Роль системы матриксных металлопротеиназ в патогенезе профессиональных заболеваний органов дыхания тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.02.04, кандидат медицинских наук Фомина, Валерия Сергеевна

• Фомина, Валерия Сергеевна
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Фомина, Валерия Сергеевна

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Аналитический обзор литературы.

1.1 Современные представления о патогенетических механизмах развития профессиональных бронхолегочной патологии.

1.2 Биохимические механизмы формирования метаболических нарушений, способствующих развитию профаллергодерматозов.

1.3 Роль системы «протеолиз-антипротеолиз» в формировании профессиональных заболеваний легких.

1.4 Геномные и протеомные исследования в оценке индивидуальной чувствительности организма при воздействии вредных факторов производства.

1.4.Шолиморфные варианты гена al- ингибитора протеаз.

1.2.2 Полиморфизм гена матриксной металлопротеиназы-1.

Глава 2. Характеристика материала, объем и методы исследований.

2.1 Краткая гигиеническая характеристика условий труда и контингентов обследованных групп.

2.2 Общая клиническая характеристика обследованных больных.

2.3 Методы биохимических исследований.

2.4 Методы молекулярно-генетических исследований.

2.5 Статистические методы обработки и анализа материала.

Глава 3. Результаты биохимических исследований.

3.1 Состояние системы «протеолиз-антипротеолиз» у обследованных больных.

3.1.1 Состояние системы «протеолиз-антипротеолиз» у больных пневмокониозами.

3.1.2 Состояние системы «протеолиз-антипротеолиз» у больных профессиональным бронхитом.

3.1.3. Состояние системы «протеолиз-антипротеолиз» у больных профессиональной бронхиальной астмой.

3.1.4. Состояние системы «протеолиз-антипротеолиз» у работников асбестцементного комбината.

Глава 4. Результаты молекулярно-генетических исследований.

4.1 Результаты молекулярно-генетических исследований гена al-ИП.

4.2 Результаты молекулярно-генетических исследований гена ММП-1.

4.3 Зависимость клинических осложнений различных нозологических форм профессиональной бронхолегочной патологии от наличия наличия полиморфных вариантов генов матриксной металлопротеиназы-1 и a 1-ингибитора протеиназ.

4.4 Клинические примеры.

Глава.5 Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль системы матриксных металлопротеиназ в патогенезе профессиональных заболеваний органов дыхания»

Комплексное и комбинированное воздействие вредных факторов производственной среды, приводит к возникновению и развитию бронхолегочной патологии различного генеза. Болезни органов дыхания от воздействия промышленных аэрозолей занимают ведущее место в структуре профессиональной заболеваемости трудоспособного населения в России. Они характеризуются высокой распространённостью и неуклонным ростом. [Измеров Н.Ф., 2009; Монаенкова A.M., 2002; Милишникова В.В., 2004 и др.] В настоящее время не теряют своей актуальности исследования по изучению механизмов повреждения легочной ткани, изысканию возможностей для ранней диагностики и представлению новых подходов к лечению данной патологии.

В патогенезе бронхолегочной патологии выделяют три ведущих составляющих: хроническое воспаление, дисбаланс в системе «протеолиз -антипротеолиз» и оксидативный стресс. При анализе данных последних лет обращает на себя внимание важность оценки баланса в системе протеолиз-антипротеолиз при заболеваниях воспалительной природы. Проведены многочисленные исследования системы «протеолиз-антипротеолиз» с определением содержания сериновых и цистеиновых протеиназ и их ингибиторов у больных профессиональной патологией бронхолегочной системы. [Л.П. Кузьмина 2003, 2005, 2008, О.В.Чиненная, 2003, О.И. Румянцева, 2005] Данные исследования свидетельствуют о том, что характер развития патологии, клинические проявления и течение заболеваний бронхолегочной системы у работающих определяются не только составом промышленных аэрозолей и длительностью воздействия вредных производственных факторов, но и индивидуальными особенностями организма.

В литературе освещены вопросы участия системы матриксных металлопротеиназ в развитии доброкачественных, злокачественных и хронических заболеваниях легких, таких как ХОБЛ, астма, туберкулез, рак легкого. [М.В. Веселовская 2007; Doornaet et al.2003; Amara et al. 2007; Bechtold et al. 1985; Hirano et al. 2003]. Однако, роль матриксных металлопротеиназ в патогенезе профессиональной бронхолегочной патологии остается не изученной. Данные по частоте встречаемости полиморфных вариантов гена матриксной металлопротеиназы-1(ММП-1), являются неоднозначными и противоречивыми.

