Неиммунное взаимодействие компонента комплемента ClQ CO Streptococcus pyogenes тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Королева, Ирина Владимировна

• Королева, Ирина Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Королева, Ирина Владимировна

Список сокращений и условных обозначений

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР НАУЧНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика стрептококков группы А

1.2. Семейство М-подобных белков .,.

1.3. Взаимодействие стрептококков группы А (СГА) с белками организма человека

1.3.1. Адгезия и инвазия СГА клеток организма хозяина

1.3.2. Взаимодействие СГА с иммунной системой организма хозяина

1.3.3. Взаимодействие СГА с компонентами системы комплемента человека

1.4. СЦ и система комплемента человека.

1.5. Неиммунные активаторы СЦ

1.6. СЦ-рецепторы клеток организма человека

1.7. Взаимодействие СЦ с бактериями

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Неиммунное взаимодействие компонента комплемента ClQ CO Streptococcus pyogenes»

Актуальность проблемы

Стрептококковая инфекция, вызываемая Streptococcus pyogenes (стрептококками группы А), продолжает оставаться в центре внимания микробиологов мира. Это объясняется тем, что стрептококки группы А вызывают широкий спектр заболеваний человека от локальных форм, таких как фарингит, импетиго, до острых инфекционных заболеваний, таких как ангина, скарлатина, стрептококковый сепсис, стрептококковый шоковый синдром и некротический фасцит. Патогенность этого вида микробов также выражается и в том, что острые вспышки заболеваний назофарингеальной слизистой сопровождаются различными формами осложнений: отит, ревматизм и гломерулонефрит, Эти осложнения подчас принимают хронический характер, что ведет к инвалидизации населения. С другой стороны, вяло текущие кожные заболевания стрептококковой этиологии часто трудно диагностируются, что повышает частоту носительства стрептококков, способствуя распространению инфекции и приводя к резкому росту числа заболеваний в отдельные периоды. Со времени открытия чувствительности СГА к антибиотикам пенициллинового ряда казалось, актуальность данной проблемы снизилась. Но она не была решена полностью.

В 80-х годах был снова отмечен рост СГА заболеваний в странах США, Скандинавии и Европы. Вместе с этим возросло число заболеваний высоко вирулентными штаммами СГА, как например, штаммами М1 и МЗ серотипов, вызывающими стрептококковый шоковый синдром, характеризующийся быстрым периодом протекания болезни и высоким уровнем летальных исходов.

Конечная цель исследований стрептококков группы А - создание высоко эффективных вакцин. Несмотря на значительный объем полученных данных, эта цель еще не достигнута, что показывает недостаточность уровня наших знаний о стрептококках. В предыдущие десятилетия научные исследования были направлены на выявление структур стрептококковой клетки, играющих роль в развитии инфекционного процесса. В последние годы интенсивное применение методов молекулярной биологии позволило по-новому охарактеризовать ряд компонентов стрептококковой клетки и заново переосмыслить ранее установленные факты. В настоящее время основной акцент делается на изучении биологического значения взаимодействий компонентов стрептококковой клетки с белками организма хозяина. В этой связи взаимодействия СГА с компонентами иммунной системой человека приобретают приоритетное значение. Первые опыты в этом направлении были проведены в 40-50-х годах. Они были связаны с открытием устойчивости СГА к фагоцитозу полиморфноядерными лейкоцитами, обусловленной гиалуроновой капсулой и М белком клеточной стенки СГА. В 1962 году Lancefield продемонстрировала защитное действие типоспецифических антител к М белку при СГА инфекции. Эффект анти-М антител был непосредственно связан с активацией системы комплемента (CK) человека по классическому пути. Большое значение имело открытие Kantor в 1965 году связывания М белком СГА фибриногена плазмы, которое играет значительную роль в защите микроба от атаки со стороны иммунной системы человека.

До сих пор ученым не удалось полностью объяснить антифагоцитарные свойства М белка. Были получены четкие доказательства, что М белок ингибирует активацию CK человека по альтернативному и, частично, по классическому пути. Попытки объяснить этот феномен привели ученых к более пристальному изучению взаимодействия СГА с компонентами CK человека. Наиболее значительным шагом в этом направлении было исследование Horstmann с соавторами в 1988 году, предположившими, что связывание ингибитора альтернативного пути активации CK, фактора Н, с рядом штаммов СГА играет решающую роль в блокировании альтернативного пути активации CK человека. Ими же было показано, что связывание фактора Н со стрептококковой клеткой происходит с участием М белка. Взаимодействие СГА с С4-связывающим белком (С4ВР), ингибитором классического пути CK, посредством М-подобных белков было продемонстрировано Thern с соавторами в 1995 году. Однако, эти авторы пока не предоставили доказательств, что данное связывание влияет на активацию CK по классическому пути.

В 70-х годах появились сведения о неиммунном взаимодействии бактерий с Clq -компонентом, вызывающим активацию CK по классическому пути. В случае грамотрицательного человеческого патогена Neisseria gonorrhoeae был убедительно продемонстрирован биологический эффект такого взаимодействия. В экспериментах на новорожденных крысах было установлено, что неиммунная фиксация человеческого Clq этими бактериями способствовала развитию экспериментальной бактериемии. Первые данные о неиммунном взаимодействии грамположительных кокков с Clq появились в 1980 году благодаря исследованиям К. Prellner. При изучении взаимодействия Clq с пневмококками она продемонстрировала относительно высокий уровень связывания Clq отдельными штаммами стрептококков групп А, В, С и G.

Дальнейшее изучение неиммунного связывания стрептококков группы А с компонентом системы комплемента Clq должно помочь выяснению биологической роли этого феномена и дать новые сведения о взаимодействии СГА с иммунной системой человека. Сказанным определяется актуальность проведения настоящего исследования.

Целью настоящей работы явилась характеристика неиммунного связывания стрептококков группы А с Clq и идентификация структур стрептококковой клетки, вовлеченных в этот процесс.

Для этого планировалось выполнение следующих задач:

1. Сравнительная характеристика неиммунного связывания Clq клетками грамположительных и грамотрицательных бактерий. Изучение неиммунного связывания и

СЦ клетками стрептококков группы А.

2. Идентификация и выделение поверхностных компонентов клеток СГА, неиммунно связывающих СЦ.

3. Характеристика неиммунного связывания СЦ с выделенными поверхностными компонентами клеток СГА.

4. Разработка методов, позволяющих оценить активацию системы комплемента человека по классическому пути.

5. Выяснение биологического эффекта неиммунного связывания СЦ с выделенными поверхностными компонентами клеток СГА.

Научная новизна работы заключается в следующем:

1. Впервые было продемонстрировано, что большинство исследованных штаммов стрептококка группы А, независимо от экспрессии М белка, неиммунно взаимодействуют с СЦ посредством двух поверхностных белков молекулярной массы 52 вД и 64 кД;

2. Впервые было продемонстрировано, что М-положительные штаммы неиммунно взаимодействуют с СЦ посредством М-подобных белков, связывающих фибриноген.

3. Впервые было продемонстрировано, что неиммунное связывание СЦ с рекомбинантным белком М5 (рМ5) осуществляется за счет глобулярной, а не коллагеноподобной части молекулы СЦ. Также было показано, что неиммунное связывание СЦ с рекомбинантным белком М5 не приводит к активации СК по классическому пути.

4. Разработан метод количественного определения компонента системы комплемента С4Ь (его составляющего фрагмента С4с), образующегося в результате активации системы комплемента по классическому пути.

5. Впервые было продемонстрировано, что рекомбинантный белок М5 ингибирует в доза зависимой манере экспериментально вызванную активацию СК по классическому пути в отсутствии типоспецифических антител. В этом процессе играет роль неиммунное взаимодействие СЦ с белком рМ5.

Работа носит теоретический характер. Теоретическая значимость выполненной работы заключается в том, что было продемонстрировано неиммунное взаимодействие стрептококков группы А с СЦ посредством поверхностных белков, в состав которых входят М-подобные белки. Охарактеризовано неимунное взаимодействие рекомбинантного белка М5 с компонентом комплемента СЦ. Было убедительно продемонстрировано, что белок рМ5 ингибирует в доза зависимой манере экспериментально вызванную активацию СК человека по классическому пути в отсутствии типоспецифических антител. Полученные данные о том, что неиммунное взаимодействие СЦ с белком рМ5 приводит к подавлению активации СК по классическому пути, дают новое представление о роли неиммунного СЦ-связывания М белком в контексте патогенетического действия стрептококков группы А на организм хозяина.

Практическая ценность. Разработанный метод количественного определения С4Ь (С4с) является быстрым и надежным способом оценки активации СК по классическому пути.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Большинство из исследованных штаммов СГА (независимо от экспрессии М белка) неиммунно взаимодействуют с СЦ посредством двух белков молекулярной массы 52 кД и 64 кД, трипсин чувствительных и ареактивных по отношению к фибриногену человека и кролика.

