Применение мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека на лабораторной модели контузионной травмы спинного мозга тяжелой степени тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.18, кандидат наук Смирнов Владимир Александрович

• Смирнов Владимир Александрович
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Смирнов Владимир Александрович

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ ТРАВМЫ СПИННОГО МОЗГА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Актуальность темы

1.2. Патогенез травмы спинного мозга

1.3. Доступные методы лечения травмы спинного мозга

1.4. Место регенеративной медицины в лечении травмы спинного мозга

1.4.1. Подавление ингибиторов роста аксонов и нейротрофические факторы

1.4.2. Клеточная терапия

1.5. Применение клеток пуповинной крови человека (КПКЧ)

1.5.1. Преимущества клеток пуповинной крови

1.5.2. Состав пуповинно-плацентарной крови человека

1.5.3. Применение клеток пуповинной крови человека при травме

спинного мозга

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Состав экспериментальных групп

2.2. Модель ушиба спинного мозга у животных (крысы)

2.3. Получение, обработка и введение концентрата клеток пуповинно-плацентарной крови человека животным моделям

2.4. Оценка двигательной активности задних конечностей животных в открытом поле

2.5. Методы оценки двигательной активности задних конечностей у животных с применением нагрузочных тестов

2.5.1. Плавательный тест

2.5.2. Вращающийся барабан Ротарод

2.5.3. Тест с сужающейся дорожкой

2.6. Гистологический анализ

2.7. Статистический анализ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Оценка безопасности клеточной терапии

3.2. Оценка эффективности клеточной терапии у животных с ушибами спинного мозга тяжелой степени в открытом поле

3.3. Применение нагрузочных тестов Ротарод и «Сужающаяся дорожка»

3.4. Оценка дисперсии угла сгибания в суставах задних конечностей в плавательном тесте

3.5. Сравнение эффективности внутривенного и внутриспинального проведения клеточной терапии у животных с ушибами спинного мозга

3.6. Гистологический анализ структуры повреждения спинного мозга

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

АД - артериальное давление.

ГБО - гипербарическая оксигенация.

ДК - дендритные клетки.

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота.

ИЛ - интерлейкин.

ИФНу - интерферон-гамма.

КПКЧ - клетки пуповинной крови человека.

МРТ - магнитно-резонансная томография.

МСК - мезенхимальные стволовые клетки.

НПВС - нестероидные противовоспалительные средства.

НСК - нейрональные стволовые клетки.

ПСМТ - позвоночно-спинномозговая травма.

РТПХ - реакция трансплантат-против-хозяина.

СК - стволовые клетки.

СРБ - С-реактивный белок.

ССВП - соматосенсорные вызванные потенциалы.

ТМО - твердая мозговая оболочка.

ТСМ - травма спинного мозга.

ФНОа - фактор некроза опухолей-альфа.

ЦНС - центральная нервная система.

ШК - шванновские клетки.

ЭСК - эмбриональные стволовые клетки.

ASIA - Американская ассоциация спинальной травмы (American spine injury association).

BDNF - нейротрофический фактор мозга (brain-derived neurotrophic factor). bFGF - основной фактор роста фибробластов (basic fibroblast growth factor). BMP - костный морфогенный белок (bone morphogenic protein). BrdU - бромдезоксиуридин.

CD - кластер дифференцировки (cluster of differentiation). CNTF - цилиарный нейротрофический фактор (ciliary neurotrophic factor). ES-like SCs - эмбриональноподобные стволовые клетки (embryonic cell-like stem cells).

FDA - Управление по санитарному надзору за пищевыми продуктами и медикаментами (Food and Drug Administration).

GCSF - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (granulocyte colony-stimulating factor).

GDNF - глиальный нейротрофический фактор (glial-derived neurotrophic factor).

GFAP - глиальный фибриллярный кислый белок (glial fibrillary acidic protein). GLP - рекомендации по лабораторной практике (Good Laboratory Performance).

GPCs - глиальные клетки-предшественники (glial progenitor cells). HGF - гепатоцитарный фактор роста (hepatocyte growth factor). HLA - антигены лейкоцитов человека (human leucocyte antigens). IGF - инсулиноподобный фактор роста (insulin-like growth factor). iPSCs - индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (induced pluripotent stem cells).

MAP - связанный с микротрубочками белок (microtubule-associated protein). MAPCs - взрослые мультипотентные прогениторные клетки (multipotent adult progenitor cells).

MBP - основной белок миелина (myelin basic protein).

MHC - главный комплекс гистосовместимости (major histocompatibility

complex).

MPs - предшественники мотонейронов (motoneuron progenitors). MPSCs - мультипотентные стволовые клетки (multipotent stem cells). NCC - клетки нервного гребня (neural crest cells). NGF - фактор роста нервов (nerve growth factor). NO - оксид азота.

NPCs - нейрональные клетки-предшественники (neural progenitor cells). NT - нейротрофин.

OECs - клетки ольфакторной выстилки (olfactory ensheating cells).

OPCs - предшественники олигодендроцитов (oligodendrocyte progenitor cells).

PLP - протеолипидный белок (proteolipid protein).

PNS - первичные нейросферы (primary neurospheres).

SD - среднеквадратичное отклонение (standard deviation).

SNS - вторичные нейросферы (secondary neurospheres).

USSCs - соматические стволовые клетки с неограниченным потенциалом

(unresctricted somatic stem cells).

VEGF - эндотелиальный фактор роста (vascular endothelial growth factor).

ВВЕДЕНИЕ.

Осложненная позвоночно-спинальная травма (ПСМТ) является распространенным видом повреждения в современном обществе. Высокая активность современной жизни, большое число падений и иных форм кататравмы, значительное увеличение числа автомобилей и других механизированных средств передвижения, в том числе слабо защищенных (мотоциклы, квадроциклы, снегоходы и др.), являются причинами высокой частоты подобных форм повреждений.

За последние 2 десятилетия в хирургии позвоночника произошли большие изменения. Современные технологии позволяют выполнять с позвоночным столбом любые манипуляции: фиксировать позвонки, укорачивать и удлинять позвоночник, корректировать его ось и при этом создавать надежный спондилодез (костный блок), однако лечение повреждений самого спинного мозга ограничено лишь несколькими малоэффективными способами. При этом доступные и рутинно применяемые методы терапии являются сугубо симптоматическими и не обеспечивают воздействие на звенья патогенеза травматического процесса.

Одним из новых, недостаточно изученных, но наиболее многообещающих направлений, актуальных для пациентов с травмой спинного мозга (ТСМ), является регенеративная медицина. С момента появления первых сообщений о возможности применения регенеративных технологий и, в частности, клеточной терапии при заболеваниях и травмах центральной нервной системы в 1970-х годах эффективность регенеративных технологий неоднократно оценивали и при травме спинного мозга. Хорошие результаты, полученные в подобных работах, позволяют надеяться на то, что регенеративная медицина может стать способом эффективного лечения этих тяжелых повреждений [84, 189].

В России в силу объективных причин экономического характера подобные лабораторные, доклинические и клинические исследования

распространены в значительно меньшей степени, чем в некоторых западных странах. Однако необходимость поиска эффективных средств лечения повреждений спинного мозга и актуальность проблемы для клинической медицины не становятся от этого ниже.

В 2012 - 2017 годах на базе нескольких учреждений здравоохранения города Москвы был проведен ряд доклинических и клинических исследований, посвященных оценке эффективности применения клеточной терапии, в частности - с применением мононуклеарных клеток пуповинной крови человека (КПКЧ) при травме спинного мозга. В данной работе представлены результаты доклинического исследования, которые позволяют предполагать, что применение клеточной терапии является безопасным и эффективным методом лечения травмы спинного мозга и может в будущем применяться для лечения пациентов с осложненной ПСМТ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека на лабораторной модели контузионной травмы спинного мозга тяжелой степени»

Цель работы.

Оценить безопасность и эффективность применения мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека при контузионной травме спинного мозга тяжелой степени у животных моделей.

Задачи работы.

1. Оценить безопасность применения мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека, исключить наличие побочных явлений и осложнений либо аллергических реакций при применении клеточной терапии у животных моделей травмы спинного мозга (крысы).

2. Оценить воспроизводимость применяемой модели травмы спинного мозга и применимость различных методов функциональной оценки двигательной активности конечностей при ушибах спинного мозга тяжелой степени у животных.

3. Оценить эффективность воздействия мононуклеарных клеток пуповинной крови человека у животных моделей контузионной травмы

спинного мозга тяжелой степени на двигательную активность задних конечностей.

4. Определить оптимальные сроки и пути введения клеток пуповинно-плацентарной крови человека при ушибах спинного мозга тяжелой степени у животных моделей.

Положения, выносимые на защиту.

1. Применение мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека является безопасным методом терапии, не имеет стойких и серьезных побочных эффектов, не вызывает осложнений и аллергических реакций как у животных, так и у человека.

2. Модель контузионной травмы спинного мозга тяжелой степени у животных является высоко воспроизводимой и соответствует необходимых требованиям, предъявляемым к доклиническим исследования методов лечения травмы спинного мозга.

3. Оптимальными методами оценки двигательного дефицита у малых животных с ушибами спинного мозга тяжелой степени является оценка в открытом поле и плавательный тест. При контузионной травме тяжелой степени, в отличие среднетяжелой травмы, нагрузочные тесты (Ротарод, сужающаяся дорожка) не обладают достаточной чувствительностью, не отражают динамику восстановления и не могут эффективно применяться в исследованиях.

4. Системное введение мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека животным моделям контузионной травмы спинного мозга тяжелой степени способствует восстановлению двигательной активности задних конечностей и объема движений в крупных суставах задних конечностей (тазобедренном, коленном, голеностопном).

5. Системное применение мононуклеарных клеток пуповинно -плацентарной крови человека является безопасным и эффективным методом лечения ушибов спинного мозга тяжелой степени у животных

и может в дальнейшем применяться в клинических исследованиях у пациентов с ушибами спинного мозга.

Научная новизна.

1. Выполнено подтверждение безопасности применения клеток пуповинной крови человека у животных моделей ушиба спинного мозга.

2. Проведен анализ эффективности воздействия регенеративных технологий на восстановление двигательной функции конечностей у животных с травмой спинного мозга.

3. Проведен анализ воспроизводимости применяемой модели травмы спинного мозга у животных и применимости различных методов оценки двигательной функции при тяжелой контузионной травме спинного мозга.

4. Проведено сравнение эффективности клеточной терапии в лечении контузионной травмы спинного мозга у животных в различные сроки, а также при различных путях введения клеток.

5. Проведена оценка возможности организации клинических исследований на основании результатов доклинической работы на животных моделях.

Практическая значимость.

1. В проведенном исследовании доказана безопасность применения мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека у животных.

2. Результаты исследования свидетельствуют о соответствии применяемой модели травмы спинного мозга поставленным задачам, высоком уровне воспроизводимости модели.

3. Полученные данные свидетельствуют о необходимости четкого отбора и градации применяемых методов оценки двигательной активности в доклинических исследованиях.

4. В проведенном исследовании доказана эффективность клеточной терапии при контузионной травме спинного мозга тяжелой степени у животных.

5. Результаты исследования позволяют рассматривать данный метод клеточной терапии как эффективный способ лечения ушибов спинного мозга и в дальнейшем формировать протоколы клинических исследований для оценки безопасности и эффективности клеточной терапии у человека.

Апробация работы.

Основные положения диссертации доложены на:

1. I Национальном конгрессе по регенеративной медицине. - Москва. - 2013 г.

2. Симпозиуме «Новейшие методы клеточных технологий в медицине». -Новосибирск. - 2014 г.

3. Съезде европейской ассоциации нейрохирургов EANS-2014. - Прага, Чехия. - 2014 г.

