Иммунотерапия в коррекции дефектов функционирования нейтрофильных гранулоцитов при нетипично протекающих гнойно-воспалительных заболеваниях у детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Чапурина Валерия Николаевна

• Чапурина Валерия Николаевна
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Чапурина Валерия Николаевна

Оглавление

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Нейтрофильные гранулоциты - основные «игроки» противоинфекционной защиты

1.2. Дефекты функционирования нейтрофильных гранулоцитов

1.3. Дефекты иммунной системы при различных гнойно-воспалительных заболеваниях

1.4 Иммунотерапия в лечении нетипично протекающих гнойно-воспалительных заболеваний

1.5 Гексапептид в лечении иммунозависимых заболеваний

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Объект исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Оценка клинического статуса

2.2.2. Лабораторные методы исследования

2.2.2.1. Фенотипирование субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов

2.2.2.2. Определение кислородзависимой микробицидной активности нейтрофильных гранулоцитов

2.2.3. Оценка фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов

2.2.3. Культуральные методы

2.2.4. Статистические методы

ГЛАВА 3. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМЫ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ ДЕТЕЙ С НЕТИПИЧНО ПРОТЕКАЮЩИМИ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ52 3.1. Фенотип субпопуляций и функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов детей с гнойными заболеваниями мягких тканей

3.2. Негативная трансформация фенотипа субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов, ассоциированная с дефектами функциональной активности при деструктивной пневмонии у детей

3.3. Вариации фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+ и CD16+CD64+CD32+CD11b+ нейтрофильных гранулоцитов, ассоциированные с нарушениями фагоцитарной и микробицидной активности при различных

формах острого перитонита у детей

ГЛАВА 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ПЕРЕПРОГРАММИРОВАНИЕ IN VITRO ФЕНОТИПА СУБПОПУЛЯЦИЙ CD16+CD64-CD32+CD11b+ И CD 16+CD64+CD32+CD 11b+ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ

4.1. Эффекты влияния гексапептида на фенотип субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов условно-здоровых детей

4.2. Ремоделирование трансформированного при гнойно-воспалительных процессах мягких тканей фенотипа субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов под влиянием гексапептида

4.3. Ремоделирующие эффекты гексапептида в эксперименте in vitro на трансформированный фенотип субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов детей раннего возраста с острой деструктивной пневмонией

4.4. Ремоделирующие эффекты гексапептида в эксперименте in vitro на трансформированный фенотип субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов

детей с различными формами острых перитонитов

ГЛАВА 5. ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОГРАММ ИММУКОРРЕКЦИИ ДЕФЕКТОВ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ ПРИ НЕТИПИЧНО ПРОТЕКАЮЩИХ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ

ЗАБОЛЕВАНИЯХ У ДЕТЕЙ

5.1 Разработка программ таргетной иммуномодулирующей терапии с включением гексапептида в комплексное послеоперационное лечение детей с нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями

5.2. Иммуномодулирующие эффекты влияния гексапептида на активность нейтрофильных гранулоцитов у детей при острой деструктивной пневмонии

5.3. Иммуномодулирующее влияние гексапептида на активность нейтрофильных гранулоцитов у детей с разными формами острых перитонитов

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунотерапия в коррекции дефектов функционирования нейтрофильных гранулоцитов при нетипично протекающих гнойно-воспалительных заболеваниях у детей»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Проблема лечения гнойно-воспалительных заболеваний (ГВЗ) у детей остается актуальной для практического здравоохранения из-за их непрекращающегося роста и частых послеоперационных осложнений [32, 125, 202, 239]. Особенностями гнойных инфекций являются расширение спектра и увеличение количественного соотношения условно-патогенных микроорганизмов, а также изменения в составе симбионтной микрофлоры кожи, снижение иммунитета в связи с ухудшающейся экологией и возрастающей антибиотикорезистентностью [37, 112].

