Иммунотропные препараты из кожи. Разработка методов получения, физико-химическая и иммунобиологическая характеристика и перспектива клинического применения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, доктор биологических наук Белова, Ольга Владимировна

• Белова, Ольга Владимировна
• доктор биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации доктор биологических наук Белова, Ольга Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.И

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ФУНКЦИЯ КОЖИ.

1.1. Строение кожи.

1.2. Вещества, влияющие на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов, апоптоз кератиноцитов.

1.3. Иммунологическая функция кожи.

1.3.1. Иммунологически активные клетки кожи.

1.3.2. Цитокины и кожа.

1.3.2.1. Интерлейкины.

1.3.2.2. Интерфероны.

1.3.2.3. Хемокины.

1.3.2.4. Колониестимулирующие факторы.

1.3.2.5. Факторы роста.

1.3.2.6. Факторы некроза опухолей.

1.4. Нейроиммунокожная система.

Глава 2. ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОЙ РНК НА ИММУННЫЙ ОТВЕТ.

Глава 3. ПСОРИАЗ. НАРУШЕНИЯ ПРИ ПСОРИАЗЕ. МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ ПСОРИАЗА.

3.1. Этиология и патогенез псориаза.

3.2. Патологическая пролиферация и дифференцировка кератиноцитов.

3.3. Патогенез псориаза на клеточном уровне.

3.4. Трансмембранные сигнальные преобразовательные системы.

3.5. Белки острой фазы воспаления и псориаз

3.6. Перекисное окисление липидов и состояние мембран при псориазе.

3.7. Системные нарушения при псориазе.

3.8. Нервная система и псориаз.

3.9. Цитокины при псориазе.

3.10. Взаимоотношение между иммунной системой и кератиноцитами при псориазе.

3.11. Методы лечения псориаза.

Часть 2. ИММУНОТРОПНЫЕ ПРЕПАРАТЫ ИЗ КОЖИ. РАЗРАБОТКА

ПОЛУЧЕНИЯ, ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ПЕРСПЕКТИВА КЛИНИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ

Собственные исследования)

Глава 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.1.Материалы исследования.

4.2.Физико-химические методы.

4.2.1. Определение концентрации белка по методу Лоури.

4.2.2. Определение концентрации белка биуретовым методом.

4.2.3. Определения концентрации РНК.

4.2.4. Определение концентрации углеводов.

4.2.5. Определение концентрации общих липидов.

4.2.6. Гель-хроматография.

4.2.7. Гель-хроматография высокого давления (ВЭЖХ).

4.2.8. Высокоэффективная жидкостная хроматография в обращенной фазе.

4.2.9. Метод изоэлектрофокусирования в тонком слое агарозы.

4.2.10. Метод вертикального ступенчатого электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия

4.2.11. Метод вертикального электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии 7М мочевины.

4.2.12. Метод масс-спектрометрии.

4.3. Иммунобиологические методы.

4.3.1. Определение количества антителообразующих клеток селезенки мышей на пике первичного иммунного ответа.

4.3.2. Метод восстановления чувствительности Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей к ингибирующему действию азатиоприна ин витро.

4.3.3. Метод восстановления чувствительности Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей к ингибирующему действию азатиоприна ин виво.

4.3.4. Метод определения уровня сывороточной тимической активности.

4.3.5. Метод получения кератиноцитов человека.

4.3.6. Пролиферация кератиноцитов человека.

4.3.7. Дифференцировка кератиноцитов человека.

4.3.8. Культура эпидермоидных клеток карциномы человека А431.

4.3.9. Культура эмбриональных фибробластов человека.1^

4.3.10. Определение содержания цитокинов.

4.3.10.1. Трансформирующий фактор роста-бета1 и бета2.

4.3.10.2. Интерлейкин-4.

4.3.10.3. Интерлейкин-1 бета

4.3.10.4. Фактор некроза опухолей-альфа.

4.3.10.5. Эпидермальный фактор роста.

4.4. Фармакологические методы.

4.4.1. Кожно-резорбтивное действие.

4.4.2. Острая токсичность.

4.4.3. Хроническая токсичность.

4.4.4. Анафилактический шок.

4.4.5. Активная кожная анафилаксия.

4.5. Статистическая обработка результатов.

Глава 5. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

5.1.Разработка ацетонового метода получения иммунотропных препаратов.

5.1.1. Процентное содержание белка, РНК, углеводов и общих липидов в иммунотропных препаратах.

5.1.2. Влияние препаратов на количества антителообразующих клеток селезенки мышей на пике первичного иммунного ответа.

5.1.3. Влияние препаратов на восстановление чувствительности Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей к ингибирующему действию азатиоприна ин витро.

5.1.4. Гель-хроматография высокого давления иммунотропных препаратов.

5.1.5. Изоэлектрофокусирование иммунотропных препаратов.

5.1.6. Электрофорез иммунотропных препаратов в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия.

5.1.7. Электрофорез иммунотропных препаратов в полиакриламидном геле в 7М мочевине.

5.1.8. Влияние иммунотропных препаратов на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека в первичной культуре.Л

5.1.9. Определение содержания в иммунотропных препаратах некоторых цитокинов.

5.1.10. Фармакологические свойства К-активина.

5.1.11. Лечение больных псориазом К-активином путем наружного применения.

5.1.12. Обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография К-активина.

5.1.13. Масс-спектрометрия К-активина.

5.1.14. Влияние К-активина на восстановление чувствительности Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей к ингибирующему действию азатиоприна ин виво.

5.1.15. Влияние К-активина на уровень сывороточной тимической активности.

5.1.16. Влияние К-активина на пролиферацию эпидермоидных клеток карциномы человека А431.

5.1.17. Влияние К-активина на пролиферацию эмбриональных фибробластов человека.

5.1.18. Определение содержания в К-активине некоторых цитокинов.

5.1.19. Физико-химические и иммунобиологические свойства К-активина.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунотропные препараты из кожи. Разработка методов получения, физико-химическая и иммунобиологическая характеристика и перспектива клинического применения»

Достижения иммунологии последних десятилетий позволили отнести кожу к органу иммунной системы. В коже обнаружены клетки и медиаторы как естественного, так и адаптивного иммунитета. Т- и В-лимфоциты кожи осуществляющие свои функции путем постоянной рециркуляции. Т-лимфоциты составляют 90% всех лимфоцитов кожи и располагаются преимущественно в верхних слоях дермы и эпидермисе (120, 30, 92). Незначительная часть В-лимфоцитов встречается в средних и глубоких слоях дермы. Было обнаружено, что большинство Т-клеток, инфильтрующих кожу, экспрессирует кожный лимфоцит-ассоциированный антиген (CLA). К настоящему времени появились доказательства того, что CLA является хоминговым рецептором, вовлеченным в селективную миграцию Т клеток в кожу (273). Т-лимфоциты кожи несут на своей поверхности как аР~, так и уб-Т-клеточный рецептор (103). Эпидермис здорового человека содержит дендритные эпидермальные Т-клетки, выявленные ранее у мышей. Они относятся к уб-Т-клеткам и продуцируют ряд цитокинов (ИЛ-1 альфа, ИЛ-2, ИЛ-3, ИЛ-7, ИЛ-13, ФНО и др) (103).

К дендритным клеткам кожи относятся клетки Лангерганса, клетки Грэнстейна, дермальные дендроциты, плазмацитоидные эпидермальные клетки, воспалительные дендритные эпидермальные клетки (30, 120, 380, 413). За последние годы пересмотрена роль дендритных клеток в организме. В настоящее время их относят к наиболее мощным антигенпредставляющим клеткам. Моноциты крови мигрируют в кожу, где превращаются в макрофаги (гистиоциты). Это факторы естественного (врожденного) иммунитета. Они реализуют первую линию иммунной защиты, но они также принимают участие и в адаптивном иммунитете. Гистиоциты осуществляют фагоцитоз и представление антигенов. Большую роль в реализации иммунного ответа играют эндотелиальные клетки сосудов. Они имеют на своей поверхности молекулы адгезии, которые взаимодействуют с соответствующими молекулами на поверхности лимфоцитов и гранулоцитов и обеспечивают миграцию последних из кровяного русла в ткани, в том числе и в кожу (30, 120). Нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, тучные клетки, естественные киллеры, выявляемые в коже, вносят свой вклад как факторы естественного иммунитета.

Выявлена иммунологическая функция кератиноцитов. Они индуцируют экспрессию терминальной дезоксинуклеотидилтрансферразы и антигена Thy-1 на предшественниках Т-лимфоцитов (117). Кератиноциты эпидермиса имеют много общего с эпителиальными клетками тимуса. И те и другие относятся к эпителиальным тканям, для которых характерно наличие кератина. Эпителиальные клетки тимуса, секретирующие тимические гормоны и базальные кератиноциты имеют общие поверхностные маркеры: ТЕ-4, А2В5 и р19 (117). Было показано, что антитела к тимопоэтину - гормону тимуса, связываются с веществом, присутствующим в цитоплазме кератиноцитов базального слоя нормального эпидермиса человека (172, 236). Возникло предположение, что кератиноциты секретируют тимические гормоны. Однако это предположение оправдалось лишь для эмбриональной кожи, в которой был обнаружен тимопоэтин, аналогичный тимопоэтину , выделенному из тимуса взрослых особей (137). В коже взрослых особей тимопоэтин не был обнаружен. В то же время, кератиноциты секретируют факторы, влияющие на рост и дифференцировку Т-лимфоцитов. Это фактор дифференцировки лимфоцитов эпидермального клеточного происхождения (ELDIF) (300, 301). Он был выделен из супернатанта культивируемых кератиноцитов человека, лишенных клеток Лангерганса. ELDIF ингибировал пролиферацию лимфоцитов селезенки, влиял на дифференцировку Т-лимфоцитов и обладал регуляторной активностью (300, 301).

Помимо клеток большую роль в функционировании иммунной системы играют такие медиаторы иммунного ответа, как цитокины: интерлейкины, интерфероны, факторы некроза опухоли, колониестимулирующие факторы, факторы роста и др. Подавляющее большинство цитокипов обнаружено в коже.

Основными продуцентами цитокинов являются клетки иммунной системы, однако, помимо них, цитокины секретируются также стромальными клетками. Активированные кератиноциты выделяют широкий диапазон цитокинов: интерлейкины-1, 3, 6, 8, 10, 15, 18, фактор некроза опухоли-альфа, трансформирующие факторы роста альфа и бета и др. Важна роль противомикробных пептидов в коже (38, 39). Все сказанное выше говорит о том, что кожа является богатым источником для получения иммунологически активных веществ, хотя используется для этого очень редко. Имеются лишь отдельные исследования по выделению тимопоэтина из эмбриональной кожи крупного рогатого скота.

Существует взаимосвязь между процессами, протекающими в коже и иммунной системе. Многие заболевания кожи протекают на фоне иммунодефицитного состояния. Так при псориазе выявляются нарушения в естественном (врожденном) и адаптивном иммунитете. Кроме того, основным проявлением псориаза является гиперпролиферация и незавершенность дифференцировки кератиноцитов. Доказанным фактом при псориазе является сдвиг регуляции Т-лимфоцитов в сторону Т-хелперов типа 1 и цитотоксических Т-лимфоцитов типа 1 (138,275).

Разработка новых иммунотропных препаратов, регулирующих иммунологические процессы и процессы, протекающие в коже, является актуальной проблемой современной иммунологии.

Цель работы. Разработать методы получения иммунотропных препаратов из кожи, изучить физико-химические и иммунобиологические свойства препаратов и оценить возможность применения одного из них для лечения псориаза.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Разработать методы получения иммунотропных препаратов из кожи свиньи.

2. Определить содержание белка, углеводов, РНК и общих липидов в полученных препаратах.

3. Изучить некоторые иммунологические свойства полученных препаратов (влияние на количество антителообразующих клеток селезенки мышей на пике первичного иммунного ответа и на созревание Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей).

4. Исследовать полученные препараты методами изоэлектрофокусирования в агарозе, электрофореза в полиакриламидном геле, а отдельные препараты методами высокоэффективной жидкостной хроматографии.

5. Изучить влияние полученных препаратов на процессы, протекающие в коже (на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека в первичной культуре и на пролиферацию культивируемых эпидермоидных клеток карциномы человека А431).

6. Изучить фармакологические свойства препарата, ингибирующего пролиферацию и стимулирующего дифференцировку кератиноцитов человека (К-активина): кожно-резорбтивное действие, острую и хроническую токсичность, аллергизирующее действие (в реакциях анафилактического шока и активной кожной анафилаксии).

7. Изучить физико-химические и иммунобиологические свойства К-активина (методами обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии, влияние на созревание Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей ин виво, влияние на уровень сывороточной тимической активности, на пролиферацию культивируемых эпидермоидных клеток карциномы человека А431 и эмбриональных фибробластов человека).

8. Изучить содержание в К-активине и некоторых иммунотропных препаратах цитокинов: трансформирующих факторов роста-бета1 и -бета2, интерлейкина-4, интерлейкина-1бета, фактора некроза опухолей-альфа и эпидермального фактора роста.

9. Сравнить физико-химические и иммунологические свойства аналогичных препаратов, полученных ацетоновым методом и методом, включающим этапы высаливания.

10. Сравнить физико-химические и иммунологические свойства аналогичных препаратов, полученных ацетоновым и безацетоновым методами.

Научная новизна работы

1. Разработаны три новых метода получения иммунотропных препаратов из кожи свиньи: ацетоновый, безацетоновый и метод с высаливанием.

2. С использованием новых методов получены иммунотропные препараты из кожи свиньи, влияющие на показатели гуморального и клеточного иммунитета, а также на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека в первичной культуре и пролиферацию культивируемых эпидермоидных клеток карциномы человека А 431.

3. Изучены физико-химические свойства новых иммунотропных препаратов из кожи свиньи: содержание белка, углеводов, РНК и общих липидов; гетерогенность, pi и молекулярные массы белков, белковых субъединиц и РНК. Изучено содержание некоторых цитокинов в отдельных препаратах.

4. Разработан новый препарат для лечения псориаза путем наружного применения - К-активин.

5. Изучены фармакологические свойства К-активина: кожно-резорбтивное действие, острая и хроническая токсичность, аллергизирующее действие (в реакциях анафилактического шока и активной кожной анафилаксии). В настоящее время материалы по К-активину находятся в ФГУ

Научный центр экспертизы средств медицинского применения Росздравнадзора».

6. Изучен механизм действия К-активина: препарат ингибирует пролиферацию и стимулирует дифференцировку кератиноцитов человека. Помимо этого он повышает сывороточную тимическую активность и увеличивает количество зрелых Т-лимфоцитов в селезенке тимэктомированных мышей.

7. Сравнение аналогичных препаратов, но полученных тремя различными методами, показало, что они отличаются как по физико-химическим, так и по иммунологическим свойствам.

Практическая значимость работы и внедрение результатов исследования.

Разработан новый препарат для лечения псориаза путем наружного применения - К-активин. Метод лечения псориаза запатентован. В настоящее время материалы по К-активину находятся в ФГУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения Росздравнадзора».

Разработаны новые иммунотропные препараты из кожи. Методы их получения запатентованы. После проведения доклинических и клинических испытаний они могут быть использованы в качестве иммунокорригирующих препаратов, а также препаратов, стимулирующих или ингибирующих процессы кератинизации, заживления ран в дерматологии и косметологии.

