Иммунофенотипическая дифференцировка лейкозов и лимфом: лабораторная диагностика и мониторинг тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, доктор медицинских наук Зуева, Екатерина Евгеньевна

• Зуева, Екатерина Евгеньевна
• доктор медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Зуева, Екатерина Евгеньевна

Введение

Глава 1. Иммунофенотипирование лейкозов и лимфом, диагностические возможности и проблемы

1.1. Иммуноцитохимический метод выявления антигенов клеток крови

1.2. Проточная цитометрия как метод иммунофенотипической диагностики

1.2.1. Практические достижения проточной цитометрии в диагностике лейкозов и лимфом

1.2.2. Информативность иммунофенотипа лейкозных бластов для диагностики острых лейкозов.

1.2.3. Аберрантность иммунофенотипа как отражение опухолевой трансформации

1.2.4. Иммунофенотипическая диагностика хронических лимфопролиферативных заболеваний

1.2.5. Использование антигенов поверхностной мембраны клеток крови для иммунофенотипической диагностики гематологических заболеваний

1.3.1. Планирование трансплантаций гемопоэтических стволовых клеток

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Пациенты

2.2. Биологический материал и методы исследования

2.2.1. Иммуноцитохимия

2.2.2. Проточная цитометрия

2.2.2.1. Пробоподготовка для выявления клеточных маркеров

2.2.2.2. Учет результатов проточной цитометрии

2.2.2.3. Анализ данных проточной цитометрии 107 2.3. Статистический анализ

Глава 3. Возможности и ограничения иммуноцитохимического метода ИФТ лимфоцитов периферической крови

3.1. Организация и проведение внутри лабораторного контроля качества иммуноцитохимического метода ИФТ.

3.2. Информативность внутрилабораторного контроля качества иммуноцитохимического метода иммунофенотипирования

3.3. Возможности иммуноцитохимического метода определения субпопуляционного состава лимфоцитов пациентов с доказанным отсутствием пролиферативного синдрома 136 3.3.1. Информативность иммунофенотипирования лимфоцитов периферической крови пациентов с доказанным отсутствием пролиферативного синдрома

3.4. Возможности иммуноцитохимического метода определения субпопуляционного состава лимфоцитов пациентов с локальным лимфопролиферативным заболеванием при отсутствии экспансии опухолевых клеток в системный кровоток

3.4.1. Клиническая характеристика больных лимфомой кожи

3.4.2. Определение стабильности состояния иммунной системы больных лимфомой кожи

3.4.3. Информативность иммунофенотипирования лимфоцитов периферической крови пациентов с локальным лимфопролиферативным заболеванием

Глава 4. Определение иммунофенотипа трансформированных клеток при диагностике и мониторинге онкогематологических заболеваний методом проточной цитометрии

4.1. ИФТ клеток периферической крови и костного мозга при хронических лимфопролиферативных заболеваниях с экспансией патологических клеток в системный кровоток

4.1.1. Выявление патологической популяции при диагностике ХЛПЗ

4.1.2. Линейная принадлежность патологических лимфоцитов

4.1.2.1. Т-клеточный характер экспансии патологических 177 лимфоцитов

4.1.2.2. В-клеточный характер экспансии патологических 186 лимфоцитов

4.1.3. Результаты оценки иммунофенотипического профиля при диагностике хронических лимфопролиферативных заболеваний

4.1.4. Прогностическое значение иммунофенотипического профиля патологических лимфоцитов больных ХЛЛ

4.2. Диагностика острых лейкозов методом проточной цитометрии

4.2.1. Анализ патологической популяции

4.2.1.1. Выявление и определение объема патологической популяции при диагностике острых лейкозов

4.2.1.2. Информативность маркера CD45 для характеристики патологической популяции

4.2.1.3. Установление линейной принадлежности основной массы бластов

4.2.1.4. Определение уровня дифференцировки основной массы бластов

4.2.2. Определение суммарного фенотипа основной массы бластов для установления окончательного иммунофенотипического 228 диагноза

4.3. Информативность данных проточной цитометрии для диагностики острых лейкозов

Глава 5. Особенности количественного учета гемопоэтических стволовых клеток при планировании аутологичных и аллогенных трансплантаций и динамика посттрансплантационного восстановления иммунной системы

5.1. Результаты применения модифицированного протокола учета ГСК в периферической крови

5.2. Выявление ГСК в продукте афереза

5.3. Выявление ГСК в пуповинной крови

5.4. Выявление ГСК в костном мозге

5.5. Динамика восстановления иммунной системы после проведения родственной или неродственной аллогенной 265 трансплантации ГСК

5.6. Информативность иммунофенотипирования методом проточной цитометрии для количественного определения гемопоэтических стволовых клеток и оценки динамики посттрансплантационного восстановления иммунной системы 275 Обсуждение полученных результатов 277 Выводы 309 Практические рекомендации 311 Список литературы

Список сокращений

АЭК - амино-этил-карбозол

ВБВНК - варикозная болезнь вен нижних конечностей

ДАБ - диаминобензидин

Г-КСФ - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор

ГСК - гемопоэтические стволовые клетки

ИФТ - иммунофенотипирование ицх - иммуноцитохимия

ЛА - лейкаферез

ЛК - лимфома кожи

ЛХ - лимфома Ходжкина

МАТ - моноклональное антитело

ММ - миеломная болезнь

МНК - мононуклеары

МОБ - минимальная остаточная болезнь

ОЛ - острый лейкоз

ОЛЛ - острый лимфобластный лейкоз омл - острый миелолейкоз нхл - неходжкинская лимфома

ПК - периферическая кровь

ПЛЛ - поли-Ь-лизин

ПОХ - пероксидаза хрена пц - проточная цитометрия

РТПХ - реакция трансплантата против хозяина

СИФ - средняя интенсивность флюоресценции

ЩФ - щелочная фосфатаза

XJ1J1 - хронический лимфолейкоз

ХЛПЗ - хроническое лимфопролиферативное заболевание

ХВН - хроническая венозная недостаточность

XT - химиотерапия

ФСБ - фосфатно-солевой буфер

CD - claster of differentiation (кластер дифференцировки)

FITC - fluorescein isothiocyanate

FSC - forward side scatter (прямое светорассеяние)

HLA - human leukocyte antigens (антигены главного комплекса гистосовместимости)

РЕ - phycoerythrine

SSC - side scatter (боковое светорассеяние)

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунофенотипическая дифференцировка лейкозов и лимфом: лабораторная диагностика и мониторинг»

Актуальность проблемы.

Иммунофенотипирование (ИФТ) приобретает все большую значимость в ведении онкогематологических больных [200; 130], так как позволяет быстро получать информацию, имеющую безусловную ценность для диагностики лейкозов и лимфом, для определения группы риска и тактики лечения с использованием новых протоколов, включая такие высокотехнологичные, как трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК) [118, 167, 247]. Время начала терапии в значительной мере определяет прогноз жизни пациента, а проведение интенсивной химиотерапии требует мониторинга восстановления гемопоэза и наличия/отсутствия (поиска иммунологических критериев) минимальной остаточной болезни [81, 65, 169]. Вследствие этого особую актуальность приобретает вопрос о сопоставимости результатов, получаемых в ходе заболевания, о контроле качества исследований, которые в значительной мере определяют судьбу больного [145, 175, 83].

Некоторые методические подходы к ИФТ имеют сугубо историческое значение (метод розеткообразования), другие (непрямая иммунофлюоресценция in situ, иммуноцитохимия и проточная цитометрия) более адекватны современным требованиям [57]. Тем не менее, выбор метода, оптимального для решения конкретной диагностической задачи, остается неопределенным, и в настоящее время в основном обусловлен личными предпочтениями исследователей [172]. Аналогичным образом обстоит ситуация и с выбором моноклональных антител для выявления целевых антигенов на клетке. Принято считать, что возможность выявления трансформированных клеток и определения их фенотипа зависят от разнообразия используемых антител [166, 218, 44]. Однако, несмотря на накопленный опыт диагностики лейкозов и лимфом, выбор конкретных специфичностей антител и оценка получаемых данных лежат в области ответственности лаборатории, проводящей исследования [191, 121, 120].

