Инфузии T-лимфоцитов памяти в низких дозах у детей после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток на платформе деплеции αβ Т-лимфоцитов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Благов Сергей Львович

• Благов Сергей Львович
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Благов Сергей Львович

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования

Цель исследования

Задачи исследования

Научная новизна исследования

Практическая значимость исследования

Основные положения исследования, выносимые на защиту

Личный вклад автора

Апробация работы и внедрение в практическое здравоохранение

Публикации и внедрение результатов исследования

Соответствие исследования паспорту научных специальностей

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. РОЛЬ АЛЛОГЕННОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В СОВРЕМЕННОЙ ТЕРАПИИ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ И ИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДЕТЕЙ И МОЛОДЫХ ВЗРОСЛЫХ

1.1. Вопросы этиологии, патогенеза и эпидемиологии острой и хронической реакции «трансплантат-против-хозяина»

1.2. Деплеция ав Т-лимфоцитов

1.3. Особенности иммунной реконституции при ав Т и СЭ19-деплетированных трансплантациях гемопоэтических стволовых клеток: эпидемиология, терапия

1.4. Вирусные инфекции у реципиентов аллогенных трансплантаций гемопоэтических стволовых клеток с ав Т и СЭ19-деплецией: эпидемиология, терапия

1.5. Особенности применения клеточной терапии вирусных инфекций у реципиентов аллогенных трансплантаций гемопоэтических стволовых клеток

1.6. Т-лимфоциты памяти. Применимость в контексте аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

Глава II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Клиническая характеристика больных, критерии включения и исключения из исследования

2.2. Режимы кондиционирования

2.3. Профилактика острой реакции «трансплантат-против-хозяина»

2.4. Характеристика доноров

2.5. Процессинг трансплантата

2.6. Процессинг донорских лимфоцитов памяти

2.7. Режим применения инфузий донорских лимфоцитов памяти

2.8. Диагностика и терапия острой реакции «трансплантат-против-хозяина»

2.9. Диагностика и терапия хронической реакции «трансплантат-против-хозяина»

2.10. План обследования пациентов

2.10.1 Исследование патоген-специфичной и общей иммунореконституции

2.10.2 Секвенирование генов Т-клеточного рецептора

2.10.2.1 Реконструкция репертура Т-клеточного рецептора

2.10.2.2 Отслеживание клонотипов и анализ репертура Т-клеточного рецептора

2.11. Дизайн исследования и статистический анализ

Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Статус пациентов на момент первой инфузии Т-лимфоцитов памяти

3.2 Оценка безопасности

3.2.1 Острая реакция «трансплантат-против-хозяина»

3.2.2 Хроническая реакция «трансплантат-против-хозяина»

3.3 Оценка эффективности

3.3.1 Вирусные инфекции

3.3.2 Основные исходы ТГСК

3.3.3 Общая иммунологическая реконституция

3.3.4 Вирус-специфическая иммунологическая реконституция

3.3.5 Динамический анализ разнообразия репертуара Т-клеточных рецепторов отдельной группы больных, получивших Т-лимфоциты памяти

3.3.6 Характеристика клонотипов Т-клеточных рецепторов, перенесенных с ИДЛ, в репертуаре Т-клеточного рецептора реципиентов

Глава IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Инфузии T-лимфоцитов памяти в низких дозах у детей после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток на платформе деплеции αβ Т-лимфоцитов»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность исследования

Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК) от аллогенного донора (алло-ТГСК) сегодня находит все большее применение в терапии многих гематологических и иммунологических заболеваний у пациентов разного возраста, зачастую являясь единственной возможной излечивающей опцией [17, 21, 102]. С каждым годом возрастает число пациентов, перенесших алло-ТГСК [37]. Реакция «трансплантат-против-хозяина» (РТПХ) является одной из ведущих причин неудачных исходов трансплантаций гемопоэтических стволовых клеток от неродственных и частично совместимых (гаплоидентичных) родственных доноров [123]. РТПХ - сложный биологический феномен, обусловленный аллогенным иммунным ответом лимфоцитов трансплантата в направлении антигенов реципиента [10, 12]. Неконтролируемое развитие этой реакции приводит к воспалительному повреждению органов-мишеней и формированию характерной клинической картины острой и/или хронической РТПХ [7, 64]. Развитие как острой, так и хронической РТПХ, требующей эскалации иммуносупрессивной терапии (ИСТ), делает пациента уязвимым к тяжелым инфекциям, а также является основной причиной инвалидизации, резко ухудшает качество жизни больных, перенесших аллогенную ТГСК [79].

Одним из наиболее перспективных методов профилактики РТПХ

является деплеция ав Т-лимфоцитов [35]. Предполагается, что

противоопухолевый эффект может быть обеспечен клеточными популяциями,

сохраненными в трансплантате при использовании ав Т-деплеции:

естественные киллеры (КК-клетки) и у5 Т-лимфоцитами, а также

миелоидными клетками. Существует достаточно широкая экспериментальная

и практическая база, указывающая, что данные популяции способны

5

опосредовать цитотоксическое действие на лейкемические клетки и, одновременно, не вызывают клинически значимой РТПХ [8].

В опубликованных предварительных результатах пилотного исследования за 2012-2013 годы на базе Федерального государственного бюджетного учреждения «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» (НМИЦ ДГОИ) показано, что применение aß Т-деплеции в рамках алло-ТГСК от гаплоидентичных доноров позволяет надежно обеспечить скорое приживление трансплантата и снижает риск развития тяжелых форм острой и хронической РТПХ. Вероятность возникновения острой РТПХ (о. РТПХ) II-III стадии с поражением висцеральных органов составила не более 16% (95%-й ДИ: 7-37). Хроническая РТПХ возникла у 30% больных и, преимущественно, была связана с активным применением посттрансплантационных инфузий нативных донорских лимфоцитов. Кумулятивная вероятность трансплантационной смертности составила 10% (95%-й ДИ: 4-26). Основной причиной трансплантационной смертности являлись поздние вирусные инфекции. Кумулятивная частота реактивации цитомегаловирусной (ЦМВ) и вируса Эпштейна-Барр (ЭБВ) - инфекции составила 53% и 40%, соответственно [95]. Вышеописанные результаты можно объяснить одним из наиболее серьезных негативных последствий удаления Т-лимфоцитов из трансплантата - медленным восстановлением функции адаптивного иммунитета, продемонстрированным в совместной работе группы НМИЦ ДГОИ и федерального государственного бюджетного учреждения «Институт биоорганической химии. им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова» Российской академии наук (ИБХ РАН) [143].

Таким образом, профилактика и терапия вирусных инфекций остается в значительной степени нерешенной задачей. Существующая лекарственная противовирусная терапия ЦМВ-инфекции, принципы действия которой базируются на ингибировании синтеза вирусной ДНК, сопряжена с высокой

токсичностью (ганцикловир), либо труднодоступна ввиду отсутствия

6

регистрации препаратов на территории Российской Федерации (сидофовир, фоскарнет) [2, 6, 131].

Существуют методики коррекции посттрансплантационного иммунодефицита, базирующиеся на выделении из крови донора и адоптивном переносе реципиенту вирус-специфичных Т-лимфоцитов. Выделение основано на стимуляции вирусными антигенами Т-клеток памяти и селекции активированных лимфоцитов. Переливание таких лимфоцитов не сопровождается, как правило, реакцией «трансплантат-против-хозяина» и другими осложнениями. Однако, применение данной методики ограничено высокой стоимостью реагентов, необходимостью трудоемких и высоко экономически-затратных ex vivo манипуляций с клеточным материалом, а также узким спектром противовирусной активности [74].

В настоящей работе предлагается исследовать гипотезу возможности использовать адоптивный перенос донорской иммунологической памяти в виде субпопуляции CD45RA-негативных лимфоцитов для профилактики и терапии вирусных инфекций у реципиентов ав T-деплетированных аллогенных ТГСК от гаплоидентичного (гапло-ТГСК) либо совместимого неродственного донора. Идеология исследования основана на доклинических данных, указывающих, что основными эффекторами РТПХ являются наивные Т-лимфоциты, и что деплеция субпопуляции наивных Т-лимфоцитов, несущих поверхностный маркер CD45RA, снижает частоту аллореактивных клеток в паре донор-реципиент in vitro [29, 43, 132, 133].

Цель исследования

Изучить эффективность, безопасность и биологические эффекты трансфузий низких доз донорских лимфоцитов памяти (CD45RA-деплетированных) в составе посттрансплантационной терапии реципиентов аллогенных ТГСК на платформе иммуномагнитной деплеции ав Т-лимфоцитов.

Задачи исследования

1. Исследовать безопасность инфузий низких доз CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов в когорте реципиентов аллогенных ТГСК на платформе деплеции ав Т-лимфоцитов.