Система «протеолиз-антипротеолиз» регулируется несколькими генами, их соотношение может предопределять наследственную предрасположенность к тем или иным заболеваниям. Так, в случае наследственных нарушений правильности синтеза одного из звеньев системы возникает дисбаланс ферментов и их ингибиторов.

Протеолитические ферменты вызывают деградацию всех компонентов внеклеточного матрикса паренхимы легких, включая эластин, коллаген, фибронектин, ламинин, протеогликаны. При этом происходит разрушение эластического каркаса тканей и нарушение нормальной архитектоники легких. Тонкие эластические волокна межальвеолярных перегородок разрушаются быстрее, чем их пучки в стенках - формируется эмфизема легких. Возникает обструктивный синдром, в основе которого лежит нарушение равновесия эластического натяжения между легочной паренхимой и бронхами.

Все вышеизложенное определяет актуальность изучения системы протеолиз-антипротеолиз на уровне системы матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов, сериновых протеиназ - нейтрофильной эластазы (НЭ) и al-ингибитора протеиназ (al ИП) с использованием молекулярно-генетических и биохимических методов исследования у больных профессиональными заболеваниями органов дыхания для выявления маркеров индивидуальной предрасположенности к развитию профессиональных заболеваний бронхолегочной системы и оценки выраженности воспалительно-деструктивных изменений в легочной ткани

Диссертационная работа выполнена в рамках госбюджетных тем ГУ НИИ медицины труда РАМН: № 0602 «Разработка дифференцированных систем комплексной профилактики профессиональной и производственно-обусловленной патологии и реабилитации работников современных производств с учетом ведущих факторов риска нарушения здоровья» и № 0904 «Производственные факторы, как триггеры в развитии наиболее распространенных форм общесоматической патологии и роль медицины труда в системе их профилактики»

Цель работы - изучение роли системы матриксразрушающих металлопротеиназ и их ингибиторов в патогенезе профессиональных заболеваний бронхолегочной системы для расширения представления о патогенетических механизмах формирования профессиональных заболеваниях легких с целью разработки биохимических критериев оценки риска развития бронхолегочной патологии и для оценки выраженности воспалительных и деструктивных процессов.

Для ее достижения предстояло решить следующие задачи:

1. Определить количественное содержание матрикс-разрушающих металлопротеиназ (про-ММР-1, ММР-2, ММР-8) и сериновых протеиназ (НЭ) у больных различными формами профессиональной бронхолегочной патологии и оценить выраженность изменений в зависимости от нозологической формы и тяжести клинического течения.

2. Разработать тест-систему для определения гомо- и гетерозиготных вариантов (инсерций G1 и делеций G2) гена матриксной металлопротеиназы -1. Провести генотипирование ММП-1 у обследованных лиц, с целью установления генетически обусловленной гиперсекреции фермента.

3. Проанализировать состояние антипротеазной системы: определить количественное содержание тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ-1 (ТИМП-1) и al- ингибитора протеиназ (al-ИП) биохимическими методами и провести генотипирование al- ингибитора протеиназ методами ДНК-диагностики с целью оценки их диагностической значимости и выявления возможной взаимосвязи между указанными ингибиторами.

4. Изучить зависимость клинических осложнений различных нозологических форм профессиональной бронхолегочной патологии от наличия полиморфных гипер- и гипосекреторных вариантов генов матриксной металлопротеиназы-1 и al- ингибитора протеиназ.

5. Научно обосновать выбор наиболее информативных критериев оценки индивидуальной предрасположенности к развитию профессиональных заболеваний бронхолегочной системы и оценки выраженности воспалительно-деструктивных изменений в легочной ткани.

Научная новизна и теоретическая значимость работы состоит в изучении системы протеолиз-антипротеолиз на уровне системы матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов с использованием молекулярно-генетических и биохимических методов. В результате проведенных исследований получены новые данные, расширяющие представления о патогенетических механизмах развития профессиональной бронхолегочной патологии. Впервые показано, что наиболее выраженные изменения в системе матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов были выявлены в группах больных профессиональным бронхитом и пневмокониозами (силикоз и гиперчувствительный пневмонит).

Впервые разработана тест-система для определения генетического полиморфизма гена матриксной металлопротеиназы-1, на основании знания о характере полиморфизмов инсерций/делеций гуанина (1607delG) в промоторном участке гена.

Разработан новый способ детекции для выявления дефицитных SZ аллелей гена al- ингибитора протеиназ (FLASH-детекция), который позволяет сократить время проведения и стоимость анализа, а также делает более безопасным проведение анализа для персонала.

