Лабораторная диагностика воспаления дыхательных путей у больных бронхиальной астмой тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Абулимити Абудуэйни

• Абулимити Абудуэйни
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Абулимити Абудуэйни

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Биохимические маркеры воспаления дыхательных путей при бронхиальной астме.

1.1.1. Значение маркеров воспаления дыхательных путей при бронхиальной астме.

1.1.2. Роль активных форм кислорода в патофизиологических процессах и воспалении.

1.1.3. Участие эозинофильного катионного протеина в патогенезе бронхиальной астмы.

1.2. Влияние лекарственных препаратов на воспаление дыхательных путей при бронхиальной астме.

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Характеристика обследованных больных.

2.2. Аппаратура и реактивы.

2.3. Определение пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха.

2.4. Определение эозинофильного катионного протеина в сыворотке крови.

2.5. Исследование показателей перекисного окисления липидов в эритроцитах.

2.6. Исследования функции внешнего дыхания.

2.7. Статистическая обработка результатов исследования.

Глава 3. Концентрации пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха, эозинофильного катионного протеина в сыворотке крови и малонового диальдегида в эритроцитах у больных бронхиальной астмой.

Глава 4. Динамика пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха, эозинофильного катионного протеина в сыворотке крови и малонового диальдегида в эритроцитах у больных бронхиальной астмой в процессе лечения.

Глава 5. Обсуждение.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Лабораторная диагностика воспаления дыхательных путей у больных бронхиальной астмой»

Актуальность темы. Последние годы характеризуются неуклонным ростом заболеваемости бронхиальной астмой (БА) (Федосеев Г.Б., 1996; Чучалин А.Г.,1997; GINA, 1995). До 10% населения в различных странах мира страдают этой тяжелой болезнью, поражающей людей преимущественно молодого возраста и приводящей к их ранней инвалидизации. Астма является национальной проблемой для многих государств, и ее медико-социальная значимость в ближайшие годы будет возрастать (Чучалин А.Г., 1997; GINA, 1995). Поэтому очевидна необходимость совершенствования методов диагностики и лечения этого серьезного заболевания.

По современным представлениям, воспаление дыхательных путей является основным морфологическим признаком БА, определяющим его клинические симптомы и нарушение функции внешнего дыхания. Вместе с тем, не обнаружено прямой зависимости между выраженностью воспалительного процесса, симптомами болезни, тяжестью и вариабельностью бронхиальной обструкции (Sont J.K., 1998). Поэтому осуществляется поиск биохимических маркеров воспаления дыхательных путей, которые могли бы использоваться для своевременной диагностики астмы и оценки эффективности проводимой терапии.

В настоящее время интенсивно разрабатывается учение о биохимических маркерах БА. Они представляют собой биологически активные вещества и молекулы, которые надежно и информативно отражают активность воспалительного процесса дыхательных путей. Предполагается, что одним из таких показателей является пероксид водорода конденсата выдыхаемого воздуха (КВВ) (Antczak A. et al.,1997; Horvath I. et al.,1998). Известно, что клетки, принимающие участие в развитии воспалительного процесса при БА (эозинофилы, макрофаги, нейтрофилы), продуцируют активные формы кислорода (АФК), в том числе пероксид водорода (Н202). Повышение концентрации Н202 в дыхательных путях может приводить к увеличению его уровня в выдыхаемом воздухе. Установлено, что содержание Н202 в конденсате выдыхаемого воздуха (КВВ) повышено у курильщиков, больных хронической обструктивной болезнью легких, бронхоэктазами, респираторным дистресс-синдромом и БА (Фархутдинов У.Р.,1999; Nowak D., et al.,1996; Antczak A. et al.,1997; Baldwin S.R. et al., 1986; Dekhuijzen P.N.R. et al., 1996; Jobsis Q. et al., 1997; Loukides S. et al., 1998;Sznaider J.I. et al., 1989; Culpitt S.Y., 1999). Это рассматривается как проявление оксидативного стресса. Тем не менее, остается неясной связь между концентрацией Н202, выраженностью нарушений функции внешнего дыхания и известными маркерами воспаления (в частности, эозинофильным катионным протеином) у пациентов с обструктивными заболеваниями легких, в том числе и БА. Не достаточно изучено влияние на его уровень различных противоастма-тических лекарственных препаратов.

Цель исследования: оценить диагностическое значение определения пе-роксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха и его динамику в процессе лечения у больных бронхиальной астмой.

Задачи исследования:

1. Усовершенствовать методику определения Н202 в КВВ.

2. Определить уровень пероксид а водорода в КВВ и содержание эозино-фильного катионного протеина (ЭКП) в сыворотке крови у больных БА и зависимость этих показателей от тяжести течения заболевания.

3. Изучить взаимосвязь между концентрацией пероксида водорода в КВВ и величиной гиперреактивности бронхов у пациентов с БА.

4. Изучить соотношение между уровнем малонового диальдегида в эритроцитах и концентрацией пероксида водорода в КВВ у больных астмой.

5. Исследовать динамику Н202 в КВВ у пациентов с БА в процессе лечения |32-адреномиметиками, антилейкотриеновыми соединениями и ингаляционными глюкокортикоидами .

Научная новизна работы:

Впервые установлена возможность использования Н202 в КВВ в качестве маркера воспаления дыхательных путей у больных БА.

Впервые показано, что пероксид водорода выдыхаемого воздуха является более чувствительным показателем активности воспаления по сравнению с эо-зйнофильным катионным протеином сыворотки крови у пациентов с легким течением БА.

Впервые установлено, что р2-адреномиметики не влияют, а антилейкот-риеновые соединения и ингаляционные глюкокортикоиды достоверно снижают концентрацию Н202 в КВВ у больных с БА.

Практическая ценность работы:

Усовершенствованный метод определения пероксида водорода в КВВ может быть использован для определения активности воспалительного процесса дыхательных путей при БА, что имеет важное значение для его диагностики и оценки эффективности проводимого лечения.

Установлена большая информативность пероксида водорода выдыхаемого воздуха по сравнению с эозинофильным катионным протеином сыворотки крови у больных БА легкого течения.