Аналитический этап проведения ИФТ должен (в идеале) приводить к формулировке иммунофенотипического диагноза, однако, отсутствие правил анализа данных мультипараметрической проточной цитометрии способно нивелировать пользу самой широкой панели антител, особенно при низком содержании бластов в образце или при изменении иммунофенотипического профиля трансформированных клеток в ходе заболевания. В этой ситуации обоснование теоретических достоинств и практических недостатков различных методических подходов диагностики и мониторинга острых и хронических онкогематологических заболеваний представляется чрезвычайно актуальным. Таким образом, проведение диагностики лейкозов и лимфом возможно лишь при правильном выборе оптимального метода ИФТ для решения конкретной клинической задачи и спектра антител и их сочетаний для постановки диагноза и мониторинга течения заболевания.

Увеличение потребности в трансплантациях гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) привело к расширению спектра используемого для этого биологического материала. Предложенные ранее протоколы количественного учета ГСК не рассчитаны на практически одновременное исследование периферической и пуповинной крови, костного мозга и продукта лейкафереза, и трудоемки для рутинного применения [201, 207, 129].

Адекватность результатов, получаемых различными методами ИФТ, как и других лабораторных исследований, должна подтверждаться постоянно проводимым контролем качества. Однако, многоэтапность пробоподготовки и анализа данных затрудняют реализацию даже классического внутрилабораторного контроля качества, без которого ценность каждого отдельного исследования значительно снижается. Иными словами, управление качеством иммунофенотипирования клеток периферической крови и костного мозга является актуальной задачей сегодняшнего дня.

Цель исследования.

Повышение информативности иммунофенотипирования клеток периферической крови и костного мозга при клинической диагностике и мониторировании некоторых миело- и лимфопролиферативных заболеваний, а также при трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

Задачи исследования.

1. Разработать алгоритм выбора метода ИФТ для диагностики и динамического наблюдения в зависимости от клинической ситуации и вовлеченности периферической крови в патологический процесс.

2. Определить принцип формирования сочетания моноклональных антител, позволяющий выявлять трансформированные клетки методом проточной цитометрии и проводить внутренний контроль качества ИФТ каждого образца биологического материала при диагностике онкогематологических заболеваний.

3. Разработать последовательность оценки данных проточной цитометрии для определения иммунофенотипического профиля опухолевых клеток, необходимого для установления иммунофенотипического диагноза, прогноза заболевания и выявления минимальной остаточной болезни.

4. Разработать внутрилабораторную систему управления качеством результатов ИФТ, полученных методами иммуноцитохимии и проточной цитометрии.

5. Разработать стандартную процедуру выявления и количественного учета гемопоэтических стволовых клеток в различном биологическом материале при планировании трансплантации.

Основные положения, выносимые на защиту.

Необходимый уровень аналитической точности определения субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови пациентов с нормальным содержанием лимфоцитов, вне зависимости от наличия пролиферативного синдрома, достижим при использовании методов иммуноцитохимии, но требует учета значительного количества клеток (не менее 500) и применения разработанной процедуры внутрилабораторного контроля качества.

Мультипараметрическая проточная цитометрия является методом выбора для иммунологической диагностики острых лейкозов и хронических лимфопролиферативных заболеваний с лейкемизацией, предоставляя объективную информацию о наличии клеток с измененным фенотипом, достаточную для определения иммунофенотипического диагноза и прогноза течения заболевания.

Использование якорных маркеров при формировании диагностических сочетаний антител позволяет определять суммарный фенотипический профиль лейкозных бластов и создает основу контроля качества результатов исследования каждого анализируемого образца.

При острых лейкозах миелоидного происхождения фенотип опухолевых бластов не соответствует нормальным клеточным аналогам и имеет характерное сочетание экспрессии маркеров различных уровней дифференцировки.

Предложенная модификация выявления гемопоэтических стволовых клеток позволяет определять их содержание в периферической и пуповинной крови, костном мозге и продукте лейкафереза и использовать периферическую кровь для предварительного определения качества продукта афереза при планировании аутологичных и аллогенных родственных трансплантаций.

Научная новизна.

Впервые сформулирован и обоснован принцип выбора метода иммунофенотипирования в зависимости от клинической ситуации и необходимого уровня аналитической точности, а также разработана программа внутреннего контроля качества иммуноцитохимического метода выявления поверхностных маркеров лимфоцитов. Впервые показано, что сохранность субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови во времени является отражением стабильного течения лимфомы кожи.

Впервые разработан принцип включения якорных антител для формирования сочетаний антител при проведении диагностики гемобластозов методом мультипараметрической проточной цитометрии. Впервые показано, что использование в качестве якорных антител панлейкоцитарного СБ45, линейно коммитированных С07 (СИЗ), СБ 19, С013 (СОЗЗ) и нелинейных маркеров клеток -предшественников СБ34, Тек и НЬА-ВЯ позволяет проводить контроль качества пробоподготовки и учета результатов каждого образца, исследуемого с целью диагностики или мониторинга онкогематологического заболевания. Обобщены данные об иммунофенотипическом профиле лейкозных бластов миелоидного происхождения.

Впервые осуществлена разработка единого протокола выявления и количественного определения гемопоэтических стволовых клеток для периферической и пуповинной крови, костного мозга и продукта лейкафереза. Впервые показано, что объективным отражением качества аферезного продукта при планировании проведения процедуры афереза

ГСК с целью их последующей трансплантации является содержание в периферической крови в день афереза CD45+CD34+ клеток, а не фракции мононуклеаров в целом.

Практическая значимость.

Определены требования к проведению ИФТ в различных клинических ситуациях с обоснованием метода выбора и порядка проведения внутреннего контроля качества.

Предложен алгоритм иммунофенотипической диагностики онкогематологических заболеваний методом проточной цитометрии с использованием якорных маркеров. Предложен подход к проведению внутреннего контроля качества пробоподготовки и анализа каждого образца биологического материала по воспроизводимости экспрессии якорных маркеров. Показано, что объективным отражением опухолевой трансформации гемопоэтических клеток гематогенного происхождения (крови) является снижение (изменение) уровня экспрессии CD45, достоверно отличающее их от неопухолевых аналогов. Определены объективные характеристики трансформированных лимфоцитов при диагностике методом проточной цитометрии хронических лимфопролиферативных заболеваний (ХЛПЗ), протекающих с экспансией патологических клеток в периферическую кровь/костный мозг. Для измененных лимфоцитов, являющихся субстратом ХЛПЗ, характерна высокая частота образования дуплетов (сдвоенных клеток), сниженный уровень экспрессии CD45. При CD5-позитивных В-клеточных ХЛПЗ, в частности, при В-ХЛЛ, уровень экспрессии CD 19 и CD5 снижен по сравнению с нетрансформированными клетками. Определен фенотипический профиль трансформированных лимфоцитов при В-ХЛЛ, ассоциированный с гепатоспленомегалией, ранним возрастом начала заболевания и выраженной агрессивностью течения. Определен иммунофенотипический профиль лейкозных бластов миелоидного происхождения, позволяющий дифференцировать их от нормальных клеточных аналогов.

Разработан алгоритм проведения внутрилабораторного контроля качества и алгоритм выбора варианта иммуноцитохимического метода выявления субпопуляций лимфоцитов периферической крови исходя из задач клиники и возможностей лаборатории. Определено минимальное количество учитываемых клеток для получения воспроизводимых результатов при использовании иммуноцитохимии. Показана информативность определения субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови при лимфоме кожи для определения стабильности течения заболевания.

Показано, что содержание гемопоэтических стволовых клеток в периферической крови является предопределяет качество лейкаферезного продукта при планировании проведения аутологичных и аллогенных родственных трансплантаций ГСК. Разработана модификация протокола выявления гемопоэтических стволовых клеток в трансплантате при планировании аутологичных и аллогенных трансплантаций.

Внедрение в практику.

