Получение мутантов томатов, устойчивых к фитофторе [Phytophthora infestans (Mont) De Bary] с использованием методов клеточной селекции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Чжан Си Чунь

• Чжан Си Чунь
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чжан Си Чунь

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ К ФИТОФТОРЕ.

1.1. Биологическая роль вторичных метаболических соединений в устойчивости растений к фитофторе

1. 1. 1. Фенольные соединения

1. 1.2. Фитоалексины пасленовых и их функции при взаимодействии паразита и хозяина

1. 1.3. Стероидные гликоалкалоиды .:.;.

1.2. Метаболизм стеринов

1.2. 1. Биологический синтез стеринов

1. 2. 2. Факторы, которые влияют на биосинтез стеринов, и биологическая роль стеринов в иммунитете высших растений

ГЛАВА 2 ОПОСРЕДОВАННАЯ КЛЕТОЧНАЯ СЕЛЕКЦИЯ НА УСТОЙЧИВОСТЬ К ФИТОФТОРЕ.

2. 1. Опосредованная клеточная селекция на устойчивость к фитофторе

2.2. Возможность применения методов клеточной селекции для получения растений с измененным составом стеринов (мутанты по стеринам).

ГЛАВА 3 ФИТОФТОРОЗ ТОМАТОВ

3.1. Внешние признаки и пути заражения фитофторозом томатов

3.2. Систематическое положение возбудителя фитофтороза

ГЛАВА 4 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

4. 1. Растительный материал

4. 2. Получение микрокаллусов

4. 3. Получение растений - регенерантов томатов

4. 4. Получение клеточных линий томатов, устойчивых к антибиотику нистатину

4. 5. Анализ вторичных микрокаллусов, полученных от устойчивых растений-регенерантов на устойчивость к нистатину

4.6. Выделение рас фитофторы из листьев картофеля в Ленинградской области

4. 7. Дифференциация рас фитофторы Ленинградской области

4.8. Подбор концентраций фитофторы для заражения сортов томатов

4. 9. Анализ растений - регенерантов на устойчивость к фитофторе in vitro.53 4. 10. Проверка выделенных растений-регенерантов in vitro на устойчивость к фитофторе в условиях теплицы

4.11. Пересадка растений - регенерантов в поле и их анализ на устойчивость в поле

4. 12. Генетический анализ наследования признака устойчивости к фитофторозу

4.13. Статистические методы учета результатов

ГЛАВА 5 РЕЗУЛЬТАТЫ.

5. 1. Индукция каллусов на эксплантах томатов

5.2. Индукция побегообразования у томатов in vitro

5.3. Получение устойчивых к нистатину клеточных линий томатов

5.4. Получение регенерантов из устойчивых к нистатину клеточных линий томатов

5.5. Анализ вторичных микрокаллусов, полученных от устойчивых растений-регенерантов на устойчивость к нистаину

5.6. Анализ выделенных растений-регенерантов в модельной системе "растение - фитофтора".

5. 6. 1. Определение рас фитофторы в Ленинградской области

5. 6. 2. Определение оптимальной концентрации зооспорангиев фитофторы для заражения сортов томатов

5. 6. 3. Скринирование растений-регенерантов на устойчивость к фитофторе в тесте in vitro

5.7. Проверка выделенных in vitro растений-регенерантов на устойчивость к фитофторе в условиях теплицы

5. 7. 1. Укоренение растений-регенерантов в почве и анализ укорененных растений-регенерантов на устойчивость к фитофторе в теплице в тесте с изолированными листьями

5. 7. 2. Характеристика растений томатов, устойчивых к фитофторе

5.8. Пересадка устойчивых растений томатов из теплицы в поле и их анализ на устойчивость к фитофторозу

5. 9.Анализ признака устойчивости к фитофторозу у инбредных Ri сеянцев томатов

ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОД

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение мутантов томатов, устойчивых к фитофторе [Phytophthora infestans (Mont) De Bary] с использованием методов клеточной селекции»

Согласно статистике, еженедельно население Земли возрастает на 1 млн 400 тыс. человек. Питание и медицинское обслуживание такого количества населения представляют собой наиболее важную проблему, стоящую перед человечеством. В связи с этим чрезвычайно актуальной становится проблема увеличения производства продуктов питания для удовлетворения потребностей человечества (Артомонов, 1989; Глеба, 1998). Особенно остро стоит проблема получения устойчивых растений к вредителям сельского хозяйства. На каждое растение в среднем приходится до 10 вредителей сельского хозяйства, особенно значима борьба с такой болезью растений как фитофтороз. Традиционные методы селекции растений уже не могут решить эту проблему и требует привлечения современных методов биотехнологии, таких как клеточная селекция in vitro.

Наличие метаболических взаимоотношений между грибами и растениями оказывает влияние как на выбор грибами определенных растений-хозяев, так и на способность последних воздействовать на выживаемость и размножение грибов. Вторичные метаболиты растений играют важную роль в становлении таких взаимоотношений. Пригодность растения в качестве корма определяется не только наличием таксичных для вредителей соединений, но и присутствием необходимых для него питательных веществ.