Разработаны новые методы получения иммунотропных препаратов из кожи свиньи, которые могут быть использованы для получения препаратов из других источников. По материалам диссертации получены три патента.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Разработаны три новых метода получения эндогенных иммунотропных препаратов из кожи свиньи: ацетоновый, безацетоновый и метод с высаливанием.

2. Продемонстрирована эффективность иммунотропных препаратов из кожи свиньи, полученных новыми методами, по влиянию на показатели гуморального и клеточного иммунитета, пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека в первичной культуре и пролиферацию культивируемых эпидермоидных клеток карциномы человека А 431.

3. Разработан новый препарат для лечения псориаза путем наружного применения - К-активин.

4. Выявлена тимоподобная активность препарата из кожи (К-активина): восстановление сниженной сывороточной тимической активности у тимэктомированных мышей и стимуляция созревания Т-лимфоцитов.

5. Механизмом действия К-активина, эффективного в клинике при лечении псориаза, является ингибирование пролиферации и стимуляция дифференцировки кератиноцитов, повышение сывороточной тимической активности и стимуляция созревания Т-лимфоцитов.

Приоритетность разработок подтверждена тремя патентами:

1. Способ получения вещества из кожи свиньи, влияющего на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека. Патент № 2038087. Зарегистрирован 27.06.1995. Бюл. изобрет. открыт. 1995, № 18, С. 24.

2. Способ лечения псориаза. Патент № 2084230. Зарегистрирован 20.07.1997. Бюл. изобрет. открыт. 1997, № 20, С. 25.

3. Способ получения иммунотропных веществ из кожи свиньи. Патент № 2203070. Зарегистрирован в Государственном реестре изобретений РФ 27 апреля 2003 г., г. Москва.

Апробация работы.

Основные положения диссертации были представлены на: - 2-м Международном симпозиуме «Реабилитация иммунной системы», Сочи-Дагомыс, 1990; - 1-м Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство», Москва, 1992; - Международном симпозиуме по аллергологии и клинической иммунологии, Алма-Ата, 1992; - 1-м Съезде иммунологов России, Новосибирск, 1992; - 8-th International Symposium on Infections in the Immunocompromised Host, Davos, Switzerland, 1994; - XY International Congress of Allergology and Clinical Immunology, Stockholm, Sweden, 1994; - 1-ом Международном конгрессе по иммунореабилитации, Сочи, 1994; - 3-м Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", Москва, 1996; -Всероссийской конференции "Биология клетки в культуре", Санкт-Петербург, 1996; - 2-м Национальном конгрессе Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов (РААКИ) "Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии", Москва, 1998; - на 2-м конгрессе с международным участием "Паллиативная медицина и реабилитация", Москва, 1998; - V Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", Москва, 1998; - 2-м Съезде иммунологов России, Сочи, 1999; - 4-м симпозиуме "Неинвазивные физико-химические методы диагностики", Москва, 2000; - VIII Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", Москва, 2001; - V Всероссийской конференции "Паллиативная помощь в онкологии", 2001; - 5-м Конгрессе Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов (РААКИ) "Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии", Москва, 2002; - Всероссийской научно-практической конференции «Биотерапия рака», Москва, 2002; - 5-й конгресс с международным участием "Паллиативная медицина и реабилитация в здравоохранении", Египет, 2003; - 1-й Всероссийская конференция по иммунотерапии, Сочи, Дагомыс, 2003; -Международный конгресс «Иммунитет и болезни: от теории к терапии», Москва, 2005; - XI Международный конгресс по реабилитации в медицине и иммунореабилитации, Тенерифе, Испания, 2006.

Награды. Доклад «Ростовые факторы и цитокины кожи» («Growth factors and cytokines from skin»), представленный на 8-м Симпозиуме по инфекциям у иммунокомпромиссного хозяина, который проводился в Давосе (Швейцария) в 1994 году (The Eighth International Symposium on Infections in the Immunocompromised Host, Davos, Switzerland, 1994), получил President Award.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 36 научных работ. Получены три патента на изобретение РФ.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 320 странице, включая 17 таблиц и 44 рисунка, состоит из введения, обзора литературы, глав собственных исследований, заключения и выводов. Библиография содержит 429 источников литературы отечественных и зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Белова, Ольга Владимировна

Выводы

1. Разработаны три новых метода получения иммунотропных препаратов из кожи свиньи: ацетоновый, безацетоновый и метод с высаливанием. С помощью разработанных методов получены препараты и изучены их физико-химические и иммунобиологические свойства.

2. Содержание белка в препаратах снижается от П1 к ПЗ независимо от разработанного метода. Содержание углеводов, РНК и общих липидов колеблется от 0,5 до 14%.

3. Выявлена гетерогенность полученных препаратов. Наименее гетерогенными оказались П1, выделенные тремя вновь разработанными методами. Они содержат 1-2 мажорных белковых субъединицы и ряд минорных субъединиц, которые формируют 3-4 мажорных белка и ряд минорных белков. Наиболее гетерогенными оказались П2, выделенные ацетоновым и безацетоновым методами, в которых выявляется до 13-15 белков.

4. Из девяти полученных препаратов восемь препаратов в дозах от 1 до 100 мкг на мышь увеличивали количество антителообразующих клеток селезенки мышей на пике первичного иммунного ответа; П2, выделенный безацетоновым методом, в дозе 100 мкг на мышь снижал количество антителообразующих клеток, а П1, выделенный безацетоновым методом, был неактивен. Все три препарата, выделенные методом с высаливанием; П2 и ПЗ, выделенные ацетоновым методом и ПЗ, выделенный безацетоновым методом стимулировали созревание Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей.

5. Препараты, выделенные ацетоновым методом, по-разному влияли на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека ин витро: П1 и ПЗ стимулировали пролиферацию и практически не влияли на дифференцировку кератиноцитов человека, П2 ингибировал пролиферацию и стимулировал дифференцировку кератиноцитов человека. Все три препарата, полученные методом с высаливанием, ингибировали пролиферацию эпидермоидных клеток карциномы человека А431.

6. Разработан новый препарат для лечения псориаза путем наружного применения - К-активин. Изучены физико-химические и биологические свойства К-активина (П2, полученного ацетоновым методом). Продемонстрирована гетерогенность препарата методами изоэлектрофокусорования, электрофореза в ПААГ, ВЭЖХ и масс-спектрометрии. Выявлена тимоподобная активность К-активина: препарат восстанавливал сниженный уровень сывороточной тимической активности тимэктомированных мышей почти до нормы и стимулировал созревание Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей. Кроме того, К-активин ингибировал пролиферацию кератиноцитов человека, эпидермоидных клеток карциномы человека А431 и эмбриональных фибробластов человека в культуре и стимулировал дифференцировку кератиноцитов человека.

7. Изучение биологических свойств К-активина показало, что он не нарушал кожных покровов, не вызывал заметных изменений в состоянии животных, не вызывал нарушений в гистологическом строении внутренних органов и тканей при изучении острой и хронической токсичности, не вызывал изменений биохимических показателей крови и обладал слабым аллергизирующим действием. В настоящее время материалы по К-активину находятся в ФГУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения Росздравнадзора».

8. В К-активине были обнаружены такие цитокины как ТФР-бета1, ИЛ-4, ИЛ-1 бета и ЭФР, но отсутствовали цитокины: ТФР-бета2 и ФНО-альфа. В П1, выделенном ацетоновым методом, обнаружено присутствие ИЛ-4, ФНО-альфа и ЭФР, а в ПЗ, выделенном ацетоновым методом - ИЛ-4 и ЭФР. Присутствие выявленных цитокинов объясняет некоторые иммунобиологические свойства препаратов.

9. Сравнение физико-химических и иммунологических свойств аналогичных препаратов, полученных ацетоновым методом и методом, включающим этапы высаливания, показало, что введение высаливания привело к изменению физико-химических свойств препаратов: увеличилось содержания белка, уменьшилось содержания углеводов и общих липидов; значительно сократилось содержание РНК в П2 и ПЗ. Высаливание привело к изменению молекулярных масс белковых субъединиц и количества белков в аналогичных препаратах, резкому снижению числа мажорных белков в П2 и к исчезновению белков с pi от 5,2 до 8,15. Не было обнаружено РЖ методом ИЭФ ни в одном из препаратов, полученных методом с высаливанием.

10. Введение этапов высаливания в ацетоновый метод привело к усилению иммунологической активности во всех аналогичных препаратах как по влиянию на антителогенез, так и на созревание Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей. Все три препарата, полученные методом с высаливанием, стимулировали созревание Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей в отличии от ацетонового метода, где был активным лишь ПЗ.

11. При сравнении аналогичных препаратов, выделенных ацетоновым и безацетоновым методами, оказалось, что они обладают как общими, так и различными физико-химическими и иммунологическими свойствами. Аналогичные препараты имели одинаковое содержание белка по Лоури и одинаково влияли на созревание Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей. П1 и П2, полученные ацетоновым и безацетоновым методами, имели одинаковое количество мажорных белков с близкими pi. В аналогичных препаратах, полученных ацетоновым и безацетоновым методами выявляются общие белковые субъединицы с близкими молекулярными массами.

12. Аналогичные препараты, выделенные ацетоновым и безацетоновым методами, отличаются по содержанию РЖ, углеводов и общих липидов и по влиянию на количество антителообразующих клеток селезенки мышей СВА на пике первичного ответа. Не было выявлено РНК методом ИЭФ ни в одном из препаратов, полученных безацетоновым методом, хотя в препаратах, полученных ацетоновым методом, были выявлены компоненты РНК. В препаратах, выделенных ацетоновым методом, выявляются белковые субъединицы, отсутствующие в аналогичных препаратах, выделенных безацетоновым методом. Все три препарата, полученные ацетоновым методом, увеличивали количество антителообразующих клеток селезенки мышей СВА на пике первичного ответа, в то время как П2, полученный безацетоновым методом в дозе 100 мкг/мышь - уменьшал.

Практические рекомендации Разработан новый препарат для лечения псориаза путем наружного применения - К-активин. В ближайшее время планируется проведение широких клинических испытаний, после чего он может быть рекомендован для лечения псориаза путем наружного применения. В дальнейшем планируется промышленный выпуск препарата.

Иммунотропные препараты из кожи, полученные новыми методами после проведения доклинических и клинических испытаний могут быть рекомендованы в качестве иммунокорригирующих препаратов, а также препаратов, стимулирующих или ингибирующих процессы кератинизации, заживления ран в дерматологии и косметологии.

Разработанные новые методы получения иммунотропных препаратов могут быть рекомендованы для получения препаратов из других источников.

ГЛАВА 6. ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Научные исследования последних десятилетий позволили отнести кожу к органам иммунной системы. В коже выявлены клетки и медиаторы как естественного, так и адаптивного иммунитета (161, 30, 120). Вместе с тем кожа обладает определенными особенностями в осуществлении иммунологической функции. В коже выявлены такие уникальные дендритные клетки как клетки Лангерганса. Позже родственные им клетки были обнаружены в эпителии пищеварительного и респираторного тракта. Помимо клеток Лангерганса в коже присутствуют и другие дендритные клетки: клетки Гранштейна, дермальные дендритные клетки, лимфоидные дендритные клетки, воспалительные эпидермальные дендритные клетки (30, 120, 413, 380). После поглощения антигена дендритные клетки созревают и мигрируют в регионарные лимфоузлы, где представляют антигены Т-хелперам.

Лимфоциты осуществляют свои функции в организме, в том числе и в коже, путем постоянной рециркуляции. Т-лимфоциты составляют 90% всех лимфоцитов кожи и располагаются преимущественно в верхних слоях дермы и эпидермисе (92, 30, 120). Незначительная часть В-лимфоцитов встречается в средних и глубоких слоях дермы. Было обнаружено, что большинство Т-клеток, инфильтрующих кожу, и субпопуляция циркулирующих Т-клеток памяти/эффекторых клеток экспрессирует кожный лимфоцит-ассоциированный антиген (CLA). К настоящему времени появились доказательства того, что CLA является хоминговым рецептором, вовлеченным в селективную миграцию клеток памяти/эффекторных Т клеток в кожу (273). Т-лимфоциты кожи несут на своей поверхности как ар-, так и у5-Т-клеточный рецептор (103). Соотношение в коже ар-Т-лимфоцитов к у5-Т-лимфоцитам составляет примерно 5:1. Показано, что у5-Т-клетки распознают антиген без предварительного процессирования и участия молекул HLA комплекса, в отличие от ар-Т-клеток. Предполагают, что они создают первую линию защиты от инфекции. Эпидермис здорового человека содержит дендритные эпидермальные Т-клетки (ДЭТК), выявленные ранее у мышей (103). Они относятся к у5-Т-клеткам и продуцируют ряд цитокинов. Предполагают, что ДЭТК взаимодействуют с кератиноцитами и клетками Лангерганса.

К началу 80-х годов прошлого века появились доказательства того, что кератиноциты являются важным элементом иммунной системы. Они индуцируют экспрессию терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы и антигена Thy-1 на предшественниках Т-лимфоцитов, что специфично для кератиноцитарно-лимфоцитарного взаимодействия (117, 120). После активации кератиноциты экспрессируют антигены HLA-DR и могут выполнять функции по представлению антигенов. Активированные кератиноциты экспрессируют молекулы адгезии и выделяют эйкозаноиды и цитокины, которые запускают иммунные реакции в коже (30).

Кератиноциты эпидермиса имеют много общего с эпителиальными клетками тимуса. И те и другие относятся к эпителиальным тканям, для которых характерно наличие десмосом и тонофиламентов, состоящих из кератина. Эпителиальные клетки тимуса, секретирующие тимические гормоны, и базальные кератиноциты имеют общие поверхностные маркеры: ТЕ-4, А2В5 и р 19 (117). Эмбриональные кератиноциты продуцируют тимический гормон тимопоэтин (137). Кератиноциты взрослых особей секретируют эпидермальный фактор дифференцировки Т-лимфоцитов (ELDIF) (318, 319).

В коже присутствуют такие клетки естественного иммунитета как гистиоциты (макрофаги кожи), естественные киллеры, тучные клетки, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, тромбоциты (120, 161). В коже обнаружено подавляющее большинство цитокинов: интерлейкины, хемокины, факторы роста, интерфероны, колониестимулирующие факторы и др. Особая роль принадлежит эндотелиальным клеткам кровеносных и лимфатических сосудов. На их поверхности присутствуют молекулы адгезии, при взаимодействии с которыми клетки крови проникают в кожу (30, 120).

Существует взаимосвязь между процессами, протекающими в коже и иммунной системе. Многие заболевания кожи протекают на фоне иммунодефицитного состояния. Так при псориазе выявляются нарушения в Т-, В-системах иммунитета и в макрофагальном звене. Кроме того, основным проявлением псориаза является гиперпролиферация и незавершенность дифференцировки кератиноцитов. Как показали последние исследования по псориазу, иммунологические нарушения предшествуют нарушениям в коже (326). В то же время до сих пор неизвестна причина псориаза, а потому до конца неясен патогенез заболевания. Поэтому в 80-х годах проводились лишь отдельные исследования по лечению больных псориазом иммунотропными препаратами.

В связи с этим целью настоящей работы было разработать методы получения иммунотропных препаратов из кожи, изучить физико-химические и иммунобиологические свойства этих препаратов и оценить возможность применения одного из них для лечения псориаза.

В начале был разработан ацетоновый метод получения иммунотропных препаратов из кожи: «Способ получения вещества из кожи свиньи, влияющего на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека». Авторы: Арион В.Я., Белова О.В., Орлова В.Ф., Капитанов А.Б., Лопухин Ю.М. Патент № 2038087. Зарегистрирован 27.06.1995. Бюл. изобрет. открыт. 1995, № 18, С. 24. Первые эксперименты были поставлены на коже человека (трупа). Но поскольку ее нельзя было использовать при промышленном получении препаратов, дальнейшие эксперименты проводились на коже свиньи.

