Получение in vitro клеточных и тканевых культур подсолнечника (Helianthus Annus L.), устойчивых к Sclerotinia sclerotiorum тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Нгуен Тхань Хай

• Нгуен Тхань Хай
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Нгуен Тхань Хай

Введение

ГЛАВА I. Литературный обзор

1.1. Подсолнечник как объект хозяйственного использования

1.1.1. Ботаническая характеристика подсолнечника (Helianthus annus L.)

1.1.2. Народнохозяйственное значение подсолнечника

1.1.3. Основные болезни подсолнечника

1.2. Культура ткани подсолнечник in vitro

1.3. Клеточная селекция растений на устойчивость к болезням

1.3.1. Использование патогенов в клеточной селекции растений на устойчивость к болезням

1.3.2. Использование культурального фильтрата патогена при клеточной селекции растений на устойчивость к болезням

1.4. Механизм устойчивости растительных клеток к действию 33 биотических факторов

ГЛАВА II. Объект и методы исследований

2.1. Объекты исследований

2.2. Методы исследований

2.2.1. Условия культивирования

2.2.2. Клеточная селекция подсолнечника in vitro

2.2.3. Биохимические и морфофизиологические исследования

2.2.4. Статическая обработка результатов исследований

ЭКСПЕРЕМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА III. Экспериментальный морфогенез в культуре изолированных тканей и органов подсолнечника in vitro

3.1. Оптимизация условий получения хорошо растущей стерильной культуры подсолнечника

3.2. Зависимость каллусогенеза и морфогенеза от первичного экспланта

3.3. Зависимость каллусогенеза и морфогенеза от исследуемого генотипа

3.4. Зависимость каллусогенеза и морфогенеза от гормонального состава 53 питательной среды

3.5. Морфофизиологические характеристики каллусных культур

3.6. Влияние гормонального состава питательной среды на морфогенез каллусной ткани подсолнечника различных генеотипов

ГЛАВА IV. Клеточная селекция подсолнечника на устойчивость к 67 патогену Sclerotinia sclerotiorum

4.1. Получение культурального фильтрата гриба Sclerotinia sclerotiorum

4.2. Фитотоксичность культурального фильтрата гриба Sclerotinia sclerotiorum

4.3. Клеточная селекция подсолнечника

ГЛАВА V. Роль фенольных соединений в адаптации каллусных культур подсолнечники in vitro к действию экзометаболитов гриба Sclerotinia sclerotiorum

5.1. Количественный состав фенольных соединений в первичном экспланте и каллусной ткани подсолнечника культивируемой в стандарных и стрессовых условиях

5.2. Качественный состав фенольных соединений в первичном экспланте и каллусной ткани подсолнечника культивируемой в стандарных и стрессовых условиях

5.3. Изменение полифенолоксидазы в первичном экспланте и каллусной ткани, культивируемой в стрессовых и стандартных условиях in vitro

ГЛАВА VI. Экспресс-биологический метод и его применение для оценки устойчивости различных генотипов подсолнечника к белой гнили {Sclerotinia sclerotiorum)

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение in vitro клеточных и тканевых культур подсолнечника (Helianthus Annus L.), устойчивых к Sclerotinia sclerotiorum»

Одной из основных задач сельскохозяйственного производства является создание новых эффективных сортов культурных растений. В работе селекционеров особое внимание уделяется созданию генотипов, сочетающих в себе, как высокую продуктивность, так и устойчивость к болезням, а также к другими биотическим стрессовым факторам.

Подсолнечник (Helianthus), одна из основных масличных культур в России, занимающая площадь 3,7 миллионов гектаров, относится к основным источникам получения растительного масла. Белок семян подсолнечника -высококачественный пищевой продукт, а шрот - ценный корм для животных (Дьяков, 2004).

В связи с возрастанием роли подсолнечника, как > ценной продовольственной и кормовой культуры, первостепенное значение приобретает разработка защитных мероприятий от комплекса болезней -белой, серой, пепельной гнилей, фузариоза, эмбелдизии ложно - мучнистой росы. Особую опасность для культуры подсолнечника представляют эпифитотии белой гнили (Sclerotinia sclerotiorum), а в последние годы фомопсиса (Phomopsis helianthi), являющиеся одними из основных причин значительного недобора урожая и снижений товарных и посевных качеств семян (Якуткин, 2003). Так, белая гниль ежегодно поражает подсолнечник на площади 1,5-2 миллионов гектаров, снижая урожай на 4 -5 центнера с гектара. В годы эпифитотии урожай погибает почти полностью, а масло в собранных семенах не пригодно для пищевых целей. Новая грибная болезнь подсолнечника - фомопсис, может снижать урожайность на 50-87 %, а масличность семянок - до 35-37%.

Данную проблему трудно решить, используя только традиционные способы защиты растений и посевов: агротехнические, химические и биологические, так как ни один из них в отдельности не обладает достаточной эффективностью.

Радикальным средством защиты растений от фитопатогенов является селекция, создание комплексно устойчивых сельскохозяйственных культур, и прежде всего, с использованием отдаленной гибридизации. Этим методом созданы многие ценные формы, сорта и гибриды сельскохозяйственных растений. Однако продолжительность такой селекции достигает 15-20 и более лет, а степень устойчивости растений к вредным организмам является недостаточной и далеко не всегда отвечает требованиям производства.

Одним из новых, перспективных путей повышения эффективности селекционного процесса является использование современных методов биотехнологии, позволяющих расширить спектр генетического разнообразия (сомаклональная вариабельность, соматическая гибридизация, индуцированный мутагенез, генетическая инженерия) и сократить сроки проведения селекции. Значительное место в решении этих задач занимает клеточная селекция, основанная на отборе клеточных популяций, устойчивых к селективному фактору, и регенерации из них целых растений (Калашникова, 2003).

