Популяционная структура тихоокеанской сельди Clupea pallasi Valenciennes Японского и Охотского морей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.10, кандидат биологических наук Рыбникова, Ирина Григорьевна

• Рыбникова, Ирина Григорьевна
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Рыбникова, Ирина Григорьевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

1.1. Описание собранных материалов. Гель-электрофорез

1.2. Генетико-биохимический анализ

1.3. Статистические методы анализа данных

ГЛАВА 2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

2.1. Краткая история вопроса изучения популяционной структуры рыб и вида С. pallasi

2.2. Ареал вида С. pallasi и особенности биологии

2.3. Особенности гидрологии исследуемого райора

2.4. Биологические особенности основных популяций С. pallasi

ГЛАВА 3. МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ С. PALLASI

3.1. Размерно-возрастной и массовый состав в географических группировках С. pallasi

3.2. Экологические группы С. pallasi

3.3. Обсуждение данных биологии

ГЛАВА 4. ПОПУЛЯЦИОННАЯ СТРУКТУРА С. PALLASI

4.1. Генетическая неоднородность и сходство-различие С. pallasi в совокупности из 27 выборок

4.2. Комплексный анализ изменчивости и сходства выборок С. pallasi по 10 аллозимным локусам и трем биологическим признакам

4.3. Изменчивость и сходство группировок тихоокеанской сельди традиционный подход и многомерный подход

ГЛАВА 5. ВНУТРИВИДОВАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ С. PALLASI

5.1. Морфологическая дифференциация С. pallasi

5.2. Популяционно-генетическая дифференциация С. pallasi

5.3. Таксономическая обособленность, зоогеографическая

характеристика и особенности популяционной дифференциации

С. раИаБ}

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Популяционная структура тихоокеанской сельди Clupea pallasi Valenciennes Японского и Охотского морей»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. Тихоокеанская сельдь Clupea paltcisi (.Valenciennes) - вид семейства костистых рыб Clupeidae (подотряд Clupeoidei, отряд Clupeiformes, класс Osteichtyes) широко распространена в северной части Тихого океана. Современные представления о популяционной структуре Clupea pallasi базируются на генеральной схеме распространения вида (Амброз, 1931; Кагановский, 1954; Ayushin, 1963), на анализе данных по морфологии и биологии (морфометрические индексы, темп роста, время и районы нереста) и на результатах траловых съемок, выявляющих распределение молоди и нагульных скоплений (Пробатов, 1954; Дружинин, 1957; Румянцев и др., 1958; Проваторова, 1965; Тюрнин, 1973; Качина, 1981; Посадова, 1985; Naumenko, 1996; Пушникова, 1996; Посадова, 1997; Вышегородцев, 1997). Целенаправленных исследований внутривидовой организации тихоокеанской сельди в азиатской части ареала не проводилось, и до настоящего времени неясными остаются как наличие репродуктивной изоляции между выделенными популяциями, так и степень генетической дифференциации разобщенных в пространстве и во времени скоплений Clupea pallasi.

В связи с конкретными проблемами, вызванными промышленной эксплуатацией, популяционно-генетическими исследованиями в настоящее время охвачены многие стада тихоокеанской сельди от берегов Кореи и Японии (Grant, Zhang, 1983; Grant, 1986; Kijima et al., 1992; Kobayashi et al., 1990; Kobayashi, 1993) Приморского и Хабаровского краев. Сахалинской и Магаданской областей России (Рыбникова, 1996; Рыбникова и др., 1998) и до берегов Северной Америки (Grant, Utter, 1984; Jorstad et al., 1994). Несмотря на довольно обширную литературу, до настоящего времени нет единства в представлениях о популяционной организации этого вида. Одни

исследователи считают, что у тихоокеанской сельди имеется генетическая дискретность стад (Kobayashi et al., 1990; Kijima et al., 1992: Рыбникова и др., 1998), а другие указывают на слабость или отсутствие их генетической дифференциации (Smith, Jamieson, 1986; Grant, Utter, 1984).

Объективный интерес в познании внутривидовой генетической изменчивости и популяционной дифференциации тихоокеанской сельди из разных участков азиатской части ареала вида и большая практическая значимость этого вопроса, в значительной мере определили актуальность настоящего исследования и методические подходы при решении поставленных задач.

Цели и задачи работы. Цель данной работы - исследование и анализ внутривидовой или популяционной структуры тихоокеанской сельди из разных участков видового ареала с использованием двух групп признаков: (1) биологических признаков - длина, вес, соотношение полов, стадии зрелости и возраста каждой особи и (2) ферментов - маркеров генов. Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие основные задачи:

1. Изучить географическую изменчивость размерного и весового состава нерестовых особей С. pallasi Приморья, Сахалина, северо-западной части Охотского моря и западной части Берингова моря.

2. Изучить электрофоретические спектры белков, главным образом ферментов, из разных тканей С. pallasi и на их основе выявить генотипическую изменчивость белковых локусов. Получить оценки внутривидовой генетической изменчивости С. pallasi.

3. На основе выявленных полиморфных генных локусов, провести сравнительный анализ популяционно-генетической изменчивости и дифференциации С. pallasi.

4. Изучить гетерогенность и дифференциацию смешанных и не смешанных в половом отношении нерестовых выборок С. pallasi из разных

участков видового ареала в северо-западной Пацифике как по морфологическим признакам, так и по распределению аллельных и генотипических частот полиморфных локусов.

Научная новизна. Впервые, при изучении популяционного состава тихоокеанской сельди в азиатской части ареала вида (в российских водах), были использованы генетико-биохимические методы, в частности метод электрофореза белков. В результате варьирования физико-химических условий электрофореза (использование разных буферных систем и концентрации крахмального геля) были получены четкие белковые спектры и ^ показано, что электрофоретические генотипы белков тихоокеанской сельди легко интерпретируются генетически, в соответствии со стандартными схемами монолокусного кодоминантного наследования. Исследованный набор белков, в основном ферментов, можно с достаточным основанием использовать для получения адекватных оценок внутривидовой генетической изменчивости С. ра11аз1. Впервые в комплексе изучена внутривидовая морфологическая и генетическая изменчивость тихоокеанской сельди -одного из самых массовых и экологически значимых представителей семейства С1ирегс1ае. Впервые дана генетическая характеристика популяций тихоокеанской сельди, обитающих в российских водах северо-западной Пацифики и эксплуатируемых промыслом (залива Петра Великого, сахалино-хоккайдская, декастринская, озера Тунайча, заливов северо-восточного Сахалина, Сахалинского залива, охотская, гижигинско-камчатская, корфо-карагинская).

Впервые проведено широкомасштабное популяционно-генетическое исследование вида С. раПаБг в северной Пацифике. На основании электрофоретических вариантов белков получена достоверная информация о характере внутривидовой генетической дифференциации С. ра11аБ1 в целом, а также степени генетической разобщенности тихоокеанской сельди из

отдельных регионов и из разделенных во времени нерестовых группировок в пределах отдельных регионов. Комплексное применение морфологического и молекулярного подходов в сочетании с информацией по экологии и воспроизводству позволило уточнить статус местных популяций тихоокеанской сельди, выделенных ранее, показав, что она не является ^ репродуктивно самостоятельной популяцией и ее нужно рассматривать как часть категории более высокого ранга.

Практическое и теоретическое значение. Тихоокеанская сельдь - это вид, который давно и интенсивно используется российским промыслом. Выявленный набор генных маркеров можно использовать для проведения работ по генетическому мониторингу за промысловыми скоплениями сельди. Обоснованные сведения о характере внутривидовой подразделенное™ С. pallasi, полученные на основании анализа генетически детерминированной белковой изменчивости, следует учитывать при определении норм изъятия из промысловых скоплений.

В методическом плане данная работа позволяет использовать отработанные на тканях С. pallasi специфические условия электрофореза, а также предложенную генетическую интерпретацию большого набора белков в аналогичных работах при генетических исследованиях конспецифических популяций, а также при анализе генетической дивергенции близкородственных видов.

Апробация. Результаты исследований, изложенные в данной работе, докладывались на III Всесоюзном совещании по генетике, селекции и гибридизации рыб (Тарту, 1986), на юбилейной научной конференции «Рыбохозяйственные исследования океана» (Владивосток, Дальрыбвтуз, 1996), на научной конференции Института биологии моря ДВО РАН (Владивосток, 1998), на международном симпозиуме «Modern Achievements in

Population, Evolutionary and Ecological Genetics» (Владивосток. 1998). По теме диссертации опубликовано 19 работ и одна находится в печати.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, пяти глав, выводов, списка литературы, включающего 237 наименований. Работа изложена на 194 страницах машинописного текста, включая 32 таблицы и 31 рисунок.

Благодарности. Я искренне благодарна моим научным руководителям Л.Н. Беседнову за помощь в постановке проблем исследования и ценные и полезные замечания, и Ю.Ф Картавцеву за всестороннюю помощь в статистической обработке, трактовке и осмыслении результатов во время работы над рукописью. Я также благодарна сотрудникам ТИНРО-ценгра В.П. Посадовой, СахНИРО Г.М. Пушниковой и Э.Р. Ившиной, охотской лаборатории МоТИНРО Р.Н. Фархутдинову, за помощь в сборе, биологической обработке материала и обсуждении результатов. Выражаю свою признательность В.П. Шунтову, В.И. Карпенко, Н.И. Науменко, В.А. Вышегородцеву за ценные и полезные советы и замечания в период подготовки рукописи.

ГЛАВА I. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

1.1. ОПИСАНИЕ СОБРАННЫХ МАТЕРИАЛОВ.

ГЕЛЬ-ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

В основу работы положены материалы, полученные автором лично на научно-исследовательских судах и в полевых условиях в Японском, Охотском и Беринговом морях. Кроме того, привлечены материалы, собранные по тихоокеанской сельди сотрудниками СахНИРО и МоТИНРО, в обработке и анализе которых автор принимала непосредственное участие.

Материал, положенный в основу работы, был собран в 9 районах северо-западной части Тихого океана в период с 1989 по 1992 г.г. (рис. 1, табл. 1; Приложение, табл. 1). Всего было исследовано 30 выборок сельди (3000 особей).

Первичная обработка материала проводилась автором на базе лаборатории генетики ТИНРО-центра. Статистическая обработка материала проведена на базе Дальрыбвтуза.

Для исследования внутривидовой изменчивости С. раНая! использовали два подхода: морфологический и популяционно-генетический, взаимно дополняющие друг друга. Выборки для исследования состояли го особей нерестовой (непосредственно в районе нереста) или преднерестовой (вблизи районов нереста) сельди, что позволило избежать разнородности материала.

У каждой особи измеряли длину (точность измерения ±1 мм), массу (±1 г), определяли пол (качественный по гонадам), стадию зрелости (побально, см. ниже). Возраст определяли по чешуе. Обработка ихтиологического материала выполнена по стандартным методикам (Правдин. 1966). Для генетико-биохимического анализа от каждой особи брали пробы в виде кусочков (массой около 5 г) белой мышцы из середины спинной части

. t

V"

12-14

*

>9 12-27

i".1

29

»-»o

jr

o

Тихий океан

Рис. I. Места взятия выборок тихоокеанской сельди С/иреа pal/asi (номера выборок, как в таблице I).

