Комплексная оценка цитокинов и функциональной активности фагоцитов у беременных с вирусной инфекцией тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.01, кандидат медицинских наук Гришук, Александр Юрьевич

• Гришук, Александр Юрьевич
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Гришук, Александр Юрьевич

Список сокращений.

Введение.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Урогенитальная инфекция вирусного генеза у беременных.

1.1.1. Эпидемиология и патогенез развития урогенитальной инфекции.

1.1.2. Особенности клинического течения урогенитальной инфекции.

1.1.3. Диагностика вирусных инфекций при беременности.

1.2. Механизмы естественного иммунитета при урогенитальной инфекции вирусной этиологии.

1.2.1. Роль системы цитокинов в патогенезе УГИ.

1.2.2. Клеточные факторы естественного иммунитета.

9 ,,,

1.2.3. Определение уровня различных цитокинов при урогенитальной инфекции и внутриутробной инфекции.

1.3. Подходы к терапии урогенитальной инфекции вирусного генеза.

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика клинического материала.

2.2. Выделение мононуклеарных клеток и нейтрофилов из периферической крови.

2.3. Определение содержания цитокинов в сыворотке крови, в околоплодных водах и в культурах мононуклеарных клеток методом иммуноферментного анализа.

2.4. Определение продукции активных форм кислорода нейтрофилами методом люминол-зависимой хемилюминесценции.

2.5. Оценка экспрессии Toll-noдобных рецепторов (TLR-9) с помощью методов молекулярной биологии.

2.5.1. Выделение РНК из мононуклеарных клеток периферической крови.

2.5.2. Реакция обратной транскрипции.

2.5.3. Полимеразная цепная реакция.

2.6. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. Особенности течения беременности у женщин с урогенитальной инфекцией вирусной этиологии.

ГЛАВА 4. Результаты собственных исследований и обсуждение.

4.1. Сравнительный анализ цитокинов в сыворотке крови, в культуре мононуклеарных клеток и в околоплодных водах беременных с вирусной инфекцией.

4.1.1. Изменение противовирусных цитокинов ИЛ-12 и ИФНу в сыворотке крови у беременных с УГИ.

4.1.2. Изучение выработки ИЛ-12 и ФНОа мононуклеарными клетками периферической крови здоровых беременных и беременных с вирусной инфекцией.

4.1.3. Оценка экспрессии TLR9 мононуклеарными клетками периферической крови и слизистой цервикального канала у беременных с УГИ вирусного генеза.

4.1.4. Определение цитокинов в околоплодной жидкости рожениц с нормально протекающей беременностью и рожениц с УГИ вирусного генеза.

4.2. Функциональная активность нейтрофилов периферической крови околоплодных вод у беременных с УТИ вирусного генеза.

4.3. Оценка состояния новорожденных, родившихся от матерей с УГИ вирусного генеза.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Комплексная оценка цитокинов и функциональной активности фагоцитов у беременных с вирусной инфекцией»

Актуальность исследования.

В настоящее время урогенитальная инфекция (УГИ) представляет собой серьезную проблему современной медицины. Это обусловлено неуклонным ростом частоты УГИ, ее определяющим влиянием на репродуктивное здоровье человека, ведущей ролью в развитии внутриутробной инфекции, приводящей к перинатальной и младенческой заболеваемости и смертности (2,44,51,52).

Высокой частоте развития УГИ способствует: широкое распространение микроорганизмов в человеческой популяции в виде латентной персистирующей инфекции, значительная генетическая вариабельность патогенов, приводящая к формированию вирулентных и резистентных штаммов, физиологический иммунодефицит беременных, разнообразные механизмы уклонения вирусов от иммунологического надзора (7,51).

Одним из наиболее частых возбудителей УГИ являются вирусы: вирус герпеса простого 2 типа (ВПГ-2), цитомегаловирус (ЦМВ), энтеровирусы и другие (5, 6,60).

Иммунная защита против вирусов осуществляется в результате координированной работы адаптивной и естетсвенной систем иммунитета. (64,65).

Одним из важных обобщений иммунологии последних лет стало раскрытие механизмов функционирования системы естесвенного иммунитета, представленной клеточными (клетки макрофагально-моноцитарной системы, дендритные клетки, естественные киллеры и др.) и гуморальными (цитокины, противомикробные пептиды, комплемент, кислородные радикалы, ферменты и др.) компонентами (25,26,37,99,103). В настоящее время активно изучается роль системы естественного иммунитета в развитии ответа на патогены при вирусных инфекциях урогенитального тракта.

