Роль механизмов врожденного иммунитета в реализации внутриутробной инфекции при беремености высокого инфекционного риска тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.01, доктор медицинских наук Бахарева, Ирина Викторовна

• Бахарева, Ирина Викторовна
• доктор медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Бахарева, Ирина Викторовна

ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ВНУТРИУТРОБНАЯ ИНФЕКЦИЯ И СИСТЕМА ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Современные представления о внутриутробной инфекции.

1.1.1 .Определение понятия «внутриутробная инфекция».

1.1.2. Этиология внутриутробной инфекции.

1.1.3. Патогенез внутриутробной инфекции.

1.1.4. Комплексная диагностика внутриутробной инфекции.

1.1.5. Интраамниотическая инфекция.

1.1.6. Клинические проявления внутриутробной инфекции у плода и новорожденного.

1.1.7. Общие принципы профилактики и лечения ВУИ.47 •

1.2. Врожденный иммунитет и беременность.

1.2.1. Механизмы врожденного иммунного ответа.

1.2.2. Изменения в системе врожденного иммунитета при физиологически протекающей беременности.

1.2.3. Изменения в системе врожденного иммунитета при осложнениях беременности.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Методы клинического обследования.

2.2. Иммунологические и молекулярно-генетические методы исследования.

2.2.1. Определение содержания цитокинов в сыворотке крови, в амниотической жидкости и в культурах мононуклеарных клеток методом шшуноферментного анализа.

2.2.2. Определение экспрессии генов TLR (TLR2, TLR4) и противомикробного пептида HBD1 методом полимеразной цепной реакции в реальном времени.

2.2.3. Определение продукции активных форм кислорода нейтрофшами методом люминол-зависгшой хемилюминесценции.

2.3. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. АНАЛИЗ УРОВНЯ ЦИТОКИНОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ У БЕРЕМЕННЫХ ВЫСОКОГО ИНФЕКЦИОННОГО РИСКА И ИХ НОВОРОЖДЕННЫХ.

3.1. Клиническая характеристика исследуемых групп.

3.2. Сравнительный анализ содержания цитокинов в сыворотке крови беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

3.3. Сравнительный анализ содержания цитокинов в пуповинной крови новорожденных, родившихся от матерей с УГИ, и здоровых новорожденных.*.

3.4. Определение продукции ИЛ-12 и ФНОа мононуклеарными клетками периферической крови беременных с вирусной инфекцией и здоровых беременных.

Глава 4. АНАЛИЗ УРОВНЯ ЦИТОКИНОВ АМНИОТИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ У БЕРЕМЕННЫХ ВЫСОКОГО ИНФЕКЦИОННОГО РИСКА.

4.1. Клиническая характеристика беременных исследуемых групп.

4.2. Комплексная оценка состава амниотической жидкости у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

4.3. Сравнительный анализ уровня цитокинов в амниотической жидкости у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

4.4. Сопоставление клинических признаков ВУИ новорожденных, родившихся от матерей с УГИ, с результатами комплексного исследования амниотической жидкости.

Глава 5. ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ TOLL-ПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ (TLR2, TLR4) И ПРОТИВОМИКРОБНОГО ПЕПТИДА HBD1 У БЕРЕМЕННЫХ ВЫСОКОГО ИНФЕКЦИОННОГО РИСКА.

5.1. Клиническая характеристика беременных исследуемых групп.

5.2. Экспрессия генов То11-подобных рецепторов у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

5.2.1. Экспрессия генов То11-подобных рецепторов мононуклеарными клетками периферической крови у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

5.2.2. Экспрессия генов То11-подобных рецепторов эпителиальными клетками цервикалъного канала у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

5.2.3. Экспрессия генов ТоП-подобных рецепторов клетками плаценты у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

5.3. Экспрессия гена противомикробного пептида HBD1 у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

5.3.1. Экспрессия гена противомикробного пептида HBD1 мононуклеарными клетками периферической крови у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

5.3.2. Экспрессия гена противомикробного пептида HBD1 эпителиальными клетками цервикалъного канала у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

5.3.3. Экспрессия гена протиеомикробного пептида HBD1 клетками плаценты у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

Глава 6. ПРОДУКЦИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА НЕЙТРОФИЛАМИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ И АМИИОТИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ У БЕРЕМЕННЫХ ВЫСОКОГО ИНФЕКЦИОННОГО РИСКА.

6.1. Продукция АФК полиморфноядерными лейкоцитами периферической крови у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных

6.2. Продукция АФК нейтрофилами амниотической жидкости у беременных высокого инфекционного риска и здоровых беременных.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль механизмов врожденного иммунитета в реализации внутриутробной инфекции при беремености высокого инфекционного риска»

Актуальность проблемы

Внутриутробная инфекция (ВУИ) является важной и нерешенной проблемой акушерства и перинатологии [16, 64, 93, 99]. Так, по данным ряда авторов [10, 22, 214], ВУИ развивается у 27,4 - 36,6% детей, рожденных живыми, а в структуре смертности новорожденных инфекционная патология занимает ведущее положение, обусловливая от 11% до 45% потерь. В развитых странах 10-25% мертворождений обусловлены инфекционными патогенами, а в развивающихся странах восходящая бактериальная инфекция является самой частой причиной неонатального сепсиса и мертворождений [214].

Проблема ВУИ является одной из ведущих в акушерской практике в связи с высоким уровнем инфицирования беременных, рожениц и родильниц, опасностью нарушения развития плода и рождения больного ребенка. ВУИ является причиной широкого спектра патологии: невынашивания беременности, плацентарной недостаточности, инфекционных заболеваний плода, хронической гипоксии, мертворождений, пороков развития плода, синдрома задержки роста плода. Увеличение частоты данной патологии среди заболеваний новорожденных обусловлено увеличением количества женщин фертильного возраста с наличием той или иной урогенитальной инфекции [64]. Наличие у беременной очагов инфекции является существенным фактором риска инфицирования плода и новорожденного. Наиболее опасным является острое инфицирование во время беременности или обострение хронической инфекции у беременной. Наряду с острым течением инфекции у плода может наблюдаться длительная персистенция возбудителя с формированием латентного или медленно текущего хронического инфекционного процесса.

ВУИ представляет сложную диагностическую проблему. Остается неясным, почему одни и те же инфекционные агенты в одних случаях вызывают тяжелое поражение плода или невынашивание беременности, а в других - практически не влияют на ее течение [99]. Сложности антенатальной диагностики ВУИ связаны с полиэтиологичностью патологии, отсутствием четкой взаимосвязи между выраженностью клинических проявлений у матери и степенью поражения плода, многофакторным влиянием инфекционного агента на плод. Из-за неспецифичности клинических проявлений ВУИ диагностика ее во время беременности затруднена и возможна лишь при сочетанном использовании клинических и лабораторно - инструментальных методов исследования [34, 35, 100].

Ведущее место в патогенезе реализации внутриутробной инфекции принадлежит иммунологическим аспектам, поэтому изучение иммунологических взаимоотношений при беременности, осложненной урогенитальной инфекцией, является одним из наиболее перспективных направлений в изучении патогенеза ВУИ.

В последние годы сформировался новый подход к пониманию механизмов противоинфекционной защиты. Речь идет о врожденном компоненте иммунной системы, который особенно важен для развития плода, когда система адаптивного или приобретенного иммунитета еще не сформирована. Особое значение в противоинфекционной защите приобретает специфичная для этого периода структура — плацента. Появляется все больше данных, что плацента осуществляет не только барьерную функцию, но и активно участвует в противомикробной защите. Особое значение приобретают в этих процессах клеточные, рецепторные и молекулярные механизмы врожденного иммунитета. Избыточная активность компонентов врожденного иммунитета может привести к воспалительному процессу в плаценте и осложнениям беременности. В этом аспекте важным является своевременное выявление факторов, способствующих реализации патологического процесса, таких как экспрессия распознающих рецепторов системы врожденного иммунитета (То11-подобных рецепторов и др.), цитокинов, в первую очередь провоспалительных, противомикробных пептидов и других факторов врожденного иммунитета [52, 138].

В возникновении ВУИ важную роль играют ограниченные возможности иммунной системы беременной к своевременному распознаванию и уничтожению этиологического агента инфекции. Иммунологическая защита против различных патогенов осуществляется в результате скоординированной работы врожденной и адаптивной систем иммунитета [109, 274]. Нарушение взаимодействия в гисто-иммунологических эпителиальных и плацентарных барьерах с различными инфекционными агентами сопровождается развитием инфекционного процесса у плода. В последние годы появляются работы о роли механизмов врожденного иммунитета в репродуктивной функции человека [200, 225, 306, 314, 316, 343].

В патогенезе внутриутробной инфекции важную роль играют система интерферонов и интерлейкинов - про- и противовоспалительных цитокинов. В ряде работ указывается на преобладание в децидуальной ткани и сыворотке крови противовоспалительных цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10) при нормально протекающей беременности, тогда как при патологическом течении гестационного процесса на фоне урогенитальной инфекции отмечается увеличение в периферической крови цитокинов с провоспалительной активностью, таких как ИЛ-1, ИЛ-6, ФНОа и ИФНу [34, 96, 103, 109, 111, 246, 322]. Воспалительная реакция может развиваться местно или на уровне всего организма, системно. Размножение микроорганизмов в амниотической жидкости приводит к повышению уровня липополисахаридов, которые активируют синтез цитокинов (интерлейкинов - 1, 6, 8, 10, фактора некроза опухоли) клетками фетального трофобласта. Аккумуляция провоспалительных цитокинов в амниотической жидкости под действием инфекции приводит к нарастанию синтеза простагландинов и преждевременному развитию родовой деятельности [193, 213, 235].

Тип иммунного ответа зависит от активности Т-хелперов. Thl секретируют преимущественно провоспалительные цитокины, принимающие участие в реализации клеточного иммунитета, дифференцировке Т-,В-лимфоцитов, естественных киллеров, противовирусной и антибактериальной защите. Th2 синтезируют интерлейкины, обеспечивающие преимущественно гуморальные реакции (ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10).

Нормальное течение беременности является результатом преобладания Th2 в эндометрии, благодаря которому становится возможной продукция блокирующих антител, скрывающих антигены трофобласта от распознавания иммунной системой матери [103, 133, 174, 143, 299, 341]. Thl и Th2 находятся в антагонистических отношениях. Гиперфункция^ Thl, возникающая при наличии инфекции, может привести к воспалительным явлениям в эндометрии и прерыванию беременности [96, 299, 341].

Для возникновения восходящего пути инфицирования определяющую роль играет ослабление иммунологических механизмов защиты во влагалище и цервикальном канале, а также снижение бактерицидных свойств амниотической жидкости. Это обусловлено «порочным кругом» факторов, нарушающих биоценоз урогенитального тракта [86, 88, 311,312]. Нисходящий путь инфицирования начинается из хронических очагов воспаления в яичниках и маточных трубах С' последующим вовлечением децидуальной оболочки и развитием хориоамнионита. При этом также имеет место подавление защитных функций околоплодной среды. Поэтому, независимо от пути инфицирования, на определенном этапе патогенетической «цепи» и развития патологических процессов в системе «мать-плацента-плод» весомая роль принадлежит функциональным изменениям околоплодной среды, одним из важнейших показателей которой является количественный и качественный состав амниотической жидкости.

АЖ представляет собой биологический барьер между плодом и экстраэмбриональными структурами, являясь местом проявления локальных иммунных реакций. Проникновение патогенных микроорганизмов в околоплодную среду вызывает ряд биохимических, гормональных и иммунологических изменений местного характера [14, 33, 309, 310, 311]. Изучение системы врожденного иммунитета слизистой урогенитального тракта, изменений иммунологических параметров АЖ в качестве показателей возможного развития ВУИ у беременных группы высокого инфекционного риска является актуальным на современном этапе.

