Проатерогенные аутоантигены и антитела к ним у больных с коронарным атеросклерозом: возможность использования в клинической практике тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.05, кандидат наук Шогенова Марьяна Хабасовна

• Шогенова Марьяна Хабасовна
• кандидат наук
• 2016

Оглавление диссертации кандидат наук Шогенова Марьяна Хабасовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений 4

Введение 7

Глава I Обзор литературы 13

1.1. История изучения атеросклероза 13

1.2. Окислительная модификация ЛНП в патогенезе атеросклероза 14

1.3. Антитела к окисленным ЛНП 20

1.4. Р2-гликопротеин I и антитела к нему 22

1.5. Белок теплового шока 60 и антитела к нему 24

1.6. Заключение по обзору литературы 27

Глава II Материалы и методы 29

2.1. Клинический материал 29

2.2. Лабораторные методы 34

2.3. Инструментальные методы 39

2.4. Статистическая обработка 41

Глава III Результаты 43

3.1. Показатели липидного профиля 43

3.2. Маркеры воспаления - мономерный СРБ, высокочувствительный СРБ, интерлейкин 6 48

3.3. Окисленные ЛНП и антитела к ним 53

3.3.5. Влияние терапии статинами на уровень окисленных ЛНП и антител к ним 63

3.3.6. Сопоставление уровней окисленных ЛНП, антител к ним и маркеров воспаления со значениями SYNTAX Score 65

3.4. Аутоантитела к ЛНП человека. ЛНП модифицированные малоновым диальдегидом. ЛНП модифицированные метилглиоксалем 66

3.5. IgG человека, модифицированный малоновым диальдегидом. IgG человека, модифицированный метилглиоксалем 72

3.6 Сравнение показателей липидного профиля, окисленных ЛНП, ЛНП и модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем у добровольцев старше 50 лет без клинических признаков ИБС и пациентов трёх основных групп 79

3.7 Антитела к белку теплового шока 60 90

3.8. Антитела к р2-гликопротеину I 94

Глава IV Обсуждение 99

Выводы 108

Практические рекомендации 110

Список литературы 111

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

HSP - белок теплового шока

SR-A - скавенджер-рецептор класса А

SR-B - скавенджер-рецептор класса В

TLR - толл-подобный рецептор

Р2ГП1 - р2-гликопротеин I

ААТ-ЛНП - аутоантитела к ЛНП человека

АГ - артериальная гипертония

АКШ - аортокоронарное шунтирование

АЛТ - аланинаминотрансфераза

АпоВ - апопротеин В

АСБ - атеросклеротическая бляшка

АСК - ацетилсалициловая кислота

АСТ - аспартатаминотрансфераза

Ат-HSP - антитела к белку теплового шока

Ат-р2ГП1 - антитела к р2-гликопротеину I

Ат-окЛНП - антитела к окисленным липопротеидам низкой плотности ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения ВчСРБ - высокочувствительный С-реактивный белок ГМК - гладкомышечные клетки

ИАПФ - ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ИК - иммунные комплексы

ИЛ-6 - интерлейкин 6

ИМ - инфаркт миокарда

ИМТ - индекс массы тела

ИФА - иммуноферментный анализ

КА - коронарные артерии

КАГ - коронароангиография

КФК - креатинфосфокиназы

ЛВП - липопротеиды высокой плотности

ЛЖ - левый желудочек

ЛКА - левая коронарная артерия

ЛНП - липопротеиды низкой плотности

ЛОНП - липопротеиды очень низкой плотности

МГ - метилглиоксаль

МГ- IgG - IgG человека, модифицированные метилглиоксалем МГ-ЛНП - ЛНП человека, модифицированные метилглиоксалем МДА - малоновый диальдегид

МДА-IgG - IgG человека, модифицированные малоновым диальдегидом МДА-ЛНП - ЛНП человека, модифицированные малоновым диальдегидом МИ - мозговой инсульт

Моно-СРБ - мономерный С-реактивный белок НРС - нарушение ритма сердца

ОкЛНП - окисленные липопротеиды низкой плотности

ОНМК - острое нарушение мозгового кровообращения

ПКА - правая коронарная артерия

ПНА - передняя нисходящая артерия

ПОЛ - перекисное окисление липидов

СД-сахарный диабет

СОЭ - скорость оседания эритроцитов

СРБ - С-реактивный белок

ССЗ - сердечно-сосудистые заболевания

ТГ - триглицериды

ХМ - хиломикроны

ХПН - хроническая почечная недостаточность ХС - общий холестерин

ХСН - хроническая сердечная недостаточность ЭКГ - электрокардиограмма ЭХОКГ - эхокардиография

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Проатерогенные аутоантигены и антитела к ним у больных с коронарным атеросклерозом: возможность использования в клинической практике»

ВВЕДЕНИЕ

По оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) сердечнососудистые заболевания (ССЗ) являются основной причиной смерти во всем мире. Ожидается, что к 2020 году острый инфаркт миокарда и мозговой инсульт станут лидирующими причинами смертности в мире, которая составит около 20 млн человек в год, а к 2030 году возрастет до 24 млн человек в год [1]. Согласно статистическим данным, в Российской Федерации ССЗ составляют 57% в структуре общей смертности. Среди них ведущее место занимают ишемическая болезнь сердца (ИБС) 50,1% и мозговые инсульты (МИ) 34,5%. В большинстве случаев причиной поражения сердечно-сосудистой системы и главной причиной ИБС является атеросклероз.

Для правильной и своевременной профилактики любых заболеваний необходимо четкое понимание причин их вызывающих. Ещё в начале XX века крупнейшим русским патологом Н.А. Аничковым была выдвинута и экспериментально обоснована липидная теория атеросклероза. Благодаря накопленным в течение последних десятилетий экспериментальным данным произошел прогресс в понимании механизмов развития атеросклеротического процесса. В середине 1970-х годов Рассел Росс выдвинул гипотезу, открывшую иммунную эру в изучении атеросклероза, согласно этой гипотезе атеросклероз представляет собой локальный воспалительный процесс в эндотелии артерий. В настоящее время атеросклероз рассматривается как полиэтиологическое заболевание со сложным патогенезом. Количество факторов риска, влияющих на развитие атеросклероза, неуклонно растет. В частности, вызывает пристальный интерес аутоиммунно-воспалительная гипотеза патогенеза атеросклероза, согласно которой проатерогенные аутоантигены и аутоантитела к ним являются важнейшим пусковым механизмом атерогенеза.

