Синтез и химико-фармацевтические свойства 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Мархабуллина Регина Шамильевна

• Мархабуллина Регина Шамильевна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Мархабуллина Регина Шамильевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Методы получения бензофуроксанов

1.2 Биологическая активность в ряду бензофуроксанов

1.3 Применение бензофуроксанов

1.4 Разработка инновационных лекарственных препаратов

1.5 Подходы к стандартизации фармацевтических субстанций

1.6 Методы контроля качества лекарственных средств

1.7 Валидация аналитических методик и статистическая обработка результатов анализа

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Характеристика объектов

2.2 Методы исследования

ГЛАВА 3. СИНТЕЗ 5,7-БИС(МЕТА-НИТРОФЕНИЛАМИНО)-4,6-ДИНИТРОБЕНЗОФУРОКСАНА

3.1 Оценка качества исходных веществ для синтеза субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

3.2 Оптимизация лабораторного метода синтеза 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

3.3 Изучение растворимости субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ПОДЛИННОСТИ СУБСТАНЦИИ 5,7-БИС(МЕТА-НИТРОФЕНИЛАМИНО)-4,6-ДИНИТРОБЕНЗОФУРОКСАНА

4.1 Изучение физических свойств субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

4.2 Изучение химических свойств субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

4.3 Спектральные характеристики субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

4.3.1 ИК-спектроскопия

4.3.2 ЯМР *Н -спектроскопия

4.3.3 УФ-спектроскопия

4.4 Качественная реакция на субстанцию 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

ГЛАВА 5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОСТИ СУБСТАНЦИИ

5,7-БИС(МЕТА-НИТРОФЕНИЛАМИНО)-4,6-ДИНИТРОБЕНЗО-

ФУРОКСАНА

5.1 Определение потери в массе при высушивании субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

5.2 Определение сульфатной золы в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

5.3 Определение посторонних примесей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

5.3.1 Определение посторонних примесей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом тонкослойной хроматографии

5.3.2 Определение посторонних примесей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной

хроматографии

5.3.2.1 Валидация методики определения посторонних примесей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензо-фуроксана методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии

5.4 Определение остаточных органических растворителей в субстанции

5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

5.4.1 Валидация методики определения остаточных органических растворителей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом газовой хроматографии

ГЛАВА 6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ АКТИВНОГО ВЕЩЕСТВА В

СУБСТАНЦИИ 5,7-БИС(МЕТА-НИТРОФЕНИЛАМИНО)-4,6-

ДИНИТРОБЕНЗОФУРОКСАНА

6.1 Количественное определение 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в субстанции методом УФ-спектроскопии

6.2 Количественное определение 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в субстанции методом титрования в неводном растворителе

6.2.1 Валидация методики количественного определения 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в субстанции методом титрования в неводном растворителе

6.3 Количественное определение 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в субстанции методом потенциометрического титрования

ГЛАВА 7. ИЗУЧЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ СУБСТАНЦИИ 5,7-БИС(МЕТА-

НИТРОФЕНИЛАМИНО)-4,6-ДИНИТРОБЕНЗОФУРОКСАНА

ГЛАВА 8. УСТАНОВЛЕНИЕ ПЕРВОНАЧАЛЬНОГО СРОКА ГОДНОСТИ СУБСТАНЦИИ 5,7-БИС(МЕТА-НИТРОФЕНИЛАМИНО)-4,6-

ДИНИТРОБЕНЗОФУРОКСАНА

ГЛАВА 9. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

9.1 Синтез субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.2 Перекристаллизация субстанции

5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.3 Изучение кислотно-основных свойств субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.4 Изучение растворимости субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.5 Изучение температуры плавления субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.6 Изучение спектральных характеристик субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом УФ-спектроскопии

9.7 Определение потери в массе при высушивании субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.8 Определение сульфатной золы в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.9 Определение посторонних примесей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом тонкослойной хроматографии

9.10 Определение посторонних примесей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной

хроматографии

9.11 Определение остаточных органических растворителей в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

9.12 Количественное определение субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом титрования в неводном растворителе

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Приложение 1. Проект фармакопейной статьи

"5,7-Бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксан"

Приложение 2. Акт внедрения результатов НИР

Приложение 3. ИК-спектр 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез и химико-фармацевтические свойства 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. Фармацевтическая отрасль в Российской Федерации является стратегически значимой, обеспечивающей национальную безопасность, социальную и экономическую стабильность страны. В Российской Федерации для роста инновационного потенциала фармацевтической отрасли, снижения импортной зависимости национального рынка лекарственных средств и увеличения конкурентоспособности отечественного производства эффективно разрабатываются программы на период до 2020 года и стратегии развития. Приоритетным направлением стратегии развития фармацевтической промышленности Российской Федерации на период до 2020 года является создание оригинальных отечественных фармацевтических субстанций и препаратов на их основе.

Лечение гельминтозов в животноводстве занимает важную роль, так как это заболевание наносит большой урон сельскому хозяйству. Несмотря на большое разнообразие антигельминтиков, потребность в новых гораздо более эффективных и малотоксичных препаратах не ослабевает. В связи с этим создание новых нетоксичных антигельминтных препаратов является весьма актуальным.

В ряду производных бензофуроксанов Спатловой Л.В. и Юсуповой Л.М. впервые обнаружены антигельминтные свойства ряда соединений. Одним из представителей производных бензофуроксана, проявляющий антигельминтные свойства, является впервые синтезированное в Казанском национальном исследовательском технологическом университете (КНИТУ) соединение - 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксан (бис(НФА)ДНБФО) с низкой токсичностью. Проведенные доклинические испытания доказали, что бис(НФА)ДНБФО относится к четвертому классу опасности (LD50=5000 мг/кг) и не вызывает отдаленных последствий. Производственные испытания бис(НФА)ДНБФО на животных (молодняк свиней) в виде лекарственной формы показали высокую лечебную эффективность при однократном применении. Для

проведения экспертизы и регистрации бис(НФА)ДНБФО необходима стандартизация лекарственной субстанции (ЛС).

Цель работы: оптимизация синтеза биологически активного бис(НФА)ДНБФО с применением метода математического планирования эксперимента и аналитическим контролем исходных веществ и конечного продукта, исследование физических и химических свойств, спектральных и хроматографических характеристик субстанции бис(НФА)ДНБФО, разработка методик фармацевтического анализа, норм качества, нормативных документов: спецификации и проекта фармакопейной статьи.

Для достижения цели решались следующие задачи:

- выбрать оптимальные условия (растворитель, температура, время реакции) синтеза с целью оптимизации выхода и качества бис(НФА)ДНБФО, провести оптимизацию синтеза методом математического планирования;

- изучить физические и химические свойства, спектральные характеристики субстанции бис(НФА)ДНБФО для установления подлинности;

- изучить состав и содержание примесей для оценки доброкачественности субстанции бис(НФА)ДНБФО с применением методов тонкослойной хроматографии (ТСХ) и обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ ВЭЖХ);

- оценить валидационные параметры разработанных методик анализа субстанции бис(НФА)ДНБФО;

- изучить стабильность и экспериментальный срок годности субстанции бис(НФА)ДНБФО;

- установить нормы качества и разработать нормативную документацию на субстанцию бис(НФА)ДНБФО.

Научная новизна. Впервые с использованием метода математического планирования проведена оптимизация синтеза бис(НФА)ДНБФО по составу растворителя, температуры и времени реакции, обеспечивающая выход бис(НФА)ДНБФО в количестве 93 %. Впервые установлены условия хроматографического разделения бис-(НФА)ДНБФО, мета-нитроанилина (м-НА) и 5,7-дихлоро-4,6-динитробензофуроксана (5,7-ДХ-4,6-ДНБФО) в условиях ОФ

ВЭЖХ, обеспечивающие разрешение пиков более 1,5, симметрию пиков менее 1,5 и количественное определение м-НА и 5,7-ДХ-4,6-ДНБФО с пределом количественного определения 0,0313 и 0,125 мкг/мл соответственно. Найдены и обоснованы рабочие условия высокочувствительного количественного определения остаточных органических растворителей: этанола и ацетонитрила в субстанции бис(НФА)ДНБФО методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ), обеспечивающие разрешение пиков более 1,5, симметрию пиков менее 1,5 и количественное определение этанола и ацетонитрила с пределом количественного определения 40 и 13 мкг/мл соответственно. Показана возможность количественного определения бис(НФА)ДНБФО в субстанции с использованием метода УФ-спектроскопии и титрования.

Практическая значимость. Разработаны методики количественного определения бис(НФА)ДНБФО в субстанции методом титрования и УФ-спектроскопии, методики количественного определения посторонних примесей: м-НА и 5,7-ДХ-4,6-ДНБФО в субстанции бис(НФА)ДНБФО методом ОФ ВЭЖХ и ТСХ; остаточных органических растворителей: этанол и ацетонитрил в субстанции бис(НФА)ДНБФО методом ГЖХ; установлены нормы качества субстанции бис(НФА)ДНБФО, составлены спецификация и проект фармакопейной статьи на субстанцию бис(НФА)ДНБФО с целью дальнейшей стандартизации (Приложение 1).

Внедрение результатов исследования. Результаты исследования апробированы в испытательной лаборатории отдела контроля качества ОАО "Татхимфармпрепараты" (Приложение 2).

Основные положения, выносимые на защиту:

- оптимизация условий синтеза бис(НФА)ДНБФО с аналитическим контролем качества исходных веществ и конечного продукта;

- химико-фармацевтические свойства субстанции бис(НФА)ДНБФО;

- нормирование основных показателей качества субстанции бис(НФА)ДНБФО;

- результаты исследования валидационных характеристик разработанных методик фармацевтического анализа субстанции бис(НФА)ДНБФО;

- изучение стабильности, экспериментального срока годности субстанции бис(НФА)ДНБФО;

- составление проекта фармакопейной статьи на субстанцию бис(НФА)ДНБФО.

Апробация работы. Основные результаты проведенных исследований были представлены на IX Всероссийской конференции «Химия и медицина» (Уфа, 2013), на Первой Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Проблемы разработки новых лекарственных средств» (Москва, 2013), на Первой Международной научной конференции «Стандартные образцы в измерениях и технологиях» (Екатеринбург, 2013), на XVII Международной заочной научно-практической конференции «Научная дискуссия: вопросы медицины» (Москва, 2013), на Международной научной конференции по аналитической химии и экологии, посвященной 110-летию со дня рождения академика Академии Наук Республики Казахстан М.Т. Козловского (Казахстан, 2013), на V Молодежной научно-технической конференции «Наукоемкие химические технологии - 2013» (Москва, 2013), на VIII Международном симпозиуме по фундаментальным и прикладным проблемам науки (Миасс, 2013).

Публикации. Основные результаты диссертационной работы опубликованы в 14 печатных изданиях, включая 6 статей в рецензируемых изданиях, рекомендуемых для размещения материалов диссертаций и 8 тезисов докладов.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, экспериментальных результатов и их обсуждения, выводов и библиографического списка, содержащего 177 источников, в том числе 36 иностранных источников. Работа изложена на 163 страницах машинописного текста и включает в себя 48 таблиц и 56 рисунков.