Определение концентрации пероксида водорода в КВВ может использоваться при изучении механизма действия лекарственных средств, применяемых для лечения БА.

Положения, выносимые на защиту:

1. Усовершенствование спектрофотометрического метода определения Н202 в КВВ путем двукратного повышения исходной концентрации 3,3',5,5'-тетраметилбензидина обеспечивает более высокую воспроизводимость получаемых результатов.

2. Пероксид водорода в конденсате выдыхаемого воздуха является маркером воспаления дыхательных путей. Его определение может быть использовано для подтверждения диагноза и контроля за эффективностью лечения у больных БА.

3. Селективные (Зг-адреномиметики (сальбутамол, бриканил-турбухалер), обладающие выраженным бронхолитическим эффектом, не оказывают существенного влияния на концентрацию пероксида водорода в КВВ у пациентов с астмой.

4. Антилейкотриеновые соединения (липринол, аколат, сингуляр) и ингаляционные глюкокортикоиды (пульмикорт- турбухалер, беклоджет) достоверно снижают концентрацию Н2Ог в КВВ у больных бронхиальной астмой.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на конференции по актуальным вопросам пульмонологии и клинической аллергологии ("Булатовские чтения", июнь 1999, Санкт-Петербург), 9-м Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (ноябрь 1999, Москва), Европейском конгрессе по аллергологии и клинической иммунологии (июль 1999, Брюссель), Европейском конгрессе по пульмонологии (октябрь 1999, Мадрид), 7-м Российском национальном конгрессе "Человек и Лекарство" (апрель 2000, Москва ).

По материалам диссертации опубликовано 5 работ, из них 3- в отечественной и 2- в зарубежной печати.

Реализация результатов исследования.

Основные методы исследования внедрены в работу кафедры госпитальной терапии и кафедры биохимии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова.

Объем и структура диссертации.

Работа состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, двух глав собственных наблюдений, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 15 таблицами и 11 рисунками. Список литературы со

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Абулимити Абудуэйни

выводы

1. Усовершенствованный метод определения пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха оказался чувствительным, быстрым и безопасным. Поэтому он может быть рекомендован для использования в клинической практике.

2. У больных бронхиальной астмой обнаружена более высокая, чем у здоровых людей, концентрация пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха, отражающая тяжесть течения бронхиальной астмы и выраженность обструкции бронхов.

3. Достоверная корреляция между уровнем эозинофильного катионного протеина сыворотки крови, величиной гиперреактивности бронхов к гистамину и концентрацией пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха свидетельствует о том, что содержание Н2О2 в КВВ может быть маркером воспаления дыхательных путей у пациентов с бронхиальной астмой.

4. Концентрация малонового диальдегида в эритроцитах недостаточно информативна для оценки активности воспаления дыхательных путей при бронхиальной астме.

5. Селективные Рг-адреномиметики (сальбутамол, бриканил-турбухалер), назначаемые в течение двух недель в режиме по "требованию", не оказывают существенного влияния на уровень пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха у больных астмой.

6. Антилейкотриеновые соединения (липринол, аколат, сингуляр) и ингаляционные глюкокортикоиды (пульмикорт-турбухалер, беклоджет) достоверно улучшают клинико-функциональное состояние пациентов с бронхиальной астмой и существенно уменьшают концентрацию пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха.

102

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Определение пероксида водорода в конденсате выдыхаемого воздуха может применяться для оценки активности воспалительного процесса и контроля за эффективностью лечения у больных бронхиальной астмой.

2. Концентрация малонового диальдегида в эритроцитах не рекомендуется для использования в качестве надежного маркера воспаления дыхательных путей у пациентов с астмой.

3. Определение концентрации эозинофильного катионного протеина в сыворотке крови может применяться для оценки активности воспаления у больных бронхиальной астмой средней тяжести и тяжелого течения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Абулимити Абудуэйни, 2000 год

1. Адо А.Д. Общая аллергология: Руководство для врачей. -2-е изд. -М.: Медицина, -1969. -С.28-36.

2. Бейли Н.Т. Статистические методы в биологии: Пер.с англ./ Под ред.В.В.Налимова.-М.: Мир, 1962. -271с.

3. Бенисович.В.И., Идельсон Л.И. Образование перекисей непредельных жирных кислот в оболочке эритроцитов при болезни Маркиафава-Микели// Вопросы медиц.химии. -1973. -Т. 19, № 6.-С.596-599.

4. Бизюкин А.В., Соодаева С.К. Новый методический подход к изучению окислительного метаболизма фагоцитирующих клеток// Пульмонология. -1995.-№1.-С.46-50.

5. Болевич С.С. Свободнорадикальные кислородные и липидные процессы и возможности их коррекции у больных бронхиальной астмой// Дисс.канд. мед.наук. -Москва, 1991. -226с.

6. Болевич С.С., Даниляк И.Г., Коган А.Х. и др. Новые доказательства включения активных форм кислорода в патогенезе бронхиальной астме// Клин, медицина. -1997. -№8. -С.75-78.

7. Величковский Б.Т. Новые представленияя о патогенезе профессиональных заболеваний легких пылевой этиологии// Пульмонология. -1995. -№1.-С.6-18.

8. Владимиров Ю.А., Азизова О.А. Деев А.И. и др. Итоги науки и техники: свободные радикалы в живых системах// Сер. Биофизика. М.: ВИНИТИ, -1991. -Т.29. -249 с.

9. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах- М.: Наука, -1972. -С252.

10. Вольский Н.Н., Кашлакова Н.В., Козлов В.А. Влияние супероксидного радикала на пролиферацию лимфоцитов, стимулированную митогеном// Цитология. -1988. -№ 7. -С.898-903.

11. Даирова Р.А. Патогенетическая роль генерации активных форм кислорода лейкоцитами и эффективность немедикаментозной терапии при бронхиальной астме у детей// Автореф.дисс.д-ра мед. наук.- Москва, -1995.-С29.