4. Четырнадцатой всероссийской научно-практической конференции «Поленовские чтения». - Санкт-Петербург. - 2015 г.

5. Седьмом всероссийском съезде нейрохирургов. - Казань. - 2015 г.

6. II Национальном конгрессе по регенеративной медицине. - Москва. -

2015 г.

7. Восьмом международном ежегодном конгрессе по регенеративной медицине и стволовым клеткам (BIT 8th Annual World Congress on Regenerative Medicine and Stem Cells). - Пусан, Корея. - 2015 г.

8. Образовательном цикле «Спинальная нейрохирургия». - Петрозаводск. -

2016 г.

9. Пятнадцатой всероссийской научно-практической конференции

«Поленовские чтения». - Санкт-Петербург. - 2016 г.

10. Конгрессе российского общества радиологов и рентгенологов. - Москва.

- 2017 г.

11. Заседаниях проблемно-плановой комиссии НИИ СП имени Н.В.

Склифосовского. - Москва. - 2015-2018 гг.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 14 печатных работ в виде статей и тезисов в отечественных и зарубежных журналах и сборниках материалов конференций, из которых 9 опубликовано в изданиях, входящих в перечень рецензируемых научных изданий ВАК.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов и списка литературы (содержащего 9 отечественных и 193 зарубежных источников). Текст диссертации изложен на 137 страницах, включает 17 рисунков и 5 таблиц.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ ТРАВМЫ СПИННОГО МОЗГА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Актуальность.

Травма спинного мозга (ТСМ) - это повреждение структуры центральной нервной системы (ЦНС), развивающееся вследствие переломов и/или вывихов позвонков различных отделов позвоночного столба. В структуре всех видов травматических повреждений элементов ЦНС травма спинного мозга занимает далеко не первое место [1], однако тяжесть состояния пациента и, по сути, практически полное отсутствие эффективных патогенетических методов лечения делают эту патологию серьезной проблемой для современной медицины.

В современном миречастота травмы спинного мозга постоянно растет. Среди взрослых людей частота ТСМ составляет, в среднем, 5 случаев на 100 тысяч населения в год [з]. В России более 80% пострадавших составляют мужчины наиболее активного и трудоспособного возраста - до 30 лет [5, 71]. Частота травмы спинного мозга в России составляет примерно 90 случаев на 1 млн. населения в год (для травмы позвоночника - примерно 130 тыс. человек в год, из них 13 тыс. с нижней параплегией или тетраплегией) [3, 5].

По структуре повреждения нервной ткани наиболее часто встречается ушиб спинного мозга (контузионная травма/контузия спинного мозга) [5, 37, 62]. При ушибе спинного мозга развиваются структурные изменения в веществе мозга, корешках, оболочках, сосудах, такие как очаговый некроз, размягчение, кровоизлияния. Ушиб спинного мозга приводит к развитию двигательных и чувствительных нарушений, нарушению функции тазовых органов, вегетативным расстройствам, характер которых определяется уровнем и структурой повреждения. При контузионной травме часть волокон, находящихся в зоне повреждения, сохраняют свою жизнеспособность и, в конечном счете, могут обеспечить частичное восстановление функций

спинного мозга, хотя полностью эти функции восстанавливаются редко [з, 5, 53, 125,169].

Другим вариантом повреждения является разрыв или разволокнение спинного мозга [5, 37, 148]. Этот вариант является наиболее неблагоприятным для пациента и характеризуется значительно большим повреждением ткани спинного мозга и гибелью основной части аксонов. При таком типе повреждения функции спинного мозга обычно не восстанавливаются либо восстанавливаются незначительно [125]. Подобное разделение по структуре и характеру травмы имеет большое значение для формирования подходов к лечению тех или иных форм повреждения и, в рамках возможной регенеративной и клеточной терапии, требуют различных путей введения лекарственных агентов и методов реабилитации пациента.

1.2. Патогенез травмы спинного мозга.

Патогенез травмы спинного мозга можно условно разделить на 2 основные стадии, включающие различные механизмы повреждения - стадии первичного и вторичного повреждения [3, 51].

Первичное повреждение ткани спинного мозга происходит непосредственно в момент травмы и обусловлено прямым воздействием фрагментов поврежденных позвонков и межпозвонковых дисков на ткань спинного мозга с последующей контузией либо компрессией последней, а также повреждением кровеносных сосудов спинного мозга и развитием мелких кровоизлияний [3, 37, 169].

Вторичное повреждение спинного мозга является многокомпонентным процессом, продолжающимся с момента травмы в течение длительного времени. Механизмы вторичного повреждения разнообразны: к ним относятся электролитные нарушения, ишемия, эксайтотоксичность, оксидативный стресс, воспалительный процесс. Результатом действия различных факторов вторичного повреждения является массивная гибель нейронов и их аксонов в зоне повреждения, сначала путем некроза, а в дальнейшем начинает

преобладать апоптоз [3, 37, 169]. Гибель олигодендроцитов, к примеру, приводит к демиелинизации волокон и усугублению проводниковых нарушений в области травмы [3, 37, 56, 144, 158]. Важным фактором является развитие валлеровской/валлериановской дегенерации - антероградной дегенерации поврежденных аксонов спинного мозга. Этот процесс запускается с 1 -3 суток после травмы и продолжается до 2-3 недель. Повреждение гематоэнцефалического барьера приводит к инфильтрации вещества спинного мозга иммунными клетками крови (в первую очередь, нейтрофилами и макрофагами), что поддерживает развитие воспалительного процесса. Что важно, активированные клетки иммунной системы, в первую очередь макрофаги, стимулируют активацию и пролиферацию клеток микроглии и экспрессию моноцитарных хемоаттрактантов, что также усугубляет воспалительный процесс и стимулирует образование глиального компонента рубца. Все это приводит к гибели большого числа клеток и аксонов спинного мозга, причем это число превашает таковое в момент действия травмирующего агента [56, 80, 158]. В последующем постепенно действие вторичных факторов повреждения ослабевает. Через 4-6 недель после травмы отмечается регресс отека в зоне повреждения, активность посттравматического воспалительного процесса снижается примерно через 3 месяца после травмы. В последующем преобладают хронические медленно протекающие процессы формирования новой структуры спинного мозга в зоне повреждения.

Примерно через 4-6 месяцев после травмы начинается стадия, называемая в ангоязычной литературе "хронической травмой", или стадия последствий травмы спинного мозга. При этом отмечается окончательное формирование посттравматической кисты и окружающего ее рубца. Присутствие в зоне повреждения макрофагов способствует миграции в область повреждения фибробластов, которые стимулируют фиброзные процессы и формируют соединительнотканный (фиброзный) рубец, окружающий астроглиальный. В контексте структуры области повреждения целесообразно говорить о комплексной кистозно-глиально-фиброзной трансформации поврежденных

отделов спинного мозга. Глиально-фиброзный рубец не только является механическим барьером на пути восстановления аксонов, но и подавляет процессы нейрорегенерации и нейрорепарации химическим путем. Также в рубце наблюдается активная демиелинизация волокон в результате дефицита олигодендроцитов. Также во многих случаях в отдаленном периоде (через 1-2 года после травмы) наблюдается развитие ретроградной дегенерации, усугубляющей неврологический дефицит и способствующей дальнейшему снижению качества жизни спинальных больных пациентов, перенесших травму спинного мозга [15, 34, 82, 149, 158].

1.3. Доступные методы лечения травмы спинного мозга.

На сегодняшний день эффективных методов патогенетического лечения травмы спинного мозга не сушествует. Все применяемые методы терапии являются либо симптоматическими, либо экспериментальными. В иных случаях некоторые способы терапии применяются безосновательно и не подтверждают свою эффективность выше уровня доказательности Э.

Доступные на сегодняшний день методы лечения травмы спинного мозга можно условно разделить на 4 группы - хирургические, физические, фармакологические и биологические методы, или технологии регенеративной медицины [158].

Наиболее широко применяемыми методами являются методы хирургического лечения. Учитывая, что травматические повреждения спинного мозга в подавляющем большинстве случаев обусловлены контузией или компрессией костными структурами, По сути, хирургическая декомпрессия является, с одной стороны, обязательным условием лечения пациентов, а с другой стороны, методом не столько лечения травмы спинного мозга, сколько создания условий для его дальнейшего самовосстановления. Однако на структуру спинного мозга и очага повреждения хирургия не оказывает никакого регенеративного или репаративного действия.

С другой стороны, при наличии нестабильности позвоночного столба либо вынужденной дестабилизации отдельных сегментов в процессе декомпрессии вопрос о необходимости стабилизации не стоит - в этом случае применение стабилизирующих систем является обязательным условием лечения. В целом, в подавляющем большинстве случаев при наличии у пациента осложненной травмы позвоночника проведение комбинированных декомпрессивно-стабилизирующих хирургических вмешательствявляется золотым стандартом [5, 6, 94, 136, 158, 188].

Во многих экспериментальных и клинических исследованиях было показано, что возможность восстановления функций спинного мозга тем выше, чем ранее проводится декомпрессия невральных структур [7, 66, 71, 136, 187]. Учитывая, что факторы вторичного повреждения начинают воздействовать с момента травмы, а компрессия невральных структур в значительной степени усиливает действие этих факторов, чем ранее устраняется сдавление спинного мозга, тем выше шансы на более полноценное восстановление. В крупном многоцентровом клиническом исследовании БТАБСТБ было показано, что проведение декомпрессии спинного мозга в первые 24 часа после травмы способствует повышению шансов на регресс неврологического дефицита на 43% и более по сравнению с более поздней декомпрессией [66, 180].

Вторая группа методов терапии - физические методы лечения -направлены преимущественно на подавление действия вторичных факторов повреждения. Наиболее часто в практической медицине используются гипотермия [10, 162], гипербарическая оксигенация [43, 98] и лечебная физкультура [74], в том числе с применением дополнительного оборудования (тредмилл, механические велоэргометры, экзоскелеты). Данные методы широко применяются в реабилитации пострадавших с травмой спинного мозга в силу простоты, высокой воспроизводимости и относительно невысокой стоимости, однако их эффективность в значительной степени ограничена.

К методам фармакологического воздействия относится применение различных лекарственных препаратов, направленных на предотвращения или

подавления развития вторичных факторов повреждения. Их применение, фактически, также является симптоматическим методом лечения и не способно эффективно и полноценно изменять патогенез травматического процесса. Однако, учитывая даже минимальное положительное воздействие, оказываемое этими препаратами, их применение в условиях "катастрофы в ЦНС" полностью оправдано.

Наиболее часто и широко при ушибах спинного мозга применяются кортикостероидные препараты, такие как дексаметазон и метилпреднизолон. Необходимость в применении стероидов при травме спинного мозга является спорным аспектом терапии и до сих пор не доказана. В трех крупных многоцентровых рандомизированных ослепленных исследованиях NASCIS было показано, что кортикостероиды оказывают противовоспалительное действие, предотвращают развитие отека в области повреждения, стимулируют кровоток в нервной ткани, стабилизируют клеточные мембраны, подавляют процесс пероксидного окисления липидов и, соответственно, образование свободных радикалов [18, 22, 23, 89, 123]. Однако со временем было показано, что эффективность кортикостероидной терапии сохраняется в течение лишь нескольких часов после травмы, тогда как длительное применение препаратов связано с множеством тяжелых побочных эффектов [59, 60, 88]. В настоящее время многие авторы склоняются к тому, что применение кортикостероидов при травме спинного мозга не оказывает достаточного терапевтического действия и не способствует восстановлению двигательной функции, вызывая при этом больше осложнений со стороны желудочно-кишечного тракта; по их мнению, применение стероидов в данном случае не оправдано. В 2013 году обновленные рекомендации ассоциации нейрохирургов под редакцией Walters et al. (2013) по лечению травмы спинного мозга содержали указание на отсутствие необходимости в применении стероидов при травме спинного мозга и более высокое число осложнений. Однако вопрос о необходимости введения пациентам с травмой спинного мозга стероидов остается дискутабельным и до сих пор открыт; тем не менее, многие

медицинские центры отказались от применения метилпреднизолона при травме спинного мозга либо ограничивают лечение коротким курсом (до 3 дней после травмы) [59, 67].

