Изучение прогностического значения накопления онкопротеина Р53 у больных злокачественными лимфомами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, кандидат медицинских наук Калищук, Светлана Анатольевна

• Калищук, Светлана Анатольевна
• кандидат медицинских наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Калищук, Светлана Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Прогностические факторы при злокачественных 11 лимфомах

1.2. Апоптоз - программированная клеточная гибель. 18 Роль апоптоза в канцерогенезе

1.3. Клеточные онкогены - индукторы канцерогенеза

1.4. Протоонкоген р53 - важный регулятор апоптоза. 22 Структура, механизмы активации

1.5. Функции, структура и механизм действия 25 онкопротеина Р53.

1.6. Протеины семейства Р

1.7. Накопление протеина Р53 при лимфопролиферативных 28 заболеваниях

1.8. Особенности накопления протеина BCL-2 в тканях

1.9. Накопление протеина BCL-2 при лимфопролифера- 32 тивных заболеваниях

1.10. Накопление протеина Р53 и лекарственная 33 устойчивость

1.11. Целенаправленная индукция апоптоза - стратегия 34 разработки новых противоопухолевых лекарств

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Общая клиническая характеристика больных

2.2. Методы клинического обследования больных НЛ

2.3. Иммуногистохимический метод

2.4. Методы статистической обработки результатов

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЯ

3.1. Характер накопления протеина Р 53 48 при различных видах злокачественных лимфом

3.2. Особенности продукции протеина Р53 при 49 агрессивнных НЛ

3.3. Особенности продукции Р53 при индолентных НЛ

3.4. Особенности продукции протеина Р53 при болезни 58 Ходжкина

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение прогностического значения накопления онкопротеина Р53 у больных злокачественными лимфомами»

Актуальность

Злокачественные лимфомы (ЗЛ) относятся к наиболее распространенным опухолевым заболеваниям системы крови, и включают в себя большую группу неходжкинских лимфом и болезнь Ходжкина (лимфогранулематоз, лимфома Ходжкина). В течение 1980-90-х годов в изучении злокачественных лимфом достигнуты значительные успехи. При лечении современными схемами химиотерапии более 50% больных живут более 5 лет [1;3;140]. Не менее значительные успехи достигнуты и в понимании биологической природы ЗЛ. Определена роль нарушения фундаментальных биологических процессов при ЗЛ, таких как клеточная пролиферация, естественная клеточная гибель - апоптоз, а также их регуляции.

Огромный прогресс достигнут патоморфологами. На сегодняшний день выделены и обособлены в отдельные нозологические формы около 40 различных видов ЗЛ [18], некоторые из которых могут протекать индолентно, а другие агрессивно, и различаются способностью реагировать на химиотерапию.

Такая клинико-морфологическая разнородность ЗЛ, и большое количество предлагаемых схем лечения, различающихся по токсичности и агрессивности воздействия на организм больного, делают проблему подбора оптимальной терапии весьма сложной и ответственной. С целью снизить риск осложнений от химиотерапии, предложены и сегодня используются различные прогностические схемы [30;38;54;62;91; 134; 170]. Эти схемы (например: Международный прогностический индекс [38], по совокупности определенных объективных показателей позволяют ещё до начала химиотерапии предположить вероятность достижения ремиссии у данного конкретного больного. Схема тем надежнее, чем больше объективных показателей включены в неё, и чем выше прогностическая ценность каждого из них. Сегодня в мире ведутся активные исследования, направленные на поиск новых, надежных и специфичных прогностических факторов. Исследования многих авторов показывают, что одним из перспективных показателей, позволяющих прогнозировать клиническое течение 3J1, является характер накопления опухолевыми лимфоид-ными клетками протеина Р-53 [4;5;72;81;89; 107; 131; 143; 147; 153].

Многочисленные работы свидетельствуют о том, что патогенез многих болезней человека связан с неспособностью клеток подвергаться апоптозу. Одним из механизмов нарушения апоптоза в опухолевых клетках являются мутации в генах, контролирующих апоптоз. В ряду этих процессов находится хорошо изученная гиперэкспрессия гена bcl-2, тормозящего апоптоз, а также мутации в гене р53, препятствующие функционированию кодируемого им белка как индуктора апоптоза. Одной из причин резистентности опухолевых клеток являются мутации или дефицит гена р53. При дефектном функционировании данного гена происходит накопление клеток с множественными генетическими дефектами, что и лежит в основе опухолевой прогрессии [7,9,27,43,64].

В опухолях человека наиболее часто (по сравнению с другими генами ) выявляются мутации гена р53. По данным литературы [7,9], не менее 50% опухолей человека экспрессируют мутированную форму гена р53. Обнаруженный вначале как опухолевый антигенсвя-занный белок в трансформированных вирусом SV40, р53 в настоящее время является одним из центральных факторов, присутствующих в большинстве опухолей человека. Продукт гена опухолевого супрессора р53 - ядерный фосфопротеин - постоянно синтезируется клетками, однако быстро распадается [7,9,64]. Белок Р53 чрезвычайно консервативен (обнаружен у многих представителей животного мира) и состоит (у человека) из 393 аминокислотных остатков [14].

В настоящее время выделяют 2 типа гена р53: нормальный (или дикий) и мутантный [2,47]. Нормальный белок Р53 специфически связывается с ДНК клеток эукариот и становится фактором транскрипции, супрессирует многие онкогены и гены факторов роста, но активирует некоторые гены факторов дифференцировки [29].

Однако даже при незначительном повреждении структуры ДНК содержание белка Р53 в клетке резко увеличивается благодаря его стабилизации. Главная функция белка Р53 - охрана целостности генома клетки [36, 56, 64]. Нормальный ген р53 фенотипически доминантен по отношению к мутантному, но высокий уровень продукции мутантного гена может подавлять действие нормального. Мутантный белок Р53, в отличие от нормального, проявляет свойства онкобел-ков [14]. Мутации гена р53 являются универсальной ступенью в прогрессии более 50% опухолей человека [14,20,30,36,71].

