Использование методов биотехнологии в получении исходных форм моркови, устойчивых к патогенному грибу Alternaria radicina M., Dr. Et E. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Раскалиева, Велина Абдрахмановна

• Раскалиева, Велина Абдрахмановна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Раскалиева, Велина Абдрахмановна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Литературный обзор.

1.1 .Вредоностность возбудителя черной гнили - Alternaria radicina.

1.1.1. Внешние симптомы альтернариоза.

1.1.2.Эколого-генетические особенности проявления устойчивости моркови к альтернариозу.

1.2.Физиолого-биохимические реакции корнеплодов моркови на ранних этапах заражения.

1.2.1 .Изменение активности NADPH-оксидазной и пероксидазной функции пероксидазы.л.;^Ц./.41',^.'.

1.2.2. Динамика активности каталазы при заражении корнеплодов моркови на протяжении периода хранения.

1.2.3.Изменение уровня перекисного окисления липидов.

1.2.4.Активность глутатион редуктазы при заражении моркови возбудителем Альтернариоза.

1.2.5. Фенольные соединения при поражении растений патогенами.

1.3.Клеточная селекция растений.

1.3.1.Использование патогенов в клеточной селекции растений на устойчивость к болезням.

1.3.2.Селекция растений к патотоксинам.

1.4.Клеточная и тканевая селекция растений на устойчивость к альтернариозу в условиях in vitro.

ГЛАВА 2. Материал и методы исследований.

2.1. Характеристика исходного объекта.

2.2. Методы исследований.

ГЛАВА 3 ОСОБЕННОСТИ КАЛЛУСОГЕНЕЗА

И МОРФОГЕНЕЗА В КУЛЬТУРЕ ТКАНИ МОРКОВИ.

3.1. Зависимость каллусогенеза от генотипа и первичного экспланта.

3.2.1. Фазы ростового цикла.

3.2.2. Ростовой индекс.

3.2.3. Жизнеспособность и агрегированность суспензионной культуры моркови.

ГЛАВА 4. Влияние культурального фильтрата гриба Aiternaria radicina на прорастание семян различных генотипов моркови.

4.1. Способы получения культурального фильтрата гриба Aiternaria radicina.

4.2.Влияние метаболитов гриба Aiternaria radicina, полученных разными спсобами, на прорастание семян моркови.

ГЛАВА 5. Клеточная селекция моркови на устойчивость к патогену Aiternaria radicina.

5.1. Влияние метаболитов патогенного гриба Aiternaria radicina на рост суспензионной культуры моркови.

5.2.Получение растений-регенерантов моркови после клеточной селекции.

ГЛАВА 6. Содержание фенольных соединений в суспензионной культуре, растениях-регенерантах и интактных растениях моркови.

6.1. Суспензионная культура.

6.2. Растения-регенераты и интактные растения.

6.3. Качественный состав фенольных соединений в растениях in vitro и in vivo.

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование методов биотехнологии в получении исходных форм моркови, устойчивых к патогенному грибу Alternaria radicina M., Dr. Et E.»

Потери урожая корнеплодов и семян столовой моркови от грибных, бактериальных и вирусных заболеваний во время хранения маточников и выращивания семенников нередко составляют 30-60%, а иногда и 100%. Существенный ущерб культуре моркови, особенно в системе семеноводства, наносит альтернариоз и фомоз.

Alternaria radicina (черная гниль) - наиболее распространенный и опасный патоген у моркови. Заражение им обычно происходит при ослаблении тканей растений, особенно в дождливую осень при несколько повышенной температуре. Гриб вызывает мацерацию тканей и проявляется в побурении нижней части стебля, листовой пластинки, соцветия и семян в процессе онтогенеза растений, а также корнеплодов при их хранении. Источником инфекции черной гнили могут служить зараженные семена, остатки пораженных растений и пораженные корнеплоды, высаженные в почву на семенники.

Наиболее радикальным средством защиты растений от фитопатогенов является создание устойчивых форм, а в дальнейшем и получение сортов. Однако для корнеплодов этот процесс требует больших временных затрат, поскольку для получения семян требуется два вегетационных периода.