Рецепторы естественного иммунитета (То11-подобные рецепторы) представляют собой семейство сигнальных молекул, распознающих консервативные молекулярные образы различных патогенов, включая вирусы, бактерии, грибы. Показана экспрессия Toll-like рецепторов в эпителии эндометрия и эпителиальных клетках нижних отделов репродуктивной системы (66). При урогенитальной инфекции вирусного генеза беременных особое внимание уделяется TLR-9.

Особый интерес представляет изучение системы цитокинов, как регуляторов воспалительных реакций, медиаторов естественного иммунитета и важных молекул "противовирусной защиты. Несмотря на обширные исследования в этой области, полученные данные противоречивы (51, 52,53).

Комплексное исследование цитокинов в сыворотке крови, в слизи цервикального канала, в околоплодных водах, в культуре мононуклеарных клеток представляется актуальным так, как может иметь диагностическую и прогностическую значимость при подозрении на внутриутробное инфицирование плода.

Околоплодные воды представляют собой биологический барьер между плодом и экстраэмбриональными структурами, являясь местом проявления локальных иммунных реакций (7). Проникновение патогенных микроорганизмов в околоплодную среду вызывает ряд биохимических, гормональных и иммунологических изменений местного характера. В связи с этим исследование уровня цитокинов и выработки кислородных радикалов в околоплодных водах несомненно является актуальным у беременных группы риска по развитию ВУИ.

Цель настоящей работы - оценка диагностической и прогностической значимости показателей естественного иммунитета у беременных с урогенитальной инфекцией вирусного генеза

Конкретные задачи исследования включали:

1) Анализ течения беременности и родов у беременных с урогенитальной инфекцией вирусной этиологии.

2) Сравнительный анализ уровней цитокинов (ИЛ-12, ИФН-7, ФНО-а) в периферической крови, в культурах мононуклеарных клеток, в околоплодных водах у беременных с вирусной инфекцией.

3) Оценка уровня экспрессии То11-подобного рецептора (TLR-9), ответственного за связывание с вирусной ДНК, МНК периферической крови и слизистой цервикального канала здоровых беременных и беременных с вирусной инфекцией.

4) Определение выработки активных форм кислорода нейтрофилами периферической крови и околоплодных вод у беременных с вирусной инфекцией.

5) Выявление возможных маркеров реализации ВУИ у беременных с вирусной инфекцией.

Научная новизна

Исследована роль факторов естественного иммунитета, включающих противовирусные цитокины, активные формы кислорода, уровень экспрессии рецептора TLR-9, распознающего вирусную ДНК, у беременных с урогенитальной инфекцией вирусной этиологии.

Впервые получены данные об увеличении экспрессии рецептора TLR-9 на клетках слизистой цервикального канала и мононуклерных клетках периферической крови беременных с вирусной инфекцией

Проведен комплексный анализ уровня цитокинов, играющих важную роль в противовирусной защите (ИЛ-12, ФНОа, ИФНу) в сыворотке крови, в культурах мононуклеарных клеток, в околоплодных водах (ОВ) у беременных с вирусной инфекцией.

Исследована роль различных цитокинов и активных форм кислорода в околоплодных водах у беременных с вирусной инфекцией, как возможных маркеров внутриутробного инфицирования плода.

Впервые сопоставлены клинические проявления ВУИ у новорожденных с данными уровня цитокинов, продукции кислородных радикалов в сыворотке крови и в ОВ у беременных с УГИ вирусного генеза.

Практическая значимость работы

Данные о снижении выработки кислородных радикалов нейтрофилами крови и околоплодных вод, о дисбалансе в системе цитокинов сыворотки крови, околоплодных,водах и в культуре мононуклеарных клеток, а именно повышение концентрации ИЛ-12, ФИО и полное отсутствие ИФН, у беременных с урогенитальной инфекцией вирусной этиологии могут быть использованы для прогноза течения и тактики ведения беременности, родов и определения показаний к проведению иммунокоррекции.

Положения, выносимые на защиту

1. У беременных с УТИ вирусной этиологии наблюдается изменения в системе цитокинов, проявляющиеся в отсутствии ИФН в сыворотке крови и снижении его концентрации в околоплодных водах.