В развитии иммунного ответа, в осуществлении антибактериальной и противовирусной защиты организма необходимым этапом является активация фагоцитов. Наиболее яркое функциональное проявление активации фагоцитов - "кислородный взрыв". Суть этого процесса сводится к выработке активных форм кислорода (АФК), играющих важную роль в защите организма от инфекции [39, 303]. В нашей работе мы планируем изучение функциональной активности фагоцитов на системном и локальном уровнях - в сыворотке крови беременных и амниотической жидкости.

Важное значение в развитии ряда патологических процессов, в том числе воспаления, имеют распознающие рецепторы врожденной иммунной системы: То11-подобные рецепторы (TLRs) [52, 67, 271, 354]. Они обеспечивают интегрирующую и регулирующую роль в активации и реализации врожденного иммунного ответа на микробные патогены. TLRs, распознавая консервативные молекулярные образцы различных патогенов, включая вирусы, бактерии, грибы, увеличивают локальный синтез цитокинов, простагландинов, хемокинов и противомикробных пептидов, что запускает механизм реализации воспалительного ответа [139, 359]. Первым TLR, идентифицированным у человека, был TLR4. Этот рецептор распознает ЛПС клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Наиболее широким спектром специфичности из всех идентифицированных TLRs обладает TLR2. TLR2 связывается с липопротеинами грамположительных и грамотрицательных бактерий, пептидогликаном и липотейхоевой кислотой грамположительных бактерий, грибковым зимозаном.

Экспрессия TLRs доказана в эпителии эндометрия и цервикального канала [315, 354]. Под влиянием различных микроорганизмов, инфицирующих эпителий цервикального канала, TLRs увеличивают локальный синтез провоспалительных цитокинов. Плацентарная ткань при нормальной доношенной беременности также экспрессирует TLRs 1-10 на уровне генов

138]. Определенные внутриутробные инфекции во время беременности оказывают как прямое, так и непрямое влияние на апоптоз клеток трофобласта, что зависит от активации различных TLR. В связи с этим особый интерес представляет изучение TLRs, как маркеров прогнозирования осложнений беременности.

Таким образом, в проблеме ВУИ вопросы ее диагностики и прогнозирования являются наиболее актуальными в настоящее время. Имеются основания предполагать, что применение современных технологий для выявления доклинических признаков ВУИ может обеспечить раннюю диагностику данной патологии и возможность новых подходов к разработке комплексных мер профилактики и лечения.

Цель исследования

Целью настоящего исследования является комплексное изучение факторов системы врожденного иммунитета (цитокинов, экспрессии генов То11-подобных рецепторов, противомикробных пептидов, функциональной активности клеток фагоцитарной системы) в сыворотке крови, цервикальной .слизи, амниотической жидкости и плаценте беременных с урогенитальными инфекциями для диагностики и прогнозирования реализации ВУИ, улучшения качества лечения.

Задачи исследования

1. Провести анализ течения беременности, родов и послеродового периода у беременных с урогенитальной инфекцией на основании комплексного клинико-лабораторного обследования беременных с урогенитальной инфекцией, для выделения группы риска по реализации внутриутробной инфекции.

2. Провести анализ уровня цитокинов в сыворотке крови и культурах мононуклеарных клеток беременных с урогенитальной инфекцией как возможных маркеров реализации ВУИ.

3. В комплексе клинико-лабораторного обследования потомства провести исследование уровня цитокинов в пуповинной крови здоровых новорожденных и больных новорожденных с реализацией ВУИ для улучшения качества диагностики и лечения.

4. Провести комплексное исследование амниотической жидкости беременных с урогенитальной инфекцией, определить диагностическую значимость определения уровня цитокинов амниотической жидкости как возможных маркеров реализации ВУИ.

5. Определить количественную экспрессию генов TLR2, TLR4 и противомикробного пептида HBD1 мононуклеарными клетками периферической крови, клетками слизистой цервикального канала и клетками плаценты у здоровых беременных.

6. Определить количественную экспрессию генов TLR2, TLR4 и противомикробного пептида HBD11 мононуклеарными клетками периферической крови, клетками слизистой цервикального канала и клетками плаценты у беременных с невынашиванием беременности инфекционного генеза и реализацией ВУИ.

7. Оценить состояние функциональной активности фагоцитарной системы по уровню продукции активных форм кислорода полиморфноядерными лейкоцитами в периферической крови и амниотической жидкости здоровых беременных и беременных с урогенитальной инфекцией.

8. Разработать алгоритм обследования беременных высокого риска реализации ВУИ для оптимизации тактики ведения.

Научная новизна

В настоящей работе, являющейся клинико-иммунологическим исследованием роли системы врожденного иммунитета в реализации ВУИ у беременных высокого инфекционного риска, впервые проводится комплексное исследование цитокинов на локальном уровне - в амниотической жидкости, системном уровне - в сыворотке крови беременных и их новорожденных, а также в культурах мононуклеарных клеток (лимфоцитов) периферической крови.

Впервые предполагается исследование системы интерлейкина 1-а и его рецепторного антагониста; оценка роли цитокинов как возможных маркеров внутриутробного инфицирования плода и невынашивания беременности инфекционного генеза.

Впервые в России проведено исследование провоспалительного цитокина ИЛ-12 в сыворотке крови беременных и их новорожденных, в амниотической жидкости и в культуре клеток, оценена его роль в реализации иммунного ответа при урогенитальных инфекциях.

Проведен комплексный анализ системы цитокинов у здоровых и больных новорожденных от матерей с урогенитальной инфекцией, что позволяет определить показания к иммунокоррекции. Клинико-иммунологические параллели обследования матерей и их новорожденных позволят своевременно диагностировать изменения иммунного статуса новорожденных от матерей с урогенитальной инфекцией.

Впервые проведено определение цитокинов в культурах мононуклеарных клеток у беременных с герпес-вирусной инфекцией в стадиях ремиссии "и обострения для обоснования рациональной цитокинотерапии.

Впервые изучена функциональная активность фагоцитарной системы в сыворотке крови беременных и амниотической жидкости, оценена роль данного исследования в диагностике и прогнозировании течения ВУИ.

Впервые в России проведена оценка количественной экспрессии генов распознающих рецепторов врожденного иммунитета (TLRs) и противомикробного пептида (HBD1) на системном и локальном уровнях при невынашивании беременности инфекционного генеза и внутриутробной инфекции.

Проведен анализ клинических проявлений ВУИ новорожденных и показана корреляция между повышением экспрессии гена TLR2 и снижением экспрессии противомикробного пептида HBD1 клетками плаценты и эпителиальными клетками цервикального канала при реализации ВУИ, что говорит о дисбалансе в системе врожденного иммунитета. Полученные данные об изменении экспрессии генов TLRs у беременных с урогенитальной инфекцией помогли расширить представление о роли механизмов врожденного иммунитета в патогенезе невынашивания беременности.

Получен патент на изобретение №2334233 «Способ прогнозирования преждевременных родов при урогенитальной инфекции».

Разработаны новые иммунологические методы диагностики внутриутробной инфекции и выработаны оптимальные профилактические мероприятия для предупреждения реализации внутриутробной инфекции у беременных групп высокого риска по ВУИ (с вирусной, бактериальной и смешанной инфекцией), обоснованы теоретические предпосылки для проведения иммунокоррекции беременным групп риска и их новорожденным.

Практическая значимость

Изучение социально — возрастного состава, а также соматического, и гинекологического статуса беременных позволяет определить факторы риска для развития ВУИ плода. Формирование групп повышенного риска среди женщин во время беременности способствует своевременной диагностике и проведению профилактического лечения ВУИ плода на ранних стадиях его развития. Определение факторов риска развития ВУИ позволяет выделить когорту беременных для проведения динамического клинико-лабораторного контроля за состоянием будущей матери и плода с применением современных технологий.

Полученные данные об изменении концентрации цитокинов и функциональной активности фагоцитов углубляют представления о патогенезе реализации ВУИ, что открывает новые возможности в лечении и профилактике данной патологии. Полученные данные доказывают возможность определения исследуемых показателей для диагностики и прогнозирования внутриутробной инфекции и профилактики невынашивания беременности. Полученные иммунологические критерии могут быть использованы для определения показаний к иммунокоррекции у беременных.

Исследование амниотической жидкости способствует расширению диагностических возможностей при проведении инвазивных методик диагностики интраамниотической инфекции.

Выявленные изменения в экспрессии гена TLR2, проявляющиеся в ее увеличении и, напротив, снижении экспрессии противомикробного пептида HBD1 эпителиальными клетками цервикального канала могут быть рекомендованы в качестве маркеров ВУИ.

Диагностика нарушений врожденного иммунитета дает возможность своевременно прогнозировать развитие осложнений во время беременности и определить показания к назначению иммунокорригирующей терапии у беременных и новорожденных. Ранняя диагностика и своевременное лечение внутриутробной инфекции будут способствовать улучшению исходов беременности для матери и плода.

Положения, выносимые на защиту

1. Наличие урогенитальной инфекции (УГИ) у беременной является фактором риска развития акушерских осложнений во время беременности и родов, выраженность которых зависит от вида инфекционного агента, фазы и длительности инфекционного процесса, активности врожденного иммунитета. Наиболее тяжелое течение беременности и родов, а также состояние новорожденных и реализация ВУИ отмечается у пациенток с наличием смешанной (бактериально - вирусной) инфекции.

2. У беременных с урогенитальной инфекцией наблюдается выраженный дисбаланс в системе цитокинов периферической крови. Увеличение частоты невынашивания у беременных с вирусной и смешанной инфекцией коррелирует с увеличением продукции ИЛ-1а и снижением ИЛ-lPa в сыворотке крови. У беременных с вирусной инфекцией ИФНу не определялся, что является теоретическим обоснованием интерферонотерапии.

3. Комплексное исследование АЖ (микробиологическое, молекулярно-генетическое, биохимическое, иммунологическое) представляет особенную диагностическую значимость для диагностики ВУИ плода. Увеличение уровня цитокинов (ИЛ—ip, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-12), снижение ИФНу и снижение выработки АФК нейтрофилами АЖ позволяет прогнозировать развитие ВУИ.

4. Маркером невынашивания беременности инфекционного генеза является дисбаланс компонентов врожденного иммунитета: повышение экспрессии генов TLR2 и снижение экспрессии гена противомикробного пептида HBD1 эпителиальными клетками цервикального канала и клетками плаценты. Маркером реализации ВУИ является достоверное увеличение экспрессии гена TLR2 в эпителиальных клетках цервикального канала и клетках плаценты по сравнению со здоровыми беременными.

5. У беременных с урогенитальной инфекцией вирусной этиологии наблюдается выраженный дефицит продукции активных форм кислорода лейкоцитами периферической крови и амниотической жидкости, что является показанием к назначению иммунотерапии.

6. На основании полученных клинико-иммунологических критериев разработан алгоритм диагностики и прогнозирования реализации ВУИ у беременных высокого инфекционного риска.

Апробация работы

Апробация диссертации состоялась на объединенной научно-практической конференции сотрудников кафедр акушерства и гинекологии и иммунологии Российского государственного медицинского университета, сотрудников городской клинической больницы №55, городской больницы №8, родильного дома №10 19 мая 2009 года.

Основные положения работы представлены: на V съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Санкт-Петербург, 2003 г.); VI, IX Российском форуме "Мать и дитя" (Москва, 2004 г., 2007 г.); XI, XIII, XIV, XV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (2004 г., 2006 г., 2007 г., 2008 г.); IV, VII конгрессе педиатров-инфекционистов России (Москва, 2005 г., 2008 г.); VIII, IX, XI, XII, XIII Пироговской студенческой научной медицинской конференции (2004 г., 2005 г., 2007 г., 2008 г., 2009 г.); Международной конференции «Генетика в России и мире» (Москва, 2006 г.); VI съезде иммунологов и аллергологов СНГ, Российском национальном конгрессе аллергологов и иммунологов (Москва, 2006 г.); II Всероссийском Конгрессе по детской аллергологии и иммунологии (Москва, 2006 г.); V конференции иммунологов Урала (Оренбург, 2006 г.); X Всероссийском научном форуме «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2006 г.); I, II Ежегодном конгрессе специалистов перинатальной медицины «Новые технологии в перинатологии» (Москва, 2006 г., 2007 г.); I Международном Семинаре «Инфекция в акушерстве и перинатологии» (First International Seminar "Infections in Obstetrics and Perinatology", Москва, 2007 г.); Конференции «Современные вопросы акушерства и гинекологии» (Москва, 2007 г.)