Однако, в любом случае различные авторы отмечают достаточно точную связь между количеством выявляемого в лимфоидной ткани при ЗЛ протеина Р53, частотой достижения ремиссий и развитием лекарственной устойчивости [72;92;131;184;185]. Зарубежные авторы активно дискутируют диагностическую и прогностическую ценность исследования протеина Р53 при ЗЛ. Полностью отсутствуют данные о синтезе этого протеина при ЗЛ в генотипе национальных популяций Российской Федерации и, в частности, среди населения Санкт-Петербурга. В связи с этим, такой перспективный прогностический показатель при ЗЛ, как интенсивность накопления протеина Р53, не получил пока научно-практического подтверждения в нашей стране, и изучение этого вопроса имеет реальное практическое значение.

Цель исследования

Изучить связь накопления онкопротеина Р53 с клинико-лабораторными показателями при злокачественных лимфомах, определить значение интенсивности накопления онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов для прогнозирования эффективности химиотерапии первой линии.

Задачи исследования

1. Изучить связь накопления онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов у больных агрессивными неходжкинскими лимфомами с клинико-лабораторными характеристиками заболевания.

2. Изучить связь накопления онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов у больных индолентными неходжкинскими лимфомами с клинико-лабораторными характеристиками заболевания.

3. Изучить связь накопления онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов у больных болезнью Ходжкина с клинико-лабораторными характеристиками заболевания.

4. Определить соотношение интенсивности накопления онкопротеина Р53 при агрессивных неходжкинских лимфомах со значением международного прогностического индекса (МПИ / IPI).

5. Сопоставить накопление онкопротеинов Р53 и BCL-2 при злокачественных лимфомах.

Положения, выносимые на защиту

1. Интенсивность накопления онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов различна при Агрессивных, индолентных неходжкинских лимфомах и болезни Ходжкина.

2. Характер накопления онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов имеет связь с клинико-лабораторными особенностями течения злокачественных лимфом - в большей степени при агрессивнных неходжкинских лимфомах, в меньшей при болезни Ходжкина, и не имеет такой связи при индолентных неходжкинских лимфомах.

3. Интенсивность накопления онкопротеина Р53 при агрессивнных неходжкинских лимфомах коррелирует со значением международного прогностического индекса (МПИ/1Р1).

Научная новизна исследования

Впервые в России на презентабельной выборке больных злокачественными лимфомами проведено исследование характера накопления онкопротеина Р53 в лимфоидной ткани и оценено его прогностическое значение. Исследовано влияние интенсивности накопления онкопротеина Р53 на характер клинического течения и связь с клинико-лабораторными показателями при злокачественных лимфомах.

Практическая значимость работы и её реализация

Исследование интенсивности накопления онкопротеина Р53 в лимфоидной ткани позволит более достоверно прогнозировать эффективность химиотерапии первой линии при неходжкинских лимфомах с целью определения наиболее оптимальной агрессивности химиотерапии и снижения токсических осложнений.

Результаты работы внедрены в практику в лаборатории молекулярной патологии и цитогенетики при кафедре гематологии и клинической иммунологии Военно-медицинской академии.

Апробация работы исследования опубликованы в 5 печатных работах.

Объем и структура работы

Диссертация состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы и 2-х приложений. Работа изложена на 111 страницах машинописного текста, содержит 14 таблиц, 1 рисунок. Указатель литературы включает 30 отечественных и 172 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Калищук, Светлана Анатольевна

ВЫВОДЫ

1. Интенсивность накопления онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов более выражена при агрессивных неходжкинских лимфомах и болезни Ходжкина, и отсутствует накопление при индолентных лимфомах.

2. При агрессивных неходжкинских лимфомах наиболее интенсивное накопление онкопротеина Р53 в опухолевой ткани лимфатических узлов выявлялось чаще у больных с ранней генерализацией патологического процесса, протекающего с поражением костного мозга, опухолевой интоксикацией, высоким значением системных опухолевых маркеров.

3. Высокая интенсивность накопления протеина Р53 при болезни Ходжкина сопутствовала мультифокальному типу поражения, наличию симптомов опухолевой интоксикации и повышенному уровню ЛДГ.

4. Интенсивность накопления онкопротеина Р53 при агрессивных неходжкинских лимфомах имеет прямую корреляционную связь со значением международного прогностического индекса (МПИ / IPI).

5. Вероятность достижения полной ремиссии при агрессивных неходжкинских лимфомах достоверно выше у больных с исходно низким накоплением протеина Р53.

6. При болезни Ходжкина интенсивность накопления онкопротеина Р53 достоверно не связана с прогнозом и эффективностью химиотерапии первой линии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для прогнозирования эффекта химиотерапии первой линии при агрессивных неходжкинских лимфомах целесообразно исследовать накопление протеина Р53 в опухолевой ткани (при слабой иммуногистохимической экспрессии вероятность достижения полной ремиссии достоверно выше, чем при сильной).

2. При иммуногистохимическом методе исследования накопления протеина Р53 в ткани лимфатических узлов, целесообразно использовать полуколичественный метод оценки накопления, с вычислением коэффициента накопления.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Калищук, Светлана Анатольевна, 2003 год

1. Бармина Н.М., Двойрина В.В. Статистика злокачественных лимфом в 1990 году // Современные методы диагностики и лечения злокачественных лимфом. - СПб. -1992. -С. 13-14.

2. Белоусова А. К. Загадки гена опухолевого супрессора р53 // Эксперим. онкол. -1996.- Т. 18 , №4.— С. 197-208.

3. БеттичерД.А. Новые мишени противоопухолевой терапии// Материалы конференции « Современные тенденции развития лекарственной терапии опухолей». М., 1997.- С. 10-16.

4. Бутенко З.А. Онкогены регуляторы апоптоза в механизмах лимфо- и канцерогенеза // Эксперим. онкол.-1995.-Т. 17,№3.-С.165-171.

5. Бутенко З.А. Программированная клеточная гибель при злокачественных лимфомах // Доп.нац.акад.наук.Укр.-1999.-№1.-С.185-187.

6. Владимирская Е.Б., Масчан А.А., Румянцев А.Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста // Гематол. трансфузиол. -1997.—Т.42, №1.— С. 4-9.

