Изучение полиморфизма RAGE-гена как фактора предрасположенности к развитию псориаза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.11, кандидат медицинских наук Шульман, Анна Яковлевна

• Шульман, Анна Яковлевна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шульман, Анна Яковлевна

Список использованных сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. История изучения генетики псориаза.

1.2. Основные теории этиопатогенеза псориаза.

1.3-. Место псориаза в структуре наследственной патологии человека.

1.4. Причины и риск возникновения мультифакториального заболевания (псориаза).

1.5. Гены и хромосомы, ассоциированные с предрасположенностью к псориазу,.

1.6. Медицинская генетика и псориаз.

1.7. Методы ДНК-диагностики: полимеразная цепная реакция.

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Объем и материалы исследований.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Выделение геномной ДНК из лейкоцитарной фракции крови.,

2.2.2. Полимеразная цепная реакция.

2.2.3. Рестрикционный анализ.

2.2.4. Электрофорез в агарозном геле.,

2.2.5. Клиническое обследование и генеалогический анализ,.,

2.2.6. Статистические методы.

Глава 3. Результаты исследований

3.1. Характеристика групп обследуемых,.

3.2. Результаты изучения взаимосвязи полиморфизма RAGE-гена с риском развития псориаза и особенностями его клинического течения.

3.3. Анализ значения средовых факторов в возникновении псориаза и комплекс профилактических мероприятий, направленных на снижение риска возникновения заболевания.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение полиморфизма RAGE-гена как фактора предрасположенности к развитию псориаза»

Проблема псориаза является одной из самых актуальных в современной дерматологии. Это обусловлено значительной распространенностью заболевания (от 1 до 5% населения планеты), хроническим, нередко тяжелым течением, неясностью этиологии и патогенеза, и, как следствие этого, несовершенством современных методов лечения /12,16,33/. Также следует отметить, что в последние десятилетия отмечается неуклонный рост заболеваемости псориазом, в том числе среди детей /18/. В настоящее время удельный вес больных псориазом среди всех больных дерматозами составляет 12-15%/25/.

О медико-социальной актуальности проблемы псориаза свидетельствуют данные, приводимые Национальным фондом псориаза США (NPF - National Psoriasis Foundation):

• Количество больных: 1996 г.- 6,4 млн. чел., 2001 г. - более 7 млн. чел.

• Средний возраст начала заболевания - 28 лет.

• Дети моложе 10 лет составляют 10-15%.

• Псориатический артрит выявляется в 10-30% случаев.

• Регистрируется 150-260 тыс. новых случаев заболевания в год.

• Расходы на лечение составляют 1,6-3,2 млрд. долл. в год.

• Ежегодно около 400 чел. умирают от связанных с псориазом причин.

• Ежегодно более 1,5 млн. чел. обращаются за медицинской помощью по поводу псориаза.

Эти данные аналогичны таковым по Российской Федерации /24/. В настоящее время число больных псориазом в России составляет приблизительно 3 млн. человек; отмечается тенденция к росту заболеваемости среди лиц трудоспособного возраста, увеличению числа тяжелых, непрерывно рецидивирующих форм заболевания. Сложившаяся ситуация предполагает поиск новых путей профилактики псориаза и создания методов прогнозирования его течения. Научной основой разработки системы медицинской профилактики считаются результаты эпидемиологических исследований. В связи с широким распространением неинфекционной патологии (сердечно-сосудистые, онкологические, кожные заболевания) с 50-х гг. двадцатого столетия термин «эпидемиология» стал применяться не только по отношению к инфекционным болезням. Для того чтобы программа клинической профилактики была эффективной, она должна быть целенаправленной /27/. то есть профилактические мероприятия необходимо проводить в первую очередь в отношении лиц, имеющих генетическую предрасположенность к псориазу.

На современном этапе развития медицины разработка новых этиопатогенетических, фармакогенетических методов лечения заболеваний с генетической предрасположенностью, в том числе и псориаза, становится возможной в значительной мере благодаря выявлению изменений в организме больного на молекулярно - генетическом уровне (точечный нуклеотидный полиморфизм) /22/. Эти методы требуют внедрения новых высокотехнологичных методов исследования, какими являются методы ДНК-диагностики, в том числе, с использованием полимеразной цепной реакции. Благодаря этим технологиям появилась возможность изучать полиморфизм генов, ассоциированных с предрасположенностью к псориазу. Кроме того, по данным литературы подобные исследования в Российской Федерации крайне малочисленны.

Настоящая работа представляет собой проблемно-ориентированное поисковое исследование, создающее научно-технический задел для реализации масштабных проектов в области молекулярно-генетических исследований мультифакториальных дерматозов и развития персонифицированной медицины.

Риск развития псориаза в зависимости от степени родства с больным пробандом составляет при первой степени родства - 5,6-6,3%, при второй степени - 3,1%, при третьей степени - 1,35% /20/. Эти данные получены с использованием популяционно-статистического, клинического и генеалогического методов исследования.

Методологический и технологический прорыв в развитии молекулярной генетики и постгеномных технологий последнего десятилетия позволил проводить исследования на новом - молекулярно-генетическом уровне.

Цель исследования.

Изучение нуклеотидного полиморфизма RAGE-гена в российской популяции как фактора предрасположенности к псориазу с целью прогнозирования течения заболевания.

Задачи исследования:

1. Выявление клинически значимых генетических маркеров псориаза в RAGE-гене человека.

2. Анализ полиморфизма RAGE-гена и его роли в развитии псориаза.

3. Разработка молекулярного метода диагностики предрасположенности к псориазу на основе анализа полиморфизма RAGE-гена.

4. Разработка комплекса профилактических мер, направленных на снижение риска манифестации псориаза.

Научная новизна.

Впервые в Российской популяции изучался полиморфизм RAGE-гена. Предложен и апробирован метод определения генетических маркеров псориаза в соматических клетках (лейкоцитах крови) человека.

На основании анализа результатов клинического обследования, генеалогического анализа и молекулярно-генетических методов исследования выявлены закономерности в клинических проявлениях псориаза в зависимости от типа нуклеотидного полиморфизма RAGE-гена.

На основе полученных данных установлена диагностическая ценность определения полиморфизма RAGE-гена как фактора риска развития заболевания.