На основании сделанных заключений исследования даны рекомендации по интерпретации данных проточной цитометрии, которые внедрены в работу клиник СПбГМУ им. акад.И.П.Павлова (отделений трансплантации костного мозга для детей и взрослых, гематологии кафедры факультетской терапии, сепарации и криоконсервирования), отделения химиотерапии лейкозов ДГБ №1, отделения кардиохирургии ГМПБ №2, отделений онкогематологии и аутологичной трансплантации костного мозга ленинградской областной клинической больницы, в центральной республиканской больнице г. Петрозаводска республики Карелии, в отделе иммунологии ЦНИЛ г. Челябинска.

Положения о выборе иммуноцитохимического метода иммунофенотипирования внедрены в практику в детских областных больниц г. Архангельск и г. Киров, центрах по профилактике и борьбе со СПИД г. Владивосток, г. Назрань (Ингушетия), г. Петрозаводск, г. Сыктывкар (КОМИ), г. Южно-Сахалинск, ДРКБ г. Владикавказ ( PCO Алания), на кафедре иммунологии Медицинского Университета г.Донецк (Украина), в лаборатории иммунологии Республиканского клинического онкологического диспансера г.Ижевск, в КДЦ и КМЛДО г.Краснодар, в МСЧ № 9г. Пермь, в санатории им. Лермонтова г. Пятигорск, в областной клинической больнице г. Ярославль, на кафедре КДЛ МАПО г. Тбилиси, в городской лаборатории клинической иммунологии г. Рыбинск Ярославской области. Результаты исследования используются при преподавании цикла клинической иммунологии студентам I и II ступеней медицинского колледжа №3, цикла по гематологии студентам VI курса кафедры факультетской терапии СПбГМУ, цикла по онкоиммунологии студентам V курса кафедры цитологии и гистологии им. Заварзина биолого-почвенного факультета СПбГУ, по программе повышения квалификации на цикле «Современные аспекты иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека» в СПбГМУ им.акад.И.П.Павлова.

Апробация материалов диссертации.

Результаты работы были представлены и обсуждены на национальных и международных конгрессах, конференциях и симпозиумах:

5-я научная конференция Европейского общества химиотерапии и инфекционных заболеваний (СПб, 1997 г.), четвертый международный конгресс «The immune consequences of trauma, shock and sepsis. Mechanisms and therapeutic approaches» (Munich, Germany, 1997); 6th International Expert Forum on Immunotherapy and Gene Therapy (Florence, Italy, 1998); 4th, 5th и 6th John Humphrey Advanced Summer Programme in Immunology (Pushchino, 1998, 2000, 2002); Advances in Critical Care Testing, the 1999 IFCC-AVL Award; 14th European Immunology Meeting EFIS (Poznan, Polsha 2000), 18th International Congress of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (18th ICCC, 2002, Kyoto, Japan), 1-я конференция пользователей проточных цитометров BD (СПб, 2000); конференции с международным участием "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге" (СПб, 2000, 2001, 2002, 2003), научно-практическая конференция «Проблемы внезапной смерти» (СПб, 2003), научно-практическая конференция «Проблемы онкоиммунологии: научные и прикладные аспекты» (Киев, Украина, 2003), русско-норвежская конференция по гематологии (СПб, 2003), 3-й съезд иммунологов Урала (Челябинск, 2003), объединенный иммунологический форум (Екатеринбург, 2004). Диссертационная работа была апробирована на расширенном заседании проблемной комиссии с участием сотрудников лабораторий молекулярной иммунологии и молекулярной диагностики научно-методического центра по молекулярной медицине, лаборатории клинической иммунологии лаборатории генной терапии и онкогематологических заболеваний, отделения гематологии кафедры факультетской терапии, отделения сепарации и криоконсервирования клиники трансплантации костного мозга СПбГМУ им.акад.И.П.Павлова 24 декабря 2003 г. и на научной конференции отдела иммунологии ГУ НИИЭМ РАМН 15 апреля 2004.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 34 печатных работы, в том числе 13 статей.

Объём и структура диссертации.

Диссертация изложена на 345 страницах и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 5 глав изложения и обсуждения собственных исследований, выводов и практических рекомендаций. Диссертация содержит 58 рисунков и 63 таблиц. Библиографический указатель включает 252 отечественных и зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Зуева, Екатерина Евгеньевна

ВЫВОДЫ.

1. Мультипараметрическая проточная цитометрия является оптимальным методом ИФТ для определения иммунофенотипического профиля трансформированных клеток при диагностике острых лейкозов и хронических лимфопролиферативных заболеваний, протекающих с поражением костного мозга и лейкемизацией, а также для верификации минимальной остаточной болезни.

2. При диагностике острых лейкозов и хронических лимфопролиферативных заболеваний трансформированные клетки могут быть выделены (дискриминированы) для последующего анализа по величине средней интенсивности флюоресценции, так как обладают более низкой экспрессией СЭ45 по сравнению с неопухолевыми аналогами (р<0,05).

3. При диагностике онкогематологических заболеваний методом проточной цитометрии сочетания антител должны включать не менее одного якорного маркера, к которым относятся панлейкоцитарный СЭ45, линейно-ассоциированные СТ>1 (СЭЗ), СЭ19, СЭ13 (СЭЗЗ) и маркеры клеток-предшественников СВ34, Тек и НЬЛ-ЭЯ, анализ экспрессии которых позволяет определить линейную принадлежность бластов (в 65,4% случаев), а количественная воспроизводимость является критерием внутреннего контроля качества.

4. При диагностике иммунологических вариантов онкогематологических заболеваний и для верификации минимальной остаточной болезни оценка данных мультипараметрической проточной цитометрии должна осуществляться согласно разработанному алгоритму, включающему идентификацию трансформированных клеток, определение их количества и линейного происхождения, уровня дифференцировки и аберрантности фенотипа.

5. В смешанной группе В клеточного острого лимфобластного лейкоза детей и взрослых количественное преобладание Tdt+ бластов по сравнению с CD34+ бластами характерно для пациентов группы высокого риска неблагоприятного течения заболевания, а преобладание CD34+ клеток характерно для пациентов группы низкого риска (р<0,01).

6. Наиболее характерными признаками бластов при острых лейкозах миелоидного происхождения являются гомогенность экспрессии CD33, низкий уровень экспрессии CD 15, неоднородная экспрессия CD 13 и одновременная экспрессия CD34 и CD15 в сочетании с наличием или отсутствием HLADR на всех клетках опухолевой популяции.

7. У пациентов с хроническим лимфоцитарным лейкозом экспрессия CD38 более, чем на 40% клеток CD5+CD19+CD23+ патологического клона ассоциирована с относительно молодым возрастом начала заболевания, гепатоспленомегалией и агрессивностью течения.

8. Субпопуляционный состав пула циркулирующих лимфоцитов периферической крови пациентов с различными формами лимфомы кожи при отсутствии прогрессии заболевания находится в пределах нормальных значений и сохраняется при динамическом наблюдении, что является объективным отражением стабильности состояния иммунной системы у данной категории больных.

9. Иммуноцитохимический метод определения субпопуляционного состава лимфоцитов при нормальном содержании лимфоцитов в периферической крови обеспечивает необходимый для диагностики уровень надежности результатов за счет использования разработанной процедуры внутрилабораторного контроля качества.

10. При планировании аутологичной или аллогенной трансплантации учет гемопоэтических стволовых клеток необходимо проводить по данным мультипараметрической проточной цитометрии, а их количественное совпадение CD45+CD34+ по гистограммам

СВ45/СБ34 и 88С/СБ34 является показателем качества пробоподготовки, анализа и результатов учета каждого образца.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. При исследовании костного мозга и/или периферической крови больных, обследуемых в связи с подозрением на острый лейкоз методом проточной цитометрии диагностические сочетания антител формируются с учетом включения якорных маркеров и могут быть представлены следующей панелью: С014/С034/С045, С061/0РЬА/СБ45, СЭ4/С08/С03, С065/СВ2/НЬА0Я, С07/С05/С03, С010/С019/СЭ13, СЭ15/СОЗЗ/СВ20, СБ 13/СОЗ4/НЬАБЯ, КЛУС019, С022/С010/СБ20, С02/С05ЫСт, Т(к/С0Ю/С019, ТЖ/С034/суС03.