В последние десятилетие наблюдается увеличение количества пациентов, как детей, так и взрослых, имеющих клинические признаки иммунокомпрометированности на фоне дисрегуляторных процессов в иммунной системе (ИС) или приобретенных иммунодефицитов. Нетипично протекающие инфекционно-воспалительные заболевания (ИВЗ) различной этиологии у таких пациентов, в том числе тяжелые ГВЗ, а именно такие как острая деструктивная пневмония, острые перитониты, острый гематогенный остеомиелит и сепсис, плохо поддаются лечению в рамках клинических рекомендаций и/или стандартов и требуют проведения таргетной заместительной или иммуномодулирующей терапии в зависимости от вида выявленных дефектов функционирования ИС [21, 31, 58, 60].

По данным Всемирной организации здравоохранения современная антибиотикотерапия зачастую неэффективна не только из-за новых механизмов бактериальной устойчивости, наблюдающейся во всем мире и представляющей серьезную проблему, но и вследствие нарушений функционирования иммунной противобактериальной защиты [102, 155], в первую очередь, нейтрофильных гранулоцитов (НГ).

НГ осуществляют решающую роль в антибактериальной защите за счет эффекторных функций: фагоцитоза, дегрануляции, образования нейтрофильных

внеклеточных ловушек и эктосом. НГ по современным представлениям являются мультифункциональными клетками, способными не только действовать как эффекторы врожденного иммунитета, но и осуществлять позитивную и негативную модуляцию адаптивной иммунной системы [57, 64, 171, 194, 215]. «В последние годы показано, что существуют многочисленные субпопуляции НГ, обладающие различной функциональной активностью, которая находится в непосредственной зависимости от их фенотипических особенностей: количества и плотности таких экспрессируемых рецепторов, как CD11b/CD18, CD10, CD15, CD16, CD32, CD64. Данные субпопуляции способны оказывать как позитивное регуляторное влияние на течение инфекционного процесса, так и обладать супрессорным эффектом» [56, 57, 110]. У иммунокомпрометированных пациентов установлен дефицит количества НГ, негативная трансформация фенотипа субпопуляций, обуславливающая нарушение эффекторных функции НГ, и, как следствие, возникновению повторных и/или тяжело протекающих гнойно-воспалительных процессов [56, 191]. Также имеются данные, доказывающие, что при тяжелых бактериальных инфекциях у новорожденных в периферической крови (ПК) увеличивается содержание НГ субпопуляции СВ16+СВ64+СВ32+СВ11Ь+ [57, 72, 82]. При этом малоизучены фенотипические изменения этой субпопуляции у детей с ГВЗ.

Всемирная организация здравоохранения призывает не только к разработке новых антибиотиков для борьбы с тяжелыми бактериальными инфекциями, но и к проведению научных исследований, направленных на разработку новых методов диагностики и иммунотерапии [102, 155]. В связи с вышесказанным очевидна необходимость создания новых программ иммунотерапии для иммунокомпрометированных детей с нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями с целью оптимизации традиционной терапии и уменьшения частоты послеоперационных осложнений.

Степень разработанности темы исследования

Установлено, что неадекватность реакций врожденного иммунитета играет ключевую роль в развитии ГВЗ, предшествуя их возникновению и тяжелому или затяжному течению, что связано с особенностями нарушений функционирования НГ [64, 82, 129, 222, 229]. Выявлено, что НГ проявляют пластичность и способны формировать различные стратегии воспалительного ответа, взаимодействуя с множеством клеток ИС [53, 63, 64, 194]. Определены варианты негативной трансформации фенотипа субпопуляций СD64+CD16+CD32+CD11b+НГ при хронических бактериальных инфекциях у взрослых пациентов, новорожденных детей с ГВЗ, детей с повторными острыми респираторными вирусными инфекциями, ко-инфекциями и сопряженные с ними нарушения функциональной активности НГ [21, 31, 110].

В связи с изложенным, актуальной является необходимость разработки различных подходов к иммунотерапии, таргетно направленной на восстановление нормального функционирования НГ при различных нетипично протекающих гнойно-воспалительных заболеваний у детей.

Цель исследования: разработать программы иммунотерапии, направленные на коррекцию дисфункций и измененного фенотипа 2-х субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов иммунокомпрометированных детей с различными нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями, и оценить их клинико-иммунологическую эффективность.