Предложен метод молекулярной диагностики предрасположенности к псориазу.

Практическая значимость.

Проведенные исследования обосновывают необходимость внедрения в клиническую практику молекулярных методов диагностики предрасположенности к псориазу. Была сконструирована тест-система для ДНК-диагностики мутаций в RAGE-гене и разработан метод генодиагностики мутаций RAGE-гена как фактора риска развития псориаза.

Внедрен в практику комплекс мер первичной профилактики псориаза, что позволяет снизить риск манифестации заболевания у лиц с генетической предрасположенностью к этому дерматозу. Внедрение результатов исследования.

Результаты исследования используются в учебном процессе на кафедре дерматовенерологии Самарского государственного медицинского университета, в научно-исследовательской работе и учебном процессе Центрального научно-исследовательского кожно-венерологического института.

Апробация работы.

Основные положения и выводы диссертации доложены и обсуждены:

• на научно-практической конференции ФГУ «ЦНИКВИ Росздрава» г.Москва 20 мая 2005 года;

• на IX Всероссийском съезде дерматовенерологов; Москва. 7-10 июня 2005;

• на научно-практической конференции, посвященной 50-летию кафедры кожных и венерических болезней ГОУ ВПО Тверской ГМА 19 мая 2006 года;

• на II Всероссийском конгрессе дерматовенерологов; Санкт-Петербург 25-28 сентября 2007 года.

По материалам исследования опубликовано 7 печатных работ. Основные положения, выносимые на защиту:

Достоверно значимым маркером псориаза в RAGE-гене является сайт 2184A/G.

Ассоциированным с псориазом в сайте 2184A/G является аллель G.

Тяжелая форма вульгарного псориаза, более раннее его начало и анамнестически отягощенная наследственность ассоциированы с аллелем G в сайте 2184A/G RAGE-гена.

Структура и объем работы

Диссертация состоит из введения, обзора литературы и глав, содержащих материалы и методы исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, содержащего 129 источников, из них 35 отечественных и 94 иностранных. Работа изложена на 104 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 14 таблицами и 21 рисунком.

Заключение диссертации по теме «Кожные и венерические болезни», Шульман, Анна Яковлевна

выводы

1. Методами клинического обследования, генеалогического анализа и молекулярно-генетического исследования, проведенными у больных псориазом, их клинически здоровых родственников, а также в группе сравнения (всего - 115 человек) установлено, что в RAGE-гене клинически значимым генетическим маркером псориаза является сайт 2184A/G.

2. Выявлены закономерности клинических проявлений псориаза в зависимости от типа нуклеотидного полиморфизма RAGE-гена. Установлено, что повышенный риск возникновения псориаза ассоциирован с аллелем G в сайте 2184A/G RAGE-гена. Частота возникновения тяжелой формы< псориаза у больных с наличием аллеля G в сайте 2184A/G RAGE-гена в 6,5 раза превышает риск развития тяжелой формы дерматоза у больных псориазом с отсутствуем аллеля G: 50% и 7,69% соответственно. Имеется взаимосвязь между присутствием аллеля G в сайте 2184A/G и вульгарной формой псориаза, а также более ранним началом заболевания.

3. На основании полученных данных о корреляции между различными видами полиморфизма RAGE-гена, возникновением и типом течения псориаза предложен метод молекулярной диагностики предрасположенности к заболеванию этим дерматозом.

4. Разработан комплекс профилактических мер, направленных на уменьшение воздействия неблагоприятных средовых факторов, что будет способствовать снижению риска манифестации псориаза. I

88

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проблема псориаза является одной из самых актуальных в современной дерматологии. Это обусловлено высокой популяционной частотой заболевания, которая в подавляющем большинстве исследований оценивается в 3-5% со значительными колебаниями в зависимости от региона проживания и расовой принадлежности; хроническим, нередко тяжелым течением, неясностью этиологии и патогенеза, а также несовершенством современных методов лечения. В последние годы в Российской Федерации наметилась тенденция к увеличению доли тяжелых, торпидно протекающих, резистентных к различным методам и средствам лечения, инвалидизирующих форм псориаза. Все это делает псориаз актуальной не только медицинской, но и социальной проблемой и обуславливает необходимость дальнейших научных исследований в этой области.

При мультифакториальных заболеваниях с полигеннодетерминируемой наследственной предрасположенностью, к которым относится псориаз, суммарный генетический риск зависит от большого числа факторов и определяется с помощью таблиц эмпирического риска.

В зависимости от степени родства с больным пробандом риск развития псориаза составляет при первой степени родства - 5,6-6,3%, при второй степени - 3,1%, при третьей степени - 1,35%. Эти данные получены с использованием популяционно-статистического, клинического и генеалогического методов исследования.

Методологический и технологический прорыв в развитии молекулярной генетики и постгеномных технологий последнего десятилетия позволил проводить исследования на современном молекулярно-генетическом уровне.

К настоящему времени выявлен ряд генов и хромосом, ассоциированных с предрасположенностью к псориазу (PSORS1- PSORS9, MICA, HLA-B13, HLA-B17, HLA-21 и другие).

Особый интерес представляет исследование по изучению полиморфизма RAGE-гена (Receptor of Advanced Glycation End Products), проведенное в 1999-2002 года Kankova К. и Vasku А., RAGE-ген локализован в коротком плече 6-ой хромосомы (6р21.3) и связан с регуляцией воспалительного процесса, в том числе, при псориатическом артрите, экспрессией рецепторов апоптоза кератиноцитов, антиоксидантной активности клеток. Исследуя полиморфизм гена RAGE среди населения Польши, было установлено, что генотипы G82S, 1704G/T и 2245 A/G не ассоциированы с бляшечным псориазом, в то время как частота аллеля 2184G значительно выше у пациентов с псориазом, чем в контрольной группе. Исследований нуклеотидного полиморфизма гена RAGE в Российской популяции до настоящего времени не проводилось.

Возможность ДНК-диагностики существенно повышает точность определения генетического риска, позволяя перейти от вероятностных моделей к дефинитивному определению генотипов и ожидаемых фенотипов.

Целью исследования явилось изучение нуклеотидного полиморфизма RAGE-гена в российской популяции как фактора предрасположенности к псориазу и прогнозирования течения заболевания.