2. Исследовать влияние инфузий низких доз CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов на кинетику общей иммунологической реконституции и патоген-специфичного иммунного ответа в когорте реципиентов аллогенных ТГСК на платформе деплеции ав Т-лимфоцитов.

3. Исследовать профилактическую и терапевтическую эффективность инфузий низких доз CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов в отношении ключевых возбудителей вирусных инфекций в когорте реципиентов аллогенных ТГСК на платформе деплеции ав Т-лимфоцитов.

4. Изучить влияние инфузий низких доз CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов на основные клинические исходы ТГСК в когорте реципиентов аллогенных ТГСК на платформе деплеции ав Т-лимфоцитов.

5. Исследовать клональную динамику инфузируемых низких доз CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов с целью доказательства возможности адоптивного трансфера и персистенции донорской иммунологической памяти.

Научная новизна исследования

1. Систематический анализ применения инфузий низких доз СВ45ЯЛ-

деплетированных донорских лимфоцитов реципиентам аллогенных

ТГСК с ав Т-деплецией трансплантата от гаплоидентичных или

8

неродственных совместимых доноров, представленный в настоящей работе, является уникальным и выполнен впервые в мире.

2. Впервые выполнено проспективное клиническое исследование применения низких доз инфузий СD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов у реципиентов аллогенных ТГСК с ав Т-деплецией трансплантата, а также ретроспективный анализ на расширенной когорте пациентов детского возраста со злокачественными и незлокачественными заболеваниями.

3. Впервые показано влияние низких доз СD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов на становление патоген-специфического иммунитета и общей иммунологической реконституции у реципиентов аллогенных ТГСК с ав Т-деплецией трансплантата.

4. Впервые показана терапевтическая роль инфузий CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов в отношении активной ЦМВ-инфекции у иммунокомпрометированных реципиентов алло-ТГСК.

5. Впервые продемонстрирована возможность монотерапии активной ЦМВ-инфекции у иммунокомпрометированных реципиентов алло-ТГСК с использованием инфузий CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов.

6. Впервые комплексно исследованы факторы, влияющие на экспансию и персистенцию вирус-специфических лимфоцитов in vivo и продемонстрирована ключевая роль экспозиции к релевантному антигену.

7. В настоящей работе впервые документирован вклад перенесенных в составе инфузии донорских лимфоцитов клонотипов вирус-специфических T-лимфоцитов в формирование разнообразия репертуара Т-клеточного рецептора у реципиентов аллогенных ТГСК с ав Т-деплецией трансплантата.

Практическая значимость исследования

1. В работе показана безопасность инфузий донорских Т-лимфоцитов памяти после приживления аллогенных трансплантатов, подготовленных методом деплеции ав Т-лимфоцитов. Отработан диапазон доз для безопасного клинического применения. Показана принципиальная возможность переноса патоген-специфического иммунного ответа в составе малых доз Т-лимфоцитов памяти.

2. Сформулированы принципы клинического применения донорских Т-лимфоцитов памяти в части тайминга, дозового режима, ожидаемых клинических эффектов и осложнений.

3. На основе полученных в работе данных выбраны ключевые параметры проспективного рандомизированного исследования инфузий донорских лимфоцитов памяти, направленного на доказательство эффективности интервенции в профилактике цитомегаловирусной инфекции у реципиентов ТГСК.

4. Разработан оптимальный тайминг и дозовый режим инфузий Т-лимфоцитов памяти реципиентам аллогенных ТГСК с ав Т-деплецией трансплантата в зависимости от типа ТГСК, а также риска различных осложнений посттрансплантационного периода.

5. Оценка вирус-специфичного иммунного ответа методом ЕЫБРОТ, на основании результатов которого базируется методология настоящей работы, внедрена в клиническую практику для определения прогнозов и терапевтического контроля в отношении ключевых вирусных патогенов у реципиентов ТГСК.

6. Работа открывает широкие перспективы оптимизации клеточной терапии и профилактики вирусных инфекций у реципиентов ТГСК.

Основные положения исследования, выносимые на защиту

1. Применение инфузий низких доз СВ45ЯЛ-деплетированных донорских лимфоцитов после приживления трансплантата является безопасной терапевтической опцией, не сопряженной с высоким риском иммунных осложнений в когорте реципиентов аллогенных ТГСК на платформе деплеции ав Т-лимфоцитов.

2. Применение инфузий низких доз СВ45ЯЛ-деплетированных донорских лимфоцитов реципиентам аллогенных ТГСК с ав Т-деплецией трансплантата позволяет осуществить адоптивный трансфер донорской вирус-специфической иммунологической памяти реципиенту.

3. Применение инфузий низких доз СВ45ЯЛ-деплетированных донорских лимфоцитов влияет на ускорение общей и патоген-специфической иммунореконституции у реципиентов аллогенных ТГСК с ав Т-деплецией трансплантата.

4. Терапевтическая эффективность применения инфузий низких доз СВ45ЯЛ-деплетированных донорских лимфоцитов в когорте реципиентов аллогенных ТГСК на платформе деплеции ар Т-лимфоцитов подтверждена низкой частотой трансплантационной смертности, смертности, ассоциированной с вирусными инфекциями, а также уменьшением общего числа случаев тяжелого неконтролируемого течения вирусных болезней.

5. Т-лимфоциты памяти, инфузируемые в составе клеточного продукта СВ45ЯЛ-деплеции, способны длительно персистировать в организме реципиента алло-ТГСК и участвовать в формировании разнообразия репертуара Т-клеточного рецептора.

Личный вклад автора

Все основные этапы работы: анализ литературы по теме исследования,

консультация и клиническое ведение пациентов, формирование научной базы

данных, обеспечение логистики забора образцов крови у больных с

11

последующей транспортировкой в профильные лаборатории, статистическая обработка и анализ полученных результатов осуществлялись автором лично.

Апробация работы и внедрение в практическое здравоохранение

Данные по теме диссертации доложены и обсуждены на «Конгрессе Европейского сообщества по трансплантации костного мозга» (Стамбул, Турция, EBMT 2015), съезде «Национального общества детских гематологов» (Москва, НОДГО 2015), «19-м курсе школы по трансплантации гемопоэтических стволовых клеток» (Малага, Испания 2015) в качестве постерных докладов. Доклады по теме работы сделаны на «42-м Конгрессе Европейского сообщества по трансплантации костного мозга» (Валенсия, Испания, EBMT 2016), на VII Съезде детских онкологов России (Москва, 2015), III рабочем совещании аллергологов-иммунологов с международным участием «Первичные иммунодефициты и аутовоспалительные заболевания» (Москва 2020), а также на «Президентском симпозиуме» «46-го Конгресса Европейского сообщества по трансплантации костного мозга» (Франкфурт, Германия, EBMT 2019), на котором автор был награжден за «лучший абстракт среди молодых ученых».

Материалы и методы, изложенные в настоящем исследовании, находят активное применение в клинической практике как на территории Российской Федерации (ФГБУ НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева МЗ РФ), так и в зарубежных трансплантационных центрах США и Европы [41, 42, 101, 133]. В профильных литературных источниках и изданиях растет количество сообщений и новых данных по применению инфузий T-клеток памяти у реципентов аллогенных ТГСК со ссылками на результаты нашей работы.

Публикации и внедрение результатов исследования

По материалам научной работы опубликовано 7 печатных работ, в том числе 4 в научных изданиях, рецензируемых ВАК Минобрнауки России. Пилотное исследование, «Memory T-cell Infusion to Improve Immunity After

TCR-alpha/beta Depleted Hematopoietic Stem Cell Transplantation», положенное в основу диссертационной работы, было зарегистрировано на сайте https://clinicaltrials.gov с последующей публикацией результатов в форме статьи в одном из профильных зарубежных журналов. Методика инфузий низких доз СD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов широко внедрена в повседневную клиническую практику для терапии пациентов различных нозологий, нуждающихся в проведении аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток с T-деплецией, на базе Федерального государственного бюджетного учреждения «Национального медицинского исследовательского центра детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Министерства здравоохранения Российской Федерации. Работы по более глубокому исследованию эффективности инфузий T-клеток памяти на базе клиники НМИЦ ДГОИ активно продолжаются в рамках рандомизированного проспективного исследования.