Активным противовоспалительным действием обладают некоторые другие препараты, такие как нестероидные противовоспалительные средства (НПВС) [54, 101, 122] и ганглиозиды (производные сиаловой кислоты) [33, 196], однако их эффективность по результатам исследований также незначительна [155, 165]. Подавление свободнорадикальных механизмов, пероксидации липидов и окислительного повреждения белков также может быть эффективным в лечении травмы спинного мозга. Для этого в ряде исследований применяли антиоксиданты и блокаторы свободных радикалов [81, 118].

Некоторые препараты, применяемые в иных областях медицины, обладают определенной нейропротективной активностью, например, аторвастатин [50, 142], эритропоэтин [77, 87], блокаторы кальциевых каналов, такие как нимодипин [135, 166], селективный блокатор кальциевых каналов типа КСа3.1 триарилметан-34 (ТЯАМ-34) [21] или аминопиридин [54]. Как и в случае с другими лекарственными средствами, применение данных препаратов дает лишь незначительный положительный эффект.

1.4. Место регенеративной медицины в лечении травмы спинного мозга.

Особенное место в терапии повреждений ЦНС отведено регенеративным технологиям. В последнее время представления о структуре и функциях ЦНС существенно изменились. В 1980-90-х годах XX века ЦНС представляли как закрытую систему, не способную к восстановлению. С середины 1990-х годов стали появляться первые указания на существование нейропластичности [42, 92, 109]. Также были обнаружены тканеспецифичные нейрональные стволовые клетки (НСК), сохраняющиеся на протяжении жизни человека в определенных структурах головного и спинного мозга, таких как субвентрикулярная зона боковых желудочков, гиппокамп и зубчатая извилина, а также эпендима

центрального канала спинного мозга [72, 73, 150]. На этом фоне возможность использования регенеративного потенциала ЦНС стала реальностью.

Во многих экспериментальных, доклинических и ряде клинических исследований в разные годы было показано, что методы регенеративной медицины, применяемые в нужное время и в нужных условиях, способны обеспечить восстановление структуры и функций головного и спинного мозга при повреждениях, ишемических нарушениях и нейродегенеративных заболеваниях [20, 40, 63, 97, 130, 131, 139, 143, 144, 151, 159, 169, 174]. В отличие от описанных выше методов лечения, регенеративная медицина обеспечивает воздействие на звенья патологенеза патологического процесса, то есть, по сути, является единственно возможным патогенетическим лечением.

На сегодняшний день в рамках регенеративной медицины исследовали эффективность применения ростовых и нейротрофических факторов, генно-инженерной терапии и, что особенно важно, клеточной терапии.

1.4.1. Подавление ингибиторов роста аксонови нейротрофические факторы.

В 1988 году Schwab и Caroni (1988) открыли молекулы, входящие в состав миелиновых оболочек и препятствующие росту аксонов в ЦНС и периферической нервной системе [32]. Одним из наиболее активных белков этого ряда был гликопротеин 250-kDa, впоследствии названный Nogo-A [31]. В конце 1990-х годов были разработаны антитела, подавляющие активность Nogo-A-IN-1 [27]. Было показано, что эффективное подавление активности Nogo-A способствует восстановлению проводящей функции спинного мозга, стимулирует регенерацию и рост аксонов кортикоспинального пути [27, 32, 161]. Позднее был разработан другой ингибиторактивности Nogo - NEP 1-40. Также была доказана эффективность применения NEP 1-40 при травме спинного мозга у животных [78, 110]. Сравнение эффективности ингибиторов у крупных животных (обезьяны) показало, что применение блокирующих антител оказывается существенно эффективнее [69, 173]. В литературе также описано применение других химических и биологических молекул -

растворимой формы NgR [111], иммунизации рекомбинантными формами Nogo-66 и MAG [168], рекомбинантной ДНК-вакциной [197].

Другой мишенью является биохимическая система Rho [52]. Молекула Rho участвует в трансдукции сигналов от межклеточного матрикса к белкам цитоскелета нейронов [172]. На животных моделях было показано, что подавление активности Rho обеспечивает полимеризацию волокон актина и стимулирует восстановление и рост аксонов. Для подавления активности Rho может применяться фермент трансфераза С3 [93], при этом как in vitro, так и in vivo наблюдается активный рост аксонов ЦНС [49]. Вначале 2000-х годов был разработан препарат Cethrin, показавший ограниченную эффективность в лечении повреждений спинного мозга [64], однако исследование было завершено досрочно в связи с большим числом побочных эффектов препарата.

Другой группой биологически активных препаратов, воздействующих на регенеративный потенциал ЦНС являются трофические факторы, присутствующие в организме в естественных условиях и регулирующие процессы роста, развития и функционирования нервной ткани. Каждый из известных нейротрофических факторов имеет свои особенности и точки воздействия. Фактор роста нервов (NGF) способствует росту и регенерации холинергических мотонейронов, первичных ноцицептивных аксонов и церулоспинальных норадренергических аксонов [79, 184]. Нейротрофический фактор мозга (BDNF) способствует регенерации рафеспинальных, руброспинальных и ретикулоспинальных моторных волокон, а также проприоцептивных чувствительных волокон [28, 105]. Нейротрофин-3 (NT3) близок по структуре и функциям к BDNF, но воздействует также на кортикоспинальный тракт [185]. В литературе показано, что некоторые нейротрофические факторы, такие как NT3, NGF и глиальный нейротрофический фактор (GDNF), способствуют восстановлению поврежденных аксонов спинного мозга, их росту и формированию синапсов [24, 153]. Основной фактор роста фибробластов (bFGF), эндотелиальный фактор роста (VEGF) и GDNF также эффективны при травме спинного мозга,

однако их эффективность ниже таковой истинно нейротрофических факторов [16, 61]. Что важно, практически во всех исследованиях улучшение показателей при применении трофических факторов оценивалось гистологически, тогда как функциональное и клиническое восстановление оставалось незначительным либо умеренным. Во многих исследованиях авторы сравнивали эффективность различных комбинаций нейротрофических факторов [28, 105, 153]. В разных работах были получены крайне неоднозначные и часто противоречащие друг другу результаты. Тем не менее, большинство исследователей сходятся в одном - применение любых сочетаний ростовых и трофических факторов оказывается менее эффективным, чем применение клеточной терапии.

1.4.2. Клеточная терапия.

На сегодняшний день считается, что различные стволовые и прогениторные клетки организма обладают несколькими механизмами регенеративного и репаративного действия: (1) паракринная активность, обусловленная секрецией различных трофических и протективных факторов, способствующих выживанию клеток и волокон, их регенерации и репарации; (2) стимуляция активности эндогенных стволовых и прогениторных клеток организма (в случае ЦНС речь идет об эндогенных тканеспецифичных нейрональных стволовых клетках); (3) прямое регенеративное и репаративное действие, обеспечиваемое воздействием стволовых клеток на поврежденные структуры (например, прямое подавление апоптоза или воздействие на внутриклеточную теломеразу); (4) противовоспалительное действие (предотвращение инфильтрации поврежденныхтканей иммунными клетками, подавление высвобождения провоспалительных цитокинов); (5) ангиогенный эффект (стимуляция пролиферации клеток эндотелия, формирования новых сосудов микроциркуляторного русла и оптимизация кровообращения в области повреждения); (6) прямая дифференцировка в клеточные элементы поврежденной ткани [113, 132, 191].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Смирнов Владимир Александрович, 2019 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Бабиченко Е.И. Травматическая болезнь спинного мозга.// Нейротравматология: Под ред. А.Н.Коновалова, Л.Б.Лихтермана, А.А.Потапова. М.: Вазар-Ферро. - 1994,- С. 292-294.

2. Белова А.Н. Патологические последствия обездвиженности.// Нейрореабилитация: Руководство для врачей. - 2000. - Москва, «Антидор». -122 с.

3. Исаев А.А., Мелихова В.С. Применение клеток пуповинной крови в клинической практике / Исаев А.А., Мелихова В.С. // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия.-2008.-Том III.-№ 1.-СС. 34-43.

4. Козлова А.В., Гусев Е.И., Коновалов А.Н., Скворцова В.И. Неврология и нейрохирургия/ под ред. А.Н. Коновалова: учебник: в 2 т. - т.2, 2009. - 420 с.

5. Крылов В.В., Гринь А.А. и соавт. Клинические рекомендации по лечению острой осложненной и неосложненной травмы позвоночника у взрослых.//Правление ассоциации нейрохирургов России, Нижний Новгород. -2013,- С. 1-43.

6. Крылов В.В., Гринь А.А. Травма позвоночника и спинного мозга. - М., 2014, 420 с.

7. Лившиц А.В. Хирургия спинного мозга. - М., 1990.

8. Разрешение на применение новой медицинской технологии ФС № 2010/342 от 21.09.2010 г. «Получение, характеристика и криогенное хранение концентрата стволовых клеток человека» - сайт криобанка пуповинной крови ООО «КриоЦентр» (www. cryocenter.ru).

9. Росстат, Сведения о числе зарегистрированных родившихся, умерших, браков и разводов за 2014, 2015, 2016 годы - сайт Федеральной службы государственной статистики (www.gks.ru).

10. Albin M.S., White R.J. Epidemiology, physiopathology, and experimental therapeutics of acute spinal cord injury / Albin M.S., White R.J. // Crit Care Clin.-1987.-3(3).-PP. 441-452.

11. Ali H., Bahbahani H. Umbilical cord blood stem cells - potential therapeutic tool for neural injuries and disorders / Ali H., Bahbahani H.// Acta Neurobiol Exp.-2010.-№70.-PP. 316-324.

12. American Spinal Injury Association. Standards for neurological classification of spinal injury patients. Chicago, IL: AmericanSpinalInjuryAssociation; 1982.

13. Arvanian et al. Combined delivery of neurotrophin-3 and NMDA receptors 2D subunit strengthens synaptic transmission in contused and staggered double hemisected spinal cord of neonatal rat. / Arvanian V.L., Bowers W.J., Anderson A., Horner P.J., Federoff H.J., Mendell L.M. // Exp. Neurol.-2006.-Vol.197(2).-PP.347-352.

14. Basso, D.M., Beattie, M.S., Bresnahan, J.C. A sensitive and reliable locomotor rating-scale for open-field testing in rats / Basso, D.M., Beattie, M.S., Bresnahan, J.C.// J. Neurotrauma. -1995. -№ 12.- PP. 1-21.

15. Beattie, M. S. et al. Cell death in models of spinal cord injury / Beattie, M. S.; Hermann, G. E.; Rogers, R. C.; Bresnahan, J. C. //Prog. Brain Res.-2002.- № 137.-PP. 37-47.

16. Blesch, A., Tuszynski, M.H. Cellular GDNF delivery promotes growth of motor and dorsal column sensory axons after partial and complete spinal cord transections and induces remyelination / Blesch, A., Tuszynski, M.H.// J. Comp. Neurol.-2003.-№ 467.-PP. 403-417.

17. Boruch, A.V. et al. Neurotrophic and migratory properties of an olfactory ensheathing cell line / Boruch, A.V., Conners, J.J., Pipitone, M., Deadwyler, G., Storer, P.D., Devries, G.H., Jones, K.J. // Glia.-2001.- № 33.-PP. 225-229.