Задачи исследования:

1) Изучить особенности фенотипа субпопуляций

CD16+СD64-СD32+СD11b+ и CD16+СD64+СD32+СD11b+, а также эффекторных функций нейтрофильных гранулоцитов иммунокомпрометированных детей разного возраста с нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями: гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей, острой деструктивной пневмонией, различными формами острых перитонитов.

2) Исследовать в системе in vitro эффекты влияния гексапептида - Arginyl-alpha-Aspartyl-Lysyl-Valyl-Tyrosyl-Argmme - синтетического аналога активного центра гормона тимуса тимопоэтина, на субпопуляции CD16+CD64-CD32+CD11b+ и CD16+CD64+CD32+CD11b+ и на эффекторные функции нейтрофильных гранулоцитов условно-здоровых детей раннего возраста.

3) В системе in vitro провести исследование влияния гексапептида на фенотип субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+, CD16+CD64+CD32+CD11b+ и эффекторные функции нейтрофильных гранулоцитов иммунокомпрометированных детей с различными нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями.

4) Разработать программы иммунотерапии с применением фармпрепарата, основной действующей субстанцией которого является гексапептид, для иммунокомпрометированных детей разного возраста с различными нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями с учетом выявленных особенностей клинических проявлений, степени выраженности нарушений эффекторных функций нейтрофильных гранулоцитов и особенностей измененного фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+ и CD16+CD64+CD32+CD11b+.

5) Изучить особенности эффектов влияния 3-х разработанных программ иммунотерапии на измененный фенотип субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD1 lb+НГ, CD16+CD64+CD32+CD11b+HT и эффекторные дисфункции нейтрофильных гранулоцитов иммунокомпрометированных детей разного возраста с различными нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями.

6) Оценить клиническую эффективность 3-х разработанных программ таргетной иммунотерапии с использованием фармпрепарата, основной действующей субстанцией которого является гексапептид, у детей разных

возрастных групп с различными нетипично протекающими гнойно -воспалительными заболеваниями.

Научная новизна

1) Впервые в системе in vitro оценены эффекты влияния гексапептида (ГП) - синтетического аналога активного центра гормона тимуса тимопоэтина, на субпопуляции CD16+СD64-СD32+СD11b+НГ и CD16+СD64+СD32+СD11b+НГ и на эффекторные функции НГ условно-здоровых детей раннего возраста.

2) Определены впервые особенности вариантов фенотипа субпопуляций CD16+СD64-СD32+СD11b+НГ и CD16+СD64+СD32+СD11b+НГ и эффекторных функций НГ иммунокомпрометированных детей с нетипично протекающими ГВЗ разных возрастных групп: при гнойно-воспалительных заболеваниях мягких тканей, острой деструктивной пневмонии, различных формах острых перитонитов.

3) Получены новые данные об эффектах влияния ГП в системе in vitro на выявленные варианты измененного фенотипа субпопуляций CD16+СD64-СD32+СD11b+НГ и CD16+СD64+СD32+СD11b+НГ и их эффекторные функции при гнойно-воспалительных заболеваниях мягких тканей, острой деструктивной пневмонии, местном неотграниченном и разлитом острых перитонитах у детей разных возрастных групп.

4) Разработаны 3 новые программы таргетной иммунотерапии с применением фармпрепарата, основной действующей субстанцией которого является гексапептид (фпГП), ориентированные на клинико-иммунологические особенности гнойно-воспалительных процессов при острой деструктивной пневмонии и различных формах острых перитонитов у детей разного возраста.

5) Впервые продемонстрирована клинико-иммунологическая эффективность 3-х разработанных программ таргетной иммунотерапии с использованием фпГП у иммунокомпрометированных детей разного возраста с различными нетипично протекающими ГВЗ.

Теоретическая значимость работы

1) Представлены новые данные об особенностях вариантов фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+HT и CD16+CD64+CD32+CD11b+HT детей разного возраста с гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей, острой деструктивной пневмонией, различными формами острых перитонитов, что вносит новый вклад в понимание механизмов иммунопатогенеза нетипично протекающих гнойно-воспалительных заболеваний.

