Обмен глутатиона в патогенезе развития рентгеноконтрастных нефропатий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат медицинских наук Жерегеля, Сергей Николаевич

• Жерегеля, Сергей Николаевич
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Жерегеля, Сергей Николаевич

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Особенности фармакокинетики и фармакодинамики РКС.

1.2. Система глутатиона и ее биологическое значение.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Выбор и содержание животных.

2.2. Моделирование интоксикации РКС и её экспериментальная терапия.

2.3. Характеристика использованных фармакологических препаратов.

2.4. Получение образцов тканей для исследований.

2.5. Определение показателей системы глутатиона и продуктов перекисного окисления липидов в эритроцитах и в тканях лабораторных животных и в эритроцитах пациентов.

2.6. Определение биохимических показателей нефротоксичности в сыворотке крови экспериментальных животных.

2.7. Гистологическое исследование ткани почек экспериментальных животных.

2.8. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. ОБМЕН ГЛУТАТИОНА И ПРОЦЕССЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ТКАНЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ВВЕДЕНИИ ВЫСОКИХ ДОЗ РЕНТГЕНОКОНТРАСТНЫХ СРЕДСТВ.

3.1. Динамика изменений обмена глутатиона и процессов перекисного окисления липидов в тканях экспериментальных животных при введении высоких доз различных групп рентгеноконтрастных средств.

3.2. Активность ферментов системы глутатиона в тканях печени, почек и эритроцитах лабораторных животных при введении различных групп РКС.

3.3. Концентрация продуктов перекисного окисления липидов в тканях печени, почек и эритроцитах лабораторных животных при введении различных групп РКС.

3.4. Клинические проявления нарушения функции почек у лабораторных животных после введения различных групп РКС.

3.5. Изменения лабораторных показателей у экспериментальных животных при введении различных групп РКС.

3.6. Морфологическая картина тканей почек экспериментальных животных при введении РКС.

Глава 4. СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ ГЛУТАТИОНА В ТКАНЯХ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ И В ЭРИТРОЦИТАХ ПАЦИЕНТОВ ПРИ ВВЕДЕНИИ НЕИОННОГО РКС.

4.1. Общие закономерности обмена глутатиона и процессов перекисного окисления липидов в тканях экспериментальных животных при введении различных доз неионного рентгеноконтрастного препарата.

4.2. Состояние системы глутатиона в тканях лабораторных животных при введении неионного РКС на фоне экспериментального сахарного диабета и коррекции изменений преднизолоном.

4.3. Влияние средств фармакологической коррекции на состояние системы глутатиона в тканях лабораторных животных при введении неионного РКС.

4.4. Математическая модель использования показателей обмена глутатиона для оценки риска развития РКН у экспериментальных животных.

4.5. Динамика изменений системы глутатиона в эритроцитах пациентов при введении неионного РКС в диагностических дозах.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Обмен глутатиона в патогенезе развития рентгеноконтрастных нефропатий»

Актуальность. Рентгеноконтрастная нефропатия (РКН) стала важной клинической проблемой, растущей параллельно с широким распространением диагностических и лечебных процедур с использованием контрастных средств. По данным Американской ассоциации сердца, только в 2003 г. было проведено примерно 1 млн. 414 тыс. коронарных ангиографий и 664 тыс. операций коронарной ангиопластики [54]. Необходимость проведения этих процедур у больных сахарным диабетом (СД) обусловлена высоким риском развития ишемической болезни сердца, эталонным методом своевременной диагностики которой является коронарная ангиография. Рентгеноконтрастная нефропатия (РКН) определяется при фиксировании подъёма уровня креатинина сыворотки крови на 44 мкмоль/л или на 25% от базового уровня в течение 48 часов после проведения процедуры с контрастом при отсутствии альтернативных причин [58]. Уровень креатинина сыворотки сам по себе лишь относительно может отражать почечную функцию, особенно при прогрессировании почечной патологии.

РКН стала третьей по частоте причиной острой почечной недостаточности (ОПН) у госпитализированных пациентов [116]. Она ассоциируется с длительной госпитализацией, необходимостью проведения диализа и высокой смертностью в период пребывания в стационаре и после выписки [69, 111]. РКН обычно имеет преходящий характер: уровень креатинина повышается в течение трёх дней и возвращается к исходному уровню через 10 дней [110]. Распространённость РКН в общей популяции не превышает 2% [81]. В группах высокого риска (пациенты пожилого возраста, с предшествующей почечной патологией, СД, сердечной недостаточностью, гипотензией, анемией, дегидратацией, миеломной болезнью, при применении нестероидных противовоспалительных препаратов) распространённость РКН достигает 20-30% [82, 105]. Систематический анализ публикаций по данной проблеме за период с 1966 г. по январь 2006 г. определил факторы риска, связанные с пациентом (хронические почечные заболевания, СД, сердечная недостаточность, пожилой возраст, анемия, дисфункция левого желудочка), а также не связанные с пациентом (применение высокоосмолярных, ионизированных контрастных препаратов, их вязкость и объём) [118]. В большом рандомизированном исследовании (The Iohexol Cooperative Study) показано, что сочетание почечной недостаточности и СД значительно повышало риск развития ОПН. При одинаковой выраженности предсуществующей почечной патологии риск развития РКН выше у пациентов с СД. В то же время частота развития РКН при исходно нормальной функции почек была одинаковой в обеих группах больных [122]. У пациентов с диабетической нефропатией (ДН) и уровнем креатинина 0,68 г/л частота развития РКН после проведения коронарографии достигала 92% [130]. Особенно высок g риск у больных СД при почечной патологии недиабетического генеза [128]. У пациентов без диабета и азотемии риск развития РКН достаточно низок (2%), он достоверно повышается у лиц с диабетом без почечной патологии (16%) и очень высок при сочетании диабета и азотемии (38%) [102]. Более того, одно из последних исследований показало достоверно частое развитие РКН при проведении коронарографии у лиц с почечной патологией и с преддиабетом (нарушенной гликемией натощак в рамках метаболического синдрома) по сравнению с лицами без такового [127]. Повышенный риск развития РКН при нарушении углеводного обмена тесно сопряжён с его основными патогенетическими механизмами - развитием ишемического поражения почечной ткани (вследствие снижения почечного кровотока) и прямого нефротоксического воздействия при введении контраста [74,89].

