Особенности клеточного обновления и апоптоз эпителия в различных отделах толстой кишки человека (биопсийное исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Поморгайло, Елена Геннадьевна

• Поморгайло, Елена Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Поморгайло, Елена Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Структурно-функциональные особенности различных отделов толстой кишки человека.

Глава 2. Клеточное обновление в слизистой оболочке толстой кишки и программированная клеточная гибель.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Глава 3. Клеточное обновление слизистой оболочки толстой кишки человека.

3.1. Эндоскопическая и микроскопическая характеристика слизистой оболочки проксимальных отделов толстой кишки человека.

3.2. Эндоскопическая и микроскопическая характеристика слизистой оболочки дистальных отделов толстой кишки человека.

3.3. Особенности клеточного обновления слизистой оболочки проксимальных отделов толстой кишки человека.

3.4. Особенности клеточного обновления слизистой оболочки дистальных отделов толстой кишки человека.

Глава 4. Особенности клеточного обновления в аденомах тубулярного строения толстой кишки человека.

Глава 5. Клеточное обновление эпителия толстой кишки и апоптоз (обсуждение результатов исследования).

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности клеточного обновления и апоптоз эпителия в различных отделах толстой кишки человека (биопсийное исследование)»

Актуальность проблемы.

Толстая кишка большинства млекопитающих представляет собой орган, выполняющий весьма разнообразные функции: поддержание водного и электролитного баланса, всасывание пищевых веществ, временное хранение испражнений и, кроме того, среда обитания миллиардов микроорганизмов, в том числе потенциально патогенных. Поэтому неудивительно, что наше понимание деятельности толстой кишки, выполняющей столь разнообразные функции в присутствии множества бактериальных ферментов, отстает от представлений о тонкой кишке, желудке и пищеводе. Некоторые из основных свойств толстой кишки хорошо изучены, тогда как другие находятся в процессе изучения (Филлипс С.Ф., 1989).

Тем не менее, несмотря на сложность проблемы изучения толстой кишки, многие исследователи сохранили интерес к пониманию процессов происходящих в этой части пищеварительного тракта.

Кишечный эпителий толстой кишки отличается высокой скоростью клеточной регенерации по сравнению с другими тканями организма. Он относится к лабильным (обновляющимся) тканям (Заварзин А.А., 1967). В нем на протяжении всей жизни организма постоянно происходит обновление всех клеток - убыль зрелых дифференцированных элементов и образование новых клеток. Благодаря равновесию между этими процессами обеспечивается тканевой гомеостаз - "гомеоморфоз" (Уголев A.M., 1978; Shan-mugathasan М., Jothy S., 2000; Renehan A.G. et al., 2001).

До недавнего времени считалось, что клетки завершившие свой жизненный цикл, отторгаются в просвет толстой кишки. Однако в настоящее время показано, что большая часть таких клеток погибает на месте, подвергаясь запрограммированной гибели - апоптозу.

Работы (Potten C.S., 1992; Hall Р.А. et al., 1994; Strater J. et al., 1995;

Que F.G., Gores G.J., 1996; Andersson R. et al, 1997; Potten C.S. et al, J^97; Renehan A.G. et al., 2001) и других авторов во многом раскрыли роль апоп-тоза в клеточном обновлении.

В настоящее время отмечается значительный интерес исследователей к изучению апоптоза. Много внимания уделяется изучению его молекулярных механизмов (Kerr J.F.R., Searle J., 1980; Wyllie A H. et al., 1980; Cohen J.J., 1993; Владимирская Е.Б. и др., 1997; Белушкина Н.Н. и др., 1998; Тронов В.А., 1999; Augenlicht L.H. et al., 1999; Butler L.M. et al., 1999; Копнин Б.П., 2000; Самуилов В.Д. и др., 2000; Белушкина Н.Н., Северин С.Е., 2001; Ferri K.F., Kroemer G., 2001; Pollack M., Leeuwenburgh С., 2001). Значимость запрограммированной гибели клетки постепенно раскрывается. Апоптоз -механизм, ограничивающий избыточность соматических мутаций врожденно или путем истощения наиболее активных клонов, гарантия сдерживания амплификации дефектной (нежелательной) ДНК (Cohen J.J., 1993).

Согласно последним данным литературы апоптоз играет важную роль в развитии многочисленных патологических процессов, в том числе и слизистой оболочки толстой кишки (Thompson С.В., 1995; Kikuchi Y. et al., 1997; Аббасова С.Г. и др., 2000; Аруин Л.И., 2000; Holcik М. et al., 2001). Значительна роль апоптоза в морфогенезе опухолей и других заболеваний толстой кишки (Payne С М. et. al., 1995; Strater J. et al., 1995; Thompson C. В., 1995; Нао X. et al., 1998; Bukholm I.K., Nesland J.M., 2000; Saleh H.A. et al., 2000; Shanmugathasan M., Jothy S., 2000; Renehan A.G. et al., 2001).

Однако исследования апоптоза на морфологическом уровне, а также данные относительно участия его в процессе клеточного обновления именно в толстой кишке немногочисленны (Kerr J.F.R. et al., 1972; Лушников Е.Ф., 1986; Payne С.М. et. al., 1995; Strater J. et al., 1995; Potten C.S. et al., 1997; Токин И.Н., Филимонова Г.Ф., 1998; Augenlicht L. et al, 1999; Saraste A., 1999; Booth C., Potten C.S., 2000), что несколько странно, учитывая значитальную распространенность патологии толстой кишки (бактериальные колиты, язвенные колиты, болезнь Крона, полипоз и др.), а также высокий уровень онкологических заболеваний этой части пищеварительного тракта у лиц зрелого возраста.