2. М-положительные штаммы СГА дополнительно неиммунно взаимодействуют с СЦ посредством фибриноген связывающих М-подобных белков.

3. Неиммунное взаимодействие СЦ с рекомбинантным белком М5-го серотипа осуществляется посредством глобулярной, а не коллагеноподобной части СЦ.

4. Неиммунное взаимодействие СЦ с рекомбинантным белком М5 не активирует СК человека по классическому пути и приводит к частичной ингибиции экспериментально вызванную активацию СК человека по классическому пути.

Достоверность полученных результатов подтверждается:

- данными, полученными в результате многократно поведенных экспериментов;

- использованием анализа в БОЙ-РАОЕ с набором белковых маркеров при оценке молекулярной массы чистых белковых препаратов;

- использованием методов, дающих возможность количественно оценить полученные результаты (радиоиммунологического, твердофазного иммуноферментного анализа).

Апробация работы.

Материалы диссертации опубликованы в 4 зарубежных работах, 2 работы находятся в печати. Кроме того, по материалам диссертации были сделаны доклады на XII, XIII и XIV Ленсфильдовских Международных симпозиумах по стрептококкам и стрептококковым заболеваниям (С.-Петербург, 1993, Париж, 1996, Окленд, 1999). Материалы работы докладывались на заседаниях Отдела молекулярной микробиологии НИИЭМ РАМН (1994, 1995, 1999) и на семинаре Отдела медицинской микробиологии при Университете г. Лунда (Швеция, 1998).

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 181 странице, включающих введение, обзор научной литературы, материалы и методы, собственные исследования, заключение, выводы и список литературы. Работа проиллюстрирована 6 таблицами и 38 рисунками. Список литературы содержит 2 отечественных и 273 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Королева, Ирина Владимировна

5. ВЫВОДЫ

1. Большинство из исследованных штаммов СГА экспрессирует на своей поверхности два белка молекулярной массы 52 кД и 64 кД, которые неиммунно взаимодействуют с СЦ.

2. М-положительные штаммы СГА дополнительно неиммунно взаимодействуют с СЦ посредством фибриноген связывающих М-подобных белков.

3. Установлено, что равновесная константа неиммунного связывания СЦ рекомбинантным белком М5 равна Ка = 6,8 х 107 М-1: связывание осуществляется благодаря глобулярному фрагменту молекулы СЦ.

4. Для оценки активации СК по классическому пути был разработан метод твердофазного иммуноферментного анализа, позволяющий количественно оценить фиксированный компонент системы комплемента С4с, образующийся в результате активации СК по классическому пути.

5. Установлено, что неиммунное взаимодействие СЦ с рекомбинантным белком М5 не активирует СК человека по классическому пути и приводит к частичной ингибиции экспериментально вызванную активацию СК человека по классическому пути.

БЛАГОДАРНОСТИ

Выражаю искреннюю благодарность: моему научному руководителю академику Тотоляну A.A. за всестороннюю поддержку проведенной работы

- Грабовской К.Б. за ценные советы и обсуждение при написании работы, а также за отзывчивость и моральную поддержку

- Суворову А.Н. за отзывчивость и помощь при оформлении диссертации и подготовке доклада

- Белову В.И. за помощь в подготовке рисунков

- сотрудникам Института пульмонологии за помощь в получении плазмы человека

- сотрудникам Отдела молекулярной микробиологии НИИЭМ за помощь и советы Schalen С. за поддержку этой работы, помощь в работе, при написании публикаций и обсуждении результатов

- Sjoholm А. за заинтересованность и поддержку данной работы, а также за искреннее и плодотворное обсуждение полученных результатов и помощь советами.

Катерову В.Е. за помощь в работе и обсуждении результатов

- сотрудникам группы Sjoholm А. Отдела медицинской микробиологии при Университете г. Лунда (Швеция) за доброжелательное отношение и помощь

- моим родственникам за моральную поддержку и искреннюю заинтересованность в быстром завершении данной работы

4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В работе представлено исследование неиммунного взаимодействия Clq с клетками Streptococcus pyogenes. Целью работы была характеристика поверхностных компонентов стрептококковой клетки, вовлеченных в связывание Clq, и выяснение биологического эффекта этого феномена.

Задачей первого этапа исследования стала сравнительная характеристика неиммунного связывания Clq клетками грамположительных и грамотрицательных бактерий, а также получение более подробной информации о Clq-связывании клетками стрептококков группы А. Результаты, полученные при исследовании 58 референс штаммов и клинических изолятов, показали, что среди исследованных клинических изолятов грамотрицательных бактерий, только изоляты P. mirabilis связывали 35-60% радиоактивного Clq, остальные изоляты (Ps. aeruginosa и Е. cloacae) практически не связывали Clq (табл. 2). Среди исследованных грамположительных клинических изолятов (S. aureus, S.saprophyticus, Е. faecalis и S. epidermidis) только S. epidermidis связывали 20-60% радиоактивного Clq. С другой стороны, большинство референс штаммов стрептококков групп А, С и G связывало 35-60% радиоактивного Clq. Более того, среди этих групп бактерий не было обнаружено отрицательного по С1 q-связыванию штамма. Уровень связывания радиоактивного Clq стрептококками группы В был ниже (20-35%) и зависел от серотипа (глава "Результаты исследований"). В дополнение к вышесказанному, полученные в 1980 году Prellner [210] результаты показали, что некоторые грамотрицательные клинические изоляты активно связывали радиоактивный Clq (H. influenzae: 87 - 92%; В. catarrhalis: 62 - 76%), и уровень связывания подчас сильно варьировал даже внутри одного вида бактерий.

Данные, полученные при исследовании неиммунного связывания Clq с референс штаммами стрептококков группы А, позволили сделать вывод о динамике и стабильности Clq-связывания, о трипсин чувствительности Clq-связывающих компонентов бактериальных клеток СГА, что подробно обсуждалось в главе "Результаты исследований". Кроме этого, данные по Clq-связыванию с цельными клетками помогли в анализе дальнейших результатов.

На втором этапе работы усилия были сконцентрированы на экстракции поверхностных белков СГА, участвующих в неиммунном связывании Clq. Данные, полученные при использовании различных способов экстракций (нейтральная, щелочная, HCl, SDS), позволяют утверждать, что все исследованные М типы штаммов СГА взаимодействуют с Clq посредством трех белков, один из которых принадлежит семейству М-подобных белков. Однако, ни один из использованных способов экстракций не позволил одновременно экстрагировать с поверхности клеток все Clq-связывающие белки. Так, применение SDS-экстракции позволило получить хороший выход 52 кД Clq-связывающего белка из большинства исследованных СГА штаммов, независимо от экспрессии М белка. В то время, как фибриноген и Clq- связывающий белок из М-положительных штаммов был выделен с помощью щелочной экстракции. Применение нейтральной экстракции позволило выделить 52 кД и 64 кД Clq-связывающие белки.

Таким образом, для выделения 52 кД белка с поверхности клеток СГА штаммов была выбрана SDS-экстракция, тогда как для выделения фибриноген и Clq- связывающего белка из М-положительных штаммов была применена щелочная экстракция.

Задачей следующего этапа работы была очистка и частичная характеристика Clq-связывающего материала из стрептококковых экстрактов. Clq-связывающий материал, очищенный с помощью аффинной хроматографии из 0.5% SDS-экстракта Т27 штамма показал в 12% SDS-PAGE и Вестерн блоте два бенда молекулярной массы 52 кД и 64 кД. Эти белки были охарактеризованы как трипсин чувствительные и ареактивные по отношению к фибриногену человека и ^О кролика. Третий фибриноген и С1ц-связывающий белок, очищенный с помощью аффинной хроматографии из щелочных экстрактов двух М-положительных штаммов (М5 и М76), по своим связывающим свойствам и молекулярной массе был идентифицирован как белок, относящийся к семейству М-подобных белков (Етт5 и БсгА76, соответственно).

Заключительным этапом исследования стала оценка биологического эффекта неиммунного взаимодействия СЦ с клетками СГА. Данные, полученные в результате нейтральной и БОБ- экстракций СГА штаммов позволили сделать вывод, что два общие С ^-связывающие белка присутствует как у М-отрицательных, так и у М-положительных штаммов. Эксперименты по СЦ-связыванию с М-отрицательными штаммами показали, что уровень связывания радиоактивного СЦ с цельными клетками не превышал 25%. Для авирулентного Т27 штамма он был равен 18%. Хорошо известно, что М-отрицательные штаммы вызывают активацию СК как по классическому, так и по альтернативному пути и активно фагоцитируются полиморфноядерными лейкоцитами. Таким образом, неиммунное связывание СЦ М-отрицательными штаммами не играет существенной роли для выживания этих микробов. Как следствие, присутствие СЦ-связывакяцих 52 кД и 64 кД белков на поверхности клеток СГА, очевидно, также не играет существенной роли для выживания этих микробов. В данной работе не удалось идентифицировать СЦ-связывающие 52 кД и 64 кД белки. По-видимому, только аминокислотный анализ этих белков может дать реальный результат для их идентификации. Вопрос о дальнейшем исследовании этих белков остается открытым.