При этом у беременных с вирусной инфекцией наблюдается увеличение концентрации ИЛ-12 ,ФНО в сыворотке крови и в культурах мононуклеарных клеток по сравнению с группой здоровых беременных.

2. Увеличение выработки провоспалительных цитокинов коррелирует с повышенной экспрессией То11-подобного рецептора (TLR-9) клетками слизистой цервикального канала и мононуклеарами периферической крови.

3. У беременных с УГИ вирусного генеза наблюдается выраженный дефицит выработки кислородных радикалов нейтрофилами периферической крови и околоплодных вод.

4. У здоровых и больных новорожденных, рожденных от матерей с УГИ вирусной этиологии отмечено увеличение концентрации ИЛ-12 в 3-4 раза по сравнению со здоровыми детьми, рожденными от здоровых матерей. ИФН не определялся в 100% случаев в пуповинной крови, что является показанием к назначению терапии препаратами интерферонового ряда.

Внедрение в практику

Материалы диссертационного исследования используются в практике учебно-педагогического процесса на кафедре акушерства и гинекологии лечебного факультета РГМУ и в практической работе родильного дома №10 и ГБ №8 г. Москвы.

Публикации результатов исследования

По теме диссертации опубликовано 4 работы. Объем и структура диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 4-х глав собственных наблюдений, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, содержащего 64 отечественных и 50 зарубежных источников. Работа выполнена на 105 страницах машинописного текста, иллюстрирована 14 таблицами и 16 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Акушерство и гинекология», Гришук, Александр Юрьевич

выводы

1. У беременных с УГИ вирусной этиологии наблюдается изменения уровня цитокинов, характеризующиеся:

-отсутствием ИФН-у в сыворотке крови и достоверным снижением (менее 9 пкг/ мл) в околоплодных водах

- увеличением концентрации ИЛ-12, ФНО в сыворотке крови и в культурах мононуклеарных клеток по сравнению с группой здоровых беременных

2. В клетках слизистой церикального канала и мононуклеаных клетках-периферической крови больных с УГИ отмечено 10-ти и трехкратное увеличение экспрессии То11-подобного рецептора (TLR9), распознающего неметилированные CpG повторы вируснуой ДНК, по сравнению с клетками здоровых беременных.

3. У беременных с УГИ вирусного генеза наблюдается выраженный дефицит выработки кислородных радикалов нейтрофилами периферической крови и околоплодных вод.

4. У здоровых и больных новорожденных, рожденных от матерей с УГИ вирусной этиологии отмечено увеличение концентрации ИЛ-12 в 3-4 раза по сравнению со здоровыми детьми, рожденными от здоровых матерей. ИФН не определялся в 100% случаев в пуповинной крови, что является показанием к назначению терапии препаратами интерферонового ряда.

5. Прогностическими критериями реализации ВУИ у рожениц с УГИ вирусного генеза можно считать увеличение в ОВ концентрации ИЛ-1 выше 100 пкг/мл, значительное снижение ИФН-у до 3,0 пкг/мл и 5-ти-кратное увеличение ИЛ-4 по сравнению с уровнем этих цитокинов в ОВ здоровых рожениц

Практические рекомендации

1. В план обследования пациенток с УГИ вирусного генеза может быть включено определение уровня цитокинов в сыворотке крови и в околоплодных водах.

2. Прогностическими критериями реализации ВУИ у рожениц с УГИ вирусного генеза можно считать увеличение в околоплодных водах концентрации ИЛ-1 выше 100 пкг/мл, значительное снижение ИФН-7 (до 3,0 пкг/мл)

3. 5-ти-кратное увеличение ИЛ-4 в ОВ рожениц, родивших детей с ВУИ, по сравнению с уровнем ИЛ-4 в ОВ здоровых рожениц необходимо учитывать при дальнейшем ведении новорожденных, входящих в группу риска по развитию аллергических заболеваний.

4. Полное отсутствие ИФН-7 в пуповинной крови новорожденных является показанием к назначению терапии препаратами группы интерферона.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Гришук, Александр Юрьевич, 2007 год

1. Анастасьева В.Г. Морфо функциональные нарушения фетоплацентарного комплекса при плацентарной недостаточности. — Новосибирск. - 1997. - с. 346-351

2. Анохин В.А., Хаертынов Х.С., Хасанова Г.Р. Внутриутробные инфекции: клиника, диагностика, лечение.// Учеб. пособие. Казань. - 1999. - 54с.