Таблица 1. Материал, положенный в основу работы

№ ^айон, координаты Дата N

выборки сбора

1 Татарский пролив, 50°04' N - 142°05' Е (север) 21.04.91 100

2 Сахалинский залив, бухта Помрь 18.06.91 100

*> э Сахалинский залив, бухта Помрь 22.06.91 100

4 Сахалинский залив, Бухта Помрь 24.06.91 100

5 Северо-восточный Сахалин, залив Ныйский 3.06.91 100

6 Северо-восточный Сахалин, залив Ныйский 5.06.91 100

7 Северо-восточный Сахалин, залив Набиль 7.06.91 100

8 Северо-восточный Сахалин, залив Даги 8.06.91 100

9 Северо-восточный Сахалин, залив Ныйский 20.06.91 100

10 Бухта Тунгусская (пос. Охотск) 31.05.91 100

11 Озеро Тунайча (юго-восточный Сахалин) 22.10.91 100

12 Зал. Петра Вкликого, полуостров Дефриз 18,03,92 100

13 Зал. Петра Великого, осторов Путятин 12.03.92 100

14 Зал. Петра Великого, бухта Северная 26.03.92 100

15 Татарский пролив, 47°30' N - 141°48' Е, (юг) 27.04.92 100

16 Татарский пролив, г. Чехов, (юг) 20.05.92 100

17 Татарский пролив, 47°33' N - 141°33' Е, (юг) 5.06.92 100

18 Сахалинский залив, пос. Рыбновск 23.06.92 100

19 Сахалинский залив, пос. Рыбновск 26.06.92 100

20 Озеро Тунайча (юго-восточный Сахалин) 4.06.92 100

21 Озеро Тунайча (юго-восточный Сахалин) 17.06.92 100

22 Северо-восточный Сахалин, залив Ныйский 11.06.92 100

23 Северо-восточный Сахалин, залив Пильтун 11.06.92 100

24 Северо-восточный Сахалин, залив Ныйский 13.06.92 100

25 Северо-восточный Сахалин, залив Ныйский 13.06.92 100

26 Северо-восточный Сахалин, залив Ныйский 25.06.92 100

27 Северо-восточный Сахалин, прибрежье 31.07.92 100

28 Татарский пролив, пос. Арково 18.06.90 100

29 Берингово море, зал. Корфа 1.07.89 81

Примечание. N - величина выборки.

туловища и печени, а также получали из хвостовых сосудов около 5 мл крови (для последующего отделения сыворотки). Пробы до лабораторного анализа хранили в замороженном состоянии при температуре минус 18 20° С.

Биохимический анализ заключался в электрофоретическом разделении структурных и ферментных белков. Электрофорез проводили в горизонтальных пластинах 14%-ного крахмального геля, для приготовления которого использовали частично гидролизованный крахмал по Смитису (Smithies, 1955). Гидролиз крахмала проводился автором в лабораторных условиях по вышеописанной методике с небольшими изменениями и дополнениями (Богданов и др., 1980).

При проведении электрофореза использовали три буферные системы. Буферная система I: электродный буфер содержит в 1л раствора 11,8 г (0,19М) борной кислоты и 2,1 г (0,05-0,09М) гидрата окиси лития, рН 8,73. Гелевый буфер с рН 8,65, представляет собой смесь из 190 мл электродного буфера и 1000 мл буферного раствора, содержащего 8,67 г (0,07М) триса (трис-оксиметиламинометан) и 1,50 г (0,007М) лимонной кислоты (Ridgway et al., 1970). Буферная система II: электродный буфер содержит в 1 л 0,04М лимонной кислоты, доводится N-(3 -ам инопропил)-морфолином до рН 7,0. Гелевый буфер: 1 часть электродного буфера и 20 частей воды (1:20) (Clayton and Tretiak, 1972). Буферная система III: электродный буфер, как в буферной системе I с рН 8,73. Гелевый буфер является смесью 110 мл электродного буфера и 1000 мл трис-лимонного буфера - 6,2 г (0,05М) триса и 1,5 г (0,007М) лимонной кислоты в 1 л раствора и имеет рН 8,46 (Kristjansson, 1971).

Время разгонки в буферной системе I при начальной силе тока 90 миллиампер на ванночку с гелем, размером 21 см х 14 см х 0,7 см, составляло 4 - 4,5 часа. В буферных системах II и III время электрофореза, при начальной силе тока 45 мА на ванночку, составляло 4-5 часов.

Основные этапы электрофореза таковы: неочищенный белок экстрагируется из мышечной или печеночной ткани, затем индивидуальные экстракты белка от каждой рыбы вносятся в гель с помощью фитилей из хроматографической бумаги. При подключении к гелю электрического тока разные формы одного белка движутся от старта с разной скоростью, так как несут неодинаковые электрические заряды. Эти формы легко идентифицируются с помощью специфического окрашивания на активность конкретного белка. Специфика окрашивания позволяет выявлять как активность, так и место локализации данного белка у каждой рыбы из смеси экстрагированных белков. Большинство исследуемых с помощью электрофореза белков представляют собой ферменты (энзимы) - для которых разработаны методики гистохимического окрашивания, выявляющие их специфическую активность (Shaw and Prasad, 1970; Harris and Hopkinson, 1976; Корочкин и др., 1977; Manchenko, 1994).

Перед специфическим окрашиванием, пластину геля разрезали (тонкой струной) на семь частей, которые подвергали специфическом}' окрашиванию, каждый раз выделяя набор изозимов одного конкретного фермента. Конечным результатом любого электрофореза является проявление полос на геле, которые указывают на локализацию разных форм одного типа белка. Электрофоретический спектр белковых полос, выявляемый у индивида, содержит информацию о его генотипе по данному локусу (или локусам), кодирующем соответствующие белки (рис. 2).

Согласно условных обозначений, применимых в генетической номенклатуре для рыб (Allendorf and Utter, 1979; Shaklee et al., 1989), локусы обозначали курсивом с аббревиатурой, отражающей название белка (например, МЕР для малик энзима). Если у тихоокеанской сельди данный белок кодируется несколькими локусами, к условному обозначению добавляли цифру (например, МЕР2*); нумерация начинается с ближайшей к

катоду фракции гомомерного белка. Аллели нумеровали в соответствии с электрофоретической подвижностью соответствующих гомомерных белков. Одному из аллелей, встречающемуся с наибольшей частотой, присваивали индекс 100 (например, МЕР2*100, другие аллели обозначали в соответствии с миграционной подвижностью белка, выраженной в процентах от того расстояния, на которое мигрировал гомомерный белок аллеля с индексом 100. Обозначение аллеля МЕ2*80 указывает на то, что гомомер. кодируемый этим аллелем, прошел за время электрофореза 80% того расстояния, на которое мигрировал гомомерный белок аллеля МЕ2*100.

ГЕЛЬ-ЭЛЕКТРОФОРЕЗ Принцип электрофореза в контексте биохимии белков заключается в движении заряженных полипептидных макромолекул в электрическом поле. Суммарный заряд белковой молекулы определяется соотношением в полипептиде остатков «кислых» (аспарагиновой и глутаминовой) и «основных» (лизина и аргинина) аминокислот (Ьешотт, 1984). Если в аминокислотной последовательности преобладают радикалы «кислых» остатков, общий заряд молекулы будет отрицательным. Наоборот, белковая молекула будет заряжена положительно при избытке в ней «основных» остатков. Суммарный заряд молекулы в значительной степени зависит от рН среды. Другими словами, первичное соотношение положительно и отрицательно заряженных остатков определяет только изоэлектрическую точку конкретного белка.

Изоэлектрические точки рН для разных животных белков варьируют в широких пределах, примерно от 1 (пепсин) до 11 (лизоцим) (Гааль и др., 1982). Когда значения рН среды лежат выше изоэлектрической точки, суммарный отрицательный заряд будет преобладать над положительным, и полипептид в поле постоянного тока будет двигаться к аноду (так «разгоняют» подавляющее большинство белков). При более «кислых» по

отношению к изоэлектрической точке значениях pH белковые молекулы будут двигаться, соответственно, к катоду. Стабилизация pH при электрофорезе достигается использованием того или иного буферного раствора. Буферные растворы для электрофореза обычно используются в концентрации от 0,005 до 0,1 М.

Основные параметры электрического тока при электрофорезе связаны по закону Ома: I = V/R. Скорость перемещения белковой молекулы прямо пропорциональна силе тока. Такой же зависимостью связаны между собой длина разгонки и время пропускания тока. Сила тока рассчитывается на 1 см2 поперечного носителя. Скорость миграции пропорциональна и градиенту напряжения, выраженному в вольтах на 1 см длины носителя. Для электрофоретической разгонки белков из природных смесей используют низкие напряжения от 50 до 500 В. При некоторых режимах во избежание тепловой денатурации белков и прекращения их фореза используется принудительное охлаждение.

Очень важной в электрофорезе является проблема поддерживающей среды или носителя. Именно от природы носителя главным образом зависит аналитический потенциал и практическая пригодность метода.

В середине 50-х годов были разработаны тонкие способы разделения белков путем электрофореза в крахмальном и полиакриламидном гелях (Smithies, 1955). Методика электрофореза белков в крахмальном и полиакриламидном гелях детально рассмотрена во многих руководствах (Серов и др., 1970; Maurer, 1971; Гааль и др., 1982). Крахмальный и особенно полиакриламидный гели обладают более высокой разрешающей способностью по отношению к агаровом)7 (Maurer, 1971).

Преимущества, связанные с электрофоретическим разделением генетически детерминированных вариантов ферментов - изоферментов (в случае, когда различные варианты одного и того же белка кодируются

разными аллелями одного и того же гена, их называют аллоферментами или аллозимами), привели к быстрому проникновению этого метода в популяционно-генетические исследования и к столь же быстрому развитию новой области знания - биохимической генетики популяций. К преимуществам исследования аллозимов можно отнести: а) простоту генетической интерпретации, б) кодоминантность проявления аллелей у гетерозигот (проявление у гетерозиготы признаков обоих аллелей), в) простоту и надежность выявления гомологичной изменчивости в популяциях различных видов и г) относительную несложность электрофоретического исследования (Shaw, 1964; Левонтин, 1978; Кирпичников, 1979, 1987). Суть этого подхода состоит в том, что электрофоретичеки выявляемые варианты ферментов - аллозимов - рассматриваются в качестве маркеров аллелей соответствующих локусов. Сопоставление аллозимных спектров у сравниваемых конспецифичных популяций по многим генам позволяет оценить сходство их генофондов (Левонтин, 1978).