Для выполнения поставленной цели были определены следующие задачи исследования: выявление клинически значимых генетических маркеров псориаза в RAGE-гене человека; анализ полиморфизма RAGE-гена и его роли в развитии псориаза; разработка молекулярного метода диагностики предрасположенности к псориазу на основе анализа полиморфизма RAGE-гена; разработка комплекса профилактических мер, направленных на снижение риска манифестации данного дерматоза.

Впервые в Российской популяции изучался полиморфизм RAGE-гена. Предложен и апробирован метод определения генетических маркеров псориаза в соматических клетках (лейкоцитах крови) человека.

На основании анализа результатов клинического обследования, генеалогического анализа и молекулярно-генетических методов исследования выявлены закономерности в клинических проявлениях псориаза в зависимости от типа нуклеотидного полиморфизма RAGE-гена.

На основе полученных данных установлена диагностическая ценность определения полиморфизма RAGE-гена как фактора риска развития заболевания.

Создание технологии, предусматривающей возможность определения полиморфизмов генов, ассоциированных с псориазом, может послужить основой для дальнейшего изучения фундаментальных патогенетических механизмов при псориазе и для формирования групп риска с целью рекомендации мер первичной профилактики псориаза (рекомендации по образу жизни, питанию, трудовые рекомендации).

Базовым методом генотипического направления профилактики псориаза является медико-генетическое консультирование, которое включает в себя постановку точного диагноза, определение величины риска повторного возникновения заболевания в семье и интерпритацию генетического прогноза лицу, обратившемуся за консультацией.

В доступной литературе имеются отдельные сведения о влиянии средовых факторов на манифестацию псориаза, но отсутствует системный анализ этих данных и не разработан подход к первичной профилактике заболевания. Таким образом, является актуальным разработка и систематизация рекомендации по первичной профилактике псориаза для лиц, имеющих генетическую предрасположенность к данному заболеванию. Этапы исследования:

• Клиническая характеристика и изучение личного и семейного анамнеза больных псориазом, формирование групп обследуемых;

• Выделение геномной ДНК из лейкоцитов человека, создание банка образцов ДНК;

• Синтез праймеров к 3 мишеням в RAGE-гене, конструирование тест-системы для проведения ПЦР;

• Постановка ПЦР, получение продуктов амплификации;

• Проведение рестрикционного анализа аллельного полиморфизма сайтов RAGE2184A/G, G82S и 1704 G/T с помощью специфических эндонуклеаз рестрикции;

• Статистическая обработка и анализ полученных данных Обследовано 115 человек в возрасте от 6 до 72 лет, из них мужчин было

- 48 (41,7%), женщин — 67 (58,3%). Все обследуемые были распределены на 4 группы: I группа (основная) состояла из больных псориазом (52 человека); II группа (сравнения) - 17 человек, в том числе 9 больных атопическим дерматитом, 5 - красным плоским лишаем, 3 - ихтиозом; III группа состояла из здоровых родственников больных псориазом (39 человек); IV группу (контрольную) составили здоровые добровольцы (7 человек). Родственники пробандов (больных псориазом, через которых осуществлялась регистрация обследуемой семьи), страдающие псориазом, были отнесены в первую группу.

Псориаз легкой степени (PASI<12) тяжести наблюдался у 12,5% пациентов, средней степени тяжести (PASI от 13 до 45) - у 70,83% и тяжелой степени тяжести (PASI>46) - у 16,67% пациентов. Отягощенный по псориазу семейный анамнез был установлен у 40,48% пациентов. В 82,35% случаев была диагностирована вульгарная форма псориаза, в 17,65% артропатическая форма. Средний возраст начала заболевания у пациентов составил 19,1 года: у мужчин — 22,8 года, у женщин — 16,1 года.

Из находившихся под наблюдением 52 пациентов 25 больных связывали возникновение псориаза с длительным пребыванием в стрессовом состоянии или с воздействием нервно-психической травмы. Также среди провоцирующих факторов были выявлены: обострение хронических инфекций, прием лекарственных препаратов, вакцинация, травматизация кожи, смена климатических условий.

В результате проведенных генеалогических исследований было установлено, что большинство респондентов (98,3%) относятся к европеоидной расе.

При клиническом обследовании и генеалогическом анализе, проведенном у родственников пробандов было установлено: -большая часть обследованных родственников имеет первую степень родства с пробандом (97, 3%);

-среди обследованных родственников пробандов больные псориазом составили 11,5%;

-у 64,8% из них заболевание началось в возрасте до 40 лет; -среди родственников пробандов выявлены следующие сопутствующие заболевания с наследственной предрасположенностью: эссенциальная гипертоническая болезнь (5,1%), ишемическая болезнь сердца (4,2%), сахарный диабет II типа (3,8%), атопический дерматит (3,6%).

Материалом для проведения молекулярно-генетических исследований была венозная кровь.

Методы исследования: -клиническое обследование; -генеалогический анализ;

-молекулярно-генетические методы: полимеразная цепная реакция, рестрикционный анализ, метод электрофореза в агарозном геле; -статистические методы;

Каждому пациенту был установлен диагноз с указанием формы псориаза, стадии, сезонности; для артропатического псориаза - с указанием формы и степени активности, рассчитан индекс PASI на момент осмотра. Подробно были изучены и проанализированы данные анамнеза заболевания (первые проявления, развитие заболевания, проведенное лечение).

Сбор генетической информации проводился путем опроса и клинического обследования членов семьи. При составлении родословной велась запись данных о каждом члене рода с указанием его родства по отношению к пробанду.

Затем, используя систему условных обозначений, составляли графическое изображение родословной.

В тест-системе, разработанной нами для определения полиморфизма

RAGE-гена, профиль амплификации представляет собой 40 циклов, проводимых в следующем режиме: 1-й этап - денатурация ДНК. В нашем исследовании денатурации подвергалась геномная ДНК, выделенная из лейкоцитарной массы цельной крови после предварительной отмывки лейкоцитов раствором Канкеля при температуре 93° С длительностью шага 10 секунд; 2-й этап - отжиг (омелинг): в разработанной нами тест-системе отжиг праймеров осуществлялся при температуре 64° С длительностью шага 10 секунд; 3-й этап - элонгация: происходит при повышении температуры до 72° С, с длительностью шага 10 секунд.