7. Воробьёв А.И., Бриллиант М.Д. Руководство по гематологии: В 2-х т. / Под ред. А.И.Воробьёва. 2-е изд., перераб. и доп. - М: Медицина, 1985.

8. Диагностика и лечение злокачественных лимфом. Под ред. Новика А.А. // Информационные материалы кафедры гематологии и клинической иммунологии Военно-медицинской академии к конференции. СП6.-1997.- С.64-81.

9. Животовский Б.Д., Хансон К.П. Роль активации генома в программируемой клеточной гибели // Биополимеры и клетка. -1985. Т. 1, № 4. - С. 199 - 203.

10. Журавлёв B.C., Вашурина Е.А., Орлова А.Д. и др. Исследование сывороточных иммуноглобулинов у больных злокачественными лимфомами // Пробл. гематологии и переливания крови.1982.- Т.27, № 3. С. 22-24

11. Иммунологические аспекты лимфопролиферативных заболеваний II Под ред. В.П. Лозового, Г.З. Ширинского. -Новосибирск: Наука, -1987. -151 с.

12. Канаев С.В., Малинин А.П., Кордыш Ф.С. Результаты терапии лимфогранулематоза в лечебных учреждениях Санкт-Петербурга II "Современные методы диагностики и лечения злокачественных лимфом" Тезисы симпозиума. -Псков. -1992. -С. 14-15.

13. Капитаненко A.M., Дочкин И.И. Клинический анализ лабораторных исследований / Под ред. Е.В. Гембицкого: 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Военное издательство, -1988. -270 с.

14. Лихтенштейн А.В., Шапот B.C. Опухолевый рост: ткани, клетки, молекулы II Пат. физиол.-—1997.--№3.—С. 35-48.

15. Лушников Е.Ф., Загребин В.М. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития //Архив патологии.-1987. -Т. 49, N92. -С. -84-9.

16. Мазуров В.И., Антонов В.Б., Новик А.А. и соавт. Клинико-морфологическая характеристика неходжкинских злокачественных лимфом // Врачебное дело. -1992. № 3. - С. 38 - 40.

17. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. Под редакцией Харрингтона С., Макги Дж., пер. с англ.- М: Мир.-1999.-С.20-64

18. Новик А.А. Классификация злокачественных лимфом. СПб: ЭЛБИ.- 2000.-С.126.

19. Новик А.А., Белохвостое А.С. Молекулярно-генетический подход к диагностике злокачественных лимфом // Вопр. онкологии -1998.-Т.44, №3, -С. 274-279.

20. Математико-статистические методы в клинической практике / Учебное пособие. Под редакцией Кувакина В.И. СПб: ВМедА.-1993.-С. 62-95.

21. Пальцев М.А., Коган Е.А., Тунцова О.И. Иммуногистохимия биомолекулярных маркеров раннего рака щитовидной железы //Арх. пат. -1997.—Вып.6.—С. 18-23.

22. Погорелов В.М., Козинец Г.И. Морфология апоптоза при нормальном и патологическом гемопоезе // Гематол. транфузиол. -1995. -Т. 40, № 5. -С.17 -25.

23. Программированная клеточная гибель. /Под ред. Новикова

24. B.C.- СПб:Наука.-1996.-С.157.

25. Робинсон М.В., Труфакин В.А. Апоптоз клеток иммунной системы // Успехи соврем, биологии. -1991 .-Т.111 ,№2,1. C.246- 259.

26. Ройт А. Основы иммунологии: Пер. с англ. М.: Мир, -1991. -С.165.

27. Уманский С.Р. Апоптоз молекулярные и клеточные механизмы // Молекулярная биология.-1996.-Том.30,№5,-С.487-502.

28. Фильченков А.А. Современные представления о роли апоптоза в опухолевом росте и его значении для противоопухолевой терапии. // Экспер. онкол.—1998.—Т.20., №5.—С.259-270.

29. Фильченков А.А., Стойка Р.С. Апоптоз (физиологическая гибель клетки) //Семинары по гематологии.—1995.--№2.— С. 1-24.

30. Флетчер Р., Флетчер С., Вагнер Э., Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины М: Медиа Сфера. -1998.-С. 141-70.

31. Я рилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология.—1996.~№6.—С. 10-23.

32. Andersen T.I., Holm R., Nesland J.M. et al. Prognostic significance of TP53 alteration in breast carcinoma // Brit. J. Cancer.—1993.— Vol. 68.—P.540-549.

33. Ansell S., Kurtin P., Stenson M. et al. Evaluation of the proliferative index as a prognostic factor in diffuse large cell lymphoma: correlation with the International Index // leuk. Lymphoma. -1999. Vol. 34, № 5 - 6. - P. 529 - 537.

34. Armstrong A., Alexander F.E., Cartwright R. et al. Epstein-Barr virus and Hodgkin's disease: further evidence for the three disease hypothesis // Leukemia. 1998. - Vol. 12. - P. 1272 - 6.

35. Bellamy C.O., Malcomson D.G. Cell death in health and disease: the biology and regulation of apoptosis // Semin. Cancer Biology.— 1995.—Vol. 6.—P.3-16.

36. Banadonna G., Saccani Jotti G. Prognostic factors and response to treatment in non-Hodgkin's lymphomas // Anticancer Res. -1987. -Vol. 7, № 4. P. 685-694.

37. Berchuk A. Biomarcers in the ovary // J. Cell. Biochem.—1995.— Vol.23.—P.223-226.

38. Bergh J. Importance of p53 in the diagnostic and treatment of cancer. // 23 ESMO congress. -1998. -P.604-608.

39. Blay J., Gomez F., Sebban C. et al. The International Prognostic Index correlates to survival in patients with aggressive lymphoma in relapse: analysis of the PARMA trial. Parma Group II Blood. -1998. -Vol. 92, №10. P.3562-3568.

40. Bloomfield C., Arthur D., Frizzera G. et al. Non-random chromosomeabnormalities in lymphoma // Cancer Res.-1983. -Vol.43. -P.2975.

41. Bloomfield C., Me Kenna R., Brunning R. Significance of hematological parameters in non-Hodgkin's malignant lymphomas // Brit. J. Haemat. -1976. -Vol. 32. -P. 41- 46.