С помощью ацетонового метода были получены три препарата с различными молекулярными массами: препарат №1 (П1) - м.м. более 15 кДа, препарат №2 (П2) - от 1,4 до 15 кДа и препарат №3 (ПЗ) - ниже 1,4 кДа. В препаратах было определено содержание белка, РНК, углеводов и общих липидов. Содержание белка падало от П1 к ПЗ, содержание РНК и углеводов нарастало от П1 к ПЗ, а содержание общих липидов колебалось в пределах 1,42,2%.

Было исследовано влияние препаратов на гуморальный и клеточный иммунитет в двух иммунологических тестах: в методе Ерне и азатиоприновом методе. В методе Ерне мы исследовали влияние препаратов на количество антителообразующих клеток селезенки мышей на пике первичного иммунного ответа. Все три препарата обладали стимулирующей активностью в данном тесте, но в разной степени и в разных дозах. Активность нарастала от П1 к ПЗ. Поскольку антителообразующие клетки являются потомками В-лимфоцитов, можно говорить о стимулирующем влиянии всех трех препаратов на гуморальный иммунитет к тимусзависимому антигену.

Поскольку препараты оказались активными в методе Ерне, мы посмотрели содержание в них ИЛ-4, который является В-клеточным специфическим ростовым фактором. Мы обнаружили ИЛ-4 во всех трех препаратах. Причем, содержание ИЛ-4 коррелировало с активностью препаратов в методе Ерне. Однако, это не исключает присутствие других факторов, активных в данном тесте.

Влияние иммунотропных препаратов на Т-систему иммунитета оценивали по восстановлению чувствительности Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей к ингибирующему действию азатиоприна ин витро. Этот метод был создан в лаборатории Баха для тестирования тимического гормона тимулина (185). Тимэктомия приводит к резкому снижению чувствительности Т-лимфоцитов к азатиоприну, что связано с уменьшением количества зрелых Т-лимфоцитов. Тимические факторы восстанавливают это свойство, способствуя созреванию Т-клеток. Активностью в данном тесте обладал лишь ПЗ. Таким образом, П1 и П2 оказывали влияние на Т-зависимое антителообразование, а ПЗ - как на Т-зависимое антителообразование, так и на созревание Т-клеток.

На следующем этапе мы исследовали физико-химические свойства препаратов методами: ВЭЖХ (гель-хроматографии), изоэлектрофокусирования в тонком слое агарозы, вертикального двуступенчатого электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия и электрофореза в полиакриламидном геле в 7М мочевине. Было выявлено, что наименьшей гетерогенностью обладал П1. Он содержит одну мажорную белковую субъединицу и ряд минорных субъединиц, которые формируют 2-3 мажорных белка и ряд минорных белков. Наиболее гетерогенным оказался препарат №2, в котором выявляется пять мажорных белковых субъединиц и ряд минорных субъединиц, которые, формируют до 8-10 мажорных белков и ряд минорных белков. Поскольку методом ВЭЖХ (гель-хроматографии) выявляются всего четыре мажорных белковых пика, вероятно, часть мажорных белков имеют одинаковую молекулярную массу, но разные pi. ПЗ содержит три мажорных и ряд минорных белковых субъединиц, которые формируют два белка с одинаковой молекулярной массой, но разными близкими pi. Во всех препаратах выявляется РНК: в П1- высокомолекулярная, в П2 и ПЗ -низкомолекулярная.

Затем мы оценили влияние иммунотропных препаратов на процессы, протекающие в самой коже: на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов человека в первичной культуре и обнаружили, что П1 стимулирует пролиферацию кератиноцитов человека в первичной культуре и имеет тенденцию к стимулиции их дифференцировки, П2 ингибирует пролиферацию кератиноцитов человека и стимулирует их дифференцировку и

ПЗ стимулирует пролиферацию кератиноцитов человека и не влияет на их дифференцировку.

Выявление ингибирования пролиферации и стимулирования дифференцировки кератиноцитов препаратом №2 навело нас на мысль, что этот препарат может оказать лечебный эффект у больных псориазом, т.к. при псориазе наблюдается гиперпролиферация и незавершенность дифференцировки кератиноцитов.

Необходимо было изучить фармакологические свойства препарата №2, которому было дано предварительное название К-активин (т.к. он стимулировал дифференцировку кератиноцитов). Было изучено кожно-резорбтивное действие К-активина, острая и хроническая токсичность и аллергизирующее действие в реакциях анафилактического шока и активной кожной анафилаксии. Оказалось, что К-активина не обладает острой и хронической токсичностью, не нарушает покровы тела при изучении кожно-резорбтивного действия, обладает слабым аллергизирующим действием и при его применении у человека следует ожидать достаточно низкую анафилактогенную активность.

Успешные доклинические испытания К-активина дали возможность проверить препарат у добровольцев - больных псориазом. Было решено применить К-активин наружно в виде мази на основе крема Унны. Исследование было проведено на небольшом количестве добровольцев. В результате лечения 39% больных вышли в ремиссию, у 39% больных наблюдалось значительное улучшение, у 5% больных - незначительное улучшение и у 17% больных - не было эффекта. Отрицательный эффект не наблюдался ни у одного больного. В настоящее время материалы по К-активину находятся в Институте доклинических и клинических исследований лекарственных средств Росздрава и планируется проведение клинических испытаний препарата. В случае успешных клинических испытаний К-активин может быть рекомендован для лечения псориаза путем наружного применения.

Способ лечения псориаза К-активином был запатентован: «Способ лечения псориаза». Авторы: Лопухин Ю.М., Воронцова Е.М., Белова О.В., Арион В.Я., Машков О.А. Патент № 2084230. Зарегистрирован 20.07.1997. Бюл. изобрет. открыт. 1997, № 20, С. 25.

Хороший результат К-активина в клинике поставил вопрос о более полном изучении его физико-химических и иммунобиологических свойств. Применение методов обращенно-фазовой ВЭЖХ и масс-спектрометрии подтвердило гетерогенность препарата. Методом обращенно-фазовой ВЭЖХ выявлено 9 мажорных и более 40 минорных пиков. Методом масс-спектроскопии выявлено 7 мажорных и до 20 минорных белков и пептидов. Была выявлена активность К-активина в тесте восстановления чувствительности Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей к ингибирующему действию азатиоприна ин виво, хотя препарат был неактивен ин витро. Кроме того, К-активин проявлял тимоподобную активность: восстанавливал сниженный уровень сывороточной тимической активности тимэктомированных мышей почти до нормы и ингибировал пролиферацию эпидермоидных клеток карциномы человека А431 и эмбриональных фибробластов человека в культуре. Итак на пролиферацию трех типов клеток человека (кератиноцитов, эпидермоидных клеток карциномы А431 и эмбриональных фибробластов) К-активин оказывал супрессорный эффект подобно таким супрессорным факторам как ТФР-бета и ИЛ-10. Хотя ТРФ-бета не проявлял свой супрессорный эффект на трансформированных клетках. В К-активине было обнаружено присутствие ТФР-бета 1, ИЛ-4, ИЛ-1 бета и ЭФР, но отсутствовали ТФР-бета2 и ФНО-альфа. Присутствие выявленных цитокинов объясняет часть биологической активности К-активина.

Надо сказать, что К-активин является уникальным оригинальным препаратом, относящимся к новому классу противопсориатических препаратов, т.к. содержит и белки и низкомолекулярную РЖ и, возможно, нуклеопротеиды. Он выделен из здоровой кожи и представляет из себя некий «природный коктейль», регулирующий процессы в коже и за ее пределами.

Кожа принимает участие в дифференцировке Т-лимфоцитов. При взаимодействии кератиноцитов и ранних Т-лимфоцитов на последних экспрессируется терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза (117). Эмбриональные кератиноциты экспрессируют тимический гормон тимопоэтин (137). Кератиноциты взрослых особей секретируют эпидермальный фактор дифференцировки лифоцитов (ELDIF), ингибирующий пролиферацию и стимулирующий дифференцировку Т-лимфоцитов (318, 319).

В. лаборатории молекулярной иммунологии НИИ ФХМ с 70-х годов проводились исследования по разработке, характеристике, получению и клиничекому применению тимических факторов (3, 4, 5). Был разработан первый российский лечебный препарат из тимуса - Тактивин. Была создана оригинальная методика получения препарата, были широко изучены его физико-химические и иммунобиологические свойства (4). Тактивин с успехом прошел доклинические и клинические испытания, после чего было налажено его производство как лечебного препарата (4). В настоящее время Тактивин можно купить в аптеке. Он применяется при лечении первичных и вторичных иммунодефицитных состояний: при онкологических, инфекционных, хирургических, дерматологических и др. заболеваниях.

Разработка иммунотропных препаратов из кожи является продолжением работ по тимическим факторам. Общие свойства кератиноцитов и эпителиальных клеток тимуса, предположение о том, что кератиноциты синтезируют тимические гормоны, синтез тимопоэтина эмбриональными кератиноцитами, секреция кератиноцитами взрослых особей эпидермального фактора дифференцировки Т-лимфоцитов - все это подтолкнуло нас к работе по выделению иммунотропных веществ из кожи. Хотя дальнейшие работы показали, что кератиноциты взрослых особей человека и мыши не содержат тимических гормонов альфа]-тимозина, тимопоэтина и тимулина, это не исключает синтез в кератиноцтах других тимических факторов. Наши данные подтверждают это. Так, К-активин обладает рядом общих свойств с тимическим препаратом Тактивином:

1. Близкие способы получения препаратов.

2. Активность в азатиоприновом тесте ин виво.

3. Оба препарата повышают уровень сывороточной тимической активности у тимэктомированных мышей.

4. Оба активны а тесте Ерне.

5. Препараты имеют перекрывающиеся молекулярные массы при разделении на сефадексе G-50: Тактивни - 1-6 кДа, К-активин - 1,4-15 кДа.

6. Оба являются гетерогенными препаратами.

7. Оба проявили лечебный эффект у больных псориазом.

Препараты имеют и отличия. Одно из них - это отсутствие активности К-активина в азатиприновом тесте ин витро. Все это не исключает возможность того, что К-активин является тимическим фактором, той самой общей субстанцией между тимусом и кожей. По крайней мере, можно говорить о тимоподобной активности К-активина, т.к. он повышает сывороточную тимическую активность.

Если предположить, что К-активин, выделенный из кожи, проникает в кровь и вносит непосредственный вклад в повышение сывороточной тимической активности, то возникает вопрос о правильности термина «сывороточная тимическая активность», поскольку хотя бы часть ее составляет «сывороточная кожная активность». Может быть правильнее называть ее сывороточной тимоподобной активностью? СТА у тимэктомированных мышей не падает до нуля, а составляет 1,5. Возможно, что этот уровень СТА поддерживается факторами кожи, которая берет на себя иммунорегуляторные функции. Но если кожа и продуцирует факторы, повышающие СТА, она не в состоянии повысить уровень СТА до нормального, поскольку у тимэктомированных мышей уровень СТА низкий. У взрослых особей происходит инволюция тимуса, хотя Т-система у них работает нормально. Возможно и здесь кожа играет определенную роль: постепенно берет на себя функцию дифференцировки Т-лимфоцитов. И только в старости наблюдается снижение иммунитета. Именно тогда, вероятно, кожа резко снижает свои иммунологические функции.

Помимо К-активина, выраженными иммунотропными свойствами обладает ПЗ. Из трех препаратов он обладал наиболее выраженной активностью в методе Ерне и единственный проявлял активность в азатиоприновом тесте ин витро. ПЗ, также как К-активин, содержит белки (или пептиды), РНК и, возможно, рибонуклеопротеиды. Из трех препаратов он самый низкомолекулярный. Он обладает стимулирующей активностью на гуморальный иммунный ответ к Т-зависимому антигену, стимулирует созревание Т-клеток, стимулирует пролиферацию кератиноцитов. После доклинических и клинических испытаний может быть рекомендован как стимулирующий иммунотропный препарат.

Изучение физико-химических свойств препаратов, полученных с помощью разработанного нами ацетонового метода, показало, что все они, помимо белков и углеводов, содержат РНК. Для получения более чистых белковых препаратов мы ввели в ацетоновый метод этапы высаливания сульфатом аммония - один из широко применяемых способов очистки белков. Мы хотели избавиться от РНК и других небелковых компонентов, чтобы повысить содержания белка в препаратах.

Изменение метода привело и к изменению физико-химических и иммунобиологических свойств препаратов, имеющих одинаковую молекулярную массу. Увеличилось содержания белка в препаратах с аналогичной молекулярной массой, уменьшилось содержания углеводов и общих липидов; значительно сократилось содержание РНК в препаратах №2 и №3 и имеется тенденция к ее увеличению в препарате №1. Не было обнаружено окрашенных компонентов РНК методом ИЭФ ни в одном из препаратов, полученных методом с высаливанием. Высаливание привело к исчезновению белков с pi от 5,2 до 8,15; резкому снижению числа мажорных компонентов в П2 и к изменению молекулярных масс компонентов, выявляемых при SDS-ПААГЭ в аналогичных препаратах. Введение этапов высаливания привело к изменению и иммунологических свойств препаратов с одинаковыми молекулярными массами. В целом можно сказать, что препараты с аналогичными молекулярными массами стали более активными. В методе Ерне максимальной активностью обладает препарат №3, полученный ацетоновым методом и препарат №2, полученный методом с высаливанием. Кроме того, изменился характер зависимости активности препаратов от дозы. Введение высаливания привело к тому, что все три препарата стали активными в азатиоприновом тесте ин витро, в то время как при ацетоновом методе был активен лишь ПЗ.

Введение высаливания привело к тому, что все три препарата стали супрессировать пролиферацию эпидермоидных клеток карциномы человека А431. При ацетоновом методе супрессирующей активностью обладал лишь П2 по влиянию на пролиферацию кератиноцитов человека в первичной культуре.

Разработка метода с высаливанием открывает путь к получению индивидуальных иммунотропных молекул, которые в дальнейшем можно будет использовать при лечении иммунодефицитных состояний и кожных заболеваний. Для этого необходимо провести дальнейшие исследования по очистке и изучению физико-химических и биологических свойств полученных веществ, провести их доклинические и клинические испытания. Выделение отдельных молекул открывает путь к получению синтетических лекарственных препаратов.

Ацетоновый метод и метод с высаливанием включают использование в больших количествах такого органического растворителя как ацетон, который является легковоспламеняемой жидкостью и вызывает поражение центральной нервной системы. Нельзя ли его заменить более безопасным веществом? Мы решили создать экологически более чистый метод выделения и заменили этап прикапывания супернатанта к ацетону в ацетоновом методе этапом обработки супернатанта сжиженным углекислым газом, т.к. последний по своим свойствам близок к ацетону.

При сравнении препаратов с аналогичными молекулярными массами, выделенных ацетоновым и безацетоновым методами, мы обнаружили, что они обладают как общими, так и различными физико-химическими и иммунологическими свойствами. Аналогичные препараты имели одинаковое содержание белка по Лоури и проявляли одинаковую активность в азатиоприновом тесте. П1 и П2, полученные ацетоновым и безацетоновым методами имели одинаковое количество мажорных белков с близкими pi. Методом SDS-ПААГЭ в аналогичных препаратах, полученных ацетоновым и безацетоновым методами выявляются общие белковые компоненты с близкими молекулярными массами.

