Исследование аномальных проявлений генетического аппарата человека при псориазе на уровне белковых продуктов генов лейкоцитов и популяционного состава лимфоцитов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Сунцова, Инна Гурьевна

• Сунцова, Инна Гурьевна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Сунцова, Инна Гурьевна

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1 Фенотипические признаки псориаза.

1.2 Роль наследственности и среды в развитии псориаза, (концепции этиологии псориаза).

1.3 Ассоциация генетических и фенотипических признаков псориаза с родителями и сибсами пробандов.

1.4 Особенности иммунного статуса больных псориазом.

1.5 Современные методы лечения псориаза и их эффективность

1.6 Лейкоцитарные белки с молекулярной массой 53 и 43 кД. Информативность использования их как индикаторов аномального проявления генетического аппарата человека при патологии.

Собственные исследования.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1 Растворы и реакти вы.

2.2 Электрофорез белков в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия.

2.2.1 Приготовление образца лейкоцитарных белков.

2.2.2 Электрофоретическое выявление в лейкоцитах белков с молекулярными массами 53 кД и 43 кД.

2.3 Разделение изоэлектрической фокусировкой фракции белков с молекулярной массой 53 кД.

2.3.1 Изоэлектрофокусирование в полиакриламидном геле (первое направление).

2.3.2 Фракционирование электрофорезом по методу Laemmli второе направление).

2.4. Препаративное выделение белковой фракции с молекулярной массой 53 кД элюированием из полоски геля.

2.5. Определение популяционного и субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови больных псориазом по CD-маркёрам (CD3, CD4, CD8, CD 16, CD72) методом проточной цитометрии.

2.6. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Результаты и обсуждение.

3.1 Клиническая характеристика больных псориазом

3.2 Сравнительный анализ представленности белков с молекулярными массами 53 и 43 кД в лейкоцитах периферической крови здоровых доноров и больных псориазом.:

3.2.1 Больные до лечения.

3.2.2 Больные после лечения.

3.2.3 Больные до и после лечения.

3.3. Обследование родственников больных псориазом на ассоциацию с иммуногенетическими маркерами лейкоцитарными белками 53К и 43К.

3.4 Иммунологические обследования больных псориазом.

3.5 Сравнение информативности иммунологических показателей и оценки уровней белков 53 К и 43 К при псориазе.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование аномальных проявлений генетического аппарата человека при псориазе на уровне белковых продуктов генов лейкоцитов и популяционного состава лимфоцитов»

Псориаз является высоко наследуемым (64-72% - Мордовцев В Н., 1977; 80% - Duffy D.L. et al., 1993; -91% - Elder J.T. et al., 1994) и широко распространенным (1-3% в разных популяциях - Ikaheimo I. et al, 1996) хроническим, часто рецидивирующим, полигенным и мультифакториаль-ным заболеванием, связанным с гиперпролиферацией клеток кожи. Не исключается наследуемость только предрасположенности к заболеванию (Ortonne J.Р., 1996), остается неясным первичное звено патологии, которое в последнее время часто связывают с нарушениями лимфоцитов периферической крови, способных в свою очередь трансформировать кератино-циты инфильтруясь в кожу или инфильтруя ее ростовыми факторами и/или иммуномодуляторами (Wrone-Smith Т., Nickoloff B.J., 1996; Zheng М et al.,1996; SchonM.P. et al., 1997; Valdimarsson H. et al., 1997).

В этой связи исследование аномальных проявлений генетического аппарата человека на уровне биохимических маркеров псориаза в лейкоцитах крови могло осветить некоторые новые аспекты патогенеза псориаза, дать возможность мониторинга динамики заболевания и подбора адекватного лечения по представленности определенных белков в лейкоцитах, а также подсказать подходы к профилактике псориаза в семьях, отягощенных данной патологией.

Псориаз рассматривался в настоящей работе как одно из конкретных патологических изменений фенотипа человека на уровне биохимических изменений лейкоцитов, обусловленное некими аномалиями генетического аппарата человека, некоторые из которых мы и попытались выявить.

Хотя обнаружены десятки показателей (в виде отдельных генов и определенных белков), ассоциированных с псориазом (Beckman L. et al., 1977; Walter H. et al., 1977; Elder et al., 1994; Henseler Т., 1997), болезнь остается практически неизлечимой, поскольку большая часть обследованных больных болеют даже не годы, а десятилетия. Причина состоит в том, что из-за низкой степени ассоциации с псориазом, ранее обнаруженные патологические факторы не смогли стать для врачей четким ориентиром в подборе эффективного лечения. В этой связи выявление аномальной представленности белков с массами 53 и 43 килодальтон у всех обследованных больных псориазом и тенденция к нормализации этих показателей у отдельных больных после лечения позволяют надеяться на возможность подбора адекватного лечения пациентов с псориазом с учетом их индивидуальной генетически обусловленной реактивности.

Псориаз относят к аутоиммунным заболеваниям и активно исследуют его ассоциацию с иммунологическими маркерами (De Pita О. et al., 1996) Получены данные о важной роли иммуноцитов периферической крови в патогенезе псориаза (Wrone-Smith Т., Nickoloff В.J., 1996; Sclion М.Р. et al. 1997; Gilhar A. et al., 1997). Поэтому нами исследована ассоциация белков с массами 53 и 43 килодальтон с параметрами иммунного статуса (популяционный состав лимфоцитов). Цель исследования.