12. Даниляк И.Г., Коган .А.Х., Болевич С.С. и др. О влиянии тромбоцитов на генерацию активных форм кислорода лейкоцитами крови, перекисное окисление липидов и антиперекисную активность у больных бронхиальной астмой// Пульмонология. -1994. -№2. -С.43-44.

13. Дубинина Е.Е., Шугалей И.В. Окислительная модификация белков// Успехи соврем, биологии.- 1993. -Т. 113, №1. -С.71-73.

14. Дубинина Е.Е. Активные формы кислорода и их роль в развитии оксида-тивного стресса// Тез.докл.конф. "фундаментальные и прикладные аспекты современной биохимии", -Санкт-Петербург, -1998. -С.386-397.

15. Жав Бав Лу., Жен Вей Цан. Окись азота и ее роль в физиологических процессах ( на китайском языке)// Успехи биохимии и биофизики. -1993. -Т.20. -С.409-411.

16. Жен Рон Лийэн. Свободно-радикальная биология (на китайском языке). -Пекин.: Высшее образование. 1993. -С.20-40.

17. Журавлев А.И. Свободнорадикальная биология// Лекции.- Москва,-1993.-68с.

18. Зайцев В.Г., Закревский В.И. Защита клеток от экзогенных и эндогенных активных форм кислорода: методологические подходы к изучению// Тез.докл.конф. "Фундаментальные и прикладные аспекты современной биохимии", Санкт-Петербург, -1998. -С.401-405.

19. Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б. Активированные кислородные метаболитыв биологических системах // Успехи соврем, биологии. -1993. -Т. 113, № 3. -С.286-296.

20. Ковальский M.JI. Аспирин-индуцированная астма/синдром риносинусита-патофизиология и лечение// Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии.-М, -1997. С.27-37.

21. Кузьменко Д.И., Лаптев Б.И. Оценка резерва липидов сыворотки крови для перекисного окисления в динамике окислительного стресса у крыс// Вопросы медиц.химии. -1999. -Т.45,№1. -С.47-52.

22. Лакин Г.Ф. Биометрия. -М.: Высшая школа, 1990. -352с.

23. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике.-М.: Медицина. 1987.-С. 10-172.

24. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов// Успехи соврем .биологии -1993.-Т. 113, № 4.-С442.

25. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К. Окислительный стресс при воспалении // Успехи соврем, биологии. -1997. -Т.117, №2.-С.155-171.

26. Морозов В.И. Участие активных форм кислорода в регуляторных процессах// Тез.докл.конф. "Фундаментальные и прикладные аспекты современной биохимии", -Санкт-Петербург, 1998. -С.398-400.

27. Новиков Ю.К. Свободнорадикальное воспаление и антирадикальная защита у больных бронхиальной астмой// Русский медицинский журнал. -1997. -Т.5, №17.-С.1143-1148.

28. Сепетлиев Д. Статистические методы в научных медицинских исследованиях: Пер. с болг./ Под ред.А.М.Меркова. -М.: Медицина, -1968. -С.89-111; 232259.

29. Сергеев П.В., Духанин А.С., Шимановский H.JI. Плазматическая мембрана клетки-мишени и стероидные гормоны: начало спора или его заверше-ние?//Бюл.эксперим.биологии и медицины.-1995. -№10.-С.342-347.

30. Ушкалова В.И., Иоанидис Н.В, Кадочникова Г.Д., и др. Контроль прекисно-го окисления липидов. -Новосибирк.: Издательство Новосибирского университета, 1993.-С.139.

31. Фархутдинов У.Р., Абдрахманова JI.M., Фархутдинов P.P. Хемилюминес-ценция конденсата влаги выдыхаемого воздуха у больных хроническим бронхитом (резюме)// Пульмонология, 9-национальный конгресс по болезням органов дыхания, Москва, 1999.-С.384.

32. Федосеев Г.Б., Дегтряева З.Я. Диагностика, лечение и профилактика преда-стмы: Метод.рек. -Л.:ВНИИП, 1 ЛМИ, -1984. -29с.

33. Федосеев Г.Б. Механизмы обструкции бронхов.-Санкт-Петербург.: Мед.информ.агентство, 1995. -С. 154-209.

34. Федосеев Г.Б. Бронхиальная Астма. -Санкт-Петербург.: Мед.инф.агентство,-1996.-261 с.

35. Федосеев Г.Б. Механизмы воспаления бронхов и легких и пртивовоспали-тельная терапия. Санкт-Петербург.: Нормед-Издат. 1998. -С. 182-330.

36. Червари С., Андял Т., Панцел А. Иницирование перекисного окисления липидов в сыворотки крови in vitro// Клин.лаб.диагн. -1992. -№11-12. -С.34-37.

37. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма: глобальная стратегия // Тер.архив.-1994.- № 3.-C.3-8.

38. Чучалин. А.Г. Бронхиальная астма. -М.: Агар. 1997.-Т.1. -С.86; -Т.2. -С.269-275.

39. Ягмуров Б.Х.,Острахович Е.А., Тимофеев А.А., Чучалин А.Г. и др. Влияние тровентола на свободнорадикальные процессы// Пульмонология.-1995. -Т.1.- С.60-64.

40. Abu-Ghazaleh R.L., Fujisawa Т., Mestecky J. et al. Ig A- induced eosinophil de-granulation//J.Immunol. -1989. -Vol. 142.-P.2393-2400.

41. Adelroth E., Rosenhall L., Johansson S.A. et al. Inflammatory cells and eosinophilic activity in asthmatics investigated by bronchoalveolar lavage// Am.Rev. Respir.Dis.-1990. -Vol.142. -P.91-99.

42. Adolphson C.R., Gleich G.J. Eosinophils// S.Holgate, M.Church. Allergy.-London,1995.-P.6.1-6.12.

43. Ager A., Gordon J. L. Differential effects of hydrogen peroxide on induces of endothelial cell function // J.Exp.Med. -1984. -Vol. 159. -P. 592-603.

44. Akagi M., KatakuseY., Fukuishi N. et al. Superoxide anion-induced histamine release from rat peritoneal mast cells // Biol.Phamiacol.Bull. -1994. -Vol. 17. -P. 732-734.