Электрофоретическое разделение белков в настоящее время является основным средством изучения критической (скрытой от глаз морфолога) внутривидовой и межвидовой изменчивости. В многочисленных экспериментах на лабораторных и домашних животных, заключавшихся в скрещивании и анализе потомства от родителей с известными белковыми фенотипами, а также путем анализа семей человека, была с бесспорностью доказана генотипическая природа биохимического полиморфизма. Это позволило описывать внутривидовую генотипическую изменчивость самым строгим и экономным способом - в терминах частот генотипов и частот генов (Кирпичников, 1981, 1987; Алтухов, 1983; Айала, 1984).

1.2. ГЕНЕТИКО-БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

До 1987 года, исследование тихоокеанской сельди проводилось по небольшому набору белковых систем: эстераза (К.Ф. З.1.1.- неспеиифическая эстераза, EST, локусы EST2*, EST4*), общий белок (GP2*), фосфоглюкомутаза (К.Ф., 5.4.2.2, PGM2*), пероксидаза (К.Ф. 1.11.1.7. PERI*, PER*2). В дальнейших исследованиях тихоокеанской сельди в биохимический анализ были включены и другие полиморфные локусы: изоцитратдегидрогеназа (К.Ф. 1.1.1.42, ИДГ, sIDHP2*\ глюкозофосфатизомераза (К.Ф. 5.3.1.9, ГФИ, G/Y*), аспартатаминотрансфераза (К.Ф. 2.6.1.1, ААТ, sAAT2*\ малик энзим (К.Ф. 1.1.1.40, ME, МЕР2*), лактатдегидрогеназа (К.Ф. 1.1.1.37, ЛДГ, локус LDH2*), супероксиддисмутаза (К.Ф. 1.15.1.1, СОД, SOD*), аконитатгидратаза (К.Ф. 4.2.1.2, АН, АН*) Энзимы, локусы, буферные системы и ткани, использованные в работе, представлены в таблице 2.

АКОНИТАТГИДРАТАЗА Электрофоретическое выявление этого белка проводилось в печени, в буферной системе II (табл. 2, рис. 2). Гистохимическое окрашивание осуществлялось по стандартной методике (Harris and Hopkinson, 1976). По нашим данным, локус аконитатгидратазы включает четыре аллеля: АН* 105, АН* 100, АН*95 и АН*86, что соответствует буквенному обозначению А, В, С, D в Приложении I, при описании аллельных частот выборок сельди.

АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗА По литературным данным (Grant, 1981, 1984) этот белок кодируется двумя локусами ААТ1* и ААТ2*. В нашей работе, проводилось электрофоретическое выявление локуса ААТ2* в мышцах, в буферной системе I. Электрофоретический спектр белковых полос ААТ2* представлен

Габлнцд >

Буферные системы и тканевая локализация ферментов и соответствуй

локусов.

Фермент Локус Буфер Ткань

1. Аспартатаминотрансферраза (ААТ2) бААТ2* I мышца

2. Аконитатгидратаза (АН) АН* II печень

3. Эстераза-2 (ЭСТ2) ЕБТ2* I мышца

4. Эстераза-4 (ЭСТ4) ЕЭТ4* I печень

5. Глюкозофосфатизомераза (ГФИ) вРР I мышца

6. Изоцитратдегидрогеназа (ИДГ2) зГОНР2* II печень

7. Лактатдегидрогеназа (ЛДГ2) 1ТЗН2* I мышца

8. Малик энзим (МЕ2) МЕР2* I, II мышца

9. Фосфоглюкомутаза (ФГМ2) РвМ2* I мышца

10. Супероксиддисмутаза (СОД) БОБ* II печень

на рис. 2. ААТ2* - четырехаллельная система: ААТ2*105. ААТ2*Ю0, ААТ2*87 и ААТ2*77. В Приложении I эти аллели имеют буквенное обозначение, соответственно, А, В, С и Б, рис. 1П. Полиморфны по этому ферменту все подвиды атлантической сельди, а также и тихоокеанская сельдь.

ЭСТЕРАЗА

У тихоокеанской сельди как и у других видов, этот фермент представлен множественными спектрами, обнаружена изменчивость, кодируемая, как минимум, двумя локусами: Е8Т2* и ЕБТ4* (рис. 2П, Приложение). Типы Е8Т2* определяли в образцах мышц, так как. не смотря на выявление полиморфизма по этому локусу как в печени, так и в мышцах, электрофоретический спектр мышц дает визуально более четкую картину. Электрофоретический анализ проводили в буферной системе I. После

-__Г2"1\

100-

Уо—

97Г

__гал.

Ш4\_ „ тш* 82

о- ___________„ О-

О т —

О - О N О О О

™ ~ г г г о о гч

о о о о

О О О О О о N г)

« — ~ — О'ОООО

О -Г о

О О О О о СЧ

^ §4 — ~ г-• О

оо о ^ м

ОО О О Ь ОС

»

о

О N6 Г> О о

о о — о о

о о о О ^

О О о се

__ 100^- ж . т

о

Z__ 100-

2 = §8°-о §?3 8 8 3 8 55

— — см

ААТ2*ш—Н — АН*1Ь» - в - •

87— Ж- 76- •

77— - 95/ 61—

о---—---0---- о

£2§8 |8§8«8

О ^ Л ^ ^

— < — 04 ~ 2 о ~ ®

О о ^ О И О 1Л 2 С> -- ?=; ~

— — ^ о О Оч О О § ~ ® ЧО

Рис. 2. Электрофоретические фенотипы всех исследованных локусов тихоокеанской сельди С1иреа ра11аз1.

электрофореза слой геля инкубировали в смеси: трис-маленнового буфера -12,1 г (0,1М) триса и 11,6 (0,1М) малеиновой кислоты на 1 л рН 3,92 и этанола, содержащего в качестве субстрата и красителя соответственно ос-нафтилацетат натрия и прочный синий ББ соль (Shiff and Stormont. 1970). 100 мг прочного синего ББ соль растворяют 100 мл этанол-буферной смеси; отдельно в 5 мл этанола растворяют 100 мг а- нафтилацетата. Растворы сливают вместе перед инкубацией.

По нашим данным локус EST2* включает четыре аллеля. Аллельные гены локуса для удобства в приложении 1 обозначены буквенно А, В, С, D и в порядке снижения имеют электрофоретическую подвижность, соответственно - 121, 114, 107 и 100 (рис. 2). Электрофоретические спектры белковых фракций на рис. 2 отражают гомозиготные (под спектром, например, 100/100; 107/107) и гетерозиготные (100/107; 100/114; 100/121> генотипы локуса EST2* у тихоокеанской сельди.

Локус EST4* обнаруживается у сельди в печени, в буферной системе I. Гистохимическое окрашивание проводилось как для EST2*; EST4* представляет собой также четырехаллельную систему. Аллельные гены этого локуса в приложении 1 (рис. ЗП, Приложение) обозначены буквами В, С, D, Е, что соответствует в порядке снижения электрофоретической подвижности -104, 100, 96, 92 (рис. 2).

ГЛЮКОЗОФОСФАТИЗОМЕРАЗА

Электрофоретическое выявление локуса GPI* проводилось нами в мышцах сельди в буферной системе I. Электрофоретический спектр белковых полос представлен также на рис. 2. По нашим данным, локус GPI* представлен аллелями: GPI*180, GPI* 145, GPI* 100, GPI*45, что соответствует в Приложении I буквенному обозначению, соответственно, А, В, С, D, рис. 4П. Пятый аллель GPI*20, описанный в работах В.Гранта (Grant, 1981, 1984) и Т.Кобаяси с соавторами (Kobayashi et al, 1990), в наших исследованиях не

был встречен. Окрашивание проводилось по стандартной методике (Harris and Hopkinson, 1976). Глюкозофосфатизомераза, как и фосфоглюком\ ,а{а рассматривается как наиболее изменчивый фермент у рыб (Кирпичпикон 1987).

ОБЩИЙ БЕЛОК

Не идентифицированный белок из спектра общих растворимых белков мышц GP2*. Полиморфизм тихоокеанской сельди, обусловленный наличием в локусе GP2* двух аллелей с электрофоретической подвижностью GP2*100 и GP2*85 обнаружен нами впервые (Рыбникова, 1987; рис.3). В Приложении 1, выявленные аллели имеют буквенное обозначение, соответственно, А и В. Электрофорез проводится в буферной системе I. окрашивание осуществлялось раствором водорастворимого нигрозина (1 г на 1 л дистиллированной воды) в фиксаторе, представляющем собой смесь дистиллированной воды, этилового спирта и ледяной уксусной кислоты в пропорции 5:5:1. Отмывание фореграмм проводилось путем

последовательной смены фиксатора в течение суток.

« * - + * 0

Рис. 3. Фотография электрофоретического спектра общего белка GP2* тихоокеанской сельди Clupea pallasi.

ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗА Локус IDHP2* электрофоретически определялся в печени сельди, в буферной системе II. Электрофоретический спектр белковых фракций представлен на рис. 2. Аллели пронумерованы в соответствии с электрофоретической подвижностью их гомомерных белков: 117, 106, 100, 91

и 86 (в приложении I - это соответствует буквенному обозначению А, В, С, D и Е. рис. 5П, Приложение).

Электрофоретический спектр локуса IDHP2* для тихоокеанской сельди описан в работах В.Гранта (Grant, 1984), Т.Кобаяси (Kobayashi, 1983; Kobavashi et al., 1990). В наших исследованиях аллель ЮНР2*82 встречен не был.

ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗА Элекгрофоретическое выявление локуса LDH2* проводилось нами в печени сельди, в буферной системе И. Электрофоретический спектр белковых фракций этого локуса в нашей работе соответствовал спектру, описанному в литературе (Grant, 1981, 1984). Локус LDH2* представлен в нашем исследовании двумя аллелями: LDH2*230 и LDH2*100, что соответствует буквенному обозначению А и В, соответственно, в Приложении I. Гистохимическое окрашивание проводилось по стандартной методике (Harris and Hopkinson, 1976).

МАЛИК ЭНЗИМ

Внутривидовая изменчивость локусов малик энзима (МЕР2*) обнаружена у атлантической сельди (Andersson et al 1981; Komfield et al., 1981). Полиморфизм по локусам MEP1* и MEP2* обнаружен также и для тихоокеанской сельди (Grant 1981; Kobayashi et al., 1990).

Локус MEP2* выявляли электрофоретически в мышцах сельди, в буферной системе II. Окрашивание проводили по стандартной методике (Harris and Hopkinson, 1976). Наблюдаемый электрофоретический спектр показан на рис. 2. Аллели пронумерованы в соответствии с их электрофоретической подвижностью в порядке снижения: МЕР2*110, МЕР2*100, МЕР2*90 и МЕР2*80, что соответствует буквенному обозначению А, В, С и D в Приложении I при описании выборок сельди по данному локусу.

