Характеристика иммунокомпетентных и гемопоэтических стволовых клеток в продукте афереза у больных гемобластозами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат наук Баторова, Дарья Сергеевна

• Баторова, Дарья Сергеевна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Баторова, Дарья Сергеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОЦЕДУРЫ СЕПАРАЦИИ И КЛЕТОК ПРОДУКТА АФЕРЕЗА (ОБЗОР

ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Краткие сведения о показаниях к аутологичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток и её эффективности при гемобластозах

1.2 Иммунологические аспекты мобилизации и сепарации гемопоэтических стволовых клеток

1.2.1 Влияние Г-КСФ на иммунокомпетентные клетки и их функциональную активность

1.2.2 Биологические эффекты препаратов Г-КСФ в зависимости от лекарственной формы

1.3 Иммунокомпетентные клетки продукта афереза и их влияние на исходы АТГСК

1.3.1 Клиническая характеристика сепарируемых СЭ34+ клеток

1.3.2 Нейтрофилы в продукте афереза

1.3.3 Влияние мононуклеарных клеток продукта сепарации на исходы АТГСК

1.3.4 Характеристика клеток с супрессорной активностью в составе

продукта афереза

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Дизайн исследования, характеристика больных

2.2 Методы лабораторных исследований

2.2.1 Определение количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы

2.2.2 Определение субпопуляций клеток методом проточной цитометрии

2.2.3 Определение клеточного цикла в СЭ34+-клетках

2.2.4 Оценка секреторной активности МНК продукта сепарации

2.3 Статистическая обработка полученных результатов

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Влияние процедуры сепарации периферической крови на субпопуляционный состав продукта афереза у больных гемобластозами

3.2 Исследование зависимости субпопуляционного состава и цитокин-продуцирующей функции продукта афереза от уровня клеток с регуляторной активностью

3.3 Сравнительная характеристика субпопуляционного состава и цигокин-продуцирующей функции клеток продукта сепарации больных лимфомами, множественной миеломой и острыми лейкозами

3.4 Влияние препаратов Г-КСФ на субпопуляционный состав и продукцию цитокинов клетками продукта сепарации больных лимфомами и множественной миеломой

3.5 Влияние субпопуляционного состава и продукции цитокинов клетками продукта сепарации больных гемобластозами на исходы аутологичной

трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика иммунокомпетентных и гемопоэтических стволовых клеток в продукте афереза у больных гемобластозами»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования

Гемобластозы - опухоли, развивающиеся из клеток кроветворной ткани, относятся к числу часто встречающейся онкологической патологии. Среди детей и взрослых до 30 лет они составляют более 30 % в общей структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями [1; 8], что придает им особое экономическое и социальное значение. Обращает на себя внимание неуклонное увеличение показателей заболеваемости гемобластозами: по России с 2001 по 2011 гг. прирост составил 17,57%, со среднегодовым темпом прироста 1,6% [8]. Преобладание агрессивных форм, особенно у лиц молодого возраста, обусловливает увеличение смертности, в частности, от иеходжкинских злокачественных лимфом, на 2-4% в год [2; 3; 69]. Перечисленные факторы требуют дальнейшего усовершенствования существующих методов лечения гемобластозов.

Высокодозная химиотерапия (ВДХТ) с последующей аутологичной трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток (АТГСК) более 40 лет используется для лечения гемобластозов, некоторых солидных опухолей и аутоиммунных заболеваний [83]. Ежегодно в мире проводится около 30 000 АТГСК [58; 111]. До 90% приходится па долю лимфопролиферативных заболеваний и острых лейкозов (OJT) [58]. Для большинства из этих заболеваний при развитии рецидива или первично-рефрактерном течении проведение ВДХТ с аутологичной трансплантацией является терапией выбора [84], позволяющей значительно увеличить показатели выживаемости [1].

Однако рецидив заболевания часто развивается в течение первых лет после АТГСК, значительно ухудшает прогноз и остается основной причиной смерти (в 69%) [111]. После рецидива лимфомы Ходжкипа (J1X) после трансплантации медиана выживаемости составляет пе более 2 лет [1; 37]. Поэтому продолжается разработка методов способных повысить эффективность АТГСК, а также поиск факторов прогноза ее исходов.

Интенсификация фармакологического воздействия при миелоаблативных режимах кондиционирования перед АТГСК в значительной мере ограничена нарастанием токсического эффекта химиотерапии. С другой стороны, исследование механизмов опухолевого роста и противоопухолевого иммунного ответа позволяет выработать новые подходы к трансплантации периферических стволовых клеток с целыо повышения ее эффективности.

В последнее время приходит понимание того, что аспират костного мозга или продукт сепарации периферической крови (ПК), ранее рассматривавшиеся лишь как источники достаточного количества кроветворных стволовых клеток, в зависимости от своего клеточного состава и его функциональной активности, способны оказывать влияние па показатели эффективности АТГСК независимо от действия гемопоэтических предшественников.

По данным исследований, проводимых с конца 1990-х гг., удаление из продукта сепарации негемопоэтических клеток во избежание реинфузии малигнизированных лимфоцитов приводит к удлинению периода лимфопении и, в ряде наблюдений, увеличению риска инфекционных осложнений в посттрансплантациоппом периоде [45; 47; 51; 146]. Этим было клинически подтверждено, что в течение первых месяцев после АТГСК восстановление пула Т-клеток происходит путем гомеостатической пролиферации трансплантируемых зрелых лимфоцитов. Со сроками выхода из лимфопении прямо коррелирует количество реинфузируемых лимфоцитов в целом, либо отдельных субпопуляций: С08+-клеток, ЫК-клеток [15; 64; 74]. При этом быстрое восстановление абсолютного количества лимфоцитов после АТГСК является прогностическим фактором увеличения общей и беспрогрессивной выживаемости [122]. Реинфузируемые клетки рассматриваются как источник цитокинов, в частности, ИЛ-7 и ИЛ-15, необходимых для быстрой и эффективной реконституции лимфоцитов [90; 119].

Традиционно мало внимания уделяется содержащимся в большом количестве в продукте сепарации гранулоцитам, в связи с разрушением этих клеток в процессе криоконсервации и последующей разморозки перед АТГСК. С

другой стороны, известна отрицательная корреляция между временем выхода из цитопении и числом реинфузируемых гранулоцитов. В этом случае, возможно, имеет значение повреждающее действие продуцируемых пейтрофилами протеолитических ферментов на поверхностные молекулы реинфузируемых гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) [157].

Не ясна роль регуляторпых Т-клеток (Трег) в патогенезе гемобластозов, известно увеличение их количества при гемобластозах и подавление ими как противоопухолевого иммунного ответа [63; 94; 153], так и пролиферации малигнизированпых лимфоцитов [32; 160]. Соответственно, не изучено возможное влияние трансплантируемых Трег на процессы иммунологической реконституции и исход терапии. Есть данные, что их восстановление после аллогеппой трансплантации идет преимущественно посредством периферической экспансии инфузируемых Трег донора [88], и об их сниженной чувствительности к режимам мобилизации ГСК, что может привести к относительно большему их содержанию в продукте афереза [34; 136].

Мобилизацию ГСК в периферическую кровь проводят с помощью препаратов гранулоцитарного колонисстимулирующего фактора (Г-КСФ), обычно в сочетании с химиотерапией. Терапевтические дозы Г-КСФ влияют на клеточный состав и функциональную активность лейкоцитов, в частности, на продукцию цитокинов in vitro и in vivo [69; 147]. При использовании копъюгированпого с полиэтиленгликолем Г-КСФ для мобилизации ГСК доноров происходит активация и экспансия субпопуляций лимфоцитов, отличных от таковых при мобилизации стандартным препаратом Г-КСФ [98; 100]. Однако конкретные изменения в клеточном составе продукта сепарации в зависимости от используемого препарата Г-КСФ па сегодняшний день не изучены. Вышеизложенное определило цель и задачи представленного исследования.

Цель исследования

На основе изучения особенностей субпопуляционного состава и функциональной активности клеток в продуктах сепарации у больных

гемобластозами в зависимости от клинической формы, режима мобилизации и исхода трансплантации гемопоэтических стволовых клеток оценить клиническую и прогностическую значимость количественных и функциональных параметров трансплантируемых клеток.

Задачи исследования

1. Изучить относительное содержание различных субпопуляций лейкоцитов в продукте афереза и периферической крови больных гемобластозами.

2. Оценить содержание клеток с регуляторной активностью и их взаимосвязь с количественными и функциональными показателями иммунокомпетентных клеток продукта сепарации.

3. Охарактеризовать субпопуляциоппый состав и продукцию цигокинов клетками продукта сепарации больных с различными нозологическими формами гемобластозов (лимфомы, множественная миелома, острые лейкозы).

4. Исследовать влияние лекарственной формы препарата Г-КСФ на субпопуляциоппый состав и продукцию цитокинов клетками продукта сепарации больных лимфомами и множественной миеломой.

Изучить количественные и функциональные параметры иммунокомпететных и стволовых кроветворных клеток продукта афереза у больных гемобластозами с различными исходами АТГСК.

Научная новизна

Впервые продемонстрировано, что по сравнению с периферической кровыо, продукт афереза у больных гемобластозами содержит более высокое относительное количество СОЗ+ Т-клеток и С04+ клеток за счет избирательного накопления С04+ и С08+ Т-клеток памяти, и более низкое количество СБ8+наивных клеток и В-лимфоцитов. При этом мобилизация и сепарация не приводит к возрастанию в продукте афереза Трег. Охарактеризовано содержание различных субпопуляций клеток с супрессорной активностью (Трег, незрелые

миелоидные клетки) в продукте афереза и продемонстрирована связь между более высоким содержанием СЭ4+РОХРЗ+ клеток и незрелых форм грапулоцитов с более низким относительным количеством эффекторпых Т-лимфоцитов и моноцитов.

Впервые выявлены различия в составе и функциональной активности аутологичпых продуктов афереза в зависимости от нозологической формы заболевания. Показано, что продукты сепарации больных ОЛ отличаются более высоким содержанием С04+С025ы Трег, более низким количеством грапулоцитов, более высокой продукцией провоспалительных цитокинов и меньшим относительным содержанием покоящихся ГСК. Продукты сепарации больных множественной миеломой (ММ) содержат значимо более высокое количество СЭ19+ В-лимфоцитов и отличаются более низкой продукцией провоспалительных цитокинов.