Для большинства М-положительных штаммов уровень СЦ-связывания находился в диапазоне 40-60%. Результаты опытов по экстракции С1 ц-связывающих белков с поверхности СГА показали, что М-положительные штаммы взаимодействуют с СЦ посредством трех белков, один из которых относится к семейству М-нодобных белков и активно связывает фибриноген человека. Данные таблицы 5 показывают, что уровень связывания радиоактивного Clq клетками М-положительных штаммов (Ml2, М49 типов) в два раза превышает уровень Clq-связывания клетками их отрицательных вариантов. Опираясь на совокупность этих фактов, можно сделать вывод, что неиммунное Clq-связывание M белком вносит дополнительный вклад в общее Clq-связывание для М-положительных штаммов. Таким образом, неиммунное Clq-связывание M белком может иметь отношение к антифагоцитарности М-положительных штаммов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Королева, Ирина Владимировна, 2000 год

1. Анатолий С.А. 1977. Гиалуроновая капсула как один из факторов патогенности-гемолитического стрептококка. Журн микроб, 2:22-27.

2. Бурова Л.А. 1990. Иммуноглобулиновые Fc-рецепторы стрептококков и их роль в патологии. Диссертация, С-Петербург.

3. Acharya K.R., E.F. Passalacqua, E.Y. Jones, К. Harbs, D.I. Stuart, R.D. Brehm, and H.S. Tranter. 1944. Structural basis of superantigen action inferred from crystal structure of toxic-shock syndrome toxin-1. Nature, 367:94-97.

4. Akesson P., J. Cooney, F. Kishimoto, and L. Bjorck. 1990. Protein H a novel IgG binding bacterial protein. Mol Immunol, 27:523-531.

5. Akesson P., A.G. Sjoholm, and L. Bjorck. 1996. Protein SIC, a novel exracellular protein of Streptococcus pyogenes interfering with complement function. J Biol Chem, 271:1081 -1088.

6. Alberti S., G. Marques, S. Camprubi, S. Merino, J.M. Tomas, F. Vivanco, and Y.J. Benedi. 1993. Clq binding and activation of the complement and classical pathway by Klebsiella pneumoniae outer membrane protein. Infect Immunity, 61:852-860.

7. Alberti, S., G. Marques, S. Hernandez-Alles, X. Rubires, J.M. Tomas, F. Vivanco, and V. J. Benedi. 1996. Interaction between complement subcomponent Clq and the Klebsiella pneumoniae porin OmpK36. Infect Immun, 64:4719-4725.

8. Alouf J.E., H. Knoll, and W. Kohler. 1991. The family of mitogenic, shock-inducing and superantigenic toxins from staphylococci and streptococci. In: Source of bacterial protein toxins. Alouf J.E., and J.H. Freer, eds. Acad Press, San Diego: 367-414.

9. Andersen, J.K. 1984. Electroblotting of multiple gels: a simple apparatus without buffer-tank for rapid transfer of proteins from Polyacrylamide to nitrocellulose. J-Biochem Biophys Meth, 10:203209.

10. Andersson J., S. Nagy, L. Bjorck, J. Abrams, S. Holm, and U. Andersson. 1992. Bacterial toxin-induced cytokine production studied at the single-cell level. Immunol Rev, 127:69-96.

11. Andrews B.S., M. Shadforth, P. Cunnigham, and J.S. Davies. 1981. Demonstration of a Clq receptor on the surface of human endothelial cells. J Immunol, 127:1075-1080.

12. Arlaud G.J., N.M. Thielens, and C. Illy. 1993. Assembly of the CI complex. Bchring Ins Mitt, 93:189-195.

13. Arvieux J., A. Reboul, J.-C. Bensa, M. Colomb. 1984. Characterization of the Clq receptor on a human macrophage cell line, U937. Biochem J, 218:547-555.

14. Barrett A., and P. Starkey. 1973. The interaction of a2-macroglobulin with proteinases. Biochem J, 133:709-723.

15. Bartholomew R.M., A.F. Esser, and H.J. Muller-Eberhard. 1978. Lysis of oncornaviruses by human serum. Isolation of the viral complement (CI) receptor and identification as pl5E. I Exp Med, 147:844-853.

16. Berge A., and L. Bjorck. 1995. Streptococcal cysteine proteinase releases biologically active fragments of streptococcal surface proteins. J Biol Chem, 270:9862-9867.

17. Berge A., M. Rasmussen, and L. Bjorck. 1998. Identification of an insertional sequence located in a region encoding virulence factors of Streptococcus pyogenes Infect Immun, 66:3449-3453.

18. Berge, A., and U. Sjobring. 1993. PAM, a novel plasminogen-binding protein from Streptococcus pyogenes. J Biol Chem, 268:25417-25424.

19. Bergey's In: manual of determinative bacteriology. Holt J.G., N.R. Krieg, P.H.A. Sneath, J.T.Staley, S.T.Williams, eds. 1994. 9th ed., Baltimore.

20. Bessen D.E., and V.A. Fischetti.1992. Nucleotide sequence of two adjacent M or M-like proteins genes of group A streptococci: different RNA transript levels and identification of a unique immunoglobulin A-binding protein. Infec Immun, 60: 124- 135.

21. Bessen D., K.F. Jones, and V.A. Fischetti. 1989. Evidence for two distinct classes ofstreptococcal M protein and their relationship to rheumatic fever. J Exp Med, 169:269- 283.

22. Bhakdi S., and J. Tranum-Jensen. 1988. Damage to cell membranes by pore-forming bacterial cytolysins. Prog Allergy, 40:1-43.

23. Bisno A.L. 1979. Alternate complement pathway activation by group A streptococci: role of M-protein. Infect Immun, 26:1172-1176.

24. Bisno A.L. 1991. Group A streptococcal infections and acute rheumatic fever. N Engl Med, 325:783-793.

25. Bjorck L., H. Miorner, O. Kuhnemund, G. Kronvall, and P. Sundler. 1984. On the interaction between p2-microglobulin and group A streptococci with special reference to streptococcal M-protein. Scand J Immunol, 20:69-72.

26. Bjorck L., S.K. Tylewska, T. Wadstrom, and G. Kronvall. 1981. P-microglobulin is bound to streptococcal M protein. Scand J Immunol, 13:391-394.

27. Boackle R.J., M.H. Connor, and J. Vesely. 1993. High molecular weight non- immunoglobulin salivary agglutinis (NIA) bind Clq globular heads and have the potential to activate the first complement component. Molec Immunol, 30:309-319.

28. Boback D.A., T.A. Gaither, M.M. Frank, and A.J. Tenner. 1987. Modulation of FcR function by complement: subcomponent Clq enhances the phagocytosis of IgG- opsonized targets by human monocytes and culture-derived macrophages. J Immunol, 138:1150-1156.

29. Bordin S., W.P. Kolb, and R.C. Page. 1983. Clq receptors on cultured human gingival fibroblasts: analysis of binding properties. J Immunol, 130:1871-1875.

30. Bordin S., and R.C. Page. 1988. Role of platelet factors and serum complement in growth of fibroblasts with high-affinity Clq complement receptors. In Vitro. Cel Dev Biol, 24:719-726.

31. Bordin S., M. Smith, B. Ghebrehiwet, D. Oida, and R.C. Page. 1982. Smooth muscle and epithelial cells express specific binding sites for the Clq component of complement. Clin Immunol Immunopathol, 63:51-57.

32. Bordin S., D.C. Teller, and R.C. Page. 1986. Human diploid fibroblasts have receptors for the globular domain of Clq. Fed Proc: 45, 246A.

33. Borsos T., R.M. Chapuis, and J J. Langone. 1981. Distinction between fixation of Clq and the activation of complement by natural IgM anti-hapten antibody: effect of cell surface hapten density. Mol Immunol, 18:863-868.

34. Boyle, M.D.P., and R. Lottenberg. 1997. Plasminogen activation by invasive human pathogens. Thromb Haemost, 77:1-10.

35. Bredt W., B. Wellek, H. Brunner, and M. Loos. 1977. Interactions between Mycoplasma pneumoniae and the first component of complement. Infect Immun, 15:7-12.

36. Bristow C.L., and RJ.Boackle. 1986. Evidence for the binding of the human serum amyloid P component to Clq and Fab. Molec Immunol, 23:1045-1052.

