Разработка и исследование трансдермальных систем доставки инсулина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.41, кандидат биологических наук Кузнецова, Евгения Геннадьевна

• Кузнецова, Евгения Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кузнецова, Евгения Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Системы доставки инсулина

1.1.1. Инъекционные системы доставки инсулина

1.1.2. Пероралъные системы доставки инсулина

1.1.3. Трансбуккальная система доставки инсулина

1.1.4. Интраназалъные системы доставки инсулина

1.1.5. Ингаляционные системы доставки инсулина.

1.2. Трансдермальные терапевтические системы (ТТС).

1.2.1. Структура кожи

1.2.2. Механизмы проникновения лекарственных веществ через

1.2.3. Переносчики и активаторы переноса лекарственных веществ через кожу

1.2.4. Трансдермальные терапевтические системы

1.2.5. Преимущества и недостатки ТТС по сравнению с традиционными лекарственными формами

1.2.6. Конструкции и материалы, используемые для создания

1.2.7. Факторы, влияющие на высвобождение лекарственного вещества из трансдермалъной лекарственной формы

1.3. Существующие разработки ТТС инсулина

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы

2.2. Методы, использованные при изготовлении коллагеновых армированных матриц 47 2.2.1. Выделение коллагена из склеры глаз свиньи

2.2.2. Определение концентрации коллагена

2.2.3. Лиофилъная сушка

2.3. Методы исследования трансдермальных терапевтических систем инсулина в условиях in vitro

2.3.1. Методика мечения инсулина

2.3.2. Исследование скорости диффузии инсулина в ячейках Франца

2.3.3. Спектрофотометрический метод определения концентрации инсулина в растворе

2.3.4. Метод конфокальной микроскопии

2.3.5. Метод электронной сканирующей микроскопии

2.4. Методы исследования трансдермальных терапевтических систем инсулина в условиях in vivo

2.4.1. Исследование раздражающего действия ТТС инсулина на

2.4.2. Моделирование экспериментального сахарного диабета на крысах

2.5. Методы статистической обработки

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Переносчик и активаторы переноса инсулина через кожу

3.2. Конструкции и состав ТТС инсулина

3.3. Исследование диффузии инсулина из коллагеновых ТТС через кожу кролика в условиях in vitro

3.3.1. Влияние различных активаторов на скорость диффузии инсулина из коллагеновой губки Гешиспон фирмы «РизаМед»

3.3.2. Оптимизация процесса диффузии инсулина с помощью использования коллагеновых армированных матриц

3.4. Исследование ТТС инсулина на животных с экспериментальным сахарным диабетом

3.5. Исследование эмульсионных матричных систем доставки инсулина

3.6. Резервуарные ТТС инсулина

3.6.1. Разработка и исследованиерезервуарных ТТС инсулина

3.6.2. Оптимизация составарезервуарной ТТС инсулина

3.7. Сравнительный анализ разработанных ТТС инсулина с другими неинвазивными способами доставки инсулина

3.8. Предварительные исследования возможности трансдермальной доставки инсулина на пациентах-добровольцах

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и исследование трансдермальных систем доставки инсулина»

Актуальность и практическая значимость.

Сахарный диабет (СД) является одной из основных проблем современной медицины. Он стоит на третьем месте среди причин смертности на земле после сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний (Дедов И.И., Шестакова М.В., 2003). Во всем мире на сегодняшний день насчитывается около 130 млн. больных сахарным диабетом. С каждым годом их число неуклонно растет и, по мнению экспертов, к 2025 году может достигнуть 300 млн. человек. В Российской Федерации сахарным диабетом страдает около 8 млн. человек. На долю диабета 1 типа (инсулинзависимого СД) приходится 10% - 15% от всех заболевших диабетом. Оставшуюся часть (85% - 90%) составляют больные диабетом 2 типа (инсулиннезависимого сд).

Лечебный процесс при сахарном диабете в первую очередь должен быть направлен на максимально возможную компенсацию тех метаболических нарушений, которые возникают в организме вследствие абсолютной или относительной недостаточности выработки организмом гормона инсулина.

В норме у здорового человека различают базальную (фоновую) и болюсную (пищевую) секрецию инсулина. Базальная секреция гормона происходит непрерывно в течение суток. Во время еды отмечается дополнительная секреция инсулина, названная болюсной. Традиционные инъекционные формы инсулина не могут полностью компенсировать недостаток гормона в организме больного сахарным диабетом.

Для улучшения качества жизни больных сахарным диабетом разрабатываются неинъкционные способы доставки инсулина: оральные (Платэ Н.А., Валуев И.Л., 2001), интраназальные (Kupila А., 2003), ингаляционные (Patton S.J., 1999) и трансбуккальные (Al-Achi А., 1993). Все эти системы могут заменить только инъекции инсулина короткого действия.