3. Баринский И.Ф., Каспаров А.А., Лазаренко А.А. и др., Терапевтические убитые вакцины как средство иммунокоррекции при хронических вирусных инфекциях// 2003, Иммунология, Т. 24, №6, с. 356-359.

4. Баринский И.Ф., Шубладзе А.К., Каспаров А.А. и др., Герпес: этиология, диагностика, лечение// Москва «Медицина», 1986.

5. Бикбулатов P.M., ^Фарбер Н.А., Босгажан Л.Р. Вирусоносительство у беременных женщин. // Вопросы охраны материн, и детства. 1982. - №9. — с. 51-53. .

6. Борисенко К.К., Генитальный герпес, Кн. Неизвестная эпидемия: герпес// Смоленск, 1997, с. 75-83.

7. Бубнова Н.И., Младковская Т.Б., Гуртовой Б.Л., Пустотина О.А. Значение исследования околоплодно жидкости в диагностике врожденных инфекций. // Мат лы 2-го Всерос. форума «Мать и дитя». - 2000. - с. 22-23.

8. Вельтищев Ю.Е. Иммунитет новорожденного и повышенная чувствительность к некоторым вирусным инфекциям. // Рос. вестник перинатологии. 1993. - №8. - с. 9-10.

9. Ганковская Л.В., Иммуноцитокины: регуляция функции макрофагов, локальная иммунокоррекция// Автореф. док. дис., М., 1993

10. Гармашева Н.Л., Константинова Н.Н. Патофизиологические основы охраны внутриутробного развития человека. Л. - 1978. - с. 275.

11. Гланц Стентон, Медико-биологическая статистика, «Практика», Москва, 1999

12. Дранник Г.Н. Иммунотропные препараты: классификация и применение. // Мед. журнал. Харьков. - 1997. - №1. - с. 69-73.

13. Ершов Ф.И., Коваленко А. Л., Романцов М.Г. и др., Герпетическая инфекция: вопросы патогенеза, методические подходы к терапии// М., 1997, с. 4-87.

14. Ершов Ф.И., Оспельникова Т.П., Современный арсенал антигерпетических лекарственных средств// Инфекции и антимикробная терапия, 2001, т.З, №4

15. Ершов Ф.И., Система интерферонов в норме и при патологии// М., 1996, 97с.

16. Зарубаев В.В., Сухинин В.П., Слита А.В., Влияние циклоферона на морфогенез и репродукцию вируса простого герпеса 1 типа в культуре клеток Vero// НИИ гриппа РАМН, Санкт-Петербург.

17. Исакова В.А., Циклоферон в клинической практике// Санкт-Петербург, «Интермедика», 2002

18. Кеворков Н.Н., Шилов Ю.И. и др. Гормоны репродукции и регуляции процессов иммунитета - Екатеринбург, Наука - 1993 - с. 172.

19. Кицак В.Я., Успехи молекулярной биологии герпесвирусов и перспективы решения прикладных задач диагностики, терапии, эпидемиологии и профилактики герпесвирусных инфекционных болезней// М., 1997, Вып. 2, с.294-298.

20. Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов. // Успехи современной биологии. 1999. №5 стр. 462475.

21. Ковальчук JI.B., Ганковская JI.B., Иммуноцитокины и локальная иммунокоррекция//Иммунология, 1995, №1, стр. 4-7.

22. Ковальчук JI.B., Ганковская Л.В., Клебанов Г.И. и др. Отсутствие прайминга лейкоцитов новорожденных. // Иммунология -2000, №3, стр. 1216.,

23. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Рыбакова Э.И. Система цитокинов. // Учеб. пособие. М. РГМУ.- 2000. 64с.

24. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Юдина С.М. и др., Суперлимф в комплексном лечении заболеваний урогенитального тракта// М., 2003, с. 1-57

25. Ковальчук Л.В., Хорева М.В, Варивода А.С., Врожденные компоненты иммунитета: То11-подобные рецепторы в норме и при патологии, ЖМЭИ, 2005, №4, с. 96-104

26. Кокряков В.Н., Биология антибиотиков животного происхождения// Монография, Наука, С-П, 1999, с. 29-32

27. Лавров В.Ф., Кузин С.Н. Вирус герпеса человека 6-го типа и ассоциированные с ним заболевания детей и взрослых// Эпидемиология и вакцинопрофилактика, 2003, №6, с. 7-10

28. Лаврова Д.Б, Самсыгина Г.А., Михайлов В.А. Этиология и показатели высокого риска ВУИ плода. // Педиатрия. 1996. - №1. - с. 94-99. .