Среди необходимых для патогена соединений, наиболее важное место занимают фитостерины (ФС). Так фитофтора (возбудитель томатной и картофельной гнили) неспособна синтезировать стерины de novo и, следовательно, зависят в своем развитии от экзогенного источника стеринов (Hendrix, 1970; Elliot, 1977). Это метаболическая особенность фитофторы может быть использована для создания новых растений со измененным составом ФС и получения устойчивых растений к фитофторе. Отсутствие фермента сквален синтетазы у этих грибов является причиной неспособности к синтезу стеринов de novo из ацетил-КоА или других ациклических предшественников (Wood, Gotlieb, 1978), однако не влияет на их способность трансформировать экзогенные стерины в необходимые производные (Elliot, 1977). Отсутствие стеринов в клетке не сказывается на жизнеспособности гриба, однако подавляет процессы полового и бесполого размножения. Добавление экзогенных фитостеринов, особенно ситостерина, ускоряет мицелиальный рост патогена и восстанавливает его способность к размножению (Ellioe, 1977; Метлицкий и др., 1980). Некоторые исследования свидетельствуют, что состав стеринов в вегетативных тканях картофеля может являться фактором, сдерживающим развитие и размножение возбудителя фитофтороза, независимо от расы последнего.

На кафедре генетики и селекции СПбГУ для табака и картофели уже получены мутанты по метаболизму фитостеринов, среди которых выделены устойчивые формы к вредителям сельского хозяйства (Лутова, Ходжайова, 1993; Левашина, 1994; Ходжайова, 1998). Для картофеля создана экологическая модель "продуцент стеринов - потребитель стеринов", в основе которой лежат растения картофеля с измененным метаболизмом стеринов и высоковирулентные расы фитофторы (Ходжайова, 1998). Получены формы картофеля, характеризующиеся устойчивостью к фитофторозу. Работа была проведена на основе опосредованной клеточной селекции, где в качестве селективного агента использовался полиеновый антибиотик филипин и ингибитор биосинтез стеринов байтан. В итоге с использованием методов газовой хроматография и масс-спектрометрии показано, что у картофеля с повышенной устойчивостью к фитофторозу изменен баланс основных стеринов (увеличена доля кампестерина) по сравнению с исходной формой. Этот признак наследовался при вегетативном и при половом размножении. Однако, провести генетический анализ устойчивости не удалось, из-за полиплоидной природы картофеля (Ходжайова, 1998).

Для выявления генетических закономерностей, лежащих в основе устойчивости к патогену, предпринята попытка для проведения аналогичной работы на томатах-диплоидной культуры, также подверженной заболеванию фитофторозом.

Целью нашей работы явилось получение мутантов томатов, устойчивых к фитофторе на основе опосредованной клеточной селекции. В задачи работы входило:

I Этап:

1. Подбор оптимальных условий для выявления растительных форм с высокой способностью к каллусо- и побегообразованию.

2. Подбор сублетальных и летальных концентраций антибиотика нистатина для получения клеточных культур устойчивых к селективному агенту.

II Этап:

1. Сбор и определение рас фитофторы в Ленинградской области.

2. Характеристика Ro растений-регенерантов томатов по признаку устойчивости к Phytophthora infestans in vitro и выявление устойчивых образцов.

3. Морфологическое описание полученных растений и анализ сохранения признака устойчивости к фитофторозу в условиях теплицы и поля.

4. Анализ признака устойчивости к фитофторозу у сеянцев Ri растений томатов.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Чжан Си Чунь

ВЫВОДЫ

1. Выявлена внутривидовая изменчивость у томатов по способности к каллусо- и побегообразованию. Выделены сорта, характеризующиеся высокими процентами каллусо- и побегообразования.

2. На основе методов клеточной селекции получены клеточные линии и растения - регенераты томатов сорта Алпатьева и Линии-1, устойчивые к нистатину, которая сохранилась в морфогенетическом цикле каллус-растение-каллус .

3. Собрана популяция фитофторы Ленинградской области, в которой при использовании сортов дифференциаторов, выявлены расы фитофторы с генами вирулентности 1, 2, 3, 4.

4. Среди растений-регенератов, устойчивых к нистатину, в тестах in vitro выявлены растения, устойчивые к фитофторозу.

5. Показано, что устойчивость к фитофторозу, выявленная в тестах in vitro, частично сохраняется при перенесении растений в условия теплицы и поля. В ходе испытаний in vivo (теплица и поле) выделено 29 растений, устойчивых к фитофторозу.

6. Показано, что устойчивые к фитофтоозу растения томатов Ro не отличаются от исходных по признакам: тип куста, форма листа, тип цветка и плода. Из 29 растений устойчивых к фитофторе от 7 получены семена.

7. В потомстве Ri полученном от самоопыления устойчивых к фитофторе растений, по признаку устойчивость к фитофторозу, выявлено расщепление, которое статистически не отличалось от 3:1 и/или 9:7.

