Исследование аберрантной экспрессии рековерина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Савченко, Марина Сергеевна

• Савченко, Марина Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Савченко, Марина Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Рековерин и другие паранеопластические антигены".

1. Рековерин.

1.1. Рековерин как белок зрительной трансдукции.

1.1.1. Тканевая и клеточная локализация.

1.1.2. Основные характеристики.

1.2. Рековерин как паранеопластический антиген.

1.2.1. Аберрантная экспрессия рековерина в опухолях и клеточных линиях.

1.2.2. Современные представления о причинах развития паранеопластической дегенерации сетчатки у онкологических больных.

1.2.3. Модельные системы САЯ-синдрома.

1.2.4. Механизмы паранеопластической дегенерации сетчатки.

1.2.5. Влияние аберрантной экспрессии рековерина на процессы, происходящие в раковых клетках.

2. РНК-связывающие белки и соответствующие им неврологические синдромы.

2.1. Ни-антиген ы.

2.2. Ш-антигены.

3. ДНК-связывающий белок Уо-антиген и паранеопластическая дегенерация мозжечка.

4. Потенциалзависимые кальциевые каналы и миастенический синдром Ламберта-Итона.

5. Потенциалзависимые калиевые каналы и нейромиотония.

6. Ацетилхолиновый (никотиновый) рецептор и миастения.

7. Амфифизин и синдром "скованного человека".

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

1. Реактивы.

2. Материалы.

3. Аналитические процедуры.

3.1. Определение концентрации белков.

3.2. SDS-электрофорез в полиакриламидном геле.

3.3. Нативный электрофорез в полиакриламидном геле.

3.4. Иммуноблоттинг.

3.5. ELISA.

3.6. Цитоиммуногистохимический анализ серийных парафиновых срезов опухолевых тканей.

4. Получение рекомбинантного миристоилированного рековерина.

5. Получение иммобилизованных белков.

6. Выделение поликлональных моноспецифических антител против рековерина.

7. Культивирование клеточных линий.

8. ПЦР с обратной транскриптазой.

9. Количественный ПЦР с обратной транскриптазой.

10. Анализ уровня метилирования ДНК при помощи бисульфитного сиквенса.

11. Выделение р26 из тканей крысы.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Рековерин в раковых опухолях и нормальных тканях.

1.1. Экспрессия рековерина в злокачественных опухолях.

1.1.1. Иммуногистохимический анализ срезов опухолей легких.

1.1.2. Анализ экспрессии мРНК рековерина в раковых опухолях.

1.2. Экспрессия рековерина в нормальных тканях.

2. Исследование механизмов аберрантной экспрессии рековерина.63 2.1. Анализ статуса метилирования области промотора и первого экзона гена рековерина в нормальных тканях и раковых опухолях.

2.2. Исследование влияния различных агентов на уровень экспрессии рековерина в клеточной линии рака легких.

2.2.1. Влияние ДАЦ, ТСА и бутирата натрия на уровень экспрессии мРНК рековерина.

2.2.2. Изменение уровня метилирования области промотора и первого экзона гена рековерина в N0-1-182 под воздействием ДАЦ.

2.2.3. Исследование влияния ДАЦ, ТСА и бутирата натрия на уровень экспрессии рековерина.

3. Рековерин как потенциальный маркер злокачественной трансфомации.

3.1. Серийный анализ опухолей легких на присутствие в них экспрессии рековерина.

3.2. Серийный анализ образцов сыворотки крови онкологических больных на присутствие аутоантител против рековерина.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование аберрантной экспрессии рековерина»

Аутоиммунные неврологические заболевания, возникающие в организме вследствие наличия злокачественной опухоли, или так называемые паранеопластические синдромы (ПНС), проявляются в виде разнообразных симптомов, возникающих вследствие повреждения органа или ткани, дистанционно удаленных от места локализации опухоли или ее метастазов. Неврологические ПНС могут поражать любую область, относящуюся к нервной системе - центральную нервную систему [1], зрение [2], периферические нервы [3], нервно-мышечные сочленения [4] и другие. Некоторые из ПНС воздействуют только на определенные участки (например, лимбический энцефалит) или клетки определенного вида (например, клетки Пуркинье в мозжечке). В иных случаях патологическое воздействие затрагивает несколько уровней нервной системы (энцефаломиелорадикулит).