Личный вклад автора. Автор активно участвовал во всех этапах представленной работы: постановке цели и задач исследования, проведении экспериментов, обработке и интерпритации полученных результатов, формулировке научных выводов, написании и оформлении статей. Автором лично проведены все

синтезы, представленные в работе, выполнены исследования по установлению физических, физико-химических и химических свойств бис(НФА)ДНБФО, на основе которых разработаны и валидированы методики количественного определения и оценки чистоты бис(НФА)ДНБФО, установлен первоначальный срок годности субстанции бис(НФА)ДНБФО, составлен проект ФСП на субстанцию бис(НФА)ДНБФО.

Благодарности. Автор выражает глубокую признательность своему научному руководителю д.х.н., профессору Л.М. Юсуповой за постоянную поддержку и чуткое руководство; начальнику испытательной лаборатории отдела контроля качества ОАО "Татхимфармпрепараты" Е.А. Курченковой за помощь в выполнении работы; научному сотруднику лаборатории элементорганического синтеза Института органической и физической химии им. А.Е. Арбузова к.х.н. Э.М. Гибадуллиной за помощь в проведении ЯМР анализа.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Методы получения бензофуроксанов

Бензофуроксаны представляют собой гетероциклические соединения, в которых фуроксановое кольцо сконденсировано с ароматическим ядром.

Основными способами синтеза бензофуроксанов и их производных являются: окисление ароматических о-нитроаминов, термолиз ароматических о-нитроазидов и окисление виц-диоксимов.

1.1.1 Окисление ароматических о-нитроаминов

Метод получения бензофуроксанов окислением о-нитроанилина и его замещенных получил широкое применение. Применяя в качестве окислителя аминной группы гипохлорит натрия, фенилиодозоацетат, диацетат иодозобензола и тетраацетат свинца из о-нитроанилина и его замещенных получены бензофуроксаны общей формулы [1]:

^ Т ^3 R2

О

R2

Р=Р1=Р2=Р3= Н, СН3, ОСН3

1.1.1.1 Окисление ароматических о-нитроаминов гипохлоритами

Действие гипохлорита щелочных металлов на орто-нитроанилины в щелочной среде приводит к образованию фуроксанового цикла [2].

В 1912 году Грин и Роу получили бензофуроксаны, действием в щелочной среде гипохлорита натрия на орто-нитроанилин, с выходом 95 % [3]:

Этот метод получил широкое распространение для синтеза бензофуроксанов.

1.1.1.2 Окисление ароматических о-нитроаминов фенилиодозоацетатом

Паусакер, изучая окисление о-нитроанилинов фенилиодозоацетатом до

азосоединений, обнаружил, что о-нитроанилины в бензольном растворе

окисляются до бензофуроксанов:

_ 6 .

0 Выход 90-95 % ры(оас)2 (1,2-3 моля), в бензоле, 20-40 °С, 1-2 суток. Х=Н, Ме (4- и 5-), С1 (4- и 5-), МеО (5-), Ш2 (4- и 5-).

На 1 моль нитроанилина расходуется чуть больше 1 моля окислителя. При наличии заместителей в положении 4 или 5 о-нитроанилина независимо от их электронного характера реакция протекает очень гладко. Исключение составляет 4-метоксигруппа, полностью подавляющая реакцию [4].

В положениях же 3 и 6, т.е. рядом с амино- и нитрогруппами, участвующими в замыкании фуроксанового кольца, заместители неблагоприятно влияют на ход реакции. Особенно сказывается влияние заместителя рядом с аминогруппой:

Ж2 ОЬ ИПА^

^ О

РМ(ОАС)2

/

№2 Т \

х х 0 Выход 30-50 %

Х=Ме, МеО, С1; PhJ(OAc)2 (1,1 моля), в бензоле, 20-30 °С, 2-6 суток.

Главный общий недостаток окисления фенилиодозоацетатом - большая длительность процесса, измеряемая при невысоких температурах обычно сутками.

1.1.1.3 Окисление виц-диоксимов

Метод получения бензофуроксанов путем окисления виц-диоксимов заключается в окислении одной оксимной группы до аци-нитрогруппы и затем дегидратацией образовавшегося промежуточного соединения [1].

В качестве окислительных агентов используют галогены, гипогалогениты (ЫаОС1, КаОВг), перекись водорода, тетраацетат свинца. В случае использования в качестве окислителей азотной кислоты процесс протекает с образованием двух соединений: бензофуроксана и соответствующего нитропроизводного. Недостатками метода являются малый выход конечного продукта реакции и малая доступность виц-диоксимов.

1.1.2 Термолиз ароматических о-нитрофенилазидов и этиленовых виц-

нитроазидов

Основным и наиболее универсальным способом получения бензофуроксанов является термическое разложение о-нитрофенилазидов. Впервые этот метод представлен Ноэльтингом и Кюном [1] на примере синтеза 5-метилбензофуроксана по схеме:

CH,

CH,

-N

NO„

N

/

O

>

N--O

Термоциклизация проводится в среде высококипящего растворителя. Наиболее подходящими для этих целей являются толуол и ксилол. В последнее время применяют уксусную и пропионовую кислоты, что дает возможность получать целевые продукты термоциклизации исходных азидопроизводных, не выделяя их из реакционной среды.

Цинке и Шварц [1] установили, что при нагревании о-нитроазидопроизводных бензола отщепляется молекула азота и замыкается фуроксановый цикл, сконденсированный с бензольным, например:

N3

NO

70-90 0C -N *

2

N

O

/ N

ч

O Тпл=72 °С

Реакция проводилась без растворителя, в расплаве. Такому превращению подвергались также 4-азидо-3-нитротолуол, 2-азидо-3-нитротолуол, 4-азидо-5-нитро-м-ксилол, 1,2- и 2,1-нитроазидинафталины.

Впоследствии было установлено, что эту реакцию с успехом можно проводить в растворителях, и она превратилась в один из важнейших методов получения бензофуроксанов.

Юсуповой Л.М. и Салаховой А.С. описан способ получения 5,7-дихлоро-4(6)-нитробензофуроксана термоциклизацией соответствующего орто-нитро-фенилазида [5, 6]:

t

NO,

N

O2N

O

O

O

O

Термолиз орто-нитро-фенилазидов необходимо проводить в высококипящих негорючих растворителях: ДХЭ, хлорбензол, бромбензол, нитробензол. Функциональные группировки (КО2, С1) в составе орто-нитрофенилазидов не мешают термоциклизации. Термолиз является наиболее универсальным методом и позволяет получить труднодоступные бензофуроксаны, замещенные различными функциональными группами.

Фуроксановый цикл замыкается при термолизе 2-нитро- и 2,4-динитроанилинов с К-ацилоксигруппой [7]:

NH-OCOR

NO,

140 0C

R

O

\

O

где R = H, NO2; выход 10 % и 61 %.

Для увеличения эффективности и быстроты синтеза бензофуроксанов термолизом о-нитрофенилазидов авторами [8] предложено использование микроволнового облучения. Микроволновое облучение в последние годы стали применять в качестве необычного энергетического источника для синтеза в органической химии. Использование микроволновой энергии приводит к увеличению скорости превращения, высокому выходу целевого продукта реакции.

t

2

t

2

N

R

1.1.3 Другие методы синтеза бензофуроксанов

При хлорировании орто-нитроанилина в четыреххлористом углероде образуется орто-нитро-Ы-хлоранилин, который при взаимодействии со щелочью образует бензофуроксан с высоким выходом [9].

По этому методу образуются бензофуроксаны при наличии в орто-нитроанилине следующих заместителей: 3-, 4- или 5-С1, 4,6-С12, 6-Ме, 4-Ы02 [9].

При действии ацетата натрия на эквимольную смесь пикрилхлорида и солянокислого гидроксиламина в спиртовом растворе при слабом нагревании образуется 4,6-динитробензофуроксан [10]:

Ключников О.Р., Старовойтов В.И., Хайрутдинов Ф.Г., Головин В.В. получили 5-амино-4,6-динитробензофуроксан при действии на тетранитроанилин гидроксиламина в присутствии бикарбоната натрия и ацетата натрия [11,12].

Этими же авторами при попытке конденсации калиевой соли 3,5-динитро-4-гидроксиламинопиридина с пикрилхлоридом в присутствии основного агента были выделены 3-нитро-4,5-пиридофуроксан и пикриновая кислота [13].

O

O

O

Получение бензофуроксанов прямым окислением фуразанов оказалось невозможным из-за отстутствия способности фурузанового ядра к окислению с образованием К-оксида [14]. При действии триэтилфосфита на о-нитронитрозобензол получен бензофуроксан, предположительно через промежуточное образование о-динитрозобензола [15]:

Выход 18 %

При пропускании через раствор бензофуразана в триэтиламине тока кислорода при комнатной температуре в небольшом количестве образуется бензофуроксан [1]:

о

Бензофуроксаны можно получить фотолизом кристаллического о-нитрофенилазида при комнатной температуре с выходом 91 % [16, 17].

Авторами с использованием реакции диазотирования м-нитроанилина показан трех стадийный синтез 5,6-динитробензофуроксана. Первая стадия

заключалась в синтезе 1-азидо-З-нитробензола путем диазотирования 3-нитроанилина с нитритом натрия и последующей реакцией с азидом натрия в смеси уксусной и серной кислот.

Вторая стадия заключалась в нитровании 1-азидо-З-нитробензола в смеси серной и азотной кислот до 1-азидо-2,4,5-тринитробензола.

Третья стадия основывалась на термоциклизции 1-азидо-2,4,5-тринтробензола в полярном растворителе до получения 5,6-динитробензофуроксана с выходом 78 % [18].

O2N

N

CH3COOH / H2SO4

1) NaNO2; 4-6 ^

2) NaN3 ; 6-9 0C O2N

N.

HNO,

NO,

H2SO4 ; 0-5 0C

O2N

NO,

O2N

O2N

N,

O2N

105-115 0C

NO2 CHCOOH O2N

N

O

N

Ч

O

Методом диазотирования 3,5-дифторанилина получен 3,5-дифторбензофуроксан [19], а из 7-хлороанилина получен 7-хлоро-4,6-динитробензофуроксан [20, 21].

1.2 Биологическая активность в ряду бензофуроксанов

Известно, что соединения фуроксанового ряда являются биологически активными соединениями широкого спектра действия [22, 23, 24, 25].

На основе бензофуроксанов синтезировано множество соединений, обладающих фунгицидной активностью: 4-азидо-6-хлор-5-нитробензофуроксан, 5-хлор-4,6-динитробензофуроксан, 5-гидрокси-4,6-динитробензофуроксан, 5,7-дибром-4,6-динитробензофуроксан, 5,7-дигидрокси-4,6-динитробензофуроксан. 5,7-Дихлор-4,6-динитробензо-фуроксан и 5,7-дибром-4,6-динитробензофуроксан проявляют фунгицидную активность против грибов AspergШus niger [26, 27, 28, 29, 30,31,32].