8. Полученные результаты предполагают, что исходные растения устойчивые к фитофторе растения, выделенные в ходе клеточной селекции, являются гетерозиготами как минимум по одному гену, контролирующему устойчивость к фитофторозу. Результаты генетического анализа позволяют

Среди сеянцев мы выявили две группы растений-устойчивые и восприимчивые к фитофторе (табл. 14). Статистический анализ полученного расщепления позволяет рассмотреть две гипотезы - 3 : 1 и 9 : 7. В ряде случаев статически подтверждались обе гипотезы. Полученные результаты позволяют предположить, что растения Яо характеризовались гетерозиготностью по крайней мере по одному гену, контролирующему устойчивость к фитофторозу. Анализ расщепления также позволяет сделать заключение, что данный признак наследуется как доминантный. Однако, окончательные выводы по характеру наследования можно сделать только в ходе последующего генетического анализа.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чжан Си Чунь, 1999 год

1. Абдель Нассер Абдель Аал Галал Дарвиш. Использование методов генной и клеточной инженерии для получения растений, устойчивых к вредителям сельского хозяйства.//Диссер .канд. биол.наук. -СПб. -1994.-127с.

2. Авдеев Ю.И. Селекция томатов Академия наук Молдовской ССР, Всесоюзный научно-исследовательский институт орашаемого овощеводства и бахчеводства. Кишинев: Изд-во Штинца, 1982 .- 282 С.

3. Артамонов В.И. Биотехнологи-Агропромышленному комплексу. М.: Наука, 1989. 156 С.

4. Асеева Е.А. Иммунологическое обоснование селекции картофеля на групповую устойчивость к фитофторозу и бактериозу.//Диссер. канд. биол. наук.-СПб.-1993.-94с.

5. Багирова С.Ф., Ан Цзян Ли, Дьяков Ю.Т. Механизм генетической изоляции специфических патогенных форм Phytophthora infest ans ß4ont). DBY. в половых и бесполовых популяциях//Микология и фитопатология. -1998. -т. 32. -Вып. 4. С. 47-50.

6. Багирова С.Ф., Горшкова Н.С. Кузьмина Е. А. Видовой состав грибов, вызывающих южный фитофтороз томата//Микология и Фитопатология. -1995. -т. 29. -Вып. 4, -С. 33-43.

7. Балашова H.H., Жученко A.A., Андрющенко В.К. Томатин-возможный ингибитор возбудителей болезней и вредителей томатов. Кишинев, 1976. -ЗЗС.

8. Балашова H.H. Фитофтороустойчивость рода Lycopersicon Tourn. и методы использования ее в селекции томата. Кишинев: Штиинца, 1979. 168 С.

9. Ю.Бейли Дж. А., Мансфилда Дж. В. Фитоалексины. перевод с английского кандидата биол. наук Дмитриева А. П. Киев: Наукова Думка, 1985 . 320 С.

10. П.Богдан Г.П. Природа защитной реакции растений. Киев: Наукова думка, 1981.-208 С.

11. Быков В.А., Крылов И.А., Манаков М.Н., Марквичев Н.С., Орлова JIM., Тарасова Н. В. Микробиологическое производство биологически активных веществ и препаратов. М.: Высшая школа, 1987 . 158 С.

12. З.Валуева Т.А., Кладницкая Г.В., Ильинская Л.И., Герасимова Н.Г., Озерецковская О.Л., Мосолов В.В. Ингибиторы химотрипсина в клубнях картофеля, инфицированных возбудителем фитофтороза//Био-органическая химия. -1998. -т. 24. № ., -С. 346-349.

13. Вандерпланк Я. Генетические и молекулярные основы патогенеза у растений. Перевод с английского языка Дуниной М. Г., под редакцией канд. биол. наук Володарского А.Д. М.: Изд-во Мир, 1981. 236 С.

14. Васюкова Н.И., Давыдова М.А., Озерецковская О.Л., Метлицкий Л.В., Сегаль Г. М. Питательно-тормозящая гипотеза фитоиммунитета.// Микол. фитопатол.-1977. -11,- С. 480-487.

15. Васюкова Н.И., Пасешничеко В.А., Давыдова М.А. и др. Изучение фунгитоксических свойств стероидных сапонинов из корней диоскорей дельтовидной/ЛТрикладная биохимия и микробиология, -1977, -Т. 13,- С. 172-176 .

16. Волуевич Е.А., Булойник A.A. Ядерно-цитоплазматические взаимоотношения в устойчивости пшеницы к грибным патогенам//Генетика. -1995.-Т. 31. №3,-С. 369-373.

17. Воробьева Ю.В., Гриднев В.В., Поспелова JI.A., Башаева Е.Г., Кваснюк Н. Я. и др. Изучение природных популяций возбудителя фитофтороза на картофеле и томатах. М.: 1990 . 127С.

18. Гаранько И.Б., Дмитриева О.М., Храполова И.А. Томаты на приусадебном участке, г. Павловск. 1997. 124 С.

19. Глеба Ю.Ю. Биотехнология растений//Соросовский образовательный журнал. -1998. №6. С. 3-8 .

20. Горленко М.В. Мир растений. Т. 2. М.: Просвещение, 1991 . 348 С.