2) Вариативность измененного фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+HT и CD16+CD64+CD32+CD11b+HT и нарушение эффекторных функций НГ обуславливает возникновение различных нетипично протекающих гнойно-воспалительных заболеваний у детей разного возраста.

3) Продемонстрирована в эксперименте in vitro возможность позитивного ремоделирования измененного фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+Hr, CD16+CD64+CD32+CD11b+HT и нарушенных эффекторных функций НГ детей разного возраста с различными нетипично протекающими ГВЗ.

4) Позитивные клинико-иммунологические эффекты, полученные при оценке влияния иммунотерапии с использованием 3-х разных программ применения фпГП в комплексе лечебных мероприятий у иммунокомпрометированных детей разного возраста с различными нетипично протекающими ГВЗ, теоретически обосновывают необходимость проведения таргетной коррекции нарушений функционирования НГ.

Практическая значимость работы

1) Разработан алгоритм иммунодиагностики нарушений функционирования НГ при различных нетипично протекающих ГВЗ у

иммунокомпрометированных детей разного возраста, включающий оценку количества субпопуляций НГ CD16+CD64-CD32+CD11b+,

CD16+CD64+CD32+CD11b+ и их фенотипа, а также эффекторных функций -

фагоцитоз с оценкой количества активно фагоцитирующих НГ, процессов захвата и переваривания бактерий, спонтанная и индуцированная кислород-зависимая микробицидность.

2) На базе данных о вариантах трансформации фенотипа субпопуляций НГ и особенностях иммуномодулирующих эффектов влияния ГП в условиях эксперимента разработаны 3 программы иммунотерапии с использованием фпГП для коррекции различных по степени выраженности вариантов измененного фенотипа 2-х субпопуляций НГ и дефектов эффекторных функций НГ у детей с нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями.

3) Три разработанные программы таргетной иммунотерапии с использованием фпГП у иммунокомпрометированных детей разного возраста с различными нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями, продемонстрировали позитивную клинико-иммунологическую эффективность.

Методология и методы исследования

Работа отвечает требованиям биомедицинской этики, принципам методов последовательного использования научного познания, одобрена локальным независимым этическим комитетом ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России протокол № 80 от 27.09.2019. Методология исследования построена на базе анализа отечественной и зарубежной литературы, что позволило определить степень актуальности и разработанности темы, а также сформулировать цель и задачи. Для решения поставленных задач проведено проспективное когортное исследование, в котором использовался сравнительный анализ собственных результатов клинического и иммунологического исследований в оценке эффективности лечения иммунокомпрометированных пациентов с нетипично протекающими ГВЗ.

Положения, выносимые на защиту

1) При нетипично протекающих гнойно-воспалительных заболеваниях

мягких тканей, острой деструктивной пневмонии, различных формах острых перитонитов у детей разного возраста имеет место негативная трансформация фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+HT и

CD16+CD64+CD32+CD11b+HT, отрицательно влияющая на процессы адекватного вовлечения нейтрофильных гранулоцитов в воспалительный процесс, что ассоциировано с нарушением их эффекторных и микробицидных функций.

2) Гексапептид в эксперименте in vitro продемонстрировал позитивные иммуномодулирующие эффекты: не влиял на нормальные эффекторные функции и фенотип 2-х субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов условно-здоровых детей, при этом способствовал перепрограммированию различных вариантов негативно измененного фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD1 lb+НГ и CD16+CD64+CD32+CD11b+Hr, восстановлению фагоцитарной и микробицидной активности нейтрофильных гранулоцитов детей с нетипично протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями.

3) Три разработанные программы иммунотерапии с фармпрепаратом, основной действующей субстанцией которого является гексапептид, созданные с учетом клинических проявлений и выявленных вариантов измененного фенотипа субпопуляций CD16+CD64-CD32+CD11b+HT, CD16+CD64+CD32+CD11b+HT, а также дефектов эффекторных функций нейтрофильных гранулоцитов, отличающиеся по режимам парентерального введения и длительности применения у иммунокомпрометированных с острой деструктивно пневмонией и различными формами острых перитонитов, продемонстрировали клинико-иммунологическую эффективность.

