Поиск, идентификация и изучение экспрессии генов-кандидатов псориатического процесса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Брускин, Сергей Александрович

• Брускин, Сергей Александрович
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Брускин, Сергей Александрович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. ПСОРИАЗ: ХАРАКТЕРИСТИКА ЗАБОЛЕВАНИЯ И ГЕНЕТИКА ПАТОЛОГИИ.

1.1. Клиническая характеристика заболевания.

1.2. Эпидемиология псориаза.

1.3. Генетика псориаза.

1.4. Наследование псориаза.

1.5. Рабочая модель иммунопатогенеза псориаза.

1.6. Триггеры внешней среды.

Глава 2. N-АЦЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ ЧЕЛОВЕКА.

2.1. Гены, кодирующие N-ацетилтрансферазы человека.

2.2. Фенотип ацетилирования.

• 2.3. Полиморфизм гена NAT2.

2.4. Ассоциация фенотипа ацетилирования с различными многофакторными заболеваниями.

Глава 3. ТРАНСКРИПЦИОННЫЙ ФАКТОР АР-1.

3.1. Характеристика транскрипционного фактора АР-1.

3.2. Кожа как система для изучения регуляции и функций АР-1.

3.3. Регуляция АР-1.

Глава 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

4.1. Определение фенотипа ацетилирования.

4.2. Выделение ДНК из крови.

4.3. Разработка микрочипа быстрого скрининга генотипа и установления фенотипа ацетилирования у больных псориазом.

4.4. Определение генотипа ацетилирования на микрочипах.

4.5. Мультиплексная полимеразная цепная реакция.

4.6. Гибридизация меченого ПЦР-продукта на микрочипе.

4.7. Забор, хранение и гомогенизация образцов кожи.

4.8. Выделение РНК кисло-фенольным методом.

4.9. Выделение РНК на колонках Qiagen.

4.10. Обратная транскрипция.

4.11. Полуколичественная полимеразная цепная реакция.

4.12. Полимеразная цепная реакция в реальном времени.

4.13. Определение активности каспазы-3 в образцах кожи колориметрическим методом.

4.14. Определение содержания белка р53 в образцах кожи методом Вестерн-блот гибридизации.

4.15. Экстракция белков для изофокусировки и электрофореза.

4.16. Двумерный электрофорез.

4.17. Анализ изображений.

4.19. Идентификация белков.

4.20. Процедуры молекулярного клонирования.

4.21. Биоинформационный анализ и базы данных.

4.22. Статистическая обработка данных.

ГЛАВА 5. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

5.1. Сравнительное изучение фенотипа ацетилирования и полиморфизма гена NAT2.

5.2. Полиморфизм гена NAT2 и его ассоциация с псориазом.

5.3. Изменение некоторых апоптических медиаторов и эффекторов в коже у больных псориазом.

5.4. Компоненты транскрипционного фактора АР-1 как гены - кандидаты при псориазе.

5.5. Анализ уровней экспрессии генов, кодирующих компоненты транскрипционного фактора АР

5.6. Идентификация новых белков, участвующих в развитии очага поражения у больных псориазом.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Поиск, идентификация и изучение экспрессии генов-кандидатов псориатического процесса»

Псориаз - заболевание кожи, является сложной генетически обусловленной патологией, в проявлении которой задействованы большие группы (сети) взаимодействующих генов/белков. При этой патологии запуск патологического процесса происходит внешними триггерами окружающей среды (психо - эмоциональные стрессы, инфекции и пр.). Патология на данный момент неизлечима, а лечение направлено на увеличение периодов ремиссии и на снижение тяжести болезни. В среднем псориазом страдает 3% мирового населения, причем имеется четкая регионально-этническая дифференциация распространенности заболевания с пиком среди европеоидных этнических групп. Псориаз редко приводит к летальному исходу, однако существенно влияет на качество жизни пациентов и часто приводит к инвалидности. В последнее время псориазом болеет все больше молодежи, что впоследствии скажется на потере трудоспособности части взрослого населения России, поэтому необходимо уже сейчас начинать разработку эффективных терапий и ранней диагностики псориаза.

Развитие любого мультифакторного заболевания обусловлено двумя основными детерминантами - генетической предрасположенностью и запускающими заболевание триггерами. Локусы, связанные с псориазом, локализованы, по крайней мере, на 8 различных хромосомах и обозначаются как PSORS (Psoriasis Susceptibility) PSORS1 - PSORS9.

Важным является вопрос, касающийся роли триггеров внешней.среды в патогенезе мильтифакторных заболеваний. Некоторые из данных триггеров (например, инфекции) могут приводить к различному уровню экспрессии цитокинов у различных индивидуумов. Другие могут влиять на эпигенетические модификации (например, возможно опосредованные RUNX).

Псориаз может быть спровоцирован стимулами внешней среды, такими как инфицирование стрептококком, повреждение (феномен Кебнера), стресс (нейропептиды), курение и алкоголь.