45. Alving K., Weitzberg E., Lundberg J.M. Increased amount of nitric oxide in exhaled air of asthmatics // Eur.Respir.J.-1993. -Vol.6.- P. 1368-1270.

46. Antczak A., D.Nowak, B.Shariati. et al. Increased hydrogen peroxide and thio-barbituric acid-reactive products in expried breaht condensate of asthmatic patients// Eur.Respir.J. -1997. -Vol.10. -P.1235-1241.

47. Arshad M.A.Q., Bhadra S., Cohen M.R. et al. Plasma lipoprotein peroxidation potential: a test to evaluate individual susceptibility to peroxidation// Clin.Chem. -1991. Vol.37. -P.1756-1758.

48. Baldwin Sr, Simon R.H., Grum C.M. et al. Oxidant activity in expired breath of patients with adult respiratopy distress syndrome// Lancet. -1986. Vol. 1.-P. 11-14.

49. Barnes, P.J. Anti-inflammatory therapy for asthma// Annu.Rev.Med. -1993. -Vol .44.-P.229-242.

50. Barnes P.J, Beivisi M.G. Nitric oxide and lung disease //Thorax. -1993.- Vol.1. -P. 1034-1043.

51. Barnes P.J. Liew F.Y. Nitric oxide and asthmatic inflammation// Immunol To-day.-1995.- Vol.16.- P.128-130.

52. Barnes N.C., Kuiter L.M. Drug affecting the leukotriene pathway in asthma//British.J.Clin.Pract -1995.-Vol.49.-P.162-165.

53. Barnes P.J, Pedersen S, Busse W.W. Efficacy and safety on inhaled corticosteroids. New developments// Am.J.Respir.Crit.Care Med.-1998.-Vol.157, suppl.S.l. -P53.

54. Beyer W., Imlay J., Fridovich I. Superoxide dismutases // Progr. Nucl. Acid. Res. Mol. Biol. -1991. -Vol. 40. -P. 221-253.

55. Biological markers: current and near term applications in atopic desease: A comprehensive literature review.-The UCB Institute of Allergy, Belgium, 1997.-15P.

56. Вое J., Bakke P.P., Rodolen T. et al. High -dose inhaled steroid in asthmatics: moderate efficacy gain and suppression of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HP A) axis//Eur.Respir.J.-1994. Vol .7.-P.2179-2184.

57. Borland C., Cox. Y., lligenbottam T. Measurement of exhaled nitric oxide in man // Thorax. -1993.- Vol.48.- P.l 160-1162.

58. Borson D.B., Gruenert D.C. Glucocorticoids induce neutral endopeptidase in transformed human tracheal epithelial cells//Am.J.Physiol.-1991. -Vol.260.-P83-89.

59. Bousquet J., Chanez P., Lacoste J.Y. et al. Eosinophilic inflammation in asthma// N.Engl.J.Med. -1990. Vol .323, suppl.l5.-P.1033-1039.

60. Brune В., Ullrich V. Inhibition of platelet aggregation by carbon monoxide is mediated by activation of guanylate cyclase// Mol.Pharmacol.-1987.- Vol .32.-P.497-504.

61. Burke С , Power С.К., Norris A. et al. Lung function immunopathological changes after inhaled corticosteroid therapy in asthma// Eur.Respir J. -1992.-Vol. 5. -P.73-79.

62. Busse W.W., Sedwik J.B. Eosinophils in asthma // Ann. Allergy.-1992.-Vol.68.-P.286-290.

63. Calhoum W.J.,Williams K.L.,Simson S.G. et al. Effect of zafirlucast (accolate) on airway inflammation after segmental challenge in patients with mild asthma// Am. J. Respir.Crit. Care Med.-1997.-Vol.155, suppl.4,pt 2.-A662.

64. Chanarin N.,Johnston S.L. Leukotrienes as a target in asthma therapy// Drugs.-1994.-Vol.47.-P. 12-24.

65. Channok S. J., El Benna J., Smith P.M.et al. The respiratory burst oxidase // J. Biol. Chem. -1994. -Vol. 269. -P.24519-24522.

66. Chilvens E.R., Carratt A., Whyte M.K. et al. Absence of circulating products of oxygen derived free radicals in acute severe asthma// Eur.Respir.J. -1989.- Vol .2, suppl. 10.-P.950-954.

67. Cremona G., Higenbotlam Т., Takao M. et al. Exhaled nitric oxide in isolated pig lungs // J. Appl. Physiol. -1995.-Vol.78.— P.59—63.

68. Cross A.R., Jones О. T. G. Enzymic mechanisms of superoxide production // Biochim. Biophys. Acta. -1991. -Vol. 1057.- P. 281—298.

69. Culpitt S.V., Russell R.E.K. The measurement of hydrogen peroxide in airways disease// Eur.Respir.Rev. -1999.- Vol.9, suppl.68. -P.246-248.

70. De Backer W. Measures of inflammation in serum// Eur.Respir.Rev.- 1998.-Vol 8.-P. 1098-1102.

71. Dekhuijzen P.N.R., Aben K.K.H., Dekker I. et al. Increased exhalation hydrogen peroxide in patients with stable and unstable chronic obstructive pulmonary disease/7 Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1996. Vol .154.-P.813-816.

72. Deme D. Doussiere J., De Sandro V., Dupuy C. et al. The Ca2+ / NADPH-dependent H202 generator in thyroid plasma membrane: inhibition by diphenylenei-odonium // Biochem. J. -1994. -Vol. 301. P. 75—81.

73. Diamant Z, Lammers J.W.J. Sterk P.J. Leukotriene receptor antagonists and biosynthesis inhibitors in asthma. An up-date// Clin.Immunolther.-1994.-VoI.12.-P.230-232.

74. Diamant Z, Hiltermann J.T.,van Resen E.L. et al. The effect of inhaled leukotriene D4 and methacholine on sputum cell differetials in asthma// Am.J.Respir. CritCare Med.-1997.-Vol .155.-P.1247-1253.