Соответствие исследования паспорту научной специальности

Диссертация соответствует паспорту научных специальностей 14.01.21 -гематология и переливание крови. Диссертация посвящена исследованию клинических особенностей применения инфузий низких доз CD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов реципиентам аллогенных трансплантаций гемопоэтических клеток c ав Т-деплецией трансплантата.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. РОЛЬ АЛЛОГЕННОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

В СОВРЕМЕННОЙ ТЕРАПИИ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ И ИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДЕТЕЙ И МОЛОДЫХ ВЗРОСЛЫХ

Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток -клиническая технология, целью которой является восстановление функции костного мозга пациента, имеющего гематологическое или иммунологическое заболевание, посредством замены гемопоэтической системы мультипотентными гемопоэтическими стволовыми клетками (ГСК) донора [3, 8, 10, 11, 14]. Первые успехи в области применения аллогенной ТГСК достигнуты в конце 1960-х годов [37]. По мере повышения степени понимания биологических особенностей гемопоэтических стволовых клеток, исследования системы лейкоцитарных антигенов человека (HLA) и развития лекарственной индустрии в целом, алло-ТГСК находит все большее применение и для ряда клинических ситуаций стала основной излечивающей опцией [15]. По разным данным, в мире ежегодно осуществляется от 60000 до 150000 трансплантаций костного мозга (ТКМ). Одна из ведущих проблем ТГСК - низкая доступность данного метода, отсутствие возможности обеспечить всех нуждающихся пациентов в необходимые сроки. В частности, для группы пациентов с гемобластозами нарушение оптимального тайминга ТГСК зачастую может привести к фатальным последствиям [136]. В число наиболее значимых затрудняющих факторов входят недостаточный коечный фонд, требующий наличия высокоспециализированного дорогостоящего инструментального и лабораторного медицинского оборудования, а также отсутствие HLA-cовместимых доноров. На начальных этапах развития технологии трансплантации гемопоэтических стволовых клеток считалось, что полная совместимость по антигенам главного комплекса гистосовместимости - ключевой фактор успешного результата как в контексте аллогенных неродственных, так и родственных ТГСК [1]. Это послужило стимулом к формированию регистров неродственных доноров, суммирующих

в настоящее время более 37 млн. волонтеров из стран по всему миру. Поиск совместимого донора в рамках регистра одной страны, безусловно, занимает гораздо меньшее время, чем в международном регистре, однако, также может быть значительно затруднен уже не с позиций логистики, а ввиду отсутствия полного соответствия этногенетического состава донорского пула и этнической структуры населения страны [115]. Возможность использовать в качестве источника гемопоэтических стволовых клеток пуповинную кровь позволило в определенной степени отступить от жестких требований к НЬА-совместимости трансплантата, однако, естественное ограничение дозы клеток в образцах пуповинной крови и отсроченная миелореконституция говорят об относительной сложности и неоптимальности данного метода [10]. В значительной степени необходимость увеличить доступность трансплантации для всех нуждающихся пациентов явилась главным драйвером развития трансплантации от гаплоидентичных доноров. Исторически такой вид трансплантации зарекомендовал себя как метод, сопряженный с тяжелыми осложнениями: риск развития реакции «трансплантат-против-хозяина» (РТПХ) Ш-1У стадии достигал 50 %, вероятность отторжения трансплантата - более 15 %, трансплантационная смертность - более 40 % (по результатам различных авторов). В нашей стране одним из крупнейших центров, занимающимися ТГСК, является клиника «ФГБУ НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева», на базе которой ежегодно проводится не менее 200 аллогенных ТГСК. НМИЦ ДГОИ - член Европейской группы по трансплантации костного мозга. Центр активно работает с международными регистрами в рамках Международной базы данных доноров гемопоэтических стволовых клеток. В НМИЦ ДГОИ широко применяется технология процессинга трансплантата с удалением ав Т-позитивной клеточной фракции, в первую очередь, направленная на уменьшение риска активации РТПХ.

1.1. Вопросы этиологии, патогенеза и эпидемиологии острой и хронической реакции «трансплантат-против-хозяина»

Одновременно с первыми клиническими успехами аллогенной трансплантации костного мозга, произошла расшифровка биологических механизмов аллореактивности и идентификация Т-лимфоцитов, как главных эффекторов РТПХ. Реакция «трансплантат-против-хозяина» является одним из главных осложнений аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, являясь наиболее распространенной причиной трансплантационной смертности. Вопрос наиболее объективной классификации РТПХ остается открытым. В НМИЦ ДГОИ, на базе которого выполнялась данная диссертационная работа, классификация и стадирование острой РТПХ проводятся в соответствии с Seattle-критериями [107]. Патогенез острой РТПХ (оРТПХ) включает несколько этапов. Начальное повреждение ткани возникает на фоне проводимого химиотерапевтического этапа кондиционирования, что приводит к активации антиген-презентирующих клеток молекулами PAMPs и DAMPs. Происходит активация и пролиферация донорских ^лимфоцитов с последующим цитотоксическим повреждением клеток-мишеней реципиента и выбросом провоспалительных цитокинов: интерлейкина 1 (ИЛ-1), фактора некроза опухоли (Т№-а), что впоследствии вызывает «некроз сателлитных клеток» [7]. Различают 3 главных органа-мишени при острой РТПХ: кожа, кишечник и печень. На клеточном уровне мишенями являются клетки эндотелия, базальные и супрабазальные клетки эпидермиса, эпителий кишечника, желчных протоков, - активно участвующие в процессах пролиферации и дифференцировки. Во всех органах-мишенях повреждения имеют схожий характер. В настоящее время к числу основных факторов риска возникновения оРТПХ принято относить степень несоответствия пары донор-реципиент по системе человеческих лейкоцитарных антигенов (HLA), пожилой возраст реципиента, использование женщин-доноров для мужчин-реципиентов, предварительная аллоиммунизация донора. Также нельзя не отметить, что, в зависимости от

использования тех или иных режимов кондиционирования, иммуносупрессивной профилактики, а также источников стволовых клеток, риск возникновения оРТПХ может варьировать [58, 61, 102]. При НЬА-совместимых родственных ТГСК риск активации оРТПХ по данным разных авторов может достигать 70%, а при неродственных совместимых либо гапло-ТГСК до 90%. Смертность от о. РТПХ и её осложнений может достигать 30%. У детей эти показатели существенно меньше, чем у взрослых пациентов [10]. С развитием фармакологической индустрии, появлением новых иммуносупрессивных агентов, контроль оРТПХ становится эффективнее, отмечается тенденция к снижению общей частоты и тяжести течения оРТПХ [64, 103]. Стандартная стартовая терапия оРТПХ - назначение кортикостероидов [70]. В частности, в исследовании МасМШап МЬ е1 а1., у трети детей и подростков, получивших алло-ТГСК, отмечалась рефрактерность к терапии кортикостероидами, а общая 2-х летняя выживаемость пациентов с оРТПХ составила 55%. В структуре трансплантационной смертности, с оРТПХ ассоциировано 56% случаев [90].

Хроническая РТПХ (хРТПХ) - мультисистемное алло- и аутоиммунное заболевание, которое характеризуется иммунной дисрегуляцией, иммунодефицитом, поражением и нарушением функции органов [13]. Ее встречаемость по разным данным может составлять до 80% на протяжении нескольких лет после ТГСК, а 5-летняя общая выживаемость при экстенсивных формах, как правило, не превышает 40%. Согласно федеральным клиническим рекомендациям РФ, диагностика и стадирование хронической реакции «трансплантат-против-хозяина» выполняются в соответствии с критериями МН (Национальный Институт Здоровья США). Для верификации хронической РТПХ необходимо наличие не менее одной диагностической манифестации, либо одного отличительного проявления с подтверждением биопсией, лабораторными тестами или рентгенологическим исследованием [105]. Различают незначительную, умеренную и выраженную

хроническую РТПХ - степень поражения оценивается баллами [19]. Характеристика патогенеза хРТПХ вызывает споры у исследователей по настоящее время. Есть мнения, что хроническая РТПХ - поздняя фаза острой, возникшая в результате распознавания минорных антигенов. Другие считают ее преимущественно аутоиммунным процессом, объясняя его нарушением функции тимуса, проявляющимся в потере его секреторной функции [123, 128, 141]. К факторам неблагоприятного прогноза при хронической РТПХ относят: прогрессию из острой РТПХ, наличие лихеноидов, повышение общего билирубина в более чем 1,5 раза от возрастной нормы и два дополнительных: тромбоцитопения, быстрая манифестация [20, 105]. У пациентов детского возраста, получивших аллогенную ТГСК от частично совместимых доноров, кумулятивная вероятность развития проявлений оРТПХ П-^ стадии по данным различных авторов может варьировать от 40 до 85%, в зависимости от степени несоответствия по системе лейкоцитарных антигенов человека (HLA) и до 27% у реципиентов полностью совместимых ТГСК [40, 53].