Характер питания и лекарственные препараты также могут провоцировать многофакторные заболевания- Среди токсинов N-нитросоединения являются основными кандидатами на роль триггеров многофакторных заболеваний. Поэтому является важным изучение полиморфизма генов системы биотрансформации ксенобиотиков.

Так как псориаз обусловлен разрегулированной работой генетического аппарата, то эффективным методом в разработке подходов для диагностики, лечения и создания лекарственных препаратов является? поиск критических звеньев патологического процесса, а именно, генов-кандидатов и соответствующих белковых продуктов. Если генетические исследования много факторных заболеваний продвинулись в достаточной: степени? как в России, так и за рубежом, то применение постгеномных технологий с целью выявления биомаркеров и исследования патогенеза данной патологии остаются задачей ближайшего будущего. К настоящему моменту, по существу, не опубликовано работ по комплексному использованию транскриптомики и протеомики для изучения псориаза. Благодаря стремительному развитию геномных и постгеномных технологий, пользуясь литературными источниками и базами данных, можно выделить известные ассоциированные с данными патологиями гены, на основании компьютерных исследований, составить карты и сети, содержащие гены-кандидаты, и выделить подпроцессы, которые могут являться критическими в развитии патологий. Далее необходимо это экспериментально проверить с помощью стандартных молекулярно-биологических методов.

Цель работы: провести поиск, выявить и изучить экспрессию генов-кандидатов при псориазе.

Задачи:

1. Изучить возможную ассоциацию ферментов систем деградации ксенобиотиков у больных псориазом, на примере гена NAT2.

2. Изучить изменение экспрессии генов В АХ, BCL-2, CASP3 и TP 53 при псориазе.

3. С использованием методов информационной биологии определить круг генов-кандидатов патогенеза при псориазе.

4. Проанализировать уровни экспрессии генов, кодирующих компоненты транскрипционного фактора API в пораженной псориазом коже.

5. Идентифицировать белки, участвующие в развитии очага поражения у больных псориазом.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Брускин, Сергей Александрович

выводы

1. Проведенный биоинформационпый анализ сетевых взаимодействий генов позволил отобрать гены, кодирующие белки-компоненты транскрипционного фактора АР-1, как возможные гены, влияющие на развитие патологического процесса при псориазе.

2. Показано, что в отличие от корреляции скорости ацетилирования с предрасположенностью к другому многофакторному заболеванию системной красной волчанке, нами не показана ассоциация между псориазом и скоростью ацетилирования. Тем не менее, полиморфное сочетание 282С/Т 341 С/С 481 С/Т 590G/A 803A/G 857А/А показало ассоциацию с заболеванием.

3. Определение соотношения транскриптов генов BAX/BCL2 до и после успешного лечения у больных псориазом дает основание считать, что это соотношение может быть маркером степени тяжести псориатического процесса.

4. Проведено количественное измерение экспрессии генов JUNB, JUND nATF-4 с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени, в результате чего было экспериментально показано изменение экспрессии данных генов в пораженной псориазом коже.

5. С помощью протеомного анализа образцов псориатической кожи установлены 10 маркерных белков, присутствующих только в пораженной коже. Данные белки могут рассматриваться как потенциальные мишени действия фармакологических препаратов при лечении псориаза.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Заболевания с наследственной предрасположенностью делят на две группы: моногенные и полигенные. Моногенные заболевания развиваются вследствие изменений лишь в одном гене, которые приводят к возникновению патологического процесса. Как правило, ген, вовлеченный в патогенез моногенных заболеваний, достаточно легко идентифицируется и для успешного лечения таких болезней одно и тоже лекарство можно применять для всех индивидуумов. Однако такой подход не применим для лечения сложных, называемых также многофакторными, патологий, в развитии которых участвует целый ряд генов, полиморфные варианты которых определяют риск и тяжесть заболевания.

Изучение этиологии, патогенеза, а также генетический анализ многофакторных заболеваний - трудные задачи. Ввиду того, что такие патологии обусловлены сочетанным влиянием многих аллеломорфов разных локусов, наблюдается широкий полиморфизм патологических состояний, т.е. наблюдается непрерывный спектр переходов от субклинических форм к формам с ярко выраженными клиническими симптомами. Истинная тяжесть заболевания определяется индивидуальной клинической картиной пациента, которая обусловлена уникальностью процессов метаболизма каждого индивидуума, определяемой его генетическим статусом.

Поиски генетических маркеров, наличие которых в организме обусловливает восприимчивость организма человека к определенному заболеванию, ведутся на протяжении не одного десятка лет и имеют большое значение. Это объясняется тем, что только генетический подход позволяет приблизиться к пониманию биологической сущности заболеваний, а получаемые при таком подходе данные дают возможность выделять группы риска развития исследуемой патологии. При этом следует принимать во внимание и индивидуальный полиморфизм генов, продукты которых могут и не иметь прямого отношения к данной патологии, а именно, индивидуальные генетические особенности организма, определяющие кинетику метаболических превращений лекарственных препаратов, и, следовательно, гетерогенность в реакции пациентов на лекарственные препараты, а также в отношении побочных эффектов лекарственных препаратов. Факторы индивидуального ответа пациента на применение лекарственных препаратов, как и факторы индивидуальной предрасположенности человека к различным заболеваниям, требуют разработки научных основ для определения критериев соответствующей лекарственной терапии для каждого отдельного пациента.