21. Гримовая Б.Б., Патрикеева М.В., Житлова H.A., Зуева О М., Осипова Е.А. Определение устойчивости картофеля к возбудителю фитофтороза по титру лектинов листьев. Методика. ВИЗР. СПб, 1990 . 37 С.

22. Громова Б.Б.-О. Иммунохимические исследования для разработки принципов селекции растений на устойчивости к болезням. Труды всесоюзного научно-исследовательского института защиты растений. JL: 1981, - С.70-77.

23. Гусева Л.И. Пути создания новых форм томата с горизонтальной устойчивостью к фитофторозу.- в кн.: Генетика иммунитета и селекция сельскохозяйственных растений на устойчивость в Молдавии. Кишинев: Штиница, 1984 . 254 С.

24. Долягин А.Б., Зимина Л.Б., Ильичева A.A., Червонюк Г.Н., Тенсина Т.В., Писаренко Э.К. К оценке болезнеустойчивости картофеля//АгроХХ1. -1997. № 2. - С. 8-9.

25. Дорожгин H.A., Ремнева З.И., Бельская С.И., Псарева В.В. Фитофтороз картофеля и томатов. Минск: Уроджай, 1976 . 224 С.

26. Дрейпера Дж., Скотта Р., Армитиджа Ф., Уолдена Р. Генная инженерия растений, пер. с англ. М,: Мир: 1991, -408 С.

27. Дьяков Ю.Т., Одинцова И.Г. Генетические основы и селекции устойчивых сортов. В сб.: Генетические основы селекции растений на иммунитет. М.:1. Наука, 1973. С. 183-203.

28. Жученко А. А. Устойчивость растений к патогенам в системе их общей и специфической адаптивности.- в кн.: Генетика иммунитета и селекция сельскохозяйственных растений на устойчивость в Молдавии. Кишинев: Штиница, 1984 . 254 С.

29. ЗО.Запрометов М.Н. Фенольные соединения. М.: Наука, 1993 . 272 С.31 .Инге-Вечтомов С.Г. Генетика с основами селекции. М.: Высшая школа, 1989, 592 С.

30. Инфекционные болезни растений: физиологические и биохимические основы//Пер. с англ. Великанова JI.JL, Левкиной Л. М., Прохорова В.П., Сидоровой И.И. Под ред. и с предисл. Дьяков Ю.Т. М.: ВО Агропромиздат. 1985. -367 С.

31. Калакуцкий Л.В., Шарая Л.С. Успехи микробиологии. -1990. -Вып. 24. С. 26-65.

32. Камераз А.Я., Яшина И.М., Склярова Н.П. Генетика устойчивости картофеля к наиболее распространенным болезням // Генетика и селекция болезнеустойчивых сортов культурных растений. М.: Изд-во Наука, 1974,-С. 247-256 .

33. Кинтя П.К., Лазурьевский Г.В., Балашова H.H., Балашова И.Т., Суруживу А.И., Лях В.А. Строение и биологическая активность стероидных гликозидов ряда спиростана и фуростана. Кишинев: Штиинца, 1987. -141 С.

34. Кинтя П.К., Лазурьевский Г.В. Стероидные гликозиды ряда спиростана. Кишинев, 1979. -145 С.

35. Ковганко Н.В., Ахрем A.A. Стероиды (экологические функции). Минск: Навука i тэхшка, 1990 . 224 С.

36. Козловский Б.Л., Фоменко H.H., Демченко С.И. Анализ модифика-ционной изменчивость растений в Mi/ Химический мутагенез и проблемыселекции. М.: Наука, 1991 288 С.

37. Коломиец Э.И., Здор H.A., Рамановская Т.В., Лбанок А.Г. Некторые аспект фитозащитного действия Streptomyces flavescens-антагониста фитопато-генных грибов//Прикладная биохимия и микробиология. -1997. №5. С. 508-511.

38. Красильников H.A. Микроорганизмы почвы и высшие растения. М.: Изд-во АН СССР, 1958.-463 С.

39. Кривченко В.И. Идентифицированные гены кстойчивости растений к болезням и возможности их практического использования//Генетика -1994. Т. 30. № 10. С. 1334-1342.

40. Курсанова Т.А. Развитие представлений о природе иммунитета растений. М.: Наука, 1988 . 98 С.

41. Кутузова С.Н. Генетические основы длительной устойчивости сортов льна к ржавчине//Генетика. -1994. Т. 30. № 10. С. 1363-1373.

42. Ладыгина М.Е. Физиолого-биохимические и биофизические методы диагностики степени устойчивости растений к патогенам и другим факторам, -М.: Изд-во МГУ, 1992. -96 С.

43. Левашина Е.А. Клеточная селекция in vitro как способ получения растений, ограничивающих развитие стерин зависимых насекомых. // Диссер. канд. биол. наук,- СПб. -1994. - 120С.

44. Левитин М.М., Федорова И.В. Генетика фитофторовых грибов АНСССР, научный совет по проблемам генетики и селекции. Л.: Изд-во Наука, Ленинградское отделение. 1972, -216 С.