18. Botelho R.V. et al. Effectiveness of methylprednisolone in the acute phase of spinal cord injuries: a systematic review of randomized controlled trials / Botelho R.V., Daniel J.W., Boulosa J.L.R., Colli B.O., Farias R.L., Moraes O.J.S. // Rev Assoc Med Bras.-2009.- №55(6).- PP. 729-737.

19. Bottai D., Madaschi L., Di Giulio A.M. et al. Viability-dependent promoting action of adult neural precursors in spinal cord injury / Bottai D., Madaschi L., Di Giulio A.M., Gorio A. // Mol. Med. (Cambridge, MA).-2008.-№ 14.-PP. 634-644.

20. Bottai D. CigogniniD., Madaschi L. Embryonic stem cells promote motor recovery and affect inflammatory cell infiltrationin spinal cord injured mice / Bottai D. CigogniniD., Madaschi L. //Experimental Neurology.-2010.-Vol. 223.-№ 2.- PP. 452-463.

21. Bouhy D. et al. Inhibition of the Ca2+-dependent K+ channel, KCNN4/KCa3.1, improves tissue protection and locomotor recovery after spinal cord injury / Bouhy

D., Ghasemlou N., Lively S., Redensek A., Rathore K.I., Schlichter L.C., David S. //J Neurosci.-2011.-31(45).- PP. 16298-16308.

22. Bracken M.B. et al. Methylprednisolone and neurological function 1 year after spinal cord injury. Results of the National Acute Spinal Cord Injury Study / Bracken M.B., Shepard M.J., Hellenbrand K.G., Collins W.F., Leo L.S., Freeman D.F. // J Neurosurg.-1985.- № 63(5).- PP. 704-713.

23. Bracken M.B. et al. Administration of methylprednisolone for 24 or 48 hours or tirilazad mesylate for 48 hours in the treatment of acute spinal cord injury. Results of the Third National Acute Spinal Cord InjuryRandomized Controlled Trial. National Acute Spinal Cord Injury Study / Bracken M.B., Shepard M.J., Holford T.R., LeoSummers L., Aldrich E.F., Fazl M., // JAMA.-1997.- № 277(20).- PP. 1597-1604.

24. Bradbury, E.J. et al. NT-3 promotes growth of lesioned adult rat sensory axons ascending in the dorsal columns of the spinal cord / Bradbury E.J., Khemani S., Von R., King Priestley, J.V., McMahon S.B. // Eur. J. Neurosci.-1999.- № 11.- PP. 38733883.

25. Brazelton, T.R. et al. From marrow to brain: expression of neuronal phenotypes in adult mice / Brazelton, T.R., Rossi, F.M.V., Keshet, G.I., Blau, H.M. // Science.-2000.- № 290.- PP. 1775-1779.

26. Brederlau, A. et al. Transplantation of human embryonic stem cell-derivedcells to a rat model of Parkinson's disease: Effect of in vitro differentiation on graft survival and teratoma formation / Brederlau A., Correia A. S., Anisimov S. V., Elmi M., Paul G., Roybon L., Morizane A., Bergquist F., Riebe I., Nannmark U., Carta M., Hanse

E., Takahashi J., Sasai Y., Funa K., Brundin P., Eriksson P. S., Li J. Y. // Stem Cells.-2006.- № 24.- PP. 1433-1440.

27. Bregman B.S. et al. Recovery from spinal cord injury mediated by antibodies to neurite growth inhibitors / Bregman B.S., Kunkel-Bagden E., Schnell L., Dai H.N., Gao D., Schwab M.E. // Nature.-1995.- № 378.-PP. 498-501.

28. Bregman, B.S. et al. Neurotrophic factors increase axonal growth after spinal cord injury and transplantation in the adult rat / Bregman B.S., McAtee M., Dai H.N., Kuhn P.L. // Exp. Neurol.-1997.- № 148.- PP. 475-494.

29. Broxmeyer H.E. et al. High-efficiency recovery of functional hematopoietic progenitor and stem cells from human cord blood cryopreserved for 15 years / Broxmeyer H.E., Srour E.F., Hangoc G., Cooper S., Anderson S.A., Bodine D.M.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2003.- Vol.100.- PP. 645-650.

30. Cao Q.-L. et al. Pluripotent stem cells engrafted into the normal or lesioned adult rat spinal cord are restricted to a glial lineage / Cao Q.-L., Zhang Y.P., Howard R.M., Walters W.M., Tsoulfas P., Whittemore S.R. // Exp. Neurol.-2001.- № 167.- PP. 4858.

31. Caroni P., Schwab M.E.Two membrane protein fractions from rat central myelin with inhibitory properties for neurite growth and fibroblast spreading / Caroni P., Schwab M.E.// J Cell Biol.-1988 Apr.- Vol. 106(4).- PP. 1281-1288.

32. Caroni P., Schwab M.E.Antibody against myelin-associated inhibitor of neurite growth neutralizes nonpermissive substrate properties of CNS white matter / Caroni P., Schwab M.E. //Neuron.-1988 Mar.- Vol. 1(1).- PP. 85-96.

33. Carvalho M.O., Barros Filho T.E., Tebet M.A.Effects of methylprednisolone and ganglioside GM-1 on a spinal lesion: a functional analysis / Carvalho M.O., Barros Filho T.E., Tebet M.A. //Clinics (Sao Paulo) (nepeBogBucn.).-2008.- №63(3).- PP. 375-380.

34. Casha S., Yu W. R., Fehlings M. G. Oligodendroglial apoptosis occurs along degenerating axons and is associated with FAS and p75 expression following spinal cord injury in the rat / Casha S., Yu W. R., Fehlings M. G.//Neuroscience.-2001.- № 103.- PP. 203-218.

35. Chambers S. M. et al. Highly efficient neural conversion of human ES and iPS cells by dual inhibition of SMAD signaling / Chambers S. M., Fasano C., Papapetrou E.

P., Tomishima M., Sadelain M, Studer L. // Nat. Biotechnol.-2009.- № 27.- PP. 275280.

36. Chen N. et al. Human umbilical cord bloodprogenitors: the potential of these hematopoietic cells to becomeneural / Chen N., Hudson J. E., Walczak P., Misiuta I., Garbuzova-Davis S., Jiang L.// Stem Cells.-2005.- № 23(10).- PP. 1560-1570.

37. Chen Y. et al. Causes of spinal cord injury / Chen Y., Tang Y., Vogel L.C., Devivo M.J. // Top Spinal Cord Inj. Rehabil.-2013.- № 19.- PP. 1-8.

38. Cheng H. et al. Clinical observation of umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in treatment for sequelae of thoracolumbar spinal cord injury / Cheng H., Liu X., Hua R., Dai G., Wang X., Gao J., An Y. //J Transl Med.-2014.- Vol. 12.-P. 253.

39. Choi J.Y. et al. Adipose-Derived Regenerative Cell Injection Therapy for Postprostatectomy Incontinence: A Phase I Clinical Study / Choi J.Y., Kim T.H., Yang J.D., Suh J.S., Kwon T.G. // Yonsei Med.-2016.-Vol. 57(5).-PP.1152-1158.

40. Cloutier F. et al. Transplantation of human embryonic stem cell-derived oligodendrocyte progenitors into rat spinal cord injuries does not cause harm / Cloutier F., Siegenthaler M.M., Nistor G., Keirstead H.S. //Regenerative medicine.-2006.- № 1.- PP. 469-479.

41. Conley B.J. et al. Derivation, propagation and differentiation of human embryonic stem cells / Conley B.J., Young J.C., Trounson A.O., Mollard R. // Int. J. Biochem. Cell Biol.-2004.- № 36.- PP. 555-567.

42. Cramer S.C. et al. Brain motor system function after chronic complete spinal cord injury / Cramer S.C., Lastra L., Lacourse M.G., Cohen M.J. // Brain.-2005.- Vol. 128.- PP. 2941-2950.

43. Cristante A.F., Damasceno M.L. et al. Evaluation of the effects of hyperbaric oxygen therapy for spinal cord lesion in correlation with the moment of intervention / Cristante A.F., Damasceno M.L., Barros Filho T.E., de Oliveira R.P., Marcon R.M., da Rocha I.D. //Spinal Cord.-2012.- № 50(7).- PP. 502-506.

44. Cummings B.J. et al. Human neural stem cell differentiation following transplantation into spinal cord injured mice: association with recovery of locomotor

function / Cummings B.J., Uchida N., Tamaki S.J., Anderson A.J. // Neurol Res.-2006.- №28.- PP. 474-481.

45. Daar A.S. et al. Stem cell research and transplantation: science leading ethics / Daar A.S., Bhatt A., Court E.,Singer P.A. // Transplantation Proceedings.-2004.-№ 36(8)w- PP. 2504-2506.

46. Dasari V.R. et al. Axonal remyelination by cord blood stem cells after spinal cord injury / Dasari V.R., Spomar D.G., Gondi C.S., Sloffer C.A., Saving K.L., Gujrati M. // Journal of Neurotrauma.- 2007.- № 24(2).- PP. 391-410.

47. Deng C., Gorrie C. et al. Survival and migration of human and rat olfactory ensheathing cells in intact and injured spinal cord / Deng C., Gorrie C., Hayward I., Elston B., Venn M., Mackay-Sim A., Waite P. // J. Neurosci. Res.-2006.- Vol. 83.-PP. 1201-1212.

48. Deng Y., Liu Y. et al. The cotransplantation of human bone marrow stromal cells and embryo olfactory ensheathing cells as a new approach to treat spinal cord injury in a rat model / Deng Y., Liu Y., Zhu W., Bi X., Wang Y., Ye M., Zhou G.-Q. // Cytotherapy.-2008.- № 10.- PP. 551-564.

49. Dergham P. et al. Rho signaling pathway targeted to promote spinal cord repair / Dergham P., Ellezam B., Essagian C., Avedissian H., Lubell W.D., McKerracher L. // J. Neurosci.-2002.- № 22.- PP. 6570-6577.

50. Dery M.-A. et al. Atorvastatin prevents early apoptosis after thoracic spinal cord contusion injury and promotes locomotion recovery / Dery M.-A., Rousseau G., Benderdour M., Beaumont E. // Neurosci. Lett.-2009.- Vol. 453.- PP. 73-76.

51. DeVivo M.J., Go B.K., Jackson A.B. Overview of the National Spinal Cord Injury Statistical Center database / DeVivo M.J., Go B.K., Jackson A.B. // J. Spinal Cord. Med.-2002.- № 25.- PP. 335-338.

52. Dickson B.J. Rho GTPases in growth cone guidance / Dickson B.J.//Curr. Opin. Neurobiol.-2001.- Vol. 11.- PP.103-110.

53. Dobkin B.H., Havton L.A. Basic advances and new avenues in therapy of spinal cord injury / Dobkin B.H., Havton L.A. // Annu. Rev. Med.-2004.- №55.- PP. 255-282.

54. Domingo A. et al. Spinal Cord Injury Rehabilitation Evidence Research Team. A systematic review of the effects of pharmacological agents on walking function in people with spinal cord injury / Domingo A., Al-Yahya A.A., Asiri Y., Eng J.J., Lam T. //J Neurotrauma.-2012.- № 29(5).- PP. 865-879.

55. Doucette R. PNS-CNS transitional zone of the first cranial nerve / Doucette R. // J. Comp. Neurol.-1991.- Vol. 312.- PP. 451-466.

56. Dougherty K.J., Hochman S. Spinal cord injury causes plasticity in a subpopulation of lamina I GABAergic interneurons / Dougherty K.J., Hochman S.//J. Neurophysiol.-2008.- № 100.- PP. 212-223.