29. Лакин Г.Ф. Биометрия. М. - 1980. - с. 293. .

30. Макаров И.О., Сидорова И.С., Матвиенко Н.А., Эдокова А.Б. Состояние фетоплацентарной и иммунной систем при высоком риске ВУИ. // Мат лы 2-го Всерос. форума «Мать и дитя». - 2000. - с. 86.

31. Малиновская В.В. и др., Виферон// Москва, 2004

32. Малиновская В.В., Ершов Ф.И. Итоги и перспективы применения препаратов интерферона в инфекционной педиатрической практике. // Вестник АМН ССР. 1990. - №7.- с. 32-36.

33. Маниатис Т. и др., Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование.//М., «Мир», 1984

34. Мезенцева М.В., Щербенко В.Э., Наровлянский А.Н. и др., Особенности продукции интерферонов и цитокинов при генитальном герпесе// Вопросы Вирусологии, 2003, 49 (6), с.33-36

35. Мирошник О.А., Редькин Ю.В., Иммуномодуляторы в России// Справочник, Омск, 2004, 342с.)

36. Михайленко А. А., Базанов Г. А., Покровский В.И. и др., Профилактическая иммунология// Москва, 2004

37. Назаров П.Г., Врожденный иммунитет и защита от инфекции// Russian Journal of Immunology, 2005, v. 9, sup. 2, p. 51-54

38. Никонов А.П., Асцатурова O.P. // Акуш. и гинекол. 1997. - №4. —с. 1113.

39. Носиков В.В. // Материалы 2-ой Рос. конф. «ПЦР в динамике и контроле лечения инфекционных заболеваний». М.- 1998. - с.128-129.

40. Пустотина О.А., Бубнова Н.И. Диагностика ВУИ. // Акуш. и гинекол. -1999.-№4.-с. 3-5.

41. Самсыгина Г.А. Современные проблемы внутриутробных инфекций. // Педиатрия. 1997. - №5. - с.34-35.

42. Самсыгина Г.А., Буслаева Г.Н., Непокульчицкая Н.В. Гематологические изменения при ВУИ. // Педиатрия. 1996. - №1. - с. 22-25.

43. Семенов Б.Ф., Каулен Д.Р., Баландин И.Г., Клеточные и молекулярные основы противовирусного иммунитета// М., изд. «Медицина», 1982, 238с

44. Сидельникова В.М. // Актуальные проблемы невынашивания беременности.- Москва.- 2001.- 168с.,.

45. Сидельникова В.Н., Бурлеев В.А., Бубнова Н.И. // Акуш. и гинекол. -1994.-№4.-с. 14-20.

46. Сидельникова В.Н., Водолазская Т.И., Ходжаева З.С. Современные представления о плацентарной недостаточности. // Клин, лекция. 1997. -18с.

47. Сидорова И.С., Данилова О.С. Перинатальные исходы у женщин с высоким риском развития ВУИ. // там же. - с.29-30.

48. Сидорова И.С., Макаров И.О., Эдокова А.Б., Макарова И.И. Состояние фетоплацентарной системы при ВУИ плода. // там же. - с. 158-160.

49. Сидорова И.С., Матвиенко Н.А. Состояние иммунной системы у беременных и новорожденных из группы высокого риска по ВУИ. // там — же.-с. 160-162.

50. Сидорова И.С., Черниенко В.Г. Гистологическое исследование плаценты, пуповины и плодных оболочек у женщин с высоким риском развития ВУИ. // там же. - с.36.

51. Сотникова Н.Ю., Анциферова Ю.С., Кудряшова А.В., Иммунологическая загадка беременности, Иваново: изд. МИК, 2005, 276 с.

52. Сухих Г.Т., Ванько JI.B. Иммунология беременности. М. - 2003, 400с. .

53. Тетруашвили Н.К. Цитокины в диагностике ВУИ. // Мат — лы 2-го Всерос. форума «Мать и дитя». 2000. - с. 18-22.