Поиск генотипов подсолнечника устойчивых к различным патогенам (в частности к Sclerotinia sclerotiorum) возможен в культуре in vitro при культивировании эксплантов на питательных средах, содержащих продуцирующие токсины патогенов.

Исходя из выше изложенного, работа по получению in vitro клеточных и тканевых культур подсолнечника, а также ратений-регенерантов, устойчивых к склеротиниозу, является своевременной и актуальной.

Цель работы: - получение и изучение клеточных тканевых культур подсолнечника, устойчивых к склеротиниозу.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

1. Получить каллусные культуры трех генотипов подсолнечника: Кубанский 93, ВК 580, ВК 653;

2. Изучить зависимость процесса каллусогенеза от типа первичного экспланта исходного генотипа и состава питательной среды;

3. Отработать методику по получению культурального фильтрата патогена Sclerotinia sclerotiorum\

4. Провести клеточную селекцию и получить устойчивые клеточные культуры подсолнечника к экзометаболитам патогена Sclerotinia sclerotiorum',

5. Изучить влияние культурального фильтраты патогена на синтез фенольных соединений в каллусной культуре, а также на морфофизиологические и цитохимические характеристики полученных тканей.

Научная новизна. Разработана схема получение культурального фильтрата гриба Sclerotinia sclerotiorum. Разработана схема селекции в in vitro на каллусной культуре подсолнечника по устойчивости клеток к действию экзометаболитов патогена Sclerotinia sclerotiorum. Впервые получены и охарактеризованы популяции клеток подсолнечника, обладающие устойчивостью к КФ патогена Sclerotinia sclerotiorum. .

Изучена зависимость способности клеток суспензионных культур к синтезу фенольных соединений от генотипа, времени и условий их культивирования in vitro. Показана роль фенольных соединений и полифенолоксидазы в адаптации клеток к действию стресс-фактора. Более высокое их накопление характерно для устойчивых к экзометаболитам клеточных культур, по сравнению с неустойчивыми. Установлено, что стресс-фактор приводит к изменению как количественного, так и качественного состава растворимых фенольных соединений.

Впервые оптимизированы условия культивирования изолированных эксплентов, обеспечивающие получение растений-регенерантов непосредственно из первичного экспланта или каллусной ткани.

Разработан экспресс-биологический метод для оценки устойчивости различных генотипов подсолнечника к склеротиниозу (Sclerotinia sclerotiorum), который может быть рекомендован для применения в селекции растений.

Практическая значимость. Показана возможность селекции in vitro каллусной ткани к склеротинии с помощью КФ патогена. Предложенная технология клеточной селекции может быть использована на каллусной культуре других высших растений для отбора клеток и тканей толерантных к Sclerotinia sclerotiorum. Устойчивые клеточные линии сельскохозяйственных растений могут применяться как исходный материал для получения растений-регенерантов, обладающих устойчивостью к склеротинии, которые могут быть включены в схему классической селекции по созданию новых сортов и гибридов сельскохозяйственных растений. Разработанный и предложенный экспресс-метод для оценки устойчивости различных генотипов подсолнечника к склеротиниозу (Sclerotinia sclerotiorum)woyKQT быть рекомендован для применения в селекции растений.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Нгуен Тхань Хай

ВЫВОДЫ

1. Впервые для подсолнечника разработан метод получения клеточных и тканевых культур, обладающих относительной устойчивостью к воздействию экзометаболита фитопатогенного гриба Sclerotinia sclerotiorum. Метод основан на культивировании каллусных тканей на питательных средах, содержащих селективный фактор - культуральный фильтрат патогена (КФ). Впервые разработана технология получения высокотоксичного КФ фитопатогенного гриба Sclerotinia sclerotiorum в условиях in vitro.

2. Установлено, что культуральный фильтрат патогена Sclerotinia sclerotiorum в концентрациях 5% и 25% оказывает стимулирующее влияние на прирост каллусной ткани и рост интактных растений соответственно, а при более высоких концентрациях проявляет ингибирующий эффект. Установлено, что клеточную селекцию подсолнечника целесообразно проводить в присутствии КФ патогена в концентрации 5%-25% от объема питательной среды.

3. Выявлено положительное влияние фенольных соединений на адаптацию клеток и каллусной ткани к действию селективного фактора. Они в большем количестве накапливаются в клетках, устойчивых к действию селективного фактора, что обусловлено изменением фенольного метаболизма, проявляющегося в изменении как количественного, так и качественного состава растворимых фенольных соединений, а также полифенолоксидазы.

4. Впервые оптимизированы условия культивирования изолированных эксплентов, обеспечивающие получение растений-регенерантов непосредственно из первичного экспланта или каллусной ткани.

5. Установлены морфофизиологические различия клеток, культивируемых в контрольном и опытном вариантах в зависимости от исследуемого t генотипа, гормонального состава питательной среды и присутствия стресс-фактора.

6. Разработан экспресс-биологический метод для оценки устойчивости различных генотипов подсолнечника к Sclerotinia sclerotiorum, который может быть рекомендован для применения в селекции растений. По устойчивости к патогену Sclerotinia sclerotiorum изучаемые генотипы располагаются в следующем возрастающем порядке: ВК 653, Кубанский 930, Кубанский 86, Триумф, Кубанский 93, Юпитер, ВК 580.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Нгуен Тхань Хай, 2008 год

1. Аветисов В. А. Биотехнологические основы расширения генетического разнообразия картофеля: Автореф. дис.д-ра биол. наук: 03.00.23.-М., 1997.- 46с.