В настоящее время биотехнология располагает методами, в частности культуры изолированных клеток, тканей и органов растений, позволяющими сократить срок проведения селекции и снизить экономические затраты ручного труда. В этом направлении ведущее место занимает клеточная селекция, при которой в условиях in vitro проводят отбор клеточных популяций, устойчивых к селективному фактору, и затем регенерируют целые растения. На сегодняшний момент в этом направлении достигнуты значительные результаты. Например, созданы линии картофеля, устойчивые к фитофторозу (45), томаты -альтернариозу (1), пшеница - септориозу (48), рис - пирикуляриозу (17) и др. Исследования по клеточной селекции моркови на устойчивость к альтернариозу малочисленны и носят пока поисковый характер. Поэтому изучение влияния биотических факторов на рост клеток моркови и селекция устойчивых к болезням клеточных линий с последующей регенерацией измененных растений имеет как теоретическое, так и практическое значение.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы было изучение особенностей ответа клеточных популяций моркови на присутствие культурального фильтрата гриба Alternaria radicina в питательной среде. Разработать методику и провести клеточную селекцию по получению растений-регенерантов, устойчивых к данному патогену.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи: получить хорошо пролиферирующую каллусную ткань и суспензионную культуру различных генотипов моркови; подобрать оптимальные условия выращивания гриба Alternaria radicina, получить кулмуральный фильтрат патогена и определить его действие на прорастание семян; изучить поведение клеточных популяций различных генотипов моркови в нормальных и стрессовых условиях культивирования; разработать и провести клеточную селекцию моркови, отобрать клеточные линии, устойчивые к культуральному фильтрату гриба Alternaria radicina; изучить образование фенольных соединений в суспензионных культурах моркови в различных условиях их культивирования и растениях, полученных in vitro и in vivo; получить растения-регенеранты и провести их оценку по устойчивости к грибу Alternaria radicina.

Научная новизна. Впервые разработана методика и проведена клеточная селекция моркови на устойчивость к грибу Alternaria radicina. Показано, что в качестве селективного фактора можно использовать культуральный фильтрат гриба Alternaria radicina в концентрациях 3050%, полученного с использованием различных методических подходов. Установлено, что при совместном культивировании патогена и каллусной ткани в жидкой питательной среде, значительно повышается агрессивность патогена, что приводит к увеличению токсичности культурального фильтрата гриба Alternaria radicina. Показано, что долговременное хранение стерильного культур ального фильтрата патогена, при пониженных температурах, не снижает его токсическое действие. Установлено, что использование эпина в питательной среде значительно повышает морфогенетический потенциал каллусной ткани, по сравнению с часто используемыми в культуре ткани цитокининами -БАЛ и 2ip. Впервые охарактеризовав клеточные суспензии различных генотипов моркови, культивируемых в присутствии биотического селективного фактора. Выяснены различия в содержании фенольных соединений в растениях in vitro и in vivo, а также в клеточных суспензиях в процессе их культивирования в нормальных и стрессовых условиях. Впервые получены клеточные линии и растения-регенеранты моркови, устойчивые к патогену A. radicina.

Практическая значимость. Предложенная и разработанная технология получения растений, устойчивых к биотеческим факторам, в частности моркови к патогену Alternaria radicina, может быть применена и для других сельскохозяйственных культур. Полученные в результате исследований устойчивые формы моркови могут служить основой для создания новых сортов, обладающих повышенной устойчивостью к 8 альтернариозу, что позволит сократить потери урожая от воздействия данного патогена.

Апробация работы. Полученные результаты докладывались и обсуждались на VII Международной конференции «Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда» (Москва, 1998), на симпозиуме в Вашингтоне « In vitro in Biology» (1998), на Международной конференции «Молекулярная генетика и биотехнология» ( Минск, 1998), на II Международной конференции «Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» (Москва, 2000), на Международных конференциях «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 1999, 2001), на научной конференции МСХА (Москва, 2000), а также на заседании кафедры сельскохозяйственной биотехнологии МСХА им К. А. Тимирязева.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Раскалиева, Велина Абдрахмановна

Выводы.

1. Впервые разработана методика и проведена клеточная селекция моркови на устойчивость к грибу Alternaria radicina, в результате которой получены устойчивые клеточные линии и растения-регенераты.

2. Показано, что различные генотипы моркови характеризуются неодинаковой интенсивностью формировать каллусную ткань и имеют различия в продолжительности фаз ростового цикла суспензионной культуры. Генотипы 6700, 225, Rondo характеризуются близкими показателями.

3. Для проведения клеточной селекции моркови на устойчивость к патагену Alternaria radicina целесообразно использовать культуральный фильтрат данного гриба, полученного на среде Чапека в концентрации 30-50%. Установлено, что на среде Чапека выделение токсичных метаболитов гриба в 7 раз выше по сравнению со средой Мурасига и Скуга.

4. Для поддержания агрессивности патогенного гриба Alternaria radicina, при длительном его культивировании, целесообразно проводить совместное выращивание данного патогена и каллусной или суспензионной культур моркови.

