбунова. Уфа, 2000. - 48 с.

31. Горбунова, В. Ю. Новые методы биотехнологии растений / В. Ю. Горбунова, Н. Н. Круглова: Тез. докл. III Российск. симп. — Пугцино, 1995. С. 18.

32. Горбунова, В. Ю. Эмбриоидогенез в культуре пыльников пшеницы: цито-лого-гистологические аспекты / В. Ю. Горбунова, Н. Н. Круглова, Н. Н. Потапова. Уфа: БНЦ УрО РАН, 1992. - Ч. 1. - 63 с.

33. Гродзинский, А. М. Краткий справочник по физиологии растений /

34. A. М. Гродзинский, Д. М. Гродзинский. — Киев: Наукова думка. 1973. -590 с.

35. Гудвинг, Т. Введение в биохимию растений / Т. Гудвинг, Э. Мерсер. — М.: Мир, 1986.-С. 203-267.

36. Давыдова, Н. Н. Усовершенствование метода культуры пыльников для использования в селекционном процессе капусты (Brassica oleraceae L.): Автореф. дис. . канд. с.-х. наук/Н. Н. Давыдова. -М., 2008. — 25 с.

37. Данвелл, Дж. М. Культуры гаплоидных клеток / Дж. М. Данвелл // Биотехнология растений: культура клеток. М.: Агропромиздат, 1989. -С. 33-51.

38. Деменко, В. И. Микроклональное размножение плодовых и ягодных растений /

39. B. И. Деменко // Докл. ТСХА. 2000. - Вып. 271. - С. 77-79.

40. Дёрфлинг, К. Гормоны растений. Системный подход. / К. Дёрфлинг. М.: Мир, 1985.-304 с.

41. Домблидес, А. С. Разработка лабораторной технологии получения гино-генных растений моркови in vitro: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук / А. С. Домблидес. М., 2001. - 23 с.

42. Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта : (С основами стат. обраб. результатов исслед.) / Б.А. Доспехов. М.: Агропромиздат, 1985. - 351 с.

43. Жуков, О. С. Методические рекомендации по получению растений-регенерантов плодовых пород в культуре пыльников /• О. С. Жуков,

44. Зайнутдинова, Э.М. Особенности регенерации растений из каллусной ткани пшеницы в присутствии абсцизовой кислоты / Э. М. Зайнутдинова,

45. Зайцев, Д. Ю. Потенциально морфогенные андроклинные каллусы как дополнительный источник дигаплоидов / Д. Ю. Зайцев // Материалы 4 съезда Общества биотехнологов России им. Ю. А. Овчинникова, Пущино, 6-7 дек. 2006 г. М., 2006. - С. 77-78.

46. Зубенко, В. Ф. Использование культуры изолированных неоплодотворен-ных семяпочек для получения гаплоидов сахарной свеклы / В. Ф. Зубенко,

47. B. Е. Белоус, Н. А. Олейник, А. Г. Бердышев, JI. П. Перфильева // Матер. Всесоюз. науч. конф. по с.-х. биотехнологии, Целиноград, 27-28 июля, 1991 г. Целиноград. 1991. - С. 73-74.

48. Искакова, К. М. Морфогенез в длительно поддерживаемой культуре анд-рогенных каллусов ячменя: Автореф. дис. . канд. биол. наук / К. М. Искакова. Алма-Ата: Казах, гос. ун-т, 1991. - 21 с.

49. Калинин, Ф.Л. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений / Ф.Л. Калинин, В.В. Сарнацкая, В.Е. Полищук. Киев: Наукова думка, 1980.-399 с.

50. Карпеченко, Г. Д. Полиплоидные гибриды Raphanus sativus L. X Brassica olercea L. / Г. Д. Карпеченко // Тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции. -1927.-С. 17.

51. Касаева, К. А. Использование гаплоидии в селекции зерновых культур / К. А. Касаева // Агропромышленное производство: опыт, проблемы и тенденции развития. 1988. - № 2. - С. 23-30.