Основные положения диссертации отражены в 67 публикациях, в том числе в 17 статьях в центральной печати, а также в методических рекомендациях и монографиях: Методические рекомендации:

Профилактика и лечение внутриутробных инфекций — коллектив авторов (И.С.Сидорова, О.В.Макаров, И.Б.Манухин, В.Е.Радзинский, И.О.Макаров, ИВ.Бахарева); 2007 год.

Монографии: 1. О.В.Макаров, Л.В.Ковальчук, Л.В.Ганковская, ИВ.Бахарева, О.А.Ганковская. Невынашивание беременности, инфекция, врожденный иммунитет. Москва, «ГЭОТАР-Медиа», 2007 г.

2. Инфекции в акушерстве и гинекологии (Под редакцией О.В.Макарова, В.А. Алешкина, Т.Н.Савченко) - коллектив авторов (О.В.Макаров, В.А.Алешкин, Т.Н.Савченко, С.С.Афанасьев, Е.А.Воропаева, Л.В.Ганковская, А.З.Хашукоева, И.В.Бахарева, С.И.Каюкова, Л.О.Протопопова, М.С.Афанасьев, Е.И.Гиммельфарб, Л.И.Новикова); Москва, «МЕДпресс-информ», 2007г., 2009г.

Внедрение в практику

Результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс студентов, ординаторов и аспирантов кафедр акушерства и гинекологии, иммунологии Российского государственного медицинского университета, используются в практической работе родильного отделения ГБ№8 и родильного дома №10 г. Москвы.

Применение исследования экспрессии гена TLR2 эпителиальными клетками у беременных подтверждено патентом на изобретение №2334233: «Способ прогнозирования преждевременных родов при урогенитальной инфекции». Патентообладатели: Ганковская Л.В., Макаров О.В., Ковальчук Л.В., Бахарева И.В., Романовская В.В., Ганковская О.А. Заявка №2006144597, приоритет изобретения 14 декабря 2006 г. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской федерации 20 сентября 2008г. Официальный бюллетень федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам РФ №17 «Изобретения. Полезные модели» 20.09.2008 г.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных наблюдений, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, содержащего 135 отечественных и 225 зарубежных источников. Работа выполнена на 296 страницах машинописного текста, иллюстрирована 68 таблицами и 70 диаграммами.

Заключение диссертации по теме «Акушерство и гинекология», Бахарева, Ирина Викторовна

выводы

1. Факторами риска реализации ВУИ являются наличие УГИ > во время беременности в сочетании с хроническими инфекционными заболеваниями, анемией, угрозой прерывания1 беременности, плацентарной недостаточностью, хронической гипоксией плодам изменением количества околоплодных вод - маловодием и многоводием.

2. У беременных с урогенитальной инфекцией вирусной и смешанной этиологии наблюдается выраженный дисбаланс в системе выработки цитокинов, характеризующийся:

- возрастанием концентрации ИЛ- 1а и снижением уровня рецепторного антагониста ИЛ-1 в сыворотке крови, что коррелирует с угрозой прерывания-беременности и развитием преждевременной родовой деятельности;

- повышением продукции ИЛ-12 в сыворотке крови по сравнению со здоровыми беременными в 2 раза;

- отсутствием выработки ИФНу в сыворотке крови беременных с урогенитальной инфекцией вирусной этиологии; что> свидетельствует о необходимости проведения интерферонотерапии в этой группе пациенток.

3. Здоровые и больные дети, рожденные от матерей- с урогенитальной инфекцией любой этиологии, не отличаются по содержанию основных цитокинов в пуповинной крови от их матерей. У инфицированных детей в. связи с незрелостью иммунной системы наблюдается снижение концентрации ИЛ-1а в 2 раза по сравнению со здоровыми детьми. У здоровых и больных новорожденных от матерей с вирусной инфекцией ИФНу не определялся в 100% случаев в пуповинной крови, что является обоснованием терапии препаратами группы интерферона.

4. Анализ цитокинов амниотической жидкости при УГИ' выявил достоверное повышение цитокинов: ИЛ-ip в 2,6 раза, ИЛ-12 в 2,2 раза, ИЛ-4 в 3,2 раза, а также резкое снижение уровня. ИФНу; по сравнению с аналогичными показателями здоровых пациенток. В группе пациенток с УГИ, родивших детей с признаками внутриутробной инфекции, статистически достоверно повышается уровень ИЛ-12 в АЖ в 3-5 раз и статистически достоверно снижается ИФНу в 5-6 раз, что позволяет прогнозировать реализацию ВУИ у пациенток группы риска.

5. При физиологической > беременности отмечается различный уровень экспрессии генов TLRs (TLR2 и TLR4) в эпителиальных клетках цервикального канала. Уровень экспрессии гена TLR2 превышает TLR4 в 8 раз.

6. В группе пациенток с УГИ, родивших детей с признаками внутриутробной инфекции, отмечалось достоверное увеличение экспрессии гена TLR2: клетками эпителия цервикального канала в 31,6 раз, клетками плаценты в 7 раз по сравнению со здоровыми беременными.

7. При субклиническом течении инфекционного процесса без выраженных системных изменений у беременных с наличием УГИ и преждевременными родами наблюдается дисбаланс параметров врожденного иммунитета:

- повышение экспрессии reHa TLR2 отмечается, в-клетках плаценты и-эпителиальных клетках в 7,8 и 8,7 раз соответственно по сравнению со здоровыми беременными;

- снижение экспрессии противомикробного пептида HBD1 клетками плаценты в 3,2 раза, эпителиальными клетками в 6,4 раза'по сравнению со здоровыми беременными.

Этот дисбаланс может служить маркером развития преждевременных родов инфекционного генеза и реализации ВУИ. Повышение уровня TLR2 в цервикальной слизи- беременных высокого инфекционного риска является показанием к проведению комплексной терапии, направленной на пролонгирование беременности, в том числе антибактериальной терапии.

8. У беременных с урогенитальной инфекцией вирусной этиологии наблюдается выраженный дефицит продукции активных форм кислорода лейкоцитами периферической* крови и амниотической жидкости, что является показанием к назначению иммунотерапии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Выявление факторов повышенного риска развития ВУИ у беременных (острая или рецидив хронической инфекции во время настоящей беременности, наличие воспалительных заболеваний органов малого таза, анемия, рецидивирующая угроза прерывания беременности; плацентарная недостаточность, многоводие, маловодие, хроническая гипоксия, СЗРП) дают основание: относить данный контингент к группе высокого риска по её развитию,, и, соответственно; подвергать целенаправленному обследованию согласно разработанному алгоритму.

2. Снижение функциональной активности; фагоцитарных- клеток и дисбаланс в системе цитокинов, а именно повышение: выработки ИЛ- 1а, ИЛ-12 и снижение выработки ИЛ-1 Pa, ИФНу в сыворотке периферической крови беременных с урогенитальной инфекцией * вирусной? этиологии- ш в пуповиннойг крови новорожденных могут быть использованы для прогноза* осложнений течения беременности;, родов и определения показаний к иммунокоррекции.

3. Комплексное обследование амниотической жидкости, включая бактериологическое исследование АЖ с определением чувствительности выявленных микроорганизмов к антибиотикам и? методом ПЦР, позволяет проводить своевременную профилактику иг лечение послеродовых гнойно-септических заболеваний матери и новорожденного.

4. Повышение уровня цитокинов в амниотической жидкости (ИЛ-1Р в 2,6 раза; ИЛ-4 в 3,2 раза; ИЛ-12 в 2,2 раза) и резкое снижение уровня ИФНу по сравнению с данными здоровых пациенток позволяет отнести данных пациенток в группу риска по реализации ВУИ.

5. С целью прогнозирования реализации ВУИ у пациенток высокого инфекционного риска» в алгоритм клинико-лабораторного обследования данного контингента целесообразно» включать комплексное исследование экспрессии генов TLR2 и HBD1 клетками эпителия цервикального канала и клетками плаценты. Достоверное повышение экспрессии гена TLR2 клетками эпителия цервикального канала по сравнению со здоровыми беременными позволяет отнести данных пациенток в группу риска по ВУИ. Сочетание увеличения экспрессии гена TLR2 клетками эпителия цервикального канала и снижения экспрессии противомикробного пептида HBD1 по сравнению со здоровыми беременными может служить прогностическим критерием развития преждевременных родов, что позволяет проводить своевременную терапию.

Алгоритм диагностики ВУИ

TLR (TLR2, TLR4)

ПМП (HBD1)

Выявление беременных групп риска по данным клииико-лабораторного обследования

Дополнительные методы обследования

Бактериологическое исследование, ПЦР

Провоспалит. цитокины

Периферическая кровь слизь

Родоразрешение

Коррекция выявленных нарушений, динамическое наблюдение, контроль

Динамическое наблюдение, контроль, профилактические мероприятия

Профилактика и лечение матери

Клинико-лабораторное обследование, профилактика и лечение новорожденного

Морфологическое и иммунологическое исследование последа

Изменения есть

Изменений нет

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Бахарева, Ирина Викторовна, 2009 год

1. Абрамченко В. В., Костючек Д.Ф., Хаджиева Э.Д. Гнойно-септическая инфекция в акушерстве и гинекологии. Руководство. СПб, 2005.

2. Адаскевич В.П. Инфекции, передаваемые половым путем. Руководство для врачей. М., Медицинская книга, П.Новгород, Изд-во НГМА, 1999: 415.

3. Анкирская А.С., Байрамова Г.Р., Муравьева В.В., Прилепская В.Н. Бактериальный вагиноз: особенности клинического течения, диагностика и лечение. РМЖ, 1998: том 6, № 5.

4. Анохин В.А., Хаертынов Х.С., Хасанова Г.Р. Внутриутробная инфекция (Клиника, диагностика и профилактика). М., Медицина, 1999: 95.

5. Ахмадеева З.Н. Внутриутробные инфекции. Здравоохранение Башкортостана спец. вып. 1999;3:75-81.

6. Баргср М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. М., «Медицина», 1982.

7. Баринский И.Ф., Каспаров А.А., Лазаренко А.А. и др. Терапевтические убитые вакцины как средство иммунокоррекции при хронических вирусных инфекциях. Иммунология 2003; 24(6): 356-359.

8. Баткаев Э.А., Липова Е.В. Лечение гениталыюго герпеса и урогенитального хламидиоза. Учебное пособие. Изд-во РМАПО МЗ РФ, 1999: 22.

9. Башмакова Н.В., Моторнюк Ю.И.// Особенности иммунного ответа в зависимости от характера течения урогенитальной хламидийной инфекции у беременных.- Российский вестник акушера-гинеколога.- 2001,- №2.- с.8-11.,

10. Безнощенко Г.Б., Долгих Т.И., Кривчик Г.В. Внутриутробные инфекции (вопросы диагностики и врачебной тактики). М., Медкнига; Н.Новгород: Изд-во НГМА, 2003: 88.

11. П.Берлев И.В1, Кира Е.Ф., Белевитина А.А.// Роль дисбиотических нарушений влагалища в развитии инфекционно-воспалительных осложнений новорожденных.-Журнал акушерства и женских болезней.- 2000.- №4.- с.58- 61.

12. Берлев И.В., Кира Е.Ф.// Роль условно-патогенной микрофлоры в развитии невынашивания беременности у женщин с нарушением микробиоценоза влагалища. -Журнал акушерства и женских болезней.- 2002,- том 51 .-С.33-37.