37. Bryant A.E., M.A. Kehoe, and D. Stevens. 1992. Streptococcal pyrogenic exotoxin A and streptolysin O enhance polymorphonuclear leuckocyte binding to gelatin matrixes. J Infect Dis, 166:165-169.

38. Bunse R., and H.-P. Heinz. 1993. Interaction of the capsular polysaccharide of Haemophilus influenzae type B with Clq. Behring Ins Mitt, 93:148-164.

39. Burova L.A., Andrushkievich T.V., Gladilina M.M., GerlachD., Schalen C. 1998. Influence of growth conditions on expression of immunoglobulin binding in group A streptococci. Zbl Bakt, 288:479-489.

40. Burova L.A., I.V. Koroleva, R.P. Ogurthzov, S.V. Murashov, M.L. Svensson, and C. Schalen. 1992. Role of streptococcal IgG Fc-receptor in tissue deposition of IgG in rabbits immunized with Streptococcus pyogenes. APMIS, 100:567-574.

41. Burova L.A., V.A. Nagornev, P.V. Pigarevsky, M.M. Gladilina, V.G. Seliverstova, C. Schalen, and A. A. Totolian. 1998. Triggering of renal tissue damage in the rabbit by IgG Fc-receptor-positive group A streptococci. APMIS, 106:277-287.

42. Burova L.A., C. Schalen, and A. Sjoholm. 1994. Binding of complement factor Clq to Streptococcus pyogenes. In: Pathogenic streptococci: present and future. Totolian A., ed. Lancer Publ, St.Petersburg : 126-127.

43. Caparon M.G., and J.R. Scott. 1987. Identification of a gene that regulates expression of M protein, the major virulence determinant of group A streptococci. Proc Natl Acad Sci USA, 84:8677-8681.

44. Carlsson-Wistedt, A., U. Ringdahl, W.Muller-Esterl, and U. Sjobring. 1995. Identification of a plasminogen-binding motif in PAM, a bacterial surface protein. Mol Microbiol, 18:569-578.

45. Castellino F.J., and S.P. Baja. 1977. Activation of human plasminogen by equimolar levels of streptokinase. J Biol Chem, 252:492-498.

46. Castellino F.J., J.N. Sodetz, W.S. Brockway, G.E. Siefring. 1976. Streptokinase. Met Enzymol, 45:244-257.

47. Catalogue of strains. The Czechoslovak national collection of type cultures. Institute -of-Hygiene and Epidemiology, Prague, 1981.

48. Chhatwal G., G. Albohn, and H. Blobel. 1987. Novel complex formed between a nonproteolytic cell wall protein of group A streptococci and a2-macroglobulin. J Bacteriol, 169:3691-3695.

49. Chhatwal G.S., K.T. Preissner, G. Muller-Berghaus, and H. Blobel. 1987. Specific binding of the human S protein (vitronectin) to streptococci, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli. Infect Immun, 55:1878-1883.

50. Christensen P., and V.A. Oxelius. 1975. A reaction between some streptococci and IgA myeloma proteins. Acta Path Microbiol Scand Sect C, 83:184-188.

51. Christensen P., Oxelius V.-A. Quantitation of the uptake of human IgG by some streptococci groups A, B, C and G. 1974. Acta Path Microbiol Scand Sect B, 82: 475- 483.

52. Cleary P.P. 1978. Genetic separation of serum opacity factor from M protein of group- Astreptococci. Infect Immun, 22:171-175.

53. Colomb M.G., G.J. Arlaud, and C.L. Vffliers. 1984. Activation of Clq. Philos Trans R Soc London, B306:283-292.

54. Cooper N.R. 1985. The classical complement pathway: activation and regulation of the first complement component. Adv Immunol, 37:151-216.

55. Cooper N.R., and D.C. Morrison. 1978. Binding and activation of the first component of human complement: by the lipid A region of lipopolysaccharides. J Immunol, 120:1862-1868.

56. Courtney H.S., Y. Li, J.B. Dale, and D.L. Hasty. 1994. Cloning, sequencing and expression of a fibronectin / fibrinogen-binding protein from group A streptococci. Infect Immun, 62:3937-3946.

57. Cunningham A.J., S.-F. Elliott, J.R. Black, and K. James. 1993. A simple method for isolating a2-macroglobulin-cytokine complexes. J Immun Meth, 169:287-292.

58. Curtiss N. 1996. Invasive group A streptococcal infection. Curr Opinlnf Dis, 9:191- 202.

59. Daha M.R., A.M.M. Miltenburg, P.S. Hiemstra, N. K. Mohamad, L.A. Van Es, and V.W.M. Van Hinsbergh. 1988. The complement subcomponent Clq mediates binding of immune complexes and aggregates to endothelial cells n vitro. Eur J Immunol, 18:783-787.

60. Dale J.B., R.G. Washburn, M.B. Marques, and M.R. Wessels. 1996. Hyaluronate capsule and surface M protein in resistance to opsonization of group A streptococci.Infect Immun, 64:14951501.

61. Donaldson V.H. 1968. Mechanism of activation of C'l esterase in hereditary angio- neurotic edema plasma in vitro. J Exp Med, 127:411-429.

62. Ellen R.P., and R.J. Gibbons. 1972. M-protein-associated adherence of Streptococcus pyogenes to epithelial surface: prerequisite for virulence. Infect Immun, 5:826-830.

63. Entwistle R.A., and L.T. Furcht. 1988. Clq component of complement binds to fibrinogen and fibrin. Biochemistry, 27:507-512.

64. Erdei A., G. Fust, and J. Gergely. 1991. The role of C3 in the immune response. Immunol today, 12:332-337.

65. Erdei A., and K.B.M. Reid. 1988. Characterization of Clq-binding material released from the membranes of Raji and U937 cells by limited proteolysis with trypsin. Biochem J, 255:493-499.

66. Fernandez H.N., P.M. Henson, A. Otani, and T.E. Hugli. 1978. Chemotactic response to human C3a and C5a anaphylatoxin. J Immunol, 120:109-115.

67. Fischetti, V.A. 1989. Streptococcal M protein: molecular design and biological behavior. Clin Microbiol Rev, 2:285-314.

68. Fischetti, V.A., R.D. Horstmann, and V. Pancholi. 1995. Location of the complement factor H binding site on streptococcal M6 protein. Infect Immun, 63:149-153.

69. Fischetti V.A., K.F. Jones, and J.R. Scott. 1985. Size variation of the M protein in group A streptococci. J Exp Med, 161:1384-1401.

70. Fischetti V.A., V. Pancholi, and O. Schneewind. 1990. Conservation of a hexapeptide sequence in the anchor region of surface proteins from gram-positive cocci. Mol-Microbiol, 4:16031605.

71. Fluckiger, U., K.F. Jones, and V.A. Fischetti. 1998. Immunoglobulins to group A streptococcal surface molecules decrease adherence to and invasion of human pharyngeal cells. Infect Immun, 66:974-979.

72. Foley S.M.J., and W.B. Wood. 1959. Studies on the pathogenicity of group A streptococci. II.

73. The antiphagocytic effects of the M protein and the capsular gel. J Exp-Med, 110:617-628.

74. Fox E.N., and Wittner M.K. 1965. The multiple molecular structure of the M proteins of group A streptococci. Proc Natl Acad Sci USA, 54:1118-1125.

75. Francis R.T., J.W. Booth, and R.R. Becker. 1985. Uptake of iron from hemoglobin and the haptoglobin-hemoglobin complex by hemolytic bacteria. Int J Biochem, 17:767-773.

76. Frick, I.M., K. L. Crossin, G.M. Edelman, and L. Bjorck. 1995. Protein H a bacterial surface protein with affinity for both immunoglobulin and fibronectin type III domains. EMBO J, 14:16741679.

77. Frithz E., L.-O. Heden, and G. Lindahl. 1989. Extensive sequence homology between IgA receptor and M proteins on Streptococcus pyogenes. Mol Microbiol, 3:1111-1119.

78. Gewurz H., S.-C. Ying, H. Jiang, and T.F. Lint. 1993. Nonimmune activation of the classical complement pathway. Behring Ins Mitt, 93:138-147.

79. Ghebrehiwet B. 1987. Clq receptor. Meth Enzymol, 150:558-578.

80. Ghebrehiwet B., G.S. Habicht, and G. Beck. 1990. Interaction of Clq with its receptor on cultured cell lines induces an antiproliferative response. Clin Immunol Immunopathol, 54:148160.

81. Ghebrehiwet B., B.-L. Lim, E.I.B. Peerschke, A.C. Willis, and K.B.M. Reid. 1994. Isolation, cDNA cloning, and overexpression of a 33-kD cell surface glycoprotein that binds to the globular "heads" of Clq. J Exp Med, 179:1809-1821.

82. Ghebrehiwet B., and H.J. Muller-Eberhard. 1978. Lysis of Clq-coated chicken erythrocytes by human lymphoblastoid cell lines. J Immunol, 120: 27-32.

