Гаплоидные технологии в ускоренном создании исходных форм и линий яровой мягкой пшеницы, устойчивых к засухе и к Septoria nodorum Berk тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, доктор биологических наук Беккужина, Сара Сабденовна

• Беккужина, Сара Сабденовна
• доктор биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации доктор биологических наук Беккужина, Сара Сабденовна

НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ, ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ.

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Эффективность использования гаплоидных технологий в селекционных программах.

1.2 Гормональная индукция андрогенеза in vitro.

1.2.1 Влияние физических и химических агентов на пыльцевой эмбриогенез.

1.3 Гаплоидные технологии и гаметная селекция.

1.3.1 Возможности использования гаметной селекции для отбора растений, устойчивых к абиотическому стрессу.

1.3.2 Отбор форм, устойчивых к биотическому стрессу с помощью селекции на уровне соматических и репродуктивных клеток.

II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

II. 1 Объекты исследований.•.

11.2 Культивирование пыльников.

11.3 Биохимические методы исследований.

11.3.1 Определение запасных белков и ферментного комплекса МДГ-ГОАТ (малатдегидрогеназа-глутаматоксалоацетат аминотрансфераза).

11.3.2 Определение суммы растворимых фенольных соединений в изолированных зародышах и каллусных культурах пшеницы.

11.3.3 Определение содержания эндогенных гормонов в растениях пшеницы.

11.4 RAPD-анализ.

11.5 Селекция in vitro на клеточном уровне.

И. 6 Методика полевых испытаний.

III РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

III. 1 Повышение эффективности экспериментальной гаплоидии для расширения генетического базиса селекции яровой мягкой пшеницы. 69 III. 1.1 Выяснение компетенции микроспор в культуре пыльников яровой мягкой пшеницы.

III. 1.2 Роль гормональных факторов и биологически активных веществ в ндукции спорофитного пути развития микроспор пшеницы (Triticum aestivum L.J.

111.2 Селекция пшеницы на устойчивость к абиотическим стрессам на уровне гамет.

111.2.1 Получение гаметоклональных вариантов в культуру пыльников 105 при солевом стрессе.

111.2.2 Ускоренное размножение линий, полученных в стрессовых условиях при одновременном тестировании и их полевая оценка.

111.3 Отбор засухоустойчивых растений-регенерантов при проведении селекции на уровне гамет.

111.4 Селекция in vitro к биотическому стрессу.

III.4.1 Усовершенствование селекции пшеницы на устойчивость к фитопатогенному грибу Septoria nodorum Berk в условиях in vitro.

III.4. 2 Биохимические изменения в экспланте и каллусных тканях, полученных в стандартных и стрессовых условиях.

111.4.3 Выделение и идентификация фитотоксичных метаболитов гриба Septoria nodorum Berk и их использование в селекции in vitro.

111.4.4 Выделение водной формы грибного фильтрата и изучение фитотоксичности гриба S. nodorum для селекции in vitro.

111.4.5 Изучение регенерационного потенциала каллусных клеток и эмбриоидов, индуцированных в стандартных и стрессовых условиях культивирования.

111.5 Изучение биологических и хозяйственно-ценных признаков линий, полученных методами биотехнологии и их использование в селекционных программах для создания перспективных форм пшеницы в НПЦ ЗХ им.А.И. Бараева.

III.5.1 Полевые испытания полученных линий и гибридов в

Карабалыкской сельскохозяйственной опытной станции.

111.6 Использование белковых маркеров для отбора перспективных гибридов в Fj и F3 поколениях.

111.7 Молекулярное маркирование дигаплоидной линии и гаметоклональных вариантов, полученных в культуре пыльников пшеницы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Гаплоидные технологии в ускоренном создании исходных форм и линий яровой мягкой пшеницы, устойчивых к засухе и к Septoria nodorum Berk»

Казахстан является одним из крупнейших производителей зерна в мире. В северном регионе Республики сосредоточено 80% площадей основной хлебной культуры яровой пшеницы и в этой связи необходим постоянный поиск резервов повышения урожайности и качества зерна.

Одним из определяющих факторов эффективности современного земледелия в Казахстане, как и во многих странах мира, является сорт, вклад которого в формирование урожая может составить 30-70%. Рост значимости сорта в ближайшем будущем связан с выведением сортов с повышенными адаптивными свойствами к стрессовым абиотическим и биотическим факторам внешней среды.

На 2-й Центрально-Азиатской конференции по зерновым культурам подведены итоги селекции пшеницы за последние 50 лет и определены новые подходы по расширению генетического базиса селекции пшеницы.

В настоящее время широко обсуждается проблема использования биотехнологических методов в решении прикладных аспектов селекции. Известно, что основным методами биотехнологии, дающими значимые результаты в решении селекционных задач, являются гаплоидные технологии и молекулярные маркеры.

В популяции удвоенных гаплоидов, т.е. однородных гомозиготных линий легче проводить отбор по хозяйственно ценным признакам, чем в сложных популяциях первых гибридных поколений, в которых обычно проводится отбор. Известно, что эффективность отбора определяется соотношением компонент генотипической и средовой изменчивости в популяции. Фенотипическая изменчивость в популяциях удвоенных гаплоидов определяется аддитивными эффектами генов и условиями выращивания. В искусственно созданной популяции, состоящей из линий удвоенных гаплоидов, эффективность отбора приближается к 100%.

Актуальность проблемы. Расширение генетического базиса методами селекции на уровне соматических и репродуктивных клеток с включением измененных вариантов, а также константных форм, полученных с помощью гаплоидных технологий в схему традиционной селекции, может обеспечить значительный успех в селекции яровой мягкой пшеницы. Комплексное применение отбора клеточных популяций в селективных условиях и методов гаплоидии повышает эффективность получения растений устойчивых к абиотическим и биотическим стрессам (B.C. Шевелуха и др., 2008). Кроме того, ускоренное размножение дигаплоидных линий и их включение в различные схемы селекции в настоящее время дает практические результаты.

Сочетание традиционных и биотехнологических методов селекции в настоящее время является эффективным в создании новых сортов с одновременным повышением продуктивности и устойчивости растений к абиотическим и биотическим стрессам. Ускоренное размножение дигаплоидных линий и их использование в различных схемах селекции дает весомые практические результаты.

Урожайность яровой пшеницы в Казахстане за последние 10 лет не превышает 1 тонну с гектара, что значительно ниже средних мировых показателей. Это обусловлено особенностями резко континентальных, климатических условий Казахстана, прежде всего недостаточной водообеспеченностью, которые являются сдерживающими факторами повышения продуктивности пшеницы. Так в НПЦ ЗХ им. А.И. Бараева в результате более 30 летнего изучения факторов внешней среды на урожайность пшеницы, выявлена высокая корреляционная зависимость продуктивности от влагообеспеченности (г = 0,645).

В Матералах II региональной научно-практической конференции «ГНУ НИИСХ Юго-Востока и Зональные особенности научного обеспечения сельскохозяйственного производства» отмечалось, что среди мер борьбы с засухой селекция растений должна занимать одно из ведущих мест (Н.С. Васильчук и др., 2010).

Академик РАСХН B.C. Шевелуха отмечает, что биотехнология может решать принципиально новые задачи, направленные на повышение урожайности сельскохозяйственных культур. Особенно это касается повышения устойчивости к биотическим факторам, так как около 30% урожая теряется из-за опасных болезней и вредителей. Сегодня используя биотехнологические подходы, можно создавать растения с комплексной устойчивостью (Шевелуха, 2001, 2003).

Преимущества использования клеточных биотехнологии для создания исходного материала и для ускорения селекционного процесса (методы эмбриокультуры, эмбриокультура в сочетании яровизацией in vitro, использование гаплоидных технологий), обсуждаются в работе Т.И. Дьячук (Дьячук и др., 2010)

В Северном Казахстане в последние годы распространение болезней зерновых культур наносит значительный ущерб продуктивности и качеству зерна. В рамках сотрудничества с Международным центром CIMMYT обследованы посевы озимой и яровой мягкой пшеницы. Было установлено, что распространение особо опасных возбудителей болезней выглядит следующим образом: Tan spot - 10-36% (Pyrenophora tritici-repentis), Septoria nodorum - 3-21%, Bipolaris sorokiniana - 5-9%, Septoria tritici - 7% (Duveiller, 2007). В регионе массовое заболевание септориозом посевов яровой мягкой пшеницы наблюдается в середине и в конце июля из-за заражения пикпоспорами, заселяющих пожнивные остатки (Койшибаев, 2006).

Септориоз пшеницы является острой проблемой мирового масштаба, о чём свидетельствуют материалы Международного симпозиума «Septoria и Stagonospora — болезни злаков», состоявшегося в Тунисе. На данном форуме ученые и практики детально обсудили традиционные и новые подходы к борьбе с болезнью, механизмы защитной ответной реакции растений, распространение септориальных болезней и объемы наносимого ущерба хлебным культурам в мировом масштабе (Zadokc, 2003).

Р.Г. Бутенко (1999) впервые подробно описала биотехнологические методы, которые позволяют повысить эффективность селекции, в частности, методы культуры изолированных клеток, тканей и органов растений. Основываясь на них, нами предпринята попытка усовершенствования схемы селекции in vitro, которая в отличие от традиционной схемы включает все звенья отбора клеток под действием различных селективных агентов.

Цели исследования. Цель исследований - создание технологической цепи, включающей традиционные методы селекции и биотехнологические методы, путем усовершенствования эффективности гаплоидных технологий при отборе яровой мягкой пшеницы на устойчивость к водному дефициту и к фитопатогенному грибу Septoria nodorum Berk.

Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи:

- создать экспериментальную систему повышения эффективности пыльцевого эмбриогенеза и выяснить роль гормональных предобработок растений-доноров в индукции спорофитного пути развития микроспор яровой мягкой пшеницы;

- провести селекцию на уровне гамет и оценить гаметоклональные варианты на толерантность к абиотическому фактору (водный дефицит);

- выявить эффективные формы селективного агента для проведения селекции in vitro к патогену Septorai nodorum Berk. Провести отбор эмбриоидов и регенерантов, размножить полученные линии, устойчивые к экзометаболитам гриба S. nodorum',

- изучить возможности использования белковых и ДНК маркеров для ускоренного отбора перспективных форм яровой пшеницы в ранних поколениях;

- создать новые перспективные формы яровой мягкой пшеницы с ценными хозяйственно-биологическими признаками на основе сочетания традиционных и биотехнологических методов с последующим включением их в селекционные программы для облегчения и ускорения селекционного процесса и расширения генетического базиса селекции пшеницы.

Научная новизна. Разработана технология, сочетающая традиционные и биотехнологические подходы, обеспечивающие расширение генетического базиса селекции яровой мягкой пшеницы.

Создана экспериментальная система повышения эффективности пыльцевого эмбриогенеза и выявлена роль гормональных предобработок растений-доноров в индукции спорофитного пути развития микроспор яровой мягкой пшеницы. Установлено, что гормон ауксинового типа действия - ИУК, а также 2,4-D при обработке растений-доноров, с учетом содержания эндогенного ИУК, стимулируют процесс андрогенеза in vitro. Выявлено, что при предобработке ИУК срезанных растений, эмбриоиды индуцируются из поздних стадий развития микроспор, возможно из пыльцевого зерна. Кроме того, установлено, что предобработка срезанных растений аконитовой кислотой приводит к 100% выживанию индуцированных эмбриоидов и формированию из них растений-регенерантов.

Впервые показана возможность разработки новой модификации технологии гаметной селекции, основанной на использовании активно растущего мужского гаметофита для повышения эффективности получения спорофитной генерации. Такой подход позволил получить новые линии яровой мягкой пшеницы, устойчивые к засухе.

Константные формы, а также гаметоклональные варианты включены в программу селекции пшеницы на устойчивость к водному дефициту. Линии-регенеранты превысили стандарт (сорт Акмола 2) по продуктивности и проявили устойчивость к засухе и к полеганию. Полученные линии, в сравнении со стандартом, отличались по своим анатомо-морфологическим признакам и по архитектонике.