42. Bocchia M., Xu Q., Wesley U. et al. Modulation of p53, WAF1/p21 and BCL-2 expression during retinoic acid-induced differentiation of NB4 promyelocytic cells // Leuk. Res. -1997. Vol. 21, N5.1. P. 439-447.

43. Bomer M.M., Brousset P. et al. Expression of apoptosis regulatory proteins of the bcl-2 family and p53 in primary resected non-small lung cancer// Brit. J. Cancer.—1999.—Vol.79.—P.952-958.

44. Boyle M., Vasak E., Tschuchnigg M et al. Subtypes of Epstein-Barr virus (EBV) in Hodgkin's disease: association between B-type EBV and immunocompromise // Blood. -1993. Vol. 81, № 2. - P.468

45. Bratstrom D., Bergqvist M., Lamberg K. et al. Complete sequence of p53 gene in 20 patients with lung cancer: comparison wit chemo-sensitivity and immunohistochemistry // Med. Oncolio 1998. -Vol.15.-P. 255-261.

46. Breast Cancer. Diagnosis, Therapy and Prognosis. 3rd edition. DACO. -1996. -P.4.

47. Brink A., Oudejans J., van-den-Brule-AJ et. al. Low p53 and high bcl-2 expression in Reed-Sternberg cells predicts poor clinical outcome for Hodgkin's disease: involvement of apoptosis resistance? // Mod. Pathol. 1998. - Vol. 11, N4. - P 376-383.

48. Calabretta В., Skorski Т., Ratajezak M. et al. Antisense strategies in the treatment of leukemias // Semin.Oncol. -1996. -Vol.23. -P.78-87.

49. Carbone P., Kaplan H., Musshoff K. et. al. Report of the Committee on Hodgkin's disease staging classification // Career Res. -1971. -Vol. 31.-P. 1860-1861.

50. Coller В., Chabner В., Gralnick H. Frequencies and patterns of bone marrow involvement in non-Hodgkin's lymphomas: observations on the value of bilateral biopsies II Am. J. Hematol. -1977. Vol. 3. -P. 105-119.

51. Colombol M., Symmans F., Gil S. et al. Detection of the apoptosis-suppressing oncoprotein bcl-2 in hormone refractory human prostate cancer//Am. J. Pathol. -1993. -Vol.143. -P.390-400.

52. Concato J., Feinstein A. et al. The risk of determining risk with multivariable models //Ann. Intern. Med.-1993. -Vol.118.1. P. 201-210.

53. Conill C., Verger E., Salamero M. Performance status assessment in cancer patients// Cancer. -1990. -Vol.65. -P. 1864-1866.

54. Conlan M., Armitage J. et al. Clinical significance of hematological parameters in non-Hodgkin's lymphoma at diagnosis // Cancer. -1991.-Vol.67.-P. 1389-95.

55. Cooper K., Haffajee Z. bcl-2 and p53 protein expression in follicular lymphoma II J. Pathol. -1997. Vol. 182, N3. - P. 307-10.

56. Korsmeyer S. J. BCL-2: a repressor of lymphocyte Death // Immunology.—1992.—Vol. 13.—P. 285-288.

57. Deckert-Schluter M., Rang A., Wiestler 0. Apoptosis and apoptosis-related gene products in primary non-Hodgkin's lymphoma of the central nervous system II Acta. Neuropathol. Berl. 1998. - Vol. 96, N2.-P. 157-162.

58. Delage R., Roy J., Jacques L. et. al. Multiple bcl-2/lg gene rearrangements in persistent polyclonal B-cell lymphocytosis // Br. J. Hematol. -1997. Vol. 97, N3. - P. 589-595.

59. Delia D., Aiello A, Soligo D. et al. bcl-2 protooncogene expression in normal and neoplastic human myeloid cells // Blood. -1992. -Vol.79. -P.1291-1298.

60. Deter S., Saccani G., Dowsett M. "Quickscore" method for immunohistochemical semiquantitation validation for estrogen receptor in breast carcinomas // J. Clin. Pathol. -1995. -Vol.48. -P.876-878.

61. Doussis I., Pezzella F. et al. An immunocytochemical study of p53 and bcl-2 protein expression in Hodgkin's disease //Am. J. Clin. Pathol. -1993. -Vol.99. -P.663-667.

62. Dunphy С., Lattuada С. Follicular center cell lymphoma with an extremely high content of T cells: case report with useful diagnostic techniques // Arch. Pathol. Lab. Med. -1998. Vol. 122, N10.1. P. 936-938.

63. DziecioL J., MaLdyk J., Zimnoch L. et al. Expression of MPM2, p53 and Bcl2 proteins in Hodgkin's disease // Folia histochemica et cytobiologica. -1999. -Vol.37.№2. P.147-148.

64. Engert A., Pohl C., Diehl V. Experimental therapy in Hodgkin's disease II Ann. Oncol. -1992 (3 suppl 4). -P.97-100.

65. Feller A., Griesser H. DNA gene rearrangement studies in Hodgkin's disease and related lymphomas. Recent results // Cancer Res.-1989. -Vol.117. -P.27-34.

66. Finger L., Harvey R., Moore R. et al. A common mechanism of chromosomal translocation in T- and B-cell neoplasia II Science. -1986. -Vol.234. -P.982-985.

67. Fonatsch C., Diehl V., Schadt M. et al. Cytogenetic investigations in Hodgkin's disease: Involvement of specific chromosomes in marker formation //Cancer. Genet. Cytogenet. -1986. -Vol.20. -P.39-52.

68. Foon K. Laboratory and clinical applications of monoclonal antibodies for leukemia and non-Hodgkin's lymphomas // Curr. Probl. Cancer. -1989. -Vol.13. -P.57-128.

69. Fukuhara S., Rowley J., Variakojis D. et al. Chromosome abnormalities in poorly differentiated lymphocytic lymphoma // Cancer Res. -1979. -Vol.39. -P.3119-3128.

70. Gaffey M., Weiss L. Viral oncogenesis: Epstein-Barr virus // Am. J. Otolaryngol. 1990. - Vol. 11, № 6. - P. 375 - 381.