52. Кастрицкая, М. С. История культуры зародышей in vitro / М. С. Кастрицкая // Плодоводство: Науч. тр. / Институт Плод. HAH Беларуси. Самохваловичи, 2002.— Т. 14-С. 161-166.

53. Катаева, Н. В. Особенности микроразмножения трудноукореняемых сортов яблони / Н. В. Катаева // Сельскохозяйственная биология. — 1986. — №4. -С. 18-22.

54. Катаева, Н. В. Клональное размножение растений в культуре ткани / Н. В. Катаева, В. А. Аветисов // Культура клеток растений. М.: Наука, 1981.-С. 137-149.

55. Катаева, Н. В. Клональное микроразмножение растений / Н. В. Катаева, Р. Г. Бутенко. М.: Наука, 1983. - 97 с.

56. Кефели, В.И. Рост растений / В. И. Кефели. М.: Колос, 1984. - 175 с.

57. Круглова, Н. Н. Каллусогенез как путь морфогенеза в культуре пыльников злаков / Н. Н. Круглова, В. Ю. Горбунова // Успехи современной биологии. 1997.-Т. 117, №1. -С. 83-94.

58. Круглова, Н. Н. Морфогенез в культуре изолированных пыльников: роль фитогормонов / Н. Н. Круглова, В.Ю. Горбунова, В.А. Куксо // Успехи современной биологии. -1999. Том 119, № 6. - С. 567-577.

59. Круглова, Н. Н. Культура изолированных пыльников злаков: точка зрения эмбриолога. 4 пути развития спорогенных клеток in vitro / Н. Н. Круглова, П. А. Куксо, Т. М. Золотова, О. А. Сельдимирова // Инф. Бюллетень / Ин-т цитол. РАН,-2001.-№ 16.-С. 17-19.

60. Круглова, Н. Н. Цитофизиологические особенности различных типов анд-роклинных каллусов пшеницы / Н. Н. Круглова, О. А. Сельдимирова,

61. Д. Ю. Зайцев // Физиология и биохимия культурных растений. -2007. — 39, № 1.-С. 42-50.

62. Куликов, И. М. Биотехнологические приемы в садоводстве: экономические аспекты / И. М. Куликов, В. А. Высоцкий, А. А. Шипунова // Садоводство и виноградарство. М., 2005. — №5. - С. 24-27.

63. Лаврова, Н.В. Технологические аспекты создания андрогенных гаплоидов озимой мягкой пшеницы / Н. В. Лаврова. — М.: МСХА, 2006. 124 с.

64. Лозариду, Т. В. Влияние холодовой предобработки на культивируемые пыльники ячменя разных генотипов / Т. В. Лозариду, А. С. Литургидис, С. Т. Котцаманидис, Д. Г. Рупакиас // Физиология растений. 2005. — 52, №2.-С. 781-785.

65. Лукьянюк, С. Ф. Метод гаплоидии в селекции зерновых культур / С.Ф. Лукьянюк // С.-х. биология. 1983. -№ 5. - С. 8-18.

66. Лукьянюк, С. Ф. Получение гаплоидов ячменя с помощью гаплопродюсе-ров / С. Ф. Лукьянюк, С. А. Игнатова // Методические рекомендации. — Одесса. 1983.-21 с.

67. Матушкина, О. В. Адвентивный органогенез в культуре тканей / О. В. Матушкина // Повышение эффективности садоводства в современных условиях: Материалы Всерос. науч.-практ. конф. Мичуринск, 2003. -Т. I.-C. 155-159.

68. Мишуткина, Л. В. Изучение влияния состава питательной среды, типа экспланта и генотипа на частоту регенерации растений сахарной свеклы {Beta vulgaris L.) in vitro / Л. В. Мишуткина, А. К. Гапоненко // Генетика. -2006. 42, № 2. - С. 210-218.

69. Мозафари, А. А. Особенности микроклонального размножения новых сортов земляники Текст. / А. А. Мозафари, Г. Ф. Говорова, М. Д. Калиженкова // Плодоводство / Ин-т плод. НАН Беларуси. — Самохваловичи, 2004. -Т. 16. С. 202-205.