13. Бернет Ф. Клеточный иммунитет. М., Изд-во «Мир», 1971.

14. Бубнова Н.И., Гуртова Б.А., Пустотина О.А., Младковская Т.Б. Значение исследования амниотической жидкости в диагностике врожденных инфекций. Материалы II Российского форума «Мать и дитя», М., 2000: 22-23.

15. Внутриутробное развитие человека. Под ред. Милованова А.П., Савельева С.В. М.: МДВ, 2006.

16. Володин Н.Н.(ред.) Протоколы диагностики, лечения и профилактики внутриутробной инфекций у новорожденных детей. 2002.- Москва. ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ.- с.7-9.

17. Володин Н.Н., Дегтярева М.В., Симбирцев А.С., Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Долгов В.В. Роль про- и противовоспалительных цитокинов в иммунной адаптации новорожденных детей. Int.J.on Immunorehabilitation, 2000; 2(1): 175-184.

18. Воропаева Е.А., Афанасьев С.С., Кудрявцева М.В. и др. Микроэкология и показатели гуморального иммунитета влагалища женщины с неспецифическими воспалительными заболеваниями гениталий. Журн. Микробиол. 2005; №3: 65-69.

19. Ганковская JI.B., Ковальчук J1.B., Клебанов Г.И. и др. Окислительный метаболизм лейкоцитов новорожденных: особенности цитокин-зависимой регуляции. Intern. J. Immuno-reabilitation, 2000; 1: 128-132.

20. Ганковская J1.B., Ковальчук JI.B., Лавров В.Ф., Лотте В.Д., Баркевич О.А.,-Долгина Е.Н. Некоторые механизмы противогерпетического действия иммуномодулирующего препарата «суперлимф». Ж. БИОпрепараты, 2004; 4: 18-21.

21. Гланц Стентон, Медико-биологическая статистика, М., «Практика», 1999.

22. Гриноу А., Осборн Д., Сазерлснд Ш. Врожденные, перинатальные и неонатальные инфекции. М., Медицина, 2000: 287.

23. Гуртовой Б.Л. Внутриутробные бактериальные и вирусные инфекции плода и новорожденного. Акуш. и гинекол. 1994; 4: 20-26.

24. Давтян Т.К., Исканд'арян Ж.Г., Галоян А.А. Модуляция вирусами активности цитокинов и хемокинов. Нейрохимия, 2002; 19(1): 6-25.

25. ДмитриевТ.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. М.,2003, 336 стр.

26. Долгушина Н.В., Макацария А.Д. Вирусные инфекции у беременных (руководство для врачей). Москва, «Триада-Х», 2004.

27. Европейские стандарты диагностики и лечения заболеваний,- передаваемых половым путем под ред. К.Рэдклифа. Медицинская литература, 2003, 264 стр.

28. Ершов Ф.И. Система интерферонов в норме и при патологии. М., 1996: 97.

29. Ершов Ф.И., Наровлянский А.Н., Мезенцева М.В. Ранние цитокиновые реакции при вирусных инфекциях. Цитокины и воспаление, 2004; 3: 3-6.

30. Инфекции во время беременности. Материалы учебного семинара ВОЗ «Основная дородовая, перинатальная и постнатальная помощь», 2002.

31. Кан Н.Е. Диагностика внутриутробной инфекции в современных условиях. Проблемы репродукции, 2004; 5: 42-46.

32. Кан Н.Е. Современные технологии в диагностике и прогнозировании внутриутробных инфекций. Автореф. дисс.докт. мед. наук. Москва, 2005.

33. Кан Н.Е., Орджоникидзе Н.В. Современные представления о внутриутробной инфекции. Акушерство и гинекология, 2004; 6:3-5.

34. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета. Иммунология 1995; 3: 30-44.

35. Кира Е.Ф. Бактериальный вагиноз.- СПб.: ООО «Нева-Люкс», 2001.- 364с.

36. Кисина В.И., Урогенитальные инфекции у женщин. 2005, 276 стр.

37. Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов. Успехи современной биологии 1999; 5: 462-475.

38. Клемина И.К., Яковлева Э.Б. Современный взгляд на инфекции у беременных женщин,- Медико-социальные проблемы семьи. 2003; №1: 107-113.

39. Клинические лекции по акушерству и гинекологии (под редакцией А.Н.Стрижакова, А.И.Давыдова, Л.Д.Белоцерковцевой). М., Медицина, 2000: 122-139.

40. Ковальчук JI.B, Ганковская JI.B. Природная композиция цитокинов (суперлимф) в топической иммунокоррекции. Аллергия, астма и клиническая иммунология. 2000; 7: 25-27.

41. Ковальчук JI.B., Ганковская JI.B, Баркевич О.А., Лавров В.Ф., Естественный иммунитет и герпетическая инфекция, Вопросы вирусологии. 2006; 3: 4-9.

42. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Долгина Е.Н. Окислительный метаболизм нейтрофилов и уровень провоспалительных цитокинов в амниотической жидкости при нормальной и осложненной урогенитальной инфекцией беременности. Иммунология. 2006; 3.

43. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Клебанов Г.И. и др. Отсутствие прайминга лейкоцитов новорожденных. Иммунология. 2000; 3: 12-16.

44. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Левченко В.А. Иммунокоррекция цитокинами. Вестник РГМУ. 2002; 3(24): 6-11.

45. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Макаров* О.В., Бахарева И.В., Таранец А.Н. Клеточные и гуморальные компоненты амниотической жидкости в норме и при внутриутробной инфекции. Иммунология, 2003; 6: 350-352.

46. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Мороз А.Ф., Аведова Т.А., Москвина С.Н. Противомикробные пептиды иммунной системы: клинические аспекты. Аллергология и иммунология. 2003; 4(2): 20-26.

47. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Мороз А.Ф., Аведова Т.А., Ухина Т.В. Противостафилококковое действие комплекса природных цитокинов. Журн. микробиол. 2004; 1: 55-59.

48. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Хорева М.В. и др. Система цитокинов, соврехменные методы иммунного анализа. М., 2001.

49. Ковальчук Л.В., Долгина Е.Н., Ганковская Л.В. Анализ цитокинов в биологических жидкостях организма. Аллергология и иммунология, 2006.

50. Ковальчук Л.В!, Хорева М.В, Варивода А.С. Врожденные компоненты иммунитета: То11-подобные рецепторы в норме и при патологии. ЖМЭИ 2005; 4: 96-104.

51. Козлов В.А. Некоторые аспекты проблемы цитокинов. Цитокины и воспаление, 2002; 1(1): 5-8.

52. Козлов П.В., Асади Мобарахан А.Х., Николаев Н.Н. и др. Роль уреаплазменпойинфекции в этиологии и патогенезе преждевременного разрыва плодных оболочек ипреждевременных родов. Журн. вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии.2003; Т. 2, №2: 33-36. ■ i

53. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийиые и микоплазменные заболевания гениталий: Руководство для врачей. Изд.б-е, обновл. и доп. М., Триада-Х, 2003: 440.

54. Кокряков В.Н. Биология антибиотиков животного происхождения. Монография. СПб, Наука, 1999: 29-32.

55. Кокряков B.II. Очерки о врожденном иммунитете. СПб, «Наука», 2006: 261.

56. Коршунов В.М., Володин Н.Н., Ефимов Б.А. и др. Микроэкология влагалища. Коррекция микрофлоры при вагинальных дисбактериозах, Москва, 1999, 80 стр.

57. Кубанова А.А. (ред.) Методические материалы по диагностике и лечению наиболее распространенных инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), и заболеваний кожи. М: ГЭОТАРМЕД 2003;447.

58. Кудрявцева Л.В., Ильина Е.Н., Говорун В.М., Минаев В.И., Зайцева С.В., Липова Е.В., Баткаев Э.А. Бактериальный вагиноз. Москва, 2001.

59. Кузьмин В.Н. Акушерская тактика у беременных с герпетической инфекций: Пособие дляврачей акушеров-гинекологов, неонатологов и студентов. М., 2000: 31.

60. Кузьмин В.Н., Музыкантова B.C., Штыкунова Е.В. Цитомегаловирусная инфекция в акушерстве и гинекологии. Под редакцией академика РАМН, проф. В.Н.Серова. М., 2000: 39.

61. Кузьмин В.Н., Шабанова Е.Н. Влияние цитомегаловирусной инфекции на течение беременности и здоровье новорожденных. Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии, 2003; 2(2): 30-32.

62. Кулаков В.И., Гуртовой Б.Л., Анкирская А.С., Антонов А.Г. Актуальные проблемы антимикробной' терапии и профилактики инфекций в акушерстве, гинекологии и неонатологии. Акушерство и гинекология, 2004; 1: 3-6.

63. Лаврова Д.Б., Самсыгина Г.А., Михайлов А.В. Этиология и показатели высокого риска внутриутробного инфицирования плода. Педиатрия 1997; 3: 94-99.

64. Мавзготов А.Р., Гараева Л.Н. Несостоявшийся аборт: новые подходы к проблеме этиопатогенеза. Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии.2004;Т.З, №1: 90-94.

65. Макаров 0:В., Ковальчук Л.В., Ганковская- Л.В., Бахарева И.В., Ганковская О.А. Невынашивание беременности, инфекция, врожденный иммунитет. Москва. «Геотар-Медиа», 2007.

66. Макаров О.В., Козлов П.В., Николаев Н.Н. Современные перинатальные подходы при ведении недоношенной беременности, осложненной преждевременным разрывом плодных оболочек. Вестник Российского Государственного медицинского университета. 2006; 4: 64-67.

67. Макаров О.В., Савченко Т.Н., Сумеди Т.Н., Шайков К.А., Долгина Е.Н. Содержание цитокинов в периферической крови и слизи цервикального канала у женщин с невынашиванием беременности инфекционного генеза. Russian J of immunology. 2005; №9, 2: 93-102.

68. Мезенцева M.B., Щербенко В.Э., Наровлянекий A.1I. и др. Особенности продукции интерферонов и цитокинов при генитальном герпесе. Вопросы, вирусологии 2003; 49(6): 33-36.

69. Милованов А.П. Патология системы мать-плацента-плод: Руководство для врачей. М., Медицина, 1999:448.

70. Михайленко А.А., Базанов Г.А., Покровский В.И. и др. Профилактическая иммунология. Москва, 2004.

71. Назаров П.Г., Врожденный иммунитет и защита от инфекции. Russian Journal of Immunology 2005; 9 sup. 2: 51-54.

72. Назарова Е.К., Гиммельфарб Е.И., Созаева Л.Г. Дисбактериозы влагалища: этиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика. Москва, 2000.

73. Никонов А.П., Асцатурова О.Р. Цитомегаловирусная инфекция и беременность. Акушерство и гинекология, 2003; 1.

74. Орджоникидзе Н.В., Тютюнник В.Л. Алгоритм обследования беременных с высоким инфекционным риском. РМЖ, 2001; 9(6): 215-217.

75. Орехов К.В., Голубева М.В. Внутриутробные инфекции и патология новорожденных. Г., Медпрактика, 2002: 252.

76. Оркин В., Василенко Л., Бакулев А. Воспалительные заболевания гениталий инфекционной природы у женщин. М.: Дрофа, 2008, 152 стр.

77. Островская О.В., Власова М.А., Ян Д.Х. и др. Прогностическое значение маркеров герпетической инфекции у женщин с осложненным течением беременности. Акушерство и гинекология. 2000; №2: 52-54.

78. Павлов» О.В., Сельков С.А. Иммунология репродукции: старые догмы и новые представления. Журнал акушерства и женских болезней. 2004; т.8.,вып.1: с.89-96.

79. Перинатальные инфекции. Под ред. Сенчука А.Я., Дубоссарской З.М., М.', 2005: 320.

80. Петерсен Эйко Э. Инфекции в акушерстве и гинекологии. МЕДпресс-информ, 2007, 352 с.

81. Плужникова. Т.А. Опыт работы Санкт-петербургского городского центра профилактики и лечения невынашивания беременности. Проблемы репродукции 2003; 9(1): 73-77.