Степень достоверности и апробация результатов

Научные данные, представленные в исследовании, положения, выносимые на защиту, и выводы сформулированы на основе анализа теоретической базы и достаточного объёма наблюдений, продуманного методологического и

методического дизайна исследования и адекватного статистического анализа, подтверждают высокий уровень достоверности результатов.

Методы исследования (клинические, иммунологические, культуральные, статистические) соответствуют поставленным задачам. Выводы и практические рекомендации логично вытекают из поставленных цели, задач исследования и анализа полученных данных.

Материалы диссертации представлены на Международном медицинском форуме «Вузовская наука. Инновации» (г. Москва, 2020 и 2022 г.г.), на EAACI Congress 2020 (Лондоне, 2020 г.); EAACI Hybrid Congress 2021 (Мадрид-Краков,

2021 г.); VIII Всероссийской междисциплинарной научно-практической конференции с международным участием «Социально-значимые и особо опасные инфекционные заболевания» (г. Сочи, 2021 г.), III объединенном научном форуме физиологов, биохимиков и молекулярных биологов (г. Сочи,

2022 г.), восьмой научно-практической школе-конференции по аллергологии и клинической иммунологи (г. Сочи, 2022 г.).

Публикации по теме диссертационной работы

По теме диссертационной работы опубликовано 6 научных статей, из них 2 статьи в журналах ВАК, 3 статей в базах цитирования Scopus и WoS. Количество печатных страниц - 64.

Личный вклад автора в получение результатов

Диссертант принимал личное участие на всех этапах исследования. Самостоятельно осуществляла выполнение экспериментальной части исследования, иммунологическое обследование пациентов, вошедших в исследование, анализ и статистическую обработку данных. Под руководством научного руководителя разработана методология исследования, дизайн исследования, разработаны программы таргетной иммуномодулирующей терапии с использованием фпГП. Подбор групп и клиническое обследование пациентов проводился автором совместно с сотрудниками кафедры хирургических болезней детского возраста и хирургического отделения № 1

ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» Министерства здравоохранения Краснодарского края. Написание текста и оформление диссертационной работы проведены лично автором под контролем научного руководителя.

Внедрение результатов исследования

Новые данные, полученные автором при проведении настоящего исследования, внедрены в:

- учебный процесс ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России: на кафедре клинической иммунологии, аллергологии и лабораторной диагностики ФПК и ППС и кафедре хирургических болезней детского возраста в форме лекций и семинарских занятий для студентов, ординаторов, аспирантов, слушателей циклов повышения квалификации по фундаментальной и клинической иммунологии, клинической лабораторной диагностике, хирургии детского возраста;

- разработанный алгоритм иммунодиагностики дефектов функционирования нейтрофильных гранулоцитов у детей разного возраста с различными нетипично-протекающими гнойно-воспалительными заболеваниями внедрен в диагностическую работу врачей педиатров ГБУЗ СК «Городской детской поликлиники № 3 г. Ставрополя»;

- разработанные программы внедрены в работу в лечебно-диагностическую работу врачей педиатров, детских хирургов на амбулаторном уровне оказания лечебно-профилактической помощи в учреждениях: ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» Министерства здравоохранения Краснодарского края (г. Краснодар), ГБУЗ Республики Адыгея «ЦРБ Майкопского района» (г. Майкоп);

Результаты работы расширяют представления о методах лечения детей с нетипично протекающими ГВЗ, возможности восстановления эффекторных функций НГ (фагоцитарной и микробицидной) путем реконструирования негативно трансформированного фенотипа субпопуляций

CD16+СD64-СD32+СD11b+НГ и CD16+СD64+СD32+СD11b+ НГ.