Определение полиморфизма-RAGE-гена на основе последовательности гена представленной в GenBank - D28769 проводилось с помощью метода рестрикционного анализа нуклеотидных последовательностей согласно методике, описанной V.Vasku со соавторами (2002).

Сайт RAGE 2184A/G: рестрикцию продуктов амплификации мы проводили в присутствии эндонуклеазы BsmFl из Bacillus stearothermophilus F (New England Biolabs) с целью получения фрагментов длиной 266 и 136 п.о. для аллели А и 174, 136 и 92 п.о. для аллели G.

Продукты амплификации инкубировали при температуре 65°С в течение 4 часов, после чего осуществляли инактивация фермента в течение 20 минут при температуре 80° С.

Сайт RAGE 1704G/T: рестрикцию проводили в присутствии эндонуклеазы Bfal из Bacteroides fragilis (New England Biolabs). Продуктами рестрикции для аллеля G явились участки ДНК длиной 240, 143 и 42 п.о.; для аллеля Т: 240 и 185 п.о.

Продукты амплификации инкубировались в течении 5 часов при 37° С. Инактивация фермента осуществлялась в течение 20 минут при температуре 80° С.

Сайт G82S: рестрикцию продуктов амплификации проводили в присутствии эндонуклеазы AIu I из Arthrobacter luteus (New England Biolabs). При диком (немутантном) типе данного аллеля продуктами рестрикции были фрагменты ДНК длиной 123, 26, 248 п.о; при мутантном типе: 123, 26, 67 и 181 п.о. Продукты амплификации инкубировали при температуре 37°С в течение 4 часов, после чего осуществляли, инактивация фермента в течение 20 минут при температуре 65° С.

Анализ полиморфизма длины полученных рестрикционных фрагментов осуществляли с помощью горизонтального электрофореза в 3%-ном агарозном геле в присутствии маркеров молекулярных масс («СибЭнзим», Новосибирск) от 100 до 1000 п.о. Документирование гелей проводили оптической системой "BIORAD" (USA) и с использованием программы "Гель-Док".

Установлено, что среди больных псориазом (основная группа) с наличием аллеля G в сайте RAGE 2184A/G тяжелая форма заболевания встречалась в

50% случаев, в отсутствии аллеля G - в 7,69%. Частота возникновения тяжелой формы псориаза в группе с наличием аллеля G выше с достоверностью 96,6% (уровень значимости р=0,034). Вульгарная форма псориаза у больных с аллелем G была1 диагностирована в 83,33% случаев, без аллеля G - в 79,31%. Отягощенная по псориазу наследственность у больных с наличием аллеля G в сайте RAGE 2184A/G установлена в 60% случаев, в то время как в отсутствии аллеля G — в 44%. Средний возраст начала заболевания в группе с аллелем G был несколько меньше, чем в группе без аллеля G: 16,6 и 19,92 года, соответственно.

Таким образом, в RAGE-гене относительно риска развития псориаза интерес представляет сайт 2184A/G. Аллель 2184G ассоциирован с псориазом и не ассоциирован с дерматозами из группы сравнения (атопический дерматит, красный плоский лишай, ихтиоз). Частота встречаемости аллеля 2184G достоверно выше в группе больных псориазом, чем в группе с отсутствием клинических признаков заболевания, то есть его можно рассматривать как аллель повышенного риска развития псориаза. Установлена взаимосвязь между наличием аллеля G в сайте 2184A/G и развитием тяжелой вульгарной формой псориаза, более ранним возрастом его манифестации и анамнестически отягощенной по псориазу наследственностью. Корреляции между различными видами полиморфизмов сайтов 1704 G/T и G82S и псориазом не выявлено.

Следовательно, лиц с наличием аллеля G в сайте 2184A/G необходимо отнести в группу повышенного риска развития псориаза и рекомендовать им комплекс профилактических мер.

Для обеспечения целенаправленности профилактических мероприятий в группу скрининга на наличие генетических маркеров псориаза прежде всего должны входить родственники больных псориазом. При обнаружении у обследуемого генетических маркеров псориаза, в частности, аллеля G в сайте 2184A/G RAGE-гена, его относят в группу повышенного риска развития псориаза. В этом случае обследуемого информируют о возможности снижения риска манифестации псориаза, исходя из особенностей его образа жизни, профессии, данных о сопутствующих заболеваниях. С этой целью составляют индивидуальные рекомендации по мерам первичной профилактики псориаза, которые могут включать: профилактику травматизации кожи (физической, химической); санацию очагов хронической инфекции и профилактику респираторных инфекций в период сезонных эпидемий, своевременную медикаментозную коррекцию неврозов и неврозоподобных состояний, исключение токсического воздействия алкоголя, ограничение приема некоторых лекарственных средств, способных вызвать инициацию процесса (бета-адреноблокаторы, тиазидные диуретики, антагонисты кальция, ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента, препараты лития, иммунопрепараты, нестероидные противовоспалительные средства, противомалярийные препараты), рекомендации по рациональному питанию, контролю массы тела и уровня глюкозы крови и другие.

Таким образом, предложенный метод молекулярной диагностики предрасположенности к псориазу позволяет определить группу повышенного риска развития псориаза, возможность целенаправленно рекомендовать индивидуально подобранные профилактические мероприятия и прогнозировать течение псориаза в случае его развития.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шульман, Анна Яковлевна, 2008 год

1. Беляев Г.М. Псориаз. Псориатическая артропатия / Беляев Г.М., Рыжко П.П. М.: МЕДпресс-информ", 2005 - 272с.

2. Бочков Н.П. Клиническая генетика: Учебник. М.: Медицина, 1997. - 228 с.

3. Бочков Н.П. Экологическая генетика человека // Мед. Кафедра: Науч.-практ. Журн. 2003. - Т.З, №7. - С.4-9.

4. Вельтищев Ю.Е. Наследственная патология человека / Вельтищев Ю.Е., Бочков Н.П. -М.,1992. Т.Н. - С. 139.

5. Воробьев А.А. Полимеразная цепная реакция и её применение для диагностики в дерматовенерологии. М.:МИА,2004. - 72 с.