70. Муравлев, А. А. Культура пыльников в селекции ярового рапса : автореф. дис. . канд. биол. наук / А. А. Муравлев. Саратов, 2007. - 24 с.

71. Муромцев, Г. С. Регуляторы роста растений / Г. С. Муромцев // Аграрная наука. 1993. -№3. - С. 21-24.

72. Муромцев, Г. С. Основы сельскохозяйственной биологии / Г. С. Муромцев, Р. Г. Бутенко, Т. И. Тихоненко, М. И. Прокофьев. — М.: Аг-ропромиздат, 1990. 384 с.

73. Навашин, М. С. Новая возможность в селекции (об использовании гаплоидов) / М. С. Навашин // Семеноводство. 1933. - № 2. - С. 11-16.

74. Никитина, Н. И. Культура неоплодотворенных семяпочек подсолнечника / Н. И. Никитина, Т. С. Федоренко, А. Ю. Боровков // Науч.-техн. бюл. / ВНИИС пасл. культур. 1989. - №3. - С. 14-16.

75. Осипова, Л. В. Микроклональное размножение земляники в искусственной культуре / Л. В. Осипова, С. Л. Расторгуев, В. М. Тюленев // Бюл. науч. информ. Центр. Генет. Лаб. 1986. - Вып. 43. - С. 27-31.

76. Павлова, М. К. Культура неоплодотворенных завязей и семяпочек: возможности и перспективы / М. К. Павлова // С.-х. биология. 1987. - №1. -С. 27-30.

77. Паушева, 3. П. Практикум по цитологии растений / 3. П. Паушева. М.: Колос.-1974.-С. 288.

78. Петров, Д. Ф. Генетика с основами селекции, изд. 2-е, доп. Учеб. Пособие для ун-тов. М.: «Высшая школа», 1976. - С. 111.

79. Полевой, В. В. Фитогормоны: Учебное пособие / В. В. Полевой. — Л.: Изд-во Ленингр. Ун-та, 1982. 248 с.

80. Пронина, И. Н. Влияние ИМК и ИУК на ризогенез плодовых и ягодных культур in vitro / И.Н. Пронина // Методы эффективного ведения садоводства: сб. науч. тр. Мичуринск, 1996. - С. 137-147.

81. Расторгуев, С. Л. Совершенствование селекционного процесса плодовых и ягодных растений на основе цитологических методов и культуры изолированных тканей: автореф. дис. . докт. с-х. наук / С. Л. Расторгуев — Мичуринск, 2008.-42 с.

82. Роньжина, Е.С 6-бензиламинопурин высокоэффективный экологически безопасный регулятор роста растений / Е. С. Роньжина // Вопросы сельского хозяйства: Междунар. сб. науч. тр. / Калинингр. Гос. тех. ун-т. — Калининград, 2003. - С. 119-127.

83. Сельдимирова, О. А. Развитие микроспориальных эмбриоидов в культуре in vitro пыльников пшеницы / О. А. Сельдимирова, С. Н. Абрамов, Н. Н. Круглова // Физиол. и биохимия культ, раст. 2004. - 36, №4. — С. 320-326.

84. Синнот, Э. Морфогенез растений / Э. Синнот.- М. 1963. — 603 с.

85. Соколов, В. А. Технология гаплоидов в генетике и селекции растений /

86. B. А. Соколов, В. К. Шумный // Вавиловское наследие в современной биологии. -М.: Наука, 1989. С. 247-269.

87. Сорока, А. И. Влияние состава среды каллусогенеза и регенерации в культуре пыльников льна / А. И. Сорока // Цит. и генетика. 2004. - Т. 38, №2. —1. C. 20-25.

88. Солдатов, И. В. Экспериментальная гаплоидия у сливы домашней / И. В. Солдатов // Генет. аспекты селекции в Киргизии. Фрунзе: Изд-во «Илим», 1982.-С. 100-102.