4,5,6,7-Тетрабромтетрагидробензофуроксан и хлорпроизводные

бензофуроксана предложены в качестве бактерицидов и фунгицидов, для обработки бобовых культур и корнеплодов [33, 34].

Опрыскивание посевов риса 5-метокси- и 4-нитропроизводными бензо-фуроксана препятствует заражению растений бактериями [1]. Хлор-, нитро- и алкоксизамещенные бензофуроксаны запатентованы как алгициды [35].

Двухкомпонентная система на основе 4,6-динитро-5,7-дихлорбензо-фуроксана (30 %) и 5-нитро-4,6-дихлорбензофуроксана (70 %) "Димиксан" проявляет при малых концентрациях (0,1-1,0 %) акарицидную и фунгицидную активности [36, 37].

Смесь 5,7-дихлор-4-нитро- и 5,7-дихлор-6-нитробензофуроксана:

N0, I 2

"Я0

С1 о С1 ь

обладает выраженным фунгицидным действием в концентрации 10-6-10-1 мг/мл и запатентована как эффективное средство для лечения паразитарных болезней домашних животных [38].

5,7-Дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан общей формулы:

N0,

N

Ъ

\

R1 О,

где Rl: фениламин или 3-метилфениламин были исследованы и могут быть использованы для профилактики и лечения стронгилятозов животных. Данные соединения обладают малой токсичностью, проявляют высокую антигельминтную активность в течение короткого времени 1-45 минут [39].

Соль 7-хлоро-5-гидрокси-4,6-динитробензофуроксана с диэтиланилином, с имидазолом, а также молекулярный комплекс 7-хлоро-5-гидрокси-4,6-динитробензофуроксана с 2-окси-4-аминопиримидином могут быть рекомендованы для разработки лекарственных препаратов, эффективных

относительно Candida albicans. Молекулярные комплексы 7-хлоро-5-гидрокси-4,6-динитробензофуроксана с 2-аминопиримидином, с 2-окси-4-аминопиримидином, а также соль 7-хлоро-5-гидрокси-4,6-динитробензофуроксана с диэтиланилином, проявляют высокую активность относительно синегнойной палочки [39].

Юсуповой Л.М. и другими исследовано, что аминопроизводные 5,7-дихлоро-4,6-динитробензофуроксана проявляют акарицидную и бактерицидную активность. Бактерицидная активность полиядерных производных 4,6-динитробензофуроксана доказана относительно бактерий Stafilococ Aureus и E. Coli [40]. Производные К-(бензофуроксан-5-метилен)-бензогидразида показали бактерицидную активность против стойких ко многим лекарственным препаратам штаммам бактерий рода Stafilococ Aureus. Эти результаты выдвигают на первое место производных бензофуроксанов в качестве потенциальных лидеров для создания антимикробных препаратов [41, 80]

В качестве инсектицидов запатентованы 7-диалкоксиди-тиофосфинокси-4-нитробензофуроксаны [42].

Соединения бензофуроксанового ряда — тримиксан, хлофузан (4-хлоро-6,7-фуроксанобензофуразан) и фениксан (5,7-бис(4-гидроксифениламино)-4,6-динитробензофуроксан) в дозе 1 мг/кг стимулируют активность нитроксидергической системы, причем нитрозамещенные бензофуроксана активируют систему оксида азота в большей степени, чем хлорзамещенные. Тримиксан представляет трех компонентную систему, состоящую из 5,7-дихлоро-4,6-динитробензофуроксана, 5,7-дихлоро-4-нитробензофуроксана и 5,7-дихлоро-6-нитробензофуроксана [43]. На 40 белых крысах было проведено исследование, которое показало, что при длительном поступлении в организм тримиксана и фениксана обмен веществ в клетке сдвигался в сторону анаболизма [44].

Метил и циано- производные бензофуроксанов проявили сосудорасширяющие свойства. Эти соединения способны обеспечивать слабую активацию растворимой гуанилатциклазы [45].

У нитропроизводных бензофуроксана обнаружена способность ингибировать синтез нуклеиновых кислот в лимфоцитах [46].

Исследования по выявлению противораковой активности у бензофуроксанов показали, что весьма значительной активностью против некоторых видов рака у мышей обладают производные 7-пиперазинил-4-нитро-бензофуроксана с различными заместителями у второго атома азота пиперазинового кольца [47].

Американский трипаносомоз (болезнь Шагаса) широко распространен в странах Северной и Южной Америки и представляет потенциальную угрозу населению. Около 8 миллионов человек в мире инфецировано Trypanosoma cruzi, паразитом, вызывающем болезнь Шагаса [48]. В основных доклинических испытаниях 5-фенилэтенилбензофуроксан проявил торможение роста протозойных паразитов Trypanosoma cruzi [49, 50, 51].

1.3 Применение бензофуроксанов

Бензофуроксаны являются донорами оксида азота, который играет важную роль в биологических процессах. В сравнении со многими другими донорами оксида азота бензофуроксаны медленно трансформируются и длительно действуют без развития нитратной толерантности [52].

Изучен на биологическую активность двухкомпонентный состав Нитроксан, состоящий из 5,7-дихлор-4-нитро- и 5,7-дихлор-6-нитробензофуроксана [38]:

NO2

Нитроксан применяется в качестве антисептического химического средства для защиты изделий из дерева, картона, бумаги и ткани [29].

Производные бензофуроксанов нашли широкое применение в медицине. Российские ученые исследовали способность бензофуроксанов совместно с бензофуразанами подавлять каталитическую активность интегразы вируса

иммунодефицита человека (ВИЧ), что дает перспективу для разработки лекарств для лечения ВИЧ [53].

На основе бензофуроксанов и фармацевтически приемлемых солей изготовлены составы для лечения стенокардии у человека и млекопитающих. Производные бензофуроксанов и их фармацевтически приемлемые соли запатентованы в качестве NO-доноров при коронарных заболеваниях сердца [54, 55].

Фуразанобензофуроксаны, фуразанобензотиодиазолы и их N-оксиды представляют новый класс сосудорасширяющих лекарственных средств [56].

На основе субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана создана лекарственная композиция "Дегельм". "Дегельм" нарушает энергетический обмен у гельминтов, проникая через мембраны клетки и митохондрий, разрушая мышечную кутикулу, и приводит к фрагментарной деструкции паразита. Проведена экспериментальная апробация "Дегельм" на свиньях при нематодозах, вызываемых Ascaris suum, Oesophagostomum dentatum и Trichocephalus suis. Доказано, что "Дегельм" не обладает токсическим действием, острая токсичность препарата равна 3500 мг/кг. "Дегельм" относится к 4 классу опасности и используется при очень низких лекарственных дозах [57, 58, 59, 60, 61].

5,7-Дихлор-4,6-динитробензофуроксан нашел широкое применение в качестве аналитического реагента. 5,7-Дихлор-4,6-динитробензофуроксан применяется в качестве аналитического реагента при спектрофотометрическом определении 4-аминофенола в лекарственных формах парацетамола [62]. Иммобилизированный мицеллами 5,7-дихлоро-4,6-динитробензофуроксан используется при спектрофотометрическом определении ароматических аминов [63, 64, 65, 66].

Исследовано использование 7-хлор-4,6-динитробензофуроксана для определения месалазина, сульфаметоксазола и сульфадиметоксина в моче и слюне. Определение проводилось спектрофотометрическим методом путем анализа интенсивно окрашенных растворов, полученных путем взаимодействия

месалазина, сульфаметоксазола и сульфадиметоксина и 7-хлор-4,6-динитробензофуроксана [67, 68].

1.4 Разработка инновационных лекарственных препаратов

Стратегически важными задачами Федеральной целевой программы «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу» являются:

- стимулирование разработки и производства инновационных лекарственных средств;

- гармонизация российских стандартов по разработке и производству лекарственных средств с международными требованиями;

- совершенствование системы подтверждения соответствия качества лекарственных средств [69, 70, 71].

Одним из эффективных способов обеспечения инновационного развития фармацевтической промышленности и конкурентоспособности российской продукции является утвержденный курс правительством Российской Федерации на импортозамещение [72].

В настоящее время в фармацевтическом сообществе нашло широкое распространение понятие «фармацевтическая разработка». Оно основано на разработке технологии производства инновационных фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов, создании системы спецификаций на разных этапах производства, валидации аналитических методик и технологических процессов, проведении доклинических и клинических испытаний, разработке нормативных документов, трансфер технологий из исследовательских подразделений в производственные. Цель фармацевтической разработки основана на выпуске готового лекарственного препарата высокого качества, с учетом всех рисков и их минимизации на всех этапах производства. Для инновационных лекарственных средств процедура фармацевтической разработки намного сложнее, чем для воспроизведенных, так как для этого необходимо знать физико-химические свойства активной фармацевтической

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мархабуллина Регина Шамильевна, 2015 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Хмельницкий, Л.И. Химия фуроксанов: Строение и синтез / Л.И. Хмельницкий, С.С. Новиков, Т.И. Годовикова. - М: Наука, 1996. - 383 с.

2. Rastogi, R. Electrochemical synthesis of benzofuroxan: role of electrogeneratediodonium ion in the intramolecular cyclization of 2-nitroaniline / R. Rastogi, G. Dixit, K. Zutshi // Electrochimica Acta. - 1984. - Vol. 29. - Iss. 10. - P.

1345-1347.

3. Jarrar, A.A. Photolysis of a heterocyclic compound / A.A. Jarrar // J. Chem. Educ. - 1974 - Vol. 58. - Iss 11. - P. 755.

4. Pausacker, K.H. The oxidation of aromatic amines / K.H. Pausacker, J.G. Scroggie // J. Chem. Soc. - 1954. - Iss 12. - P. 4499-4502.

5. Салахова, А.С. Разработка рационального способа получения высокоэффективного лекарственного препарата "Нитроксан": дис. ...канд. хим. наук. / А.С. Салахова. - К., 1999. - 124 с.

6. Спатлова, Л.В. Синтез и свойства 5,7-дизамещенных-4,6-динитробензофуроксана": дис. канд. хим. наук. / Спатлова Л.В. - К., 2003. - 161 с.

7. Bryont, J.R. Improved conditions are given for the reduction of benzofurazan oxides / J.R. Bryont, L.K. Dyall // Austral. J. Chem. - 1989. - Vol. 42. - P. 2275-2288.

8. Leyva, E. Fast preparation of benzofuroxans by microwave-assisted pyrolysis of o-nitrophenyl azides / E. Leyva, S. Leyva, R. Gonzalez-Balderas, D. de Loera, R. Jimenez-Catano // Mendeleev Communications. - 2013. - Vol. 23 - № 4. - P. 217-218.

9. Chapman, K.J. An unusual type of aromatic substitution reaction / K.J. Chapman, L.K. Dyall // Austral. J. Chem. - 1976. - Iss. 29. - P. 367-374.

10. Ингольд, К. Теоретические основы органической химии / К. Ингольд. -М.: Мир, 1973. - 1055 с.

11. Ключников, О.Р. Образование фуроксанового цикла при взаимодействии 2,3,4,6-тетранитроанилина с гидроксиламином / О.Р. Ключников, В.И. Старовойтов, Ф.Г. Хайрутдинов, В.В. Головин // Химия гетероцикл. соед. - 2003. - № 1. - С. 142-143.