В качестве серьезных кандидатов на роль индукторов иммунного ответа предлагаются различные факторы - окисленные липопротеиды низкой

плотности (ОкЛНП), антитела к ним (Ат-окЛНП), ß2-гликопротеин I (ß2rni), антитела к ß2rni (Ат-ß2ГПI), белки теплового шока (HSP), антитела к HSP (Ат-HSP) и инфекционные возбудители (Chlamydia pneumoniae). Следует отметить, что кроме атеросклероз-ассоциированных аутоантигенов в атерогенез, как в воспалительный процесс, вовлечены различные семейства медиаторов воспаления, такие как цитокины, белки острой фазы воспаления, интегрины, селектины и молекулы адгезии. Многочисленные клинические исследования продемонстрировали достоверную взаимосвязь между острыми сердечнососудистыми осложнениями и биохимическими признаками воспалительных реакций.

Все больше данных свидетельствуют о том, что ОкЛНП обладают более атерогенными свойствами, чем нативные липопротеиды низкой плотности (ЛНП). [2] ОкЛНП способствуют активации макрофагов и внутриклеточному накоплению эфиров холестерина, оказывают цитотоксическое действие на эндотелиальные клетки, увеличивают тромбоцитарную активность, стимулируют миграцию и пролиферацию гладкомышечных клеток, тем самым инициируя развитие атеросклеротического процесса [3]. В связи с чем, высказывается предположение, что содержание ОкЛНП является наиболее важным диагностическим маркером атеросклероза, чем уровень общего холестерина (ХС) и ЛНП. ОкЛНП считаются ключевыми факторами локального воспаления и дестабилизации атеросклеротических бляшек. Окислительная модификация индуцирует образование иммуногенных эпитопов в молекулах ЛНП, что приводит к образованию специфических антител против них. Доказана способность ОкЛНП взаимодействовать с Ат-окЛНП, образуя иммунные комплексы, оказывающие дополнительное повреждающее действие на эндотелий.

Последнее время все чаще обсуждается вопрос о возможности включения в систему стратификации риска данных об уровне проатерогенных антигенов и аутоантител к ним с целью усовершенствования современной оценки степени

риска ССЗ. Рассматривается новый подход к лечению и профилактике атеросклероза - перспектива создания противоатеросклеротической вакцины. Основная стратегия иммуномодуляции состоит в подавлении проатерогенных и активации атеропротекторных иммунных факторов. Однако следует признать, что роль ОкЛНП и Ат-окЛНП в атеросклеротическом процессе до сих пор четко не выяснена. Сложность состоит в том, что имеющиеся в литературе данные о роли ОкЛНП и Ат-окЛНП в атеросклеротическом процессе, зачастую, противоречивы. Согласно различным источникам, аутоантитела к проатерогенным аутоантигенам могут оказывать прямо противоположные эффекты: проатерогенный и атеропротекторный. Поэтому вопрос о роли проатерогенных антигенов и антител к ним в атерогенезе по сей день остается актуальным, как и поиск средств воздействия на данные показатели.

10 ЦЕЛЬ

Определить содержание и оценить целесообразность использования в клинической практике сывороточных проатерогенных аутоантигенов и антител к ним у больных с различной выраженностью коронарного атеросклероза.

ЗАДАЧИ

1. Определить и сравнить содержание в сыворотке крови окисленных ЛНП и антител к ним у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом и здоровых лиц.

2. Определить корреляционную зависимость между уровнем окисленных ЛНП и уровнем антител к ним у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом и здоровых лиц.

3. Сопоставить содержание в сыворотке крови окисленных ЛНП и антител к ним с уровнем общего холестерина (ХС), липопротеидов низкой плотности (ХС ЛНП), липопротеидов высокой плотности (ХС ЛВП), высокочувствительного С-реактивного белка (вчСРБ), интерлейкина-6 (ИЛ-6) у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом и здоровых лиц.

4. Определить и сравнить содержание в сыворотке крови аутоантител к ЛНП человека, ЛНП, модифицированных метилглиоксалем, ЛНП, модифицированных малоновым диальдегидом, IgG, модифицированных метилглиоксалем, IgG, модифицированных малоновым диальдегидом и мономерного СРБ (Моно-СРБ) у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом и здоровых лиц.

5. Определить и сравнить содержание в сыворотке крови антител к р2-гликопротеину I и антител к белку теплового шока 60 у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом и здоровых лиц.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые показано отсутствие различий в уровне сывороточных окисленных ЛНП, ЛНП, модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем, у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом, добровольцев старше 50 лет без клинических признаков ИБС и молодых практически здоровых добровольцев.

Впервые продемонстрировано, что уровень антител к окисленным ЛНП у молодых практически здоровых лиц достоверно выше, чем у больных со стенозирующим коронарным атеросклерозом. Установлено, что уровень IgG, модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем, у молодых практически здоровых лиц достоверно выше, чем у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом.

Впервые показано отсутствие взаимосвязи между уровнем окисленных ЛНП и уровнем антител к ним у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом и у молодых практически здоровых лиц. Установлено отсутствие связи между уровнем окисленных ЛНП и антител к ним с показателями липидного профиля и маркерами воспаления у больных со стенозирующим и нестенозирующим коронарным атеросклерозом и у молодых практически здоровых лиц.

Впервые продемонстрировано, что уровень ОкЛНП у сопоставимых по возрасту больных со стенозирующим и нестенозирующим атеросклерозом КА, находящихся на гиполипидемической терапии статинами, и у добровольцев старше 50 лет, не принимающих статины, достоверно не различается.

Продемонстрировано, что у больных со стенозирующим атеросклерозом КА отсутствует корреляционная связь между значениями SYNTAX Score и уровнями окисленных ЛНП и антител к ним, однако выявлена умеренная корреляция между уровнями вчСРБ и мономерного СРБ и значениями SYNTAX Score.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Результаты работы показали, что уровни окисленных ЛНП, ЛНП модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем у больных ИБС не могут быть использованы в клинической практике для оценки тяжести коронарного атеросклероза. Тем не менее, следует учитывать, что у больных с различной степенью атеросклеротического поражения коронарных артерий уровень антител к окисленным ЛНП, IgG модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем достоверно ниже, чем у молодых практически здоровых лиц.

Апробированы методы определения ЛНП, модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем, и IgG, модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем, с использованием моноклональных антител отечественного производства, которые показали более высокую информативность по сравнению с определением окисленных ЛНП и антител к ним стандартными наборами реактивов зарубежных производителей, что позволяет рекомендовать отечественные тест-системы при проведении научных исследований в дальнейшем.

