Особенности созревания лимфоцитов крови и экспрессии цитокиновых рецепторов у новорожденных детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.09, кандидат медицинских наук Зиновьева, Татьяна Евгеньевна

• Зиновьева, Татьяна Евгеньевна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Зиновьева, Татьяна Евгеньевна

Введение.

Глава 1 Особенности клеточного иммунитета и лимфоцитарных рецепторов у новорожденных детей (обзор литературы)

1. Заболеваемость и смертность новорожденных (по данным эпидемиологических исследований)

2. Развитие лимфоидных клеток у новорожденных детей в процессе онтогенеза в норме и при патологии

2.1. особенности иммунофенотипа Т-лимфоцитов у новорожденных детей

2.2. особенности иммунофенотипа В-лимфоцитов у новорожденных детей

2.3. Система цитокинов у нофорожденных детей и сведения о цитокиновых рецепторах.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности созревания лимфоцитов крови и экспрессии цитокиновых рецепторов у новорожденных детей»

Актуальность проблемы:

Становление иммунитета происходит постепенно и зависит от целого ряда факторов: гестационного возраста новорожденного, наличия локальных или генерализованных воспалительных процессов, перенесения острой- и - / или хронической гипоксии и т.д.

Несмотря на' многочисленные исследования, иммунной системы новорожденного ребенка, многие аспекты этой проблемы остаются недостаточно изученными. Известно, что у недоношенных новорожденных есть незрелые лимфоциты, но оценка их производилась только по Л антигену и процесс дальнейшей дифференцировки мало изучен:. В частности, недостаточно исследований, посвященных процессам^ дифференцировки иммунных клеток в периферической крови у новорожденных детей разного гестационного возраста и с учетом всех факторов, определяющих иммунокомпетентность. Благодаря новым методикам определения клеточных популяций путем проточной цитометрии с применением двойной и тройной флюоресцентных меток, появилась возможность объективно детально охарактеризовать мембранный фенотип иммунокомпетентных клеток, проследить этапы их созревания, особенности экспрессии рецепторов к основным про - (интерлейкины 8, 5, интерферон) и противовоспалительным^ (интерлейкины 4,10) цитокинам.

Все вышеизложенное обусловило цель настоящей работы.

Цель работы:

Установить особенности экспрессии цитоюшовых рецепторов и созревания различных популяций5 Т- и В-лимфоцитов. у новорожденных детей с перинатальной патологией.

Задачи исследования:

Г. Исследовать комплекс рецепторов лимфоцитов крови для оценки созревания системы, клеточного иммунитета у новорожденных детей;

2. Определить состав основных субпопуляций. Т-лимфоцитов крови у новорожденных детей различного гестационного возраста, в первые 10 суток жизни и в конце неонатального периода;

3. Изучить особенности состава В-лимфоцитов крови, у новорожденных детей' в те же возрастные периоды;

4. Выявить особенности экспрессии цитокиновых рецепторов к основным провоспалительным цитокинам (интерлейкин 2, 5; 8, интерферон-у, фактор некроза опухоли-а) у новорожденных детей различного гестационного возраста, в первые 10 суток жизни и в конце неонатального-периода;

5. Определить особенности экспрессии цитокиновых рецепторов к основным противовоспалительным цитокинам (интерлейкин 4, 10) у новорожденных детей различного гестационного возраста, в те же возрастные периоды.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые у доношенных и недоношенных новорожденных детей исследован- комплекс дифференцировочных антигенов иммунокомпетентных клеток с помощью метода проточной цитометрии с применением двойной и тройной флюоресцентных меток. Впервые изучена динамика состава В1-лимфоцитов в начале и конце периода новорожденности и в пуповинной крови.

Впервые определена экспрессия мембранных рецепторов к провоспалительным цитокинам интерлейкинам 2, 5, 8, интерферону-у, фактору некроза опухоли-а, а также к основным противовоспалительным цитокинам интерлейкинам 4 и 10 на лимфоцитах пуповиной крови и у новорожденных детей в первые 10 суток жизни и в конце неонатального периода. Показан процесс активации клеточных иммунных реакций в ранний период внеутробной жизни, отражающий особенности функционирования иммунной-системы в этом возрасте. Впервые изучена динамика состава субпопуляций лимфоцитов крови и экспрессии, цитокиновых рецепторов в начале и в конце неонатального периода в зависимости от гестационного возраста и наличия инфекционных заболеваний. Доказано негативное влияние развития инфекционно-воспалительных заболеваний периода новорожденное™ на развитие рецепторного аппарата лимфоцитов крови. Показано, что. адекватная реакция иммунной системы недоношенных детей при инфекционных заболеваниях формируется только к концу 1-го месяца жизни.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Доказана диагностическая ^ ценность изучения иммунофенотипа-лимфоцитов крови с определением уровней экспрессии мембранных рецепторов цитокинов, у новорожденных детей различного гестационного возраста.