2. Оценка экспрессии якорных маркеров (СЭ45, СЭ19, СТ>1 (СБЗ), С013 (СОЗЗ), С034, Тек, НЬА-ОЯ) позволяет диагностировать лейкоз и определить его линейную принадлежность более, чем в половине случаев острого лейкоза (65,4%).

3. При иммунофенотипировании биологического материала пациентов, обследуемых в связи с подозрением на хроническое лимфопролиферативное заболевание с поражением крови и/или костного мозга, диагностические сочетания антител могут быть представлены следующей панелью: СБЗ/СВ19/С045, С08/С04/СБЗ, СБЗ/НЬА-ОК/СЭ19, С051СтЪ1Ств, С010/С034/С019, С022/С07/СЭ45, СЭ38/СВ2/С019, КА/СЭ19.

4. Внутренним контролем качества иммунофенотипирования клеток периферической крови и/или костного мозга при диагностике онкогематологических заболеваний методом проточной цитометрии является количественная воспроизводимость экспрессии якорных маркеров.

5. Оценка иммунофенотипических особенностей клеток бластной популяции для установления иммунологического диагноза по данным проточной цитометрии должна осуществляться последовательно и включать выявление лейкозных клеток, определение их линейного происхождения, уровня дифференцировки и аберрантности фенотипа.

6. Для больных различного, в том числе онкогематологического профиля, при нормальном уровне лимфоцитов периферической крови определение субпопуляционного состава лимфоцитов может быть реализовано методом иммуноцитохимии.

7. При выявлении В-лимфоцитов и других популяций, составляющих менее трети от общего числа лимфоцитов, иммуноцитохимическим методом, для достижения оптимального уровня аналитической точности необходимо учитывать не менее 500 клеток.

8. При планировании аутологичной или аллогеннной родственной трансплантации для прогноза количества гемопоэтических стволовых клеток в аферезном продукте рекомендуется определять относительное содержание СЭ34+ клеток фракции мононуклеаров периферической крови.

9. Для внутреннего контроля качества выявления гемопоэтических стволовых клеток рекомендуется проводить обратное гейтирование кластера СЭ45+СЭ34+ на гистограмму Р8С/88С.

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Зуева, Екатерина Евгеньевна, 2004 год

1. Абелев Г.И. Что такое опухоль? // Соросовский Образовательный Журнал. 1997. № 4. - С. 17-22.

2. Барышников А.Ю., Кадагидзе З.Г., Малахова JI.A., Тупицын H.H. Иммунологический фенотип лейкозной клетки. М.: Медицина, 1989.-240с.

3. Ван Донген Ж., Никитин В.Ю. Проточная цитометрия в диагностике хронических лимфопролиферативных заболеваний / материалы Российско-Голландской конференции «Диагностика и лечение лимфом». 2002. - С.7-33.

4. Думпе Э.П., Ухов Ю.И., Швальб П.Г. Физиология и патология венозного кровообращения нижних конечностей. М.: Медицина, 1982.-167с.

5. Ин-т проблем онкологии им Р.Е.Кавецкого. Киев.: Наук. Думка, 1990.-232с.

6. Исхаков А., Алексеев JL, Бачурин П., Яздовский В. Комплементзависмый микролимфоцитотоксический тест для количественного анализа субпопуляций лимфоцитов // Иммунология. -1988. № 6. С.75-76.

7. Клиническая онкогематология: Руководство для врачей. Под ред. М.А.Волковой. М.: Медицина, 2001. - 576 с.

8. Лецкий В.Б. Цитохимические исследования лейкоцитов (методическое письмо).- Л.-1970.- 32 стр.

9. Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е. Лабораторная диагностика острых лейкозов. Тверь: Губернская медицина. - 1999. -80с.

10. Медицинская лабораторная диагностика (программы и алгоритмы). Справочник / под ред. проф. А.И.Карпищенко, СПб, Интермедика, 2001, 544 стр. с илл.

11. Методы проточной цитометрии в медицинских и биологических исследованиях / под ред. М. Потапнева. Минск: ГУРНМБ, 2003, -136с.

12. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. / Под ред. С.Херрингтона, Дж. Макги. М. -Мир. - 1999. - 557с.

13. Новик A.A. Классификация злокачественных лимфом. СПб: ЭЛБИ.-2000.-126с.

14. Новик A.A., Богданов А.Н. Принципы трансплантации костного мозга и стволовых кроветворных клеток периферической крови. -СПб.:ВМедА, 2001. 168с.

15. Полак Дж., Ван Норден С. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы. М.:Мир. -1987. 70с.

16. Разнатовский И.М., Ястребов В.В. Лимфомы кожи. / С-Петербург. -НеваПресс. 1997. - 55с.

17. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. 2000г. М. Мир, 580с.

18. Рукавицын А.О. Роль иммунотерапии в лечении больных заболеваниями системы крови // Вопросы онкологии. 2002. - №2. -С.186-192.

19. Руководство по гематологии в 3 т. Т.1. / Под ред. А.И.Воробьева. -М.: Ньюдиамед, 2002, 280с.

20. Савельев B.C. Современные направления в хирургическом лечении хронической венозной недостаточности // Флеболимфология. 1996. -№ 1. - С.5-7.

21. Савченко В.Г., Паровичников E.H. Лечение острых лейкозов (клинические исследования). М.:МЕДпресс-информ, 2004.- 224с.

22. Серебряная Н.Б. Иммунопатогенез B-клеточных лимфом // Медицинская иммунология. 2002. - Т.4. №4-5. - С.53 5-544.

23. Стрижаков А.Н., Мхеидзе Д.М., Тимохина Е.В., Гришина В.В. Пуповинная кровь источник стволовых клеток // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. -2003.-Т.2. №4.-C.33-37.

24. Тотолян А.А., Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы. СПб.: Наука. - 2000.- Т.1;Т.2. 231с.

25. Управление качеством клинических лабораторных исследований. Нормативные документы. Под ред В.В.Меньшикова. М: Лабпресс. -2000.-152с.

26. Фатех-Могхадам А., П.Стиебер Рациональное использование опухолевых маркеров. 1993. - 70с.

27. Хаитов P.M., Вербицкий М.Ш. Онтогенез иммунной системы // Итоги науки и техники ВИНИТИ. Сер. Иммунология.- 1986. Т. 14. -165с.

28. Чередеев А.Н., Горлина Н.А., Козлов И.Г. CD-маркеры в практике клинико-диагностических лабораторий // Клин, лабор. диагн. 1999. - №6. - С.25-32.

29. Эллиниди В.Н., Аникеева Н.В., Максимова Н.А. Практическая иммуногистоцитохимия (Методические рекомендации) СПб.: ВЦЭРМ МЧС России, 2002. - 36с.

30. Яблоков Е.Г., Кириенко А.И., Богачев В.Ю. Хроническая венозная недостаточность. М.: Медицина. - 1999. - 218с.

31. Allman R. Flow cytometry: principles and application. In: Clinical Flow cytometry. Principles and application. Ed. by Bauer K.D., Duque R.E., Shankey T.V. / Proceedings RMS. 1993. - Vol.28. №2. - P.45-54.

32. Avrameas S. and Uriel J. Method of antigen and antibody labeling with enzymes and its immunodiffusion application. // C. R. Acad. Sci. Paris. -1966. Vol.262. №24. -P.2543-2545. French.

33. Avrameas S. Coupling of enzymes to proteins with glutaraldehyde. Use of the conjugates for the detection of antigens and antibodies // Immunochemistry. 1969. - Vol.6. №1. - P.43-52.

34. Bain B.J. Routine and specialized techniques in the diagnosis of haematological neoplasms // J. Clin. Pathol. 1995. - Vol.48. №6. - P.501-508.

35. Bakker S.T.C., De Grooth B.G., Greve J. Cluster analysis of flow cytometric list mode data on a personal computer // Cytometry. 1993. -Vol.14.-P.649-659.