При этом обращает на себя внимание тот факт, что большинство опухолей толстой кишки обнаруживаются в дистальных отделах, тогда как в проксимальных отделах они встречаются крайне редко (Еремин В.А., 1995; Шелыгин Ю.А., 1997; Петров В.П., Погехин А.В., 1998; Liu L.U. et al., 1999; Кузнецов С.М. и др., 1999). Предполагают, что это связано с разным характером апоптоза в нормальной слизистой оболочке этих отделов толстой кишки человека.

В связи с выше изложенным представляется целесообразным изучение клеточного обновления слизистой оболочки в различных отделах толстой кишки и участия в нем апоптоза в условиях относительной нормы (у практически здорового человека).

Цель исследования. Установить особенности клеточного обновления и оценить уровень апоптоза в неизмененном эпителии слизистой оболочки различных отделов толстой кишки человека.

Задачи исследования.

1. Изучить особенности клеточного обновления в неизмененной слизистой оболочке в проксимальных отделах толстой кишки человека.

2. Определить особенности клеточного обновления в неизмененной слизистой оболочке дистальных отделов толстой кишки человека.

3. Провести сравнительный анализ уровней пролиферации и апоптоза в неизмененной слизистой оболочке проксимальных и дистальных отделов толстой кишки человека.

Научная новизна. В результате проведенных исследований в кишечных криптах слизистой оболочки толстой кишки человека выделены пять основных функциональных компартментов, активно участвующих в процессе клеточного обновления: нижняя треть крипт - генеративная зона, средняя треть - генеративно-функциональная зона, верхняя треть - функциональная зона, поверхностный эпителий - зона "отмирания" эпителия, зона генетического контроля - средняя треть крипт.

Кроме того, показано, что в направлении от проксимальных отделов толстой кишки к дистальным наблюдается возрастающий градиент проли-феративной активности, тогда как индекс апоптоза остается неизменным. Вероятно, именно этот факт лежит в основе более частого обнаружения опухолевых образований в левых отделах толстой кишки человека.

Практическая значимость.

Нарушение регуляции клеточного обновления и в частности запрограммированной клеточной гибели в событиях онкогенеза велико и все шире раскрывается с каждым годом. Поэтому изучение механизмов и способов регуляции апоптоза является очень важной задачей, позволяет по-новому рассмотреть процесс нормального клеточного обновления, дает новую трактовку многим событиям онкогенеза.

Кроме того, понимание механизмов регуляции клеточного обновления в толстой кишке имеет практическое значение и может обеспечить теоретическое основание для новых стратегий лечения: возможность стимулирования репарации эпителиального барьера при нарушении последнего (например, при воспалительных заболеваниях толстой кишки, язвенном колите и т.д.); регулирование процесса обновления эпителиоцитов у больных с предраковыми заболеваниями; подавление клеточного обновления для более успешного проведения химио- и лучевой терапии у больных со злокачественными заболеваниями толстой кишки.

Апробация работы.

Основные положения работы были представлены на II съезде Международного союза ассоциаций патологоанатомов (Москва, 1999), на юбилейной научно-практической конференции, посвященной 10-летию Республиканского Диагностического Центра Министерства здравоохранения Кыргызкой республики "Диагностические технологии - практическому здравоохранению" (Бишкек, 2000), на межрегиональной научно-практической конференции патологоанатомов Урала и Западной Сибири (Челябинск, 2001), на Всероссийской конференции «Этно-экологические особенности ассоциации инфекционных факторов и патологии органов пищеварения у взрослого и детского населения» (Красноярск, 2001).

На защиту выносятся следующие положения.

1. На основании комплексного (гистологического, электронно-микроскопического и иммуногистохимического) исследования в кишечных криптах неизмененной слизистой оболочки толстой кишки можно выделить пять основных клеточных компартментов, принимающих активное участие в процессе клеточного обновления: нижняя треть крипт - генеративная зона, средняя треть - генеративно-функциональная зона, верхняя треть - функциональная зона, поверхностный эпителий - зона "отмирания" эпителия, зона генетического контроля - средняя треть крипт.

2. В неизмененной слизистой оболочке проксимальных отделов толстой кишки человека отмечаются низкие темпы пролиферации и апоптоза. В дистальных отделах уровень пролиферации значительно выше, тогда как индексе апоптоза примерно тот же. Это создает возможность для увеличения риска возникновения клеточных линий, имеющих мутации генов.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (21 страницы), глав "Материалы и методы исследования" и "Результаты собственных исследований" (92 страниц), обсуждения

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Поморгайло, Елена Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. В слизистой оболочке толстой кишки человека в направлении от проксимальных отделов к дистальным отмечается достоверное увеличение толщины слизистой оболочки, глубины кишечных крипт, объемной доли кишечных крипт, высоты эпителиальных клеток, относительного количества недифференцированных клеток, относительного количества бокаловидных клеток.

2. В кишечных криптах неизмененной слизистой оболочки толстой кишки человека можно выделить пять функциональных компартментов, которые активно участвуют в процессе клеточного обновления и поддержании тканевого гомеостаза: нижняя треть крипт - генеративная зона, средняя треть - генеративно-функциональная зона, верхняя треть -функциональная зона, поверхностный эпителий - зона "отмирания" эпителия, зона генетического контроля - средняя треть крипт.

3. Пролиферативный компартмент - область максимального количества Кл67-позитивных клеток во всех отделах неизмененной слизистой оболочки толстой кишки располагается в нижней и средней трети кишечных крипт.

4. Апоптозные клетки, выявляемые с помощью метода TUNEL, располагаются в проксимальных и дистальных отделах толстой кишки человека в средней трети кишечных крипт и в поверхностном эпителии.

5. В неизмененной слизистой оболочке толстой кишки человека в направлении от проксимальных отделов к дистальным параллельно увеличению индекса пролиферации возрастает незначительно индекс метки р53 и bcl-2. Меченые клетки располагаются в средней и нижней трети кишечных крипт.