12. Ключников, О.Р. Синтез конденсированных нитрофуроксанов гидроксиламинным методом / О.Р. Ключников, В.И. Старовойтов, Ф.Г. Хайрутдинов, В.В. Головин // Журн. прикл. химии. - 2004. - Т. 77. - №5. - С. 858859.

13. Ключников, O.P. Образование фуроксанового цикла при взаимодействии 3,5-динитро-4-гидроксил-аминопиридина с пикрилхлоридом / O.P. Ключников, Ф.Г. Хайрутдинов, В.В. Головин, И.Ф. Фаляхов // Химия гетероцикл. соед. - 2000.

- № 8. - С. 1143-1144.

14. Katritzky, A.R. Chemistry of heterocyclic N-oxides / A.R. Katritzky, J.M. Ladowski. - London, 1971. - 588 p.

15. Cadogan, J.J. Reduction of nitro-compouds by triethylphosphite: a convenient new route to carbazoles, indoles, indazoles, triazoles, and related compounds / J.J.Cadogan // J. Chem. Soc. - 1965. - Vol. 9. - P. 4831-4837.

16. Jorge, S. Novel benzofuroxan derivatives against multidrug-resistant Staphylococcus aureus strains: Design using Topliss' decision tree, synthesis and biological assay / S.D. Jorge, F. Palace-Berl, A. Masunari, Cl.A. Cechinel, M. Ishii, K.F. Pasqualoto, L.C. Tavares // Bioorganic & Medicinal Chemistry. - 2011. - Vol. 19

- № 16. - P. 5031-5038.

17. Leyva, E. Generation of benzofuroxans by photolysis of crystalline o-nitrophenylazides. A green chemistry reaction / E. Leyva, R. Gonzalez-Balderas, D. de Loera, R. Jimenez-Catano // Tetrahedron Letters. - 2012. - Vol. 53 - № 19. - P. 24472449.

18. Sarlauskas, J. Benzofuroxan (benzo[1,2-c]1,2,5-oxadiazole N-oxide) derivatives as potential energetic materials: studies on their synthesis and properties / J. Sarlauskas, Z. Anusevicius, A. Misiunas // Central European Journal of Energetic Materials. - 2012. - Vol. 9 - № 4. - P. 365-386.

19. Jovene, C. Revisiting the Synthesis of 4,6-Difluorobenzofuroxan: A Study of Its Reactivity and Access to Fluorinated Quinoxaline Oxides / С. Jovene, M. Jacquet, J. Marrot, F. Bourdreux, M.E. Kletsky, O.N. Burov, A. Goncalves, R. Goumont // European Journal of Organic Chemistry. - 2014. - № 29. - P. 6451-6466.

20. Huo, H. Synthesis and characterization of 7-chloro-4,6-dinitro-benzofuroxan / H. Huo, B. Wang, Q. Liu, Y. Luo, Y. Zhan // Huozhayao Xuebao. - 2009. - Vol. 32 -№ 4. - P.31-33.

21. Hu, Zh. Synthesis of 7-amido-4,6-dinitrobenzofuroxan / Zh. Hu, J. Wang // Tianjin Huagong. - 2008. - Vol. 22 - № 3. - P. 47-48.

22. Хмельницкий, Л.И. Химия фуроксанов: Реакции и применение / Л.И. Хмельницкий. - М.: Наука, 1996. - 430 с.

23. Cerecetto, H. Pharmacological Properties of Furoxans and Benzofuroxans: Recent Developments Text / H. Cerecetto // Mini-Rev. Med. Chem. - 2005. - Vol. 5. -P. 57-71.

24. Ghosh, P. Benzofurazans and benzofuroxans: Biochemical and pharmacological properties / P. Ghosh, B. Ternai, M. Whitehouse // Med. Res. Rev. -1981. - Vol. 1. - Iss. 2. - P. 159-187.

25. Jovene, C. The properties and the use of substituted benzofuroxans in pharmaceutical and medicinal chemistry: a comprehensive review / C. Jovene, R. Goumont, E.A. Chugunova // Mini-Rev. Med. Chem. - 2013. - Vol. 8. - Iss. 13. - P. 1089-1136.

26. Пат 2255935 Российская Федерация, МПК7 C07D271/12, A01N43/832. 5,7-Дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан общей формулы С6Ж06^1)2, обладающий акарицидной и бактерицидной активностью / Л.М. Юсупова, И.Ф. Фаляхов, Л.В. Спатлова, Т.В. Гарипов, Т.А. Шиндала Мухамад Кхамид, Д.Р. Ишкаева; заявитель и патентообладатель Казан. гос. технол. ун-т. - № 2003119046/04; заявл. 24.06.03; опубл. 27.12.04.

27. Пат 2452730 Российская Федерация, МПК C07D271/12, A61К31/4245, А61Р31/02, А61Р31/10. Комплексы Мейзенгеймера, обладающие бактерицидной и фунгицидной активностью / И.В. Галкина, Е.В. Тудрий, Г.Л. Тахаутдинова, С.Н. Егорова, Л.М. Юсупова, В.И. Галкин; заявитель и патентообладатель Казан. Федеральный ун-т. - № 2011113785/04; заявл. 08.04.11; опубл. 10.06.12.

28. Пат 2728419 Российская Федерация, МПК C07D271/12, С07D413/04, A01N43/828, A61K31/4245. 5,7-Дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан общей

формулы C6N4O6(R1)2, обладающий акарицидной и бактерицидной активностью / А.Р. Бурилов, Э.М. Касымова, Л.М. Юсупова, В.В. Зобов; заявитель и патентообладатель Инст. орг. и физ. химии им. А.Е. Арбузова; заявитель и патентообладатель Казан. Федеральный ун-т. - № 2009139700/04; заявл. 27.10.09.

29. Юсупова, Л.М. Средства биологической защиты многоцелевого назначения на основе хлорпроизводных / Л.М. Юсупова, С.Ю. Гармонов, И.М. Захаров, А.Р. Быков, Т.В. Гарипов, И.Ф. Фаляхов // Вестник Казанского технологического университета. - 2004. - №1. - С. 103-111.

30. Юсупова, Л.М. Фунгицидные и токсикологические свойства функционально замещенных нитробензофуроксанов / Л.М. Юсупова, С.Ю. Гармонов, в И.М.Захаро, А.Р. Быков, И.Ф. Фаляхов, Т.В. Гарипов // Хим.-фарм. журн. - 2008. - Т. 42. - № 4 - С. 27-29.

31. Юсупова, Л.М. Разработка путей синтеза биологически активной субстанции "Димиксан" / Л.М. Юсупова, А.М. Мухаметшина, А.Н. Хузиахметова, Е.Г. Горелова // Вестник Казанского технологического университета. - 2013. -Т.16. - №18. - С. 36-39.

32. 198. Wang, L. Synthesis and biological evaluation of benzofuroxan derivatives as fungicides against phytopathogenic fungi / L. Wang, C. Qiao, C. Li, Y. Zhang, Y. Ye // J. Agric. Food Chem. - 2013. - Vol. 36. - Iss. 61. - P. 8632-8640.

33. Philips' N.V. Agricultural fungicides / N.V. Philips'// Chem. Abstr. - 1965. -№ 63. - P. 170-171.

34. Ter Horst, W.P. Bactericides, fungicides and insecticides / W.P. Ter Horst // Chem. Abstr. 1943. Iss 37.

35. Cannon, W.N. Controlling growth of algal with benzofurozans and benzofurazan 1-oxides / W.N. Cannon // Chem. Abstr. - 1969. - № 70.

36. Горелова, Е.Г. Физико-химические свойства субстанции Нитроксан в водных средах / Е.Г. Горелова, А.И. Курмаева, Л.М. Юсупова, А.С. Салахова, И.Ф. Фаляхов, В.П. Барабанов // Химия и компьютерное моделирование. Бутлеровские сообщения. - Казань, 2001. №. 4. - C. 35-37.

37. Горелова, Е.Г. Нитропроизводные дихлорбензофуроксанов и их акарицидные составы в водных средах: автореф. дис. ... канд. хим. наук / Е.Г. Горелова. - К., 2009. - 17 с.

38. Пат 2076803 Российская Федерация, МПК7 B27K3/50, C07D271/12. Фунгицидный состав / Ж.В. Молодых, Б.И. Бузыкин, Л.М. Юсупова, И.Ф. Фаляхов; заявитель и патентообладатель Инст. орг. и физ. химии им. А.Е. Арбузова - № 5039212/04; заявл. 22.04.92; опубл. 10.04.97.

39. Юсупова, Л.М. Биологическая активность 5,7-дизамещенных-4,6-динитробензофуроксанов / Л.М. Юсупова, Л.В. Спатлова, Р.Ш. Мархабуллина, Д.Е. Морогова, Н.А. Фонюк // VIII Международный симпозиум по фундаментальным и прикладным проблемам науки: сб. статей. Миасс. 2013. - С. 148-151.

40. Пат 2051913 Российская Федерация, МПК7 CO7D271/12. Фунгицидный состав / Л.М. Юсупова, Б.И. Бузыкин, Ж.В. Молодых, И.Ф. Фаляхов; И.Ш. Абдрахманов, Г.Х. Хисамутдинов, П.Г. Беляев, В.С. Угрымова, Г.Р. Юсупова, Г.П. Шарнин, В.В. Булидоров, С.И. Свирцов, Н.Н. Анисимова; заявитель и патентообладатель Инст. орг. и физ. химии им. А.Е. Арбузова - № 5039212/04; заявл. 22.04.92; опубл. 10.01.96.

41. Jorge, S.D. Design, synthesis, antimicrobial activity and molecular modeling studies of novel benzofuroxan derivatives against staphylococcus aureus / S.D. Jorge, A. Masunari, C.O. Rangel-Yagui, K.F.M. Pasqualoto, L.C. Tavares // Bioorg. & Med. Chem. - 2009. - Vol. 17. - Iss. 8. - P. 3028-3036.

42. Maatschappig, N.V. Insecticidal benzofurazans / N.V. Maatschappig // Chem.Abstr. - 1966. - № 64.

43. Каримова, Р.Г. Бензофуроксаны - соединения, усиливающие образование оксида азота (II) в организме / Р.Г. Каримова, Т.В. Гарипов // Аграрный вестник Урала. - 2012. - № 5. - С.27-28.

44. Каримова, Р.Г. Ферментный состав крови при длительном введении бензофуроксанов / Р.Г. Каримова, Т.В. Гарипов // Казанский медицинский журнал. - 2011. - Т. 92. - № 4. - С.572-576.

45. Medana, C. NO Donor and Biological Properties of Different Benzofuroxans / C. Medana, A. Di Stilo, S. Visentin, R. Fruttero, A. Gasco, D. Ghigo, A. Bosia // Pharm. Res. - 1999. - Vol. 16. - Iss. 16. - P. 956-960.

46. Ghosh, P.B. Potential Antileukemic and Immunosuppressive Drugs. 11. Further Studies with Benzo-2,1,3-oxadiazoles (Benzofurazans) and Their N-Oxides (Benzofuroxans) / P.B. Ghosh // J. Med. Chem. - 1969. - Vol. 12. - Iss. 3. - P. 505507.