Цель работы состояла в анализе биохимических и иммунологических аспектов патогенеза псориаза и предрасположенности к этой болезни путем исследования аномальных проявлений генетического аппарата человека при псориазе на уровне белков лейкоцитов периферической крови и популяционного состава лимфоцитов, демонстрирующего состояние иммунного статуса.

Задачи исследования:

1) Исследование особенностей белкового состава лейкоцитов периферической крови больных псориазом для выявления высокоассоциированных с патологией факторов, позволяющих анализировать патогенетические характеристики заболевания и наследственную предрасположенность к нему.

2) Выявить гетерогенность больных псориазом на основе ассоциированных с патологией белков.

3)На основании семейного анализа установить способность ассоциированных с псориазом белков достоверно выявлять предрасположенность к заболеванию у родственников больных для организации профилактики псориаза.

4) Исследовать патогенетическое значение иммунопатологии при псориазе ю на основе анализа корреляции между белками, ассоциированными с псориазом, и популяционным составом лимфоцитов, как индикатором клеточного иммунитета. 5) Изучить информативность белков, ассоциированных с псориазом, и параметров клеточного иммунитета для прогноза динамики заболевания, подбора эффективного вида терапии и предупреждения вредных побочных эффектов лечения.

Научная новизна работы.

1) Обнаружены патологические изменения в белковом составе лейкоцитов (ранее неизвестные) и в популяционном составе лимфоцитов периферической крови пациентов с псориазом. Это доказывает, что псориаз нельзя рассматривать только как кожную патологию, связанную с гиперпролиферацией кератин оцитов.

2) Патологические проявления генетического аппарата в лейкоцитах крови всех обследованных больных и их родственников, без клинических признаков псориаза, указывают, что первичным звеном поражения при псориазе являются лейкоциты крови, а не кератиноциты кожи, как считалось ранее.

3) Семейный анализ ассоциации аномального отношения белков 53К/Н2А показал, что дети, один из родителей которых болен псориазом, обнаруживаю! даже при отсутствии клинических признаков псориаза достоверное отличие по критерию /-квадрат и по критерию Стьюдента от группы доноров (11=19, средний возраст 23 года) и от группы новорожденных детей (п=2147). Это доказывает наличие аномалии в генетическом аппарате этих детей, проявляющейся в предрасположенности к псориазу.

4) Выявлена гетерогенность больных псориазом, проявляющаяся в нормальных либо аномальных значениях отношения белков 43К/Н2А в лейкоцитах обследованных пациентов.

Научно - практическое значение работы.

1 Обнаружена ассоциация аномального соотношения белков 53К/Н2А>0,25 с 80% больных псориазом, а аномальные соотношения 53К/Н2А>0,25 и 43К/Н2А<1,6 ассоциированы со всеми обследованными больными псориазом и здоровыми в отношении псориаза родственниками больных.

2. На основании сделанных в диссертационной работе наблюдений появляются следующие возможности для практической медицины: а) осуществлять индивидуальный подход к пациентам при лечении псориаза, ориентируясь на генетически обусловленную индивидуальную реактивность, проявляющуюся в изменении отношений белков 53К/Н2А и 43К/Н2А в лейкоцитах. б) организовать клинические испытания воздействия иммуномодуля-торов с целью профилактики заболеваний псориазом у детей, в семьях, где один из супругов или один из детей болен псориазом, ориентируясь на нормализацию выявленных аномалий в белковом составе лейкоцитов. с) обнаруженная в работе ассоциация 53К/Н2А с иммунопатологией, делает актуальным использование в лечении и профилактике псориаза иммуномодуляторов, причем их индивидуальный подбор облегчается ориентировкой только на два показателя, выявляемых в одном тесте, а не на множество нарушенных при псориазе характеристик иммунного статуса.

Положения, выносимые на защиту:

1) У больных псориазом, а также у их здоровых родственников отношение лейкоцитарных белков 53К/Н2А достоверно повышено по сравнению с этим показателем у здоровых доноров.

2) Все обследованные больные псориазом характеризуются аномальными значениями одного или обоих отношений лейкоцитарных белков 53К/Н2А>0,25; 43К/Н2А<1,6.

3) Выявлена корреляция иммунологических параметров больных псориазом и отношения лейкоцитарных белков 53К/Н2А.

4) Показана возможность использования отношений белков 53К/Н2А и 43К/Н2А для определения эффективности лечения псориаза, ориентируясь на нормализацию этих параметров: 53К/Н2А<0,25; 43К/Н2А>1,6.

5) Выявлена гетерогенность больных псориазом, связанная с представленностью в лейкоцитах белков 43К/Н2А>1,6 либо 43К/Н2А<1,6.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Сунцова, Инна Гурьевна

140 ВЫВОДЫ.

1. Обнаружены патологические изменения в экспрессии генов лейкоцитов периферической крови больных псориазом в виде достоверно повышенного отношения белков 53К/Н2А по сравнению с клинически здоровыми донорами, что доказывает, что псориаз нельзя рассматривать только как кожную патологию, связанную с гиперпролиферацией кератиноцитов.

2. Все обследованные больные псориазом характеризуются аномальными значениями одного или обоих отношений лейкоцитарных белков 53К/Н2А > 0,25; 43К/Н2А< 1,6.

3. Выявлена корреляция отношения 53К/Н2А с иммунологическими параметрами больных псориазом в виде содержания в периферической крови субпопуляций лимфоцитов СДЗ+, СД4+, СД8+ и В-лимфоцитов, что доказывает связь этого соотношения с иммунопатологией при псориазе.