Экспериментальные исследования показали, что определенную роль в развитии РКН играет повышенное образование свободных радикалов, оказывающих повреждающее действие на эпителиальные клетки канальцев. В связи с этим гипотетически оправдано применение N-ацетилцистеина и бикарбоната натрия для профилактики РКН, поскольку они способны смягчить эти негативные воздействия. Клинические и экспериментальные исследования доказывают важную роль в патогенезе РКН вида контрастного препарата [74, 122]. При этом чётко продемонстрировано достоверное снижение риска развития РКН при применении низкоосмолярных контрастных препаратов по сравнению с высокоосмолярными у лиц с изолированной почечной патологией или в сочетании с СД [125].

Помимо осмолярности, важное значение в индуцировании РКН имеют гиперхолестеринемия и гиперурикемия, часто выявляемые у больных СД 2 типа. В экспериментальных исследованиях показано, что гиперхолестеринемия способствует РКН за счет снижения продукции вазодилатирующего фактора - оксида азота [56]. Гиперурикемия сопровождается повышенным синтезом свободных радикалов, повышением уровня эндотелина-1, подавлением активности оксида азота [120].

Интерес как к средству профилактики РКН по-прежнему проявляется к ацетилцистеину, поскольку он обладает антиоксидантными свойствами (прямое удаление свободных радикалов и опосредованное через продукцию глутатиона), вазодилатирующими свойствами, предотвращает гибель эндотелиальных клеток [79, 88]. Несмотря на безопасность, простоту применения, дешевизну ацетилцистеина, на сегодняшний день достаточно ограниченны доказательства того, что наряду с адекватной гидратацией организма он может использоваться в качестве стандартного профилактического средства у пациентов с высоким риском развития РКН.

Таким образом, исследование системы глутатиона при введении РКС позволяет более подробно изучить молекулярные механизмы его токсического действия, кумулятивный эффект, а так же биохимические механизмы детоксикации этих соединений.

Цель исследования. Определить вклад изменений обмена глутатиона в механизмы формирования рентгеноконтрастных нефропатий для оптимизации мероприятий по их профилактике, диагностике и лечению.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

- определить динамику (в течение 5 суток) и провести сравнительный анализ изменений обмена глутатиона в различных органах белых беспородных крыс после введения рентгеноконтрастных препаратов омнипак-350 и гипак-76 в дозах 0,5 LD50 и LD50;

- определить динамику морфологических изменений почечной ткани и лабораторных показателей функции почек в тех же условиях у лабораторных животных;

- провести сравнительный анализ морфологических изменений, стандартных лабораторных показателей (концентрация креатинина и мочевины) и изменений обмена глутатиона в условиях формирования экспериментальных рентгеноконтрастных нефропатий у лабораторных животных;

- определить эффект влияния рентгеноконтрастного препарата омнипак-350 в дозе 0,5 LD50 на обмен глутатиона в различных тканях и лабораторные показатели функции почек у животных с экспериментальным сахарным диабетом;

- определить характер влияния представителей различных групп фармакологических препаратов (предшественника синтеза глутатиона -ацетилцистеина, препарата окисленного глутатиона — глутоксима, антигипоксанта - трисана, антиоксидантов мексидола и цитофлавина, дегидрированного аналога гормона коры надпочечников гидрокортизона -преднизолона) на динамику изменений исследуемых биохимических и морфологических показателей в тканях лабораторных животных при использовании неионного рентгеноконтрастного препарата омнипак-350 в дозе 0,5 LD50;

- определить динамику измений обмена глутатиона в эритроцитах пациентов на фоне проведения изолированного рентгеноконтрастного исследования.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Введение рентгеноконтрастных препаратов оказывает выраженное влияние на обмен глутатиона в тканях почек и эритроцитах лабораторных животных в виде сдвигов тиол-дисульфидного равновесия, изменения активности ферментов - глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, глутатионредуктазы, глутатион-8-трансферазы, глутатионпероксидазы.

2. Изменения обмена глутатиона носят дозозависимый характер и являются диагностически информативными при оценке тяжести рентгеноконтрастной нефропатии.

3. Введение рентгеноконтрастных препаратов на фоне экспериментального сахарного диабета приводит к потенцированию повреждающего действия на систему глутатиона в тканях почек проявляющееся снижением активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и глутатионредуктазы.

4. Выраженность изменений обмена глутатиона в почках животных с экспериментальной рентгеноконтрастной нефропатией на фоне проводимой терапии отражает степень нефропротекторной активности ряда фармакологических препаратов.