Учитывая более высокую физико-химическую стабильность и среднюю концентрацию в сыворотке крови молекул IgG, определение уровней IgG, модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем можно использовать наряду с определением уровней ЛНП, модифицированных малоновым диальдегидом и метилглиоксалем для оценки процессов, связанных с альдегидной модификацией белков и липопротеинов.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. История изучения атеросклероза

Общепризнанно, что атеросклероз является ведущим патогенетическим фактором сердечно-сосудистой заболеваемости и смертности во всем мире, в том числе и в России. Клинические проявления атеросклероза известны с древнейших времен. Атеросклеротические поражения сосудов обнаруживались патологоанатомами задолго до установления причинно-следственной связи между найденными в артериях изменениями и клиническими синдромами данного заболевания. В 1829 году французский патологоанатом немецкого происхождения Жан Лобштейн в своей монографии «Учебник по патофизиологической анатомии» впервые применил термин «артериосклероз». В 1904 году немецкий патолог Феликс Маршан назвал термином «атеросклероз» дегенеративный процесс с наличием выраженного липидного компонента в интиме артерий. В середине XIX века Карлом Рокитанским была предложена тромбогенная теория атеросклероза. Яростным критиком этой теории выступал Рудольф Вирхов, сравнивавший разрыв атеросклеротической бляшки (АСБ) со вскрывшимся абсцессом и считавший атеросклероз «реакцией на повреждение», протекающей по признакам воспаления. В первом десятилетии XX века российские ученые А. Игнатовский, Н.Аничков и С.Халатов продемонстрировали, что добавление холестерина в пищу экспериментальных животных является причиной атеросклероза. Тем самым была доказана липидная теория развития атеросклероза, в последующем получившая твердые клинические доказательства. В 1976 году Рассел Росс выдвинул модификацию оригинальной теории Вирхова, согласно которой атеросклероз является локальным воспалительным процессом в эндотелии артерий. В 1999 году Росс назвал атеросклероз воспалительным заболеванием и подчеркнул роль перекисного окисления липидов в его развитии [4].

В настоящее время теоретически и клинически обоснована тесная взаимосвязь патофизиологических механизмов иммуно-воспалительного и липидного генеза развития и прогрессирования атеросклероза. На сегодняшний день атеросклероз рассматривается как патофизиологическое состояние, в основе которого лежит нарушение динамического равновесия между гуморальными факторами, оказывающими защитное действие (N0, эндотелиальный фактор гиперполяризации, простагландин - PGI), и факторами, повреждающими стенку сосуда (супероксид-анион, эндотелин- 1, тромбоксан А2), вследствие чего развивается эндотелиальная дисфункция и повышение проницаемости эндотелия [5]. Одновременно с этим активируются иммуно-воспалительные процессы в сосудистой стенке, происходит высвобождение провоспалительных молекул, что способствует накоплению в

субэндотелиальном слое артерии моноцитов, активизированных макрофагов, липидов, гладкомышечных клеток и лимфоцитов [6]. Эти процессы приводят к запуску механизмов развития атеросклероза и формированию атеросклеротической бляшки (АСБ), что в свою очередь ведет к снижению эластичности сосудистой стенки, сужению просвета, окклюзии артерии, нарушению кровообращения.

1.2. Окислительная модификация ЛНП в патогенезе атеросклероза

В течение последних лет все большее внимание уделяется аутоиммунной теории патогенеза атеросклероза и роли в атерогенезе иммунных факторов, таких как проатерогенные аутоантигены и аутоантитела к ним. Аутоиммунные факторы играют одну из ключевых ролей в формировании и дальнейшем развитии атеросклеротических бляшек [7]. Есть несколько антигенных стимулов, которые участвуют в патогенезе атеросклероза. Наиболее выраженными атерогенными свойствами обладают ОкЛНП. [8]. Они могут выступать в качестве аутоантигенов за счет взаимодействия с Толл-подобными

рецепторами (TLR), активируя Т-лимфоциты, ответственные за индукцию и поддержание локального иммунного ответа в атеросклеротической бляшке.

Достоверно известно, что высокий уровень циркулирующих липидов, таких как ОкЛНП, является одним из пусковых моментов в развитии атеросклеротического процесса [9, 10]. Нарушение баланса между про- и антиоксидантной системами организма приводит к развитию окислительного стресса, что в комплексе с наличием гиперлипидемии создает благоприятные условия для перекисного окисления липидов (ПОЛ). При пероксидации липидов образуются первичные продукты окисления - гидроперекиси или моноциклические эндоперекиси, которые затем метаболизируются во вторичные продукты ПОЛ - различные альдегиды (малоновый диальдегид (МДА), метилглиоксаль (МГ) ), 4-гидрокси-2-ноненаль, ацетальдегид, кротоновый альдегид) и третичные продукты ПОЛ - основания Шиффа. В соответствии с этим, в зависимости от степени окисленности и соотношения первичных и вторичных продуктов окисления следует различать «окисленные» липопротеины низкой плотности, содержащие гидроперикиси и «модифицированные» природными дикарбонилами ЛНП [11]. Токсичные продукты перикисного окисления липидов помимо атерогенной модификации ЛНП приводят к дисфункции эндотелия и другим сосудистым нарушениям, чем способствуют прогрессированию атеросклероза. [12].

Окислительная модификация ЛНП в общей циркуляции выражена слабо. Основной процесс клеточного окисления ЛНП in vivo происходит в субэндотелиальном слое артериальной стенки в условиях высокой концентрации ионов металлов переменной валентности (Cu2+ и Fe2+) и в присутствии активных кислородных метаболитов, секретируемых макрофагами, Т-лимфоцитами и пенистыми клетками (Рис. 1) [13]. Накопление ОкЛНП в интиме стимулирует секрецию воспалительных цитокинов, экспрессию молекул адгезии и индуцирует миграцию моноцитов в субэндотелиальное пространство [14], где они дифференцируются в макрофаги.

Макрофаги экспрессируют по меньшей мере шесть структурно различных видов рецепторов клеточной поверхности для модифицированных форм ЛНП, таких как скавенджер-рецепторы класса А (SR-A), класса B (SR-BI), CD36, CD68, лектиноподобные рецепторы и скавенджер-рецепторы, связывающиеся с фосфатидилсерином [15, 16, 17, 18]. Считается, что основными рецепторами, ответственными за поглощение ОкЛНП и приводящими к липидной перегрузке макрофагов, являются SR-А, SR- В1 и CD36 [19].

CD36 - гликозилированный белок (53 кДа) с № и С-концевыми трансмембранными доменами, определяемый как скавенджер-рецептор класса В. Этот белок был первоначально идентифицирован как интегральный гликопротеиновый рецептор мембраны тромбоцитов для связи с тромбоспондином-1. В настоящее время доказана его способность связывать и захватывать ОкЛНП [20]. SR-А является тримерным гликопротеином в 200 кДа, состоящим из мономеров с одним трансмембранным доменом, связывающимся с ацетил-ЛНП и ОкЛНП [21]. SR-BI - № гликозилированный белок, еще один член семейства скавенджер-рецепторов класса В [22, 23].