75. Ding Z, Li S., Wu Z. Platelet-activating factor mediates hydrogen peroxide induced endothelial-leukocyte adhesion // J. Med. Coll. PLA. -1992. Vol. 7. -P. 236— 241.

76. Doelman C.J, Bast A. Oxygen radicals in lung pathology// Free Radi-cal.Biol.Med. -1990. Vol .9.-P.381-400.

77. Dupuy C., Virion A., Ohayon R.et al. Mechanism of hydrogen peroxide formation catalyzed by NADPH oxidase in thyroid plasma membrane // J. Biol. Chem. -1991. -Vol. 266. -P. 3739—3743.

78. Ellioti S. J., Meszaros J. G., Schilling W. P. Effect of oxidant stress on calcium signaling in vascular endothelial cells // Free Radical Biol. Med. -1992. -Vol. 13. -P. 635—650.

79. Fahy J.V, Wong H, Liu J, Boushey H.A. Comparison of samples collected by sputum induction and bronchoscopy from asthmatic and healthy subjects//Am.J. Respir. Crit. Care Med. -1995. Vol .152.-P. 53-58.

80. Feldman C., Anderson R., Kanthakumar K. et al. Oxidant-mediated ciliary dysfunction// Free Radic. Biol.Med. -1994.- Vol .17.-P.1-10.

81. Fenton H. J. H., Jackson H. The oxidation of polyhydric alcohols in the presence of iron // J. Chem. Soc. Trans. -1899. -Vol. 75. -P. 1—11.

82. Ferguson A.G., Vaughan R., Brown H. et al. Evaluation of serum eosinophilic cationic protein as a marker of disease activity in chronic asthma// J.Allergy Clin.Immunol. -1995. Vol .95(1 Pt l)-P.23-28.

83. Frigas E., Motojima S., Gleich G.J. The eosinophilic injury to the mucosa of the airways in the pathogenesis of bronchial asthma// Eur.Respir.J. -1991. suppl.13.-P.123-135.

84. Freeman B. Free radical chemistry of nitric axide//Chest. -1994. Vol. 105. -P. S79.

85. Fukuda K., Yusuba A., Satake N. et al. Luminol-dependent chemiluminescens of peripheral neutrophils in asthmatic patients// Nippon Keobu Shikkan Gakkai Zasshi. -1989. Vol .27, suppl.2.-P.200-205.

86. Gaboury J. P., Anderson D. C., Kubes P. Molecular mechanisms involved in su-peroxide-induced leukocyte-endothelial cell interactions in vivo // Amer. J. Physiol. -1994. -Vol. 266. -P. 637—642

87. Gallati Von H., Prach I. Horseradish peroxidase: Kinetic studies and optimaza-tion of the peroxidase activity determination with the substrates H202 and 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine// J.Clin.Chem.Clin.Biochem. -1985. -Vol.23.-P.453-460.

88. Gamaley I. A. Kirpichnikova К. M., Klyubin I. V. Activation of murine macrophages by hydrogen peroxide // Cellular Signal. -1994. -Vol. 6. -P. 949—957.

89. Gleich G.J.,Loegering D.A., Adolphson C.R. Eosinophils and bronchial inflammation// Chest.-1985.- Vol .87, suppl.l.-P.10-13.

90. Global Initiative for Asthma,- NHLB/WHO Workshop Report-National Heart Lung Blood Institute, Publication number 95-3659,1995.-176 P.

91. Gohn G., Widdicombe M.D. International symposium on airway hyperreactivity //Am. Rev.Respir.Dis.-1991 .-Vol. 143 ,suppl.3 .-part2.-P. 1 -82.

92. Gustafsson L.E., Leone.A.M., Persson M., Wikiund N.P., Moncada S. Endogenous nitric oxide is present in the exhaled air of rabbits, guinea-pigs and humans// Biochem. Biophys. Res. Commun.— 1991.— Vol.181.— P.852—857.

93. Haber F., Weiss J. The catalitic decomposition of hydrogen peroxide by iron salts // Proc. Roy. Soc. London. -1934. -Vol. 147. -P. 332—351.

94. Halliwell В., Chirico S. Lipid peroxidation: its mechanism, measurement and significance// Am.J.Clin.Nutr. -1993.- Vol .57.-P.715-725.

95. Harris L.R. Cake M.H, Macey D.J. Iron release from ferritin and its sensitivity to superoxide ions differs among vertebrates// Biochem. J. -1994. Vol. 301. -P. 385.

96. Hasday J., Moore W. Meltzer S. et al. Anti-inflammatory effect of zileuton in an identifiable subpopulation of asthmatics// Am. J. Respir. Crit. Care Med.-1997.-Vol .155, suppl.4,pt 2.-A662.

97. Hay D.W.P., Torphy T.J., Undem B.J. Cysteinyl leukotrienes in asthma: old mediators up to new trick//Tends. Pharmacol. Sci.-1995.-Vol.l6.-P.304-309.

98. Hay D.W.P. Pharmacology of leukotriene receptor antagonists-more than inhibitors ofbronchoconstriction//Chest.-1997.-Vol. Ill, suppl.2.-P.35S-45S.

99. Hebib M.P, Eskelson C, Katz M.A. Ethene production rate in rats exposed to high oxygen concentration//Am.Rev.Respir.Dis. -1988. Vol. 137.-P. 341-344.

100. Henderson W.R. Role of leukotrienes in asthma//Ann .Allergy.-1994.-Vol.72.-P.272-278.

101. Hinshaw D.B., Sklar L A., Bohl B.et al. Cytoskeletal and morphological impact of cellular oxidant injury // Amer. J. Pathol. -1986. -Vol. 123. -P. 454- 464.

102. Hoekstra M.O, Hovenga H, Gerritsen J . et al . Eosinophilis and eosinophil-derived proteins in children with moderate asthma// Eur. Respir. J. -1996.- Vol .9.-P. 2231-2235.

103. Holgate S.T., Roche W.R, Church M.K. The role of the eosinophil in asthma// Am.Rev.Respir.Dis. -1991. Vol .143.-P.S66-S70.