57. Dunham N.W., Miya T.S. A note on a simple apparatus for detecting a neurological deficit in rats and mice / Dunham N.W., Miya T.S. // J. Am. Pharm. Assoc.-1957.-Vol.46(3).-PP.208-209.

58. Erices A., Conget P., Minguell J.J. Mesenchymalprogenitor cells in human umbilical cord blood / Erices A., Conget P., Minguell J.J. //British Journalof Haematology.-2000.- №109(1).- PP. 235-242.

59. Evaniew N., Belley-Côté E.P. et al. Methylprednisolone for the Treatment of Patients with Acute Spinal Cord Injuries: A Systematic Review and Meta-Analysis / Evaniew N., Belley-Côté E.P., Fallah N., Noonan V.K., Rivers C.S., Dvorak M.F. // J Neurotrauma.-2016.- №33(5).- PP. 468-481.

60. Evaniew N., Noonan V.K., Fallah N. et al. RHSCIR Network Methylprednisolone for the Treatment of Patients with Acute Spinal Cord Injuries: A Propensity Score-Matched Cohort Study from a Canadian Multi-Center Spinal Cord Injury Registry / Evaniew N., Noonan V.K., Fallah N., Kwon B.K., Rivers C.S., Ahn H., Bailey C.S., Christie S.D., Fourney D.R., Hurlbert R.J., Linassi A.G., Fehlings M.G., Dvorak M.F. //J Neurotrauma.-2015.- № 32(21).- PP. 1674-1683.

61. Facchiano F.et al. Promotion of regeneration of corticospinal tract axons in rats with recombinant vascular endothelial growth factor alone and combined with adenovirus coding for this factor / Facchiano F., Fernandez E., Mancarella S., Maira G., Miscusi M., D'Arcangelo D., Cimino-Reale G., Falchetti M.L., Capogrossi M.C., Pallini R.// J. Neurosurg.-2002.- № 97.- PP. 161-168.

62. Farry A. The Incidence and Prevalence of Spinal Cord Injury in Canada / Farry A., Baxter D. // Rick Hanson Institute and Urban Futures Report, 2010.- 57PP.

63. Faulkner J., Keirstead H.S. Human embryonic stem cell-derived oligodendrocyte progenitors for the treatment of spinal cord injury / Faulkner J., Keirstead H.S. //Transpl Immunol.-2005.- № 15.- PP. 131-142.

64. Fehlings M.G., Theodore N., Harrop J. et al. A phase I/IIa clinical trial of a recombinant rho protein antagonist in acute spinal cord injury / Fehlings M.G., Theodore N., Harrop J., Maurais G., Kuntz C., Shaffrey C.I., Kwon B.K., Chapman J., Yee A., Tighe A., McKerracher L.// J. Neurotrauma.-2011.- Vol. 28.- PP. 787796.

65. Fehlings M., Vawda R.. Cellular treatments for spinal cord injury: the time is right for clinical trials / Fehlings M., Vawda R.// Neurotherapeutics.-2011.- № 8.- PP. 704720.

66. Fehlings M.G., Vaccaro A., Wilson J.R. et al. Early versus delayed decompression for traumatic cervical spinal cord injury: results of the Surgical Timing in Acute Spinal Cord Injury Study (STASCIS) / Fehlings M.G., Vaccaro A., Wilson J.R., Singh A., Cadotte D.W., Harrop J.S. // PLoS One.-2012.- № 7(2).- P. 320-337.

67. Fehlings M.G., Wilson J.R., Cho N. Methylprednisolone for the treatment of acute spinal cord injury: counterpoint / Fehlings M.G., Wilson J.R., Cho N. //Neurosurgery.-2014.- № 61.-Suppl 1.- PP. 36-42.

68. Feron F. et al. Autologous olfactory ensheathing cell transplant in human spinal cord injury / Feron F., Perry C., Cochrane J., Licina P., Nowitzke A., Urquhart S., Geraghty T., Mackay-Sim A. // Brain.-2005.- №128.- PP. 2951-2960.

69. Fouad K., Klusman I., Schwab M.E. Regenerating corticospinal fibers in the Marmoset (Callitrix jacchus) after spinal cord lesion and treatment with the anti-Nogo-A antibody IN-1 / Fouad K., Klusman I., Schwab M.E. // Eur. J. Neurosci.-2004.- № 20.- PP. 2479-2482.

70. Friedenstein A.J. et al. Heterotopic of bone marrow. Analysis of precursor cells for osteogenic and hematopoietic tissues / Friedenstein A.J., Petrakova K.V., Kurolesova A.I., Frolova G.P. //Transplantation.-1968.- Vol. 6(2).- PP. 230-247.

71. Furlan J.C., Fehlings M.G. The impact of age on mortality impairment and disability among adults with acute traumatic spinal cord injury / Furlan J.C., Fehlings M.G. // J. Neurotrauma.-2009.- № 26.- PP. 1707-1717.

72. Gage F.H., Coates P.W. et al. Survival and differentiation of adult neuronal progenitor cells transplanted to the adult brain / Gage F.H., Coates P.W., Palmer T.D., Kuhn H.G., Fisher L.J., Suhonen J.O., Peterson D.A., Suhr S.T., Ray J. // Proc Natl Acad Sci USA.-1995.- №92(25).- PP. 11879-11883.

73. Gage F.H. Mammalian neural stem cells / Gage F.H. // Science.-2000.- Vol. 287.- PP. 1433-1438.

74. Gale K., Kerasidis H., Wrathall J.R. Spinal cord contusion in the rat: behavioral analysis of functional neurologic impairment / Gale K., Kerasidis H., Wrathall J.R. // Exp. Neurol.-1985.- №88 (1).-PP. 123-134.

75. Garbuzova-Davis S., Saporta S., Sanberg P.R.et al. Intravenous administration of human umbilical cord blood cells in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis: distribution, migration, and differentiation / Garbuzova-Davis S., Willing A.E., Zigova T., Saporta S., Justen E.B., Lane J.C., Hudson J.E., Chen N., Davis C.D., Sanberg P.R.// J Hematother Stem Cell Res.-2003.- № 12(3).- PP. 255-270.

76. Gil J.E. et al. Vitronectin promotes oligodendrocyte differentiation during neurogenesis of human embryonic stem cells / Gil J.E., Woo D.H., Shim J.H., Kim S.E., You H.J., Park S.H., Paek S.H., Kim S.K., Kim J.H.//FEBS Lett.-2009.- № 583.- PP. 561-567.

77. Gorio A. et al. Recombinant human erythropoietin counteracts secondary injury and markedly enhances neurological recovery from experimental spinal cord trauma / Gorio A., Gokmen N., Erbayraktar S., Yilmaz O., Madaschi L., Cichetti C., Di Giulio A.M., Vardar E., Cerami A., Brines M. // PNAS 99.-2002.- PP. 9450-9455.

78. GrandPre T., Li S., Strittmatter S.M. Nogo-66 receptor antagonist peptide promotes axonal regeneration / GrandPre T., Li S., Strittmatter S.M. // Nature .-2002.- № 417.-PP. 547-551.

79. Granger C.V., Albrecht G.L., Hamilton B.B. Outcome of comprehensive medical rehabilitation: measurement by PULSES profile and the Barthel Index / Granger

C.V., Albrecht G.L., Hamilton B.B. // Arch. Phys. Med. Rehabil.-1979.-Vol.60(4).-PP.145-154.

80. Gris P. et al. Transcriptional regulation of scar gene expression in primary astrocytes / Gris P., Tighe A., Levin D., Sharma R., Brown A. //Glia.-2007.- Vol. 55.- PP. 1145-1155.

81. Hachem L.D., Mothe A.J., Tator C.H. Evaluation of the effects of riluzole on adult spinal cord-derived neural stem/progenitor cells in vitro and in vivo / Hachem L.D., Mothe A.J., Tator C.H. //Int J Dev Neurosci.-2015.- № 47(Pt B).- PP. 140-146.

82. Hall E.D., Springer J.E. Neuroprotection and acute spinal cord injury: a reappraisal / Hall E.D., Springer J.E. // NeuroRx.-2004.- № 1(1).- PP. 80-100.

83. Harris D.T., Schumacher M.J. et al. Phenotypic and functional immaturity of human umbilical cord blood T lymphocytes / Harris D.T., Schumacher M.J., Locascio J., Besencon F.J., Olson G.B., DeLuca D. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.-1992.- Vol. 89(21).- PP. 10006-10010.

84. Harris D.T. Non-haematological uses of cord blood stem cells / Harris D.T. // Br J Haematol.-2009.- № 147(2).- PP. 177-184.

85. Henon P.R. Human embryonic or adult stem cells: an overview on ethics and perspectives for tissue engineering / Henon P.R. // Advances in Experimental Medicine and Biology.-2003.- № 534.- PP. 27-45.

86. Hicks S.P., D'Amato C.J. Motor-sensory cortex-corticospinal system and developing locomotion and placing in rats. / Hicks S.P., D'Amato C.J. // Am. J. Anat.-1975.-Vol.143(1).-PP.1-42.

87. Huang H. et al. Recombinant human erythropoietin protects against experimental spinal cord trauma injury by regulating expression of the proteins MKP-1 and p-ERK / Huang H., Fan S., Ji X., Zhang Y., Bao F., Zhang G. // J. Int. Med. Res.-2009.- № 37.- PP. 511-519.

88. Hurlbert RJ. Methylprednisolone for the treatment of acute spinal cord injury: point / Hurlbert RJ. //Neurosurgery.-2014.- № 61.-Suppl.1.- PP. 32-35.

89. Hurlbert R.J. et al. Pharmacological therapy for acute spinal cord injury / Hurlbert R.J., Hadley M.N., Walters B.C., Aarabi B., Dhall S.S., Gelb D.E., Rozzelle C.J., Ryken T.C., Theodore N. //Neurosurgery.-2015.-Vol. 76.- Suppl.1.- PP.71-83.

90. Hutton J.F. et al. Development of CD4+CD25+FoxP3+ regulatory T cells from cord blood hematopoietic progenitor cells / Hutton J.F., Gargett T., Sadlon T.J., Bresatz S., Brown C.Y., Zola H., Shannon M.F., D'Andrea R.J., Barry S.C. // J. Leukoc. Biol.-2009.-Vol.85(3).-PP.445-451.

91. Iwanami A., Kobayashi S. et al. Transplantation of human neural stem cells for spinal cord injury in primates / Iwanami A., Kaneko S., Nakamura M., Kanemura Y., Mori H., Kobayashi S. // Journal of neuroscience research.-2005.- № 80.- PP. 182-190.

92. Jain N., Catania K.C., Kaas J.H. Deactivation and reactivation of somatosensory cortex after dorsal spinal cord injury / Jain N., Catania K.C., Kaas J.H. // Nature.-1997.- Vol. 386.- PP. 495-498.

93. Jalink K., van Corven E.J., Hengeveld T., Morii N., Narumiya S., Moolenaar W.H.Inhibition of lysophosphatidate- and thrombin-induced neurite retraction and neuronal cell rounding by ADP ribosylation of the small GTP-binding protein Rho / Jalink K., van Corven E.J., Hengeveld T., Morii N., Narumiya S., Moolenaar W.H. // J. Cell Biol.-1994.- № 126.- PP. 801-810.

94. Janssen L., Hansebout R.R. Pathogenesis of spinal cord injury and newer treatments. A review / Janssen L., Hansebout R.R. //Spine (Phila Pa 1976).-1989.- № 14(1).- PP. 23-32.

95. Jiang Q., Kobayashi M. et al. Functional immaturity of cord blood monocytes as detected by impaired response to hepatocyte growth factor / Jiang Q., Azuma E., Hirayama M., Iwamoto S., Kumamoto T., Kobayashi M. // Pediatrics International.-2001.- № 43(4).- PP. 334-339.