45. Левитин М.М. Достижение генетики фитофторовых грибов. М.: 1980.- 39 С.

46. Лутова Л.А., Бондаренко Л.В., Бузовкина И.С., Левашина Е.А., Тиходеев О.Н., Ходжайова Л.Т., Шарова Н.В., Шишкова С.О. Влияние генотипа растения на процессы регенерации//Генетика.-1994.-30. С. -1065-1074.

47. Лутова Л.А., Левашина Е.А., Бондаренко Л.В., Байрамова Н.Л., Андронова Е.В., Инге-Вечтомов С.Г. Мутация высших растений по биосинтезу стеринов//Генетика. -1992. Т. 28. № 2. С. 129-136.

48. Лутова Л.А., Ходжайова Л.Т. Использование методов биотехнологии с целью получения растений картофеля, устойчивых к болезням и насекомым вредителям .//Тез. докл. III съезда ВОФР. -СПб. -1993. Т.6, С. 660.

49. Лутова Л.А., Ходжайова Л.Т. Молекулярно-генетические аспекты устойчивости высших растений к вредителям сельского хозяйтва //Генетика. 1998. Т. 34. № 6. - С. 719-729.

50. Метлицкий Л.В., Озерецковская О.Л., Васюкова Н.И., Давыдова М.А., Сегаль Г.М. Роль стеринов во взаимоотношениях картофеля и РЬуЮрЫкога т/еБШтПЛШ СССР. 1976. - 227. - С. 244-247.

51. Метлицкий Л.В., Озерецковская О.Л., Васюкова Н. И. Фитостерины и их роль во взаимоотношениях растений и паразитарными грибами.//Успехи совр. биол. 1980,- 89. - С. 28-41.

52. Муромцев Г.С., Бутенко Р.Г., Тихоненко Т.И., Прокофьев М.И. Основы сельскохозяйственной биотехнологии. М.: ВО Агропромиздат, 1990,- 383 С.

53. Муросок Т.И., Рейфман В.Г., Жравлев Ю.Н. и др. Влияние кинетина на активность РНК-азы и репродукцию ВТМ в листьях табакаУ/Метаболизм больного растения. Владивосток: 1976. С. 120-126.

54. Новотельнова Н.С.//Фитофторовые грибы. JL: Из-во Наука, Ленинградское отделение. 1974, - 208С.

55. Камарова, Л.А., Давидович Л.А. Свободные фенолкарбоновые кислоты и фенолоки-сляющие ферменты в некротической защитной реакции ржи против листовой ржавчины//Физиология растений. -1997. Т. 44. № 5. С. 749-755.

56. Остроумов С.А. Введение в биохимическую экологию. М.: Изд-во, Моск. ун-та. 1986, - 176 С.

57. Пасешниченко В.А. Итоги науки и техники, Биологическая химия, биосинтез и биологическая активность растительных терпеноиды и стероидов. М.: 1987. - С. 88-127 .

58. Патрикеева М. В., Методические указания по фитопатологическим работам при селекции картофеля на устойчивость к фитофторозу. Л.: 1990. - 42С.

59. Платонова Т.А., Васюкова Н.И., Давыдова М.А. Влияние дефицита стеринов на спороношение Phytophthora infestans J/Прикл. биол. микробиол. 1977. -13. -С. 907-915.

60. Попкова К.В. Фитофтора картофеля. М.: Колос, 1972, - 176С.

61. Розенталь Д.А. В мире науки. 1986. № 3. С. 56-62 .

62. Рубин Б.А., Арциховская Е.В., Аксенова В.А. Биохимия и физиология иммунитета растений. -М.: Высш. школа, 1975. -319С.

63. Рубин Б.А., Арциховская Е.В. Биохимия и физиология иммунитета растений, М.: Высш. школа, 1968. - 411С.

64. Стейплз Р., Тенинссен Г. Борьба с болезнями растений: устойчивость и восприимчивость. Пер. англ. Левкиной Л.М., Плотниковой Ю.М., Под ред. и с предисл. Дьякова Ю.Т. -М.: Колос, 1984. 293 С.

65. Степанова Т.В., Патрикеева М.В., Каплан-Дикс В.А. Роль активности рибонуклеаз в устойчивости растений к болезням, Труды всесоюзного научно-исследовательского института защиты растений, Л.: 1981. - С. 6370.

66. Стрельникова Т.Р., Маштакова А.Х. Селекция гибридов томатов, устойчивых к фитофторозу. в кн.: Генетика иммунитета и селекция сельскохозяйственных растений на устойчивость в Молдавии. Кишинев, Штиница. 1984 . - 254 С.

67. Терентьева П.В., Ростова Н.С. Практикум по биометрии. Л.: Изд-во ЛГУ,-1977.-152 С.

68. Филатова О.Ф., Ходжибаева С.М. Интродукция микроорганизмов в окружающую среду. М .: ОНТИПНЦ РАН, 1994. С. 13-14.

69. Флетчер Дж. Т. Борьба с болезнями растений в теплицах, пер. с англ. Голышина Н. М., М.: ВО Агропромиздат. 1987 . 261 С.