104. Holgate S.T., Bradding P., Sampson A.P. Leukotriene antagonists and synthesis inhibitors: New directions in asthma therapy// J. Allergy. Clin. Immunol.-1996.-Vol 98.-P.1-13.

105. Horvath I., Donnely L.E., Kiss A.et al. Combined use of exhaled hydrogen peroxide and nitric oxide in monitoring asthma// Am.J.Respir.Crit.Care Med. -1998. -Vol.158, suppl.4.-P. 1042-1046.

106. Hoshino M, Nakamura Y. Relationship between activated eosinophils of the bronchial mucosa and serum eosinophil cationic protein in atopic asthma // Int. Arch. Allergy Immunol. -1997. Vol .112.-P.59-64.

107. Hulmann A.R., Raatgeep H.R., den Hollander J.C. et al. Oxidative epithelial damage produces hyperresponsiveness of human peripheral airways// Am. J. Respir. Crit. Care Med.-1994.-Vol.l49.-P.519-525.

108. Jackson R,M. Molecular, pharmacologic and clinical aspects of oxigen-induced lung injury// Clin.Chest.Med. -1990. Vol .ll,suppl.l.-P.73-86.

109. Kanasawa H., Kurihara N., Hirata K. et al. The role of free radicals in airway obstruction in asthmatic patients// Chest.-1991. Vol .100.-P.1319-1322.

110. Katsumata U., Miura M., Ichinase M. et al. Oxygen radicals produce airway constriction and hyperresponsivenes in anesthetized cats// Am.Rev. Respir. Dis.-1990.-Vol .141.-P.1158-1161.

111. Kharitonow S.A. Yates D.,Robbins R.A.,Logan-Sinclair R. et al. Increased nitric oxide in exhaled air of asthmatic patients// Lancet.— 1994.—Vol.343. — P. 133— 135.

112. Kharitonow S.A., О Connor B.J., Evans D.J. et al . Allergen-induced late asthmatic are associated with elevation of exhaled nitric oxide // Ibid.— Vol.151.— P. 1894—1899.

113. Khahtonov S.A., Wells A.U., O'Conner B.J. et al. Elevated levels of exhaled nitric oxide in bronchiectasis// Am. J. Respir. Crit. Care Med.— 1995.— Vol.151.— P. 1889—1893.

114. Kiyoshi Zayasu., Kiyohisa Sekizawa., Shuji Okinaga. et al. Increased carbon monoxide in exhaled air of asthmatic patients// Am.J.Respir.CritCare Med. -1997.-Vol .156.-P.1140-1143.

115. Klebanoff S.J. Phagocytic cells : products of oxygen metabolism//Inflammation: Basic Principles and Clinical Correlates. -New York. : Raven Press. -1988. -P. 391.

116. Kobzik L., Bredt D.S., Lowenstein C.J. et al. Nitric oxide synthase in human and rat lung: immunocytochemical and histochemical locazation // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol.— 1993.—Vol.9.—P.371—377.

117. Koller D.Y, Wojnarowski C, Herkner K.R. et al. High levels of eosinophil cation protein in wheezing infants predict the development of asthma// J.Allergy Clin. Immunol. -1997.- Vol .99.-P. 752-756.

118. Krippeit Drews P., Long F., Huussinger D.et al. H202 induced hyperpolarization of pancreatic B-cells // Pflugers Arch. -1994. -Vol. 426. -P. 552—554.

119. Krippeit Drews P., Haberland C., Fingerle J.et al. . Effects of H202 on membrane potential and Ca2+. of cultured rat arterial smooth muscle cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1995. -Vol. 209. -P. 139— 145.

120. Kuo S. S. Saad A. H., Koong A.et al. Potassium-channel activation in response to low doses of y-irradiation involves reactive oxygen intermediates in nonexcita-tory cells // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1993. -Vol. 90. -P. 908—912.

121. Lai C.K, Ho A.S, Chan C.H, Tang J. et al. Interleukin-5 messenger RNA expression in peripheral blood CD4+ cell in asthma// J. Allergy Cilin. Immunol. -1996.- Vol .97.-P. 1320-1328.

122. Laitinen L.A., Laitinen A., Heino M. et al. Eosinophilic airway inflammation during exacerbation of asthma and its treatment with inhaled corticosteroid// Am.Rev.Respir.Dis. -1991. Vol .143.-P.423-427.

123. Laitinen L.A., Laitinen A., Haahtela T. Treatment of eosinophilic airway inflammation with inhaled corticosteroid, budesonide, in newly diagnosed asthmatic patient (abstract)// Eur.Respir.J. -1991.- Vol .4, suppl 14.-P.342S

124. Laitinen L.A., Laitinen A.,Haahtela T. A Comparative study of the effects of an inhaled corticosteroid, budesonide, and of a p2-agonist, terbutaline, on airway inflammation in newly diagnosed asthma// J.Allergy Clin. Immunol.-1992.- Vol.90.-P.32-42.

125. Laitinen L.A.,Laitinen A., Haahtela T. et al. Leukotriene E4 and granulocytic infiltration into airways//Lancet.-1993.-Vol. 341.-P.989-992.

126. Langermans J. A. M., Hazenbos W. L W., van Funh R. Antimicrobial function of mononuclear phagocytes // J. Immunol. Meth. -1994. -Vol. 174. -P. 185—194.

127. Leff J.A., Israel E, Nooman M.J. et al. Montelukast (MK0476) allows tapering of inhaled corticosteroids in asthmatic patients while maintaning clinical stability // Am .J. Respir. Crit. Care Med.-1997.-Vol.155, suppl 4,pt 2.-A976.

128. Lee P.S, Camplell L.M., Watson D.G. et al. Budesonide Turbohaler once daily in mild asthma (Abstract)// Thorax. -1991.- Vol .26.-P.769.

129. Leone A.M., Guslafsson L.E., Francis P.L., Persson M.G.et al. Nitric oxide in exhaled breath in humans: direct GC-MS comfirmation // Biochem. Biophys Res.Commun.— 1994.— Vol.201.— P.883—887.

130. Liew F.Y., Cox F.F. Nonspecific resistance mechanisms: the role of nitric oxide //Immunol. Today.— 1991.—Vol.12—P.A17.