Многофакторные хронические воспалительные заболевания, затрагивающие барьерные органы, к числу которых относятся псориаз, атопический дерматит, болезнь Крона, астма и другие, хотя и различаются в отношении их общей патофизиологии, тем не менее, обладают некоторыми общими ключевыми характеристиками, включающими рецидивность воспаления и пораженные органы. Более того, области генетического сцепления, которые были идентифицированы в независимых исследованиях, часто перекрываются.

В наших исследованиях в качестве модельной многофакторной патологии выступает заболевание псориаз. Оно имеет все атрибуты многофакторной патологии - запускается триггерами внешней среды у индивидуумов с генетической предрасположенностью. Основные направления молекулярно-генетических исследований патогенеза этого заболевания заключены в идентификации ключевых генов патогенеза и соответствующих им белков, как основных мишеней для разработки новых подходов к лечению.

Проведенное исследование показало, что фенотип ацетилирования зависит от генотипа Ы-ацетилтрансферазы-2, установлена связь между полиморфизмом гена и активностью фермента NAT2. Также мы показали возможность использования полученного в сотрудничестве с Центром биологических микрочипов ИМБ РАН биологического микрочипа для определения генотипа NAT2 и предсказания соответствующего ему фенотипа. Хотя нам не удалось выявить ассоциации между фенотипом ацетилирования и риском развития заболевания (доля медленных ацетиляторов в группе больных и здоровых достоверно не различалась), мы, тем не менее, выявили ассоциацию с полиморфным сочетанием 282С/Т 341 С/С 481 С/Т 590G/A 803A/G 857А/А в гене NAT2, р<0.01)

На основании произведенного нами анализа литературных данных мы предположили о возможном изменении экспрессии ряда генов, которые являются основными медиаторами или эффекторами апоптоза. В, числе этих генов: В АХ, BCL-2, CASP-3 и TP 53. Определение уровня экспрессии этих генов мы проводили в пораженной коже больных псориазом до и после лечения пациента. Лечение проводилось препаратом «Глутоксим®» с иммуномодулирующим действием.

В группе больных псориазом с эффективным лечением, соотношение мРНК генов BAXIBCL-2 в пораженной коже в сравнении с этим же участком после успешного лечения изменилось достоверно (р<0.01). Это говорит о том, что данный параметр может являться достаточно эффективным критерием как состояния патологического процесса, так и эффективности лечения.

Каспаза-3, как уже отмечалось ранее, является одной из ключевых эффекторых каспаз. Активность каспазы-3 у различных больных псориазом индивидуальна и не выявляет никакой закономерности.

На основании произведенного нами анализа литературных данных и баз данных мы идентифицировали ряд генов, которые в контексте с вышеизложенным представляются важными для исследования. В их числе

114 гены, кодирующие транскрипционный фактор АР-1 (C-JUN, JUNB, JUND, C-FOS, FOSB, FRA-1 и FRA-2 и др.)- Идентификация белков, кодируемых перечисленными генами, является важным аспектом проводимых в настоящее время исследований в связи с тем, что именно они являются основными мишенями для разработки новых подходов к лечению псориаза.

С помощью метода ПЦР в реальном времени мы показали увеличение экспрессии генов JUNB и JUND в коже больных псориазом. Это говорит о том, что данный параметр может являться достаточно эффективным критерием как состояния патологического процесса, так и эффективности лечения.

С помощью протеомного анализа образцов псориатической кожи были установлены 10 маркерных белков, присутствующих только в пораженной коже и отсутствующие в непораженной коже у больных псориазом. Данные белки могут рассматриваться как потенциальные мишени действия фармакологических препаратов при лечении псориаза.

Теория цитокиновой сети, для объяснения возникновения псориаза, сформулирована свыше 15ти лет назад [Nickoloff, 1991]. Согласно этой теории, именно цитокины, а не другие, небелкового типа медиаторы воспаления, такие как эйкозаноиды, руководят многоклеточными взаимодействиями, которые происходят среди различных иммуноцитов, таких как дендритные клетки и Т-клетки, а также перекрестным взаимодействие между иммуноцитами и эпидермальными кератиноцитами, что в итоге приводит к образованию псориатической бляшки. В новых работах того же автора [Nickoloff, 2007] сообщается, что псориаз является результатом взаимодействий между иммунными клетками и кератиноцитами в коже. Природа этих сигналов стала в настоящее время более понятной, выявилась потенциальная роль IL-23 и Thl7 ответов.