Методика исследования субпопуляций лимфоцитов с помощью проточной цитометрии с применением двойной и тройной флюоресцентных меток адаптирована для работы с микродозами крови, что позволило использовать ее у новорожденных, в том числе недоношенных, детей. Применение данной методики-дает возможность изучить этапы созревания иммунокомпетентных клеток и особенностей экспрессии рецепторов к основным про- и противовоспалительным цитокинам.

На основании* изучения иммунофенотипа лимфоцитов крови новорожденных с разным гестационным возрастом на протяжении первого месяца жизни выявлена определяющая роль таких факторов, как. недоношенность и наличие внутриутробного инфицирования, в замедлении созревания иммунной.системы в этой возрастной группе.

Предложен протокол иммунофенотипирования лимфоцитов крови с учетом экспрессии цитокиновых рецепторов, помогающий дифференцированно проводить профилактические и терапевтические мероприятия, что позволяет снизить риск возможных осложнений и дальнейшей инвалидизации у доношенных и особенно недоношенных детей первого месяца жизни.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ В ПРАКТИКУ

И ПУБЛИКАЦИИ

На основании результатов настоящего исследования, разработан протокол иммунофенотипирования лимфоцитов крови, с учетом экспрессии цитокиновых рецепторов у новорожденных детей, который был внедрен и используется, в отделении, для недоношенных детей НИИ педиатрии ГУ НЦЗД РАМН с 2007 года.

Результаты, исследования' используются в практической работе отделения для недоношенных детей и отделении диагностики и восстановительного лечения детей с перинатальной патологией Научного Центра Здоровья Детей Российской Академии Медицинских Наук.

Метод иммунофлюоресценции путем проточной цитометрии с применением двойной и тройной флюоресцентных меток используется в клинико-диагностической лаборатории ГУ НЦЗД РАМН для диагностики функционального состояния системы иммунитета у детей раннего возраста.

Результаты настоящей работы были доложены на научно-практической конференции ГУ НЦЗД РАМН «Проточная- цитометрия в диагностике заболеваний» (Москва, 2006), конференции молодых ученых ГУ НЦЗД РАМН (Москва, 2006), научно-практической конференции «Фармакотерапия и фармакокинетика в педиатрии»» (Москва, 2006), заседании проблемной комиссии сотрудников отделения неонатологии и клинико-гематологической лаборатории -ГУ НЦЗД РАМН (Москва, 2006), 2й конференции «Клуба профессиональных иммунологов» (Турция, Анталия, 2007).

Предложенные методы исследования, функционального состояния системы- иммунитета у детей рекомендуется использовать для диагностических целей в работе отделений II этапа выхаживания новорожденных, отделений, патологии детей, раннего возраста. Материалы диссертации, целесообразно включать в учебные курсы для, студентов медицинских факультетов ВУЗов, ординаторов, аспирантов, слушателей факультетов усовершенствования врачей.

По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ.

Заключение диссертации по теме «Педиатрия», Зиновьева, Татьяна Евгеньевна

ВЫВОДЫ

1. Адаптация новорожденного ребенка к условиям внеутробной жизни определяет особенности функционирования системы клеточного иммунитета в этом возрастном периоде. У недоношенных детей отмечается задержка созревания иммунной системы, которая приводит к недостаточности ряда клеточных реакций и способствует развитию инфекционных заболеваний.

2. Уровень зрелых Т-клеток, Т-хелперов и Т-супрессоров у доношенных и недоношенных новорожденных детей с перинатальной гипоксией является стабильным и не зависит от развития сопутствующих инфекционных заболеваний. Уровень Т-лимфоцитов с тимическим фенотипом CD3+CD4+CD8+ у детей первой недели жизни превышает 3%, что достоверно выше уровня взрослых. Повышение уровня молодых Т-клеток в циркуляции наиболее выражено у недоношенных детей с клиническими проявлениями инфекционных заболеваний.

3. Общий уровень В-лимфоцитов у детей всех обследованных групп соответствует возрастному диапазону и не имеет различий между группами. В крови новорожденных детей всех групп уровень В1-лимфоцитов значительно превышает уровень данной субпопуляции в пуповинной крови и у детей старшего возраста и составляет 62-67%.

4. В крови новорожденных детей всех групп определяются- значительные популяции молодых активированных лимфоцитов с фенотипом CD19+CD10+ и В1 -лимфоцитов.CD 19+CD10+CD5+. У недоношенных детей, обследованных в конце неонатального периода, с наличием инфекционного процесса выявлено существенное снижение уровня молодых активированных В-лимфоцитов и активированной части В1-лимфоцитов, что- является свидетельством срыва компенсаторных процессов недостаточно зрелой иммунной системы недоношенных детей * при развитии инфекционного заболевания.