82. Пономарева Н.А., Газазян М.Г., Ангалева Е.Н., Мосолова Г.Н., Феоктистова Н.И. Современные подходы к диагностике внутриутробного, инфицирования. Матер. II Российского форума «Мать и дитя», М., 2000: 32-33.

83. Протоколы диагностики, лечения, и профилактики внутриутробных инфекций, у новорожденных детей (2-е издание). Москва, 2002 г.

84. Пусготина О.А., Бубнова Н.И. Диагностика ВУИ. Акуш. и гинекол. 1999; 4: 3-5.

85. Радзинский В.Е., Бондаренко К.В., Союнов М.А., Запертова Е.Ю. Провоспалительные цитокины и их роль.в генезе привычного невынашивания беременности. Гинекология, 2004; 6(6).

86. Радзинский В.Е., Милованов А.П. Экстраэмбриональные и околоплодные структуры при нормальной и осложненной беременности. М., 2004.

87. Ройт А. Основы иммунологии. Пер. с англ., М., 1991.

88. Рэдклиф К. (ред.) Европейские стандарты диагностики и лечения заболеваний, передаваемых половым путем. М., Медицинская литература, 2003,264 стр.

89. Савичева A.M., Башмакова М.А. Урогенитальный хламидиоз у женщин и его последствия. Под ред. Айламазяна Э.К. Н.Новгород, Изд-во. HFMA 1998: 182.

90. Сакун НЛО., Манухин И.Б., Ковальчук Л.В. Эффективность комплекса природных цитокинов в лечении гениталыюго герпеса. Аллергология и иммунология, 2000; 1(2): 97.

91. Серов В.Н., Тютюнник В.Л., Зубков В.В. и др. Перинатальные потери у беременных с инфекционными заболеваниями и плацентарной недостаточностью. Акушерство и гинекология, 2002; 3: 16-21.

92. Сибиряк С.В., Черешнев В.А., Симбирцев А.С. и др., Цитокиновая регуляция биотрансформации ксенобиотиков и эндогенных соединений, 2006, Екатеринбург, УрО РАН, 161с.

93. Сидельникова В.М. Актуальные проблемы невынашивания беременности. Москва, 2001: 168.

94. Сидельникова В.М. Привычная потеря беременности. М., «Триада-Х», 2005: 304.

95. Сидельникова В.М., Антонов А.Г. Преждевременные роды. Недоношенный- ребенок. Москва, ГЭОТАР-медиа, 2006.

96. Сидорова И.С., Макаров И.О., Матвиенко Н.А. Внутриутробная инфекция: Ведение беременности, родов и послеродового периода, изд. Медпресс, М., 2008: 160 с.

97. Сидорова И.С., Макаров И.О., Матвиенко Н.А. Профилактика внутриутробной инфекции по триместрам развития беременносги. Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2006; №2: 53-58.

98. Сидорова И.С., Черниенко И.Н., Сидоров А.А. Особенности течения и ведения беременности при внутриутробном инфицировании- плода. Рос. вест, перинатологии и педиатрии 1998; 4: 13-17.

99. Симбирцев А.С. Цитокины — новая система, регуляции защитных реакций организма. Цитокины и воспаление 2002; 1(1): 9-16.

100. Сотникова Н.Ю., Анциферова Ю.С., Кудряшова А.В:, Иммунологическая загадка беременности. Иваново, изд. МИК, 2005: 276.

101. Старостина Т.А., Демидова Е.М., Анкирская А.С. и др. Современные вопросы патогенеза и терапии невынашивания беременности. Акушерство и гинекология, 2002; 5: 59-61.

102. Стецюк О.У., Андреев И.В. Проблема внутриутробной инфекции в акушерско-гинекологической практике. Фарматека, 2006; 14: 12-20.

103. Стрижаков А.Н., Баев О.Р., Буданов П.В. Система обследования и лечения беременных с нарушениями микробиоценоза родовых путей, инфекциями, передаваемыми половым путем и восходящим инфицированием плода. Акушерство и гинекология, 2003; 1: 47-52.

104. Стрижаков А.Н., Буданов П.В. Внутриутробная инфекция у новорожденного: прогнозирование, профилактика, лечение. Врач, 2006; 2: 28-31.

105. Суслов. А.П., Третьяков О.Ю., Коноплева М.В. Структурные и функциональные особенности MIF. Медицинская иммунология, 2004; Т. 6, № 3-5, с. 193-200.

106. Сухих Г.Т., Ванько J1.B. Иммунология беременности, М., 2003, 400 с.

107. Тегруашвили Н.К. Цитокины в диагностике ВУИ. Материалы II всероссийского форума «Мать и дитя», М., 2000: с. 18—22.

108. Тетруашвили Н.К., Сухих Г.Т. Роль цитокинов в невынашивании беременности. Материалы V всероссийского форума «Мать и дитя», М., 2003: с. 231—232.

109. ИЗ. Тотолян А.А., Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы, СПб, Наука, 2000; т.1-2: 231.

110. Тусупкапиев А.Б., Укыбасова Т.М., Рябова Е.Н. Возможности УЗИ при внутриутробном инфицировании плода. Клинич. медицина, г.Алма-Ата, 1998: 196-200.

111. Тютюнник B.J1. Дисбиотические состояния при беременности и методы их коррекции: РМЖ, 2003; 16.

112. Тютюнник B.J1. Подготовка к беременности при инфекционной патологии репродуктивной системы женщин. РМЖ, 2002; 18.

113. Тютюнник B.JI. Предгравидарная подготовка, тактика ведения беременности, родов и послеродового периода при инфекции. Акушерство и гинекология, 2004; 1.

114. Урогенитальные инфекции у женщин: Клиника, диагностика, лечение / под ред. В.И.Кисиной, К.И.Забирова. М: ООО «Медицинское информационное агентство», 2005-280 с.

115. Федорова М.В:, Серов В:Н., Стрижаков А.Н., Тареева Т.Г. Внутриутробные инфекции. Вестник.Российской ассоциации акушеров-гинекологов-1997; 2: 89-99.

116. Фрейдлин И.С. Цитокины. и межклеточные контакты в противоинфекционной защите организма. Соросовский образовательный журнал 1996: 7: 19-25.

117. Фризе К., Кахель В. Инфекционные заболевания беременных и новорожденных. Пер. с нем. М:, Медицина, 2003: 424.

118. Хаитов Р:М., Игнатьева Г. А., Сидорович И.Г. Иммунология.- М.:2000.- 430с

119. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии. Иммунология, 2001; 4: 4-6:

120. Херрингтон С., Макги Дж. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. М., «Мир», 1999.

121. Шабалдин А.В., Балянова JI.A., Казакова JI.M. Применение ПЦР в диагностике ВУИ у плодов и новорожденных. Педиатрия 2000; 3: 38-41.

122. Шабалов Н.П. Проблема классификации внутриутробной инфекции. Педиатрия 2000; 1: 87-91.

123. Ширшев С.В., Механизмы иммуноэндокринного контроля процессов репродукции, Екатеринбург, УрО РАН, 2002, 557с.

124. Ярилин А.А. Интерфероны. Молекулярное многообразие и биологические свойства. Иммунология 2006; 1: 2-4.

125. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М., Медицина, 1999.

126. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии. Иммунология 1997; 5: 7-14.

127. Ярилин А.А., Донецкова А.Д., Регуляторные Т-клетки, зависимые от фактора Foxp3, и перспективы их изучения при беременности, Russian J. Immunol., 2005, vol. 9, Suppl. 2, p. 149-152

128. Abrahams V.M. Antagonizing toll-like receptors to prevent preterm labor. Reprod Sci. 2008 Feb; 15(2): 108-9.

129. Abrahams V.M., Bole-Aldo P., Kim Y.M. et al. Divergent trophoblast responses to bacterial products mediated by Toll-like receptors. J.Immunol. 2004; 173: 4286-4296.

130. Abrahams V.M., Мог G. Toll-like Receptors and their Role in the Trophoblast, Placenta 2005; 26: 540-547.

131. Abrahams V.M., Visintin I. et al. A role for TLRs in the regulation of immune cell migration by first trimester trophoblast cells J.Immunol. 2005; 175(12): 8096-8104.

132. Abuja P.M., Zenz A., Trabi M. The cyclic antimicrobial peptide RTD-1 induces stabilized lipid-peptide domains more efficiently than its open-chain analogue. FEBS-Lett. 2004;566:301-306.

133. Adams Waldorf K.M., Persing D., et al. Pretreatment with Toll-like receptor 4 antagonist inhibits lipopolysaccharide-induced preterm uterine contractility, cytokines and prostaglandins in rhesus monkeys. Reproductive sciences, 2008, 15(2), 121-127.

134. Agnese D.M., Calvano J.E., Hahm S.J. et al. Human Toll-like receptor 4 mutations but not CD 14 polymorphisms are associated with an increased risk of gram-negative infections, J. Infect. Dis. 2002; 186: 1522-1525.

135. Akdis M., Verhagen J., Taylor A. et all Immune responses in healthy and allergic individuals are characterized by a fine balance between allergen-specific T regulatory 1 and T helper 2 cells, J. Exp. Med. 2004; 199: 1567-1575.

136. Akira S., Takeda K. Toll-like receptor signalling. Nat.Rev.Immunol. 2004; 4: 499-511.

137. Alanen A. PCR in the detection of microbes in amniotic fluid.Ann.Med. 1998;30:288-295.

138. Aliprantis A.O., Yang R.B., Mark M.R., Suggett S., Devaux B. et al. Cell activation and apoptosis by bacterial lipoproteins through toll-like receptor-2. Science 1999; 285: 736-9.

139. Allaire A.D., Ballenger K.A., Wells S.R. et al. Placental apoptosis in preeclampsia. Obstet.Gynecol. 2000; 96: 271-6.

140. Amsel R., Totten P.A., Spiegel C.A., Chen K.S. et al. Nonspecific vaginitis: diagnostic criteria and microbial and epidemiologic assotiations. Am. J. Med. 1983: 74; 14-22.

141. Arechavaleta-Velasco F., Koi H., Strauss 3rd J.F., Parry S. Viral infection of the trophoblast: time to take a serious look at its role in abnormal implantation and placentation? J.Reprod. Immunol. 2002; 55: 113-121.

142. Aschkenazi S., Straszevvski S., Verwer K.M. et al. Differential regulation and function of the Fas/Fas ligand system in human trophoblast cells. Biol. Reprod. 2002; 66: 1853-1861.

143. Ayabe T. et al. Secretion of microbicidal a-defensins by interstinal Paneth cells in response to bacteria. Nat. Immunol., 2000; 1: 113-118.

144. Backhed F., Hornef M. Toll-like receptor 4 — mediated signaling by epithelial surfaces: necessity or threat? Microbes and Infection 2003; 5: 951-959.

145. Balu R.B., Savitz D.A., Ananth C.V., et al. Bacterial vaginosis and vaginal fluid defensins during pregnancy. Am J Obstet Gynecol. 2002 Nov; 187(5): 1267-71.

146. Banerjee S., Smallwood A. et al. Placental expression of nterferon-gamma and its reccptor IFN-gamma R2 fail to switch from early hypoxic to late normotensive development in preeclamsia. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2005; 90(2): 944-952.

147. Beigi RH, Yudin MH, Cosentino L, Meyn LA, Hillier SL. Cytokines, pregnancy, and bacterial vaginosis: comparison of levels of cervical cytokines in pregnant and nonpregnant women with bacterial vaginosis J Infect Dis. 2007 Nov l;196(9):1355-60.

148. Beijar E.C., Mallard C., Powell T.L. Expression and subcellular localization of TLR-4 in term and first trimester human placenta. Placenta, 2006; 27(2-3): 322-326.

149. Bellocchio S., Montagnoli C., Bozza S. et al. The contribution of the Toll-like/IL-1 receptor superfamily to innate and adaptive immunity to fungal pathogens in vivo. J. Immunol. 2004; 172: 3059.