2. Аврова А.О. Физиолого-биохимические особенности взаимодействия томатов с Alternaria solani и селекция in vitro на устойчивость к альтернариозу: Автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.23. -ВИЗР., 1994.- 18 с.

3. Активация мелафеном роста и накопления фенольных соединений в каллусной культуре чайного растения не связана с его возможной цитокининовой активностью / Н.В. Загоскина, А.С. Пинаев, А.К. Алявина и др. // Докл.АН/РАН.-2007.-Т.413; № 6.- С. 841-844.

4. Андреев Л.Н., Талиева М.Н. Физиологически активные вещества во взаимоотношениях растения-хозяина и патогенного гриба // Физиол. растений.- 1996.- Том 43; № 5. -С. 661-666.

5. Андреев Л.Н.; Талиева М.Н. Физиология взаимоотношений растения-хозяина и патогена: роль физиологически активных веществ Устойчивость растений к грибным болезням. // Бюл.Гл.ботан.сада.-1995 .-Вып. 171 .-С.61-68.

6. Балов В.К.; Шибзухов М.Н. Влияние азотно-фосфорных удобрений на продуктивность и качество семян подсолнечника и устойчивость его к болезням в условиях вертикальной зональности КБР // Зерн.хоз-во.- 2006.- № 6. С. 24-26.

7. Биологические основы клеточной селекции растений (Селекция на устойчивость к патогенам и стрессовым факторам) / Е.А. Калашникова // Докл.ТСХА/Моск.с.-х.акад., 2003.- Вып.275. С. 110112.

8. Васильев Д.С. Подсолнечник.-М.:Агропролиздат, 1990.-174 с.

9. Влияние экзометаболитов гриба Rhizoctonia solani на клеточныеIкультуры различных генотипов картофеля / Н.В.Загоскина, Е.А. Гончарук, Г.А. Дубравина, Е.А. Калашникова // Биотехнология.- 2006.-№ 5. С. 19-22.

10. Возбудитель фитофтороза Phytophtora infestans (Mont) De Вагу вмешивается в функционирование рострегулирующей системы клеток картофеля / М.А.Проценко, Э.П.Ладыженская, Н.П. Кораблева и др. // Физиол. растений,- 1993.-Том 40.-С. 225-229.

11. Волотович А. А. Защита растений от патогена Sclerotinia1sclerotiorum II Весщ Нац.ДН Беларусь Сер.б1ял.навук.- 2005'.- № 4. С. 112-116

12. Волощук А.Д, Волощук С.И., Гирко B.C. Оценка устойчивости к Fusarium graminearum по параметрам роста суспензионной культуры в присутствии культурального фильтрата // Докл. РАСХН.- 2001.- № 2. -С. 9-10.

13. Волынец А.П., Кароза С.Э., Манжелесова Н.Е. О природе нарушения ауксиногово обмена растений ячменя гельминто-спориозной инфекцией // Докл. АН Беларуси. -1993.-Том 37; № 2. -С. 166-168.

14. Волынец А.П., Кароза С.Э., Сухова JI.C. Абсцизовая кислота как возможный фактор защиты ячменя при грибной инфекции // Докл.АН /Рос.АН. -1993.-Том 39; № 3. -С. 380-382.

15. Вольф В .Г. Соняшник,- К.:Урожай, 1972.-228с.

16. Гирко B.C., Волощук К.Г., Оценка устойчивости к действию КФ грибного патогена в культуре незрелых зародышей // С.-х. биология. Сер. "Биология растений". 1993.-№ 9.- С. 62-70.

17. Гормональный баланс ИУК/АБК в растениях пшеницы при инфицировании септориозом / И.В.Максимов, Ф.М.Шакирова, Р.М.Хайруллин, М.В.Безрукова // Микология и фитопат.- 1996; Том 30; Вып. 3.-С.75-83.

18. Дмитриев А.П. Фитоалексины и их роль в устойчивости растений. Киев, 1999. - 207 с.

19. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. — М.: Агропромиздат, 1985.-351 с.

20. Дьяков А.Б. Физиология подсолнечника.-Краснодар: ВНИИМК, 2004. -76с.

21. Дьяков Ю.Т. Молекулярно-генетические основы взаимоотношений растений с грибными и бактериальными инфекциями.// Успехи совр. Генетика.- 1994.-Вып. 19.- С. 25-48.

22. Загоскина Н.В., Зайцева С.М.; Александрова М.С. Изменения в образовании фенольных соединений при введении клеток тисса ягодного (Taxus baccata L.) и тисса канадского (Taxus canadensis Marsh.) в культуру in vitro // Биотехнология.-2007.- № 1. -С.29-34.

23. Зайцева С.М. Образование и локализация фенольных соединений в растениях тисса {taxus baccata L, taxus canadensis marsh.) и в инициированных из них каллусных культурах: Автореф. дис.канд. биол. наук: 03.00.12.- М.,2007.- 21с.

24. Запрометов М.Н. Фенольные соединения и их роль в жизни растения. LVI Тимирязевские чтения. М.: Наука, 1996.- 45с.

25. Запрометов М.Н. Фенольные соединения и их роль в жизни растения.-М.:Наука, 1996.-45с.

26. Запрометов М.Н. Фенольные соединения; распространение, метаболизм и функции.-М.: наука, 1993.-272 с.

27. Защиты растений от болезней / Шкаликов В.А., Белошапкина О.О., Букреев Д.Д. и др. : М.: КолосС, 2004. 255с.

28. Зезуль Т.Г., Горбатенко Э.В., Ралдугина Г.Н. Регенерация in vitro растений подсолнечника {Helianthus annuus L.) через соматический эмбриогенез // Генетика. 1995.- Т.31; № 2.-С. 228-233.