5. Изучение поведения клеток суспензионной культуры различных генотипов моркови в нормальных и стрессовых условиях, в процессе культивирования, выявило некоторые сходства и различия по жизнеспособности клеточных популяций, степени агрегированности и ростовому индексу суспензионных культур. Показано, что повышение концентрации культурального фильтрата в питательной среде и длительное культивирование

75 клеточных суспензий в стрессовых условиях приводит к снижению всех учитываемых показателей.

6. Выявлены различия в содержании фенольных соединений у растений in vivo и in vitro, а также в клеточных суспензиях, культивируемых в нормальных и стрессовых условиях. У интактных растениях колличество этих веществ ниже, чем у растений-регенерантов, что свидетельствует об изменениях в их фенольном метаболизме, являющемся, по-видимому, следствием клеточной селекции.

7. Установлено, что использование эпина для морфогенеза каллусной ткани моркови после клеточной селекции, приводит к быстрому получению высокого числа морфогенных структур, которые способны в дальнейшем развиваться в нормальные растения-регенеранты.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Раскалиева, Велина Абдрахмановна, 2001 год

1. Аврова А.О. Физиолого-биохимические особенности взаимодействия томатов с Aiternaria solani и селекция in vitro на устойчивость к альтернариозу// Автореф. диссерт. к.б.н., ВИЗР, 1994, 18 с.

2. Апарцин М.С., Саксонов М.Н., Стом Д.Н. К вопросу о механизме действия пирокатехина и п-бензохинона на клетки кителл// Докл. АН СССР, 1979, т. 244, № 2, с. 510.

3. Байтматова Б.К. Культурально-морфологические особенности некоторых видов рода Aiternaria Nees.// Автореф. диссерт. к.б.н., Алма-Ата, 1972, 18 с.

4. Белякова Г.А., Ермолинский Б.С., Свиридов С.И. и др. Токсичность КФ грибов, вызывающих пятнистость на хлопчатнике.// Вестник Московского ун-та, сер. № 16, 1991, № 4, с.56-61.

5. Берестецкий О.А Определение фитотоксичной активности культур микросеопических грибов. // В кн.: Методы экспериментальной микологии. Киев, 1973, с. 165-175.

6. Биотехнология растений: культура клеток / Под редакцией Р.Г.Бутенко. М.:Агропромиздат, 1989.

7. Бутенко Р.Г., Гусев М.В., Киркин А.Ф. и др. Клеточная инженерия, Биотехнология, 3 книга, М.: Высшая школа, 1987, 128 с.

8. Бутенко Р.Г. Культура клеток растений и биотехнология. М.: Наука, 1986.

9. Винцунас Т.С. Полевая устойчивость подвидов и разновидностей моркови к грибным болезням.// Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции, 1980, т. 66, вып. 2, с. 84-90.

10. Генетические основы селекции растений на иммунитет. М. .Наука, 1973.

11. Германович С.Т. Отбор клеточных линий клевера лугового, устойчивых к КФ Fusarium oxysporum.// Материалы конф. Молодых ученых и аспирантов «Новые идеи в растениеводстве, и пути их реализации», М., 1991, с. 90-91.

12. Гирко В.С., Волощук К.Г., Оценка устойчивости к действию КФ грибного патогена в культуре незрелых зародышей.// С.-х. биология, сер. Биология растений, 1993, № 9, с. 62-70.

13. Гришкова В.П., Виневцев B.C., Хандобики JI.M. Физиологическая роль ряда фенольных соединений, образующихся в тканях моркови под воздействием гриба Phoma rostrupil.// Научные доклады высш. Биол. школы, 1984, №6, с. 63-67.

14. Гумбатова Р.И., Раджабова А.А. Синтез липидов Alternaria.// Известия АН Аз СССР, сер. Биол. наук., 1988, №5, с. 117-122.

15. Гумбатова Р.И., Раджабова А.А. Синтез липидов грибами Alternaria.// Известия АН Аз СССР, Сер. Биол. наук, 1989.

16. Данлади Дада Кута Маркеры сортовой устойчивости к пирикуляриозу в каллусной культуре риса./ Автореф. диссерт. к.б.н., М., 2000, 21 с.

17. Дементьева М.И., Выгонский М.И. Болезни овощей, плодов и картофеля при хранении. М.: В.О.Агропромиздат, 1988, 231 с.

18. Дмитриев А.П., Ковтун А.В. Роль конститутивных фенольных веществ лука в устойчивости к патогенам.// Физиология и биохимия культурных растений, 1988, т, 20, № 9, с. 29-34.

19. Дорожкин Н.А., Соколов Л.И. Черная гниль моркови и борьба с ней сельского хозяйства Белоруссии. 1985, № 12, с. 24.

20. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта ( с основами статистической обработки результатов исследований ). М.:Агропромиздат, 1985, 351 с.