Опубликованы результаты исследования «aieop AML-2002/01», в

котором 141 пациент детского возраста с высоким риском острого

миелобластного лейкоза (ОМЛ) получили аллогенную ТГСК. Все пациенты

имели схожее кондиционирование с применением бусульфана и мельфалана.

Иммуносупрессивная профилактика включала препараты - ингибиторы

кальциневрина в моно - режиме (для родственных совместимых

трансплантаций), либо с добавлением метотрексата и включением в

кондиционирование тимоглобулина (для ТГСК от неродственных доноров).

Кумулятивная вероятность оРТПХ П-^ и Ш-^ стадий составила 38.1% и

13.7%, соответственно. Острая РТПХ П-^ стадии у детей, получивших ТГСК

от HLA-совместимого родственного донора, взрослого совместимого

неродственного донора и от неродственного совместимого донора

пуповинной крови составила 35.1%, 45.1% и 38.5%, соответственно. У 33-х

пациентов из данного исследования возникли проявления хронической РТПХ,

у 11 из которых имела место экстенсивная форма хРТПХ, таким образом,

18

кумулятивная вероятность хРТПХ составила 25%, экстенсивной хРПТХ -8,6%. Трансплантационная смертность пациентов с верифицированной РТПХ составила 8,9% [88].

С целью улучшения доступности ТГСК как метода, в последнее время все большее распространение находят трансплантации от гаплоидентичных доноров. К числу преимуществ трансплантаций такого рода относятся быстрота активации донора (родитель, гаплоидентичный сиблинг), а также возможность в дальнейшем без сложностей получить донорские гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) для ИДЛ либо ретрансплантации в случае клинической необходимости [1]. В качестве источника стволовых клеток при такого рода трансплантациях могут быть использованы костный мозг либо периферические стволовые клетки крови (ПСКК). В исследовании Ьигтк е1 а1. 2008, продемонстрированы результаты аллогенных трансплантаций костного мозга у 68 пациентов с гемобластозами от гаплоидентичных доноров. Больные получили немиелоаблативное кондиционирование с последующим введением циклофосфамида на +3 и +4 сутки после трансплантации костного мозга с целью профилактики РТПХ. Кумулятивная вероятность возникновения оРТПХ 11-1У и Ш-1У стадий составила 34% и 6%, соответственно. У части пациентов, получивших 2 введения циклофосфамида (п = 40) вместо 1 (п = 28), отмечалась достоверно меньшая вероятность активации хРТПХ к 1 году после ТГСК: 5% к 25%. Однако, общая 2-х летняя выживаемость пациентов составила не более 36%. Из числа пациентов, умерших не от прогрессии основного заболевания, проявления РТПХ отмечалась у 18% больных [89]. В одном из недавних опубликованных проспективных исследований по применению ТГСК от гаплоидентичных доноров с посттрансплантационным введением циклофосфамида у детей и молодых взрослых включено 32 больных. Кумулятивная вероятность оРТПХ 11-1У стадии к сотому дню после ТГСК составила всего 13%, тогда как ни один пациент не развил оРТПХ 111-1У

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Благов Сергей Львович, 2021 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1) Афанасьев, Б.В. Выбор донора при аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток / Б.В. Афанасьев, Л.С. Зубаровская, А.Л. Алянский и др. // Российский журнал детской гематологии и онкологии. - 2016. - №. 3. - С. 30-36.

2) Балашов, Д.Н. Факторы риска цитомегаловирусной инфекции у пациентов после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток / Д. Н. Балашов, П. Е. Трахтман, Е. В. Скоробогатова и др. // Российский журнал детской гематологии и онкологии. - 2010. - №. 4. - С. 20-26.

3) Балашов, Д.Н. Опыт проведения повторной трансплантации у пациентов с первичными иммунодефицитами при тяжелых дисфункциях трансплантата гемопоэтических стволовых клеток / Д.Н. Балашов, Л.Н. Шелихова, И.П. Шипицына и др. // Российский журнал детской гематологии и онкологии. - 2019. - Т. 6. - № S1. - С. 155-156.

4) Благов С. Применение инфузий Т-клеток памяти с целью профилактики вирусных инфекций у пациентов с гемобластозами, перенесших аллогенную трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток с деплецией альфа/бета-Т-лимфоцитов / С.Л Благов, Л.Н. Шелихова, Е.Ю. Осипова и др. //Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2018. - Т. 17. - №. 2. - С. 9-20.

5) Бриллиантова, В.В. Оценка химеризма в СЭ3+ клеточной линии у пациентов с острым миелобластным лейкозом (ОМЛ) после аллогенной ТГСК с ТСЯ а/Ь деплецией / В.В. Бриллиантова, В.О. Бобрынина, А.В. Поляков и др. // Программа и научные труды Научной конференции молодых ученых по медицинской биологии ФГБУ ФНКЦ физико-химической медицины ФМБА. - 2016. - С. 27-28.

6) Дегтярева, А.В. Опыт применения ганцикловира при лечении генерализованной формы врожденной цитомегаловирусной инфекции /

А.В. Дегтярева, В.В. Зубков, О.С. Непша и др. // Акушерство и гинекология. - 2012. - №. 5. - С. 103-108.

7) Ефимов, Г.А. Иммунобиология острой реакции «трансплантат против хозяина» / Г.А. Ефимов, А.С. Вдовин, А.А. Григорьев и др. // Медицинская иммунология. - 2015. - Т. 17. - №. 6.- С. 499-516.

8) Масчан, М.А. Деплеция альфа/бета-Т-лимфоцитов - надежная платформа для развития трансплантации гемопоэтических стволовых клеток от гаплоидентичных доноров / М.А. Масчан // Российский журнал детской гематологии и онкологии. - 2015-T. 2 - №. 3. -С. 34-38.

9) Першин, Б.С. Новый протокол диагностики и лечения цитомегаловирусного ретинита после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток / Б.С. Першин, Л.Н. Шелихова, А.Б. Смирнова и др. // Современные технологии в офтальмологии. - 2017. - №. 1. - С. 219-221.

10) Румянцев, А.Г. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей. Руководство для врачей / А.Г. Румянцев, А.А. Масчан //М.М МИА, —2003.—400 с.

11) Савченко, В.Г. Программное лечение заболеваний системы крови. / В.Г. Савченко // М. Практика, —2012. — С. 155-245.

12) Савченко, В.Г. Трансплантация костного мозга в онкогематологии. Клиническая онкогематология / В.Г. Савченко // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. - 2010. - Т. 3. - №. 4. - С. 410-411.

13) Скворцова, Ю.В. Новое в патогенезе, диагностике и лечении хронической реакции «трансплантат против хозяина» после аллогенной ТГСК / Ю.В. Скворцова, Г.А. Новичкова, А.А. Масчан // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2018. - Т. 17. - №. 2. - С. 121-135.

14) Скворцова, Ю.В. Кожная форма реакции «Трансплантат против хозяина» у пациентки через 1 год после ортотопической трансплантации печени:

описание случая и обзор литературы / Ю.В Скворцова, О.Д. Олисов, В.Е. Сюткин и др. // Трансплантология, - 2010. - №. 1. С. 61-68.

15) Скворцова, Ю.В. Болезнь трансплантат против хозяина после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у детей / Ю.В. Скворцова, Д.Н. Балашов, В.М. Делягин// Медицинский совет—2016. — № 1— С.136-139.

16) Скоробогатова, Е.В. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с анемией Фанкони: опыт РДКБ и ФНКЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева. / Е.В. Скоробогатова, К.И. Киргизов, Д.Н. Балашов и др. //Российский журнал детской гематологии и онкологии —2016. —№ 1— С. 23-34.

17) Шелихова, Л.Н. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток от гаплоидентичного донора с TCR ав-деплецией у детей с химиорезистентным острым миелобластным лейкозом / Л.Н. Шелихова, М.А. Илюшина, К.В. Семиглазова и др. // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2019. - Т. 18. - №. 2. - С. 11-21.

18) Anderson, B. Memory CD4+ T cells do not induce graft-versus-host disease / B. Anderson, J. McNiff, J. Yan, et al. // The Journal of clinical investigation. -2003. - Vol. 112 (1) - Р. 101-108.

19) Arora, M. New classification of chronic GVHD: added clarity from the consensus diagnoses. / M. Arora, S. Nagaraj, J. Witte et al. // Bone Marrow Transplant. - 2009. - Vol. 43 (2) - P. 149-53.

20) Atkinson, K. Clinical bone marrow and blood stem cell transplantation/ Kerry Atkinson // Cambridge university press. — 1999. —1524 p.