В практическом плане работа имеет существенное значение с точки зрения коррекции дефектов функционирования НГ детей, что позволяет сократить продолжительность и объем антибиотикотерапии при ГВЗ, значительно снизить рост послеоперационных осложнений, в связи с этим возможно уменьшение количества дней пребывания пациентов на стационарном лечении, а также снижение обострений сопутствующих заболеваний детей.

Структура и объём работы. Диссертация имеет традиционную структуру изложения, состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка сокращений, списка литературных источников (240 научных работ, включающих 116 работ отечественных и 124 зарубежных авторов). Диссертация представлена на 158 страницах машинописного текста, иллюстрирована 20 таблицами, 31 рисунком.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Нейтрофильные гранулоциты - основные «игроки» противоинфекционной защиты

Последнее десятилетие в научном сообществе проявляется все больший интерес к уникальным клеткам ИС - нейтрофильным гранулоцитам. Открытие И.И. Мечниковым фагоцитирующих клеток произвело фурор в иммунологии и позволило по-новому взглянуть на работу ИС в борьбе с различными антигенами (АГ). Но дальнейший интерес к НГ был потерян более чем на 100 лет, их относили к низшей части иерархии иммунного ответа и считали «примитивными фагоцитами», не способными к дифференцировке после выхода из костного мозга, экспрессии генов, белковому синтезу и, тем более, к регуляторному влиянию на различные звенья ИС [53, 57, 85, 145, 176].

Современные представления о НГ свидетельствуют об их основополагающей роли в развитии иммунного ответа. Являясь популяцией клеток первой линии защиты врожденного иммунитета, НГ инициируют противобактериальную, противовирусную и противогрибковую защиту, также «обладают очень важными функциональными возможностями, позволяющими запускать каскад реакций для активации и регуляции адаптивного иммунитета, что способствует его полноценной реализации на различных уровнях, включая В-клетки маргинальной зоны, плазматические дендритные клетки, макрофаги, популяции Т-клеток и естественных киллерных клеток (ЕКК)» [12, 53, 55, 87, 110, 192, 196, 217]. Противоинфекционную защиту НГ реализуют через запуск эффекторных функций: фагоцитоза, дегрануляции, продукции активных форм кислорода (reactive oxygen species - ROS), синтеза цитокинов, образования внеклеточных нейтрофильных экстрацеллюлярных сетей (neutrophil extracellular traps - NET) и эктосом [57, 134, 166, 169, 224]. Стоит отметить, что способность НГ формировать NET лежит в основе патогенеза многих заболеваний, таких как диабет, атеросклероз, образование тромбов, в том числе, и при новой

короновирусной инфекции (COVID-19) [158, 170, 176, 184, 208, 216]. Реализация таких разнообразных механизмов НГ возможна благодаря мощному рецепторному аппарату, быстро и пластично реагирующему на изменения в иммунном гомеостазе для обеспечения связи НГ с экстрацеллюлярным окружением, другими клетками ИС, эндотелием и эпителием [19, 63, 110, 192].

Запуск основополагающих процессов для реализации фагоцитарной и киллинговой активности НГ находится в прямой зависимости от количества и плотности экспрессии функционально-значимых мембранных рецепторов CD16 (FcyRIII), CD32 (FcyRII), CD11b (Mac-1/CR3A), CD64 (FcyRI), формирующих определенный фенотип НГ [53, 57, 63, 64, 158].

Fcy рецепторы - члены суперсемейства иммуноглобулинов с гомологичными внеклеточными доменами, специфически связывающие Fc-фрагменты тяжелых цепей IgG (FcyRs), что позволяет им взаимодействовать и реагировать с мономерными или агрегированными иммуноглобулинами, иммунными комплексами антиген-антитело и опсонизированными частицами или клетками [129, 174]. Рецепторы к IgG экспрессируются на поверхностных мембранах НГ и других клеток (эозинофилов, базофилов, моноцитов/макрофагов, лимфоцитов), обеспечивают важную связь гуморального иммунитета с клеточными эффекторными механизмами. [161, 162, 177]. FcyRs играют важную роль в активации эндоцитоза, фагоцитоза, антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ), в образовании ROS и цитокинов. FcyRI (CD64), FcyRIIa (CD32) и FcyRIIIb (CD16) - три класса рецепторов НГ, имеющие структурные и функциональные особенности и представляющие различные стадии активации НГ [130, 151, 229, 238].