6. В слизистой оболочке толстой кишки человека отмечается увеличение индекса пролиферации в направлении от проксимальной ее части к дистальиой, что свидетельствует о больших пролиферативных возможностях конечных отделов толстой кишки человека.

7. В неизмененной слизистой оболочке тс. ;той кишки человека индекс апоптоза не изменялся в направлении от слепой кишки к прямой. На этом фоне высокие темпы пролиферации дистальных отделов свидетельствуют о больших потенциальных возможностях этих отделов в плане онкогенеза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Поморгайло, Елена Геннадьевна, 2002 год

1. Аббасова С.Г., Кушлинский Н.Е., Липкин В.М., Трапезников Н.Н. Факты и перспективы изуеиия Fas-FasL-системы в норме и при патологии // Успехи совр. биол. 2000. - Т.120, №3. - С.303-318.

2. Автандилов Г.Г. Проблема патогенеза и патологоанатомической диагностики болезней в аспектах морфометрии. М.: Медицина, 1984. -228 с.

3. Аникин И.В., Плисс Г.Б., Лимаренко А.Ю. Играют ли нарушения клеточного деления решающую роль в онкогенезе? // Вопр. онкологии. -1998. Т.44, № 1. - С. 126-130.

4. Армитаж Н. Рак толстого кишечника: современный подход к ведению больных // Лечащий врач. 1998. - №1. - С. 16-19.

5. Аруин Л.И. Апоптоз при патологических процессах в органах пищеварения // Клин, медицина. 2000. - №1. - С.5-10.

6. Аруин Л.И. Эндокринные клетки желудочно-кишечного тракта в норме и при патологии // Клин, медицина. 1975. - №1. - С. 18-26.

7. Аруин Л.И. В кн.: Струков А.И., Серов В.В., Саркисов Д.С. Общая патология для врачей: руководство для врачей. В 2 т. Т. 2. 2-е изд., пере-раб. и доп. - АМН СССР. - М.: Медицина, 1990. - С.233-290.

8. Аруин Л.И., Капуллер Л.Л., Исаков В.А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника. М.: "Триада-Х", 1998. - 496с.

9. Аруин Л.И., Шаталова О.Л. Межэпителиальные лимфоциты в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки // Арх. АГЭ. -1982. Т.82., вып.4. - С.58-81.

10. Ю.Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В. Программированная клеточная смерть (апоптоз) // Росс, онкол. журн. 1996. - №1. - С.58-61.

11. П.Бгатова Н.П., Новоселов Я.Б. Использование биологически активных пищевых добавок на основе природных минералов для детоксика-ции организма. Новосибирск, 2000. - 240с.

12. Белушкина Н.Н., Северин С.Е. Молекулярные основы патологии апоптоза // Арх. патологии. 2001. - №1. - С.51 -60.

13. Белушкина Н.Н., Хасан Хамад А., Северин С.Е. Молекулярные основы апоптоза // Вопр. биол., медиц. и фармацевт, химии. 1998. - №4. -С. 15-24.

14. И.Владимирская Е.Б., Масчан А.А., Румянцев А.Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста // Гематология и трансфузиология. -1997. Т.4, №5. с.4-9.

15. Гамильтон С.Р. Структура толстой кишки // В кн.: Физиология и патофизиология желудочно-кишечного тракта / Под ред. Дж. М. Полак, С.Р. Блума, Н.А. Райта, А.Г. Батлера. М.: Медицина, 1989. - 496 с.

16. Гребнев A.JI., Мягкова Л.П. Болезни кишечника (современные представления в диагностике и терапии). М.: Медицина, 1994. - 400 с.

17. П.Гуревич Л.А., Исаков В.А. Использование в иммуногистохимиче-ских исследованиях методов восстановления антигенной специфичности воздействием микроволн на ткани, фиксированные формалином и заключенные в парафин // Арх. патологии. 1999. - №2. - С.48-50.

18. Данилов Р.К., Боровая Т.Г., Клочков Н.Д. Экспериментально-гистологический анализ гистогенеза и регенерации тканей (некоторые итоги XX в. и перспективы дальнейших исследований) // Морфология. -2000. Т.117, №4. - С.7-16.

19. Дондуа А.К. Кинетика клеточных популяций и процессы дифференциации. В кн.: Клеточное размножение и процессы дифференциации. -Л., 1983. - С.230-233.

20. Епифанова О.И. Метаболизм пролиферирующих и покоящихся клеток // Цитология. 1979. - №12. - С. 1379-1398.

21. Епифанова О.И., Терских В.В., Полуновский В.А. Покоящиеся клетки: свойства и функции в организме. М.: Наука, 1983. - 178с.

22. Епифанова О.И., Терских В.В. Метод радиоавтографии в изучении клеточных циклов. М.: Наука, 1969. - 119с.

23. Иванова О.В., Пузырев А.А. Дифференцировка эндокриноцитов толстой кишки некоторых позвоночных животных и человека // Морфология. 1998. - Т. 114, №4. - С. 107-111.

24. Капуллер Л.Л. Морфологические критерии гиперплазии, диспла-зии и начального рака толстой кишки // Арх. Патологии. 1985. - Вып. 11. - С.14-9.

25. Клишов А.А. Гистогенез и регенерация тканей. Л.: Медицина, 1984. - 232 с.

26. Клишов А.А. О содержании и соотношении понятий "дифференцировка", "детерминация" и "специализация" // Арх. анат. -1983а. -Вып.З.-С.73-81.

27. Коган Е., Демура. С., Пальцев М. Патология митоза и апоптоза при опухолевом росте // Врач. 2001. - №9. - С.35-37.

28. Козлова И.В., Осадчук М.А., Кветной И.М., Попучиев В.В. Апу-доциты и тучные клетки при хронических воспалительных заболеванияхтолстой кишки: клинико-морфологические сопоставления // Терапевт, арх. 2000. - Т.72, №2. - С.32-35.