21) Balashov, D. Single-Center Experience of Unrelated and Haploidentical Stem Cell Transplantation with TCRaP and CD19 Depletion in Children with Primary Immunodeficiency Syndromes. / D. Balashov, А. Scherbina et al. // Biology of Blood and Marrow Transplantation. —2015—Vol. 21 (11) — P.1955 - 1962

22) Barba, P. Ex Vivo CD34+-Selected T Cell-Depleted Peripheral Blood Stem Cell Grafts for Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Acute Leukemia and Myelodysplastic Syndrome Is Associated with Low Incidence of Acute and Chronic Graft-versus-Host Disease and High Treatment Response. / P. Barba, P. Hilden, S. Devlin et al. // Biology of blood and marrow transplantation. — 2017— Vol. 23(3), — P.452-458.

23) Bayraktar U. Progress in Haploidentical Stem Cell Transplantation, / U Bayraktar, E Richard, O Stefan. // Biology of Blood and Marrow Transplantation. - 2012. - Vol. 18. - №. 3. - P. 372-380.

24) Bertaina, A. HLA-haploidentical stem cell transplantation after removal of alphabeta + T and B cells in children with nonmalignant disorders / A. Bertaina, P. Merli, S. Rutella, et al. // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 2014. - Vol. 124 - P. 822-826.

25) Bertaina, A. Unrelated donor vs HLA-haploidentical a/ß T-cell- and B-cell-depleted HSCT in children with acute leukemia / A. Bertaina, M. Zecca, B. Buldini et al. // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. -2018- Vol. 132(24) - P. 2594-2607.

26) Bhat, S. Outcomes of myeloablative haplo-identical hematopoietic stem cell transplant in pediatric patients with TCR a/ß; and CD 19 depletion. / S. Bhat, S. Ngangbam W. Iqbal, et al. // Biology of Blood and Marrow Transplantation. - 2017. - Vol. 23. - №. 3. - P. 191-192.

27) Blagov, S. T-cell tracking, safety, and effect of low-dose donor memory T-cell infusions after aß T cell-depleted hematopoietic stem cell transplantation. / S. Blagov, I. Zvyagin, L. Shelikhova et al. // Bone Marrow Transplantation. -2020-P.1-9.

28) Bleakley M. Leukemia-associated minor histocompatibility antigen discovery using T-cell clones isolated by in vitro stimulation of naive CD8+ T cells. / M. Bleakley, B. Otterud, J. Richardt, et al. // Blood. - 2010. - Vol. 115. - №. 23. - P. 4923-4933.

29) Bleakley, M. Engineering human peripheral blood stem cell grafts that are depleted of naive T cells and retain functional pathogen-specific memory T cells. / M Bleakley, S Heimfeld, LA Jones et al. // Biol Blood Marrow Transplant - 2014. -Vol. 20 (5). - P.705-716.

30) Bleakley, M. Outcomes of acute leukemia patients transplanted with naive T cell-depleted stem cell grafts. / M. Bleakley, S. Heimfeld, K. Loeb et al. // The Journal of clinical investigation. - 2015. - Vol. 125. - №. 7. -P. 26772689.

31) Bolotin, D. MiXCR: software for comprehensive adaptive immunity profiling. / D Bolotin, S Poslavsky, I Mitrophanov et al.// Nature methods. -2015. - Vol. 12. - №. 5. - P. 380-381.

32) Brodszki, N, Turkiewicz D, Toporski J. et al. Novel treatment of severe combined immunodeficiency utilizing ex-vivo T-cell depleted haploidentical hematopoietic stem cell transplantation and CD45RA+ depleted donor lymphocyte infusions. / N. Brodszki, D. Turkiewicz, J. Toporski et al. // Orphanet Journal of Rare Disease. - 2016. - Vol 11 (5).

33) Britanova O. Age-related decrease in TCR repertoire diversity measured with deep and normalized sequence profiling. / O. Britanova, E Putintseva, M Shugay //The Journal of Immunology. - 2014. - T. 192. - №. 6. - C. 26892698.

34) Burns, D. Greatly reduced risk of EBV reactivation in rituximab-experienced recipients of alemtuzumab-conditioned allogeneic HSCT / M. Burns, S. Rana, E. Martin, et al. //Bone marrow transplantation. - 2016. - Vol. 51. - №. 6. -C. 825-832.

35) Chaleff, S. A large-scale method for the selective depletion of alphabeta T lymphocytes from PBSC for allogeneic transplantation. / S Chaleff, M Otto, R. Barfield, T. Leimig // Cytotherapy - 2007. - Vol. 9. - №. 8. - P. 746-754.

36) Chen, B. Inability of memory T cells to induce graft-versus-host disease is a result of an abortive alloresponse. / B Chen, D Deoliveira, X Cui, et al.// Blood. - 2007. - Vol. 109. - №. 7. - P. 3115-3123.

37) Clark C. What do we need to know about allogeneic hematopoietic stem cell transplant survivors? / C Clark, M Savani, M Mohty et al.// Bone Marrow Transplant. - 2016. - Vol. 51. - №. 8. - P. 1025-1031.

38) Cobbold M. Adoptive transfer of cytomegalovirus-specific CTL to stem cell transplant patients after selection by HLA-peptide tetramers. / M Cobbold, N Khan, B Pourgheysari, S Tauro, et al. //The Journal of experimental medicine. - 2005. - Vol. 202. - №. 3. - P. 379-386.

39) Czerkinsky, C. Reverse ELISPOT assay for clonal analysis of cytokine production I. Enumeration of gamma-interferon-secreting cells. / C Czerkinsky, G Andersson, H. Ekre et al. //Journal of immunological methods.

- 1988. - Vol. 110. - №. 1. - P. 29-36.

40) Davies, S. Recent decrease in acute graft-versus-host disease in children with leukemia receiving unrelated donor bone marrow transplants. / S Davies, D Wang, T Wang et al //Biology of Blood and Marrow Transplantation. - 2009.

- Vol. 15. - №. 3. - P. 360-366.

41) Dhamne, C. Rapid immune reconstitution post CD45RA depleted HSCT leads to better engraftement, reduced risk of invasive viral infections and superior graft versus leukemia effect. / C Dhamne, F Yeap, T Soh, //Bone Marrow Transplantation. - 2017. - Vol. 52. - P439.

42) Diaz, M. CD45 RA Depletion As an Allogeneic Hematopoietic Transplantation Platform in Children from HLA-Identical Donors / M Diaz, B Molina, E Sebastian, et al. // Biology of Blood and Marrow Transplantation. -2019. - Vol. 25. - №. 3. - P. S205-S206.

43) Distler, E. Alloreactive and leukemia-reactive T cells are preferentially derived from naive precursors in healthy donors: implications for immunotherapy with memory T cells. / E Distler, A Bloetz, J Albrecht et al. //haematologica. - 2011. - Vol. 96. - №. 7. - P. 1024.

44) D'Orsogna, L. New tools to monitor the impact of viral infection on the alloreactive T-cell repertoire / L. D'Orsogna, A. Amir, Y. Zoet et al. //Tissue antigens. - 2009. - T. 74. - №. 4. - C. 290-297.

45) Drokov, M. Influence of non-CMV specific intravenous immunoglobulin on intravenous ganciclovir effectiveness in patients after allogeneic stem cell transplantation with CMV-disease. / M. Drokov, D. Tikhomirov, L. Kuzmina et al. //Cellular Therapy and Transplantation. - 2018. - Vol. 7. - №.3 - P. 349-352.

46) D'Souza, A. Current Use and Trends in Hematopoietic Cell Transplantation in the United States. / A D'Souza, S Lee, X Zhu, et al. // Biology of Blood and Marrow Transplantation. - 2017. - Vol. 23. - №. 9. - P. 1417-1421.

47) Dutt, S. Naive and memory T cells induce 1397 different types of graft-versus-host disease. / S Dutt, D Tseng, J Ermann, et al. // The Journal of Immunology. - 2007. - Vol. 179. - №. 10. - P. 6547-6554

48) Dykes, J. Effective depletion of CD45RA+ naive T cells using the CLINIMACS System to produce donor lymphocyte infusions for antiviral boost following haploidentical transplantation. / J Dykes, A Hult, A Persson et al. //Bone Marrow Transplantation. - 2014. - Vol. 49. - P.246

49) Einsele, H. Infusion of cytomegalovirus (CMV)-specific T cells for the treatment of CMV infection not responding to antiviral chemotherapy. / H Einsele, E Roosnek, N Rufer, //Blood. - 2002. - Vol. 99. - №. 11. - P. 39163922.

50) El Haddad L. The Ability of a Cytomegalovirus ELISPOT Assay to Predict Outcome of Low-Level CMV Reactivation in Hematopoietic Cell Transplant Recipients / L El Haddad, E Ariza-Heredia, D P Shah //The Journal of infectious diseases. - 2019. - Vol. 219. - №. 6. - P. 898-907.