6. Гинтер Е.К. Медицинская генетика. — М.: Медицина,2003. — 428 с.

7. Гланц С. Медико-биологическая статистика. — М.: Практика, 1999.

8. Горбунова В.Н. Молекулярные основы медицинской генетики. — СПб.:Интермедика. -С.199-212.

9. Забаровский Е.Р. Обнаружение экспрессии протоонкогенов в эпидермисе больных псориазом / Забаровский Е.Р., Старков И.В., Мордовцев В.Н., Киселев Л.Л. // Биополимеры и клетка. — 1986. Т.2. - С.212-215.

10. Иллариошкин С.Н. ДНК-диагностика и медико-генетическое консультирование. М.:МИА,2004. - 207 с.

11. П.Кимбол А.Б. Псориаз / Кимбол А.Б., Бергстром К.Г. М.: Практика, 2007 - 152 с.

12. Кожные и венерические болезни: Рук-во для врачей В 2-Х Т. / Под ред. Ю.К.Скрипкина, В.Н.Мордовцева. М.: Медицина, 1999. - Т.2. - С.116-118.

13. Кожные и венерические болезни: Справочник / Под ред. О.Л.Иванова. М.: Медицина, 1997. - С.227

14. Курчанов Н.А. Генетика человека с основами общей генетики. — СПб.:СпецЛит,2006. 175 с.

15. Маркушева Л.И. Метаболизм предшественников нуклеиновых кислот при псориазе: Дис. . д-ра биол. наук. М.,1998. - 271 с. (РУДН).

16. Мерк. Руководство по медицине / Мерк, Шарп. Доум. М.: Мир,1997. - Т.П. - С.522-523, 616-617.

17. Минашкин В.Г. Основы теории статистики / Минашкин В.Н., Козарезова Л.О. М.:Финансы и статистика,2004. - 144 с.

18. Мордовцев В.Н. Заболевания кожи с наследственным предрасположением / Мордовцев В.Н., Алиева П.М., Сергеев А.С. -Махачкала, 2002. 260 с.

19. Мордовцев В.Н. Роль наследственных факторов при псориазе: Дис. . .д-ра мед наук. М., 1976. - 190 с.

20. Мутовин Г.Р. Основы клинической генетики. М.: Высшая школа, 2001.-234 с.

21. Назаренко Л.П. Клинико-генеалогический анализ и области его применения / Назаренко Л.П., Салюкова О.А. Томск: Печатная мануфактура,2004. - 56 с.

22. Новик А.А. Генетика в клинической медицине: Рук-во для врачей / Новик А.А., Камилова ТА., Цыган В.Н. СПб.: Военно-мед.акад.,2001. - 219 с.23.0лисова О.Ю. Современные подходы к ведению больных псориазом // Рос. Мед. Журн. 2004. - Т. 12, №4(204).

23. Пегано Д. Лечение псориаза: Естественный путь. М.:Кудиц-образ,2001. — С. 180-181.

24. Пузырные дерматозы. Псориаз. Современные методы лечения / Под ред. Е.В.Соколовского. СПб.: Сотис,1999. - 134 с.

25. Рахматов А.Б. Связь генетических факторов с выраженностью иммунного ответа у больных псориазом / Рахматов А.Б., Залиляева М.В., Чиченина И.В. и др. Вестн. Дерматол. Венерол. - 1991. - №2. - С.30-33.

26. Руководство по медицинской профилактике / Под ред. Р.Г.Оганова, Р.А.Хальфина. М.:ГЭОТАР-Медиа,2007. - 464с.

27. Старков И.В. Роль некоторых экзогенных и генетических факторов в развитии псориаза: Автореф. дис.канд. мед. наук. — М.,1989. — 16 с.

28. Федоров С.М. Псориаз: клинические и терапевтические аспекты. // Рус. Мед. Журн. 2001.- №11 - С.447.

29. Херрингтон С. Молекулярная клиническая диагностика: Методы / Херринггон С., Макги Дж. М.:Мир,1999. - С.395-402.

30. Хэбиф Т.П. Кожные болезни: диагностика и лечение / Под общ. ред. А.А.Кубановой. М.:МЕДпресс-информ,2006. - 672 с.

31. Шевченко В.А. Генетика человека: Учебник для ВУЗов / Шевченко В .А., Топорина Н.А., Стволинская Н.С. М.: ВЛАДОС, 2004. - 240 с.

32. Шилов В.Н. Псориаз — решение проблемы (этиология, патогенез, лечение). -М.: Изд. В.Н. Шилов, 2001 -304 с.

33. Щипков В.П. Общая и медицинская генетика / Щипков В.П., Кривошеина Г.Н.-М.: Academa,2003. С. 167, 200-206.

34. Ябленик Б.С. Чешуйчатый лишай. М.:Медицина,1964. - С.61-63.

35. Ahangari G. RT-PCR topography of chronic psoriasis skin based on analyse of T-cell receptor В variable region gene usage / Ahangari G., Halapi E., Tehrani MJ. et al // Scand. J. Immunol. 1997. - V.45, n.5. - P.535-540.

36. Allen M.H. A non-HLA gene within the MHC in psoriasis / Allen M.H., Veal C., Faassen A. //Lancet. 1999. - V.353. -P.1589-1590.

37. Allen M.H. Allelic association of the MICA (MHC class I related chain A) gene with psoriasis / Allen M.H., Kondeatis E., Jones A.B. // Exp. Dermatol. -1998. V.7. — P.406-409.

38. Ameen M. Genetic basis of psoriasis vulgaris and its pharmacogenetic potential // Pharmacogenomics. 2003. - V.4, n.3. - P.297-308.

39. Asahina A. Specific nucleotide sequence of HLA-C is strongly associated with psoriasis vulgaris / Asahina A., Akazaki S., Nakagawa H. et al // J. Invest. Dermatol. 1991. - V.97. - P.254-258.

40. Asumalahti K. Coding haplotype analysis supports HSR as the putative susceptibility gene for psoriasis at the MHC PSORS1 locus / Asumalahti K., Veal

41. C., Laitinen T. // Human Molecular Genetics. 2002. - Vol.11, №5. - P.589-597.

42. Asumalahti К. Genetic Analysis of PSORS1 Distinguishes Guttate Psoriasis and Palmoplantar Pustulosis / Asumalahti K., Ameen M., Suomela S. // J. Invest. Dermatol. 2003. - V.120. - P.627-632.