47. Kessel, P. Effect of 4-nitrobenzofurazans and their N-oxides on synthesis of protein and nucleic acid by murine leukemia cells / P. Kessel, J.G. Belton // Cannier Res. - 1975. - Vol.12. - P. 3735-3740.

48. Benitez, D. Initial studies on mechanism of action and cell death of active N-oxide-containing heterocycles in Trypanosoma cruzi epimastigotes in vitro / D. Benitez, G. Casanova, G. Cabrera, N. Galanti, H. Cerecetto, M. Gonzalez // From Parasitology. -2014. - Vol. 141. - № 5. - P. 682-696.

49. Cabrera, M. Cytotoxic, mutagenic and genotoxic effects of new anti-T. cruzi 5-phenylethenylbenzofuroxans. Contribution of phase I metabolites on the mutagenicity induction / M. Cabrera, M.L. Lavaggi, P. Hernandez, A. Merlino, A. Gerpe, W. Porcal, M. Boiani, A. Ferreira, A. Monge, A.L. de Cerain // Toxicology Letters. -2009. - Vol. 190 - № 2. - P. 140-149.

50. Cerecetto, H. Synthetic medicinal chemistry in Chagas, disease: compounds at the final stage of "Hit-to-Lead" phase / H. Cerecetto, M. Gonzalez // Toxicology Letters. -2010. - Vol. 190 - № 3. - P. 810-838.

51. Jorge, S. D. Ligand-based design, synthesis, and experimental evaluation of novel benzofuroxan derivatives as anti-Trypanosoma cruzi agents // S.D. Jorge, F. Palace-Berl, P. Mesquita, F. Kerly, M. Ishii, A.K. Ferreira, C.M. Berra, R.V. Bosch, A. Durvanei L. C. Tavares // European Journal of Medicinal Chemistry. - 2013. - № 64. -P. 200-214.

52. Граник, В.Г. Фуроксанопиримидины как экзогенные доноры оксида азота / В.Г. Граник, М.Э. Каминка, Н.Б. Григорьев, И.С. Северина, М.А.

Калинкина, В.А. Макаров, В.И. Левина // Хим.-фарм. журн. - 2002. - Т. 32. - № 10. - С. 7-11.

53. Королев, С.П. Структурно-функциональный анализ 2,1,3-бензоксадиазолов в их N-оксидов в качестве ингибиторов интегразы ВИЧ-1 / С.П. Королев, С.П. Кондрашина, Д.С. Дружиловский, А.М. Старосотникова // Журнал «ActaNaturae». - 2013. - Т.5. - № 1. - С.65-74.

54. Пат 2209065 Российская Федерация, МПК7 A61K31/4245, A61P9/10. Применение производных бензофуроксана при лечении стенокардии / Алангуди Санкараянан; заявитель и патентообладатель Торрент Фармасьютикалз ЛТД. - № 2000132206/14; заявл. 17.05.99; опубл. 20.10.02.

55. Пат 2222532 Российская Федерация, МПК7 C07D271/12, C07D413/12, A61K31/4245, A61P9/10. Соединения ряда бензофуроксана, способ их получения (варианты), фармацевтическая композиция, способ получения парентерального состава и способ лечения коронарных сердечных заболеваний / Алангуди Санкараянан; заявл. 17.05.99; опубл. 10.11.02.

56. Ghosh, P.B. Furazanobenzofuroxan, furazanobenzothiadiazole and their Noxides. New class of vasodilator drugs / P.B. Ghosh, B.J. Everitt // J. Med. Chem. -1974. - Vol.17. - Iss. 2. - P. 203-206.

57. Пат 2413513 Российская Федерация, МПК А61К31/4245, А61К31/66, А61Р33/10. Антигельминтная композиция на основе соли четвертичного фосфония и замещенного динитробензофуроксана / И.В. Галкина, С.Н. Егорова, Л.М. Юсупова, Р.Ф. Мавлиханов, Н.А. Лутфуллина, Н.В. Воробьева, Л.В. Спатлова, Ю.Г. Штырлин, В.И. Галкин, М.Х. Лутфуллин Е.В. Тудрий, Г.Л. Тахаутдинова, заявитель и патентообладатель Казан. гос. ун-т. - № 2009112924/15; заявл. 06.04.09; опубл. 20.10.10.

Пат Российская Федерация, МПК. Антигельминтная композиция на основе соли четвертичного фосфония и замещенного динитробензофуроксана / № 2009112924/04; заявл. 6.04.09; опубл. 10.03.11.

58. Антигельминтное средство: пат. 2404975 Рос. Федерация. № 2009115095/04; заявл. 20.04.09; опубл. 27.11.10.

59. Галкина, И.В. Антигельминтное лекарственное средство "Дегельм" для лечения нематодозов / И.В. Галкина, М.Х. Лутфуллин, Р.Ф. Мавлиханов, Н.А. Лутфуллина, Е.В. Тудрий, В.И. Галкин, Л.В. Спатлова, Л.М. Юсупова, Н.В. Воробьева // Современные проблемы ветеринарной фармакологии и токсикологии. Материалы II съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов России - Казань, 2009, - С. 66-71.

60. Галкина, И.В. Новый подход к созданию антигельминтных средств: изучение антигельминтной активности фармацевтической композиции соли фосфония и нитрозамещенногобензофуроксана / И.В. Галкина, М.Х. Лутфуллин, С.Н. Егорова, Р.Ф. Мавлиханов, Н.А. Лутфуллина, Н.В. Воробьева, Е.В. Тудрий, Л.В. Спатлова, Л.М. Юсупова, В.И. Галкин // Уч. Зап. Казан. ун-та, Сер. Естеств. науки. - 2010. - Т.152. - № 2. - С. 227-236.

61. Галкина, И.В. Синтез и апробация нового поколения антигельминтиков / И.В. Галкина, М.Х. Лутфуллин, С.Н. Егорова, Р.Ф. Мавлиханов, Н.А. Лутфуллина, Н.В. Воробьева, Р.И. Хамидуллин, Л.М. Юсупова, Л.В. Спатлова, В.И. Галкин // Российский паразитологический журнал. - 2010. - № 2. - С. 99105.

62. Бакеева, Р.Ф. Спектрофотометрическое определение п-аминофенола в лекарственных препаратах при использовании 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана как реагента в мицеллярной среде / Р.Ф. Бакеева, Т.С. Горбунова, О.Е. Вахитова, А.И. Гайсина, Л.М Юсупова, С.Ю. Гармонов, В.Ф. Сопин // Хим.-фарм. журн. - 2010. - Т.44. - № 5. - С. 51-55.

63. Бакеева, Р.Ф. Модификация 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана для применения в качестве аналитического реагента и компонента биологически активных композиций. Ч.1 Иммобилизация смешанными мицеллами / Р.Ф. Бакеева, Т.С. Горбунова, Л.И. Сафиуллина, О.Е. Вахитова, С.Ю. Гармонов, Л.М. Юсупова, В.Ф. Сопин // Вестник Казанского технологического университета. -2010. - № 5. - С. 48-54.

64. Бакеева, Р.Ф. Модификация 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана для применения в качестве аналитического реагента и компонента биологически

активных композиций. 4.II Солюбилизация в смешанных мицеллах / Р.Ф. Бакеева, Т.С. Горбунова, Л.И. Сафиуллина, О.Е. Вахитова, Е.А. Васютина, Л.М. Юсупова, В.Ф. Сопин // Вестник Казанского технологического университета. - 2010. - № 5. - С. 60-65.

65. Бакеева, Р.Ф. Использование наноструктурированных мицеллярных сред для модификации 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана при определении ароматических аминов / Р.Ф. Бакеева, Т.С. Горбунова, О.Е. Вахитова, Л.И. Сафиуллина, С.Ю. Гармонов, Л.М. Юсупова // Вестник Казанского технологического университета. - 2010. - № 10. - С. 37-45.

66. Бакеева, Р.Ф. Солюбилизационная способность неионных ПАВ по отношению к биологически активному 5,7-дихлор-4,6- динитробензофроксану / Р.Ф. Бакеева, О.Е. Вахитова, Л.М. Юсупова, В.Ф. Сопин // Вестник Казанского технологического университета. - 2013. - Т. 16. - № 4. - С. 73-77.

67. Гармонов, С.Ю. Спектрофотометрическое определение 5-аминосалициловой кислоты в моче для оценки ее экскреции из организма человека / С.Ю. Гармонов, З.Ч. Нгуен, И.Ф. Мингазетдинов, Л.М. Юсупова, Н.С. Шитова, Р.Н. Исмаилова, В.Ф. Сопин // Вестник Казанского технологического университета. - 2010. - № 10. - С. 57-63.

68. Гармонов, С.Ю. Спектрофотометрическое определение месалазина в моче как тест для оценки фенотипа ацетилирования организма человека / С.Ю. Гармонов, З.Ч. Нгуен, И.Ф. Мингазетдинов, Л.М Юсупова, Н.С. Шитова, Р.Н. Исмаилова, В.Ф. Сопин // Хим.-фарм. журн. - 2011. - Т. 45. - № 12. - С. 48-51.

69. Приказ № 965 "Об утверждении стратегии развития фармацевтической промышленности на период до 2020 г". Министерство промышленности и торговли Российской Федерации. Москва. 2009.

70. Приказ Президента Российской Федерации от 01.11.2016 № Пр-2573 "Основы государственной политики в области обеспечения химической и биологической безопасности Российской Федерации на период 2025 года и дальнейшую перспективу".

71.http ://www.minpromtorg. gov.ru/ministry/strategic/sectoral/7//utverzhdennaya _strategiya_farma2020_231009.pdf (дата обращения 02.05.2012).

72. Леонидов, Н.Б. Развитие фармацевтической промышленности и национальная безопасность России / Н.Б. Леонидов, Т.А. Воронина, С.Я. Скачилова, Н.Б. Демина, А.И. Губанок, А.А. Кузьмин // Разработка и регистрация лекарственных средств. - 2014. - № 2(3). - С. 50-56.

73. Быковский, С.Н. Фармацевтическая разработка: концепция и практические рекомендации. Научно-практическое руководство для фармацевтической отрасли / С.Н. Быковский, И.А. Василенко, Н.Б. Демина, И.Е. Шохина, О.В. Новожилова, А.П. Мешковский, О.Р. Спицкий. - М.: Перо, 2015. -472 с.

74. Арзамасцев, А.П. Особенности системы стандартизации субстанций в условиях рыночной экономики / А.П. Арзамасцев, А.В. Титова // Ремедиум. -2006. - № 9. - С. 57-59.

75. Арзамасцев, А.П. Лекарственные средства: современные требования к стандартизации и контролю качества / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев // Новая аптека. Эффективное управление. - 2007. - № 5. - С. 58-61.

76. Будников, Г.К. Фармацевтический анализ / Г.К. Будников, С.Ю. Гармонов. - М. АРГАМАК-МЕДИА, 2013. - 778 С.