Впервые для селекции клеточных колоний in vitro, устойчивых к экзометаболитам гриба Septoria nodorum Berk., одновременно применен отбор на уровне репродуктивных и соматических клеток при поверхностном и глубинном выращивании каллусных культур.

Выявлены гибридные комбинации с большим содержанием МДГ-ГОАТ (малатдегидрогеназа-глутамат-оксалоацетат аминотрансфераза) по сравнению с родительскими формами. Малатдегидрогеназный комплекс позволяет отобрать ценные линии на устойчивость к засухе в ранних поколениях.

С помощью RAPD-метода выявлены изменения в геноме потомства растений-регенерантов пшеницы, полученных в результате использования гаплоидных технологий. Определены генетические расстояния между дигаплоидной линией и исходным сортом, а также гаметоклональными вариантами отражающие степень различия их геномов.

Практическая значимость работы. Отобранные в культуре пыльников яровой мягкой пшеницы линии переданы селекционным учреждениям, расположенным в различных регионах Казахстана (НПЦ ЗХ им. А.И. Бараева, Карабалыкская СХОС, Актюбинский селекционный центр) для селекционной оценки и включения в гибридизацию. Перспективные формы и линии будут переданы на ГСП.

Разработанная нами технология получения перспективных форм яровой мягкой пшеницы на основе сочетания традиционных и биотехнологических методов селекции, может быть применена и к другим злаковым культурам.

Полученные результаты используются в учебном процессе при чтении лекций и проведения лабораторно-практических занятий по курсу

Биотехнология растений» и «Биотехнология сельскохозяйственных культур» в Казахском агротехническом университете им. С. Сейфуллина. Основные результаты исследований по гаметоклональной селекции растений вошли в учебник «Ос1мдш биотехнологиясы» (С.С. Беккужина, 2009), рекомендованный Министерством образования и науки PK для преподавания на биологических и агрономических факультетах ВУЗов.

В результате исследований разработан способ получения гаплоидных растений пшеницы с повышенным регенерационным потенциалом, на который получен инновационный патент (2007/0161.1.).

Основные положения, выносимые на защиту:

Разработана экспериментальная система, способствующая повышению компетенции микроспор для эффективного использования гаплоидной технологии по расширению генетической основы яровой мягкой пшеницы. Баланс фитогормонов является одним из ключевых механизмов переключения микроспор с гаметофитного на спорофитный путь развития. У растений-доноров с высоким эндогенным содержанием индолилуксусной кислоты при их дополнительной обработке экзогенной ИУК повышается эффективность пыльцевого эмбриогенеза.

- Создана схема селекции на уровне репродуктивных и соматических клеток, позволяющая отбирать клеточные линии, устойчивые к засухе используя АБК, как фактор, моделирующий водный дефицит. Для получения форм устойчивых к Septoria nodorum Berk, в качестве селективного агента целесообразно использовать водную форму фильтрата фитопатогенного гриба S. nodorum Berk.

- Создана технология, сочетающая традиционные методы селекции и методы биотехнологии для ускорения селекции яровой мягкой пшеницы по отбору ценных признаков на продуктивность и стрессоустойчивость. Включение потомств растений-регенерантов в схемы классической селекции выявило преимущества комплексного использования этих методов по выявлению линий, обладающих хозяйственно-ценными признаками.

Белковые и молекулярные маркеры позволили отобрать перспективные формы яровой мягкой пшеницы в ранних поколениях.

Апробация работы. Основные положения работы доложены и представлены на различных международных, республиканских конференциях, симпозиумах и совещаниях, в том числе на Международном симпозиуме «Устойчивость растений к биотическим и абиотическим факторам» (Берлин, 2009); Международном микологическом форуме (Москва, 2009, 2010); Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» (Ульяновск, 2009); Международной научной конференции «Актуальные вопросы биологии в Байкальском регионе» (Иркутск, 2009); IX Конференции «Биология клеток растений in vitro и биотехнология» (Москва, 2008); Международной конференции, посвященной 40-летию ГосНИИгенетики (Москва, 2008); Российской конференции «Генетика микроорганизмов», посвященной 100-летию со дня рождения С.А. Алиханяна (Москва-Пущино-на-Оке, 2006); Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летию РГП «НИЦ ЗХ им. А.И.Бараева» (Шортанды, 2006); Международной конференции, посвященной 50-летию Казахского агротехнического университета им. С. Сейфуллина (Астана, 2007); Международной конференции «Развитие ключевых направлений сельскохозяйственных наук в Казахстане: селекция, биотехнология, генетические ресурсы» (Астана, 2004); на Координационном совещании по Государственной программе 042 (Шортанды, 2001-2005).

Связь работы с крупными научными программами.

Теоретические и экспериментальные исследования по диссертационной работе были тесно связаны с выполнением Республиканских научных программ Министерства сельского хозяйства и Министерства образования и науки по проектам:

- «Расширение генетического базиса яровой мягкой пшеницы с помощью БН-метода»;

- «Усовершенствование методов селекции пшеницы на уровне клеток, выяснение механизмов, обеспечивающих устойчивость к биотическим факторам в морфогенетическом цикле «клетка-растение-клетка».

Публикации. Основные положения диссертации изложены в 54 печатных работах, включая научные статьи, тезисы докладов, учебник, учебное пособие, методические рекомендации, инновационный патент.

Личный вклад автора. Экспериментальные результаты получены автором лично и совместно с коллегами из Института биологии и биотехнологии, центра биотехнологии Республики Казахстан, Института Молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина, Института проблем биологической безопасности, НПЦ ЗХ им. А.И. Бараева, РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева, Карабалыкской СХОС. Авторство указано в списке опубликованных работ, приведенных в диссертации и в автореферате. Формулировка идей, планирование экспериментов, обработка первичных данных, их статистико-математический анализ и теоретическое обобщение результатов выполнены диссертантом. Диссертационная работа полностью написана лично автором.

Обоснованность и достоверность научных положений и выводов обеспечивается анализом обширного экспериментального материала, полученного в течение 17 лет, с использованием общепринятых и современных методик, а также разработанных нами методик и статистической обработкой результатов исследований с оценкой их точности и достоверности.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Беккужина, Сара Сабденовна

ВЫВОДЫ

1. Разработана комплексная технология получения форм и линий яровой мягкой пшеницы, устойчивых к водному дефициту и к фитопатогенному грибу Septorai nodorum Berk., на основе сочетания гаплоидной технологии и классических методов селекции.

2. Создана эффективная биологическая система, позволяющая переключать развитие микроспор с гаметофитного на спорофитный путь развития на основе предобработки срезанных колосьев гормонами ауксинового типа действия - ИУК, 2,4-D с учетом содержания эндогенного ИУК в растениях. Разработанный способ повышает эффективность пыльцевого эмбриогенеза до 8%.

3. Впервые при гаметоклональной селекции in vitro из трех форм селективного агента: культуральный фильтрат, фитотоксины и водная форма грибного фильтрата (ВФГФ) гриба Septoria nodorum Berk, выявлена эффективность отбора эмбриоидов на среде с ВФГФ. Данный селективный фактор обладал фитотоксичностыо в 1,5-2 раза выше по сравнению с КФ.

4. Установлено, что в условиях in vitro на уровне репродуктивных клеток, при использовании абсцизовой кислоты и хлорида натрия могут быть получены осмотолерантные клеточные линии. На основе морфогенетического цикла «клетка-растение-клетка» отобраны засухоустойчивые линии AR245, K)580R2 и гаметоклон ЛГВЗ-692-3-5, которые проявили устойчивость к засухе при полевой оценке (7-9 баллов).

5. Линии, полученные в результате селекции на уровне гамет, отличались анатомо-морфологическими признаками и общей архитектоникой - большей листовой поверхностью, верхний лист по отношению к стеблю расположен под значительно меньшим углом (45-55°), что приводит к смещению фаз всходы-колошение на период лучшей влагообеспеченности. Растения формировали большое количество узловых корней и продуктивных побегов кущения в условиях острой засухи.

6. Линии - регенеранты превысили стандартный сорт Акмола 2 по урожайности на 3,6-4,5 ц/га. Урожайность формировалась за счет высокой продуктивной кустистости, озерненности колоса и массы зерна с колоса. Хлебопекарная оценка линий варьирует от 4,3 до 4,6 балла. Высоким содержанием клейковины отличались линии I0580R и ЛГВ2-92-2 - 30,032,4%. Линии I0580R, AR45 использованы в гибридизации и на их основе при отборе получено 44 400 элитных колосьев.

7. При использовании белковых маркеров на ранних этапах гибридизации выявлены ценные гибридные комбинации по запасным белкам пшеницы. Константные формы с ценными аллелями по этим признакам переданы в селекционные центры. Выявлены гибридные комбинации с большим содержанием МДГ-ГОАТ (малатдегидрогеназа-глутамат-оксалоацетат аминотрансфераза) по сравнению с родительскими формами. Малатдегидрогеназный комплекс позволяет отобрать ценные линии на устойчивость к засухе в ранних поколениях.

8. RAPD анализ подтвердил наименьшие геномные различия (0.02) между исходным сортом Целинная-Юбилейная и дигаплоидной линии I0580R. При сравнении спектров дигаплоидной линии I0580R и полученной из нее гаметоклонов (ЛГВЗ-692-3-5, ЛГВ2-92-2, ЛГВ1-92-2) выявлено 13 полиморфных фрагментов.

9. Многолетние полевые испытания подтвердили наличие морфофизиологических показателей устойчивости растений пшеницы к засухе и полеганию. Показана перспективность комплексного применения методов биотехнологии и традиционной селекции для отбора линии, обладающих хозяйственно-ценными признаками. Полученные перспективные линии яровой мягкой пшеницы готовятся к передаче на Государственное сортоиспытание.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Успешное решение задачи по созданию ценного исходного материала, устойчивых к биотическим и абиотическим стрессам, требует использования мультидисциплинарного подхода. Для этого мы попытались соединить несколько методов in vitro с методами классической селекции и создать технологическую цепь, включающую традиционные и биотехнологические методы селекции.

Теоретические разработки по выяснению компетенции микроспор позволили установить строгую зависимость эффективности пыльцевого эмбриогенеза от баланса эндогенных и экзогенных фитогормонов. Предполагается, что низкий выход гаплоидных структур у изучаемых генотипов связан с низким содержанием в них индолилуксусной кислоты, играющей важную роль в индукции андрогенеза in vitro.

Показано, что гормоны ауксинового типа действия — ИУК, 2,4-D при обработке растений-доноров с учетом содержания эндогенного ИУК способствуют повышению эффективности андрогенеза in vitro. Генотипы с низким содержанием эндогенного гормона необходимо обрабатывать растворами высоких концентраций ИУК.

Установлено, что обработка ИУК повышает появление аномальных микроспор. Например, у сорта Акмола 2 в контроле пыльцевой эмбриогенез составляет 1,4 %, где аномальные микроспоры не образуются. При повышении концентрации ИУК частота выхода эмбриоидов 5,2 %, аномальные микроспоры составляют 16,6 %. На сорте Ишимская 98 высокий процент аномалий наблюдали при обработке 0,5% ИУК в течение 10 суток, где также отмечен высокий выход эмбриоидов.

В результате экспериментальных исследований показано, что с помощью селекции in vitro на уровне репродуктивных клеток, используя селективный фактор, моделирующий водный дефицит можно отобрать засухоустойчивые линии. При отборе клеток на осмотолерантность через три цикла селекции in vitro создана линия I0580R2, обладающая способностью к дополнительному побегообразованию на 1% солевой среде.

Разработанная схема селекции in vitro на уровне репродуктивных клеток (рис. 72), показала свою эффективность при отборе засухоустойчивых растений, где в качестве селективного фактора использовали абсцизовую кислоту, участвующую в адаптивных реакциях на потерю воды клетками.

Линия AR245, отобранная согласно разработанной схеме, показала устойчивость к засухе при полевой оценке. Линия по сравнению со стандартом, отличалась анатомо-морфологическими признаками и архитектоникой. Обладала большей листовой поверхностью, причем листья относятся к эректоидному типу, что очень важно для эффективного поглощения ФАР. Верхний лист по отношению к стеблю расположен под значительно меньшим углом (45-55 С), что способствует меньшему испарению влаги с листовой поверхности в условиях засухи.