ПЕРОКСИДАЗА

Пероксидазы сыворотки крови - PERI* и PER2* электрофоретически выявлялись в буферной системе III. Полиморфизм тихоокеанской сельди по обеим пероксидазам до наших исследований (Богданов и др., 1987; Рыбникова, 1987) не был известен. Гистохимическое окрашивание проводилось инкубационной смесью, содержащей в 1 л раствора 2 г бензидина, 5 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл 33%-ной перекиси водорода. Бензидин растворяли в дистиллированной воде, нагревая ее до кипения, с последующим охлаждением до комнатной температуры (при охлаждении бензидин образует мелкие серебристые хлопья), затем добавляли соответствующее количество ледяной уксусной кислоты и перекиси водорода (на этом этапе раствор бензидина вновь становится прозрачным). Сразу же после окончания инкубации зоны пероксидазной активности проявляются в виде сине-зеленых полос на светлом фоне, которые оплывают при избытке пероксидазной активности, поэтому считывание проводилось сразу. После сушки, зоны пероксидазной активности выглядят коричневыми полосами на светло-коричневом фоне (рис. 2). Локусы PERI* и PER2* двухаллельные, с подвижностью аллелей соответственно 100, 90 и 100, 80 (рис. 2). В приложении I аллели PERI* 100 и PER 1*90, а также PER2*100 PER2*90 обозначены соответственно, буквами А и В.

ФОСФОГЛЮКОМУТАЗА Полиморфизм по этому ферменту у тихоокеанской сельди впервые обнаружен Ф. Аттером (Utter, 1970). Данный белок включает два локуса PGM1* и PGM2*. Определение локуса PGM2* мы проводили в мышцах сельди (буферная система I). Гистохимическое окрашивание проводили по стандартной методике (Shaw and Prasad, 1970). Электрофоретический спектр локуса PGM2* в нашей работе был такой же как в работах В.Гранта (Grant, 1981) и Т.Кобаяси с соавторами (Kobayashi et al., 1990). PGM2* описана, как

четырехаллельная система с подвижностью аллелей 108, 100. 82 и 76. В исследованных выборках сельди были встречены два аллеля: PGM2* 100 и PGM2*82, (Приложение 1 буквенные обозначения А и В, рис. 611). Фосфоглюкомутаза проявляется в виде синих полос на светлом фоне.

СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗА Супероксиддисмутаза электрофоретически выявляется в печени сельди в буферной системе II (табл. 2, рис. 2). По данным В.Гранта (Grant, 1981; 1986) этот белок кодируется у тихоокеанской сельди одним локусом SOD*. Данный локус представлен четырьмя аллелями: SOD* 138, SOD* 100, SOD*76 и SOD*61. Электрофоретический спектр локуса SOD* описан в диссертационной работе В.Гранта (Grant, 1981). В наших исследованиях выборок тихоокеанской сельди редкий аллель SOD*61 не был встречен. В Приложении I буквенному обозначению А, В и С соответствуют аллели SOD* 138, SOD* 100, SOD*76 в порядке снижения их электрофоретической подвижности.

1.3. СТАТИСТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ДАННЫХ

В нашей работе проводилось исследование выборок тихоокеанской сельди на основании частот аллелей 13 полиморфных локусов. Частоты аллелей для всех исследованных выборок сельди в период с 1981 г. по 1992 год приведены в приложении I. В каждой выборке сравнивали фенотипическое распределение частот генотипов в локусах с численностями, ожидаемыми согласно закона Харди-Вайнберга. Значимость отличий определяли по стандартному критерию хи-квадрат (Лакин, 1980). Гетерогенность частот аллелей среди выборок также оценивали при помощи критерия хи-квадрат (%2) (Workman and Niswander, 1970):

2 к

х2=:—— d Nj-pz-N р2).

P(1 - р) j=l

Здесь N = Ni + ... + Nk - суммарная численность во всех выборках, а к

р = X N jp j/ N - средневзвешенная частота аллеля в этих выборках. В J=I

работе использовали обозначение X вместо % , так как X ~ параметрическая функция хи-квадрат, а X2 - эмпирический критерий.

Анализ внутри- и межгрупповой изменчивости проводили, используя F-статистику в дефиниции Нея (Nei, 1977). Подразделение общепопуляционной гетерогенности на групповые компоненты на основе теоретических гетерозиготностей и соответствующих им F-статистик является важным приемом при изучении структуры популяции. Если обозначить Но средневзвешенную фактическую гетерозиготность по всем изучаемым субпопуляциям, Hs - средневзвешенную теоретически ожидаемую гетерозиготность, а Нт - ожидаемую гетерозиготность во всей популяции, оцененную на основе усредненных частот аллелей, то однофакторная структура популяции определяется следующими F- статистиками:

Hs-Ho Нт-Но Ht-Hs

Fis =_ » Fn- = ' , FST =_ ,

Hs Ht HT

где Fis, Fit - отклонение наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности в

отдельной выборке и во всей совокупности выборок, FSt

стандартизированная дисперсия частот аллелей, то есть, FIS и F,T служат

мерами избытка или дефицита гетерозигот, a FSt - мерой популяционной

дифференциации. Такой подход к анализу структуры популяций позволяет на

основе понятия гетерозиготности проанализировать структуру популяции и

может применяться для оценки по нескольким локусам (Nei, 1977), в чем его

преимущество, по сравнению с F- статистиками Райта (Nei, 1987).

В соответствии с этим методом всю величину генетической изменчивости подразделяли на внутри- и межпопуляционные компоненты Для определения относительного вклада разных компонент в общее генетическое разнообразие применяли иерархический метод, основанный на географическом распределении выборок (Chakraborty et al., 1982). Иерархическая структура генетической изменчивости (в шкале FSj = GSj) была представлена: 1) всем набором выборок, 2) регионами (Японское, Охотское и Берингово моря), 3) выборками в пределах регионов, 4) выборками в пределах местных популяций, 5) межгодовой изменчивостью в пределах регионов.

Помимо изучения компонент изменчивости популяций, важным является оценка генетической близости выборок. Для внутривидовых сравнений рекомендовано использование минимальных генетических расстояний (Nei, 1972). Минимальное расстояние Нея выражается формулой:

dffl=(Zxi2 + Z^2V2-2:xiyi, Dm= 1/k S k d m, где x и у частоты аллелей в i-той выборке, к - число выборок. Dm = 0 обозначает отсутствие различий, Dm = 1 - идентичность сравниваемых групп.

В некоторых случаях были использованы также индексы различия и подобия (D и S) Роджерса (Rogers, 1972) и Превости (Prevosti et al., 1975): D R = 1/m ZV (x j - у i)2/ 2 ; Sr=1-Drimh DP = l/mSS I x i- у i I /2 ; S P = 1 - D P.

S и D, также как Dm колеблются в пределах от 0 до 1. Индекс подобия Роджерса является геометрической средней показателей сходства по отдельным локусам и обычно близок по своей величине к I (Nei, 1972). В нашей работе генетические различия выборок оценивались при помощи несмещенных минимальных расстояний Нея (Dm) (Nei, 1978):

2 nx £ x,2 - 1 2 ny S у,2 - 1

dmA =_ + _ - Ixiyi,

2(2nx - 1) 2(2ny - 1)

DmA= 1/k Z к dmA .

Графическое представление данных о генетических различиях выборок проводили двумя методами: 1) на основе метода невзвешенных групповых арифметических средних (UPGMA; Sneath and Sokal, 1973) строили дендрограммы или, 2) проводя ординацию выборок по Dm с помощью метода главных компонент (Sneath and Sokal, 1973; Афифи, Эйзен, 1982), с представлением в двух- и трехмерном пространстве. При совместном анализе морфо-биологических признаков и аллозимных данных применяли три многомерных метода: дисперсионный анализ (MANOVA), канонический анализ и дискриминантный анализ (Афифи, Эйзен, 1982).

При реализации статистического анализа популяционно-генетических данных использованы пакеты программ: NTSYS-pc (Rohlf, 1987), SPECSTAT (Картавцев, Соловьев, 1992). Многомерный анализ всего комплекса признаков реализован с использованием пакета программ STATISTICA (StatSoft, 1995).

Заключение диссертации по теме «Ихтиология», Рыбникова, Ирина Григорьевна

выводы

1. Анализ морфологических признаков тихоокеанской сельди показал наличие полового диморфизма по длине АС, массе и гонадному индексу в местных популяциях сельди заливов Петра Великого, Сахалинского, северовосточного Сахалина, декастринской, охотской и корфо-карагинской, что необходимо учитывать при проведении популяционных исследований.

2. Установлено, что у тихоокеанской сельди имеется выраженная внутривидовая структура. В изученных выборках сельди из Японского и Охотского морей обнаружены три совокупности, которые можно интерпретировать как генетически обособленные локальные стада, представляющие собой объединения нескольких местных популяций сельди.

3. Учитывая значимую межгодовую морфологическую и генетическую изменчивость внутри ранее выделенных популяций, а также отсутствие значимости дискриминации пар популяций залива Петра Великого -Сахалинского залива и озера Тунайча - заливов северо-восточного Сахалина можно полагать, что локальное стадо тихоокеанской сельди является подразделенной или генетически неоднородной популяцией, состоящее из субпопуляций, обменивающихся между собой мигрантами. Различия между отдельными подразделенными популяциями поддерживаются комплексно за счет дифференцирующего естественного отбора и дрейфа генов.

4. Из пяти выделенных ранее местных популяций к генетически самостоятельным локальным стадам (подразделенным популяциям) относятся: 1. Местные популяции вод Приморья и Сахалинского залива, 2. Совокупность популяций сахалино-хоккайдской сельди, 3. Местные популяции северо-восточного Сахалина и озера Тунайча.

5. Экологические группы тихоокеанской сельди, выделяемые ихтиологами, не являются самостоятельными популяционно-генетическими единицами. В экологические группы входят представители различных локальных стад. Наименьшая популяционно-генетическая дифференциация обнаружена между океанической и морской группами сельди. Озерные сельди генетически наиболее обособлены от всех других групп тихоокеанской сельди.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Рыбникова, Ирина Григорьевна, 1999 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Алтухов Ю.П. Генетические процессы в популяциях // М: Наука, 1983.279 с.

Айала Ф. Введение в популяционную генетику // М.: М1ф, 1984,- 230 с. Арсеньев В.К. Гижигинский промысловый район // Экономии, жизнь ДВ, 1925,-40с.

Амброз А.И. Сельдь залива Петра Великого // Изв. ТИНРО, 1931.-Т. 6.

О 1.3 С.

Амброз А.И. Сельдь Приморья // Соц. Реконстр. Рыбн. Хоз-ва ДВ, 1932. -№8-10.-С. 3-14.

Афифи Ф., Эйзен С. Статистический анализ. Подход с использованием ЭВМ.// М.: Мир, 1982,- 488 с.

Аюшин Б.Н. Весенняя сельдь северо-западной части Охотского моря // Изв. ТИНРО, 1947.- Т. 25,- С. 3-33.

Аюшин Б.Н. Некоторые данные о нагульной сельди северной части Охотского моря //Изв. ТИНРО, 1951. -Т. 35.- С.81-86.