29. Комарова Е.А., Гудков А.В. Супрессия р53: новый подход к преодолению побочных эффектов противоопухолевой терапии // Биохимия. -2000. Т.65, вып. 1. - С.48-56.

30. Кононов А.В. Местный иммунитет и регенерация слизистых оболочек при хроническом воспалении (биопсийное исследование). Омск, 1993. - 320с.

31. Копнин Б.П. Мишени дествия онкогенов и опухолевых супрессо-ров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза. // Биохимия. -2000. Т.65, вып.1. - С.5-33.

32. Корнева Т.К. Дисбактериоз кишечника у проктологических больных: микробиологические аспекты // Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопрокт. 1999. -N3. - С.55-60.

33. Короткова Г.П., Токин Б.П. Понятие "дифференциации" в современной биологии // Арх. анат. 1974. - Вып.1. - С. 102-111.

34. Краевский Н.А., Смольянникова А.В., Саркисова Д.С. Патолого-анатомическая диагностика опухолей человека: Руководство в 2 томах. Т. 1,2. 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1993. - 560 е., 688 с.

35. Краскина Н.А., Вегер Е.М., Гуторова Н.М. и др. Контролирующее влияние Т-лимфоцитов-супрессоров на пролиферацию клеток различных органов // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1988. - №4. - С.464-466.

36. Кузнецов С.М., Лужнов К.В., Лужнов Н.П. Клинико-морфологическая характеристика ворсинчатых опухолей толстой кишки // IV Всероссийская конференция с международным участием "Актуальные проблемы колопроктологии", Иркутск. 1999. - С. 138-140.

37. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш. школа, 1990. - 352 с.

38. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М.: Мир, 1969. - 645 с.

39. Лукьянова Н.Ю., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей // Вопр. онкол. 2000. - Т46, №2. - С.121-128.

40. Лушников Е.Ф. Апоптоз клеток при лучевом патоморфозе опухолей // Арх. патологии. 1986. - №3. - С.60-67.

41. Маймулов В.Г., Лучкевич B.C., Румянцев А.П., Семенова В.В. Основы научно-литературной работы в медицине: СПб: СПбГМА, 1996. -128 с.

42. Маковецкий В.Д. // В автореф. . дисс. докт. мед. наук: Структурно-функциональная характеристика и морфогенез железистого аппарата толстой кишки взрослого человека / Д.Б.Никитюка. М., 1994. - 34 с.

43. Никитюк Д.Б. Структурно-функциональная характеристика и морфогенез железистого аппарата толстой кишки взрослого человека: Дисс. докт. мед. наук. М., 1994. - 34 с.

44. Новиков B.C. Программированная клеточная гибель СПб: Наука, 1996. - 276 с.

45. Петров В.П., Потехин А.В. Хирургическое лечение злокачественных ворсинчатых новообразований толстой кишки // Росс. журн. гастроен-терол., гепатол., колопркт. 1998. - №6. - С.71-75.

46. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная. М.: Иностранная литература, 1962. - 963 с.

47. Погорелое В.М., Козинец Г.И. Морфология апоптоза при нормальном и патологическом гемопоэзе // Гематол. и транс фу зиол. 1995. -Т.40, №5. -С.17-25.

48. Пожарисский К.М., Климашевский В.Ф., Гущин В.А. Сравнительный анализ кинетики популяции энтероцитов различных отделов тонкой и толстой кишки крысы // Цитология. 1977. - Т.19, №3. - С.318-328.

49. Рекомендации фирмы "DAKO" List of tissues that cfn be used as positive controls for antibodies, listed accoding to antibodies // DAKO, Дания, 1999. 3 p.

50. Самуилов В.Д., Олескин A.B., Лагунова E.M. Программируемая клеточная смерть // Биохимия. 2000. - Т.65, вып.8. - С. 1029-1046.

51. Саркисов Д.С. Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций. М.: Медицина, 1987. - 448 с.

52. Саркисов Д.С., Пальцев М.А., Хитров Н.К. Общая патология человека. М.: Медицина, 1995. - 272 с.

53. Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Микроскопическая техника: Руководство. М.: Медицина, 1996. - 544 с.

54. Саркисов Д.С., Туманов В.П. В кн.: Струков А.И., Серов В.В., Саркисов Д.С. Общая патология для врачей: руководство для врачей. В 2 т. Т. 2. 2-е изд., перераб. и доп. - АМН СССР. - М.: Медицина, 1990. -С. 199-322.

55. Ставровская А.А. Клеточные механизмы множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток // Биохимия. 2000. - Т.65, вып.1. -С.112-126.

56. Струков А.И., Хмельницкий O.K., Петленко В.П. Морфологический эквивалент функции (Методологические основы) / АМН СССР. М.: Медицина, 1983. - 208 с.

57. Судакова К.В. Нормальная физиология: курс физиологии функциональных систем. М.: Медицинское информационное агентство, 1999. -718с.

58. Тимашкевич Т.Б. Пути и механизмы регенерации пищеварительного тракта у позвоночных. М.:Наука, 1978. - 183с.

59. Токин И.Б. Проблемы радиационной цитологии. Л., 1974.

60. Токин И.И., Филимонова Г.Ф. Апоптоз и структура популяции кишечного эпителия // Актуальные вопросы экологии и экотоксикологии: Труды Санкт-Петербурского общества экологии и экотокосикологии СПб., 1998 С.66-74.

61. Тронов В.А. Репарация ДНК и апоптоз // Цитология. 1999. -Т.41, №5. - С.405-410.

62. Уголев A.M. Энтериновая (кишечная гормональная) система. Л.: Наука, 1978.-316 с.

63. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клетоные механизмы // Молек. биол. 1996. - Т.30, вып.З. - С.487-502.