Научная новизна. Проведена комплексная оценка обмена глутатиона в тканях лабораторных животных и эритроцитах пациентов при введении различных рентгеноконтрастных препаратов. Экспериментально обоснована возможность использования показателей системы обмена глутатиона в клетках крови в качестве лабораторных тестов для оценки тяжести поражения почек и эффективности лечения рентгеноконтрастных нефропатий.

Реализация результатов исследования. Рекомендации, разработанные на основании полученных в ходе диссертационного исследования данных, используются в научной работе и учебном процессе на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии.

Диссертационное исследование выполнено по плану НИР, шифр «Цитотоксичность».

Апробация работы. Результаты работы доложены на итоговой конференции военно-научного общества слушателей и ординаторов 1-го факультета Военно-медицинской академии (Санкт-Петербург, 2007), Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 115-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова (Санкт-Петербург, 2008), Российской и всеармейской научно-практической конференции «Вопросы нефрологии в практике терапевта и эндокринолога» (Санкт-Петербург, 2008), IV съезд Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Санкт-Петербург, 2008).

Публикации. По теме диссертационного исследования опубликовано 26 печатных работ.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Жерегеля, Сергей Николаевич

выводы

1. Основными изменениями обмена глутатиона в тканях животных при введении рентгеноконтрастных препаратов в дозе 0,5 LD50 являются достоверное снижение ГР и каталазной активности на 25 — 30% в почках, а также увеличение ГР (на 65%) и ГП (на 18%) активности, снижение каталазной активности (на 40%) и концентрации СГ (в 2,0 раза) в эритроцитах на фоне отсутствия достоверных сдвигов со стороны лабораторных маркеров нарушения функции почек (концентрация креатинина и мочевины).

2. После введенния рентгеноконтрастных препаратов в среднесмертельных дозах на фоне необратимых морфологических изменений в тканях почек (некроз почечной паренхимы) и существенных нарушений их функции (увеличение концентрации мочевины в 1,81 раза и креатинина в 1,5 раза) отмечается достоверное снижение активности Г-6-ФДГ, ГР, каталазы, ГП и ГТ (в 1,8 - 2,6 раза) в тканях почек, а также повышение (р<0,05) концентрации СГ на 23,4% и снижение активности Г-6-ФДГ на 18% в эритроцитах.

3. Введение омнипака-350 животным с экспериментальным сахарным диабетом приводило к возникновению выраженных нарушений обмена глутатиона в тканях почек в виде снижения (р<0,05) активности ГР и Г-6-ФДГ в 1,8 раза по сравнению с показателями контрольной группы.

4. Эффективность фармакологической коррекции проявилась в частичном восстановлении обмена глутатиона в тканях животных, наиболее ярко при использовании препарата антигипоксантного действия — трисана. Его применение приводило к снижению концентрации СГ до уровня физиологической нормы, достоверному увеличению активности ферментов обмена глутатиона в тканях почек: Г-6-ФДГ, ГР, ГТ, ГП (в 1,9 — 2,7) раза, а также к увеличению активности ГП, ГТ, Г-6-ФДГ (в 1,63 - 2,1 раза) в эритроцитах.

5. Между изменениями обмена глутатиона в эритроцитах и тканях почек экспериментальных животных на фоне введения рентгеноконтрастных препаратов существует положительная корреляция: для омнипака-350 в дозе LD50 г = 0,53 (Г-6-ФДГ) и г = 0,69 (ГП), и для гипака-76 в эквивалентной дозе г = 0,52 (Г-6-ФДГ) и г = 0,49 (ГП). Получена математическая модель (уровень значимости р=0,026) позволяющая прогнозировать риск развития РКН у лабораторных животных основанная на определении концентрации СГ и активности Г-6-ФДГ и ГП в эритроцитах.

6. После проведения изолированного рентгеноконтрастного исследования пациентов, не имеющих признаков формирования рентгеноконтрастной нефропатии, основными биохимическими изменениями со стороны обмена глутатиона в эритроцитах явилось уменьшение активности Г-6-ФДГ и ГП (на 46,5% и 35,7%) по сравнению с показателями до введения РКС.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В качестве лабораторных тестов оценки риска развития и степени тяжести рентгеноконтрастных нефропатий у пациентов, подвергающихся диагностическим и лечебным процедурам с использованием контрастных средств, рекомендуется определение в эритроцитах активности Г-6-ФДГ и ГП.

2. Дополнительным методом оценки нефропротекторных свойств фармакологических препаратов для профилактики и лечения РКН является определение показателей обмена глутатиона в тканях экспериментальных животных и в эритроцитах пациентов.

162

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Жерегеля, Сергей Николаевич, 2010 год

1. Арчаков А.И. Микросомальное окисление / А.И. Арчаков. — М.: Наука, 1975.-С. 327.

2. Арчаков А.И. Окисление чужеродных соединений и проблемы токсикологии / А.И. Арчаков, И.И. Карузина // Вестн. АМН СССР. -1988. -№ 1.-С. 14-23.

3. Барабой В.А. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, И.И. Брехман, В.Г. Голотйн СПб: Наука, 1992. - С. 148.

4. Белоусова А.К. Молекулярные механизмы действия алкилирующих агентов и антибиотиков / А.К. Белоусова // Химиотерапия злокачественных опухолей. М: Медицина, 1977. - С. 61 - 117.

5. Блохин Н.Н. Химиотерапия опухолевых заболеваний / Н.Н. Блохин, Н.И. Переводчикова. М.: Медицина, 1984. - С. 304.