Особый интерес представляют трансдермальные терапевтические системы (ТТС) доставки инсулина (Севастьянов В.И., 2001). Трансдермальные системы, являясь аналогом внутривенного капельного введения JIB, обеспечивают постоянную скорость диффузии лекарства через неповреждённую кожу от нескольких часов до нескольких дней (Шумаков В.И., Севастьянов В.И., 1995).

Было предположено, что чрескожное введение инсулина будет играть роль препаратов инсулина пролонгированного действия, связанную с поддержанием базального (фонового) уровня инсулина в крови. Кроме того, трансдермальное введение инсулина, по сравнению с подкожными инъекциями, является безболезненным и более удобным в применении.

Основной трудностью в создании ТТС инсулина является то, что большая молекулярная масса инсулина (5700 Да) препятствует его проникновению через кожу без какого-либо специфического переносчика. Несмотря на то, что многими фармацевтическими компаниями ведется интенсивный поиск химических, физических и биологических активаторов, которые позволили бы доставлять инсулин через неповреждённые участки кожи, в настоящее время не существует допущенных к клиническому применению ТТС инсулина.

Цель работы состояла в создании и экспериментальном исследовании различных систем трансдермальной доставки инсулина.

Основные задачи работы:

1. Доказать возможность трансдермального переноса инсулина.

2. Разработать экспериментальные методики для оценки эффективности чрескожного переноса инсулина в условиях in vitro.

3. Найти биологически безопасные разрыхлители кожи и переносчики инсулина через кожу, позволяющие поддерживать постоянную концентрацию инсулина в крови в течение не менее 24 ч.

4. Исследовать функциональные свойства трансдермальных терапевтических систем инсулина различной конструкции в условиях in vitro и in vivo.

Научная новизна

Найдены составы инсулинсодержащих водно-спиртовых и эмульсионных растворов, обеспечивающие в модельных условиях трансдермальный перенос гормона.

Разработаны и исследованы три вида матричных ТТС инсулина с использованием коллагеновой, коллагеновой армированной и синтетической матрицы, а также резервуарная ТТС инсулина.

Найдены оптимальные составы и размеры ТТС инсулина, которые позволяют достичь скорости переноса гормона, соизмеримые со средней скоростью секреции инсулина поджелудочной железой.

В условиях in vitro показано, что матричные и резервуарные ТТС могут поддерживать постоянную концентрацию гормона в крови в течение 24 и 48 ч, соответственно.

В экспериментах на животных доказано сохранение биологической активности инсулина при его чрескожном переносе. На двух пациентах-добровольцах с сахарным диабетом подтверждена возможность трансдермальной доставки биологически активного гормона.

Практическая значимость

Разработан и внедрен в программу доклинических испытаний трансдермальных терапевтических систем инсулина спектрофотометрический метод определения гормона, меченного флуоресцеин изотиоцианатом (ФИТЦ).

Матричные и резервуарные ТТС инсулина могут быть использованы в качестве пролонгированной лекарственной формы гормона для больных сахарным диабетом.

Апробация работы

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на межинститутских семинарах Центра по исследованию биоматериалов ГУ НИИ трансплантологии и искусственных органов (2002, 2003, 2004, 2005 гг.), на IX научно-технической конференции «Вакуумная наука и техника» 19-24 сентября 2004, Судак, Украина.

Публикации

Результаты проведенных исследований отражены в 6 печатных работах, опубликованных в России и за рубежом.

Структура и объем диссертации

Заключение диссертации по теме «Трансплантология и искусственные органы», Кузнецова, Евгения Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. В модельных условиях спектрофотометрическим методом доказан трансдермальный перенос инсулина из водно-спиртовых и эмульсионных растворов в присутствии склонного к мицеллообразованию переносчика САФ-М-99.

2. В условиях in vitro доказано, что матричные трансдермальные терапевтические системы (ТТС) обеспечивают постоянную скорость переноса инсулина через кожу в течение 24 ч.

3. В условиях in vitro показано, что разработанные конструкции коллагеновой, коллагеновой армированной и синтетической матричной ТТС позволяют получить значения удельных скоростей диффузии инсулина через кожу равные (41±12)-10"3 Ед/см2час, (105,2±8,9)* 10"3

2 3 2

Ед/см час, (81,9±14,8)-10 Ед/см час, соответственно. Среднее время достижения постоянной скорости чрескожной диффузии гормона не более 10 ч.

4. Установлено, что резервуарная ТТС инсулина в условиях in vitro поддерживает в течение 48 ч. постоянную среднюю удельную скорость

3 л диффузии гормона через кожу, равную (86,4±24,7)Т0 Ед/см час. При у площади ТТС ~ 12 см скорость диффузии инсулина через кожу становится соразмерной с базальной скоростью его секреции поджелудочной железой.