При всем разнообразии симптомов и признаков ПНС можно выделить их общие характерные особенности. Очень часто неврологическое расстройство проявляется раньше, чем с помощью современных диагностических методов будет замечена опухоль, являющаяся его причиной. На сегодняшний день причиной развития ПНС считается экспрессия злокачественной опухолью белков, которые в норме (в отсутствие трансформации) не синтезируются тканью, где локализована опухоль. Некоторые из этих белков строго специфичны для нервной ткани, другие могут содержать эпитопы, идентичные эпитопам ней-рональных белков. Такие белки называют паранеопластическими (он-коневральными) антигенами, или ПНА.

Возможный механизм ПНС может сводиться к следующему. Нервная система относится к иммунопривилегированной зоне, т.е. она защищена от деструктивного действия иммунной системы наличием гематотканевого (гематоэнцефалического и гематоокулярного) барьера. Но в случае аберрантной экспрессии раковой опухолью белков, специфичных для нервной ткани, их попадание в кровоток вызывает выработку аутоантител против них, поскольку эти белки являются "чужими" для иммунной системы. Аутоантитела затем преодолевают гематотканевый барьер и выводят из строя тот белок-антиген, на который они были выработаны, что и приводит к дегенерации ткани [5].

Особенный интерес в изучении ПНА представляет тот факт, что заболевания, вызываемые ими, могут быть диагностированы за месяцы или даже за годы до определения у того же пациента раковой опухоли. В связи с этим чрезвычайно важным кажется изучение не столько собственно ПНС и их проявлений, сколько самих ПНА, их свойств и причин, вызывающих их экспрессию в опухоли.

Настоящая работа посвящена исследованию одного из ПНА, ре-коверина, аберрантная экспрессия которого в опухолях может приводить к развитию специфического ПНС — паранеопластической дегенерации сетчатки.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

РЕКОВЕРИН И ДРУГИЕ ПАРАНЕОПЛАСТИЧЕСКИЕ

АНТИГЕНЫ»

1. Рековерин.

Рековерин - это Са -связывающий белок, принимающий участие в фототрансдукции [6]. С другой стороны, рековерин известен как ПНА, ответственный за развитие паранеопластической дегенерации сетчатки при раке [7].

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Савченко, Марина Сергеевна

ВЫВОДЫ

1. Показано, что рековерин экспрессируется в опухолях немелко-клеточной карциномы легких.

2. мРНК рековерина выявлена в нормальных тканях, не относящихся к тканям нервной системы.

3. Получены данные, указывающие на вовлечение деметилирова-ния участков промотора и первого экзона гена рековерина в регуляцию экспрессии рековерина в клеточной линии рака легких in vitro.

4. Установлено, что ацетилирование гистонов не участвует в проявлении аберрантной экспрессии рековерина in vitro.

5. Определены частоты экспрессии рековерина в опухолях легких и встречаемости аутоантител против рековерина в сыворотке крови пациентов при раке легких, которые составляют, соответственно, 76% и 17%.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Савченко, Марина Сергеевна, 2005 год

1. Gultekin, S.H., Rosenfeld, M.R., Voltz, R., Eichen, J., Posner, J.B. and Dalmau, J. (2000). Paraneoplastic limbic encephalitis: neurological symptoms, immunological findings and tumour association in 50 patients. Brain 123, 1481-1494.

2. Goldstein, S.M., Syed, N.A., Milam, A.H., Maguire, A.M., Lawton, T.J. and Nichols, C.W. (1999). Cancer-associated retinopathy. Arch. Ophthalmol. 117, 1641-1645.

3. Rudnicki, S.A. and Dalmau, J. (2000). Paraneoplastic syndromes of the spinal cord, nerve, and muscle. Muscle Nerve 23, 1800-1818.

4. Carpentier, A.F. and Delattre, J.Y. (2001). The Lambert-Eaton myasthenic syndrome. Clin. Rev. Allergy Immunol. 20, 155-158.