6. Воронина Т.А. Механизм действия и обоснование применения препарата мексидол в неврологии / Т.А. Воронина, Л.Д. Смирнов, И.И. Горяйнова. М.: Институт биохим. физики. - 2002. - С. 15.

7. Гаврилов В.Б. Измерение диеновых конъюгатов в плазме крови по УФ -поглощению гептановых и изопропанольных экстрактов / В.Б. Гаврилов, А.Р. Гаврилова, Н.Ф. Хмара. // Лаб. дело. 1988. - № 2. - С. 60 - 64.

8. Гаджиева С.Ш. Цитодифференцирующие агенты в онкологии / С.Ш. Гаджиева, Е.Р. Полосухина, Т.Г. Николаева и др. // Вопросы онкологии. -2006. Т. 52, № 3. - С. 264-274.

9. Гипоксия: адаптация, патогенез, клиника: рук. для врачей / Под. ред. Ю.Л. Шевченко. СПб: ЭЛБИ, - 2000. - С. 384.

10. Глушков С.И. Нарушения системы глутатиона и их роль, в патогеназе острых интоксикаций ксенобиотиками с различными механизмами токсического действия: Дис. . д-ра. мед. наук: 14.00.20; 03.00.04 / С.И. Глушков; Воен. мед. акад. - СПб, - 2006. - С. 451.

11. Голиков С.Н. Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, Л.А. Тиунов. Л.: Медицина. - 1986. - С. 279.

12. Еропкин М. Культуры клеток как модельная система' исследования токсичности и скрининга цитопротекторных препаратов / М.Ю.Еропкин, Е.М.Еропкина. СПб: МОРСАР АВ, - 2003. - С. 239.

13. Зозуля Ю.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного, мозга / Ю.А. Зозуля, В.А. Барабой, Д.А. Сутковой. -М.: Знание,-2000. -С. 344.

14. Ивницкий Ю.Ю. Янтарная кислота в системе средств метаболической коррекции функционального состояния и резистентности организма / Ю.Ю. Ивницкий, А.И. Головко, Г.А. Софронов. СПб: Воен.- мед. акад., 1998.-С. 82.

15. Карпищенко А.И. Методика определения показателей системы глутатиона в лимфоцитах человека / А.И. Карпищенко, В.В. Смирнов, С.И. Глушков и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 1997. -№ 12.-С. 41-42.

16. Карпищенко А.И. Система белков теплового шока БТШ 70 у крыс при отравлении дихлорэтаном / А.И. Карпищенко, С.А. Куценко, С.И. Глушков. // Токсикологический вестник. 1999. - № 6. - С. 8 - 12.

17. Кашуро В.А. Изучение влияния антигипоксантов на систему глутатиона при остром отравлении циклофосфаном / В.А. Кашуро, С.И. Глушков,

18. Т.М. Новикова. // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. СПб: Фолиант, - 2004. - С. 349-350.

19. Кашуро В.А. Система глутатиона и перекисное окисление липидов в патогенезе острых тяжелых интоксикаций циклофосфаном: Дис. . канд. мед. наук: 14.00.20, 03.00.04 / В.А. Кашуро; Воен.- мед. акад. СПб, 2003.-С. 209.

20. Колесниченко Л.С. Глутатионтрасферазы / Л.С. Колесниченко, В.И. Кулинский. // Успехи соврем, биологии. 1989. - Т. 107, Вып. 2. - С. 179-194.

21. Корнеев А.А. Роль глутатиона в формировании метаболического ответа клетки на гипоксию / А.А. Корнеев, И.А. Комиссарова. // Известия РАН. 1993.-№4.-С. 542-549.

22. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк. //Лаб. дело. 1988.-М? 1.-С. 16-19.

23. Кулинский В.И. Биологическая роль глутатиона / В.И. Кулинский, Л.С. Колесниченко // Успехи соврем, биологии. 1990. — Т. 110, Вып. 1 (4). -С. 20-37.

24. Кулинский В.И. Обмен глутатиона / В.И. Кулинский, Л.С. Колесниченко. // Успехи биол. химии. 1990. - Т. 31. - С. 157 - 179.

25. Кулинский В.И. Структура, свойства, биологическая роль и регуляция глутатионпероксидазы / В.И.Кулинский, Л.С.Колесниченко. // Успехи совр. биол.- 1993.- Т.113, Вып.1. С.107- 122.

26. Кулинский В.И. Ферменты метаболизма глутатиона и их регуляция в норме и при усиленной пролиферации / В.И. Кулинский, Л.С. Колесниченко. // Всесоюзный симпозиум по медицинской энзимологии: тез. докл. М.: б.и., 1986. - С. 197 - 198.

27. Лабори А. Регуляция обменных процессов (теоретический, экспериментальный, фармакологический и терапевтический аспекты) / А. Лабори. М.: Медицина, 1970. - С. 384.

28. Ленинджер А. Основы биохимии / А. Ленинджер; Под ред. В.А. Энгельгардта. М.: Мир, 1985.- Т. 1. - С. 367.

29. Новиков B.C. Физиология экстремальных состояний / B.C. Новиков, В.В. Горанчук, Е.Б. Шустов. СПб: Наука, - 1998. - С. 247.

30. Пальчикова Н.А. Влияние перфторана на чувствительность животных к диабетогенному действию аллоксана и течение экспериментального диабета / Н.А. Пальчикова, О.И. Кузьминова, В.Г. Селятицкая. // Бюллетень СО РАМН. 2006. - № 3. - С. 113 - 116.