В то же время, препараты с аналогичными молекулярными массами, но выделенные разными методами, отличаются по содержанию РНК, углеводов и общих липидов и по влиянию на количество антителообразующих клеток селезенки мышей на пике первичного ответа. Не было выявлено РНК методом ИЭФ ни в одном из препаратов, полученных безацетоновым методом, хотя в препаратах, полученных ацетоновым методом, она выявлялась. Методом SDS-ПААГЭ и ИЭФ в препаратах, выделенных ацетоновым методом, выявляются белки, отсутствующие в аналогичных препаратах, выделенных безацетоновым методом. Все три препарата, полученные ацетоновым методом, увеличивали количество антителообразующих клеток в методе Ерне, в то время как П2, полученный безацетоновым методом в дозе 100 мкг/мышь - уменьшал. В методе Ерне отличался характер зависимости активности препаратов с аналогичными молекулярными массами от дозы.

Мы обнаружили, что в процессе хранения лиофилизированного супернатанта происходит изменение физико-химических и иммунологических свойств полученных из него препаратов. Уменьшается содержание белка в П1 и П2, в ПЗ - не изменяется. Уменьшается содержание РНК во всех трех препаратах и увеличивается содержание углеводов. Снижается молекулярная масса мажорного белкового компонента в ПЗ. В процессе хранения теряется активность в тесте восстановления чувствительности Т-лимфоцитов селезенки тимэктомированных мышей к ингибирующему действию азатиоприна в препарате №3, но появляется в препаратах №1 и №2.

Преимуществом безацетонового метода является то, что нет необходимости использовать такое большое количество ацетона как в ацетоновом методе и методе с высаливанием. В перспективе можно подобрать условия и программировать получение препаратов с определенными иммунобиологическими свойствами. Метод перспективен в технологическом плане при промышленном производстве препаратов.

Разработка трех новых методов дало возможность получить новые иммунотропные препараты. К-активин, полученный ацетоновым методом, уже был испытан в клинике на ограниченной группе добровольцев - больных псориазом и дал хорошие результаты. Другие иммунотропные препараты могут быть использованы в клинике после прохождения доклинических и клинических испытаний. Особенно перспективны в этом плане низкомолекулярные препараты, обладающие высокой иммунологической активностью. Дальнейшая очистка препаратов, выделение отдельных пептидов, создание синтетических пептидов дает широкое поле для дальнейшей деятельности как в плане создания лекарств, так и в плане изучения регуляторных механизмов иммунологически активных факторов кожи.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Белова, Ольга Владимировна, 2007 год

1. Айзятулов Р.Ф., В.В. Юхимеико. Значение факторов риска в возникновении и течении псориатической болезни. Вестн. дерматол., 2001; 1:40—42

2. Анищенко М.А., Мельников Б.И., Ярулин Р.Г., Русинов В.И., Антонов Ю.В. HLA-антигены I класса у больных вульгарным псориазом. Иммунология, 1998, №3, С. 45-47.

3. Арион В.Я. Иммунобиология гормонов тимуса. 1989, Киев, «Здоровье», гл. 7, с. 103-125.

4. Арион В.Я. (Arion V.Ya) Thymic Peptides as Immunoregulators, with Spesial Reference to T-Activin. Soviet Medical Reviews are published by Yarwood Academic Pablishers, 1989, p. 65.

5. Арион В.Я., Зимина И.В., Лопухин Ю.М. Современные данные по природе и клиническому применению тимических препаратов. Russian J. Immunol., 1997, V.2, N. 3-4, P. 158-166.

6. Архипенкова A.A., Г.И. Суколин, Ю.С. Бутов, В.М. Верещагина, А.Г. Туманян. Уровень белков острой фазы воспаления в сыворотке крови у больных псориазом. Вестн. дерматол., 2003; 5: 25-29.

7. Балтабаев М. К., Ш. А. Хамидов, У. А. Валиханов, Ф. Ш. Хамидов. Псориаз и метаболизм желчных кислот. Вестн. дерматол., 2005; 4:25—28.

8. Балтабаев М.К., Хамидов Ш.А. Диагностическое значение определения желчных кислот в сыворотке крови при псориазе. Вестн. дерматол., 1996; 3:3234.

9. Баранова О.А. Физико-химические и иммунобиологические свойства РНК из тимуса, связанные со специфической фрагментацией высокомолекулярных РНК. Диссер. соиск. уч. ст. канд. биол. наук. М. 2004.

10. Бейли Д. Определение белка. Методы химии белков. М., 1965. - С. 266.

11. Бекман Э.М., Баранова О.А., Власенко Р.Я., Арнон В.Я. Влияние низкомолекулярных РНК из тимуса на Т-зависимое антителообразование. Бюл. экспер. биол. мед. 2001, Т. 132, № 10, С. 419-423.

12. Бекман Э.М., Григорьев М.Ю., Гутникова М.Н., Митрохин Ю.И. и др Аутолитическая деградация РНК: влияние аутолизатов и нативных препаратов пре-mPHK на уровень транскрипции в модельных системах ин витро и ин виво. Биохимия. 1985, Т. 50, С. 1843-1851.

13. Вавилов A.M., В.А. Самсонов, JT.E. Димант, Л.Э. Завалишина. Иммуноморфологические исследования Г-лимфоцитов в коже больных псориазом. Вестн. дерматол., 2000; 4:4—7

14. Вайсов А.Ш., А.Б. Рахматов, Н.Р. Расулева. Сандиммун в лечении тяжелых форм псориаза. Вестн. дерматол., 1998; 6:38-40

15. Вильшонков А.И., Е.В.Орлов, Е.И.Селезнев, И.Ф.Васильева, В.А.Дьячков. Лечение больных псориазом внутрисосудистым лазерным облучением крови. Вестн. дерматол., 1997; 1:35-36.

16. Владимиров В.В. Диагностика и лечение кожных болезней. М. 1995.

17. Владимиров В.В., Л.В. Меньшикова, И.Г. Черемухина, В.В. Владимирова, О.Н.Курьянова, Е.В. Владимирова. Лечение больных псориазом ультрафиолетовой средневолновой фототерапией узкого спектра 311 нм. Вестн. дерматол., 2004; 4:29—32.

18. Ганковская Л.В. Иммуноцитокины: регуляция функций макрофагов, локальная иммунокоррекция. Дис. соис. учен. степ, докт медиц. наук. М., 1993.

19. Гистология. Под редак. проф. Э.Г.Улумбекова, проф. Ю.А.Челышева. М. Геотар-мед. 2001. С.483-502.

20. Гольцова Е.Н. Дифференцированный подход к местной иммуномодулирующей терапии при псориазе. Автореферат дис. соиск. учен. ст. к.м.н. 2004. Тюмень.

21. Довжанский С.И., Утц С.Р. Псориаз. Саратов. 1992.

22. Жибурт Е.Б., Серебряная Н.Б., Каткова И.В. Цитокины в кроветворении, иммуногенезе и воспалении. Физиология. 2001 (интернет-статья).

23. Загртдинова P.M., П.Н. Шараев, Н.А. Колясева, З.А. Шарипова, О.А. Пантюхина. Показатели обмена соединительной ткани при псориатической болезни. Вестн. дерматол., 2001; 5:29—31.

24. Земсков A.M. Усиление иммунного ответа на тифоидную вакцину при подкожном введении РНК. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологиии. 1977, № 7, стр. 99-102.

25. Земсков В.М., Барсуков А.А., Пальмина С.И., Фадеева JLJL, Максудлва М.Х. Усиление антибактериальной и антивирусной невосприимчивости и иммунного ответа лекарственным препаратом РНК. Бюлл. экспер. биол. мед., 1979, т. 87, №3, С. 256-259.

26. Земсков В.М., Лидак М.Ю., Земсков A.M., Микстайс У .Я. Низкомолекулярная РНК. Получение, гидролиз и применение в медицине. 1985. Рига. Зинатне.

27. Зигль Э., Бем Э. Метод локального гемолиза в геле. В кн.: Иммунологические методы. М., 1979. - С. 96-107.

28. Зимина И.В., Лопухин Ю.М., Арион В.Я. Кожа как иммунный орган: клеточные элементы и цитокины. Иммунология, 1994, № 1, С. 8-13.

29. Каламкарян А.А., Самсонок В.А., Тимошин Г.Г., Чистякова И.А. Средства для наружного лечения псориаза. Вест, дерматол., 1988, № 12, С. 4749.

30. Катунина О.Р. Иммунная система кожи и ее роль в патогенезе псориаза. Вестн. дерматол., 2005; 1:19—22.

31. Катунина О.Р. Иммуноморфологическая характеристика клеток воспалительного инфильтрата при псориазе. Вестн. дерматол., 2005; 2:25—28.

32. Ким К.Ф., Климова С.В., Дьяконова В.А., Никонова М.Ф., и др. Влияние тимических пептидов на синтез и внутриклеточное содержание некоторых цитокинов. Иммунология. 2002, Т. 23, № 5, С. 274-278.

33. Кириллова B.C., Кордюм В.А. Экспрессия экзогенных РНК в эукариотических и прокариотических клетках. Молекулярная биология (Киев). 1977, №18, С. 62-70.

34. Кожа (строение, функция, общая патология и терапия). Под ред. Чернухи A.M., Фролова Е.П. М. Медицина. 1982.

35. Кожные и венерические болезни. Под ред. Ю.К. Скрипкина. М. Медицина. Т. 2.1995.

36. Ковальчук Л.В. Иммунология слизистых и кожи: связь между внешней средой и иммунной системой. Рос. жур. гастроэн. гепатол. колопрок. 1999, Т. IX, №4, Прил. №7, С. 32-34.

37. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Мороз А.Ф., Аведова Т.А., Москвина С.Н. Противомикробные пептиды иммунной системы: клинические аспекты. Аллергология и иммунология, 2003, том 4, №2, 20-26.

38. Короткий Н.Г, Ружицкая Е.А., Арион В.Я., Уджуху В.Ю., Кротова С.Б., Бреусов Ю.Н. Опыт применения Т-активина у больных псориазом. Вест, дерматол., 1985, № 7, С. 48-51.

39. Короткий Н.Г, В.Ю. Уджуху, А.Э Абдуллаева. Терапевтические возможности тимодепрессина у больных псориазом и механизмы его лечебного действия. Вестн. дерматол., 2002; 4:41—43

40. Короткий Н.Г. Первый опыт применения анти-ФНО-альфа (ремикейд) при лечении тяжело протекающего псориаза. Вестн. дерматол., 2003; 4: 37—38

41. Короткий Н.Г., Песляк М.Ю. Псориаз как следствие включения 0-стрептококков в микробиоценоз кишечника с повышенной проницаемостью (концепция патогенеза). Вестн. дерматол., 2005; 1:9—18.

42. Кубанова А.А., Маркушева Л.И., Фомина Е.Е. Уровень сывороточного фактора некроза опухоли а при различных дерматозах. Иммунология, 1998, № 2, С. 47-49.

43. Кубанова А.А., М.Б. Жилова, А.В. Резайкина. Эффективность применения неотигазона (ацитретина) в терапии больных с тяжелыми формами псориаза. Вестн. дерматол., 2000; 3:47—48

44. Курдина М.И. Антицитокиновая терапия — новое направление в лечении псориаза. Вестн. дерматол., 2005; 1:3—8.

45. Курдина М.И., Ю.Г. Антропова, О.П. Ильинская, Д.Ю. Песков, Е.В. Парфенова. Экспрессия урокиназы и ее рецептора в коже больных псориазом. Вестн. дерматол., 2002; 1:9—12

46. Лебедев А.Т. Масс-спектрометрия в органической химии. М. Изд. «Бином. Лаборатория знаний», 2003.

47. Левашов И.Н., Ф.И. Ершов, А.Л. Тищенко, С.С. Григорьян, Т.П. Оспельникова, Л.Д. Тищенко. Опыт применения циклоферона при лечении псориаза. Вестн. дерматол., 1999; 2:32—34

48. Левин М.М., М.Я.Левин, И.С.Чернышев, В.В.Евстафьев, Э.К.Газданов.

49. Показатели состояния иммунитета у больных псориазом. Вестн. дерматол., 1996; 5:26-28.

50. Ляпон А.О. В кн.: Псориаз. М. 1980, вып.1, С. 133-137.

51. Маркушева Л.И., Фомина Е.Е., Кеда Ю.М., Морозова М.С., Панков Ю.А. Антитела к фибробластам кожи человека у больных псориазом. Иммунология, № 3, С. 52-53.

52. Маркушева Л.И., В.А. Самсонов, Е.Е. Фомина, Ю.М. Кеда, М.С. Морозова, Л.Е. Димант. Антитела к фибробластам кожи человека у больных различными дерматозами. Вестн. дерматол. 1998, № 2, С. 23-25.

53. Маркушева Л.И., В.А. Самсонов, А.Г. Саруханова, М.В. Савватеева. Оценка продукции различных цитокинов у больных псориазом. Вестн. дерматол., 2004, № 4, С. 4—6.

54. Маркушева Л.И., В.А. Самсонов, А.И. Полетаев, М.В. Савватеева. Результаты изучения пролиферативной активности лимфоцитов у больных псориазом. Вестн. дерматол., 2001; 3:19—21

55. Маркушева Л.И., В.А.Самсонов, Е.Е.Фомина, И.А.Чистякова. Уровень сывороточного фактора некроза опухоли (альфа) при псориазе. Вестн. дерматол., 1997;3:8-10

56. Маркушева Л.И., М.И. Савина, Ю.В. Тихонов, В.А. Самсонов, А.И. Полетаев, М.В. Савватеева. Нарушение обмена веществ в лимфоцитах при псориазе. Вестн. дерматол., 2000; 5:9—12.

57. Махнева Н.В., Л.В. Белецкая. Антигены главного комплекса гистосовместимости класса II (HLAII) на клеточных элементах кожи при дерматозах. Вестн. дерматол., 2004; 4:7—12.

58. Машкиллейсон А.Л., Ляпон А.О. В кн.: Всесоюзное мед. Науч. О-во дермато-венерологов. Правление. Пленум. Таллин. 1981, С. 127-128.

59. Медуницин Н.В. Цитокины и аллергия. Иммунология. 1999, № 5, С. 5-9.

60. Меньшикова JI.B., В.В. Владимиров. Результаты изучения иммунного статуса у больных псориазом при климатотерапии на Мертвом море. Вестн. дерматол., 2001; 3:15—18.

61. Молочков В.А., М.Н.Ежова, И.В.Гостева. Опыт применения препаратов дипросалик и тридерм в терапии различных дерматозов. Вестн. дерматол., 1996; 4:47-48.

62. Найденов Ю.Н. Наружное применение кортикостероидов в дерматологической практике. Военно-медицин. журнал., 1983, №7, С. 63-64.

63. Некипелова А.В., М.Н. Поляченко, В.И. Ислямова. Опыт применения кальципотриола (псоркутана) в лечении псориаза. Вестн. дерматол., 1999; 5:47—48

64. Никулин Н.К., Старостина З.Д., Комарова В.Д. Вест, дерматол., 1981, № 9, С. 10-14.

65. Новиков А.И., А.В. Кононов, В.А. Охлопков, О.В. Правдина, Г.Д. Братухина, Р.В. Городилов. Иммунохимические исследования при псориазе. Вестн. дерматол., 2003; 3: 27—30.

66. Новое в диагностике и лечении заболеваний, передающихся половым путем и болезней кожи. М. 1997.