5. У доношенных новорожденных к концу первого месяца жизни, выявлено повышение уровня^ активированных лимфоцитов с высокоаффинным рецептором ИЛ-2 CD 122. У недоношенных детей подобная реакция» отсутствует. При анализе экспрессии рецепторов к интерлейкинам 4 и 5 у детей обследованных групп существенной динамики в течение первого месяца жизни не отмечено.

6. Экспрессия рецептора к гамма-интерферону на лимфоцитах крови у новорожденных всех групп однородна, и к концу первого месяца существенной динамики не отмечается. Экспрессия рецептора к ФНО-а у детей первой недели жизни соответствует уровню пуповинной крови, в дальнейшем достоверно« повышается* к месячному возрасту, что является свидетельством активации иммунного ответа.

7. С первых дней жизни на лимфоцитах крови детей всех групп увеличивается» экспрессия рецептора к фактору хемотаксиса ИЛ-8, что является свидетельством активации клеточных иммунных реакций. Это повышение наиболее выражено у детей 3-10*дней жизни с инфекционными заболеваниями.

8. В течение первого месяца жизни на лимфоцитах крови достоверно увеличивается мембранная экспрессия рецептора к основному противовоспалительному цитокину ИЛ-10. Выявлено повышение числа лимфоцитов с рецептором к ИЛ-10 при развитии инфекционных заболеваний, особенно выраженное у доношенных детей первой недели жизни. Адекватная реакция увеличения экспрессии рецептора к ИЛ-10 при инфекционных заболеваниях у недоношенных детей выявляется только к концу 1-ого месяца жизни.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Использование протокола иммунофенотипирования лимфоцитов крови, с учетом экспрессии цитокиновых рецепторов; у новорожденных детей рекомендуется в отделениях I и II этапов выхаживания новорожденных, а также в центрах реабилитации детей раннего возраста с различными* видами перинатальной патологии и ее последствий для* определения степени, зрелости- иммунной системы, а также для контроля, за эффективностью проводимого лечения (в дополнение к традиционному определению факторов гуморального иммунитета в сыворотке крови).

2. Особенности становления иммунокомпетентности у доношенных и» недоношенных новорожденных необходимо учитывать при назначении терапии детям с различным гестационным возрастом. Особенно важно учитывать задержку становления иммунитета у недоношенных новорожденных.

3. Рекомендовано применение протокола иммунофенотипирования лимфоцитов крови, с учетом экспрессии цитокиновых рецепторов, у новорожденных детей из группы риска внутриутробного инфицирования в качестве дополнительного критерия оценки тяжести и прогнозирования течения инфекционно воспалительных заболеваний.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Зиновьева, Татьяна Евгеньевна, 2008 год

1. Андреева Л.Ю., Тупицин Н.Н., Овумян Г.Ш. и др. Стволовые гемопоэтические клетки в крови онкологических больных: экспрессия CD34 и колониеобразование. Гематология и трансфузиология., 1999, т.44, №4, с. 3-7.

2. Антонов А.Г., Сидельникова В.М. Преждевременные роды. Недоношенный ребенок. / ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 448 с.

3. Балаболкин И.И. Бронхиальная астма. //В кн.: Аллергические болезни у детей. Под ред. М.Я. Студеникина, И.И. Балаболкина. М.: Медицина. - 1998. - С. 188-213.

4. Балаболкин И.И., Намазова Л.С., Ковальчук Л.В. и др. Интерлейкины 1 и 2 в патогенезе бронхиальной астмы у детей // Иммунология 1994 - №1 - с. 33 - 36.

5. Баранов А.А., Альбицкий В.Ю. Социальные и организационные проблемы педиатрии. Избранные очерки. М., 2003. 511 с.

6. Барышников А.Ю. Моноклональные антитела и ксеногенные антисыворотки в диагностике лейкоза и лимфосаркомы. // Дисс. . доктора мед. наук, Москва, 1985, 308 с.

7. Барышников А.Ю., Торубарова Н.А., Алымкулова Э.Д. Иммунологическая характеристика ранних предшественников < лимфоидных клеток человека. // Гематология и трансфузиология, 1985, №11, с. 45-49.

8. Бейн Б.Дж., Гупта Р. Справочник гематолога. Перевод с английского. Москва, Бином, Лаборатория знаний, 2004, стр. 43-60.

9. Вельтищев Е.Ю. Иммунитет новорожденного и повышенная чувствительность к некоторым вирусным инфекциям. // Рос. вестн. перинатал. пед. 1993. - 5 - С.: 9 - 11.

10. Воробьев А.А., Быков А.С., Караулов А.В. Иммунология и аллергология. Практическая медицина. Москва, 2006. Стр.72-74.