31. Пальчикова Н.А. Количественная оценка чувствительности экспериментальных животных к диабетогенному действию аллоксана / Н.А. Пальчикова, В.Г. Селятицкая, Ю.П. Шорин. // Пробл. Эндокринол. -1987.-№4.-С. 65-68.

32. Пастушенков Л.В. Растения антигипоксанты (фитотерапия) / В.Л. Пастушенков, Е.Е. Лесиовская. - СПб: Хим.-фарм. ин-т, — 1991. — С. 96.

33. Петрович Ю.А. Глутатионпероксидазы в системе антиоксидантной зашиты мембран / Ю.А. Петрович, Д.В. Гуткин. // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1981. - № 5. - С. 76 - 78.

34. Саркисов Д.С. Микроскопическая техника: Руководство / Под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова. М.: Медицина, - 1996. - С. 544.

35. Северин Е.С. Биохимия / Е.С. Северин. М.: ГЭОТАР - Медиа, - 2005. -С. 622- 623.

36. Сергеев П.В. Исследования действия рентгеноконтрастных веществ на дыхательную цепь митохондрий печени крыс / Н.В. Образцов, А.Б. Тимофеев, Э.М. Халилов. // Фармакол. и токсикол. 1977. - № 5. - С. 591 -595.

37. Сергеев П.В. Исследования действия рентгеноконтрастных веществ на скорость окисления НАДФН и НАДН микросомами печени крыс / В.Н. Болыиев, Э.М. Халилов. // Фармакол. и токсикол. 1977. — № 4. — С. 445 -446.

38. Сергеев П.В. Контрастные средства / К.Н. Свиридов, Н.Л. Шиманский. -М.: Медицина, 1993. С. 184 - 190.

39. Соколовский В.В. Тиолдисульфидное соотношение крови как показатель состояния неспецифической резистентности организма: Учебное пособие / В.В. Соколовский. СПб: б.и., 1996. - С. 30

40. Тиунов Л.А. Механизмы естественной детоксикации и антиоксидантной защиты / Л.А. Тиунов // Вестник РАМН. 1995. - № 3. - С. 9-13.

41. Тиунов Л.А. Роль глутатиона в процессах детоксикации / Л.А. Тиунов, В.А. Иванова // Вест. АМН СССР. 1988. - № 1. - С. 62-69.

42. Турпаев К.Т. Роль фактора транскрипции АР-1 в интеграции внутриклеточных сигнальных систем / К.Т. Турпаев // Молекулярная биология. 2006.- Т. 40, № 6. - С. 945-961.

43. Узбеков М.Г. Действие глутатиона на энергетический обмен мозга при антенатальной гипоксии / М.Г. Узбеков, И.К. Карпачевская // Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1991. - № 5. - С. 11-13.

44. Циклофофан. Сборник статей / Под ред. С. А. Гиллера. Рига: Зинатне, 1965.-С. 270.

45. Шанин В.Ю. Клиническая патофизиология / В.Ю. Шанин. — СПб: Специальная Литература, 1998. — С. 569.

46. Шиманский Н.Л. Исследования взаимодействия рентгеноконтрастных веществ с эритроцитами / И.В. Злоказова, А.У. Степанятц. // Хим. -фарм. журн. 1978. - № 6. - С. 38 - 42.

47. Юнкеров В.И. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований / В.И. Юнкеров, С.Г. Григорьев. — СПб: ВМедА, — 2005. С. 82.

48. American Heart Association. Heart Disease and Stroke Statistics. 2006. Update.-P. 35.

49. Anderson B.B. Glutathione reductase activity and its relationship to pyri-doxinephosphate activity in G-6-PD deficiency / B.B. Anderson, J.E. Clements, G.M. Perry. // Eur. J. Haematol. 1987. - Vol. 38, № 1. - P. 12 -20.

50. Andrade L. Hypercholesterolemia aggravates radiocontrast nephrotoxicity: protective role of arginine / L. Andrade, S.B. Campos, A.C. Seguro. // Kidney Int.-1998.-Vol.53.-P. 1736-1742.

51. Arai M. Mitochondrial phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase plays a major role in preventing oxidative injury to cells / M. Arai, H. Imai, T. Koumura // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274, № 8. - P. 4924 - 4933.

52. Barrett B.J. Preventing nephropathy induced by contrast medium / В J. Barrett, P.S. Parfrey. // N. Engl. J. Med. 2006. - Vol. 354. - P. 379 - 386.

53. Bellomo G. Modulation of cellular glutathione and protein thiol status during quinone metabolism / G. Bellomo, H. Thor, S. Orrenius // Meth. Enzymol. -1990. Vol. 186. - P. 627 - 635.

54. Bettmann M.A. Adverse events with radiographic contrast agents: results of the SCVIR contrast agents registry / M.A. Bettmann, T. Heeren, A. Greenfield et al. // Radiology. 1997. - Vol. 203. - P. 611 - 620.

55. Boveris A. Superoxyde dismutase / A. Boveris, E. Cadenas ed by L. Oberly. — CRS Press, Boca Rraton, Fl., 1983. P. 15 - 30.

56. Burgman P.W. Possible role of localized protein denaturation in the mechanism of induction of thermotolerance by heat, sodium-arsenite and ethanol / P.W. Burgman, H.H. Kampinga, A.W.T. Konings. // Int. J. Hypertherm. 1993. - Vol. 9. - P. 151 - 162.