70. Ханс Росс. Селекция картофеля -проблемы и перспективы, Пер. с англ. Лебедева В. А., Под ред. Яшиной И. М. М.: ВО Агропромиздат, 1989,- 119 С.

71. Харборн Дж. Введение в экологическую химию. М.: Мир, 1985. 312 С.

72. Ходжайова Л.Т., Усольцева М.Ю., Асеева Е.А., Лутова Л.А. Клеточная селекция растений картофеля, устойчивых к фитофторозу, с использованием веществ, нарушающих метаболизм стеринов// Физиологиярастений. -1998. Т. 45. № 2. С. 283-288.

73. Черенок Л.Г. Помидоры, перец, баклажан, физалис. Минск: ООО "Сэр-Вит", 1997.- С. 3-163 .

74. Шарая Л.С. Выделение и изучение жизненных циклов актиномицетов клубеньков и ризосферы азотфиксирующих небобовых растений: Автореф. дис. канд. бил. наук. Пущино: Ин-т биохимии и физиологии микроорганизмов РАН, 1985. 16 С.

75. Щербакова Л.А. Участие стеринов во взаимоотношениях картофеля и возбудителя фитофтороза Phytophthora infestans (Mont.) De Вагу.// Автореф. диссер. канд. биол. наук. - М.-1981.-23с.

76. Щербокова В.К. Генетико-физиологические и молекулярно-генети-ческие основы иммунитета. Сб. Генетические основы селекции на иммунитет. М.: Накуа, 1973. - С. 11 -64.

77. Anon. 1983b: Cotrol of inportant fungal diseases. Ann. Rep. Intern. Pot. Center. Lima, 1982. 34-40.

78. Bach T. J., Lichtenthaler H. K. Inhibition by mevinolin of plant growth, sterol formationand pigment accumulation/ZPhysilo. Plant. -1983. -59. P. 50-60.

79. Bard M. Sterol mutants of S. cerevisiae: chromatographic analysis/ZLipids. -1977. -12. -P. 645-654.

80. Benveniste P., Rahier A., Target sites of sterol biosynthesis inhibitors in plants.// In: Target sites of fungicide action./ Ed. koller W. D. Lodon: CRC Press.-1992.-P. 207-226.

81. Berger G. M. В., Regoraro R. J., Patel S. В., Naidu P., Rom L., Hideke H.,

82. Marais A. D., Jadnav A., Naoumove R. P., and Thompson G. R. HMG-CoA reductase is not the site of the primary defect in phytosterolemia//J. of Lipid Research. -1998, -V. 39, P. 1046-1054.

83. Burka, L. T., L. Kuhnert, B. J. Wilson, and T. M. Harris. Biogenesis of lung-toxic furans produced during microbial infection of sweet potatoes (Ipomoea batatas) J. Am. Chet. Soc. 1977. -99: 2303-2305.

84. Callow J.A. ed. Biochemical plant pathology, Chichester. J. Wiley. 1983 .

85. Chappell et al. Overexpression of HMG-CoA reductase gene in tabacco plants/ZPlant Physiol. -1995. -109. -P. 1337-1343.

86. Chasan R. Plant-Pathogen Encounters in Edinburgh (Meeting report)//Plant Cell. -1994. -V. 10. P. 1332-1340.

87. Chiu P.L., Bottino P.J., Patterson G. W. Sterol composition of nystatin and amphotericin B resistant tobacco calluses/ZLipids. 1980. -P.50-54.

88. Clarke D.D. Potato late blight: a case study. In: J.A. Callow (ed.), Biochemical Plant Pathology. 1983: 3-15. J. Wiley & Sons, Ldn.

89. Dahl J.S., Dahl C.E., Bloch K. Sterols in membranes: growth characteristics and membrane properties of Micoplasma capricolum cultured on cholesterol and lanosterol/ZBiochem. -1980. -19. P.1467-1473.

90. Davis R.H., Copenhaver G.H., Carver M.G. Quantitation of staines proteins in poiyacrtlamide gels//Ann. Biochem. 1974. - 58. - P. 615-618.

91. Di Cosmo F., Towers G. H. N. // Phytochemical adaptations to seress. N. Y.: Plenum press. 1984. P. 97-175.

92. Doke, N., and K. Tomiyama. Effect of sulfhydryl-binding compounds on hypersensitove death of potato tuber cells following infection with anincompatible race of Phytophthora infestansllPhysiol. Plant Pathol. 1978, - 12. -P. 133-139.

93. Doke, N., and K. Tomiyama. Suppression of the hypersensitive response of potato tuber protoplasts to hyphal wall components by water soluble glucans isolated from Phytophthora infestans!f?\\ys\o\. Plant Pathol. 1980. - 16: - P. 177-186 .

94. Doke N., N.A. Garas, and J. Kuc. Effect of host hypersensitivity of suppressors released during the germination of Phytophthora infestans cystocpores //Phytopathology. 1980. - 70. - P. 35-39.