Окислительная модификация преобразует ЛНП в форму, захватываемую макрофагами в десятки раз быстрее, чем нативные ЛНП. [12] Такое активное поглощение ОкЛНП макрофагами приводит к образованию нагруженных липидами пенистых клеткок [24, 25], которые в дальнейшем подвергаются апоптозу, в результате чего кристаллы холестерина попадают в экстрацеллюлярное пространство и провоцируют процесс воспаления сосудистой стенки вследствие своей высокой цитотоксичности. В то же время, активированные макрофаги продуцируют ряд провоспалительных молекул, включая хемокины, которые стимулируют трансформацию и миграцию гладкомышечных клеток (ГМК) из медии в интиму сосуда [26, 27]. ГМК приобретают способность продуцировать элементы соединительной ткани (коллаген, эластин и гликозамингликаны), которые в дальнейшем используются

для построения фиброзного каркаса атеросклеротической бляшки, который отделяет липидное ядро от просвета сосуда. Одновременно происходит васкуляризация очага атеросклеротического поражения. Формируется типичная атероматозная бляшка, которая, с течением времени, увеличиваясь в объеме, может вести к снижению кровотока в сосуде или же к разрыву с развитием последующих осложнений (инфаркт миокарда (ИМ), мозговой инсульт).

Рисунок 1. Участие окисленных липопротеинов низкой плотности в атерогенезе (адаптировано из ЫМзыига Е, 2004 [28]).

В развитии и поддержании воспалительного процесса при атеросклерозе следует отметить и особо важную роль СРБ, который под влиянием ИЛ-6 синтезируется гепатоцитами, однако может также продуцироваться присутствующими в атеросклеротической бляшке макрофагами и лимфоцитами. СРБ является высокочувствительным маркёром воспаления и тканевой деструкции. Доказана его способность связываться с ОкЛНП и, накапливаясь в местах атеросклеротического поражения артерий, поддерживать

системное и локальное хроническое воспаление, в связи с чем, СРБ считается вторичным триггером обострения воспалительного процесса в бляшке. [29, 30]. В 1983 г была обнаружена новая форма СРБ, состоявшая, в отличие от нативной формы, не из пентамеров а из свободных мономеров СРБ. В настоящее время изучение роли мономерного СРБ в воспалительном ответе вызывает большой интерес, так как существующие данные свидетельствуют о том, что именно переход пентамерной формы СРБ в мономерную вызывает повышение концентрации компонентов воспалительного ответа, ускоряет агрегацию тромбоцитов и секрецию серотонина, стимулирует высвобождение интерлейкина [31, 32, 33].

Связь уровня ОкЛНП с развитием атеросклероза изучалась в ряде работ. Помимо атеросклеротических бляшек различной локализации, ОкЛНП обнаруживаются и в атеросклеротически измененных аортальных клапанах [34]. Известно также, что накопление ОкЛНП в плазме крови больных атеросклерозом ингибирует синтез простациклина в артериальной стенке, что может существенно повышать опасность возникновения инфаркта миокарда вследствие тромбоза коронарных сосудов [35]. Интересные данные получены российскими авторами. При сравнении пациентов с ишемической болезнью сердца и артериальной гипертонией с группой здоровых добровольцев, не страдающих сахарным диабетом, ожирением, с нормальным артериальным давлением, без сосудистых и эндокринных заболеваний в анамнезе, у больных с ишемической болезнью сердца отмечалось увеличение уровня ОкЛНП [36]. Однако, в похожей работе при исследовании уровня ОкЛНП у здоровых лиц различных возрастных категорий и у пациентов с ССЗ, наиболее высокий уровень ОкЛНП регистрировался у молодых здоровых пациентов. Что, по мнению авторов, может быть обусловлено более высокой интенсивностью метаболических процессов, свойственных для молодого возраста. Хотя, в этом же исследовании в группе пациентов, страдавших ИБС, наблюдалось возрастание концентрации ОкЛНП с усилением тяжести заболевания [37]. В то

же время имеются данные о том, что наличие ОкЛНП не имеет достоверной связи с такими главными факторами риска ИБС, как гиперлипидемия, гипертензия, курение и диабет, в связи с чем, элиминация этих факторов риска, возможно, не повлияет на уровни ОкЛНП. Поэтому остается актуальным поиск средств воздействия на эти крайне атерогенные частицы.

Следует отметить, что окисление ЛНП может приводить к образованию минимально измененных ЛНП, которые распознаются ЛНП-рецепторами макрофагов, но не распознаются скавенджер-рецепторами [38]. Эти свойства отличают минимально модифицированные ЛНП от более глубоко модифицированных окисленных ЛНП, которые не распознаются ЛНП-рецепторами, но усиленно поглощаются скавенджер-рецепторами макрофагов, такими как CD36 и SR-BI [39]. Тем не менее, минимально измененные ЛНП обладают многими проатерогенными свойствами, такими как индукция адгезии моноцитов к эндотелиальным клеткам, производство колониестимулирующего фактора, хемотаксического протеина-1 моноцитов и тканевого фактора [38, 40, 41]. Кроме того, минимально измененные ЛНП (также как и окисленные ЛНП) индуцируют полимеризацию актина и распространение макрофагов, что приводит к таким проатерогенным последствиям как ингибирование фагоцитоза клеток, подвергшихся апоптозу, и повышение поглощения ОкЛНП [42].

По мнению сторонников «аутоиммунной» теории атеросклероза, окисленные фосфолипиды и эфиры холестерина, входящие в состав ЛНП, распознаются TLR-ассоциированными механизмами врожденного иммунитета как «маркеры повреждения». Кроме того, уровни проатерогенных аутоантигенов и аутоантител к ним могут обладать прогностическим значением в отношении риска сердечно-сосудистых осложнений.

1.3. Антитела к окисленным ЛНП

В процессе модификации ЛНП окисляются как липиды, так и апопротеин В (апоВ). При этом, вещества альдегидной природы, образующиеся в ходе пероксидации липидов, прежде всего, реагируют с аминогруппами апоВ, индуцируя экспрессию новых химических структур - специфических иммуногенных эпитопов на поверхности белка, что может послужить причиной возникновения антигенных детерминант [43]. Наличие таких эпитопов на ОкЛНП было продемонстрировано в сыворотке и атеросклеротических повреждениях, как у экспериментальных животных, так и у людей [44, 45]. В таких поражениях имеет место Т-клеточно-опосредованный иммунный ответ, способный вызывать активацию В-клеток с сопутствующей выработкой специфических аутоантител [46, 47, 48]. То есть, антитела к ОкЛНП могут считаться маркером окисления ЛНП на тканевом уровне в сосудистой стенке.