5. В экспериментах in vivo, проведенных в соответствии с национальными стандартами ГОСТ Р ИСО 10993-99 «Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий» доказано отсутствие раздражающего действия при аппликации разработанных трансдермальных систем на кожу кроликов.

6. Сохранение биологической активности гормона при трансдермальной доставке было доказано достоверным снижением уровня гликемии на

37,9±13,8 % (п=5) у крыс с экспериментальным сахарным диабетом, вызванным стрептозотоцином. 7. В исследованиях на двух пациентах-добровольцах с сахарным диабетом была подтверждена возможность трансдермальной доставки биологически активного инсулина. Эффект компенсации сниженной дозы пролонгированного инъекционного инсулина сохранялся в течение 48 ч. с момента аппликации ТТС на кожу пациента.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. При исследовании in vitro чрескожной диффузии лекарственных веществ белковой природы из трансдермальных систем доставки спектрофотометрическим методом рекомендуется использовать метод мечения белковой молекулы флуоресцеин изотиоцианатом (ФИТЦ) для отделения спектра поглощения лекарственных веществ от спектра поглощения собственных белков кожи. Максимум поглощения ФИТЦ -495 нм, максимум испускания - 523 нм.

2. Независимо от конструкции трансдермальной формы для повышения скорости чрескожной диффузии, инсулин следует вводить в матрицу в эмульсионной форме.

3. Для поддержания постоянной скорости чрескожной доставки инсулина в течение 24 ч. рекомендуется использовать синтетическую ТТС, а для поддержания постоянной скорости в течение не менее 48 ч. -резервуарную конструкцию ТТС с эмульсионной формой инсулина.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кузнецова, Евгения Геннадьевна, 2005 год

1. Адамян А.А. Средство для лечения ран Пат. Р. №2071788, Бюл., №2 от 20.01.97.

2. Александров И.Д., Субботин В.М. Справочник по технологии приготовления лекарственных форм. Ростов-на-Дону, «Феникс», 2001, с. 17.

3. Алесковский В.Б., Бардин В.В. и др. Физико-химические методы анализа, Ленинград, «Химия», 1988.

4. Алфёров А.А. и др. Экспериментально-клиническое обоснование применения коллагеновой губки для лечения гнойно-воспалительных осложнений заживления ран в неотложной абдоминальной хирургии. Клиническая хирургия, 1993, № 1, с. 17-19.

5. Аметов А.С. Стратегии в области сахарного диабета: начало новой эры. Русский медицинский журнал, 1998, № 2, с. 12-16.

6. Асафов А.В. и др. Средство для лечения ожогов. Пат. Р. №94011797. Бюл., №11 от 20.04.96.

7. Балаболкин М.И. «Эндокринология». Универсум Паблишинг, Москва, 1998.

8. Барманова Е.Ю., Безносюк Е.Д., Белякова Н.В. и др. Новые отечественные лекарственные средства (сводный выпуск), Москва, «Ремедиум», 2000, с. 489-492.

9. Валуев И.Л., Сытов Г.А., Валуев Л.И., Валуева Т.А., Ульянова М.В., Платэ Н.А. Ингибиторы протеолитических ферментов в терапии сахарного диабета. Вопросы медицинской химии, № 1, 2001.

10. Ю.Варпаховская И. Лекарственные препараты для интраназального введения. Ремедиум, 1999, № 9, с. 3-7.11 .Варпаховская И. Лекарственные препараты для интраназального применения, Медлайн Экспресс, 2001, № 5 (137), с. 16-19.

11. Варпаховская И. Новые системы доставки лекарственных средств. Ремедиум, 1999, № 2, с. 62-70.

12. Васильев А.Е., Давыдов А.Б. Макромолекулярные терапевтические системы: проблемы и перспективы. Журнал всесоюзного химического общества им. Менделеева, 1985, т. XXX, № 4, с. 395-402.

13. Васильев А.Е., Краснюк И.И., Равикумар С., Тохмачи В.Н. Трансдермальные терапевтический системы доставки лекарственных веществ (обзор). Химико-фармацевтический журнал, 2001, том 35, № 11, с. 29-41.

14. Васильев А.Е. Трансдермальные терапевтические системы «сухие капельницы». Новая аптека, 2002, № 11, с. 5-11.

15. Воспаление. Руководство для врачей. Под редакцией Серова В.В., Паукова B.C., Москва, «Медицина», 1976, с. 210.

16. Глущенко Н.Н., Плетенева Т.В., Попков В.А. Фармацевтичекая химия. «Академия», Москва, 2004, с. 43.

17. Гуревич К.Г. Разработка систем интраназальной доставки лекарственных средств. Качественная клиническая практика, 2002, № 1, с. 3-8.

18. Дедов И.И., Фадеев В.В. «Введение в диабетологию». Руководство для врачей, Москва, «Издательство Берег», 1998.