Впервые продемонстрировано, что при использовании пегелированной формы (ПЭГ-Г-КСФ) клетки продукта сепарации отличаются более высоким количеством Трег и более низким содержанием моноцитов, более высокой продукцией ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-7 и содержат большее количество пролиферирующих гемопоэтических клеток-предшественников, чем образцы сепарата при использовании стандартного (пеконъюгировапного) Г-КСФ.

Установлено, что у больных ММ развитие рецидива ассоциировано с более высоким содержанием СО 19* В-клеток в продукте сепарации (> 2,5 %). Также впервые установлено, что больные ОЛ с развитием рецидива после АТГСК отличаются значимо более высоким относительным содержанием С08 СЭ451Ю Т-клеток. Впервые описана обратная связь между продукцией клетками продукта сепарации ИЛ-2 и сроками восстановления лимфоцитов после АТГСК.

Теоретическая и практическая значимость

Теоретическая значимость работы заключается в расширении и систематизации данных о факторах, ассоциированных с вариабельностью субпопуляционного состава и функциональной активности клеток, содержащихся

в продукте сепарации. Факторами, влияющими па состав и функции трансплантируемых клеток в составе продуктов афереза, являются селективное обогащение определенных клеточных субпопуляций в процессе самой процедуры сепарации, клиническая форма заболевания и тип используемого препарата Г-КСФ. Выявленная взаимосвязь между количеством С04+Р0ХРЗ+ Трег, незрелых миелоидных клеток и отдельных субпопуляций клеток (С016+ Т^К-клетки, СЭЗ+, С04+ Т-клетки, моноциты) продукта афереза указывает па потенциальное влияние клеток с регуляторной активностью на иммунную реконстигуцию. Описанные в работе ассоциации более высокого содержания С019+ В-клеток и С08+С045Я0+ Т-клеток в продуктах сепарации больных ММ и ОЛ, соответственно, с развитием рецидива могут иметь значение для дальнейшего изучения патогенеза этих заболеваний.

Практическая значимость работы заключается в выявлении более высокого содержания в продукте афереза С04+С025111ёЬ и С04+Р0ХРЗ+ Трег при мобилизации с использованием ПЭГ-Г-КСФ, что обуславливает необходимость сравнительных исследований исходов АТГСК при использовании различных лекарственных форм Г-КСФ. Другим прикладным аспектом является выявление высокой прогностической значимости содержащихся в продукте сепарации В-лимфоцитов в оценке исходов АТГСК у больных ММ. Кроме того, выявленное более высокое содержание С08+С0451Ю+ Т-клеток в продуктах сепарации у больных ОЛ с последующим развитием рецидива позволяет рассматривать данный маркер в качестве потенциального предиктора неблагоприятного исхода при остром лейкозе.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Селективное обогащение определенных клеточных субпопуляций в процессе процедуры сепарации, нозологическая форма заболевания и тип используемого препарата Г-КСФ являются факторами, влияющими на субпопуляционный состав и цитокип-секреторную активность продукта сепарации у больных гемобласгозами при проведении АТГСК.

2. Регуляторные Т-клетки не подвержены селективному накоплению в процессе процедуры сепарации, характеризуются наиболее высоким содержанием в образцах сепаратов больных ОЛ, у больных лимфомами и ММ их количество увеличивается при использовании для мобилизации ПЭГ-Г-КСФ. Более высокий уровень С04+Р0ХРЗ+ Трег и незрелых миелоидных клеток в продукте сепарации больных гемобластозами ассоциирован с меньшим количеством СЭ1б+ "МК-клеток, СОЗ+, СЭ4+ Т-лимфоцитов и С014+НЬА-0Я+ моноцитов.

3. Развитие рецидива основного заболевания после АТГСК ассоциировано со значимо более высоким количеством С019+ В-клегок в продуктах афереза у больных ММ и более высоким относительным количеством СЭ8+ клеток памяти в продуктах сепарации у больных ОЛ.

Апробация работы

Материалы диссертации были представлены и обсуждены на конференциях студентов и молодых ученых «Авиценна» (г. Новосибирск, 2006-2008 гг.), V Международном симпозиуме, посвященном памяти Р. М. Горбачевой «Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей и взрослых» (Санкт-Петербург, 2011 г.), Всероссийской научно-практической конференции «Дни иммунологии в Сибири» (Иркутск, 2012 г.), Конгрессе гематологов России (Москва, 2012 г.).

Диссертационная работа апробирована на расширенном заседании сотрудников кафедры терапии, гематологии и трансфузиологии ФПК и ППв, кафедры акушерства и гинекологии, кафедры педиатрии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России 30 июня 2014 г.

Внедрение результатов работы

Исследование относительного содержания С019+ В-клеток в продуктах афереза больных множественной миеломой внедрено в практику работы отделения гематологии с блоком трансплантации костного мозга (ТКМ) клиники

иммунопатологии ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии». Материалы диссертации получили отражение в учебном процессе на кафедре терапии, гематологии и трансфузиологии ФПК и ППВ ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России.

Диссертация выполнена в соответствии с планом НИР ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России (номер государственной регистрации 01200952283).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 6 статей в научных журналах и изданиях, которые включены в перечень российских рецензируемых научных журналов для публикаций материалов диссертации.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Полученные результаты проиллюстрированы с помощью 24 таблиц и 11 рисунков. Указатель литературы представлен 174 источниками, из которых 166 - зарубежных авторов.

Личный вклад автора

Весь материал, представленный в диссертации, собран, обработан, проанализирован и интерпретирован лично автором.

ГЛАВА 1 КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

ПРОЦЕДУРЫ СЕПАРАЦИИ И КЛЕТОК ПРОДУКТА АФЕРЕЗА

(ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Краткие сведения о показаниях к аутологичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток и сё эффективности при гемобластозах

ВДХТ с АТГСК используются в лечении следующих вариантов гемобластозов: неходжкинские лимфомы (ГТХЛ), ЛХ, ММ, острый миелобластпый лейкоз (ОМЛ) и острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ).

В настоящее время в Европе и мире 99 % АТГСК проводятся с использованием мобилизованных и сепарированных ГСК [111; 112]. В 90% случаев показанием для АТГСК являются лимфопролиферативные заболевания (НХЛ, ЛХ и ММ), доля ОЛ - около 6 % [58; 112].

На долю НХЛ приходится около 40 % всех АТГСК. Трансплантация при лимфомах показана при наличии неблагоприятных факторов прогноза: величина международного прогностического индекса (IPI, international prognostic index) > 1, большой объем опухолевой массы, число курсов химиотерапии (XT), гистологический вариант НХЛ [1]. ВДХТ с АТГСК является стандартом лечения пациентов моложе 60 лет с химиочувствительпым рецидивом или первично резистентным течением агрессивных НХЛ. В нескольких исследованиях показано увеличение показателей выживаемости при использовании АТГСК в качестве I линии терапии диффузной крупноклеточной В-клеточпой лимфомы (ДКБКЛ), однако в ряде других пе выявлено различий с контрольной группой [16]. По данным Центра международных исследований по трансплантации крови и костного мозга (CIBMTR), 3-летняя общая выживаемость 10 490 пациентов с ДБККЛ, перенесших АТГСК в 2001-2011 гг., составила 62 % ± 1 % и 40 % ± 2 % для химиочувствительного и химиорезистентного варианта, соответственно [111].

Современная XT и лучевая терапия позволяют добиться излечения примерно 80% случаев ЛХ [1; 16]. ВДХТ с АТГСК показана при II1-IV стадии

болезни, отсутствии ремиссии, развитии рецидива или первичпой резистентности. 3-летняя общая выживаемость, в зависимости от течения болезни и чувствительности к XT, составляет 55-85 % [1; 111].

Несмотря па успехи современной медицины, ММ остается инкурабельпым заболеванием. Около 40 % всех АТГСК проводится больным ММ, при отсутствии противопоказаний и активном течении болезни независимо от стадии. При этом не во всех исследованиях показано значимое улучшение показателей выживаемости. По данным CIBMTR, 3-летняя общая выживаемость составляет 72 %± 1 % [108; 111].

АТГСК при OMJI рассматривается как этап консолидации в терапии заболевания с помощью проведения ВДХТ. При этом до настоящего времени не выявлено значимого улучшения общей выживаемости по сравнению со стандартной химиотерапией, однако в исследовании Европейской организации по исследованию и лечению рака показано увеличение безрецидивной выживаемости [70; 174]. При выполнении АТГСК в полную ремиссию 3-летняя общая выживаемость составляет 35-55 % [1; 70].

Применение АТГСК для консолидации ремиссии при OJTJI оправдано в случае Т-клеточных OJIJT [7]. 3-летняя общая выживаемость составляет 33-44 % [!]•

1.2 Иммунологические аспекты мобилизации и сепарации гемоноэтических стволовых клеток

Для аутологичной трансплантации ГСК получают из крови больного путем аппаратного лейкофереза после мобилизации ГСК в ПК с помощью химиотерапевтических препаратов и/или гранулоцитарного

колониестимулирующего фактора (Г-КСФ).

Использование периферических гемопоэтических стволовых клеток по сравнению с костным мозгом, помимо удобства для пациентов и медперсонала, имеет ряд таких преимуществ, как более быстрое восстановление всех ростков

гемопоэза и уменьшение контаминации трансплантата малигнизированпыми клетками.

Мобилизацию аутологичпых ГСК обычно проводят с использованием протоколов химиотерапии, вызывающих выраженную кратковременную цитопению, за счет чего происходит стимуляция гемопоэза. Механизмы действия Г-КСФ, вводимого в период цитопепии после окончания ХТ, в настоящее время продолжают изучаться. Помимо опосредованного действия через активацию гранулоцитов, сообщается о влиянии препаратов Г-КСФ па функциональную активность Т-клеток, экспансию Трег и дендритных клеток (ДК) [20; 23; 69; 136].