96. Kao C.H. et al. Human umbilical cord blood-derived CD34+ cells may attenuate spinal cord injury by stimulating vascular endothelial and neurotrophic factors / Kao C.H., Chen S.H., Chio C.C., Lin M.T. // Shock.-2008.- № 29(1).- PP. 49-55.

97. Keirstead H.S. et al. Human embryonic stem cellderived oligodendrocyte progenitor cell transplants remyelinate and restore locomotion after spinal cord injury /

Keirstead H.S., Nistor G., Bemal G., Totoiu M., Cloutier F., Sharp K. //J Neurosci.-2005.- №25.- PP. 4694-4705.

98. Kelly D.L. Jr. et al. Effects of hyperbaric oxygenation and tissue oxygen studies in experimental paraplegia / Kelly D.L. Jr, Lassiter K.R., Vongsvivut A., Smith J.M. //J Neurosurg. -1972.- № 36(4).- PP. 425-429.

99. Keyvan-Fouladi N., Raisman G., Li Y.Functional repair of the corticospinal tract by delayed transplantation of olfactory ensheathing cells in adult rats / Keyvan-Fouladi N., Raisman G., Li Y.Keyvan-Fouladi N., Raisman G., Li Y. // J. Neurosci.-2003.- № 23.- PP. 9428-9434.

100. Kim J.W., Kim S.Y., Park S.Y., Kim Y.M., Kim J.M., LeeM.H. Mesenchymal progenitor cells in the humanumbilical cord / Kim J.W., Kim S.Y., Park S.Y., Kim Y.M., Kim J.M., LeeM.H. // Annals of Hematology.-2004.- № 83(12).- PP. 733-738.

101. KoppM.A., LiebscherT., WatzlawickR., MartusP., LauferS., BlexC., SchindlerR., Jun gehulsingG.J., KnüppelS., KreutzträgerM., EkkernkampA., DirnaglU., StrittmatterS. M., NiedeggenA., SchwabJ.M. SCISSOR-SpinalCordInjury StudyonSmallmolecule-derivedRhoinhibition: aclinicalstudyprotocol / KoppM.A., LiebscherT., WatzlawickR., MartusP., LauferS., BlexC., SchindlerR., Jun gehulsingG.J., KnüppelS., KreutzträgerM., EkkernkampA., DirnaglU., StrittmatterS. M., NiedeggenA., SchwabJ.M. //BMJ0pen.-2016.- № 6(7).- PP. 1-6.

102. Korshunova I. et al. GAP-43 regulates NCAM-180-mediated neurite outgrowth / Korshunova I., Novitskaya V., Kiryushko D., Pedersen N., Kolkova K., Kropotova E., Mosevitsky M., Rayko M., Morrow J., Ginzburg I., Berezin V., Bock E.// J Neurochem. -2007.- № 100.- PP. 1599-1612.

103. Kuh S. et al. Functional recovery after human umbilical cord blood cells transplantation with brain-derived neutrophic factor into the spinal cord injured rat / Kuh S., Cho Y., Yoon D., Kim K., Ha Y.//Acta Neurochir (Wien).-2005.- № 147.- PP. 985-992.

104. Kumagai G., Okano H. et al. Roles of ES cell-derived gliogenic neural stem/progenitor cells in functional recovery after spinal cord injury / Kumagai G., Okada Y., Yamane J., Nagoshi N., Kitamura K., Mukaino M., Tsuji

O., Fujiyoshi K., Katoh H., Okada S., Shibata S., Matsuzaki Y., Toh S., Toyama Y., Nakamura M., Okano H. // PLoS One.-2009.- № 4(11).- PP. 1-13.

105. Kwon B.K. et al. Survival and regeneration of rubrospinal neurons 1 year after spinal cord injury / Kwon B.K., Liu J., Messerer C., Kobayashi N.R., McGraw J., Oschipok L., Tetzlaff W. // PNAS.-2002.- Vol. 99.- PP. 3246-3251.

106. Kwon B.K., Bresnahan J.C., Silver J. et al. Demonstrating efficacy in preclinical studies of cellular therapies for spinal cord injury — How much is enough? / Kwon B.K., Lesley J.J. Soril, Mark Bacon, Michael S. Beattie, Armin Blesch, Jacqueline C. Bresnahan, Mary Bartlett Bunge, Sarah A. Dunlop, Michael G. Fehlings, Adam R. Ferguson, Caitlin E. Hill, Soheila Karimi-Abdolrezaee, Paul Lu, John W. McDonald, Hans W. Müller, Martin Oudega, Ephron S. Rosenzweig, Paul J. Reier, Jerry Silver, Eva Sykova, Xiao-Ming Xu, James D. Guest, Wolfram Tetzlaff. // Exp. Neurology.-2013.- Vol. 248.- PP. 30-44.

107. Leavitt A.D., Hamlett I. Homologous recombination in human embryonic stem cells: a tool for advancing cell therapy and understanding and treating human disease / Leavitt A.D., Hamlett I. //Clinical andTranslational Science.-2011.- Vol. 4.- № 4.-PP. 298-305.

108. Lepore A.C., Fischer I.Lineage-restricted neural precursors survive, migrate, and differentiate following transplantation into the injured adult spinal cord / Lepore A.C., Fischer I. // Exp. Neurol.-2005.- № 194.- PP. 230-242.

109. Levy Jr. W.J. et al. Focal magnetic coil stimulation reveals motor cortical system reorganized in humans after traumatic quadriplegia / Levy Jr. W.J., Amassian V.E., Traad M., Cadwell J. // Brain Res.-1990.- Vol. 510.- PP. 130-134.

110. Li S., Strittmatter S.M. Delayed systemic Nogo-66 receptor antagonist promotes recovery from spinal cord injury / Li S., Strittmatter S.M. // J. Neurosci.-2003.- № 23.- PP. 4219-4227.

111. Li S. et al. Blockade of Nogo-66, myelin-associated glycoprotein, and oligodendrocyte myelin glycoprotein by soluble Nogo-66 receptor promotes axonal sprouting and recovery after spinal injury / Li S., Liu B.P., Budel S., Li M., Ji B., Walus L., Li W., Jirik A., Rabacchi S., Choi E., Worley D., Sah D.W.Y., Pepinsky

B., Lee D., Relton J., Strittmatter S.M. // J. Neurosci.-2004.- № 24.- PP. 1051110520.

112. Li J.-Y., Christophersen N.S., Brundin P. et al. Critical issues of clinical human embryonic stem cell therapy for brain repair / Li J.-Y., Christophersen N.S., Hall V., Soulet D., Brundin P. // Trends Neurosci.-2008.- № 31.- PP. 146-153.

113. Li J., Lepski G. Cell transplantation for spinal cord injury: a systematic review / Li J., Lepski G. // BioMed Res. Int.-2013.- PP. 1-32.

114. Liebscher et al. Nogo-A antibody improves regeneration and locomotion of spinal cord-injured rats / Liebscher T., Schnell L., Schnell D., Scholl J., Schneider R., Gullo M., Fouad K., Mir A., Rausch M., Kindler D., Hamers F.P., Schwab M.E. // Ann. Neurol.-2005.-Vol.58(5).-PP.706-719.

115. Lim J.H. et al. Transplantation of canine umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells in experimentally induced spinal cord injured dogs / Lim J.H., Byeon Y.E., Ryu H.H., Jeong Y.H., Lee Y.W., Kim W.H. // Journal of Veterinary Science.-2007.-№8(3).- PP. 275-282.

116. Lim J., Park S. et al. Brain-derived neurotrophic factor stimulates the neural differentiation of human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells and survival of differentiated cells through MAPK/ERK and PI3K/Akt-dependent signaling pathways / Lim J., Park S., Oh J, Kim S., Jeong C., Jun J., Lee K., Oh W., Lee J., Jeun S.// J Neurosci Res.-2008.- № 86.- PP. 2168-2178.

117. Lima C. et al. Olfactory mucosa autografts in human spinal cord injury: a pilot clinical study / Lima C., Pratas-Vital J., Escada P., Hasse-Ferreira A., Capucho C., Peduzzi J.D. // J. Spinal Cord Med.-2006.- № 29.- PP. 191-203.

118. Lin C.W. et al. Inhibition of Autophagy by Estradiol Promotes Locomotor Recovery after Spinal Cord Injury in Rats / Lin C.W., Chen B., Huang K.L., Dai Y.S., Teng H.L. //Neurosci Bull.-2016.- № 32(2).- PP. 137-144.

119. Liu S. et al. Embryonic stem cells differentiate into oligodendrocytes and myelinate in culture and after spinal cord transplantation / Liu S., Qu Y., Stewart T.J., Howard M.J., Chakrabortty S., Holekamp T.F., McDonald J.W. // PNAS.-2000.- № 97.- PP. 6126-6131.

120. Liu A.M. et al. Umbilical cord-derived mesenchymal stem cells with forced expression of hepatocyte growth factor enhance remyelination and functional recovery in a rat intracerebral hemorrhage model / Liu A.M., Lu G., Tsang K.S., Li G., Wu Y., Huang Z.S., Ng H.K., Kung H.F., Poon W.S. // Neurosurgery.-2010.-Vol.67(2).-PP.357-365.

121. Lu P., Tuszynski M.H. et al. Neural stem cells constitutively secrete neurotrophic factors and promote extensive host axonal growth after spinal cord injury / Lu P., Jones L.L., Snyder E.Y., Tuszynski M.H. // Exp. Neurol.-2003.- № 181.- PP. 115129.

122. Lynch M. et al. Effect of acute intermittent hypoxia on motor function in individuals with chronic spinal cord injuryfollowing ibuprofen pretreatment: A pilot study / Lynch M., Duffell L., Sandhu M., Srivatsan S., Deatsch K., Kessler A., Mitchell G.S., Jayaraman A., Rymer W.Z. //J Spinal Cord Med.-2016 Feb 9.- PP. 1-9.

123. Marcon R.M., Barros Filho T.E.P. et al. Experimental study on the action of methylprednisolone on Wistar rats before spinal cord injury / Marcon R.M., Barros Filho T.E.P., Oliveira R.P., Cristante A.F., Taricco M.A., Colares G. //Acta Ortop Bras.-2010.- № 18(1).- PP. 26-30.

124. McDonald J.W. et al. Transplanted embryonic stem cells survive, differentiate and promote recovery in injured rat spinal cord / McDonald J.W., Liu X.-Z., Qu Y., Liu S., Mickey S.K., Turetsky D., Gottlieb D.I., Choi D.W. // Nat. Med.-1999.- № 5.- PP. 1410-1412.

125. McDonald J.W., Sadowsky C. Spinal-cord injury / McDonald J.W., Sadowsky C.//Lancet.-2002.- № 359.- PP. 417-425.

126. Mezey E. et al. Turning blood into brain: cells bearing neuronal antigens generated in vivo from bone marrow / Mezey E., Chandross K.J., Harta G., Maki R.A., McKercherS.R. // Science.-2000.- Vol. 290.- PP. 1779-1782.

127. Miao X., Wu X., Shi W. Umbilical cord mesenchymal stem cells in neurological disorders: A clinical study / Miao X., Wu X., Shi W. //Indian J Biochem Biophys.-2015.- № 52(2).- PP. 140-146.

128. Mikami T. et al. Ultrastructural and cytochemical characterization of human cord blood cells / Mikami T., Eguchi M., Kurosawa H., Sato Y., Sugita K., Suzumura H. // Medical Electron Microscopy.-2002.- № 35(2).- PP. 96-101.