89. Солдатов, И. В. Гаплоиды косточковых плодовых растений и их использование в селекции / И. В. Солдатов // Генет. аспекты селекции в Киргизии. Генетика, селекция и семеноводство растений. 1986. - С. 102-106.

90. Спивак, В. А. Влияние физиологически активных веществ на морфогенез пыльников пшеницы в культуре in vitro / В. А. Спивак, О. Н. Головинская, Б. Г. Быховцев // Вопр. биохимии и физиол. раст. и микроорганизмов. — 1991. -№12. С. 66-73.

91. Тивари, Ш. Морфогенез в культуре пыльников и изолированных микроспор ячменя: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Ш. Тивари. М.: ТСХА, 1989.-25 с.

92. Тивари, Ш. Цитогенетическая гетерогенность андрогенных каллусов ячменя / Ш. Тивари, С. Колумбаева, И. Р. Рахимбаев // Цитология и генетика.- 1990.-С. 12-15.

93. Тивари, Ш. Регуляторы роста и развития растений / Ш. Тивари, И.Р. Рахимбаев : Тез. докл. II Всесоюз. конф. -Киев, 1989. С. 295.

94. Туровская, Н. И. Особенности микроклонального размножения земляники / Н. И. Туровская, О. В. Стрыгина, JI. Алыпевцева // Сб. науч. тр. / ВНИИ садов-ва им. И. В. Мичурина. Мичуринск, 1986. - Вып. 47. - С. 49-56.

95. Тюкавин, Г. Б. Основы метода андрогенеза моркови in vitro путем каллу-согенеза / Г. Б. Тюкавин. ГАВРИШ, 2006. - №4. - С. 28-32.

96. Хамукова, Ф. Н. Регенерация растений земляники и малины из эксплантов различного происхождения : автореф. дис. . канд. с.-х. наук / Ф. Н. Хаму-кова.-М., 1994.-22 с.

97. Хохлов, С. С. Гаплоидия и селекция / С. С. Хохлов, Е. В. Гришина и др. — М.: Наука, 1976.-221 с.

98. Шамина, 3. Б. Андрогенез и получение гаплоидов в культуре пыльников и микроспор / 3. Б. Шамина // Культура клеток растений. М., 1981 - С. 124-136.

99. Шевелуха, В. С. Современные проблемы гормональной регуляции живых систем и организмов / В. С. Шевелуха // Регуляторы роста и развития : Сб. тез. докл. III конф. М., 1997. - С. 3-4.

100. Шипунова, А. А. Влияние некоторых факторов культивирования на кло-нальное микроразмножение плодовых и ягодных растений / А. А. Шипунова, В. А. Высоцкий // Плодоводство и ягодоводство России: сб. науч. работ / ВСТИСП. М., 2002. - Т. IX. - С. 193-200.

101. Шмыкова, Н. А. Разработка системы биотехнологических методов, направленных на ускорение селекционного процесса овощных культур : авто-реф. дис. . докт. с-х. наук. М., 2006. - 47 с.

102. Anderson, R. L. Rooting of tissue cultured rhododendrons / R. L. Anderson // The inter. Plant. Prop. Soc. 1978. -V. 28. - P. 135-139.

103. Arnison, P. G. Genotype specific response of cultured broccoli (Brasssica oleracea var. italica) anthers to cytokinins / P. G. Arnison, P. Donaldson, A.Jackson, C. Semple, W. A. Keller // Plant Cell Tiss, Org. Cult. - 1990. -V. 20.-P. 217-222.

104. Biesaga-Koscielniak, S. Effect of zearalenone treatment on the production of wheat haploids via the maize pollination system / S. Biesaga-Koscielniak, I. Marsinska, M. Wedzony, S. Koscielniak // Plant Cell Repts ЭИ. 2003. -21, №11.-P. 1035-1039.

105. Blakeslee, A. F. A haploid mutant in the Simson weed, Datura Stramonium / A. F. Blakeslee, I. Belling, M.E. Farnhame, A.D. Bregner // Science 1922. -V. 1,55.-P. 646-647.

106. Bryser, S. Wheat: production of haploids, performance of doubled haploids and trials / S. Bryser, Y. Henry // Crops B. 1986. - V. 1. - P. 73-88.