5. Ho, T.W., McKhann, G.M. and Griffin, J.W. (1998). Human autoimmune neuropathies. Annu. Rev. Neurosci. 21, 187-226.

6. Dizhoor, A.M., Ray, S., Kumar, S., Niemi, G., Spencer, M., Brolley, D., Walsh, K.A., Philipov, P.P., Hurley, J.B., Stryer, L. (1991). Recoverin: a calcium sensitive activator of retinal rod guanylate cyclase. Science 251, 915-918.

7. Subramanian, L. and Polans, A.S. (2004). Cancer-related diseases of the eye: the role of calcium and calcium-binding proteins. Bioch. Biophys. Res. Com. 322, 1153-1165.

8. Ray, S., Zozulya, S., Niemi, G.A., Flaherty, K.M., Brolley, D., Dizhoor, A.M., McKay, D.B., Hurley, J.B. and Stryer, L. (1992). Cloning, expression, and crystallization of recoverin, a calcium sensor in vision. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 89, 5705-5709.

9. Lambrecht, H.-G. and Koch, K.-W. (1991). Light-dependent phosphorylation a 26 kd calcium binding protein from bovine rod outer segments. FEBS Lett. 317,45-48.

10. Дижур A.M., Некрасова Э.Н., Филиппов П.П. (1991). Новый специфичный для фоторецепторных клеток белок с молекулярной массой 26 кДа, способный связываться с иммобилизованным делипидизиро-ванным родопсином. Биохимия 56, 225-229.

11. Korf, H.W., White, В.Н., Schaad, N.C. and Klein, D.C. (1992). Recov-erin in pineal organs and retinae of various vertebrate species including man. Brain Research 595, 57-66.

12. Milam, A.H., Dacey, D.M. and Dizhoor, A. (1993). Recoverin immu-noreactivity in mammalian cone bipolar cells. Vis. Neurosci. 10, 1-12.

13. Wiechmann, A.F. and Hammarback, J.A. (1993). Expression of recoverin mRNA in the human retina: localization by in situ hybridization. Exp. Eye Res. 57, 763-769.

14. De Raad, S., Comte, M., Nef, P., Lenz, S.E., Gundelfinger, E.D. and Cox, J. A. (1995). Distribution pattern of three neural calcium-binding proteins (NSC-1, VILIP and recoverin) in chicken, bovine and rat retina. His-tochem. J. 27, 524-535.

15. McGinnis, J.F., Stepanik, P.L., Jariangprasert, S. and Lerious, V. (1997). Functional significance of recoverin localization in multiple retina cell types. J. Neurosci. Res. 50, 487-495.

16. Dalil-Thiney, N., Bastianelli, E., Pochet, R., Reperant, J. and Versaux-Botteri, C. (1998). Recoverin and hippocalcin distribution in the lamprey (Lampreta fluviatilis) retina. Neurosci. Lett. 247, 163-166.

17. Bastianelli, E. and Pochet, R. (1994). Calbindin-D28k, calretinin, and recoverin immunoreactivities in developing chick pineal gland. J. Pineal. Res. 17, 103-111.

18. Bastianelli, E., Polans, A.S., Hidaka, H. and Pochet R. (1995). Differential distribution of six calcium-binding proteins in the rat olfactory epithelium during postnatal development and adulthood. J. Comp. Neurol. 354,395-409.

19. Gorodovikova, E.N., Gimelbrant, A.A., Senin, I.I. and Philippov, P.P. (1994). Recoverin mediates the calcium effect upon rhodopsin phosphorylation and cGMP hydrolysis in bovine retina rod cells. FEBS Lett. 349(2), 187-190.

20. Gorodovikova, E.N., Senin, I.I. and Philippov, P.P. (1994). Calcium-sensitive control of rhodopsin phosphorylation in the reconstituted system consisting of photoreceptor membranes, rhodopsin kinase and recoverin. FEBS Lett. 353(2), 171-172.

21. Makino, C.L., Dodd, R.L., Chen, J., Burns, M.E., Roca, A., Simon, M.I. and Baylor, D.A. (2004). Recoverin regulates light-dependent phosphodiesterase activity in retinal rods. J. Gen. Physiol. 123(6), 729-741.