Таким образом, многолетние полевые испытания подтвердили морфофизиологические показатели устойчивости растений пшеницы к засухе и полеганию.

Для ускорения селекционного процесса проводилась гибридизация линий Ю580 R и AR45 с формами, являющимися донорами признака засухоустойчивости. Гибриды отбирали по активности ферментного комплекса МДГ-ГОАТ по сравнению с обеими родительскими формами.

Линии AR45, ЛГВЗ-692-3-5 достоверно превысили стандарт по урожайности на 2,9-3,6 ц/га. Линии, превысившие стандарт, переданы на размножение и испытание в ТОО «Карабалыкская СХОС».

Линия AR45 разложена на два биотипа по высоте растений и сроки созревания и высевается отдельно каждый в сравнении как со стандартом, так с исходной формой AR45. Проводится селекционный процесс, в котором осуществляется отбор F3 и F4 поколений гибридов, полученных с участием линий-регенерантов Ю580 R и AR45. В дальнейшем перспективные линии будут переданы на ГСИ.

Схема отбора селекции на уровне гамет применялась и для индукции пыльцевого эмбриогенеза при биотическом стрессе.

При использовании 3-х форм селективного фактора: культуральный фильтрат (КФ), фитотоксины и новая форма фильтрата фитопатогенного гриба Septoria nodorum Berk. Выявлено, что водная форма грибного фильтрата является более токсичной, чем КФ S. nodorum Berk. Отбор на токсинах не является эффективным. При использовании комплекса фитотоксинов в качестве селективного фактора установлено, что токсины гриба для отдельно растущих клеток являются высокотоксичными и растения-регенеранты на данной форме селективного агента не были получены. Растения-регенеранты, устойчивые к экзометаболитам гриба Septoria nodorum Berk., получены при поверхностном выращивании клеточных колоний, и в культуре пыльников. Получено семенное потомство Ro из растений-регенерантов через три цикла селекции на ВФГФ Septoria nodorum Berk.

Выявлено, что фитотоксины в КФ и в экстрактах, выделенных из мицелия гриба Septoria nodorum Berk, идентичны.

Используя RAPD-метод, определяли наличие изменений в геноме потомства растений-регенерантов пшеницы, полученных с помощью пыльцевого эмбриогенеза. В результате проведенного RAPD-маркирования, каждый из полученных спектров анализируемых гаметоклонов характеризуется уникальным набором амплифицированных фрагментов. Полиморфизм между анализируемыми гаметоклонами пшеницы составил 10,2%.

Наименьшие геномные различия (0.02) наблюдали между сортом Целинная-Юбилейная и полученной из нее дигаплоидной линией I0580R.

На основе проведенных исследований разработана технологическая схема (рис.72), позволяющая ускорить селекционный процесс яровой мягкой пшеницы. Умелое сочетание традиционных и биотехнологических методов может быть применено и к другим сельскохозяйственным культурам для улучшения их генетического базиса. Селекция на уровне гамет может достойно стать одним из ведущих направлений в поиске путей отбора растений, устойчивых к стрессовым воздействиям, не исключая при этом, методы классической селекции.

Предлагаемая нами схема состоит из следующих этапов:

I этап. Отбор перспективных форм методами традиционной селекции и их гомозиготизация в ранних поколениях с помощью культуры пыльников

II этап. Селекция in vitro на уровне репродуктивных и соматических клеток с отбором константных форм и их гаметоклональных вариантов по признаку стрессоустойчивости.

III этап. Гибридизация с сортами и линиями являющимися «генетическими носителями» по признаку засухоустойчивости и использование в качестве одной из родительских форм удвоенных гаплоидов, отобранных в условиях in vitro на водный дефицит.

IV этап. Использование белковых маркеров для отбора ценных гибридов в ранних поколениях на стрессоустойчивость. Оценка степени гетерозиса по активности МДГ-ГОАТ у гибридов по сравнению с родительскими формами. ч

V этап. RAPD-метод анализа ДНК для оценки уровня полиморфизма, межлинейных отличий, генетических расстояний исходных форм и форм, отобранных в культуре in vitro.

Технология создания перспективных форм яровой мягкой пшеницы на основе клеточных технологий, включая традиционные методы селекции

Традиционная селекция Биотехнология

Гибридизация с формами, генетическими носителями» по признаку засухоустойчивости и <г использование в качестве одной из родительских форм особей, отобранных в условиях селекции in vitro на водный дефицит

Селекционный процесс

Гомозиготизация перспективных форм в ранних поколениях (получение DH-линий)

Селекция in vitro на уровне репродуктивных и соматических клеток

Отбор константных форм и их гаметоклональных вариантов по признаку устойчивости к водному дефициту

Отбор гибридов в ранних поколениях по белковым маркерам на стрессоустойчивость (активность ферментного комплекса МДГ-ГОАТ)

1/

КАРБ-анализ ДНК для оценки уровня полиморфизма и межлинейных отличий генетического расстояния

Рисунок 72 — Этапы технологии получения растений, устойчивых к абиотическому и биотическому стрессу

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Беккужина, Сара Сабденовна, 2011 год

1. Аврова, А.О. Физиолого-биохимические особенности взаимодействия томатов с Alternaría solani и селекция in vitro на устойчивость к альтернариозу: автореф. дис. .канд. биол. наук / А.О. Аврова. ВИЗР. -1994. - 18 с.

2. Алипбекова, Ч. А. Биологическое особенности септориоза пшеницы и использование их в иммуноселекции: автореф. дис. .канд. сельскохоз. наук / Ч.А. Алипбекова. Алма-ата. - 1993. - 23 с.

3. Ахметов, К.А. АРМ «Биометрия» / К.А. Ахметов, Р.А. Асаев. Алматы. -2000.- 156 с.

4. Бавол, И.А. Использование методов клеточной селекции для повышения устойчивости пшеницы к корневой гнили / И.А Бавол // IX Конференция «Биология клеток растений in vitro и биотехнология». Москва. - 2008. -С. 26.

5. Балашова, Н.Н. К вопросу о роли микрогаметофита в адаптации растений к эконише возделывания / Н.Н Балашова, З.Т Валеева, А.Н. Игнатова // С.-х. биол. 1994. - С. 59-64.

6. Бальвинская, М.С. Возможности использования многомаркерных дигаплоидных линий для картирования генома ячменя / М.С. Бальвинская, Ю.М. Сиволап // Цитология и генетика. 2000. - Т. 34. - №6. - С. 42-49.

7. Батыгина, Т.Б. Методические рекомендации по исследованию морфогенетического потенциала пыльника яровой мягкой пшеницы / Т.Б. Батыгина, Н.Н. Круглова // ИБ УНЦ РАН. Уфа. - 2001. - 39 с.

8. Батыгина, Т.Б. Пыльник как модель изучения морфогенетических потенций и путей морфогенеза / Т.Б. Батыгина // Эмбриология цветковых растений: Терминология и концепция, Т.1. Мир и Семья. - Санкт-Петербург. - 1994. - С. 120-121.

9. Батыгина, Т.Б. Эмбриогенез злаков / Т.Б. Батыгина // Эмбриология цветковых растений: Терминология и концепция, Т.2. Мир и Семья. — Санкт-Петербург. - 1997. - С. 528-538.

10. Батыгина, Т.Б. Эмбриоидогения новый тип вегетативного размножения / Т.Б. Батыгина // Эмбриология цветковых растений: Терминология и концепция, Т.З. - Мир и Семья. - Санкт-Петербург. - 2000. - С. 334-349.

11. Беккужина, С.С. Селекционная оценка линий, полученных в культуре пыльников пшеницы {Triticum aestivum L) / С.С. Беккужина, Ю.И. Зеленский // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана, №3. ТОО издательство «Бастау». - 2009. - С. 11-14.

12. Беккужина, С.С. Использование DH-метода для проведения гаметной селекции / С.С. Беккужина // 7-ая Пущинская школа-конференция молодых ученых 14-18 апреля. Сборник тезисов. Москва. - 2003. - С. 90.

13. Беккужина, С.С. Селекция пшеницы на устойчивость к грибному патогену Septoria Nodorum Berk в культуре изолированных пыльников / С.С. Беккужина, Е.А. Калашникова // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. № 4. - 2009. - С. 6-7.

14. Беккужина, С.С. Клональное размножение для селекции пшеницы / С.С. Беккужина // Вестник АСХИ. № 3. - 1996. - С. 105-111.

15. Беккужина, С.С. Влияние стадий развития микроспор на пыльцевой эмбриогенез в культуре пыльников пшеницы (Triticum aestivum L.) / С.С. Беккужина, Л.Ф. Созинова // Научный журнал МОН PK: Поиск. №2.2009.-С. 16-19.

16. Белякова, Г.А. Токсичность КФ грибов, вызывающих пятнистость на хлопчатнике / Г.А. Белякова, Б.С. Ермолинский, С.И. Свиридов // Вестник Московского ун-та, сер. № 16. - 1991. - С. 56-61.

17. Берестецкий, O.A. Определение фитотоксической активности культур микроскопических грибов / O.A. Берестецкий // В кн. «Методы экспериментальногой микологии». — Киев. 1973. - С. 165-175.

18. Богданова, Е.Д. Адаптационные морфологические признаки для повышения засухоустойчивости пшеницы Triticum aestivum L. / Е.Д. Богданова, Ф.А. Полимбетова // 1-я центрально-азиатская конференция по пшенице. 2003. - С. 175-181.

19. Бочарова, E.B. Фитотоксины гриба Septoria nodorum В. И их роль в патогенезе септориоза: дисс. канд. биол. наук. / Е.В. Бочарова // Гвардейский, 1991. 127 с.

20. Булатова, K.M. Глютениновые биотипы пшеницы Богарная 56. / K.M. Булатова // Вестник с.-х. науки Казахстана. №11. - 1985. - С. 37-38.

21. Бунин, М.С. Разработка методики повышения холодостойкости репы • японской с использованием мужского гаметофита / М.С. Бунин, В.А.

22. Степанов // В сборнике: Гетерозис сельскохозяйственных растений. Мат. докл. сообщ. Международного симп. 1997. - С. 96-97.

23. Бутенко, Р.Г. Биотехнология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р.Г. Бутенко // М.: ФБК Пресс. 1999. - 159 с.

24. Бутенко, Р.Г. Индукция морфогенеза в культуре тканей растений / Р.Г. Бутенко // Гормональная регуляция онтогенеза растений. Москва. - 1984. - С. 42-54.

25. Бутенко, Р.Г. Клеточные технологии в селекционном процессе / Р.Г. Бутенко // Мат. Всесоюзной конф. «Состояние и развитие с/х биотехнологии». -Москва. 1986. - С. 29-38.

26. Бутенко, Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза / Р.Г. Бутенко // Москва. 1964. - С. 29-38.

27. Бутенко, Р.Г. Культура клеток и тканей растений в практической генетике и селекции / Р.Г. Бутенко // Докл. ВАСХНИЛ. Т . 7. - 1982. - С. 12-26.

28. Бутенко, Р.Г. Перспективы использования культивируемых клеток растений в биотехнологии / Р.Г. Бутенко // В кн. Биотехнология. Москва: Наука. - 1984. - С. 239-247.

29. Бутенко, Р.Г. Экспериментальный морфогенез и дифференциация в культуре клеток растений / Р.Г. Бутенко // М.: Наука. 1975. - 51 с.

30. Бхат Дж., Х.Н. Мурти регенерация гаплоидных растений в культуре из неопыленных семяпочек масличного нута / Х.Н. Бхат Дж. // Физиология растений. Т. 55. - №2. - 2008. - С. 262-267.

31. Васецкая, М.Н. Возбудители септориоза пшеницы / М.Н. Васецкая, Г.И. Борзионова // Вестн. с/х наук Казахстана, № 3. 1987. - С. 45-47.

32. Васильчук, Н.С. Роль сорта в повышении урожайности и качества зерна яровой твердой пшеницы / Н.С. Васильчук, С.Н. Гапонов // Матералы II региональной научно-практической конференции. Саратов. - 2010. - С. 18-30

33. Веселов, Д.С. Реакция растений на засоление и формирование солеустойчивости / Д.С. Веселов, И.В. Маркова, Г.Р. Кудоярова // Успехи современной биологии. Т. 5. - 2007. - С. 482-493.