36. Banker D.E., Groudine M., Willman C.L., Norwood T., Appelbaum F.R. Measurements of spontaneous and therapeutic agent-induced apoptosis with BCL-2 protein expression in acute myeloid leukemia // Blood. 1997. -Vol.89. - P.243-255.

37. Basso G., Buldidni B., de Zen L., Orfao A. New immunologic approaches for imunophenotyping acute leukemias // Hematologica. 2001. -Vol.86. №7.-P.675-692.

38. Basso G., Rondelli R., Covezzoli A., Putti M. The role of immunophenotype in acute lymphoblastic leukemia of infant age // Leuk. Lymphoma. 1994. - Vol.15. №1-2. - P.51-60.

39. Beljaards R.C., Meijer C.J., Scheffer E., van Vloten W.A., Willemze R. Cutaneous large cell lymphomas of T cell origin: diagnosis, classification and prognostic parameters // Curr. Probl. Dermatol. 1990. - Vol.19. -P.144-149.

40. Belov L., de la Vega O., dos Remedios C.G., Mulligan S.P., Christopherson R.L., Immunophenotyping of leukemias using a cluster of differentiation antibody microarray // Cancer Res. 2001. - Vol.61. №11.-P.4483-4489.

41. Bene M.C., Bernier M., Castoldi G., Faure G.C., Knap W., Ludwig W.D., Matute E., Orfao A., van der Veer M. Impact of Immunophenotyping on management of acute leukemias // Hematologica. 1999. - Vol.84. -P.1024-1034.

42. Bennett J.M., Catovsky D., Daniel M.T., Flandrin G., Galton D.A., Gralnick H.R., Sultan C. Proposals for the classification of the acute leukaemias. French-American-British (FAB) co-operative group // Br. J. Haematol. 1976. - Vol.33. №4. - P.451-458.

43. Binet J.L., Auquier A., Dighiero G. A new prognostic classification of chronic lymphocytic leukemia derived from a multivariate survival analysis // Cancer. 1981. - Vol.48. - P.198-206.

44. Borella L., Casper J.T., Lauer S.J. Shifts in expression of cell membrane phenotypes in childhood lymphoid malignancies at relapse // Blood. 1979. - Vol.54. №1.-P.64-71.

45. Borowitz M., Shuster J., Carroll A. Prognostic significance of fluorescence intensity of surface marker expression in childhood B-precursor acute lymphoblastic leukemia. A Pediatric Oncology Group Study // Blood. -1997. Vol.89. - P.3960-3966.

46. Bosse R, Kulmburg P, von Kalle C, Engelhardt M, Dwenger A, Rosenthal F, Schulz G. Production of stem-cell transplants according to good manufacturing practice // Ann Hematol. 2000. - Vol.79. №9. -P.469-476.

47. Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. -1968. Vol.21. Suppl.97. - P.l-9.

48. Brandtzaeg P., Halstensen T.S., Huitfeldt H.S., Valnes K.N. Immunofluorescence and immunoenzyme histochemistry. In: Johnstone AP, Turner MW, eds. Immunochemistry 2. A Practical Approach. Oxford University Press: Oxford. 1997. - P.71-130.

49. Braylan R.C., Orfao A., Borowitz M.J., Davis B.H. Optimal number of reagents required to evaluate hematolymphoid neoplasias: result of an international consensus meeting // Cytometry. 2001. - Vol.46. № 16. -P.23-27.

50. Burke M.D. Clinical laboratory consultation // Clin. Chem. 1995. -Vol.41.-P.1237-1240.

51. Busachi C.A., Ray M.B., Desmet V.J. An immunoperoxidase technique for demonstrating membrane localized HBsAg in paraffin sections of liver biopsies // J. Histochem. Cytochem. 1978. - Vol.19. - P.95-99.

52. Caligaris-Capio F. How immunology is reshaping clinical disciplines: the example of hematology // Lancet. 2001. - Vol.358. №9275. - P.49-55.

53. Callam M.J. Epidemiology of varicose veins // Br. J. Surg.- 1994. -Vol.81. P.1671-1673.

54. Campana D., Coustan-Smith E. Minimal residual disease studies by flow cytometry in acute leukemia // Acta Haematol. 2004. - Vol.112. №1-2. -P.8-15.

55. Campana D., Behm F.G. Immunophenotyping of leukemia // J. Imm. Methods. 2000. - Vol.243. - P.59-75.

56. Campana D., Coustan-Smith E. Detection of minimal residual disease in acute leukemia by flow cytometry // Cytometry. 1999. - Vol.38. - P. 139152.

57. Campbell G.T., Bhatnagar A.S. Simultaneous visualization by light microscopy of two pituitary hormones in a single tissue section using a combination of indirect immunohistochemical methods // J. Histochem. Cytochem. 1976. - Vol.24. - P.448-452.

58. Cascavilla N., Musto P., D'Arena G., Ladogana S., Matera R., Carotenuto R. Adult and childhood acute lymphoblastic leukemia: clinico-biological differences based on CD34 antigen expression // Hematologica. -1997.-Vol.82.-P.31-37.

59. Chen Z., Sandberg A.A. Molecular cytogenetic aspects of hematological malignancies: clinical implications // Am. J. Med. Genet. 2002. - Vol.115. -P.130-141.

60. Cheson B.D., Bennett J.M., Rai K.R. Guidelines for clinical protocols for chronic lymphocytic leukemia: recommendations of the National Cancer Institute-sponsored working group // Am. J. Hematol. 1988. - Vol.29. -P.152-163.

61. Coon W.W., Willis P.W., Keller J.B. Venous thromboembolism and other venous disease in the Tecumseh Community Health Study // Circulation. 1973. - Vol.48. - P.839-846.

62. Coons A.H., Creech H.J., Jones R.N. Immunological properties of an antibody containing a fluorescent group // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. — 1941. Vol.47. - P.200-202.

63. Corver W.E., Fleuren G.J., Cornelisse C.J. Software compensation improves the analysis of heterogeneous tumor samples stained for multiparameter DNA flow cytometry // J. Immunol. Methods. 2002. -Vol.260. №1-2.-P.97-107.

64. Cualing H.D. Automated analysis in flow cytometry // Cytometry. -2000. Vol.42. №2. - P.110-113.

65. Dahmoush L., Hijazi Y., Barnes E., Stetler-Stevenson M., Abati A. Adult T-cell leukemia/lymphoma: a cytopathologic, immunocytochemical, and flowcytometric study // Cancer. 2002. - Vol. 96. №2. - P.110-116.

66. Del Vecchio L., Brando B., Ortolani C., Pizzolo G., Semenzato G., Basso G. Recommended reporting format for flow cytometry diagnosis of acute leukemia // Haematologica. 2004. - Vol.89. №5. - P.594-598.

67. Delgado J., Morado M., Jimenez C.M., Garcia-Grande A., Hernandez-Navarrro F. CD56 expression in myelopeoxidase negative FAB M5 acute myeloid leukemia // Am. J. Hematol. 2002. - Vol.69. №1. - P.28-30.

68. Di Giuseppe J.A., Borowitz M.J. Clinical utility of flow cytometry in the chronic lymphoid leukemias // Semin. Oncol. 1998. - Vol.25. №1. - P.6-10.

69. Donnenberg A.D., Koch E.K., Griffin D.L., Stanczak H.M., Kiss J.E., Carlos T.M., Buchbarker D.M., Yeager A.M. Viability of cryopreserved bone marrow progenitor cells stored for more than a decade // Cytoterapy. -2002. Vol.4. №2. - P.157-163.

70. Dormandy J.A. Pathophysiology of venous leg ulceration: an update // Angiology.- 1997. Vol.48. - P.71-75.

71. Dorshkind K. Multilineage development from adult bone marrow cells // Nature Immunology. 2002. - Vol.3. №4. - P.311-313.

72. Dowd P.M., Hudspith B.N., Miller J.A., Barr R.M., Brostoff J., Greaves M.W. Release in vivo of IL-1 like activity by human skin // Clin. Exp. Immunol. 1987. - Vol.67.№ 3. - P.606-610.