22. Klenchin, V.A., Calvert, P.D. and Bownds, M.D. (1995). Inhibition of rhodopsin kinase by recoverin. Further evidence for a negative feedback system in phototransduction. J. Biol. Chem. 270 (27), 16147-16152.

23. Wiechmann, A.F. and Hammarback, J.A. (1993). Molecular cloning and nucleotide sequence of a cDNA encoding recoverin from human retina. Exp. Eye Res. 56, 463-470.

24. Wiechmann, A.F., Akots, G., Hammarback, J.A., Pettenati, M.J., Rao, P.N. and Bowden, D.W. (1994). Genetic and physical mapping of human recoverin: a gene expressed in retinal photoreceptors. Invest. Ophtalmol. Vis. Sci. 35,325-331.

25. Kretsinger, R.H. (1980). Structure and evolution of calcium-modulated proteins. CRC Crit. Rev. Biochem. 8, 119-174.

26. Flaherty, K.M., Zozulya, S., Stiyer, L. and McKay, D.B. (1993). Three-dimensional structure of recoverin, a calcium sensor in vision. Cell 75, 709-716.

27. Senin, 1.1., Fischer, T., Komolov, K.E., Zinchenko, D.V., Philippov, P.P. and Koch, K.W. (2002). Ca2+-myristoyl switch in the neuronal calcium sensor recoverin requires different functions of Ca2+-binding sites. J. Biol. Chem. 277(52), 50365-72.

28. Ames, J.B., Porumb, T., Tanaka, T., Ikura, M. and Stiyer, L. (1995). Amino-terminal myristoylation induces cooperative calcium binding to recoverin. J. Biol. Chem. 270, 4526-4533.

29. Hughes, R.E., Brzovic, P.S., Klevit, R.E. and Hurley, J.B. (1995). Calcium-dependent solvation of the myristoyl group of recoverin. Biochemistry 34, 11410-11416.

30. Zozulya, S. and Stryer, L. (1992). Calcium-myristoyl protein switch. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 11569-11573.

31. Thirkill, C.E., Tait, R.C., Tyler, N.K., Roth, A.M. and Keltner, J.L. (1992). The cancer-associated retinopathy antigen is a recoverin-like protein. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 33(10), 2768-2772.

32. Adamus, G., Ortega, H., Witkowska, D. and Polans, A. (1994). Recoverin: a potent uveitogen for the induction of photoreceptor degeneration in Lewis rats. Exp. Eye Res. 59(4), 447-455.

33. Thirkill, C.E., Roth, A.M. and Keltner, J.L. (1987). Cancer-associated retinopathy. Arch. Ophthalmol. 105, 372-375.

34. Jacobson, D.M., Thirkill, C.E. and Tipping, S.J. (1990). A clinical triade to diagnose paraneoplastic retinopathy. Ann. Neurol. 28, 162-167.

35. Jacobson, D.M. (1996). Paraneoplastic disorders of neuro-ophthalmologic interest. Curr. Opin. Ophthalmol. 7, 30-38.

36. Sawyer, R.A., Selhorst, J.B., Zimmerman, L.E. and Hoyt, W.F. (1976). Blindness caused by photoreceptor degeneration as a remote effect of cancer. Am. J. Ophtalmol. 81, 606-613.

37. Keltner, J.L., Roth, A.M. and Chang, R.S. (1983). Photoreceptor degeneration. Possible autoimmune disorder. Arch. Ophthalmol. 101, 564569.

38. Kornguth, S.E., Klein, R., Appen, R. and Choate, J. (1982). Occurrence of anti-retinal ganglion cell antibodies in patients with small cell carcinoma of the lung. Cancer. 50, 1289-1293.

39. Kornguth, S.E., Kalinke, T., Grunwald, G.B., Schutta, H. and Dahl, D. (1986). Anti-neurofilament antibodies in the sera of patients with small cell carcinoma of the lung and with visual paraneoplastic syndrome. Cancer Res. 46, 2588-2595.