21. Дьяков Ю.Г. Физиолого-биохимические механизмы устойчивости растений к грибным болезням.// Итоги науки и техники, сер. Защита растений, ВИНИТИ, т. 3, 1983.

22. Дорожкин Н.Л., Соколова JI.H. Возбудители черной гнили./ В кн. «Интегр. Система защиты урожая с/х культур от вредных организмов», Воронех, 1983, с. 23-24.

23. Жук И.П.,Рассока С.Н. Регенерация и отбор соматических клонов томата на устойчивость к ВТМ.// Докл. РАСХН, 1992, № 11-12, с. 18-21.

24. Жук И.П. Устойчивость соматических клонов томата к вирусу табачной мозаики.// Микробиол. Журнал, 1993, т.55, № 6, с. 41-46.

25. Закиян JI. Грибы из рода Alternaria и Stemphylium в Армении и некоторые их биологические особенности./ Автореф. диссертации к.б.н., Ереван, 1982, с.20.

26. Запрометов М.Н. Образование и функции фенольных соединений в высших растениях.// Журнал общей биохимии, 1970, т.31,№ 2, с. 170-198.

27. Запрометов М.Н. Основы биохимии фенольных соединений. М.:Высшая школа, 1974, 214 с.

28. Запрометов М.Н. Фенольные соединения растений: биосинтез, превращения и функции.// Новые направления в физиологии растений, м.:Наука, 1985, с. 143-162.

29. Запрометов М.Н. Фенольные соединения: распространение, метаболизм и функции в растениях. М.:Наука, 1993, 272 с.

30. Запрометов М.Н. Специализированные функции фенольных соединений в растениях.// Физиол. Раст., 1993, т. 46, с. 291.

31. Запрометов М.Н. Фенольные соединения и их роль в жизни растения. М,-.Наука, 1996,45 с.

32. Иванова Н.Г. Разработка селективного фактора для проведения клеточной селекции на устойчивость к Corynebanium sepedorium.// Использование клеточной технологии в селекции картофеля, М., 1987, с. 26-28.

33. Иванова О.С. Клеточная селекция на инфекционном фоне для получения фузариозоустойчивых форм томатов.// Материалы Всесоюз. Конф. По с/х биотехнологии, Целиноград, 1991, с. 97-98.

34. Иванюк В.Т., Свиридов А.В. Виды родов Alternaria и Stemfhilium возбудителей болезней моркови в Беларуссии.// Науч. доки, высш. шк. библ. Науки, 1989, № 5, с. 72-74.

35. Иванюк В.Т., Свиридов А.В. Особенности культивирования Phoma rostrupii и Alternaria radicina возбудителей серых гнилей моркови.// Микология и фитопатология, 1988, т,22, вып. 2, с. 553-560.

36. Иванюк В.Т., Свиридов А.В. Бурая пятнистость листьев моркови.// Изв. АН БССР, сер. С/х наук, 1990, 3 9 с. 66-80.

37. Исееков В.П. О патогенных свойствах грибов рода Alternaria на интодуцентах в Крыму.// Бюлл. Гл. Бот. Сада, 1991, вып. 159, с. 81-85.

38. Казакова А.С., Логашев Ю.Е. Изучение фенольных соединений в кульутре ткани сорго всвязи с проблемами клеточной селекции.// Тез. докл. Конф. « Применение биотехнологий в животноводстве, растениеводстве и ветеринарной медецине», М., 1988, с. 207-208.

39. Калинин Ф.Л. и др. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. Киев: Наукова думка, 1980.

40. Кирай 3., Клемент 3. Методы фитопатологии. М.:Колос, 1974.

41. Кононенко Т.П., Поправко С.А., Соколова С.А. Бисинтез и превращения птерокарианов и изофлаванов при взаимодействии бобовых растений с паразитическими грибами.// Обзор.- Прикладная биохимия и микробиология, 1984, т. 20, вып. 6, сс. 723-732.

42. Кошникович В.И. Вредоностностъ и некоторые биологичсекие особенности возбудителя черной гнили моркови в Новосибирской области. В кн.: Вредители и болезни культурных растений. Новосибирск, 1981, с. 49-57.

43. Кукушина JI.H., Дорошенко А.А. Изучение о оценки регенерантов картофеля по устойчивости к фитофторе in vivo и in vitrro.// Использование клеточных технологий в селекции картофеля. М., 1987, с. 52-56.

44. Купрашвили Т.Д. Выявление микрофлоры культурных зонтичных растений и изучение биоэкологии гриба -возбудителя черной пятнистости моркови в Грузии./ Автореф. диссерт. к.б.н.,Тбилиси, 1973,21 с.