Изучена зависимость особенностей клинического течения профессиональных заболеваний органов дыхания (выраженность дыхательной недостаточности, наличие пневмосклероза и эмфиземы легких, наличие сочетанной патологии) от наличия полиморфных вариантов генов металлопротеиназы-1 (гетерозиготный вариант Gl-инсерция гуанина, гомозиготный вариант С2-делеция гуанина и al- ингибитора протеиназ (PiMM, PiMZ, PiMS).

Проведена оценка диагностической информативности биохимических и молекулярно-генетических методов исследования. Показано, что биохимические методы позволяют изучать механизмы формирования воспалительно-деструктивных изменений в легочной ткани, оценить степень выраженности этих изменений.

Применение генетических методов анализа (пиросиквенирование и аллельспецифичная ПНР-реакция) для выявления полиморфных вариантов генов металлопротеиназы-1 и a 1-ингибитора протеиназ дает возможность проводить скрининговые исследования для оценки риска развития профессиональных заболеваний бронхолегочной системы.

Практическая значимость работы. Разработана тест-система для определения инсерций G/- (G1) и делеций -/- (G2) гена матриксной металлопротеиназы-1. Разработан комплекс биохимических и молекулярно-генетических показателей протеиназно-ингибиторной системы, включающий определение (инсерции/делеции гуанина гена металлопротеиназы-1), профермента матриксной металлопротеиназы-1, нейтрофильной эластазы, al-ингибитора протеиназ (определение гипосекреторных S и Z вариантов), тканевого ингибитора металлопротеиназ-1 для оценки риска развития и прогноза заболевания.

Основными формами внедрения являются:

1. Заявка на патент «Способ прогнозирования риска развития профессиональной бронхолегочной патологии» (№ 2010134590 от 19.08.2010г.)

2. Материалы диссертационной работы были использованы при составлении методического пособия для врачей «Определение полиморфизма генетико-биохимических систем для оценки индивидуальной чувствительности организма к воздействию неблагоприятных факторов производственной среды» Методическое пособие (Утверждено научным советом «Медико-экологические проблемы здоровья работающих», Москва 2005г.).

3. Материалы диссертационной работы были использованы при составлении методического пособия для врачей «Проблема индивидуальной чувствительности в медицине труда», Методическое пособие (Утверждено научным советом «Медико-экологические проблемы здоровья работающих», Москва, 2009 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В патогенетических механизмах развития бронхолегочной патологии важную роль играет нарушение баланса матриксных металлопротеиназ и ингибиторов, в основе которого лежит изменение их соотношения, а также наличие полиморфных гипо- или гиперсекреторных мутаций генов ферментов и ингибиторов.

2. Сочетание неблагоприятных гетеро и гомозиготных аллелей генов металлопротеиназы -1 и al- ингибитора протеиназ характеризуется тяжелым течением и наличием сочетанной бронхолегочной и кожной патологией.

3. Для оценки риска развития, тяжести клинического течения и прогноза профессиональной бронхолегочной патологии целесообразно определение биохимических и молекулярно-генетических показателей системы «протеолиз-антипротеолиз» на уровне ферментов металлопротеиназы -1, нейтрофильной эластазы и ингибиторов - al-ингибитора протеиназ, тканевого ингибитора металлопротеиназ-1.

Заключение диссертации по теме «Медицина труда», Фомина, Валерия Сергеевна

выводы

1. У больных профессиональными заболеваниями легких выявлено нарушение баланса матриксных металлопротеиназ и ингибиторов, в основе которого лежит изменение их соотношения. Наиболее выраженные изменения системы (повышение уровней нейтрофильной эластазы, тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ-1 и а 1-ингибитора протеиназ, снижение уровня про-ММП-1) выявлены у больных пневмокониозами и профессиональным бронхитом. Полученные результаты свидетельствуют о преобладании деструктивных процессов при данных нозологиях.

2. У больных бронхиальной астмой выявлено достоверное снижение про-ММП-1, повышение ТИМП-1 при нормальных уровнях матриксных металлопротеиназ 2,8 и нейтрофильной эластазы, что свидетельствует о преобладании воспалительных процессов. Высокая встречаемость среди больных данной группы (18%) лиц с гиперсекреторными мутациями (инсерции и делеции) гена матриксной металлопротеиназы-1 является показателем неблагоприятного прогноза заболевания.

3. Для оценки индивидуального риска развития заболевания бронхолегочной системы и прогноза клинического течения на основании данных о нуклеотидной последовательности гена ММП-1 был установлен характер мутаций (инсерции G1/делеции G2) промоторной области гена, подобраны праймеры для выявления гиперсекреторных аллелей гена ММП-1 и разработана тест-система.