40. Grunwald, G.B., Kornguth, S.E., Towfighi, J., Sassani, J., Simmonds, M.A., Housman, C.M. and Papadopoulos, N. (1987). Autoimmune basis for visual paraneoplastic syndrome in patients with small-cell lung carcinoma. Cancer 60, 780-786.

41. Polans, A.S., Buczylko, J., Crabb, J. and Palczewski, K. (1991). A photoreceptor calcium binding protein is recognized by autoantibodies obtained from patients with cancer-associated retinopathy. J. Cell. Biol. 112(5), 981-989.

42. Yamaji, Y., Matsubara, S., Yamadori, I., Sato, M., Fujita, T., Fujita, J. and Takahara, J. (1996). Characterization of a small-cell-lung-carcinoma cell line from a patient with cancer-associated retinopathy. Int. J. Cancer 65,671-676.

43. Matsubara, S., Yamaji, Y., Sato, M., Fujita, J. and Takahara, J. (1996). Expression of a photoreceptor protein, recoverin, as a cancer-associated retinopathy autoantigen in human lung cancer cell lines. Br. J. Cancer 74, 1419-1422.

44. Maeda, A., Ohguro, H., Maeda, T., Wada, I., Sato, N., Kuroki, Y. and Nakagawa, T. (2000). Aberrant expression of photoreceptor-specific calcium-binding protein (recoverin) in cancer cell lines. Cancer Res. 60, 19141920.

45. Maeda, T., Maeda, A., Maruyama, I., Ogawa, K.I., Kuroki, Y., Sahara, H., Sato, N. and Ohguro, H. (2001). Mechanisms of photoreceptor cell death in cancer-associated retinopathy. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 42 (3), 705-712.

46. Adamus, G. and Amundson, D. (1996). Epitope recognition of recoverin in cancer associated retinopathy: evidence for calcium-dependent conformational epitopes. J. Neur. Res. 45, 863-872.

47. Gery, I., Chanaud, N.P. and Anglade, E. (1994). Recoverin is higly uveitogenic in Lewis rats. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 35, 3342-3345.

48. Adamus, G., Guy, J., Schmied, J., Arendt, A. and Hargrave, P. (1993). Role of anti-recoverin autoantibodies in cancer-associated retinopathy. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 34, 2626-2633.

49. Thirkill, C. (1997). Experimental, cancer-induced retinopathy. Occular. Immunol. Inflam. 5(1), 55-65.

50. Adamus, G., Machnicki, M. and Seigel, G. (1997). Apoptotic retinal cell death induced by antirecoverin autoantibodies of cancer-associated retinopathy. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 38, 283-291.

51. Hollyfield, J. and Rayborn, M. (1987). Endocytosis in the inner segment of rod photoreceptors: analysis of Xenopus laevis retinas using hores-radish peroxidase. Exp. Eye. Res. 45, 703-719.

52. Chen, W., Elias, R.V., Cao, W., Lerious, V. and McGinnis, G.F. (1999). Antirecoverin antibodies cause the apoptotic death of mammalian photoreceptor cells in vitro. J. Neurosci. Res. 57, 706-718.

53. Adamus, G., Machnicki, M., Elerding, H., Sugden, B., Blocker, Y.S. and Fox, D.A. (1998). Antibodies to recoverin induce apoptosis of photoreceptor and bipolar cells in vivo. J. Autoimm. 11, 523-533.

54. Adamus, G. (2003). Autoantibody-induced apoptosis as a possible mechanism of autoimmune retinopathy. Autoimmun. Rev. 2, 63-68.

55. Shiraga, S. and Adamus, G. (2002). Mechanism of CAR syndrome: antirecoverin antibodies are the inducers of retinal cell apoptotic death via the caspase 9- and caspase 3-dependent pathway. J. Neuroimmunol. 132, 7282.

56. Chen, W., Cao, W., Achyuthan, A.M. and McGinnis, J.F. (2001). In vitro inhibition of antirecoverin immunoglobulin-mediated death of mammalian photoreceptor cells. J. Neurosci. Res. 63, 116-123.