29. Иммуномодуляторы фитопатогенов и их соучастие во взаимоотношениях с растениями / Ю.Т. Дьяков // Индуцированный иммунитет сельскохозяйственных культур важное направление в защите растений.- Всерос. науч.-исслед. ин-т защиты растений, 2006. -С. 15.

30. Исследовали возможность культивирования различных тканей подсолнечника на искусственных питательных средах и перспективы получения растений-регенерантов. Центр экологической физиологии растений, Буэнос-Айрес. 1986 Bibliogr, с. 137

31. Калашникова Е.А. Клеточная селекция растений на устойчивость к грибным болезням: А^тореф.дис. д-ра биол. наук: 03.00.23. -М., 2003.-53 с.

32. Калашникова Е.А., Нгуен T.J1.A. Морфо-физиологические особенности пробирочных растений, каллусной ткани и суспензионной культуры картофеля, обусловленные действием экзометаболитов гриба Rhioclonia solani II Биотехнология.- 2003.- № 3. С. 36-41.

33. Клеточная селекция клевера и люцерны на устойчивость к фузариозному увяданию / В.М.Плащев //Гаметофитная и защитная селекция растений.- Кишенев, 1987.- С.176-178.

34. Клеточная селекция клевера лугового на устойчивость к возбудителям корневых .гнилей (<Sclerotinia trifolium, Fusarium sp.) /

35. В.В. Мазин, JI.A. Солодкая, И.Г. Кирьян и др. // Молек. и генет. механизмы взаимодействия микроорганизмов с растениями. -Пущино, 1989.-С. 164-167. |

36. Клеточная селекция на устойчивость к кольцевой гнилиIкартофеля / Г.В. Рассадина, JI.M. Хромова, Р.Г. Бутенко // Тез. Междунородной конференции «Биология культивирования клеток и биотехнология».-Новосибирск, 1988.- Ч. 1.- С. 167-168.

37. Кнорре Д.Г., Мазина С.Д. Биологическая химия. М.:Высшая школа, 2002.- 325 с.

38. Комарницкий И.А. Ботаника (Систематика). М.: Просвещение,I1975.-608 с. 1

39. Комплексная защита подсолнечника от болезней / В.И.1 Якуткин // Тез. докл. «Современные системы защиты растений от болезней и перспективы использования достижений биотехнологии и генной инженерии».- Голицыно., 2003.- С.239-240.

40. Кретович В.Л. Биохимия растений. -М.:Высшая школа, 1986.-420с.1

41. Культра пыльников как способ создания высокопродуктивных геноисточников льна (Linum usitatissimum L.) методами биотехнологии

42. А.В.Поляков, Н.В.Пролетова // Материалы научно-производственной конф. по льну (Вологда, 26 марта 2000).- Вологда., 2000,- С. 354-357.

43. Лети Джое, Калашникова Е.А. Клеточная селекция пшеницы на устойчивость к септориозу. //Сельскохозяйственная биотехнология. Избранные работы. 2000, Том. 1, С.61-71.

44. Лихачев А.Н. Использование жидких питательных сред для получения моноспоровых культур грибов // Микология иVфитопатология.-1994.-Том 28; Вып. 5.- С. 14-16.I

45. Лутова Л.А. Биотехнология высших растений: Учебник.-СПб.: Изд-во С.-Петерб.ун-та, 2003.-228 с.

46. Масленников С.Е. Методы культуры каллусов и клеток в создании форм люцерны, устойчивых к фузариозу: Автореф.дис. канд.биол.наук: 03.00.23.- М.:ТСХА, 1994.- 15 с.

47. Мезенцева О.Ю. Создание исходного селекционного материала люцерны и пшеницы, устойчивого к фузариозу, методом' клеточнойселекции: Автореф.дис. канд. биол. наук: 03.00.23.- М., 1992.- 21 с.v

48. Ментюков Н.С., Пивень В.Т. Товарные и посевные качества семян подсолнечника в зависимости от степени поражения белой гнилью

49. Науч.-техн. бюл. Всерос. науч.-исслед. ин-та маслич. .культур. -Краснодар, 2004. Вып. 2(131). - С. 58-61.

50. Методические указания по определению солеустойчивостинекоторых злаковых культур (ячмень, кукуруза, кормовые травы) / Г.В.I

51. Удовенко, Л.А. Семушина, А.Г. Морозова. — ВИР., 1973.-14с|.

52. Методы создания форм клевера лугового с повышенной устойчивостью к раку / Л.А.Солодкая, Е.Ю.Новоселова // Сборник науч.трудов. -ВНИИкормов., 1989.- Вып. 42, С.57-65.

53. Молекулярные и генетические механизмы взаимодействия фитопатогенных грибов с растениями / Ю.Т. Дьяков // Молекуляр. иI

54. Морфогенетический потенциал различных эксплантов подсолнечника в условиях in vitro / В.Н. Попов, JI.JI. Юшкина, Я.Ю. Шарыпина // Твер. гос. с.-х. акад: Научное обеспечение национального проекта "Развитие АПК". -Тверь, 2006. С. 152-155. ;

55. На рынке растительного масла // БИКИ.- 25.08.2000.0Ф

56. Нгуен T.JI.A. Повышение устойчивости яровой пшеницы к абиотическим стрессам методами биотехнологии: Автореф.дис.канд.биол.наук: 03.00.23. -М., 1995.-22с.1

57. Нгуен Хонг Минь Селекция in vitro на устойчивость к Fusarium oxysporum f. Sp. Lycopersici у томатов: Автореф.дис. канд.биол.наук:03.00.15.-Минск, 1991.-21 с.