45. Лабораторно-практические занятия по сельскохозяйственной биотехнологии. Методические указания.М.:МСХА, 1996, 90 с.

46. Лети Джое Получение форм пшеницы ( Triticum aestivum) устойчивых к грибу Srptoria nodorum в условиях in vitro./ Автореф. диссерт. к.б.н., М., 1998, 22 с.

47. Лети Джое, Калашникова Е.А. Влияние гриба S. Nodorum и его метаболитов на прорастание семян пшеницы.// Известия ТСХА, 1996, вып. 4, с. 150-155.

48. Лихачев А.Н. Использование жидких питательных сред для получения моноспоровых культур грибов.// Микология и фитопатология, 1994, т. 28, вып. 5, с. 14-16.

49. Лопухина Т.П., Сычева Л.В. Устойчивость моркови к возбудителю черной гнили./ В кн. Интегр. Система защиты урожая с/х культур от вредных организмов. Воронеж, 1983, с. 23-27.

50. Лукьянюк С.Ф., Овсюк Т.Н. Методы in vitro для отбора люцерны на фузариозоустойчивость.// Методы биотехнологии в селекции с/х растений. Одесса, 1992, с. 39-48.

51. Магди Гад Аль-Раб К созданию селективных питательных сред на основе КФ Alternaria solani.// Защита растений от вредителей и болезней в условиях экологидизации с/ производства, Сп.б., 1992, с.63-66.

52. Максимов В.Н., Многофакторный эксперимент в биологии, М.:МГУ, 1980, 150 с.

53. Манешина Т.В., Обухович Е.М., Курицова Н.А. Отбор токсиноостойчивых каллусов в культуре зародышей ячменя.//Междун. Конф. Клеток и биотехнология. Тез. докл., Новосибирск, 1988, ч. 1, с. 179.

54. Маруненко И.М., Кучко А.А. и др. Клеточная селекция картофеля на устойчивость к патогенам.// Междунар. Конф. «Биология культивируемых клеток и биотехнология», Новосибирск, 1988, ч. 1, е. 169.

55. Маруненко И.М. и др, Отбор генотипов, устойчивых к мокрым гнилям картофеля, методами клеточной селекции.// Создание и использование исходного материала в селекции картофеля, Киев, 1992, с. 62-70.

56. Масленников С.Е. Методы культуры каллусов и клеток в создании форм люцерны, устойчивых к фузариозу./ Автореф. диссертации к.б.н., М.:ТСХА, 1994, 15 с.

57. Масленников С.Е. Получение устойчивых к корневым гнилям растений люцерны с использованием методов культуры каллусов и клеток.// Соврем. Достижения биотехнологии. Ставрополь, 1995, с. 24-25.

58. Мезенцева О.Н. Получение клеточных линий пшеницы, устойчивых к токсинам фузариоза.// Доклвды научно-практич. Конф. «Ученые Нечерноземья развитию сельского хозяйства», М., 1991, с. 179-183.

59. Метлицкий Л.В., Озерецковская О.Л. Фитоалексины. М.:Наука, 1973.

60. Метлицкий Л.В. Иммунологический контроль в жизни растений.// 45-е Тимирязевские чтения. М.:Наука, 1987.

61. Метлицкий Л.В. Фитоиммунитеты, молекулярные механизмы.// 31-е Баховские чтения. М.:Наука, 1976.

62. Методы клеточной инженерии растений.// Под редакцией МомотВ.П., Киев, 1988.

63. Минаева В.Г. Флавоноиды в онтогенезе растений и их практическое использование. Новосибирск:Наука, 1978, 225 с.

64. Муромцев Г.С., Бутенко Р.Г., Прокофьев М.И. Основы сельскохозяйственной биотехнологии. М.:Агропромиздат, 1990,384 с.

65. Мохамед Али-Абдельхамед Али Физиологические изменения в культуре клеток моркови при соматическом эмбриогенезе./ Автореферат диссерт. к.б.н., М., 1997, 18 с.

66. Никуленко Т.Р. Токсины фитопатологических грибов и их роль в развитии растений. М.:Агропромиздат, 1987.

67. Нгуен Хонг Минь Селекция in vitro на устойчивость к Fusarium oxysporum f. Sp. Lycopersici у томатов./ Автореферат диссерт., к.б.н., Минск, 1991, 21с.

68. Плащев В.М. Вьщеление вирулентных клонов Alternaria radicina.// Бюл. ВИР, 1982, вып. 118, с.61-62.

69. Плащев В.М. Клеточная селекция клевера и люцерны на устойчивость к фузариозному увяданию./УГаметофитная и защитная селекция растений, Кишенев, 1987, с. 176-178.

70. Попкова К.В. Учение об иммунитете растений. М.:Колос, 1979, 272 с.