11. Гервазиева В.Б., Петрова Т.И. Экология и аллергические заболевания у детей. // Аллергология и иммунология. 2000. - № 1. -С. 101-108.

12. ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ Протоколы диагностики, лечения и профилактики внутриутробных инфекций у новорожденных детей. М. -2001.-96 с.

13. Громов И.А. Клинико-иммунологическое значение определения экспрессии мембранных рецепторов лимфоцитов крови у детей с атопической бронхиальной астмой при проведении аллергенспецифической иммунотерапии. Дис. . канд. мед. наук. -М.-2007.-118 с.

14. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и его фармакологическийконтроль. -М.: Фармус Принт. 1998. - 322 с.

15. Деменьтьева Г.М., Вельтищев Ю.Е. Профилактика нарушенийадаптации и болезней новорожденных. Лекция для врачей. // Росс. Вестн.

16. Перина. Педиатр. 2003. - Приложение. - 75 с.

17. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология. М.: ООО «Медицинское информационное агентство». 2003. - 604.

18. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. — М.: Медицина. 1996. - 240 с.

19. Зайцева О.В., Малиновская В.В., Зайцева С.В., Самсыгина Г.А. Система интерферона и бронхиальная астма у детей. // Аллергология. -2000. №4. - С.7-11.

20. Зайцева О. В., Лаврентьев А.В., Самсыгина Г.А. Роль некоторых цитокинов при бронхиальной астме у детей. // Педиатрия. 2001. - №1. -С. 13-19.

21. Кетлинский С.А. Роль Т-хелперов 1 и 2 типа в регуляции клеточного и гуморального иммунитета. // Иммунология. 2002. - №2. - С. 77-79.

22. Ковальчук Л.В. Антигенные маркеры клеток иммунной системы человека CD (CLUSTER DIFFERENTIATION) система. // Учебно-методическое пособие. М.,- РГМУ.- 2005.- С. 14-44.

23. Лаврова Т.Е., Ревякина В.А., Боровик Т.Э., Рославцева Е.А. Современный взгляд на проблему пищевой непереносимости. // Вопросы современной педиатрии. 2004. - т. 3. - № 6. - С.: 40 - 49.

24. Намазова Л.С., Ревякина В.А., Балаболкин И.И. Роль цитокинов в формировании аллергических реакций у детей. // Педиатрия. 2000. -№1. - С. 56-67.

25. Орехов К.В., Барычева Л.Ю. Формирование системы иммунитета у детей с врожденными инфекциями. Ставрополь.: Изд. Стгма, 2006. -130 с.

26. Останин А.А., Макогон А.В., Леплина О.Ю., Пасман Н.М., черных Е.Р. Показатели иммунитета плода в ранней диагностике внутриутробной инфекции. // Мед. Иммунол. 2001. Т. 3. - № 4. - С.: 515-524.

27. Пенкина М.И. Распространенность, факторы риска и течение атопического дерматита у детей. / Автореф. дисс. . докт. мед наук. -М.-2006.-44 с.

28. Прямкова Ю.В. Пренатальное становление бронхиальной астмы. Аллергология 2001. - 4. - С.: 23 - 29.

29. Ройт А., Бростофф* Дж., Мейл Д. Иммунология, Москва, «Мир», 2000.

30. Савельева Г.М., Панина О.Б., Сичинава Л.Г. и др. Пренатальный период и его значение в развитии плода и новорожденного. // Акуш и гинек. 2004. - 3 2. С.: 60 - 62.

31. Самохвалова А.В. Становление Т-лимфоидной системы у новорожденных детей в ранний неонатальный период. Автореферат диссертации. кандидата медицинских наук. Москва, 1987. Стр. 3-20.

32. Самохвалова А.В. Торубарова Н.А. Определение субпопуляций лимфоцитов пуповинной и периферической крови здоровых новорожденных детей5 с помощью моноклональных антител. // Вопросы охраны материнства и детства. 1987, №6. Стр. 6-10.

33. Стародубов В.И., Михайловская Ю.В., Иванова А.Е. Здоровье населения России в социальном контексте 90-х годов: проблемы и перспективы. М., 2003. 288 с.

34. Стрижаков А.Н., Баев О.Р., Игнатко И.В. Современные-методов и-перспективы развития пренатальной диагностики. // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2002. - № 2. - С.: 17 - 22.

35. Студеникин В.М. Становление лимфоидной системы и особенности мембранных рецепторов иммунокомпетентных клеток в раннем онтогенезе. Автореферат дис. . докт. мед. наук. - М. - 1997. - 37 с.

36. Суханова Л.П. Здоровье новорожденных детей России./ М.: «Канон»+РООИ «Реабилитация». 2007. - 320 с.