95. Eliiot C.G. Sterols in Fungi: Their Functions in Growth and Reproduction.// Adv. Microbial Physiol. 1977. - 15. - P. 121-174.

96. Elliot C.A., Knights B.A. Interaction between steroods in the growth of Phytophthora J/1. Sci. Food & Agr. -1969. -20. -P. 405-408.

97. Enyedi A., Yalpani N., Silverman P., Raskin I. Signal Molecules in Sistemic Plant Resistance to Pathogenes and Peste//Cell. 1992. - V. 70. - P. 879-886.

98. Fenner G.P., Patterson G.W., Koines P. M. Sterol Composition During the Life Cycle of the Soybean and Squash./ZLipids. -1986. -21. -P. 48-51.

99. Fenner G.P., Patterson G.W., Lusby W.R. Developmental Regulation of sterol Biosynthesis in Cucurbita maxima L.// Lipids. -1989. -24. -P. 271-277.

100. Flor H.H. Current statns of the dene-for-gene concept. Ann. Rev. Phytopa-tholog. -1971, -V.9. P.275-296.

101. Fry S.C., Miller J.G.//Plant cell wall poiymers. Wash. (D.C.): Amer. Chem. Soc. 1989, P. 33-36.

102. Fujita, M., K. Oba, and I. Uritani. Ipomeamarone 15-htdroxylase from cutinjured and Ceratocystic fimbriata-ini'cctQd sweet pototo root toeeue// Agric. Biol. Chem. 1981. - 45. - P. 1911-1913.

103. Fujita, S., H. Imasaki, and I. Uritani. Biosynthesis of ethylene in sweet potato root tissue, lant Cell Physiol. 1970. - 11. - P. 737-745.

104. Gottlieb D., Knaus R. J., Wood S. G. Differences in the sterol synthesizing pathways of sterol-producing and non-sterol-producing fungi.// Phytopathol.-1978,- 68.-P. 1168-1170.

105. Grummer G., Gunter E., Eggert D. Die Prufung von Tomatensorten und ihren Hybriden auf Blatt- und Fruchtbefall mit Phytophthora infestans. Theor. Appl. Genet. 1969. - 39. - P. 232-238.

106. Hahlbrock K., chappel J., Scheel D. Genes involved in resistance reaction in higher plants: possible candidates for gene transfer In: The impact of gene trasfer technique in eukaryotic cell biology, W. Berlin, Springer Verlag. 1984. P. 100120.

107. Halverson L. J. Stacey G. Signal exhange im plant-microbe interactions. Microb. Rey. 1986. - 50(2). - P. 193-225.

108. Hanley K.M., Nicolas O., Donaldson T.B., Smith-Monroy C., Robinson G.W., Hellmann G.M. Molecular cloning, in vitro expression and characterizationof a plant squalene synthase cDNA//Plant Mol.Biol. -1996. -30. P. 1139-1151.

109. Hartmann M. A., Benveniste P. Plant membrane sterols: Isolaton, Identification and biosynthesis./ZMethods Enzymol. -1987. -141. -P. 632-650.

110. Hashimoto T., Tajima M.//Plant and Cell Physiol.- 1980. V. 21. - P. 15591571.

111. Heftmann E., Biogenesis of steroids in Solanaceae/ZPhytochem. -1983. -22. -P. 1843-1860.

112. Hendrix J.W. Sterols in growth and reproduction of fungi.//Annu. Rev. Phytopathol. -1970. -8. -P. 111-130.

113. Howard S. Judelson. The Genetics and Biology of Phytophthora infestans: Moden Approachrs to a Historical Challenge/ZFugal Genetics ang Biology. -1997.-1 22.-P. 65-76.

114. Hurghisin I. Modifcari ale activitatu in plántele de conopida, mustar si varza infectate cu virusul mozaicului conopidei. Stud. cerc. Biol. Ser. bot. - 1966. -18. N5. - P. 485-488.

115. Roller W. D., Antifungal Agents with Target Sites in sterol Functions and Biostnthesis//In: Target stes of fungicide action/ Ed. Koller W. D., -London: CRC Press.-1992.-P. 119-206.

116. Kusano G., Takahashi A., Sugiyama K., Nozoe S.//Chem. Pharm. Bull. 1987. -V. 35.-P. 4862-4867.

117. Lorenz F., Parks M. Senescent of oat leaves: changes in t he free sterol composition and enzyme activities of the membrane//Plant Sci.-1991. 79. - P. 311.

118. Lucas I. A., Ritt D. Immunochemical identification of a new molecular from of acid phosphatase of host origin arising during infection of potato tubers by Phytophthora erythroseptica Pethybr.//J. Gen. Microbiol. 1974. - 84. - N 2. - P. 311-320.

119. Lutova L.A., Khodjaiova L.T., Usoltseva M.Y. Plant sterols are pivotal point in the plant-pathogen interactions//Abstract Book of the 8th International Congress Molecular Plant-Microbe Interactions. Knoxville. 1996, B-77.

120. Malcolmson, J. F., & R. J. Killick. The breeding valoes of potato field resistance to late blight measured by whole seedling. Euphytica, 1980. 29. - P. 489-495.