Современные клеточные фракционаторы позволяют эффективно сепарировать и концентрировать мопопуклеарные клетки (МНК), среди которых в дальнейшем оценивается доля СЭ34+ ГСК. Продукт сепарации ГСК, по сравнению с костным мозгом (КМ), содержит большое количество Т-лимофцитов, моноцитов и ДК [1, 20]. Ка11раши1а с соавт. продемонстрировали влияние марки аппарата для лейкофереза на показатели выживаемости 127 больных НХЛ, при проведении многофакториого анализа было показано прогностическое значение большего количества сепарированных лимфоцитов [71].

Таким образом, все перечисленные этапы, помимо мобилизации собственно ГСК, неизбежно оказывают значительное влияние на субпопуляционпый состав и функциональную активность иммупокомпетептных клеток ПК, часть из которых в дальнейшем будет изолирована, криоконсервирована и реинфузирована совместно с С034+клетками.

1.2.1 Влияние Г-КСФ на иммунокомнетентные клетки и их функциональную активность

Г-КСФ человека является основным цитокипом, регулирующим созревание, пролиферацию и функциональную активность нейтрофилов всех стадий. В организме секретируется моноцитами, макрофагами, стромальными клетками КМ, фибробластами и эндотелиальными клетками, выраженное усиление его

продукции наблюдается при инфекциях и цитопении. Высокоафинпые рецепторы к Г-КСФ экспрессируются на миелоидных предшественниках и зрелых нейтрофилах, с наибольшей частотой на клетках поздних стадий созреваиия. По некоторым данным, наиболее чувствительны к его действию комиттировапные предшественники нейтрофилов (миелобласты, промиелоциты и миелоциты) [110].

Основной механизм мобилизации ГСК основан на активации граиулоцигов, вырабатывающих ферменты-протеазы (эластаза, матрикспая металлопротеипаза-2 и -9, катепсин G и др.), повреждающие молекулы адгезии и хемокиновые рецепторы гемопоэтических предшественников (c-kit, VCAM-1, VLA-4, CXCR4, SDF-1) [106; 163]. Вследствие этого нарушается связь ГСК со стромой костного мозга и усиление их выхода в периферическое русло, повреждение хемокиновых рецепторов замедляет обратный хоминг в КМ. При этом мобилизуются в основном С034+-клетки, находящиеся в G0/Gi фазе клеточного цикла (покоящиеся), т.к. клетки в S,G2/M-c})a3e клеточного цикла значительно интенсивнее экспрессируют молекулы адгезии [52; 171].

Кроме своей основной функции - увеличение количества и функциональной активности зрелых нейтрофилов, Г-КСФ может оказывать иммупомодулирующее действие, реализующееся через моноциты, которые могут экспрессировать рецепторы к этому цитокииу [25; 132]. Обработанные Г-КСФ моноциты ш vivo и in vitro в ответ на стимуляцию менее интенсивно продуцируют провоспалительпые цитокины ИЛ-12 и ФНО-а, но усиливают продукцию противовоспалительного и иммуиосупрессорного ИЛ-10 [25; 105]. Также под воздействием Г-КСФ моноциты способны дифференцироваться в толерогенные плазмоцитоидные дендритные клетки [13; 87; 132; 133]. Вследствие этого снижается пролиферативная и функциональная активность Т-лимфоцитов, в особенности продукция интерферона-у (IFN-y), однако возможно усиление иммунного ответа, опосредуемого Т-хелперами 2-го типа и увеличение продукции ими ИЛ-4 и ИЛ-10 [25; 29; 147; 156]. Schlahsa с соавт. описали угнетение противоопухолевой активности NK-клеток здоровых доноров ГСК после мобилизации Г-КСФ [138]. Bunse с соавт., помимо снижения секреции

IFN-y, также обнаружили уменьшение продукции гранзима В и экспрессии CD 107а цитотоксическими CD8+ Т-клетками доноров ГСК после мобилизации Г-КСФ, при этом количество клеток изменено не было [29]. Мобилизация препаратами Г-КСФ также может приводить к накоплению в ПК различных субпопуляций функционально активных регуляторных Т-клеток [100; 136; 161].

Влияние Г-КСФ на иммунокомпетептные клетки in vivo может зависеть от многих факторов. В эксперименте Morris с соавт. на мышиной модели аллогенпой ТГСК при введении различных препаратов Г-КСФ с целью ускорения выхода из нейтропении была показана активация NKT-клеток, увеличение экспансии цитотоксических CD8+ Т-клеток и концентрации IFN-y в сыворотке [99]. В результате ретроспективного анализа выживаемости у 1 887 больных OJI после аллогенной ТГСК, в группе пациентов, получавших Г-КСФ после трансплантации, описано увеличение частоты реакции «трансплантат-против-хозяина» (РТПХ) и показателей смертности, не связанной с рецидивом [129]. Однако в другом метаанализе, включавшем 2 719 пациентов, ухудшения показателей выживаемости при использовании Г-КСФ с целью ускорения выхода из нейтропении выявлено не было [73].

1.2.2 Биологические эффекты препаратов Г-КСФ в зависимости от лекарственной формы

Присоединение полиэтилеигликоля к рекомбииантпому Г-КСФ (пэгилирование) приводит к образованию пэгилированного Г-КСФ (ПЭГ-Г-КСФ). Вследствие этой процедуры молекула цитокина увеличивается до такой степени, что значительно затрудняется ее выведение посредством почечной фильтрации, и практически всё введенное количество препарата остается доступным для связи с рецепторами па клетках-мишенях. Этим достигается уменьшение количества инъекций до одной па курс мобилизации, а также постоянное плавное изменение концентрации Г-КСФ в циркуляции, снижающееся по мере увеличения

стимулируемых пейтрофилов [172]. Действие обеих лекарственных форм реализуется через один рецептор [77].

В настоящее время имеется ограниченное число работ, посвященных количественным и функциональным различиям клеточных субпопуляций, циркулирующих в периферическом русле или мобилизуемых с помощью разных препаратов Г-КСФ.

Bruns с соавт. при анализе полимеразиой цепной реакции (ПЦР) образцов ПК 16 больных ММ выявили, что CD34+ клетки, мобилизованные с помощью ПЭГ-Г-КСФ, более высоко экспрессировали ключевые регуляторпые гены, характерные для ранних стадий гемопоэза. Среди CD34+ клеток было обнаружено большее количество ГСК и миелоидных предшественников и меньшее — мегакариоцитарных и эритроидных предшественников, что не сказывалось на сроках восстановления тромбоцитопоэза и уровне гемоглобина после АТГСК. Также и CD34+ клетки, и ГСК, мобилизованные с помощью ПЭГ-Г-КСФ, отличались значимым увеличением показателей клеточного цикла [27].

Единичные имеющиеся данные о влиянии ПЭГ-Г-КСФ на экспансию Трег по сравнению со свободной формой Г-КСФ противоречивы. Morris с соавт. на мышиной модели аллогепной ТГСК показано, что мобилизация донорских ГСК с помощью ПЭГ-Г-КСФ в дальнейшем эффективнее предотвращает развитие РТПХ за счет более интенсивной генерации Трег, продуцирующих супрессориый ИЛ-10 [100]. Однако в исследовании Bonanno с соавт. не выявлено увеличения CD4+FOXP3+ Трег при использовании ПЭГ-Г-КСФ у онкогинекологических больных, зато показано увеличенное по сравнению с Г-КСФ количество циркулирующих предшественников ДК, при созревании in vitro эффективно стимулирующих пролиферацию Т-клегок, а также усиление продукции моноцитами ИЛ-12 [23].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Баторова, Дарья Сергеевна, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Волкова, М. А. Клиническая опкогематология: руководство для врачей / М. А. Волкова - М. : Медицина, 2007. - 1147 с.

2. Воробьев, А. И. Руководство по гематологии: в 3 т. / А. И. Воробьев. -3-е изд., перераб. и доп. - М. : Ыыодиамед, 2003. - Т. 2. - 280 с.

3. Поддубная, И. В. Диагностика и определение распространенности (стадировапие) пеходжкинских лимфом / И. В. Поддубная, Е. А. Дёмина // Практическая онкология. - 2004. - Т. 5, № 3 (19).-С. 176-184.

4. Козлов, В. А. Клеточные технологии: теоретические и прикладные аспекты: сб. науч. тр. / Под ред. В. А. Козлова, С. В. Сенникова, Е. Р. Черных, А.

A. Останина - Новосибирск: Наука. - 2009. - 300 с.

5. Пантелеев, А. В. Сравнение экспрессии ранних маркеров в пуповинпой крови и заготовках мобилизованной крови / А. В. Пантелеев, И. А. Воробьев // Цитология.-2012.-Т. 54, № 10.-С. 774-782.

6. Румянцев, А. Г. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей: руководство для врачей / А. Г. Румянцев, А. А. Масчан. - М. : МИА, 2003. -912с.

7. Савченко, В. Г. Программное лечение заболеваний системы крови /

B. Г. Савченко - М. : Практика, 2012. - 287 с.

8. Чиссов, В. И. Злокачественные новообразования в России в 2011 году (заболеваемость и смертность) / В. И. Чиссов, В. В. Старииский, Г. В. Петрова -М. : ФГБУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздрава России, 2013.-289 с.

9. Ai W.Z. Follicular lymphoma В cells induce the conversion of conventional CD4+ T cells to T regulatory cells / Ai W.Z., IIou J.Z., Zeiser R. [et al.] // Int J Cancer. -2009.-Vol. 124, № l.-P. 239-244.

10.Allavena, P. The role of chemokines and their receptors in tumor progression and invasion: potential new targets of biological therapy / P. Allavena, F. Marchesi, A. Mantovani // Current Cancer Therapy Reviews. - 2005. - Vol. 1, № 1. - P. 81-92.

11. Outcome in Hodgkin's lymphoma can be predicted from the presence of

accompanying cytotoxic and regulatory T cells / T. Alvaro, M. Lejeune, M. T. Salvadô, [et al.] // Clin Cancer Res. - 2005. - Vol. 11, № 4. - P. 1467-1473.

12.Appelbaum, P. R. Haematopoietic cell transplantation as immunotherapy / F. R. Appelbaum // Nature. - 2001. - Vol. 411.- P.385-389.

13.Granulocyte-colony stimulating factor mobilizes T helper 2-inducing dendritic cells / M. Arpinati, C. L. Green, S. Heimfeld [et al.] // Blood. - 2000. - Vol. 95, № 8. -P. 2484-2490.

