Клинико-диагностическое значение генетических аномалий при программном лечении острого миелобластного лейкоза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, кандидат медицинских наук Виноградов, Александр Владимирович

• Виноградов, Александр Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Виноградов, Александр Владимирович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.л.

ГЛАВА 1. ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ

ЗНАЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ АНОМАЛИЙ ПРИ ОСТРОМ

МИЕЛОБЛАСТНОМ ЛЕЙКОЗЕ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. роль ге1штических перестроек в онкогенезе острого миелобластного лейкоза.

1.2. Частота, молекулярная структура и прогностическое значение хромосомных аномалий при остром милобластном лейкозе.

1.2.1. Специфические генетические аномалии.

1.2.2. Неслучайные генетические аномалии.

1.2.3. Случайные генетические аномалии.

1.3. Алгоритмизация генодиагностики острого миелобластного лейкоза на основе цитоге11етического анализа и полимер аз ной цепной реакции.!.*.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-диагностическое значение генетических аномалий при программном лечении острого миелобластного лейкоза»

Актуальность проблемы

Основные принципы лечения острого миелобластного лейкоза (OMJI) разработаны в 1970-х годах и использовались в большинстве программ химиотерапии. Однако в 1980-1990-х гг. стало очевидно, что дальнейший прогресс в лечении сопряжен с определением биологической гетерогенности ОМЛ и, в частности, введением международной системы цитологической классификации (FAB) и иных прогностических факторов, разработкой дифференцированных программ лечения больных в зависимости от группы риска, организацией многоцентровых исследований, развитием исследований в области фармакокинетики цитостатических препаратов, повышением эффективности сопроводительной терапии [18, 20, 29]. Все это привело к созданию следующего поколения программ, включающих интенсивную индукцию-консолидацию ремиссии, направленную на максимальное разрушение пула опухолевых клеток, применение высокодозной полихимиотерапии и трансплантации костного мозга, а также профилактику нейролейкемии для пациентов из групп риска [28].

Одним из современных направлений развития опкогематологии является цитогенетическое и молекулярно-генетическое типирование гемобласто-зов [32, 103]. Известно, что в основе развития острых лейкозов (OJI) лежат мутации генетического материала ядра кроветворной клетки. Генетические и эпигенетические аномалии обусловливают нарушение процессов внутриклеточной сигнализации, регуляции клеточного цикла, спонтанной и индуцированной программированной клеточной гибели, что ведёт к нарушению процессов пролиферации, дифференцировки и экспансии опухолевого клона [6, 12, 35]. Следовательно, генодиагностика ОМЛ и разработка на её основе высокоэффективных методов патогенетической терапии, включая трансплантацию стволовых кроветворных клеток, являются на сегодняшний день приоритетными задачами онкогематологии [115].

Традиционным методом обнаружения хромосомных аберраций при OJI является цитогенетический метод дифференциальной G-окраски хромосом в метафазных пластинках [24]. Данный метод стал широко применяться в мировой практике с 1970-х годов и в настоящее время продолжает играть ведущую роль в генетическом анализе опухолевых клеток. Однако эффективность цитогенетического метода ограничена возможностями светового микроскопа, а в некоторых случаях по ряду причин не удается получить качественных препаратов метафазных пластинок [31, 33]. Поэтому изобретение К.

Мюллисом в 1986 году метода полимеразной цепной реакции (ПТTP) открыло перспективу широкого внедрения методов молекулярной генодиагностики в онкогематологии [96]. В последнее время, в связи с расшифровкой молекулярных механизмов целого ряда генетических аномалий, диагностический потенциал молекулярно-генетических методов существенно возрос [32, 44, 47, 49, 61, 106], а область их применения расширилась от единичных исследовательских работ до образования отдельного научного направления и признания необходимости скорейшего их внедрения в практику [17, 111, 115, 124, 125].

В настоящее время при OMJI описаны хромосомные аберрации, в которые вовлекаются практически все хромосомы. Прогностическое значение некоторых из них - таких, как t(8;21)(q22;q22), t(15;17)(q22;ql 1), inv(16)(pl3;q22), аномалии сегмента llq23 известно с середины 90-х годов XX века [61, 71]. Более того, с внедрением в клиническую медицину новых методов молекулярно-генетического анализа, основанных на полимеразной цепной реакции (ПЦР), появилась возможность выявлять в лейкозных клетках транскрипты матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) мучантных гибридных генов {AMLl-ETO, PML-RARA, CBFB-MYH1Г) [32, 111]. При наличии в лаборатории полного набора праймеров, с помощью ПЦР в настоящее время можно обнаруживать хромосомные аберрации более чем у 30% больных ОМЛ [32].

При этом, однако, неизбежно возникает вопрос об экономической целесообразности и практической значимости внедрения методов молекулярной диагностики хромосомных аберраций в клиническую онкогематологию. Следует учитывать, что доля большинства из известных в настоящее время аберраций в общей структуре хромосомной патологии при лейкозах составляет 1-2%, и их изучение остается предметом академической науки. В то же время, круг аберраций, актуальных для решения практических задач, связанных с диагностикой, лечением и прогнозом течения лейкоза, должен быть ограничен [31, 111, 115].