129. Mitsui T. et al. Transplantation of neuronal and glial restricted precursors into contused spinal cord improves bladder and motor functions, decreases thermal hypersensitivity, and modifies intraspinal circuitry / Mitsui T., Shumsky J.S., Lepore A.C., Murray M., Fischer I. // J. Neurosci.-2005.- № 25.- PP. 9624-9636.

130. Miura K., Okada Y. , Aoi T. Variation in the safety of induced pluripotent stem cell lines / Miura K., Okada Y. , Aoi T. //Nature Biotechnology.-2009.- Vol. 27.- № 8.-PP. 743-745.

131. Muheremu A., Peng J., Ao Q. Stem cell based therapies for spinal cord injury / Muheremu A., Peng J., Ao Q. //Tissue Cell.-2016.- № 48(4).- PP. 328-333.

132. Nakamura M., Okano H. et al. Regenerative medicine for spinal cord injury: current status and open issues / Nakamura M., Nagoshi N., Fujiyoshi K., Kaneko S., Toyama Y., Okano H. // Inflammation and regeneration.-2009.- Vol. 29(3).- PP. 198-203.

133. The National Spinal Cord Injury Statistical Center (2010). Spinal cord injury facts and figures at a glance. (https://www.nscisc.uab.edu/public_content/pdf/Facts%20and%20Figures%20at%20 a%20Glance%202010.pdf), April 2010.

134. National vital statistics reports, centers for disease control and prevention // National Center for Farmworker Health, Inc. (N.C.F.H.).-2002.

135. Nehrt A., Rodgers R., Shapiro S. et al. The critical role of voltage-dependent calcium channel in axonal repair following mechanical trauma / Nehrt A., Rodgers R., Shapiro S., Borgens R., Shi R. //Neuroscience.-2007.- № 146(4).- PP. 1504-1512.

136. Netto C.C., Cristante A.F., Barros Filho T.E.P. et al. Effects of decompression time after spinal cord injury on neurologic recovery in Wistar rats / Netto C.C., Gaia L.F.P., Sattin A.A., Cristante A.F., Marcon R.M., Barros Filho T.E.P. //Acta Ortop Bras.-2010.- № 18(6).- PP. 315-320.

137. Newcomb J.D., Sanberg P.R. et al. Umbilical cord blood research: current and future perspectives / Newcomb J.D., Sanberg P.R., Klasko S.K., Willing A.E. // Cell Transplantation.-2007.- № 16(2).- PP. 151-158.

138. Newman M.B., Sanberg P.R. et al. Human umbilical cord blood (HUCB) cells for central nervous system repair / Newman M.B., Davis C.D., Kuzmin-Nichols N., Sanberg P.R. // Neurotoxicity Res.-2003.- № 5(5).- PP. 355-368.

139. Nguyen L.T. et al. Outcomes of autologous bone marrow mononuclear cells for cerebral palsy: an open label uncontrolled clinical trial / Nguyen L.T., Nguyen A.T., Vu C.D., Ngo D.V., Bui A.V. // BMC Pediatr.-2017.-Vol.17(1).-PP.1-6E.

140. Ohta M. et al. Bone marrow stromal cells infused into the cerebrospinal fluid promote functional recovery of the injured rat spinal cord with reduced cavity formation / Ohta M., Suzuki Y., Noda T., Ejiri Y., Dezawa M., Kataoka K., Chou H., Ishikawa N., Matsumoto N., Iwashita Y., Mizuta E., Kuno S., Ide C. // Exp. Neurol.-2004- № 187.- PP. 266-278.

141. Okada S., Okano H. et al. In vivo imaging of engrafted neural stem cells: its application in evaluating the optimal timing of transplantation for spinal cord injury / Okada S., Ishii K., Yamane J., Iwanami A., Ikegami T., Katoh H., Iwamoto Y., Nakamura M., MiyoshiH., Okano H.J., Contag C.H., Toyama Y., Okano H. // FASEB J.-2005- № 19.- PP. 1839-1841.

142. Pannu R. et al. Attenuation of acute inflammatory response by atorvastatin after spinal cord injury in rats / Pannu R., Barbosa E., Singh A.K., Singh I. // J. Neurosci. Res.-2005.- № 79.- PP. 340-350.

143. Parish C.L., Thompson L.H. Developing stem cell-based therapies for neural repair / Parish C.L., Thompson L.H. //Front Cell Neurosci.-2013.- №7.- P. 198.

144. Park D.H., Lee J.H., Borlongan C.V. et al. Transplantation of umbilical cord blood stem cells for treating spinal cord injury / Park D.H., Lee J.H., Borlongan C.V., Sanberg P.R., Chung Y.G., Cho T.H. // Stem Cell Rev and Rep.-2011.- № 7.- PP. 181-194.

145. Park S.I. et al. Human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cell therapy promotes functional recovery of contused rat spinal cord through enhancement of

endogenous cell proliferation and oligogenesis / Park S.I., Lim J.Y., Jeong C.H., Kim S.M., Jun J.A., Jeun S.-S., Oh W.I. // J. Biomed. And Biotech.-2012.- Epub 2012 Feb 13.- PP. 1-8.

146. Parr A.M. et al. Transplanted adult spinal cord-derived neural stem/progenitor cells promote early functional recovery after rat spinal cord injury / Parr A.M., Kulbatski I., Zahir T., Wang X., Yue C., Keating A., Tator C.H. // Neuroscience.-2008.- № 155.- PP. 760-770.

147. Pfeifer K. et al. Adult neural progenitor cells provide a permissive guiding substrate for corticospinal axon growth following spinal cord injury / Pfeifer K., Vroemen M., Blesch A., Weidner N. // The European journal of neuroscience.-2004.- № 20.- PP. 1695-1704.

148. Pickett G.E. et al. Epidemiology of traumatic spinal cord injury in USA and Canada / Pickett G.E., Campos-Denitez M., Keller J.L., Duggal N. // Spine (Phila, Pa, 1976).-2006.- № 31.- PP. 799-805.

149. Pineau I., Lacroix S. Proinflammatory cytokine synthesis in the injured mouse spinal cord: Multiphasic expression pattern and identification of the cell types involved / Pineau I., Lacroix S.//J. Comp. Neurol.-2007.- № 500.- PP. 267-285.

150. Potten C.S., Loeffler M. Stem cells: attributes, cycles, spirals, pitfalls and uncertainties. Lessons for and from the crypt / Potten C.S., Loeffler M.//Development. -1990.- № 110(4).- PP. 1001-1020.

151. Puri M.C., Nagy A. Concise review: embryonic stem cells versus induced pluripotent stem cells: the game is on / Puri M.C., Nagy A. //Stem Cells.-2012.-Vol. 30.-№ 1.-PP. 10-14.

152. Rainsford E., Reen D.J. Interleukin 10, produced in abundance by human newborn T cells, may be the regulator of increased tolerance associated with cord blood stem cell transplantation / Rainsford E., Reen D.J. //British Journal of Haematology.-2002.- № 116(3).- PP. 702-709.

153. Ramer M.S., Priestley J.V., McMahon S.B. Functional regeneration of sensory axons into the adult spinal cord / Ramer M.S., Priestley J.V., McMahon S.B. // Nature.-2000.- Vol. 403.- PP. 312-316.

154. Ramo' n-Cueto A., Bunge M.B. et al. Long-distance axonal regeneration in the transected adult rat spinal cord is promoted by olfactory ensheathing glia transplants / Ramo n-Cueto A., Plant G.W., Avila J., Bunge M.B. // J. Neurosci.-1998.- № 18.-PP. 3803-3815.

155. Redondo-Castro E., Navarro X. Chronic ibuprofen administration reduces neuropathic pain but does not exert neuroprotection after spinal cord injury in adult rats / Redondo-Castro E., Navarro X. //Exp Neurol.-2014.- № 252.- PP. 95-103.

156. Ribeiro C.A. et al. The secretome of bone marrow mesenchymal stem cells-conditioned media varies with time and drives a distinct effect on mature neurons and glial cells (primary cultures) / Ribeiro C.A., Salgado A.J., Fraga J.S., Silva N.A., Reis R.L., Sousa N.// J. Tissue Eng. Regen. Med.-2001.- № 5.- PP. 668-672.

157. Rogers I., Casper R.F. Umbilical cord blood stem cells / Rogers I., Casper R.F. //Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol.-2004.- № 18(6).- PP. 893-908.

158. Rowland J.W., Fehlings M.G. et al. Current status of acute spinal cord injury pathophysiology and emerging therapies: Promise on the horizon / Rowland J.W., Hawryluk G.W., Kwon B., Fehlings M.G.//Neurosurg. Focus.- 2008.- № 25.- PP. 1-2.

159. Salewski R.P., Fehlings M.G. et al. The generation of definitive neural stem cells from PiggyBac transposon-induced pluripotentstem cells can be enhanced by induction of the NOTCH signaling pathway / Salewski R.P., Buttigieg J., Mitchell R.A., van der Kooy D., Nagy A., Fehlings M.G.//Stem Cells Dev.-2013.- №22.- PP. 383-396.

160. Saporta S., Sanberg P.R. et al. Human umbilical cord blood stem cells infusion in spinal cord injury: engraftment and beneficial influence on behavior / Saporta S., Kim J.J., Willing A.E., Fu E.S., Davis C.D., Sanberg P.R. // J Hematother Stem Cell Res.-2003.- № 12(3).- PP. 271-278.

161. Schnell L., Schwab M.E. Axonal regeneration in the rat spinal cord produced by an antibody against myelin-associated neurite growth inhibitors / Schnell L., Schwab M.E. // Nature.-1990.- Vol. 343.- PP. 269-272.

162. Schwab M.E., Brösamle C. Regeneration of lesioned corticospinal tract fibers in the adult rat spinal cord under experimental conditions. / Schwab M.E., Brösamle C. // Spinal Cord.-1997.-Vol.35(7).-PP.469-173.

163. Sedy et al. Methods for behavioral testing of spinal cord injured rats / Sedy J., Urdzikova L., Jendelova P., Sykova E // Neurosci Biobehav Rev.-2008.-Vol. 32 (3).-PP. 550-580.

164. Setoguchi T. et al. Treatment of spinal cord injury by transplantation of fetal neural precursor cells engineered to express BMP inhibitor / Setoguchi T., Nakashima K., Takizawa T., Yanagisawa M., Ochiai W., Okabe M. // Experimental neurology.-2004.- №189.- PP. 33-44.

165. Sharp K.G. et al. A re-assessment of the effects of treatment with a non-steroidal anti-inflammatory (ibuprofen) on promoting axon regeneration via RhoA inhibition after spinal cord injury / Sharp K.G., Yee K.M., Stiles T.L., Aguilar R.M., Steward O. //Exp Neurol.-2013.- № 248.- PP. 321-337.

166. Shi R., Sun W. Potassium channel blockers as an effective treatment to restore impulse conduction in injured axons / Shi R., Sun W.//Neurosci Bull.-2011.- № 27(1).- PP. 36-44.

167. Shihabuddin L.S. et al. Adult spinal cord stem cells generate neurons after transplantation in the adult dentate gyrus / Shihabuddin L.S., Horner P.J., Ray J., Gage F.H. // J. Neurosci.-2000.- №20.- PP.8727-8735.

168. Shin J.C. et al. Clinical Trial of Human Fetal Brain-Derived Neural Stem/Progenitor Cell Transplantation in Patients with Traumatic Cervical Spinal Cord Injury / Shin J.C., Kim K.N., Yoo J., Kim I.S., Yun S., Lee H., Jung K., Hwang K., Kim M., Lee I.S., Shin J.E., Park K.I. // Neural Plast.-2015.-EPub. 2015 Oct 11.