34. Волощук, А.Д. Морфолого-биохимические характеристики каллусов пшеницы при культивировании с патогенными грибами / А.Д. Волощук // Докл. Российской академии сельскохоз. наук. — Москва. 2005. - 38 с.

35. Галиева, Э.Р. Феномен андроклинии и албинизм у злаков / Э.Р Галиева, Ф.М. Шакирова, H.H. Круглова // Успехи современной биологии -Т. 122. №4. 2002.-С. 342-352.

36. Гирко, B.C. Оценка устойчивости к действию КФ грибного патогена в культуре незрелых зародышей / B.C. Гирко, К.Г. Волощук // С.-х. биология, сер. Биология растений, №9. 1993. - С. 62-70.

37. Горбунова, В.Ю. Андрогенез in vitro у яровой мягкой пшеницы: диссертация. доктора биол. наук / В.Ю. Горбунова // Москва 2000. -378 с.

38. Горбунова, В.Ю. Индукция андрогенеза in vitro у яровой мягкой пшеницы: баланс эндогенных и экзогенных фитогормонов / В.Ю. Горбунова, H.H. Круглова, С.Н. Абрамов // Изв. РАН Сер. Биол., № 1. -2001.-С. 31-36.

39. Грищенко, Е.И. Особенности эмбриогенного развития in vitro пыльцевых зерен Brassica napus / Е.И. Грищенко, Я.Б. Блюм. // Цитология и генетика, №5.-2001.-С. 65-73.

40. Турецкая, B.C. Роль биологически активных соединений в индукции гаплоидов в культуре пыльников / B.C. Турецкая // Тез. докл. междунар. конф. «Молекулярная генетика и биотехнология». Минск. - 1998. - С. 170-171.

41. Даниленко, Н.Г. Миры геномов органелл / Н.Г. Даниленко, О.Г. Давыденко // Мн.: Тэхналопя. 2003. - 494 с.

42. Джардемалиев, Ж.К. Исследование роста клеточных популяций различных видов пшеницы и эгилопса в суспензионной культуре / Ж.К. Джардемалиев, И.Д. Никифорова, Р.Г. Бутенко, М.К. Карабаев, М.А. Айтхожип // Вестник АН КазССР, №8. 1988. - С. 66-70.

43. Добровольская, JT.B. Андрогенез у пшенично-ржаных замещенных линий (Саратовская 29*Онохойская) и тритикале / JI.B. Добровольская // Современные проблемы генетики, биотехнологии и селекции растений: Тезисы междунар. конф. — Харьков. 2001. - 18 с.

44. Дорофеева, Ф.С. Методические указания по изучению мировой коллекции пшеницы / Ф.С. Дорофеевой // 3-е издание, переработанное. -Ленинград. 1977. - 28 с.

45. Дьячук, Т.И. Методические рекомендации по получению гаплоидных растений мягкой пшеницы в культуре пыльников / Т.И. Дьячук, П.А. Дьячук // М.: ВАСХНИИЛ -1989. С. 3-30.

46. Дьячук, Т.И. Технологические и селекционные аспекты гаплоидии (на примере пшеницы и ячменя): автореф. дис. доктора биол. наук / Т.И. Дьячук. Саратов, 2003. - 50с.

47. Дьячук, Т.И. Цитологическое подтверждение спорофитного развития микроспор в культуре пыльников тритикале без холодового воздействия / Т.И. Дьячук, О.В. Хомякова, Т.О. Дугина // Сельскохозяйственная биология. 2010. - № 5. - С.27-30

48. Драгавцев, В.А. К проблеме генетичекого анализа полигенных количественных признаков растений / В.А. Драгавцев // Научное издание: ООО Копи Р. С-Пегербург, 2003. - 35 с.

49. Евстратова, Л.П. О получении чистой культуры гриба Rhizoctonia solani / Л.П. Евстратова, Л.И. Груздева, Е.М. Матвеева // Вести Рос. акад. с/х наук, 1995, №4. -С. 47-49.

50. Ермаков И.П., Матвеева Н.П. / Диморфизм пыльцы и андрогенез в культуре пыльников и микроспор //Вестн.Моск.ун-та.Сер.16, Биология. 1986, №3.-С. 28-40.

51. Жамбакин, К.Ж. Гаплоидная биотехнология растений / К.Ж. Жамбакин // Алматы: Издательский центр «Интерлигал». — 2004. 184 с.

52. Жамбакин, К.Ж. Использование гаплоидной биотехнологии для селекции яровой мягкой пшеницы в Северном Казахстане / К.Ж. Жамбакин, Н.В. Терлецкая // 1-я Центрально- Азиатская конференция по пшенице. -Алматы, 2003. 114 с.

53. Жученко, A.A. Современные проблемы биотехнологии и биобезопасность / A.A. Жученко // Сельскохозяйственная биология, 2003, №1.

54. Зайцева, О.И. Показатели андрогенеза в культуре пыльников сортов и гибридов ярового триткале / Зайцева, О.И. // Четвертый Московский международный конгресс. Москва, 2007. - 240 с.

55. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения и методы их использования / М.Н. Запрометов // Биохимические методы в физиологии растений М.: Наука, 1971. С. 185-197.

56. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения / М.Н. Запрометов // М.:Наука, 1993.-272 с.

57. Иванников, A.B. Биометрия, учебное пособие / A.B. Иванников // Астана, 2006.- 115 с.

58. Инге-Вечтомов, С.Г. Метаболизм растений и защита стеринов // Соросовский образовательный журнал, 1997. №11. С. 16-21.

59. Исабаев, С.Я. Количество зародышевых корней как показатель засухоустойчивости яровой мягкой пшеницы / С.Я. Исабаев, Ж.Т. Калыбекова // 1-я Центрально-Азиатская конференция по пшенице. Алматы, 2003. 120 с.

60. Калашникова, Е.А. Клеточная селекция пшеницы на устойчивость к грибным болезням: дисс. доктора биол.наук / Е.А. Калашникова // Москва, 2003. 270 с.

61. Калашникова, Е.А. Получение in vitro клеточных и тканевых культур подсолнечника устойчивых к Sclerotinia Sclerotiorum I / Е.А. Калашникова // IX Конференция «Биология клеток растений in vitro и биотехнология». Москва, 2008,-С. 158.

62. Карабаев, М.К. Культивируемые клетки пшеницы и кукурузы: физиологические и биотехнологичекие аспекты: автореф. дис. докт. биол. наук / М.К. Карабаев // Москва, 1994. 49 с.

63. Кихара, X. Цитоплазматическая мужская стерильность и селекция пшеницы / X. Кихара // В кн.: Гетерозис и практика.- JI. Колос,1968.- С. 87-102.

64. Кляченко, C.B. Получение гаплоидных растений Brassika napus в условиях in vitro / C.B. Кляченко // Четвертый Московский международный конгресс. Москва, 2007. 280 с.

65. Кобыльский, Г.И. Патогенность дейторомицетов (на примере возбудителя септориоза пшеницы-гриба Septoria nodorum (Berk) / Г.И. Кобыльский //Автореф. докт. биол. наук. Москва, 2005.- 45 с

66. Кобыльский, Г.И. Методика определения фитотоксинов гриба Septoria nodorum Berk, с помощью тонкослойной хроматографии / Г.И. Кобыльский, Е.В. Бочарова //Гвардейский, 1990. 20 с.

67. Койшыбаев, М. Интернет сайт-интервью / М. Койшыбаев // www net.kz, 2008.

68. Койшыбаев, M. Защита зерновых культур от болезней с воздушно-капельной инфекцией / М. Койшыбаев // Практическое руководство, Алматы, 2006. 30 с.

69. Койшыбаев, М. Болезни зерновых культур / М. Койшыбаев // Алматы. Бастау, 2002. 368 с.

70. Койшыбаев, М. Динамика болезни зерновых культур листостебельной инфекции в разных ландшафтных зонах / М. Койшыбаев // Стратегия земледелия растениеводства на рубеже 21 в, Алматы, 1999. С. 108-109.

71. Койшыбаев, М. Особенности развития и вредоносность септориоза в Казахстане / М. Койшыбаев, Э.Т. Исмаилова // Вестник с-х- науки Казахстана, 1991. С. 31-38.

72. Ковалева, JI.B. Гаметофитно-спорфитное взаймодействие в системе пыльца-пестик: диссер. на докт. биол. наук / JI.B. Ковалева // 1994.

73. Колючий, В.Т. Селекционная ценность аллелей глиадинкодирующих локусов озимой мягкой пшеницы в условиях лесостепи Украины: автореф. дис. канд. биол.наук. / В.Т. Колючий // Киев. 1989. 16 с.

74. Колючий, В.Т. Влияние естественного отбора на частоту аллелей глиадинкодирующих локусов и их ассоциаций в искусственно созданной гибридной популяции озимой пшеницы / В.Т. Колючий, A.A. Созинов // Цитология и генетика. 2000, Т.34, №2. С. 32-38.

75. Конарев, A.B. Белки семян как маркеры в решении проблем генетических ресурсов растений, селекции и семеноводства / A.B. Конарев, В.Г. Конарев, Н.К. Губарева, Т.И. Пенева // Цитология и генетика. 2000, Т.34, №2.- С. 91-103.

76. Копусь, М.М. О естественной геногеографии глиадиновых аллелей у озимой мягкой пшеницы / М.М. Копусь // Селекция и семеноводство. 1994. №4.-С. 9-14.

77. Кочиева, Е.З. Идентификация меж- и внутрисортового полиморфизма у томатов / Е.З. Кочиева, Т.П. Супрунова, С.К. Семенова // Генетика. 1999. Т.35. № 10.-С. 1386-1389.

78. Кошкин, Е.И. Физиология устойчивости сельскохозяйственных культур / Е.И. Кошкин // М.:2010. 638с.

79. Кравченко, А.Н. Методы гаметной и зиготной селекции томатов / А.Н. Кравченко, В.А. Лях, Л.Г. Тодераш // Кишинев,1988.

80. Круглова, H.H. Эмбриологические основы андроклинии пшеницы / H.H. Круглова, Т.Б. Батыгина// М.: Наука, 2005. 99 с.

81. Круглова, H.H. Влияние концентрации 2,4-Д на начальные этапы эмбриоидогенеза в культуре пыльников яровой пшеницы / H.H. Круглова, В.Ю. Горбунова, H.H. Потапова //Тез. докл. III съезда ВОФР. Ч. 2. Санкт-Петербург, 1993. С. 139.

82. Круглова, H.H. Морфогенез в культуре пыльников пшеницы: эмбриологический подход / H.H. Круглова // Уфа: Гилем, 2001. 203 с.

83. Кулаева, О.Н. Как регулирется жизнь растений / О.Н. Кулаева // Соросовский образовательный журнал, 1995, № 1. С. 20-27.

84. Кулаева, О.Н. Карликовые мутанты и их роль в «зеленой революции» /

85. Н. Кулаева// Соросовский образовательный журнал, том 6, № 8, 2000.

86. Кулаева, О.Н. Новейшие достижения и перспективы изучения механизма действия фитогормонов в сигнальных системах целого растения / О.Н. Кулаева//, 2009. С. 851.

87. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин // Учебное пособие для биологических специальностей вузов — 3-издание переработ, и дополнен. М. Высш. Школа, 1980 293с

88. Ларченко, Е.А., Моргун В.В. / Сравнительный анализ наследственной изменчивости растений при мутагенной обработке генеративных клеток и семян кукурузы / Е.А Ларченко, В.В. Моргун //Цитология и генетика, 2000, Т. 34. №4.-С.16-20.

89. Левитес, Е.В., Свирщевская A.M. и др. / Удвоенные гаплоиды в изучении эпигенетической изменчивости сахарной свеклы / Е.В.Левитес, А.М Свирщевская. и др / Вестник ВОГиС, 2005. Т. 9, № 5. С. 512-517.

90. Джое, Л. Клеточная селекция пшеницы на устойчивость к септориозу / Л. Джое, Е.А. Калашникова // Сельскохозяйственная биотехнология, 2000, т.1, Избранные работы под редакцией B.C. Шевелухи. 262 с.