В настоящее время па новых моделях начинают выявляться механизмы регуляции патогенеза зависимых от Т-клеток хронических воспалительных заболеваний [Sugiyama et al, 2005] постулируется, что помимо адаптивной

115 иммунной системы, клетки врожденной иммунной системы, включающие нейтрофилы, моноциты, макрофаги, антиген-презентирующие клетки и Т лимфоциты, а также натуральные киллеры, также вовлечены в патогенетические пути при псориазе [Bos et al, 2005; Gaspari et al, 2006].

В последние годы основное внимание уделялось разработке адекватных моделей, на которых в настоящее время ведутся работы по идентификации этапов развития псориатического процесса. Это различные трансгенные, накаутированные или реконструированные модели, например иммунодефицитные SCID (Severe combined, immunodeficiency) - мыши с трансплантированной на них вовлеченной (с видными поражениями) или невовлеченной (без визуальных поражений) псориатической кожей. [Gudjonsson et al, 2007]. Несмотря на определенные ограничения, эти модели позволяют отразить ряд аспектов псориатического процесса.

Таким образом, если ранее изучение псориаза заключалось в измерении параметров клеточных инфильтратов, то в настоящее время начинается новый уровень исследований, направленных на изучение молекулярных путей патогенеза при псориазе и идентификацию белковых мишений для фармакологического эффекта. В этих исследованиях важнейшее значение имеет выявление механизмов регуляции экспрессии всех генов, задействованных в сложной сети, участвующей в развитии псориатического процесса.

Недавно открытые новые регуляторные механизмы в патогенезе хронических воспалительных кожных заболеваний свидетельствуют о сложности регуляции экспрессии генов, вовлеченных в патогенез [Sonkoly et al, 2007].

Среди псориаз-специфических микроРНК, т.е. miRNAs, со сверхэкспрессией при псориазе, идентифицирована кератиноцит -специфическая miRNA (miR - 203) и лейкоцит - специфическая miRNA (miR - 146). В панели из 21 различных органов и тканей человека, miR - 203 проявляет высокую специфичность экспрессионных профилей именно в коже.

Эти результаты свидетельствуют о том, что нарушение регуляция на уровне микроРНК также вовлекается в патогенез псориаза и вносит свой вклад в дисфункцию взаимодействия между резидентными и инфильтрирующими клетками в коже.

Данные, полученные нами при анализе экспрессии генов-кандидатов патогенеза при псориазе, могут способствовать идентификации новых мишеней лекарственных препаратов для лечения заболевания.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Брускин, Сергей Александрович, 2008 год

1. Akerblom Н. К., Vaarala О., Hyoty Н., Iloncn J. and Knip М. (2002). Environmental factors in the etiology of type 1 diabetes.// Am J Med Genet.-V.115(1).- P.18-29.

2. Angel P, Imagawa M, Chiu R, Stein B, Imbra RJ, Rahmsdorf HJ, Jonat C, Herrlich P, Karin M. (1987) Phorbol ester-indueible genes contain a common cis element recognized by a TPA-modulated trans-acting factor.// Cell.-V.49(6).-P.729-39.

3. Angel P, Karin M. (1991). The role of Jun, Fos and the AP-1 complex in cell-proliferation and transformation.// Biochim Biophys Acta.- V. 1072(2-3).-P.129-157.

4. Angel P, Szabowski A, Schorpp-Kistner M. (2001) Function and regulation of AP-1 subunits in skin physiology and pathology.// Oncogene.-V.20(19).-P.2413-23.

5. Angel P, Szabowski A. (2002) Function of AP-1 target genes in mesenchymal-epithelial cross-talk in skin.// Biochem Pharmacol.- V.64(5-6).-P.949-56.

6. Bach J. F. (2002). The effect of infections on susceptibility to autoimmune and allergic diseases.// N Engl J Med.- V.347(12).- P.911-20.

7. Baer A. N., Woosley R. L. and Pincus T. (1986). Further evidence for the lack of association between acetylator phenotype and systemic lupus erythematosus.// Arthritis Rheum.- V.29(4).- P.508-14.

8. Barker J. N. (2001). Genetic aspects of psoriasis.// Clin Exp Dermatol.- V.26(4).- P.321-5.

9. Bhalerao J. and Bowcock A. M. (1998). The genetics of psoriasis: a complex disorder of the skin and immune system.// Hum Mol Genet.- V.7(10).-P.1537-45.

10. Bigler C. F., Norris D. A., Weston W. L. and Arend W. P. (1992). Interleukin-1 receptor antagonist production by human keratinocytes.// J Invest Dermatol.- V.98(l).- P.38-44.

11. Bonifati C, Ameglio F. (1999) Cytokines in psoriasis.// Int J Dermatol.- V.38(4).-P.241-51.

12. Bos J. D. and De Rie M. A. (1999). The pathogenesis of psoriasis: immunological facts and speculations.// Immunol Today.- V.20(l).- P.40-6.

13. Bos JD, de Rie MA, Teunissen MB, Piskin G. (2005) Psoriasis: dysregulation of innate immunity. //Br J Dermatol.- V.152(6).-P.1098-107.