107. Button, J. Tissue in the citrus industry / J. Button, J. Kochba // Appl. and fun-dam. Aspects plant cell, tissue and organ cult. B. etc. // Spring. Verl., 1977. -P. 70-92.

108. Chase, S. S. Monoploids and monoploid-derivatives of maize (Zea mays L.) / S. S. Chase // Bot. Rev. 1969. - Vol. 35. - P. 117-167.

109. Chopra, R. W. In vitro culture of ovaries of Athaea rosea Cav. / R. W. Chopra // Proc. Seminar. Mof. Lev. Plant Phisiol / Ed. P. Maheshwari. Delhi., 1958. -P. 87-89.

110. Doina, Clapa. The use of zeatin as growth regukator for the micropropagation of some highbush blueberry (Vaccinium corymbosum) cultivars / Clapa Doina, Al. Fira // Bui. Univ. sti. Agr. Si med. Vet. Cluj-Napoca. Ser. Hort. 2006. - 63. -P. 320-325.

111. Fang Shu-Gui, Zeng Xiao-Ling, Zhu Chao-Hui, Lin Bi-Ying, Chen Wen- Hui, Liao Xiao-Zhen. Wuhan Zhiwuxue yanjiu // S. Wuhan Bot. Res. 2005. -23, №6.-P. 530-534.

112. Feng, X. R. Recovery of haploid plants from asparagus microspore culture / X. R. Feng, D. J. Wolyn // Can. J. Bot. 1994. - 72, №3. - P. 296-300.

113. Ferrie, A.M. Evalnation of Brassica rapa L., genotypes from for microspore culture response and identification of a highly embryogenic line / A.M. Ferrie, L. S. Epp, W. A. Keller // Plant Cell Repts. 1995. - 14, № 9. - P. 580-584.

114. Flehing-Haus, Roux T. Anther — culture ability in Secale cereals L. / Roux T. Flehing-Haus, S. Leimling, H. H. Veiger // Plant Breed. 1995. - 114, № 3. -P. 259-261.

115. Fowler, C. W. Callus formation from strawberry anthers / C. W. Fowler, H. G. Hughes, J. Janick // Hortic. Res. 1971. - V.2. - P. 116-117.

116. Garcia-Llamas, C. Effect of pollinator on haploid production in durum wheat crossed with maize and pearl millet / C. Garcia-Llamas, M. C. Ramirez, S. Ballesteros // Plant Breed. 2004. - 123, №2. - P. 201-203.

117. Guha, S. In vitro production of embryos from anthers of Datura. / S. Guha, S. C. Maheshwari // Nature. 1964. - V.204. - P. 497-498.

118. Guo Shu -qiao, Fang Hai- juan, Wang Zhou-fei, Zhang Hong-sheng. Nanjing non-gue daxue xuebao // S. Nanjing Agr. Uniw. 2006. - 29, №2. - P. 1 -5.

119. Ho, K. M. Genetic control of chromosome elimination during haploid formation in barley / K. M. Ho, K. J. Kasha // Genetics. 1975. - Vol. 81. - P. 263-275.

120. Johansson, L. Improvement of anther culture technique activated charcoal bound in agar medium in combination with liquid medium and elevated C02 concentration / L. Johansson, B. Anderson, T. Eriksson // Physiol Plant. 1982. — V. 54.-P. 24-30.

121. Jones, O. P. Propagation in vitro of five apple scion cultivars / O. P. Jones, C. H. Pontikis, M. E. Hopgood // J. Hort. Sci. 1979. - V. 54, № 2. - P.155-158.

122. Kasha, K. S. Utilization of haploidy in plant breeding and mutation / K. S. Kasha // Genetics. 1976. - Vol. 8, № 12. - P. 101-110.

123. Kasha, K. S. Achievements with haploids in barby research and breeding / K. S. Kasha, E. Reinbergs // The plant genome. Nowick, 1980. - P. 215-230.