121. Mclaughlin. Effekt of infection by Ph. infestans on phenolics in potato tubers with various degrees of fried resistance. Pot. Res. 1983. 26. - P. 261- 275.

122. Milhaud I., Bolard J., Benveniste P., Hartmann M. -A. Interaction of polyene antibiotic filipin mith model and natural membranes containing plant sterols// Biochem. & Biophys. -1988. 941. - P. 315-325.

123. Narita J. O., Gruissen W. Tomato hydroxymethylglutaryl-CoA reductase is required early in fruit development but not during ripening// Plant Cell. 1989. -1. -P. 181-190.

124. Neison R. R. Genetics of horizontal resistance to plant disease//Ann. Rev. Phytopath. 1978. - V.16. - 13. - P. 359-378.

125. Nilsson, B.-A. Component anaiysis of general resistance to Ph. infestans in clones from the Colombian potato collection. Pot. Res. 1981. -24. P.239-244.

126. Parkc Leo W., Casea Warren W.//Physioiogical implications of Sterolbio-synthesis in yeast // Annu. Rev. Microbiol. -Palo Alto (Calif). 1995. V.49. - P. 95-166.

127. Pascal S., Taton M., Rahier A. Plant Sterol Biosynthesis. Identifocation and characterization of two dinstinct microsomal oxidative enzymatic ststems involved in sterol C-4 demethylation//J. Biol. Chem. -1993. -268. -P. 1163911654.

128. Roddick J. G., // Phytochemistry. 1974, - V. 13. - 11. - P. 9-25.

129. Rowan D. D., Macdonald P. E., Skipp R.//Phytochemistry. 1983. - V. 22. - 1 8.-P. 2102-2104.

130. Salt T., Tocker J. E., Adler J. H., Dominance of A5-Steros in Eight Species ofthe Cactaceae/ZPhytochem. -1987. 26.-P. 731-733.

131. Shannon, L., M. Imaseki, and I. Uritani. De novo synthesis of pero-xidase isozymes in sweet potato slices .//Plant Physiol. 1971. - 47. - P. 493-498.

132. Shaw D. S., Genetics.//In: Phytophthora infestans: the causeof late blight of potato.//Eds. Ingram D. S., Williams P. H. -Adv.Plant Pathol. -1991. -7. -P. -131169.

133. Shi J., Gonzales R. A., Bhattacharyya M. K., Identification and characterization of an S-adenosy-L-methionine: delta 24-sterol-C-methyltransferase cDNA from soybean// J. Biol. Chem.- 1996. -271. -P. 9384-9389.

134. Stahmann, M. A., B. G. Clare, and W. Woodburg. Increased disease resistance and enzyme activity induced by ethylene and ethylene priduction by black rot infected sweet potato tissue/ZPlant Physiol. 1966.- 41. - P.1505-1512.

135. Stegamann, H., & D. Schnick. Index 1985 europaischer Kartoffelsorten. Mitt. Biol. Bundesanst., Braunschweig. 1985. 227. - P. 128.

136. Taton M., Benveniste P., Rahier A. Mechanism of inhibition of Sterol Biosynthesis Enzymes by N-Substituted Morpholines/ZPestic. Sei. -1987.(a)-21.-P. 269-280.

137. Tso T. C., Cheng A. L., Sorokin T., Tso E., Phytosterols and polyphenols in reciprocally grafted tobacco-tomato plants// Phytochem. -1974. P. 1667-1671.

138. Vanetten, H., D. E. Matthews & D. A. Smith. Metobabolism of phytoalexins.1.l1.: Bailey J., & J. Maansfield(eds.). Phytoalexins, Blackie Glasgow. 1982. -P.181-217.

139. Vogeli U., Chappell J. Induction of sesquiterpene cyclase and suppression of squalene synthetase in plant cell cuiture treated with fungal elicitor./ZPlant Physiol.-1988.-88.-P. 1291-1296.

140. Weins F. Heritable variation in plant cell culture// Ann. Rev. Plant Physiol., -Palo Alto. Calif. -1983. -V. 34. -P. 327-346.

141. Wensel G. Stategies in incomentional breeding for desease resistance//Ann. Rev. Phytopathol. Palo Alto, Calif. - 1985. -V. 23. -P. 149-172.

142. Wood P. K. S. ed. Active defence mechanisms im plant. New-York, Plennum Press, 1982.

143. Yamamoto E., Bokelman G. H., Lewis N. G., // Plant cell wall poiymers. Wash . (D.C.): Amer. Chem. Soc. 1989. P. 68-88.

144. Zheng Xiaobo, Gong Longying, Lu Jiayun Eighteen plant diseases caused by Phytophthora spp. and the pathogen identification in Jiangsu province// Journal of plant pathology. 1995. - 25(1). - P. 84-85.

145. Zook M. K., Kuc J. Induction of Sesquiterpene Cyclase and Supperessin of Squalene Synthetase Activite in Elicitor-Treated or Fungal-Infected Potato Tuber Tissue//Physiol. Mol. Plant Pathology. 1994. - V. 39 - 4. - P.377.112