83. Ghebrehiwet B., L. Silvestri, and C. McDevitt. 1984. Identification of the Raji cell membranederived Clq inhibitor as a receptor for human Clq. Purification and immunochemical characterization. J Exp Med, 160:1375-1389.

84. Glicas P.C., M.H. Ginsberg, and N.R. Cooper. 1979. Immunoglobulin G independent activation of the classical complement pathway by monosodium urate crystals. J Clin Invest, 63:759-764.

85. Grey E.D. 1972. Nucleases of group A streptococci. In: Streptococci and streptococcal diseases. Wannamaker L.W., J.M. Matsen, eds. N.Y.-London: 143-155.

86. Griffith F. 1934. The serological classification of Streptococcus pyogenes. J Hyg Camb, 34:542-483.

87. Haanes E.J., D.G. Heath, and P.P. Cleary. 1992. Architecture of the vir regulons of group A streptococci parallels opacity factor phenotype and M protein class. J Bacteriol, 174:4967-4976.

88. Habicht G.S., G. Beck, and B. Ghebrehiwet. 1987. Clq inhibits the expression of B lymphoblastoid cell line Interleukin 1 (IL-1). J Immunol, 138:2593-2597.

89. Hackett S.P., and D.L. Stevens. 1992. Streptococcal toxic shock syndrom: synthesis of tumor necrosis factor and interleukin-1 by monocytes stimulated with pyrogenic exotoxin A and streptolysin O. J Infect Dis, 165:879-885.

90. Hallas G., Widdowson J.P. 1983. The relationship between opacity factor and M protein in Streptococcus pyogenes. J Med Microbiol, 16:13-26.

91. Hamada A., and B.M. Greene. 1987. Clq enhancement oflgG-dependent eosinophil- mediated killing of schistosomula in vitro. J Immunol, 138:1240-1245.

92. Hamada A., J. Young, R.A. Chmielewski, and B.M. Greene. 1988. Clq enhancement of antibody-dependent granulocyte-mediated killing of nonphagocytosable targets in vitro. J Clin Invest, 82:945-949.

93. Hanski, E., and M. Caparon. 1992. Protein F, a fibronectin-binding protein, is an adhesin of the group A streptococcus Streptococcus pyogenes. Proc Natl Acad Sci USA, 89:6172-6176.

94. Hasty D.L., I. Ofek, H.S. Courtney, and R.J. Doyle. 1992. Multiple adhesins of streptococci. Infect Immun, 60:2147-2152.

95. Heath D.G., M.D.P. Boyle, and P.P. Cleary. 1990. Isolated DNA repeat region from fcrA76, the Fc-binding protein gene from an M-type 76 strain of group A streptococci, encodes a protein with Fc-binding activity. Mol Microbiol, 4:2071 -2079.

96. Heath D.G., and P.P. Cleary. 1987. Cloning and expression of the gene for an immunoglobulin G Fc receptor protein from a group A streptococcus. Infect Immun, 55:1233-1238.

97. Herman A., J.W. Kappler, P. Marrack, and A.M. Pullen. 1991. Superantigens: mechanism of T-cell stimulation and role in immune response. Annu Rev Immunol, 9:745-772.

98. Herwald, H., M. Collin, W. Muller-Esterl, and L. Bjorck. 1996. Streptococcal cysteine proteinase releases kinins: a novel virulence mechanism. J Exp Med, 184:665-673.

99. Hill J. 1975. Characterization of hyaluronidase from Streptococcus pyogenes. In: Abstr of papers VI Intern Symp on Streptjcoccus pyogenes. Prague: 10.

100. Hollingshead S.K., V.A. Fischetti, and J.R. Scott. 1986. Complete nucleotide sequence of type 6 M protein of the group A Streptococcus. Repetitive structure and membrane anchor. J Biol Chem, 261:1677-1686.

101. Holm S.E., J.J. Ferretti, D. Simon, and K.H. Johnston. 1992. Deletion of a streptokinase gene eliminates the nephritogenic capacity of a type 49 strain. Zbl Bakt Suppl, 22:261 -263.

102. Holm S.E., A. Norbby, A.-M. Bergholm, and M. Norgren. 1992b. Aspects of pathogenesis of serious group A streptococcal infections in Sweden. J Infect Dis, 166:31-37.

103. Holmskov U., R. Malhotra, R.B. Sim, and J.C. Jensenius. 1994. Collectins: collagenous C-type lectins of the innate immune defense system. Immunol Today, 15:67-74.

104. Hong, K., T. Kinoshita, J. Takeda, H. Kozono, P. Pramoonjago, Y.U.Kim, and K. Inoue. 1990. Inhibition of the alternative C3 convertase and classical C5 convertase of complement by group A streptococcal M protein. Infect Immun, 58:2535-2541.

105. Horstmann, R.D., H.J. Sievertsen, J. Knobloch, and V.A. Fischetti. 1988. Antiphagocytic activity of streptococcal M protein: selective binding of complement control protein factor H. Proc Natl Acad SciUSA, 85:1657-1661.

106. Horstmann, R.D., H.J. Sievertsen, M. Leippe, and V.A. Fischetti. 1992. Role of fibrinogen in complement inhibition by streptococcal M protein. Infect Immun, 60:5036-5041.

107. Hugli T.E. 1984. Structure and function of the anaphylatoxins. Springer Semin Immunopathol, 7:193-219.

108. Husmann L.K., J.R. Scott, G. Lindahl, and L. Stenberg. 1995. Expression of the Arp protein, a member of the M protein family, is not sufficient to inhibit phagocytosis of Streptococcus pyogenes. Infect Immun, 63:345-348.

109. Hynes W.L., and J.J. Ferretti. 1989. Sequence analysis and expression in Escherichia coli of the hyaluronidase gene of Streptococcus pyogenes bacteriophage H4489A. Infect Immun, 57:533539.

110. Iwasaki M., H. Igarashi, Y. Hinuma, and T. Yutsudo. 1993. Cloning, characterization and overexpression of Streptococcus pyogenes gene encoding a new type of mitogenic factor. FEBS Lett, 331:187-192.

111. Jacks-Weis, J., Y. Kim, and P.P. Cleary. 1982. Restricted deposition of C3 on M+ group A streptococci: correlation with resistance to phagocytosis. J Immunol, 128:1897- 1902.

112. James K. 1990. Interactions between cytokines and ot2-macroglobulin. Immunol Today, 11:163-166.

113. Jeppson H., E. Frithz, and L.-O. Heden. 1992. Duplication of a DN A sequence homologous to genes for immunoglobulin receptors and M proteins in Streptococcus pyogenes. FEMS Microbiol Lett, 92:139-146.

114. Ji Y., L. McLandsborough, A. Kondagunta, and P.P. Cleary. 1996. C5a peptidase alters clearence and trafficking of group A streptococci by infected mice. Infect Immun, 64:503-510.

115. Jiang H., B. Cooper, F.A. Robey, and H. Gewurz. 1992. DNA binds and activates complement via residues 14-26 of the human Clq A chain. J Biol Chem, 267:25597- 25601.

116. Jiang H., S.-C. Yiang, Y.B. Kim, and H. Gewurz. 1995. Endotoxin activates the classical complement pathway via residues 14-26 of the Clq A chain, and peptide 14-26 inhibits this activation. J Clin Invest, 11:345-352.

117. Johnsson, E., A. Thern, B. Dahlback, L.-O. Heden, M. Wikstrom, and G. Lindahl. 1996. A highly variable region in members of the streptococcal M-protein family binds the human complement regulator C4BP. J Immunol, 157:3021-3029.

118. Kantor, F.S. 1965. Fibrinogen precipitation by streptococcal M-protein. I. Identity of the reactants, and stoichiometry of the reaction. J Exp Med, 121:849-859.

119. Kapur V., S. Topouzis, and M.W. Majesky. 1993a. A conserved Streptococcus pyogenesextracellular cysteine protease cleaves human fibronectin and degrades vitronectin. Microb Pathog, 15:327-346.

120. Kass E.H., and C.V. Seastone. 1944. The role of the mucoid polysaccharide (hyaluronic acid) in the virulence of group A hemolytic streptococci. J Exp Med, 79:310-330.

121. Katz A.R., and D.M. Morens. 1992. Severe streptococcal infections in historical perspective. Clin Infect Dis, 14:298-307.

122. Katerov V., A. Andreev, C. Schalen, and A.A. Totolian. 1998. Protein F, a fibronectin- binding protein of Streptococcus pyogenes, also binds human fibrinogen: isolation of the protein and mapping of the binding region. Microbiol, 144:119-126.

123. Katerov V., C. Schalen, and A.A.Totolian. 1994. M-like, immunoglobulin-binding protein of Streptococcus pyogenes type M15. Cur Microbiol, 29:31-36.