14.CD4+CD25+FOXP3+ T regulatory cells reconstitute and accumulate in the bone marrow of patients with multiple myeloma following allogeneic stem cell transplantation / D. Atanackovic, Y. Cao, T. Luetkens [et al.] // Haematologica. - 2008. -Vol. 93, №3.-P. 423^430.

15.High CD8+ lymphocyte dose in autograft predicts early absolute lymphocyte count recovery after peripheral hematopoietic stem cell transplantation / E. I I. Atta, de A. M. Azevedo, A. Maiolino [et al.] // Am. J. Ilematol. - 2009. - Vol. 84, № 1. - P.21-28.

16-Ayala, E. Hematopoietic cell transplantation for lymphomas / E. Ayala, M. Tomblyn // Cancer Control. - 2011. - Vol. 18, № 4. - P. 246-257.

17. Intermediate-term hematopoietic stem cells with extended but time-limited reconstitution potential. / Benveniste P., Frelin C., Janmohamed S. [et al.] // Cell Stem Cell. - 2010. - Vol. 6, № 1. - P. 48-58.

18.In multiple myeloma, clonotypic B lymphocytes are detectable among CD 19+ peripheral blood cells expressing CD38, CD56, and monotypic Ig light chain / P. L. Bergsagel, A. M. Smith, A. Szczepek [et al.] // Blood. - 1995. - Vol. 85, № 2. - P. 436-447.

19. In vivo peripheral expansion of naive CD44CD25hiehFoxP3^ regulatory T cells in patients with multiple myeloma / M. Beyer, M. Kochanek, T. Giese [et al.] // Blood. -2006.-Vol. 107, № 10.-P. 3940-3949.

20.Randomized trial of bone marrow versus lenograstim-primed blood cell allogeneic transplantation in patients with early-stage leukemia: a report from the Société Française de Greffe de Moelle / D. Biaise, M. Kuentz, C. Fortanier [et al.] //

J Clin Oncol. - 2000. - Vol. 18, № 3. - P. 537-546.

21.Infused CD34+ccll dose, but not tumor cell content of peripheral blood progenitor cell grafts, predicts clinical outcome in patients with diffuse large B-cell lymphoma and follicular lymphoma grade 3 treated with high-dose therapy / A. K. Blystad, J. Delabie, S. Kvaloy [et al.J // Br J Haematol. - 2004. - Vol. 125. - P. 605612.

22.Patients mobilizing large numbers of CD34+ cells ('super mobilizers') have improved survival in autologous stem cell transplantation for lymphoid malignancies / B. J. Bolwell, B. Pohlman, L. Rybicki [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2007. -Vol. 40, № 5.-P. 437-441.

23.Effects of pegylated G-CSF on immune cell number and function in patients with gynecological malignancies / G. Bonanno, A. Procoli, A. Mariotti [et al.] // J Transi Med.-2010.-Vol. 8.-P. 114.

24.Lymphoid reconstitution after autologous PBSC transplantation with FACS-sorted CD34+ hematopoietic progenitors / C. Bomberger, M. Singh-Jairam, G. Rodey [et al.] // Blood. - 1998. - Vol. 91. - P. 2588-2600.

25.Human monocytes express functional receptors for granulocyte colony-stimulating factor that mediate suppression of monokines and interferon-gamma / E. M. Boneberg, L. Hareng, F. Gantner [et al.] // Blood. - 2000. - Vol. 95, № 1. - P. 270-276.

26.Quiescence, cycling, and turnover in the primitive hematopoietic stem cell compartment / G. B. Bradford, B. Williams, R. Rossi [et al.] // Exp Hematol. - 1997. -Vol. 25, №5.-P. 445-453.

27.Pegylated granulocyte colony-stimulating factor mobilizes CD34+ cells with different stem and progenitor subsets and distinct functional properties in comparison with unconjugated granulocyte colony-stimulating factor / I. Bruns, U. Steidl, J. C. Fischer [et al.] // Haematologica. - 2008. - Vol. 93, № 3. - P. 347-355.

28.Infusion of ex vivo expanded T regulatory cells in adults transplanted with umbilical cord blood: safety profile and detection kinetics / C. G. Brunstein, J. S. Miller, Q. Cao [et al.]//Blood.-2011.-Vol. 117,№3.-P. 1061-1070.

29.Impaired functionality of antiviral T cells in G-CSF mobilized stem cell donors: implications for the selection of CTL donor / C. E. Bunse, S. Borchers, P. R. Varanasi [et al.] // PLoS One. - 2013. - Vol. 8, № 12.

30.Occurrence and severity of adverse events after autologous hematopoietic progenitor cell infusion are related to the amount of granulocytes in the apheresis product / B. Calmels, C. Lemarie, B. Esterni [et al.] // Transfusion. -2007. - Vol. 47, № 7.-P. 1268-1275.

31.The role of CD19 and CD27 in the diagnosis of multiple myeloma by flow cytometry: a new statistical model / E. Cannizzo, G. Carulli, L. Del Vecchio [et al.] // Am J Clin Pathol. -2012. - Vol. 137, №3.-P. 377-386.

32.High numbers of tumor-infiltrating POXP3-positive regulatory T cells are associated with improved overall survival in follicular lymphoma / J. Carreras, A. Lopez-Guillermo, B. C. Fox [et al.] // Blood. - 2006. - Vol. 108, № 9. - P. 29572964.

33.In vivo proliferation and cell cycle kinetics of long-term self-renewing hematopoietic stem cells / S. H. Cheshier, S. J. Morrison, X. Liao, I. L. Weissman // Proc Natl Acad Sci USA.- 1999. - Vol. 96, № 6. - P. 3 120-3125.

34.Functional regulatory T cells are collected in stem cell autografts by mobilization with high-dose cyclophosphamide and granulocyte colony-stimulating factor/ M. Condomines, P. Quittet, Z. Y. Lu [et al.] // J Immunol. - 2006. - Vol. 176, № 11.-P. 6631-6639.

35.1nterleukin 1 as an autocrine growth factor for acute myeloid leukemia cells / F. Cozzolino, A. Rubartelli, D. Aldinucci [et al.] // Proc Natl Acad Sci USA.- 1989. -Vol. 86, № 7. - P. 2369-2373.

36.Infectious complications after autologous CD34-selected peripheral blood stem cell transplantation / F. Crippa, L. Holmberg, R. A. Carter [et al.J // Biol Blood Marrow Transplant. - 2002. - Vol. 8, № 5. - P. 281-289.

37. Crump, M. Management of Hodgkin lymphoma in relapse after autologous stem cell transplant / M. Crump // Hematology Am Soc Hematol Educ Program. - 2008. -P. 326-333.

38.CD34+-selected versus unmanipulated autologous stem cell transplantation in multiple myeloma: impact on dendritic and immune recovery and on complications due to infection / D. Damiani, R. Stocchi, P. Masolini [et al.] // Ann Oncol. - 2003. -Vol. 14, №3.-P. 475-480.

39.Reinfusion of autologous lymphocytes with granulocyte-macrophage colony-stimulating factor induces rapid recovery of CD4+ and CD8+ T cells after high-dose chemotherapy for metastatic breast cancer / G. C. de Gast, F. A. Vyth-Dreese, W. Nooijen [et al.] // J Clin Oncol. - 2002. - Vol. 20, № 1. - P. 58-64.

40. Autologous stem cell transplantation for autoimmunity induces immunologic self-tolerance by reprogramming autoreactive T cells and restoring the CD4+CD25+ immune regulatory network / I. de Kleer, B. Vastert, M. Klein [et al.] // Blood. - 2006. -Vol. 107.-P. 1696-1702.

41.Dendritic cells in autologous hematopoietic stem cell transplantation for diffuse large B-cell lymphoma: graft content and post transplant recovery predict survival / R. Dean, P. Masci, B. Pohlman, [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2005. -Vol. 36, № 12.-P. 1049-1052.

42.Demirer, T. Optimization of peripheral blood stem cell mobilization / T. Demirer, C. D. Buckner, W. I. Bensinger // Stem Cells. - 1996. - Vol. 14, № 1. -P. 106-116.

43.Subsets of CD34+ cells and rapid hematopoietic recovery after peripheral blood stem cell transplantation / M. W. Dercksen, S. Rodenhuis, M. K. Dirkson [et al.] //J Clin Oncol. - 1995,-Vol. 13.-P. 1922-1932.

44.Tregs prevent GVTID and promote immune reconstitution in HLA-haploidentical transplantation / M. Di Ianni, F. Falzetti, A. Carotti [et al.] // Blood. -2011.-Vol. 117.-P. 3921-3928.

45.Poor lymphocyte recovery following CD34-selected autologous peripheral blood stem cell transplantation for non-Hodgkin's lymphoma / M. Diviné, D. Boutolleau, M.-Il. Delfau-Larue [et al.] // Br J Haematol. - 1999. - Vol. 105, № 2. -P. 349-360.

46.The spontaneous expression of interleukin-1 beta and interleukin-6 is

associated with spontaneous expression of AP-1 and NF-kappa B transcription factor in acute myeloblasts leukemia cells / W. H. Dokter, L. Tuyt, S. J. Sierdsema [et al.| // Leukemia. - 1995. - Vol. 9, № 3. - P. 425-432.

47.Autografting of highly purified peripheral blood progenitor cells following myeloablative therapy in patients with lymphoma: a prospective study of the long-term effects on tumor eradication, reconstitution of hematopoiesis and immune recovery / P. Dreger, K. Viehmann, N. von Neuhoff [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 1999. -Vol. 24, №2.-P. 153-161.

48.CD4(+)CD25(-f-) regulatory T cells preserve graft-versus-tumor activity while inhibiting grafl-versus-host disease after bone marrow transplantation / M. Edinger, P. Hoffmann, J. Ermann [et al.] // Nat Med. - 2003. - Vol. 9. - P. 1144-1150.

49.Tumour cell generation of inducible regulatory T-cells in multiple myeloma is contact-dependent and antigen-presenting cell-independent / S. Feyler, G. B. Scott,

C. Parrish [et al.] // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7, № 5.

50.Differential expression of novel potential regulators in hematopoietic stem cells / E. C. Forsberg, S. S. Prohaska, S. Katzman [et al.] // PLoS Genet. - 2005. -Vol 1, № 3:e28.