57. Ohguro, H., Ogawa, K., Maeda, T., Maeda, A. and Maruyama, I. (1999). Cancer-associated retinopathy induced by both anti-recoverin and anti-hsc70 antibodies in vivo. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 40, 3160-3167.

58. Ohguro, H., Ogawa, K. and Nakagava, T. (1999). Recoverin and hsc70 are found as autoantigens in patients with cancer-associated retinipathy. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 40(1), 82-89.

59. Ohguro, H., Odagiri, H., Miyagawa, Y., Ohguro, I., Sasaki, M. And Nakazawa, M. (2004). Clinicopathological features of gastric cancer cases and aberrantly expressed recoverin. Tohoku J. Exp. Med. 202, 213-219.

60. Liu, J., Dalmau, J., Szabo, A., Rosenfeld, M., Huber, J. and Furneaux, H. (1995). Paraneoplastic encephalomielitis antigens bind to the AU-rich elements of mRNA. Neurology 45, 544-550.

61. Marusich, M.F., Furneaux, H.M., Henion, P. and Weston, J.A. (1994). Hu neuronal proteins are expressed in proliferating neurogenic cells. J. Neurobiol. 25, 143-155.

62. Posner, J.B. and Furneaux, H.M. in Immunologic Mechanisms in Neurologic and Psychiatric Disease, ed. Waksman BH (Raven, New York) 1990; 187-219.

63. Szabo, A., Dalmau, J., Manley, G., Rosenfeld, M., Wong, E., Henson, J., Posner, J.B. and Furneaux, H. (1991). HuD, a paraneoplastic encephalomyelitis antigen, contains RNA-binding domain and is homologous to Elav and Sex-lethal. Cell 67(2), 325-333.

64. Kenan, D.J., Query, C.C. and Keene, J.D. (1991). RNA recognition: towards identifying determinants of specificity. Trends Biochem. Sci. 74, 214-220.

65. Sachs, A.B. (1993). Messenger RNA degradation in eucariotes. Cell 74, 413-421.

66. Levine, T.D., Gao, F., King, P.H., Andrews, L.G. and Keene, J.D. (1993). Hel-Nl: an autoimmune RNA-binding protein with specificity for 3' uridilate-rich untranslated regions of growth factor mRNAs. Mol. Cell. Biol. 13, 3494-3504.

67. Dalmau, J., Furneaux, H., Gralla, R.J., Kris, M.G. and Posner, J.B. (1990). Detection of anti-Hu antibody in the serum of patients with small-cell lung cancer aquantitative western blot analysis. Ann. Neurol. 27, 544-552.

68. Gibson, T.J. and Pastore, A. (1996). Three-dimensional structure and stability of the KH domain: molecular insights into the fragile X syndrome. Cell 85, 237-245.

69. Buckanovich, R.J., Yang, Y.Y. and Darnell, R.B. (1996). The onconeu-ral antigen Nova-1 is a neuron-specific RNA-binding protein, the activity of which is inhibited by paraneoplastic antibodies. J. Neurosci. 16, 11141122.

70. Tuerk, C. and Gold, L. (1990). Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase. Science 249,505-510.

71. Yang, Y.Y., Yin, G.L. and Darnell, R.B. (1999). The neuronal RNA-binding protein Nova-2 is implicated as the autoantigen targeted in POMApatients with dementia. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 13254-13259.

72. Engebrecht, J.A., Voelkel-Meiman, K. and Roeder, G.S. (1991). Meio-sis-specific RNA splicing in yeast. Cell 66, 1257-1268.

73. Siebel, C.W., Admon, A. and Rio, D.C. (1995). Soma-specific expression and cloning of PSI, a negative regulator of P element pre-mRNA splicing. Genes Dev. 9, 269-283.

74. Gamarnik, A.V. and Andino, R. (1997). Two functional complexes i formed by KH domain containing proteins with the 5' noncoding region ofpoliovirus RNA. RNA 3, 882-892.

75. Ostareck, D.H., Ostareck-Lederer, A., Wilm, M., Thiele, B J., Mann, M. and Hentze, M.W. (1997). mRNA silencing in erythroid differentiation: hnRNP K and hnRNP El regulate 15-lipoxygenase translation from the 3' end. Cell 89, 597-606.