14. Bowcock A. M. and Cookson W. O. (2004). The genetics of psoriasis, psoriatic arthritis and atopic dermatitis.// Hum Mol Genet.- V.13 Spec No 1.-P.R43-55.

15. Bradford M. M. (1976). A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.// Anal Biochem.- V.72.- P.248-54.

16. Brandrup F. (1984). Psoriasis in first-degree relatives of psoriatic twins.// Acta Derm Venereol.- V.64(3).- P.220-6.

17. Broder S. and Venter J. C. (2000). Whole genomes: the foundation of new biology and medicine.// Curr Opin Biotechnol.- V.l 1(6).- P.581-5.

18. Burden A. D., Javed S., Bailey M., Hodgins M., Connor M. and Tillman D. (1998). Genetics of psoriasis: paternal inheritance and a locus on chromosome 6p.// J Invest Dermatol.- V.l 10(6).- P.958-60.

19. Capon F., Dallapiccola B. and Novelli G. (2000). Advances in the search for psoriasis susceptibility genes.// Mol Genet Metab.- V.71(l-2).- P.250-5.

20. Capon F., Munro M., Barker J. and Trembath R. (2002). Searching for the major histocompatibility complex psoriasis susceptibility gene.// J Invest Dermatol.- V.l 18(5).- P.745-51.

21. Carroll J. M., Romero M. R. and Watt F. M. (1995). Suprabasal integrin expression in the epidermis of transgenic mice results in developmental defects and a phenotype resembling psoriasis.// Cell.- V.83(6).- P.957-68.

22. Cascorbi I., Brockmoller J., Mrozikiewicz P. M., Muller A. and Roots I. (1999). Arylamine N-acetyltransferase activity in man.// Drug Metab Rev.-V.31(2).- P.489-502.

23. Chen L, Glover JN, Hogan PG, Rao A, Harrison SC. (1998) Structure of the DNA-binding domains from NFAT, Fos and Jun bound specifically to UNA.// Nature.- V.392(6671).-P.42-8.

24. Chen L., Glover J. N., Hogan P. G., Rao A. and Harrison S. C. (1998). Structure of the DNA-binding domains from NFAT, Fos and Jun bound specifically to UNA.// Nature.- V.392(6671).- P.42-8.

25. Chinenov Y, Kerppola TK. (2001) Close encounters of many kinds: Fos-Jun interactions that mediate transcription regulatory specificity.// Oncogene.-V.20(19).- P.2438-52.

26. Curran T, Peters G, Van Beveren C, Teich NM, Verma IM. (1982) FBJ murine osteosarcoma vims: identification and molecular cloning of biologically active proviral DNA. //J Virol.- V.44(2).-P.674-82.

27. Daly A. K. (2003). Pharmacogenetics of the major polymorphic metabolizing enzymes.// Fundam Clin Pharmacol.- V.17(l).- P.27-41.

28. Danese S., Sans M. and Fiocchi C. (2004). Inflammatory bowel disease: the role of environmental factors.// Autoimmun Rev.- V.3(5).- P.394-400.

29. Duffy D. L., Spelman L. S. and Martin N. G. (1993). Psoriasis in Australian twins.// J Am Acad Dermatol.- V.29(3).- P.428-34.

30. Elder J. Т., Nair R. P., Guo S. W., Henseler Т., Christophers E. and Voorhees J. J. (1994). The genetics of psoriasis.// Arch Dermatol.- V. 130(2).-P.216-24.

31. Evans W. E. and Johnson J. A. (2001). Pharmacogenomics: the inherited basis for interindividual differences in drug response.// Annu Rev Genomics Hum Genet.- V.2.- P.9-39.

32. Farber E. M., Nail M. L. and Watson W. (1974). Natural history of psoriasis in 61 twin pairs.// Arch Dermatol.- V. 109(2).- P.207-11.

33. Gaspari AA. (2006) Innate and adaptive immunity and the pathophysiology of psoriasis. //J Am Acad Dermatol.- V.54(3 Suppl 2).-P.S67-80.

34. Gilbert S. Omenn A. G. M. (2003). Integration of Pharmacogenomics into Medical Practice. Pharmacogenomics. A. R. Mark: 135-161.

35. Grant D. M., Hughes N. C., Janezic S. A., Goodfellow G. H., Chen H. J., Gaedigk A., Yu V. L. and Grewal R. (1997). Human acetyltransferase polymorphisms.// Mutat Res.- V.376(l-2).- P.61-70.

36. Groves R. W., Mizutani H., Kieffer J. D. and Kupper T. S. (1995). Inflammatory skin disease in transgenic mice that express high levels of interleukin 1 alpha in basal epidermis.// Proc Natl Acad Sci U S A.- V.92(25).- P. 11874-8.

37. Gruaz-Chatellard D., Baumberger C., Saurat J. H. and Dayer J. M. (1991). Interleukin 1 receptor antagonist in human epidermis and cultured keratinocytes.// FEBS Lett.- V.294(l-2).- P. 137-40.