67. Павлова О.В. Новые аспекты патогенетической терапии псориаза. Вестн. дерматол. 2005, № 6, С. 36-39.

68. Пакирдинов А.Б. Применение плазмафереза и гипербарической оксигенации в дерматологической практике. Вестн. дерматол., 1998; 6:41-42.

69. Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Основные свойства дендритных клеток. Иммунология. 2001, № 4, С. 7-16.1Ъ. Петрова J1.B., Л.В. Ильина. Применение циклоспорина А в современнойдерматологической практике. Вестн. дерматол., 2005; 1:23—25.

70. Повалий Т.М., Т.К.Логинова, Г.Я.Шарапова, С.А.Гусев. Т.М. Количественный анализ холестерина мембран кератиноцитов эпидермиса при псориазе. Вестн. дерматол., 1997; 1:4-7

71. Попович A.M. Интерлейкин-2: иммунобиология и иммунотерапия. Санкт-Петербург. 2004.

72. Попович A.M. Интерлейкин-2: опыт клинического применения в России. Санкт-Петербург. 2005, С. 12-19.

73. Прохоренков В. И., Рукша Т. Г., Петрова Л. Л., Салмина А. Б. Запрограммированная клеточная гибель кератиноцитов и ее роль в патогенезе некоторых заболеваний кожи. Вестн. дерматол., 2005; 4:4—7.

74. Прохоренков В.И., Т.М. Вандышева, С.Ю. Терещенко. Структурно-функциональное состояние мембран лимфоцитов у больных псориазом. Вестн. дерматол., 2003; 2:17—20.

75. Родин А.Ю. Патогенетическое обоснование и клиническая эффективность применения естественных ингибиторов протеаз в терапии псориаза. Вестн. дерматол., 1996; 4:30-32

76. Рукша Т.Г., В.И. Прохоренков, А.Б. Салмина, Л.В. Труфанова, Е.И. Таксанова, Л.Л. Петрова. Апоптоз кератиноцитов и экспрессия периферических бензодиазепиновых рецепторов при псориазе. Вестн. дерматол., 2004; 5:4—6.

77. Русак Ю.Э. Лечение псориаза селективной фототерапией в сочетании с солевыми ваннами и дитранолом. Вестн. дерматол., 1997; 1:30-32

78. Русак Ю.Э., А.П. Вассерман, В.М. Волков, П.С. Арситов, И.Д. Лопандина. Новый метод лечения псориаза и нейродермита — импульсная фототерапия. Вестн. дерматол., 1999; 4:45—46.

79. Рыбакина Е.Г., Корнева Е.А. Трансдукция сигнала интерлейкина-1 в процессах взаимодействия нервной и иммунной систем организма. Вестн. Рос. акад. мед. наук., 2005, № 7, С. 3-8.

80. Рыбкина B.JI. Влияние лечения с применением кларитромицина наэкспрессию кластеров дифференцировки лимфоцитов больных псориазом. Иммунология. 2005, №3, С. 170-172.

81. Самсонов В.А., Л.Е. Димант, Н.К. Иванова, В.А. Волнухин, Е.Е. Царегородцева, М.В. Куликов. Скин-кап (активированный цинка пиритионат) в терапии больных псориазом. Вестн. дерматол., 2000; 5:34—36.

82. Самсонов В.А., С.М. Федоров, А.А. Данилова, О.В. Надгериева. Терапия псориаза элокомом С. Вестн. дерматол., 2004; 6: 48—49.

83. Самсонов В.А., Хапилова В.И. Локоид в терапии больных аллергодерматозами и псориазом. Вестн. дерматол., 1996; 6:41-43.

84. Симбирцев А.С. Биология семейства интерлейкина-1 человека. Иммунология, 1998, № №, С. 9-17.

85. Симбирцев А.С. Интерлейкин-2 и рецепторный комплекс интерлейкина-2 в регуляции иммунитета. Иммунология, 1998, № 6, С. 3-8.

86. Симбирцев А.С. Интерлейкин-8 и другие хемокины. Иммунология. 1999, № 4, С. 9-14.

87. Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции. Цитокины и воспаление, 2004, Т. 3, № 2, С. 16-21.

88. Скрипкин Ю.К., Лезвинская Е.М. Кожа орган иммунной системы. Вест, дермат. венерол., 1989, № 10, С. 14-20.

89. Скрипкин Ю.К., Чистякова И.А. Современные методы лечения псориаза. Materia medica. 1994, № 2, С. 37-50.

90. Соколов Д.И., Котов АЛО., Симбирцев А.С.,Фрейдлин И.С. Сравнение цитокинов по способности влиять на уровень секреции интерлейкина-8 эндотелиальными клетками. Иммунология. 2002, Т. 23, № 1, С. 32-37.

91. Степаненко Р.Н. Миелопид: иммунофармакологическая активность при иммунодефицитных состояниях. Дисс. соиск. учен. степ, доктора медиц. наук. Москва. 1992.

92. Суколина О. Г. Состояние оксида азота и адаптивных белков припсориазе. Вестн. дерматол., 2005; 5:15—18.

93. Суханова Н.М. Иммуноморфологические маркеры нарушения дифференцировки и пролиферации клеток в коже больных псориазом. Вестн. дерматол., 2003; 3:31—33.

94. Суханова Н.М., В.А. Самсонов, В.А. Смольянникова. Дайвонекс (кальципотриол) в комплексной терапии больных псориазом с учетом иммукогистохимических показателей кожи. Вестн. дерматол., 2003; 4: 30—33.

95. Терских В.В., А.В. Васильев, Е.А. Воротеляк. Стволовые клетки: эволюция концепции. Вестн. дерматол., 2005, № 2, С. 4-8.

96. Терских В.В., А.В. Васильев, Е.А. Воротеляк. Стволовые клетки и структура эпидермиса. Вестн. дерматол., 2005; 3:11—15.

97. Тимошин Г.Г., И.А. Чистякова, И.М. Косорукова, И.Н. Гвоздева. Псориатен в лечении больных псориазом. Вестн. дерматол., 1998; 5:40-41.

98. Титов В.Н. Роль макрофагов в становлении воспаления, действие интерлейкина-1, интерлейкина-6 и активность гипоталамо-гипофизарной системы (обзор литературы). Клин, лабор. диагнос. 2003, № 12, С. 3-10.

99. Трофимова И.Б., Задионченко Е.В. уб-Т-клетки и их распространение в организме. Вест, дерматол. 2005, № 3, С. 16—20.

100. Трофимова И.Б., Е.Н. Костянова, А.В. Коралкин. Некоторые аспекты патогенеза и лечения псориаза. Вестн. дерматол., 2004; 5: 33—35.

101. Тузанкина И.А., Кунгуров Н.В., Филимонкова Н.Н., Бердникова Э.Р. Псориатическая болезнь системный аутоиммунный процесс. Цитокины и воспаление, 2003, Т. 2, № 3, С. 59-60.

102. Тяготин Ю.В., Рыбакова Л.П., Тутова И.Ю., Гончарова С.В., Куликова И.Н. Низкомолекулярный пептид лимфоидной ткани лимфотилин как модулятор иммунологических реакций. Иммунология. 1999, № 3, С. 36-38.

103. Фаттяхетдинова З.А., Резайкина А.В., Знаменская Л.Ф. Особенности лечения больных распространенным псориазом, резистентным к терапии. Вестн. дерматол., 2005, №3, С. 39-40.

104. Фрейдлин И.С. Интерлейкин-12 ключевой цитокин иммунорегуляции. Иммунология, 1999, № 4, С. 5-9.

105. Хамаганова И.В. Терапевтическая эффективность псоркутана при различных формах псориаза в сравнении с наружной глюкокортикоидной терапией. Вестн. дерматол., 2000; 6:45—46.

106. Хапилова В.И., И.А.Чистякова, Е.В.Авербах. Применение кортикостероидных гормонов в дерматологии. Сообщение I. Системное применение кортикостероидов. Вестн. дерматол., 1996; 4:49-50.

107. Хардикова С.А., Белобородова Э.И., Пестерев П.Н. Состояние иммунной системы у больных псориазом в сочетании с хроническим описторхозом. Вестн. дерматол. 2005, № 6, С. 33-35.

108. Чернов И.П., Ростапшов В.М., Ажикина Т.Л. и др. Получение гена гамма-интерферона свиньи методом однонаправленного многоточечного мутагенеза. Биоорган, химия, 1989, № 12, С. 1686-1689.

109. Чистякова И.А., В.И.Хапилова, Е.В.Авербах. Кортикостероидные гормоны в дерматологии. Сообщение II: Топическое применение кортикостероидов. Вестн. дерматол., 1996; 5:20-22.

110. Шахтмейстер И.Я., Шимановский Н.Л. Кальципотриол (псоркутан) в лечении псориаза. Вестн. дерматол., 1999; 4:47—48.

111. Шилов В.Н. Псориаз решение проблемы (этиология, патогенез, лечение). М. 2001.

112. Шилов В.Н., Сергиенко В.И. Новые подходы к изучению патогенеза и лечению псориаза. Вестн. дерматол., 1998; 3:44-47.

113. Эдельсон Р.Л., Финк Д.М. Иммунологическая функция кожи. В мире науки. 1985, С. 16-24.

114. Юрина Н.А., Радостина А.И. Гистология. М. Медицина. 1995.

115. Юцковский А.Д., Н.А. Латышев, С.П. Касьянов, Я.А. Стефанович, Д.В. Куклев. Об эффективности полиненасыщенных жирных кислот в комбинированной амбулаторной терапии псориаза. Вестн. дерматол., 1999; 1:26-28.

116. Ярилин А.А. Кожа как часть иммунной системы. Materia medica. 1994, № 2, С. 7-36.

117. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии. Иммунология, 1997, № 5, С. 7-14.

118. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М. Медицина. 1999.

119. Ярилин А.А. Интерлейкин-7 и другие лимфопоэтины. Иммунология, 2000, № 1, С. 4-13.

120. Ярилин А.А., Пинчук В.Г., Гриневич Ю.А. Структура тимуса дифференцировка Т-лимфоцитов. Киев. Наукова думка. 1991.

121. Adolf G.R., Grell М. et al. Tumor necrosis factor. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993, P. 63-88.

122. Aggarwal S, Ghilardi N, Xie MH, de Sauvage FJ, Gurney AL. Interleukin-23 promotes a distinct CD4 T cell activation state characterized by the production of interleukin-17. J Biol Chem. 2003 Jan 17;278(3):1910-4.

123. Akira S., Taga Т., Kishimoto T. Interleukin-6 in biology and medicine. Adv Immunol. 1993, V. 54, P. 1-78.

124. Appasamy PM. Interleukin-7: biology and potential clinical applications. Cancer Invest. 1993, V. 11, N. 4, P. 487-499.

125. Aragane Y., Bhardway R.S. et al. Detection of keratinocyte-derived interleukin-4. J. Invest. Dermatol. 1994, V. 102, P. 586-592.

126. Aragane Y., Simon M. et al. Detection of the production of interleukin 12 by human keratinocytes. Arch. Dermatol. Res. 1994, V. 286, P. 229-236.

127. Archer S. Induction of T-cell specific antigen on bone marrow lymphocytes with thymus RNA. Immunology. 1978, V. 34, P. 123-129.

128. Arnold R., Seifert M., Asadullah K., Volk H.D. Crosstalk between keratinicytes and T lymphocytes via Fas/Fas ligand interaction: modulation by cytokines. J. Immunol. 1999, V. 162, P. 7140-7147.

129. Asadullah K, Docke W.-D., Ebeling M., Friedrich M., Belbe G., Audring H, Volk HD, Sterry W. Interleukin 10 treatment of psoriasis. Clinical results of a phase 2 trial. Arch. Dermatol. 1999, V. 135, P. 187-192.

130. Asadullah K, Sabat R, Friedrich M, Volk HD, Sterry W. Interleukin-10: an important immunoregulatory cytokine with major impact on psoriasis. Curr Drug Targets Inflamm Allergy. 2004 Jun;3(2): 185-92.

131. Asadullah K, Sterry W, Stephanek K, Jasulaitis D, Leupold M, Audring H, Volk HD, Docke WD. IL-10 is a key cytokine in psoriasis. Proof of principle by IL-10 therapy: a new therapeutic approach. J Clin Invest. 1998 Feb 15;101(4):783-94.

132. Audhia Т.К., Goldstein G. Amino asid sequence of thymopoietin isolated from skin. Ann. N. J. Acad. Scien. Endocrine, metabolic and immunologic functions of keratinocytes. 1988, V. 548, P. 233-240.

133. Bach J.-F. , Dardenne M. Studies of thymic products. II. Demonstration and characterisation of a circulating thymic hormone. Immunol., 1973, v. 25, N 3, p. 353-366.

134. Bach J.-F., Bach M.-A., et al. Thymic Serum Factor. Bull. Inst. Pasteur, 1978, v. 76, N4, p. 325-398.

135. Baggiolini M, Dahinden CA. CC chemokines in allergic inflammation. Immunol Today. 1994, V. 15, N. 3, P. 127-133.

136. Baker BS, Fry L. The immunology of psoriasis. Br J Dermatol 1992; 126:1-9.

137. Balkwill F.R., Burke F. The cytokine network. Immunol. Today. 1989, N. 10, P. 299-304.

138. Banno T, Adachi M, Mukkamala L, Blumenberg M. Unique keratinocyte-specific effects of interferon-gamma that protect skin from viruses, identified using transcriptional profiling. Antivir. Ther. 2003 V. 8, N. 6, P. 541-554.

139. Barker JN, Jones ML, Swenson CL, Sarma V, Mitra RS, Ward PA, Johnson KJ, Fantone JC, Dixit VM, Nickoloff В J. Monocyte chemotaxis and activating factor production by keratinocytes in response to IFN-gamma. J Immunol. 1991, V. 146, N. 4, P. 1192-1197.

140. Becker D., Knop J. Epidermal cell-derived cytokines and delayed-type hypersensitivity. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993, P. 365-376.

141. Becker Y. Immunological and regulatory functions of uninfected and virus infected immature and mature subtypes of dendritic cells. Virus Genes. 2003, V. 26 (2): 119-130.

142. Benczik M, Gaffen SL. The interleukin (IL)-2 family cytokines: survival and proliferation signaling pathways in T lymphocytes. Immunol Invest. 2004 May;33(2): 109-42.

143. Bertolero F., Kaighn M.E., Camalier R.F., Saffiotti U. Effects of serum-derived factors on growth and differentiation of mouse keratinocytes. In Vitro Cell. Develop. Biol. 1986, V. 22, N. 7, P. 423-428.

144. Bhatnagar R., Penformis H., Hauviel A. et al. IL-1 inhibits the synthesis of collagen by fibroblasts. Biochem. Int. 1986, V. 13, N. 4, P. 709-720.

145. Bian ZM, EIner SG, Yoshida A, EIner VM. Differential involvement of phosphoinositide 3-kinase. Akt in human RPE MCP-1 and IL-8 expression. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2004,45(6): 1887-96

146. Bieber T. Fc epsilon RI on human Langerhans cells: a receptor in search of new functions. Immunol Today. 1994, V. 15, N. 2, P. 52-53.

147. Blanpain C, Migeotte I, Lee B, Vakili J, Doranz В J, Govaerts C, Vassart G, Doms RW, Parmentier M. CCR5 binds multiple CC-chemokines: MCP-3 acts as a natural antagonist. Blood. 1999, 94(6): 1899-905.