51.Friedman, J. Autologous CD34+ enriched peripheral blood progenitor cell (PBPC) transplantation is associated with higher morbidity in patients with lymphoma when compared to unmanipulated PBPC transplantation / J. Friedman, FI. M. Lazarus, O. N. Koc // Bone Marrow Transplant. - 2000. - Vol. 26, № 8. - P. 831-836.

52.Fruehauf S. Delineation of cell cycle state and correlation to adhesion molecule expression of human CD34+ cells from steady-state bone marrow and peripheral blood mobilized following G-CSF-supported chemotherapy / Fruehauf S., Veldwijk M.R., Kramer A., et al. // Stem Cells.- 1998.- Vol. 16, N 4,- P. 271-279.

53.Gabrilovich, D. 1. Coordinated regulation of myeloid cells by tumours /

D. I. Gabrilovich, S. Ostrand-Rosenberg, V. Bronte // Nat Rev Immunol. - 2012. - Vol. 12, №4.-P. 253-268.

54.Reconstitution of regulatory T cells after autologous transplantation in multiple myeloma / P. Ganeshan, R. Gupta, M. Flakim [et al.] // Int J Hematol. - 2011. -

Vol. 94. - P. 578-579.

55.The frequency of T regulatory cells modulates the survival of multiple myeloma patients: detailed characterisation of immune status in multiple myeloma / K. Giannopoulos, W. Kaminska, I. Plus [et al.] // Br J Cancer. - 2012. - Vol. 106, № 3. -P. 546-552

56.Higher incidence of relapse in patients with acute myelocytic leukemia infused with higher doses of CD34+ cells from leukapheresis products autografted during the first remission / N. C. Gorin, M. Labopin, J. Reiffers [et al.] // Blood. - 2010. -Vol. 116,№ 17.-P. 3157-3162.

57.Correlation of early lymphocyte recovery and progression-free survival after autologous stem-cell transplant in patients with Ilodgkin's and non-IIodgkin's lymphoma / L. N. Gordan, M. W. Surgrue, J. W. Lynch [et al.] // Bone Marrow Transplant.-2003.-Vol. 31.-P. 1009-1013.

58.Quantitative and qualitative differences in use and trends of hematopoietic stem cell transplantation: a Global Observational Study / A. Gratwohl, II. Baldomero, M. Gratwohl [et al.] // Haematologica. - 2013. - Vol. 98, № 8. - P. 1282-1290.

59. Expression of FOXP3, CD68, and CD20 at diagnosis in the mMicroenvironment of classical Hodgkin lymphoma is predictive of outcome / P. Greaves, A. Clear, R. Coutinho [et al.] // J Clin Oncol. - 2012. -http://jco.ascopubs.org/content/early/2012/10/03/JC0.2011.39.9881 .long

60.Hassuneh, M. R. Evidence for the participation of interleukin-2 (IL-2) and IL-4 in the regulation of autonomous growth and tumorigenesis of transformed cells of lymphoid origin / M. R. I-Iassuneh, P. S. Nagarkatti, M. Nagarkatti // Blood. - 1997. -Vol. 89, №2.-P. 610-620.

61.IIayat, M. A. Tumor Dormancy, Quiescence, and Senescence, Volume 1: Aging, Cancer, and Noncancer Pathologies / M. A. Hayat. - Springer Science & Business Media, 2013. - 348 p.

62.Depletion of CD4+ CD25+ regulatory T cells inhibits local tumour growth in a mouse model of B cell lymphoma / I. Heier, P. O. Hofgaard, P. Brandtzaeg [et al.] // Clin Exp Immunol.-2008.-Vol. 152.-P. 381-387.

63.Follicular lymphoma intratumoral CD4+CD25+GITR+ regulatory T cells potently suppress CD3/CD28-costimulated autologous and allogeneic CD8+CD25" and CD4+CD25"T cells / S. P. Milchey, A. De, L. M. Rimsza [et al.] // J Immunol. - 2007. -Vol. 178, № 7. - P. 4051-4061.

64.Higher infused lymphocyte dose predicts higher lymphocyte recovery, which in turn, predicts superior overall survival following autologous hematopoietic stem cell transplantation for multiple myeloma / D. K. Hiwase, S. Hiwase, M. Bailey [et al.] // Biol Blood Marrow Transplant.-2008.-Vol. 14, № l.-P. 116-124.

65.1-Iogan, W. J. Therapeutic applications of non-myeloablative hematopoietic stem cell transplantation in malignant disease / W. J. Ilogan, R. Storb // Immunol Res. -2003.-Vol. 28.-P. 1-11.

66.Increased incidence of cytomegalovirus disease after autologous CD34-selectcd peripheral blood stem cell transplantation / L. Holmberg, M. Boeckh, II. I-Iooper [et al.] // Blood. - 1999. - Vol. 94. - P. 4029-4035.

67.Iscove, N. N. Hematopoietic stem cells expand during serial transplantation in vivo without apparent exhaustion / N. N. Iscove, K. Nawa // Curr Biol. - 1997. - Vol. 7, № 10.-P. 805-808.

68.CD19 expression and growth inhibition of tumours in human multiple myeloma / II. Ishikawa, N. Tsuyama, M. S. Mahmoud [et al.] // Leuk Lymphoma. -2002.-Vol. 43, № 3. - P. 613-616.

69.Jun, II. X. In vivo induction of T-cell hyporesponsiveness and alteration of immunological cells of bone marrow grafts using granulocyte colony-stimulating factor / H. X. Jun, C. Y. Jun, Z. X. Yu // Haematologica. - 2004. - Vol. 89, № 12. - P. 15171524.

70.Allogeneic hematopoietic cell transplant for acute myeloid leukemia: Current state in 2013 and future directions / A. S. Kanate, M. C. Pasquini, P. N. Ilari [et al.] // World J Stem Cells.-2014.-Vol. 6, №2.-P. 69-81.

71.Apheresis instrument settings influence infused absolute lymphocyte count affecting survival following autologous peripheral hematopoietic stem cell transplantation in non-Hodgkin's lymphoma: the need to optimize instrument setting

and define a lymphocyte collection target / R. Katipamula, L. F. Porrata, D. A. Gastineau [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2006. - Vol. 37, № 9. - P. 811817.

72.The ratio of FOXP3+ regulatory T cells to granzyme B+ cytotoxic T/NK cells predicts prognosis in classical Hodgkin lymphoma and is independent of bcl-2 and MAL expression / T. W. Kelley, B. Pohlman, P. Elson [et al.] //Am J Clin Pathol. -2007. - Vol. 128, № 6. - P. 958-965.

73. Impact of posttransplantation G-CSF on outcomes of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation / I-I. J. Khoury, F. R. Jr Loberiza, O. Ringden [et al.] // Blood. -2006.-Vol. 107, №4.-P. 1712-1716.

74.Non-CD34+ cells, especially CD8+ cytotoxic T cells and CD56+natural killer cells, rather than CD34 cells, predict early engraftment and better transplantation outcomes in patients with hematologic malignancies after allogeneic peripheral stem cell transplantation / D. G. Kim, D. I. Won, N. Y. Lee [et al.] // Biol Blood Marrow Transplant. -2006. - Vol.12, № 7. - P. 719-728.

75.Lymphocyte recovery as a positive predictor of prolonged survival after autologous peripheral blood stem cell transplantation in T-cell non-Hodgkin's lymphoma / II. Kim, I I. J. Sohn, S. E. Kim [ct al.] // Bone Marrow Transplant. - 2004. -Vol. 34.-P. 43-49.

76.Relationship of CD34 cell dose to early and late hematopoiesis following autologous peripheral-blood stem-cell transplantation / J. E. Kiss, W. B. Rybka, A. Winkelsein [et al.]//Bone Marrow Transplant. - 1997.-Vol. 19.-P. 303-310.

77.Evidence that the granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) receptor plays a role in the pharmacokinetics of G-CSF and PegG-CSF using a G-CSF-R KO model / A. C. Kotto-Kome, S. E. Fox, W. Lu [et al.] // Pharmacol Res. - 2004. -Vol. 50, № 1.- 55-58.

78.Kupsa, T. The role of cytokines in acute myeloid leukemia: a sistematic review / T. Kupsa, J. M. Horacek, L. Jebavy // Biomed Pap Med Fac Univ Palaclcy Olomouc Czech Repub. - 2012. - Vol. 156, №4.-P. 291-301.

79.Number of CD4+ cells and location of forkhead box protein P3-positive cells

in diagnostic follicular lymphoma tissue microarrays correlates with outcome / A. M. Lee, A. J. Clear, M. Calaminici [et al.] // J Clin Oncol. - 2006. - Vol. 24, № 31. -P. 5052-5059.

80.CD34 expression is associated with poor clinical outcome in patients with acute promyelocytic leukemia / J. J. Lee, D. Cho, I. J. Chung [et al.J // Am J Hematol. -2003.-Vol. 73, №3,-P. 149-153.

81.Infused CD34+cell dose predicts long-term survival in acute myelogenous leukemia patients who received allogeneic bone marrow transplantation from matched sibling donors in the first complete remission / S. H. Lee, M. H. Lee, J. H. Lee [et al.] // Biol Blood Marrow Transplant. - 2005. - Vol. 11. - P. 122-128.

82.Immunosuppressive CD14+IILA-DR(low)/" monocytes in B-cell non-Hodgkin lymphoma / Y. Lin, M. P. Gustafson, P. A. Bulur [et al.] // Blood. - 2011. - Vol. 117.— P. 872-881.

83.Allogeneic and autologous transplantation for haematological diseases, solid tumours and immune disorders: current practice in Europe 2009 / P. Ljungman, M. Bregni, M. Brune [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2010. - Vol. 45, № 2. - P. 219234.

84.Allogeneic and autologous transplantation for hematological diseases, solid tumours and immune disorders: definitions and current practice in Europe / P. Ljungman, A. Urbano-Ispizua, M. Cavazzana-Calvo [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2006. - Vol. 37, № 5. _ p. 439^149.

85.High frequencies of CD62L+ naive regulatory T cells in allografts are associated with a low risk of acute graii-\>e/\yz/s-host disease following unmanipulated allogeneic haematopoietic stem cell transplantation / S.-Y. Lu, K.-Y. Liu, D.-II. Liu [et al.]//Clin Exper Immunol.-2011.-Vol. 165.-P. 264-277.