37. Таболин В.А., Володин Н.Н., Дегтярева М.В., Дегтярев Д.Н., Бахтикян К.К. "Актуальные вопросы перинатальной иммунологии." Int. J. on Immunorehabilitation. 1997. - 6. - P.: 112-122.

38. Таболин B.A., Петрухин A.C. и др. Этапное лечение и реабилитация1 детей с перинатальной патологией. Педиатрия, 1987, №4, стр. 22-27.

39. Торубарова Н.А., Кошель И.В., Яцык Г.В. Кроветворение плода и новорожденного. Москва, «Медицина», 1993, стр.59.

40. Филатов А.В. Итоги 6-го международного рабочего совещания по дифференцировочным антигенам лейкоцитов человека. // Гематология и трансфузиология, 1998, т.43, №3, с. 53-55.

41. Фрейдлин И.С. Иммунная, система и ее дефекты: руководство для врачей. СПб.: Полисан. - 1998. - 113 с.

42. Хромова С.С., Шкопоров А.Н., Ефимов Б.А., Тарабрина Н.П., Черная З.А., Кафарская Л.И. Микрофлора кишечника и механизмы иммунорегуляции // Вопросы детской диетологии. 2005. Т. 3. № 1. С. 92-96.

43. Чернышов В.П., Слукавин И.И. Анализ субпопуляций Т-лимфоцитов и естественных киллеров методом проточной цитофлюорометрии у новорожденных детей. // Педиатрия. 1993. - 5. -С.: 15-17.

44. Шабалина Н.В., Длин В.В., Малиновская В.В. Интерфероновая система человека: биологическая роль и взаимосвязь с иммунной системой. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1995. -Т.40.-5.-С.: 29-35.

45. Шабалов Н.П. Неонатология. Москва, «МЕДпресс-информ», 2006, стр.17-18.

46. Шахбазян Г.П., Митерев Г.Ю., Булычева Т.И. Иммуноцитохимические и иммунофлюоресцентные методы исследования в иммунодиагностике острых лейкозов. // Гематология и трансфузиология, 1993, №1, стр. 29-33.

47. Юхтина Н.В. Иммунные и гормональные факторы развития итечения бронхиальной астмы у детей. Автореф. дисс.докт. мед.наук. М., - 1998. -42 с.

48. Ярилин А.А. //Основы иммунологии. М.: Медицина. - 1999. -607с.

49. Яцык Г.В. и др. Клинико-социальные проблемы детей с малой массой тела. Педиатрия, 1987 г., №4, стр. 17-22.

50. Яцык Г.В. и др. Руководство по неонатологии / Под ред. Г.В. Яцык. М.: Гардарики, 2004. - С.: 138 - 144.

51. Andrews RC., Singer JW., Bernstein Ш. Precursors of colony-forming cells in human can be distinguished from colony-forming cells by expression of the CD33 and CD34 antigens and light scatter properties. // J Exp Med, 1989;169:1721-1731.

52. Barcena A., Muench M.O., Roncarolo M.G., Spits H. Tracing the expression of CD7 ahd other antigens during T and myeloid cell differentiation in the human fetal liver and thymus. // Leuk. Lymphoma, 1995; 17:1-11.

53. Barker J., Verfallie C.M. A novel in vitro model of early human adult В lymphopoesis that allows proliferation of pro-B cells and differentiation to mature В lymphocytes. // Leukemia 14:1614-1620, 2000.

54. Begemann U., Hassan H.T., Zandre A.R., Comparison of human T-cell subsets and the cycline D1 and A expression in CD34 positive cells between bone marrow and cord blood. // Hem. Journ. 1 (suppl.l), p.9, 2000.

55. Berardi A.C., Meffre E., Pflumio F. et. Al. Individual CD34+CD381owCD 19-CD10-progenitor cells from human cord blood generate В lymphocytes and granulocytes. // Blood, 89 (10) :3554-64 1997 May 15.

56. Boggs D.R., Boggs S., Saxe D. Hematopoietic stem cell with high proliferative potential. // J. Clin. Invest., 70 (2): 242-253,1982.

57. Borowitz M.J. Guenther K.L. Shults K.E. et al. Immunophenotyping of acute leukemia by flow cytometric analysis. Use of CD45 and right-angle light scatter to gate on leukemic blasts in three-colour analysis. // Am. J.Clin. Pathol. 100:534,1993.

58. Bot A., Antohi S., Bona C. "Immune response of neonates elicited by somatic transgene vaccination wiht naced DNA." Frontiers in Bioscience 2: dl73-188,1997.

59. Bourin P., Lataillade J.J., Satanine P. et al. Differential expression of VLA chains on CD 34+ cells from three sources. // Hem. Journ. 1 (suppl.l), p.8, 2000.