19. Дедов И.И., Шестакова М.В. Сахарный диабет, Универсум Паблишинг, Москва, 2003, с. 13.

20. Досон Р., Элиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика, Москва, «Мир», 1991.

21. Иванова JI.A., Абрамов Т.А., Попова З.С., Фетисова Э.В. Кинетика высвобождения динатриевой соли дексаметазона фосфата и канамицина сульфата из глазных капель и плёнок на основе коллагена. Фармация, 1988, т. 34, №2, с. 24-27.

22. Иванова JI.A. Общие закономерности в создании лекарственных форм на основе коллагена. Актуальные вопросы изыскания и технологии лекарственных средств. Москва, 1982, с. 21-24.

23. Искусственные органы, под ред. В.И. Шумакова, Москва, «Медицина», 1990, с. 155-167.

24. Истранов Л.П., Бондарева Л.Н. Использование коллагенсодержащего сырья для медицинских и микробиологических целей. Лекарственные средства, экономика и перспективы получения. Обзорная информация. Фармация, Выпуск 4, Москва, 1989, с. 41.

25. Истранов Л.П. и другие. Строение, свойства, направления использования коллагена в технологии лекарств. Обзор, Фармация, 1984, т. 33, №5, с. 7679.

26. Истранов Л.П. Фармацевтический анализ препаратов на основе коллагена. Фармация, 1986, т.35, №2, с. 22-24.

27. Кожа (строение, функция, общая патология, терапия) под ред. Чернуха A.M., проф. Фролова Е.П., Москва, «Медицина», 1982, с. 128-140.

28. Колесник Г.А. и др. Применение коллагеновой гемостатической губки при лечении больных с перфорацией верхнечелюстной пазухи после удаления зуба. Стоматология, 1993, т. 12, №2, с. 77.

29. Котык А., Яначек К. Мембранный транспорт. Москва, «Мир», 1980, с. 179-180.

30. Кучерук Е. Еженедельник Аптека, № 7 (428), 23 февраля 2004 г.

31. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Пособие для врачей. Том 2, издание тринадцатое, Харьков «Торсинг», 1998, с. 16-19.

32. Муравьев И.А. Технология лекарств. «Медицина», Москва, 1971, с. 422437.

33. Николаев А.В. и др. Профилактика и лечение гнойно-восполительных осложнений послеоперационных ран композицией на основе коллагена. Вестник хирургии им. И.И. Грекова, 1988, т.141, №11, с. 58-59.

34. Патент RU 2124340. Чувствительная к давлению система трансдермальной доставки лекарства и способ её получения (6A 61F 13/02А).

35. Рашке Т., Эккерт Дж., Дюсинг Х.-Дж., Кальмайер Ф., Виттерн К.-П. Технологии инкапсулирования в косметике. Косметика и медицина, №1, 2004, с. 22-29.

36. Севастьянов В.И., Саламатина JI.A., Яковлева Н.В., Урьяш В.Ф., Шумаков В.И. Новый способ введения глипогликемизирующего препарата с помощью трансдермальной лекарственной формы хлорпропамида. Медицинская техника, 2000, 2, с. 3-6.

37. Смиронов В.В., Кукса В.П. Инсулины, применяемые в лечении сахарного диабета. Медицинский научный и учебно-методический журнал, №5, 2001, с. 93-97.

38. Старостина Е.Г. Инсулин и инсулинотерапия: «тёмный лес» или стройная система?. Периодика, В мире лекарств, 1998, №2, с. 4-10.

39. Страйер Л. Биохимия, Москва, Мир, 1985.

40. Теппермен Дж., Теппермен X. Физиология обмена веществ и эндокринной системы. «Мир», Москва, 1989, с. 433-435.

41. Технология изготовления лекарственных форм. Под редакцией Аванесьянца Э.М. «Феникс», Ростов-на-Дону, 2002, с. 146-155.

42. Трансдермальные терапевтические системы, Качественная клиническая практика (от редакции, гл. редактор Белоусов Д.Ю.), 2001, №1, с. 3-10.

43. Фадеев А.С., Левачев С.М., Измайлова В.Н. Мономолекулярные слои коллагена. Вестн. моек, ун-та. сер. 2. Химия, 1999, т. 40. N 4, с.270-275.

44. Федюкович Н.И. Современные сахароснижающие препараты. «Ушверсггэцкае», Минск, 1998, с.5-9.

45. Хилькин A.M., Шехтер А.Б., Истранов Л.П., Леменев В.Л. Коллаген и его применение. Москва, «Медицина», 1976.

46. Чекман И.С., Пелещук А.П., Пятак О.А. Справочник по клинической фармакологии и фармакотерапии. Киев, «Здоровье», 1987.