38. Gudjonsson JE, Johnston A, Dyson M, Valdimarsson H, Elder JT. (2007) Mouse models of psoriasis.// J Invest Dermatol.- V.127(6).-P. 1292-308.

39. Guillaudeux Т., Janer M., Wong G. K., Spies T. and Geraghty D. E. (1998). The complete genomic sequence of 424,015 bp at the centromeric end of the HLA class I region: gene content and polymorphism.// Proc Natl Acad Sci U S A.- V.95(16).- P.9494-9.

40. Gunnarsson I., Kanerud L., Pettersson E., Lundberg I., Lindblad S. and Ringertz B. (1997). Predisposing factors in sulphasalazine-induced systemic lupus erythematosus.// Br J Rheumatol.- V.36(10).- P. 1089-94.

41. Hagmeyer BM, Angel P, van Dam H. (1995) Modulation of AP-1/ATF transcription factor activity by the adenovirus-ElA oncogene products.// Bioessays.- V.17(7).-P.621-9.

42. Hazzalin С A, Mahadevan LC. (2002) MAPK-regulated transcription: a continuously variable gene switch?//Nat Rev Mol Cell Biol.- V.3(l).-P.30-40.

43. Hess J, Angel P, Schorpp-Kistner M. (2004) AP-1 subunits: quarrel and harmony among siblings.// J Cell Sci.- V.l 17(Pt 25).-P.5965-73.

44. Hill CS, Wynne J, Treisman R. (1994) Serum-regulated transcription by serum response factor (SRF): a novel role for the DNA binding domain. //EMBO J.- V. 13(22).-P.5421-32.

45. Horrocks C., Holder J. E., Berth-Jones J. and Camp R. D. (1997). Antigen-independent expansion of T cells from psoriatic skin lesions: phenotypic characterization and antigen reactivity.// Br J Dermatol.- V. 137(3).- P.331-8.

46. Jones D. A., Yawalkar N., Suh K. Y., Sadat S., Rich B. and Kupper T. S. (2004). Identification of autoantigens in psoriatic plaques using expression cloning.//J Invest Dermatol.- V. 123(1).- P.93-100.

47. Karin M, Liu Z, Zandi E. (1997). AP-1 function and regulation.// Curr Opin Cell Biol.- V.9(2).-P.240-246.

48. Karin M. (1995) The regulation of AP-1 activity by mitogen-activated protein kinases. //J Biol Chem.- V.270(28).-P. 16483-6

49. Kastan M. В., Zhan Q., el-Deiry W. S., Carrier F., Jacks Т., Walsh W.

50. V., Plunkett B. S., Vogelstein B. and Fornace A. J., Jr. (1992). A mammalian cell125cycle checkpoint pathway utilizing p53 and GADD45 is defective in ataxia-telangiectasia.// Cell.- V.71(4).- P.587-97.

51. Kato R. and Yamazoe Y. (2000). History of drug metabolism research in Japan.// Drug Metab Rev.- V.32(l).- P.45-79.

52. Kormeili Т., Lowe N. J. and Yamauchi P. S. (2004). Psoriasis: immunopathogenesis and evolving immunomodulators and systemic therapies; U.S. experiences.// Br J Dermatol.- V.151(l).- P.3-15.

53. Krishnan B. R., Jamry I. and Chaplin D. D. (1995). Feature mapping of the HLA class I region: localization of the POU5F1 and TCF19 genes.// Genomics.- V.30(l).- P.53-8.

54. Krueger J. G. (2002). The immunologic basis for the treatment of psoriasis with new biologic agents.// J Am Acad Dermatol.- V.46(l).- P. 1-23; quiz 23-6.

55. Laemmli UK. (1970) Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4.// Nature.- V.-227(5259).P.680-5.

56. Lander E. and Kruglyak L. (1995). Genetic dissection of complex traits: guidelines for interpreting and reporting linkage results.// Nat Genet.-V.ll(3).- P.241-7.

57. Lee W, Mitchell P, Tjian R. (1987) Purified transcription factor AP-1 interacts with TPA-inducible enhancer elements.// Cell.- V.49(6).-P.741-52.

58. Liu Y, Krueger JG, Bowcock AM. (2007) Psoriasis: genetic associations and immune system changes.// Genes Immun.- V.8(l).-P.l-12.

59. Livak KJ, Schmittgen TD. (2001) Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method.// Methods.- V.25(4).-P.402-8.

60. Lomholt G. (1954). Psoriasis on the Faroe Islands; a preliminary report.// Acta Derm Venereol.- V.34(l-2).- P.92.

61. Luger ТА, Schwarz T. (1990) Evidence for an epidermal cytokine network. //J-Invest Dermatol.- V.95(6Suppl).-P.100S-104S.

62. Maas-Szabowski N, Shimotoyodome A, Fusenig NE. (1999) Keratinocyte growth regulation in fibroblast cocultures via a double paracrine mechanism. /Я Cell Sci.- V.l 12(Pt 12).-P.l843-53.