73. Fagioli M., Alcalay M., Pandolfi P.P. Alternative splicing of PML transcripts predicts coexpression of several carboxy-terminally different protein isoforms // Oncogene. 1992. - Vol.7. - P.1083-1091.

74. Ferrando A. and Look A.T. Gene expression profiling: will it complement or replace immunophenotyping? // Best Practice & Research Clinical Haematology. 2003. - Vol.16. №4. - P.645-652.

75. Foa R., Vitale A. Towards an integrated classification of adult acute lymphoblastic leukemia // Rev. Clin. Exp. Hematol. 2002. - Vol.6. -P.181-199.

76. Foon K.A., Told R.F. Immunologic classification of leukemia and lymphoma // Blood. 1986. - Vol.68. №1. - P.l-31.

77. Fornas O., Garcia J., Retriz J. Flow cytometry of CD34+ cells in whole blood // Nature Med. 2000. - Vol.6. - P.833-836.k

78. Franks P.J., Moffatt C.J., Connolly M. Community leg ulcer clinics: effect on quality of life // Phlebology. 1994. - Vol.9. - P.83-86.

79. Gale R.P., Cozen P., Godman M.,Wang F.F., Bernstein L. Decreased chronic lymphocytic leukemia incidence in Asians in Los Angeles County // Leuk. Res. 2000. - Vol.24. - P.665-669.

80. Gall E.A., Mallory T.B. Malignant lymphoma: a clinico-pathological survey of 618 cases // Amer. J. Pathol. 1942. - Vol.18. №3. - P.381-429.

81. Gallyas F., Gores T., Merchnthaler I. High-grade intensification of the end-product of the diaminobenzidine reaction for peroxidase histochemistry // J. Histochem. Cytochem. 1982. - Vol.30. №2. - P.183-184.

82. Galton D.A.G. The pathogenesis of chronic lymphocytic leukemia // Can. Med. Assoc. J. 1966. - Vol.94. - P.1005-1010.

83. Garrido S.M., Willman C.L., Appelbaum F.R., Banker D.E. Three-color versus four-color multiparameter cell cycle analyses of primary acute myeloid leukemia samples // Cytometry (Comm.Clin. Cytometry). 2000. -Vol.42. - P.83-94.

84. Gelman R., Wilkening C. Analyses of quality assessment studies using CD45 for gating lymphocytes for CD3+CD4+% // Cytometry (Comm in Clin Cytometry). 2000. - Vol.42. - P.l-4.

85. Gluckman E. Current status of umbilical cord blood hematopoietic stem cell transplantation // Exp. Hematol. 2000. - Vol.28. - P. 1197-1205.

86. Gluckman E., Broxmeyer H.A., Auerbach A.D. Hematopoietic reconstruction in a patient with Fanconi's anemia by means of umbilical-cord blood from HLA-identical sibling // N. Engl. J. Med. 1989. -Vol.337.-P.373-381.

87. Gotic M., Kraguljac N., Rolovic Z., Radosevic N., Boskovic D. Immunophenotyping of leukemic cells in the diagnosis of hairy cell leukemia // Srp. Arh. Celok. Lek. 2000. - Vol.128. № 5-6. - P.157-164.

88. Graham R.C., Lundholm U., Karnovsky M.J. Cytochemical demonstration of peroxidase activity with 3-amino-9-ethylcarbozole // J. Histochem. Cytochem. 1965. - Vol.13. - P.150-152.

89. Greaves M. Molecular genetics, natural history and the demise of childhood leukemia // Eur. J. Cancer. 1999. - Vol.35. - P.1941-1953.

90. Greaves M.F., Chan L.C., Farley A.J.W., Wan S.M., Molgaart H.V. Lineage promiscuity in hemopoietic differentiation and leukemia // Blood. -1986.-Vol.67.-P.l-11.

91. Grogan W. McLean, Collins J.M. Guide to flow cytometry methods. / Marcel Dekker Inc, NY and Basel. 1990. - 227p.

92. Hassett J., Parker J. Laboratory practices in reporting flow cytometry phenotyping results for leukemia/lymphoma specimens: results of survey // Cytometry. 1995. - Vol.22. - P.264-281.

93. Hoelzer D., Gokbuget N., Ottman O., Pui C.-H., Relling M.V., Appelbaum F.R., van Dongen J.J.M., Szczepanski T. Acute lymphoblastic leukemia // Hematology. 2002. - Vol.1. - P.162-182.

94. Hofman F. Immunohistochemistry. In: Current Protocols in Immunology. -1996. 5.8.1-5.8.2.3.

95. Hrusak O., Porwit-McDonald A. Antigen expression patterns reflecting genotype of acute leukemias // Leukemia. 2002. - Vol.16. - P.1233-1258.

96. Hsu S.-M., Raine L. / DeLellis R.A. (ed.) Advances in immunohistochemistry. NY: Masson. 1984.

97. Hulkkonen J., Vilpo L., Hurme M., Vilpo J. Surface antigen expression in chronic lymphocytic leukemia: clustering analysis, interrelationship and effects of chromosomal abnormalities // Leukemia. 2002. - Vol.16. №20. -P.178-185.

98. Kay N.E., Hamblin T.J., Jelinck D.F., Dewald G.W., Byrd J.C., Farag S., Lucas M., Lin T. Chronic lymphocytic leukemia // Hematology. 2002. -Vol.1.-P.193-223.

99. Keeney M, Brown W, Gratama J, Papa S, Lanza F, Sutherland DR; EuropeanWorking Group on Clinical Cell Analysis. Immunophenotypic characterization of CD34(pos) cells // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. -2003. Vol.17. №3. - P.254-260.

100. Kern W, Schnittger S. Monitoring of acute myeloid leukemia by flow cytometry // Curr. Oncol. Rep. 2003. - Vol.5. №5. - P.405-412.

101. Killick S., Matute E., Powles R.L., Hamblin M., Swansbury J., Treleaven J.G., Zomas A., Atra A., Catovsky D. Outcome of biphenotypic acute leukemia // Hematologica. 1999. - Vol.84. №8. - P.699-706.

102. Kipps T.J. The CD5 B cell // Adv.Immunol. 1989. - Vol.47. - P.117-185.

103. Knowles D.M. Immunophenotypic and antigen receptor gene rearrangement analysis in T cell neoplasia // Am. J. Pathol. 1989. -Vol.134. №4.-P.761-785.

104. Kohlmann A., Schoch C., Schnittger S., Dugas M., Hiddemann W., Kern W., Haferlach T. Molecular characterization of acute leukemias by use of microarray technology // Genes Chromosomes Cancer. 2003. - Vol.37. -P.396-405.

105. Kuzel T.M., Roenigk H.H., Rosen S.T. Mycosis fungoides and the Sezary syndrome: a review of pathogenesis, diagnosis, and therapy // J. Clin. Oncol. -1991. Vol.9. №7. - P.1298-1313.

106. Lacombe F., Durrieu F., Briais A., Dumain P., Belloc F., Bascans E. Flow cytometry CD45 gating for immunophenotyping of acute myeloid leukemia // Leukemia. 1997. - Vol.11. - P.1878-1886.

107. Lauer S, Piaskowski V, Camitta B, Casper J. Bone marrow and extramedullar variations of cell membrane antigen expressionin childhood lymphoid neoplasias at relapse // Leuk. Res. 1982. - Vol.6. №6. - P.769-774.

108. Lavabre-Bertrand T. Flow-cytometric quantitation in chronic leukemias // Eur. J. Histochem. 1996. - Vol.40. Suppl 1. - P.33-38.

109. Lenkei R., Gratama J.W., Rothe G. Performance of calibration standards for antigen quantitation with flow cytometry // Cytometry. 1998. - Vol.33. - P.188-196.

110. Linet M.S., Blatttner W.A. The epidemiology of CLL. In Chronic Lymphocytic Leukemia / A. Polliack and Catovsky D. (eds) Harwood Academic Publishers, Churc, Switzerland. 1988. - P.ll-32.

111. Liu T.C. External quality assurance schemes in flow cytometry // Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health. 2002. - Vol.33. Suppl. 2. -P.91-93.