150. Bennett W.A., Terrone D.A., Rinehart B.K. et al. Intrauterine infusion in rat pregnancy induces preterm delivery and increases placental prostaglandin F2alpha metabolite levels. Am.J.Obstet.Gynecol. 2000; 182: 1496-501.

151. Bergey's manual of determinative bacteriology, ed. By R.E.Buchanan, N.E.Gibbons, Baltimore, 1975.

152. Berkane N., Verstraete L., Uzan S.Recurrent miscarriage.Rev. Prat.2003;53(l 7): 1906-12.

153. BihbF., Salez L., Beaubier M. et al. Overexpression of Toll-like receptor 4 amplifies the host response to lipopolysaccharide and provides a survival advantage in transgenic mice. J.Immunology 2003; 170: 6141.

154. Bodeus M., Hubinont C., Bernard P., Thomas K., Goubau P. Prenatal diagnosis of human cytomegalovirus by culture and polymerase chain reaction. Prenat. Diagn. 1999; 19(4): 314317.

155. Borman H.G. Antibacterial peptides: basic facts and emerging concepts. Journal of Internal Medicine, 2003; 254: 197-215.

156. Bullard I., Vermillion S., Soper D. Clinical intraamniotic infection and the outcome for very low birth weight neonates. Am.J.Obstet.Gynecol. 2002; 187: S73.

157. Casey ML., Cox SM., Word RA. et al. Cytokines and infection-induced preterm labour. Reprod.Fertil.Devl. 1990; 2: 499.

158. Challis J.R., Sloboda D.M., Alfaidy N., et al. Prostaglandins and mechanisms of preterm birth. Reproduction, 2002; 124: 1.

159. Chan G., Guilbert L.J. Ultraviolet-inactivated human cytomegalovirus induces placental syncytiotrophoblast apoptosis in a Toll-like receptor-2 and tumour necrosis factor-a dependent manner. J. Pathol. 2006; 210: 111-120.

160. Chee A.V., Roizman B. Herpes simplex virus 1 gene products occlude the interferon signaling pathway at multiple sites. J. of Virol. 2004; 78 (Apr.): 4185-4196.

161. Chen S., Pearson A., Coen D., et al. Failure of Thymidine Kinase-Negative Herpes Simplex Virus To Reactivate from Latency following Efficient Establishment. J.of Virol. 2004; 78(1): 520-523.

162. Chuang TH., Ulevitch RJ. Cloning and characterization of a subfamily of human toll-like receptors: hTLR7, hTLR8, and hTLR9. Eur Cytokine Netw. 2000; 11: 372.

163. Clark D.A., Arck P.C., Chaou'at G. Why did your mother reject you? Immunogenetic determinants of the response to environmental selective pressure expressed at the uterine level. Am.J.lmmunol. 1999; 41: 5-22.

164. Clark D.A., Arck P.C., Jalali R'. et al. Psycho-neuro-cytokine/endocrine pathways in immunoregulation during pregnancy. Am. J. Reprod. Immunol. 1996; 35(4): 330-337.

165. Compton T. et al. Human cytomegalovirus activates inflammatory cytokine responses via CD14 and Toll-like receptor 2. J. Virol. 2003; 77: 4588-^596.

166. Daher S., Fonseca F., Ribeiro O.G. et al. Tumor necrosis factor during pregnancy and at the onset of labor and spontaneous abortion. Eur.J.Obstet.Gynecol.Reprod.Biol. 1999; 83(1): 77-79.

167. Darville T. et al. Toll-like receptor-2, but not Toll-like receptor-4 is essential for development of oviduct pathology in chlamydial genital tract infection. J. Immunol. 2003; 171:6187-6197.

168. Denney J.M., Culhane J.F., Goldenberg R.L. Prevention of preterm birth Womens Health (Lond Engl). 2008 Nov;4(6):625-38

169. Deshpande S.P., Kumaraguru U., Rouse B.T. Dual role of В cells in mediating innate and acquired immunity to herpes simplex virus infections. Cell. Immunol. 2000; 202: 79-87.

170. Dhont M. Recurrent miscarriage. Curr.Womens Health Rep. 2003; 3(5): 361-6.

171. Diebold S.S. et al. Innate antiviral responses by means of TLR7-mediated recognition of single-stranded RNA. Science, 2004; 303: 1529-1531.

172. Dinarello CA. The IL-1 family and inflammatory diseases. Clin.Exp.Rheumatol. 2002; 20: SI.

173. Ding L., Yang L., Weiss T.M. Interaction of antimicrobial peptides with lipopolysaccharides. Biochemistry, 2003; Oct 28, 42(42): 12251-9.

174. Dong Z., Zhou S., Li Y., Liu R. Detection of a human parvovirus intrauterine infection with the polymerase chain reaction. J. Reprod. Med. 2000; 45(5): 410-412.

175. Dowd J., Laham N., Rice G., Brennecke S., Permezel M. Elevated interleukin-8 concentrations in cervical secretions are associated with preterm labour. Gynecol Obstet Invest. 2001;51(3): 165-8.

176. Dudley D.J., Collmer D., Mitchell M.D., Trautman M.S.: Inflammatory cytokine mRNA in human gestational tissues: implications for term and preterm labor. J. Soc. Gynecol. Investig. 1996; 3: 328-335.

177. Duerst R. Innate Immunity to Herpes Simplex Virus Type 2. Viral immunology, 2003; 16(4): 475-490.

178. Duff P. Perinatal infectious Disease. Semin. in Perinatol. 1998; 22 (4).

179. El-Bastawissi AY., Williams MA., Ryley DE. et al. Amniotic fluid interleukin-6 and preterm delivery: A review. Obstet. Gynecol. 2000; 95: 1056.

180. Elliott C.L., Slater D.M., Dennes W., Poston L., Bennett P.R.: Interleukin 8 expression in human myometrium: changes in relation to labor onset and with gestational age. Am. J. Reprod. Immunol. 2000; 43: 272-277.

181. Elovitz M.A., Wang Z., Chien E.K. et al. A new model for inflammation-induced preterm birth: the role of platelet-activating factor and toll-like receptor-4. Am.J.of Pathology, 2003; 163(5): 2103-2111.

182. Esplin M.S., Hamblin S., Fausett В., Silver R., Branch W., Adashi E.Y. Monocyte chemotactic protein-1 expression is increased in spontaneous term and preterm labor. Am. J. Obstet. Gynecol. 2002; 185: S82.

183. Esplin M.S., Varner M.W. Genetic factors in preterm birth the future, BJOG. 2005 Mar;l 12 Suppl 1:97-102.

184. Esplin MS., Romero R., Chaiworapongsa T. et al. Amniotic fluid levels of immunoreactive monocyte chemotactic protein-1 increase during term parturition. J.Matern.Fetal Neonatal Med. 2003; 14: 51.

185. European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases (ESCMID) www.escmid.org.

186. Fazelil A., Bruce C., Anumba D.O. Characterization of Toll-like receptors in the female reproductive tract in humans. Human Reprod. 2005; 20 (5): 1372-1378.

187. Feng Y., Pan X., Huang N. et al. The human beta-defensins expression in female genital tract and pregnancy-related tissues. Sichuan Da Xue Bao Yi Xue Ban 2003; 34(2): 217-219.

188. Fortunato S.J., Corbitt C., Menon R., Swan K.F. Expression of interleukin-8 and interleukin-12 by human fetal membranes. Am.J.Obstet.GynecoI. 1995; 172: 281.

189. Friebe-Hoffmann U., Chiao J.P., Rauk P.N. Effect of IL-ip and IL-6 on oxytocin secretion in human uterine smooth muscle cells. Am. J. Reprod. Immunol. 2001; 46: 226231.

190. Fujikawa Т., Numazaki K., Asanuma II., Tsutsumi H. Human cytomegalovirus infection during pregnancy and specific T cells by intracellular cytokine staining. Int.J.Infect.Dis. 2003; 7(3): 215-221.

191. Gardner L., Moffett A. Dendritic cells in the human decidua. Biol. Reprod. 2003; 69: 1438-1446.

192. Gerber S., Vial Y., Hohlfeld P: et al. Detection of Ureaplasma urealyticum in second-trimester amniotic fluid by polymerase chain reaction correlates with subsequent preterm labor and delivery. J.Infect.Dis. 2003; 187: 518.

193. Gewirtz A.T., Navas T.A., Lyons S. et al. Cutting edge: bacterial flagellin activates basolaterally expressed TLR5 to induce epithelial proinflammatory gene expression. J. Immunol. 2001; 167: 1882-5.

194. Gibbs R.S., Davies J.K., McDuffie R.S. Jr et al. Chronic intrauterine infection and inflammation in the preterm rabbit despite antibiotic therapy. Am.J.Obstet.Gynecol. 2002; 186: 234-239.

195. Gierynska M. et al. Induction of CD8 T-cell-specific systemic and mucosal immunity against herpes simplex viruswith CpG-peptide complexes. J. Virol. 2002; 76: 6568-6576.

196. Goepfert A.R, Goldenberg R.L., Hauth J.C. The Preterm Prediction Study: Association between cervical interleukin 6 concentration and spontaneous preterm birth. Am. J. Obstet. Gynecol. 2001; 184: 483-488.

197. Goepfert A.R., Schwebke J., Andrews W. et al. Perinatal emphasis research center (PERC): Vaginal markers of preterm birth. Am.J.Obstet.Gynecol. 2002; 187: SI 26.

198. Goldenberg R.L., Hauth J., Andrews W. Intrauterine infection and preterm delivery. N. Engl. J. Med. 2000; 342(20): 1500-1507.

199. Goldenberg R.L., Thompson C. The infectious origins of stillbirth. Am.J.Obstet.Gynecol. 2003; 189:861.

200. Goldsby R.A., Kindt T.J., Osborne B.A., Kuby J., Immunology (5th edition). W.H: Freeman & Company, 2002.

201. Gomez R., Romero R., Edwin S.S., David C. Pathogenesis of preterm labor and preterm rupture of membranes associated with intraamniotic infection. Infect. Dis. Clin. North Am. 1997; 11(1): 135-76.

202. Goncalves L.F., Chaiworapongsa Т., Romero R. Intrauterine infection and prematurity. Ment.Retard.Dev.Disabil.Res.Rev. 2002; 8: 3-13.

203. Gonzalez-Bosquet E., Cerqueira M.J., Dominguez C., et al. Amniotic fluid glucose and cytokines values in the early diagnosis of amniotic infection in patients with preterm labor and intact membranes. J.Matern.Fetal Med. 1999; 8: 155-158.

204. Gordon S. Pattern recognition receptors: doubling up for the innate immune response. Cell 2002; 111:927-930.

205. Gravett M., Hitti J., Hess D., Eschenbach D. Intrauterine infection and preterm delivery: evidence for activation of the fetal hypothalamic pituitary - adrenal axis. Am. J. Obstet. Gynecol. 2000; 182(6): 1404-1413.

206. Gravett MG, Adams KM, Sadowsky DW, et al. Immunomodulators plus antibiotics delay preterm delivery after experimental intraamniotic infection in a nonhuman primate model. Am. J. Obstet. Gynecol. 2007 Nov; 197(5): 518.

207. Grenache D.G., Hankins К., Parvin C.A., Gronowski A.M. Cervicovaginal Interleukin-6, Tumor Necrosis Factor-a, and Interleukin-2 Receptor as Markers of Preterm Delivery. Clin. Chem., October 1,2004; 50(10): 1839 1842.

208. Guaschino S;, De Seta F., Piccoli M., Maso G., Alberico S: Aetiology of preterm labour: bacterial vaginosis BJOG. 2008 Apr; 115(5): 674-5.

209. Guleria I., Pollard J.W. The trophoblast is a component of the innate immune system during pregnancy. Nat. Med. 2000; 6: 589-593.

210. Heil F. et al. Species-specific recognition of single-stranded RNA via Toll-like receptor 7 and 8. Science, 2004; 303: 1526-1529.