77. Максимкина, Е.А. Стандартизация и обеспечение качества лекарственных средств / Е.А. Максимкина. - М.: Медицина, 2008. - 256 с.

78. Краснов, Е.А. Стандартизация лекарственных средств / Е.А. Краснов, Т.В. Кадырова. Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2008. - 172 с.

79. Отраслевой стандарт. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения. ОСТ 91500.05.001.00, № 388 от 1.11.2001 г.

80. Садчикова, Н.П. Развитие и роль фармакопеи в условиях глобализации экономики стран / Н.П. Садчикова, А.П. Арзамасцев // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - № 5. - С. 3-11.

81. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2008. - 704 с.

82. Правила составления, изложения и оформления стандартов качества на фармацевтические субстанции: Метод. Рекомендации. - М., 2009. - 68 с.

83. Арзамасцев, А.П. Стандартные образцы лекарственных веществ / А.П. Арзамасцев, П.Л. Сенов. - М.: Медицина, 1978. - 248 с.

84. Арзамасцев, А.П. Основные направления создания и оценки качества лекарственных средств / А.П. Арзамасцев // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2001. - № 4. - С. 3-5.

85. Арзамасцев, А.П. Стандартные образцы для фармакопейного анализа / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2010. - № 5. - С. 6-10.

86. Багирова, В.Л. Актуальные вопросы экспертизы и стандартизации лекарственных средств / В.Л. Багирова, Е.Л. Ковалева, К.С. Шаназаров // Хим.-фарм. журн. - 2005. - Т. 39. - № 6. - С. 48-51.

87. Дорофеев, В.Л. Обзор стандартов качества лакарственных средств / В.Л. Дорофеев // Ремедиум. - 2011. - № 3. - С. 48-54.

88. Миназова, Г.И. Стандарты качества лекарственных средств и требования, предъявляемые к ним / Г.И. Миназова //Фармация. - 2011. - № 5. - С. 51-52.

89. Леонтьев, Д.А. Создание национальной системы стандартных образцов лекарственных средств в Украине / Д.А. Леонтьев // Фармаком. - 2012. - № 1. -С. 25-32.

90. Леонтьев, Д.А. Фармацевтические стандартные образцы. Под ред. чл.-кор. НАН Украины В.П. Георгиевского - Х.: изд. НТМТ, - 2012. - Т. 3. - С. 1064-1118.

91. Леонтьев, Д.А. Национальная система Фармацевтических стандартных образцов лекарственных средств в Украине // Scientific Journal of the Ministry of Health of Ukraine. - 2013. - № 2. - С. 108-113.

92. ОФС 42-0074-07 Фармацевтические субстанции.

93. Колбин, А.С. Фармаконадзор в Российской Федерации и в объединенной Европе в свете новой директивы Евросоюза. Ждут ли нас перемены / А.С. Колбин, К.А. Загородникова, А.Т. Бурбелло // Ремедиум. - 2012. - №8. - С. 8-14.

94. British Pharmacopoeia. 2009. London: The Stationery Office on behalf of the Medicines and Healthcare products Regulatory Agency (MHRA). - 10952 p.

95. British Pharmacopoeia. 2009. London: The Stationery Office on behalf of the Medicines and Healthcare products Regulatory Agency (MHRA). - 10952 p.

96. United States Pharmacopeia / The National Formular / USP / NF24. Rockville, MD: United States Pharmacopoeia Convention. - 2006. - 3476 p.

97. ОФС 42-0057-07 Остаточные органические растворители.

98. Тюкавкина, Н.А. Стандартизация и контроль качества лекарственных средств / Н.А. Тюкавкина, А.С. Берлянд, Т.Е. Елизарова. - М.: ООО "Медицинское информационное агенство", 2008. - 384 с.

99. Леонтьев, Д.А. Стандартизация хроматографического анализа лекарственных средств. Сообщение 3. Применение стандартов в высокоэффективной жидкостной хроматографии / Д.А. Леонтьев, А.И. Гризодуб, М.Г. Левин, В.П. Георгиевский // Фармаком. - 1996. - № 3. - С. 12-22.

100. Денеш, И. Титрование в неводных средах / И. Денеш. -М.: Мир, 1971.

- 413 с.

101. Арзамасцев, А.П. Выявление фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, А.А. Коновалов, В.Ю. Кочин, Н.Н. Лебедева, И.В. Титов // Хим.-фарм. журн. - 2004. - № 3. - С. 48-51.

102. Чекрышкина, JI.A. Инструментальные методы в фармацевтическом анализе / JI.A. Чекрышкина, Н.И. Эвич. Пермь, 2009. - 210 с.

103. Арзамасцев, А.П. Современное состояние проблемы применения ИК-спектроскопии в фармацевтическом анализе лекарственных средств / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, А.В. Титова // Хим.-фарм. журн. - 2008. - Т. 42. - № 8. - С. 26-30.

104. ОФС 42-0043-07 Спектрометрия в инфракрасной области.

105. Преч, Э. Определение строения органических соединений / Э. Преч, Ф. Бюльман, К. Аффольтер. - М.: Мир; БИНОМ. Лаборатория знаний, 2006. - 438 с.

106. Арзамасцев, А.П. Изучение возможности использования метода нарушенного полного внутреннего отражения для подтверждения подлинности пирацетама в субстанции и лекарственных формах / А.П. Арзамасцев, А.В. Титова, Д.Ю. Чашкин // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - № 1. - С. 19-21.

107. Арзамасцев, А.П. Метод ближней инфракрасной спектроскопии как перспективное направление в оценке качества лекарственных средств / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, А.В. Вахтель, Д.В. Долбнев // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - № 4. - С. 7-9.

108. Арзамасцев, А.П. Применение метода ближней инфракрасной спектроскопии для идентификации лекарственных средств / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, Е.В. Степанова, А.В. Вахтель, Д.В. Долбнев, И.Д. Азимова // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - № 6. - С. 27-29.

109. Арзамасцев, А.П. Метод ближней ИК-спектроскопии в системе контроля качества лекарственных средств (обзор) / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, А.В. Титова // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2010. - № 1. - С. 63-67.

110. Елизарова, Т.Е. Применение метода спектроскопии ближнего диапазона для идентификации лекарственных субстанций и готовых лекарственных средств / Т.Е. Елизарова, C.B. Штылева, Т.В. Плетенева // Хим.-фарм. журн. - 2008. - Т. 42. - №7. - С. 51-53.

111. Арзамасцев, А. П. Ультрафиолетовые и инфракрасные спектры лекарственных веществ / А.П. Арзамасцев. - М.: Медицина, 1981. - 176 с.

112. Берштейн, И.Я. Спектрофотометрический анализ в органической химии / И.Я. Берштейн, Ю.П. Каминский - Л.: Химия, 1986. - 200 с.

113. Гризодуб, А.И. Применение спектрофотометрии в видимой и УФ-областях спектра в контроле качества лекарственных средств / А.И. Гризодуб // Аналитическая химия в создании, стандартизации и контроле качества лекарственных средств. Харьков, 2012. -Т. 1. - С. 96-202.

114. Дормидонтов, Ю.П. Методы УФ, ИК и ЯМР спектроскопии и их применение в органической химии: учеб. пособие по спецкурсу / Ю.П. Дормидонтов. - Пермь, 2008. - 154 с.

115. Казицина, Л.А. Применение УФ-, ИК- и ЯМР-спектроскопии в органической химии / Л.А. Казицина, Н.Б. Куплетская. - М.: Высш. школа, 1971. - 264 с.

116. Карташов, В.С. Современное состояние и перспективы использования спектроскопии ЯМР в фармацевтическом анализе / В.С. Карташов // Хим.-фарм. журн. - 1996. - Т. 30. - № 5. - С. 59-62.

117. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография / Ю. Кихнер. - М.: Мир, 1981. - 805 с.

118. Костарной, А.В. Использование высокоэффективной жидкостной хроматографии для анализа многокомпонентных лекарственных средств / А.В. Костарной, Г.Б. Голубицкий, Е.М. Басова, Е.В. Будко, В.М. Иванов // Журнал аналитической химии. - 2008. - Т. 63. - № 6. - С. 566-580.

119. Сливкин, А.И., Садчикова Н.П. Функциональный анализ органических лекарственных веществ / А.И. Сливкин, Н.П. Садчикова. Воронеж: Воронежский государственный университет, 2007. - 426 с.

120. Краснов, Е.А. Физико-химические методы в анализе лекарственных средств / Е.А. Краснов, А.А. Блинникова. Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2011. - 163 с.

121. Харитонов, Ю.Я. Количественный анализ. Физико-химические (инструментальные) методы анализа. Аналитическая химия. / Ю.Я. Харитонов. -М.: Высшая школа, 2003. Т. 2. - 559 с.

122. Краснов, Е.А. Современные хроматографические методы (ГЖХ, ВЭЖХ) в фармацевтическом анализе / Е.А. Краснов, А.А. Блинникова. Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2006. - 154 с.

123. Чекрышкина, JI.A. Хроматографические методы в фармацевтическом анализе. Краткие теоретические основы и практическое применение / JI.A. Чекрышкина, Н.И. Эвич. Пермь, 2003. - 62 с.

124. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии / М. Шаршунова, Ч. Михалей, В. Шварц. - М.: Мир, 1980. - 621 с.

125. Сенов, П.Л. Использование хроматографии в тонком слое для количественной оценки и определения чистоты лекарственных средств / П.Л. Сенов, В.Е. Чичиро, З.П. Костепникова // Фармация. - 1973. - №1. - С. 76.

126. Глазков, И.Н. Определение органических примесей в фармацевтических препаратах / И.Н. Глазков, Н.Л. Бочкарева, И. А. Ревельский // Журн. аналит. химии. - 2005. - Т. 60. - № 2. - С. 124-136.

127. Рейхарт, Д.В. Высокоэффективная жидкостная хроматография в контроле качества лекарственных средств / Д.В. Рейхарт, Г.И. Барам, Е.Д. Гольдберг, Р.У. Хабриев, В.А. Хазанов // Фарматека. - 2005. - № 2. - С. 77-78.

128. Рудаков, О.Б. Спутник Хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии. / О.Б. Рудаков, И.А. Востров, C.B. Федоров, A.A. Филиппов, В.Ф. Селеменев, А.А. Приданцев. Воронеж: Водолей. 2004. - 528 с.

129. Стыскин, Е.Л. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография / Е.Л. Стыскин, Л.Б. Ициксон, Е.В. Брауде. - М.: Химия, 1986. -288 с.

130. Шатц, В.Д. Высокоэффективная жидкостная хроматография: Основы теории. Методология. Применение в лекарственной химии / В.Д. Шатц, О.В.Сахартова. Рига: Зинатне. 1988. - 390 с.

131. Яшин, Я.И. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Состояние и перспективы / Я.И. Яшин, А.Я. Яшин // Рос. хим. журн. - 2003. - T. XLVII. - № 1. - С. 64-79.

132. Яшин, Я.И. Газовая хроматография / Я.И. Яшин, Е.Я. Яшин, А.Я. Яшин. - М.: Транслит, 2009. - 528 с.

133. ОФС 42-0056-07 Сульфатная зола.