91. Лихачев, А.Н. / Использование жидких питательных сред для получения моноспоровых культур грибов / А.Н Лихачев // Микология и фитопатология, 1994. Т. 28, вып. 5. С. 14-16.

92. Лутова, Л.А, Левашина Е.А и др. / Мутанты высших растений по биосинтезу стеринов/ Л.А. Лутова, Е.А Левашина и др. Генетика, 1999. Т. 28. №2. С.129-126.

93. Мараит, А. / Мараит Значение разнообразия патогенов в борьбе с желтой пятнистостью и ожогом листьев пшеницы в центральной Азии / А Мараит, Д. Меркадо Вергнес, М.Е. Ренард и др. // Агромеридиан 2006. 2.(3).-С 105-114.

94. Масленников, С.Е. / Получение устойчивых к корневым гнилям растений люцерны с использованием методов культуры каллусов и клеток / С.Е Масленников //Соврем. Достижения биотехнологии. Ставрополь, 1995. С. 24-25.

95. Матвеева, Н.П. /Физиология развития мужского гаметофита покрытосеменных растений / Н.П Матвеева, И. П Ермаков // Общая биология, 1999. Т. 60, № 3. С. 277-293.

96. Матвеева, Н.П. / Эмбриология растений: использование в генетике, селекции и биотехнологии растений / Н.П Матвеева // М.: Агропромиздат, 1990.-С. 335-370.

97. Методы биохимического исследования растений: Сборник под редакцией Ермакова А.И. Колос. 1972.

98. Методические указания. Отбор образцов на засухоустойчивость и продуктивность по корням / Сост.: Балык Г.С. JL, 1979. - 50 с.

99. Методические указания по изучению мировой коллекции пшениц / Сост. Градчанинова О.Д., Филатенко A.A., Руденко М.И.: Ред. Дорофеев В.Ф.-Л., 1985.-26 с.

100. Нгуен, Х.М. / Селекция in vitro на устойчивость к Fusarium oxysporum f. Sp. Lycopersici у томатов / Х.М. Нгуен //Автореф. . канд.биол.наук, Минск, 1991.-21 с.

101. Ницше В. / Гаплоиды в селекции растений / Ницше В. Венце ль Т. II пер.с англ. Попова B.B. М.: Колос,1989. 127с

102. Носова, О.Н. / Использование раствора 2,4—Д для повышения эффективности получения гаплоидов в культуре пыльников тритикале / О.Н. Носова //Тез. докл. II Росс. симп. «Новые методы биотехнологии растений». Пущино, 1993. -160 с.

103. Олейник, A.A. / Некоторые особенности корневой системы сортов ярового ячменя / А.А Олейник // Селекция и семеноводство, садоводство и защита растений. — Целиноград, 1971.

104. Паушева, З.П. Практикум по цитологии растений/ З.П Паушева- М: Колос, 1970.-255 с.

105. Пирузян, Э. С. Основы генетической инженерии растений / Э. С. Пирузян, Москва, «Наука», 1988. 300 с.

106. Полевой, В.В. Фитогормоны / В.В Полевой // JL: Изд-во Ленингр. Унта. 1982. 248 с.

107. Поляков, A.B./ Размножение льна-долгунца/А.В Поляков // Москва,2008.

108. Поляков, A.B. /Биотехнология в селекции льна / A.B. Поляков //М: Форма, 2000. 179 с

109. Поляков, A.B. / Биотехнология в селекции льна / A.B. Поляков

110. Издание второе.- М: 2010. 202 с.

111. Поперля, Ф.А. / Блок компонетов глиадина GLD 1ВЗ как маркер гена, как маркер гена, обуславливающего устойчивость растений пшеницы к стеблевой ржавчине / Ф.А Поперля, Л.Г.Бабаянц //Докл. ВАСХНИЛ. 1980. №4. С. 4-7.

112. Поперля, Ф.А. / Электрофорез глиадина как метод идентификации пшениц, у которых 1в-хромосома полностью или частично замещена на 1к-хромосому ржи / Ф.А. Поперля, A.A. Созинов //Докл. ВАСХНИЛ, 1977. №2. С. 2-4.

113. Программа СИМИТ по улучшению пшеницы в Казахстане. Вместе в XXI веке. Астана, 2008. 55 с.

114. Пухальский, В.А. / Проблемы генетической теории селекции растений / В.А. Пухальский // Вестник ВОГиС, 2005. Т. 9, №3. С. 306-316.

115. Пыльнев, В.В / Коновалов Ю.Б.Дупацария Т.И. Частная селекция полевых культур/ В.В Пыльнев, Ю.Б. Коновалов, Т.И. Хупацария // М: Колос, 2005. 552 с.

116. Пшеничникова, Т.А. / На IX Международном симпозиуме по генетике пшеницы / Т.А Пшеничникова // Вестник ВОГИС, 1998. №5. С. 4-8.

117. Пшеничникова, Т.А / Институт цитологии и генетики СО РАН и Международные раучные программы по генетике пшеницы / Т.А Пшеничникова // Вестник ВОГИС, 2006. Т. 10. № 1. С. 203-206.

118. Пыжикова, Г.В., / Для снижения вредоносности септориоза / Г.В Пыжикова, Г.Ю. Тушинский // Защита растений, 1985. 39. С. 15-16.

119. Раджарам, С. / Потенциал урожайности пшеницы / С. Раджарам, X. Браун // Агромеридиан 2(3), 2006. С. 5-12.

120. Рахимбаев, И. / Биотехнология растений в мире и в Казахстане / И. Рахимбаев // Биотехнология теория и практика, 2006. С. 5-15.

121. Рахимбаев, И. / Культура репродуктивных клеток и гаплоидная биотехнология генетического улучшения растений /И. Рахимбаев// Биотехнология. Теория и Практика. №3. 1997. С. 1- 8.

122. Родева, В., Станчева И. / Биологичен эфект на културални филтрати от различии изопати на Alternaría solani върху растение доматени растение ш vitro/ В.Родева, И. Станчева //Биотехнология- 1990.Т. 4, № 3/4. С. 27-30.

123. Сайфуллин, Р.Г. Селекция яровой мягкой пшеницы в Саратове // Матералы II региональной научно-практической конференции / Р.Г. Сайфуллин, К.Ф. Гуриянова, В.А. Давыдова и др. // Саратов, 2010. С. 917.

124. Сельскохозяйственная биотехнология. Избранные работы. Т2., под редакцией Шевелухи В.С, «Евразия +», 2001, 404с.

125. Сельскохозяйственная биотехнология. Избранные работы. Т2. под редакцией Шевелухи В.С, «Евразия +», 2000. Т.1. -С. 3-14.

126. Семенов, О.Г. / Аллоцитоплазматическая пшеница. Биологические основы селекции / О.Г Семенов // Монография Ид-во РУДН: 2000. 208 с.

127. Скоробогатова И.В / Изменение содержания фитогормонов в проростках ячменя в онтогенезе и при внесении регуляторов, стимулирующих рост / И.В Скоробогатова, Н.П Карсункина, П.Б Курапов, Соркина Г.Л, Кислин Е.Н // «Агрохимия» 1999, N8. С. 49-53.

128. Смиряев, A.B. / Генетика популяций и количественных признаков / Смиряёв, A.B. A.B. Кильчевский. Учебник. Издательство «КолосС», 2007. 269 с.

129. Созинов, A.A. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / А.А Созинов // М: Наука, 1985. 272 с.

130. Созинов, A.A., Поперля Ф.А. / Полиморфизм глиадина и селекция /

131. A.А Созинов, Ф.А. Поперля // Вести с.-х. науки. 1979. 310. С. 21-34.

132. Созинов, И.А. /Полиморфизм аллельных состояний глиадинкодирующих локусов с урожаем и массой 1000 зёрен озимой пшеницы / И.А. Созинов // Экология генетики растений и животных: Тез. Докладов всесоюзн. Конференции Кишинев, 1981. ч.1. - С. 70-71.

133. Трошина, Л. Г. / Индкуция салициловой кислотой устойчивости пшеницы к Septoria nodorum Berk / Л. Г Трошина, А.Ш. Яруллина // Известия РАН, Серия биологическая, 2007. № 5. С. 545-550.

134. Тучин, C.B. / Моделирование стресса обезвоживания в культуре изолированных тканей пшеницы и его биологические последствия / C.B. Тучин // Дисс. доктора биол.наук. 2000.- 277 с

135. Тырнов, B.C. Гаплоидия у растений: Научное и прикладное значение /

136. B.C. Тырнов // М.: Наука, 1998. 53 с.

137. Тырнов, B.C. Андрогенез // Гаплоидия и селекция. М.: Наука, 1976.1. C. 87-89.

138. Угарова, C.B. / Селекция моркови с применением биотехнологических методов / С.В Угарова, A.A. Тесля // Тез. докл. «Пробл. Совета по растениеводству, селекции, семеноводству с/х культур Сибири», Новосибирск, 1994. С. 23-24.

139. Уразалиев, Р. А, Абсаттарова A.C. / Селекция за рубежом / Р. А Уразалиев, A.C. Абсаттарова //Вестник ВОГиС, 2005, Т. 9, №3. -С 415422.

140. Уразалиев, P.A. / Состав запасных белков озимой пшеницы регионального питомника ПАЗ / Р.А Уразалиев, К. M Булатова., М.А., Есимбекова К., Джиенбаев // Вестник региональной сети по внедрению сортов пшеницы и семеноводству № 2. Алматы, 2002. С. 70-74.

141. Уразалиев, P.A. / Состав высокомолекулярных глютенинов озимых мягких пшениц / P.A. Уразалиев, К. M Булатова., М.А. Есимбекова, С.Е Карбозов // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана № 6, 1997. -С. 54-58.

142. Холодова, В.П. / Характер адаптивных реакции ядерно-цитоплазматических гибридов яровой пшеницы на засуху / В.П. Холодова, Т.С.Бормотова, Вл.В.Кузнецов и др. www/neonet.

143. Хомякова, О. В./ Создание исходного материала для селекции тритикале на основе клеточных биотехнологий / О. В. Хомякова // Автореф. канд. биол.наук. Саратов, 2009. 27с.

144. Ху Даофень / Система пыльцегаплоидной селекции озимой пшеницы / Ху ДаофеньМ., 1992.

145. Шаяхметов, И.Ф. / Влияние фитотоксичных метаболитов Bipolaris sorokiniana на рост каллусной ткани и регенерацию растений пшеницы / И.Ф Шаяхметов, P.P. Асфандиярова // Физиология растений, 1991. № 2. -С. 399-405.

146. Шаяхметов, И.Ф. / Культура клеток и тканей пшеницы in vitro и соматический эмбриогенез / И.Ф. Шаяхметов // Автореф. . доктора биол. наук, 2001. 45 с.

147. Шевелуха, B.C. / Сельскохозяйственная биотехнология / В.С Шевелуха, Е.А Калашникова, Е.С. Воронин // Учебник, 2-ое изд., перераб. и доп., М.:Высшая школа, 2003. -469 с.

148. Шевелуха, B.C. / Сельскохозяйственная биотехнология / Шевелуха, B.C., Калашникова Е.А., Кочиева Е.З. и др. // М.: Высш.шк., 2008. 710с.

149. Шмыкова, Н.А. / Разработка системы биотехнологических методов, направленных на ускорение селекционного процесса овощных культур / Шмыкова, Н.А. // Автореф. дис.докт.с.-х.наук. ВНИССС)К-М.:2006.-20с.

150. Эконометрика. Учебник под редакцией И.И. Елесеевой, Москва. И. Проспект, 2009. 287 с.

151. Чистякова, В.Н. / Гаплоиды неполных пшенично-пырейных амфидиплоидов, мягкой пшеницы и ячменя: получение и использование / В.Н Чистякова // Москва, 2000. МАКС Пресс. 355 с

152. Amssa, М. / Origin of diploid plants obtained by in vitro culture of anthers of young wheat (Triticum aestivum L.) / J.De Buyser, Y.Henry // Cr Acad Sci DNat290: 1980 -P. 1095-1097.