71. Gaidano G., Dalla-Favera R. Protooncogenes and tumor suppressor genes // Neoplastic Hematopathology. Baltimore: Williams and Wilkins. -1992. P.245-261.

72. Gaidano G., Pastore C., Capello D. et. al. Molecular pathways in low grade B-cell lymphoma II Leuk. Lymphoma. -1997. Vol. 26, Suppl 1.-P. 107-113.

73. Gascoyne R., Adomat S., Krajewski S. et. al. Prognostic significance of Bcl-2 protein expression and Bcl-2 gene rearrangement in diffuse aggressive non-Hodgkin's lymphoma // Blood. -1997. Vol. 90, N1. -P. 244-251.

74. Gaulard P., d'Agay M., Peuchmaur M. et al. Expression of the bcl-2 gene product in follicular lymphoma II Am. Л Pathol. 1992. -Vol.140. -P. 1089-1095.

75. Gause A., Jung W., Schmits R. et al. Soluble CD8, CD25, and CD30 antigen as prognostic markers in patients with untreated Hodgkin's lymphoma //Ann. Oncol. -1992. -Vol.3. Suppl 4. P. -49-52.

76. Geelen F., Vermeer M., Meijer C. et. al. bcl-2 protein expression in primary cutaneous large B-cell lymphoma II J. Clin. Oncol. 1998. -Vol. 16, N6. - P. 2080-2085.

77. Ghia P., Boussiotis A., Schultze J. et. al. Unbalanced expression of bcl-2 family proteins in follicular lymphoma: contribution of CD40 signaling in promoting survival // Blood. -1998. Vol. 91, N1.1. P. 244.

78. Gisbertz I., Schouten H., Bot F. et al. Proliferation and apoptosis in primary gastric B-cell non-Hodgkin's lymphoma // Histopathology. -1997. Vol. 30, N2. - P. 152-159.

79. Griesser H., Tkachuk D. et al. Gene rearrangements and translocations in lymphoproliferative diseases II Blood. 1989. -Vol.73.-P. -1402-15.

80. Hall A., Maclean F., Reid M. et al. The relationship between bcl-2 expression and response to chemotherapy in acute leukemia // Leukemia. -1995. -Vol.9, N3. -P.530.

81. Haluska F., Finger L., Kagan J. et al. Molecular genetics of chromosomal translocations in B- and T-lymphoid malignancies. Molecular Genetics in Cancer Diagnosis // Edited by J Cossman. New York, Elsevier.- 1990.-P.143- 162.

82. Hanada M., Delia D., Aiello A. et al. bcl-2 gene hypometilation and high level expression in B-cell chronic lymphocytic leukemia // Blood. -1993. -Vol. 82. -P. 1820-1828.

83. Harris N., Jaffe S., Stein H. et al. A Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasm: A Proposal From the International Lymphoma Study Group II Blood. -1994. Vol. 84, № 5.-P. 1361 -1392.

84. Hayward R., Leonard R., Prescott R. et al. A critical analysis of prognostic factors for survival in intermediate and high grade non-Hodgkin's lymphoma // Br. J. Cancer. -1991. -Vol. 63, № 6.1. P. 945-52.

85. He H., Lam M., McCormick T. et al. Maintenance of calcium homeostasis in the endoplasmic reticulum by Bcl-2 // J. Cell. Biol. -1997. Vol. 138, N6. - P. 1219-1228.

86. Heim S., Mitelman F. Cancer Cytogenetics //Alan R. Liss Inc. New York. -1987.-P.201-225.

87. Henriksen R. Expression and prognostic significance of Bcl-2 //Br. J. Cancer. -1995. -Vol.72. -P.1324-1329.

88. Herbst H., Raff Т., Stein H. Phenotypic modulation of Hodgkin and Reed-Sternberg cells by Epstein-Barr virus // J. Pathol. 1996. -Vol.179.-P.54-59.

89. Hermans J., Krol A.D., van-Groningen K. et al. International Prognostic Index for aggressive non-Hodgkin's lymphoma is valid for all malignancy grades // Blood. -1995. Vol. 86. - №4. P. 1460.

90. Hermine 0., Haloun C., Lepage E. et al. Bcl-2 protein expression in agresssive non-Hodgkin's lymphoma. A new adverse prognostic factor? A GELA Study. Fifth International Conference on Malignant Lymphoma, Lugano. -1993. Abstr.16.

91. Hill M., MacLennan K. et al. Prognostic significance of bcl-2 expression and bcl-2 major breakpoint region rearrangement in diffuse large cell non-Hodgkin's lymphoma. A British National Lymphoma Investigation study// Blood. -1996. -V0I.-88. P. 1046.

92. Hockenberry D., Oltvai Z., Yin X. et al. bcl-2 functions in an antioxidant pathway to prevent apoptosis // Cell. -1993. -Vol.75. -P.241-251.

93. Hoffbrand A. Postgraduate Hematology // Third edition. -1992.

94. Hoffman R., Benz E.J., Sanford J. et al. Hematology Basic Principles and Practice // Churchill Livingstone, London. 2000. -P.1294.

95. Hsu В., Marin M. Expression of bcl-2 gene confers multidrug resistance to chemotherapy-induced cell death // Cancer Bull. -1994. -Vol.46, N2. -P. 125- 129.

96. Inagaki H., Banno S., Wakita A. et al. Prognostic significance of CD44v6 in diffuse large B-cell lymphoma // Mod. Pathol. 1999. -Vol. 12, №5.-P. 546-552.

97. Kanavaros P., Stefanaki K., Vlachonikolis J. et al. Expression of p53, p21/waf1, bcl-2, bax, Rb and Ki67 proteins in Hodgkin's lymphomas // Histology and Histopathology. 2000. -Vol.15, №2. -P.445-453.

98. Kaneko Y., Rowley J., Variakojis D. et al. Prognostic implications of karyotype and morphology in patients with non-Hodgkin's lymphoma // Int. J. Cancer. -1983. -Vol.32. -P.683- 692.