4. У больных с различными формами профессиональной бронхолегочной патологией (профессиональный хронический бронхит, пневмокониозы, профессиональная бронхиальная астма) выявлено наличие гиперсекреторных мутаций гена ММП-1: гетерозиготный (инсерция) G1 генотип - 39%, гомозиготный (делеция) G2 генотип— 13% и наличие мутаций гена al ИП — 6%, что свидетельствует об участии генетически детерминированной системы «протеолиз-антипротеолиз» в патогенетических механизмах развития бронхолегочной патологии от воздействия промышленных аэрозолей сложного состава. Наибольшее количество гиперсекреторных мутаций инсерции и делеции) гена матриксной металлопротеиназы-1 - 20% обнаружено у больных профессиональным хроническим бронхитом, в группе больных силикозом - 9%.

5. Сочетание полиморфных вариантов генов ММП-1 и al-ИП у отдельных •лиц характеризуется наличием клинических осложнений в виде дыхательной недостаточности 2, 2-3 типа, наличия эмфиземы легких и пневмосклероза, сочетанием бронхолегочной и кожной патологии.

6. У работников асбестцементного комбината в системе «протеолиз -антипротеолиз» были выявлены достоверно высокие уровни тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ при нормальных уровнях протеолитических ферментов, т.е. признаки нарушения биологического баланса в системе. Указанные показатели (повышение уровня ТИМП-1 и наличие лиц с гиперсекреторными мутациями гена матрикснойметаллопротеиназы-1 (9% лиц)) позволяют рассматривать эти показатели, как информативные критерии индивидуального риска развития бронхолегочной патологии при воздействии производственных факторов.

6. На основании проведенных исследований разработан комплекс биохимических и молекулярно-генетических показателей протеиназно-ингибиторной системы, включающий определение (инсерции/делеции гуанина гена ММП-1), про-ММП-1, НЭ, al-ИП (определение гипосекреторных S и Z вариантов), ТИМП-1 для оценки индивидуального риска развития и прогноза заболевания.

112

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Фомина, Валерия Сергеевна, 2010 год

1. Аверьянов А.В., Поливанова А.Э. Дефицит ai-антитрипсина и хроническая обструктивная болезнь легких // Пульмонология. — 2007. -№3.-С. 103-109.

2. Бабок А.А. Изучение роли тканевых протеиназ и их ингибиторов в патогенезе патологии лёгких пылевой этиологии: Дис. . канд. мед. наук. Москва, 1990. •

3. Болезни органов дыхания: Руководство для врачей: В 4 т.Палеев Н.Р. ред: М.: Медицина, 1990.

4. Вахрушев Я.М., Ермаков Г.И., Шараев П.Н. Оценка метаболизма основного вещества, соединительной ткани при хронической обструктивной болезни легких. Тер. архив 2006; 3: 13—16., 20

5. Величковский Б.Т. Основные патогенетические механизмыIпрофессиональных заболеваний легких пылевой этиологии. Медицина труда и пром. экология 1999; 8: 20-27.

6. Винник JI.A., Герович JI.M. Эластаза крови при туберкулёзе и других заболеваниях лёгких // Проблемы туберкулёза. 1985. — № 12. - С. 3539.

7. Гайцхоки B.C. Молекулярно-генетическая гетерогенность наследственных болезней // Вопросы медицинской химии. — 1997. Т. 43, № 5. - С. 290-299.

8. Герштейн Е.С., Короткова Е.А., Пророков В.В.,. Кушлинский Н.Е / Матриксные металлопротеиназы как биологические маркеры прогноза рака толстой кишки/ Бюлл. эксперим. биологии и медицины.—2008.— Т. 145, № 3.—С.337—341.

9. Го луб Н.И. Влияние курения на состояние иммунитета, и антипротеазную защиту (обзор литературы) // Терапевтический; архив. — 1996. -№ 1.-С. 64-67.

10. И.Гончарова Н.С., Моисеева О.М., Алешина Г.М., Шляхто Е.В.Матриксная ■ металлопротеиназа-9 и ее ингибитор у пациентов с аортальным стенозом Кардиология СНГ. 2007. Том 5, №1

11. Герштейн Е.С., Короткова .Е.А., Пророков В.В., Кушлинский Н.Е. Матриксные металлопротеиназы как биологические маркеры прогноза рака-толстой кишки // Бюлл. эксперим. биологии-и.-медицины.—2008.— Т. 145, № 3.—С.337—341.

12. Иващенко Т.Э:; Сиделева О.Г., Петрова М.А., Гембицкая Т.Е., Орлов-А.В., Баранов B.C. Генетические факторы предрасположенности, к бронхиальной астме // Генетика. — 2000. — Т.36. № 9. — С. 1-5.

13. Гб.Изаксон Э. О патолого-анатомических изменениях легочных сосудов при эмфизематозных процессах в.легких. Дис. . д-ра» мед. СПб., 1870. (Пульмонология. 2005; 4: 41-52).