76. Kiledjian, M., Wang, X. and Liebhaber, S.A. (1995). Identification of two KH domain proteins in the alpha-globin mRNP stability complex. EMBO J. 14,4357-4364.

77. Jensen, K.B., Dredge, B.K., Stefani, G., Zhong, R., Buckanovich, R.J., Okano, H.J., Yang, Y.Y. and Darnell, R.B. (2000). Nova-1 regulates neuron-specific alternative splicing and is essential for neuronal viability. Neuron 25,359-371.

78. Furneaux, H., Rosenblum, M., Dalmau, J. et al. (1990). Selective ex* pression of Purkinje-cell antigens in tumor tissue from patients with paraneoplastic cerebellar degeneration. N. Engl. J. Med. 332, 1844-1851.

79. Anderson, N.E., Rosenblum, M., Graus, F., Wiley, R.G. and Posner, J.B. (1988). Antibodies in paraneoplastic syndromes associated with small-cell lung cancer. Neurology 38, 1391-1398.

80. Cunningham, J., Graus, F., Anderson, N. and Posner, J. (1986). Partial characterization of the Purkinje cell antigens in paraneoplastic cerebellar degeneration. Neurology 36, 1163-1168.

81. Dropcho, E.J., Chen, Y.-T., Posner, J.B. and Old, L.J. (1987). Cloning of a brain protein identified by autoantibodies from a patient with paraneoplastic cerebellar degeneration. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 4552-4556.

82. Tanaka, K., Tanaka, M., Onodera, O. and Tsuji, S. (1995). Paraneoplastic cerebellar degeneration characterization of anti-Yo antibody and underlying cancer. Rinsho Shikeigaku 35(7), 770-774.

83. Oguro-Okano, M., Griesmann, G.E., Kryzer, T. et al. (1993). N-type (class B) neuronal Ca2+ channels expressed in small cell lung carcinomas of patients with and without Lambert-Eaton myasthenic syndrom (LES). Soc. Neurosci. Abstr. 19, 1755.

84. Lambert, E.H. and Lennon, V.A. (1988). Selected IgG rapidly induces Lambert-Eaton myasthenic syndrom in mice: complement independence and EMG abnormalities. Muscle Nerv. 11, 1133-1145.

85. Birnbaumer, L., Campbell, K.P., Catteral, W.A., Harpold, M.M., Hoffman, F., Home, W.A., Mori, Y., Schwartz, A., Snutch, T.P., Tanabe, T. et al. (1994). The naming of voltage-gated calcium channels. Neuron 13, 505506.

86. Roberts, A., Perera, S., Lang, B. et al. (1985). Paraneoplastic myasthenic syndrome IgG inhibits 45Ca2+-flux in a human small cell carcinoma line. Nature 317, 737-739.

87. Sher, E., Biancardi, E., Passafaro, M. and Clementi, F. (1991). Physiopathology of neuronal voltage-operated calcium channels. FASEB J. 5, 2677-2683.

88. O'Neil, J.H., Murray, N.M. and Newson-Davis, J. (1988). The Lambert-Eaton myasthenic syndrom. A review of 50 cases. Brain 11, 577-596.

89. Motomura, M. (1999). The Lambert-Eaton myasthenic syndrome: a study of 110 Japanese cases. Rinsho Shinkeigaku 39(12), 1237-1239.

90. Pongs, O. (1992). Molecular biology of voltage-dependent potassium channels. Physiol. Rev. 72, 69-88.

91. Lang, B. and Vincent, A. (1996). Autoimmunity to ion-channels and other proteins in paraneoplastic disorders. Curr. Opinion in Immun. 8, 865871.

92. Newson-Davis, J. and Mills, K.R. (1993). Immunological associations of acquired neuromyotonia (Isaacs' syndrom). Report of five cases and literature review. Brain 116, 453-469.

93. Lindstrom, J.M. and Lambert, E.H. (1978). Content of acetylcholine receptor and antibodies bound to receptor in myasthenia gravis, experimental autoimmune myasthenia gravis, and Eaton-Lambert syndrom. Neurology 28, 130-138.

