Липопротеид(а) и полиморфизм апобелка(а) как факторы риска атеросклероза и его осложнений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, доктор биологических наук Афанасьева, Ольга Ильинична

• Афанасьева, Ольга Ильинична
• доктор биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации доктор биологических наук Афанасьева, Ольга Ильинична

Список сокращений.

I ВВЕДЕНИЕ.

II ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Открытие и первые годы изучения Лп(а).

2. Структура и полиморфизм Лп(а) и апобелка(а).

3. Предполагаемый метаболизм апо(а).

4. Возможная физиологическая и патофизиологическая роль

Лп(а).

5. Лп(а) как фактор риска атеросклероза.

6. Концентрация Лп(а), полиморфизм апо(а) и коронарный атеросклероз.

7. Лп(а) и атеросклероз сонных артерий.

8. Связь Лп(а) и изоформ апо(а) с атеросклерозом артерий нижних конечностей.

9. Методы количественного определения концентрации Лп(а) как потенциальный источник противоречий результатов клинических исследований.

10. Методы коррекции уровня Лп(а).

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

III МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

1. Выделение липопротеидов.

2. Получение антител.

3. Синтез аффинных сорбентов.

4. Определение сорбционной емкости иммуносорбентов.

5. Анализ чистоты и специфичности белков.101.

6. Методы определения концентрации белков и липидов.

7. Клинические исследования.

8. Проведение процедур терапевтического, афереза.с использованием колонок Лп(а) Липопак.

9. Статистические методы.

IV РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Разработка препаративных методов выделения Лп(а) и получения антител к Лп(а).

1.1. Разработка методов выделения Лп(а).

1.2. Разработка препаративных методов получения специфических антител барана к Лп(а) человека.

2. Разработка методов определения концентрации Лп(а) и изоформ апо(а) в плазме или сыворотке крови человека.

2.1. Разработка методов определения концентрации Лп(а) в плазме и сыворотке крови человека.

2.2. Разработка метода фенотипирования апобелка(а).

3. Распределение изоформ апо(а) и концентрации Лп(а) у здоровых доноров и больных сердечно-сосудистыми заболеваниями.

4. Связь полиморфизма апобелка(а) и концентрации Лп(а) с атеросклерозом различных локализаций.

4.1. Связь Лп(а) с атеросклерозом коронарных артерий.

4.2. Полиморфизм апо(а) и осложнения коронарного атеросклероза.

4.3. Связь Лп(а) с атеросклерозом сонных артерий.

4.4. Связь Лп(а) с поражением периферических артерий.199"

4.5. Связь Лп(а) с мультифокальным атеросклерозом.

5. Исследование влияния полиморфизма апобелка(а) и концентрации Лп(а) на прогноз больных ИБС.

5.1. Лп(а) и полиморфизм апо(а) у больных после операции аорто-коронарного шунтирования.

5.2. Влияние концентрации Лп(а) и полиморфизма апо(а) на прогноз больных ИБС.

6. Разработка методов коррекции повышенной концентрации

Лп(а).

6.1. Снижение Лп(а) медикаментозными методами.

6.2. Снижение Лп(а) методами терапевтического афереза.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Афанасьева, Ольга Ильинична

VI. ВЫВОДЫ.

1. Разработаны препаративные методы выделения высокоочищенного препарата Лп(а) из плазмы крови человека и получения моноспецифических поликлональных Ат барана против Лп(а) человека.

2. Разработан иммуноферментный метод, позволяющий с высокой точностью и воспроизводимостью определять концентрацию Лп(а) в плазме/сыворотке крови человека. На основе полученных моноспецифичных поликлональных антител разработан метод фенотипирования апо(а), основанный на разделении апо(а) по электрофоретической подвижности в ЯЭЗ-полиакриламидном геле с последующим иммуноблотингом.

3. Повышенная концентрация Лп(а) (более 30 мг/дл) и низкомолекулярные изоформы апо(а) встречаются в 1,5-2 раза чаще у больных с атеросклеротическим поражением различных сосудистых бассейнов, чем у здоровых доноров и больных без признаков атеросклероза. Более, чем у 40% больных ИБС встречается концентрация Лп(а) > 30 мг/дл и низкомолекулярные изоформы апо(а) .

4. Низкомолекулярные изоформы апо(а) являются независимым предиктором наличия, тяжести и распространенности атеросклеротического поражения коронарных, сонных, периферических артерий и мультифокального атеросклероза, у больных ИБС. Отношение шансов атеросклероза коронарных, сонных, и периферических артерий в 3-6 раз выше у больных с повышенной концентрацией Jln(a) и низкомолекулярными изоформами апо(а), чем у больных с высокомолекулярными изоформами!апо(а).

5. Наиболее значимая связь Лп(а) и, особенно, полиморфизма апо(а) с атеросклеротическими поражениями и ИБС отмечена у больных молодого и среднего возраста.

6. Повышенная концентрация Лп(а) и наличие низкомолекулярных изоформ апо(а) связаны с:

- неблагоприятным прогнозом течения«ИБС;

- развитием осложнений после операции реваскуляризации миокарда.

7. Разработана технология синтеза иммуносорбента, позволяющего с высокой специфичностью и эффективностью удалять Лп(а)' из плазмы крови человека.

8. Лп(а) аферез является уникальным, специфичным, безопасным и эффективным методом коррекции уровня Лп(а). Проведение курса Лп(а) афереза больным с повышенной концентрацией Лп(а) позволяет достичь положительного клинического результата, выраженного в стабилизации течения ИБС.