124. Keller, W. A. Einige morphologische Aspekte bei der Kulture von Antheren / W. A. Keller, E. Klocke, H. B. Schmidt // Biol. Rundsch. 1986. - V. 24, № 6. -P. 367-381.

125. Kimbler, G. Haploid angiosperms / G. Kimbler, R. Riley // Bot. Rev. 1963. -V. 29.-P. 80-531.

126. Lane, W. D. Regeneration of apple plants from shoot meristem tips / W. D. Lane, //Plant Sci., left. - 1978. -V. 13. - P. 281-285.

127. Lei Chun, Chen Sin-feng. Qian Chun-tao, Zhang Yong-bing. Song Hui. Xibei zhiwu xuebao // Acta bot. boreali Occident, sin. - 2004. - 24, №9. - P. 1739-1743.

128. Lezin, F. The effects of genotype, ploidy level and cold pretreatment on barley anther culture responsiveness / F. Lezin, A. Sarrafi, G. Alibert // Cereal Res. Commun. 1996. - 24, № 1.-P. 7-13.

129. Li Wei-dong. Hebei nongye daxue xuebao / Li Wei-dong, Ge Hui-bo, Zhou Chun- jiang, Zhang Jie. // J. Agr. Univ. Hebei. 2004. - V. 27, № 2. - P. 59-63.

130. Lin Gang, He Yonggang, Liu Yong, He Guangyuan. Huazhong keji daxue xuebao. Ziran Kexue ban // J. Hualhong Univ Sci. and Techol. Natur. Sci. 2004. -32, №9. — P. 111-113.

131. Lopez-Perez, A. J. High embryogenic ability and plant regeneration of table grapevine cultivars (Vitis vinifera L.) induced by activated charcoal / A. J. Lopez-Perez, J. Carreno, A. Martinez-Cutillas, M. Dabauza // Vitis. 2005. - 44, № 2. - P. 79-85.

132. Maheshwari, S. C. Haploids from pollen grains retrospect and prospect / S. C. Maheshwari, A. Rashid, A. K. Jyagi // Amer. Y. Bot. - 1982. - 69, № 5. - P. 865-879.

133. Masoje, R. Responsiveness to anther culture in cultivars and F, cros ses of spring wheat / R. Masoje, O. M. Lukow, R. S. H. McKenzie, N. K. Howes // Can. S. Plant Sci. 1993. - 73, №3. - C. 777-783.

134. Melchers, G. Haploid higher plants for plant breeding / G. Melchers // Z. Pflan-zenzuchtg. 1972. -V. 67. - P. 21-32.

135. Moreira, M. F. Anatomical aspects of IBA-treated microcuttings of Gamphrena macrocephala St.-Hil / M. F. Moreira, B. Appezzato-Gloria, L. B. P. Zaidan // Braz. Arch.Biol. and Technol. 2000. - 43, № 2. P. 44-48.

136. Murashige, T. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures / T. Murashige, F. Skoog // Physiol. Plant. 1962. - V. 15-13. -P. 473-497.

137. Niemirowicz-Sczytt, K. Micropropagation from the meristems and young leaves ofFragaria/K.Niemirowicz-Sczytt, S. Mulepszy//Bull. Pol. Acad. Sci. Biol. Sci — 1980.-V.28, № 5.-P. 335-340.

138. Niemirowicz-Sczytt, K. Characters of plants obtaned from Fragaria x ananassa in anther culture / K. Niemirowicz-Sczytt, Z. Zakrzewska, S. Malepszy, B. Kubicki // Ac-taHortic.-1983.-V. 131.-P. 231-238:

139. Nitsch, S. P. Haploid plant from pollen. / S. P. Nitsch // Z. Pflanzenzucht. -1972.-V. 67.-P. 3-18.

140. Nogler Gian Sondrea. Genetics of gametophytic apomixes historical sketch / Nogler Gian Sondrea // Pol. Bot. Stud.- 1994. - 8. - P. 5-11.