Таким образом, диагностические и лечебные алгоритмы, в которых бы учитывался весь спектр выявленных при остром миелобластном лейкозе мутаций до сих пор не разработаны, а результаты противоопухолевой химиотерапии и других методов лечения по-прежнему далеки от желаемых [14, 26, 30]. В связи с этим, проведение дополнительных клинико-генетических исследований при ОМЛ является актуальной проблемой, которую необходимо разрабатывать [31, 115]. Более того, несмотря на большое количество работ, посвященных использованию методов молекулярной диагностики хромосомных аберраций у больных острым миелобластным лейкозом, прикладные аспекты их использования для комплексной диагностики актуальных хромосомных аберраций в клинической практике до настоящего времени не получили должного освещения.

Цель работы

Оптимизация генодиагностики и прогностической стратификации острого миелобластного лейкоза на основе цитогенетического и молекулярно-генетического анализа опухолевых клеток.

Основные задачи исследования

1. Проанализировать частоту встречаемости и особенности хромосомных аберраций при остром миелобластном лейкозе.

2. Оценить диагностическое и прогностическое значение генетических аномалий при программном лечении острого миелобластпого лейкоза.

3. Оптимизировать протоколы генодиагностики острого миелобластного лейкоза на основе модели минимизации материальных затрат.

Научная новизна

Впервые определена частота специфических, неслучайных и случайных генетических аномалий при различных морфологических вариантах острого миелобластного лейкоза в Уральском регионе.

Установлено прогностическое значение различных вариантов изменений кариотипа при лечении пациентов по отечественным протоколам полихимиотерапии.

Определены оптимальные стратегии генодиагностики острого миелобластного лейкоза при сочетанном применении цитогенетического и ПЦР-методов на основе математической модели минимизации материальных затрат.

Установлена структура и прогностическое значение цитогенетической дивергенции лейкозных субклонов при остром миелобластном лейкозе.

Основные положения, выносимые на защиту

1) Генетические аномалии, выявляющиеся при остром миелобластном лейкозе с установленной частотой, являются важным диагностическим и прогностическим критерием, определяющим вероятность достижения первой ремиссии, развития первичной резистентности, рецидивов, вероятностную общую и безрецидивную выживаемость пациентов, получающих программную полихимиотерапию.

2) Детекция генетических аномалий у больных острым миелобластным лейкозом позволяет стратифицировать их, в зависимости от показателей первой ремиссии, рецидивов и вероятностной общей выживаемости, на группы благоприятного, промежуточного и неблагоприятного прогноза.

3) Безрецидивная вероятностная выживаемость больных острым миелобластным лейкозом с цитогенетической дивергенцией субклонов, содержащих прогностически неблагоприятные аберрации, достоверно выше, чем при моноклоновом лейкозе.

4) Алгоритм генодиагностики острого миелобластного лейкоза, разработанный на основе модели минимизации материальных затрат, позволяет определять рациональные стратегии детекции клинически значимых хромосомных аберраций при сочетанном использовании цитогенетического и мо-лекулярно-генетического методов.

Теоретическая и практическая значимость работы

Установлено распределение генетических аномалий при различных морфологических вариантах острого миелобластного лейкоза.

Определены структурные особенности острого миелобластного лейкоза при цитогенетической дивергенции лейкозных субклонов.

Разработан алгоритм оптимизации этапа генодиагностики острого миелобластного лейкоза на основе математической модели минимизации материальных затрат.

Проведена государственная регистрация программы для ЭВМ «Алгоритм генодиагностики гемобластозов на основе математической модели минимизации материальных затрат», адаптированной для практического применения (свидетельство о государственной регистрации № 2009612020 от 21 апреля 2009 г.) и

Практическое внедрение результатов исследования

Результаты исследований внедрены в практическую деятельность Лаборатории молекулярной диагностики ГОУ ВПО «Уральская государственная медицинская академия», гематологического отделения ГУЗ «Свердловская областная клиническая больница №1», МУ «Клинико-диагностический центр», ООО «Инновационный центр Рубикон».

Апробация работы

Основные результаты работы представлены и обсуждены на Всероссийской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной и клинической медицины» (г. Тюмень, 2003 г.), Всероссийском съезде гематологов и трансфузиологов «Совершенствование гематологии и трансфузиологии в современных условиях» (г. Москва, 2005 г.), конференции УрО РАН «Демидовские чтения на Урале» (г. Екатеринбург, 2006 г.), I международной научно-практической конференции «Наука и технологии: шаг в будущее» (г. Белгород, 2006 г.), Британско-российском совещании с участием Европейской комиссии «Стволовые клетки: политика, исследования и инновации. Перспективы сотрудничества Европейского Союза и Российской Федерации» (г. Москва, 2007 г.), 8-м Международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке» (г. Москва, 2008 г.), XXXIV Международной гематологической школе «Лейкозы: терапия и фундаментальные исследования» (г. Москва, 2008 г.), Объединенном иммунологическом форуме (г. Санкт-Петербург, 2008 г.), Международной конференции памяти P.M. Горбачевой «Трансплантация стволовых кроветворных клеток» (г. Санкт-Петербург, 2007, 2009 г.), IV съезде физиологов Урала (Екатеринбург, 2009 г.).