4. Выявление патологических изменений в содержании белков в лейкоцитах крови всех обследованных больных и их родственников (сибсов) без клинических признаков псориаза указывает, что первичным звеном поражения при псориазе являются лейкоциты крови, а не кератиноциты кожи.

5. Показано достоверное отличие детей без клинических признаков псориаза, но один из родителей которых болен псориазом, от группы новорожденных детей и доноров более старшего возраста по представленности в

142

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Исследования аномальных проявлений генетического аппарата человека при патологии и, в частности, при псориазе основаны на широко распространенном убеждении, что именно генетический аппарат определяет нормальную жизнедеятельность клеток и многоклеточных организмов и только создание в нем аномальных отклонений или нарушений за счет вредных воздействий может привести к патологичным клиническим признакам, а также к биохимическим изменениям в клетках, тестируемых лабораторными анализами.

Рассмотрим какое значение имеют для анализа патогенеза псориаза полученные в настоящей работе результаты. 1) Они согласуются с представлениями о полигенной природе этого заболевания, поскольку белки с массами как 53 так и 43 килодальтон могут иметь разный пептидный состав, т.е. быть продуктами нескольких генов. 2) Они показывают, что при псориазе поражаются не только клетки кожи, но и лейкоциты периферической крови. В третьих, аномальное состояние лейкоцитов у здоровых в отношении псориаза сибсов пробандов позволяет утверждать, что первичным пораженным звеном в развитии псориаза является не кожа, а лейкоциты крови. Данные в пользу этого вывода, полученные совершенно другими экспериментальными методами, недавно появились в литературе (Wrone-Smith Т., Nickoloff B.J., 1996; Zheng М. et. al„ 1996; Schon M.P. et.al., 1997; Valdimarsson H. et.al., 1997). Авторы указанных работ приводят данные в пользу того, что первичным звеном в развитии псориаза является нарушение дифференцировки лимфоцитов, которые в свою очередь трансформируют кератиноциты.

Наши результаты показывают, что здоровые в отношении псориаза сибсы пробандов со средним возрастом 10 лет достоверно отличаются по критерию хквадрат и по критерию Стьюдента от группы доноров со средним возрастом 23 года и от новорожденных, как по среднему значению отношения 53К/Н2А, так и по распределению обследуемых лиц по группам нормы 53К/Н2А < 0,25 и группам риска: 0,25 < 53К/Н2А < 0,35 и 53К/Н2А > 0,35. Выявление аномальных белковых показателей у сибсов пробандов, здоровых в отношении псориаза, требует обсуждения проблемы "доклинической диагностики заболеваний и возможности нормокопирования фенотипа", вошедшей в силу ее актуальности в учебники (Бочков Н.П., 1997).

Эта проблема активно обсуждается известными Российскими клиницистами Д.С. Саркисовым, М.А. Пальцевым и Н.К. Хитровым в монографии "Общая патология человека" (1995). Указанные авторы делают вывод о существовании доклинического периода в развитии любых заболеваний - периода, связанного с отставанием клинических проявлений болезни от развития внутренних структурных изменений в организме, которые можно выявлять специальными лабораторными тестами на внутриклеточные модификации.

Одной из иллюстраций этого вывода является наша находка аномального соотношения белков 53К/Н2А в лейкоцитах у сибсов пробандов, когда клинические признаки псориаза отсутствуют.

Полученные в настоящей работе новые данные о патогенезе псориаза, дают основание использовать соотношение 53К/Н2А в качестве показателя для профилактики псориаза в семьях, отягощенных этим заболеванием с помощью методов, нормализующих этот показатель.

Как показано в предыдущих работах В.Д. Папонова, нормализация этого показателя возможна с помощью различных иммуномодуляторов, а также методов очистки крови, с помощью гемосорбентов, которые активно используются в клинике при различных хронических заболеваниях.

Для профилактики заболеваний крайне важным является существование неспецифических индикаторов общей патологии, позволяющих осуществлять отбор (просеивание) индивидов, нуждающихся в уточняющей диагностике и лечении, либо в нормализации фенотипа на основании адекватных для конкретных индикаторов общей патологии лечебных процедур. (Маймулов В.Г., 1998).

На основании многолетнего опыта изучения "донозологических состояний организма" Маймулов В.Г. (1998) утверждает, что при массовых обследованиях наиболее пригодны "показатели неспецифической резистентности организма", в качестве которых упоминаются, в частности: определение концентрации в слюне секреторного иммуноглобулина А,

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Сунцова, Инна Гурьевна, 2000 год

1. Абракманова А.О. Особенности иммунограмм при различных формах псориаза.// Дйссертацйя на соискание ученой степени к.м.н., Алмааты,1994.

2. Альбанова В.И., Мордовцев В.Н., Тимошин Г.Г. Морфологические изменения микроциркулярного русла кожи больных псориазом после лечения.// Вестник дерматологии и венерологии, 1988, №3, с.4-8.

3. Амирова И. А. Комплексное лечение больных псориазом с использованием иммунокоррегирующих средств.// Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., Баку, 1985.

4. Анищенко В.А., Мельников Б.И., Ярулин Р.Г., Русинов В.И., Антонов Ю.В. НЬА антигены I класса у больных вульгарным псориазом.// Иммунология, 1998, №2, с.45-46.

5. Балтабаев М.К. Псориаз (Вопросы диагностики, патогенеза и совершенствования лечения.).// Диссертация на соискание ученой степени д.м.н., Ташкент, 1997.