57. Carlberg I. Glutathione reductase / I. Carlberg, B. Mannervik. // Meth. Enzymol. 1985. - Vol. 113. - P. 484 - 490.

58. Chang S.W. Hypoxia increases plasma glutathione disulfide in rats / S.W. Chang, T.J. Stelzner, J.V. Weil. // Lung. 1989. - Vol. 167, № 5. - P. 269 -276.

59. Chen Q. Activation of the growth arrest and DNA damage-inducible gene gadd 153 by nephrotoxic cysteine conjugates and dithiothreitol / Q. Chen, K.Yu, J. Stevens. // J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267, № 12. - P. 8207 -8212.

60. Clauss W. Renal tolerance of iotrolan 280. A meta-analysis of 14 double-blind studies / W. Clauss, J. Dinger, C. Meissner. // Eur. Radiol. 1995. - № 5. -Suppl. 2.-P. 79-84.

61. Dangas G. Contrast-induced nephropathy after percutaneous coronary interventions in relation to chronic kidney disease and hemodynamic variables / Dangas G., Iakovou I., Nikolsky E., et al. // Am. J. Cardiol. 2005. - Vol. 95.-P. 13 - 19.

62. Davies K.J. Protein damage and degradation by oxygen radicals. 1. General aspects / K.J. Davies. // J. Biol. Chem. 1987. - Vol. 262, № 17. - P. 9865 -9901.

63. Davies K.J. Protein damage and degradation by oxygen radicals. Modification of secondary and tertiary structure / K.J. Davies, M.E. Delsignore. // J. Biol. Chem. 1987. - Vol. 262, № 17. - P. 9908 - 9913.

64. Davies K.J. Protein damage and degradation by oxygen radicals. Modification of aminoacids / K.J. Davies, M.E. Delsignore, W. Lin. // J. Biol. Chem. -1987. Vol. 262, № 17. - P. 9902 - 9907.

65. Dean R.T. Hypothesis: a damaging role in aging for reactive protein oxidative products / R.T.Dean, J.Gebiki, S.Gieseg. // Mutat. Res. 1992. - Vol. 275. -P. 387- 393.

66. Detrenis S. Lights and shadows on the pathogenesis of contrast-induced nephropathy: state of the art / S. Detrenis, M. Meschi, S. Musini et al. // Nephrol Dial Transplant 2005. - Vol. 20. - P. 1542 - 1550.

67. Diaz-Sandoval L.I. Acetylcysteine to prevent angiography-related renal tissue injury / L.I. Diaz-Sandoval, B.D. Kosowsky, D.W. Losordo. // Am. J. Cardiol. -2002.-Vol. 89.-P. 536.

68. Droge W. Function of glutathione and glutathione disulfide in immunology and immunopathology / W. Droge, K. Schulze-Osthoff, S. Mihm. // FASEB J.- 1994.-Vol. 8.-P. 1131 1138.

69. Ellman G.L. Tissue sulfhydryl groups / G.L. Ellman. // Arch. Biochem. Biophys. 1959. - Vol. 82, № 1. - P. 70 - 77.

70. Ficol A. Glucose-6-phosphate dehydrogenase plays a crucial role in protection from redox-stress-induced apoptosis / A. Ficol, F. Paglialungal, L. Cigliano et al. // Cell Deat and Diff. 2004. - Vol. 11, № 8 - P. 823 - 831.

71. Fishbane S. N-acetylcysteine in the prevention of radiocontrast-induced nephropathy / S. Fishbane, J.H. Durham, K. Marzo et al. // J. Am. Soc. Nephrol. 2004. - Vol. 15. - P. 251 - 260.

72. Fleetwood G. The effects of radiographic contrast media on myocardial contractility and coronary resistance / G. Fleetwood, M.A. Beetmann, J.C. Gordon. // Invest. Radiol. 1990. - Vol. 25. - P. 254 - 260.

73. Gleeson T.G. Contrast-induced nephropathy / T.G. Gleeson, S. Bulugahapitiya. // Am. J. Roentgenol. 2004. - Vol. 183. - P. 1673 - 1689.

74. Goldenberg I. Nephropathy induced by contrast media: pathogenesis, risk factors and preventive strategies / I. Goldenberg, S. Matetzky. // CMAJ — 2005.-Vol. 172.-P. 1461 1471.

75. Goldstein E. Interaction of Ligandin with Radiographic contrast media / E. Goldstein, I. Arias. // Invest. Radiol. 1976. - Vol. 11. - P. 594 - 597.

76. Grant R.L. Experimental models and general mechanisms of toxicity / R.L. Grant, J.D. Acosta, M.A. Mith. // Comprehensive Toxicology on CD-ROM. Elsevier Sci. 1997. - Vol. 1 - P. 567 - 568.

77. Habig W.H. Assay for differentiation of glutathione S-transferases / W.H. Habig, W.B. Jakoby. // Meth. Enzymol. 1981. - Vol. 77. - P. 398 - 405.

78. Harman D. Free-radical theory of aging: inversing the functional life span / D. Harman // Ann. NY Acad. Sci. 1994. - Vol. 717. -P. 1 - 15.

79. Heyman S.N. N-acetylcysteine ameliorates renal microcirculation: studies in rats / S.N. Heyman, M. Goldfarb, A. Shina et al. // Kidney Int. 2003. - Vol. 63.-P. 634-641.

80. Heyman S.N. Regional alterations in renal haemodynamics and oxygenation: a role in contrast medium-induced nephropathy / S.N. Heyman, C. Rosenberger, S. Rosen. // Nephrol. Dial. Transplant. Suppl. 2005. - Vol. 20. -P.6-11.