99. Kerr J., Wyllie A., Currie A. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implication in tissue kinetics II Br. J. Cancer. -1972. -Vol.26, N4. -P.239-257.

100. Kerr J., Winterford C., Harmon B. Apoptosis: its significance in cancer therapy II Cancer. -1994. -Vol.73. -P.2013- 2026.

101. Koduru P., Filippa D., Richardson M., et al. Cytogenetic and histologic correlations in malignant lymphoma // Blood. -1987. -Vol.69.-P.97-102.

102. Korsmeyer S., bcl-2 initiates a new category of oncogenes: regulators of cell death // Blood. -1992. -Vol.80. -P.879- 886.

103. Kramer M., Hermans J et al. Clinical significance of bcl-2 and p53 protein expression in diffuse large B-cell lymphoma: a population-based study // J. Clin. Oncol. -1996. -Vol.14. P. 2131-2138.

104. Kramer M., Hermans J., Wijburg E. et al. Clinical relevance of BCL2, BCL6, and МУС rearrangements in diffuse large B-cell lymphoma II Blood. -1998. -Vol.92,№9. -P.3152- 3162.

105. Kusenda J. Bcl-2 family proteins and leukemia. Minireview II Neoplasma. -1998. Vol. 45, N3. - P. 117-122.

106. Lee M., Chang K., Cabanillas F. et al. Detection of minimal residual carrying the t (14;18) by DMA sequence amplification // Science.-1987.-Vol.237.- P.-175-178.

107. Lindvall L., Lantz M., Gullberg U. et al. Modulation of the constitutive gene expression of the 55 kD tumor necrosis factor receptor inhaematopoietic cells// Biochem. Biophys. Res. Commun. -1990. -Vol. 172, № 2. -P. 557-563.

108. Lo Coco F., Gaidano G.L., Louie D.C. et al. p53 mutations are associated with histologic transformation of follicular lymphoma // Blood. -1993. -Vol.82. P. 2289- 2295.

109. Loeffler M., Mauch P., MacLennan K.et al. Review on prognostic factors // Ann. Oncol. -1992. -Vol.3, suppl 4. P. 63- 66.

110. Lopez Guillermo A., Montserrat E., et al. A study of prognostic factors and assessment of five recently proposed predictive systems II Leukemia and Lymphoma. -1993. -Vol.10. - P.101-109.

111. Lopez-Guillermo A., Cabanillas F., McLaughlin P. et. al. The clinical significance of molecular response in indolent follicular lymphomas // Blood. -1998. Vol. 91, N8. - P. 2955- 2960.

112. Lorenzen J., Hansmann M. et al. Expression of the bcl-2 oncogene product and chromosomal translocation t (14; 18) in Hodgkin's disease// Hum. Pathol. -1992. -Vol.23. -P. 1205-1209.

113. Lu Q., Elia G., Lucas S. et al. bcl-2 protooncogene expression in Epstein-Barr-virus-associated nasopharyngeal carcinoma II Cancer. -1993. -Vol.53. P.29-35.

114. Lu Q.L., Poulsom R., Wong L. etal. BCL-2 expression in adult and embryonic non-haematopoietic tissues // J. Pathol.- 1993.-Vol.169.-P.431- 437.

115. Mac Lennan I.C.M. Germinal centers//Ann. Rev. Immunol. -1994. -Vol.12.-P.117-139.

116. Marin M., Hsu В., Meyn R. etal. Evidence that p53 and bcl-2 are regulators of a common cell death pathway important for lymphomagenesis // Oncogene.-1994.-Vol.9.- P.3107- 3112.

117. Marin M., Hsu В., Stephens L. et al. The functional basis of c-myc and bcl-2 complementation during multistep lymphomagenesis in vivo II Exp. Cell. Res.-1995. -Vol.217. -P.240-247.

118. Martinka M., Comeau Т., Foyle A. et. al. Prognostic significance of t(14;18) and bcl-2 gene expression in follicular small cleaved cell lymphoma and diffuse large cell lymphoma II Clin. Invest. Med. -1997. Vol. 20, N6. - P. 364-370.

119. Matolcsy A., Warnke R., Knowles D. Somatic mutations of the translocated bcl-2 gene are associated with morphologic transformation of follicular lymphoma to diffuse large-cell lymphoma //Ann-Oncol. 1997. - Vol. 8, Suppl 2. - P. 119-122.

120. McClelland R.A., Wilson D., Leake R. et al., A multicentre study into the reliability of steroid receptor immunocytochemical assay quantification II Eur.J.Cancer. -1991. -Vol.27. -P.711- 715.

121. McDonnel N. Marin V., Hsu V. et al. Bcl-2 oncogene: apoptosis and neoplasia // Radiation Res.-1993. -Vol.136. -P.307- 312.

122. McDonnell Т., Deane N., Piatt F. et al. bcl-2 immunoglobulin transgenic mice demonstrate extended В cell survival and follicular lymphoproliferation II Cell. -1989. -Vol. 57. -P. 79-88.

123. McDonnell Т., Korsmeyer S. Progression from lymphoid hyperplasia to high grade malignant lymphoma in mice transgenic for the t (14;18) II Nature.- 1991.-Vol.349.-P. 254- 256.

124. Meijerink J. t (14;18), a journey to eternity II Leukemia. -1997. Vol. 11, N12.-P. 2175-2187.

125. Miettinen M., Sarlomo-Rikala M., Kovatich A. Cell-type- and tumour-type-related patterns of bcl-2 reactivity in mesenchymal cells and soft tissue tumors II Virchows. Arch. -1998. Vol. 433, N3.1. P. 255- 260.

126. Milner A., Grand R., Vaughan A. et. al. Differential affects of BCL-2 on survival and proliferation of human B-lymphoma cells following gamma-irradiation II Oncogene. -1997. Vol. 15, N15. - P. 1815-22.

127. Monni 0., Franssila K., Joensuu H. et al. BCL2 overexpression in diffuse large B-cell lymphoma // Leuk. Lymph. -1999. -Vol. 34. -N1-2. -P.45-52.