43. Balendran N. Characterization of the major susceptibility region for psoriasis at chromosome 6p21.3 / Balendran N., Clough R.L., Arguello J.R. et al // J. Invest. Dermatol. 1999. - V.l 13. - P.322-328.

44. Barker J.N. Genetic aspects.of psoriasis // Clin. Exp. Dermatol. — 2001. -V.26, n.4. P.321-325.

45. Barker J.N.W.N. Psoriasis: pathophysiology, genetics, and recent research // J. EADV. 2000. - V.14. - P.95.

46. Barker J.N.W.N. The genes that cause psoriasis // Clin. Exp. Dermatol.- 2000. V.25, n.2. - P. 165-166.

47. Beck S. Complete sequence and gene map of a human major histocopatability complex / Beck S., Geraghty D., Inoko H. // Nature. — 1999. -V.401.-P.921-923.

48. Biral A.C. Association of psoriasis with specific alleles of the HLA-B*57 CW*06: CW*06 haplotypes in Brazilian patients: in search of genetic susceptibility / Biral A.C., Cardoso C.B., Magalhaes R.F. et al // Hum. Immunol. -2003.-V.64, lOSuppl. S137.

49. Bowcock A.M. Genetics of psoriasis: The potential impact on new therapies / Bowcock A.M., Barker J.N. // J. Am. Acad. Dermatol. 2003. - V.49.1. P.51-56.

50. Bowcock A.M. The international Psoriasis Genetics Study: Assessing Linkage to 14 Candidate Susceptibility Loci in a Cohort of 942 Affected Sib Pairs / Bowcock A.M., Elder J.T. // Am. J. Hum. Genet. 2003. - V.73. - P.430-437.

51. Burd R.M. Urinary measurement of markers of oxidative damage in psoriasis / Burd R.M., Bleiker Т.О., Cooke M.S. et al // JEADV. 1999. - V.12. -P.336.

52. Burden A.D. Genetics of psoriasis: paternal inheritance and a locus on chromosome 6p. / Burden A.D., Javed S., Bailey M. et al // J. Invest. Dermatol. -1993.-V. 110.- P.958-960.

53. Burden A.D. Identifying a gene for psoriasis on chromosome 6 (Psorsl) // Brit. J. Dermatol. 2000. - Vol. 143, №2. - C.239.

54. Capon F. Searching for the Major Histocompatibility Complex Psoriasis Susceptibility Gene / Capon F., Munro M. // J. Invest. Dermatol. 2002. - V.l 18. -P.745-751.

55. Chang Y.T. A study of candidate genes for psoriasis near HLA-C in Chinese patients with psoriasis / Chang Y.T., Tsail S.F., Lee D.D. // Brit. J. Dermatol. 2003. - V.148. - P.418-423.

56. Chang Y.T. SPRlgen near HLA С is 5unlikely to be a psoriasis susceptibility gene / Chang Y.T., Tsai S.F., Lin M.W. // Exp. Dermatol. - 2003. -№12. -P.307-314.

57. Choi H.B. MICA 5.1 allele is a susceptibility marker for psoriasis in the Korean population / Choi H.B., Han H., Youn J.I. et al // Tissue Antigens. 2000. -V.56, n.6. — P.548-550.

58. Elder J.T. The genetics of psoriasis / Elder J.T., Nair R.P., Guo S.W. et al // Arch. Dermatol. 1994. - V.130, N.2. - P.216-214.

59. Elder J.T. The genetics of psoriasis 2001: the odyssey continues / Elder J.T., Nair R.P., Henseler T. // Arch Dermatol. 2000. - V.136, №11. - P.1447-1454.

60. Enerback C. Evidence that HLA-Cw6 determines early onset of psoriasis, obtained using sequence-specific primers (PCR-SSP) / Enerback C., Martinsson Т., Inerot A., Swanbeck G. // Acta Derm. Veneriol. 1997. - V.77. -P.273-276.

61. Enlund F. Psoriasis susceptibility locus in chromosome region 3q21 identified in patients from southwest Sweden / Enlund F., Samuelson A., Enerback C. et al // Eur. J. Hum. Genet. 1999. - V.7. - P.783-790.

62. Enno Christophers. Genotyping Psoriasis // The society for Investigative Dermatology, Inc. 2003. - N.12. - P.627.

63. Foell D. Expression of the pro-inflammation protein S100A12 (ENRAGE) in rheumatoid and psoriatic arthritis / Foell D., Kane D., Bresnihan B. // Rheumatology. 2003. - V.42. - P. 1383-1389.

64. Ghoreschi K. Immunopathogenesis of Psoriasis / Ghoreschi K., Rocken M. // J. Deut. Dermatol. 2003. - V.9. - P.231-233.

65. Guedjonsson J.E. HLA-Cw6-positive and HLA-Cw6-negative patients with Psoriasis vulgaris have distinct clinical features / Guedjonsson J.E., Karason A., Antonsdottir A.A. et al // J. Invest. Dermatol. 2002. - V.l 18. - P.362:365.

66. Gupta M.A. Quality of life of psoriasis patients / Gupta M.A., Gupta A.K. // JEADV. 2000. - V.14, n.4. - P.241-242.

67. Heizmann C.W. SI00 proteins: structure, functions and pathology / Heizmann C.W., Fritz G., Schafer B.W. // Front. Biosci. 2002. - №7. - P.1356-1368.

68. Henseler T. Psoriasis of early and late onset: characterization of two types of psoriasis vulgaris / Henseler Т., Christophers E. // J. Am. Acad. Dermatol.- 1985. — V.13. -P.450-456.

69. Higgins. Alcohol, smoking and psoriasis // Clin. Exp. Dermatol. — 2000.- V.25, n.2. -P.107-110.

70. Hofmann M.A. RAGE mediates a novel proinflammatory axis: a central cell surface receptor for SlOO/calgranulin polypeptides / Hofmann M.A., Drury S., Fu C. // Cell. 1999. - V.97. -P.889-901.