71. Попкова К.В. Общая фитопатология. М.:Агропромиздат, 1989, 399 с.

72. Родева В., Станчева И. Биологичен эфект на културални филтрати от различии изопати на Alternaria solani върху растение доматени растение in vitro.// Биотехнология, 1990, т. 4, № 3/4, с.27-30.

73. Родин М.Н. Общая фитопатология. М.:Высшая школа, 1978.

74. Рубин Б.А., Архиховская Е.В., Аксенова В.А. Биохимия и физиология иммунитета растений, М.:Высшая школа, 1975.

75. Рукшенайте-Берецкене С. Грибные болезни моркови в Литовской ССР и биологические свойства возбудителей альтернариоза./ Автореферат диссерт. к.б.н., Вильнюс, 1971, 20 с.

76. Сельскохозяйственная биотехнология: Учебник ( под редакцией В.С.Шевелухи), М.:Высшая школа, 1998, 416 с.

77. Семенов Л.Д. Питательные среды. М., 1994,210 с.

78. Сидоров В.А. Биотехнология растений. Клеточная селекция. Киев:Наукова Думка, 1990, 360 с.

79. Сидукова Е.В., Свиридов А.В. Источники инфекции моркови возбудителем бурой пятнистости листьев.// Экол.экон. основы усовершенствования интегр. Систем защиты растений от вредителей, болезней и сорняков. Минск, 1996, ч. 2, с. 42-43.

80. Соколова Т.Д. Физиолого-биохимические реакции корнеплодов на ранних этапах заражения возбудителя Alternaria в процессе хранения./ Автореферат диссерт. к.б.н., ВИЗР, Сп.б., 1998, 19 с.

81. Солодкая JI.A., Новоселова Е.Ю. Методы создания форм клевера лугового с повышенной устойчивостью к раку.// Сборн. Науч. Трудов ВНИИ кормов, 1989, вып. 42, с.57-65.

82. Таганов Б.О. Разработка лабораторной технологии получения андрогенных растений моркови in vitro ./ Автореферат диссерт. к.б.н., М„ 1991,22 с.

83. Тимина JI.T. Эколого-генетические особенности проявления устойчивости моркови к Alternaria.// Научн. Тр. По семеноводству овощных культур, 1995, т. 1, с. 147-152.

84. Тимина JI.T., Василевский В.А. Устойчивость моркови к альтернариозу при селекции на гетерозис.// Гетерозис с/х растений, 1997, с. 158-160.

85. Угарова С.В., Тесля А.А. Селекция моркови с применением биотехнологических методов.// Тез. докл. «Пробл. Совета по растениеводству, селекции, семеноводству с/х культур Сибири», Новосибирск, 1994, с.23-24.

86. Федоренко Е.И. Изучение коллекционного разнообразия моркови по устойчивости к Aiternaria.// Научн.-технич. Бюл. ВИР, 1983, вып. 130, с. 64-66.

87. Фитоалексины./ Под ред. Бейли Д.А. и Мансфильда Д.В., Киев:Наукова Думка, 1985.

88. Хандобина JI.M., Гришкова В.П.,Вишвецев B.C. Изменение состава фенольных соединений в тканях моркови при поражении грибом Phoma rostrupii.// Научн. Докл. Высш. школы биол. науки, 1982, № 9, с.85-89.

89. Хотин Ю.А., Полякова Т.М. Сохранение инфекционных свойств возбудителя ризоктониоза риса при культивировании на искусственных питательных средах.// Микология и фитопатология, 1991, т. 25, вып. 1, с.80-84.

90. Черненко Е.А. Распространение устойчивости к болезням среди разнообразия вида Daucus carrota.// Проблемы селекции овощных культур. Минск, 1997, с.40-41.

91. Шапова А.С. Альтернариоз помидоров в условиях Узбекистана и меры борьбы с ними./ Автореферат диссерт. к.б.н., Ташкент, 1966, с.20.

92. Шаяхметов И.Ф. Культура клеток и тканей пшеницы in vitro и соматический эмбриогенез./ Автореф. диссерт. Д.б.н., 2001, 45 с. „ ■

93. Шаяхметов И.Ф. идр Клеточная селекция яровой пшеницы на устойчивость к корневым гнилям.// Генетика, 1994, т. 30, с. 181.

94. Шевелуха B.C. Новая биотехнология в селекции и растениеводстве.// Вестник с/х науки, 1986, № 2, с. 25-31.

95. Шевченко Д.Н. Изменчивость линий-регенерантов ячменя по признакам устойчивости к болезням, морфологии и продуктивности./ Автореферат диссерт. к.б.н., 1994, 18 с.