47. Шумаков В.И., Севастьянов В.И., Чижикова В.А., Колпаков Е.В., Лукава М.Г. Трансдермальные лекарственные формы пропранолола и нитроглицерина. Тезисы Н-го Российского национального конгресса «Человек и лекарство», Москва, 1995, с. 95.

48. Эрнандес Е.И, Марголина А.А., Петрухина А.О. Липидный барьер кожи и косметические средства. Москва, ООО «Фирма Клавель», 2003, с. 340.

49. Almeida P.F.F., Vaz W.L.C., Thompson Т.Е. Biochemistry 1992, 31, pp. 67396747.

50. Asbill C.S., El-Kattan A.F., Michniak B. Enhancement of transdermal drug delivery: chemical and physical approaches. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, 2000, 17.

51. Barry B.W. Drug delivery rotes in skin: a novel approach. Advanced drug delivery reviews, 2002, 54 Suppl. 1, S31-S40.

52. Barry B.W. Mode of action of penetration enhancer in human skin. In J.M. Anderson, S.W. Kim. Advances in drug delivery systems, V.3. Amsterdam, Elsevier Sience Publishers B.V. 1987, pp. 85-97.

53. Bauerova K., Matusova D., Kassai Z. Chemical enhancers for transdermal drug transport. Eur J Drug Metab Pharmacokinet, 2001, 26(1-2), pp. 85-94.

54. Benz H., Schroeder J.A., at al. Improved local delivery of TGF-B2 by binding to injectable fibrillar collagen via difunctional polyethylene glycol. J Biomed Mater Res, 1998,39, pp. 539-548.

55. Boucaud A., Garrigue M.A., Machet L. at al. Effect of sonication parameters on transdermal delivery of insulin to hairless rats. J Control Release, 2002, May 17,81 (1-2), pp. 113-119.

56. Buckles R.G. Biomaterials for drug delivery systems. Journal of Biomed Mater Res, 1983, Vol. 17, pp. 109-128.

57. Cascone M.G., Sim B. and Downes S. Blends of synthetic and natural polymers as drug delivery systems for growth hormone. Biomaterials, 1995, Vol. 16, №7, pp. 569-574.

58. Cevc G., Blume G. New, highly efficient formulation of diclofenac for the topical, transdermal administration in ultradeformable drug carriers, Transfersomes. Biochim Biophys Acta, 2001, 1514(2), pp. 191-205.

59. Cevc G. Dermal Insulin. In: Frontiers in Insulin Pharmacology (M. Berger, and F. A. Gries, eds.), Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1993, pp. 161-169.

60. Cevc G. Drug delivery across the skin. Experts opinion in investigation drugs, 1997, 6, pp. 1887-1937.

61. Cevc G. Overcoming the Skin Barrier with Artificial Smart Carries of Drugs, in Dinh S.M., DeNuzzio J.D., Comfort A.R. Intelligent materials for controlled release, ACS Symposium series 728.

62. Cevc G., Schatzlein A., Blume G. Transdermal drug carriers: basic properties, optimization and transfer-efficiency in the case of epicutaneously applied peptides. Journal of Controlled Release 1995, 36, pp. 3-16.

63. Chalain Т., Phillips J.H., Hinek A. Bioengeneering of elastic cartilage with aggregated porcine and human auricular chondrocytes and hydrogels containing alginate, collagen and k-elastin. J Biomed Mater Res, 1999, Vol.44, Num.3, pp. 280-288.

64. Charulatha V., Rajaram A. Crosslinking density and resorption of dimethyl suberimidate treated collagen. J Biomed Mater Res, 1997, Vol. 36, № 4, pp. 478-486.

65. Choi E.H., Lee S.H., Ahn S.K., Hwang S.M. The pretreatment effect of chemical skin penetration enhancers in transdermal drug delivery using iontophoresis. Skin Pharmacol Appl Skin Physiol, 1999, 12(6), pp. 326-335.

66. Donald T. Downing. Lipid and protein structures in the permeability barrier of mammalian epidermis. Journal of lipid research, 1992, Vol. 33, pp. 301-313.

67. Di Tizio V., Karlgard C. et al. Localized drug delivery using crosslinked gelatin gels, containing liposomes: factors influencing liposome stability and drug release. J Biomed Mater Res, 2000, vol. 51, № 1, pp. 96-106.

68. Duan M.X., Guo J.H., Ma H. at al. Hypoglycemic effect of insulin in oil preparation by oral administration. Park K., Mrsny R.J. Controlled drug delivery. Designing technologies for the future. ACS Symposium Series 752, pp. 65-68.

69. Edvards G.A., Glattauer V., et al. In vivo evaluation of a collagenous membrane as an absorbable adhesoin barier. J Biomed Mater Res, 1997, 34, pp. 291-297.

70. Geibler U., Hempel U., et al. Collagen type 1 coating of Ti6A14V promotes adhesion of osteoblasts. J Biomed Mater Res, 2000, Vol. 51, № 4, pp. 752-760.