211. Heine R., Wiesenfeld H., Mortimer L., Greig P. Amniotic fluid defensins: potential markers of subclinical intrauterine infection. Clin. Infect. Dis. 1998; 27(3): 513-518.

212. Herbst-Kralovetzl M.M., Pyles R.B., Toll-like Receptors, Innate Immunity and HSV Pathogenesis, HERPES, 2006; 13 (2), 37-41.

213. Hiliman M., Ramet M., Ezekowitz RA. Toll-like receptors as Sensors of Pathogen.Pediatric Research, 2001; 50(3): 315.

214. Hillier S., Nugent R'., Eschenda D. Association between bacterial vaginosis and preterm delivery of a low-birthweight infant. New Engl. J. med. 2001; 333: 1737.

215. Hirata Т., Osuga Y., Hirota Y. et al: Evidence for the presence of toll-like receptor 4 system in the human endometrium. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2005; 90(1): 548-556.

216. Hirsch E, Muhle RA: Intrauterine bacterial inoculation induces labor in the mouse by mechanisms other than progesterone withdrawal. Biol Reprod 2002, 67:1337-1341.

217. Hitti J., Cauci S., Noonan C. et al. Vaginal hydrolytic enzyme activity, bacterial vaginosis and risk of early preterm birth among women in preterm labor. Am.J.Obstet.Gynecol. 2001; 185: S193.

218. Holmlund U., Cebers G., Dahlfors AR. et al. Expression and regulation of the pattern recognition receptors Toll-like receptor-2 and Toll-like receptor-4 in the human placenta. Immunology 2002; 107: 145-151.

219. Horn L., Rose I. Placental and fetal pathology in intrauterine viral infection. Intervirology. 1998; 41(4-5): 219-225.

220. Howell M., Jones J., Kisich K. et al. Selective killing of vaccinia virus by LL-37: implications for eczema vaccination. J. of Immunology 2004; 174: 1763-1767.

221. Ilievski V., Lu S.J., Hirsch E. Activation of Toll-like Receptors 2 or 3 and Preterm Delivery in the Mouse. Reproductive Sciences, 2007; Vol. 14, No. 4: 315-320.

222. Imler J-L., Zheng L. Biology of Toll receptors and their transducers, J. Leukoc. Biol. 2004; 75: 18.

223. Ishihara N., Matsuo H., Murakoshi H. et al. Increased apoptosis in the syncytiotrophoblast in human term placentas complicated by either preeclampsia or intrauterine growth reterdation. Am.J.Obstet.Gynecol. 2002; 186: 158-66.

224. Janeway Jr C.A., Medzhitov R. Innate immune recognition. Annu Rev. Immunol. 2002; 20: 197-216.

225. Janssens S., Beyaert R. Role of Toll-like receptors in pathogen recognition. Clin. Microbiol. Rev. 2003; 16(4): 637-646.

226. Jerzak M., Bischof P. Apoptosis in the first trimester human placenta: the role in maintaining immune privilege at the maternal-foetal interface and in the trophoblast remodelling. Eur.J.Obstet.Gynecol.Reprod.Biol. 2002; 100: 138-42.

227. Keelan J.A., Blumenstein M., Helliwell R.J. et al. Cytokines, prostaglandins and parturition a review. Placenta 2003; 24: S33.

228. Kelly R.W. Inflammatory mediators and cervical ripening. J. Reprod. Immunol. 2002; 57: 217-224.

229. Kent AS., Sullivan MH., Elder MG. Transfer of cytokines through human fetal membranes. J.Reprod.Fertil. 1994; 100: 81.

230. Kilpatrick S.J., Patil R., Connell J., Nichols J., Studee L. Risk factors for previable premature rupture of membranes or advanced cervical dilation: a case control study. Am. J. Obstet. Gynecol. 2006 Apr; 194(4): 1168-1174.

231. Kim Y.M., Romero R., Oh S.Y. et al. Toll-like receptor 4: a potential link between "danger signals", the innate immune system, and preeclampsia? Am.J.Obstet.Gynecol. 2005; 193(3 Pt 2): 921-927.

232. Koga К., Мог G. Toll-like Receptors and Pregnancy. Reproductive Sciences 2007; 14: 297-299.

233. Krediet T.G., Wiertsema S.P., Vossers M.J., et al. Toll-like receptor 2 polymorphism is associated with preterm birth. Pediatr. Res. 2007; Oct;62(4): 474-6.

234. Krug A. et al. Herpes simplex virus type 1 activates murine natural interferon-producing cells through toll-like receptor 9. Blood, 2004; 103: 1433-1437.

235. Kumazaki K., Nakayama M., Yanagihara I. et al. Immunohistochemical distribution of Toll-like receptor 4 in term and preterm human placentas from normal and complicated pregnancy including chorioamnionitis. Hum. Pathol. 2004; 35: 47-54.

236. Kuo Y. C. et al. Ilerpes virus simplex genes inhuman mononuclear cells and affecting cell mediated immunity. Immun. 2001; 99: 411-17.

237. Laflamme N., Rivest S. Toll-like receptor 4: the missing link of the cerebral innate immune response triggered by circulating gram-negative bacterial cell wall components. EMBO J. 2001; 15: 155-163.

238. Lamont R.F. Infection in the prediction and antibiotics in the prevention of spontaneous preterm labour and preterm birth. BJOG 2003; 110 (Suppl. 20): 71-75.

239. LeBouder E., Rey-Nores J.E., Rushmere N.K. et al. Soluble forms of Toll-like receptor (TLR)2 capable of modulating TLR2 signaling are present in human plasma and breast milk. J.Immunol. 2003; 171: 6680-9.

240. Lehrer R., Ganz T. Cathelicidins: a family of endogenous antimicrobial peptides. Current Opinion in Hematology 2002; 9: 18-22.

241. Leitich H., Bodner-Adler В., Brunbauer M. et al. Bacterial vaginosis as a risk factor for preterm delivery: A meta-analysis. Am.J.Obstet.Gynecol. 2003; 189: 139.

242. Li Liwu. Regulation of innate immunity signaling and its connection with human diseases. Current drug targets-Inflammation and Allergy. 2004; 3: 81.

243. Lorenz E., Hallman M., Marttila R. et al. Association between the Asp299Gly polymorphisms in the toll-like receptor 4 and premature births in the Finnish population. Pediatries. 2002; 52: 373-376.

244. Loudon J.A., Groom K.M., Bennett P.R. Prostaglandin inhibitors in preterm labour. Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. 2003; 17: 731.

245. Lund J. et al. Toll-like receptor 9-mediated recognition of Herpes simplex virus-2 by plasmacytoid dendritic cells. J. Exp. Med. 2003; 198, 513-520.

246. Malmgaard L., Melchjorsen J., Bowie A.G. Viral activation of macrophages through TLR-dependent and -independent pathways. J. Immunol. 2004; 173(11): 6890-6898.

247. Malmgaard L., Paludan S. Interferon (IFN)-a/p, interleukin (IL)-12 and IL-18 coordinately induce production of IFN-c during infection with herpes simplex virus type 2. Journal of General Virology, 2003; 84: 2497-2500.

248. Mayer D.C., Chescheir N.C., Spielman F.J. Increased intrapartum antibiotic administration associated with epidural analgesia in labor. Am.J.Perinatol. 1997; 14: 83-86.

249. Medunitsin N.V., Avdeeva J.I., Acilzina S.E. et al. Presence of cytokines in biological preparations. Biologicals, 2002; 30: 1-6.

250. Medzhitov R. Toll-like receptors and innate immunity. Nat. Rev. Immunol. 2001; 1: 135145.

251. Medzhitov R., Janeway Jr C.A. Decoding the patterns of self and nonself by the innate immune system. Science, 2002; 296: 298-300.

252. Michael F., Tosi M.D. Innate immune responses to infection. Current reviews if allergy and clinical immunology, 2005; 9: 241-248.

253. Mikloska Z., Bosnjak L., Cunningham A.L. Immature monocyte-derived dendritic cells are productively infected with herpes simplex virus tupe 1. J. Virol. 2001; 75: 5958-5964.

254. Moffett A., Loke Y.W. The immunological paradox of pregnancy: a reappraisal. Placenta, 2004; 25: 1-8.

255. Mogensen Т.Н., Soren R.P. Molecular pathways in virus-induced cytokine production. Microbiology and Molecular Biology Reviews, 2001; 65(1): 131-150.

256. Mondestin-Sorrentino M., Smulian J.C., et al. Variations in cervical IL-10 and 1L-8 concentrations throughout gestation in normal pregnancies. Am. J. Reprod. Immunol. 2007 Jun;57(6): 482-7.

257. Morgan R. Peltier. Immunology of term and preterm labor, Reproductive Biology and Endocrinology 2003, 1-11.

258. Morrison G., Kilanowski F., Davidson D. Characterization of the mouse P-defensin 1 Defbl, mutant mouse model. Infect. Immun., 2002; 70: 3053-3060.

259. Morrison L.A. The Toll of herpes simplex virus infection. Trends in Microbiology 2004; 12(8): 353-356.

260. Moser C. et al. P-Defensin 1 contributes to pulmonary innate immunity in mice. Infect. Immun. 2002; 70: 3068-3072.

261. Мифу Т.J., Patcrson H.M., Mannick J. A. et al. Injury, sepsis, and regulation of Toll-like receptor responses. J. Leukoc.Biol. 2004; 75: 400.

262. Nazir M.A., Pankuch G.A., Botti J.J., Appelbaum P.C. Antibacterial activity of amniotic fluid in the early third trimester. Am. J. Perinat. 1987; 4: 59-62.

263. Newton E.R. Diagnosis of perinatal TORCH infections. Clin. Obstet.Gynecol. 1999; 42: 59.

264. Novak N., Peng W.M. Dancing with the enemy: the interplay if herpes simplex virus with dendritic cells. Clinical and Experimental Immunology, 2005; 142: 405-410.

265. Oakeshott P., Hay P., Hay S. et al. Association between bacterial vaginosis or chlamydial infection and miscarriage before 16 weeks' gestation: Prospective, community based cohort study. BMJ 2002; 325: 1334.

266. Ogando D.G., Paz D., Cella M., Franchi A.M. The fundamental role of increased production of nitric oxide in lipopolysaccharide-induced embryonic resorption in mice. Reproduction 2003; 125: 95-110.

267. Oppenheim J.J., Biragyn A., Kwak L.W., Yang D. Roles of antimicrobial peptides such as defensins in innate and adaptive immunity. Ann. Rheum. Dis. 2003; 62: 17-21.

268. Peipert J.F. Clinical practice: Genital chlamydial infections. N.Engl.J.Med. 2003; 18: 349.

269. Periathamby A.R., Dentino A.R. Current status of defensins and their role in innate and adaptive immunity. FEMS Microbiology Letters, 2002; 206: 9-18.

270. Petrova A., Demissie K., Rhoads G.G., et al. Association of maternal fever during labor with neonatal and infant morbidity and mortality. Obstet.Gynecol. 2001; 98:20.

271. Piccinni M.P., Scaletti C. et al. Role of hormone-controlled Thl and Th2-type cytokines in successful pregnancy. J.Neuroimmunol. 2000; 109 (1): 30-33.

272. Pivarcsi A., Nagy I., Koreck A. et al. Microbial compounds induce the expression of proinflammatory cytokines, chemokines and human b-defensin-2 in vaginal epithelial cells. Microbes and Infection, 2005; 7: 1117-1127.

273. Poggi S.H., Spong C.Y., Ghidini A., Ossandon M. Gender differences in amniotic fluid cytokine levels. J. Matern. Fetal Neonatal Med. 2004; 15(6): 367-71.

274. Pollara G. et al. Herpes simplex virus infection of dendritic cells: Balance among activation, inhibition, and immunity. J. Infect. Dis. 2003; 187: 165-178.