Аюшин Б.Н. Разведка сельди в северной части Охотского моря // Владивосток. Примиздат,- 1956.- 51 с.

Бенко Ю.К., Богаткин Ю.Н.,Фархутдинов Р.Н. Биологические основы применения искусственных нерестилищ для воспроизводства охотской сельди // Биол. моря, 1987,- №1,- С. 56-61.

Богаевский В.Т. Жирующая сельдь прибрежных вод юго-западного Сахалина//Изв. ТИНРО, 1951,-Т. 34.- С. 5-24.

Богданов Л.В., Флусова Г.Д., Билим Л.А., Шелобод Л.В. Популяционно-генетические исследования тихоокеанской сельди (С1иреа Ьагеп§ш раНта) // в сб.: Биохимическая и популяционная генетика рыб. - Изд. ЦИН АН СССР, 1979,- С.74-82.

Богданов Л.В., Коваль Е.З., Черноиванов В.А. Рекомендации по использованию электрофоретических данных при межпопуляционных и межвидовых сравнениях // Владивосток. Изд. ТИНРО, 1980.- 39 с.

Богданов Л.В., Мацак Е.А., Рыбникова И.Г., Флусова Г.Д., Шершнева Н.И. Новый метод дифференциации популяций рыб на основании морфомеристических и биохимических признаков // В кн. Генетика в аквакультуре. 1987.-С. 125-136.

Бонк A.A., Науменко Н.И. Изменение биологических показателей корфо-карагинской сельди в зависимости от уровня нерестового запаса // 1 Конгр. Ихтиологов России, сент., 1997. Тез. докл. Астрахань,- 1997.- С. 5960.

Варварин И.А. Жируюшая сельдь южной части Татарского пролива // Изв. ТИНРО, 1946 - Т.22. - С. 3-34.

Василенко A.B. Популяционнаая структура и структура популяции: попытка альтернативной интерпретации концепции флюктуирующего стада // Изв. ТИНРО, 1994. - Т. 116. - С. 75-90.

Веденский А.П. Сельдь Восточного Сахалина // Изв. ТИНРО, 1950 -Т. 32. - С. 55-63.

Вышегородцев В.А. Особенности обыкрения нерестового субстрата гижигинско-камчатской сельди // Изв. ТИНРО, 1994,- Т. 115,- С. 137-141.

Вышегородцев В.А. О размножении гижигинско-камчатской сельди // Певый Конгр. ихтиологов России, Астрахань, сент., 1997. Тез. докл. Астрахань. ВНИРО, 1997,- С. 143-144.

Гааль Э., Медьеши Г.. Верецкеи Л. Электрофорез в разделении биологических макромолекул // М. : Мир. - 1982. - 346 с.

Гайл Г.И. Промысловые водоросли Сахалина и Курильской гряды // Примиздат. Владивосток, 1949.- 87 с.

Галкина Л.В. О размножении сельди Гижигинской губы И Изв. ТИНРО, 1959.-Т. 47.- С. 86-99.

Галкина Л.А. Оплодотворение и развитие икры беломорской сельди в воде различной солености //ДАН СССР, 1962 -Т. 143,- № 2.- С. 479-482.

Глубоковский М.К., Животовский Л.А. Популяционная организация горбуши: факты и модели // В кн. Генетика в аквакультуре, 1989.- С. 47-67.

Глубоковский М.К. Эволюционная биология лососевых рыб // Диссерт. на соискан. уч. степ. д. б. н. Владивосток. ИБМ ДВ АН РАН, 1990,- 636 с.

Гордеев В.Д. Предварительные результаты поисков зимней сельди в заливе Анива//Изв. ТИНРО, 1955 -Т. 43,- С. 224-227.

Гриценко О.Ф., Шилин Н.И. Экология размножения сельди Ныйского залива (Сахалин) // Биол. моря, 1979. - №. 1. - С. 58-65.

Дарда М.А. О распределении личинок и сеголетков сельди у юго-западнго побережья Сахалина // Сб. работ по биол., технике рыболовства и технологии . СахТИНРО, 1960 - Вып. 1,- С. 15-26.

Добровольский А.Д., Залогин Б.С. Моря СССР // Изд. МГУ, 1982,- С. 1129.

Дружинин А.Д., Покровская И.С. Некоторые данные о зимней сельди в заливе Анива // Изв. ТИНРО, 1957. - Т. 44. - С. 39-56.

Дружинин А.Д. Материалы по биологии анивской сельди // Изв. ТИНРО, 1957,- Т. 44. - С. 14-38.

Дружинин А.Д. О распределении и поведении нагульной сельди в водах Сахалина // Сб. работ по биол., технике рыбол-ва и технологии. Южно-Сахалинск, 1960,- Вып. 1. - С. 3-14.

Дружинин А.Д. Результаты мечения сельди в водах Сахалина в 19561960 г.г. // Изв. ТИНРО, 1963. - Т. 49,- С. 65-94.

Дружинин А.Д. Материалы по биологии нагульной сельди (С1иреа 11агеп£ш раНавО в водах Сахалина // Изв. ТИНРО, 1964,- Т. ЬУ,- С. 3-38.

Дударев В.А. Состав и биомасса донных и придонных рыб на шельфе северного Приморья // Вопросы ихтиологии, 1996 - Т. 36,- № 3. - С.333-338.

Елкин Е.Я. К вопросу о прогнозировании сроков образования крупных косяков охотской нагульной сельди // Изв. ТИНРО, 1973. -Т. 86. - С. 22-25.

Животовский JI. А., Глубоковский М.К., Викторовский P.M., Броневский A.M., Афанасьев К.И., Ефремов В.В., Ермоленко Л.Н., Калабушкин Б.А., Ковалев В.Г., Макоедов А.Н., Малинина Т.В., Пустовойт С.Н., Рубцова Г. А. Генетическая дифференциация горбуши // Генетика, 1989. -№ 7.- С. 1261-1274.

Зверькова Л.М., Пушникова Г.М, Тарасюк С.Н., Худя В.Н. и др. Результаты исследования популяций морских промысловых рыб в Сахалино-Курильском районе // Деп. Отчет. -1991.-Южно-Сахалинск. 50 с. «Депонир. Научн. Раб.» (Естеств. и точ. науки, техника). 10(240). М. С,- 1154 рк-91.

Зверькова Л.М., Пушникова Г.М. Сырьевые ресурсы Охотского моря у северо-восточного Сахалина//Рыбн. хозяйство, 1996,- № 1. - С. 38-39.

Иванкова З.Г., Козлов Б.М. Сельдь восточного побережья Сахалина // Изв. ТИНРО, 1968 - Т. 65. - С. 12-19.

Иванков В.Н. Изменчивость и микроэволюция рыб // Владивосток. Изд. Дальнев. Унив., 1997,- 124 с.

Истомин Ю.В. Температура вод Японского моря и возможности ее прогноза//Тр.Океанографической комиссии, 1960. -Т. 8. - С. 52-97.

Кагановский А.Г. К вопросу о состоянии сельдевых стад Приморья // Изв. ТИНРО, 1938. -Т. 14. - С. 19-36.

Кагановский А.Г., Полутов И.А. Сельдь Пенжинского залива // Изв. ТИНРО, 1950.- Т. 32. - С. 37-54.

Кагановский А.Г. О летнем и осеннем распределении сахалинской сельди // Изв. ТИНРО, 1954. - Т. 39. - С. 73-81.

Карпенко В.И., Максименков В.В. Предварительные данные о взаимоотношениях тихоокеанских лососей и сельди в период раннего развития // Вопр. ихтиол, 1988,- Т. 28.- Вып. 5. -С. 743-747.

Картавцев Ю.Ф., Соловьев A.A. Программный миникомплекс SPECSTAT для статистической обработки данных по популяционной генетике // Генетика, 1992. -Т. 28,- № 3. -С. 194-197.

Картавцев Ю.Ф., Рыбникова И.Г. Генетическое и морфобиологическое исследование популяций тихоокеанской сельди Clupea pallasi из Японского и Охотского морей // Генетика. В печати.

Качина Т.Ф. Рост корфо-карагинской сельди и время закладки годового кольца//Изв. ТИНРО, 1967. - Т.57.-С. 142-153.

Качина Т.Ф. Некоторые закономерности динамики плодовитости корфо-карагинской сельди//Изв. ТИНРО, 1968. -Т. 64,- С. 315-320.

Качина Т.Ф. Сельдь западной части Берингова моря // Легкая и пшцев. промышленность. М.:, 1981.- 120 с.

Кимура М. Молекулярная эволюция: теория нейтральности // М.: Мир, 1985. -398 с.

Кирпичников B.C. Генетические основы селекции рыб /У Л.:, 1979,- 391

с.

Кирпичников B.C. Возникновение и поддержание биохимического полиморфизма в популяциях животных и растений // В кн. Вопросы общей генетики. Тр. 14-го Междунар. Гент. Конгр. М.:, 1981,- С. 18-27.

Кирпичников B.C. Генетика и селекция рыб // Л.: Наука, 1987,- 520 с.

Козлов Б.М., Шелегова Е.К. Условия, влияющие на промысел в северной части Татарского пролива // Рыбн. хоз-во, 1961. 7. - С. 9-11.

Козлов Б.М., Фролов А.И. Влияние промысла на стр\тстуру и запасы декаст-ринского стада сельди // Изв. ТИНРО, 1973. -Т.91.- С. 3-9.

Коновалов С.М. Популяционная биология тихоокеанских лососей // Л.:Наука, 1980. -237 с.

Корочкин Л.И., Серов О.Л., Пудовкин А.И., Манченко Г.П. Генетика изофер-ментов // В кн.: Генетика изоферментов.- М.: Наука. 1977.- 278 с.

Крыжановский С.Г. Особенности половых продуктов сахалинской сельди Clupea harengus pallasi Val. // Вопр. ихтиол., 1955. - Вып. 5.- С. 34-38.

Кун М.С. Питание тихоокеанской сельди в северной части Татарского пролива//Изв. ТИНРО, 1949. -Т. 29. - С. 107-138.

Лайус Д.Л. Преобразования хромосомных наборов беломорской сельди Clupea pallasi marisalbi (Berg) (Teleostei, Clupeidae) // Тр. Зоол. института АН СССР, 1989. - Т. 192.- С. 113-124.

Лакин Г.Ф. Биометрия // М.: Высшая школа, 1980. - 292 с.

Левонтин Р. Генетические основы эволюции // М.: Изд. Мир, 1978.- 351

с.

Леонов А.К. Японское море // В кн. Региональная океанография. Ч. 1. Л:. Гидромегиздат, I960.- С. 291-463.

Лучин В.А., Дарницкий В.Б. Климатическая вихревая структура течений Охотского моря в осенний период // Тез. докл. IX конф. по пром. океанологии. Л:, 1993. - С. 219-222.

Маркина Н.П., Благодеров А.И., Соболевский Е.И. Биологическая продук-тивность Охотского моря // Тез. Докл. Второй Всесоюзн. Конф. по морской биол.- ТИНРО. -Владивосток, 1991.- Ч. 2,- С. 150-151.