153. Araujo, L.G. / RAPD analysis of blast resistant somaclones from upland rice cultivar IAC 47 for genetic divergence / L.G. Araujo // Plant Cell, Tissue and Organ Culture 2001, 67: P. 165-172.

154. Araujo, L.G. / Genetics analysis of leaf blast resistance in somaclones of rice cultivar Araguaia / L.G Araujo, A.S.Prabhu, M.C. Fillipi // Fitopatol. Bras., 1999. 24: -P. 182-184.

155. Araujo, L.G. / Variation for riceblast resistance in early somaclonal generations derived from / L.G.Araujo, A.S.Prabhu, A.B.Freire //Fitopatol. Bras., 1998.-P. 76-81.

156. Araujo, L.G. / Variacao somaclonalna cultivar de arroz IAC-47 para resistencia a brusone / A.S.Prabhu, A.B.Freire // Fitopatol. Bras., 1997 22: P. 125-130.

157. Araujo, L.G. / Variacao somaclonal em arroz com relacao a resistencia a brusone. Universidade Federal de Goias, Goiania. / L.G.Araujo // Tesede Mestrado,1994. P. 67-47.

158. Assani, A. Production of haploids from anther culture of banana Musa balbisiana {BB}. / A.Assani, F.Bakry, F.Kerbellec, R.Haicour et al. // Plant Cell Rep., 2003. 21: P. 511-516.

159. Baenziger, P.S. / Quantifung gametoclonal variation in wheat doubled haploids / P.S Baenziger, V.D Keppene // Cerealres. Comm., 1991. 19. N 1-2. -P.33-39.

160. Barinova, J. Regulation of developmental pathways in cultured microspores of tobacco and snap dragon by medium pH / J. Barinova, C. Clement, L. Marting, F. Baillieul et al. // Planta 219: 2004. P 141-146.

161. Barnabas, B. / In vitro androgenesis of wheat: from fundamentals to practical application / B. Barnabas, B. Szakacs,P. Pfahler. et al. // Euphituca, 2001. 119. -P.211-216.

162. Bennett, M.D. / Additional mitosis in wheat pollen induced by ethrel / M.D.Bennett, W.G.Hughes //Nature 240: 1972. -P. 566-568

163. Bird, P.M / The risistance of wheat to Septoria nodorum fungal development in relation to host lignifications / P.M.Bird, J.P. Ride // Physiol Plant Pathol. 1981, V 19. P. 289-299.

164. Blaydes, D.F. / Interaction of kinetin and various inhibitors in the growth of soybean tissues / D.F. // Physiol.Plant,1966. V.19. №3. P.748-753.

165. Blomstedt, C.K. / Generative cells of Lilium longiflorum possess translatable and functional protein synthers machinery / C.K Blomstedt, R.B Knox, M.B.Singh // Plant Mol. Biol, 1996, V31, N 5. P.1083-1086.

166. Bohus, O. / Colhicine induced embryogenesis in maize / O. Bohus, B. Barnabas // Plant Cel, Tissue Organ Cult, 2004. 77. P. 283-285.

167. Bojadjiev, P. / Cytological physiological studies of some varieties and F1 hyibrids of rice, Oruza sativa using the method of anther culture / P. Bojadjiev, Ph.V.Cuong Ph. // Bionatiury, 1988, V.8, №1. P. 89-56.

168. Bousquet, K.S. Isolement et mode d action d une phytotoxine produite en culture par Septoria nodorum Berk / K.S. Bousquet, M.Skajennikoff // Phytopathol. Z. 1974. V.80. №4. P.355-360.

169. Bucbanan, B. / Biochemistry and Molecular Biology of plants / B. Bucbanan, B.Gruissem, P.L.Jones // American Society of Plant Physiologists, 2000. Rockville Maryland.

170. Bueno, A., / Haploid Origin of Cork Oak Anther Embryos Detected by Enzyme and RAPD Gene Markers / A. Bueno, M.D Agundez, A. Gomez, M.J. Carrascosa, J.A.Manzanera // International Journal of Plant Sciences, 2000. V. 161, No. 3. P.363-367.

171. Chawala, H.S. / In vitro selection for fusaric acid resistanc barley plants / H.S.Chawala, G.Wenzel // Plant Breed, 1987. N 2. P. 159-163.

172. Chen, Y. / Inheritance of rust resistance genes and molecular markers in microspore-derived populations of flax /Y.Chen, P. Kenaschuk & Dribnenki // Plant Breeding, 120 (1). 2001. P.82-84.

173. Chen, Y. Dribnenki P. / Effect of genotype and medium composition on flax linum usitatissimum L. anther cultur / Y.Chen, P. Dribnenki // Plant Cell Rep., 2002. 21:-P. 204-207.

174. Cho, M. / Callus formation and plant regenerations in isolated culture of rise / M.Cho, F. Lapata // Plant Sei. 1988. №58. P.239-244.

175. Chowdhury, B. / Microspore embryogenesis and fertile platlet regeneration in a salt susceptible x salt tolerant rice hybrid / B. Chowdhury B, A.Mandal // Plant Cell Tessue Organ Cult, 2001, 65. P. 141-147.

176. Chy, C. / Establishment of efficient medium for anher culture of rice through comparative experiment of nitrogen sourses / C. Chy, C. Weng // Sei Sinica -1985.- №5. -P. 699-698.

177. Cordian, G. / Regeneration of anther — derived plants hyosccyamus niger L. / G. Cordian // Planta, 1975,V. 127, N1. P.27-36.

178. COST action 851 website http:// www.Scri.sari.ac.uk/assoc

179. Data, S., / Embryogenesis and plant regeneration from microspores of both "Indica" and "Japonica" rice ( Orisa s. ) / S. Data, I.Potrykus // Plant Sciense. 1990.67. P.83-88.

180. Devys, M. / Ochracine (melleine), phitotoxine insolee du millieu de culture Septofia nodorum Berk / M. Devys, J.F. Bousquet, M. Skajennikoff ,M. Barbier // Phytopathol.Z. 1974. V. 81. P.92-9.

181. Dictma, G. / Poliacrilamid Gel Electrophoresis: Reaction of acrilamide at alkaline pH with Buffer Components and Proteins / G. Dictma, J. Kruppa //Analitical Biochemistry (1997), 160, P. 184-191.

182. Dong-Woog, C. / Close Barley Cbf3 Gene Identification, Expression Pattern, and Map Location / C. Dong-Woog, M. Edmundo, Rodriguez, J. Timothy // Plant Physiol, 2009, Vol. 129. P.1781-1787.

183. Duncan, E.J. / Effect of temperature shock on nuclear phenomenain microspores of Nicotiana tabacum and consequently on plantlet production E J.Duncan, E. Heberle // Protoplasma, 1976, 90: P. 173-177.

184. Dunwell, J. / Role of sucrose in microspore embryo production in Brassica hapus ss poleifera / J. Dunwell J., N. Thurling // J Exp Bot, 36, 1985, P. 14781491.

185. Evenar, D. / Somaclonal variation in celery and selection by coculturing toward resistance to Septoria apicola / D. Evenar, E. Pressman,Y. Benyephet,

186. L.Rappaport // Plant Cell tissue and organ culture, 1994, №39. P.203-210.

187. Flavell, R. / Annu Structure and function of plant genomes / R. Flavell // Plenum press., 1982. P. 1-14.

188. Frascaroli, E. / Pollen genotype selection for a simply inherited qualitative factor' determining resistance to chlorsulfuron in maize /E. Frascaroli, D Songstad // TAG, 2001, 103. P.342-346.

189. Galili, G. / Genetic control of endosperm proteins in wheat / G. Galili, M. Feldman // Theor.Appl.Genet. 1983. - V.66. - P.77-86.

190. Gemes, J. Production of Doubled Haploid Breeding Lines In Case Of Paprika, Spice Paprika, Eggplant, Cucumber, Zucchini And Onion / J.Gemes, Venczel, G., Sagi et al.//Acta Hort., 2006. 725: - P. 845-854.

191. Gentile, A. / Nucellar callus of «Femminello» lemon, selected for tolerance to Phoma tracheiphila toxin, shows enhanced release of chitinase and glukanase ito the culture medium / A. Gentile // Theor Appl Genet 1993. 86. P.527-532.

192. Germana, M.A. / Improvement in Citrus Clementina ort.Ex Tan. microspore derived embryoids induction and regeneration / M.A. Germana, B. Chiancone //Plant Cell Rep 22: 2003. P. 181-187.

193. Guha, S. / In vitro production of embryos from anther of Datura / S.Guha, S. Maheshwari //Nature, 1964. V. 204. N 4957. 497 p.

194. Hammerschlag, F.A. / Selection of peach cells for insensivity to culture filtrates of Xanhtxomonas campestris pv pruni and regeneration of resistant plants / F.A. Hammerschlag // Theor Appl Genet, 1988. -P 76-81.

195. Hansen, N.J.P. / In vitro chromosome doubling with colchicines during microspore culture in wheat (Triticum aestivum L.) / N.J.P. Flansen, S.B.Andersen //Euphytica, 1998. 102:-P. 101-108

196. Heberle-Bors, E. / Experimental control of pollen development / HeberleBors, E. // Androgenesis and haploid plants (In memory of J.-P. Bourgin) Ed Y.Chupeau, M. Caboche, Y. Henry.-B.; Heidelberg; N.Y.: Springer, 1998. P. 38-53.

197. Heberle-Bors, E. / In vitro haploid formation from pollen: a critical review / E. Heberle-Bors // Theor. and Appl. Genet. 1985. 71. P. 361-374.

198. Heberle-Bors, E. / Enviromental control and evidence predetermination of pollen embryogenesis in Nicotiana tabacum pollen / E. Heberle-Bors, J. Reinert // Protrplasma. 1981, V. 109. P. 249-255.

199. Hetberington, A.M. / Guard Cell Signaling / A.M. Hetberington / Cell. 2001. V. 107. -P.711-714.

200. Hoekstra, S. / The interaction of 2,4-D application and mannitol pretreatment in anther and microspore culture of Hordeum vulgare / S. Hoekstra S. Bergen, I. R.Brouwershaven, R. A. Schilperoort, F. L. Heidekamp //Plant Physiol., 1996. 148: P. 696-700.

201. Hofer, M. / In vitro androgenesis in apple-improvement of the induction phase / M. Hofer // Plant Cell Rep, 2004. 22. P. 365-370.

202. Huang, B. / Effects of culture dencity, conditional medium and feeder cultures on microspore embryogenesis in Brasica napus / Huang, B. // Topas Hlant Cell Rep, 1990. 8. P. 594-597.

203. Huang, B. / Temperature stress pretreatment in barley anther culture / B. Huang, N. Sunderland // Ann Bot-London, 1982. 49: P. 77-88

204. Huang, X.O. / High-frequency plant regeneration through callus initiation from anther of maize {Zea mays L.) / X.O. Huang, Z.M. Wei // Plant Cell Rep., 2004. V. 22. 11.-P. 793-800.

205. Hu, T.C. / A cytological study of pretreatments used to improve isolated microspore cultures of wheat (Triticum aestivum L.) / T.C. Hu, K.J. Kasha // Chris Genome, 1999, 42. P. 432-441.

206. Hu, H. / In vitro induced haploids in wheat. / H.Hu In: Jain S.M., Sopory S.K., Veilleux R.E. (eds) In vitro haploid production in higher plants // Kluwer, Dordrecht, 1997. P.73-97.

207. Hu, H. / Application of Pollen-derived Plants to Crop Improvement / H.Hu, B. Huang // International Review of cytology, 107, 1987, P.293-313.

208. Hu, H. /Anther pollen Culture in Cereals / H. Hu, C. Liu, X. Tan, Q. Zhou // Proc.of international symposium Wheat breeding prospects and future approaches, Albenia, 1990. P. 129-132.

209. Ikeda-Iwai, M. / Stress-induced somatic embryogenesis in vegetative tissues of Arabidopsis thaliana / M. Ikeda-Iwai, M.Umehara, S. Satoh, H. Kamada // The Plant J., 2003. 34: P. 107-114.