148. Blumberg H, Conklin D, Xu WF, Grossmann A, Brender T, Carollo S. Et al. Interleukin 20: discovery, receptor identification, and role in epidermal function. Cell, 2001, V.104 (1), p.9-19.

149. Bos J.D., De Rie M.A. The pathogenesis of psoriasis: immunological facts and speculations. Immunol. Today. 1999, V. 20, Is. 1, P. 40-46.

150. Bos JD The pathomechanisms of psoriasis; the skin immune system and cyclosporin. Br J Dermatol. 1988, 118(2): 141-55.

151. Bos JD, Hulsebosch HJ, Krieg SR, Bakker PM, Cormane RH. Immunocompetent cells in psoriasis. In situ immunophenotyping by monoclonal antibodies. Arch Dermatol Res. 1983;275(3):181-9.

152. Bos JD, Zonneveld I, Das PK, Krieg SR, van der Loos CM, Kapsenberg ML. The skin immune system (SIS): distribution and immunophenotype of lymphocyte subpopulations in normal human skin. J Invest Dermatol. 1987 V. 88, N. 5, P. 569573.

153. Boyman 0, Hefti HP, Conrad C, Nickoloff В J, Suter M, Nestle FO. Spontaneous development of psoriasis in a new animal model shows an essential role for resident T cells and tumor necrosis factor-alpha. J Exp Med. 2004, V. 199, N. 5, P. 731-6.

154. Brandt K, Bulfone-Paus S, Foster DC, Ruckert R. Interleukin-21 inhibits dendritic cell activation and maturation. Blood. 2003 Dec l;102(12):4090-8.

155. Breathnach S.M., Katz S.I. Cell-mediated immunity in cutaneous disease. Hum Pathol. 1986 V. 17, N. 2, P. 161-167.

156. Brubaker JO, Montaner LJ. Role of interleukin-13 in innate and adaptive immunity. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2001 Jun;47(4):637-51.

157. Cameron AL, Kirby B, Fei W, Griffiths CE. Natural killer and natural killer-T cells in psoriasis. Arch Dermatol Res. 2002 Nov;294(8):363-9.

158. Cameron AL, Kirby B, Griffiths CE. Circulating natural killer cells in psoriasis. Br J Dermatol. 2003 Jul; 149(1): 160-4.

159. Castells-Rodellas A, Castell JV, Ramirez-Bosca A, Nicolas JF, Valcuende-Cavero F, Thivolet J. Interleukin-6 in normal skin and psoriasis. Acta Derm. Venerol., 1992,72 (3), 165-8.

160. Chang C, Magracheva E, Kozlov S, Fong S, Tobin G, Kotenko S, Wlodawer A, Zdanov A. Crystal structure of interleukin-19 defines a new subfamily of helical cytokines. J Biol Chem. 2003 Jan 31;278(5):3308-13.

161. Chang EY, Hammerberg C, Fisher G et al. T-cell activation is potentiated by cytokines released by lesional psoriatic, but not normal, epidermis. Arch Dermatol 1992; 128: 1479-85.

162. Chang JCC, Smith LR, Froning KJ et al. CD8+ T cells in psoriatic lesions preferentially use T-cell receptor Vbeta.3 and/or V[beta]13.1 genes. Proc Natl Acad Sci USA; 1994;91:9282-6.

163. Chu A.C., Patterson J.A.K., Goldstein G., Berger C.L., Takesaki S., Edelson R.L. Thymopoietin-like substance in human skin. J. Invest. Dermatol., 1983, V. 81, P. 194-197.

164. Conti P, DiGioacchino M. MCP-1 and RANTES are mediators of acute and chronic inflammation. Allergy Asthma Proc. 2001, 22(3): 133-7.

165. Cook PW, Piepkorn M, Clegg CH et al. Transgenic expression of the human amphiregulin gene induces a psoriasis-like phenotype. J Clin Invest 1997; 100: 228694.

166. Cooper KD, Hammerberg C, Baadsgaard O, Elder JT, Chan LS, Sauder D.N., Voorhees JJ, Fisher G. IL-1 activity is reduced in psoriatic skin. Decreased IL-la and increased nonfunctional IL-1 p. J. Immunol., 1990, V. 144, N.12, P. 4593-4603.

167. Cooper KD, Hammerberg C, Baadsgaard O, Elder JT, Chan LS, Taylor RS, Voorhees JJ, Fisher G. Interleukin-1 in human skin: dysregulation in psoriasis. J. Invest. Dermat. 1990, Nov. 95 (5), 24S-26S.

168. Cork M.J., Duff G.W. Interleukin one. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993, P. 19-48.

169. Cormane R., Asghar S. Immunology and skin diseases. London. 1981.

170. Cormane RH, Hunyadi J, Hamerlinck F. The role of lymphoid cells and polymorphonuclear leukocytes in the pathogenesis of psoriasis. J Dermatol., 1976, V.3(5):245-59.

171. Cruikshank WW, Kornfeld H, Center DM. Interleukin-16. J Leukoc Biol. 2000 Jun;67(6):757-66.

172. Cumberbatch M, Dearman RJ, Antonopoulos C, Groves RW, Kimber I. Interleukin (IL)-l 8 induces Langerhans cell migration by a tumour necrosis factor-alpha- and IL-1 beta-dependent mechanism. Immunology, 2001, V.102 (3), p. 323330.

173. Dardenne M., Bach J.-F. The sheep cell rosette assay for the evaluation of thymic hormones. In: Biologycal activity of thymic hormones. Eds. V. Bekkum, D.W.Rotterdam. N.Y., 1975. - P. 235-243.

174. Davison S, Allen M, Harmer A, Vaughan R, Barker JN. Increased T-cell receptor vbeta2 chain expression in skin homing lymphocytes in psoriasis. Br. J. Dermatol., 1999, May, 140 (5), 845-8.

175. De Benedetti F, Meazza C, Martini A. Role of interleukin-6 in growth failure: an animal model. Horm Res. 2002;58 Suppl 1:24-7.

176. Debets R, Hegmans JP, Croughs P, Troost RJ, Prins JB, Benner R, Prens EP The IL-1 system in psoriatic skin: IL-1 antagonist sphere of influence in lesional psoriatic epidermis. J. Immunol., 1997, V. 158 (6), p. 2955-63.

177. Dinarello C.A. Interleukin-1 and its biologically related cytokines. Adv Immunol. 1989, V. 44, P. 153-205.

178. Diveu C, Lak-Hal AH, Froger J, Ravon E, Grimaud L, Barbier F, Hermann J, Gascan H, Chevalier S. Predominant expression of the long isoform of GP130-like (GPL) receptor is required for interleukin-31 signaling. Eur Cytokine Netw. 2004, 15(4):291-302.

179. Dreno B, Hallet MM, Moisan JP, Soulillou JP, Jacques Y. Interleukin 2-like material in human epidermis: a ligand for the human interleukin 2-receptor 55 kD alpha chain. J Invest Dermatol. 1989, V. 93, N. 1, P. 78-82.

180. Eckert R.L. Structure, function, and differentiation of the keratinocyte. Physiologic. Rev., 1989, V. 69, N. 4, P 1316-1346.

181. Edelson R.L., Fink J. The immunologic function of skin. Scien. Amer. 1985, V. 252, P. 46-53.

182. Elgjo K., Reichelt K.L. Strucure and function of growth inhibitory epidermal pentapeptide. Ann. N. J. Acad. Scien. Endocrine, metabolic and immunologic functions of keratinocytes. 1988, V. 548, P. 197-203.

183. Elgjo K., Reichelt K.L., Clausen O.P.F., Angelis P. Inhibitory epidermal pentapeptide modulates proliferation and differentiation of transformed mouse epidermal cells in vitro. Virchows Archiv. B. Cell. Pathol., 1991, V. 60, P. 161-164.

184. Elgjo K., Reichelt K.L., Hennings H., Michael D., Yuspa S.H. Purified epidermal pentapeptide inhibits proliferation and enhances terminal differentiation in cultured mouse epidermal cells. J. Invest. Dermatol., 1986, V. 87, P. 555-558.

185. Enk A.H. Interleukin 10. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993. P. 113-130.

186. Enk A.H., Angeloni V.L. et al. An essential role for Langerhans cell-derived IL-1 beta in the initiation of primary immune responses in skin. J Immunol. 1993, V. 150, N. 9, P. 3698-3704.

187. Enk AH, Katz SI. Early molecular events in the induction phase of contact sensitivity. Proc Natl Acad Sci USA. 1992, V. 89, N. 4, P. 1398-1402.

188. Enk AH, Saloga J, Becker D, Mohamadzadeh M, Knop J. Induction of hapten-specific tolerance by interleukin 10 in vivo. J Exp Med. 1994, V. 179, N. 4, P. 13971402.

189. Fantuzzi G. Lessons from interleukin-deficient mice: the interleukin-1 system. Acta Physiol Scand. 2001 Sep;173(l):5-9.

190. Farrar MA, Schreiber RD. The molecular cell biology of interferon-gamma and its receptor. Annu Rev Immunol. 1993, V. 11, P. 571-611.

191. Fernandez EJ, Wilken J, Thompson DA, Peiper SC, Lolis E. Comparison of the structure of vMIP-II with eotaxin-1, RANTES, and MCP-3 suggests a unique mechanism for CCR3 activation. Biochemistry. 2000 Oct 24;39(42): 12837-44

192. Fickenscher H, Pirzer H. Interleukin-26. Int Immunopharmacol. 2004, 4(5):609-13.

193. Fierlbeck G, Rassner G, Muller C. Psoriasis induced at the injection site of recombinant interferon gamma. Results of immunohistologic investigations. Arch. Dermatol., 1990, V. 126, N. 3, P. 351-355.

194. Fierlbeck G, Rassner G. Treatment of psoriasis and psoriatic arthritis with interferon gamma. J Invest. Dermatol. 1990, V. 95, N. 6, Supp. 1, P. 138S-141S.

195. Fransson J. Tumour necrosis factor-alpha does not influence proliferation and differentiation of healthy and psoriatic keratinocytes in a skin-equivalent model. Acta Derm Venereol. 2000 Nov-Dec;80(6):416-20.

196. Friedman R.M. Interferons. In Immunophysiology; The Role of Cells and Cytokines in Immunity and Inflammation. J.J. Oppenheim and E.M. Shevach, editors. Oxford University Press, New York, 1990. P. 194-209.

197. Gaffen SL, Liu KD. Overview of interleukin-2 function, production and clinical applications. Cytokine. 2004 Nov 7;28(3): 109-23.

198. Gaffen SL. Biology of recently discovered cytokines: interleukin-17- a unique inflammatory cytokine with roles in bone biology and arthritis. Arthritis Res Ther. 2004;6(6):240-7.

199. Gallagher G, Eskdale J, Jordan W, Peat J, Campbell J, Boniotto M, Lennon GP, Dickensheets H, Donnelly RP. Human interleukin-19 and its receptor: a potential role in the induction of Th2 responses. Int Immunopharmacol. 2004 May;4(5):615-26.

200. Gerwien J., Kaltoft K., Nielsen M., Nielsen M.B., Svejgaard A., Geisler C., Ropke C., Odum N. Staphylococcus enterotoxin A modulates interleukin 15-induced signaling and mitogenesis in human t cells. Tissue Antigens. 1998, V. 51, N. 2, P. 164-173.

201. Gold MH, Holy AK, Roenigk HH Jr. Beta-blocking drugs and psoriasis: a review of cutaneous side effects and retrospective analysis of their effects on psoriasis. J Am Acad Dermatol 1988; 19: 837-41.

202. Gomi T, Shiohara T, Munakata T, Imanishi K, Nagashima M. Interleukin 1 alpha, tumor necrosis factor alpha, and interferon gamma in psoriasis. Arch Dermatol. 1991, V. 127, N. 6, P. 827-830.

203. Gornall A.C., Bardawill C.J., David M.M. Determination of serum proteins by means of the biuret reaction. J. Biol. Chem. 1949. - Vol. 177. - P. 751-766.

204. Gottlieb SL, Gilleaudeau P, Johnson R et al. Response of psoriasis to a lymphocyte-selective toxin (DAB389IL-2) suggests a primary immune, but not keratinocyte, pathogenic basis. Nat Med 1995; 1: 442-7.

205. Griffiths C.E.M. Psoriasis. I. Pathogenesis. J. Americ. Acad. Dermatol. 1992, V. 27, N. 1,P. 98-101.

206. Grosfeld JL, Du X, Williams DA. Interleukin-11: its biology and prospects for clinical use. JPEN J Parenter Enteral Nutr. 1999 Sep-Oct;23(5 Suppl):S67-9.

207. Groves R.W., Sherman L., Mizutani H., Dower S.K., Kupper T.S. Detection of interleukin-1 receptors in human epidarmis. Induction of the type II receptor after organ culture and in psoriasis. Americ. J. Pathol., V. 145, P. 1048-1056.

208. Gubler U, Chua AO, Schoenhaut DS, Dwyer CM, McComas W, et al. Coexpression of two distinct genes is required to generate secreted bioactive cytotoxic lymphocyte maturation factor. Proc Natl Acad Sci U S A. 1991, V. 88, N. 10, P. 4143-4147.

209. Guilhou JJ, Meynadier J, Clot J. New concepts in the pathogenesis of psoriasis. Br J Dermatol 1978; 98: 585-92.

210. Haftek M. The Langerhans cells. In: Psoriasis. Eds. H.A.Roenigk, G.I.Maybach. N. Y., Basel, Hong-Kong, 1991, P. 343-370.

211. Hancock GE, Kaplan G, Cohn ZA. Keratinocyte growth regulation by the products of immune cells. J Exp Med. 1988, V. 168, N. 4, P. 1395-402.

212. Hanifin JM, Schneider LC, Leung DY, Ellis CN, Jaffe HS, Izu AE,t al. Recombinant interferon gamma therapy for atopic dermatitis. J Am Acad Dermatol. 1993, V. 28, N. 2, Pt 1,P. 189-197.

213. Heufler С, Topar G, Grasseger A, Stanzl U, Koch F, Romani N, Namen AE, Schuler G. Interleukin 7 is produced by murine and human keratinocytes. J Exp Med. 1993, V. 178, N. 3, P. 1109-1114.

214. Hillenkamp F., Karas M., Beavis R.C., Chait B.T. Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry of biopolymers. Anal. Chem., 1991, V. 63 (24), P. 1193A-1203A.

215. Hisada M, Kamiya S, Fujita K, Belladonna ML, Aoki T, Koyanagi Y, Mizuguchi J, Yoshimoto T.Potent antitumor activity of interleukin-27. Cancer Res. 2004, 64(3): 1152-6.

216. Homey B. Interleukin-31. A messenger of T-cells inducing urticaria and eczema reactions., Hautarzt. 2004, 55(10): 1004).

217. Hong K, Chu A, Ludviksson BR, Berg EL, Ehrhardt RO. IL-12, independently of IFN-gamma, plays a crucial role in the pathogenesis of a murine psoriasis-like skin disorder. J. Immunol, 1999, V. 162 (12), p.7480-91.

218. Huang BB, Bonish BK, Chaturvedi V, Qin JZ, Nickoloff BJ Keratinocyte CDw60 expression is modulated by both a Th-1 type cytokine IFN-gamma and Th-2 cytokines IL-4 and IL-13: relevance to psoriasis. J. Invest. Dermatol, 2001, V. 116 (2), p. 305-312.

219. Ikeda К, Nakajima H, Suzuki К, Kagami S, Hirose K, Suto A, Saito Y, Iwamoto I. Mast cells produce interleukin-25 upon Fc epsilon Rl-mediated activation. Blood,. 2003, V. 101(9), p. 3594-3596.