112. Lo Coco F., Nervi C., Avvisati G., Mandelli F. Acute promyelocytic leukemia: a curable disease // Leukemia. 1998. - Vol.12. - P.1866-1880.

113. Lo-Coco F., Breccia M., Noguera N. Diagnostic value of detecting fusion proteins derived from chromosome translocations in acute leukaemia // Best Practice & Research Clinical Haematology. 2003. - Vol.16. №4. -P.653-670.

114. Look A.T. Oncogenic transcription factors in the human acute leukemias // Science. 1997. - Vol.278. - P.1059-1064.

115. Ludwig W.D., Raghavachar A., Thiel E. Immunophenotypic classification of acute lymphoblastic leukaemia // Baillieres Clin. Haematol. 1994. - Vol.7. №2. - P.235-262.

116. Luger T.A., Schwarz T., Krutmann J., Kock A., Urbanski A., Kirnbauer R. Cytokines and the skin // Curr. Probl. Dermatol. 1990. - Vol.19. - P.35-49.

117. Lukes R.J., Collins R.D. New approaches to the classification of the lymphomas // Brit. J. Cancer. 1975. - Vol.31. Suppl.2. - P.l-28.

118. Mandy F., Bergeron M., Minkus T. Evolution of leukocyte immunophenotyping as influenced by HIV/AIDS pandemic // Cytometry. -1997.-Vol.30.-P.157-165.

119. Mason D.Y., Woolston R.-E. Double immunoenzymatic labeling. In Techniques in Immunohistochemistry /Eds. Bullock G.R., Petrusz P. London. Academic Press. 1982. - P.135-153.

120. Matutes E., Catovsky D. The classification of lymphoid leukaemias // Leuk. Lymphoma. 1991. - Vol.5. Suppl. - P.153-155.

121. Matutes E., Morilla R., Carbonell F., Swansbury J., Dyer M., Catovsky D. Defiition af acute biphenotypic leukemia // Hematologica. 1997. -Vol.82. - P.64-66.

122. Matutes E., Pollack A. Morphological and immunophenotypic features of chronic lymphocytic leukemia // Rev. Clin. Exp. Hematol. 2000. -Vol.4. №l.-P.22-46.

123. McCoy J.P., Carey J.L., Krause J.R. Immunophenotyping and general laboratory procedures // Am. J. Clin. Pathol. 1990. - Vol.93. Supp.l. -P.S27-S37.

124. McCoy J.P., Overton W.R. Quality control in flow cytometry for diagnostic pathology: II. A conspectus of reference ranges for lymphocyte immunophenotyping // Cytometry (Comm in Clin Cytometry). 1994. -Vol.18. -P.129-139.

125. Medina K.L., Garrett K.P., Thompson L.F., Rossi M.I.D., Payne K.J., Kincade P.W. Identification of very early lymphoid precursor in bone marrow and their regulation // Nature Immunology. 2001. - Vol.2. № 8. -P.718-724.

126. Montserrat E. Current therapy for CLL // Hematol. Cell Ther. 2000 -Vol.42. №l.-P.31-33.

127. Moos P.J., Raetz E.A., Carlson M.A., Szabo A., Smith F.E., Willeman C. Identification of gene expression profiles that segregate patients with childhood leukemia // Clin. Cancer Res. 2002. - Vol.8. - P.3118-3130.

128. Moreau E.J., Matutes E., A'Hern R.P. Improvement of the chronic lymphocytic leukemia scoring system with the monoclonal antibody SN8 (CD79b) // Am. J. Clin. Pathol. 1997. - Vol.108. - P.378-387.

129. Naeim F. Selection of monoclonal antibodies in the diagnosis and classification of leukemias // Disease Markers. 1989. - Vol.7. - P.l-14.

130. Nakane P.K., Pierce G.B. Enzyme-labeled antibodies for the light and electron microscopic localization of tissue antigens // J. Cell Biol. 1967. -Vol.33. №2.-P.307-318.

131. Nemes Z. Intensification of 3'3-diaminobezidine precipitation using the ferric ferrocyanide reaction, and its application in te double-immuoperoxidase technique // Histochemistry. 1987. - Vol.86. - P.415-419.

132. Nestle F.O., Haffner A.C., Schmid M.H., Dummer R., Burg G. Current therapy concepts in cutaneous T-cell lymphomas. // Schweiz. Med. Wochenschr. -1997. Bd. 127. №8. - P.311-320. [German].

133. Orfao A., Schmitz G., Brando B. Clinically useful information provided by the flow cytometric immunophenotyping of hematological malignancies: current status and future directions // Clin. Chem. 1999. - Vol.45. -P.1708-1717.

134. Owens M.A., Vail H.G., Hurley A.A., Wormsley S.B. Validation and quality control of immunophenotyping in clinical flow cytometry // J. Immunol. Methods. 2000. - Vol.243. №1-2. - P.33-50.

135. Paietta E. Comments on the 2001 WHO proposal for the classification of haematopoietic neoplasms // Best Practice & Research Clinical Haematology 2003. - vol.16. №4. - P.547-559.

136. Paietta E. How to optimize multiparameter flow cytometry for leukaemia/lymphoma diagnosis // Best Practice & Research Clinical Haematology. 2003. - Vol.16. №4. - P.671-683.

137. Partsch H. A new classification scheme of chronic venous disease in the lower extremities. The 'CEAP' system // Phlebolymphology. - 1995. -№10. -P.3-8.

138. Porwit-MacDonald A., Bjorklund E., Lucio P., van Lochem E.C., Mazur I., Parreira A., van den Beemd M.W., van Wering E.R., Baars E., Gaipa G.,

139. Powell C.C., Rohrer M.J., Barnard M.R., Peyton B.D., Furman M.I., Michelson A.D. Chronic venous insufficiency is associated with increased platelet and monocyte activation and aggregation // J. Vase. Surg. 1999. -Vol.30. №5.-P.844-851.

140. Pui C.H., Campana D., Evans W.E. Childhood acute lymphoblastic leukemia current status and future perspectives // Lancet Oncol. - 2001. -Vol.2. - P.597-607.

141. Raghavachar A., Steinbach K.H., Prummer O., Grilli G., Fliedner T.M. Survival of transfused cryopreserved granulocytic progenitor cells (CFU-C) inrecipient circulation // Cell Tissue Kinet. 1983. - Vol.16. №3. - P.303-311.

142. Rai K.R., Sawitsky A., Cronkite E.P. Clinical staging of chronic lymphocytic leukemia // Blood. 1975. - Vol.46. -P.219-234.

143. Ralfkiaer E. Controversies and discussion on early diagnosis of cutaneous T-cell lymphoma phenotyping // Dermatol. Clin. 1994. -Vol.12. №2.-P.329-334.

144. Rappaport H., Winter W.J., Hicks E.B. Follicular lymphoma: a réévaluation of its position in the scheme of malignant lymphoma, based on a survey of 253 cases // Cancer. 1956. - Vol.9. №1. - P.792-821.

145. Ratei R., Sperling C., Karawajew L. Immunophentype and clinical characteristics on CD45-negative and CD45-positive childhood acute lymphoblastic leukemia // Ann. Hematol. 1998. -Vol.77. - P.107-114.

146. Reading C.L., Estey E.H., Huh Y.O., Claxton D.F., Sanchez G., Terstappen L.W., O'Brien M.C., Baron S., Deisseroth A.B. Expression of unusual immunophenotype combinations in acute myelogenous leukemia // Blood. 1993. - Vol.81. - P.3083-3090.

147. Reilly J.T., Barnett D. UK NEQAS for leukocyte immunophenotyping: the first 10 years // J. Clin. Pathol. 2001. - Vol.54. №7. - P.508-511.

148. Rezael A., Adib M., Mokarian F., teblanlan M., Nassiri R. Leukemia markers expression of peripheral blood vs. bone marrow using flow cytometry // Med Sci Monit. 2003. - Vol.9. №8. - P.CR359-362.

149. Richards S.J., Jack A.S. The development of integrated haemapathology laboratoties: a new approach to tpe diagnosis of leukemia and lymphoma // Clinical and Laboratory Haematology. 2003. - Vol.25. №6. -P.:337-342.