124. Kehoe, M.A. 1994. Cell-wall-associated proteins in Gram-positive bacteria. N Compr Biochem, 27:217-261.

125. Kilpatrick J.M., and J.E. Volanakis. 1991. Molecular genetics, structure and function of C-reactive protein. Immunol Res, 10:43-53.

126. Kinoshita T. 1993. Complement receptors and regulation of humoral immune response. In: Complement today. Cruse J.M., and R.E. Lewis, eds. Complement profiles, Basel, Karger 1:46-55.

127. Kohler W., and O. Prokop. 1978. On the relationship between haptoglobin and Streptococcus pyogenes T4 antigens. Nature, 271:373-381.

128. Kostrzynska M., C. Schalen, and T. Wadstrom. 1989. Specific binding of collagen type IV to Streptococcus pyogenes. FEMS Microbiol Lett, 59:229-234.

129. Kronvall G. 1973. A surface component in group A, C and G streptococci with non- immune reactivity for immunoglobulin G. J Immunol, 111: 1401-1406.

130. Kronvall G., E.B. Myhre, L. Bjorck, and I. Berggard. 1978. Binding of aggregated human ß2-microglobulin to surface protein structure in group A, C and G streptococci. Infect Immun, 22:136

131. Krumwiede E. 1954. Studies on a lipoproteinase of group A streptococci. J Exp Med, 100:629-639.

132. Lachmann P.J., and N.C. Hughes-Jones. 1984. Initiation of complement activation. Springer Semin Immunopathol, 7:143-162.

133. Laurell A.B., U. Johnson, U. Martensson, and A.G. Sjoholm. 1978. Formation of complexes composed of Clr, Cls, and CI inhibitor in human serum on activation of CI. Acta Pathol Microbiol Scand C, 86c:299-306.

134. Laemmli U.K. 1970. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of-bacteriophage T4. Nature, 227:680-685.

135. Lammler C., T. Guszczynski, and W. Dobryszycka. 1988. Further characterisation of haptoglobin binding to streptococci of serological group A. Zbl Bakt Hyg, A269:454- 459.

136. Lancefield R.C. 1928. The antigenic complex of Streptococcus hemolyticus.l. Demonstration of a type-specific substance in extracts of Streptococcus haemolyticus. J Exp Med, 47:91-103.

137. Lancefield, R.C. 1933. A serological differentiation of human and other groups of hemolytic streptococci. J Exp Med, 57:571-595.

138. Lancefield R.C. 1940. Type-specific antigens, M and T, of matt and glossy variants of group A hemolytic streptococci. J Exp Med, 71:521-537.

139. Lancefield R.C. 1943. Studies on the antigenic composition of group A hemolytic streptococci. J Exp Med, 78:465-476.

140. Lancefield R.C. 1957. Differentiation of group A streptococci with a common R antigen into three serological types, with special reference to the bactericidal test. J Exp- Med, 106:525-544.

141. Lancefield, R.C. 1962. Current knowledge of type-specific M antigens of group A streptococci. J Immun, 89:307-313.

142. Latsch M., J. Mollerfeld, H. Ringsdorf, and M. Loos. 1990. Studies on the interaction of Clq,a subcomponent of the first component of complement, with porins from Salmonella minnesota incorporated into artificial membranes. FEBS Lett, 276:201-204.

143. Law S.K.A., and K.B.M. Reid. 1995. Complement, 2nd edition. Male D., ed. IRL Press, Oxford.

144. Legres L.G., F. Pochon, M. Barray, F. Gay., S. Chouaib, and E. Delain. 1995. Evidence for the binding of a biologically active interleukin-2 to human a2-macroglobulin. J Biol Chem, 270:8381-8384.

145. Levy N.J., and D.L. Kasper. 1986. Surface-bound capsular polysaccharide of type la group B Streptococcus mediates CI binding and activation of the classical complement pathway. J Immunol, 136:4157-4162.

146. Lindahl G., and B. Akerstrom. 1989. Receptor for IgA in group A streptococci: cloning of the gene and characterization of the protein expressed in Escherichia coli. Mol Microbiol, 3:239-247.

147. Lindahl G., and L.Stenberg. 1990. Binding of IgA and/or IgG is a common property among clinical isolates of group A streptococci. Epidemiol Infect, 105:87-93.

148. Linder E., V.-P. Lehto, and S. Stenman. 1979. Activation of complement by cytoskeletal intermediate filaments. Nature, 278:176-178.

149. Loos M., and D. Bitter-Suermann. 1976. Mode of interaction of different polyanions with the first (CI) the second (C2) and the fourth (C4) component of complement. IV. Activation of CI in serum by polyanions. Immunology, 31:931 -934.

150. Loos M., D. Bitter-Suermann, and M. Dierich. 1974. Interaction of the first (CI), the second (C2), and the fourth (C4) component of complement with diferent preparations of bacterial lipopolysaccharides and with lipid A. J Immunol, 112:935-940.

151. Loos M., and F. Clas. 1987. Antibody-independent killing of gram-negative bacteria via the classical pathway of complement. Immunol Lett, 14:203-208.

152. Loos M., B. Wellek, R. Thesen, and W. Opferkuch. 1978. Antibody-independent interactionof the first component of complement with gram-negative bacteria. Infect Immun, 22:5-9.

153. Lottenberg R., C.C. Broder, and M.D.P. Boyle. 1987. Identification of a specific receptor for a plasmin on a group A streptococcus. Infect Immun, 55:1914-1928.

154. Lottenberg R., C.C. Broder, M.D.P. Boyle, S.J. Kain, B.L. Schroeder, and R. Curtiss III. 1992. Cloning, sequence analysis and expression in Escherichia coli of a streptococcal plasmin receptor. J Bacteriol, 174:5204-5210.

155. Lottenberg R., D. Minning-Wenz, M.D.P. Boyle. 1994. Capturing host plasminogen: a common mechanism for invasive pathogens? Trends Microbiol, 2:20-24.

156. Lowry O.H., N.J. Rosenbraugh, A.L. Ferr, R.J. Randall. 1957. Protein measurement-with the folin phenol reagent. J Mol Biol, 193:265-273.

157. Malhotra R. 1993. Collectin receptor (Clq receptor): structure and function. Behring Ins Mitt, 93:254-261.

158. Malke H. 1993. Polymorphism of the streptokinase gene: implications for the pathogenesis of post-streptococcal glomerulonephritis. Int J Med Microbiol Virol Parasitol Inf Dis, 278:246-257.

159. Manjula B.N., A.S. Acharya, S.M. Mische, T. Fairwell, and V.A. Fischetti. 1984. The complete amino acid sequence of a biologically active 197-residue fragment of M protein isolated from type 5 group A streptococci. J Biol Chem, 259:3686-3693.

160. Manjula B.N., and V.A. Fischetti. 1980. Studies on group A streptococcal M proteins:purification of type 5 M protein and comparison of its amino-terminal sequence with two immunologically unrelated M protein molecules. J Immunol, 124:261-273.

161. Manjula B.N., and V.A. Fischetti. 1980. Tropomyosin-like seven residue periodicity in three immunologically distinct streptococcal M proteins and its implications for the antiphagocytic property of the molecule. J Exp Med, 151:695-708.

162. Matsushita M., and T. Fujita. 1992. Activation of the classical complement pathway via a mannose-binding protein in association with a novel CIs-like serine protease. J Exp Med, 176:14971502.

163. Maxted W.R., J.P. Widdowson, C.A.M. Fraser, L.C. Ball, andvD.C.J. Bassett. 1973.-The use of the serum opacity reaction in the typing of group A streptococci. J Med Microbiol, 6:83-90.

164. McLandsborough L.A., and P.P. Cleary. 1995. Insertional inactivation of virR in Streptococcus pyogenes M49 demonstrates that VirR functions as a positive regulator of Sep A, FcRA, OF, and M protein. FEMS Microbiol Lett, 128:45-52.

165. Merino S., M.M. Nogueras, A. Aguilar, X. Rubires, S. Alberti, V.J. Benedi, and J.M. Tomas. 1998. Activation of the complement classical pathway (Clq binding) by Mesophilic Aeromonas hydrophila outer membrane protein. Infect Immun, 66:3825- 3831.

166. Muller H.P., and H. Blobel. 1985. Binding of human a2-macroglobulin to streptococci of group A, B, C and G. In: Recent advances in streptococci and streptococcal diseases. Kimura Y., S. Kotami, Y. Shiokawa, eds. Reedbooks Ltd: 96-98.

167. Muller-Eberhard H.J. 1986. The membrane attack complex of complement. Ann Rev Immunol, 4:503-528.

168. Muller-Eberhard H. J. 1988. Molecular organization and function of the complement system. Annu Rev Biochem, 57:321-347.