96. Яковлева Т.А. и др. Негативный отбор in vitro самоклонов картофеля, устойчивых к парше обыкновенной.// II Междунар. Конф. «Биология культивируемых клеток растений и биотехнология», Алма-Ата, 1993, с. 136.

97. Allicchoi R., Bioni М., Ghedini R. Jsozymatic varition in potato plants regenerstion cells resistant tofungab toxin.// Atti| Assoc. Gent. Ital. 1989, v. 35, p. 9-70.

98. Arcioni S. Et al. Thea. Appl. Gen., 1987, v. 74, p. 700-705.

99. Austin S et. al. Thea. Appl. Gen., 1986, v. 71, p. 682-690.

100. Baranski R., Nowak E. et. al. Development of carrot callus in the presence of the crude extract from Erwinia carotovora culture.// J. appl. Genet., 1997, v. 38 A, p. 91-99.

101. Boiteux L.S. Heritabity estimate for resistance to Alternaria dancu carrot.// Boite. Seed Sc. Technol., 1993, v. 110, 1 2, p. 37248.

102. Bomme U., Daniel G. Erste untersuchungsergebrisse zun Auslesezuchtung fei Arnica montana. L. Unter Einberichung der in vitro kulter.// Vortr. Fur Pflanzen zuchtung. Bjnn., 1993, v. 26, s. 92-108.

103. Bruemmer J.H., White J.M. Bse of phytoalexin production in carrot cell cultures to evaluate leaf blight susceptibility.// Proc. Fborida state Hortic. So hake Afred, Fia, 1987, v. S.9, p. 156-157.

104. Brunok., Smolka S. Production of zinnib by Alternaria dauciana its.//Ann. Agr. Sc., 1981.

105. Chawa H.S., Wenzel G. Thea. Appl. Gen., 1987, v. 74, p. 841845.

106. Coxon D.T., Heill T.M., Mansfield J.M. et. al. Identification of three hydroxyflavan phytoalexins from daffodil bulbs.// Phytochemistry, 1980, v. 19, p. 889.

107. Daub M.E. Tissue culture and the selection of resistance to patogens.// Ann. Rev. Phitopathol., 1986, v. 24, p. 156-186.

108. Deadon W.R., Keyes G.J., Collins G.B. Expressed resistance to black shankamong tobacco callus cultures.// Theer. And Appl. Genet., 1982, v. 63, p. 65-70.

109. Fish N., Gones M. Plant today, 1988, v. 2, p. 47-49.

110. Foroughi Wehr В., Stalle K., Nachr D. Pflanzenshuts., 1985, v. 37, p. 170-173.

111. Harborre J.B. Do natural plants phenols play a role in ecology.// Acta hort., 1994,1 381, p. 36-43.

112. Herrandez M.M., Kowalski В., Orizu Electividaddel empleode filtrados Alternaria solani Ellij. Y Mantienen la selecci on in vitro deformas resistees en papa (Solanum tuberosum L.).// Cultuvost гор., 1991, v. 12,1 2, p. 48-50.

113. Hartman C.L. et. al. Plant Sc. Let., 1984, v. 34, p. 151-158.

114. Hunold R. In vitro selection for gerstl and resistens gegen toxinevon Drechslera tores (Sacc.) sholmaker.// Vortr. Fur О Pflanzenzuchtung. Bonn., 193{p. 8-30.

115. Hunold N. Toxin sensibilitat von kalluskulturen cinigen sommer gersten mit unterschiedlicher resistens gegenuben Drechslera teres (Sacc.) shvem.// Arch. Phytopathol. Pflanzenschuts03$ h. 3, p. 267-276.

116. Kaltschmidt B. In vitro selection fur bakterienbrandresistens in genotypen der susshifsche orste ergebnisse mit einer neuenznfections method.// Vont. Fur Pflanzenzuchtung Bonn, 1991, h. 19, p. 213-214.

117. Kasenberg T.R., Traguair J.A. Effectis of phenolics on growth of fusurium oxysporum f. Sp. Radicis- Lycopersici in vitro.// Can. J. Bot., 1988, v. 66,1 6, p. 1174-1177.

118. Kurusaki P., Amin M., Nishi A. Induction of phytoalexin production and accumulation of phenolic compounds in cultured carrot cells.// Physiol. Molec. Plant. Pathol., 1986, v. 28, 1 3, p. 359-370.

119. Kurusaki P., Tashiro N., Nishi A. Secretion of chitinase^ from cultured carrot cell treated wiht fungal myceliae walls.// Physiol. Molec. Plant. Pathol., 1987, v. 31,1 2, p. 211-216.