6. Балтабаев М.К., Хамидов Ш.Л., Федоров С.М., Джалотов К.Д. Спектр нейтральных липидов в периферической крови больных псориазом и хроническом гепатите.// Вестник дерматологии и венерологии, 1995, №5, с.44-49.

7. Балтабаев М.К., Хамидов Ш.А. Состояние клеточного иммунитета у больных псориазом и больных хроническим гепатитом. // Вестник дерматологии и венерологии, 1996, №1, с. 41-45.

8. Батпекова Г.Р. Эффективность клинико-биохимических исследований в диагностике нарушений печени, почек, обмена веществ при псориазе.// Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., Алмааты, 1996.

9. Бочков Н.П. Клиническая генетика.// Москва, "Медицина", 1997.

10. Василевский С. С. Взаимоотношения иммунологических и неиммунологических факторов патогенеза псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1990, №9, с.26-29.

11. Вильчионков А.И., Орлов Е.В., Селезнев Е.И., Васильева И.Я., Дьячков В.А. Лечение псориаза внутрисосудистым лазерным облучением крови. // Вестник дерматологии и венерологии, 1997, №1, с. 36-38.

12. Витряк A.A. Обоснование комплексной терапии псориаза патогенетическими препаратами, корригирующими побочное действие псориаза при радиационной фоторадиохимии. // Диссертация, на соискание ученой степени к.м.н., Москва, 1992.

13. Владимиров В.В., Полев A.B., Чубинидзе Г.Д. Псорантрон в терапии псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1992, №3, с.48-51.

14. Гребенников В.А., Зотова В.В., Анисимова Л.А., Энгель М.Б. Сравнительная эффективность различных вариантов иммунокорректирующеголечения больных псориазом детей на основе кластерного анализа.// Вестник дерматологии и венерологии, 1994, №5, с. 26-28.

15. Гребешок В.Н., Новикова З.И., Акулов Ю.С. Гришко Г.И. Клинические особенности псориаза у детей.// Вестник дерматологии и венерологии, 1994, №5, с. 38-40.

16. Гришко Т.Н. Особенности клиники и и мму но корректирующая терапия псориаза у детей. // Диссертация на соискание ученой степени к.м.Н., Москва, 1989.

17. Довжанский С.И., Слесаренко H.A., Ледванов М.Ю. Реакция бласттрансформации лимфоцитов и интерлейкины у больных красным плоским лишаем и псориазом// Вестник дерматологии и венерологии, 1994, №2, с. 12-17.

18. Зернов A.A. Иммунорегуляторные нарушения при псориазе, их коррекция у больных псориатической эритродермией. // Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., Москва, 1990.

19. Знаменская Л.Ф., Резайкина С.Ю., Ялин М.А. Скрининг иммуномодуляторов хемилюминисцентным методом в тесте in \itro. // Вестник дерматологии и венерологии, 1996, №3, с. 65-67.

20. Исаева М.П. Применение тималина, тимогена, эпиталанина в терапии псориаза с учетом нарушении иммунитета и гемостаза. // Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., С-Петербург, 1990.

21. Йегер Л. Клиническая иммунология и аллергология.// Москва, «Медицина», 1990.

22. Каграманова А.П. Полиамины биохимические маркеры псориаза.// Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., Москва, 1992.

23. Кадумов И.Е. Об активности щелочной фосфатазы сыворотки крови, как факторе, отражающем хронический воспалительный процесс при псориазе.// Вестник дерматологии и венерологии, 1990, №12.

24. Карякина Л.А. Инфракрасные лазерные лучи в терапии тяжелых форм псориаза.// Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., С.Петербург, 1995.

25. Кешелева З.Б. Эпидемиология псориаза, значение иммуногенетических маркёров и иммунных нарушений для оценки риска развития, прогноза течения и эффективности терапии больных.// Диссертация на соискание ученой степени д.м.н., Москва, 1991.

26. Корсун В.Ф., Сталевич A.B., Яговдик Н.З., Левин М.М. О вирусной итиологии псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1999, №4, с. 18-20.

27. Косинец В.Н. Сочетанная иммунокорректирующая терапия аутологичными иммуноцитоксинами и сывороткой крови в комплексном лечении больных распространенным псориазом.// Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., С-Петербург, 1997.

28. Курьянова О.Н., Мазина H.H., Владимиров В.В. Сандимун в лечении больных с тяжелыми формами псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1994, №4, с. 39-42.

29. Левин М.М., Чернышов И.С., Шубчек В.М., Евстафьев В.В., Левин М.Я. Характеристика аутоиммунных процессов при псориазе.// Вестник дерматологии и венерологии, 1995, №3, с. 29-33.

30. Мавров И.И. Роль цитокинов в лечении дерматозов.// Вестник дерматологии и венерологии, 1997, №2, с. 23-27.

31. Маймулов В.Г. Проблемы донозологической диагностики у детей при антропогенном воздействии.// Материалы 3-го конгресса педиатров

32. России "Экологические и гигиенические проблемы педиатрии", Москва, 1998, с.116.

33. Малашенкова Е.В. Оценка взаимосвязи клинико-иммунологических показателей с содержанием лейкоцитарных белков крови р53 и р43 при хронических заболеваниях легких.// Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., Москва, 1996.

34. Малова И.О. Влияние фотохимиотерапии и регуляторных пептидов на иммунологические показатели у больных псориазаом.// Диссертация на соискание ученой степени к.м.н., Москва, 1990.

35. Маркушева Л.И., Волкухин В.А., Полянская Н.П. Адаптивные белки сыворотки крови у больных псориазом как критерий оценки общей реактивности организма.// Вестник дерматологии и венерологии, 1995, №5, с. 60-62.