14. Карнаух Н.Г., Ковальчук Т.А. Актуальные вопросы профессиональной пылевой патологиилегких. К.: Книга, 2004. 104 с.

15. Классификация пневмоканиозов(методические указания№ 95/235)/ Сост. Милишникова В.В; Монаенкова A.M., Бурмистрова Т.Б. и др. Ml, 1996.-27с.

16. Копьева Т.Н., Бармина Г.В.,СвищевА.В., Макарова О .В. Морфология и патогенез хронического бронхита. Арх. патол. 1989; 7: 83-7.

17. Информационный сборник о состоянии^ профессиональной заболеваемости в Российской федерации, Москва.2006г.

18. Кузьмина Л.П. Биохимические' и генетические показатели, индивидуальной чувствительности организма к воздействию/ промышленных аэрозолей:Дис.докт.биол.наук, Москва, 1998

19. Кузьмина Л.П." Биохимические аспекты изучения индивидуальной чувствительности^ организма' при1 воздействии производственных и экологических факторов // Врач. 2001'. - № 5. — С. 1447.

20. Кузьмина Л.П. Биохимические и молекулярно-генетические механизмы развития профессиональных заболевании бронхолегочной системы. Медицина труда и пром. экология>2003; 6:10-14.

21. Кузьмина' Л.П., Тарасова Л.А. Биохимический профиль организма:Iтеоритические и» практические" аспекты изучения и оценки в„ медицине труда// Медицина труда непромышленная экология.-2000.-№7-с. 1 -6

22. Кузьмина Л.П., Тарасова Л.А., Каспаров А.А. Проблема изучения генетико-биохимических основ индивидуальной чувствительности в медицине труда // Медицина труда и промышленная экология. 1998. -№4.-С. 1-4.

23. Мельникова О.В. Кпинико-биохимическая характеристика хронического воспаления при профессиональном бронхите// Медицина труда и пром. Экология 2003.-№2-с.35-39

24. Мельникова О.В. Клинико-биохимические особенности хронического воспаления при профессиональном бронхите// автореферат диссертации канд.мед.наук М.,2001-24с.

25. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. М.: Медицина, 1995. 224 с.31 .Профессиональные заболевания: руководство для врачей: в 2 т. Измеров Н.Ф. ред. М.: Медицина, 1996

26. Пузырев В.П., Савюк В.Я. Молекулярные основы и клинические аспекты недостаточности ai-антитрипсина // Пульмонология. 2003. -№1. — С. 105-115.

27. Радченко В.Г., Шабров А.В., Зиновьева Е.Н. Основы клинической гепатологии. Заболевания печени и билиарной системы. СПб.: Диалект; М.: БИНОМ, 2005. - 864 е.: ил.

28. Руководство по пульмонологии / под ред. Н.В. Путова, Г.Б. Федосеева. — 2-е изд., перераб. и доп. — Л.: Медицина, 1984. 456 е., ил.

29. Румянцева О.И. Клинико-биохимические особенности формирования и течения бронхолегочной патологии от воздействия аэрозолей цветных металлов-Дис. .канд.мед.наук, Москва,2005

30. Румянцева О.И., Кузьмина, Л.П., Ожиганова В.Н. Состояние протеиназно-ингибиторной системы у больных профессиональной бронхиальной астмой от воздействия аэрозолей цветных металлов. //I

31. Медицина труда и промышленная экология. 2005. № 23-27.

32. Соловьева Н.И., Елисеева Ю.А., Локшина Л.А. Протеолитические ферменты и их биологические функции. Вестник РАМН 1995; 2: 3—9.

33. Чиненная О.В. Фено- и генотипические особенности протеиназно-ингибиторной системы у больных профессиональными заболеваниями органов дыхания Дис. .канд.мед.наук, Москва,2003

34. Чучалин А.Г., Кронина Л.А., Воронина Л.М., Самильчук Е.И. Случай сочетания муковисцидоза с дефицитом альфа-1-антитрипсина // Пульмонология. 1994. - №3. - С. 82 - 84.

35. Шевцова В.М. Физиологические механизмы формирования адаптационно-компенсаторного процесса при воздействии локальной вибрации в сочетании с шумом и пылью. Медицина труда и пром. экология 2000; 2: 18-22,

36. Шмелев Е.И. Хроническая обструктивная болезнь легких. В кн.: Респираторная медицина. Под ред. А.Г.Чучалина. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007; 1: 597-650.

37. Anisimova V.V., Filippova I.Yu., Lysogorskaya E.N. et al. // Int.J.Peptide Protein Res. 1996. - Vol. 47. - P. 28 - 35.