58. Никитчин Д-И. Масличные культуры.-Запорожье.: ВПК «Запор1жжя», 1996. 336 с.

59. Общая и молекулярная фитопатология / Ю.Т.Дьяков, О.Л.Озерецковская, В.Г.Джавахия и др. -М; Общество фитопатологов, 2001. -302 с.

60. Озигит И.И., Гозукирмизи Н., Семиз Б.Д. Индукция каллуса и регенерация растений из зрелых зародышей подсолнечника // Физиология растений.- 2006.- Т. 53; № 4. С. 621-624.

61. Олениченко Н.А., Осипов В.И., Загоскина Н.В. Фенольный комплекс листьев озимой пшеницы и его изменение в процессе низкотемпературной адаптации растений // Физиология , растений.-2006.- Т.53; № 4. С. 554-559.

62. Определение фитотоксической активности культурмикроскопических грибов / О.А.Берестецкий // Конфереция «Методыэкспериментальногой микологии». -Киев, 1973. -С. 165-175. '

63. Отбор клеточных линий клевера лугового, устойчивых к КФ Fusarium oxysporum / С.Т.Германович // Материалы конф. молодых ученых и аспирантов «Новые идеи в растениеводстве, и пути их реализации».- М., 1991.- С. 90-91.

64. Пасешниченко В. А. Растения продуценты биологически активных веществ // Соросовский образовательный журнал. - 200l.-Том 7;№ 8.-С. 13-19. ,

65. Петренкова В.П. Интергированные методы защиты подсолнечника от белой гнили // Вестник аграрной науки1997. №101. С.34-37. ;I

66. Полевой В.В. Физиология растений.-М.:Высшая школа, 1989.-464с.

67. Получение устойчивых к корневым гнилям растений люцерны с использованием методов культуры каллусов и клеток / С.Е.Масленников // Соврем. Достижения биотехнологии.-Ставрополь, 1995.- С. 24-25.

68. Пушкаренко А.Я.; Игнатова С.А.; Лукьянюк С.Ф. Регенерация растений подсолнечника из незрелых зародышей // Науч.угехн. бюл. Всесоюз. селекц.-генет. ин-та.- 1990. Том 2. С. 46-50.

69. Разработка селективного фактора для проведения клеточной селекции на устойчивость к Corynebanium sepedorium / Н.Г.Иванова // Использование клеточной технологии в селекции картофеля. -М., 1987.-С. 26-28.

70. Раскалиева В.А. использование методов биотехнологии в получении исходных форм моркови, устойчивых к патогенному грибу Alternaria radicina : Дис.канд биол. наук: 03.00.23.- М.,2001.- 91с.

71. Раскалиева В.А., Калашникова Е.А. Использование методов биотехнологии в получении форм моркови, устойчивых к альтернариозу. //Сельскохозяйственная биотехнология. Избранные работы. 2001, том. 2, с.81-91.

72. Растеневодство / Г.С.Посыпанов, В. Е. Долго дворов, Г.В.Коренев и др. -М.: Колос, 1997.-448с.I

73. Родева В., Станчева И. Биологичен эфект на културални филтрати от различии изопати на Alternaria solani върху растение доматени растение in vitro II Биотехнология.- 1990.- Том 4; № 3/4. -С.27-30.

74. Савич И.М. Пероксидазы — стрессовые белки растений // Успехи соврем. Биол. 1989.-Том 107. -С. 406-417.

75. Селекция моркови с применением биотехнологических методов / Угарова С.В., Тесля А.А. // Тез. докл. «Пробл. Совета порастениеводству, селекции, семеноводству с/х культур Сибири», Новосибирск, 1994, с.23-24.

76. Сельскохозяйственная биотехнология: Учебник, 2-ое изд., перераб. и доп. / Шевелуха B.C., Калашникова Е.А., Воронин Е.С. и др. -М.:Высшая школа, 2003.- 469 с.

77. Сельскохозяйственная биотехнология: Учебник, 3-е изд., перераб. и доп. / Шевелуха B.C., Калашникова Е.А., Кочнева Е.З и др. -М.:Высшая школа, 2008.- 710 с.

78. Сидоров В.А. Биотехнология растений. Клеточная селекция.-Киев; Наук.думка, 1990. <

79. Сидоров Н.В., Моргун В.В., Логвиненко В.Ф. Особенности каллусо- и морфогенезза в культуре незрелых зародышей разных генотипов мягкой озимой пшеницы // Физиология и биохимия культурных растений. -1988. -№ 4.- С. 349-353.

80. Смиряев А.В., Кильчевский А.В. Генетика популяций и количественных признаков.- М.: КолосС, 2007.-272 с.

81. Сорокатая Е.И. Использование биотехнологических методов для получения устойчивых к корневым гнилям форм ярового ячменя: Автореф.дис. канд. биол. Наук: 03.00.23.- Красноярск., 2001.- 18 с.

82. Способность различных сортов пшеницы (Triticum aestivum L.) к образованию фенольных соединений / Н.В.Загоскина, Н.А.Олениченко, Чжоу Юньвэй, Е.А. Живухина // Прикл.биохимия и микробиология.-2005.- Т.41; № 1.-С. 113-116.

83. Стройков Ю.М., Шкаликов В.А. Защита сельскохозяйственных культур от болезней. М.:МСХА, 1998. - 264с.

84. Таккель Э.А.; Грязева В.И. Фитосанитарная оценка сортов и гибридов подсолнечника (Оценка на устойчивость к белой и серой гнили, а также насекомым-вредителям) // Зерн.хоз-во.- 2006.- № 5. С. 9-11.