86.Frequency of CD4(+)CD25(hi)FOXP3(+) regulatory T cells has diagnostic and prognostic value as a biomarker for acute graft-versus-host-disease / J. M. Magenau, X. Qin, I. Tawara [et al.] // Biol Blood Marrow Transplant. - 2010. -Vol. 16, №7.-P. 907-914.

87. Successful granulocyte-colony stimulating factor treatment of Crohn's disease

is associated with the appearance of circulating inteiieukin-10-producing T cells and increased lamina propria plasmacytoid dendritic cells / P. J. Mannon, F. Leon, I. J. Fuss [et al.] // Clin Exp Immunol. - 2009. - Vol. 155, № 3. - P. 447-456.

88.Altered regulatory T cell homeostasis in patients with CD4f lymphopenia following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation / K. Matsuoka, I I. T. Kim, S. McDonough [et al.] // J Clin Invest. - 2010. - Vol. 120, № 5. - P. 1479-1493.

89.Immune mobilization of autologous blood progenitor cells: direct influence on the cellular subsets collected / K. R. Meehan, L. Talebian, J. Wu [et al.] // Cytotherapy. -2010.-Vol. 12, №8.-P. 1013-1021.

90.Cytopenia and leukocyte recovery shape cytokine fluctuations after myeloablative allogeneic hematopoietic stem cell transplantation / J. J. Melenhorst, X. Tian, D. Xu [et al.] // Haematologica. - 2012. - Vol. 97, № 6. - P. 867-873.

91.Factors which predict unsuccessful mobilisation of peripheral blood progenitor cells following G-CSF alone in patients with non-Hodgldn's lymphoma / I.N. Micallef, J. Apostolidis, A. Z. Rohatiner [et al.] // Hematol J. - 2000. - Vol. 1, №6.-P. 367-373.

92.Reconstitution of FOXP3+ regulatory T cells (Tregs) after CD25-depleted allotransplantation in elderly patients and association with acute graft-versus-host disease / S. Mielke, K. Rezvani, B. N. Savani [et al.] // Blood. - 2007. - Vol. 110, № 5. -P. 1689-1697.

93.Adverse events after infusions of cryopreserved hematopoietic stem cells depend on non-mononuclear cells in the infused suspension and patient age /

G. Milone, S. Mercurio, A. Strano [et al.] // Cytotherapy. -2007. - Vol. 9, № 4. -P. 348-355.

94. Local and systemic induction of CD4*CD25+ regulatory T-cell population by non-Hodgkin lymphoma / S. Mittal, N. A. Marshall, L. Duncan [et al.] // Blood. - 2008. -Vol. 111, № 11. - P. 5359-5370.

95.Miyamoto, T. Early viral complications following CD34-selected autologous peripheral blood stem cell transplantation for non-PIodgkin's lymphoma / T. Miyamoto,

H. Gondo, Y. Miyoshi // Br J Haematol. - 1998. - Vol. 100. - P. 348-350.

96.Myeloid-derived suppressor cells in cancer patients: a clinical perspective / A. J. Montero, C. M. Diaz-Montero, C. E. Kyriakopoulos [et al.] // J Immunother. -2012.-Vol. 35, №2.-P. 107-115.

97.1nterleukin-l alpha as an autocrine growth factor for acute lymphoblastic leukaemia cells / N. Mori, F. Shirakawa, S. Murakami [et al.] // Br J Haematol. - 1994. -Vol. 86, №2. -P. 386-388.

98.Morris, E. S. Stem cell mobilization with G-CSF analogs: a rational approach to separate GVHD and GVL? / E. S. Morris, K. P. MacDonald, G. R. Hill // Blood. -2006. - Vol. 107, № 9. - P. 3430-3435.

99. Induction of natural killer T cell-dependent alloreactivity by administration of granulocyte colony-stimulating factor after bone marrow transplantation / E. S. Morris, K. P. MacDonald, R. D. Kuns [et al.] // Nat Med. - 2009. - Vol. 15, № 4. - P. 436-441.

100. Donor treatment with pegylated G-CSF augments the generation of IL-10-producing regulatory T cells and promotes transplantation tolerance / E. S. Morris, K. P. MacDonald, V. Rowe [et al.] // Blood. - 2004. - Vol. 103, № 9. - P. 3573-3581.

101. Mougiakakos D. Regulatory T cells in cancer / Mougiakakos D., Choudhury A., Lladser A., Kiessling R., Johansson C.C. // Adv Cancer Res.- 2010.- Vol.107.- 57117.

102. Increased T regulatory cells are associated with adverse clinical features and predict progression in multiple myeloma / K. R. Muthu Raja, L. Rihova, L. Zahradova [et al.] //PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7, № 10.-P. 1-11.

103. Cryptosporidiosis after CD34-selected autologous peripheral blood stem cell transplantation / D. Nachbaur, G. Kropshofer, FI. Feichtinger [et al.] // Bone Marrow Transplant.-1997.-Vol. 19.-P. 1261-1263.

104. Increased frequencies of CD4+CD25hlgh Tregs correlate with disease relapse after allogeneic stem cell transplantation for chronic myeloid leukemia / E. Nadal, M. Garin, J. Kaeda [et al.] // Leukemia. - 2007. - Vol. 21. - P. 472^179.

105. G-CSF reduces IFN-gamma and IL-4 production by T cells after allogeneic stimulation by indirectly modulating monocyte function / Y. Nawa, T. Teshima, K. Sunami [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2000. - Vol. 25, № 10. - P. 1035-

106. Nervi, В. Cytokines and hematopoietic stem cell mobilization / B. Nervi, D. C. Link, J. F. Di Persio // J Cell Biochem. - 2006. - Vol. 99, № 3. - P. 690-705.

107. Prognostic analysis of early lymphocyte recovery in patients with advanced breast cancer receiving high-dose chemotherapy with an autologous hematopoietic progenitor cell transplant / Y. Nieto, E. J. Shpall, I. K. McNiece [et al.] // Clin Can Res. - 2004. - Vol. 10. - P. 5076-5086.

108. Role of reduced intensity conditioning in allogeneic hematopoietic cell transplantation for patients with multiple myeloma / T. Nishihori, M. A. Kharfan-Dabaja, J. L. Ochoa-Bayona fet al.] // Ilematol Oncol Stem Cell Ther. - 2011. - Vol. 4, № l.-P. 1-9.

109. The graft content of donor T cells expressing TCR+ and CD4+foxp3+ predicts the risk of acute graft versus host disease after transplantation of allogeneic peripheral blood stem cells from unrelated donors / C. Pabst, PI. Schirutschke, G. Ehninger [et al.] // Clin Cancer Res. - 2007. - Vol. 13. - P. 2916-2922.

110. Panopoulos, A. D. Granulocyte colony-stimulating factor: molecular mechanisms of action during steady state and 'emergency' hematopoiesis / A. D. Panopoulos, S. S. Watowich // Cytokine. - 2008. - Vol. 42, № 3. - P. 277-288.

111. Pasquini, M. C. Current use and outcome of hematopoietic stem cell transplantation: CIBMTR summary slides, 2013 [Электронный ресурс] / M. С. Pasquini, Z. Wang // Режим доступа: http://www.cibmtr.org

112. Hematopoietic SCT in Europe: data and trends in 2011 / J. R. Passweg, PI. Baldomero, M. Bregni [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2013. - Vol. 48, № 9. -P. 1161-1167.

113. Lymphoid reconstitution after allogeneic stem cell transplantation for hematologic malignancies / Z. S. Pavletic, S. S. Joshi, S. J. Pirruccello [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 1998. - Vol. 21. - P. 33-41.

114. Pecora, A. Impact of stem cell dose on hematopoietic recovery in autologous blood stem cell recipients / A. Pecora // Bone Marrow Transplant. - 1999. -Vol. 23, Suppl. 2. - S7-S12.

115. Re-infused lymphocyte dose does not influence disease control following upfront autologous stem cell transplantation for multiple myeloma / L. A. Percy, S. E. Moore, W. Qian [et al.] // Br J Haematol. - 2012. - Vol. 157, № 4. - P. 494^196.

116. Impact of CD34+ cell dose on the outcome of patients undergoing reduced-intensity conditioning allogeneic peripheral blood stem cell transplantation / J. A. Perez-Simon, M. Diez-Campelo, R. Martine [et al.] //Blood. - 2003.-Vol. 102. - P. 1108— 1113.

117. Re-infused autologous graft natural killer cells correlates with absolute lymphocyte count recovery after autologous stem cell transplantation / L. F. Porrata, D. A. Gastineau, D. Padley [et al.] // Leuk Lymphoma. - 2003. - Vol. 44, № 6. - P. 997-1000.

118. The dose of infused lymphocytes in the autograft directly correlates with clinical outcome after autologous peripheral blood hematopoietic stem cell transplantation in multiple myeloma / L. F. Porrata, M. A. Gertz, S. M. Geyer [et al.] // Leukemia.-2004.-Vol. 18.-P. 1085-1092.

119. Day 15 peripheral blood lymphocyte/monocyte ratio post-autologous peripheral hematopoietic stem cell transplantation and survival in diffuse large B-cell lymphoma / L. F. Porrata, D. J. Inwards, S. M. Ansell [et al.J // J Stem Cell Res Ther. -2011.-P. 100-103.

120. Interleukin-15 affects patient survival through natural killer cell recovery after autologous hematopoietic stem cell transplantation for non-FIodgkin lymphomas / L. F. Porrata, D. J. Inwards, I. N. Micallef [et al.] // Clin Dev Immunol. - 2010. -P. 914-945.

121. Infused peripheral blood autograft absolute lymphocyte count correlates with day 15 absolute lymphocyte count and clinical outcome after autologous peripheral hematopoietic stem cell transplantation in non-FIodgkin's lymphoma / L. F. Porrata, M. R. Litzow, D. J. Inwards [et al.] // Bone Marrow Transplant. - 2004. - Vol. 33, № 3. -P. 291-298.

122. Porrata, L. F. Autograft mediated adoptive immunotherapy of cancer in the context of autologous stem cell transplantation / L. F. Porrata, S. N. Markovic // World

J Clin Oncol.-2010.-Vol. 1, № 1. - P. 29-34.