Марти Ю.Ю. Миграции морских рыб // М.: Пшцев. пром., 1980,- 247 с.

Мирошкин К.В.Новая схема поверхностных течений Охотского моря // Океанология, 1964,-Т. 4.-Вып.4. -С. 641-650.

Натаров В.В. О водных массах и течениях Берингова моря // Труды ВНИРО-ТИНРО, 1963. -Т. 48-50.-С. 11-133.

Науменко Н.И. Причины долголетней депрессии корфо-карагинской сельди // В кн. Биологич. ресурсы гидросферы и их использование. М.: Наука, 1990.- С. 139-148.

Науменко Н.И. Некоторые закономерности воспроизводства корфо-карагинской сельди // Сб. Исследования биологии и динамики численности промысловых рыб камчатского шельфа. - Изд. КоТИНРО. 1991.- Вып. 1,-ч.1.--С. 198-209.

Науменко Н.И., Бонк A.A. Состояние и перспективы промысла корфо-карагинской сельди // Рыбное хозяйство. 1998. В печати.

Никольский Г.В. Теория динамики стада рыб // М. Пищевая пром-ть, 1965,- 447.С.

Омельченко В.Т., Вялова Г.П. Популяционная структура горбуши // Биол. моря, 1990,-№ 1,- С. 3-13.

Павлычев В.П. Некоторые результаты научно-промысловой экспедиции на НПС «Новокотовск» в 1994 году // В кн. Комплексные исследования экосисте-мы Охотского моря. М:. ВНИРО, 1997,- С. 56-64.

Пасеков В.П. Генетические расстояния // В кн. Итоги науки и техники, 1983.-М.: Т. 8,- 160 с.

Панин К.И. Материалы по биологии сельди северо-восточного побережья Камчатки //Изв. ТИНРО, 1950,- Т. 32. - С. 3-36.

Пискунов И.А. Некоторые данные о состоянии стада сельди залива Де-Кастри // Изв. ТИНРО, 1947. -Т. 25.- С. 7- 27.

Пискунов И.А. Весенняя сельдь западного побережья южного Сахалина // Изв. ТИНРО, 1952.- Т. 37. - С. 3-67.

Пискунов И.А. О плодовитости сельди (Clupea harengus pallasi V.), размно-жающейся у западного берега о. Сахалин // Зоологич. Жур., 1952. -Т. 31.-С. 115-121.

Пискунов И.А. Материалы по биологии сельди Гижигинской губы // Изв. ТИНРО, 1954. - Т. 39. - С. 59-72.

Покровская И.С. Питание тихоокеанской сельди в юго-восточной части Та-тарского пролива // Изв. ТИНРО, 1954. - Т. 41. - С. 309-319.

Покровская И.С. Питание личинок сахалинской сельди // Изв. ТИНРО, 1957.-Т. 44.-С. 39-56.

Правдин И.Ф. Очерк западно-камчатского рыболовства // Изв. Тихоок. Научно-промысловой станции, 1928. - Т. 1. Вып. 1. - 17с.

Правдин И.Ф. Руководство по изучению рыб // М.: Пищ. пром., 1966.376 с.

Правоторова Е.П. О районах нагула гижигинско-камчатского стада сельди // Рыбн. хоз-во, 1963. -№ 12,- С. 7-8.

Правоторова Е.П. Некоторые данные по биологии гижигинско-камчатской сельди в связи с колебаниями численности и изменением ареала нагула//Изв. ТИНРО, 1965,- Т. 59,- С. 102-128.

Пробатов А.Н., Фролов А.И. Сельдь озера Тоннай // Изв. ТИНРО, 1951.-Т. 35.-С. 97-104.

Пробатов А.И., Варварин И.А. Молодь сельди залива Анива // Изв. ТИНРО, 1951.- Т. 34. - С.25-39.

Пробатов А.Н. Распределение и численность нерестовой сельди у восточных берегов Японского моря // Изв. ТИНРО, 1954.- Т. 39. - С. 21-28.

Пробатов А.Н., Дарда М.А. Биологическая характеристика нерестовой сельди острова Кунашир // Изв. ТИНРО, 1956. - Т. 44. -1956.- С.3-11.

Пробатов А.Н., Фридлянд И.Г. Некоторые закономерности изменения плодовитости у тихоокеанской сельди // Ученые записки Ростовского унив., 1957.-Т. 28.-Вып. 5. - С. 141-147.

Посадова В.П. Межгодовая изменчивость нерестовых подходов сельди зали-ва Петра Великого // Сб. Сельдевые северной части Тихого океана. -Владивосток. - Изд. ТИНРО, 1985,- С. 22-29.

Посадова В.П. Состояние запасов сельди зал. Петра Великого // Сб. Изменчи-вость состава ихтиофауны, урожайность поколений и методы прогнозир. запа-сов в северной части Тихого океана. - Владивосток. - Изд. ТИНРО, 1988.-С.64-69.

Посадова В.П. Численность сельди залива Петра Великого (Японское море) и причины ее снижения // Певый Конгресс ихтиологов России. Астрахань, 1997.-С.516.

Пушникова Г.М. О состоянии запасов и возрасте оптимальной эксплуатации сахалино-хоккайдской сельди // Изв. ТИНРО, 1981. - Т. 105. -С.79-84.

Пушникова Г.М., Пушников В.В., Рыбникова И.Г. О внутривидовой структуре сельди шельфа Сахалина в период депрессии численности // Изд. Географич. Общ., Южно-Сахалинск, 1987.- С. 111-114.

Пушникова Г.М., Ившина Э.Р. Состояние и перспективы использования стад сельди в водах Сахалина // Тез. Докл.- Владивосток,- ТИНРО, 1992,-С.51-52.

Пушникова Г.М. Тихоокеанская сельдь // В сб. Промысловые рыбы, беспозвоночные и водоросли морских вод Сахалина и Курильских островов. ДВ книж изд. - Южно-Сахалинск, 1993.- С. 85-89.

Пушникова Г.М. Состояние запасов сахалино-хоккайдской сельди и пути стабилизации ее численности // Сб. Рыбохозяйственные исследования в Сахалино-Курильском районе и сопредельных акваториях . Южно-Сахалинск. - Изд. СахНИРО, 1994,- С. 47-56.

Пушникова Г.М. Характеристика экологических групп сельди юго-западной части Охотского моря // PISES. Владивосток. Россия, 1995.- С. 68.

Пушникова Г.М. Промысел и состояние запасов сельди присахалинских в( // Науч. Труды. - Дальрыбвтуз. - Владивосток, 1996,- Вып.8,- С. 34-43.

Радченко В.И., И.В. Мельников, А.Ф. Волков, А.Ю. Семенченко, И.И. Глебов, A.A. Михеев, С.А. Черкашин, А.Н. Старовойтов. Состав планктонных и нектонных сообществ в эпипелагиали северной части Охотского моря осенью 1994 г. //Биология моря, 1997. - Т. 23. - № 3. - С. 143-150.

Риман Н., Аттер Ф.М. Генетика и управление рыбным хозяйством // В кн. Популяц. генет. и управление рыбным хоз-вом.. М. ВО Агропромиздат, 1991.- С. 15-35.

Румянцев А.И., Фролов А.И, Козлов Б.М. Миграции и распределение сельдей в водах Сахалина // Изд. Рыбное хоз. - ВНИРО, 1958. - С. 44.

Румянцев А.И. Методы, применяемые для оценки запасов и прогнозирования возможных уловов промысловых рыб в сахалинских водах // Труды ВНИРО, 1967. -Т.- 62,- С. 107-121.

Рыбникова И.Г. Популяционно-генетическая структура сельдей Охотского моря // В сб. Сельдевые северной части Тихого океана. Изд. ТИНРО,-Владивосток, 1985,-С. 57-62.

Рыбникова И. Г. Результаты популяционно-генетического изучения тихоокеанской сельди Clupea pallasi Val/ // В сб. Генетические исследования гидробионтов. - М.: ВНИРО, 1987,- С. 94-107.

Рыбникова И.Г. Популяционно-генетическая дифференциация тихоокеанс-кой сельди // Науч. Труды. Дальневост. госуд. технич. рыбохоз. унив. Владивосток, 1996.- Вып. 8. - С. -17-24.

Рыбникова И.Г., Пушникова Г.М., Беседнов Л.Н. Взаимодействие сахалино-хоккайдской сельди с другими популяциями этого вида // Биол. Моря, 1998. -Т. 24,- №. 4. - С. 218-227.

Световидов А.Н. О некоторых биологических особенностях тихоокеанской сельди и о причинах, их обуславливающих // Изв. ТИНРО, 1949. - Т. 31. - С. 59-64.

Световидов А.Н. Сельдевые. Рыбы. // Фауна СССР,- М.-Л: Изд. АН СССР, 1952. - Т. 2,-Вып. 1,- 331 с.

Сизова Ю.В. Циркуляция вод Японского моря // М.\ Изд. АН СССР, 1961.-С. 146-154.

Смирнов A.A. Некоторые черты биологии, распределения и поведения гижигинско-камчатской сельди в осенний период 1989 г. // Отчет, Арх. № 20940, Магадан,- 1990. № гос. per. 01829005236,-Руков. Вышегородцев.-22с.

Степанов В.Н. Общая характеристика гидрологии Японского моря // В кн. Основные черты геологии и гидрологии Японского моря. М.\ Изд. АН СССР, 1961,-С. 102-108.

Суховеева М.В. Видовой состав и распределение макрофитов в районах размножения сельди у северо-западного побережья Охотского моря // Изв. ТИНРО, 1976. - Т. 100. - С. 144-146.

Суховей В.Ф. Моря Мирового океана // JI:. Гидрометнздат, 1986.- 288 с.

Трувеллер К.А., Н.М. Алферова, H.A. Масленникова. Электрофоретическое исследование белков сельдей Clupea harengus s. 1. // Сб. Биохимическая генетика рыб,- ЦИН АН СССР, 1973,- С. 188-194.

Тюрнин Б.В. Материалы по биологической характеристике сельди Аянского района // Изв. ТИНРО, 1965. - Т. 59. - С. 82-91.

Тюрнин Б.В. Нерестовый ареал охотской сельди // Изв. ТИНРО, 1973. -Т. 86.-С. 12-21.

Тюрнин Б.В. Структура нерестовой популяции сельди северо-западной части Охотского моря, ее динамика и биологические основы прогнозирования улова // Автореферат на соск. уч. степени к.б.н. Владивосток. Изд. ТИНРО, 1975,-23 с.

Упрямов В.Е. Биология озерных сельдей Камчатки и их промысел // Тез. докл. 3-ей per. конф. «Биол. ресурсы шельфа, их pan. исп. и охрана». -Южно-Сахалинск, 1986,-С. 67.

Фархутдинов Р.Н. Эффективность использования искусственных нерестилищ для воспроизводства охотской сельди // Сб. Научно-технич. проблемы марикультуры в стране. - Изд. ТИНРО, 1989,- С.48-49.