85. Талиева М.Н., Филимонова М.В. О паразитической специализации видов род$ Botrytis в свете новых экспериментальных данных.//Ж. общей биол.- 1992.-Том 53.-С.225-231.

86. Тарчевский И.А. Сигнальные системы клеток растений.-М.:Наука, 2002. -294 с.

87. Тарчевский И.А. Элиситор-индуцируемые сигнальные системы и взаимодействие // Физиол. растений.- 2000.-Том 47;№ 2. С. 321-331.

88. Ткачева А.А. Методы in vitro в селекции огурца (Cucumis sativus L.) на устойчивость к фузариозу: Автореф. дис. канд. с.-х. наук: 06.01.05; 03.00.23.-М., 2007.-19с.

89. Ткаченко О.О. "Новая" старая болезнь декоративного подсолнечника (Белая гниль) // Цветоводство.- 2006; № 4. С. 50.

90. Токсичность КФ грибов, вызывающих пятнистость на хлопчатнике / Г.А.Белякова, Б.С.Ермолинский, С.И.Свиридов и др. // Вестник МГУ. Сер. 16.- 1991.- № 4.- С.56-61.

91. Участие фенольных соединений в адаптации клеточных культур к действию экзометаболитов патогенных грибов при селекции in vitro /

92. Е.А.Калашникова, Е.А.Гончарук // Тез. Докл. «VI симпозиум по фенольным соединениями ».- М., 2004,- С.42.

93. Физиологические , аспекты иммунитета растений / Л.Н.Андреев, М.Н.Талиева // Облигатный паразитизм. Цитофизиологические аспекты. -М., 1991. С. 5-12.

94. Физиология и биохимия сельскохозяйственных растений / Н.Н.Третьяков, Е.И.Кошкин, Н.М.Макрушин и др. -М.: Колос, 2000.-640с.

95. Хотин Ю.А., Полякова Т.М. Сохранение инфекционных свойств возбудителя ризоктониоза риса при культивировании наIискусственных питательных средах // Микология и фитопатология.-1991.- Том 25; Вып. 1.- С.80-84.

96. Частная селекция полевых культур / В.В. Пыльнев, Ю.Б. Коновалов, Т.И. Хупацария и др. М.: КолосС, 2005.- 552с.

97. Частная селекция полевых культур / Ю.Б. Коновалов, Л.И. Долгодворова, Л.В. Степанова и др. -М; Агропроомиздат, 1990.- 543 с.

98. Чигрин В.В. Физиолого-биохимическая регуляция совместимости клеток высшего растения и биотрофного патогенна на примере взаимодействия пшеницы и возбудителя стеблевой ржавчины. // Ж.общей биол.- 1986,- XLVII.- С. 310 327.

99. Чкаников Д.И. Использование различий химического состава фитопатогенных грибов и растений при изучении их взаимоотношений // Физиол. Растений.- 1996.-Том 43;№ 5. С. 671-678.1.I t

100. Чкаников Д.И., Артеменко E.H., Гринченко С.Г. О роли инолил -3-уксусной кислоты в патогенезе стеблевой и бурной ржавчивы // Физиол. Растений.- 1990.- № 37,- С.591-595.

101. Шаяхметов И.Ф. Культура клеток и тканей пшеницы in vitro и соматический эмбриогенез: Автореф.дис. д-ра биол. наук: 03.00.23.-С.-Петерб., 2001.- 45 с.I

102. Шевченко Д.Н. Изменчивость линий-регенерантов ячменя попризнакам устойчивости к болезням, морфологии и продуктивности:I

103. Автореф.дис. канд. биол. наук: 06.01.11. -Всерос.НИИ., 1994.- 18 с.I

104. ABA accumulation нт wheat heads inoculated with Septoria nordorum in the field condition / J.F.Bousqet, G.Touraud, M.T.Piollat, i U.Bosch // J.Agron. Crop.Sci.- 1990. Vol. 165.-P. 297-300.

105. Amadioha A.C. Production of cellulolytic enzymes by Rhizopus oryzae in culture and Rhizopus-infected tissues of potato tubers // Mycologia.- 1993.- Vol. 85;№ 4. P. 574-578.

106. Aureusidin Synthase: A Polyphenol Oxidase Homolog Responsible for Flower Coloration // T. Nakayama, K. Yonekura-Sakakibara, T. Sato et al. // Science.- 2000. -№ 290. -P 1163-1166.

107. Bohorova N.E.,v. Punia M.S., lossiftcheva C. Morfogenetic ability of tissue and protoplast culture of wild diploid species of sunflower (.Helianthus L.) // Helia.- 1990.- T. 13, p. 35-40.

108. Chawla H.S., Wenzel G. In vitro selection for fusaric acid resistanc barley plants // Plant Breed.- 1987.- No 2.- P. 159-163.

109. Chawla H.S., Wenzel G. In vitro selection of barley and wheat for resistance against Helminthosporium sativum II Theoritical and applied Genetics.- 1987.- Vol. 74; No 6.- P. 841-845.

110. Combining ability of sunflower inbred lines for in vitro traits / G. Nestares, M. L. Mayor, R. Zorzoli, et al. // Helia. -Novi Sad.- 2001; Vol. 24; №35.-P. 17-23.

111. Daub M.E. Tissue culture and the selection of resistance to patogens // Ann. Rev. Phitopathol.- 1986.- Vol. 24.- P. 156-186.j

112. Deadon W.R., Keyes G.J., Collins G.B. Expressed resistance to blackIshankamong tobacco callus cultures // Theoretical and Applied Genetics.-1982.-Vol. 63.-P. 65-70. . j

113. Deluc L., Barrieu F. Characterization of grapevine R2R3-MYB transcription factor that regulates the phenylpropanoid pathway // Plant physiology preview.-2006.-Vol. 140.-P.-499-511.