О существовании АТ-ОкЛНП известно в течение длительного времени, но их клиническая роль до конца не ясна [49]. Для изучения потенциальной роли АТ-ОкЛНП в атерогенезе проводилась иммунизация против ОкЛНП кроликов, дефицитных по ЛНП рецептору, и определены последствия этого вмешательства. Иммунизация генерировала высокие титры антител с такой же специфичностью, как и у нативных аутоантител и значительно снижала степень атеросклеротического поражения аорты. Хотя механизмы, с помощью которых иммунизация приводит к защитным эффектам, неизвестны, эти результаты свидетельствуют о важной роли иммунной системы в модуляции атерогенного процесса и могут указывать на новый подход для ингибирования прогрессирования атеросклероза [50].

При исследовании выработки АТ-ОкЛНП в двух группах мышей, дефицитных по ЛНП рецептору, была продемонстрирована корреляция между титрами АТ-ОкЛНП и степенью атеросклероза. В первой группе мышей, находившихся на атерогенной диете, была выявлена выраженная

гиперхолестеринемия и обширные атеросклеросклеротические поражения аорты. Вторая группа находилась на диете с низким содержанием липидов и отличалась отсутствием изменений в липидном профиле и минимальным атеросклерозом аорты. При объединении данных обеих групп отмечалась значительная корреляция между титрами АТ-ОкЛНП и степенью атеросклероза. Также была отмечена связь титров АТ-ОкЛНП с уровнем холестерина в плазме крови. Эти результаты показывают, что рост титров АТ-ОкЛНП в мышиной модели частично определяется степенью атеросклероза, но может также зависеть и от степени гиперхолестеринемии или других факторов, которые могут повлиять на процессы перекисного окисления липидов [51].

У человека АТ-ОкЛНП регистрируются как у пациентов с сердечнососудистыми заболеваниями, так и у здоровых лиц [52]. Неоднократно высказывалось мнение о наличии связи между уровнем циркулирующих АТ-ОкЛНП и развитием атеросклеротического поражения и сердечнососудистыми заболеваниями [53, 54, 55]. Было продемонстрировано, что уровень антител к окЛНП коррелирует со степенью атеросклеротических поражений коронарных [56, 55], сонных [53] и периферических артерий [57] независимо от уровня ЛНП в сыворотке крови. Также не исключается связь уровня антител к окЛНП в плазме крови с нестабильностью атеросклеротической бляшки [58]. Более того, имеются данные о том, что антитела к МДА-модифицированным ЛНП не только повышены у пациентов с острым инфарктом миокарда [59], но и могут быть его предикторами [55, 60].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Шогенова Марьяна Хабасовна, 2016 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. World Health Organization. The World Health Report 2014.

2. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Кумскова Е.М. Особенности модификации липопротеинов низкой плотности в развитии атеросклероза и сахарного диабета типа 2. Кардиол. Вестн. 2008. Т. 3, № 1. С. 60 - 67.

3. Mizuno Y, Jacob RF, Mason RP. Inflammation and the development of atherosclerosis. J Atheroscler Thromb 2011;18:351-8.

4. Ross R. Atherosclerosis-an inflammatory disease. N Engl J Med 1999; 340:115-126.

5. Modena MG, Bonetti L, Coppi F, et al. Prognostic role of reversible endothelial dysfunction in hypertensive postmenopausal women. J Am Coll Cardiol. 2002; 40:505-551.

6. Hansson GK, Libby P. The immune response in atherosclerosis: a double-edged sword. Nat Rev Immunol. 2006; 6(7):508-19.

7. Yla-Herttuala S, Palinski W, Rosenfeld ME, et al. Evidence for the presence of oxidatively modified low density lipoprotein in atherosclerotic lesions of rabbit and man. J Clin Invest 1989; 84:1086-95.

8. Азизова О.А. Роль окисленных липопротеидов в патогенезе атеросклероза. Эфферентная терапия. 2000. Т.6. №1. С.24-31.

9. Shashkin P, Dragulev B, Ley K. Macrophage differentiation to foam cells. Curr Pharm Des. 2005; 11(23):3061-72.

10. Shi W, Wang X, Shih DM, Laubach VE, Navab M, Lusis AJ. Paradoxical reduction of fatty streak formation in mice lacking endothelial nitric oxide synthase. Circulation. 2002; 105(17):2078-82.

11. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. Наука-Интерпериодика. 2001:343.

12. Ланкин В.З., Вихерт А.М. Перекисное окисление липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза. Архив патологии, 1989. 51 (1). С. 80-84.

13. Steinberg D, Parthasarathy S, Carew TE, Khoo JC, Witztum JL. Beyond cholesterol: modification of low density lipoprotein that increase its atherogenicity. N Engl J Med 1989;320:915-24.

14. Groyer E, Caligiuri G, Laschet-Khallou J, Nicoletti A. Immunological aspects of atherosclerosis. Presse Med. 2006; 35(3 Pt 2):475-86.

15. Greaves DR, Gordon S. Thematic review series: the immune system and atherogenesis. J Lipid Res. 2005; 46(1):11-20.

16. Arai T, Wang N, Bezouevski M. Decreased atherosclerosis in heterozygous low density lipoprotein receptor deficient mice expressing the scavenger receptor BI transgene. J Biol Chem. 1999; 274(4):2366-71.

17. Sawamura T, Kume N, Aoyama T, Moriwaki H, Hoshikawa H, Aiba Y, Tanaka T, Miwa S, Katsura Y, Kita T, Masaki T. An endothelial receptor for oxidized low-density lipoprotein. Nature. 1997; 386(6620):73-7.

18. Shimaoka T, Kume N, Minami M, Hayashida K, Kataoka H, Kita T, Yonehara S. Molecular cloning of a novel scavenger receptor for oxidized low density lipoprotein, SR-PSOX, on macrophages. J Biol Chem. 2000; 275(52):40663-6.

19. Kunjathoor VV, Febbraio M, Podrez EA, Moore KJ, Andersson L, Koehn S, Rhee JS, Silverstein R, Hoff HF, Freeman MW. Scavenger receptors class A-I/II and CD36 are the principal receptors responsible for the uptake of modified low density lipoprotein leading to lipid loading in macrophages. J Biol Chem. 2002; 277(51):49982-8.

20. Febbraio M, Podrez EA, Smith JD, Hajjar DP, Hazen SL, Hoff HF, Sharma K, Silverstein RL. Targeted disruption of the class B scavenger receptor CD36 protects against atherosclerotic lesion development in mice. J Clin Invest. 2000;105(8):1049-56.

21. Suzuki H, Kurihara Y, Takeya M, Kamada N, Kataoka M, Jishage K, Ueda O, Sakaguchi H, Higashi T, Suzuki T, Takashima Y, Kawabe Y, Cynshi O, Wada Y, Honda M, Kurihara H, Aburatani H, Doi T, Matsumoto A, Azuma S, Noda T, Toyoda Y, Itakura H, Yazaki Y, Kodama T. A role for macrophage scavenger receptors in atherosclerosis and susceptibility to infection. Nature. 1997;386(6622):292-6.