38. Aoshiba K, Yokohori N, Nagai A. Alveolar wall apoptosis causes lung destruction and emphysematous changes. Am J Respir Cell Mol Biol 2003; 28: 555-62.

39. Bartalesi B, Cavarra E, Fineschi S et al. Different lung responses to cigarette smoke in two strains of mice sensitive to oxidants. Eur Respir J 2005; 25: 15— 22

40. Basargina, M.A. Activity of Matrix Metalloproteinases and their Inhibitor in Children with Bronchopulmonary Dysplasia / I.V. Davydova, G.V. Yatzik,

41. T.V. Bershova, M.A. Basargina // European Respiratory Journal.- Austria.-2009.-P.719.

42. Beckman L., Sikstrom C., Mikelsaar A.-V. et al. ai-Antitrypsin-(Pi) alleles as markers of westeuropean influence in the Baltic Sea Region // Hum. Hered. -1999.-№49.-P. 52-55.

43. D'Armiento J, Dalai SS, Okada Y, Berg RA, Chada K. Collagenase expression' in the lungs of transgenic mice causes pulmonary emphysema. Cell. 1992 Dec 11;71(6):955-61.

44. Carrel R.W., Lomas. D.A. Alpha 1-antitrypsin deficiency a model' for conformational diseases // N. Engl. J. Med. - 2002. - №346(1). - P. 45 - 53.

45. Cellular mechanism of proteinase realease from inflammatory cells and the degradation of extra cellular proteins / M. Baggiolini, J. Shnider, U. Bretz et al // Protein degradation Health and Diseases. — Amsterdam, 1980. P. 105121.

46. Corryn B. Pathology of interstitial lung disease // Semin. Respir. Crit. Care Med. -1994.-Vol. 15.-P. 61-76.

47. Gotran RS. Tissue repair: cellular growth, fibrosis and wound healing. In: Robbins pathologic basis of disease. 6th ed. Ramzi S. Cotran; Vinay Kumar, Tucker Collins. W.B.Saunders Company. Philadelphia, 1999; 89-112.

48. Crystal RG: The alpha 1-antitrypsin gene and its deficiency states.Trends Genet 1989, 5:411-417.

49. DeMeo D.L., Silverman E.K. ai-antitrypsin deficiency. 2: Genetic aspects of ai-antitrypsin deficiency: phenotypes and genetic modifiers of emphysema risk // Thorax. 2004. - №59. - P 259 - 264.

50. Dentener MA, Vernooy JH, Hendriks S, Wouters EF. Enhanced levels of hyaluronan in lungs of patients with COPD: relationship with lung function and local inflammation. Thorax 2005; 60: 114-9:

51. Deshmukh HS, Case LM, Wesselkamper SC et al. Metalloproteinases mediate mucin 5AC expression by epidermal growth factor receptor activation. Am J RespirCrit.Care Med 2005; 171: 305-14.

52. Finlay GA, OYDonnell MD, OYConnor CM et al. Elastin and, collagen remodelinginemphysema -a scanning electron microscopy study. Am J Pathol 1996; 149: 1405-15.

53. Finlay GA, Russell KJ, McMahon KJ et al. Elevated levels of matrix metalloproteinases in bronchoalveolar lavage fluid of emphysematous patients. Thorax 1997; 52: 502-6.

54. Gill S.E., Parks W.C. Metalloproteinases and their inhibitors: regulators of wound healing. Int J Biochem Cell Biol 2008; 40: 6—7: 1334—1347.

55. Gray T, Coakley R, Hirsh A et al. Regulation of MUC5AC mucin secretion and airway surface liquid metabolism by IL-ip in human bronchial epithelia. Am J Physiol 2004; 286: L320-30.

56. Hautamaki RD, Kobayashi DK, Senior RM, Shapiro SD. Requirement for macrophage elastase for cigarette smoke-induced emphysema in mice. Science 1997; 277: 2002-4.

57. Hayashibara Т., Yamada Y., Onimaru Y. et al. Matrix metalloproteinase-9 and vascular endothelial

58. Kim W.-D., Ling S.H., Coxson H.O. et al. The association between small airway obstruction and emphysema phenotypes in COPD // Chest. 2007. -№131.-P. 1372-1378.120 : ■ " ;. '":■■•■ ■'•,■ ■ ■

59. Klein G., Vellengai Е., Fraaje; MiW. et al. The possible role of matrix"metalloproteinase (MMP)-2 and

60. Konno K, Arai? H^ Motomiya . Щ et- ah A', biochemical study от-glycosaminoglycans (mucopolysaccharides) in emphysematous and in aged! lungs. Am Rev Respir Dis 1982; 126: 797-801.