169. Silva N.A. et al. From basics to clinical: a comprehensice review on spinal cord injury / Silva N.A., Sousa N., Reis R.L., Salgado A.J. // Progress in Neurobiology.-2014.- № 114.- PP. 25-57.

170. Smith R.R. et al. Effects of swimming on functional recovery after incomplete spinal cord injury in rats / Smith R.R., Shum-Siu A., Baltzley R., Bunger M., Baldini A., Burke D.A., Magnuson D.S. // J. Neurotrauma.-2006.-Vol. 6.- PP. 908-919.

171. Smith R.R. et al. The Louisville Swim Scale: a novel assessment of hindlimb function following spinal cord injury in adult rats / Smith R.R., Burke D.A., Baldini A.D., Shum-Siu A., Baltzley R., Bunger M., Magnuson D.S. // J. Neurotrauma.-2006.-Vol. 11.- PP. 1654 - 1670.

172. Song H.-J., Poo M.-M. The cell biology of neuronal navigation / Song H.-J., Poo M.-M. //Nat. Cell Biol.-2001.- № 3.- PP. E81-E88.

173. Steward O. et al. A re-assessment of the effects of Nogo-66 receptor antagonist on regenerative growth of axons and locomotor recovery after spinal cord injury in mice / Steward O., Sharp K., Yee K.M., Hofstadter M. // Exp. Neurol.-2008.- № 209.- PP. 446-468.

174. Sun T., Ma Q.H. Repairing neural injuries using human umbilical cord blood / Sun T., Ma Q.H. //Mol Neurobiol.-2013.- № 47(3).- PP. 938-945.

175. Takahashi K., Yamanaka S. Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures bydefined factors / Takahashi K., Yamanaka S.//Cell.-2006.-Vol. 126.-№ 4.-PP. 663-676.

176. Takahashi K., Yamanaka S. et al. Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors / Takahashi K., Tanabe K., Ohnuki M., Narita M., Ichisaka T., Tomoda K., Yamanaka S. // Cell.-2007.- № 131.- PP. 861-872.

177. Takami T. et al. Schwann cell but not olfactory ensheathing glia transplants improve hindlimb locomotor performance in the moderately contused adult rat thoracic spinal cord / 214. Takami T., Oudega M., Bates M.L., Wood P.M., Kleitman N., Bunge M.B. // J. Neurosci.-2002.- № 22.- PP. 6670-6681.

178. TetzlaffW., FehlingsM.G. et al. A systematic review of cellular transplantation therapies for spinal cord injury / TetzlaffW., OkonE.B., Karimi-AbdolrezaeeS., HillC.E., SparlingJ.S., PlemelJ.R., PlunetW.T., TsaiE.C., BaptisteD., SmithsonL.J., KawajaM.D., FehlingsM.G., KwonB.K. // J. Neurotrauma.-2010.- № 28.- PP. 16111682.

179. Theilgaard-Monch K., Raaschou-Jensen K., Palm H., Schjodt K., Heilmann C., Vindelov L.Flow cytometric assessment of lymphocyte subsets, lymphoid progenitors, and hematopoietic stem cells in allogeneic stem cell grafts / Theilgaard-

Monch K., Raaschou-Jensen K., Palm H., Schjodt K., Heilmann C., Vindelov L. // BoneMarrow Transplantation.-2001.- № 28(11).- PP. 1073-1082.

180. Thibault-Halman G., Fehlings M.G. et al. Predicting Recruitment Feasibility for Acute Spinal Cord Injury Clinical Trials in Canada Using National Registry Data / Thibault-Halman G., Rivers C.S., Bailey C.S., Tsai E.C., Drew B., Noonan V.K., Fehlings M.G., Dvorak M.F., Kuerban D., Kwon B.K., Christie S.D. // J. Neurotrauma.-2017.- № 34(3).- PP. 599-606.

181. Thomson B.G. et al. Analysis of engraftment, graft-versus-host disease, and immune recovery following unrelated donor cord blood transplantation / Thomson B.G., Robertson K.A., Gowan D., Heilman D., BroxmeyerH.E., Emanuel D. // Blood.-2000.- № 96(8).- PP. 2703-2711.

182. Tse W., Laughlin M.J. Umbilical cord bloodtransplantation: a new alternative option. Hematology/the EducationProgram of the American Society of Hematology / Tse W., Laughlin M.J. //American Society of Hematology. Education Program.-2005.- PP. 377-383.

183. Tsuji O., Miura K., Okano H. et al. Cell therapy for spinal cord injury by neural stem/progenitor cells derived from iPS/ES cells / Tsuji O., Miura K., Fujiyoshi K., Momoshima S., Nakamura M., Okano H. //Neurotherapeutics.-2011.-Vol. 8.-№ 4.-PP. 668-676.

184. Tuszynski M.H. et al. Fibroblasts genetically modified to produce nerve growth factor induce robust neuritic ingrowth after grafting to the spinal cord / Tuszynski M.H., Peterson D.A., Ray J., Baird A., Nakahara Y., Gages F.H. // Exp. Neurol.-1994.- № 126.- PP. 1-14.

185. Tuszynski M.H., Grill R., Jones L.L., Brant A., Blesch A., Lo"w K., Lacroix S., Lu P.NT-3 gene delivery elicits growth of chronically injured corticospinal axons and modestly improves functional deficits after chronic scar resection / Tuszynski M.H., Grill R., Jones L.L., Brant A., Blesch A., Lo"w K., Lacroix S., Lu P. // Exp. Neurol.-2003.- № 181.- PP. 47-56.

186. Urdzi'kova L., Sykova E. et al. Transplantation of bone marrow stem cells as well as mobilization by granulocyte-colony stimulating factor promotes recovery after spinal

cord injury in rats / Urdzi'kova L., Jendelova P., Glogarova K., Burian M., Ha'jek M., Sykova E. // J. Neurotrauma.-2006.- № 23.- PP. 1379-1391.

187. Vaccaro A.R., Daugherty R.J. et al. Neurologic outcome of early versus late surgery for cervical spinal cord injury / Vaccaro A.R., Daugherty R.J., Sheehan T.P., Dante S.J., Cotler J.M., Balderston R.A. //Spine (Phila Pa 1976).-1997.- № 22(22).- PP. 2609-2613.

188. Van Middendorp J.J., Barbagallo G. et al. Design and rationale of a Prospective, Observational European Multicenter study on the efficacy of acute surgical decompression after traumatic Spinal Cord Injury: the SCI-POEM study / Van Middendorp J.J., Barbagallo G., Schuetz M., Hosman A.J. // Spinal Cord.-2012.-№50(9).- PP. 686-694.

189. Volarevic V., Erceg S. et al. Stem Cell-Based Therapy for Spinal Cord Injury / Volarevic V., Erceg S., Shanker S., Bhattacharya, Stojkovic P., Horner P., Stojkovic M. //Cell Transplantation.-2013.- Vol. 22.-PP. 1309-1323.

190. Wagner J.E., Broxmeyer H.E., Gluckman E. et al. Allogeneic sibling umbilical-cord-blood transplantation in children with malignant and non-malignant disease / Wagner J.E., Kernan N.A., Steinbuch M., Broxmeyer H.E., Gluckman E. //Lancet.-1995.-№346(8969).- PP. 214-219.

191. Willerth S.M., Sakiyama-Elbert S.E. Cell Therapy for Spinal Cord Regeneration / Willerth S.M., Sakiyama-Elbert S.E. //Adv Drug Deliv Rev.-2008.- № 60(2).- PP. 263-276.

192. Willing A.E., Zigova T.,Song S. et al. Intravenous versus intrastriatal cord bloodadministration in a rodent model of stroke / Willing A.E., Lixian J., Milliken M., Poulos S., Zigova T.,Song S.//Journal of NeuroscienceResearch.-2003.- № 73(3).- PP. 296-307.

193. Willing A.E., Eve D.J., Sanberg P.R. Umbilical cord blood transfusions for prevention of progressive brain injury and induction of neural recovery: an immunological perspective / Willing A.E., Eve D.J., Sanberg P.R. // Regenerative Medicine.-2007.- № 2(4).- PP. 457-464.

194. Woodbury D., Prockop D.J. et al. Adult rat and human bone marrow stromal cells differentiate into neurons / Woodbury D., Schwarz E.J., Prockop D.J., Black I.B. // J. Neurosci.-2000.- Res. 61.- PP. 364-370.

195. Wu P., Tarasenko Y.I. et al. Region-specific generation of cholinergic neurons from fetal human neural stem cells grafted in adult rat / Wu P., Tarasenko Y.I., Gu Y., Huang L.Y., Coggeshall R.E., Yu Y. // Nature neuroscience.-2002.- №5.- PP. 12711278.

196. Xu D. et al. Clinical study of ganglioside (GM) combined with methylprednisolone (MP) for early acute spinal injury / Xu D., Yang L., Li Y., Sun Y. //Pak J Pharm Sci.-2015.- № 28.- Suppl. 2.- PP. 701-704.

197. Xu G., Nie D.-Y., Chen J.-T., Wang C.-Y., Yu F.-G., Sun L., Luo X.-G., Ahmed S.,David S., Xiao Z.-C.Recombinant DNA vaccine encoding multiple domains related to inhibition of neurite outgrowth: a potential strategy for axonal regeneration / Xu G., Nie D.-Y., Chen J.-T., Wang C.-Y., Yu F.-G., Sun L., Luo X.-G., Ahmed S., David S., Xiao Z.-C. // J. Neurochem.-2004.- № 91.- PP. 1018-1023.

198. Zhao Z.M. et al. Intraspinal transplantation of CD34+ human umbilical cord blood cells after spinal cord hemisection injury improves functional recovery in adult rats / , Li H.J., Liu H.Y., Lu S.H., Yang R.C., Zhang Q.J., Han Z.C.// Cell Transplant.-2004.- № 13(2).- PP. 113-122.

199. Zhao Y. et al. Clinical study of NeuroRegen scaffold combined with human mesenchymal stem cells for the repair of chronic complete spinal cord injury / Zhao Y., Tang F., Han G., Wang N., Yin N., Chen B., Jiang X., Yun C., Han W., Zhao C., Cheng S., Xiao Z., Zhang S., Dai J. //Cell Transplant.-2017.- Feb 9.- E1-E9.

200. Zhu H. et al. Phase I-II Clinical Trial Assessing Safety and Efficacy of Umbilical Cord Blood Mononuclear Cell Transplant Therapy of Chronic Complete Spinal Cord Injury / Zhu H., Poon W., Liu Y., Leung G.K., Wong Y., Feng Y., Ng S.C., Tsang K.S., Sun D.T., Yeung D.K., Shen C., Niu F., Xu Z., Tan P., Tang S., Gao H., Cha Y., So K.F., Fleischaker R., Sun D., Chen J., Lai J., Cheng W., Young W. //Cell Transplant.-2016.- Apr 25.- E1-E16.

201. Zhu H. et al. Phase III Clinical Trial Assessing Safety and Efficacy of Umbilical Cord Blood Mononuclear Cell Transplant Therapy of Chronic Complete Spinal Cord Injury / Zhu H., Poon W., Liu Y., Leung G.K., Wong Y., Feng Y., Ng S.C., Tsang K.S., Sun D.T., Yeung D.K., Shen C., Niu F., Xu Z., Tan P., Tang S., Gao H., Cha Y., So K.F., Fleischaker R., Sun D., Chen J., Lai J., Cheng W., Young W. //Cell Transplant.-2016.- № 25(11).- PP. 1925-1943.

202. Zurita M., Vaquero J. Bone marrow stromal cells can achieve cure of chronic paraplegic rats: Functional and morphological outcome one year after transplantation / Zurita M., Vaquero J. // Neurosci. Lett.-2006.- № 402.- PP. 51-56.