141. Oosawa, K. Studies on the anther culture of vegetable crops. 2. Multiplying virus-free strawberry plants by means of the anther culture method / K. Oosawa, M. Toda, S. Nishi // Bull. Veg. Ornament. Crops Res. Stat. A. 1974.-№ 1.- P. 41-57.

142. Petolino, I. F. Anther culture of elite genotypes of maize / I. F. Petolino, A. M. Jones // Crop Sci. 1986.-26, № 5. - P. 1072-1074.

143. Pierik, R. L. In vitro culture of higher plants / R. L. Pierik // Lordrecht: M. wij-hoffPubl.-1987.-344 p.

144. Prakash, S. Indaction and growth of androgenic haploids / S. Prakash, Z. Giles // Int. Rev. Cytol. 1987. - Vol. 107. - P. 273-292.

145. Pundir, N. S. Experimental embryology of Gossypium arboretum L. and G. hir-sutum L. and their reciprocal crosses . / N. S. Pundir // Bot. Gaz. 1972. -V. 133. -№1. -P. 7-26.

146. Quorin, M. Improved medium for in vitro culture of Prunus sp. / M. Quorin, P. Lepoivre // Acta hortic. 1977. - V. 78. - P. 437-442.

147. Reddy, V. Influence of genotype and culture medium on microspore callus -induction and green plant regeneration in anihersof Oryza sativa / V. Reddy, S. Leelevathi, S. Sen // Physiol, Plantazum. 1985. - 63, 3. - P. 308-314.

148. Roberts, L. W. Cytodifferentiation in plants / L. W. Roberts // Y. Canberra Univ. press, 1976.-P. 538-542.

149. Rosati, P. Anther culture of strawberry / P. Rosati, M. Devreux, U. Laneri // Hortscience. 1975. — V. 10.-P. 119-120.

150. Roulund, N. Effect of genotype, environment and carbohydrate on anther culture response in head cabbage (Brassica oleraceae L. Convar. capitata L.). Alef. / N. Roulund, L. Hansted, S. B. Andersen, B. Farestveit // Euphytica. 1990. -49, №3.-P. 237-242.

151. Rudolf, K. Microspore culture of white cabbage, Brassica oleraceae var. capitata L.: Genetic improvement of non-responsive cultivars and effect of genomedoubling agents / K. Rudolf, B. Bohanes, M. Hansen // Plant Breed. 1999. -118. №3. - P. 237-241.

152. Sachar, R. C. In vitro culture of ovaries of Zephyranthes / R. C. Sachar, M. Kapoor// Phytomorfology. 1959.-9, №21. - P. 147-156.

153. Sachar R. C. Influence of kinetin and gibberellic acid on the test-tube seeds of Cooperia pedunculata Herb / R. C. Sachar, M. Kapoor // Naturwissens chaften. — 1958.-45.-P. 552-553.

154. Salokhe, S. S. Micropropagation of sugar beet (Beta vulgaris L.) / S. S. Salokhe, Y. S. Nerkar // J. Maharashtra Agr. Univ. 2005. - 30, № 3. -P. 298-301.

155. Skoog, F. Chemical regulation of growth and organ formation in plant tissue cultured in vitro / F. Skoog, C.O. Miller// Sympos. Soc. Experiment. Biol. "The biological action of growth substances" Eds. Porter H.K. 1957. - V.l 1. -P.l 18-131.

156. Sharma, H. An assessment of doubled haploid production in soft red winter wheat by wheat x corn wide crosses / H. Sharma, Y. Yang, H. Ohm // Cereal Res. Commun. 2002. - 30, № 3-4. - P. 269-275.

157. Shi Xue-hui, Chen Hai-xia, Jiang Hui, Yang Can, He Ke-jia, Hong Ya-hui. Hunan nongye daxue xuebao // J. Hunan Agr. Univ. 2003. - 29, № 6. - P. 509-512.

158. Shimada Takiko, Otani Motogasu, Koba Takato. Anther culture of Japanese spring wheat «Haruhikari» and characterization of doubled haploid plants // Bull. Res. Inst. Resour. Ishikawa Agr. Coll. 1995. - №4. - P. 17-22.