128. Montserrat E. Chronic lymphoproliferative disorders // Curr. Opin. Oncol. -1997. Vol. 9, N1. - P. 34-41.

129. Morrison V., Frizzera G., Arthur D.C. et al. Prognostic factors for therapeutic outcome of diffuse small non-cleaved cell lymphoma in adults // Am. J. Hematol. -1994. Vol. 46, № 4. - P. 295 - 303.

130. Nakimine H., Bagin R.G., Vase J.M. et al. Prognostic significance of clinical and pathologic features in diffuse large B-cell lymphoma // Cancer. -1993. -Vol. 71. -P. 3130-3136.

131. Navone R., Pich A., Fiammotto M. et al. Bone marrow Histopatho-logy and prognosis in malignant lymphomas // Tumor. 1992. - Vol. 78, № 3. - P. 176-180.

132. Negrin R., Blume K. The use of polymerase chain reaction for the detection of minimal residual malignant disease // Blood. -1991. -Vol.78. -P.255- 258.

133. Ngan В., Weiss L., Warnke R. et al. Expression in non-Hodgkin's lymphoma of the bcl-2 protein associated with the t(14;18) translocation II New Engf. J. Med.-1988. -Vol.318. -P.1638-1644.

134. Nomdedeu J., Baiget M., Gaidano G. et. al. p53 mutation in a case of blastic transformation of follicular lymphoma with double bcl-2 rearrangement (MBR and VCR) // Leuk-Lymphoma. 1998. - Vol. 29, N5-6. - P. 595-605.

135. Obrams G., O'Conor G. The emerging epidemic of non-Hodgkin's Lymphoma: current knowledge regarding etiological factors. Timetrends and pathological classification: a summary // Cancer Res. -1992. Vol. 52, № 19. - P.5570.

136. Ohshima K., Kikuchi M. et al. Bcl-2 gene and prognosis of B-cell lymphoma//Leuk. Lymphoma. -1991. -Vol.5. -P. 305.

137. Ott M., Muller-Hermelink H. et al. Chromosomal translocation detected by bcl-1 and bcl-2 rearrangement in low-grade B-celi lymphomas in a European population // Hystopatology. -1991. -Vol.19.-P. -163-167.

138. Palestro G., Ponti R., Chiusa L. et. al. Cell proliferation, bcl-2, c-myc, p53 and apoptosis as indicators of different aggressiveness in small lymphocytic lymphoma (SLL) // Eur. J. Haematol. -1997. Vol. 59, N3.-P. 148-154.

139. Pescarmona E., De-Sanctis V., Pistilli A. et. al. Pathogenetic and clinical implications of Bcl-6 and Bcl-2 gene configuration in nodal diffuse large B-cell lymphomas // J. Pathol. -1997. Vol. 183, N3. -P. 281-286.

140. Pesce A., Fuzibet J. -G. Systemic markers in Non-Hodgkin's lymphomas II New Techniques and Treatments. 4-th Cancer Res. Workshop, Grenoble 1984.(Karger, Basel 1985). -P. 56-60.

141. Pezzella F., Gatter K. What is value of bcl-2 protein detection for histopathologists? II Histopathol. -1995. -Vol.26. -P.89-93.

142. Prognostic Factors in Aggressive Non-Hodgkin's Lymphoma / Malignant Lymphomas: Biology and Treatment Ed. Pangalis G.A.-Springer-Verlag Berlin Heidelberg.-1995.-P.103-127.

143. Pezzella F., Tse A., Cordell J. et al. Expression of the bcl-2 protein is not specific for the 14:18 chromosomal translocation // Am. J. Pathol. -1990. -Vol.137. -P.225-232.

144. Pezzella F., Turley H., Kuzu I. et al. bcl-2 protein in non-small-cell lung carcinoma. Immunohistochemical evidence for abnormal expression and correlation with survival // New Engl. J. Med.-1993. -Vol.329. -P.690- 694.

145. Pezzella F., Gatter K., Mason D. et al. BCL-2 protein expression in follicular lymphomas in absence of 14; 18 translocation // Lancet.-1990.-NI. P.1510.

146. Piris M., Pezella F. et al. p53 and bcl-2 expression in high-grade B-cell lymphomas correlation with survival time // Br. J. Cancer. -1994. -Vol.69. P.337-341.

147. Portlock C. Management of the low-grade non-Hodgkin's lymphoma // Semin. Oncol. -1990. -Vol.17. P.51- 59.

148. Qi X., Simonson M., Distelhorst C.W. Bcl-2 inhibits c-fos induction by calcium // Oncogene. -1997. Vol. 15, N23. - P. 2849- 2853.

149. Rack K., Salomon-Nguyen F., Radford-Weiss I. etal. FISH detection of chromosome 14q32/lgH translocations: evaluation in follicular lymphoma//Br. J. Haematology. -1998. -Vol.103, N2. -P.495-504.

150. Reed J. Bcl-2 family proteins: regulators of apoptosis and chemoresistance in hematological malignancies II Semin. Hematol. -1997. Vol. 34, N4 Suppl 5. - P. 9-19.

151. Reed J. Bcl-2 family proteins: strategies for overcoming chemoresis-tance in cancer//Adv. Pharmacol. -1997. Vol. 41. - P. 501-532.

152. Rezuke W., Abernathy E., Tsongalis G. Molecular diagnosis of B- and T-cell lymphomas: fundamental principles and clinical applications // Clin. Chem. -1997. Vol. 43, N10. - P. 1814-1823.

153. Richardson M., Quanguang C., Filippa D. et al. Intermediate to high grade histology of lymphomas carrying t(14;18) is associated with additional nonrandom chromosome change // Blood.-1987.-Vol.70.-P.444- 447.

154. Shipp M. Prognostic factors in aggressive non-Hodgkin's lymphoma: Who has "high-risk disease?" // Blood. -1994. -Vol. 83, № 5 (March 1). -P. 1165-1173.

155. Sklar J. Polymerase chain reaction: the molecular microscope of residual disease//J. Clin. Oncol. -1991. -Vol.9. -P.1521- 1524.

156. Soini Y., Raunio H., Paakko P. High-grade malignant non-Hodgkin's lymphomas differ from low-grade lymphomas in the extent of apoptosis and their expression of bcl-2, mcl-1, bax and p53 // Tumor. Biol. -1998. Vol. 19, N3. - P. 176-85.