54. Тетруашвили Н.К., Сухих Г.Т.// Роль цитокинов в невынашивании беременности.- Материалы V Российского форума «Мать и дитя».- Москва.-2003.- с.231-232.,

55. Федоров М.В., Тареева Т.Г. Диагностика и терапия внутриутробных инфекций. // РМЖ. 1997. - №3. - с.27-30.

56. Федоров Н.А., Суханов Ю.С., Асади Мобахан А.Х. и др., Полимеразная цепная реакция (ПЦР) // Москва, 1996

57. Федорова М.В., Калашникова Е.П. Плацента и ее роль при беременности. -М. -1986. 74с.

58. Федорова М.В., Серов В.Н., Стрижаков А.Н., Тареева Т.Г. внутриутробные инфекции. // Вестник Рос. ассоц. акуш. гинекол. - 1997. -№2. - с.89-99.

59. Херрингтон С., Макги Дж., Молекулярная клиническая диагностика. Методы//М. изд. «Мир», 1999

60. Царегородцева Е.Е. ВЗРП и внутриутробное инфицирование плода. // Тезисы 2-го Рос. Форума «Мать и дитя». М. - 1999. - с. 16-17.

61. Шабалдин А.В., Балянова JI.A., Казакова JI.M. Применение ПЦР в диагностике ВУИ у плодов и новорожденных. // Педиатрия. 2000. - №3. — с. 38-41.

62. Шмагель К.В., Черешнев В.А. Иммунитет беременной женщины — Москва, Медицинская книга 2003, с. 14. .

63. Шунько Е.Е. Особенности интерферонового статуса и применение реаферона у недоношенных детей. // Мат лы науч. - практ. конф. - Киев. -1995.-с. 131-132.

64. Ярилин А.А. Основы иммунологии// М., «Медицина», 1999

65. Abbas А.К., Lichtman А.Н., Pober J.S., Cellular and Molecular Immunology, 2-nd ed., Saunders Company, 1994, Philadelphia

66. Abrahams V. M. and Мог G., Toll-like Receptors and their Role in the Trophoblast, Placenta, 2005, 26, p540-547

67. Ashkar AA, Yao XD, Gill N Toll-like receptor (TLR)-3, but not TLR4, agonist protects against genital herpes infection in the absence of inflammation seen with CpG DNA//J Infect Dis. 2004, Nov 15;190(10), p. 1841-1849

68. Boutell C. and Everett R., The Herpes Simplex Virus Type 1 (HSV-1) Regulatory Protein ICPO Interacts with and Ubiquitinates p53// J. of Biol. Chemistry, 2003, v. 278, N. 38, p. 36596-36602

69. Brown T.A., Gene cloning and DNA analysis, «Blackwell Publishing», 2001

70. Cantin EM, Hinton DR, Chen J et al., Gamma interferon expression during acute and latent nervous infection by herpes simplex virus type 1// J Virol., 1995, Aug, 69 (8), p. 4898-4905 .

71. Chatterjee S., Burns P., Whitley R., Kern Е/, Effect of (S)-l-(3-hydroxy-2-phosphonylmethoxy)propyl. cytosine on the replication and morphogenesis of herpes simplex virus type 1// Antiviral Res., 1992, V. 19, N3, p. 181-192

72. Cheryl AJ, Knipe D, Herpes simplex virus vaccines// Concise Reviews of Pediatric Infections Diseases, 2003, Nov., p. 1003-1006

73. Chilukuri S, Rosen T, Management of acyclovir-resistant herpes simplex virus// Dermatol Clin., 2003, Apr., 21 (2), p. 311-320.

74. Dargan D., Aitken J., Subak-Sharpe J., The effect of triterpenoid compounds on uninfected and herpes simplex virus-infected cells in culture// J. Gen. Virol., 1988, V. 69, p. 439-444.

75. Dong Y., Clair P., Rmzy I. A microbiologic and clinical study of placental inflammation at term. // Am. J. Obstet. Gynecol. -1987. vol. 70. - p. 175-182.-102

76. Duerst R., Innate Immunity to Herpes Simplex Virus Type 2// Viral immunology, 2003, v. 16, № 4, 2003, p. 475-490

77. Emery V.C. Human herpesvirus 6 and 7 in solid organ transplant recipients// Clin. Infect. Dis, 2001, v. 32, p. 1357-1360

78. Finberg, R.W., E.A. Kirk-Jones, J. Zhu, et al. TLR2 is required for cytokine induction by HSV-1// Presented at the 28th International Herpesvirus Workshop, University of Wisconsin, Madison, 2003. (85a)

79. Hayashi F, Means TK, Luster AD, Toll-like receptors stimulate human neutrophil function//Blood, 2003, 1 Oct, v. 102, No. 7, p. 2660-2668

80. Julkunen et al., Introduction Cytokine receptors, signaling pathways and viruses// Cytokine and Growth Factor Reviews, 2001, 12, p. 129-131

81. Kawai T and Akira S, Toll-like receptor downstream signaling// Arthritis Research and Therapy, 2004, v. 7, no. 1, p. 12-17.)