169. Musoke A. J., and A.F. Barbet. 1977. Activation of complement by variant-specific surface antigen of Trypanosoma brucei. Nature, 270:438-440.

170. Myhre E.B., G. Kronvall. 1979. Immunoglobulin binding to group A, C and G streptococci. In: Pathogenic streptococci. Parker M.T., ed. Reedbooks Ltd., Surrey: 76- 78.

171. Nordin-Fredrikson G. 1997. Analysis of complement deficiency states. Lund University, Medical Dissertations, Sweden.

172. Norrby-Teglund A. 1994. The role of superantigens in the pathogenesis of group A streptococcal infections. Umea University Medical Dissertations, Sweden.

173. Nowicki S., M.G. Martens, and B.J. Nowicki. 1995. Gonococcal infection in a nonhuman host is determined by human complement Clq. Infect Immun, 63:4790-4794.

174. Ohlsson K. 1971. Elimination of 125I-trypsin- a2-macroglobulin complexes by reticuloendothelial cells in dog. Acta Physiol Scand, 81:269-272.

175. Oiki S., and Y. Okada. 1988. Clq induces Chemotaxis and K+ conductance activation coupled to increased cytosolic Ca2+ in mouse fibroblasts. J Immunol, 141:3177-3185.

176. Okada, N., M.K. Liszewski, J.P. Atkinson, and M.Caparon. 1995. Membrane cofactor protein (CD46) is a keratinocyte receptor for the M protein of the group A streptococcus. Proc Natl Acad Sei USA, 92:2489-2493.

177. Okada, N., A.P. Pentland, P. Falk, and M.G. Caparon. 1994. M protein and protein F act as important determinants of cell-specific tropism of Streptococcus pyogenes in skin tissue. J Clin Invest, 94:965-977.

178. Okhuni H., Y. Todome, K. Yoshimura, T. Yamamoto, H. Suzuki, K. Yokomuro, K.H. Johnston, and J.B. Zabriskie. 1991. Detection of nephritis strain-associated streptokinase by monoclonal antibodies. J Med Microbiol, 35:60-63.

179. O'Toole, P., L. Stenberg, M. Rissler, and G. Lindahl. 1992. Two major classes in the M protein family in group A streptococci. Proc Natl Acad Sei USA, 89:8661-8665.

180. Painter R.H. 1993. The binding of Clq to immunoglobulins. Behring Inst Mitt, 93:131-137.

181. Pancholi V., and V.A. Fischetti. 1988. Isolation and characterization of the cell- associated region of group A streptococcal M6 protein. J Bacteriol, 170:2618-2624.

182. Pancholi V., and V.A. Fischetti. 1992. A major surface protein on group A streptococci is a glyceral dehyde-B phosphate dehydrogenase with multiple binding activity. J Exp Med, 176:415426.

183. Pangburn M.K., and H.J. Muller-Eberhard. 1984. The alternative pathway of complement. Springer Semin Immunopathol, 7:163-192.

184. Paques E.P., R. Huber, and I. Priess. 1979. Isolation of the globular region of thesubcomponent q of the CI component of complement. Hoppe-Seyler's Z Physiol Chem, 360:177182.

185. Peerschke E.I.B., and B. Ghebrehiwet. 1988. Identification and partial characterization of human platelet Clq binding sites. J Immunol, 14:3505-3511.

186. Peerschke E.I.B., and B. Ghebrehiwet. 1990. Platelet Clq receptor interactions with collagen-and Clq-coated surfaces. J Immunol, 145:2984-2988.

187. Peerschke E.I.B., R. Malhotra, B. Ghebrehiwet, K.B.M. Reid, A.C. Willis, and R.B. Sim. 1983. Isolation of a human endothelial cell Clq receptor (Clq-R). J Leuk Biol, 53:179-184.

188. Perez-Casal J., N. Okada., M.G. Caparon, and J.R. Scott. 1995. Role of the conserved C-repeat region of the M protein of Streptococcus pyogenes. Mol Microbiol, 15:907- 916.

189. Peterson, P.K., D. Schmeling, P.P. Cleary, B.J. Wilkinson, Y. Kim, and P.G. Quie. 1979. Inhibition of alternative complement pathway opsonization by group A streptococcal M protein. J Infect Dis, 139:575-585.

190. Phillips G.N., P.F. Flicker, C. Cohen, B.N. Manjula, and V.A. Fischetti. 1981. Streptococcal M protein: a-helical coiled-coil structure and arrangement on the cell surface. Proc Natl Acad Sci USA, 78:4689-4693.

191. Pinckard R.N., M.S. Olson, P.C. Glicas, R. Terry, J.T. Boyer, and R.A. O'Rourke. 1975. Consumption of classical complement components by heart subcellular membranes in vitro and in patients after acute myocardial infarction. J Clin Invest, 56:740-750.

192. Podbielski A. 1993. Three different types of organization of the vir regulon in group A streptococci. Mol Gen Genet, 237:287-300.

193. Podbielski A., N. Schnitzler, P. Beyhs, and M.D.P. Boyle. 1996. M-related protein (Mrp) contributes to group A streptococcal resistance to phagocytosis by human granulocytes. Mol Microbiol, 19:429-441.

194. Ponting C.P., J.M. Marshall, and S.A. Cederholm-Williams. 1992. Blood Coagul Fibrinolysis,3:605-614.

195. Prakash K., S.Dutta. 1991. Antibodies to streptococcal opacity factor in a selected Indian population. J Med Microbiol, 34:119-124.

196. Prellner K. 1980. Bacteria associated with acute otitis media have high Clq binding capacity. Acta path microbiol scand Sect C, 88:187-190.

197. Pro ft Th., S.L. Moffatt, C.J. Berkahn, and J.D. Fraser. 1999. Identification and characterization of no vel superantigens from Streptococcus pyogenes. J Exp Med, 189:89-101.

198. Rakonjac, J.V., J.C. Robbins, V.A. Fischetti, 1995. DNA sequence of serum opacity factor of group A streptococci: identification of a fibronectin-binding repeat domain. Infect Immun, 63: 622631.

199. Reid K.B.M. 1976. Isolation by partial pepsin digestion, of the three collagen-like regions present in subcomponent Clq of the first component of human complement. Biochem J, 155:5-17.

200. Reid K.B.M. 1983. Proteins involved in the activation and control of the two pathway of human complement. Biochem Soc Trans, 11: 1-12.

201. Reid K.B.M., and J.Edmondson. 1984. Location of the binding site in subcomponent Clq for plasma fibronectin. Acta Path Microbiol Immunol Scand Sect C 92 Suppl, 284:11-17.

202. Reid K.B.M., and R.R. Porter. 1976. Subunit composition and structure of subcomponent Clq of the first component of complement. Biochem J, 155:19-23.

203. Rent R., N. Ertel, R. Eisenstein, and H. Gewurz. 1975. Complement activation by interaction of polyanions and polycations. I. Heparin-protamine induced consumption of complement. J Immunol, 114:120-124.

204. Retnoningrum D.S., and P.P. Cleary. 1994. M12 protein from Streptococcus pyogenes is a receptor for immunoglobulin G3 and human albumin Infect Immun, 62:2387-2394.

205. Robbins J.C., J.G. Spanier, S.J. Jones, W.J. Simpson, and P.P. Cleary. 1987. Streptococcus pyogenes type 12 M protein gene regulation by upstream sequences. J- Bacteriol, 169:5633-5640.

206. Rosenberg A.M., P.A. Prokopchuk, and J.S. Lee. 1988. The binding of native DNA to the collagen-like segment ofClq. J Rheumatol, 15:1091-1096.

207. Rotta J., R.M. Krause, R.C. Lancefield, and H. Lackland. 1970. New approaches for the laboratory recognition of M types of group A streptococci. J Exp Med, 134:298-315.

208. Santoro F., M.A. Ouaissi, J. Pestel, and A. Capron. 1980. Interaction beiween Schistosoma mansoni and the complement system: binding of Clq toschistosomula. J Immunol, 124:2886-2891.

209. Saravani G.A., and D.R. Martin. 1990. Opacity factor from group A streptococci is an apoproteinase. FEMS Microbiol Lett, 68:35-40.

210. Scatchard, G.1949. The attraction of proteins for small molecules and ions. Ann N Y-Acad Sci, 51:660-672.

211. Schmidt, K.H., K. Mann, J. Cooney, and W. Kohler. 1993. Multiple binding of type 3 streptococcal M protein to human fibrinogen, albumin and fibronectin. FEMS Immunol Med Microbiol, 7:135-143.

212. Schmidt K.-H., and T. Wadstrom. 1990. A secreted receptor related to Ml protein of Streptococcus pyogenes binds to fibrinogen, IgG, and albumin. Zbl Bakt, 273:216-228.

213. Schumaker V.N., P. Zavodszky, nd P.H. Poon. 1987. Activation of the first component of complement. Ann Rev Immunol, 5:21-42.