210. Imamura, J. / Effects of abscic acid and water stress on the embryo and plant of formation in anther cultures Nicotiana tabacum / J. Imamura, H.Harada // Z. Pflanzenphysiol, 1980. 100 P. 285-289.

211. Imamura, J. / Stimulatory effect of reduced atmospheric pressure on pollen embryogenesis / Imamura J., Harada H. // Naturwissenschaften, 1980b. 67: 357-358

212. Immonen, S. / Success in rye anther culture / S. Immonen, H. Anttila // Votr. Pflanzenzuchlg, 2006. 35. P. 237-244.

213. In: Grayson B.T. / PestManagement in Rice Elsevier / B.T. Grayson, M.b. Green, L.G Copping // Applied Science, London, 2011. P.514-536.

214. Ingram, H.M. / Microspore-derived embryo induction from cultured anthers of wheat / H.M. Ingram, J.B. Power, K.C.Lowe, M.R Davey // Plant Cell Tissue

215. Organ Cult, 2000. 60: P 235-238.th229. 16 International Symposium on Septoria and Stagonospora Diseases of Cereals. Desember 8-12, Tunis, Tunisia, 2003.

216. Jacobs, A.K. / Induction of different pathogenesis and related cDNAs in grapevine infected with powdery mildew and treated with ethephon /A.K. Jacobs, I.B. Dry, S.P. Robinson // Plant Physiol., 1999. 48. P. 325-336.

217. Jacquard, C. / Sangvan et al. Barley anther culture: effects of annual cucle and spike position on microspore embryogenesis and albinism / C. Jacquard, R. Asakaviciute, A. Hamalian, R. Sangvan // Plant Cell Rep, 2006. 26. P. 375381.

218. Jahne, A. / Cereal microcpore culture / A. Jahne, H. Lorz // Plant Sci, 109, 1995.-P.1-12.

219. Jain, M. / In vitro Haploid production in higher plants / M.Jain, S.K.Sopory, R.E.Veilleux // Kluwer Acad Press, 1996. V.2. P. 1-4.

220. Kasha K.J. / Chromosome doubling and recovery of doubled haploid plants / In: Palmer C.E., Keller W.A., Kasha K.J. // Biotechnology in Agriculture and Forestry, V. 56. Springer-Verlag, Berlin, 2005. -P. 123-152.

221. Keller, B. / Differential sensitivity of wheat embryos against extracts containing toxins of Septoria nodorum / B. Keller, H. Winzeler, M. Wunzeler, P. Fried // Phytopathology, 1994. V. 141. N 3. P. 233-240.

222. Kiviharju, E. / The effect of cold and heat pretreatments on anther culture of Avena sativa and A. Sterilis / E. Kiviharju E., E.Pehu // Plant Cell Tiss Org Cult 1998. 54:-P. 97-104.

223. Kiyosue, T. / Induction of somatic embryogenesis in carrot by heavy metal ions / T. Kiyosue, K.Takano, H. Kamada, H. Harada // Can J. Bot, 1990.68: P. 2301-2303.

224. Konieczny, R. / Two pathways of plant regeneration in wheat anther culture / R. Konieczny, A.Z. Czaplicki, H. Golczyk, L. Przywara // Plant Cell Tissue Organ Cult, 2003, 73:- P. 177-187.

225. Konzak, C.F. / Anther culture methods for double haploid production in wheat / C.F. Konzak, Zhou H. // Cereal Res. Comm. 1991. 19: P. 147-164.

226. Konzak, C. Methods for generating doubled haploid plants / C. Konzak, E.A. Polle // Int. patent Apllic PCT /US9919498/. 1999.

227. Kunz, C. / Assessment and improvement of wheat microspore derived embryo induction and regeneration / C. Kunz, S.M.S. Islam, J. Berberat, S.O. Peter, B. Buter, J.E. Stamp Schmid// Plant Physiol, 2000. 156: P. 190-196.

228. Kyo, M. / Control of the developmental pathway of tobacco pollen in vitro / M. Kyo, H. Harada // Planta, 1986. 168. P. 427-432.

229. Labbani, Z. / Chlorophyllian durum wheat plants obtained by isolated microspores culture: importance of the pretreatment / Z. Labbani, N. Richard, J. De Buyser, E. Picard // CR Biol. 2005. 328: P. 713-723.

230. Laemmli, U.K. / Clevage of structural proteins during assembly of the head of bacteriophage / U.K. Laemmli // Nature, 1970. T. 4. V. 277, N4. P. 178189.

231. Lawrence, G.J. / Dough quality of biotipes of eleven-Australian Wheat cultivars that oliffer in high molecular weight glutanin subunit composition / G.J. Lawrence, H.J. Moss, K.W. Shepherd, C.W. Wrigley // J.Cereal sci. 1987. 6,1.-P 99-101.

232. Layasankar, S. / In vitro selection of Vitis vinifera 'Chardonnay'with Elsinoe ampelina culture filtrate is accompanied by fungal resistance and enhanced secretion of chitinase / S. Layasankar // Planta, 2000. 211. — PL 2002008.

233. Legrand, M. / Biological function of pathogenesis- related proteins four pathogenesis-related are chitinases / M. Legrand, S. Kauffman, P. Geoffroy, B. Fritig // Proc Natl Acad Sci USA, 1987. 84. P. 6750-67-54.

234. Levites, E.V. / Variation at isozyme loci in cultured in vitro sugar beet regenerants of gynogenetic origin / E.V. Levites, A.M. Svirshchevskaya, S. Kirikovich // Sugar Tech. 2005. V. 7, N 1. P.71-75.

235. Leyser, O. / Molecular Genetic of Auxin Signaling / O. Leyser // Annu. Rev. Plant Biol. 2002. V. 53. P. 377-398.

236. Liu, W. / Improving green plant production via isolated microspore culture in bread wheat (Triticum aestivum L.) / W. Liu, M.Y. Zheng, C.F. Konzak // Plant Cell Rep 2001. 20: P. 821-824.

237. Liu, W. / Improving green plant production via isolated microspore culture in bread wheat (Triticum aestivum L.) / W. Liu, M.Y. Zheng, C.F. Konzak // Plant Cell Rep, 2002. 20: P. 821-824.

238. Lowry, O.H. / O.H. Lowry // Journal Biol.Chem., 1951. 193. P.265-270.

239. Lu, D.B. / Increasing stress resistance by in vitro selection for abscisic insensitivity in wheat / D.B. Lu, R.G. Sears, G.M. Palsen // Crop Sci. 1989. 29, N4.-P. 939-943.

240. Maheshwari, S.C. / Haploids from pollen grains-retrospect / S.C. Maheshwari, A. Rashid, A.K. Tyagi // Amer.J.Bot. 1982. V. 69, N 5. P.865-879.

241. Maluszyncki, / Published protocols for e other crop plant species / Maluszyncki // In Doubled Haploid Production in Crop Plants, 2003. P. 309336.

242. Marciniak, K. / Surma MThe anther-culture response of triticale line ■ tester progenies / K. Marciniak, Z. Kaczmarek, T. Adamski, // Cell Mol Biol Lett 8: 2003. P. 343-351.

243. Mascarenhas, J. / Gene activity during pollen development / J. Mascarenhas // Annu. Rev.Plant.Physiol. Plant Mol. Biol., 1990. 41. P. 371-378.

244. Michal E. / Screening hibrid poplars in vitro for resistanse to leaf spot caused by Septoria masiva / E. Michal, E. Ronald, T. Kathleen, R. Robert // Plant disease, 1988. v. 72. N 6. P. 491-499.

245. Michalczuk, L. / Auxin levels at different stages of carrot somatic embryogenesis / L. Michalczuk, T.J. Cooke, J.D. Cohen // Phytochemistry 31: 1992a. P. 1097-1103.

246. Michalczuk, L. / Regulation of indole-3-acetic acid biosynthetic pathways in carrot cell cultures / L. Michalczuk, D.M. Ribnieky, T.J. Cooke, J.D. Cohen // Plant Physiology, 100: 1992b.-P. 1346-1353.

247. Miklas, P.N. / Use of patho gen filtrate to differentiale physiological resistance of dry bean to white molddisease / P.N. Miklas, K.F. Grafton, G.A. Secor// Crop. Sc., 1992. V. 32, № 2. P.310-312.

248. Moieni, A. / The effects of gibberllic acid phenyletthula mine, 2,4-D and genotypes with on androgenesis in hexaploid wheat (Trticum aestivum) / A. Moieni, A. Sarrafi // Cereal res. Common., 1996, V. 24, №2. P.139-145.

249. Mulcahy, D.L. / The rise of the Angiospermous: a genealogical factor / D.L. Mulcahy // Sci, 1979, 206. P. 20-23.

250. Mulcahy, D.L. / Further evidence that gametophytic selection modifies the genetic quality of the sporophyt / D.L. Mulcahy, G.B. Mulcahy, E. Ottaviano // Anny Bot, 1978. 125. P. 57-60.

251. Mulcahy, D. / The effects of pollen competition / D. Mulcahy, G. Mulcahy // Am. Sci, 1987. 75. P.44-50.

252. Mulcahy, D. / Biol, and implications for plant breeding / D. Mulcahy, E. Ottaviano // New York, 1983. P. 85-87.

253. Murashige, T. / A revised medium for rapid growth and bioassaya with tobacco tissue cultures / T. Murashige, F. Skoog // Physiologia Plantarum, 1962, V. 15, N3.-P. 473-497.

254. Nascaril, J. / Studies on Alternaría solani tuberosum in vitro interactions / J. Nascaril, M. Broggio // Riv. Agr. Subtrom. Trop., 1990. 84. N 3. - P. 445-499.

255. Nitsch, J.P. Haploid plants from pollen grains / J.P. Nitsch, C. Nitsch // Science. 1969. Vol. 163. P. 85-87.

256. Nitzche W. / Herstellung haploids Pflanzen aus festuca-Lolium Bastard // Naturewissenschaft., 1970, 57. P. 199-200.

257. Obert, B. / Colchicine induced embryogenesis in maize / B. Obert, B. Barnabas // Plant Cell Tiss Org Cult, 2004. 77. P. 283-285.

258. Ogawa, T. Induction of cell division of isolated pollen grains by sugar starvation in rice / T. Ogawa, H. Fukuoka, Y. Ohkawa // Breed Sci. 1994. 44: -P. 75-77.

259. Ouang, J.W. / Induction of pollen plants in Triticum aestivum / J.W. Ouang // Haploids in higher plants in vitro. — Hidelberg: Berlin, 1986. P. 26-41.

260. Palmer, C.L. / Mycosphaerella graminicola latents infection, crop devastation and genomics / C.L. Palmer, W. Skinner // Mol. Plant Pathol. -2002. V.3. -P.63-70.

261. Payne, P.I. / Genetics of wheat storage proteins and the effect of allelic variation on Bread-marking quality / P.I. Payne // Ann. Rev. Plant physiol., 1987.-38: -P. 141-153.

262. Payne, P.I. / Wheat storage proteins: their genetics and their potential for manipulation by plant breeding / P.I. Payne, L.M. Holt, E.A. Jackson, C.N. Law // Phil.Trans.R.Soc.Lond B. 1984. 304. P. 359-371.

263. Peixe, A. / Induction morphogenic calluses from in vitro cultured anthers of Prunus Armeniaca cv. Harcot / A. Peixe, A. Barroso // Plant Cell Tissue Organ Cult, 2004. 77.-P. 35-41.

264. Peter, I.P. / The Relationship between HMW Glutenin Subunit composition and the Breat-marking Quality of british-grown Wheat Varieties / LP. Peter, A. Maple, F.K. Anatole, M. H. Linda // J. Sci. Food Agric. 1987. 40. P. 51-65.

265. Picard, E. Obtention de plantules haploids de Triticum aestivum L. a partir de cultures d'anthers in vitro / E. Picard, J. De Buyser // CR Acad Sci Paris 1973.277: -P. 1463-1466.

266. Picard, E. / The male gamete as a tool in the genetic improvement of cereals / E. Picard // Genome, 1989. 31. P. 1005-1013.

267. Pooler, M.R. / Aberrant transmission of RAPD markers in haploids, doubled haploids, and Fj hybrids of peach: observations and speculation on causes / M.R. Pooler, R. Scorza // Scientia Horticulturae, 1995. V. 64. P. 233-241.