60. Cai Z., Pan Z.-L., Pang Yi, Evans O.B., Rhodes P.G. "Cytokine Induction in Fetal Rat Brains and Brain Injury in Neonatal Rats after Maternal Lipopolysaccharide Administration." Pediatric Research 47 (1), 2000.

61. Chen L, Cohen AC, Lewis DB.Impaired allogeneic activation and T-helper 1 differentiation of human cord blood naive CD4 T cells.Biol Blood Marrow Transplant. 2006 Feb;12(2):160-71.

62. Chung K.F., Barnes P.J. Cytokines in asthma.// Thorax. 1999 -Vol. 54. - P.825-857.

63. Civin CI, Trishman TM., Facker MJ et al. Report on the CD34 cluster workshop. In: Knapp W., Dorken В., Gilks WR., et al.' eds. Leukocyte typing IY: White Cell Differentiation Antigens. // Oxford University Press; 1989: 818-825.

64. Coile A., Bertrand C., Tsuyuki S. et al. IL-4 differentiates naive CD8+ T-cells to a «Th2-like». // Ann.N.Y.Acad.Sci. 1996. - Vol.796. - C.97-103.

65. Cormican L., Gunaratham C., Sullivan S. et al. Differences in the mechanism of T cell activation in atopic and non atopic asthma. // Abstr. Eur. Respir.Soc.Congr. Madrid. -1999. - P.499.

66. Dean J., Golden-Mason L., Doney D. et al. Natural T lymphocyte populations in trephine biopsies differ from those in bone marrow aspirates. //Hem. Journ. 1 (suppl.l), p.10, 2000.

67. Diaz A., Reboredo M., Castro A. et al. Penotypic analysis by flow cytometry of human umbilical cord blood lymphocytes.// Hem. Journ. (supp.l), p.199, 2000.

68. Diaz V., Pinto R.A., Arredondo S.M., Bono M.R., Gaggero A.A. Infection Is Associated With Increased Endogenous Plasma Cortisol T Helper 1/T Helper 2 Cytokine Imbalance in Respiratory Syncytial Vims. // Pediatrics 2006;117;e878-e886.

69. DimmetteJE. Studies of human pregnancy. I. Immunoglobulins attached to the trophoblast. // Obstet Gynecol. 1976 Jun;47(6):730-2.

70. Drach J., Drach D., Glass H. et al. Flow cytometry determination of atypical antigen expression in acute leukemia for the study of minimal residual disease. // Cytometry 13:893-901,1992.

71. Eun B.-L., Liu X.-H., Barks J.D.E. "Pentoxifylline Attenuates Hypoxic-Ischemic Brain Injury in Immature Rats." Pediatric Research 47 (1), 2000.

72. Freedman A.R., Zhu H., Levine J.D. et al. Generation of human T-lymphocytes from bone marrow CD34+ cells in vitro. // Nat. Med., 2(1): 4651,1996, Jan.

73. Freeman S., Kelm S., Barber E. et al. Characterization of CD33 as a new member of the sialoadhesin family of cellular interaction molecules. // Blood, v.85, N 8,1995, pp 2005-2012.

74. Fukuda J., Kaneko Т., Egashira M., Oshimi K. Direct measurement of CD 34+ blood stem sell absolute counts by flow cytometry. // Stem Cells, 16(l):294-300,1998

75. Gabler J, Arnold. J, Kyewski B.Promiscuous gene expression and the developmental dynamics of medullary thymic epithelial cells.Eur J Immunol. 2007 Dec;37(12):3363-72.

76. Gomella A.S., Ganningam M.D. Neonatology basic management, on call problems, diseases, drugs. Appleton & Lange. California, 1998. 450 pp.

77. Greaves M.F. et al. Lineage promiscuity in hematopoietic differentiation and leukemia. Blood, 67:1-11,1986.

78. Harvey D., Cooke W.I., Levitt G.A. the baby ander 1000 g. Butterworth and Co. Ltd. London-Boston. 1992. 353 pp.

79. Harwitz C.A., Gore S.D., Stone K.D. Flow cytometric detection of rare normal human marrow cells with immunophenotype characteristic of acute lymphoblastic leukemia cells. //Leukemia, 6 (4):233-9,1992.

80. Holgate S. Mediator and cytokine mechanisms in asthma. // Thorax. -1993.- Vol.48. -P.103-109.

81. Inman M., Matsumoto K., Wattie J. et al. Interferon-gamma is required for resolution of allergen-induced, airway disfunction. // Abstr.l0th ERS Ann.Congr. Florence. - 2000. - P.161.

82. Janossy G.,Tidman N. et al. Distribution of T-lymphocyte subsets in the bone marrow and thymus: an analysis with monoclonal antibodies. //J.Immunol., 126(4): 1608-1613,1981, Apr.165.

83. Jennings C.D., Foon K.A. Recent- advantages in flow cytometry: application to the diagnosis of hematological malignancy. // Blood 90:8:2863-2892,1997.