131. Lim .S., K.F.Chung. Potential role of noninvasive markers of inflammation in clinical management of asthma// Eur. Respir. J. -1998.- Vol.8, suppl.64.- P. 11031107.

132. Liu S. M., Sundqvist T. Effects of hydrogen peroxide and phorbol myristate acetate on endothelial transport and F-actin distribudon // Exp. Cell Res. -1995. -Vol. 217.- P. 1—7.

133. Loukides S., Horvath I., Wodehous T. et al. Elevated levels of expired breath hydrogen peroxide in bronchiectasis// Am. J. Respir. Crit Care. Med .-1998. Vol. 158.-P.991-994.

134. Maines M. D. Heme oxygenase: function, multiplity, regulatory mechanisms, and clinical applications// FASEB J. -1988. Vol .2.-P.2557-2568.

135. Mates J.M., Sanchez -Jimenez F. Antioxidant enzymes and their implications in pathophysiologic processes// Frontiers in Bioscience.-1999.-Vol 4.- d.339-345.

136. McKenna S.M., Davies K.I.A. Oxygen Radicals in Biology and Medicine -N.Y.;L.-1988.-P. 829.

137. Misawa M, Arai H. Airway inflammation induced by xantine / xantine oxidase in guinea-pig// Agents Actions. -1993. Vol .38.-P. 19-26.

138. Motoima S., Makino S., Gliich G.I. The effect of eosinophil peroxidase and major basic protein on beta-adrenergic receptors // Allergy Clin.Immunol. -1991. -Vol .87,suppl.l. (part2) -P. 247.

139. Morita S.H., Snider M.T., Inada Y. Increased N-pentane excretion in humans : a consequence of pulmonary oxygen exposure// Anesthesiology. -1986. Vol.64.-P.730-733.

140. Musiki В., Alen K.F., Bernman H.R. Inhibition of protein syntesis and hor-monesensetive steroidogenesis in response to hydrogen peroxide in rat luteal cells// Endocrinology. -1993. Vol .134,suppl.2.-P.588-595.

141. Nathan С. F., Silverstein S. O., Brukner L. H., Cohn Z. A. Extracellular cytoly-sis by activated macrophages and Bianulocytes. II. Hydrogen peroxide as a mediator of cytotoxicity // J. Exp. Med. -1979. -Vol. 149. -P. 100—113.

142. O'Donneil-TormeyJ., De BoerC. J., Nathan C. F. Resistance of human tumor cells in vitro to oxidative cytolysis//J. Clin. Invest. -1985. -Vol. 76. -P. 80—86.

143. Pauwels R.A., Joos G.F.,Kips J.C. Leukotrienes as therapeutic target in asthma//Allergy.-1995.-Vol .50.-P.615-622.

144. Peden D.B., Dailey L, De Graff W. et al. Hydrogen peroxide effects on rat mast cell function// Am. J. Physiol. -1994. Vol .267.-P. L85-L93.

145. Peters-Golden M. Anti-leukotriene therapy update on asthma management is-sues//Postgraduate course 8.-American Thoracic Society,San Francisco,-1997.-P. 1-9.

146. Pinamoti S., Muzzuli M., ChiccaM.C.et al. Xanthine oxidase activity in bron-choalveolar lavage fluid from patiens with chronic obstructive lung disease //Free Radic.Biol.Med.-1996.- Vol .21.-P.147-155.

147. Pizzichini E, Pizzichini МММ, Efthimiadis A. et al. Measuring airway inflammation in asthma: eosinophils and eosinophilic cationic protein in induced sputum compared with peripheral blood// J .Allergy Clin .Immunol. -1997.- Vol .99. -P. 539-544.

148. Pratico D., luliano L, Ghiselli A.et al. Hydrogen peroxide as a trigger of platelet aggregation//Haemostasis. -1991. -Vol. 21. -P. 169—174.

149. Pratico D., luliano L, Pulcinelli F. M. et al. Hydrogen peroxide triggers activation of human platelets selectively exposed to nonaggregating concentrations of arachidonic acid and collagen // Lab. Clin. Med. -1992. -Vol.119. -P. 364—370.

150. Rahman I., Mac Nee W. Role oxidants/antioxidants in smoking induced lung diseases// Free Radic. Biol. Med.-1996.- Vol .21.-P.669-681.

151. Reed C.D. Aerosol steroids as primary treatment of mild asthma// N.Engl.J.Med. -1991. Vol .325.-P.425-426.

152. Rosen G.M., Pou S., Ramos G.L., Cohen M.S., Britigan B.E. Free radical and phagocytic cells// FASEB J. -1995. Vol.9. -P. 200.

153. Ruch W, Cooper P.H, Baggiolini M. Assay of H202 production by macrophages and neutrophils with homovanillic acid and horseradish peroxidase// J. Immunol. Methods. -1983. Vol.63.-P.347-357.

154. Sampson A., Castello J. Treatment guidelines for asthma-where will leukotriene receptors antagonists fit in?//Pharmaceutical.J.-1995.-Vol.225.-P.26-30.

155. Sawada M., Sester U., Carlson J.C. Superoxide radical fomation and associated biochemical alterations in the plasma membrane of brain, heart, and liver during the lifetime of the rat// J.Cell Biochem. -1992. Vol.48.-P. 296-304.

156. Schraufstatter I. U., Hinshaw D. В., Hyslop P. A. et al. Hydrogen peroxide induced injury of cells and its prevention by inhibitors of poly (ADP-ribose) polymerase //Proc. Nat. Acad. Sci.USA -1986.-Vol.83. -P.4908-4912.

157. Sies H. Oxidative stress: From basic reseach to clinical appilication// Amer. J. Med.-1991. Vol. 91, suppl. 3C. -P. S31.

158. Sigurdur Kristjansson, Inga-Lisa Strannegard, Goran Wennergren. Inflammatory markers in childhood asthma//Ann. Med . -1996.- Vol .28.-P.395-399.