81. Huthwohl B. The effect of triiodinate radiographic contrast media on microsomal drug metabolism / B. Huthwohl, H. Hohage, E. Truber. // Schmiedeberges Arch. Pharmacol. 1975. - Vol. 285. - Supp. 1. 1. - P. 79.

82. Isaacs J.T. Cyclic AMP-dependent control of rat hepatic glutathione disulfi-de-sulfhydryl ratio / J.T. Isaacs, F. Binkley. // Biochem. Biophys. Acta. -1977.-Vol. 498, № l.-P. 29-38.

83. Juma F. D.First pass hepatic metabolism of cyclophosphamide / F.D.Juma, H J.Rogers, et al. // Brit. J. Clin. Pharmacol. 1979. -Vol. 7. - P. 422.

84. Kanekal S. Metabolism of cyclophosphamide by lipoxygenases / S. Kanekal, J.P. Kehrer. // Drug Metab. Dispos. 1994. - №1. - P.74 - 78.

85. Katzberg R.W. Renal rennin and haemodynamic responses to selective renal artery catheterization and angiography / R.W. Katzberg, T.W. Morris, F.A. Burgener et al. // Invest. Radiol. 1977. - Vol. 12. - P. 381 - 388.

86. Kehrer J. R Cellular reducing equivalents and oxidative stress / J.R. Kehrer, L.G. Lund. // Free Radical. Biol. Med. 1994. - Vol.17, № 1. - P. 65 - 75.

87. Kendal B.E. Iodixanol in intra-arterial cerebral digital subtraction angiography: comparison with iohexol / B.E. Kendal, A. Sheppich, J.O. Nossen et al. // Neuroradiology. 1995. - Vol. 35. - P. 512.

88. Ketterer B. The structure and maltiple function of glutathione transferases / B. Ketterer, P. Beale, D.J. Meyer. // Biochem. Soc. Transact. 1982. - Vol. 10, №2.-P. 82-83.

89. Kinscherf R. Effect of glutathione depletion and oral N-acetyl-cysteine treatment on CD4+ and CD8+ cells / R. Kinscherf, T. Fischbach, S. Mihm. // FASEB J. 1994.-Vol. 8.-P. 448-451.

90. Kornberg A. Glucose-6-phosphate dehydrogenase 6-phosphogluconic dehydrogenase / A. Kornberg, B.L. Horecker, P.Z. Smyrniot. // Meth.

91. Enzymol. 1955. - Vol. 1. - P. 323 - 327.

92. Lash L.H. Transport of glutathione by renal basal-lateral membrane vesicles / L.H. Lash, D.P. Jones. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1983. - Vol. 112. — № l.-P. 55-60.

93. Lasser E. Letter to the Editor / Invest. Radiol. 1975. - Vol. 10. - P. 79 - 80.

94. Lautin E.M. Radiocontrast-associated renal dysfunction: incidence and risk factors / E.M. Lautin, N.J. Freeman, A.H. Schoenfeld et al. // Am. J. Roentgenol. 1991.-Vol. 157.-P. 49-58.

95. Lawrence R.A. Species, tissue and subcellular distribution of non Se-dependent glutathione peroxidase activity / R.A. Lawrence, R.F. Burk. // J. Nutr. 1978. - Vol.108. - №2. -P. 211- 215.

96. Lichtman M. Acidification of plasma by the red cell due to radiographic contrast / M. Lichtman, M. Murphy, A. Whitbecr et al. // Circulation 1975. -Vol. 52.-P. 943-950.

97. Maeder M. Contrast nephropathy; review focusing on prevention / M. Maeder, M. Klein, T. Fehr et al. // J. Am. Coll. Cardiol. 2004. - Vol. 44. - P. 1763 -1771.

98. Maiorino M. Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase / M. Maiorino, C. Gregolin, F. Ursini. // Meth. Enzymol. 1990. - Vol. 186. - P. 448-457.

99. Mannervick B. Role of cytoplasmic thioltransferase in cellular regulation bytthyol-disulfide interchange / B. Mannervick, K. Axelsson. // Biochem. J. -1980.-Vol. 190, № l.-P. 125- 130.

100. Mannervik B. Glutathione: chemical, biochemical and medical aspects / B. Mannervik, J. Carlberg, K. Larson. // Pt. A: Coenzymes and cofactors. N.Y.: Wiley, 1989. - Vol. 3 - P. 693

101. Mannervik B. Thioltransferases / B. Mannervik // Enzymatic basis of detoxicatio. Orlanto: Acad. Press, 1980. - Vol. 2. - P. 229 - 244.

102. Marenzi G. Contrast-induced nephropathy in patients undergoing primary angioplasty for acute myocardial infarction / G. Marenzi, G. Lauri, E. Assanelli et al. // J. Am. Coll. Cardiol. 2004. - Vol. 44. - P. 1780 - 1785.

103. McCullough P.A. Acute renal failure after coronary intervention: incidence, risk factors, and relationship to mortality / P.A. McCullough, R. Wolyn, L.L. Rocher et al. // Am. J. Med. 1997. - Vol. 103. - P: 368 - 375.

104. Meister A. Glutathione / A. Meister, M.E. Anderson. // Ann. Rev. Biochem. -1983.-Vol. 52.-P. 711 -760.

105. Meister A. Glutathione and related glutamyl compounds: biosynthesis and utilization / A. Meister, S.S. Tate. // Ann. Rev. Biochem. 1976. - Vol. 45, № 3.-P. 559-564.