22. Febbraio M, Hajjar DP, Silverstein RL. CD36: a class B scavenger receptor involved in angiogenesis, atherosclerosis, inflammation, and lipid metabolism. J Clin Invest. 2001;108(6):785-91.

23. Acton SL, Scherer PE, Lodish HF, Krieger M. Expression cloning of SR-BI, a CD36-related class B scavenger receptor. J Biol Chem. 1994; 269(33):21003-9.

24. Michelsen KS, Arditi M. Toll-like receptor signaling and atherosclerosis. Curr Opin Hematol. 2006; 13(3):163-8.

25. Stoll G, Bendszus M. Inflammation and atherosclerosis: novel insights into plaque formation and destabilization. Stroke. 2006; 37(7):1923-32.

26. Yan Z-Q, Hansson GK. Innate immunity, macrophage activation, and atherosclerosis. Immunol Rev. 2007; 219:187-203.

27. Newby AC. Matrix metalloproteinases regulate migration, proliferation, and death of vascular smooth muscle cells by degrading matrix and non-matrix substrates. Cardiovascular Research. 2006; 69(3):614-24.

28. Matsuura E, Lopez LR. Are Oxidized LDL/b2-glycoprotein I Complexes Pathogenic Antigens in Autoimmune-mediated Atherosclerosis? Clin Dev Immunol. 2004; 11(2): 103-11.

29. Folsom AR, Pankow JS, Tracy RP, et al. Association of C-reactive protein with markers of prevalent atherosclerotic disease. Am J Cardiol 2001; 88(2): 112— 117.

30. Hansson GK. Inflammation, Atherosclerosis, and Coronary Artery Disease. N Engl J Med. 2005 Apr 21;352(16):1685-95.

31. Potempa LA, Maldonado BA, Laurent P, Zemel ES, Gewurz H. Antigenic, electrophoretic and binding alterations of human C-reactive protein modified selectively in the absence of calcium. Mol Immunol. 1983 Nov; 20(11): 1165-75.

32. Potempa LA, Zeller JM, Fiedel BA, Kinoshita CM, Gewurz H. Stimulation of human neutrophils, monocytes, and platelets by modified C-reactive protein (CRP) expressing aneoantigenic specificity. Inflammation. 1988 Aug; 12(4):391-405.

33. Khreiss T, Jozsef L, Potempa LA, Filep JG. Conformational rearrangement in C-reactive protein is required for proinflammatory actions on humanendothelial cells. Circulation. 2004 Apr 27;109(16):2016-22.

34. Napoli С., F. de Nigris., Palinski W.J. Multiple role of reactive oxygen species in the arterial wall. J Cell Biochem. 2001; 82(4):674-82.

35. Moncada S. Prostacyclin and arterial wall biology. Arteriosclerosis. 1982 May-Jun; 2(3):193-207.

36. Огуркова О.Н., Суслова Т.Е., Левашкина Е.А., Кулагина И.В., Лихоманов К.С., Кошельская О.А. Изменение содержания окисленно-модифицированных липопротеинов низкой плотности и антител к ним при применении аторвастатина у больных с ишемической болезнью сердца. Сибирский медицинский журнал. 2008; 23(4):21-23.

37. Фефелова Е.В., Хышиктуев Б.С., Максименя М.В., Терешков П.П., Михайличенко С.И., Цыбиков Н.Н. Содержание окисленных липопротеинов низкой плотности и антител к ним у здоровых лиц и у пациентов с сердечно -сосудистой патологией. Дальневосточный медицинский журнал. 2013;1:6-8.

38. Berliner JA, Territo MC, Sevanian A, Ramin S, Kim JA, Bamshad B, Esterson M, Fogelman AM. Minimally modified low density lipoprotein stimulates monocyte endothelial interactions. J Clin Invest. 1990; 85(4):1260-6.

39. Glass CK, Witztum JL. Atherosclerosis. The road ahead. Cell. 2001;104(4):503-16.

40. Berliner JA, Subbanagounder G, Leitinger N, Watson AD, Vora D. Evidence for a role of phospholipid oxidation products in atherogenesis. Trends Cardiovasc Med. 2001; 11(3-4):142-7.

41. Liao F, Berliner JA, Mehrabian M, Navab M, Demer LL, Lusis AJ, Fogelman AM. Minimally modified low density lipoprotein is biologically active in vivo in mice. J Clin Invest. 1991; 87(6):2253-7.

42. Miller YI, Viriyakosol S, Binder CJ, Feramisco JR, Kirkland TN, Witztum JL. Minimally modified LDL binds to CD14, induces macrophage spreading via TLR4/MD-2, and inhibits phagocytosis of apoptotic cells. J Biol Chem. 2003; 278(3):1561-8.

43. Binder CJ, Chang MK, Shaw PX, Miller YI, Hartvigsen K, Dewan A, Witztum JL. Innate and acquired immunity in atherogenesis. Nat Med. 2002 Nov; 8(11): 1218-26.

44. Parumus DV, Brown DL, Mitchison MJ. Serum antibodies to oxidized low density lipoprotein and ceroid in chronic periaortitis. Arch Pathol Lab Med. 1990; 114(4):383-7.

45. Witztum JL. The oxidation hypothesis of atherosclerosis. Lancet. 1994; 344(8925):793-5.

46. Stemme S, Faber B, Holm J, Wiklund O, Witztum JL, Hansson GK. T lymphocytes from human atherosclerotic plaques recognize oxidized low-density lipoprotein. Proc Natl Acad Sci U S A. 1995; 92(9):3893-7.

47. Lopes-Virella MF, Virella G. Clinical significance of the humoral immune response to modified LDL. Clin Immunol 2010; 134:55-65.

48. Hansson GK, Hermansson A. The immune system in atherosclerosis. Nat Immunol 2011; 12:204-12.

49. Steinerova A, Racek J, Stozicky F, Zima T, Fialova L, Lapin A. Antibodies against oxidized LDL—theory and clinical use. Physiol Res 2001; 50:131-41.

50. Palinski W, Miller E, Witztum JL. Immunization of low density lipoprotein (LDL) receptor-deficient rabbits with homologous malondialdehyde-modified LDL reduces atherogenesis. Proc Natl Acad Sci U S A. 1995 Jan 31; 92(3):821-5.

51. Palinski W, Tangirala RK, Miller E, Young SG, Witztum JL. Increased autoantibody titers against epitopes of oxidized LDL in LDL receptor-deficient mice with increased atherosclerosis. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1995 Oct; 15(10):1569-76.