61. Kuittinen O., Soini Y., Tuipeenniemi-Hujanen T. Diverse role of MMP-2 and MMP-9imthel999; 878: 212-227.79:E.P:Kuzmina; V.V.Milishnikova, L.A.Tarasova;„ L.M'Bezrukavnikova;

62. O.I.Rumyantseva. Assessment of protein-inhibition system- due to• •' th occupational respiratory diseases // 10 International Conference on

63. Occupational Respiratory Diseases. Abstr Beijing, China, 2005 - P. 447

64. Lang MR, Fiaux GW, Gilloolv M et al. Collagen- content of alveolar wall? tissue: in emphysematous and non-emphysematous lungs. Thorax 1994; 49:- 319-26.

65. Lim S, Roche:Nj Oliver BG et al. Balance of matrix metalloprotease-9 and tissue inhibitor of metalloprotease-1 from alveolar macrophages in. cigarette smokers: regulatiom6y interleukin-10. Am J Respir Crit Care Med 2000; 162: 1355-60.

66. Lomas D.A., Elloitt P.R., Sighar S.K. et al: Alphar antitrypsin Mmalton ( Phe deleted) forms loop-sheet polymers in vivo: evidence for the С sheet mechanism of polymerization // J . Biol. Chem. 1995: - №270: - P. 16864 -16870.

67. Euisetti M, Seersholm N: Alpha!-antitrypsin deficiency. 1: epidemiology of alpha 1-antitrypsin' deficiency .Thorax 2004, 59:164-169

68. Lung> injury induced by leukocytic proteases / A. Janoff, R. White, U. Carp et al //Amer. J. Path. 1979.-Vol. 97.-P. 111-136,

69. Mahadeva R., Atkinson C., Li Z. et al. Polymers of Z ai-antitrypsin co-localize with neutrophils in emphysematous alveoli and are chemotactic: in vivo // Am. J. Pathol. 2005. - №166. - P. 377 - 386.

70. Marshall CJ. Specificity of receptor tyrosine kinase signaling: Transient versus sustained extracellular signal-regulated kinase activation. Cell 1995; 80: 179-85.

71. Massague J, Pandiella A. Membrane-anchored growth factors. Annu Rev Biochem 1993;62:515-41.

72. Mornex J.F., Crystal R. Protease-antiprotease• imbalance in lung diseases // Marker Proteins Inflammation; New York, 1989; - P. 261-270;

73. Mornex J.F., Crystal R. Protease-antiprotease imbalance in lung diseases // Marker Proteins Inflammation. New York, 1989. - P. 261 -270.

74. Nagase H , Woessner J.F. Matrix metalloproteinases. J. Biol. Chem. 1999; 274:21491-21494. .

75. Peake NJ, Foster HE, Khawaja K, Cawston ТЕ and Rowan AD Assessment of the clinical significance of gelatinase activity in patients with juvenile idiopathic arthritis using quantitative protein substrate zymography. ARD Online 2006, 65(4), 501-507. .

76. Puddicombe SM, Polosa R, Richter A et al. Involvement of the epidermal growth factor receptor in epithelial repair in asthma. FASEB J 2000; 14: 1362-74.

77. Regahi R., Poyer F., Legrand E. et al. Spontaneous and cytokine-evoked production of matrix

78. Repine JE, Bast A, Lankhorst I. Oxidative stress in chronic obstructive pulmonary disease. Am J Resp Crit Med 1997; 156: 341-57.

79. Reynolds J.J. Collagenases and tissue inhibitors of metalloproteinases: a functional balance in tissue degradation. Oral Dis 1996; 2: 1: 70—76.

80. Ries C., Loher F., Zang C. et al. Matrix metalloproteinase production by bone marrow mononuclear cells

81. Schoofs L, Clynen E, Salzet M: Trypsin and chymotrypsin inhibitors in insects and gut leeches.Curr Pharm Des 2002, 8:483-491.

82. Shao MX, Nakanaga T, Nadel JA. Cigarette smoke induces MUC5AC mucin overproduction via tumor necrosis factor-a converting enzyme in human airway epithelial (NCI-H292) cells. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2004; 287: L420-27.

83. Shapiro SD, Goldstein NM, Houghton AM et al. Neutrophil elastase contributes to cigarette smoke-induced emphysema in mice. Am J Pathol 2003;163:2329-35.

84. Shapiro SD, Ingenito EP. The pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease: advances in the past 100 years. Am J Respir Cell Mol Biol 2005; 32: 367-72.

85. Shiomi T, Okada Y, Foronjy R et al. Emphysematous changes are caused by degradation of type III collagen in transgenic mice expressing MMP-1. Exp Lung Res 2003; 29: 1-15.