64. Урываева И.В. Пролиферация клеток в ключевых событиях канцерогенеза // В сб. научн. трудов: Клеточная репродукция и процессы дифференциации / Под ред. А.К.Дондуа. Л.: Наука, 1990. - С.94-109.

65. Филлипс С.Ф. Функции толстой кишки: обзор // В кн. Физиология и патофизиология желудочно-кишечного тракта / Под ред. Полак Дж.М., Блума С.Р, Райта Н.А., Батлера А.Г. М.: Медицина, 1989. - 340496 с.

66. Чертков И.Л., Гуревич О.А. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение. М.: Медицина, 1984. - 232 с.

67. Чумаков П.М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью // Биохимия. 2000. - Т.65, вып.1. - С.34-47.

68. Хэм А., Кормак Д. Гистология.- М.: Мир, 1983. Т.4. - 245 с.

69. Шварцман Я.С., Хазенсон Л.Б. Местный иммунитет. Л.: Медицина, 1978. - 224 с.

70. Шелыгин Ю.А. Диагностика и лечение рака толстой кишки // Росс. журн. гастроентерол., гепатол., колопркт. 1997. - N°7. - С.12-19.

71. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. М., 1998.

72. Щербаков И.Т. Патоморфология слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта при острых и бактериальных вирусно-кишечных инфекциях и хронических колитах: Автореф. дис. докт. мед. наук. М., 1995.-39 с.

73. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология. 1996. - N7. - С. 10-23.

74. Ярилин А.А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целом организме // Патол. физиол. и эксперим.терапия. 1998. - №2 - С.38-48.

75. А11еп R.T., Hunter W.J., Agrawal D.K. Morphological and biochemical characterization and analysis of apoptosis // J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 1997. - Vol.37. - P.215-228.

76. Allen T.D. Perspectives on Mammalian Death / Ed. C. S. Potten. -Oxford, 1987. P. 39-65.

77. Andersson R., Wang X., Soltesz V. The significance and potential molecular mechanisms of gastrointestinal barrier homeostasis // Scand. J. Gastroenterol. 1997. - Vol. 32. - P. 1073-1082.

78. Appleton D.R., Sunter I.R., DE Blok S., Dee Jong E. L'anatomie de la region amorectale // Phlebologie. 1980. - Vol.33, №4. - P.661-668.

79. Augenlicht L.H., Bordonaro M., Heerdt B.G., Mariadason J., Velcich A. Cellular mechanisms of risk and transformation // Ann. N.Y. Acad. Sci. -1999. Vol.889. - P.20-31.

80. Augenlicht L., Velcich F., Mariadason J., Bordonaro M., Heerdt B. Colonic cell proliferatin, differentiation, and apoptosis // Adv. Exp. Med. Biol. -1999.-Vol.470.-P.15-22.

81. Bellamy Ch.O.C. P53 and apoptosis // Br. Med. Bull. 1997. - Vol.53, №3. - P.522-538.

82. Bjerknes M., Cheng H. The stem-cell zone of the small intestinal epithelium // Amer. J. Anat, 1982. - Vol.160. - P.77-91.

83. Bonkhoff H., Fixemer Т., Hunsicer I., Remberger K. Simultaneous detection of DNA fragmentation (apoptosis), cell proliferation (MIB-1), and phenotype markers in routinely processed tissue sections // Virchovs. Arch. -1999. Vol.434, №1. - P.71-73.

84. Booth C., Potten C.S. Gut instincts: thoughts on intestinal epithelial stem cells // J. Clin. Invest. 2000. - Vol.105, №11. - P.1493-1499.

85. Brown D., Gatter K. Monoclonal antibody Ki67: its use in histopathology // Histopathology. 1990. - Vol.17. - P.486-501.

86. Bruno S., Darzynkiewicz Z. Cell cycle dependent expression and stability of the nuclear protein detected by Ki67 antibody in HL-60 cells // Cell. Prolif. 1992. - Vol.25. - P.31-40.

87. Bukholm I.K., Nesland J.M Protein expression of p53, p21 (Wafl/CIPl), bcl-2, Bax, cyclin D1 and pRb in human colon carcinomas // Vir-chows Arch. 2000. - Vol.436, №3. - P.224-232.

88. Butler L.M., Hewett P.J., Fitridge R.A., Cowled P.A. Deregulation of apoptosis in colorectal corcinoma: theoretical and therapeutic implications // Aust. N.Z.J. Surg. 1999. - Vol.69, №2. - P.88-94.

89. Carson D., Lois A. Cancer progression and p53. Lancet. - 1995. -Vol.346. -P.1009-1011.

90. Cohen J.J. Apoptosis // Immunol.Today. 1993. - Vol.14. - P.126-130.

91. Cole J.W., McKalen A. Observation of Cell Renewal in Human Rectal Mucosa in vivo with Thymidine-H3 // Gastroenterology. 1961. - Vol. 41. -P. 122-125.

92. Cowdery J.S., McKieman F.S. Analysis of T cell and В cell function in Реуек-s patch and lamina propria of New Zeland black and DBA/2 mice // J. Immunol. 1986. - Vol.136, №11. - P.4070-4074.

93. Cristina M.L., Lehy Т., Zeitoun P. Les cellubes endocrines du colon of du rectum chez Thomme normal. Etude ultrastructure // Boil. Gastoent. -1976/1977. Vol.9, №4. - P.310-311.

94. Deschner E.E., Lipkin M. Proliferation and differentation of gastric intestinal cells in health and disease // Gastrointestinl tract cancer. New York, 1978. - P.3-27.

95. Dickman S. First p53 relative maybe a new tumor suppressor // Science. 1997. - Vol.277. - P.l605-1606.

96. Donowitz M., Levin S., Powers G. et al. Ca2+ chanel blockers stimulate ileal and colonic water absorption // Gastroenterology. 1985. -Vol.89. - P.858-866.