36. Маркушева Л.И., Самсонов В.А., Фомина Е.Е., Чистякова И.А. Уровень сывороточного фактора некроза опухоли (а) при псориазе.// Вестник дерматологии и венерологии, 1997, №3, с.8-12.

37. Маркушева Л.И., Фомина Е.Е., Кеда Ю.М., Морозова М.С., Панков Ю.А, Антитела к фибробластам кожи человека у больных псориазом.// Иммунология, 1997, №5, с.52-53.

38. Машкиельсон A.M., Рубине А.Я., Векслер Х.М. Иммунологические аспекты патогенеза псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1987, №2, с. 17-22.

39. Милевская А.Я. Информационно-функциональная модель иммунного статуса у больных псориатическим артритом и псориазом.// Вестник дерматологии и венерологии, 1991, №1, с. 52-56.

40. Мордовцев В.Н. Роль наследственных факторов при псориазе.// Диссертация на соискание ученой степени д.м.н., Москва, 1977.

41. Мордовцев В.Н., Прокоров А.Ю., Старков И.В., Меликянц И.Г. Современные концепции по патогенезу псориаза. // Вестник дерматологии и венерологии, 1987, №7, с. 28-33.

42. Мордовцев В.Н., Старков И.В., Забаровский Е.П., Чумаков И.М., Степанова J1.B., Киселев JI.JI. Псориаз: электронно-микроскопические вирусологические молекулярно-биологические исследования.// Вестник дерматологии и венерологии, 1987, №7, с. 4-10.

43. Мордовцев В.Н., Мушет Г.В., Бируков A.B., Скрипник А.Ю. Иммунорегуляторные процессы при псориазе. Проблемма связи состояния иммуной системы с патогенезом кожного поражения.// Терапевт. Арх., 1990, т. 62, №12, с. 98-102.

44. Мордовцев В.Н. Наследственные болезни кожи. Псориаз.// Монография "Наследственная патология человека" под ред. Ю.Е.Вельтищева, Н.П. Бочкова, Москва, 1992, C.93-15Q.

45. Мордовцев В.Н., Мушет Г.В., Альбанова В.И. Псориаз.// Кишинев, Штиица, 1991.

46. Мошкалов A.B., Имякитов E.H. Генетика псориаза. Обзор литературы. // J. Denn. Cosmet. 1995, №1, р. 17-19.

47. Никитин А.Ф., Легостев Б.И., Серлявская И.В. К вопросу о патогенезе псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1990, №5, с.42.

48. Опарин Р.Б. Нарушение иммунного гомеостаза при псориазе у детей.// Сборник научных статей "Актуальные вопросы дерматологии и венерологии", Астрахань, 1998, с. 78-80.

49. Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот (электрофорез и ультрацентрифугирование).// Москва, Наука, 1981, с. 3-20.

50. Папонов В.Д. Динамика генетического аппарата эукариотов (динамика генома).// Успехи современной биологии, т 103, вып 3, с. 354370, 1987.

51. Папонов В.Д. Динамика генетического аппарата эукариотов при дифференциальной транскрипции генома.// Успехй современной биологии, т. 104, вып.2(5), с.167-183, 1987.

52. Папонов В.Д., Громов П.С., Ковалев Л.И., Щеглова Е.Г., Спитковский Д.М., Шишкин С.С. Электрофоретический анализособенностей белкового состава лейкоцитов больных с синдромом Дауна. //Бюлл. эксп. биол. мед. 1985, т.99, №1, с. 50-52.

53. Папонов В.Д., Щеглова Е.Г., Яруллин H.H., Купсик Е.Г. Злектрофо-ретическое выявление белка р53 в лейкоцитах человека.// Бюлл. экспер. биол. и мед. 1985, т. 100, №8, с. 188-191.

54. Папонов В.Д., Радько С.П. Анализ встречаемости белка с массой 53 кДа в лейкоцитах семейных пар, отягощенных детьми с врожденной патологией.// Тезисы докладов 2-го Всесоюзного съезда медицинских генетиков, Алма-ата, 1990, с.339-340.

55. Папонов В.Д., Радько С.П., Штейн Е.В., Щеглова Е.Г. Электрофоре-тический анализ представленности белка 53 К в лейкоцитах крови новорожденных. //Бюлл. эксп. биол. и мед. № 5, с. 527-529, М, 1992.

56. Папонов В.Д., Сунцова И.Г., Опарин Р.Б., Байдакова Г.В. Различные лабораторные методы исследования, как оценка эффективности лечения при псориазе.// Тезисы докладов научно практической конференции, посвященной 75-летию ЦНИКВИ., Москва, 1996, с.64.

57. Папонов В.Д., Сунцова И.Г., Старков И.В., Хапилова В.И. Новые биохимические факторы, ассоциированные с псориазом и иммунопатологией.// VII Российский съезд дерматологов и венерологов, Казань, 1996, с. 165 166.

58. Папонов В.Д., Симонова A.B., Байдакова Г.В., Сигора Г.А., Сунцова И.Г., Хапилова В.И., Мордовцев В.Н. Специфические белки лейкоцитовкрови иммуногенетические маркеры оценки эффективности терапии при псориазе.//Иммунология, 1996, №2, с. 46-48.

59. Повалий Т.М., Логинова Т.К., Шарапова Г.Я., Гусев С.А. Количественный анализ холестерина мембран кератиноцитов эпидермиса при псориазе.// Вестник дерматологии и венерологии, 1997, №1, с. 4-7.