51) Elmariah, H. Post-transplantation cyclophosphamide to facilitate HLAhaploidentical hematopoietic cell transplantation: Mechanisms and results. / H Elmariah, E Fuchs // Seminars in hematology. - WB Saunders, 2019. - Vol. 56. - №. 3. - P. 183-189.

52) Erbey, F. Comparison of outcomes after HLA-matched unrelated and aß T-cell-depleted haploidentical hematopoietic stem cell transplantation for

children with high-risk acute leukemia. / F Erbey, A Akfay, D Atay //Pediatric transplantation. - 2018. - Vol. 22. - №. 4. - P. e13192.

53) Faraci, M. Acute graft-versus-host disease in pediatric allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Single-center experience during 10 yr. / M Faraci, I Caviglia, E Biral et al.// Pediatric transplantation. - 2012. -Vol. 16. - №. 8. - P. 887-893.

54) Farber, D. Human memory T cells: generation, compartmentalization and homeostasis. / D. Farber, N. Yudanin, N. Restifo // Nature Reviews Immunology. - 2014. - Vol. 14. - №. 1. - P. 24-35.

55) Feuchtinger, T. Adoptive transfer of pp65-specific T cells for the treatment of chemorefractory cytomegalovirus disease or reactivation after haploidentical and matched unrelated stem cell transplantation. / T Feuchtinger, K Opherk, W Bethge et al. //Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 2010. - Vol. 116. - №. 20. - P. 4360-4367.

56) Feuchtinger, T. Isolation and expansion of human adenovirus specific CD4+ and CD8+ T-cells according to IFNgamma secretion for adjuvant immunotherapy. / T Feuchtinger, P Lang, K Hamprecht et al. //Experimental hematology. - 2004. - Vol. 32. - №. 3. - P. 282-289.

57) Feuchtinger, T. Safe adoptive transfer of virus-specific T-cell immunity for the treatment of systemic adenovirus infection after allogeneic stem cell transplantation. / T Feuchtinger, S Matthes-Martin, C Richard, et al. //British journal of haematology. - 2006. - Vol. 134. - №. 1. - P. 64-76.

58) Flowers, M. Comparative analysis of risk factors for acute graft-versus-host disease and for chronic graft-versus-host disease according to National Institutes of Health consensus criteria. / M Flowers, Y Inamoto, P Carpenter //Blood. - 2011. - Vol. 117. - №. 11. - P. 3214-3219.

59) Foster, A. Human CD62L- memory T cells are less responsive to alloantigen stimulation than CD62L+ naive T cells: potential for adoptive immunotherapy and allodepletion. / A Foster, M Marangolo, M Sartor et al. //Blood. - 2004. -Vol. 104. - №. 8. - P. 2403-2409.

60) Frentsch, M. Direct access to CD4+ T cells specific for defined antigens according to CD154 expression. / M Frentsch, O Arbach, D Kirchhoff, // Nature medicine. - 2005. - Vol. 11. - №. 10. - P. 1118-1124.

61) Gale, RP. Risk factors for acute graft-versus-host disease. / RP Gale, MM Bortin, DW Bekkum et al. //British journal of haematology. - 1987. - Vol. 67. - №. 4. - P. 397-406.

62) Gasior Kabat M. Clinical outcome, safety and rapid immunologic reconstitution in CD45RA-depleted haploidentical transplantation in paediatric acute leukemia treatment. / M Gasior Kabat, R De Paz, I Badell et al. // Bone Marrow Transplant - 2017-Vol.52- S353.

63) Gerdemann U. Generation of multivirus- specific T cells to prevent/treat viral infections after allogeneic hematopoietic stem cell transplant. / U Gerdemann, JF Vera, CM Rooney et al. //Journal of visualized experiments: JoVE. - 2011.

- №. 51.

64) Ghimire, S. Pathophysiology of GvHD and Other HSCT-Related Major Complications. / S Ghimire, D Weber, E Mavin, // Frontiers in immunology.

- 2017. - Vol. 8. - P. 79.

65) Giardino, S. Haploidentical stem cell transplantation with post-transplant cyclophosphamide or in vivo aß+ T and CD19 + B cells depletion. A Single Center Pediatric Experience. / Giardino S, Caroleo A, Caviglia I et al. // Annual Meeting of the European Society for Blood and Marrow Transplantation. - 2017. - Abstract B149.

66) Gober, H. Human T cell receptor gammadelta cells recognize endogenous mevalonate metabolites in tumor cells. / H Gober, M Kistowska, L Angman et al. // Journal of Experimental Medicine. - 2003. - Vol. 197. - №. 2. - P. 163168.

67) Hakki, M. Immune reconstitution to cytomegalovirus after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: impact of host factors, drug therapy, and subclinical reactivation. / M Hakki, SR Riddell, J Storek et al. // Blood. -2003. - Vol. 102. - №. 8. - P. 3060-3067.

68) Hamann, D. Phenotypic and functional separation of memory and effector human CD8+ T cells. / D. Hamann, P. Baars, M. Rep, B. Hooibrink, S. Kerkhof-Garde, M. Klein, et al. //The Journal of experimental medicine. -1997. - Vol. 186. - №. 9. - P. 1407-1418.

69) Handgretinger, R. New approaches to graft engineering for haploidentical bone marrow transplantation. / R Handgretinger // Seminars in oncology. -WB Saunders, 2012. - Vol. 39. - №. 6. - P. 664-673.

70) Hill, L. New and emerging therapies for acute and chronic graft versus host disease. / L Hill, A Alousi, P Kebriaei et al. //Therapeutic advances in hematology. - 2018. - Vol. 9. - №. 1. - P. 21-46.

71) Ho, V. The history and future of T-cell depletion as graft-versus-host disease prophylaxis for allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. / V Ho, R Soiffer // Blood. - 2001. - Vol. 98. - №. 12. - P. 3192-3204.

72) Huang, X. Haploidentical hematopoietic stem cell transplantation without in vitro T cell depletion for treatment of hematologic malignancies in children. / X Huang, D Liu, X Zhang et al. // Bone marrow transplantation. - 2006. -Vol. 38. - №. 4. - P. 291-297.

73) Jacoby, E. Comparison of two cytoreductive regimens for aP-Tcell-depleted haploidentical HSCT in pediatric malignancies: Improved engraftment and outcome with TBI-based regimen / E Jacoby, N Varda-Bloom, G Goldstein et al. // Pediatric blood & cancer. - 2018. - Vol. 65. - №. 2. - P. e26839.

74) Kaeuferle, T. Strategies of adoptive T -cell transfer to treat refractory viral infections post allogeneic stem cell transplantation. / T Kaeuferle, R Krauss., F Blaeschke et al. //Journal of hematology & oncology. - 2019. - Vol. 12. -№. 1. - P. 1-10.

75) Kallay, K. Early experience with CliniMACS prodigy CCS (IFN-gamma) system in selection of virus- specific T cells from third-party donors for pediatric patients with severe viral infections after hematopoietic stem cell transplantation. / K Kallay, C Kassa, M Reti et al. //Journal of Immunotherapy. - 2018. - Vol. 41. - №. 3. - P. 158-163.

76) Kato S. Allogeneic hematopoietic transplantation of CD34+ selected cells from an HLA haplo-identical related donor. A long-term follow-up of 135 patients and a comparison of stem cell source between the bone marrow and the peripheral blood. / S Kato, H Yabe, M Yasui, et al //Bone marrow transplantation. - 2000. - Vol. 26. - №. 12. - P. 1281-1290

77) Kaynar, L. TcRaP-depleted haploidentical transplantation results in adult acute leukemia patients. / L Kaynar, K Demir, E Turak, et al //Hematology. -2017. - Vol. 22. - №. 3. - P. 136-144.

78) Kolb, H. Donor leukocyte transfusions for treatment of recurrent chronic myelogenous leukemia in marrow transplant patients. / H Kolb, E Papadopoulos, A Leen //Blood. - 1990. - Vol. 76. - P. 2462.

79) Kroemeke, A. Everyday life following hematopoietic stem cell transplantation: decline in physical symptoms within the first month and change-related predictors. / A Kroemeke., M Sobczyk-Kruszelnicka, Z Kwissa-Gajewska // Quality of Life Research. - 2018. - Vol. 27. - №. 1. - P. 125-135.

80) Laberko A. Risk factors for and the clinical impact of cytomegalovirus and Epstein-Barr virus infections in pediatric recipients of TCR-a/p- and CD19-depleted grafts. / A Laberko, A Bogoyavlenskaya, L Shelikhova et al. //Biology of Blood and Marrow Transplantation. - 2017. - Vol. 23. - №. 3. -P. 483-490.