71. Holm S.J. Polymorphisms in the SEEK1 and SPR1 genes on 6p21.3 associate with psoriasis in Swedish population / Holm S.J., Carlen L.M., Mallbris L., O'Brien K.P. // Exp. Dermatol. 2003. - V.12, n.4. - P.435.

72. Hudson B.I. Identification of polymorphisms in the receptor for advanced glycation end-produccts (RAGE) gene / Hudson B.I., Stickland M.H., Grant P.J. // Diabetes. 1998. -V.47. - P.l 155-1157.

73. Iizuka H. Pathophysiology of generalized pustular psoriasis / Iizuka H., Takahashi H., Ishida-Yamamoto A. // Arch. Dermatol. Res. 2003. - V.295. -P.55-59.

74. Ikaheimo I. HLA risk haplotype Cw6, DR7, DQA1*0201 and HLA-Cw6 with reference to the clinical picture of psoriasis vulgaris / Ikaheimo I., Tiilikainen A., Karvonen J. et al // Arch. Dermatol. Res. 1996. - V.288. - P.363-365.

75. Jullien D. Genetics of psoriasis / Jullien D., Barker J.N. // JEADV. -2006. V.20, n. s2. - P.42-51.

76. Kankova K. Association of G82S Polymorphism in the RAGE Gene With Skin Complications in Type 2 Diabetes / Kankova K., Vasku A., Hajek D. // Diabetes Care. 1999. -V. 10. - P. 1745.

77. Kankova K. Polymorphisms 170G/T and 2184A/G in the RAGE gene a associated with antioxidant status / Kankova K., Marova I. // Metabolism. 2001. -V.50.-P. 1152-1160.

78. Kankova K. Polymorphisms in RAGE gene influence susceptibility to diabetes associated microvascular dermatoses in NIDDM / Kankova K., Zahejsky J., Marova I.// Diabetes Complications. - 2001. - V.15. - P. 185-192.

79. Karason A. A susceptibility gene for psoriatic arthritis maps to chromosome 16q: evidence for impriting / Karason A., Gudjonsson J.E., Upmanyu R. et al // Am. J. Hum. Genet. 2003. - V.72. - P. 125-131.

80. Kim T.G. Polymorphisms of tumor necrosis factor (TNF) alpha and beta genes in Korean patients with psoriasis / Kim T.G., Pyo C.W., Hur S.S. // Arch. Dermatol. Res. 2003. - V.295. - P.8-13.

81. Kirby B. Psoriasis: the future / Kirby В., Griffiths C.E.M. // Br. J.

82. Dermatol. 2001. - V.144, n. s58. - P.37-43.

83. Kundakci N. Association of psoriasis vulgaris with HLA class I and class II antigens in the Turkish population according to the age at onset / Kundakci N., Oskay Т., Olmez U. et al // Exp. Dermatol. 2003. - V. 12, n.4. - P.444.

84. Lecewicz-Torun B. The total number of neutrophils in plasma and concentration of interleukin-8 in psoriatic patients / Lecewicz-Torun В., Pietrzak A., Krasowska D. // JEADV. 1999. - V.12. - P.333.

85. Lee Y.A. Genome wide scan in German families reveals evidence for a novel psoriasis-susceptibility locus on chromosome 19pl3 / Lee Y.A., Roschendorf F., Windermuth C. et al // Am. J. Hum. Genet. 2000. - V.67. -P. 1020-1024.

86. Leung D.Y. Evidence for a streptococcal superantigen-driven process in acute guttate psoriasis / Leung D.Y., Travers J.B., Giorno R. et al // J. Clin. Invest. 1995. - V.96. -P.2106-2112.

87. Lin J.D. Genetic linkage studies in psoriasis / Lin J.D., Auerbach A.D., Auerbach R. et al // J. Invest. Dermatol. 1991. - V.96. - P.535.

88. Luba K.M. Chronic plaque psoriasis / Luba K.M., Stulberg D.L. // Am. Fam. Phys. 2006. - V.73, n.4. - P.636-644.

89. Martin E.R. Correcting for a potential bias in the pedigree disequilibrium test / Martin E.R., Bass M.P., Kaplan N.L. // Am. J. Hum. Genet. -2001. — V.68. -P.1065-1067.

90. Martinez-Borra J. Psoriasis vulgaris and psoriatic arthritis share a 100 kb susceptibility region telomeric to HLA-C / Martinez-Borra J., Gonzalez S.,

91. Santos-Juanes J. et al // Rheumatology. 2003. - V.42. - P. 1089-1092.

92. Matthews D. Evidence that a locus for familial psoriasis maps to chromosome 4q. / Matthews D., Fry L., Powles A. et al // Nature Genet. — 1996. — V.14.-P.231-233.

93. Mendoca C.O. Current concepts in psoriasis and its treatment / Mendoca C.O., Burden A.D. // Pharmacol. Therap. 2003. - V.99. - P. 133-147.

94. Nair R.P. Localization of psoriasis-susceptibility locus PSORS1 to a 60-kb interval telomeric to HLA-C / Nair R.P., Stuart P., Henseler T. // Am. J. Hum. Genet. 2000. - V.66. - P. 1833-1844.

95. Nair R.P. Scanning chromosome 17 for psoriasis susceptibility: Lack of evidence for a distal 17q locus / Nair R.P., Guo S., Jenisch S. et al // Hum. Hered. 1995. - V.45. - P.219-223.

96. Naldi L. Dietary factors and the risk of psoriasis. Results of an Italian case-control study / Naldi L., Parazzini F., Peli L. // Br. J. Dermatol. 1996. — V.134, П.1.-Р.101-106.

97. Nomura I. Distinct patterns of gene expression in the skin lesions of atopic dermatitis and psoriasis: A gene microarray analysis / Nomura I., Gao В., Boguniewicz M. et al // J. Allergy Clin. Immunol. 2003. - V.l 12. - P.l 195-1202.

98. Pietzak A. Have the psoriatic females «worse» hormones? / Pietzak A., Lecewicz-Torun В., Jakimiuk A., Chodorowska G. // JEADV. 1999. - V.12. — P.329.

99. Rahmatov A.B. Causes of clinical polymorphism and risk factors of psoriasis // JEADV. 1999. - V.12. -P.335.

100. Rich N. The future of genetic studies of complex human diseases / Rich N., Merikangas K. // Science. 1996. - V.273. - P. 1516-1517.