60. Потекаев Н.С., Курдина М.И. Плазмоферез в терапии рефракторных форм псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1990, №9, с. 40-49.

61. Прохоров А.Ю., Мордовцев В.Н. Репарация ДНК у больных псориазом в процессе терапии.// Вестник дерматологии и венерологии, 1991, №1, с. 4-6.

62. Рахматов А.Б., Чигенина И.В. Генетические маркеры псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1990, №5, с. 40-41.

63. Рахматов А.Б. Связь генетических факторов с выражением иммунного ответа у больных псориазом.// Вестник дерматологии и венерологии, 1991, №2, с. 30-34.

64. Резайкина A.B., Самсонов В.А. Способ оценки эффективности ПУ-ВА-терапии больных псориазом.// Вестник дерматологии и венерологии, 1995, №4, с. 49-52.

65. Рогаев Е.И. Генетические факторы и полигенная модель болезней Альцгеймера.// Генетика, 1999, т.35,№11, 1558-1571.

66. Родин В.Н. Клинико-генетические особенности, некоторые аспекты патогенеза и новые методики лечения псориаза.// Диссертация насоискание ученой степени д.м.н., Волгоградская медицинская Академия, 1999.

67. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика// Минск, 1973.

68. Рубине А.Я. Иммунные механизмы патогенеза и обоснование иммунокорригирующей терапии больных псориазом.// Диссертация на соискание ученой степени д.м.н., Рига, 1987.

69. Русак Н.Э. Лечение псориаза селективной фототерапией в сочетании с солевыми ваннами и дитраколом.// Вестник дерматологии и венерологии, 1997, №1, с. 31-33.

70. Рыбкина В.Л. Значение отдельных компонентов системы комплемента в патогенезе псориаза.// Тезисы докладов научно-практической конференции:" Новое в диагностике и лечении заболеваний, передающихся половым путем и болезней кожи Москва 1997.

71. Саркисов Д.С., Пальцев М.А., Хитров Н.К. Общая патология человека.//Москва, "Медицина", 1995.

72. Свердлов Е.Д. Микрокосм генома.// Молекулярная биология, 1999, 33, №6, 917-940.

73. Скрипкин Ю.К., Каламкарян A.A., Мандель А.Ш., Тимошин Г.Г. Основные методы лечений больных псориазом.// Вестник дерматологии и венерологии, 1987, №7, с. 22-28.

74. Соколов Е.И., Глан П.В., Гришина Т.И., Кузьменко Л.Г., Матвеев Н.В., Перламутров Ю.Н., Пухальский А.Л., Сомов Б.А., Яцына И.В.

75. Клиническая иммунология.// Руководство для врачей, Издательство "Медицина", Москва, 1998.

76. Старченко М.Е., Пирятинская В.А., Рябинина М.Е. Леакадин в терапии тяжелых форм псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1995, №1, с. 40-42.

77. Стенина М.А., Зернов A.A., Бирюков A.B., Скрипкин А.Ю. Иммунорегуляторные процессы при псориазе. Проблема связи состояния иммунной системы с патогенезом кожного поражения.// Вестник дерматологии и венерологии, 1990, №2, с98-104.

78. Сунцова И.Г., Байдакова Г.В., Мордовцев В.Н., Сигора Г.А., Папонов В.Д. Особенности белкового состава лейкоцитов периферической крови больных псориазом.// Тезисы докладов 1-го Российского съезда медицинских генетиков. Москва 1994, с.56-57.

79. Тищенко А. Л. Влияние ультрафиолетового облучения на взаимодействие тиамина и пиридоксина у больных псориазом.// Вестник дерматологии и венерологии, 1997, №6, с.9-12.

80. Филимонова H.H., Левчик Н.К. К вопросу о патогенезе псориаза.// Тезисы докладов научно-практической конференции:" Новое в диагностике и лечении заболеваний, передающихся половым путем и болезней кожи ", Москва 1997.

81. Чередеев А.Н. Методы, ошибки и клинические показания к лабораторным иммунологическим исследованиям.// Лабораторное дело, Москва, 1989, №12, с. 4-13.

82. Чередеев А.Н., Ковальчук Л.В. Интерпретация лабораторных показателей при оценке иммунного статуса человека.// Лабораторное дело, Москва, 1991, №2 с. 6-14.

83. Шахтмейстер И.Я. Новые аспекты патогенеза и лечение псориаза.// Клин, фармак. и терап., 1995, т.4, №2, с. 93-94.

84. Шегай М.М., Кешилева З.Б., Анышебаева Г.А. Роль некоторых цитокинов в развитии псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1998, №5, с.7-14.

85. Шилов В.И,, Сергиенко В.И. Новые подходы к изучению патогенеза и лечению псориаза.// Вестник дерматологии и венерологии, 1998, с.49-53.

86. Яковдик Н.З., Петровская Т.Н. Сравнительная оценка чувствительности эпидермиса человека к Gl-кейлону в норме и при псориазе.// III симпозиум по псориазу дерматовенерологов социалистических стран, Москва, 1987, с. 156-157.

87. Ananthakrishnan R., Eckesh L., Walter H. On the genetics of psoriasis: an analisys of Hellgen's data for model of multifactorial inheritance.// Arch Dermatol. 1973, vol.247, pp53-58.

88. Beckman L., Bergdahl K., Cedergren В., Liden S. Genetic markers in psoriasis.//Acta Dermatovener., 1977, v.57, pp. 247-251.