150. Roederer M. Spectral compensation for flow cytometry: visualization artifacts, limitations, and caveats // Cytometry. 2001. - Vol.45. №3. -P.194-205.

151. Rothe G., Schmitz G. European Working group on clinical cell analysis (EWGCCA) Consensus Document on Leukemia Immuniphenotyping // Leukemia. 1996. - Vol.10. - P.877-895.

152. Ruiz A.A., Duque R.E., Orfao A. Report on the first Latin American consensus conference for flow cytometric immunophenotyping of leukemia // Cytometry. -1998. Vol. 34. - P.39-42.

153. Schmid I., Ferbas J., Uittenbogaart CH., Giorgi JV. Flow cytometric analysis of live cell proliferation and phenotype in populations with low viability // Cytometry. 1999. - Vol.35. №1. - P.64-74.

154. Schmid I., Uittenbogaart C.H., Keld B., Giorgi J.V. A rapid method for measuring apoptosis and dual-color immunofluorescence by single laser flow cytometry // J. Immunol. Methods. 1994. - Vol.170. №2. - P.145-157.

155. Schmitz N., Barrett J. Optimizing engraftment source and dose of stem cells // Seminars in Hematology. - 2002. - Vol.39. №1. - P.3-14.

156. Schwartz A., Marti G.E., Poon R., Gratama J.W., Fernandez-Repollet E. Standartizing flow cytometry: a classification system of fluorescence standards used for flow cytomtery // Cytometry. 1998. - Vol.33. - P.106-114.

157. Serke S., Johnsen H., Huhn D., Kvalheim G. European survey of the flow cytometric determination of CD34 expression cells // Cytotherapy. -1999.-Vol.1.-P.343-347.

158. Serke S., Johnsen H.E. A European reference protocol for quality assessment and clinical validation of autologous haematopoietic blood progenitor and stem cell grafts // Bone Marrow Transplant. 2001. - Vol27. №5. - P.463-470.

159. Shaffer A.L., Rosenwald A., Staudt L.M. Lymphoid malignancies: the dark side of B-cell differentiation // Nature Review Immunology. 2002. -Vol.2. - P.20-32.

160. Shapiro H.M., Perlmutter N.G., Stein P.G. A flow cytometer designed for fluorescence calibration // Cytometry. 1998. - Vol.33. №2. - P.280-287.

161. Sims L.C., Brecher M.E., Gertis K., Jenkins A., Nickischer D., Schmitz JL., Sparks S., Wright P., Bentley S. Enumeration of CD34-positive stemcells evaluation and comparison of tree methods // J. Hematother. 1997. -Vol.6. - P.213-226.

162. Slater D.N. Review of investigative diagnostic techniques for cutaneous lymphoma // Semin. Dermatol. 1994. - Vol.13. №3. - P.166-171.

163. Stelzer G.T., Shuts K.E., Loken M.R. CD45 gating for routine flow cytometric analysis of human bone marrow specimens / In: Landay E. eds. Clinical flow cytometry. NewYork Ann of NY Acad Sci. - 1993. - P.265-280.

164. Sternberg L.A. Immunocytochemistry. / 2nd ed., John Wiley and Sons.-New York.-1979.

165. Stetler-Stevenson M. Flow cytometry in lymphoma diagnosis and prognosis: useful? // Best Practice & Research Clinical Haematology. -2003. Vol.16. №4. - P.583-597.

166. Stewart C.C., Stewart S.J. Immunological monitoring utilizing novel probes // NY Acad. Sci. 1993. - Vol.677. - P.94-112.

167. Straus W. Imidazole increases the sensitivity of the cytochemical reaction for peroxidasewith diaminobenzidine at a neutral pH .// J. Histochem. Cytochem. 1982. - Vol.30. №5. - P.491-493.

168. Sulivan J.G., Wiggers T.B. Immunophenotyping of leukemia, the new force in hematology //Clin. Lab. Sci. 2000. - Vol.13. - P.l 17-122.

169. Sutherland D.R, Anderson L., Keeney M., Nayar R., Chin-Yee I. The ISHAGE guidelines for CD34+ cell determination by flow cytometry // J. Hemother. 1996. - Vol.5. - P.213-226.

170. Szczepanski T., van der Velden V.H.J., van Dongen J.J.M. Classification systems for acute and chronic leukemias // Best Practice & Research Clinical Haematology. 2003. - Vol.16. №4. - P.561-582.

171. Taylor C.G., Stasi R., Bastianelli C., Venditti A., Del Poeta G., Amadori S., Sargent J. Diagnosis and classification of the acute leukemias: recentadvances and controversial issues // Hematopathol. Mol. Hematol. 1996. -Vol.10. №1-2.-P.l-38.

172. Tenen D.G. Disruption of differentiation in human cancer: AML shows the way // Nature Review. 2003. - Vol.3. №2. - P.89-101.

173. Terstappen L.W.M., Mickaels R.A., Dost R., Loken M.R. Increased light scattering resolution facilitates multi-dimensional flow cytometric analysis // Cytometry. -1990. Vol.11. - P.506-512.

174. Teshima T., Ferrara J.L.M. Understanding the alloresponse: new approaches to graft-versus-host disease prevention // Semin Hematology. -2002. Vol.39. №1. - P.15-22.

175. Thomas E.D. Bone marrow transplantation: past experiences and future prospects // Semin. Oncol. 1992. - Vol.19. №3. Suppl.7. - P.3-6.

176. Tytherleigh L., Taparia M., Leahy M.F. Detection of hairy cell leukemia in blood and bone marrow using multidimensional flow cytomery with CC45-PECY5 and SS gating // Clinical Laboratory Haematology. 2001. -Vol.23. №6.-P. 385-390.

177. Urasinski I, Zdziarska B. Indicators of nonspecific immunity in patients with non-Hodgkin's lymphoma of high grade malignancy in the remission phase of the disease. // Pol. Arch. Med. Wewn. 1991. - Vol.86. №5. -P.304-310. [Polish]

178. Verwer B.J., Terstappen L.W. Automatic lineage assignment of acute leukemias by flow cytometry // Cytometry. 1993. - Vol.14. - P.862-875.

179. Vesely R., Barths J., Vanlangendonck F., Hannet I., Strauss K. Initial results of central immunophenotyping quality control program (CEQUAL) // Cytometry. -1996. Vol.26. №2. - P.108-112.

180. Vidríales M.B., San-Miguel J.F., Orfao A., Coustan-Smith E., Campana

181. D. Minimal residual disease monitoring by flow cytometry // Best Practice & Research Clinical Haematology. 2003. - Vol.l6№4. - P.599-612.

182. Waters W.R., Harkins K.R., Wannemuchler M.J. Five-color flow cytometric analysis of swine lymphocytes for detection of proliferation, apoptosis, viability, and phenotype // Cytometry. 2002. - Vol.48. №3. -P.146-152.

183. Weisburger E.K., Russfield A.B., Homburger F., Weisburger J.H., Boger

184. E., van Dongen G.C. Testing of twenty-one environmental aromatic amines or derivatives for long-term toxicity or carcinogenicity // J. Environ. Pathol. Toxicol. 1978. - Vol.2. №2. - P.325-356.

185. Whiteside T.L., Gooding W. Immune monitoring of human gene therapy trials: potential application to leukemia and lymphoma // Blood Cells Mol. Dis. 2003. - Vol.31. №1. - P.63-71.

186. Wood G.S. Cutaneous lymphoproliferative disorders: strategies for molecular biological analysis and their major findings // Springer Semin. Immunopathol. 1992. - Vol.13. №3-4. - P.387-399.

187. Yeoh E.J., Ross M.E., Shurtleff S.A., Williams W.K., Patel D., Mahtouz R. Classification, subtype, discovery, and prediction of outcome in pediatric acute lymphoblastic leukemia by gene expression profiling // Cancer Cell. -2002.-Vol.1. P.133-143.

188. Zutter M.M., Hes J.L. Guidelines for the diagnosis of leukemia or lymphoma in children // Am. J. Clin. Pathol. 1998. - Vol.109. Suppl.l. -P.S9-S22.