220. Jablonska S., Glinski W. Overview of immunology. . In: Psoriasis. Eds. H.A.Roenigk, G.I.Maybach. N. Y., Basel, Hong-Kong, 1991, P. 261-284.

221. Jinquan T, Larsen CG, Gesser B, Matsushima K, Thestrup-Pedersen K. Human IL-10 is a chemoattractant for CD8+ T lymphocytes and an inhibitor of IL-8-induced CD4+ T lymphocyte migration. J Immunol. 1993, V. 151, N. 9, P. 45454551.

222. Jones GE, Prigmore E, Calvez R, Hogan C, Dunn GA, Hirsch E, Wymann MP, Ridley AJ. Requirement for PI 3-kinase gamma in macrophage migration to MCP-1 and CSF-1. Exp Cell Res. 2003, 290(1): 120-31.

223. Kaminski M, Szmurlo A, Pawinska M, Jablonska S. Decreased natural killer cell activity in generalized pustular psoriasis (von Zumbusch type). Br J Dermatol. 1984 May;110(5):565-8.

224. Kato K., Ikeyama S. Takouki M., Shino A., Takeuchi M., Kakinuma A. Epithelial cell components immunoreact with anti-serum thymic factor (FTS) antibodies: possible association with intermediate-sized filaments. Cell. 1981, V. 24, P. 885-895.

225. Kerkhof van de P.C.M. The polymorphonuclear leukocytes. In: Psoriasis. Eds. H.A.Roenigk, G.I.Maybach. N. Y., Basel, Hong-Kong, 1991, P. 285-304.

226. Kim SH, Han SY, Azam T, Yoon DY, Dinarello CA.Interleukin-32: a cytokine and inducer of TNFalpha. Immunity. 2005 Jan;22(l):131-42.

227. King L.E., Gates J.R.E., Stoscheck C.M et al. Role of epidermal growth factor in psoriasis. In: Psoriasis. Eds. H.A.Roenigk, G.I.Maybach. N. Y., Basel, HongKong, 1991, P. 431-446.

228. Kishimoto T. Interleukin-6: from basic science to medicine 40 years in immunology. Annu Rev Immunol. 2005;23:1-21.

229. Komine M, Rao LS, Freedberg IM, Simon M, Milisavljevic V, Blumenberg M. Interleukin-1 induces transcription of keratin K6 in human epidermal keratinocytes. J. Invest. Dermatol., 2001, V.l 16 (2), p. 330-338

230. Kresbach H. Annotations on malignant cutaneous lymphomas. Z Hautkr. 1980 V. 55, N. 5, P. 302-308.

231. Kupper T.S. Production of cytokines by epithelial tissues. Amer. J. Dermatopathol., 1989, V. 11, N. 1, P. 69-73.

232. Kussmann M., Roepstorff P. Sample preparation techniques for peptides and proteins analyzed by MALDI-MS. Methods Mpl. Biol., 2000, N. 146, P. 405-424.

233. Laas Т., Olsson I., Soderberg L. High voltage isoelectric focusing with pharmalyte: field strength and temperature distribution, zone sharpening, isoelectric spectra and pi determinations. Anal Biochem 1980; Vol. 101; 449-461.

234. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; Vol. 227: 680-5.

235. Lambalgen P. van., Wauben -Penris P.J.J. Concepts in immunodermatology. Acta Derm. Venereol. 1989, V. 69, Sappl. 151, P. 56-60.

236. Laporte M, Galand P, Fokan D, de Graef C, Heenen M. Apoptosis in established and healing psoriasis. Dermatology. 2000. V. 200, N. 4, P. 314-316.

237. Larsen C.G., Anderson A.O., Oppenheim J.J., Matsushima K. Production of interleukin-8 by human dermal fibroblasts and keratinocytes in response to interleukin-1 or tumour necrosis factor. Immunology. 1989, V. 68, P. 31-36.

238. Laurincova B. Interleukin-1 family: from genes to human disease. Acta Univ Palacki Olomuc Fac Med. 2000;143:19-29.

239. Lee E, Trepicchio WL, Oestreicher JL, Pittman D, Wang F, Chamian F, Dhodapkar M, Krueger JG. Increased expression of interleukin 23 pi9 and p40 in lesional skin of patients with psoriasis vulgaris. J. Exp. Med., 2000, V. 199 (1), p. 125-130.

240. Lee SK, Surh CD. Role of interleukin-7 in bone and T-cell homeostasis. Immunol Rev. 2005 Dec;208:169-80.

241. Leonard WJ, Spolski R. Interleukin-21: a modulator of lymphoid proliferation, apoptosis and differentiation. Nat Rev Immunol. 2005 Sep;5(9):688-98.

242. Leroy S, Dubois S, Tenaud I, Chebassier N, Godard A, Jacques Y, Dreno B. Interleukin-15 expression in cutaneous T-cell lymphoma (mycosis fiingoides and Sezary syndrome). Br J Dermatol. 2001, V. 144, N. 5, P. 1016-1023.

243. Lester R.S. Psoriasis: a theory of pathogenesis. Sandorama, Sect. Dermatology, 1992, N.l-2, P. 31-35.

244. Leung DYM, Travers JB, Norris DA. The role of superantigens in skin disease. J Invest Dermatol 1995; 105:37S-42S.

245. Lew W., Bowcock A.M., Krueger J.G. Psoriasis vulgaris: cutaneous lymphoid tissue supports T-cell activation and 'Type 1' inflamatory gene expression. Treds in Immunol., 2004. V. 25, Is. 6, P. 295-305.

246. Li M, He S. Purification and characterization of recombinant human interleukin-29 expressed in Escherichia coli. J Biotechnol. 2006, V. 46, N. 2, P. 2226.

247. Lieschke GJ, Burgess AW. Granulocyte colony-stimulating factor and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (1). N Engl J Med. 1992, V. 327, N. 1, P. 28-35.

248. Liew FY, Mclnnes IB. Role of interleukin 15 and interleukin 18 in inflammatory response. Ann Rheum Dis. 2002, V. 61, Suppl 2:iil00-2.

249. Lodolce J, Burkett P, Koka R, Boone D, Chien M, Chan F, Madonia M, Chai S, Ma A. Interleukin-15 and the regulation of lymphoid homeostasis. Mol Immunol. 2002 Dec;39(9):537-44.

250. Lodolce JP, Burkett PR, Koka RM, Boone DL, Ma A. Regulation of lymphoid homeostasis by interleukin-15. Cytokine Growth Factor Rev. 2002 Dec;13(6):429-39.

251. Logsdon NJ, Jones ВС, Josephson K, Cook J, Walter MR. Comparison of interleukin-22 and interleukin-10 soluble receptor complexes. 2002, J. Interferon Cytokine Res., V. 22 (11), p. 1099-1112.

252. Longley B.J., Braverman I.M., Edelson R.L. Immunology and the skin: current concepts. Ann. N. J. Acad. Scien. Endocrine, metabolic and immunologic functions of keratinocytes. 1988, V. 548, P. 225-232.

253. Longley J., Rochester C. et al. Interleukin 11 (IL-11) in normal skin and sarkoidosis. J. Invest, Dermatol. 1993, V. 100, P. 524-530.

254. Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 1951. Vol. 193. - P. 265-275.

255. Luger T.A. Cytokine regulation in the skin. XV International congress of allergology and clinical immunology. 1994. Stockholm. Sweden, P. 26-34.

256. Luger T.A., Kock A., Kirnbauer R., Schwarz Т., Ansel J.C. Keratinocyte-derived interleukin 3. Ann. N. J. Acad. Scien. Endocrine, metabolic and immunologic functions of keratinocytes. 1988, V. 548, P. 253-261.

257. Luger T.A., Schwarz T. Therapeutic use of cytokine in dermatology. J. Amer. Acad. Dermatol., 1991, V. 24, N. 6, P. I, P. 915-926.

258. Luszczek W, Manczak M, Cislo M, Nockowski P, Wisniewski A, Jasek M, Kusnierczyk P. Gene for the activating natural killer cell receptor, KIR2DS1, is associated with susceptibility to psoriasis vulgaris. Hum Immunol. 2004 Jul;65(7):758-66.

259. Majewska M, Szczepanik M. The role of Toll-like receptors (TLR) in innate and adaptive immune responses and their function in immune response regulation. Postepy Hig Med Dosw. 2006, V. 60, P. 52-63.

260. Mangi MH, Newland AC. Interleukin-3 in hematology and oncology: current state of knowledge and future directions. Cytokines Cell Mol Ther. 1999 Jun;5(2):87-95.

261. Mansbridg J.N, Hanawalt P.C. Role of TGF-(3 in maturation of human epidermal keratinocytes. J. Invest. Dermat. 1988, V. 90, P. 336-341.

262. Martin R. Interleukin 4 treatment of psoriasis: are pleiotropic cytokines suitable therapies for autoimmune diseases? Trends Pharmacol Sci. 2003 Dec;24(12):613-616.

263. Massague J. The TGF-3 family of growth and differentiation factors. Cell. 1987, V. 49, P. 437-438.

264. Matsue H, Cruz PD Jr, Bergstresser PR, Takashima A.Langerhans cells are the major source of mRNA for IL-1 beta and MIP-1 alpha among unstimulated mouse epidermal cells. J Invest Dermatol. 1992, V. 99, N. 5, P. 537-541.

265. Maxam A.M., Gilbert W. A new method for sequencing DNA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1977, V. 74, P. 560-564.

266. Mclnnes IB, Gracie JA. Interleukin-15: a new cytokine target for the treatment of inflammatory diseases. Curr Opin Pharmacol. 2004 Aug;4(4):392-7.

267. McKenzie AN. Regulation of T helper type 2 cell immunity by interleukin-4 and interleukin-13. Pharmacol Ther. 2000 Nov;88(2): 143-51.

268. Misery L. Skin, immunity and nervous system. Brit. J. Dermat., 1997, V. 137, N. 6, P. 843-850.

269. Modi WS, Goedert JJ, Strathdee S, Buchbinder S, Detels R, Donfield S, O'Brien SJ, Winkler C. MCP-l-MCP-3-Eotaxin gene cluster influences HIV-1 transmission. AIDS. 2003 Nov 7;17(16):2357-65.

270. Moore KW, O'Garra A, de Waal Malefyt R, Vieira P, Mosmann TR. Interleukin-10. Annu Rev Immunol. 1993, V. 11, P. 165-190.

271. Morhenn VB, Pregerson-Rodan K, Mullen RH, Wood GS, Nickoloff BJ, Sherwin SA, Farber EM. Use of recombinant interferon gamma administered intramuscularly for the treatment of psoriasis. Arch Dermatol. 1987 V. 123, N. 12, P. 1633-1637.

272. Moseley ТА, Haudenschild DR, Rose L, Reddi AH. Interleukin-17 family and IL-17 receptors. Cytokine Growth Factor Rev. 2003 Apr; 14(2): 155-74.

273. Mosmann TR, Moore KW. The role of IL-10 in crossregulation of TH1 and TH2 responses. Immunol Today. 1991, V. 12, N. 3, P. A49-53.

274. Mukai Y, Iwaya K, Ogawa H, Mukai K.Involvement of Arp2/3 complex in MCP-1-induced chemotaxis. Biochem Biophys Res Commun. 2005 Aug 26;334(2):395-402.

275. Muneta Y, Kikuma R, Yoshihara K, Mori Y. Cloning, expression, and tissue distribution of bovine interleukin-21. Vet. Immunol. Immunopathol., 2003, V. 95 (12), p. 73-80.

276. Neumann R, Pohl-Markl H, Aberer E. Parenteral interferon-alpha treatment of psoriasis. Dermatologica. 1987, V. 175, N. 1, P. 23-28.

277. Nickoloff B.J., Karabin G.D., Barker J.N.W.N., Griffiths C.E.M., Sarma V. et al. Cellular licalization of interleukin-8 and its inducer, tumor necrosis factor-alpha in psoriasis. Amer. J. Pathol. 1991, V. 138, N. 1, P. 129-140.

278. Nickoloff В J, Bonish B, Huang BB, Porcelli SA. Characterization of a T cell line bearing natural killer receptors and capable of creating psoriasis in a SCID mouse model system. J Dermatol Sci. 2000 Dec;24(3):212-25.

279. Nicolas J.F., Auger С., Dardenne M, Thivolet J. Do epidermal cells produce thymic hormones in vivo? An immunohistochemical study using anti-thymic hormone antibodies. Thymus, 1988, V. 12, N. 3, p. 187-201.

280. Nicolas J.F., Dardenne M, Faure M, Gaucherand M, Gagneraut MC, Thivolet J, Bach JF. Production of a lymphocyte differentiating factor (ELDIF) by cultured human epidermal cells. Immunol Lett. 1985;9(2-3):65-8.

281. Nishimoto N., Ogata A. et al. Oncostatin M, leukemia inhibitory factor, and interleukin 6 induce the proliferation of human plasmacytoma cells via the common signal transducer, gpl30. J Exp Med. 1994, V. 179, N. 4, P. 1343-1347.

282. Noonberg S.B., Garovoy M.R., Hunt C.A. Characteristics of oligonucleotide uptake in human keratinocyte cultures. J. Invest. Dermatol. 1993, V. 101, P. 727-731.

283. Norris DA, Travers JB, Leung DYM. Lymphocyte activation in the pathogenesis of psoriasis. J Invest Dermatol 1997; 109: 1-4.

284. Nutt SL, Brady J, Hayakawa Y, Smyth MJ. Interleukin 21: a key player in lymphocyte maturation. Crit Rev Immunol. 2004;24(4):239-50.

285. Ohta Y, Hamada Y, Katsuoka K. Expression of IL-18 in psoriasis. Arch. Dermatol. Res., 2001, V. 293, P. 334-42.

286. Oral HB, Kotenko SV, Yilmaz M, Mani O, Zumkehr J, Blaser K, Akdis CA, Akdis M. Regulation of T cells and cytokines by the interleukin-10 (IL-lO)-family cytokines IL-19, IL-20, IL-22, IL-24 andIL-26. Eur J Immunol. 2005, 36(2):380-388.

287. Ortonne J.-P. Recent developments in the understanding of the pathogenesis of psoriasis. Br. J. Dermatol., 1999, V. 140, Suppl. 54, N. 4, p. 1-7.

288. Osterlund P, Veckman V, Siren J, Klucher KM, Hiscott J, Matikainen S, Julkunen I. Gene expression and antiviral activity of alpha/beta interferons andinterleukin-29 in virus-infected human myeloid dendritic cells. J Virol. 2005, 79(15):9608-17.

289. Ovigne JM, Baker BS, Brown DW, Powles AV, Fry L. Epidermal CD8+ T cells in chronic plaque psoriasis are Tel cells producing heterogeneous levels of interferon-gamma. Exp Dermatol., 2001, V. 10, N. 3, P. 168-174.

290. Ozturk G, Erbas D, Gelir E, Gulekon A, Imir T. Natural killer cell activity, serum immunoglobulins, complement proteins, and zinc levels in patients with psoriasis vulgaris. Immunol Invest. 2001 Aug;30(3):181-90.

291. Parker K.P., Sauder D.N., Kilian P.L. Presence of interleukin-1 receptors on keratinocytes. Ann. N. J. Acad. Scien. Endocrine, metabolic and immunologic functions of keratinocytes. 1988, V. 548, P.346-347.

292. Parrish-Novak J, Foster DC, Holly RD, Clegg CH. Interleukin-21 and the IL-21 receptor: novel effectors ofNK and T cell responses. 2002, J. Leukoc. Biol., V. 72 (5), p. 856-863.