Фролов А.И. О локальных стадах сахалинской сельди (Clupea harengus pallasi C.V.) // Докл. АН СССР, 1949. - Т.69,- № 6. - С. 861-864.

Фролов А.И. О локальных формах сахалинской сельди // Изв. ТИНРО, 1950.-Т. 32.-С. 65-71.

Фролов А.И. Морфологическая характеристика сельдей вод Сахалина // Изв. ТИНРО, 1964. - Т. 55. - С. 39-53.

Фридлянд И.Г. Размножение сельди у западного побережья южного Сахалина // Рыбное Хоз-во, 1949. - №. 1. - С. 35-39.

Фридлянд И.Г. Размножение сельди у юго-западного берега Сахалина // Изв. ТИНРО, 1951,-Т. 35. - С. 105-145.

Хикада К. Японское море // В кн. Океанографическая энциклопедия. Л:. Гидрометиздат, 1974.-С. 626-631.

Чакраборти Н., Леймар О. Генетическая изменчивость в подразделенной популяции // В кн. Популяционная генетика и управление рыбным хозяйством,- М.: ВО Агропромизд, 1991.- С. 114-154.

Чернявский В.И. Циркуляционные системы Охотского моря //Изв. ТИНРО, 1981,- Т. 105,- С. 13-19.

Шелегова Е.К. Влияние япономорских вод на термический режим и промысел рыб у юго-восточного берега Сахалина // Бюлл. Тхнико-экон. инфор-мции. - Южно-Сахалинск, 1962,- № 5. - С. 49-55.

Шабельский Д.Jl. Особенности биологии сельди северного Приморья // Рыбохозяйств. исслед. океана. Матер. Юбил. науч. конф. Владивосток. Дальрыбвтуз, 1996.-С. 103-105.

Шмидт П.Ю. Морские промыслы острова Сахалина // С.-Петербург, 1905.-454 с.

Шунтов В.П. Биологические ресурсы Охотского моря // М.: Агропромиздат, 1985,-224 с.

Шунтов В.П., Дулепова Е.П. Экосистемы Берингова и Охотского морей //Рыб. хоз-во, 1991,- № 6. - С. 25-27.

Шунтов В. .П., Радченко В.И., Чучукало В.И., Ефимкин А.Я., Кузнецова H.A., Лапко В.В., Полтев Ю.Н., Сенченко H.A. Состав планктонных и нектон-ных сообществ верхней эпипелагиали западной части Берингова моря и тихо-океанских вод Камчатки в период анадромных миграций лососей // Биол. моря, 1993,- № 4.- С. 19-31.

Шунтов В.П., В.В. Лапко, В.В. Надточий, Е.В. Самко. Межгодовые изменения в ихтиоценах верхней эпипелагиали сахалино-курильского региона // Вопр. ихтиол., 1994,- Т. 34.- №. 5. - С. 649-656.

Шунтов В.П. Межгодовая динамика в составе и структуре пелагических сообществ Охотского моря // Природа ДВ. Вестник ДВО РАН, 1995.- №. 6. -С. 80-89.

Шунтов В.П., Радченко В.И., Дулепова Е.П., Темных О.С. // Биологические ресурсы Дальневосточной Российской экономической зоны: структура пелагических и донных сообществ, современный статус, тенденции многолетней динамики // Изв. ТИНРО, 1997. - Т. 122. - С. 3-15.

Шунтов В.П., K.M. Горбатенко, В.В. Надточий, H.A. Кузнецова, Е.В. Самко, Т.А. Зяблицкая. Современное состояние планктонных и нектонных сообществ эпипелагиали Сахалино-Курильского региона // Биология моря, 1998.-Т. 24.-№3.-С. 161-168.

Шунтов В.П., К.М. Горбатенко, В.В. Надточий, Н.А. Кузнецова, Е.В. Самко, Т.А. Зяблицкая. Современное состояние эпипелагических сообществ северо-восточной части Охотского моря // Биология моря, 1998. - Т. 24. - № 2. -С. 96-102.

Яблоков А.В. Фенетика. Эволюция, популяция, признак // М.:, 1980.136 с.

Яблоков А.В. Популяционная биология // М. Высш. Школа, 1987,- 304

с.

Ямагучи Г. Изучение биологии сельди , обитающей у о. Хоккайдо // Изв. Хоккайдской н.-пр. станции, 1926,- № 17. -17 с.

Яричин В.Г. Состояние изученности циркуляции вод Японского моря // В сб. Вопросы океанографии. Л:. Гидрометиздат, 1980,- С. 46-61.

Allen S.K. Flow citometry: Assaying experimental polyploid fish and shellfish // Aquaculture, 1983. - V. 33. - P. 317-328.

Allendorf F.W., Phelps S.R. Use of allelic friquensies to describe population sructure // Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1981,- V. 38,- P. 1507-1514.

Allendorf F.W., Utter F.M. Population genetics // In fish physiology. Academic Press. New York, 1979. - V. 8. - P. 407-454.

Altukhov Yu. P., Salmenkova E.A. Applications of the stock concept to fish populations in the USSR // Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1981. - V. 38,- P. 1591-1600.

Andersson S., Bankier A.T., Barrell B.G., de Bruijn M.H.L., Coulson A.R., Drouin J., Eperon I.C. et al. Seguence and organization of the human mitochondrial genom //Nature, 1981. - V. 290. - P. 457-465.

Avise J.C. Systematic value of electrophoretic data // Syst. Zool., 1974,- V. 23. - P.465-481.

Ayushin B.N. Abundance dynamics of herring population in the seas of Far-East and reasons for the introduction of fisheiy regulation // Rapp. Proces Verb., 1963. -V. 154. - P. 262-269.

Berst A.H., Simon R.C. (eds). Proceedings of the stock Concept Symposium //Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1981,-V. 38(12). - P. 1457-1458.

Clayton I.W., Tretiak D.N. Amine-citrate buffers for pH control in starch gel electrophoresis //J. Fish. Res. Board of Canada, 1972,- V. 29.- P.l 169-1172.

Chakraborty R., Haag M., Ryman N., Stahl G. Hierarchical gene diversity analysis and its application to brown trout population data // Hereditas. 1982,- V. 91.- P. 17-21.

Cushing D.H., BurdA.C. On the herring of the Southern North Sea. III. //Fish Invest. Ser.- II, 1957.- V.- 10. - 31 p.

Dushkina L.A. Influence of salinity on eggs, sperm and larvae, of lowvertebral herring reproducing in the coastal waters of the Soviet Union // J. Marine Biology, 1973,- Y. 19,- P. 210-223.

Fujita T., Kokubo S. Studies of herring // Bull, of School of Fish. Hokkaido Imperial Univ. Sapporo, 1927. - V. 1.- Pt. 1,- 25 p.

Gaffney P.M. Enzyme heterozygosity, growth rate, and variability in Mytilus edulus, another look // Evolution, 1990,- V. 44. - No. 1,- P. 204-210.

Grant W.S. Biochemical genetic variation, population structure, and evolution of Atlantic and Pacific herring // Ph. D. Dissertation, University of Washington. Seattle, 1981.- 135 p.

Grant W.S., Zhang C.I. Electrophoretic examination of Korean herring Clupea harengus pallasi // Bull. Fish. Res. Dev. Agency, 1983,- V. 31,- P.49-60.

Grant W.S.,Utter F.M. Biochemical population genetics of Pacific herring (Clupea pallasi) // Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1984.- V. 41,- P. 856-864.

Grant W.S. Biochemical genetic divergence between Atlantic, Clupea harengus, and Pacific, C. pallasi, herring // Copeia, 1986,- P. 714-719.

Grant W.S., Zhang C.I. Electrophoretic examination of Korean herring Clupea harengus pallasi //Bull. Fish. Res. Dev. Agency, 1983. V. 31. P. 49-60.

Gross M. Disruptive selection for alternative life histories in salmon // Nature, 1985.- V.- 313. - P. 47-48.

Haegele C.W., Schweigert J.F. Distribution and characteristics of herring spawning grounds and description of spawning behavior // Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1985,-V. 42. - P.-39-55.

Harris H., Hopkinson D. Handbook of enzime electrophoresis in human genetics // American Elsevier. New York, 1976.

Hourston A.S. Homing by Canada's west coast herring to managment units and divisions as indicated by tags recoveries // Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1982.- V.-39,-P. 1414-1442.

Heinke F. Naturgeschichte des herrings // Berlin, 1898,- V.2.

Iizuka A., Morita S. Review of herring fishery and its biological reserch Japan//Mar. Behav. Physiol, 1991.- V. 18.-P.227-302.

lies T.D., Sinclair M. Atlantic herring: Stock discreteness and abundance // Science, 1982,-V. 215,-No. 4533,- P. 627-633.

Irie T. On herring populetons of Hokkaido-Sakhalin Waters // Bull. Hok. Reg. Fish. Res. Lab. Fish. Agency, 1980. - No. 45,- P. 1-14.

Jonsson B., Hindar K., Northcote T.G. Optimal age at sexual maturity of sympatric and experimentally allopatric cuttroat trout and Dollyv Varden charr // Oecologia, 1984,- V. 61.- P. 319-325.

Jorstad K.E., King D.P.F., Naevdal G. Population structure of Atlantic herring, Clupea harengus L. // J. Fish. Biol., 1991,- V. 39.- Suppl. A.- P.43-52.

Jorstad K.E., Dahle G., Paulsen O.I. Genetic comparison between Pacific herring (Clupea pallasi) and Norwegian Fjord stock of Atlantic herring (Clupea harengus)// Can. J. Fish, and Aquat. Sci., 1994,- V.51. Suppl. n 1.- P.223-239.

Kanno Y. On subpopulation of herring Clupea pallasi in the Okhotsk Sea adjasent to Hokkaido // Bull. Jap. Soc. Sci. Fish., 1982,- V. 48,- No. 6,- P. 755762.

Kanno Y. Variations in meristic and morphometric characters among populations of herring Clupea pallasi in the Far Eastern Waters /7 Nippon Suisan Gakkaishi, 1989a. - V. 55,-No. 3. - P. 431-439.

Kanno Y. Causes for morphological variation among populations of herring Clupea pallasi in hte FAR eastern Waters //Nip. Suis. Gak., 1989 b.- V. 55.-No. 3.-P. 441-445.

Karpenko V.I., Maksimenkov V.V. The inpact of Pacific salmon on herring survial in the western Bering Sea // In Proceeding of the Intern. Herring Sympos.-Anchorage, 1990,-P. 445-449.

Kartavtsev Yu. Ph. Allozyme variability and differentiation sources in pink shrimp Pandalus borealis // Isozyme Bull., 1993.- V. 29,- P. 30.

Kijima A., Nakajima M., Fujio Y. Genetic differentiation among lcalities in the natural Pacific herring around Japan and genetic characterization of the artificial seeds compared with the natural population// Tohoku J. Agr. Res., 1992.-42, 3-4.-P.83-93.