214. Sela S., A. Aviv, A. Tovi, I. Burstein, M.G. Caparon, and E. Hanski. 1993. Protein F: an adhesin of Streptococcus pyogenes binds fibronectin via two distinct domains. Mol Microbiol, 10:1049-1055.

215. Siegel A.C., Schumaker V.N., and P.H. Poon. 1981. Stoichiometry and sedimentationproperties of the complex between the Clq and Clr2-Cls2 subcomponents of the first component of complement. J Immunol, 127:2447-2452.

216. Sim R.B., and K.B.M. Reid. 1991. CI: molecular interactions with activating system. Immunol Today, 12:307-311.

217. Simpson W.J., D. LaPenta, C. Chen, and P.P. Cleary. 1990. Coregulation of type 12 M protein and streptococcal C5a peptidase genes in group A streptococci: evidence for a virulence regulon controlled by virR locus. J Bacteriol, 172:696-700.

218. Sobel A.T., and V.A. Bokish. 1975. In: Membrane receptors of lymphocytes. Seligman M., F.L. Preud' Homme, and F.M. Kourilsky, eds. North Holland Publishing Co., Amsterdam: 151.

219. Sorvillo J.M., I. Gigli, and Pearlstein, E. 1986. The effect of fibronectin on the processing of Clq-and C3b/bi-coated immune complexes by peripheral blood monocytes. J Immunol, 136:10231026.

220. Speziale P., G. Raucci, S. Meloni, M.L. Meloni, and T. Wadstrom. 1987. Binding of collagen to group A, B, C, D and G streptococci. FEMS Microbiol Lett, 48:47-51.

221. Stenberg L., P.W. O'Toole, J. Mestecky, and G. Lindahl. 1994. Molecular characterization of protein Sir, a streptococcal cell surface protein that binds both immunoglobulin A and immunoglobulin G. J Biol Chem, 269:13458-13464.

222. Stenberg L., P.W. O'Toole, J. Mestecky, G. Lindahl. 1994. Molecular characterization of protein Sir, a streptococcal cell surface protein that binds both immunoglobulin A and immunoglobulin G. J Biol Chem, 269:13458-13464.

223. StoHerman, G.H. 1969. Nephrogenic and rheumatogenic group A Streptococci. J Infect Dis, 120:258-263.

224. Storrs B.S., W.P. Kolb, and M.S. Olson. 1983. Clq binding and CI activation by various isolated cellular membranes. J Immunol, 131:416-422.

225. Straight D., J. Laszlo, P. McKee, and R. Snyderman. 1988. Binding of 0,2- macroglobulinthrombin complexes and methylamine treated ot2-macroglobulin to human blood monocytes. Biochemistry, 27:2885-2890.

226. Suba E.A., and G. Csako. 1976. Clq (CI) receptor on human platelets: inhibition of collagen-induced platelet aggregation by Clq (CI) molecules. J Immunol, 117:304-309.

227. Swift H.F., A.T. Wilson, and R.C. Lancefield. 1943. Typing group A haemolytic streptococci by M precipitin reactions in capillary pipeties. J Exp Med, 78:127-132.

228. Switalski L.M., P. Speziale, M. Hook, T. Wadstrom, and R.Timpl. 1984. Binding of Streptococcus pyogenes to laminin. J Biol Chem, 259:3734-3738.

229. Tenner A.J. 1989. Clq interactions with cell surface receptors. Behring Ins Mitt, 84:220-235.

230. Tenner A.J., and N.R. Cooper. 1982. Stimulation of a human polymorphonuclear leukocyte oxidative response by the Clq subunit of the first complement component. J Immunol, 128:25472552.

231. Tenner A.J., P.H.Lesavre, and N.R.Cooper. 1981. Purification and radiolabelling of human Clq. J Immunol, 127:648-653.

232. Thern, A., L. Stenberg, B. Dahlback, and G. Lindahl. 1995. Ig-binding surface proteins of Streptococcus pyogenes also bind human C4b-binding protein (C4BP), a regulatory component of the complement system. I Immunol, 154:375-386.

233. Thern A., M. Wastfelt, and G. Lindahl. 1999. Expression of two different antiphagocytic M-proteins by Streptococcus pyogenes of the OF+ lineage. I Immunol.

234. Tillet W.S., and R.L. Garner 1934. The agglutination of hemolytic streptococci by plasma and fibrinogen. Bull Johns Hopkins Hosp, 54:154-156.

235. Tsai P.-J., C.-F. Kuo, K.-Y. Lin, Y.-S. Lin, H.-Y. Lei, F.-F. Chen, J.-R. Wang, and J.-J. Wu.1998. Effect of group A streptococcal cysteine protease on invasion of epithelial cells. Infect Imuun, 66:1460-1466.

236. Turner M.W. 1996. Mannose-binding lectin: the pluripotcnt molecule of the innate immune system. Immunol Today, 17:532-540.

237. Tylewska S.K., V.A. Fischetti, and R.J. Gibbons. 1988. Binding selectivity of Streptococcus pyogenes and M protein to epithelial cells différés from that of lipoteichoic acid. Curr Microbiol, 16:209-216.

238. Uwatoko S., and M. Mannik. 1990. The location of binding sites on Clq for DNA. J Immunol, 144:3484-3488.

239. Van Schravendijk R., and R.A. Dwek. 1982. Interaction of Clq with DNA. Molec Immunol, 19:1179-1187.

240. Veerhuis R., L.A. Van Es, and M.R. Daha. 1985. Effects of soluble aggregates of IgG- on the binding uptake and degradation of the Clq subcomponent of complement by- adherent guinea pig macrophages. Eur J Immunol, 15:881-887.

241. Wang J.R., and M.W. Stinson. 1994. M protein mediates streptococcal adhesion to HEp-2 cells. Infect Immun, 62:442-448.

242. Ward H.K., and G.V. Rudd. 1938. Studies on haemolytic streptococci from human sources. Aust J Exp Biol Med Sci, 16:181-192.

243. Wautier J.L., K.B.M. Reid, Y. Legrand, and J.K. Caen. 1980. Region of the Clq molecule involved in the interaction between platelets and subcomponent Clq of the first component of complement. Mol Immunol, 17:1399-1405.

244. Wessels M.R., A.E. Moses, J.B. Goldberg, and T.J. DiCesare. 1991. Hyaluronic acid capsule is a virulence factor for mucoid group A streptococcLProc Natl Acad Sci USA, 88:8317-8321.

245. Wexler D.E., and P.P. Cleary. 1983. Human neutrophil chemotactic response to group A streptococci: bacteria-mediated interference with complement-derived chemotactic factors. Infectlmmun, 39:239-246.

246. Wexler D.E., and P.P. Cleary. 1985. Purification and characteristics of the streptococcal chemotactic factor inactivator. Infect lmmun, 50:757-764.

247. Wexler D.E., D.E. Chenoweth, and P.P. Cleary. 1985. Mechanism of action of the group A streptococcal C5a inactivator. Proc Natl Acad Sci USA, 82:8144-8148.

248. Whitnack, E., and E.H. Beachey. 1982. Antiopsonic activity of fibrinogen bound to M protein on the surface of group A streptococci. J Clin Invest, 69:1042-1048.

249. Whitnack E., and E.H. Beachey. 1985. Biochemical and biological properties of the binding of himan fibrinogen to M protein in group A streptococci.J Bacteriol, 164:350-358 .

250. Whitnack, and E.H. Beachey. 1985. Inhibition of complement-mediated opsonization and phagocytosis of Streptococcus pyogenes by D fragments of fibrinogen and fibrin bound to cell surface M protein. J Exp Med, 162:1983-1997.

251. Whitnack E., A.L. Bisno, E.H. Beachey. 1981. Hyaluronate capsule prevents attachment of group A streptococci to mouse peritoneal macrophages. Infect lmmun, 31:985-991.

252. Whitnack E., J.B. Dale, and E.H. Beachey. 1984. Common protective antigens of group A streptococcal M proteins masked by fibrinogen. J Exp Med, 159:1201-1212.

253. Widdowson I.P. 1980. The M-associated protein antigens of group A steptococci. In: Streptococcal diseases and the immune response. Reed S.E., and I.B. Zabriskie, eds. Acad Press, New York: 125-147.

254. Wideback K., J. Havlicek, and G. Kronvall. 1983. Demonstration of a receptor for mouse and human serum albumin in Streptococcus pyogenes. Acta Path Microbiol Immunol Scand Sect B, 91:373-382.

255. Ying S.-C., A.T. Gewurz, H. Yiang, and H. Gewurz. 1993. Human serum amyloid P component oligomers bind and activate the classical complement pathway via residues 14-26 and 76-92 of the A chain collagen-like region of Clq. J Immunol, 150:169-176.