114. Differential sensitivity of wheat embryos against extracts containing toxins of Septoria nodorum / Keller В., Winzeler H., Wunzeler M., Fried P. // Phytopathology.- 1994.- Vol. 141; № 3.- P. 233-240.

115. Dixon R.A.; Palva N.L. Stress-induced phenylpropanoid metabolism//

116. Plan Cell.- 1995.- Vol. 7. P. 1085-1097.

117. Effect of cytokinin' on the accumulation of pathogenesis related proteins (PR la protein) in vitro propagated Nicotiana tabacum shoots / A.Poupet, L.Cardin, B.Bettachini, D.Beck // Physiol. Veget.- I990.-Vol. 311. -P. 239-246.

118. Flavonoids: Plant signal to soil microbes / D.A. Philips // Phenolic metabolism in plant. -N.Y.: Plenum press.-1992.-P. 201-231.

119. Freyssinet M., Freyssinet G. Fertile plant regeneration from sunflower (Helianthus annuus L.) immature embryos // Plant Sc. — 1988.- T. 56; № 2. -P. 177-181.i

120. Friedman, M. Chemistry, biochemistry, and dietary role of potatoipolyphenols // Agric. Food Chem. -1997.-№ 45. P.-1523-1540. ji

121. Hammerschlag F. A. Resistance responses of plants regenerated from peach callus cultures to Xaythomonas campestris pv. pruni // J. Amer. Soc. Hortic, Sci. 1990. -Vol. 115; No 6.- P. 1034-1037. ,

122. Hammond-Kosack K.E., Gones J.D.G. Resistance gene dependent plant defence responses // Plant Cell. -1996,- Vol. 8. -P. 1773-1791.

123. Hanson L.E., Howell C.R. Elicitors of plant defense responses from biocontrol strains of Trichoderma virens II Phytopathology.- 2004. Vol. 94; №2. -P. 171-176.

124. Harborne J.B. Arsenal for survival secondary plant-products // Taxon.-2000.-Vol. 49; I. 3.-P.435-449.

125. Harborne J.B. Do natural plant phenols play a role in ecology ? // Acta Hort. -1994. -No 381.- P.36-43.137. http:// www.fao.org/apps.fao.org

126. Hughes R.K., Dickerson A.G. Auxin regulation of Phaseolus vulgaris to a fungal elicitor // Plant Cell Physiol.- I990.-Vol. 31. -P. 667-675.

127. Induction of plant defense response by exoenzymes of Erwinia carotovora subsp. carotovora / T.K.Palva, K.O.Holmstrom, P.Heino, E.T.

128. Palva // Molec.Plant-Microbe Interact.- 1993.- Vol. 6; № 2. P. 190-196 .j

129. Influence of genotype and gelling agents on in vitro regeneration by organogenesis in sunflower,/ E. F. Berrios, L. Gentzbittel, H. Serieys et al. // Plant Cell Tissue Organ Cult.- 1999.- Vol.59; № 1. P. 65-69.

130. Jach Monika, Przywara Leslaw. Somatic embryogenesis and organogenesis induced in immature zygotic embryos of selected sunflower

131. Helianthus annuus L.) genotypes Acta boil // Cracov.Ser.Bot. -2000.-Vol.42, № 2. -P. 83-86. '

132. Kasenberg T.R., Traguair J.A. Effectis of phenolics on growth of Fusurium oxysporum f. Sp. Radicis- Lycopersici in vitro II Can. J. Bot. -1988.- Vol. 66; № 6,- P. 1174-1177.

133. Katiyar R.K., Chopra V.L. Somaclonally induced in a Brassica juncea germplasm accession with field resistance to important diseases // Plant Breed. 1990.- Vol. 104; No 3.- P. 262-264.

134. Knogge W. Fungal infection of plants // Plant Cell.- 1996.-T 8.- P. 1711-1722.

135. Kojima M., Takeuchi W. Detection and characterization of p-Coumaric Acid Hydroxylase in mungbean, vigna mungo, seedlings.J. // Biochem.-1989.-№ 105. -P. 265-270.

136. Krauter R., Friedt W. Propagation and multiplication of sunflower lines {Helianthus annuus L.) by tissue culture in vitro II Iielia. -1991,- T. 14; № 14. P. 117-121.

137. Kurusaki P., Tashiro N., Nishi A. Secretion of chitinasef from cultured carrot cell treated wiht fungal myceliae walls // Physiol. Molec.

138. Plant. Pathol.- 1987,- Vol. 31; № 2.-P. 211-216.1

139. Li A., Heath C. Effect of plant growth regulators on the interactions beween bean plants and rust fungi non-pathogenic on beans // Physiol. Mol. Plant Pathol.- 1990.- Vol 37. P. 245-254.

140. Li L., Steffens J. C. Overexpression of Polyphenol Oxidase in transgenic tomato plants results in enhanced bacterial disease resistance // Planta.- 2002. -№ 275. -P. 239-247.

141. Lofty S., Fleuriet A. Biocinthesis of phenolic compounds in Vitis vinifera cell suspension cultures: Study on hydroxycinnamoyl Co A: ligase // Plant cell reports.-1989.-Vol.8; I.2.-P.93-96.

142. Maki H., Morohashi Y. Development of olyphenol oxidase activity inithe micropylar endosperm of tomato seeds // Plant Physiol.- 2006.-№163.-P. 1-10.

143. Mauch-Mani В., Metraux J.P. Salicylic acid and systemic acquirediresistance to pathogen attack. //Annals Bot. -1998.-Vol. 82.-P. 535-540.