71. Gerado P. Carino, Edith Mathiowitz. Oral insulin delivery. Advance Drug Delivery Reviews, 1999, 35, pp. 249-257.

72. Glocckner D.C., Sacks M.S., et al. Mechanical evaluation and design of a multilayeved collagenous repair biomaterial. J Biomed Mater Res, 2000, Vol. 52, № 2, pp. 365-373.

73. Grzbowski J., Kolodzeij W., at al. A new anti-infectiv collagen dressing containing antibodies. J Biomed Mater Res, 1997, 36, pp. 163-166.

74. Guo J., Ping Q., Zhang L. Transdermal delivery of insulin in mice by using lecithin vesicles as a carrier. Drug Deliv, 2000, 7(2), pp. 113-116.

75. Harsch I.A., Hahn E.G., Konturek P.C. Syringe, pen, inhaler the evolution of insulin therapy. Med Sci Monit, 2001, 7(4), pp. 833-836.

76. Haugland R.P. Covalent fluorescent probes. In: Excited of Biopolymers, ed. by Steiner R.F., Plenum Press, N.Y. & London, 1983, pp. 29-58.

77. Hinchcliffe M., Ilium L. Intranasal insulin delivery and therapy. Advanced Drug Delivery Reviews, 1999, 35, pp. 199-234.

78. Houk J., Guy R.H. Membrane models for skin penetration studies. Chemical reviews, 1988, Vol. 88, № 3, pp. 455-471.

79. Huang L.L.H., Lee P.C., et al. Comparison of epoxides on grafting collagen to polyurethane and their effects on cellular growth. J Biomed Mater Res, 1998, Vol. 39, pp. 630-636.

80. Iao Z.P., et al. Parcine dermal collagen as awound dressing for skin donor sites and deep partiol skin thikness burns. Burns, 1992, Vol.18, №6, pp.492-496.

81. Jung S., Jung W., et al. Preparation and characterizatuin of collagen-GAG sponge for wound dressing. Proceedings International symposium on biomaterials and drug delivery systems, Korea, 2000, August, p. 124.

82. Kalia Y.N., Guy R.H. Modeling Transdermal drug release. Advanced drug delivery reviews, 2001, 48(2-3), pp. 159-172.

83. Kanikkannan N., Kandimalla K., Lamba S.S., Singh M. Structure-activity relationship of chemical penetration enhancers in transdermal drug delivery. Curr Med Chem, 2000, 7(6), pp. 593-608.

84. Kanikkannan N., Sing J., Ramarao P. Transdermal iontophoretic delivery of bovine insulin and human insulin analogue. J Control Release, 1999, 59 (1), pp. 99-105.

85. Karande P., Jain A., Mitragotri S. Discovery of transdermal penetration enhancers by high-throughput screening. Nature biotechnology, 2004, Vol. 22, № 2, pp. 192-197.

86. King M.J., Badea I., Solomon J. at al. Transdermal delivery of insulin from a novel biphasic lipid system in diabetic rats. Diabetes Technol Ther, 2002, 4 (4), pp. 479-488.

87. King M.J., Michel D., Foldvari M. Evidence for lymphatic transport of insulin by topically applied biphasic vesicles. J Pharm Pharmacol, 2003, 55 (10), pp. 1339-1344.

88. Knutson K., Krill S.L., Zhang J. Solvent-mediated alteration of the stratum corneum. Journal of Control Release, 1990, 11, pp. 93-103.

89. Kost J. Utrasound-assisted insulin delivery and noninvasive glucose sensing. Diabetes Technol Ther, 2002, 4 (4), pp. 489-497.

90. Krauland A.H., Guggi D., Bernkop-Schnurch A. Oral insulin delivery: the potential of thiolated chitosan-insulin tablets on non-diabetic rats. J Control Release, 2004, Mar 24, 95 (3), pp. 547-555.

91. Kuijpers A.J., van Wahchem P.B., et al. In vivo compatibility and degradation of crosslinked gelatin gel incorporated in knitted Dakron. J Biomed Mater Res, 2000, 51, pp. 136-145.

92. Kupila A., Sipila J., Keskinen P. Intranasally administered insulin intended for prevention of type 1 diabetes a safety study in healthy adults. Diabetes Metab Res Rev, 2003, Sep-Oct 19 (5), pp. 415-420.

93. Kurihara-Bergstrom Т., Good W.R. Skin development and drug permeability. In J.M. Anderson, S.W. Kim. Advances in drug delivery systems, V.3. Amsterdam, Elsevier Sience Publishers B.V. 1987, pp. 51-58.

94. Kurihara-Bergstrom Т., Knutson K., DeNoble L.J., Goates C.Y. Percutaneous absorption enhancement of an ionic molecule by ethanol-water system in human skin. Pharmaceutical research, 1990, Vol.7, № 7, pp. 762-766.