120. Leon J., Shulaev V., Lauton et. al. Benzoic acid 2-hidroxulase a putative cytochrome P-450, catalizes the biosynthesis of salicilic acid.// Plant Physiol., 1994, v. 105, p. 15.

121. Le-Wis N. G., Yamamot O.E. Lignin occarence, biogenesis and biodegradation.// Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Boil., 1990, v. 41, p. 339.

122. Lynn D.G., Chang M. Phenolic signalis cohabitation: Implications for plant development.// Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Boil., 1990, v. 41, p. 497.

123. Melis A., Nemson J.A., Yarrison M.A. Damongetofunctional components and pantial degradation of photosystem II reaction center ptoteins upon chloroplast exposure to ultraviolet В radiation.// Bioch. Et biophys. Acta, 1992, v. 110, p. 312.

124. Miklas P.N., Grafton K.F., Secor G.A. Use of patho gen filtrate to differentiale physiological resistance of dry bean to white molddisease.// Crop. Sc., 1992, v. 32,1 2, p. 310-312.

125. Moerschbucher В. Lignin biosynthesis and rsistance of wheat to stem rust.//Phytoparasitica, 1998, v. 16, p. 153.

126. Muller H. Unter suchung zur bildung von 3-methyl -6-melhoxy hugroxy-3,4-dihidroisocumerin bei den moohmenlagerund.// Phytopatol., 1976, r. 93, h. 3, p. 241-248.

127. Nascaril J., Broggio M. Studies on Alternaria solani tuberosum in vitro interactions.// Riv. Agr. Subtrom. Trop., 1990. A. 84, N 3, p. 445-499.

128. Olsson K., Svensson A. Are carrot phenols and polyacety lenes in fluenity susceptilicity. 1997, v. 38A, p. 219-223.

129. Rizk A.M., Hammouda F.M. Phytoalexins produced by Daucus carota infected with some fungi.// Ann. Agri. Sc., 1983, v. 28, N 1, p. 23-31.

130. Srivastava O.L., Van Huystee R.B. Interections among phenolic oxidase activities of peanut peroxidase isozymes .// Phytochem., 1997., v. 16. N. 10. P. 1527-1530.

131. Toyoda Y., et. al. Phytopathol. Soc. Janan., 1984, v. 50, p. 538540.

132. Tylkowska K. Stadies toxines Alternaria alternata isolaten from carrot seeds and seedling.//Szczeshag, 1974, s. 877-879.

133. Tylkowska K. Toxinogenicity of Alternaria altemana isolates from carrot seeds and seedlings.// Seed Sc. Technol, 1995, v. 23, N. 3, p. 877-879.

134. Jensen R.A. The shikimate/arogenate pathway: Link between carbohydrate metabolism and secondary metabolism.// Physiol. Plant., 1986, v. 66, p. 164.

135. Wagner A.M., Wagner M.J. Measurement of in vivo ubiqionone reduction levels in plant cell.// Plant Physiol., 1995;vv. 108, p. 277.

136. Weissenbock G., Plesser A., Trinks H. Flavonoid gekalt und enzymaktivitaten isolienten Hafechloroplasten (Avenasatival.).// Ber. Dt. Bot. Gen., 1976, v. 89, p. 457.

137. Weissenbock G., Tevini M., Re2nic H. Uber das vokommenvon flavonoiden in cliloroplasten von Jmpatens balsamina L.// Ztschr., Pflaztnphysiol., 1971, v. 64, p. 274.

138. Wadholm J.M. Selection and characterization a Daucus carota L. Cell line resistant to four aminoacidd analogues.// J. Exp. Bot., 1978, v. 29, p. 1111-1116.

139. Wadholm J.M. Selection of plants cell lines which accumulate compound.// Plant Tissue Culture, 1980, p. 99-114.

140. Wadholm J.M. Differential expression of amino acid biosynthetic control isoenzymes in plants and cultured cells.// Plant Tissue Culture, 1980, p. 157-159.

141. Wieland T. Poisonous principles of mushruums of the genus Amanita.// Science, 1968, p. 946-052/

142. Wild J.R., Kerns H.A. Amplification of dihydrofolatt reductase in tesponse to stepwise increases in folate analogue concentration in cotton tissue culture.// Abstr. Plant Mol. Biol., 1983, p. 23.

143. Wong J.R., Sussex J.M. Isolation of abscisic acid risistant variants from tobacco cell cultures.// Planta, 1980, p. 97-102/

144. Wray J.L. The molecular genetics of highen plant nitrate assimilation.// A genetic approach to plant biochemistry, 1986, p. 101-151.

145. Wright W.E., Hayflick L. Use of biochemical lesions for selection of human cells with hybrid cytoplasms.// Proc. Nat> Acad. USA, 1975, p. 1812-1816.