81) Lang, P. Improved immune recovery after transplantation of TCRap/CD19-depleted allografts from haploidentical donors in pediatric patients. / P Lang, T Feuchtinger, H Teltschik et al.// Bone Marrow Transplant. - 2015. - Vol. 50 Suppl 2. S6-S10.

82) Lang, P. TCR-alpha/beta and CD19 depleted haploidentical stem cell transplantation following reduced intensity conditioning in children: first results of a prospective multicenter phase I/II clinical trial. / P Lang, P Schlegel, R Meisel, et al. // Blood. - 2017. - Vol. 130. - №. Supplement 1. -P. 214-214.

83) Leen, A. Challenges of T cell therapies for virusassociated diseases after hematopoietic stem cell transplantation. A Leen, T Tripic, C Rooney. // Expert opinion on biological therapy. - 2010. - Vol. 10. - №. 3. - P. 337-351.

84) Leen, A. Monoculture-derived T lymphocytes specific for multiple viruses expand and produce clinically relevant effects in immunocompromised individuals. / A Leen, G Myers, U Sili et al. // Nature medicine. - 2006. -Vol. 12. - №. 10. - P. 1160-1166.

85) Leslie, D. CD1-mediated gamma/delta T cell maturation of dendritic cells. / D. Leslie, M. Vincent, F. Spada, et al. //The Journal of experimental medicine. - 2002. - Vol. 196. - №. 12. - P. 1575-1584.

86) Li, N. Memory T cells from minor histocompatibility antigen-vaccinated and virus-immune donors improve GVL and immune reconstitution. / N Li, C Matte-Martone, H Zheng et al. // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 2011. - Vol. 118. - №. 22. - P. 5965-5976.

87) Locatelli, F. Outcome of children with acute leukemia given HLA-haploidentical HSCT after aß T-cell and B-cell depletion. / F Locatelli, P Merli, D Pagliara et al. // Blood. - 2017. - Vol. 130. - №. 5. - P. 677-685.

88) Locatelli, F. Outcome of children with high-risk acute myeloid leukemia given autologous or allogeneic hematopoietic cell transplantation in the aieop AML-2002/01 study. / F Locatelli, R Masetti, R Rondelli et al. // Bone marrow transplantation. - 2015. - Vol. 50. - №. 2. - P. 181-188.

89) Luznik, L. HLA-Haploidentical Bone Marrow Transplantation for Hematologic Malignancies Using Nonmyeloablative Conditioning and HighDose, Posttransplantation Cyclophosphamide / L Luznik, P O'Donnell, H. Symons, et al. // Biol Blood Marrow Transplant. - 2008. - Vol. 14. - P. 641650.

90) MacMillan, M. Pediatric acute GVHD: clinical phenotype and response to upfront steroids. / M MacMillan, S Holtan, A Rashidi, et al. // Bone marrow transplantation. - 2020. - Vol. 55. - №. 1. - P. 165-171.

91) Mainardi, C. CD34+ selected stem cell boosts can improve poor graft function after paediatric allogeneic stem cell transplantation / C Mainardi, M Ebinger, S Enkel, et al. // British journal of haematology. - 2018. - Vol. 180. - №. 1. - P. 90-99.

92) Marmont, A. T-cell depletion of HLA-identical transplants in leukemia / A Marmont, M Horowitz, R Gale, et al. //Blood- 1991- Vol. 78: P. 2120-2130

93) Marty F. Letermovir Prophylaxis for Cytomegalovirus in Hematopoietic- Cell Transplantation / F Marty, P Ljungman, R Chemaly // New England Journal of Medicine. - 2017. - Vol. 377. - №. 25. - P. 2433-2444.

94) Maschan, M. Low-dose donor memory T-cell infusion after TCR alpha/beta depleted unrelated and haploidentical transplantation: results of a pilot trial. / M Maschan, S Blagov, L Shelikhova et al. // Bone marrow transplantation. -2018. - Vol. 53. - №. 3. - P. 264-273

95) Maschan, M. TCR-alpha/beta and CD19 depletion and treosulfan-based conditioning regimen in unrelated and haploidentical transplantation in children with acute myeloid leukemia. / M Maschan, L Shelikhova, M Ilushina et al. // Bone marrow transplantation. - 2016. - Vol. 51. - №. 5. - P. 668-674.

96) Masopust, D. Preferential localization of effector memory cells in nonlymphoid tissue. / D Masopust, V Vezys, A Marzo et al. // Science. -2001. - Vol. 291. - №. 5512. - P. 2413-2417.

97) Merli, P. Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Pediatric Acute Lymphoblastic Leukemia. / P Merli, M Algeri, F Del Bufalo, // Current hematologic malignancy reports. - 2019. - Vol. 14. - №. 2. - P. 94-105.

98) Minculescu, L. The role of gamma delta T cells in haematopoietic stem cell transplantation. / L Minculescu, H Sengel0v // Scandinavian journal of immunology. - 2015. - Vol. 81. - №. 6. - P. 459-468.

99) Mochizuki, K. Feasibility of tacrolimus, methotrexate, and prednisolone as a graft-versus-host disease prophylaxis in non-T-cell depleted haploidentical hematopoietic stem cell transplantation for children. / K Mochizuki, A

Kikuta, M Hosoya et al. // Clinical transplantation. - 2011. - Vol. 25. - №. 6.

- P. 892-897.

100) Mozo, Y. Safety of dose escalating haploidentical memory T cell donor lymphocyte infusions after 45RA-depleted haplo-stem cell transplantation / Y Mozo, D Bueno, T Gooley et al. // Bone Marrow Transplant. - 2017- Vol 52.

- S507.

101) Muller, N. Generation of alloreactivity-reduced donor lymphocyte products retaining memory function by fully automatic depletion of CD45RA-positive cells. / N Muller, K Landwehr, K Langeveld et al. //Cytotherapy. - 2018. -Vol. 20. - №. 4. - P. 532-542.

102) Nash, R. Acute graft-versus-host disease: analysis of risk factors after allogeneic marrow transplantation and prophylaxis with cyclosporine and methotrexate. / R Nash, M Pepe, R Storb, // Blood. - 1992. - Vol. 80. - №. 7.

- P. 1838-1845.

103) Nassereddine, S. Acute Graft Versus Host Disease: A Comprehensive Review. / S Nassereddine, H Rafei, E Elbahesh, I Tabbara //Anticancer research. - 2017. - Vol. 37. - №. 4. - P. 1547-1555.

104) Papadopoulos, E. Infusions of donor leukocytes to treat Epstein-Barr virus-associated lymphoproliferative disorders after allogeneic bone marrow transplantation. / E Papadopoulos, M Ladanyi, D Emanuel et al. // New England Journal of Medicine. - 1994. - Vol. 330. - №. 17. - P. 1185-1191

105) Pavletic, S. Chronic graft versus host disease: implications of the National Institutes of Health Consensus Development Project on Criteria for Clinical Trials / S. Pavletic, S. Lee, G. Socie, et al. //Bone marrow transplantation. -2006. - Vol. 38. - №. 10. - P. 645-651.

106) Peggs, K. Adoptive cellular therapy for early cytomegalovirus infection after allogeneic stem-cell transplantation with virus-specific T-cell lines. / K Peggs, S Verfuerth, A Pizzey et al. // The Lancet. - 2003. - Vol. 362. - №. 9393. - P. 1375-1377.

107) Przepiorka, D. Consensus Conference on Acute GVHD Grading. / D Przepiorka, D Weisdorf, P Martin et al. //Bone marrow transplantation. -1995. - Vol. 15. - №. 6. - P. 825-828.

108) Qi, Q. Diversity and clonal selection in the human T-cell repertoire. / Q Qi, Y Liu, Y Cheng, et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences. -2014. - Vol. 111. - №. 36. - P. 13139-13144.

109) Ranieri, E. CTL ELISPOT assay. / E Ranieri, I Popescu, M Gigante // Cytotoxic T-Cells. - Humana Press, New York, NY, 2014. - P. 75-86.

110) Rauser, G. Rapid generation of combined CMV-specific CD4+ and CD8+ T-cell lines for adoptive transfer into recipients of allogeneic stem cell transplants. / G Rauser, H Einsele, C Sinzger, et al. //Blood. - 2004. - Vol. 103. - №. 9. - P. 3565-3572.

111) Reinhardt, R. Visualizing the generation of memory CD4 T cells in the whole body. R Reinhardt, A Khoruts,., R Merica et al. //Nature. - 2001. - Vol. 410. - №. 6824. - P. 101-105.

112) Reisner, Y. Transplantation for severe combined immunodeficiency with HLA-A,B,D,DR incompatible parental marrow cells fractionated by soybean agglutinin and sheep red blood cells. / Y Reisner, N Kapoor, D Kirkpatrick // Blood. - 1983. -Vol. 61(2). - P. 341-348.