123. Tumor necrosis factor-alpha-induced proliferation requires synthesis of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor / PI. Quentmeier, W. G. Dirks, D. Fleckenstein [et al.] // Exp Ilematol. - 2000. - Vol. 28, № 9. - P. 1008-1015.

124. Rapid immune recovery and graft-versus-host-disease-like engraftment syndrome following adoptive transfer of costimulated autologous T cells / A. P. Rapoport, E. A. Stadtmauer, N. Aqui [et al.] // Clin Cancer Res. - 2009. - Vol. 15. - P. 4499-4507.

125. Pligh levels of circulating CD34+ cells at autologous stem cell collection are associated with favourable prognosis in multiple myeloma / J. Raschle, D. Ratschiller, S. Mans [et al.] // Br J Cancer. - 2011. - Vol. 105, № 7. - P. 970-974.

126. Pligh donor FOXP3-positive regulatory T-cell (Trc.g) content is associated with a low risk of GVPID following IILA-matched allogeneic SCT / K. Rezvani, S. Mielke, M. Ahmadzadeh [et al.] // Blood. - 2006. - Vol. 108. - P. 1291-1297.

127. Richa, E. The correlation between the granulocyte content in infused stem cells and side effects of the infusion/ E. Richa // Blood Trans fus. - 2011. - Vol. 9, № 3. -P. 346.

128. Decreased treatment failure in recipients of PILA-identical bone marrow or peripheral blood stem cell transplants with high CD34 cell doses / O. Ringden, A. J. Barrett, M. J. Zhang [et al.] // Br. J Plaematol. - 2003. - Vol. 121. - P. 874-885.

129. Growth factor-associated graft-versus-host disease and mortality 10 years after allogeneic bone marrow transplantation / O. Ringdén, M. Labopin, N. C. Gorin [et al.] // Br J I laematol. - 2012. - Vol. 157, № 2. - P. 220-229.

130. Immunophenotype of normal and myelomatous plasma-cell subsets / N. Robillard, S. Wuilléme, P. Moreau [et al.] // Front Immunol. - 2014. - Vol. 5. -P. 137.

131. Lymphocyte recovery and infused CD34+ cells dose: Effect on the evolution after stem cell autotransplantation / E. Romero Fernández, G. M. Bravo, R. A. Gallastegui [et al.] // Leuk Res Rep. - 2013. - Vol. 2, № 2. - P. 54-57.

132. Rossetti, M. Granulocyte-colony stimulating factor drives the in vitro

differentiation of human dendritic cells that induce anergy in naive T cells / M. Rossetti, S. Gregori, M. G. Roncarolo // Eur J Immunol. - 2010. - Vol. 40, № 11. - P. 30973106.

133. Granulocyte colony-stimulating factor promotes the generation of regulatory DC through induction of IL-10 and IFN-alpha / S. Rutella, G. Bonanno, L. Pierelli [et al.] // Eur J Immunol. - 2004. - Vol. 34, № 5. - P. 1291-1302.

134. Multiple myeloma expressing CD19(+)CD56(-) phenotype / N. Sahara, M. Ihara, T. Ono [et al.] // Am J Hematol. - 2000. - Vol. 64, № 4. - P. 311-313.

135. Modulation of colony stimulating factor-(CSF) dependent growth of acute myeloid leukemia by tumor necrosis factor. / M. Salem, R. Deiwel, I. Touw [et al.] // Leukemia. - 1990.-Vol. 4, № l.-P. 37-43.

136. Isolation of Highly Suppressive CD25+FoxP3+ T Regulatory Cells from G-CSF-Mobilized Donors with Retention of Cytotoxic Anti-Viral CTLs: Application for Multi-Functional Immunotherapy Post Stem Cell Transplantation / E. R. Samuel, L. Beioki, K. Newton [et al.] // PLoS ONE. - 2014. - Vol. 9, № 1. - P. e85911.

137. Chemokine-mediated rapid turnover of myeloid-derived suppressor cells in tumor-bearing mice / Y. Sawanobori, S. Ueha, M. Kurachi [et al.] // Blood. - 2008. -Vol. 111, № 12.-P 5457-5466.

138. Granulocyte-colony-stimulatory factor: a strong inhibitor of natural killer cell function / L. Schlahsa, Y. Jaimes, R. Blasczyk [ct al.] // Transfusion. - 2011. - Vol. 51, №2.-P. 293-305.

139. Tumor-infiltrating monocytic myeloid-derived suppressor cells mediate CCR5-dependent recruitment of regulatory T cells favoring tumor growth / Schlecker E., Stojanovic A., Eisen C., et al.//J Immunol.- 2012,- Vol. 189, N 12.- P. 5602-5611.

140. Schmidmaier, R. Helper T cells (CD37CD4+) within the autologous peripheral blood stem cell graft positively correlate with event free survival of multiple myeloma patients / R. Schmidmaier, N. Oversohl, B. Schnabel [et al.] // Exp. Oncol. -2008. - Vol. 30, № 3. - P. 240-243.

141. Prognostic impact of tumour-infiltrating Th2 and regulatory T cells in classical Hodgkin lymphoma / S. Schreck, D. Friebel, M. Buettner [et al.] // Hematol

Oncol. - 2009. - Vol. 27, № 1. - P. 31-39.

142. Assessment of cytokine expression profile in acute myeloid leukemia patients before and after chemotherapy. // Z. Sepehrizadeh, M. Mohammadi, A. Emami [et al.] // Turk J Haematol. - 2014. - Vol. 31, № 2. - P. 149-154.

143. Myeloid-derived suppressor cells promote cross-tolerance in B-cell lymphoma by expanding regulatory T cells / P. Serafini, S. Mgebroff, K. Noonan [et al.] // Cancer Res. - 2008. - Vol. 68, № 13. - P. 5439-5449.

144. Control of homeostatic pro- liferation by regulatory T cells / S. Shen, Y. Ding, C. E. Tadokoro [ct al.] //J Clin Invest. - 2005. - Vol. 115.-P. 3517-3526.

145. Therapeutic relevance of CD34+ cell dose in blood cell transplantation / S. Siena, R. Schiavo, P. Pcdrazzoli [et al.] // J Clin Oncol. - 2000. - Vol. 18, № 6. -P. 1360-1377.

146. Immune reconstitution after autologous hematopoietic transplantation with Lin-, CD34+, Thy-ILO selected or intact stem cell products / R. K. Singh, M. L. Varney, Leutzinger C. [et al.] // Int. Immunopharmacol. - 2007. - Vol. 7, № 8. -P. 1033-1043.

147. Pharmacologic doses of granulocyte colony-stimulating factor affect cytokine production by lymphocytes in vitro and in vivo / E. M. Sloand, S. Kim, J. P. Maciejewski Let al.] // Blood. - 2000. - Vol. 95, № 7. - P. 2269-2274.

148. CD34-positive cells: biology and clinical relevance / C. C. Stella, M. Cazzola, P. De Fabritiis [et al.] // Haematologica. - 1995. - Vol. 80, № 4. - P. 367387.

149. Purging of autologous peripheral-blood stem cells using CD34 selection does not improve overall or progression-free survival after high-dose chemotherapy for multiple myeloma: results of a multicenter randomized controlled trial / A. K. Stewart, R. Vescio, G. Schiller [et al.] // J Clin Oncol. - 2001. - Vol. 19. - P. 3771-3779.

150. The expression of IL-6 and its related genes in acute leukemia / I-I. Sugiyama, K. Inoue, II. Ogawa [et al.] // Leuk Lymphoma. - 1996. - Vol. 21, № 1-2. -P. 49-52.

151. Characterization and outcome of "hard to mobilize" lymphoma patients

undergoing autologous stem cell transplantation / M. W. Surgue, K. Williams, B. II. Pollock [et al.] // Leuk Lymphoma. - 2000. - Vol. 39, № 5-6. - P. 509-519.

152. Synergism of cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 blockade and depletion of CD25f regulatory T cells in antitumor therapy reveals alternative pathways for suppression of autoreactive cytotoxic T lymphocyte responses / R. P. utmuller, L. M. van Duivenvoorde, A. van Elsas [et al.] // J. Exp. Med. - 2001. - Vol. 194. -P. 823-832.

153. Increased frequency and suppression by regulatory T cells in patients with acute myelogenous leukemia / M. J. Szczepanski, M. Szajnik, M. Czystowska [et al.] // Clin Cancer Res. -2009.- Vol. 15, № 10.-P. 3325-3332.

154. Novel mobilization strategies to enhance autologous immune effector cells in multiple myeloma / L. Talebian, J. Y. Wu, D. A. Fischer [et al.] // Front Biosci (Elite Ed). - 2011.-Vol. 3.-P. 1500-1508.

155. Teague, R. M. Immune evasion in acute myeloid leukemia: current concepts and future directions / R. M. Teague, J. Kline // Journal for ImmunoTherapy of Cancer. -2013.-Vol. 1:13 doi:10.1186/2051-1426-1-13.

156. G-CSF induces a potentially tolerant gene and immunophenotype profile in T cells in vivo / I-I. C. Toh, L. Sun, Y. Soe [et al. ] // Clin Immunol. - 2009. - Vol. 132, № 1. - P. 83-92.

157. Delayed recovery after autologous peripheral hematopoietic cell transplantation: potential effect of a high number of total nucleated cells in the graft / IT. Trebeden-Negre, M. Rosenzwajg, M.-L. Tanguy [et al.] // Transfusion. - 2010. -Vol. 50, № 12. - P. 2649-2659.

158. Recipient-type specific CD4+CD25+ regulatory T cells favor immune reconstitution and control graft-versus-host disease while maintaining graft-versus-leukemia / A. Trenado, F. Charlotte, S. Fisson [et al.] // J Clin Invest. - 2003. -Vol. 112, №. 11.-P. 1688-1696.

159. The prognostic significance of cytokine levels in newly diagnosed acute myeloid leukemia and high-risk myelodysplastic syndromes / A. M. Tsimberidou, E. Estey, S. Wen [et al.] // Cancer. - 2008. - Vol. 113, № 7. - P. 1605-1613.