84. Jones BJ, Brooke G, Atkinson K, McTaggart SJ.Immunosuppression by placental indoleamine 2,3-dioxygenase: a role for mesenchymal stem cells.Placenta. 2007 Nov-Dec;28(ll-12):1174-81.

85. Kelly AP, Finlay DK, Hinton HJ, Clarke RG, Fiorini E, Radtke F, Cantrell DA.Notch-induced T cell development requires phosphoinositide-dependent kinase l.EMBO J. 2007 Jul 25;26(14):3441-50.

86. Kranz B.R., Kolb H.J., Ledderjse G. et al. Immunocytochemical Characterization of Cell subpopulations in Human Bone Marrow. // Congress of the Austrian and German Societies of Hematology and Oncology, №200,1984.

87. Landor M. Maternal-fetal transfer of immunoglobulins. // Ann Allergy Asthma Immunol. 1995 Apr;74(4):279-83.

88. Landsdorp PM, Doughery GJ., Humphries RK. CD 34 epitopes. // In: Knapp W., Dorken В., Gilks WR., et al. eds. Leukocyte typing IY: White Cell Differention Antigenes. Oxford University Press; 1989: 826-827.

89. Landsdorp PM., Sutherland HJ., Eaves CJ. Selective expression of CD45 isoforms of functional subpopulations of CD34+ hemopoietic cells from human bone marrow. // J. Exp Med., 1990; 172:363-366.

90. Ledbetter JA., Evans RL., Lipinski M., et al., Evolutionary conservation of surface molecules that distinguish T-lymphocytes helper/inducer and T-cytotoxic/suppressor subpopulations in mouse and man.//J Exp Med., 1981; 153:310-323.

91. Levis DE., Puck JM., Babcock GM., et al. Disproportionate expansion of a minor T-cell subset in a patients with lymhadenopathy syndrome and acquired immunodeficiency syndrome. // J Infect Dis, 1985; 151:555.

92. Lima JO, Zhang L, Atkinson TP, Philips J, Dasanayake AP, Schroeder HW Jr.Early expression of iepsilon, CD23 (FcepsilonRII), IL-4Ralpha, and IgE in the human fetus.J Allergy Clin Immunol. 2000 Nov;106(5):911-7.

93. Ling KW, van Hamburg JP, de Bruijn MJ, Kurek D, Dingjan GM, Hendriks RW.GATA3 controls the expression of CD5 and the T cell receptor during CD4 T cell lineage development. // Eur J Immunol. 2007 Apr;37(4): 1043-52.

94. Macaubas C, de Klerk NH, Holt BJ, Wee C, Kendall G, Firth M, Sly PD, Holt PG.Association between antenatal cytokine production and? the development of atopy and asthma at age 6 years.Lancet. 2003 Oct 11;362(9391): 1192-7.

95. Malek A, Sager R, Kuhn P, Nicolaides KH, Schneider H.Evolution of maternofetal transport of immunoglobulins during human pregnancy.Am J Reprod Immunol. 1996 Nov;36(5):248-55.

96. Ш2. Melyr L., Magnan- A., Badier Ml et al: Interferon-y im asthma:; involvement of CD8+ T-cells. // Abstr. Eur. Respir.Soc.Congr. Madrid. -1999: - P.2624.

97. Miyano A\, Miyamichi T., Nakayama M. "Effect of chorioamnionitis on the levels of serum proteins in the cord blood of premature infants". Arch. Pathol. Lab. Med. 120 (№3): 245-248, 1996.

98. Neubert RT, Delgado I, Webb JR, Brauer M. et al. Assessing lymphocyte functions in neonates for revealing abnormal prenatal development of the immune system.' // Teratog Garcinog Mutagen; 2000;20(4): 171-93.

99. Nicklas R., Bernstein I., Blessing-Moore J. et al. Practice parameters for allergen immunotherapy. //J. Allergy Clin. Immunol 1996. - Vol. 6. -P. 1001-1011.

100. Oertel J., Huhn D., Immunohystochemical methods in haematology and oncology. //J. Cancer Res. Glin. Oncol. 126:425-440, 2000.

101. Oymar K., Elsayed S., Bjerknes R. Serum eosinophil cationic protein and interleukin-5 in children with bronchial asthma and acute bronchiolitis. // Pediatr. Allergy Immunol. 1996. - Vol.7(4). - P. 180-186.

102. Oymar K, Laerdal A, Bjerknes R.Soluble CD30 and CD23 in cord blood are not related to atopy in early cliildhood.Pediatr Allergy Immunol. 2000 Nov; 1й(4):220-4.

103. Paloczi K.,, Batai A., Gopcsa L et: al. Immunophenotypic characterizatiomof cord blood B-lymphocytes. // Bone Marr. Transplant. 22 Suppl 4 : S89-91,1998 Dec.