94. Vincent, A. and Newson-Davis, J. (1985). Acetylcholine receptor antibody as a diagnostic test for myasthenia gravis: results in 153 validated cases and 2967 diagnostic assays. J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry 48, 1246-1252.

95. Karlin, A. (1993). Structure of nicotinic acetylcholine receptors. Curr. Opin. Neurobiol. 3, 299-309.

96. Mamalaki, A. and Tzartos, S.J. (1994). Nicotinic acetylcholine receptor: structure, function and main immunogenic region. Adv. Neuroimmu-nol. 4, 339-354.

97. Newson-Davis, J. (1997). Autoantibody-mediated channelopathies at the neuromuscular junction. Neuroscientist, 337-346.

98. David, C., Mepherson, P.S., Mundigl, O. and Decamilli, P. (1996). A role of amphiphisin in synaptic vesicle endocytosis suggested by its binding to dinamin in nerve terminals. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 331-335.

99. Klenchin, V.A., Calvert, P.D. and Bownds, M.D. (1995). Inhibition of rhodopsin kinase by recoverin. Further evidence for a negative feedback system in phototransduction. J. Biol. Chem. 270(27), 16147-16152.

100. Практикум по Биохимии. (1989). Издательство Московского университета, стр. 85.

101. Laemmli, U.K. (1970). Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 227, 680-685.

102. Практикум по Биохимии. (1989). Издательство Московского университета, стр. 320.

103. Senin, I.I., Zargarov, A.A., Alekseev, A.M., Gorodovikova, E.N., Lipkin, V.M. and Philippov, P.P. (1995). N-myristoylation of recoverin enhances its efficiency as an inhibitor of rhodopsin kinase. FEBS Lett. 376(1-2), 87-90.

104. Tikhomirova, N.K., Kochetov, G.A. (1990). Purification of transketo-lase from baker's yeast by an immunoadsorbent. Biochemistry Intern. 22, 31-36.

105. Lie, Y.S. and Petropoulos, C.J. (1998). Advances in quantitative PCR technology: 5' nuclease assays. Curr. Opin. Biotech. 9, 43-48.

106. De Smet, С., De Backer, О., Faraoni, I., Lurquin, С., Brasseur, F. and Boon, T. (1996). The activation of human gene MAGE-1 in tumor cells is correlated with genome-wide demethylation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93,7149-7153.

107. Archer, S.Y. and Hodin, R.A. (1999). Histone acetylation and cancer. Curr. Opin. Gen. Dev. 9, 171-174.

108. Eden, S. and Cedar, H. (1994). Role of DNA methylation in the regulation of transcription. Curr. Opin. Genet. Dev. 4, 255-259.

109. Creusot, F., Acs, G. and Christman, J.K. (1982). Inhibition of DNA methyltransferase and induction of Friend erythroleukemia cell differentiation by 5-azacytidine and 5-aza-2'-deoxycytidine. J. Biol. Chem. 257, 2041-2048.

110. Yoshida, M., Horinouchi, S. and Beppu, T. (1995). Trichostatin A and trapoxin: novel chemical probes for the role of histone acetylation in chromatin structure and function. Bioassays. 17, 423-430.

111. Chen, J.S., Faller, D.V. and Spanjaard, R.A. (2003). Short-chain fatty acid inhibitors of hystone deacetylases: promising anticancer therapeutics? Curr. Cancer Drug Targets 3 (3), 219-236.

112. Dalmau, J., Furneaux, H.M., Cordon-Cardo, C. and Posner, J. (1992). The expression of the Hu (paraneoplastic encephalomyelitis/sensory neu-ronopathy) antigen in human normal and tumor tissues. Am. J. Patol. 141, 881-886.

113. Dropcho, E.J. (2002). Remote neurologic manifestations of cancer. Neurol. Clin. 20, 85-122.

114. Musunuru, K. and Darnell, R.B. (2001). Paraneoplastic neurologic disease antigens: RNA-binding proteins and signaling proteins in neuronal degeneration. Ann. Rev. Neurosci. 24, 239-262.