97. Fazeli A., Steen R.G., Dickinson S.K., Bautista D. et al. Effects of p53 mutations on apoptosis in mouse intestinal and human colonic adenomas // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol.94, №19. - P. 10199-10204.

98. Ferguson D.J.P., Anderson T.J. Ultrastructual observations on Cell Death by Apoptosis in the "resting" human breast // Virchow"s. Arch. Abt. A. Pathol. Anat. -1981. Bd.393. - S.193-203.

99. Ferri K.F., Kroemer G. Organelle-specific initiation of cell death pathways // Nat. Cell Biol. 2001. - Vol.3, №11. - P.255-263.

100. Fisher D. Apoptosis in cancer therapy: crossing the threshold // Cell. -1994. -Vol.78, №4. P.539-542.

101. Fredersdorf S., Milne A., Hall P., Lu X. Characterization of a panell of novel anti-p21 Wafl/Cipl monoclonal antibodies and Immunohistochemical analysis of p21 expression in normal human tissues // Am. J. Clin. Pathol. -1996.-Vol.148.-P.825-835.

102. Frisch S.M., Francis H. Disruption of epithelial cell-matrix interactions induces apoptosis // J. Cell Biol. -1994. Vol.124., N4. - P.619-626.

103. Gavrieli Y, Sherman Y, Ben-Sasson SA. Identification of programmed cell death in situ via specific labelling of nuclear DNA fragmentation. // J. Cell Biol. 1992. -Vol.119. - P.493-501.

104. Greenwood J.H., Austin L.L., Dobbins W.O. In vitro characterization of human intestinal lymphocytes // Gastroenterology. 1983. - Vol.85, №5. -P.l 023-1036.

105. Halestrap A.P., Doran E., Gillespie J.p., O'Toole A. Mitochondria and cell death // Biochem. Soc. Trans. 2000. - Vol.28, №2. - P. 170-177.

106. Hall P.A., Coates P.J., Ansari A. Regulation of cell number in the mammalien gastrointestinal tract: the importans of apoptosis // J. Cell Sci. -1994. Vol. 107. - P.3569-3577.

107. Hamilton S.R., Bussy H.J.R., Morson B.C. // In face histology technique to demonstrate mucose inflamatory lesions in macroscopicallyuninvolved colon of Cron's disease resection specimens // Lab. invest. 1980. -Vol.42.-P.121.

108. Hansen R., Oren M. P53: from inductive signal to cellular effect // Curr. Opin. Genet. Develop. 1997. - Vol.7. - P.46-51.

109. Пб.Нао X., Du M., Boshop A.E., Talbot I.C. Imbalance between proliferation and apoptosis in the development of colorectal carcinoma // Virchows Arch. 1998. - Vol.433, №6. - P.523-527.

110. Hawker P.C., Turnberg L.A. (Хоукер П.К., Тернберг JI.А.). Транспорт жидкости и электролитов в толстой кишке // Гастроэнтерология 3. Толстая кишка. Под ред. Дж. Александера-Вильямса, X. Дж. Биндера. -М.: Медицина, 1988. - 9-23 с.

111. Hickman J.A. Apoptosis an overview // Hum. and Exp. Toxicol. -1995.-Vol.14, №9.-P.751.

112. Hockenbery D., Nunez G., Milliman C. et al. Bcl-2 is an inner mitochondrial membrane protein that blocks programmed cell death // Nature. -1990. -Vol.348, №6299. P.334-336.

113. Holcik M., Gibson H., Korneluk R.G. XIAP: apoptotic brake and promising therapeutic target // Apoptosis. 2001. - Vol.6, №4. - P.253-261.

114. Holt P.R., Moss S.F., Kapetanakis A.M. et al. Is Ki67 a better proliferative marker in colon then proliferating cell nuclear antigen? // Cancer. Epidemiol. Biomarers. Prev. 1997. - Vol.6. - P. 131-136.

115. Jacobson M. Apoptosis: Bcl-2 related proteins get connected // Curr. Biol. - 1997. - Vol.7. - P.R277-R281.

116. Jacobson M.D., Bume J.F., King M.P. et al. Bcl-2 blocks apoptosis in cells lacking mitochondrial DNA // Nature. 1993. - Vol.361, №6410. - P.365-366.

117. Jacobson M. P., Wail M., Raff M. Programmed cell death in animal development // EMBO J. 1997. - Vol.88. - P.347-354.

118. Kerr J.F.R., Searle J. Apoptosis: its nature and kinetic role // Radiation Biology in Cancer Research. New York, 1980. - P.367-384.

119. Kerr J.F.R., Wyllie A.H., Currie A.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implication in tissue kinetics // Brit. J. Cancer. 1972. - Vol.26, №4. - P.239-257.

120. Kikuchi Y., Dinjens W.N., Bosman F.T. Proliferation and apoptosis in proliferative lesions of the colon and rectum // Virchows Arch. 1997. -Vol.431.-P.l 11-118.

121. Kisieleski W.E., Baserga R., Lisco H. Tritiated thymidine and the study of tumors // Atompraxis. 1961. - Vol.73. - P.81-86.

122. Korsmeyer S.J. Bcl-2 initiates a new category of oncogenes: regulators of cell death // Blood. 1992. - Vol.80. - P.879-886.

123. Lamont A.G., Mowat A. Contrasuppressor cells in mucosal immunity // Immunol. Today. 1986. - Vol.7. - P.255.

124. Lane DP. P53 guardian of the genome // Nature. 1992. - Vol.358. -P.15-16.

125. Lazebnik Yu., Cole S., Cooke C. et al. Nucleai events of apoptosis in vitro in cell free mitotic extracts // J. Cell Biol. - 1993. - Vol. 123. - Г.7-22.