95. Kydonieus A.F. Controlled release technologies: methods, theory, and applications. CRC Press, Inc, 1980, v.l, pp. 1-19.

96. Lee S., McAuliffe D.J., Mulholland S.E., Doukas A.G. Photomechanical transdermal delivery of insulin in vivo. Lasers Surg Med, 2001, 28(3), pp. 282285.

97. Lee S., McAuliffe D.J., Flotte T.J., Kollias N., Doukas A.G. Photomechanical transcutaneous delivery of macromolecules. J Dermatol, 1998, 111 (6),pp. 925-929

98. Lieb W.R., Stein W.D. J. Membrane Biol. 1986, 92, pp. 111-119.

99. Lynn A.K., Yannas I.V., Bonfield W. Antigenicity and immunogenicity of collagen. J Biomed Mater Res, part B, 2004, vol. 71, №2, pp. 343-354.

100. Maione E., Shung K.K., Meyer R.J. Transducer design for a portable ultrasound enhanced transdermal drug delivery system. IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control, 2002, 49 (10), pp. 1430-1436.

101. Мао X.M., Liang B.W. at al. Facilitated transdermal delivery of insulin by pulse current iontophoresis. Yao Hsueh Hsueh Pao, 1995, 30 (4), pp. 302-306.

102. Мао X.M., Liang B.W., Yao Y.P. at al. Effect of pulse current iontoforetic transdermal delivery of insulin on blood glucose in diabetic rats. Yao Hsueh Hsueh Pao, 1995, 30 (12), pp. 881-885.

103. Matsumura K., Hyon S.H., et al. Surface modification of poly(ethylene-co-vinyl) (EVA). Part I. Introduction of carboxyl groups and immobilization of collagen. J Biomed Mater Res, 2000, 50, pp. 512-517.

104. Menon G.P. New insights into skin structure: scratching the surface. Advanced Drug Delivery Reviews, 2002, 54 Suppl.l, S3-S17.

105. Mitragotri S., Blankschtein D., Langer R. Utrasound-mediated transdermal protein delivery. Science, 1995, Aug 11, 269 (5225), pp. 850-853.

106. Mueller S.M., Schneider Т.О., et al. Smooth muscle action and contractile behavior of bovine meniscus cells seeded in type I and type II collagen-GAG matrices. J Biomed Mater Res, 1999, 45, pp. 157-166.

107. Naik A., Kalia Y.N., Guy R.H. Transdermal drug delivery: overcoming the skin's barrier function. Parm Sci Technol Today, 2000, 3(9), pp. 318-326.

108. Nakamura K., Murray RJ, Joseph J.I. et al. Oral insulin delivery using P(MAA-g-EG) hydrogels: effect of network morphology on insulin delivery characteristics. J Control Release, 2004, Mar 24, 95 (3), pp. 589-599.

109. Nehrer S., Breinan H.A., et al. Canine chondrocytes seeded in type I and type II collagen implants investigated in vitro. J Biomed Mater Res. (Appl. Biomater.), 1997, 38, pp. 95-104.

110. Ogiso T.,Iwaki M., Tanino T. at al. In vitro skin penetration and degradation of enkephalin, elcatonin and insulin. Biol Pharm Bull, 1997, 20 (1), pp. 54-60.

111. Olde Damink L.H.H., Dijkstra P.J., M.J.A. van Luyn, et al. Changes in the mechanical properties of dermal sheep collagen during in vitro degradation. J Biomed Mater Res, 1995, Vol. 29, pp. 139-147.

112. Ono I., Tateshita Т., Inoue M. Effects of collagen matrix containing basic fibroblast growth on wound contraction. J Biomed Mater Res, Applied Biomaterials, 1999, Vol. 48, № 5, pp. 621-360.

113. Owens D.R., Zinman В., Bolli G. Alternative routes of insulin delivery. Diabet Med, 2003, 20 (11), pp. 886-898.

114. Pajedra Pratar Singh et al. Vesicular systems for non-invasive topical immunization: rationale and prospects.Indian journal of farmacology, 2002, 34, pp. 301-310.

115. Patton S.J., Bukar J., Nagarajan S. Inhalad insulin. Advanced Drug Delivery Reviews, 1999, 35, pp. 235-247.

116. Paul A., Cevc G., Bachhawat B.K. Transdermal Immunisation With an Integral Membrane Component, Gap Junction Protein, by Means of Ultradeformable Drug Carriers, Transfersomes. Vaccine, 1998, 16, pp. 188-195.

117. Petite H., Rault I., et al. Use of acryl azide method for crosslinking collagen-rich tissues such as pericardium. J Biomed Mater Res, 1990, Vol. 24, № 2, pp. 179-187.