134. ОФС 42-0087-08 Потеря в массе при высушивании.

135. Guidance for Industry. Q2B Validation of analytical procedures: Methodology. ICH, november, 1996.

136. Аладышева, Ж.И. Практические аспекты работ по валидации аналитических методик / Ж.И. Аладышева, В.В. Беляев, В.В. Береговых // Фармация. - 2008. - № 7. - С. 9-14.

137. Арзамасцев, А.П. Валидация аналитических методов / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Ю.Я. Харитонов // Фармация. - 2006. - № 4. - С. 812.

138. Береговых, В.В. Валидация в поизводстве лекарственных средств / В.В. Береговых, Ж.И. Аладышева, И.А. Самылина // Фармация. - 2008. - № 3. - С. 1012.

139. Гризодуб, А.И. Стандартизованная процедура валидации методик количественного анализа лекарственных средств методом стандарта / А.И. Гризодуб, Д.А. Леонтьев, Н.В. Денисенко // Фармаком. - 2004. - № 3. - С. 3-17.

140. Береговых, В.В. Валидация в производстве лекарственных средств / В.В. Береговых, Н.В. Пятигорская, В.В. Беляев, Ж.И. Аладышева, А.П. Мешковский - М.: Издательский дом "Русский врач", 2010. - 286 с.

141. Валидация аналитических методик для производителей лекарств. Типовое руководство предприятия по руководству лекарственных средств / Под ред. В.В. Береговых. - М. 2008. - 132 с.

142. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Ч. 1: Основные положения и определения. -М.: Изд-во стандартов, 2002. - 31 с.

143. Эрмер, Й. Валидация методик в фармацевтическом анализе / Й. Эрмер, Дж. Миллер. - М. 2013. - 495 с.

144. Ermer, J. Method validation in pharmaceutical analysis. A guide to best practice. - Weinheim. - 2005. - 403 p.

145. Дерфель, К. Статистика в аналитической химии / К. Дерфель. -М.: Мир, 1994. - 268 с.

146. Государственная Фармакопея СССР. XI выпуск. - Т.1. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.

147. Лутфуллин, М.Х. Стронгилятозы желудочно-кишечного тракта жвачных животных / М.Х. Лутфуллин, П.Г. Никифоров, Н.А. Лутфуллина // Методическое указание. - Казань. - 2012. - 138 с.

148. Мархабуллина, Р.Ш. Синтез и биологическая активность 5,7-дизамещенных-4,6-динитробензофуроксана / Р.Ш. Мархабуллина, Л.В. Спатлова, Л.М. Юсупова // Первая Всероссийская научно-практическая конференции молодых ученых «Проблемы разработки новых лекарственных средств»: сб. тезисов. - Москва. - 2013. - С. 76.

149. Мархабуллина, Р.Ш. Синтез субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Р.Ш. Мархабуллина, Л.М. Юсупова // V Молодежная научно-техническая конференции «Наукоемкие химические технологии - 2013»: сб. тезисов. - Москва. - 2013. - С. 66-67.

150. Юсупова, Л.М. Синтез и свойства 5,7-дихлоро-4,6-динитробензофуроксана": автореф. дис...канд. хим. наук. / Л.М. Юсупова. - К., 1990. - 21 с.

151. Райхардт, Х. Растворители в органической химии / Х. Райхардт. - Л.: Химия, 1973. - 152 с.

152. Евгеньев, М.И. Определения аминосоединений: реакции дериватизации хлординитрозамещенными бензофуразапа и их N-оксидами: дис. ... докт. хим. наук / М.И. Евгеньев. - М., 1997. - 247 с.

153. Мархабуллина, Р.Ш. Аналитический контроль при синтезе субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Р.Ш. Мархабуллина, Л.М. Юсупова // Первая Всероссийская научно-практическая

конференции молодых ученых «Проблемы разработки новых лекарственных средств»: сб. тезисов. - Москва. - 2013. - С. 66.

154. ОФС 42-0049-07 Растворимость.

155. Юсупова, Л.М. Определение примесей в субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Л.М. Юсупова, С. Ю. Гармонов, Мархабуллина Р.Ш. // Вестник Казанского технологического университета. -2014. - Т 17. - № 5. - С. 129-131.

156. Мархабуллина, Р.Ш. Исследование субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Р.Ш. Мархабуллина, Л.М. Юсупова, С.Ю. Гармонов // IX Всероссийская конференция «Химия и медицина» с молодежной научной школой по органической химии: сб. тезисов. - Уфа-Абзаково. - 2013. - С. 238-239.

157. Мархабуллина, Р. Ш. Стандартизация субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Р. Ш. Мархабуллина, Л.М. Юсупова // Первая Международная научная конференция «Стандартные образцы в измерениях и технологиях»: сб. тезисов. - Екатеринбург. - 2013. - Ч. 1. - С. 231232.

158. Мархабуллина, Р.Ш. Физические и физико-химические методы анализа для стандартизации субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Р.Ш. Мархабуллина, Л.М. Юсупова, Р.С. Юсупова, С.Ю. Гармонов // Международная научная конференция по аналитической химии и экологии, посвященная 110-летию со дня рождения академика АНРК М.Т. Козловского: сб. тезисов. - Казахстан. - 2013. - С. 126-128.

159. Юсупова, Л.М. Исследование кислотно-основных свойств субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Л.М. Юсупова, Р.Ш. Мархабуллина, С.Ю. Гармонов // Вестник Казанского технологического университета. - 2013. - Т 16. - № 5. - С. 145-147.

160. Юсупова, Л.М. Фармацевтический анализ субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Л.М. Юсупова, С.Ю. Гармонов, Р.Ш. Мархабуллина. // XVII Международная заочная научно-практическая

конференция «Научная дискуссия: вопросы медицины»: сб. статей. - Москва. -2013. - №6. - С. 73-79.

161. Альберт, А. Константы ионизации кислот и оснований / А. Альберт, Е. Сержент. - М.: Химия, 1964. - 180 с.

162. Наканиси, К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений / К. Наканиси. - М.: Мир, 1965. - 216 с.

163. Юсупова, Л.М. Спектрофотометрическое определение 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в лекарственных формах / Л.М. Юсупова, Р.Ш., Мархабуллина С.Ю. Гармонов // Вестник Казанского технологического университета. - 2013. - Т 16. - № 5. - С. 139-141.

164. Государственная Фармакопея СССР. XI выпуск. - Т.2. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.

165. Гейсс, Ф. Основы тонкослойной хроматографии / Ф. Гейсс. - М.: Мир, 1999. - 405 с.

166. Салахов, И.А. Унифицированные подходы к анализу метаболиков, химиотерапевтических, анальгезирующих и противовоспалительных лекарственных средств методом ВЭЖХ: дис. ... канд. хим. наук / И.А. Салахов. -К., 2010. - 173 с.

167. Садек, П. Растворители для ВЭЖХ / П. Садек. - М: БИНОМ. Лаборатория знаний. 2006. - 704 с.

168. Эпштейн, H.A. Оценка пригодности (валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе (обзор) / H.A. Эпштейн // Хим.-фарм. журн. - 2004. -Т. 38. - № 4. - С. 40-56.

169. Эпштейн, H.A. О требованиях к пригодности хроматографической системы при контроле качества лекарственных субстанций и препаратов методом ВЭЖХ / H.A. Эпштейн, С.В. Емшанова // Хим.-фарм. журн. - 2008. - № 11. - С. 34-40.

170. Юргель, Н.В. Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств / Н.В. Юргель, А.Л. Младенцев, А.В. Бурдейн. - М.: Фармацевтическая промышленность, 2007. - 58 с.

171. Царев, Н.И. Практическая газовая хроматография / Н.И., Царев, В.И. Царев, И.Б. Катраков. Барнаул: Изд-во Алт. ун-та, 2000. - 156 с.

172. Гиошон, Ж. Гийемен К. Количественная газовая хроматография для лабораторных анализов и промышленного контроля / Ж. Гиошон, К. Гийемен. -М.: Мир, 1991. Ч.1. - 535 с.

173. Гольберт, К.А. Введение в газовую хроматографию / К.А. Гольберт, М.С. Вигдергауз. - М.: Химия, 1990. - 352 с.

174. Мархабуллина, Р.Ш. Валидация аналитической методики определения остаточных органических растворителей для стандартизации субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана / Р.Ш. Мархабуллина, Л.М. Юсупова // Журнал Стандартные образцы. - 2014. - № 1. - С. 55-61.

175. Юсупова, Л.М. Количественное определение субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом потенциометрического титрования / Л.М. Юсупова, С.Ю. Гармонов, Мархабуллина Р.Ш., Юсупова Л.М., Гармонов С.Ю., Мархабуллина Р.Ш. // Вестник Казанского технологического университета. - 2014. - Т 17. - № 5. - С. 141-143.

176. Мархабуллина, Р.Ш. Валидация аналитической методики количественного определения субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом потенциометрического титрования / Р.Ш. Мархабуллина, Л.М. Юсупова // Журнал Стандартные образцы. - 2014. - № 4. -С. 30-35.

177. Временная инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре И 42-8-82 / Минздрав СССР. - М. 1982. - 13 с.

Приложение 1. Проект фармакопейной статьи "5,7-Бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробегоофуроксан"

5,7-БИС(МЕТА-НИТРОФЕНИЛАМИНО)-4,6-ДИНИТРОБЕНЗОФУРОКСАН,

субстанция

Международное непатентованное название: 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксан.

Химическое название:

5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксан. Структурная формула:

Эмпирическая формула: С18Н10К8О10

Молекулярная масса: 498,3

Препарат содержит не менее 99,0 % С18Н10К8О10 в пересчете на сухое вещество.

Нормы качества субстанции бис(НФА)ДНБФО

ПОКАЗАТЕЛИ МЕТОДЫ НОРМЫ

Описание Визуальный Аморфный порошок оранжевого цвета.

Растворимость ГФ XII Легко растворим в диметилсульфоксиде, умеренно растворим в ацетоне и диметилформамиде, мало растворим в ацетонитриле и 0,01 М растворе едкого натра, практически нерастворим в воде, этаноле 96 % и хлороформе.

Подлинность ИК-спектроскопия ИК-спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку ИК-спектра бис(НФА)ДНБФО.

УФ-спектроскопия ГФ Х! Электронный спектр поглощения бис(НФА)ДНБФО в диметилсульфоксиде и диметилформамиде с концентрацией 8 мкг/мл в области от 300 до 600 нм должен иметь минимум поглощения при 392±2 нм и максимум поглощения при 440±2 нм. Электронный спектр поглощения бис(НФА)ДНБФО в ацетоне с концентрацией 8 мкг/мл в области от 300 до 600 нм должен иметь минимум поглощения при 346±2 нм и максимум поглощения при 400±2 нм. Электронный спектр поглощения бис(НФА)ДНБФО в ацетонитриле с концентрацией 8 мкг/мл в области от 200 до 600 нм должен иметь минимум поглощения при 220±2, 300±2 и 350±2 нм и максимум поглощения при 250±2, 320±2 и 400±2 нм.