126. Leblond C.P., Cheng H. Identification of stem cells in the small intestine of the mouse. In: Cairnie A.B., Lala P.K., Osmond G.G. (eds.). Stem. Cells of Renewing Cell Populations, New York, Academic Press, 1976.

127. Lipkin M., Sherlock P., Bell B. Cell Proliferation Kinetikcs in the Gastointestinal Tract of Man. II. Cell Renewal in Stomach, Ileum, Colon, and Rectum // Gastroenterology. 1963. - Vol.45. - P.721-729.

128. Liu L.U., Holt P.R., Krivosheyev V., Moss S.F. Human right and left colon differ in epithelial cell apoptosis and in expression of Bak, a pro apoptotic Bcl-2 homologue // Gut 1999. - Vol.45. - P.45-50.

129. Lowe S.W., Schmitt E.M., Smith S.W. et al. P53 is reguired for radiation- induced apoptosis in mouse thymocytes // Nature. 1993. - Vol.74. -P.957-967.

130. Marsh M.N. Studies of intestinal lymphoid tissue. The cytology and electron microscopy of glutein-sensitive enteropathy, with particular referenee its immunopathology // Basic. Sci. Gastroenterol: Struct. Gut. Ware, 1982. -P.87-106.

131. Mendelsohn M.L. The growth fraction: a new concept applied to tomors. Science. - 1960. - Vol.132. - P. 1496.

132. Metcalfe A., Streuli C. Epithelial apoptosis // Bioessays. 1997. -Vol.19, №8.-P.711-720.

133. Mueller J., Mueller E., Hoepner I., Jutting J., Bethke В., Stolte M., Hofler H. Expression of bcl-2 and p53 in de novo and ex-adenoma colon carcinoma: a comparative immunohistochemical study // J. Pathol. 1996 -Vol.180. - №3. - P.259-265.

134. Paijes J. // В автореф. . дисс. докт. мед. наук: Структурно-функциональная характеристика и морфогенез железистого аппарата толстой кишки взрослого человека / Д.Б.Никитюка. М., 1994. - 34 с.

135. Payne С.М., Bernstein Н., Garewal Н. Role of Apoptosis in Biology and Pathology: Resistance to Apoptosis in Colon Carcinogenesis // Ultrastructual Pathology. 1995. - Vol.19. - P.221-248.

136. Pollack M., Leeuwenburgh C. Apoptosis and aging: role of the mitochondria // J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 2001. - Vol.56, №11. - P.475-482.

137. Potten C.S. A comprehensive study of the radiobiological response of the murine (BDFI) smal intestine // Int. J. of Rad. Biol. 1990. - Vol.58. -P.925-974.

138. Potten C.S. Epithelial cell growth and differentiation. II. Intestinal apoptosis // Am. J. Physiol. 1997. - Vol.273. - P.253-257.

139. Potten C.S. Stem cells in gastrointestinal epithelium, numbers, characteristics and death // Philos. Trans. R. Soc. Lond. В Biol. Sci. 1989. -Vol.353.-P.821-830.

140. Potten C.S. The significance of spontaneous and induced apoptosis in the gastrointestinal tract of mice // Cancer Metastasis rev. 1992. - Vol.11. -P. 179-195.

141. Potten C.S., Booth C., Pritchard D.M. The intestinal epithelial stem cell: the mucosa governor // Int. J. Exp. Pathol. 1995. - Vol.78. - P.219-243.

142. Potten C.S., Merritt A., Hickmann J., Halls p., Faranda A. Characterization of radiation induced in the small intestinal and its biological implications // Int. J. Rad. Biol. 1994. - Vol.65. - P.71-78.

143. Potten C.S., Wilson J.W., Booth C. Regulation and Significance of apoptosis in the stem cells of the gastrointestinal epithelium // Stem Cells. -1997.-Vol.15, №2.-P.82-93.

144. Prindull G. Apoptosis in the embryoand tumorgenesis // Eur. J. Cancer. 1995. - Vol.31 A, №1. - P.l 16-123.

145. Prokosimer M., Rotter V. Structure and function of p53 in normal cell and their abberation in cancer cells: projection on the hematologic cell lineages// Blood. 1994. - Vol.84, №8. - P.231-241.

146. Que F.G., Gores G.J. Cell death by apoptosis: basic concepts and disease relevance for the gastroenterologist // Gastroenterology. 1996. -Vol.110.-P.1238-1243.

147. Reed J.C. Bcl-2 and the regulation of programmed cell death // J. Cell. Biol. 1994. - Vol.124, №1. - P.l-6.

148. Renehan A.G., Bach S O., Potten C.S. The relevance of apoptosis for cellular homeostasis and tumorigenesis in the intestine // Can. J. Gastroenterol. 2001. - Vol.15, №3. - P. 166-176.

149. Robey P.G. Series Introduction: Stem cells near the century mark // J. Clin. Invest. 2000. - Vol.105, №11. - P.1489-1491.

150. Ruoslahti E., Reed J. Anchorage dependence, integrins, and apoptosis // Cell. 1994. - Vol.77. - P. 477-478.

151. Saraste A. Morphologic criteria and detection of apoptosis // Herz. -1999. Vol.24, №. - P.189-195.

152. Sawada M.s Horiguchi Y., Abujiang P. et al. Monoclonal antibodies to a zinc-binding protein of rat Panath cells // J. Histochem. Cytochem. 1994.- Vol.42. P.467-472.

153. Schulze Osthoff K., Walczak H., Droge W., Krammer P.H. Cell nucleus and DNA fragmentation are not required for apoptosis // J. Cell Biol. -1994. - Vol.127, №1. - P.15-20.

154. Scott H., Brandtzaeg P. Enumeration of Paneth cell in coeliac disease. Comparision of conventional light microscopy and immunofluorescence staining for lyzozym // Gut. 1981. - Vol.22, №10. -P.812-816.