Публикации

Основное содержание работы отражено в 18 научных статьях, из них 4 в журналах, рекомендованных ВАК РФ для публикации научных результатов диссертаций на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, главы литературного обзора, четырех глав собственных исследований, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 40 отечественных и 91 зарубежный источник. Диссертация имеет объем 114 страниц, иллюстрирована 18 таблицами и 14 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Виноградов, Александр Владимирович

ВЫВОДЫ

1) Частота детекции генетических аномалий при остром миелобласт-ном лейкозе составляет 71,4%, из них в 39,9% наблюдений определяются аберрации, ассоциированные с благоприятным прогнозом, в 31,5% - с неблагоприятным.

2) Благоприятный прогноз установлен при программном лечении больных острыми миелоидными лейкозами с транслокациями 1:(8;21), 1(15; 17), инверсией шу(16). Частота достижения первой ремиссии у таких пациентов составила 91,0%), общая 5-летняя выживаемость - 66,7±5,7%.

3) Неблагоприятный прогноз установлен при программном лечении больных острыми миелоидными лейкозами с аномалиями аЬп(11)^23), ае1(7я)/-7, +8, ёе1(5я)/-5, 1(9;22)(я34;я11), аЬп(Зя), аЬп(12р), прочими структурными и/или количественными аберрациями. Частота первой ремиссии у таких больных равнялась 46,0%, общая 5-летняя выживаемость -11,0±3,8%.

4) Цитогенетическая клональная дивергенция не оказывает самостоятельного влияния на прогноз при программном лечении острого миелобласт-ного лейкоза. Эффективность лечения таких больных определяется наличием прогностически значимых генетических аномалий в каждом из лейкозных субклонов.

5) Применение алгоритма генодиагностики острого миелобластного лейкоза, основанного на модели минимизации материальных затрат, позволяет повысить экономическую эффективность этого этапа на 26,7%.

6) Высокая частота «скрытых» (криптических) специфических аномалий, выявляемых только методом полимеразной цепной реакции, определяет клиническую и экономическую целесообразность его использования на первом этапе генодиагностики острого миелобластного лейкоза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1) Для оптимизации генодиагностики острых миелоидных лейкозов МО, М2 и М4 по FAB рекомендуется использование программы для ЭВМ «Алгоритм генодиагностики гемобластозов на основе математической модели минимизации материальных затрат».

2) При морфологических вариантах МЗ и М4эо по FAB на первом этапе генодиагностики рекомендуется проводить только ПЦР для определения специфических аномалий. Цитогенетическое исследование показано при отрицательном результате ПЦР.

3) При использовании программной полихимиотерапии острого мие-лобластного лейкоза целесообразно распределение пациентов на группы благоприятного (при выявлении транслокаций t(8;21), t(15;l7), инверсии inv(16)), промежуточного (диплоидия), и неблагоприятного (прочие аномалии) прогноза с дифференцированным подходом к лечению пациентов из разных прогностических групп.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Виноградов, Александр Владимирович, 2009 год

1. Азовская Т.Ю. Клинико-иммунологическая характеристика острых лейкозов у детей Уральского региона : автореф. дис. . канд. мед. наук : 14.00.36 / Т.Ю. Азовская .- М., 1998 30 с.

2. Альсведе Р. Задачи поиска / Р. Альсведе, И. Вегенер .- М.: Мир, 1982 .368 с.

3. Афифи А. Статистический анализ: Подход с использованием ЭВМ / А. Афифи, С. Эйзен .-М.: Мир, 1982 .-488 с.

4. Возрастные особенности цитогенетических изменений при острых миелоидных лейкозах / Е.В. Флейшман, О.И. Сокова, A.B. Попа // Он-когематология .- 2007 .- №4 .- С. 12-16.

5. Гейл Д. Теория линейных экономических моделей / Д. Гейл .- М.: Иностр. лит., 1963 .- 480 с.

6. Гейл Р.П. Стволовые клетки, клональность и лейкоз / Р.П. Гейл, А. Буттурини // Гематол. и трансфузиол .- 1994 .- Т. 39 .- № 6 .- С. 3 6.

7. Гилл Ф. Практическая оптимизация / Ф. Гилл, У. Мюррей, М. Райт .М.: Мир, 1985 .-509 с.

8. Гланц С.А. Медико-биологическая статистика / С.А. Гланц .- М.: Практика, 1999 .- 459 с.

9. Даффин Р. Геометрическое программирование / Р. Даффин, Э. Питер-сон, К. Зенер .- М.: Мир, 1972 .- 312 с.

10. Демидова И.А. Использование молекулярно-биологических методов для определения генетических нарушений при миелоидных лейкозах и мониторирования минимальной остаточной болезни / И.А. Демидова // Опкогематология 2007 №4 .- С. 17 25.

11. Дополнительные аномалии кариотипа при остром миелобластном лейкозе с транслокацией t(8;21) / E.B. Флейшман, О.И. Сокова, A.B. Попа и др. // Гематол. и трансфузиол .- 2003 Т. 48 №2 .-С. 10 13.

12. Зборовская И.Б. Супрессоры опухолевого роста (антионкогены): механизмы действия, участие в развитии гемобластозов / И.Б. Зборовская, В.В. Земляков // Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой М.: Медицина, 2008 С. 117 125.

13. Итоги многоцентрового рандомизированного исследования по лечению острых миелоидных лейкозов взрослых / E.H. Паровичникова, В.Г. Савченко, В.Г. Исаев и др. // Тер. архив .- 2007 .- №7 .- С. 14-19.

14. Карманов В.Г. Математическое программирование / В.Г. Карманов .М.: Наука, 1986 .- 288 с.

15. Классификация ВОЗ опухолей гемопоэтической и лимфоидной тканей // Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой .- М.: Медицина, 2008 С. 299 305.

16. Клинические экспериментальные исследования в гематологии: планирование, управление данными, представление результатов / С.М. Куликов, В.Г. Савченко, Е.Р. Маслова и др. // Гематол. и трансфузиол .1996 .-№7 .- С. 65-73.

17. Ковалев М.М. Дискретная оптимизация, (целочисленное программирование) / М.М. Ковалев .- Минск.: Изд. БГУ, 1977 .- 192 с.

18. Многоцентровая кооперация основа прогресса в лечении лейкозов / В.Г. Савченко, E.H. Паровичникова, Л.П. Менделеева и др. // Тер. архив 2005 .-№7 .-С. 5-11.

19. Мониторинг минимальной резидуальной болезни при остром промие-лоцитарном лейкозе / Е.В. Флейшман, И.С. Косорукова, Ю.А. Батурина и др. // Гематол. и трансфузиол .- 2004 .- Т. 49 №5 .- С. 3 8.

20. Мониторинг минимальной резидуальной болезни у больных острым промиелоцитарным лейкозом / E.H. Шуравина, E.H. Паровичникова, И.А. Демидова и др. // Тер. архив .- 2006 №7 .- С. 25 31.

21. Огородникова Ю.С. Клиническая и прогностическая характеристика цитогенетических изменений при острых лейкозах у детей : автореф. дис. . канд. мед. наук : 14.00.29 / Ю.С. Огородникова .- СПб., 1999 .22 с.

22. Ольшанская Ю.В. Хромосомные перестройки при острых лейкозах / Ю.В. Ольшанская, Е.В. Домрачева .- М.: МЕДпресс-информ, 2006 .112 с.

23. Первичные острые миелоидные лейкозы с миелодисплазией: клинико-лабораторные особенности и прогноз / О.Ю. Баранова, М.А. Волкова, М.А. Френкель и др. // Гематол. и трансфузиол .- 2005 .- Т. 50 .- №4 .С. 10-20.

24. Программное лечение лейкозов: Сборник протоколов и алгоритмов химиотерапии и сопроводительного лечения лейкозов, миелодисплазий и аплазий кроветворения / Под ред. В.Г. Савченко .- М.: ГНЦ РАМН, 2008 .- 487 с.

25. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва М.: МедиаСфера, 2003 .-312 с.

26. Савченко В.Г. Лечение острых лейкозов (Клинические исследования) / В.Г. Савченко, E.H. Паровичникова .- М.: МЕДпресс-информ, 2004 .224 с.

27. Савченко В.Г. Острые лейкозы / В.Г. Савченко, E.H. Паровичникова / / Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой М.: Медицина, 2008 .-С. 409- 501 .

28. Савченко В.Г. Программное лечение лейкозов / В.Г. Савченко, E.H. Паровичникова, В.Г. Исаев .- М.: Изд-во ГНЦ РАМН, 2002 238 с.

29. Сергеев А.Г. Молекулярно-генетическая диагностика и прогноз лейкозов у детей : автореф. дис. . д-ра мед. наук : 14.00.29 / А.Г. Сергеев .М., 1998 .-41 с.

30. Сергеев А.Г. Генодиагностика лейкозов / А.Г. Сергеев, P.A. Иванов .Екатеринбург: УГМА, 1998 .- 39 с.

31. Сергеев А.Г. Опыт использования полимеразной цепной реакции для выявления хромосомных аберраций в детской онкогематологии / А.Г. Сергеев, P.A. Иванов, Л.Г. Фечина // Гематол.и трансфузиол 1999 .Т. 44 .- №2 .- С. 3 7.

32. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека / A.A. Тотолян, И.А. Балдуева, Л.Н. Бубнова Л.Н. и др. // Клин. лаб. диагн 2001 .- №8 .- С. 38 45.

33. Татосян А.Г. Онкогены: роль в системе передачи сигналов в клетках и механизмы активации / А.Г. Татосян / / Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой -М.: Медицина, 2008 .- С. 108 -116.

34. Флейшман Е.В. Клиническое значение хромосомного анализа в онкогематологии / Е.В. Флейшман / / Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой .- М.: Медицина, 2008 .- С. 370 408 .

35. Флетчер Р. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины / Р. Флетчер, С. Флетчер, Э. Вагнер .- М.: МедиаСфера, 2003 .352 с.

36. Френкель М.А. Лабораторная диагностика острых лейкозов / М.А. Френкель / / Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой М.: Медицина, 2008 .- С. 306 318 .

37. Химмельблау Д. Прикладное нелинейное программирование. / Д. Химмельблау .- М.: Мир, 1975 .- 536 с.

38. Частота встречаемости и прогностическое значение дополнительных хромосомных перестроек при остром промиелобластном лейкозе / Ю.В. Ольшанская, Д.С. Гуторова, Е.Н. Шуравина и др. // Гематол. и трансфузиол .- 2007 .- Т. 52 .- №3 .- С. 27 31.

39. A new prognostic score for patients wiyh acute myeloid leukemia based on cytogenetics and early blast clearance in trials of the German AML Cooperative Group/ T. Haferlach, W. Kern, C. Schoch et al. // Hematologica .2004 .- V.89 .- N.4 .- P. 408 418.

40. A PML/retinoic acid receptor alpha fusion transcript is constantly detected hy RNA-based polymerase chain reaction in acute promyelocytic leukemia / S. Castaigne, N. Balitrand, H. de The et al. // Blood .- 1992 .- V.79 .- P. 3110-3115.

41. Acute myeloid leukemia / F.R. Appelbaum, J.M. Rowe, J. Radich et al. // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2001. P. 62 - 86.

42. Acute myeloid leukemia carrying cytoplasmic/mutated nucleophosmin (NPMc+ AML): biologic and clinical features / B. Falini, I. Nicoletti, M.F. Martelli et al. //Blood .- 2007 .- V.109. -N.3. -P.875 885.

43. BCR-ABL rearrangement in a child with acute myelogeneous leukaemia without a Philadelphia chromosome / A. Borkhardt, R. Repp, J. Harbott et al. // Br. J. Haematol .- 1993 .- V.84 .- P. 341 342.

44. Berger R. Philadelphia-positive acute leukemia. Cytogenetic and molecular aspects / R. Berger, S.J. Chen, Z. Chen // Cancer Genet. Cytogenet.- 1990 .-V.44 .p. 143 152.

45. Burnett A.K. Targeting treatment in AML / A.K. Burnett, S. Knapper // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2007 .- P. 429 434.

46. Cancer Therapy Evaluation Program, Common Terminology Criteria for Adverse Events, Version 3.0, DCTD, NCI, NIH, DHHS, March 31, 2003 Electronic sourse. .- Publish Date: August 9, 2006 .- URL: http://ctep.cancer.gov.

47. CBFA2, the target of multiple chromosomal translocations in human leukemia, is essential for normal liver hematopoiesis / T. Okuda, J. van Deursen, S.W. Hiebert et al. // Cell1996 .- V .84 .- P. 321 330.

48. Childhood and adolescent lymphoid and myeloid leukemia / J.-H. Pui, M. Schrappe, R.C. Ribeiro, C.M. Niemeyer // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2004 P. 118 144.

49. Chromosomal translocation t(15;17) in human acute promyelocytic leukemia fuses RAR alpha with a novel putative transcription factor, PML / A. ICakizuka, W.H. Miller, K. Umesono et al. // Cell .-1991 .- V.66 .- P. 663 -674.

50. Cloning and characterization of AFX, the gene that fuses to MLL in acute leukemias with a t(X;ll)(ql3;q23) / A. Borkhardt, R. Repp, O.A. Haas et al. // Oncogene .- 1997 .- V.14 .- P. 195 202.

51. Cloning and characterization of the t(15;17) translocation breakpoint region in acute promyelocytic leukemia / R.S. Lemons, D. Eilender, R.A. Waldmann et al. // Genes Chromosom. Cancer .- 1990 V.2 .- P. 79 87.

52. Cloning of ALL-1, the locus involved in leukemias with the t(4;lI)(q21;q23), t(9;ll)(p22;q23), and t(l I;19)(q23;pl3) chromosome translocations / G. Cimino, D.T. Moir, O. Canaani et al. // Cancer Res .1991 .-V.51 .-P. 6712-6714.

53. Complete exon structure of the ALL1 gene / D. Rasio, S.A. Schichman, M. Negrini et al. // Cancer Res .- 1996 .- V.56 .- P. 1766 1769.

54. Comelissen J.J. Role of allogenic stem cell transplantation in current treatment of acute myeloid leukemia / J.J. Comelissen, B. Lowenberg // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2005 P. 151 - 155.

55. Daga A. Leukaemia / Drosophila homology / A. Daga, J.K. Tighe, F. Calabi //Nature .- 1992 .- V.356 .- P. 484.

56. Definition of acute biphenotypic leukemia / E. Matutes, R. Morilla, N. Fara-hat et al. //Haematologica .- 1997 .- V.82 .- P. 64-66.

57. Detection of AML/ETO fusion transcript as a tool for diagnosing t(8;21) positive acute myelogenous leukemia / F. Maruyama, S.A. Stass, E.FI. Estey et al. // Leukemia .- 1994 .- V.8 .- N.l. P. 40 - 45.

58. Detection of fusion transcripts generated by the inversion 16 chromosome in acute myelogenous leukemia / D.F. Claxton, P. Liu, H.B. Hsu et al. // Blood .- 1994 .- V.83.- N.7 .- P. 1750 1756.

59. Detection of major and minor bcr/abl fusion gene transcripts in a patient with acute undifferentiated leukemia secondary to treatment with an alkylating agent / M. Hattori, M. Tanalca, Y. Yamazaki et al. // Leulc. Res .- 19951. Y.19 .-N.6 .-P. 389-396.

60. Dohner H. Implication of the molecular characterization of acute myeloid leukemia / H. Dohner // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .2007 P. 412-419.

61. Early detection of minimal residual disease by reverse transcriptase polymerase chain reaction predicts relapse in acute promyelocytic leukemia / E.

62. Roller, H. Karlic, O. Krieger et al. // Ann. Hematol .- 1995 V.70 P. 75 78.

63. Erba H.P. Prognostic factors in eldery patients with AML and the implications for treatment / H.P. Erba // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2007 .- P. 420 428.

64. Franz W.M. Deletion of an N-tenninal regulatory domain of the c-abl tyrosine kinase activates its oncogenic potential / W.M. Franz, P. Berger, J.Y.J. Wang // EMBO J .- 1989 .- V.8 P. 137.

65. Frequency of CBF beta/MYHl 1 fusion transcripts in patients entered into the U.K. MRC AML trials. The MRC Adult Leukaemia Working Party / S.E. Langabeer, H. Walker, R.E. Gale et al. // Br. J. Haematol .- 1997 .-V.96 .- P. 736 739.

66. Fusion between trancription factor CBFB/PEBP2B and a myosin heavy chain in acute myeloid leukemia / P. Liu, S.A. Tarle, A. Hajra et al. // Science .- 1993 V.261 .- P. 1041 1044.

67. Gene rearrangement and truncated mRNA in cell lines with 1 lq23 translocation / IC. Yamamoto, M. Seto, Y. Akao et al. // Oncogene .- 1993 .- V.8 .P. 479 485.

68. Human Cytogenetics: A Practical Approach / Eds. D.E. Roony, B.H. Czepulkowski.- Washington D.C.: IPL Press Oxford, 1986 .- P. 242.

69. Identification of a gene, MLL, that spans the breakpoint in 1 lq23 translocations associated with human leukemias / S. Ziemin-van der Poel, N.R. McCabe, H.J. Gill et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA .-1991 .- V.88 .- P. 10735 10739.

70. Identification of breakpoints in t(8;21) acute myelogenous leukemia and isolation of a fusion transcript, AML1/ETO, with similarity to Drosophila segmentation gene, runt / P. Ericlcson, J. Gao, S. Chang et al. // Blood .- 1992 V.80 .-P. 1825 1831.

71. Identification of MLL and chimeric MLL gene products involved in llq23 translocation and possible mechanisms of leukemogenesis by MLL truncation / T. Joh, Y. Kagami, K. Yamamoto et al. // Oncogene .- 1996 .- V.13 .P. 1945 1953.

72. ISCN: An International System for Human Cytogenetic Nomenclature // Birth Defects: Original Article Series / Eds. D.G. Harden, H.P. Klinger .1985 .- V.21 .- N 1 .-P. 12.

73. Isolation of a yeast artificial chromosome spanning the 8:21 translocation breakpoint t(8;21)(q22;q22.3) in acute myelogenous leukemia / J. Gao, P. Erickson, K. Gardiner et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA .-1991 .- V.88 .P. 4882 -4886.

74. Jackson P. N-terminal mutations activate the leukemogenic potential of the myristoylated form of c-abl / P. Jackson, D. Baltimore // EMBO J .- 1989 .-V.8 .- P. 449.

75. Kaplan E. Nonparametric estimation from incomplete observations / E. Kaplan, P. Meier//J. Am. Stat.- 1958 .- V.53 .-P. 457 -481.

76. Konopka J.B. An alteration of the human c-abl protein in K-562 leukemia cells unmasks associated tyrosine kinase activity / J.B. Konopka, S.M. Wa-tanabe, O.N. Witte // Cell.- 1984 .- V.37 P. 1035 1042.

77. Kurzrock R. The molecular genetics of Philadelphia chromosome-positive leukemias / R. Kurzrock, J.U. Gutterman, M. Talpaz // N. Engl. J. Med .1988 .-V.319 .-P. 990.

78. Licht J.D. The molecular pathology of acute myeloid leukemia / J.D. Licht, D.W. Sternberg // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program 2005. -P. 137- 142.

79. Localization of the chromosome 15 breakpoints and expression of multiple PML/RARa transcripts in acute promyelocytic leukemia: a study of 28 Chinese patients / J.-P. Geng, J.-H. Tong, S. Dong et al. // Leukemia .- 1993 .V .7 .-P. 20- 26.

80. Lowenberg B. Acute myeloid leukemia and acute promyelocytic leukemia / B. Lowenberg, J.D. Griffin, M.S. Tallman // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2003. P. 82 - 101.

81. Maru Y. The BCR gene encodes a novel serine/threonine kinase activity within a single exon / Y. Maru, O.N. Witte // Cell .-1991 .- V.67 .- P. 459.

82. Molecular analysis of acute promyelocytic leukemia breakpoint cluster region on chromosome 17/1. Borrow, A.D. Goddard, D. Sheer, E. Solomon // Science 1990 .- V.249 .- P. 1577 1580.

83. Molecular analysis of the PML/RARa chimeric gene in pediatric acute promyelocytic leukemia / J.R. Kane, D.R. Head, L. Balazs et al. // Leukemia .- 1996 .- V.10.-P. 1296- 1302.

84. Molecular characterization of 16p deletions associated with inversion 16 defines the critical fusion for leulcemogenesis / P. Marlton, D.F. Claxton, P. Liu et al. // Blood .- 1995 V.85 N.3 .- P. 772 779.

85. Molecular monitoring of the myl/retinoic acid receptor-alpha fusion gene in acute promyelocytic leukemia by polymerase chain reaction / A. Biondi, A. Rambaldi, P.P. Pandolfi et al. // Blood 1992 .- V.80 .- P. 492 497.

86. Molecular stratification model for prognosis in cytogenetically normal acute myeloid leukemia / C.M. Santamaria, M.C. Chillon, R. Garcia-Sanz et al. //Blood .-2009 .—V.114 .—N. 1 .-P. 148- 152.

87. Mrozelc K. Chromosome aberrations, gene mutations and expression changes, and prognosis in adult acute myeloid leukemia / K. Mrozek, C.D. Bloomfield // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2006 .- P. 169-177.

88. Mullis K.B. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase-catalyzed chain reaction / K.B. Mullis, F.A. Faloona // Methods in Enzymology .- San Diego: Academic Press, 1987 .- V.155 P. 335 350.

89. Nucifora G. AML1 and the 3;21 and 8;21 translocations in acute and chronic myeloid leukemia / G. Nucifora, J.D. Rowley // Blood .- 1995 .- V.86 .- P. 1 14.

90. Occurrence of distinct PML-RAR-alpha fusion gene isoforms in patients with acute promyelocytic leukemia detected by reverse transcriptase/polymerase chain reaction / S.-J. Chen, Z. Chen, A. Chen et al. // Oncogene .- 1992 .- V.7 .- P. 1223 1232.

91. Philadelphia chromosomal breakpoints are clustered within a limited region, bcr, on chromosome 22 / J. Groffen, J.R. Stephenson, N. Heisterkamp, A. de Klein // Cell.- 1984 .- V.36 .- P. 93 99.

92. Ph-posltive, bcr-negative acute leukemias: Clustering of breakpoints on chromosome 22 in the 3' end of the BCR gene first intron / S.J. Chen, Z. Chen, J. Hillion et al.//Blood .- 1989 .-V.73 .-P. 1312-1315.

93. Pretreatment cytogenetic abnormalities are predictive of induction success, cumulative incidence of relapse, and overall survival in adult patients with de novo acute myeloid leukemia: results from Cancer and Leukemia Group

94. B / J.C. Byrd, K. Mrozelc, R.K. Dodge et al. // Blood .- 2002 .- V.100 .-N.13 .-P. 4325 -4336.

95. Proposed revised criteria for the classification of acute myeloid leukemia / J.M. Bennet, D. Catovsky, M. Daniel et al. // Ann. Intern. Med .- 1985 .-V.103 .-P. 626-629.

96. Prospective Karyotype Analysis in Adult Acute Lymphoblastic Leukemia: The Cancer and Leukemia Group B Experience / M. Wetzler, R.K. Dodge, K. Mrozek et al. //Blood .- 1999 V.93 .-N.1 .-P. 3983 3993.

97. Ramakrishnan L. Abl genes / L. Ramakrishnan, N. Rosenberg // Biochimica et Biophysica Acta .- 1989 .- V. 989 P. 209 224.

98. Rothe G. Consensus protocol for the flow cytometric immunophenotyping of hematopoietic malignancies / G. Rothe, G. Schmitz // Leukemia .- 1996 .-N.10.-P. 877 895.

99. Roley J.D. The role of chromosome translocations in leukemogenesis / J.D. Roley // Sem. Hematol.- 1999 V.36 .- N.4 .- Suppl. 7 .- P. 59 72.

100. Seabright M. A rapid banding technique for human chromosomes / M. Sea-bright // Lancet .-1971 .- V.2 .- P. 971 972.

101. Small D. FLT3 mutations: biology and treatment / D. Small // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2006 .-P. 175 184.

102. Specific enzymatic amplification of DNA in vitro: the polymerase chain reaction / K.B. Mullis, F.A. Faloona, S. Scharf et al. // Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol.- 1986 V.51. P. 263 - 273.

103. Standardized RT-PCR analysis of fusion gene transcripts from chromosome aberrations in acute leukemia for detection of minimal residual disease /

104. J.M. van Dongen, E.A. Macintyre, J.A. Gabert et al. // Leukemia .- 1999 N.13 .-P. 1901 1928.

105. Stock W. Controversies in treatment of AML: case-based discussion / W. Stock // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program 2006 P. 185 — 191.

106. Structural organization of the bcr gene and its role in the Ph' translocation / N. Heisterkamp, K. Stam, J. Groffen et. al. //Nature .- 1985 V.315 .- P. 758 761.

107. Tallman M.S. New strategies for the treatment of acute myeloid leukemia including antibodies and other novel agents /M.S. Tallman // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program .- 2005 .-P. 143 150.

108. The 2008 revision of the World Health Organisation (WHO) classification of myeloid neoplasms and acute leukemia: rationale and important changes / J.V. Vardiman, J. Thiele, D.A. Arber et al. // Blood .- 2009 .- V.l 14 .- N.5 .- P. 937-951.

109. The acute promyelocytic leukemia-specific PML-RAR alpha fusion protein inhibits differentiation and promotes survival of myeloid precursor cells / F. Grignani, P.F. Ferrucci, U. Testa et al. // Cell .- 1993 .- V.74 .- P. 423 -431.

110. The PML-RAR alpha gene product of the t(15;17) translocation inhibits retinoic acid-induced granulocytic differentiation and mediated transactiva-tion in human myeloid cells / P. Rousselot et al. // Oncogene 1994 .- V.9 .- P. 545 551.

111. The PML-RAR alpha fusion mRNA generated by the t(15; 17) translocation in acute promyelocytic leukemia encodes a functionally altered RAR / H. de The, C. Lavau, A. Marchio et al. // Cell. 1991. - Vol. 66. - P. 675-684.

112. The predictive value of hierarchical cytogenetic classification in older adults with acute myeloid leukemia: analisis of 1065 patients entered into the United Kingdom Medical Research Council AML 11 trial / D. Grimwade,

113. H. Walker, G. Harrison et al. // Blood .- 2001 .- V.98 .- N.5 .- P. 1312 -1320.

114. The t(4;ll) chromosome translocation of human acute leukemias fuses the ALL-1 gene, related to Drosophila trithorax, to the AF-4 gene / Y. Gu, T. Nakamura, H. Alder et al. // Cell.- 1994 .- V .71. P. 701 - 708.

115. The t(8;21) translocation in acute myeloid leukemia results in production of an AML1-MTG8 transcript / H. Miyoshi, T. Kozu, K. Shimizu et al. // EMBO J .- 1993 V.12. P. 2715 - 2721.

116. Transgenic expression of PML/RARalpha impairs myelopoiesis / E. Early, M.A. Moore, A. Kakizuka et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA .- 1996 .-V.93 .- P. 7900 7904.

117. Vardiman J.W. The World Health Organization classification of the myeloid neoplasms / J.W. Vardiman, N.L. Harris, R.D. Brunning // Blood .- 2002 .-V.100 .-N.7 .- P.2292 2302.

118. Variable expression of PML-RARa mRNA isoforms in acute promyelocytic leukemia patients / R. Gallagher, S. Rao, P. Etkind et al. // Proc. Annu. Meet. Am. Assoc. Cancer. Res 1993 .- V.34 .- P. 3173a.

119. Walker H. Cytogenetics in acute myeloid leukaemia / H. Walker, F.J. Smith, D.R. Betts // Blood Rev .- 1994 .- V.8 .- P. 30 36.

120. Weinberg R.A. Tumor supressor genes / R.A. Weinberg // Science .- 19911. V.254 .-P. 1138 1146.

121. What is a "step" in a multi-step pathogenesis of leukemia? / G.M. Jankovic, M.D. Colovic, A.D. Bogdanovic et al. // Leuk. Res .- 1996 .- V.20 .- N.6 .P. 531 532.

122. Wickremasinghe R.G. Biochemical and genetic control of apoptosis: relevance to normal hematopoiesis and hematological malignancies / R.G. Wickremasinghe, A.V. Hoffbrand // Blood .- 1999. V.93 N.ll P. 3587 -3597.

123. Williams B.G. Ph+ acute myeloid leukaemia expressing both CML-type and ALL-type BCR/ABL mRNA transcripts / B.G. Williams, J.L. Yin, D.D. Ma //Leuk. Lymphoma .- 1994 .- V.14 .-N.3-4 .-P. 341 346.