89. Boehncke W.H. Psoriasis and bacterial superantigens formal or causal correlation.// Trends Microbiol. 1996,V4, N12, pp485-489.

90. Bos J.D. The skin as an organ of immunology.// Clin Exp Immunol v. 107, N1,1997, pp 3-5.

91. Bos J.D., Kapsenberg M.L., The skin immunol system ( sis ): Is cellular constituents and their interactions.// Immunol Today, N3, 1997, pp 234-240.

92. Coffey R.J., Derynck R., Wilccox J.N. Production and autoinduction of of transforming growth factor-alfa in human keratinocytes.// Nature, 1987, vol. 328, pp 817-820.

93. De Risi J.L., Iyer V.R., Brown P.O. Exploring the metabolic and genetic control of gene expression on a genomic scale.// Science, 1997, v.278, pp.680686.

94. De Pita O., Ruffelli M., Cadoni S., Frezzollini A., Biava GF., Simom R., Bottari V., De Sanctis G. Psoriasis: comparison of immunological markers in patients with acute and remission phase.// J Dermatol Sci. 1996, V.13, N2, pp 118-124.

95. Debets R., Hegmans J.P., Croughs P., Troost R.J., Prins J.B., Benner R., Prens E.P. The IL-1 system in psoriatic skin: EL-1 antagonist sphere of influence in lesional psoriatic epidermis.// J Immunol., 1997, Y.158, N6, pp 2955-2963.

96. Duffy D.L., Spelman L.S., Martin N.G. Psoriasis in Australian twins.// J. Amer. Acad. Dermatol., 1993, v.29, №3, pp.428-434.

97. Edwards J.H. The simulation of mendelism.// Acta Gen Stat Med, 1960, v.10(1-3), pp 63-70.

98. Enerback.C., Martinsson T., Inerot A,. Evidence that HLA-Cw6 determines early onset of psoriasis, obtained using sequence-specific primers (PCR-SSP).// Acta Derm venerol, 1997, V.77, N4, pp 273-276.

99. Fairbanks G., Streck T.L., Wallach D.F.H. Electroforetic analysis of the major peptides of the erytrocytes membrane.// Biochemistry, 1971, v. 10, pp2607-2617.

100. Falconer D.S. The inheritance of liability to certain diseases, estimated from the incidence among relatives.// Ann Hum Genetics, 1965, v.29, pp51-71.

101. Farber E.M. The genetics of psoriasis. // JAMA, 1972, v219, №8, pp1063-1064.

102. Fogli K., Sogaard H., Herlin T., Kragballe K. Improvement of psoriasis vulgaris after intralesional injections of 15-hydroxyeicosatetraenoic acid (15HETE).// J Amer Acad derm, 1988, vol.18, pp 279-285.

103. Gilhar A., David M„ Ullmann Y., Berkutski T., Kalish R.S. T-lymphocyte dependence of psoriatic pathology in human psoriatic skin grafted to SCID mice.// J. Invest. Dermatol., 1997, v/109, №3, pp. 283-288.

104. Guckian M., Jones C.D., Vestey J.P., Cooper E.J., Dawe R., Gills N.K., Norval M. Immimomodulation at the initiation of phototherapy and photochemotherapy.// Photodermatol. Photoimmunol. Photomed., 1995, v. 11, №4, pp. 163-169.

105. Guzzo C. Recent advances in the treatment of psoriasis.// Dermantol Clin., 1997, v,15,Nl, pp. 59-68.

106. Henseler T. The genetics of psoriasis.// J. Am. Acad. Dermatol., 1997, v.37 (2 pt 3), pp. 1-11.

107. Hieter P., Boguski M. Functional Genomics: It's all how you read it.// Science, 1997, v. 278, pp 601-602.

108. Ikaheimo I., Silvennoinen-Kassinen S., Karvonen J. The friquency of QAP 2.1 is increased in psoriasis vulgaris patients but no unusual linkagebetween QAP/PQA or QBP/PQB1.// Arch Dermatol Res, 1997, V289, N7, pp 373-377.

109. Isaacs I.D., Burroows N., Wing M., Keoodan M.T., Rebello P.R. Humanized anti-CD4 monoclonal antibodeis therapy of autoimmune and inflammatory disease.// Clin Exp Immunol, 1997, V.l 10, N 2, pp 158-166.

110. Jablonska S., Glinski W. Overview of immunology "Psoriasis"// 1992, pp. 261-285.

111. Kapp A., Wokalek H., Schopf E. Involvement of complement in psoriasis and atopic dermantitis measurement of C3a and C5a, C3, C4 and CI inactivator.// Arch Dermatol Res, 1985, v. 277, pp 359-361.

112. Kaur I., Handa S., Kumar B. Natural history of psoriasis: a study from the Indian subcontinent.// J. Dermatol., 1997, v.24, №4, pp. 230-234.

113. Kaur I. Oral lesions in psoriasis.// Int. J. Dermatol, v.36(I), pp 78-79, 1997.

114. Kerkhof P., Lammers A. Intraepidermal accomulation of polymorphonuclear leucocytes in chronic stable psoriasis.// Dennatologia, 1987, v.174, pp224-227.

115. Kovalyov L.I., Naumov V., Samko A., Tsvetkova M., Shishkin S.S. Two-dimentional electroforesis of heart muscle proteins in human cordiomyopathy.// Electroforesis, 1990, v.4, pp333-336.

116. Krohi T. Possible function of 1 (OH)2 25-Dihyobroxyvitamin D3 an active form of vitamin D3 in the differentation and development of skin.// J Invest Dermatol., 1985, v.84, pp459-460.