82. Kobelt D, Lechmann M, Steinkasserer A, The interaction between dendritic cells and herpes simplex virus-1// Curr Top Microbiol Immunol, 2003, 276, p. 145161.

83. Koff, W.C. and A.V. Fann. Human tumor necrosis factor-alpha kills herpesvirus-infected but not normal cells// Lymphokine Res, 1986, 5, p. 215-221

84. Kurt-Jones EA, Belko J, Yu С The role of toll-like receptors in herpes simplex infection in neonates// J Infect Dis, 2005, Mar, 1, 191(5), p. 746-748.

85. Kurt-Jones EA, Chan M, Zhou S et al., Herpes simplex virus type 1 interaction with Toll-like receptor 2 contributes to lethal encephalitis// PNAS, 2004, Feb 3, 101 (5), p. 1315-1320

86. Malmgaard L, Melchjorsen J, Bowie AG Viral activation of macrophages through TLR-dependent and -independent pathways// J Immunol., 2004, Dec 1, 173(11), p. 6890-6898ч

87. Matsuda Y., kouno S., Kamitomo M., Ibara S. Intrauterine infection, magnesium sulfate exposure and cerebral palsy in infants born between 26 and 30 weeks of gestation. // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. -2000. vol. 91. - p. 159-164.

88. Michael F, Tosi MD, Innate immune responses to infection, Current reviews if allergy and clinical immunology, 2005, 9, p. 241-248

89. Oppenheim JJ, Biragyn A, Kwak LW, Yang D, Roles of antimicrobial peptides such as defensins in innate and adaptive immunity// Ann Rheum Dis, 2003, 62, p. 17-21.

90. Periathamby AR, Dentino AR, Current status of defensins and their role in innate and adaptive immunity// FEMS Microbiology Letters, 2002, v. 206, p. 9-18.

91. Qureshil S. and Medzhitov R., Toll-like receptors and their role in experimental models of microbial infection// Genes and Immunity, 2003, v. 4, p. 87-94.

92. Schulz 0, Diebold SS, Chen M Toll-like receptor 3 promotes cross-priming to virus-infected cells//Nature., 2005, Feb 24, 433(7028), p. 887-92

93. Shobokshi maternalserum and amniotic fluid cytokints in patientswith preterm premature rupture of membrants with aand without intrauterine infection/? Int JGynaecol Obstet 2002 ,79, 3, 209- 215.

94. M.F., D.J. Tenney, J.L. Rothstein, et al. Effect of macrophage activation on resistance of mouse peritoneal macrophages to infection with herpes simplex virus types 1 and 111 J. Gen. Virol., 1988, 69, p. 1999-2010

95. Xing Z and Wang J, Consideration of cytokines as therapeutics agents or targets// Current Pharmac. Design, 2000, 6, p. 599-611

96. Yang D., Biragyn A, Kwak LW et al., Mammalian defensins in immunity: more than just microbicidal// Trends in immunology, 2002, v. 23, No. 6, June, p. 291-296.

97. Veith G.L., Rice G.E. Interferon gamma expression during human pregnance and its association with labour//Gynecol Obstet Invest 1999, 48 (3), p. 163-167

98. Yui J Cetotoxity of tumor necrosis factor alpha and gamma interferon agains primary human placental trophoblasts//Placenta,1994, v. 15, p. 819-835

99. Wegman T G Bidirectional cytokine interaction in the maternal-fetal relationshih is succtssful pregnancy a Th2 phenomenon// Immunol Today ,1993 v.14, p. 353-356

100. Verma S., King A., Loke Y. W. Expression of killer cell inhibitory receptors on human uterine NK cells//Eur. J. Immunol., 1997, v. 27, p. 979-983

101. Woods D R Reactive oxygen species and preterm premature rupture of membranes/ /Placenta2001,22,p.3 8-44