101. Risch N.J. Searching for genetic determinants in the new millennium // Nature. 2000. - V.405. - P.847-856.

102. Romphruk A.V. Corneodesmosin gene: no evidence for PSORS 1 gene in North-easten Thai psoriasis patients / Romphruk A.V., Oka A., Romphruk A. et al // Tissue Antigens. 2003. - V.62, n.3. - P.217-224.

103. Rook A. Textbook of Dermatology / Rook A., Wilkinson D.S.,

104. Ebling F.J.G. Blckwell Scientific Publications, 1990. - V.l. - P. 100.

105. Saccone N.L. HLA-Cw*0602 as the primary risk factor for psoriasis accounts for all other observations of association of psoriasis with alleles from the HLA class I region / Saccone N.L., Heims C., Hsu T.M. et al // J. Hum. Genet. -2002.-V.71.-P.458.

106. Schmidt A.M. Activation of receptor of advanced glycation end products: a mechanism for chronic vascular dysfunction in diabetic vasculopathy and atherosclerosis / Schmidt A.M., Yan S.D., Wautier J.L., Stern D. // Circ. Res. -1999. V.84. — P.489-497.

107. Schmidt A.M. The multiligand receptor RAGE as a progression factor amplifyining immune and inflammatory responses / Schmidt A.M., Yan S.D., Yan S.F., Stern D.M. // J. Clin. Invest. 2001. - V.108. -P.949-955.

108. Semprini S. Evidence for differential SI00 gene over expression in psoriatic patients from genetically heterogeneous pedigrees / Semprini S., Capon F., Tacconelli A. // Hum. Genetics. - 2002. - V. 111. - P.310-313.

109. Shilov V.N. Oxidative stress in keratinocytes as an etiopathogenetic factor of psoriasis / Shilov V.N., Sergienko V.I. // Bull. Exp. Biol. Med. 2000. -V.129. - P.364-369.

110. Speckman R.A. Novel immunoglobulin superfamily gene cluster, mapping in region of human chromosome 17q25, linked to psoriasis susceptibility / Speckman R.A., Wright Daw J.A., Helms C. // Hum. Genet. 2003. - V.l 12. -P.34-41.

111. Suomela S. HCR, a Candidate Gene for Psoriasis, Is Expressed

112. Differently in Psoriasis and Other Hyperproliferative Skin Disorders and Is

113. Downregulated by Interferon-y in Keratinocytes / Suomela S., Elomaa O., Asumalahti K. et al // J. Invest. Dermatol. 2003. - V. 121. - P. 1360-13 64.

114. Swanbeck G. A population genetic study of psoriasis / Swanbeck G., Inebot A., Martinsson Т., Wahlstrom J. // Br. J. Dermatol. 1994. - V.131, n.l. -P.32-39.

115. Swanbeck G. Age at onset and different types of psoriasis / Swanbeck G., Inerot A., Martinsson T. et al // Br. J. Dermatol. 1995. - V.133, n.5. - P.786-773.

116. Tatari Z. HLA-Cw allele analisis by PCR-restraction fragment length polymorphism: study of known and additional alleles / Tatari Z., Fortier C., Bobrinina V. et al // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - V.92. - P.8803-8807.

117. Telfer N.R. The role of streptococcal infection in the initiation of guttate psoriasis / Telfer N.R., Chalmers R.J., Whale K., Colman G. // Arch. Dermatol. 1992,-V. 128.-P.39-42.

118. Teraoka Y. Genetic polymorphisms in the cell growth regulated gene, SCI telemetric of the HLA-C gene and lack of association of psoriasis vulgaris / Teraoka Y., Naruse Т.К., Oka A. et al // Tissue Antigens. 2000. - V.55, n.3. -P.206-211.

119. Terwilliger J.D. Handbook of Human Genetic Linkage / Terwilliger J.D., Ott J. Baltimore: Johns Hopkins, 1994.

120. Tiilikainen A. Psoriasis and HLA-Cw6 / Tiilikainen A., Lassus A., Karvonen J. et al //Br. J. Dermatol. 1991. - V.l02. - P.179-184.

121. Tomfohrde J. Gene for familial psoriasis susceptibility mapped to the distal end of human chromosome 17q. / Tomfohrde J., Silverman A., Barnes R. et al // Science. 1994. - V.264. - P.l 141-1145.

122. Traupe H. Update on psoriasis genetics: ethnic diversity as a new theme // JEADV. 2000. - V.14, №1. - P.25.

123. Vasku V. Gene polymorphisms (G82S, 170G/T, 2184A/G and 2245G/A) of receptor of advanced glycation end products (RAGE) in plaque psoriasis / Vasku V., Kankova K., Muzik J. // Arch. Dermatol. Res. 2002. -V.294. — P.127-130.

124. Veal C. Family-Based Analysis Using a Dense Single-Nucleotide Polymorphism Based Map Defines Genetic Variation at PSORS1, the Major Psoriasis - Susceptibility locus / Veal C., Capon F., Allen M. // Am. J. Hum. Genet.-2002. -№71.-P.554-564.

125. Veal C. Genom-wide search for psoriasis susceptibility genes: novel approaches to complex disease gene mapping / Veal C., Clough L., Mason S. // Br. J. Dermatol. 2000. - V.142. - P.606-609.

126. Wolters M. Diet and psoriasis: experimental data and clinical evidence // Br. J. Dermatol. 2005. - V.153, n.4. - P.706-714.

127. Young H.S. Single-Nucleotide Polymorphisms of vascular Endothelial Growth Factor in Psoriasis of Early Onset / Young H.S., Summers A.M., Bhushan M. // J. Invest. Dermatol. 2004. - V.122. - P.209-215.

128. Zhang X. Evidence for a Major Psoriasis Susceptibility Locus at 6p21 (PSORS1) and a Novel Candidate Region at 4p31 by Genom-wide Scan in Chinese Hans / Zhang X., He P., Wang Z. // J. Invest. Dermatol. 2002. - V.l 19. - P.1361-1366.

129. Zheng J. Confirmation of PSORS1 psoriasis susceptibility loci in a Chinese population / Zheng J., Jin S., Shi R. // Arch. Dermatol. Res. 2003. — V.295, n.l.-P.14-18.