160. Correlation of high numbers of intratumoral FOXP3+ regulatory T cells with improved survival in germinal center-like diffuse large B-cell lymphoma, follicular lymphoma and classical Ilodgkin's lymphoma / A. Tzankov, C. Meier, P. Hirschmann [et al.] // Plaematologica. - 2008. - Vol. 93, № 2. - P. 193-200.

161. Human Regulatory T Cells of G-CSF Mobilized Allogeneic Stem Cell Donors Qualify for Clinical Application / S. N. Ukena, S. Velaga, L. Goudeva [et al.] // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7, № 12: c51644.

162. The relapse risk of AML patients undergoing autologous transplantation correlates with the stem cell mobilizing potential / I. Von Griinigen, J. Raschle, I. Riisges-Wolter [et al.] // Leuk Res. - 2012. - Vol. 36, № 11. - P. 1325-1329.

163. Wadhwa, M. Haematopoietic growth factors and their therapeutic use / M. Wadhwa, R. Thorpe // Thromb. Haemost. - 2008. - V. 99, № 5. - P. 863-873.

164. Wang, K. CD 19: a biomarker for B cell development, lymphoma diagnosis and therapy / K. Wang, G. Wei, D. Liu // Exp Plematol Oncol. - 2012. — Vol. 1, № 1:36.

165. Wesolowslci, R. Myeloid derived suppressor cells - a new therapeutic target in the treatment of cancer / R. Wesolowski, J. Markowitz, W. E. Carson // Journal for ImmunoTherapy of Cancer. -2013.- Vol. 1:10.

166. Williams, K. T cell immune reconstitution following lymphodepletion / K. Williams, F. T. Hakim, R. E. Gress // Semin. Immunol. - 2007. - Vol. 19, № 5. -P. 318-330.

167. Winstead, C. J. Regulatory CD4+CD25+Foxp3+ T cells selectively inhibit the spontaneous form of lymphopenia-induced proliferation of naive T cells / C. J. Winstead, J. M. Fraser, A. Khoruts // J Immunol. - 2008. - Vol. 180. - P. 73057317.

168. CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells optimize diversity of the conventional T cell repertoire during reconstitution from lymphopenia / C. J. Winstead, C. S. Reilly, J. J. Moon [et al.] // J Immunol. - 2010. - Vol. 184. - P. 4749-4760.

169. An analysis of engraftment kinetics as a function of the CD34 content of peripheral blood progenitor cell collections in 692 patients after the administration of

myeloablative chemotherapy / C. II. Weaver, B. Hazelton, R. Birch [et al.] // Blood. -1995. - Vol. 86. - P. 3961-3969.

170. Regulatory T-cells in the graft and the risk of acute graft-versus-host disease after allogeneic stem cell transplantation / D. Wolf, A. M. Wolf, D. Fong [et al.] // Transplantation. - 2007. - Vol. 83, № 8. - P. 1107-1113.

171. Different adhesive characteristics and VLA-4 expression of CD34(+) progenitors in Go/Gi versus SfG2/M phases of the cell cycle / M. Yamaguchi, K. Ikebuchi, F. Hirayama [et al.] // Blood. - 1998. - Vol. 92, № 3. - P 842-848.

172. Yang, B. B. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of pegfilgrastim / B. B. Yang, A. Kido // Clin Pharmacokinet. - 2011. - Vol. 50, № 5. - P. 295-306.

173. Higher infused CD34+ hematopoietic stem cell dose correlates with earlier lymphocyte recovery and better clinical outcome after autologous stem cell transplantation in non-Hodgkin's lymphoma / D. H. Yoon, B. S. Sohn, G. Jang [et al.] // Transfusion. - 2009. - Vol. 49, № 9. - P. 1890-1900.

174. Autologous or allogeneic bone marrow transplantation compared with intensive chemotherapy in acute myelogenous leukemia. European Organization for Research and Treatment of Cancer (EORTC) and the Gruppo Italiano Malattie Ematologiche Maligne deH'Adulto (GIMEMA) Leukemia Cooperative Groups / R. A. Zittoun, F. Mandelli, R. Willemze [et al.] // N Engl J Med. - 1995. - Vol. 332, №4.-P. 217-23.

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

1 Рисуиок 2Л - Дизайн исследования С. 34

2 Рисунок ЗЛ - Цитометрическая характеристика субпопуляций регуляторпых Т-клеток продукта сепарации больных гемобластозами..................................................................... С. 46

3 Рисунок 3.3 - Фазы клеточного цикла С034+-клеток в продуктах сепарации больных гемобластозами.......................................... С. 63

4 Рисунок 3.4 - Фазы клеточного цикла С034*-клеток в продуктах сепарации больных лимфомами и множественной миеломой в зависимости от используемой для мобилизации формы Г-КСФ........ С. 69

5 Рисунок 3.5.1 - Анализ общей выживаемости после АТГСК у больных лимфомами, множественной миеломой и острыми лейкозами........................................................................... С. 74

6 Рисунок 3.5.2 - Анализ безрецидивной выживаемости после АТГСК у больных лимфомами, множественной миеломой и острыми лейкозами........................................................................... С. 75

7 Рисунок 3.5.3 - Анализ безрецидивной выживаемости после АТГСК у больных лимфомами в зависимости от течения заболевания на момент трансплантации.......................................................... С. 76

8 Рисунок 3.5.4 - Анализ безрецидивной выживаемости после АТГСК у больных множественной миеломой в зависимости от течения заболевания на момент трансплантации...................................... С. 77

9 Рисунок 3.5.5 - 1ЮС-анализ диагностической значимости определения содержания С019+ В-клеток продукта сепарации больных множественной миеломой в прогнозе рецидива после АТГСК............................................................................... С. 80

10 Рисунок 3.5.6 - Анализ З-хлетней безрецидивной выживаемости после АТГСК у больных лимфомами и множественной миеломой в

зависимости от сроков выхода из лимфопении............................. С. 83

11 Рисунок 3.5.7 - Анализ 1-летней безрецидивной выживаемости после АТГСК у больных лимфомами и множественной миеломой в зависимости от сроков выхода из лимфопении............................. С. 84

12 Таблица 2.1 - Режимы химиотерапии, использованные при мобилизации гемопоэтических стволовых клеток.......................... С. 35

13 Таблица 3.1.1 - Относительное содержание субпопуляций мопонуклеарпых клеток в периферической крови и продукте сепарации больных гемобластозами.......................................... С. 43

14 Таблица 3.1.2 - Относительное количество гранулоцитов в продукте сепарации........................................................................... С. 44

15 Таблица 3.1.3 - Относительное содержание субпопуляций регуляторных Т-клеток в периферической крови и продукте сепарации больных гемобластозами.......................................... С. 47

16 Таблица 3.2.1 - Относительное содержание субпопуляций мопонуклеарпых клеток в продукте сепарации больных гемобластозами в группах с низким и высоким содержанием С04ЬС0251^'1 клеток.............................................................. С. 48

17 Таблица 3.2.2 - Относительное содержание субпопуляций мопонуклсарных клеток в продукте сепарации больных гемобластозами в группах с низким и высоким содержанием

СЭ41С025+СЭ127" клеток........................................................ С. 49

18 Таблица 3.2.3 - Относительное содержание субпопуляций мопонуклеарпых клеток в продукте сепарации больных гемобластозами в группах с низким и высоким содержанием

С04'РОХРЗ+ клеток............................................................... С. 50

19 Таблица 3.2.4 - Продукция цитокинов клетками продукта сепарации больных в группах с низким и высоким содержанием С04+С02511,е'1 клеток................................................................................. С. 51

20 Таблица 3.2.5 - Продукция цитокинов клетками продукта сепарации больных в группах с низким и высоким содержанием СЭ4+СЭ25 127" клеток....................................................... С. 52

21 Таблица 3.2.6 - Продукция цитокинов клетками продукта сепарации больных в группах с низким и высоким содержанием С041Т0ХРЗ+ клеток................................................................................. С. 53

22 Таблица 3.2.7 - Относительное содержание субпопуляций моиопуклеарных клеток в продукте сепарации больных в группах с низким и высоким содержанием незрелых форм гранулоцитов (промиелоциты + миелоциты)................................................... С. 55

23 Таблица 3.2.8 - Продукция цитокинов клетками продукта сепарации больных в группах с низким и высоким содержанием незрелых форм гранулоцитов (промиелоциты + миелоциты)................................ С. 56

24 Таблица 3.3.1 - Клиническая характеристика пациентов по нозологическим формам......................................................... С. 59

25 Таблица 3.3.2 - Относительное содержание отдельных субпопуляций лейкоцитов в продуктах афереза больных лимфомами, острыми лейкозами и множественной миеломой.......... С. 60

26 Таблица 3.3.3 - Продукция отдельных цитокинов клетками продукта афереза больных лимфомами, острыми лейкозами и множественной миеломой............................................................................ С. 64

27 Таблица 3.4.1 - Клиническая характеристика больных лимфомами и множественной миеломой в зависимости от используемой для мобилизации формы Г-КСФ.................................................... С. 66

28 Таблица 3.4.2 - Содержание различных популяций лейкоцитов в продуктах сепарации больных лимфомами и множественной миеломой в зависимости от используемой для мобилизации формы Г-КСФ................................................................................ С. 67

29 Таблица 3.4.3 - Продукция цитокинов клетками сспаратов больных

лимфомами и множественной миеломой в зависимости от используемой для мобилизации формы Г-КСФ............................. С. 70

30 Таблица 3.5.1 - Течение заболевания на момент АТГСК................. С. 73

31 Таблица 3.5.2 - Клиническая характеристика больных множественной миеломой в зависимости от течения болезни после АТГСК............................................................................... С. 78

32 Таблица 3.5.3 - Содержание СЭ19+ В-клеток и продукция цитокииов клетками сепаратов больных множественной миеломой с различными исходами АТГСК................;................................. С. 79

33 Таблица 3.5.4 - Клинические показатели больных острыми лейкозами в зависимости от течения болезни после АТГСК............ С. 80

34 Таблица 3.5.5 - Содержание субпопуляций лимфоцитов и продукция цитокинов клетками сепаратов больных острыми лейкозами в зависимости от течения болезни после АТГСК........................... С. 81

35 Таблица 3.5.6 - Содержание субпопуляций лимфоцитов и фазы кеточного цикла СВ34+-клеток в продуктах сепарации больных острыми лейкозами в зависимости от исхода АТГСК..................... С. 82