157. Stamatopoulos K., Kosmas C., Belessi C. et al. Molecular insights into the immunopathogenesis of follicular lymphoma // Immunology today. -2000. -Vol.21, N6. -P.298-305.

158. Takano Y., Saegusa M., Masuda M. et. al. Apoptosis, proliferative activity and Bcl-2 expression in Epstein-Barr-virus-positive non-Hodgkin's lymphomas II J. Cancer. Res. Clin. Oncol. -1997. Vol. 123, N7.-P. 395-401.

159. The International Non-Hodgkin's Lymphoma Prognostic Factors Project: A predictive model for aggressive Non-Hodgkin's lymphoma. II N. Engl. J. Med. -1993. P.987-994.

160. Tormo M., Tari A.M., McDonnell T.J. et. al. Apoptotic induction in transformed follicular lymphoma cells by Bcl-2 downregulation // Leuk. Lymphoma. 1998. - Vol. 30, N3-4. - P. 367- 379.

161. Trumper L., Brady G., Bagg A. et al. Single-cell analysis of Hodgkin and Reed-Sternberg cell: molecular heterogeneity of gene expression and p53 mutations // Blood. -1993. -Vol.81. -P.3097-115.

162. Trumper L.H. Brady G. et al. Gene expression in single Reed-Sternberg cells of Hodgkin's disease: Results from PCR generated single cell cDNA libraries //Ann. Oncol. -1992. -Vol.3, suppl 4.1. P.25- 26.

163. Tsujimoto Y., Croce C. Analysis of the structure, transcripts and protein products of bcl-2, the gene involved in human follicular lymphoma II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1986. -Vol.83. -P.5214.

164. Tsujimoto Y., Crossman E., Jaffe E. et al. Involvement of the bcl-2 gene in human follicular lymphoma II Science. -1985. -Vol.228. -p. 1440-1443.

165. Tsujimoto Y., Finger L., Yunis J. et al. Cloning of the chromosome breakpoint of neoplastic В cells with the t(14;18) chromosome translocation // Science.-1984.-Vol.226.-P.1097-1099.

166. Tsujimoto Y., Gorham I., Cossman J. et al. The t(14;18) chromosome translocations involved in B-cell neoplasms result from mistakes in VDJ joining // Nature.-1985.-Vol.229.-P.1390-1393.

167. Tsujimoto Y., Gorham J., Cossman J. et al. Characterization of the protein product of bcl-2, the gene involved in human follicular lymphoma//Oncogen. -1987. -Vol.2. -P.3-7.

168. Utz G., Swerdlow S. Distinction of follicular hyperplasia from follicular lymphoma in B5-fixed tissues: comparison of MT2 and bcl-2 antibodies // Human. Pathol. -1993. -Vol.24. -P.1155-1158.

169. Van-Haselen C., Vermeer M., Toonstra J. et. al. p53 and bcl-2 expression do not correlate with prognosis in primary cutaneous large T-cell lymphomas II J. Cutan. Pathol. -1997. Vol. 24, N8. -P. 462-467.

170. Vaux D., Cory S., Adams M. bcl-2 gene promotes haemopoietic cell survival and cooperates with c-myc to immortalize pre-B cells II Nature. -1988. -Vol.335. -P.440- 442.

171. Veis D., Sorensen C., Shutter J. et al. bcl-2 deficient mice demonstrate fulminant lymphoid apoptosis, polycystic kidneys and hypopigmented hair// Cell. -1993. -Vol.75. -P.229- 240.

172. Vitolo U., Gaidano G., Botto B. et. al. Rearrangements of bcl-6, bcl-2, c-myc and 6q deletion in B-diffuse large-cell lymphoma: clinical relevance in 71 patients // Ann. Oncol. 1998. - Vol. 9, N1.1. P. 55-61.

173. Volm M. Multidrug Resistance and its reversal II Anticancer Res-1998.-Vol.18. -P.2905- 2918.

174. Walker A., Taylor S., Hickman J. et al. Germinal center-derived signals act with Bcl-2 to decrease apoptosis and increase clonogenicity of drug-treated human В lymphoma cells // Cancer. Res. -1997. Vol. 57, N10. - P. 1939-1945.

175. Wang H., Reed J. Mechanisms of Bcl-2 protein function // Histol. Histopathol. -1998. Vol. 13, N2. - P. 521- 530.

176. Weisenburger D., Gascoyne R., Bierman P. et al. Clinical significance of the t(14;18) and BCL2 overexpression in follicular large cell lymphoma // Leuk. Lymph. 2000. -Vol.36, N5-6.1. P.613- 523.

177. Weiss N. Clinical epidemiology: the study of the outcomes of illness II New York. Oxford University Press. 1986.

178. Wheaton S., Netser J., Guinee D. et. al. Bcl-2 and bax protein expression in indolent versus aggressive B-cell non-Hodgkin's lymphomas II Hum. Pathol. -1998. Vol. 29, N8. - P. 820- 825.

179. Wilson W., Teruya-Feldstein J., Fest T. et. al. Relationship of p53, bcl-2, and tumor proliferation to clinical drug resistance in non-Hodgkin's lymphomas II Blood. -1997. Vol. 89, N2. - P. 601-609.

180. Wu G., El-Deiry W. Apoptotic death of tumor cells correlates with chemosensitivity, independent of p53 or bcl-2 // Clin. Cancer. Res.-1996.-Vol.2,N4.-P.623- 633.

181. Yunis J., Frizzera G. et al. Multiple recurrent genomic defects in follicular lymphoma // N. Engl. J. Med.-1987. -Vol.316. -P.79-84.

182. Zhang A., Ohshima K., Sato K. et al. Prognostic clinicopathologic factors, including immunologic expression in diffuse large B-cell lymphomas//Pathol. Int. 1999.-Vol. 49, №12.-P. 1043-52.

183. Zhang X., Safah H., Mudad R. et. al. Frequency of BCL-2/J(H) translocations in peripheral blood of follicular lymphoma patients // Am. J. Hematol. -1997. Vol. 55, N4. - P. 205- 207.