CD64 (FcyRI) - «высокоаффинный рецептор, способный связывать IgG1, IgG3 и IgG4 человека в мономерной форме. В условиях «физиологического покоя» у здоровых людей на мембранной поверхности неактивных НГ FcyRI экспрессируется в малом количестве (~1400 рецепторов на клетку), однако в присутствии компонентов микробной стенки (LPS), продуктов расщепления

комплемента и некоторых провоспалительных цитокинов» [111, 133, 186], таких как IFNy и G-CSF, CD64 быстро мобилизуется на поверхность НГ, повышая экспрессию данного рецептора, что оценивается как ранний диагностический признак при гнойно-воспалительных заболеваниях [38, 68, 143, 147, 150, 153]. CD64 активирует NADPH-оксидазу, образование ROS, усиливает фагоцитарную активность и способствует запуску АЗКЦ [52, 64, 141, 143, 187, 188].

CD32 (FcyRIIa) и CD 16 (FcyRIIIb) - конститутивно экспрессируются на поверхностной мембране НГ, являются низкоаффинными рецепторами, связывающими IgG1 и IgG3 в комплексно-агрегированной форме. Эти рецепторы важны для клиренса и прикрепления НГ к иммобилизованным иммунным комплексам на эндотелиальных поверхностях [110, 151, 157, 163, 173]. Среди всех FcyR только FcyRII способен связывать IgG2 человека. CD32 рецептор в состоянии покоя имеет более низкое сродство к IgG, чем у активированных НГ. При эффективном сшивании FcyRIIa запускаются эффекторные и иммунорегуляторные функций НГ, такие как дегранулируляция, продукция медиаторов воспаления и ROS и запуск образования NET [57, 219, 226]. Второй низкоаффинный рецептор FcyRIIIb является одним из наиболее представленных белков на поверхности НГ, причем каждая клетка экспрессирует от 100 000 до 200 000 копий. Так же описан пул внутрицитоплазматических CD16, накопленных в секреторных гранулах НГ, которые обеспечивают быструю дополнительную экспрессию FcyRIIIb на поверхность клетки при взаимодействии её паттернраспознающх рецепторов с паттернами патогенности или опасности [126, 139, 149]. Повышенная экспрессия мембранных CD16 на НГ свидетельствует о переактивации клетки, при этом сниженная экспрессия или полное отсутствие CD16 характеризует незрелость НГ и/или «обратную дифференцировку» клетки, которая наблюдается при тяжелых бактериальных инфекциях или некрозах тканей. Слущивание CD16 с поверхностной цитоплазматической мембраны свойственно апоптотическим НГ. Сшивание FcyRIIa с FcyRIIIb инициирует Ca2+

и активирует сигнальные каскады, которые запускают фагоцитоз, дегрануляцию, кислородный взрыв и АЗКЦ, ассоциируемые с CD11b/CD18-зависимым механизмом [149, 152, 157].

СБ11Ь (Мас-1) - а-субъединица молекулы адгезии р2-интегрина, трансмембранный рецептор НГ для С3Ь компонента комплемента, экспрессируется на мембранной поверхности НГ в низких количествах. CD11b локализуется во внутриклеточных гранулах и транслоцируется на поверхность в течение 5 минут после воздействия с бактериальными АГ, достигая пика экспрессии в течение 30 минут [136, 164, 198]. Мас-1 способствует прочному прикреплению НГ к эндотелию, что обеспечивает трансэндотелиальную миграцию в очаг воспаления. При активации НГ, связанной с сигнальными белками и цитоскелетом НГ, CD11b запускает и регулирует сигналлинг, хемотаксис, адгезию, фагоцитоз, кислородный взрыв и дегрануляцию. Снижение экспрессии на поверхностной цитоплазматической мембране НГ или блокада CD11b вызывают дефекты активации Fcy рецепторов и нарушения в эффекторной активности НГ [140, 181, 182, 211].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Чапурина Валерия Николаевна, 2023 год

- 84 с.