52. Garrido-Sánchez L, García-Fuentes E, Cardona F, Rojo-Martínez G, Soriguer F, Tinahones FJ. Anti-oxidized LDL antibody levels are reduced in women with hypertension. Eur J Clin Invest. 2009 Sep; 39(9): 800-6.

53. Salonen JT, Yla-Herttuala S, Yamamoto R, et al. Autoantibody against oxidised LDL and progression of carotid atherosclerosis. Lancet 1992; 339:883-7.

54. Virella I, Virella G, Leman RB, Pryor MB, Lopes-Virella MF. Anti-oxidized low-density lipoprotein antibodies in patients with coronary heart disease and normal healthy volunteers. Int J Clin Lab Res 1993; 23:95-101.

55. Maggi E, Finardi G, Poli M, et al. Specificity of autoantibodies against oxidized LDL as an additional marker for atherosclerotic risk. Coron Artery Dis 1993; 4:1119-22.

56. Puurunen M, Manttari M, Manninen V, Tenkanen L, Alfthan G, Ehnholm C, Vaarala O, Aho K, Palosuo T. Antibody against oxidized low-density lipoprotein predicting myocardial infarction. Arch Intern Med. 1994; 154(22):2605-9.

57. Bergmark C, Lervert AK, Swedenborg J. Patients with early-onset peripheral vascular disease have increased levels of autoantibodies against oxidized LDL. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1995; 15(4):441-5.

58. Holvoet P, Vanhaecke J, Janssens S, Van de Werf F, Collen D. Oxidized LDL and malondialdehide-modified LDL in patients with acute coronary syndromes and stable coronary artery disease. Circulation. 1998; 98(15):1487-94.

59. Ryan M, Owens D, Kilbride B, Collins P, Johnson A, Tomkin GH. Antibodies to oxidized lipoproteins and their relationship to myocardial infarction. QJM. 1998; 91(6):411-5.

60. Wu R, Nityanand S, Berglund L, Lithell H, Holm G, Lefvert AK. Antibodies against cardiolipin and oxidatively modified LDL in 50-year-old men predict myocardial infarction. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1997; 17(11):3159-63.

61. Van de Vijver LP, Steyger R, van Poppel G, Boer JM, Kruijssen DA, Seidell JC, Princen HM. Autoantibodies against MDA-LDL in subjects with severe and minor atherosclerosis and healthy populationcontrols. Atherosclerosis. 1996 May; 122(2):245-53

62. Tinahones FJ, Gomez-Zumaquero JM, Garrido-Sanchez L, et al. Influence of age and sex on levels of anti-oxidized LDL antibodies and anti-LDL immune complexes in the general population. J Lipid Res 2005;46:452-7.

63. Karvonen J, Paivansalo M, Kesaniemi YA, Horkko S. Immunoglobulin M type of autoantibodies to oxidized low-density lipoprotein has an inverse relation to carotid artery atherosclerosis. Circulation 2003; 108:2107-12.

64. Shaw PX, Horkko S, Tsimikas S, et al. Human-derived anti-oxidized LDL autoantibody blocks uptake of oxidized LDL by macrophages and localizes to atherosclerotic lesions in vivo. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2001; 21: 1333-9.

65. Burut DF, Karim Y, Ferns GA. The role of immune complexes in atherogenesis. Angiology 2010; 61:679-89.

66. Virella G, Lopes-Virella MF. Atherogenesis and the humoral immune response to modified lipoproteins. Atherosclerosis 2008; 200:239-46.

67. Yla-Herttuala S, Palinski W, Butler SW, Picard S, Steinberg D, Witztum JL. Rabbit and human atherosclerotic lesions contain IgG that recognizes epitopes of oxidized LDL. Arterioscler Thromb 1994; 14:32-40.

68. Saad AF, Virella G, Chassereau C, Boackle RJ, Lopes-Virella MF. OxLDL immune complexes activate complement and induce cytokine production by MonoMac 6 cells and human macrophages. J Lipid Res 2006; 47:1975-83.

69. Virella G, Atchley D, Koskinen S, Zheng D, Lopes-Virella MF. Proatherogenic and proinflammatory properties of immune complexes prepared with purified human oxLDL antibodies and human oxLDL. Clin Immunol 2002; 105:81 -92.

70. Bouma B, de Groot PG, van den Elsen JM, Ravelli RB, Schouten A, Simmelink MJ, et al. Adhesion mechanism of human b2-glycoprotein I to phospholipids based on its crystal structure. EMBO J 1999;18:5166-74.

71. Schwarzenbacher R, Zeth K, Diederichs K, Gries A, Kostner GM, Laggner P, et al. Crystal structure of human b2-glycoprotein I: implications for phospholipid binding and the antiphospholipid syndrome. EMBO J 1999; 18:6228-39.

72. Price BE, Rauch J, Shia MA, Walsh MT, Lieberthal W, Gilligan HM, et al. Anti-phospholipid autoantibodies bind to apoptotic, but not viable, thymocytes in a b2-glycoprotein I-dependent manner. J Immunol 1996; 157:2201-8.

73. Nimpf J, Wurm H, Kostner GM. b2-glycoprotein-I (apo-H) inhibits the release reaction of human platelets during ADP-induced aggregation. Atherosclerosis 1987; 63:109-14.

74. George J, Harats D, Gilburd B, Afek A, Levy Y, Schneiderman J, Barshack I, Kopolovik J & Shoenfeld Y. Immunolocalization of beta2-gpI (apolipoprotein H) to human atherosclerotic plaques: potential implications for lesion progression. Circulation 1999; 99: 2227-30.

75. Arvieux J, Roussel B, Colomb MG. Antiphospholipid and anti beta 2-glycoprotein I antibodies. Ann Biol Clin 1994; 52: 381-5.

76. Farsi A, Domeneghetti MP, Fedi S et al. High prevalence of anti-beta2-gpI antibodies in patients with ischemic heart disease. Autoimmunity 1999; 30: 93-8.

77. Ranzolin A, Bohn JM, Norman GL, Manenti E, Bodanese LC, von Mühlen CA, Staub HL. Anti-beta2-glycoprotein I antibodies as risk factors for acute myocardial infarction. Arq Bras Cardiol. 2004 Aug; 83(2):141-4; 137-40.

78. Vaarala O. Antiphospholipid antibodies and myocardial infarction. Lupus 1998; S2 132-4.

79. Limaye V, Beltrame J, Cook R, Gillis D, Pile K. Evaluation of antibodies to beta2-gpI in the causation of coronary atherosclerosis as part of the antiphospholipid syndrome. Aust NZ J Med 1999; 29: 789-93.

80. Morimoto RI. Cells in stress: transcriptional activation of heat shock genes. Science. 1993 Mar 5; 259(5100):1409-10.