144. Mayer A. M., Harel E. Phenoloxidases and Their Significance in Fruit and Vegetables. In Food Enzymology; Fox, P. F., Ed. // Elsevier.- New York.- 1991.- p.373-398.

145. Mc Coy T. Tissue culture selection for resistant plants // liowa state j. Res. -1988.- No 4.- P. 503-521.

146. Miklas P.N., Grafton K.F., Secor G.A. Use of patho gen filtrate to differentiale physiological resistance of dry bean to white molddisease // Crop. Sc.- 1992.- Vol. 32; № 2.- P. 310-312. j

147. Pajevic S., Vasic D., Sekulic P. Biochemical characteristics and nutrient content of the callus of sunflower inbred lines // Helia. -Novi Sad.-2004.- Vol. 27; № 41. P. 143-149.

148. Pathophysiological aspects of plants disease resistance / Z.Kiraly, T.Ersek, B.Barna et al. // Acta Phytophath. Entomol. Hungarica.- 1991.-Vol. 26.-P. 233-250.

149. Plant regeneration from cotyledons derived from mature sunflowerseeds / G. Nestares, R. Zorzoli, L. Mroginski, L. Picardi //

150. Helia. -Novi Sad.- 1996.- Vol.19; № 24. P. 107-112. !i

151. Plantlet formation from callus and shoot-tip culture of Helianthus annuus L. / Lupi M.C., Bennici A., Locci F., Gennai D. // Plant: Cell Tissue Organ Cult. -1987.- Т. 11; No 1. P. 47-55.

152. Responses of Asparagus officinalis pollen to the culture filtrate of Fusarium oxysporum f. sp. asparagi / A.C. Pontaroli, E.L. Camadro, F.J. Babinec, A. Ridao // Sc.hortic.- 2000.- Vol.84; № 3/4. P. 349-356.

153. Sacristan M. Resistance responses to Phoma lingam of plants regenerated from selected cell and embruogenic cultures of haploid Brassica napus И Theoretical and Applied Genetics.- 1982.- Vol. 61; No 3.- P. 193200.

154. Schmitz P., Schnabl H. Regeneration and evacuolation of protoplastsfrom mesophyll, hypocotyl and petioles from Helianthus annuus L II J. Plant Physiol. 1989.- T. 135; No 2. - P. 223-227. 1993. -Том 18; № 4. -С. 15-20.

155. Screening hibrid poplars in vitro for resistanse to leaf spot caused by Septoria musiva / Michal E., Ronald E., Kathleen Т., Robert R // Plant disease.- 1988,- Vol. 72; № 6.- P. 491-499.

156. Semal J., Viseur J., Anceau C. In vitro cultures of producingpathogen-free plants and selecting disease resistant genotupes //'Bull. Rech.

157. Agron. Gembroux.- 1988.- Vol. 23; № 3.- P. 261-269.1

158. Sjodin C., Glimelius K. Transfer of resistance against Phoma lingam. . . '

159. Brassica napus by asymmetric somatic hybridization combined with toxinselection // Theoretical and Applied Genetics.- 1989.- Vol. 78; No 4.- P. 513-520.1

160. Somaclonal variation in celery and selection by coculturing toward resistance to Septoria apicola / Evenar D., Pressman E., Benyephet Y., Rappaport L. // Plant Cell tissue and organ culture.- 1994.- No 39.- P. 203210.

161. Sunflower tissue culture and use in selection for resistance to Phomavmacdonaldii and white mold (Sclerotinia sclerotiorum) / Hartman C.L.; Donald P.A.; Secor G.A.; Miller J.F. //Proc.-1988.- Vol. 2; S.l. P. 347-351.

162. Surface signalling in pathogenesis / P.E.Kolattukudy, L.M.Rogers,

163. D.Li et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA .-1995.-Vol. 92.-P. 4080-4087.iiculture filtrate of Fusarium oxysporum f. sp. dianthi //i

164. Plant Cell Rep.- 2002.- Vol. 20; № 9. P. 825-828.

165. Thanutong P., Furusava I., Ymamoto M. Resistance tobacco plants from protoplasts derived calluses selected for their resistance to Pseudomonas and Alternaria toxins // Theoretical and Applied Genetics.-1983.-Vol. 66; No 34.-P. 209-215.i

166. Toyoda H. Selection of disease resistant plant through tissue culture // Karaky to scibucu.- 1990.- Vol. 28; No 1.- P. 12-19.i

167. Trebst A., Depka B. Polyphenol Oxidase and Photosynthesis Research // Photosynth.Res.-1995. -№ 46. P. 41-44.

168. Tylkowska K. Toxinogenicity of Alternaria alternana isolates from carrot seeds and seedlings // Seed Sc. Technol.- 1995.- Vol. 23; № 3.- P. 877-879.

169. Valluri J., Treat W. Bioreactor culture of heterotrophic sandalwood cell suspensions utilizing a cell-lift imperller // Plant cell report.-1991.1. Vol.l0;I.6.-P.-366-370. ii

170. Van Becelaere G., Miller J.F. Methods of inoculation of sunflower heads with Sclerotinia sclerotiorum II Helia. -Novi Sad.- 2004.-1 Vol. 27; № 41.-P. 137-142.

171. Vasic D., Alibert G., Skoric D. In vitro screening of sunflower for resistance to Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary // Helia. -Novi Sad., 1999.- Vol.22; № 31. P. 95-103.

172. Wang J., Constabel C. P. Polyphenol Oxidase Overexpression intransgenic populus enhances resistance to Herbivory by forest tenticaterpillar (Malacosoma disstria) // Planta. 2004. -№ 220. - P. 87-96.