275. Pollard J.K., Mitchell M.D. Intrauterine infection and the effects of inflammatory mediators on prostaglandin production by myometrial cells from pregnant women. Am. J. Obstet. Gynecol. 1996; 174: 682-686.

276. Raghupathy R. Pregnancy: success and failure within Thl/Th2/Th3 paradigm. Semin.in Immunol. 2001; 13(4): 210-227.

277. Raghupathy R., Makhseed M. et al. Cytokine production by maternal lymphocytes during normal human pregnancy and in unexplained recurrent spontaneous abortion. Hum. Reprod. 2000; 15:713-718.

278. Ramsey P., Lyon D., Goepfert A. Midtrimester vaginal polymorphonuclear cell counts compared to PNM to epithelial cell ratios for the prediction of spontaneous preterm birth. Am.J.Obstet.Gynecol. 2003; 189: SI69.

279. Reisenberger K., Egarter C., Knofler M. et al. Cytokine and prostaglandin production by amnion cells in response to the addition of different bacteria. Am.J.Obstet.Gynecol. 1998; 78(1): 50-53.

280. Revello M., Zavattoni M., Sarasini A., Percivalle E., Simoncini L., Gerna G. Human cytomegalovirus in blood of immunocompetent persons during primary infection: prognostic implications for pregnancy. J. Infect. Dis. 1998; 177(5): 1170-1175.

281. Rezaikina A. V. et al. Chemiluminiscent analisis of the functional state of cellular and humoral components of neutrophil system in recurrent herpes simplex. Immun. 1996, 72: 112 15.

282. Riggs J.W., Blanco J.D. Pathophysiology, diagnosis and management of intraamniotic infection Semin. Perinat. 1998; 22(4): 251-255.

283. Rizzo G., Capponi A., Rinaldo D. et al. Interleukin-6 concentrations in cervical secretions identify microbial invasion of the amniotic cavity in patients with preterm labor and intact membranes. Am.J.Obstet.Gynecol. 1996; 175: 812-817.

284. Romero R. Novel aspects of neutrophil biology in human pregnancy. Am. J. Reprod. Immunol. 2005; 53: 275.

285. Romero R., Chaiworapongsa Т., Espinoza J. et al. Micronutrients and intrauterine infection, preterm birth and the fetal inflammatory response syndrome. J.Nutr. 2003; 133: 1668S.

286. Romero R., Chaiworapongsa Т., Kuivaniemi H. et al. Bacterial vaginosis, the inflammatory response and the risk of preterm birth: A role for genetic epidemiology in the prevention of preterm birth. Am.J.Obstet.Gynecol. 2004; 190: 1509.

287. Romero R., Erez O., Espinoza J. Intrauterine Infection, Preterm Labor, and Cytokines. J. Soc. Gynecol. Investig. 2005 Oct; 12(7): 463-465.

288. Romero R., Espinoza J., Goncalves L.F., Kusanovic J.P., Friel L., Hassan S. The Role of Inflammation and Infection in Preterm Birth. Semin. Reprod. Med. 2007; 25(1): 21-39.

289. Romero R., Ghidini A., Mazor M., Behnke E. Microbial invasion of the amniotic cavity in premature rupture of membranes. Clin. Obstet. Gynecol. 1991; 34: 769.

290. Sacks G., Sargent I., Redman C. An innate view of human pregnance. Immunology Today, 1999; 20: 114-118.

291. Schaefer T.M., Desouza K., Fahey J.V. et al. Toll-like receptor (TLR) expression and TLR-mediated cytokine/chemokine production by human uterine epithelial cells. Immunology, 2004; 112: 428-436.

292. Schaefer T.M., Fahey J.V., Wright J.A. et al. First trimester trophoblast cells mount a potent antiviral response upon exposure to viral dsRNA. Am. J .Reprod. Immunol. 2005; 53: 299.

293. Schrag S.J., Arnold K.E., Mohle-Boetani J.C. et al. Prenatal screening for infectious diseases and opportunities for prevention. Obstet. Gynecol. 2003; 102: 753.

294. Searle R.F., Bromage S.J., Palmer J., Curry J.E., Lang A.K. Human amniotic fluid lacks interleukin-2 and interleukin-15 but can interact with the beta-chain of the interleukin-2 receptor. Immunology. 2000; 99(3): 411-417.

295. Sennstrom M.B., Ekman G., Westergren-Thorsson G., et al. Human cervical ripening, an inflammatory process mediated by cytokines. Mol. Hum. Reprod. 2000; 6: 375-381.

296. Sheiner E, Levy A, Katz M, Mazor M. Pregnancy outcome following recurrent spontaneous abortions. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2005; Jan 10; 118(1): 61-65.

297. Shim SS, Romero R, Hong JS, Park CW, Jun JK, Kim Bl, Yoon ВН. Clinical significance of intra-amniotic inflammation in patients with preterm premature rupture of membranes. Am J Obstet Gynecol. 2004 Oct;191(4): 1339-1145.

298. Shobokshi A., Shaarawy M. Maternal serum and amniotic fluid cytokines in patients with preterm premature rupture of membranes with and without intrauterine infection. Int J Gynaecol Obstet. 2002; 79(3): 209-15.

299. Simhan H.N., Caritis S.N., Krohn M.A. et al. Elevated vaginal pH and neutrophils are strongly associated with early spontaneous preterm birth. Am.J.Obstet.Gynecol. 2003; 189: 1150.

300. Simhan Y.N., Caritis S.N. Prevention of Preterm Delivery. NEJM, 2007; V.357 (5): 477487.

301. Smith G., Rafuse C., Anand N., et al. Prevalence, management, and outcomes of preterm prelabour rupture of the membranes of women in Canada. J Obstet Gynaecol Can. 2005 Jun;27(6): 547-553.

302. Somerset D., Zeng Y., Kiby N. Normal human pregnancy is associated with an elevation in the immune suppressive CD4+CD25+ regulatory T cells subset. Immunology, 2004; 112: 38-43.

303. Soper D.E., Mayhall C.G., Dalton H.P. Risk factors for intraamniotic infection: A prospective epidemiologic study. Am.J.Obstet.Gynecol. 1989; 161: 562-568.

304. Sorensen O.E., Follin P., Johnsen A. et al. Human cathelicidin, hCAP-18, is processed to the antimicrobial peptide LL-37 by extracellular cleavage with proteinase 3. Blood, 2001; 97(12): 3951-3957.

305. Splichal I., Trebichavsky I. Cytokines and other important inflammatory mediators in gestation and bacterial intraamniotic infections. Folia Microbiol. (Praha), 2001; 46(4): 345351.

306. Sweet R.L., Gibbs R.S. Infectious Diseases of the Female Genital Tract. Intraamniotic infection (Intrauterine infection in late pregnancy). Baltimore, MD, Williams and Wilkins, 1990: 337-347.

307. Takeda К., Akira S. TLR signaling pathways. Semin. Immunol. 2004; 16: 3-9.

308. Takeuchi O. et al. Cutting edge: TLR2-deficient and MyD88-deficient mice are highly susceptible to Staphylococcus aureus infection. J.Immunol. 2000; 165: 5392-5396.

309. Tapping R.I., Akashi S., Miyake K. et al. Toll-like receptor 4, but not toll-like receptor 2, is a signaling receptor for Escherichia and Salmonella lipopolysaccharides. J.Immunol. 2000; 165: 5780-5787.

310. Taylor D.D., Akyol S., Gercel-Taylor C., Pregnancy-Associated Exosomes and Their Modulation of T Cell Signaling, The Journal of Immunology 2006; 176: 1534-1542.

311. Ulevitch R.J. Therapeutics targeting the innate immune system. Nature, Reviews Immunology. 2004;4:512.

312. Ustiin С., Kocak I., Baris S. et al. Subclinical chorioamnionitis as an etiologic factor in preterm deliveries. IntJ.Obstet. Gynecol. 2001; 72: 109.

313. Varner M.W., Esplin M.S. Current understanding of genetic factors in preterm birth, BJOG. 2005 Mar;l 12 Suppl 1: 28-31.

314. Vassiliadis S., Ranella A., Papadimitriou L. et al. Serum levels of pro- and antiinflammatory cytokines in nonpregnant women, during pregnancy, labour and abortion. Mediators Inflamm., 1998; 7(2): 69-72.

315. Vesce F., Pavan В., Lunghi L., Giovannini' G., Scapoli C., Piffanelli A., Biondi C. Inhibition' of amniotic interleukin-6 and prostaglandin E2 release by ampicillin. Obstet Gynecol. 2004;103(1): 108-113.

316. Wegmann T.G. et al. Bidirectional cytokine interactions in the maternal-fetal relationship: is successful pregnancy a Th2 phenomenon? Immunol. Today, 1993; 14: 353356.

317. Williams Obstetrics, 22 edition, edited by Cunningham F.G. et al., McGraw-Hill, Medical Publishing Division, 2005; 180-181.

318. Wira C.R., Fahey J.V. The innate immune system: gatekeeper to the female reproductive tract. Immunology, 2004; 111: 13-15.

319. Witkin S.S., Linhares I.M., Giraldo P., Ledger W.J. An altered immunity hypothesis for the development of symptomatic bacterial vaginosis. Clin. Infect. Dis. 2007 May 15; 44(10): 1398.

320. Woods D.R. Reactive oxygen species and preterm premature rupture of membranes a review. Placenta, 2001; 22 Suppl A: S38-44.

321. Wulster-Radcliffe MC, Seals RC, Lewis GS: Progesterone increases susceptibility of gilts to uterine infections after intrauterine inoculation with infectious bacteria-. J Anim Sci 2003, 81:1242-1252.

322. Xu J., Holzman C.B., Arvidson C.G., Chung H., Goepfert A.R. Midpregnancy vaginal fluid defensins, bacterial vaginosis, and risk of preterm delivery. Obstet. Gynecol. 2008 Sep; 112(3): 524-31.

323. Yasin В., Wang W., Pang M. ct al. 0 Defensins protect cells from infection by herpes simplex virus by inhibiting viral adhesion and entry. J. of Virology, 2004; 78(10): 5147

324. Yoon B.H., Jun J.K., Romero R. et al. Amniotic fluid inflammatory cytokines (interleukin-6, interleukin-lp and TNF-a), neonatal brain white matter lesions, and cerebral palsy. Am.J.Obstet.Gynecol. 1997; 177: 19-26.

325. Young A., Thomson AJ., Ledingham M. et al. Immunolocalization of proinflammatory cytokines in myometrium, cervix, and fetal membranes during human parturition at term. Biol.Reprod. 2002; 66: 445.

326. Young S.L., Lyddon T.D., Jorgenson R.L., Misfeldt M.L. Expression of Toll-like receptors in human endometrial epithelial cells and cell lines. Am. J. Reprod. Immunol. 2004; 52: 67-73.

327. Zanetti M., Gennaro R., Skeriavaj B. et al. Cathelicidin peptides as candidates for a novel class of antimicrobials. Curr. Pharm Des. 2002; 8(9): 779-793.

328. Zarember K.A., Godowski P.J. Tissue expression of human Toll-like receptors and differential regulation of Toll-like receptor mRNAs in leukocytes in response to microbes, their products and cytokines. J.Immunol. 2002; 168: 554.

329. Zariffard. M.R., Novak R.M., Lurain N. et al. Induction of tumor "necrosis factor-a secretion and Toll-like receptor 2 and 4 mRNA expression by genital mucosal fluids fromwomen with bacterial vaginosis. JID 2005; 191(1): 1913-1921.

330. Zasloff M. Antimicrobial peptides of multicellular organism. Nature, 2002; 415: 389-395.

331. Zhang D., Zhang G., Hayden M.S. et-ah A Toll-like receptor that prevents infection-by uropathogenic bacteria. Science. 2004;303:1522.

332. Zlatnik F.J., Gellhaus T.M., Benda J.A., Koontz F.P., Burmeister L.F. Histologic chorioamnionitis, microbial infection and prematurity. Obstet. Gynecol. 1990; 76: 355-359.5156.