155. Searle J., Lawson T.A., Abbott P.J. et al. An electron microscope study of the cell death induced by cancerchemotherapeutic agens in populations of proliferating normal and neoplastic cells // J. of Pathol. 1975. - Vol.116. -P. 129-138.

156. Shanmugathasan M., Jothy S. Apoptosis, anoikis and their relevance to the pathobiology of colon cancer // Pathol. Int. 2000. - Vol.50, №4. - P.273-282.

157. Shibahara Т., Sato N., Waguri S. et al. The fate of effete epithelial cells at the villus tip of the human small intestine // Arch. Histol. Cytol. 1995.- Vol.58. -P.205-219.

158. Shimamura A., Fisher D.E. P53 in life and death // Clin. Cancer Res.- 1996. -Vol.2, №3. P. 435-440.

159. Smith M., Fornace A. The two faces of tumor supressor p53 // Am. J. Pathol. 1996. - Vol.148. - P.1019-1022.

160. Solcia E., Capella C., Ruffa R. et al. The diffuse endokrine -paracrine system of the gut in helth and diseose. // Scand. J.Gastroent. 1981. - Vol.16, №70. - P.25-36.

161. Solcia E., Greutzfeldt W., Falkmer S. et al. Human gastroenteropancreatic endocrine paracrine cell: Santa Monica 1980 classification. New York, San Francisco, London, Academic press, 1981. -P.159-165.

162. Soussi T. The p53 tumor suppressor gene: from molecular biology to clinical investigation // Ann. NY Acad. Sci. 2000. - Vol.910. - P. 121-137.

163. Speroni A.H., Vanzulli S.I., Meiss R.P. Adenomas of the colon: overexpression of p53 protein and risk factors // Endoscopy. 1998. - Vol.30, №7. - P.623-626.

164. Steller H. Mechanisms and genes og cellular suicide // Science. -1995. Vol.267, №5203.- P.1445-1449.

165. Strater J., Koretz K., Gunthert A.R., Moller P. In situ detection of enterocytic in normal colonic mucosa and in familian adenomatous poliposis // Gut. 1995. - Vol.37. - P.819-825.

166. Susin S.A., Zamzami N., Castedo M. et al. The central executioner of apoptosis: multiple connections between protease activation and mitochonria in Fas/APO-l/CD95 and ceramide-induced apoptosis // J. exp. Med.- 1997. -Vol.186.-P.25-37.

167. Talbot I., Prise A. Biopsy Pathology in colorectal disease // london. Chapman and Hall. 1987. - P.394.

168. Thompson C.B. Apoptosis in the pathogenesis and treatment of disease // Science. 1995. - Vol.267, №5203. - P.1456-1462.

169. Trasher J.D. Age and the cell cycle of the mouse colonic epithelium // Anat. Rec. 1967. - Vol.157, №4. - P.621-625.

170. Tsujimoto Y., Croce C.M. Analysis of the structure, transcripts, and protein products of Bcl-2, the gene involved in human follicular lymphoma // Proc. Natl. Acad Sci. USA. 1986. - Vol.83. - P.5214-5218.

171. Vaux D.L., Weissmann I.L. Neither macromolecular synthesis nor myc is required for cell death via the mechanism that can be controlled by Bcl-2 // Mol. Cell. Biol. 1993. - Vol.13, №11.- P.7000-7005.

172. Vogelstein В., Fearon E., Hamilton S. et al. Genetic alteration during colorectal-tumor development // N. Engl. J. Med. 1988. - Vol.319. - P.525-532.

173. Ward M., Ferguson A., Eastwood M.A. Jejunal lyzozyme activity and the paneth cell in coeliac disease // Gut. 1979. - Vol.20, №1. - P.55-58.

174. Watson A.J.M., Merritt A.J., Jones L.S., et al. Evidence for reciprocity of Bcl-2 and p53 expression in human colorectal adenomas and carcinomas // Br. J. Cancer. 1996. - Vol.73. - P.889-895.

175. Winterford C.M., Walsh M.D., Leggett B.A., Jass J.R. Ultrastructural licalization of epithelial mucin core in colorectal tissues // J. Histochem. Cytochem. 1999. - Vol.47, №8. - P.1063-1074.

176. Wong M.H., Stappenbeck T.S., Gordon J.I. Living and Commuting in Intestinal Crypts // Gastroenterology 1999. - Vol. 116. - P.208-209.

177. Wyllie A.H. Glucocorticoid-induced thymocyte apoptosis is associated with endogenous activation // Nature. 1980. - Vol.284. - P.555-556.

178. Wyllie A.H., Kerr J.F.R., Currie A.R. Cell death: The significance of apoptosis // Intern. Rev. Cytol. 1980. - Vol.68. - P.251-306.

179. Yamaguchi A., Makimoto K., Goi Т., Takeuchi K., Maehara M., Isobe Y., Nakagawara G. Overexpression of p53 protein and proliferative activity in colorectal adenoma // Oncology. -1994. Vol.51, №3. - P.224-227.

180. Yang E., Korsmeyer S. J. Molecular thanatopsis: a discourse on the BCL2 family and cell death // Blood. 1996. - Vol.88. - P.386-401.

181. Yang H.B., Chow N.H., Sheu B.S., Chan S.H., Chien C.H., Su I.J. The role bcl-2 in the progression of the colorectal adenoma-carcinoma seuence // Anticancer Res. 1999. - Vol.19. - P.727-730.

182. Yonish-Rouach E. A questtion of life or death: the p53 tumor supressor gene // Pathol. Biol. 1997. - Vol.45, №10. - P.815-823.

183. Zamazami N. Mitochondrial control of apoptosis // South. West. Cancer News. 1997. - Vol.10. - P.4-5.