117. Laemmli U.K. // Nature, 1970, Vol.227, pp. 680-686.

118. Lhend M., Mrouietz V. Phenotipic differences between human blood monocyte subpopulation in psoriasis and atopic dermantities.// J Dermantool, 1997, V.24,№6, pp 370-78.

119. Mahmoud F., Abul B., Morgan G. Differential expression of interferon gamma by mitogen-stimulation peripheral blood mononuclear cell among Kuwaiti psoriasis patients.// J Dermatol, 1999, Jan 26(1), pp23-28.

120. Ortonne J.P. Aetiology and pathogenesis of psoriasis.// Br J Dermatol.,1996, V.135, Suppl.49, pp 1-5.

121. Rogers S. New developments in the treatment of psoriasis.// Ir Med J,1997, v.90, №5, pp 178-179.

122. Schon M.P., Detmar M., Parker C.M. Murine psoriasis like disorder induced by naive CD4+T cells.// Ñat.-Med., 1997, 3(2), pp. 183-188.

123. Smith C. Concordance in twins: methods and interpretation.// Am J Hum Genet., 1974, v.26, pp 454-466.

124. Szczerkowska Dobosz A., Placek W., Szczerkowska Z., Roszkiewicz J. Psoriasis vulgaris with the early and late onset HLA phenotype correlations.// Arch. Immunol. Ther. Exp. Warsz., 1996, v.44, №4, pp 265-269.

125. Teofoli P., De-Pita O., Lootti T.M. Cyclosporin G inhibits proliferation of A 431 cells in a dose-and-time dependent manner comparable to cyclospoorin A.// Skin Pharmacol., 1997, V.10, №2, pp. 79-84.

126. Van de Kerkhof F.C., Gerritsen M.J., De Jong E.M. Transition from symptomless to lesional psoriatic skin. II Clin Exp Dermatol., 1996, v.21, №5, pp 325-329.

127. Valdimarsson H., Sigmundsdottir H., Jonsdottir I. Is psoriasis induced by streptococcal superantigens and maintained by M-protein-spesific T cells that cross-react with keratin?// Clin. Exp. Immunol., 1997, v.107 (suppl.), pp.21-24.

128. Van-Steensel M.A., Steijlen P.M. Genetics of psoriasis.// Clin Dermatol, 1997, V.15, №5, pp 669-675.163

129. Voorhees J.J. Dohi Memorial Lecture. Psoriasis an immunological disease.// J Dermatol, 1996, V.23, №12, pp. 851-857.

130. Walter H., Brachter R., Eckes L., Hilling M. Psoriasis vulgaris and genetic markers.// Hum. Genet., 1977, v.37, №2, pp. 169-181.

131. Watson W., Cann H.M., Farber E.M., Nail M.L. The genetics of psoriasis.// Arch. Dermatol., 1972, v.105, №2, ppl97-207.

132. Wrone-Smith T., Nickoloff B.J. Dermal injection of immunocytes induces psoriasis.//J. Clin. Invest., 1996, v.98, №8, pp. 1878-1887.

133. Yokote R., Tokura Y., Furukawa F., Takigawa M. Decreased responsiveness of T cell to toxic shock syndrome toxin-1 in patients with severe psoriasis at active stage.// Arch Dermatol Res, 1997, V.289, №9, pp 547-550.

134. Zheng M., Sun G., Mrowietz U. The chemotactic activity of T-lymphocytes in response to interleukin 8 is significantly decreased in patients with psoriasis and atopic dermatitis.// Exp. Dermatol., 1996, v.5, №6, 334-340.

135. Zlatkov N.B.,Minev M., Martinova F. HLA System and Therapy of Psoriasis.// Dermatológica, 1993, v.266, ppl56-160.1. NOVOR.00111 1 ' M400 600 FSC-H1. File: NOVOR.OOI Log1. Sample ID: CONTR 1 Pati1. Patient Name: Cas

136. Acquisition Date: 21-Feb-97 Gat«

137. Gated Events: 4916 Tot; X Parameter: FL1-H (Log)

138. Marker Left, Right Events % Gated1. All M11, 62,9910 60984916 100.00 63 1.28o o .c\jo co .o , CM.1. NOVOR.002c1. U 00 ■1. M11. FL1-H10"10

139. File: NOVOR.002 Sample ID: CD3 1 Patient Name:

140. Acquisition Date: 21-Feb-97 Gated Events: 4588 X Parameter. FL1-H (Log)1. Histogram Statistics1.g Data Units: Linear Values Patient ID: N1 Case Number: Gate: G11. Total Events: 10000

141. Marker Left, Right Events % Gated % Total Mean Geo Mean AH 1, 9910 4588 100.00 45.88 221.07 111.58 M1 66, 4614 2868 62.51 28.68 339.56 309.36o o .1. C\Jo <o .o1. CNJ .c ^1. NOVOR.0031. M1

142. File: NOVOR.OO3 Sample ID: CD4 Patient Name:

143. Acquisition Date: 21-Feb-97 Gated Events: 5160 X Parameter: FL1-H (Log)1. Histogram Statistics1.g Data Units: Linear Values Patient ID: N1 Case Number: Gate: G11. Total Events: 10000

144. Marker Lett, Right Events % Gated % Total Mean Geo Mean Ail 1, 9910 5160 100.00 51.60 90.85 39.26 M1 42, 7704 2226 43.14 22.26 191.14 169.92oo <D .1. O C\i .1. NOVOR.0041. So