63. Mallon E. and Bunker С. B. (2000). HIV-associated psoriasis.// AIDS Patient Care STDS.- V.14(5).- P.239-46.

64. Matthews D., Fry L., Powles A., Weber J., McCarthy M., Fisher E., Davies K. and Williamson R. (1996). Evidence that a locus for familial psoriasis maps to chromosome 4q.// Nat Genet.- V.14(2).- P.231-3.

65. Mease P. J., Goffe B. S., Metz J., VanderStoep A., Finck B. and Burge D. J. (2000). Etanercept in the treatment of psoriatic arthritis and psoriasis: a randomised trial.// Lancet.- V.356(9227).- P.385-90.

66. Mechta-Grigoriou F, Gerald D, Yaniv M. (2001) The mammalian Jun proteins: redundancy and specificity. //Oncogene.- V.20(19).-P.2378-89

67. Mohrenweiser H. W. (2003). Pharmacogenomics: Pharmacology and Toxicology in the Genomics Era. Pharmacogenomics. A. R. Mark: 29-49.

68. Nacak M., Aynacioglu A. S., Filiz A., Cascorbi I., Erdal M. E., Yilmaz N., Ekinci E. and Roots I. (2002). Association between the N-acetylation genetic polymorphism and bronchial asthma.// Br J Clin Pharmacol.- V.54(6).-P.671-4.

69. Nickoloff B. J. (1991). The cytokine network in psoriasis.// Arch Dermatol.- V. 127(6).- P.871-84.

70. Nickoloff B. J. and Wrone-Smith T. (1998). Superantigens, autoantigens, and pathogenic T cells in psoriasis.// J Invest Dermatol.- V. 110(4).-P.459-60.

71. Nickoloff B. J., Nestle F. O. (2004). Recent insights into the immunopathogenesis of psoriasis provide new therapeutic opportunities.// J Clin Invest.- V.l 13(12).- P. 1664-75.

72. Nickoloff B. J., Schroder J. M., von den Driesch P., Raychaudhuri S. P., Farber E. M., Boehncke W. H., Morhenn V. В., Rosenberg E. W., Schon M. P. and Holick M. F. (2000). Is psoriasis a T-cell disease?// Exp Dermatol.- V.9(5).-P.359-75.

73. Nickoloff BJ, Qin JZ, Nestle FO. (2007) Immunopathogenesis of psoriasis.// Clin Rev Allergy Immunol.- V.33(l-2).-P.45-56.

74. Obermayer-Straub P., Strassburg C. P. and Manns M. P. (2000). Autoimmune hepatitis.// J Hepatol.- V.32(l Suppl).- P. 181-97.

75. Ockenfels H. M. (2003). Trigger factors for psoriasis.// Hautarzt.-V.54(3).- P.215-23.

76. Ortonne J. P. (1999). Recent developments in the understanding of thepathogenesis of psoriasis.// Br J Dermatol.- V.140 Suppl 54.- P. 1-7.128

77. Peters В. P., Weissman F. G. and Gill M. A. (2000). Pathophysiology and treatment of psoriasis.// Am J Health Syst Pharm.- V.57(7).- P.645-59; quiz 660-1.

78. Plumbe S. (1824). Practical treatise on desease of the skin // Underwood. London.-.

79. Prinz J. C. (2001). Psoriasis vulgaris~a sterile antibacterial skin reaction mediated by cross-reactive T cells? An immunological view of the pathophysiology of psoriasis.// Clin Exp Dermatol.- V.26(4).- P.326-32.

80. Reddy SP, Mossman ВТ. (2002) Role and regulation of activator protein-1 in toxicant-induced responses of the lung.// Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol.- V.283(6).-P.L1161-78.

81. Reidenberg M. M., Levy M., Drayer D. E., Zylber-Katz E. and Robbins W. C. (1980). Acetylator phenotype in idiopathic systemic lupus erythematosus.// Arthritis Rheum.- V.23(5).- P.569-73.

82. Reisman D. and Loging W. T. (1998). Transcriptional regulation of the p53 tumor suppressor gene.// Semin Cancer Biol.- V.8(5).- P.317-24.

83. Sambrook J. and Russell D. W. (2001). Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory; 3rd edition 999 c.

84. Schon M. P. (1999). Animal models of psoriasis what can we learn from them?// J Invest Dermatol.- V.l 12(4).- P.405-10.

85. Shaulian E, Karin M. (2001) AP-1 in cell proliferation and survival. //Oncogene.-V.20(19).-P.2390-400.

86. Shaulian E, Karin M. (2002) AP-1 as a regulator of cell life and death. //Nat Cell Biol.- V.4(5).-P.E131-6.

87. Shen L. X., Basilion J. P. and Stanton V. P., Jr. (1999). Single-nucleotide polymorphisms can cause different structural folds of mRNA.// Proc Natl Acad Sci U S A.- V.96(14).- P.7871-6.

88. Sonkoly E, Wei T, Janson PC, Saaf A, Lundeberg L, Tengvall-Linder M, Norstedt G, Alenius H, Homey B, Scheynius A, Stahle M, Pivarcsi A. (2007) MicroRNAs: novel regulators involved in the pathogenesis of Psoriasis? //PLoS ONE.- V.2(7).-P.e610.

89. Sonnhag C., Karlsson E. and Hed J. (1979). Procainamide-induced lupus erythematosus-like syndrome in relation to acetylator phenotype and plasma levels of procainamide.// Acta Med Scand.- V.206(4).- P.245-51.

90. Sun X., Shimizu H. and Yamamoto K. (1995). Identification of a novel p53 promoter element involved in genotoxic stress-inducible p53 gene expression.// Mol Cell Biol.- V.15(8).- P.4489-96.

91. Takeda A, Higuchi D, Takahashi T, Ogo M, Baciu P, Goetinck PF, Hibino T. (2002) Overexpression of serpin squamous cell carcinoma antigens in psoriatic skin.// J Invest Dermatol. -V.l l8(l).-P.147-54.

92. Teraoka Y., Naruse Т. K., Oka A., Matsuzawa Y., Shiina Т., Iizuka

93. M., Iwashita K., Ozawa A. and Inoko H. (2000). Genetic polymorphisms in the130cell growth regulated gene, SCI telomeric of the HLA-C gene and lack of7association of psoriasis vulgaris.// Tissue Antigens.- V.55(3).- P.206-11.

94. Vansant J., Woosley R. L., John J. T. and Sergent J. S. (1978). Normal distribution of acetylation phenotypes in systemic lupus erythematosus.// Arthritis Rheum.-V.21(2).- P. 192-5.

95. Vogelstein B. and Kinzler K. W. (1992). p53 function and dysfunction.// Cell.- V.70(4).- P.523-6.

96. Wagner EF. (2001) АР-1—Introductory remarks.// Oncogene.-V.20(19).-P.2334-5.

97. Watson W., Cann H. M., Farber E. M. and Nail M. L. (1972). The genetics of psoriasis.// Arch Dermatol.- V. 105(2).- P. 197-207.

98. Wisdom R. (1999) AP-1: one switch for many signals.// Exp Cell Res. V.253(l).-P.180-5.

99. Wong P., Banerjee K., Massengill J., Nowell S., Lang N. and Leyland-Jones B. (2001). Validity of an ELISA for N-acetyltransferase-2 (NAT2) phenotyping.// J Immunol Methods.- V.251(l-2).- P. 1-9.

100. Wrone-Smith T. and Nickoloff B. J. (1996). Dermal injection of immunocytes induces psoriasis.// J Clin Invest.- V.98(8).- P. 1878-87.

101. Zhou Y. and Chaplin D. D. (1993). Identification in the HLA class I region of a gene expressed late in keratinocyte differentiation.// Proc Natl Acad Sci U S A.- V.90(20).- P.9470-4.

102. Zschieschang P., Hiepe F., Gromnica-Ihle E., Roots I. and Cascorbi I. (2002). Lack of association between arylamine N-acetyltransferase 2 (NAT2) polymorphism and systemic lupus erythematosus.// Pharmacogenetics.- V.12(7).-P.559-63.

103. Артамонов В. В., Любченко Л. Н., Шабанов М. А., Немцова М. В., Залетаев Д. В. (2004) Изучение ассоциации полиморфных маркеров гена

104. NAT2 со спорадическим раком молочной железы // Молекулярная биология.-Т.38(3).-С.457-62

105. Вавилин В.А., Макарова С.И., Ляхович В.В., Гавалов С.М. (2002) Ассоциация полиморфизма генов ферментов биотрансформации и детоксикации ксенобиотиков с особенностями бронхиальной астмы у детей // Генетика.- Т.38(4).-С. 539-545.

106. Гра О.А., Глотов А.С., Кожекбаева Ж.М., Макарова О.В., Самочатова Е.В., Заседателев А.С. and Т.В. Н. (2006). Опыт использования биочипов для анализа полиморфных вариантов гена CYP1A1 при лейкозах у детей.// Мед. генетика.- V.46.- Р.34-38.

107. Макарова О. В., Викторова Т. В., Янбаева Д. Г., Корытина Г.Ф., Якупова Э.В., Каримова JI.K. (2003) Полиморфизм генов метаболима ксенобиотиков у рабочих нефтехимических производств // Генетика.- Т. 39(9). С. 1268-1274.

108. Турпаев К.Т. (2006) Роль фактора транскрипции АР-1 в интеграции внутриклеточных сигнальных систем // Молекулярная биология.-Т.40(6).-С.945-961

109. Федорова О.Е., Синицка О.Н., Тихомирова Л.П., Вишневская Я.В., Заседателев А.С. and Т.В. Н. (2006). Анализ точечных мутаций в гене BRCA1 методом гибридизации с гидрогелевыми микрочипами.// Молекулярная биология.- Т.40.- С.31-36.