81. Milkman R. Temperature effects on day old Drosophila pupae. J Gen Physiol. 1962 Mar; 45:777-99.

82. Madrigal-Matute J, Martin-Ventura JL, Blanco-ColioLM, Egido J, Michel JB, Meilhac O. Heat-shock proteins in cardiovascular disease. Adv Clin Chem. 2011; 54:1-43.

83. Xu Q, Metzler B, Jahangiri M, Mandal K. Molecular chaperones and heat shock proteins in atherosclerosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2012 Feb 1;302(3):H506-14.

84. Hartl FU. Heat shock proteins in protein folding and membrane translocation. Semin Immunol. 1991 Jan;3(1):5-16.

85. Roma P, Catapano AL. Stress proteins and atherosclerosis. Atherosclerosis. 1996 Dec 20;127(2):147-54.

86. Young RA, Elliott TJ. Stress proteins, infection, and immune surveillance. Cell. 1989 Oct 6; 59(1):5-8.

87. Wick G, Schett G, Amberger A, Kleindienst R, Xu Q. Is atherosclerosis an immunologically mediated disease? Immunol Today. 1995 Jan;16(1):27-33.

88. Wick G, Kleindienst R, Schett G, Amberger A, Xu Q. Role of heat shock protein 65/60 in the pathogenesis of atherosclerosis. Int Arch Allergy Immunol. 1995 May-Jun;107(1-3):130-1.

89. Kol A, Bourcier T, Lichtman AH, Libby P. Chlamydial and human heat shock protein 60s activate human vascular endothelium, smooth muscle cells, and macrophages. J Clin Invest. 1999 Feb;103(4):571-7.

90. Kol A, Sukhova GK, Lichtman AH, Libby P. Chlamydial heat shock protein 60 localizes in human atheroma and regulates macrophage tumor necrosis factor-a and matrix metalloproteinase expression. Circulation. 1998 Jul 28;98(4):300-7.

91. Xu Q, Schett G, Perschinka H et al. Serum soluble heat shock protein 60 is elevated in subjects with atherosclerosis in a general population. Circulation. 2000 Jul 4;102(1):14-20.

92. Dybdahl B, Sl0rdahl SA, Waage A, Kierulf P, Espevik T, Sundan A. Myocardial ischaemia and the inflammatory response: release of heat shock protein 70 after myocardial infarction. Heart. 2005 Mar; 91(3):299-304.

93. Xiao Q, Mandal K, Schett G et al. Association of serumsoluble heat shock protein 60 with carotid atherosclerosis: clinical significance determined in a follow-up study. Stroke. 2005 Dec; 36(12):2571-6.

94. Satoh M, Shimoda Y, Akatsu T, Ishikawa Y, Minami Y, Nakamura M. Elevated circulating levels of heat shock protein 70 are related to systemic inflammatory reaction through monocyte Toll signal in patients with heart failure after acute myocardial infarction. Eur J Heart Fail. 2006 Dec; 8(8):810-5.

95. Gombos T, Forhecz Z, Pozsonyi Z, Janoskuti L, Prohaszka Z. Interaction of serum 70-kDa heat shock protein levels and HspA1B (+1267) gene polymorphism with disease severity in patients with chronic heart failure. Cell Stress Chaperones. 2008 Summer; 13(2): 199-206.

96. Zhang X, He M, Cheng L et al. Elevated heat shock protein 60 levels are associated with higher risk of coronary heart disease in Chinese. Circulation. 2008 Dec 16;118(25):2687-93.

97. Knoflach M, Kiechl S, Kind M et al. Cardiovascular risk factors and atherosclerosis in young males: ARMY study (atherosclerosis risk-factors in male youngsters). Circulation. 2003 Sep 2;108(9):1064-9.

98. Kiechl S, Xu Q, Mayr M. et al. Association of serum antibodies to heat-shock protein 65 with carotid atherosclerosis: clinical significance determined in a follow-up study. Circulation. 1999 Sep 14;100(11):1169-74.

99. Huittinen T, Leinonen M, Tenkanen L et al. Autoimmunity to human heat shock protein 60, Chlamydia pneumoniae infection, and inflammation in predicting coronary risk. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2002 Mar 1; 22(3):431-7.

100. Foteinos G, Afzal A. R, Mandal K, Jahangiri M, Xu Q. Anti-heat shock protein 60 autoantibodies induce atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice via endothelial damage. Circulation. 2005 Aug 23; 112(8):1206-13.

101. Nicholls SJ, Brandrup-Wognsen G, Palmer M, Barter PJ. Meta-analysis of comparative efficacy of increasing dose of Atorvastatin versus Rosuvastatin versus Simvastatin on lowering levels of atherogenic lipids (from VOYAGER). Am J Cardiol. 2010 Jan 1;105(1):69-76.

102. Душкин М.И. Макрофаги и атеросклероз: патофизиологические и терапевтические аспекты. Бюллетень СО РАМН. - 2006. - № 2 (120). - С. 47-55.

103. Lehtimäki T, Lehtinen S, Solakivi T, Nikkilä M, Jaakkola O, Jokela H, Ylä-Herttuala S, Luoma JS, Koivula T, Nikkari T. Autoantibodies against oxidized low density lipoprotein in patients with angiographically verified coronary artery disease. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1999 Jan;19(1):23-7.

104. Uusitupa MI, Niskanen L, Luoma J, Vilja P, Mercuri M, Rauramaa R, Ylä-Herttuala S. Autoantibodies against oxidized LDL do not predict atherosclerotic vascular disease in non-insulin-dependent diabetes mellitus. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1996 Oct;16(10):1236-42.

105. Schumacher M, Eber B, Tatzber F, Kaufmann P, Halwachs G, Fruhwald FM, Zweiker R, Esterbauer H, Klein W. Transient reduction of autoantibodies against

oxidized LDL in patients with acute myocardial infarction. Free Radic Biol Med. 1995 Jun;18(6):1087-91.

106. Shoji T, Nishizawa Y, Fukumoto M, Shimamura K, Kimura J, Kanda H, Emoto M, Kawagishi T, Morii H. Inverse relationship between circulating oxidized low density lipoprotein (oxLDL) and anti-oxLDL antibody levels in healthy subjects. Atherosclerosis. 2000 Jan;148(1):171-7.

107. Fabris N. Plasticity of neuroendocrine-immune interactions during aging. Acta Neurol (Napoli). 1991 0ct;13(5):403-9.

108. Ennist DL, Jones KH, St Pierre RL, Whisler RL. Functional analysis of the immunosenescence of the human B cell system: dissociation of normal activation and proliferation from impaired terminal differentiation into IgM immunoglobulin-secreting cells. J Immunol. 1986 Jan;136(1):99-105.

109. Manolio T. Novel risk markers and clinical practice. N Engl J Med. 2003 0ct 23; 349(17):1587-9.