86. Sniger G.L., Lucey E.C., Stone P.J. Animal models of emphysema // Am. Rev. Respir. Dis. 1986. - №133. - P. 149 - 169.

87. Stamenkovic I. Extracellular matrix remodeling: the role of matrix etalloproteinases. J Pathol 2003; 4: 448—464.

88. M. Sheppard, W. Harrison, 1992

89. Takeyama K, Jung B, Shim JJ et al. Activation of epidermal growth factor receptors is responsible for mucin synthesis induced by cigarette smoke. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2001; 280: LI65-72.

90. Taraseviciene-Stewart L, Scerbavicius R, Choe KH et al. An animal model of autoimmune emphysema. Am JRespir Crit Care Med 2005; 171: 734-42.

91. Tetley TD: New perspectives on basic mechanisms in lung disease. 6. Proteinase imbalance: its role in lung disease.Thorax 1993, 48:560-565.

92. Timens W, Coers W, Van Straaten JFM, Postma DS. Extracellular matrix and inflammation: a role for fibroblast-mediated tissue repair in thepathogenesis of emphysema? Eur Respir Rev 1997; 7: 119-23.

93. Tinkle CL, Lechler T, Pasolli HA et al. Conditional targeting of E-cadherin in skin: Insights into hyperproliferative and degenerative responses. Proc Natl Acad Sci USA 2004; 101: 552-7.

94. Travaglino E., Benatti C., Malcovati L. et al. Biological and clinical relevance of matrix metalloproteinases 2 and 9 in acute myeloid leukaemias and myelodysplastic syndromes. Eur. J. Haematol.2008;.80: 216-226.

95. Tuder RM, Yoshida T, Arap W et al. State of the art. Cellular and molecular mechanisms of alveolar destruction in emphysema: an evolutionary perspective. Proc Am Thorac Soc 2006; 3: 503-11.

96. Van der Geld YM, Van Straaten JFM, Postma DS, Timens W. Role of proteoglycans in development and pathogenesis of emphysema. In: Garg HG, Roughley PJ, Hales. CA, eds, Proteoglycans- in Lung Disease. New York: Marcel Dekker, 2002; 241-67.

97. Van Lint P., Libert C. Chemokines and cytokines processing by matrix metalloproteinases and its effect on leukocyte migration and inflammation. J Leukoc Biol 2007; 82: 6: 135—1381

98. Van Valckenborgh E.V., Croucher P.I., Raeve H. et al. Multifunctional role of matrix metalloproteinases acute lymphatic leukemia (ALL). Leukemia Res. 2001; 25: 125-131.

99. Vandiver R.W., Fadok V.A., Hoffmann P.R. et al. Elastase-mediated phosphatidylserine receptor cleavage impairs apoptotic cell clearance in cystic fibrosis and bronchiectasis // J. Clin. Invest. 2002. - №109. - P. 661 - 670.

100. Vignola AM, Riccobono L, Mirabella A et al. Sputum metalloproteinase-9/tissue inhibitor of metalloproteinase-1 ratio correlates with airflow obstruction in asthma and chronic bronchitis. Am J Respir Crit Care Med 1998; 158: 1945-50.

101. Vihinen P., Kahari V.M. Matrix metalloproteinase in cancer: prognostic markers and therapeutic targets.

102. Voynow JA, Fischer BM, Malarkey DE et al. Neutrophil elastase induces mucus cell metaplasia in mouse lung. Am J Physiol 2004; 287: LI293-302.

103. Wang RD, Tai H, Xie С et al. Cigarette smoke produces airway wall remodeling in rat tracheal explants. Am J Respir Crit Care Med 2003; 168: 1232-6.

104. Wi Wallace и соавт. (1994) J Exp Med; 192: 1587-99.134. with acute myeloid leukemia. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi 2006; 14(1): 15-20.

105. Wright JL, Kerstjens HAM, Timens W. What is new in chronic obstructive pulmonary disease? Eur Resp Mon 2007; 39: 153-69.

106. Wright JL, Levy RD, Churg A. Pulmonary hypertension in chronic obstructive pulmonary disease: current theories of pathogenesis and their implications for treatment. Thorax 2005; 60: 605-9.

107. Wright JL, Tai H, Churg A. Vasoactive mediators and pulmonary hypertension after cigarette smoke exposure in the guinea pig. J Appl Physiol 2006; 100: 672-6.

108. Yang L., Dong Z.R., Wen S.P. et al. Relationship between VEGF and MMP-2, MMP-9 in 82 patients

109. Zhang В., Wu K.F., Cao Z.Y. et al. IL-18 increases invasiveness of HL-60 myeloid leukemia cells:

110. Zucker S., Hymowitz M., Conner C. et al. Measurement of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors