Химическое исследование цветков хризантемы корейской (Chrysanthemum x koreanum Makai) с целью получения фармологически активных суммарных фитокомплексов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Кодониди, Максим Иванович

• Кодониди, Максим Иванович
• кандидат фармацевтических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Кодониди, Максим Иванович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ И ПРИМЕНЕНИЕ ХРИЗАНТЕМЫ КОРЕЙСКОЙ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ.

1.1.1. Флавоноиды хризантемы.

1.1.2. Терпеноиды.

1.1.3. Сесквитерпеновые лактоны.

1.2. ПРИМЕНЕНИЕ ХРИЗАНТЕМЫ КОРЕЙСКОЙ В НАРОДНОЙ

МЕДИЦИНЕ.Г.

Выводы по обзору и задачи собственных исследований.

ГЛАВА 2. ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЦВЕТКОВ ХРИЗАНТЕМЫ КОРЕЙСКОЙ (CHRYSANTHEMUM х KOREANUM

MAKAI).

2.1. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

2.1.1 Определение основных групп биологически активных веществ в цветках хризантемы корейской.

2.1.2. Витаминный состав.

2.1.3. Аминокислотный состав.

2.1.4. Элементный состав цветков.

2.1.5. Количественное определение флавоноидов.

2.1.6. Количественное определение каротиноидов.

2.1.7. Количественное определение полисахаридов.

2.1.8. Содержание антиоксидантов в различных извлечениях из цветков хризантемы корейской.

2.1.9. Определение фенольных соединений в сухом экстракте соцветий хризантемы корейской методом ВЭЖХ.

2.1.10. Количественное определение гидроксикоричных кислот и флавоноидов в сухом экстракте.

2.2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.2.1. Хроматографическое исследование флавоноидов.

2.2.2. Определение жирорастворимых витаминов.

2.2.3. Количественное определение аскорбиновой кислоты в сырье.

2.2.4. Определение аминокислот.

2.2.5. Количественное определение флавоноидов в сырье.

2.2.6. Количественное определение каротиноидов в сырье.

2.2.7. Количественное определение полисахаридов в сырье.

2.2.8. Определение суммарного содержания антиоксидантов.

2.2.9. Определение фенольных соединений сухого экстракта методом ВЭЖХ.

2.2.10. Количественное определение гидроксикоричных кислот и флавоноидов в сухом экстракте.

Выводы по главе 2.

ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕНИЕ И ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФРАКЦИЙ ИЗ ЦВЕТКОВ ХРИЗАНТЕМЫ КОРЕЙСКОЙ (CHRYSANTHEMUM х KOREANUM MAKAI).

3.1. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

3.1.1 Спектральные исследования соединений, полученных из разных фракций.

3.1.2 Изучение пектинового комплекса.

3.2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.2.1. Получение сухого экстракта.

3.2.2. Препаративная колоночная хроматография.

3.2.3. ИК-спектроскопия кристаллических веществ, выделенных из различных фракций.

3.2.4. Анализ физико-химических свойств пектиновых веществ.

Выводы к главе 3.

ГЛАВА 4. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛЮТЕОЛИН-7-ГЛЮКОЗИДА И ФРАКЦИЙ, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ ЦВЕТКОВ ХРИЗАНТЕМЫ КОРЕЙСКОЙ (CHRYSANTHEMUM х KOREANUM MAKAL).

4.1. Прогноз фармакологических эффектов лютеолин-7-глюкозида с помощью программы PASS.

4.2. Определение токсичности.

4.3. Скрининг-исследования влияния лютеолин-7-глюкозида и фракций, полученных из хризантемы, на сердечно-сосудистую систему.

4.4. Влияние лютеолин-7-глюкозида и фракций, полученных из хризантемы, на артериальное давление.

4.5. Изучение антиаритмической активности лютеолин-7-глюкозида и фракций, полученных из хризантемы.

4.6. Антигипоксическая активность лютеолин-7-глюкозида и фракций, полученных из хризантемы.

4.7. Актопротекторное действие лютеолин-7-глюкозида и фракций, полученных из хризантемы.

Выводы по главе 4.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Химическое исследование цветков хризантемы корейской (Chrysanthemum x koreanum Makai) с целью получения фармологически активных суммарных фитокомплексов»

Актуальность проблемы. Одной из проблем медицинской науки является исследование влияния активных форм кислорода (АФК) на физиологические функции организма человека. Известно, что гиперпродукция АФК приводит к нарушению перекисного окисления липидов и, как следствие, к повреждению клеточных мембран. Это является причиной тяжелых функциональных расстройств, в частности: сердечнососудистые заболевания, атеросклероз; ишемия мозга, рассеянный склероз; токсический гепатит; острые и хронические воспалительные процессы; мутагенез, злокачественные опухоли и многие другие.

Такие явления могут быть устранены не только путем применения лекарственных веществ, но и добавлением к рациону биологически активных соединений. В 2004 году НИИ питания РАМН были проведены исследования ежедневного рациона питания и опубликованы рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ, утвержденные главным государственным санитарным врачом РФ — Г. Г. Онищенко. К числу таких веществ следует отнести флавоноиды. В качестве одного из альтернативных источников полифенольных соединений, в том числе флавонов (лютеолина, апигенина, акацетина, диосметина) или С-гликозидов (витексина, изовитексина, ориентина, изоориентина) предложено использовать цветки хризантемы садовой (Chrysanthemum morifolium) [71].

Известно, что широкий спектр действия флавоноидов объясняется их избирательностью по отношению к активным формам кислорода (АФК): при гиперпродукции АФК они проявляют антиоксидантные свойства, а при низком уровне генерации АФК - прооксидантные. Удачное сочетание низкой токсичности с высокой фармакологической активностью делает их чрезвычайно перспективными для профилактики и лечения многих заболеваний.

Однако сырьевые источники флавоноидов, которые могут быть использованы как лекарственные вещества, ограничены. В то же время известны растения, которые широко применяются в народной медицине. 5

Например, в странах юго-восточной Азии растения рода Chrysanthemum используются в качестве средств, улучшающих коронарный кровоток; устраняющих симптомы вегетососудистой дистонии; снижающих артериальное давление; нормализующих обмен веществ; поддерживающих антитоксическую функцию печени; как успокаивающее и антиаллергическое средство.

Хризантема корейская широко культивируется в нашей стране как декоративное растение, но не используется в практических целях в качестве источника биологически активных соединений. Причиной этого является недостаточная изученность химического состава Chrysanthemum х koreanum Makai и отсутствие исследований фармакологического действия препаратов, выделенных из этого растения.

С этой точки зрения углубленное изучение химического состава, а также разработка доступных и легковоспроизводимых способов получения суммарных фракций из хризантемы в качестве перспективных источников для создания новых лечебно-профилактических средств является актуальной проблемой.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является исследование химического состава цветков хризантемы корейской и разработка рациональных путей получения из них суммарных фракций, обладающих биологической активностью.

Для достижения поставленной цели мы сочли целесообразным решение следующих задач: изучить качественный и количественный состав основных групп биологически активных соединений цветков Chrysanthemum х koreanum Makai.; выявить наиболее активные в фармакологическом отношении фракции, изучить их химический состав и определить содержание в них антиоксидантов;

- разработать препаративные способы выделения индивидуальных соединений из цветков хризантемы корейской; осуществить фармакологический скрининг индивидуальных веществ и отдельных фракций, полученных из хризантемы.

Научная новизна. Методами химического и физико-химического анализа доказано наличие биологически активных веществ в цветках хризантемы корейской, которые представлены флавоноидами, каротиноидами, витаминами, кумаринами, производными коричной кислоты, аминокислотами и полисахаридами. С целью полной характеристики сырья — цветков хризантемы корейской — проведено количественное определение основных групп БАВ и установлено содержание флавоноидов, каротиноидов, свободных аминокислот, витаминов (Е, С и Р-каротиноидов), а также макро-и микроэлементов.

Показано, что антиоксидантное действие определяется комплексом БАВ и найдена суммарная антиоксидантная активность в сухих экстрактах цветков хризантемы.

Изучен качественный и количественный состав фенольных соединений методом ВЭЖХ в экстракте цветков хризантемы корейской, полученном спиртом этиловым 40%.

Методом препаративной колоночной хроматографии из сухого экстракта цветков хризантемы корейской, получено 5 кристаллических веществ флавоноидной природы. Вещества, выделенные из фракций V и VI, на основании качественных реакций, хроматографического анализа, УФ-, ИК- и ПМР-спектроскопии идентифицированы как лютеолин и лютеолин-7-глюкозид.

Впервые изучены физико-химйческие свойства пектинового комплекса из цветков хризантемы.

Выявлены гипотензивная, антигипоксическая и актопротекторная активность лютеолин-7-глюкозида и суммарных фракций из хризантемы и впервые доказано их влияние на потенцирование желудочковой аритмии.

Практическая значимость работы. В результате химического и фармакологического исследования доказана возможность и перспективность использования цветков хризантемы корейской в качестве альтернативного сырья для получения БАВ и суммарных лекарственных средств.

Разработаны способы получения сухих экстрактов, полученных экстракцией сырья спиртом этиловым 70% и 40% концентрации, а также определена их фармакологическая активность.

Предложен препаративный способ выделения доминирующего флавоноида — лютеолин-7-глюкозида из цветков хризантемы, что может быть использовано для получения стандартного образца данного соединения.

Внедрение результатов в практику. По материалам диссертации составлено информационное письмо «Фармакотехнологическое исследование хризантемы корейской (Chrysanthemum х koreanum Makai)», которое передано в ПИИ питания РАМН для дальнейших совместных исследований, а также на кафедры фармакогнозии Пятигорской государственной фармацевтической академии и Курского государственного медицинского университета для включения полученных результатов в курс лекций. Наработанные сухие экстракты цветков хризантемы переданы ООО «МИП «Уником» для разработки экспериментальных серий фармакологических средств на их основе.

Положения, выдвигаемые на защиту:

- обоснование использования цветков хризантемы корейской в качестве источника для получения биологически активных веществ;

- результаты качественного и количественного исследования химического состава цветков хризантемы корейской;

- препаративные методы получения отдельных фракций и результаты изучения их химического состава;

- способ выделения лютеолин-7-глюкозида;

- результаты предварительного фармакологического и биохимического исследования влияния лютеолин-7-глюкозида и полученных из хризантемы фракций.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно8 исследовательской работы (НИР) ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава, а также в соответствии с соглашением о выполнении НИР между Федеральным агентством по здравоохранению и социальному развитию и ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (№06/1049).

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационной работы изложены на 62-й и 63-й научных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск 2008-2009 гг.). По теме диссертации опубликовано 7 работ, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 141 странице текста компьютерного набора и состоит из обзора литературы и 3 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 154 источника, в том числе 60 иностранных; содержит 41 таблицу, 38 рисунков и приложения.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Кодониди, Максим Иванович

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Определены качественные характеристики биологически активных веществ цветков хризантемы корейской, которые представлены флавоноидами, каротиноидами, витаминами, кумаринами, производными коричной кислоты, аминокислотами и полисахаридами.

2. Количественный анализ основных групп БАВ показал, что содержание флавоноидов составляет 0,87%; свободных аминокислот — 2,52%; витамины Е, С и провитамин А, содержатся в количестве 0,10 мг/%, 1,78 мг/% и 19,77 мг/% соответственно.

Полисахариды цветков хризантемы представлены водорастворимой фракцией (8,89%), пектиновыми веществами (17,79%), гемицеллюлозой А (1,80%) и гемицеллюлозой Б (0,51%). Среди микроэлементов количественно преобладают калий, магний и фосфор.

3. Суммарное содержание антиоксидантов в сухих экстрактах цветков хризантемы составляет: в экстракте, полученном 95 % этанолом — 57,3 мг/г; 70 % этанолом - 113,6 мг/г; 40 % этанолом - 116,9 мг/г; водой - 17,1 мг/г).

4. В экстракте цветков хризантемы корейской, полученном 40 % спиртом этиловым, методом ВЭЖХ определен качественный состав фенольных соединений, который представлен флавоноидами (гесперидином, гиперозидом, рутином, виценином, кверцетином), фенолокислотами (хлорогеновой, неохлорогеновой, кофейной, цикоревой, феруловой и о-метоксикумаровой), кумарином (о-метосикумарин). Преобладающими компонентами являются хлорогеновая, феруловая и цикоревая кислоты, а также гесперидин.

Впервые в изучаемом виде установлено наличие неохлорогеновой и о-метоксикумаровой кислот, виценина и о-метоксикумарина.

5. Методом препаративной колоночной хроматографии из сухого экстракта, полученного с применением спирта этилового 40%, выделены и идентифицированы лютеолин, лютеолин-7-О-глюкозид и 7-гликозид акацетина.

6. Из цветков хризантемы корейской выделен пектиновый комплекс и изучены его физико-химические свойства: определена средняя молекулярная масса (29093 г/моль); поверхностная активность (повышает поверхностное натяжение воды); кинетика и сорбционная л I емкость в отношении ионов свинца (143 мг-Pb /г пектина).

7. Использование компьютерной прогностической программы PASS позволило получить информацию с высоким процентом вероятности (до 90%) о положительном влиянии лютеолин-7-глюкозида и его агликона — лютеолина на сердечно-сосудистую и нервную систему, что в дальнейшем было подтверждено экспериментально: доказана гипотензивная, антигипоксическая и актопротекторная активность лютеолин-7-глюкозида и суммарных фракций из хризантемы; доказано также потенцирование хлоркальциевой желудочковой аритмии исследуемыми веществами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Кодониди, Максим Иванович, 2009 год

1. Абрамсон, А.А. Поверхностно активные вещества / А.А. Абрамсон. -Л.: Химия, 1975. 246с.

2. Аминокислоты фиалки полевой и донника рослого / И.Л. Дроздова и др. // Фармация. 2003. - № 5. - С. 14-15.

3. Аналитическая хроматография / К.И. Сакодынский и др.. -М.: Химия, 1993. 464 с.

4. Антиокислительная активность флавоноидов в различных системах перекисного окисления липидов / В.А. Костюк и др. // Биохимия. — 1988. Т.53, № 8. - С. 1365-1370.

5. Антиоксидантные свойства лекарственных растений / В.Ф. Громовая и др. // Хим. фармац. журн. - 2008. - Т.42, №1. - С. 26-29.

6. Афанасьев, И.Б. Кислородные радикалы в биологических процессах / И.Б. Афанасьев // Хим.-фармац. журн. 1985. — Т. 19, № 1. — С.11-23.

7. Бандюкова, В.А. Применение цветных реакций для обнаружения флавоноидов путем хроматографии на бумаге / В.А. Бандюкова // Раст. ресурсы.- 1965.-Вып. 4.- С. 591-596.

8. Бандюкова, В.А. Распространение флавоноидов в некоторых семействах высших растений / В.А. Бандюкова // Раст. ресурсы. — 1968.- Т. 4, вып. 3.- С. 429^439.

9. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды / В.А. Бандюкова // Химия природ, соединений. 1983. - №3.- С. 263272.

10. Беленький, М.П. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.П. Беленький. — 2-е изд., перераб. и доп. -Л.: Медицина, 1963.-149 с.

11. Беликов, В.В. Аналитические исследования природных фенольных соединений и разработка методов их количественного определения: автореф. дис. д-ра фармац. наук: 15.00.02. / В.В. Беликов Харьков, 1990.-36 с.

12. Бубенчиков, Р.А. Изучение полисахаридов травы фиалки донской / Р.А. Бубенчиков, Н.Ф. Гончаров // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. — Пятигорск, 2004. Вып.59. - С. 8.

13. Ветров, П.П. Определение содержания липофильных веществ и суммы каротиноидов в растительном сырье / П.П. Ветров, С.В. Гарная, Л.Г. Долганенко // Хим. фармац. журн. 1989. - Т.23, № 3. — С.23—25

14. Вичканова, С А. Антимикробная активность сесквитерпеновых лактонов из семейства сложноцветных / С А. Вичканова, М.А. Рубинчик, В.В. Адгина // Лекарственные растения: Фармакология и химиотерапия. М. 1971- С. 230-238.

15. Владимиров, Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран / Ю.А. Владимиров // Биофизика. 1987. - Т. 32, №5. - С. 830 - 844.

16. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров // Сорос, образ, журн. 2000. - Т.6, №12 - С. 1319.

17. Войткевич, С.А. Эфирные масла для парфюмерии и ароматерапии / С.А. Войткевич. — М.: Пищевая химия, 1999. — 282 с.

18. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / Е.А. Краснов и др.. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1987.-184 с.

19. ВЭЖХ в исследовании флавоноидов. Определение рутина /

20. B.И. Дейнека и др.// Хим.-фармац. журн. 2004. - Т.38, № 4.1. C. 23-25.

21. Гемодинамические эффекты синтетических атриопептидов у бодрствующих крыс в условиях объемной нагрузки / А.Н. Мурашев и др. // Эксперим. и клинич.фармакология.-1994.-Т.57, №5.- С. 1819.

22. Гемореологические свойства экстрактов из некоторых растений, содержащих флавоноиды / М.Б. Плотников и др. // Раст. ресурсы. -1998. Вып. 1.- С. 87-90.

23. Георгиевский, В.П. Физико-химические и аналитические методы характеристики флавоноидных соединений / В.П. Георгиевский, А.И. Рыбаченко, A.JL Казаков. Ростов н/Д: Изд-во Ростов, ун-та, 1988.- 144 с.

24. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук. -Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1990.- 333 с.

25. Голиков, С.Н. Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, JI.A. Тиунов. JL: Медицина, 1986. -279 с.

26. Гончаренко, Е.Н. Химическая защита от лучевого поражения / Е.Н. Гончаренко, Ю.Б. Кудряшов. М.: Изд-во МГУ, 1985. - 248 с.

27. Государственная фармакопея российской федерации. М.: Науч. центр экспертизы средств мед. применения, 2008. — 704 с.:ил.

28. Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа: в 2 вып.- 11-е изд., доп. / МЗ СССР М.: Медицина, 1987-1990. - Вып. 1, 2.

29. Давитавян, Н.А. Разработка технологии и нормирование качества жидкого и сухого экстрактов травы стальника полевого: дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / Давитавян Наира Альбертовна. -Краснодар, 2007. 173с.

30. Дворянинова, К.Ф. Хризантемы. Интродукция, биология и агротехника / К.Ф. Дворянинова. — Кишинев: Штиница, 1982. — 167 с.

31. Дроздова, И.Л. Аминокислотный и микроэлементный состав листьев лопуха / И.Л. Дроздова // Фармация. 2004.- № 3. - С. 18-19.

32. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения: распространение, метаболизм и функции в растениях / М.Н. Запрометов М.: Наука, 1993.-272 с.

33. Зиятдинова, Г.К. Определение флавонолов в фармпрепаратах методом вольтамперометрии / Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников // Хим. фармац. журн. - 2005. - Т.39, №10. - С. 54-56.

34. Зубкевич, Г.И. Классификация высших растений: Метод, указания по ботанике / Г.И. Зубкевич, Т.А. Сауткина, В.В. Черник Минск: БГУ, 2002. - 34 с.

35. Иванов, JI.В. Сродство к биомембранам и некоторые особенности фармакокинетики соединений флавоноидной природы / Л.В. Иванов и др. // Хим.-фарм. журнал.- 1992- №2. С. 20-23.

36. Ивашев, М.Н. Изучение центральной гемодинамики с использованием компьютерной программы «ВЕАТ» / М.Н. Ивашев, Т.А. Лысенко, В.А.Коршунов // Человек и лекарство: тез. докл. 4 Рос. нац. конгр. 7-12 апр. 1997 г. М., 1997. - С. 263.

37. Измеров, Н.Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии / Н.Ф. Измеров, И.В. Саноцкий, К.К.Сидоров.- М.: Медицина, 1977.- 197 с.

38. Изучение состава фенольных соединений донника лекарственного методом ВЭЖХ / В.Н. Бубенчикова и др. // Хим.-фармац. журн. — 2004. Т.38, № 4. - С. 24^25.

39. Интернет-система прогноза спектра биологической активности химических соединений / В.В. Поройков и др. // Хим. фармац. журн. - 2002. - Т.36, №10. - С. 21-26.

40. Исследование микроэлементного состава объектов растительного происхождения/ Д.А. Муравьева и др. // Достижения современной фармацевтической науки и образования практическому здравоохранению: материалы юбил. научн.-практич. конф. — Пермь, 1997.-С.224.

41. Исследования связи структура-активность производных флавона, обладающих антиаллергической активностью / Э.Т. Оганесян и др. // Хим.-фармац. журнац. 1991. - № 8. - С. 18-24.

42. Кабиев, O.K. Природные фенолы — перспективный класс противоопухолевых и радиопотенцирующих соединений / O.K. Кабиев, С.Б. Балмуханов. -М.: Медицина, 1975.- 200 с.

43. Клышев, А.К. Флавоноиды растений / А.К. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюкина,- Алма-Ата, 1978.- 220 с.

44. Ковалев, И.П. Инфракрасные спектры поглощения некоторых групп природных соединений (Атлас спектров) / И.П. Ковалев, Е.В. Титов,-Харьков, 1966.- 204 с.

45. Комиссаренко, С.Н. Пектины — их свойства и применение / С.Н. Комиссаренко, В.Н. Спиридонов. // Раст. ресурсы 1998. - Т.34, №1. с. 111-119.

46. Короткова, Е.И. Новый вольтамперометрический способ определения активности антиоксидантов / Е.И. Короткова, Ю.А. Корбаинов, О.А. Аврамчик // "Биоантиоксидант"; тез. докл. VI междунар. конф. 16-19 апр. 2002 г. М., 2002. - С. 298-299.

47. Кочетков, Н.К. Химия биологически активных соединений / Н.К. Кочетков. М., 1970. - 486 с.

48. Лигай, JI.B. Изучение полифенолов и полисахаридов некоторых растений сем. мальвовых: автореф. дис. .канд. фармац. наук: 15.00.02./ Лигай Лилия Вениаминовна Спб., 1977. — 31 с.

49. Литвиненко, В.И. Химия природных флавоноидов и создание препаратов при комплексной переработке растительного сырья: автореф. дис. д-ра фармац. наук: 15.00.02. / В.И. Литвиненко. — Харьков, 1990.-29 с.

50. Лысенко, Т.А. Влияние новых производных бензимидазола на системную и региональную гемодинамику: автореф. дис. канд.фармац.наук.: 14.00.25 / Т.А. Лысенко. — Пятигорск, 1999. — 22 с.

51. Максютина, Н.П. Растительные антиоксиданты и пектины в лечении и профилактике лучевых поражений и детоксикации организма / Н.П. Максютина, Л.Б. Полипчук. // Фармац. журн. 1996 - №2-С. 35-41.

52. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. / М.Д. Машковский. 14-е изд., перераб. и доп. - М.: Новая волна, 2000.-2 т.

53. Методические указания по применению унифицированных клинических лабораторных методов исследования /под ред. М.И. Прохоровой. Л.: Изд-во ЛГУ, 1982. - 272 с.

54. Многократные измерения параметров системной гемодинамики у бодрствующих крыс / О.С. Медведев и др. // Физиол. журн. СССР.-1986.-Т.72, №2.- С.253-256.

55. Моргунова, Т.В. Влияние лекарственных средств на свободно-радикальное окисление / Т.В. Моргунова, Д.Н. Лазарева // Эксперим. и клинич. фармакология.- 2000.- Т.63, №1.-С. 71-75.

56. Мурашев, А.Н. Руководство по экспериментальной физиологии кровообращения / Мурашев А.Н., Медведев О.С., Давыдова С.А. — Саратов: Изд-во Саратовского ун-та, 1992. — 42 с.

57. Общество натуральной медицины Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.nutrition.ru/fito/hrizantema-l l.html - Загл. с экрана

58. Определение антиоксидантной активности экстрактов растительного сырья методом катодной вольтамперометрии / Е.И. Короткова и др. // Хим. фармац. журн. - 2003. - Т.37, №9. - С. 55-56.

59. Определение полифенольного состава сухого экстракта гребней винограда методом ВЭЖХ / А.В. Еремина и др. // Хим.-фармац. журн. 2004. - Т.38, № 3. - С. 26-28.

60. Пат. 2238554 Российская Федерация, МКИ G01 N33/15 N27/26. Способ определения суммарной антиоксидантной активности биологически активных веществ / В.П. Пахомов и др. (РФ). — № 2003123072/15; заявл. 25.07. 03; опубл. 20.10.04, Бюл. № 15. 3 с.

61. Пектин. Производство и применение / Н.С. Карпович и др.. — Киев: Урожай, 1989. 88 с.

62. Перфилова, В.Н. Кардиопротективное действие феруловой кислоты при стрессорном повреждении сердца / В.Н. Перфилова, А.А. Дьяков, И.Н. Тюренков // Эксперим. и клинич. Фармакология. — 2005. Т. 68, №5.-С. 19-22.

63. Пигулевский, Г.В. Новые работы в области химии сесквитерпенов / Г.В. Пигулевский, А.Т. Рыскальчук // Терпены и кумарины. -М.: Наука, 1965.- С. 125.

64. Полюдек-Фабини, Р. Органический анализ: пер. с нем. / Р. Полюдек-Фабини, Т. Бейрих.- Л.: Химия, 1981.- 624 с.

65. Преч, Э. Определение строения органических соединений. Таблицы спектральных данных: пер. с англ. / Э. Преч, Ф. Бюльманн, К. Аффольтер.- М.: Мир, 2006.- 440 с.

66. Природные флавоноиды / Д.Ю. Корулькин и др. // Рос. акад. наук, Сиб. отд., Новосиб. ин-т органической химии. Новосибирск: Академическое изд-во 'Тео", 2007. -232 с.

67. Растения целебный источник производства отечественных функциональных продуктов питания XXI века/ А.Л. Казаков и др. -М.: Демиург-Арт, 2005. - 304 с.

68. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав использование: Семейство Asteraceae (Compositae) СПб.: Наука, 1993.- 352 с.

69. Рациональное питание. Рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ / Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Методика N MP 2.3.1.1915-04 от 2 июля 2004г.

70. Роль фенольных антиоксидантов в повышении устойчивости органических систем к свободно-радикальному окислению / И.В.Сорокина и др. // Аналитический обзор. Новосибирск, 1997. -Вып. 46. - 67 с.

71. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / В.П. Фисенко и др.. -М.: Ремедиум, 2004.- С. 220-224.

72. Скурихин, В.Н. Методы анализа витаминов А, Д, Е и каротина в кормах, биологических объектах и продуктах животноводства /

73. B.Н. Скурихин, С.В. Шабаев. М.: Химия, 1996. - 96 с.

74. Справочник биохимика: пер. с англ./ Р. Досон и др..— М.: Мир, 1999. 544с.

75. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования / под ред. Е.А. Кост. М.: Медицина, 1975. - 383 с.

76. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии /

77. О.Б. Рудаков и др.. Воронеж: Водолей, 2004. - 528 с.

78. Сравнительное изучение антиоксидантной активности витаминов А, Е и b-каротина/И.В. Кутузова и др.//Фармация. 2004. - № 4.1. C. 15-18.

79. Строев, Е.А. Практикум по биологической химии: учеб. пособие / Е.А. Строев, В.Г. Макаров М.: Высш. шк., 1986. - 231 с.

80. Сумма гликозидов диосметина из Вики обрубленной: выделение и изучение биологического действия / О.А. Андреева и др. // Хим.-фармац. журн- 1998. Т.32, №11.- С.28-30.

81. Тонкослойная хроматография флавоноидов / В.А. Бандюкова и др. // Химия природ, соединений 1973. - № 1. - С.20-25.

82. Установление структуры органических соединений физическими и химическими методами / под общ. ред. А.Вайсберга: в 2 т. — М.: Химия, 1967. Т.2. - 531с.

83. Филимонов, Д.А. Прогноз спектров биологической активности органических соединений / Д.А. Филимонов, В.В. Поройков // Рос. хим. журн. 2006. - № 50 (2). - С. 66-75.

84. Флора СССР: в 30 т. /под общ. ред. B.JL Комарова. — M.-JL: Изд-во АН СССР, 1961. Т. 26. - 940 с.

85. Харбон, Д. Биохимия фенольных соединений: пер. с англ. / Д. Харбон. -М.: Мир, 1968.- 452 с.

86. Химический анализ лекарственных растений: Учеб. пособие для фарм. вузов / Ладыгина Е.Я. и др..- М.: Высш. шк., 1983.-176 с.

87. Храмов, В.А. Хлорогеновая кислота в листьях и лиофилизированных экстрактах стевии / В.А. Храмов, Н.В. Дмитриенко // Хим.-фармац. журн. 2000. - Т.34, №11. - С.34-35

88. Хроматография на бумаге / под ред. И.М. Хайца, К. Мацека. — М.: Изд-во ин. лит.,- 1962. 457 с.

89. Целенаправленный поиск веществ с заданными фармакологическими свойствами / Э. Т. Оганесян и др. // Кубанск. науч. мед. вестн. -2009. № 2. - С.37-40.

90. Шварценбах, Г. Комплексометрическое титрование / Г. Шварценбах, Г. Флашка. -М.: Химия, 1970. С. 182-192.

91. Шинкаренко, А.А. Методы исследования природных флавоноидов (методические рекомендации) / А.А. Шинкаренко, В.А. Бандюкова, A.JI. Казаков.- Пятигорск, 1977. 70 с.

92. Якубке, Х.-Д. Аминокислоты, пептиды, белки: пер. с нем. / Х.-Д. Якубке, X. Ешкайт,- М.:Мир, 1985.- 455с.

93. Яшин, А.Я. Прибор для определения антиоксидантной активности растительных лекарственных экстрактов и напитков / А.Я. Яшин, Я.И. Яшин // Журн. междунар. информационная система по резонансным технологиям 2004. - №34. - С.10-14ч

94. A first allergenic sesquiterpene lactone from Chrysanthemum indicum L.: arteglasin-A / B.M. Hausen et al. // Naturwissenschaften. 1975. -№ 12.-P. 585 -586.

95. A gradient HPLC method for the quality control of chlorogenic acid, linarin and luteolin in Flos Chrysanthemi Indici suppository / Q. Zhang et al. // J. Pharm. Biomed. Anal. 2006. - №8. - P. 210-214

96. A quantum chemical explanation of the antioxidant activity of flavonoids / S.A. Van Acker et al. // Chem. Res. Toxicol. 1996. - № 9. - P. 13051312.

97. Additional antilipoperoxidant activities of alpha-tocopherol and ascorbic acid on membrane-like systems are potentiated by rutin / Negre-Salvayre A. et al. // Pharmacology. 1991. - Vol. 42, № 5. -P. 262-272.

98. Anti-AIDS agents, 10. Acacetin-7-O-beta-D-galactopyranoside, an anti-HIV principle from Chrysanthemum morifolium and a structure-activity correlation with some related flavonoids / C.Q. Hu et al. // J. Nat. Prod.- 1994.-№1.-P. 42-51.

99. Antil-inflammatory Effects of Extracts from Some Traditional Mediterranean Diet Plants / M. Strzelecka et al. // J. Physiol. Pharmacol.- 2005. Vol. 56, № i. p. 139-156

100. Antiinflammatory action of flavonoids extracted from regional vegetable sources / L. Pelser et al. // Comun. biol. 1994.- N3. - P.268.

101. Antioxidant activity of natural flavonoids is governed by number and location of aromatic hydroxyl groups / Z.Y. Chem et al. // Chemistry and physics of lipids 1996. - Vol.79, № 5. — P. 157-163.

102. Antioxidant and prooxidant behavior of flavonoids: Structure-activity relationships / R.L. Prior et al. // Free Radic. Biol. Med. 1997. -№ 22.- P.749-760.

103. Antioxidant enzymes activity involvement in luteolin-induced human lung squamous carcinoma CH27 cell apoptosis / H. Wing-Cheung Leung et al. // European Journal of Pharmacology 2006.- № 534.- P. 12-18

104. Antioxidant properties of hidroxy-flavones / N. Cotelle et al. // Free Radic. Biol. 1996. - Vol. 20, № 1. - P. 35-43.

105. Antioxydant and pro-oxidant actions of flavonoids: effects on DMA damage induced by nitric oxide, peroxynitrite and nitroxyl anion/ Ohshima H. et al. // Free Radic Biol Med. 1998. - Vol. 25, № 9. - P. 10571065.

106. Antitubercular Activity of Triterpenoids from Asteraceae Flowers / A. Toshihiro et al. // Biol. Pharm. Bull. 2005. - Vol. 28 №1. - P. 158160.

107. Arora, A. Structure activity relationships for antioxidant activities of a series of flavonoids in a liposomal system / A. Arora, M.G. Nair, G.M. Strasburg // Free Radic. Biol. Med. - 1998. - Vol. 24. -P.1355-1363.

108. Beyer, G. Effects of selected flavonoids and caffeic acid derivatives on hypoxanthine-xanthine oxidase-induced toxicity in cultivated human cells/ G. Beyer, M.F. Melzig // Planta Med. 2003. - Vol. 69. -P. 1125-1129.

109. Biological effects of hesperidine, a Citrus Flavonoid. Note II. Hypolipidemic activity on experimental hypercholesterolemia in rat / M.T.Monforte et al. // Farmaco. 1995. - Vol. 50, № 9 - P. 595-599.

110. Cadenas, E. Basic mechanisms of antioxidant activity / E. Cadenas // Biofactors. 1997. - Vol.6, № 4. - P.391-397.

111. Comparative acute and subacute toxicities of allethrin and pyrethrin / C.P. Carpenter et al. // Arch. Indian Hyg. Occup. Med. 1950. - № 2. -P. 420-432.

112. Composition of the essential oil of C. sibiricum / K.T. Lee et al. // Nat. Prod. Sci. 2002. - № 8. - P. 133-136.

113. Constituents of the essential oils from three tetraploid species of Chrysanthemum / Y. Uchio et al. // Phytochemistry. 1981. - № 20. -P. 2691-2693.

114. Cytotoxicity and lipid peroxidation inhibiting activity of flavonoids / Cos P. et al.// Planta Med. - 2001. - Vol. 67, № 12. - P. 515-519.

115. Deng, W. Flavonoids function as antioxidants: by scavenging oxygen species or by chelating iron / W. Deng, X. Fang, J. Wu // Radiat. Phys. Chem. 1997. - Vol. 50. - P. 271-276.

116. Discriminating between drugs and nondrugs by prediction of activity spectra for substances (PASS) / S. Anzali et al. // J. Med. Chem. 2001. -Vol. 44, № 15. - P. 2432-2437.

117. Dreikorn, K. The role of phytotherapy in treating lower urinary tract symptoms and benign prostatic hyperplasia / K. Dreikorn // World J. Urol.- 2002. Vol.19, № 6. - P.426-435.

118. Essential oil of Chrysanthemum indicum / B. Stoianova-Ivanova et al. // Planta Med. 1983. - Vol. 49, № 2. - P. 236-239.

119. Finkel, T. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing / T. Finkel, N.J. Holbrook // Nature. 2000. - Vol. 408, № 6809. - P. 239-247.

120. Flavonoids as antioxidants: determination of radical-scavenging efficiencies/ Bors W. et al. // Methods Enzymol. 1990. - Vol. 186. -P. 343-355.

121. Flavonoids: a review of probable mechanisms of action and potential applications/ Nijveldt R.J. et al.// Am. J. Clin. Nutr. 2001. - № 74. -P. 418-425.

122. Gurkan, E. Cytotoxicity assay of Chrysanthemum coronarium / E. Gurkan, E.P. Koksal, I. Sarioglu // Fitoterapia. 1998. - № 69. - P. 284.

123. Hadaroglu, H. Antioxidant and radical scavenging properties of Iris Germanica / H. Hadaroglu, Y. Demir, N. Demir // Хим. фармац. журн. -2007.- T.41, №8. - С. 13-18.

124. Halliwell, В. Antioxidant defence mechanisms: from the beginning to the end (of the beginning) / B. Halliwell // Free Radic. Res. 1999. - Vol. 31, №4.-P. 261-272.

125. Hu, L. Sesquiterpenoid alcohols from Chrysanthemum morifolium / L. Ни, Z. Chen // Phytochemistry 1997. - № 44. - P. 1287-1290.

126. Indicumenone, a new bisabolane ketodiol from Chrysanthemum indicum / K. Mladenova et al. // Planta Med. 1987. - № 53.- P. 118-119.

127. Influence of iron chelation on the antioxidant activity of flavonoids / S.A. Van Acker et al. // Biochem. Pharmacol. 1998. - Vol. 56. -P. 935-943.

128. Isolation and Identification of Dihydrochrysanolide and Its 1-Epimer from Chrysanthemum coronarium L. / D.L. Kyung et al. // Biosci. Biotechnol. Biochem. 2002. - Vol. 66, № 4. - P. 862-865.

129. Kamwo Herb Guide ("Traditional Functions of Chinese Herbs and Formulas Free Online Database") Электронный ресурс. - Режим доступа: http://www.kamwo.com - Загл. с экрана.

130. Kobayashi, S. Cardiopulmonary toxicity of tetrachloroethylene / S. Kobayashi, D.E. Hutcheon, J. Poll // J. Toxicol Environ. Health. 1985. - Vol. 11, № 1.-P. 29-41.

131. Kuklina, E.A. Flower Development of Greenhouse Chrysanthemum / E.A. Kuklina // Acta Biologica Cracoviensa Series Botanica. 2003. -Vol. 45, № l.-P. 173-176.

132. Kumar, A. Secondary metabolites of Chrysanthemum genus and their biological activities / A.Kumar, S. P. Singh, R. S. Bhakuni // Current Science. 2005. - Vol. 89, № 9. - P. 1489-1501.

133. Liebler, D.C. Antioxidant reactions of beta-carotene: identification of carotenoid-radical adducts / D.C. Liebler, T.D. McClure // Chem. Res. Toxicol. 1996. - Vol. 9, № 1. -P.8-11.

134. Luteolin Reduces Lipopolysaccharide-induced Lethal Toxicity and Expression of Proinflammatory Molecules in Mice / A. Kotanidou et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med.- 2002.- № 165.- P. 818-823.

135. Luteolin, an emerging anti-cancer flavonoid, poisons eukaryotic DNA topoisomerase I / A.R. Chowdhury et al. // Biochem. J.- 2002.- N366.-P. 653-661

136. Magnani, L. Spectrophotometric measurement of antioxidant properties of flavones and flavonols against superoxide anion / L. Magnani, E M. Gaudou, J.C. Hubaud // Anal. Chim. Acta. 2000. - Vol. 4, № 11. -P. 209-216.

137. Mitsuo, M. Antimutagenic Activity of Flavonoids from Chrysanthemum morifolium / M. Mitsuo, H. Masayoshi // Biosci. Biotechnol. Biochem. -2003. Vol. 67, №10. - P. 2091-2099.

138. Mladenova, K. Sesquiterpene lactones from Chrysanthemum indicum / K. Mladenova, E. Tsankova, B. S. Ivanova // Planta Med. 1985. - № 3. -P. 284-285.

139. Peyrat-Maillard, M.N. Determination of the antioxidant activity of phenolic compounds by coulometric detection / M.N. Peyrat-Maillard, S. Bonnely, C. Berset // Talanta. 2000. - Vol.51, № 4. - P. 709-716.

140. Pharmacological effect of aqueous extract of Chrysanthemum indicum on gastrointestinal smooth muscles / S. Amos et al. // J. Herbs, Spices Med. Plants. 2000. - № 7. - P. 45-53.

141. Quality assessment of Flos Chrysanthemi Indici from different growing areas in China by solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry / S. Shun et al. // J. Chromatogr. 2004. - Vol. 1047, № 2. -P. 281-287.

142. Raha, S. Mitochondria, oxygen free radicals, disease and ageing / S. Raha, B.H. Robinson // Trends Biochem. Sci. 2000. - Vol. 25, №10. - P. 502508.

143. Ramakrishnan, N. Ebselen inhibition of apoptosis by reduction of peroxides / N. Ramakrishnan, J.F. Kalinich, D.E. McClain // Biochem. Pharmacol.-1996.-Vol. 51, № 11.-P. 1443-1451.

144. Rice-Evans, C.A. Current status of antioxidant therapy / C.A. Rice-Evans, A.T. Diplock // Free Radic. Biol. Med. 1993. - № 15. - P. 77-96.

145. Schussler, M. Myocardial effects of flavonoids from Crataegus species / M. Schussler, J. Holsl, U. Fricke // Arzneim. Forsch. - 1995. - № 8. -P. 842-245.

146. Sinner, M. The chromatographic behavior of polysaccharides / M. Sinner, JJ. Puis // J. Chromatogr. 1978. - Vol. 156, № 1. -P. 194-204.

147. Stability and Bioavailability of Antioxidants in Garland (Chrysanthemum coronarium L.) / T. Makiko et al. // Biosci. Biotechnol. Biochem. -2000. Vol. 64, № 12. - P. 2689 - 2691.

148. Synergistic interactions between vitamin A and vitamin E against lipid peroxidation in phosphatidylcholine liposomes / L. Tesoriere et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1996. - Vol. 326, № 1. - P. 57-63.

149. Teixeira da Silva, J.A. Chrysanthemum: advances in tissue culture, ryopreservation, postharvest technology, genetics and transgenic biotechnology / J.A. Teixeira da Silva // Biotechnology Advances. 2003. -№21.-P. 715-766

150. The Science of Flavonoids / edit, by E. Grotewold // Springer Science + Business Media, Inc. 2006. - 274 p.

151. Txakou, О. Flavonoids from Achillea crithmifolia Waldst and Kit / Txakou О., H. Skaltsa, C. Harvala // Sci. Pharm. 1996. - № 2.-P. 197-202.

152. Vogin, E.E. Bioflavonoids in experimental ulcerations / Vogin E.E., Rossi G.V. // J. Pharmacol. Sci. 1961. - Vol. 50, № 1 - P. 14-17.