King M.C., Wilson A.C. Evolution at two levels in humans and chimpanzees//Science, 1975,-V. 188.- P. 107-116.

King D.P.F., Ferguson A., Mofett I.J.J. Aspecta of the population genetics of herring, Clupea harengus, around thr British Isles and in the Baltic sea // Fish. Res., 1987.-V. 6. - P. 35-52.

Klinkhardt M.B. Cytogenetics of the herring (Clupea harengus L.) 1 Karyotypes of North European stocks // Cytobios. Great Britain, 1993a.- No. 75,- P. 113-128.

Klinkhardt M.B. Cytogenetics of the herring (Clupea harengus L.) 2 Karyotypes of White Sea herring gpoups // Cytobios. Great Britain, 1993b.- 75.- P. 149-156.

Kobayashi T. Study on two genetically spawning groups of Pacific herring Clupea harengus pallasi Valenciennes) appearing in Ishikari Bay. Hokkaido // Bull. Hok. Reg. Fish. Res.Lab., 1983.- No. 48,- P. 11-19.

Kobayashi T., Iwata ML Numachi K. Genetic divergence among local spawning populations of Pacific herring in the vicinity of Northern Japan // Nippon Suisan Gakkaishi, 1990.- V. 56.- No. 7,- P. 1045-1052.

Kobayashi T. Biochemical analyses of genetic variability and divergence of populations in Pacific herring // Bull. Nat. Res. Inst. Far Seas Fish., 1993. No.30. P. 1-77.

Kondo H. On the conditions of herring Clupea pallasi Cuvier et Valenciennes in waters around Hokkaido and Sakhalin during recent sient // Rep. Of the Hoi. Fish. Exp. St., 1965.- V. 3. - P. 3-18.

Kornfield I., Gagnon P., Sidell B. Inheritance of allzymes in Atlantic herring (Clupea harengus harengus) // Can. J. Genet. And Cytol., 1981,- V. 32. - P.715-720.

Kornfield I., Sidell B.D., Gagnon P.S. Stock difinition of Atlantic herring (Clupea harengus harengus): genetic evidence for discrete falland spring spawning populations // Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1982,- V. 39. - P. 1610-1621.

Kristjansson F.K. Genetic control of three haptoglobins in pigs // Genet., 1971.-V. 46,- P. 907-912.

Leary R.F., Allendorf F.W., Knudsen K.L. Developmental stability and enzyme heterozygosity in rainbow trout // Nature, 1983. - V. 301.- P. 71 -71.

Lewontin R.C., Krakauer J. Distribution of gene frequency as test of theory of the selective neutrality of polymorfisms // Genetics, 1973,- V. 74,- P. 175-195.

Lewontin R.C. Detecting population differences in quantitative characters as opposed frequensies // Amer. Natur., 1984.- V. 123.- P. 115-124.

Manchenko G.P. Handbook of detection of enzymes on electrophoretic gels // CRC Press. Boca Raton Ann Arbor London Tokyo, 1994,- 341 p.

Maurer H.R. Disc electrophoresis, and related techniques of polvacrilamide gel electrophoresis // Berlin - New-york, 1971. - 359 p.

Mayr E. Principles of systematic zoology // McGraw-Hill. New-York. -1969.-330 p.

Moriyasu S. The Tsushima current. The Kuroshio. Its physical aspects // Tokyo, 1972.-P. 353-363.

Moser M. Biological tags for separation of Pacific herring (Clupea harengu pallasi Valenciennes) and the possible effect of «El Nino» currents on parasitism // Proc. Inst. Herring Symp. Anchorage. Rep., 1991.- No. 90-01. - P.245-254.

Naevdal J. Distributions of multiple forms of lactate degidrogenase, aspartate aminotransferase and serum aeterase in herring from Horwegian Waters // Rep. Proc. Verb. Copenhagne, 1971,- V. 161.- 83-90.

Naumenko N.I. The reproductive biology of herring in the western Bering Sea with reference to spawning stock numbers // Alaska Sea Grant College Program, 1991,- Report No.91-01.- P.323-327.

Naumenko N.I. Stock dynamics of western Bering Sea herring // Ecology of the Bering Sea: A rewiew of russian literature. Univ. Of Alaska Col. Progr. Rep.-Anchorage, 1996.-No. 96-01,-P. 169-175.

Nei M. Genetic distance between populations // Amer. Nat., 1972,- V. 106.-P.283-292.

Nei M. F-statistics and analysis of gene diversity in subdivided populations // Annals of Human Genetics, 1977.- V. 41.- P. 225-233.

Nei M. Estimation of average heterozigosity and genetic distance from a small namber of individuals // Genetics, 1978,- V. 89,- P. 583-590.

Nei M. Molecular evolutionary genetics. N.Y.: Columbia Univ. Press., 1987.

512p.

Odense P.H., Allen G.M. A biochemical comparison of some Atlantic herring populations//Rap. Proc. Verb. Copenhague, 1971,- V. 161. - P. 21-25.

Pushnikova G.M. The features of the southwestern Okhotsk Sea herring groups // PICES. Abstracts. - Vladivostok, Russia, 1995,- P.68.

Ridgway G.J., Klonta G.W., Lewis R.D. Polymorphism in the esterases of Atlantic herring // Trans. Amer. Fish. Soc., 1970,- V. 99.-P. 147-151.

Rogers J.S. Measures of genetic similarity and genetic distance // In: Studies in Genetics YII.- Univ. Tex.. Publ. 7213., Austin. Tex., 1972,- P. 145-153.

Rogers A.R., Harpending H.C. Population structure and quantitative characters//Genetics, 1983,-V. 105,-P. 985-1002.

Rosenthal H., Alderdice D.F., Velsen F.P.J. Cross-fertilization experiments using Pacific eggs and cryopreserved Baltic herring sperm // Can. Fish, and Marine Serv. Techn. Rep., 1978. - V. 844. - 9 p.

Rholf F.J. NTSYS-pc. Numerical taxonomy and multivariate and analysis system // Exeter Publishing. LTD. New York.- 1988. p. 223.

Ryman N. Recommendations // In Fish gene pools. Ecol. Bull. Stockholm, 1981.-V. 34.-P.61-74.

Ryman N., Stahl G. Genetic changes in hatchery stocks of brown trout (Salmo trutta) // Can. J. Fish. Aquat. Sci., 1981,- V. 37. - P. 82-87.

Ryman N. Patterns of distribution of biochemical genetic variation in salmonids: Differences between species // Aquqculture, 1983.-V. 33,- P. 1-21.

Ryman N., Lagercrantz U., Andersson L., Chakraborty R., Rosenberg R. Lack of correspondence between genetic and morrphologic variability in Atlantic herring (Clupea harengus) // Heredity, 1984,- V. 53.- P. 687-704.

Ryman N., Utter F. Population genetics and fishery managment // Washington Sea Gran Progr. Distrib. By Univ. Of Washington Press Seattle and London, 1991,-420 P.

SchweigertJ.F., Withler R.E. Genetic differentiation of Pacific herring on enzyme electrophoresis and mitochondrial DNA analysis // Amer. Fish. Sci. Symposium, 1990,-V. 7.-P. 459-469.

Schweigert J.F. Comparison of morphometric and meristic data against truss networks for describing Pacific herring stocks // Amer. Fish. Soc. Sympos., 1990.-V. 7,- P.47-62.

Shaklee J.B., Allendorf F.W., Morizot D.C., Whin G.S. Genetic nomenclature for protein-coding loci in fish: Proposed guidelines // Trans. Amer. Fish. Soc., 1989,- V. 118.-P.218-227.

Shaw C.R. The use of genetic variation in the analysis of isozyme structure. In Subunit Structure of Proteins, Biochemical and Genetic Aspects // Brookhaven Sympsia of Biology. New York, 1964. - No. 17,- pp. 117-130.

Shaw C.R., Prasad R. Starch gel electrophoresis of enzymes: a compilation of recipes // Biochem. Genet., 1970,- V. 4,- No. 2.- P. 297-320.

Schiff R., Stormont C. The biochemical genetics of rabbit erythrocyte esterases: two new esterases loci // Biochem. Genet., 1970. - V. 4,- P. 11-17.

Slatkin M. Gene flow in natural population // Ann. Rev. Ecol. Syst., 1985.-V. 16,-P. 393-430.

Smith P. J., Jamieson A. Stock discreteness in herring: A conceptual revolution // Fish. Res., 1986,- V. 4.- P. 223-234.

Smithies O. Zone electrophoresis in starch gels: Group variations in the serum proteins of normal human adults // Biochem. J., 1955.- V. 61. - P. 629-641.

Sneath P.H.A., Sokal R.R. Numerical taxonomy // W.H. Freeman, San Francisco, 1973.- 573 p.

Statistica. StatSoft, Inc. STATISTICA for Windows [Computer program manual] // Tulsa, OK: StatSoft, Inc., 2300 East 14th Street, Tulsa, OK, 741044442, [phone], fax: [phone], e-mail: [e-mail], WEB: http://www.statsoftinc.com.1995.

Tester A.L. Populations of herring (Clupea pallasi) in the coastal waters of British Columbia // Fish. Res. Board Can. - V. 3.- P. 108-144.

Utter F. M. Phosphoglucomutase and esterase polymorphism of Pacific herring in Washington waters // H.R.MacMillan lectures in fisheries.- Seattle. Washington, 1970,-P. 191-197.

Utter F.M., Hodgins H.O., Allendorf F.W. Biochemical genetics studies of fishes: Potencialities and imitations // Biochem. And Biophys. Perspectives in Marine Biol. New-York, 1974,- V.l. - P. 213-238.

Workman P.L., Niswander J.D. Population studies on south-western Indian tribs. II. Local genetic differentiation in Papago // Am. J. Human Genet., 1970.- V. 22.- P. 24-29.

Приложение. Рисунок 1. Фотография электрофорети чес кого спектра аспартатаминотрансферазы (локус ААТ2*) тихоокеанской сельди Clupea pallas!.

'i. .^v : ■ •

EST2;

Приложение. Рисунок 2. Фотография электрофоретического спектра эстеразы (локус EST2*) тихоокеанской сельди Clupea pallasi.

«»si

г . m - -

EST4* -100

- 96

— 92

Приложение. Рисунок 3. Фотография электрофоретического спектра эстеразы (локус EST4*) тихоокеанской сельди Clupea pallasi.

Приложение. Рисунок 4. Фотография электрофоретического спектра глюкозофосфатизомеразы (локус ОР1*) тихоокеанской сельди Оиреа раИаз!.

"+* ' ПЖР2*

106

____ 100

VI _ 91

Приложение. Рисунок 5. Фотография электрофоретического спектра изицитратдегидрогеназы (локус ГОНР2*) тихоокеанской сельди С1иреа раНаБг.

111

* Ф -100 РвМ2*

I*6 -— 82

Приложение. Рисунок 6. Фотография электрофоретического спектра фосфоглюкомутазы (локус РОМ2*) тихоокеанской сельди СШреара11аБ1.