104. Pellegrini W., Marocolo D., Facchetti F., et al. CD34+ megakaryocytes occur in normal bone marrow and are greatly increased in myelodysplastic syndromes. // Hematologica 80 (367-87), 1995.

105. Peterson, LF, Wang Y, Lo MC, Yan M, Kanbe E, Zhang DE.The multi-functional cellular adhesion-molecule CD44 is regulated by the 8;21 chromosomal translocation.Leukemia. 2007 Sep;21(9):2010-9.

106. Raes M, Alliet P, Gillis P, Zimmermann A. et al. Lymphocyte-subpopulations in healthy newborn infants: comparison of cord blood values with values five days after birth. // J Pediatr. 1993 Sep;123(3):465-7.

107. Romagnani S. Immunologic influences on allergy and the TH1/TH2 balance. // J Allergy Clin Immunol. 2004 Mar;113(3):395-400.

108. Sabra A, Bellanti JA, Rais JM, Castro HJ, de Inocencio JM, Sabra S. IgE and non-IgE food allergy. // Ann Allergy Asthma Immunol. 2003 Jun;90(6 Suppl*3):71-6.

109. Sakabe H., Ohmizono Y., Tanimukai S. et al. Functional differences between subpopulations of mobilized peripheral blood-derived CD34+ cells expressing different levels of HLA-DR, CD33, CD38 and c-kit antigens. // Stem Cells, 15(1):73-81 January 1997.

110. Sampson H.A. Update on food allergy. // J. Allergy Clin. Immunol. -2004.-V. 114. -N. 1. P.: 127-130.

111. Sanchez M.J.,Spits H., Lanier L.L., Philips J.H. et al. Human natural killer cell commited thymocytes and their relationship to the T-cell lineage.// J'.Exp.Med., 1993; 178:1857-1866.

112. Secrist H., DeKruyff R.H., Umetsu D.T. Interleukin 4 production by CD4+ T. cells from allergic individuals is modulated by antigen concentration and antigen-presenting cell type. // J. Exp. Med. 1995. -Vol. 181.-P. 1081-1089.

113. Sethi S.K., Bianko A., Allen J.T. et al. IFN-y down, regulates the rhinovirus-induced expression of intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) on human airway epithelial cells // Clin. Exp. Immunol. 1997. -Vol. 110.-P. 362-369.

114. Sherr E, Macy E, Kimata H, Gilly M, Saxon A.Binding the low affinity Fc epsilon R on В cells suppresses ongoing human IgE synthesis J Immunol. 1989 Jan 15;142(2):481-9.

115. Sinkora M, Butler JE, Holtmeier W, Sinkorova J.Lymphocyte development in fetal piglets: facts and surprises.Vet Immunol Immunopathol. 2005 Oct 18; 108(1-2): 177-84.

116. Tang R., Chen S. Evaluation of serum interleukin-8 as a marker of disease activity in acute asthma in children. // J.Asthma. 2000. - Vol.37(5). - P.409-413.

117. Tedder TF., Crain MJ., Kubagava H., Clement LT., et al. Evaluation of lymphocyte differention in primary and secondary immunodeficiency diseases.//J Immunol., 1985; 135:1786-1791.

118. Terstappen LW., Safford. M:, Konemann S. et al. Row cytometric characterization, of acute myeloid leukemia. II Phenotypic heterogeneity at1 diagnosis. //Leukemia 1991; 5:757-767.

119. Ugur N. Flow cytometric analysis cell-surfase and intracellular antigens in acute myeloblasts leukemia. // Neoplasma, v.45(5), 1998.

120. Xu L, Rothman P.IFN-gamma represses epsilon germline transcription and subsequently down-regulates switch recombination to epsilon.Int Immunol. 1994 Apr;6(4):515-21.

121. Yang Y., Wilson J.M. "CD40 ligand-dependent T cell activation: requirement of B7-CD28 signalling through CD40." Science 273: 18621864,1996.

122. Yousefiv S., Hemann S., Weber M. et al. IL-8 is expressed by human peripheral blood eosinophils. // J.Immunol. 1995. - Vol.l54(10).- P.5481-5490.

123. Zaitseva O., Primakova J., Samsygina G. Relations between interferon system and bronchial asthma at children. // Abstr. Eur. Respir. Soc. Ann.Congr. 2002. - Stockholm. - P.918.

124. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. A comparison between immunophenotypes of lymphoid cells from human umbilical cord blood and bone marrow and its significance. // 2002 Dec;10(6):519-22.

125. Zoumbos N.C., Gascon P., Trost S. et al. Circulating activated suppressor T-lumphocytes in aplastic anemia. // N. Engl. J. Med., 312:257265,1985.