118. Prasad G.K., et al. Prospectiv comparison of bovine dressing to bovine spray thrombin for control of haemorrhage of skin graft donor sites. Burns, 1991, Vol. 11, № l,pp. 70-71.

119. Rault I., Frei V., et al. Evaluation of different chemical methods for cross-linking collagen gel, films and sponges. J Mater Science: Materials in medicine 7, 1996, pp. 215-221.

120. Santin M., Motta A., at al. Changes in serum conditioning profiles of glutaraldehyd-crosslinked collagen sponges after their treatment with calcification inhibitors. J Biomed Mater Res, 1998, 40, pp. 434-441.

121. Sekine Т., Nakamura Т., Liu Yu, Matsumoto K., Shimizu Y. Collagen Coated Y-Shaped Prosthesis for Carinal Replacement Promotes Regeneration of the Tracheal Epithelium. ASAIO Journal, 2000, Vol.46, № 4, pp. 421-425.

122. Sen A., Daly M.E., Hui S.W. Transdermal insulin delivery using lipid enhanced electroporation. Biochim Biophys Acta, 2002, Aug 19, 1564 (1), pp. 5-8.

123. Smith N.B., Lee S., Shung K.K. Ultrasound-mediated transdermal in vivo transport of insulin with low-profile cymbal arrays. Ultrasound Med Biol., 2003,29(8), pp. 1205-1210.

124. Suh H., Hwang Yu-Shik, Park Jong-Chul, Bum Koo Cho. Calcification of leaflets from percine aortic valves crosslinked by ultraviolet irradiation. Artif. Organs, 2000, Vol 24, № 7, pp. 555-563.

125. Sung H.W., Chen W.H., et al. Crosslinking characteristics of porcine tendons: Effect of fixation with glutaraldehyde or epoxy. J Biomed Mater Res, 1996, Vol.30, N3, pp. 361-367.

126. Sung H.W., Chen W.H., et al. Studies on epoxy compound fixation. J Biomed Mater Res (Appl. Biomater.), 1996, Vol.33, pp. 177-186.

127. Tachibana K., Tachibana S. The use of ultrasound for drug delivery. Echocardiography, 2001, 18(4), pp. 323-328.

128. Tachibana K., Tachibana S. Transdermal delivery of insulin by ultrasonic vibration. J Pharm Pharmacol, 1991, 43 (4), pp. 270-271.

129. Tocanne J.F., Dupou-Cezanne L. at al. FEBS Lett. 1989, 257, pp. 10-16.

130. United States Patent № 5597796 "Transdermal insulin". 1997, January 28.

131. United States Patent № 6274166 "Transdermal delivery system". 2001, August 14.

132. Wang J, Bu G. Influence of intranasal medication on the structure of the nasal mucosa. Zhonghua Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi, 1999, Feb. 34 (1), pp. 1425.

133. Weadock K.S., Edward J.M., et al. Effect of physical crosslinking methods on collagen fiber durality in proteolytic solutions. J Biomed Mater Res, 1996, Vol 32, №2, pp. 221-226.

134. Weadock K.S., Edward J.M., et al. Physical crosslinking of collagen fiber: Comparison of ultraviolet irradiation and dehydrothermal treatment. J Biomed Mater Res, 1995, Vol 29, № 11, pp. 1373-1379.

135. Weadock K., Olson R.M., Silver F.H. Evaluation of collagen tecniques. Med. Dev., Art. Org., 1983-84, 11(4), pp. 293-318.

136. Weaver J.C., Vaughan Т.Е., Chizmadzhev Y. Theory of electrical creation of aqueous pathways across skin transport barriers. Advanced drug delivery reviews, 1999, Vol. 35, № 1, pp. 22-39.

137. Werkmeister J.A., Edwards G.A., et al. Evaluation of a collagen based biosynthetic materials for the repair of abdominal wall defects. J Biomed Mater Res, 1998, 39, pp. 429-436.

138. Yamashita F., Hashida M. Mechanistic and empirical modeling of skin penetration of drugs. Advanced drug delivery reviews, 2003, Vol.55 (9), pp. 1185-1199.

139. Zakzewski C.A., Wasiliewski J., Cawley P., Ford W. Transdermal delivery of regular insulin to chronic diabetic rat: effect of skin preparation and electrical enhancement. J Control Release, 1998, 50 (1-3), pp. 267-272.

140. Zeeman R, Dijkstra P.J., van Wachem P.B., et al. Crosslinking and modification of dermal sheep collagen using 1,4-butanediol diglycidil ether. J Biomed Mater Res, 1999, Vol. 46, № 3, pp. 424-433.

141. Zhang I., Shung K.K., Edwards D.A. Hydrogels with enhanced mass transfer for transdermal drug delivery. J Pharm Sci, 1996, 85 (12), pp. 1312-1316.