106. Meister A. Methods for the selective modification of glutathione metabolism and study of glutathione transport / A. Meister. // Meth. Enzymol. 1985. -Vol. 113.-P. 571 -589.

107. Morin J.E. Thiol: protein disulfide exchange enzymes / J.E. Morin, J.E. Dixon. // Meth. Enzymol. 1985. - Vol. 113. - P. 541 - 547.

108. Nash K. Hospital-acquired renal insufficiency / K. Nash, A. Hafeez, S. Hou. // Am. J. Kidney Dis. 2002. - Vol. 39. - P. 930 - 936.

109. Pacifici R.E. Protein, lipid and DNA repair system in oxidative stress: free radical theory of aging revisited / R.E. Pacifici, KJ.A. Davies. // Gerontology. 1991.-Vol. 37.-P. 166- 180.

110. Pannu N. Prophylaxis strategies for contrast-induced nephropathy / N. Pannu, N. Wiebe, M. Tonelli. // JAMA 2006. - Vol. 295. - P. 2765 - 2779.

111. Papa S. Reactive oxygen species, mitochondria, apoptosis and aging / S. Papa, V.P. Skulachev. // Mol. Cell. Biochem. 1997. - Vol. 174. - P. 305 - 319.

112. Perl stein T.S. Uric acid and the state of the intrarenal renin-angiotensin system in humans / T.S. Perlstein, O. Gumieniak, P.N. Hopkins et al. // Kidney Int. -2004. Vol. 66. - P. 1465 - 1470.

113. Peterson G.L. Simplification of protein assay method of Lowry et al which is more generally applicable / G.L. Peterson // Anal. Biochem. - 1977. - Vol. 83,2.-P. 346-356.

114. Rudnick M.R. Nephrotoxicity of ionic and nonionic contrast media in 1196 patients: a randomized trail / M.R. Rudnick, S. Goldfarb, L. Wexler et al. // The Iohexol Cooperative Study. 1995. - Vol. 47. - P. 254 - 261.

115. Schrader R. Trombogenic potential of non-ionic contrast media — fact or fiction? / Schrader R. // Eur. J. Radiol. 1996. - Vol. 23. - Supp. 1. - P. 10 -13.

116. Singh S.N. Effect of high altitude (7,620 m) exposure on glutathione and related metabolism in rats / S.N. Singh, P. Vats, M.M. Kumria. // Eur. J. Appl. Physiol. 2001. - Vol. 84. - № 3. - P. 233 - 237.

117. Smith D.C. Three new low osmolality contrast agents: a comparative study of patient discomfort / D.C. Smith, P.Y. Yahiku, M.D. Maloney et al. // A. J. N. R. 1988. - № 8. - P. 137 - 139.

118. The cytotoxics handbook / Ed. by: M.C.Allwood, P.Wright. Oxford: Red-cliffe med. Press. - 1990. - P. 239.

119. Toprak O. Metabolic syndrome as a risk factor for contrast-induced nephropathy in non-diabetic elderly patients with renal impairment / O. Toprak, M. Cirit, M. Yesil et al.// Kidney Blood Press Res. 2006. - Vol. 29. -P.2-9.

120. Toprak O. Risk factors contrast-induced nephropathy / O. Toprak, M. Cirit. // Kidney Blood Press Res. 2006. - Vol. 29. - P. 84 - 93.

121. Uchiyama M. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thiobarbituric acid test / M. Uchiyama, M. Michara. // Anal. Biochem. 1978. -Vol. 86.-№.1.-P. 271 -278.

122. Weinrauch L.A. Coronary angiography and acute renal failure in diabetic azotemic nephropathy / L.A. Weinrauch, R.W. Healy, O.S. Leland et al. // Ann. Intern. Med. 1977. - Vol. 86. - P. 56 - 59.

123. WHO Handbook for reporting results of cancer treatment // WHO Offset Publication NO. Geneva. - 1985. P. 48.

124. Wilson A.J. Effects of non-ionic contrast media on the blood-brain barrier.

125. Osmolality vs.chemo-toxicity / AJ. Wilson, C.A. Evill, M.R. Sage. // Invest. Radiol. 1991. - Vol. 26. - P. 1091 - 1094.

126. Yuan Z.M. Glutathione conjugation with phosphoramide mustard and cyclophosphamide. A mechanistic study using tandem mass spectrometry / Z.M. Yuan, P.B. Smith, R.B. Brundrett et al. // Drug Metab. Dispos. 1991. -№ 3. - P. 625-629.

127. Ziegler D.M. Role of reversible oxidation-reduction of enzyme thiols-disulfides in metabolic regulation / D.M. Ziegler. // Annual. Rev. Biochem. -1985. Vol. 54. - P. 305 - 329.

128. Изменения концентрации восстановленного глутатиона в тканях различных органов белых беспородных крыс при введении ионного РКС в суточной дозе 16 г/кг (ммоль/г ткани или мкмоль/г гемоглобина)

129. Группа исследования Сроки исследования, сутки Исследуемый орган1. Эритроциты Почки Печень

130. Контроль 6,37 ±0,31 7,31 ±0,78 12,46 ±1,42

131. Гипак LD50 1 7,58 ±0,76 6,56 ± 0,77 8,59 ± 0,243 6,85 ± 0,88 6,62 ± 0,24 9,88 ± 1,045 7,58 ± 0,47 5,50 ±0,58 14,21 ±0,73достоверность отличия р<0,05 по сравнению с группой контроля