293. Paul SR, Schendel P. The cloning and biological characterization of recombinant human interleukin 11. Int J Cell Cloning. 1992, V. 10, N. 3, P. 135-143.

294. Paul WE. Interleukin-4: a prototypic immunoregulatory lymphokine. Blood. 1991, V. 77, N. 9, P. 1859-1870.

295. Pease JE, Sabroe I. The role of interleukin-8 and its receptors in inflammatory lung disease: implications for therapy. Am J Respir Med. 2002; 1(1): 19-25.

296. Perera LP. Interleukin 15: its role in inflammation and immunity. Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 2000;48(6):457-64.

297. Piguet PF, Grau GE, Hauser C, Vassalli P. Tumor necrosis factor is a critical mediator in hapten induced irritant and contact hypersensitivity reactions. J Exp Med. 1991, V. 173, N. 3, P. 673-679.

298. Pittelkow M.R., Coffey R.J., Moses J., Moses H.L. Keratinocytes produce and are regulated by transforming growth factors. Ann. N. J. Acad. Scien. Endocrine, metabolic and immunologic functions of keratinocytes. 1988, V. 548, P. 211-224.

299. Pober JS, Kluger MS, Schechner JS Human endothelial cell presentation of antigen and the homing of memory/effector T cells to skin. Ann N Y Acad Sci. 2001 Sep;941:12-25.

300. Quesada JR, Gutterman JU. Psoriasis and alpha-interferon. Lancet, 1986, V. 28, N. 1 (8496), P. 1466-1468.

301. Ranges G.E., Figari I.S., Espevik Т., Palladino M.A. Inhibition of cytotoxic T cell development by transforming growth factor (3 and reversal by recombinant tumor necrosis factor a. J Exp. Med. 1987, V. 166, N. 4, P. 991-998.

302. Reddy P. Interleukin-18: recent advances. Curr Opin Hematol. 2004 Nov;l 1(6):405-10.

303. Reichelt K.L., Elgjo K., Edminson P.D. Isolation and structure of an epidermal mitosis inhibitis pentapeptide. Biochem. Boophys. Res. Commun. 1987, V. 145, N. 3, P. 1493-1501.

304. Renauld JC, Houssiau F, Druez C, Uyttenhove C, Vink A, Van Snick J. Interleukin-9. Int Rev Exp Pathol. 1993, V. 34, Pt A, P. 99-109.

305. Rheinwald J.G, Green H. Serial cultivation of strains of human epidermal keratinocytes: the formation of keratinizing colonies from single cells. Cell. 1975, V. 6, P. 331-343.

306. Rice R.H, Green H. Presence in human epidermal cells of a soluble protein precursor of the cross-linked envelope: activation of the cross-linking by calcium ions. Cell. 1979, V. 18, P. 681-694.

307. Rich B.E, Kupper T.S. Cytokines: IL-20 a new effector in skin inflammation. Current Biology, 2001, V. 11, P. R531-R534.

308. Rivas JM, Ullrich SE. Systemic suppression of delayed-type hypersensitivity by supernatants from UV-irradiated keratinocytes. An essential role for keratinocyte-derived IL-10. J Immunol. 1992, V. 149, N. 12, P. 3865-3671.

309. Robek MD, Boyd BS, Chisari FV. Lambda interferon inhibits hepatitis В and С virus replication. J Virol. 2005, 79(6):3851-4.

310. Roberts A.B, Sporn M.B. The transforming growth factor-betas. In Handbook of experimental pharmacology. I Peptide growth factors and their receptors. M.B.Sporn and A.B. Roberts, editor. Springer Verlag, Berlin. 1990. P. 419-472.

311. Rode HJ, Janssen W, Rosen-Wolff A, Bugert JJ, Thein P, Becker Y, Darai G. The genome of equine herpesvirus type 2 harbors an interleukin 10 (ILlO)-like gene. Virus Genes. 1993, V. 7,N. 1, P. 111-116.

312. Romani N, Heufler C. et al. Cytokines and Langerhans cells. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993. P. 345-364.

313. Romero L.I., Ikejima Т., Pincus S.H. In situ localization of interleukin-1 in normal and psoriatic skin. J. Investig. Dermatol. 1989, V. 93, N. 4, P. 518-522.

314. Rosmarin D, Strober BE. The potential of interleukin 12 inhibition in the treatment of psoriasis. J Drugs Dermatol. 2005 May-Jun;4(3):318-25.

315. Ruckert R, Asadullah K, Seifert M, Budagian VM, Arnold R, Trombotto C, Paus R, Bulfone-Paus S. Inhibition of keratinocyte apoptosis by IL-15: a new parameter in the pathogenesis of psoriasis? J Immunol. 2000, V. 165, N. 4, P. 22402250.

316. Salim A, Emerson R. Targeting interleukin-2 as a treatment for psoriasis. Curr Opin Investig Drugs. 2001 Nov;2(l l):1546-8.

317. Scarborough D.E. Cytokine modulation of pituitary hormone secretion. Ann NY Acad Sci. 1990, V. 594, P. 169-187.

318. Schmidt G., Tannhauser S.J. A method for the detection of desoxyribonucleic acid, ribonucleic acid and phosphoproteins in animal tissues. J. Biol. Chem. 1945. -Vol. 161.-P. 83-89.

319. Schon MP, Detmar M, Parker CM. Murine psoriasis-like disorder induced by naive CD4+ T cells. Nat Med 1997; 3: 183-8.

320. Schroder J.M., Sticherling M. et al. Interleukin 8 and structurally related cytokines. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993. P. 89-112.

321. Schwarz Т., Luger T.A. Pharmacology of cytokines in the skin. In Pharmacology of The Skin. H. Muhktar, editor. CRC Press, Boca Ration, FL. 1992. P. 283-314.

322. Seifter S. A method for the detection of carbo-hydrates by the anthrone reagent. Arch. Biochem. 1950. Vol. 25. - P. 191-193.

323. Shimada S, Katz SI. The skin as an immunologic organ. Arch Pathol Lab Med. 1988, V. 112, N. 3,P. 231-234.

324. Sille F.C., Visser A., Boes M. T cell priming by tissue-derived dendritic cells: New insights from recent murine studies. Cellular Immunology. 2005. V. 237 (2): 7785.

325. Sivakumar PV, Foster DC, Clegg CH. Interleukin-21 is a T-helper cytokine that regulates humoral immunity and cell-mediated anti-tumour responses. Immunology. 2004 Jun;l 12(2): 177-82.

326. Skov L, Chan LS, Fox DA et al. Lesional psoriatic T cells contain the capacity to induce a T cell activation molecule CDw60 on normal keratinocytes. Am J Pathol 1997; 150: 675-83.

327. Sporn M.B., Roberts A.B. Peptide growth factors and inflammation, tissue repair, and cancer. J. Clin. Investig. 1986, V. 78, P. 329-332.

328. Sporn M.B., Roberts A.B. Peptide growth factors are multifunctional. Nature. 1988, V. 332, N. 6161, P. 217-219.

329. Sporn M.B., Roberts A.B., Wakefield L.M., Assoian R.K. Transforming growth factor-P: biological function and chemical structure. Science. 1986, V. 233, P. 532-534.

330. Stingl G. Antigen presenting mechanisms in skin. XV International congress of allergology and clinical immunology. 1994. Stockholm. Sweden, P. 13-24.

331. Streilein JW, Grammer SF, Yoshikawa T, Demidem A, Vermeer M. Functional dichotomy between Langerhans cells that present antigen to naive and to memory/effector T lymphocytes. Immunol Rev. 1990 Oct; 117:159-83.

332. Streilein JW, Taylor JR, Vincek V, Kurimoto I, Shimizu T, Tie C, Golomb C. Immune surveillance and sunlight-induced skin cancer. Immunol Today. 1994, V. 15, N. 4, P. 174-179.

333. Streilein JW. Skin-associated lymphoid tissues (SALT): origins and functions. J Invest Dermatol. 1983, V. 80, Suppl., P. 12s-16s.

334. Takatsu К. Role of interleukin-5 in immune regulation and inflammation. Nippon Rinsho. 2004 Oct;62( 10): 1941 -51.

335. Takematsu H., Ohkochi K., Terui Т., Tagami H. Psoriatic lesions do not respond to oral administration of lobenzarit disodium, an inhibitor of interleukin-1 production. Dermatologia. 1989, V. 179, N. 2, P. 64-66.

336. Taniguchi T. Structure and function of IL-2 and IL-2 receptors. Behring Inst Mitt. 1992, V. 91, P. 87-95.

337. Taylor C, Burns DA, Wiselka MJ. Extensive psoriasis induced by interferon alfa treatment for chronic hepatitis C. Postgrad Med J. 2000, V. 76, N. 896, P. 365367.

338. Teunissen MB, Koomen CW, de Waal Malefyt R, Wierenga EA, Bos JD. Interleukin-17 and interferon-gamma synergize in the enhancement of proinflammatory cytokine production by human keratinocytes. J.Invest. Dermatol., 1998, V. Ill (4),p. 645-649.

339. Trefzer U, Brockhaus M, Lotscher H, et al. The 55-kD tumor necrosis factor receptor on human keratinocytes is regulated by tumor necrosis factor-alpha and by ultraviolet В radiation. J Clin Invest. 1993, V. 92, N. 1, P. 462-70.

340. Trinchieri G. Interleukin-12 and its role in the generation of Thl cells. Immunol Today. 1993, V. 14, N. 7, P. 335-338.

341. Ueno M, Sonoda Y, Funakoshi M, Mukaida N, Nose K, Kasahara T. Differential induction of JE/MCP-1 in subclones from a murine macrophage cell line, RAW 264.7: role of kappaB-3 binding protein. Cytokine. 2000, 12(3):207-19.

342. Valdimarsson H., Baker B.S., Jonsodottir I., Fry L. Psoriasis: a disease of abnormal keratinocyte proliferation induced by T lymphocytes. Immunology Today, 1986, V. 7, P. 256-263.

343. Van der Fits L, van der Wei LI, Laman JD, Prens EP, Verschuren MC. In psoriasis lesional skin the type I interferon signaling pathway is activated, whereas interferon-alpha sensitivity is unaltered. J Invest Dermatol., 2004, V. 122, N. 1, P. 5160.

344. Victor FC, Gottlieb AB. TNF-alpha and apoptosis: implications for the pathogenesis and treatment of psoriasis. J Drugs Dermatol. 2002. V. 1, N. 3, P. 264275.

345. Villarino AV, Hunter С A. Biology of recently discovered cytokines: discerning the pro- and anti-inflammatory properties of interleukin-27. Arthritis Res Ther. 2004;6(5):225-33.

346. Wahl S.M. 1993. Regulation of tissue inflammation, repair, and fibrosis by transforming growth factor beta. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993. P. 19-48.

347. Waldmann ТА. Targeting the interleukin-15/interleukin-15 receptor system in inflammatory autoimmune diseases. Arthritis Res Ther. 2004;6(4): 174-7.

348. Waldmann TA.The IL-2/IL-2 receptor system: a target for rational immune intervention. Immunol Today. 1993, V. 14, N. 6, P. 264-270.

349. Wang M, Tan Z, Zhang R, Kotenko SV, Liang P. Interleukin 24 (MDA-7/MOB-5) signals through two heterodimeric receptors, IL-22R1/IL-20R2 and IL-20R1/IL-20R2. J Biol Chem. 2002, V.277(9), p. 7341-7347.

350. Wang YQ, Ugai S, Shimozato O, Yu L, Kawamura K, Yamamoto H, Yamaguchi T, Saisho H, Tagawa M. Induction of systemic immunity by expression of interleukin-23 in murine colon carcinoma cells. Int. J. Cancer, 2003, V. 105 (6), p. 820-824.

351. Washington EA, Kimpton WG, Holder JE, Cahill RN. Role of the thymus in the generation of skin-homing alpha beta and gamma delta virgin T cells. Eur J Immunol. 1995 Mar;25(3):723-7.

352. Weber-Matthiesen K, Sterry W. Organization of the monocyte/macrophage system of normal human skin. J. Invest. Dermatol. 1990, V. 95, N. 1, P. 83-89.

353. Wilson КС, Center DM, Cruikshank WW. The effect of interleukin-16 and its precursor on T lymphocyte activation and growth. Growth Factors. 2004 Jun;22(2):97-104.

354. Witowski J, Ksiazek K, Jorres A. Interleukin-17: a mediator of inflammatory responses. Cell Mol Life Sci. 2004 Mar;61(5):567-79.

355. Wolfer LU, Goerdt S, Schroder K, Zouboulis CC, Orfanos CE. Interferon-alpha-induced psoriasis vulgaris. Hautarzt, 1996, V. 47, N. 2, P. 124-128.

356. Wollenberg A., Mommaas M., Oppel Т., Schottdorf E.M., Gunther S., Moderer M. Expression and function of the mannose receptor CD206 on epidermal dendritic cells in inflammatory skin diseases. J Invest Dermatol. 2002 , V. 118, N. 2, P. 32734.

357. Wrone-Smith T, Mitra RS, Thompson CD et al. Keratinocytes derived from psoriatic plaques are resistant to apoptosis compared with normal skin. Am J Pathol 1997; 151: 1321-29.

358. Wrone-Smith T, Nickoloff В J. Dermal injection of immunocytes induces psoriasis. J Clin Invest 1996; 98: 1878-87.

359. Yang K, Puel A, Zhang S, Eidenschenk C, Ku CL, Casrouge A, Picard C, von Bernuth H, Senechal B, Plancoulaine S, Al-Hajjar S, Al-Ghonaium A, Marodi L, Davidson D, Speert D, Roifman C, Garty BZ, Ozinsky A, Barrat FJ, Coffman RL,

360. Yang Y, Yoo HM, Choi I, Pyun KH, Byun SM, Ha H. Interleukin 4-induced proliferation in normal human keratinocytes is associated with c-myc gene expression and inhibited by genistein. J. Invest. Dermatol., 1996, 107 (3), p. 367-72.

361. Yano S, Komine M, Fujimoto M, Okochi H, Tamaki K. Interleukin 15 induces the signals of epidermal proliferation through ERK and PI 3-kinase in a human epidermal keratinocyte cell line, HaCaT. Biochem Biophys Res Commun. 2003, 301 (4), p. 841-7.

362. Yawalkar N, Karlen S, Hunger R, Brand CU, Braathen LR. Expression of interleukin-12 is increased in psoriatic skin. J. Invest. Dermatol., 1998, Dec.V. Ill (6), pl053-7.

363. Yoshizaki K., Kishimoto T. Interleukin 6. In Epidermal growth factors and cytokines. T.A. Luger and T. Schwarz, editors. Marcel Dekker, Inc., New York. 1993. P. 49-62.

364. Zabeau L, Gevaert P, Bachert C, Tavernier J. Interleukin-5, eosinophilic diseases and therapeutic intervention. Curr Drug Targets Inflamm Allergy. 2003 Dec;2(4):319-28.

365. Zdanov A. Structural features of the interleukin-10 family of cytokines. Curr PharmDes. 2004; 10(31):3873-84.

366. Zhang M, Zhang YZ,Wang S, Wang L, Li FY. Dendritic cells, natural killer cells and adhesion molecules in psoriasis. Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2004 Sep;35(5):626-9.

367. Zurawski G, de Vries JE. Interleukin 13, an interleukin 4-like cytokine that acts on monocytes and В cells, but not on T cells. Immunol Today. 1994, V. 15, N. 1, P. 19-26.