159. Simon R. H. Scoggin С. H., Patterson D. Hydrogen peroxide causes the fatal injury to human fibroblasts exposed to oxygen radicals // J. Biol. Chem. -1981. -Vol. 256. -P. 7181—7186.

160. Smith L.Y. The role of platelet-activating factor in asthma// Am.Rev.Respir.Dis. -1991.- Vol .143.-P. 100-102.

161. Sidney P. Colowick., Nathan O. Kaplan. Methods in enzymology.-Academic press, New York and London. -1967, suppl.10. -P.574-580.

162. Soloperto M., Mattosa V.L., Fosoli A. et al. Bronchial epithelial cell-derived factor in asthma that promotes eosinophil activation and survival ASGM-CSF// Am.J.Physiol. -1991.- Vol. 260.-P.530-538.

163. Sont J.K. Airway inflammation in asthma: repeatability and therapeutic implications// Eur. Respir. Rev. 1998.-Vol.8.-P.1089-1094

164. Spector S.L. Leukotriene inhibitors and antagonist in asthma//Ann.Allergy Asthma and Immunol.-1995.-Vol .75.-P.463-474.

165. Spragg R. J., Gm-inshaw D. В. Hyslop P.A. et al. Alteration in ATP and energy degree in cultured endothelial and P388Di cells following oxidant injury // J. Clin. Invest. -1985. -Vol. 76. -P. 1471- 1476.

166. Stadman E.R. Metal ion-catalyzed oxidation of proteins: biochemical mechanism and biological consequences // Free Radic.Biol.Med. -1990. Vol .9.-P.315-325.

167. Sterk P. Effects of therapy on bronchial hyperresponsiveness. Asthma Management. Topics for the 90s. A Symposium Report// Clinical Vision Ltd. Second edition. -1994.-P.13-14.

168. Stenton S.C., Court E.N., Kingston W.R. et al. Platelet-activating factor in bronchoalveolar lavage fluid from asthmatic subjects// Eur.Respir.J. -1990.- Vol. 3,suppl.4.-P.408-413.

169. Stocks J., Dormandy T.L. The autoxidation of human red cell lipids induced by hydrogen peroxide// British.J.Haemat. -1971, -Vol.20. -P.95-111.

170. Suzuki M., Asako H., Kubes P. et al. Neutrophil-derived oxidants promote leukocyte adherence in postcapillary venules // Microvasc. Res. -1991. -Vol. 42. -P. 125—138.

171. Sundaresan M., Yu Z.-X., Ferrans V. J.et al. Requirement of generation of H202 for platelet-derived growth factor signal iransduction // Science. -1995. -Vol. 270. -P. 296—299.

172. Sundqvist Т., Liu S. M. Hydrogen peroxide stimulates endocytosis in cultured bovine aortic endothelial cells//Acta Physiol. Scand. -1993. -Vol. 149. -P. 127—131.

173. Sznajder J.I., Fraiman A.,Hall J.B. et al. Increased hydrogen perxide in the expired breath of patients with acute hypoxaemic respiratory failure// Chest. -1989.-Vol. 96.-P.606-612.

174. Thien F.C, Watters E.H. Eicosanoids and asthma: an Update/ZProstaglandins Leukotrienes and Essential Fatty Acids.-1995.-Vol.52.-P.271-278.

175. Tonnel A.B., Wallaert B. Oxidants and bronchial inflammation process// Eur. Respir. J.-1990.-Vol 3.-P.987-988.

176. Toogood J.H., Lefcoe N.M., Haines D.S.M. et al. A graded dose assessment of the efficacy of beclomethasone dipropionate aerosol for severe chronic asthma. //J.Allergy Clin.Immunol.-1977.- Vol .59.-P.298-308.

177. Toogood J.H. Concentrated aerosol formulation in asthma// Lancet.-1983.-Vol. 2.-P.790.

178. Toogood J.H., Baskerville J.,Johansson S.A. Factors acounting for steroid resistance in chronic asthma // Chest.-1985.- Vol .88, suppl.l.-P.529.

179. Torrielli M.V., Dianzani M.U. Free Radicals in Molecular Biology, Aging, and Disease N.Y.: Raven Press. -1984. -P. 355.

180. Venge P., Dahl R., Karlstroom R. et al. Eosinophil and neutrophil activity in asthma in a one-year double blind trial with theophylline and two doses of inhaled budesonide (Abctract)// J. Allergy Clin.Immunol. -1992.- Vol.89.-P.190.

181. Venge P. Serum measurement of eosinophil cationic protein (ECP) in bronchial asthma// Clin. Exp. Allergy. -1993.- Vol .23 .-P. 3-7.

182. Verma A., Hirsch D.J., Glatt E., et al. Carbon monoxide: a putative neural messenger// Science . -1993.- Vol .259.-P.381-384.

183. Ward J.K., Beivisi M.C., Springall D.R. et al. Human INANC bronchodilatation and nitric oxide-immunoreactive nerves are reduced in distal airways // Am. J. Res-pir. Cell. Mol. Biol. -1995. —Vol.13.—P. 175—184.

184. Wei X., Chaides I.G., Smith A. et al. Altered immune response in mice lacking inducible nitric oxide, synthiase // Nature .-1995.— Vol.375.— P.408 -411.

185. Wenzel S.E. Arachidonic acid metabolites-mediators of inflammation in asthma/ZPharmacotherapy.-1997.-Vol. 17.-P.3 S.-12S

186. Wever A.M.J., Wever-Hess J., Hensgens H.E.S.J.et al. Serum eosinophil cationic protein in chronic asthma: Relationship to spirometry, flow-volum curves, PC2o, and exacerbations// Respir. Med.-1994.- Vol. 88.- P.613-621.

187. Winn J. S., Guille J., Gebicki J. M. et al. Hydrogen peroxide modulation of the respiratory burst of human neutrophils // Biochem. Pharmacol. -1991. -Vol. 41.- P. 31—36.

188. Yao S.K., Ober J.C., Gonenne A. et al. Active oxygen species play a role in mediating platelet aggregation and cyclic flow variations in severely stenosed and endothelium-injured coronary arteries // Circ. Res. -1993. -Vol. 73. -P. 952—967.