113) Riddell, S. Restoration of viral immunity in immunodeficient humans by the adoptive transfer of T cell clones. / S Riddell, K Watanabe, J Goodrich. // Science. - 1992. - Vol. 257. - №. 5067. - P. 238-241

114) Riddell, S. The use of anti-CD3 and anti-CD28 monoclonal antibodies to clone and expand human antigen-specific T cells. / S Riddell, P Greenberg // Journal of immunological methods. - 1990. - Vol. 128. - №. 2. - P. 189-201.

115) Riezzo, I. Donor Selection for Allogenic Hemopoietic Stem Cell Transplantation: Clinical and Ethical Considerations. / I Riezzo, N Pascale, R La Russa, //Stem cells international. - 2017. - Vol. 2017.

116) Rooney, C. Use of gene- modified virus-specific T lymphocytes to control Epstein-Barr-virus-related lymphoproliferation. / C Rooney, C Smith, C Ng, //The Lancet. - 1995. - Vol. 345. - №. 8941. - P. 9-13.

117) Sahasrabudhe K. TCR aP+/CD19+ cell depletion in haploidentical hematopoietic allogeneic stem cell transplantation: a review of current data, / K Sahasrabudhe, M Otto, P Hematti, V Kenkre //Leukemia & lymphoma. -2019. - Vol. 60. - №. 3. - P. 598-609.

118) Sallusto, F. Central memory and effector memory T cell subsets: function, generation, and maintenance. / F Sallusto J Geginat, A Lanzavecchia //Annu. Rev. Immunol. - 2004. - Vol. 22. - P. 745-763.

119) Sanders, M. Human memory T lymphocytes express increased levels of three cell adhesion molecules (LFA-3, CD2, and LFA-1) and three other molecules (UCHL1, CDw29, and Pgp-1) and have enhanced IFNy production. / M Sanders, M Makgoba, S Sharrow et al. // The Journal of Immunology. - 1988. - Vol. 140. - №. 5. - P. 1401-1407.

120) Sellar, R. CMV promotes recipient T-cell immunity following reduced-intensity T-cell-depleted HSCT, significantly modulating chimerism status. / R Sellar, F Vargas, J Henry et al. // Blood. - 2015. - Vol. 125. - №. 4. - P. 731-739.

121) Shelikhova L. Tcr ab/CD19+-depletion in hematopoietic stem cells transplantation from matched unrelated and haploidentical donors following treosulfan or TBI-based conditioning in pediatric acute lymphoblastic leukemia patients. / L Shelikhova, Z Shekhovtsova, D Balashov et al.// Blood. - 2016. - Vol. 128 (22) - S4672.

122) Shelikhova, L. Serotherapy-Free Regimen Improves Non-Relapse Mortality and Immune Recovery Among the Recipients of ap TCell-Depleted Haploidentical Grafts: Retrospective Study in Childhood Leukemia. / L Shelikhova, S Glushkova, R Nikolaev, et al. // Transplantation and Cellular Therapy. - 2021.

123) Shlomchik W. Graft-versus-host disease. / W Shlomchik // Nature Reviews Immunology. - 2007. - Vol. 7. - №. 5. - P. 340-352.

124) Shook D. Haploidentical stem cell transplantation augmented by CD45RA negative lymphocytes provides rapid engraftment and excellent tolerability. / D Shook, B Triplett, P Eldridge //Pediatric blood & cancer. - 2015. - Vol. 62.

- №. 4. - P. 666-673.

125) Shugay M. VDJtools: Unifying Post-analysis of T Cell Receptor Repertoires. / M Shugay, D Bagaev, M Turchaninova et al. // PLoS computational biology.

- 2015. - Vol. 11. - №. 11. - P. e1004503.

126) Shugay, M. Towards error-free profiling of immune repertoires. / M Shugay, O Britanova, E Merzlyak, et al // Nature methods. - 2014. - Vol. 11. - №. 6.

- P. 653-655.

127) Smith, S. Functional subsets of human helper- inducer cells defined by a new monoclonal antibody, UCHL1. / S Smith, M Brown, D Rowe et al.// Immunology. - 1986. - Vol. 58. - №. 1. - P. 63.

128) Sullivan K. Chronic graft-versus-host disease and other late complications of bone marrow transplantation. / K Sullivan, E Agura, C Anasetti, et al //Seminars in hematology. - 1991. - Vol. 28. - №. 3. - P. 250-259.

129) Symons H. Haploidentical BMT using fully myeloablative conditioning, T cell replete bone marrow grafts, and post-transplant cyclophosphamide (PT/Cy) has limited toxicity and promising efficacy in the first prospective multicenter trial for pediatric, adolescent, and young adult patients with high risk acute leukemias and myelodysplastic syndrome. / H Symons, A Cluster, E Caywood et al. // Biology of Blood and Marrow Transplantation. - 2015. -Vol. 21. - №. 2. - P. S29.

130) Tamari R. CD34-Selected Hematopoietic Stem Cell Transplants Conditioned with Myeloablative Regimens and Antithymocyte Globulin for Advanced Myelodysplastic Syndrome: Limited Graft-versus-Host Disease without Increased Relapse. / R Tamari, S Chung, E Papadopoulos et al. // Biology of Blood and Marrow Transplantation. - 2015. - Vol. 21. - №. 12. - P. 21062114.

131) Tan, B. Cytomegalovirus Treatment / B Tan // Current treatment options in infectious diseases. - 2014. - Vol. 6. - №. 3. - P. 256-270.

132) Teschner D. Depletion of naive T cells using clinical grade magnetic CD45RA beads: a new approach for GVHD prophylaxis. / D Teschner, E Distler, D Wehler et al. // Bone marrow transplantation. - 2014. - Vol. 49. -№. 1. - P. 138-144.

133) Touzot F. CD45RA depletion in HLA-mismatched allogeneic hematopoietic stem cell transplantation for primary combined immunodeficiency: a preliminary study. / F Touzot, B Neven, L Dal-Cortivo et al. // Journal of Allergy and Clinical Immunology. - 2015. - Vol. 135. - №. 5. - P. 13031309.

134) Turkiewicz D. CD45RA depleted donor lymphocyte infusions for antiviral boost following ex-vivo T-cell depleted haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. / D Turkiewicz, J Dykes, C Pronk, J Toporski //Bone Marrow Transplantation. - Nature Publishing Group, 2015. - Vol. 50. - P. 248-249.

135) Urbano-Ispizua A. Rapid engraftment without significant graft-versus-host disease after allogeneic transplantation of CD34+ selected cells from peripheral blood. / A Urbano-Ispizua, C Rozman, C Martinez et al. // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 1997. - Vol. 89. - №. 11. - P. 3967-3973.

136) Wayne A. Hematopoietic stem cell transplantation for leukemia. / AWayne, K Baird, R Egeler // Pediatric clinics of North America. - 2010. - Vol. 57. - №. 1. - P. 1.

137) Wolfl M. Activation- induced expression of CD137 permits detection, isolation, and expansion of the full repertoire of CD8+ T cells responding to antigen without requiring knowledge of epitope specificities. / M Wolfl, J Kuball, W Ho et al. // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 2007. - T. 110. - №. 1. - C. 201-210.

138) World Marrow Donor Association [электронный ресурс]// Режим доступа: https://www.wmda.info/.

139) Wu J. Risk factors and outcomes of cytomegalovirus viremia in pediatric hematopoietic stem cell transplantation patients. / J Wu, H Ma, C Lu et al. // Journal of microbiology, immunology and infection. - 2017. - Vol. 50. - №. 3. - P. 307-313.

140) Yoon H. Cytomegalovirus infection in children who underwent hematopoietic stem cell transplantation at a single center: a retrospective study of the risk factors. / H Yoon, J Lee, E Choi et al. // Pediatric transplantation. - 2009. -Vol. 13. - №. 7. - P. 898-905.

141) Zecca M. Chronic graft-versus-host disease in children: incidence, risk factors, and impact on outcome. / M Zecca, A Prete, R Rondelli, et al. // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 2002. - Vol. 100. - №. 4. - P. 1192-1200.

142) Zheng H. Central memory CD8+ T cells induce graft-versus-host disease and mediate graft-versus-leukemia. / H Zheng, C Matte-Martone, D Jain et al. // The Journal of Immunology. - 2009. - Vol. 182. - №. 10. - P. 5938-5948.

143) Zvyagin I. Tracking T-cell immune reconstitution after TCRap/CD19-depleted hematopoietic cells transplantation in children. / I Zvyagin, I Mamedov, O Tatarinova, et al // Leukemia. - 2017. - Vol. 31. - №. 5. - P. 1145-1153.