Посторонние ВЭЖХ Суммарное содержание примесей - не более 1,0 %

примеси

Потеря в массе ГФ ХI Не более 0,5 %

при

высушивании

Сульфатная зола ГФ ХI Не более 0,1 %

Остаточные ГФ ХП Ацетонитрил - не более 0,041 %

органические Этанол - не более 0,5 %

растворители

Количественное Титриметрия От 99,0 до 101,0 % (С^Нш^Ош) в пересчете на сухое

определение (неводное титрование) вещество

Срок годности 3 года.

Описание. Аморфный порошок оранжевого цвета.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, умеренно растворим в ацетоне и диметилформамиде, мало растворим в ацетонитриле и 0,01 М растворе едкого натра, практически нерастворим в воде, этаноле 96 % и хлороформе. (ГФ XII, ч.1, с. 92).

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана.

Для определения электронного спектра 1 мг субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в соответствующем растворителе (диметилсульфоксид, диметилформамид, ацетон, ацетонитрил), доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора соответствующим растворителем до метки и перемешивают. Для испытания используют кюветы с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют соответствующий растворитель.

Электронный спектр поглощения 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в диметилсульфоксиде и диметилформамиде с концентрацией 8 мкг/мл в области от 300 до 600 нм должен иметь минимум поглощения при 392±2 нм и максимум поглощения при 440±2 нм.

Электронный спектр поглощения 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в ацетонитриле с концентрацией 8 мкг/мл в области от 200 до 600 нм должен иметь минимум поглощения при 220±2, 300±2 и 350±2 нм и максимум поглощения при 250±2, 320±2 и 400±2 нм, а в ацетоне должен иметь минимум поглощения при 346±2 нм и максимум поглощения при 400±2 нм.

Посторонние примеси. Определение проводят методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Около 0,01 г (точная навеска) субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл,

растворяют в 50 мл ацетонитрила (для хроматографии), доводят тем же растворителем до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор не более 0,45 мкм. Условия хроматографирования:

- металлическая колонка, заполненная сорбентом C18 с диаметром частиц 5 мкм (250x4,6 мм), например, Symmetry C18;

- подвижная фаза: 0,1% трифторуксусная кислота и ацетонитрил (30:70, об.

%);

- объем вводимой пробы - 20 мкл;

- скорость потока - 1 мл/мин;

- детектор - спектрофотометрический, 245 нм;

- температура колонки - от 18 до 22 0С.

Возможна корректировка подвижной фазы, чтобы выполнялся тест «Проверка пригодности хроматографической системы».

Раствор СО и испытуемый раствор, раствор для проверки пригодности хроматографической системы вводят трижды. Регистрируют хроматограммы.

Время регистрации хроматограммы должно составлять три времени удерживания пика 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана.

Содержание мета-нитроанилина и 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана в субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана в процентах (Х) вычисляют по формуле:

Х _ S • a0 -100 • P _ S1 • a0 • P

s0 • a -100 -100 S0 • a -100,

где

50 - среднее значение площади пика соответствующей примеси, вычисленное по трем хроматограммам раствора стандартного образца;

51 - среднее значение площади пика соответствующей примеси, вычисленное по трем хроматограммам испытуемого раствора;

a1 - навеска субстанции, в граммах;

а0 - навеска соответствующе примеси, взятая для приготовления стандартного раствора, в граммах;

Р - содержание основного вещества в СО примеси, в пересчете на безводное вещество, в процентах.

Содержание суммы примесей (мета-нитроанилина и 5,7-дихлор-4,6-ди-нитробензофуроксана) в субстанции должно быть не более 1%.

Результаты анализа считаются достоверными, если выполняется требование теста "Проверка пригодности хроматографической системы".

Примечание 1. Приготовление раствора СО. Около 0,0025 г (точная навеска) мета-нитроанилина и около 0,0025 г 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана (с точностью до 0,00001г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл ацетонитрила (для хроматографии), доводят объем раствора ацетонитрилом до метки и перемешивают (раствор А).

Раствор используют свежеприготовленным.

1 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят ацетонитрилом до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор не более 0,45 мкм.

Раствор используют свежеприготовленным.

2. Приготовление 0,1% раствора трифтор-уксусной кислоты. 1 мл концентрированной три-фторуксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора бидистилированной водой до метки, тщательно перемешивают и дегазируют.

Срок годности раствора 1 мес.

4. Приготовление раствора для проверки пригодности хроматографической системы. 4 мл

раствора А и 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ацетонитрилом до метки и тщательно перемешивают.

Раствор используют свежеприготовленным. 3. Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-

4.6-динитробензофуроксана, не менее 9000 теоретических тарелок;

- разрешение между пиками мета-нитроанилина и

5.7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробен-зофуроксана не менее 9;

- разрешение между пиками 5,7-бис(мета-нитро-фениламино)-4,6-динитробензофуроксана и 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана не менее 2,5;

- факторы асимметрии пиков мета-нитроанилина и 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана не более 2,0;

- относительное время удерживания мета-нитроанилина

- 0,7 (около 3,12 мин.), 5,7-бис(мета-нит-рофениламино)-4,6-динитробензофуроксана - 1,0 (около 4,70 мин), 5,7-дихлор-4,6-динитробензофу-роксана - 1,2 (около 5,36 мин);

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное по площадям пиков мета-нитроанилина и 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана не более 2 %.

Потеря в массе при высушивании. Испытание проводят в соответствии с требованиями ГФ XI, вып. 1, с. 176.

Около 1,0 г (точная навеска) субстанции 5,7-бис(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы. Потеря в массе при высушивании не должна превышать 0,5 %.

Сульфатная зола. Испытание проводят в соответствии с требованиями ГФ XI, вып. 2, с.25.

Содержание сульфатной золы в 1,0 г субстанции (точная навеска) должно быть не более 0,1 %.

Остаточные органические растворители.

Определение проводят методом газовой хроматографии с использованием хроматографа с пламенно-ионизационным детектором и рассчитывают методом внешнего стандарта.

Около 0,1 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл диметилсульфоксида (для хроматографии), доводят тем же растворителем до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор не более 0,45 мкм.

Хроматографи ческие условия:

- газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором;

- кварцевая капиллярная колонка длиной 3000 см, диаметром 0,32 мм, типа

ЕШ-5, или аналогичная, позволяющая получить степень разделения не менее

1,5 для пиков определяемых веществ;

- температурный режим: температура термостата колонки 50 0С в течение 2

мин, далее подъем температуры до 150 0С со скоростью 10 0С/мин и выдерживание при этой температуре в течение 15 мин;

- температура испарителя 230 0С;

- температура детектора 250 0С;

- скорость - газа носителя (гелий) - 1 мл/мин;

- расход водорода - 45 мл/мин;

- расход воздуха - 450 мл/мин;

- деление потока 50/1;

- время анализа 27 мин.

Возможна корректировка хроматографических условий, чтобы выполнялся тест "Проверка пригодности хроматографической системы".

В испаритель хроматографа вводят по 0,1 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца. Получают не менее трех хроматограмм для каждого раствора.

Время удерживания пика этанола - около 3,91 мин, пика ацетонитрила -около 4,21 мин.

Содержание этанола и ацетонитрила в препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

Х _ <$1 • а0 -10 -100 _ $ • а0 S0 • а1 -100 -100 $0 • а1 -10,

где

50 - среднее значение площади пика соответствующего растворителя, вычисленное по трем хроматограммам раствора стандартного образца;

51 - среднее значение площади пика соответствующего растворителя, вычисленное по трем хроматограммам испытуемого раствора;

а1 - навеска субстанции, в граммах;

а0 - навеска этанола (ацетонитрила), взятая для приготовления стандартного раствора, в граммах;

Содержание этанола и ацетонитрила в субстанции должно быть не более 0,5 % и не более 0,041 % соответственно.

Результаты анализа считаются достоверными, если выполняется требование теста "Проверка пригодности хроматографической системы".

Примечание. 1. Приготовление раствора СО. Около 0,5 г (точная навеска) этанола (для хроматографии) и около 0,041 г (точная навеска) ацетонитрила (для хроматографии), помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 80

мл диметилсульфоксида (для хроматографии), доводят диметилсульфоксидом до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор не более 0,45 мкм. Раствор используют свежеприготовленным.

2. Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику этанола на хроматограмме раствора СО должна быть не менее 500 теоретических тарелок;

- разрешение между пиками этанола и ацетонитрила на хроматограмме раствора СО должно быть не менее 1,5;

- коэффициенты асимметрии пиков этанола и ацетонитрила должны быть не более 2.

Количественное определение. Около 0,25 г (точная навеска) субстанции бис(НФА)ДНБФО растворяют в 50 мл ДМФА, предварительно нейтрализованного по индикатору 0,3 % раствору тимолового синего в метаноле и тируют 0,1 М раствором натрия гидроксида в метаноле до появления красного окрашивания (индикатор - 0,5 мл 0,3 % раствора тимолового синего в метаноле) не исчезающего в течение 30 секунд.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 49,83 мг С18Н10К8010.

Упаковка. По 200 г в бутыли с плотно закрытой крышкой.

Маркировка. На этикетке указывают производителя, адрес, название препарата на русском языке, количество, условия хранения, регистрационный номер, номер серии, срок годности.

Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 17768-90.

Хранение. В хорошо укупоренной таре, при температуре от 5 до 25 °С.

Срок годности 3 года.

Приложение 2. Акт внедрения результатов НИР

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель генера. ву

"ОАО Татхимфарм]

Севодин В.А.

АКТ

Ш (ЕДРЕНМЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ПИР

Настоящим актом подтверждается, что результаты МИР по исследованию физических, физико-химических свойств, разработке методик анализа и установлению норм качества субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофсниламино)-4,6-динитробензофуроксана, выполненных в рамках кандидатской диссертации Мархабуллиной Р.Ш., использованы для расширения возможностей по испытанию качества лекарственных субстанций и рекомендованы для применения. Проведенные валидации разработанных методик анализа субстанции 5,7-бис-(метаыштрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана: количественное определение субстанции 5,7-бис-(мета-ннтрофениламино)-4,6-динитробснзо-фуроксана методом неводного титрования в диметилформамиде, количественное определение посторонних примесей в субстанции 5,7-бис-(мета-нитрофениламино)-4,6-динитробензофуроксана методом ВЭЖХ, количественное определение остаточных органических растворителей в субстанции 5,7-бие-(мета-нитрофениламино)-4,6~дшштробеизофуроксана методом ГЖХ доказали их пригодность и гарантируют получение достоверных и точных результатов анализа.

Начальник исп. лаборатории ОКК

со со _

■5

GJ СО _

о

со È -

3319—

со M _

о 31G1 —

со о _

о

M со _

■5

Is} со _

о

M è-о

Is? M _

о

to

О - 1602-1

1553-1

1529-1

со О - 1502-Я

1459-Í

1426J

со О - о 1377—Л 1298-1

ê- 125441

о 12094 11404

M _ 1 озз4

о 10294

1 008 0001- 983 4 950 4 889 4 823 4 761 4 739 4 674 —

о о _ 640 -