159. Singh, S. Differential responsiveness of winter and spring wheat genotypes to maize-mediated production of haploids / S. Singh, G. S. Sethi, H. K. Chaudhary // Cereal Res. Commun. 2004. - 32, №2. - P. 201-207.

160. Stewart, J. In ovuloe embryo culture and seedling development of cotton (G. hirsutum L.). / J. Syewart, D. Mc, C.L. Hsu // Planta. 1977. - V. 137, №2. -P. 113-117.

161. Sunderland, N. Multicellular pollen formation in cultured barley an-ther.Independent division of the generative and vegetative cells / N. Sunderland,

162. M. Roberts, L. Y Evans, D. C. Wildon // S. Exp. Bot. 1979. - Vol. 30, w. 119. -P. 1133-1144.

163. Trejo -Tapia Gabriela, Amaya Uriel Maldonado, Morales Guadalupe Solcedo, Sancher Antonia De Jesus, Bonfil Blanca Martinez, Rodrigues Monroy Mario, Jimenez - Apariceo Antonio // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. - 2002. — 71, №1.- P. 41-46.

164. Tretyakova, SraidaN. Induction of androgenic cultures of Siberian larch (Larix sibirica Ledeb) / Sraida N. Tretyakova, Alonya S. Vyazovetskova, Anna S. Svanova // Eurasion S. Forest Res. 2006. - 9, №1. - P. 37-44.

165. Truong, A. In vitro haploid plants derived from pollination by irradiated pollen on cucumber. / A. Truong // Cucurbitaceal 88: Proc EUCARPIA Meet Cucurbut Genet, and Breed., Avignon Montfavet, May 31 - June 1-2, 1988. - Paris. -1988.-P. 143-144.

166. Tulecke, W. A tissue derived from the pollen of Yinkgo biloba / W. Tulecke. -Science. 1953. - 117, w 3048. - P. 599-600.

167. Vaithiyalingan, M. Effect of 2,4-D and casein — hydrolysate on callus induction and differentiation in Pigeon pea (Cajanus cajari) / M. Vaithiyalingan, N. Nadarajan // J. Ecobiol. 2004. - 16, №2. - P. 119-122.

168. Wang Tao Tao, Li Han - Xia, Zhang Si - Hong Lu Yong - En, Ye Zhi - Biao. Wuhan zhiwuxue yanjin // S. Wuhan Bot. Res. - 2004. - 22, №6. - P. 596-574.

169. Xie Miao, Qin Li ying, Pan Sun - song, He Huan - le, Wu Ai - zhong, Cai Run. Xibei zhiwu xuebao // Acta bot. boreali - Occident, sin. - 2005. - 25, № 6. -P. 1096-1100.

170. Xynias, I. N. Effect of cold pretreatment and incubatuin (Triticum aestivum) anther culture /1. N. Xynias, I. A. Zamani, E. Gouli Vavdinoudi, D. G. Roupakias // Cereal Res. Commun. - 2001. - 29, №3-4. - P. 331-338.

171. Zenkteler, M. Induction of androgenetic embryoids in the in vitro cultured anthers of several species / M. Zenkteler, E. Misiura, E. Ponitka // Experientia. 1975. - V.31. -P. 289-291.

172. Zhang Fuquan, Zheng Sixiang, Lin Xun, Q Shaowu. Hunan nonqye daxue xu-ebao // J. Hunana Agr. Univ. 1999. - 25, №4. - P. 275-278.

173. Zhao Sing, Sun Meng-Xiang. Wuhan Zhiwuxue yanjiu // J. Wuhan Bot. Res. -2005.-23, №6.-P. 519-523.

174. Zhou, C. Induced of haploid rice plantlets by ovary culture / C.Zhou, H. Y. Yang // Plant Sci. Let. 1981. - 20. - P. 231-237.

175. Zhu Hai-sheng, Pan Dong-ming, Lin Yi-zhang, Zhang Zhi-zhong, Wen Qing-fang. Xibei zhiwu xuebao // Acta bot. boreali oceident. sin. - 2007. - 27, № 5. -P. 919-925.