268. Raghavan, V. / Role of the generative cell in androgenesis in Henbane. / V. Raghavan // Science, 1976.V.191. № 4225. P. 119.

269. Rasmusson, D.C. / Increasing Yield Potential in Wheat Breaking the barriers / D.C. Rasmusson // Gepmplasm is paramount In: M.P.Reynolds, S.Ragaram and A.McNab (eds.) Mexico D.F., CIMMYT, 1996. P. 28-35.

270. Redha, A. / Improvement of green plant regeneration by manipulation of anther culture induction medium of hexaploid wheat / A. Redha, T. Attia // Plant Cell Tiss O.C., 92. 2008. P. 141-146.

271. Ribarits, A. / Combination of reversible male sterility and doubled haploid production by targeted inactivation of cytoplasmic glutamine synthetase in developing anthers and pollen / A. Ribarits // Plant Biotechnol. J.5, 2007. P. 483-494.

272. Robinson, S.P. / A class IV chitinase is highly expressed in grape berries during ripening / S.P. Robinson, A.K. Jakobs, I.B. Dry // Plant Physiol, 1997. 114.-P.771-778.

273. Rose, J.B. / Anther culture of Sorghum bicolor (L) Maench. I. Effect of panicle pretreatment, anther incubation temperature and 2,4-D concentration / J.B. Rose, J.M. Dunwell // Plant Cell Tissue Organ culture, 1986.V. 6. №1. P. 15-22.

274. Sabehat, A. / Expression of small heat-shock proteins at low temperatures: a possible role in protecting against chilling injuries / A. Sabehat, S. Lurie, D. Weiss // Plant Physiology. 1998.117. - P. 651-658.

275. Sagi, R.A. / Evidence for cytoplasmic control of in vitro microspore embryo-genesis in the anther cultcure of wheat (Triticum aestivum L.) / R.A. Sagi // Theor. and Appl. Genet. 1989. 78. №6. - P .867-872.

276. Sunderland, N. / Cold-pretreatment of excised flower buds in float culture of tobacco anthers / N. Sunderland, M. Roberts // Ann Bot. 1979. 43. P. 405414.

277. Sunderland, N. / Shed pollen culture in Hordeum vulgare / N. Sunderland, Z.H. Xu // J Exp Bot. 1982.136. P. 1086-1095.

278. Sangvan, R.S. / Biochemical cytology of pollen embiyogenesis / R.S. Sangvan, B.S. Sangvan-Norrel // Intern.rev.Cytol.Orlando. 1987, V.107. -P.221-272.

279. Semagn, K. / Distribution of DArT, AFLP, and SSR markers in a genetic linkage map of a doubled-haploid hexaploid wheat population / K. Semagn, A. Bjornstad, H. Skinnes, A.G. Maroy, Y. Tarkegne, M. William // Genome, 2006. V. 49. P.545-555.

280. Shtereva, L.A. / Induced androgenesis in tomato (Lycopersicon esculentum Mill). II. Factors affecting induction of androgenesis / L.A. Shtereva, N.A. Zagorska, B.D. Dimitrov, M.M. Kruleva, H.K. Oanh // Plant Cell Rep 1998. -18.-P. 312-317.

281. Shimada, T. /Anther culture of Japanese spring wheat Haruhikari and chapacterization of doubled haploid plants / T. Shimada, M. Otani, T. Koba // Bull. Res.Inst.Agr. Resour. 1995. N4. - P. 17-22.

282. Shinozaki, K. / Gene expression and signal transduction in water-stress response / K. Shinozaki, K. Yamaguchi-Shinozaki // Plant Physiol, 1997. 115:-P. 327-334.

283. Shoyama, Y. / Micropropagation of Panax notoginseng by somatic embryogenesis and RAPD analysis of regenerated plantlets / Y. Shoyama, X.X. Zhu //Plant Cell Reports, 1997. 16. P.450-453.

284. Sicbel, J. / A comparison of anther and microspore culture as a breeding tool in Brassica napus / J. Siebel, K.P. Pauls // Theor Appl Genet, 1989.V.78. -P.473-479.

285. Sneath, P.H.A. / Numerical Taxonomy — the Principles and Practice of Numerical Classification / P.H.A. Sneath, R.R. Sokal // San Francisco: Freeman, 1973.

286. Solid Future Annual report, CIMMYT Drought: Grim Reaper of Harvests and Lives, 2004-2005.

287. Sopory, S. / Anther culture in vitro: haploid Production in Higher Plants / S. Sopory, M. Munshi // Sci. Lett. v. 1, 1996. P. 145-176.

288. Stolarz, A. / Somatic embryogenesis, in vitro multiplication and plant regeneration from immature explants of hexaploid Triticale / A. Stolarz, H. Lorz // Ztshr.Pflanzenzucht.1996, 96. P. 353-362.

289. Sunderland, N. / Embryoid formation in pollen grains of Nicotiana tabacum / N. Sunderland, F.M. Wicks // J. Exp.Bot., 1971, V. 22, N 70. P.213-226.

290. Szarejko, I. / Anther culture for doubled haploid production in barley (Hordeum vulgare L.). / I. Szarejko, M. Maluszynski, K. Kasha, B.P. Forster // A manual. Kluwer Academic, Dordrecht., 2003. P. 35-42.

291. Szarejko, I. / Doubled haploidy and indused mutation Euphytica DOI / I. Szarejko, B. Forster//200610 1007/s 10681-006-9241-1.

292. Takemori, N. / RAPD markers for confirmation of somatic hybrids in the dihaploid breeding of potato (Solarium tuberosum L.) / N. Takemori, K. Shinoda, N. Kadotani // Plant Cell Reports, 1994. V. 13. P. 367-371.

293. Tenhola-Roininen, T. / Rye doubled haploids as a research and breeding tool a practical point of view / T. Tenhola-Roininen, S. Immonen, P. Tanhuanpa // Plant Breeding, 2006. 125:6. - P. 584-590.

294. Toenniessen, G.H. / Rice biotechnology: progress and prospects / G.H. Toenniessen // Proc Natl Acad Sci. 1990. - P. 209-215.

295. Touraev, A. / Stress induced microspore embryogenesis from tobacco microspores: an optimized system for molecular studies / A. Touraev, A. Ilham, O. Vicente, E. Heberle-Bors // Plant Cell Rep. 1996 a 15. P. 561-565.

296. Touraev, A. / Pollen selection a transgenic reconstruction approach / A. Touraev, C.S. Fine, E. Stoger, E. Heberle-Bors // Proc Natl Acad Sci USA. 1995. -P.12165-12169.

297. Touraev, A. / Efficient microcpore embryogenesis in wheat (Triticum aestivum L.) induced by starvation at high temperatures / A. Touraev // Sex. Plant reprod., 1996 b. 9. P. 209-215.

298. Tsunewaki, K. / Genetic diversity of the cytoplasm in Triticum and Aegilops. XX. The hexaploid triticale as an effective tester for plasma type distinction / K. Tsunewaki, M. Maekawa, H. Tsujimoto // Jpn. J. Genet. 1984. - Vol. 59 -P. 215-224.

299. Vagera, J. / Induced androgenesis in vitro in mutated populations of barley, Hordeum vulgare / J. Vagera, J. Novothy, L. Ohnoutkova // Plant Cell Tissand organ culture, 2004. 77. P. 55-61.

300. Van de Peer, Y. / TREECON for Windows: A Software Package for the Construction and Drawing of Evolutionary Trees for the Microsoft Windows Environment / Y. Van de Peer, R. De Wächter // Comput. Appl. Biosci., 1994, V. 10. P. 569-570.

301. Vijayan, K. / In vitro screening of mullberry (Morus spp) for salinity tolerance / K. Vijayan, S. Chakraborti // Plant Cell Rep., 2003. 22. P.350-357.

302. Wang, J.J. / Studies on increasing the induction frequency of pollen callus in wheat / J.J. Wang, D.F. Hu, H.M. Wang, Y.L. Tang // Hereditas (Beiging) 1981. 13. P. 28-29.

303. Wedzony, M. / Progress in doubled haploid technology in higher plants / M. Wedzony // Euphytica, 2008. P. 2517-2526.

304. Wedzony, M. / Protocol for doubled haploid Titicale by crosses with maize / M. Wedzony // In Doubled Haploid production in Crop Plants, 2003. P. 135140.

305. Weijers, D. / Auxin triggers transient local signaling for cell specification in Arabidopsis embryogenesis / D. Weijers, A. Schiereth, J.S. Ehrismann, G. Schwank, M. Kientz, G. Jürgens // Developmental Cell, 2006.10. P. 265-270.

306. Xie, J.H. / The effect of cool-pretreatment on the isolated microspore culture and the free aminoacid change of anthers in japonica rice (Oryza sativa L.) / J.H. Xie // J Plant Physiol, 1997. 151. P. 79-82.

307. Xu, Z.H. / Culture of barley anthers in conditioning media / Z.H. Xu, B. Huang, N. Sunderland // J Exp Bot. 1981. 32. P.767-778.

308. Xu, L. / Haploid and Doubled Haploid Technology / L. Xu, U. Najeeb // Advances in Botanical Research, 2007. V. 45. - P. 181-216.

309. Zadokc, J.C. / Two wheat septorias; two emerging diseases from the past / J.C. Zadokc //16 th International Symposium on Septoria and Stagonospora Diseases of Cereals. Desember 8-12, 2003. Tunis. - P. 1-9108.

310. Zamir, D. / Temperature effects on haploid selection of tomato microspores and pollen grains. Pollen: Biology and application for plant breeding / D. Zamir, E. Valligos //N.Y., 1982. P. 335-342.

311. Zhang, L.J. / An efficient method for the regeneration of wheat (Triticum aestivum) from anther cultures / L.J. Zhang, C. Anceau, P. Lepoivre, P. Seilleur, J. Semal // Bull Rech Agron Gembloux, 1987. 22. P. 301-314.

312. Zhao, J.P. / Induction of embryogenesis with colchicines instead of heat in microspores of Brassica napus L. cv. / J.P. Zhao, D.H. Simmonds, W. Newcomb // Topas Planta, 1996. 198. P. 433^139.

313. Zheng, M.Y. / Culture of freshly isolated wheat (Triticum aestivum L.) microspores treated with inducer chemicals / M.Y. Zheng, W. Liu, Y. Weng, E. Polle, C.F. Konzak // Plant Cell Rep 20: 2001. P. 685-690.

314. Zheng, M.Y. / Effect of 2-4-Dichlorphenoxyasetic acid on callus induction and plant regeneration in another culture of wheat {Triticum aestivum L.) / M.Y. Zheng, C.F. Konzak // Plant Cell Rep, 1999. P. 185-190.

315. Zheng, M.Y. / Microspore culture in wheat {Triticum aestivum) doubled haploid production via induced embryogenesis / M.Y. Zheng // Plant Cell Tissue Organ Cult, 2003. 73 - P. 213-230.

316. Zhou, H. / In fluence of genetic and enviromental factor anther culcure responsofiimat/ H. Zhou, C. Konzak // Appl. Genet. 38 (4). 1997. P. 393-406.

317. Zhou, W.J. / Incr easing embryogenesis and doubling efficiency by immediate colchicines treatment of isolated microspores in spring Brassica napus / W.J. Zhou, P. Hagbery, G.X. Tang // Euphytica, 2002. 128 P.27-34.

318. Zhou, H. / Osmotic potential of media affecting green plant percentage in wheat anther culture / H. Zhou, Y. Zheng, C.F. Konzak // Plant Cell Rep, 1991, 10. P. 63-66.

319. Ziauddin, A. / Improved plant pegeneraition from wheat anther and barley microspore culture using phenylacetic acid (PAA) / A. Ziauddin, A. Marsolais // Plant Cell Rep, 1992, 11.- P.489-498.

320. Zonia, L.E. / Lithium treatment of Nicotiana tabacum microspores blocks polar nuclear migration, disrupts the partitioning of membrane-associated Ca+2, and induces symmetrical mitosis / L.E. Zonia, , J. Tupy // Sex Plant Reprod, 1999.58: P. 152-160.