103. Фармакологическая иммунореабилитация в системе специфической иммунопрофилактики и вакцинотерапии: современные подходы и перспективы развития / В. В. Лебедев, А. В. Данилина, И. В. Сгибова [и др.] // International Journal on Immunorehabilitation. - 2000. - Т. 2 (1). - С. 48-53.

104. Федоров Ю.Н. Стратегия и принципы иммунокоррекции и иммуномодулирующей терапии / Ю. Н. Федоров, В. И. Клюкина, М. Н. Романенко [и др.] // Вестник Новгородского государственного университета им. Ярослава Мудрого. - 2015. - № 3-1 (86). - С. 84-87.

105. Фенотип циркулирующих нейтрофилов на разных стадиях неоплазии шейки матки / Т. В. Абакумова, Т. П. Генинг, Д. Р. Долгова [и др.] // Медицинская иммунология. - 2019. - Т. 21, № 6. - С. 1127-1138. - DOI 10.15789/1563-0625-2019-6-1127-1138.

106. Фенотипическая гетерогенность нейтрофилов: новые антимикробные характеристики и диагностические технологии / Б. Г. Андрюков, В. Д. Богданова, И. Н. Ляпун // Гематология и трансфузиология. - 2019. - Т. 64 (2). -С. 211-222.

107. Функциональная активность нейтрофилов у пациентов с послеоперационными инфекционно-септическими осложнениями / И. В. Образцов, А. Ю. Рябов, Н. С. Цуранова [и др.] // Российский иммунологический журнал. - 2019. - Т. 13 (22), №4. - С. 1393-1402.

108. Хаитов Р. М. Иммунология: учебник / Р. М. Хаитов. - 4-е издание, переработано и дополненное. - Москва: Гэотар-Медиа, 2021. - 520 с.

109. Цитокинотерапия в клинической практике / А. В. Леднева, С. Н. Стяжкина, М. Л. Черненкова [и др.] // Современные проблемы науки и образования. - 2011. - № 6. - С. 68.

110. Чудилова Г. А. Мультивариантность фенотипической трансформации субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов при различных иммунозависимых заболеваниях: специальность 14.03.09 «Клиническая иммунология, аллергология»: диссертация на соискание ученой степени доктора

биологических наук / Чудилова Галина Анатольевна; Кубанский государственный медицинский университет. - Краснодар, 2020. - 375 с.

111. Чудилова Г. А. Фенотипический профиль CD64-CD16+ CD32+ CD11b+ , CD64+ CD16+ CD32+ CD11b+ Субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов у здоровых новорожденных, условно-здоровых детей различных возрастных групп и условноздоровых взрослых субъектов / Г.А. Чудилова, И.В. Нестерова // Российский иммунологический журнал. -2019. - Т. 22, № 1. - С. 53-61.

112. Шмагель К. В. Местный иммунитет гнойных ран / К.В. Шмагель, Н.А. Зубарева, А.В. Ренжин // Медицинская иммунология. - 2010. - Т. 12 (4-5). - 393-398. - URL: https://doi.org/10.15789/1563-0625-2010-4-5-393-398.

113. Шуматов В. Б. Клинико-иммунологическая оценка эффективности внутривенных иммуноглобулинов в качестве адъювантной терапии хирургического сепсиса / В. Б. Шуматов, В. А. Лазанович, В. Е. Красников // Российский иммунологический журнал. - 2019. - Т. 13, № 2-1. - С. 666-668. -DOI 10.31857/S102872210007008-3.

114. Эволюция и возрастные особенности врожденной и адаптивной иммунной системы / А. Е. Абатуров, Е. А. Агафонова, Н. И. Абатурова, В. Л. Бабич // Современная педиатрия. - 2016. - № 3 (75). - С. 74-84.

115. Экстракорпоральная цитокинотерапия в хирургии / С. Н. Стяжкина, М. К. Иванова, В. В. Тихонова [и др.] // Modern Science. - 2020. - № 12-2. - С. 261-264.

116. Эффективность интраназального применения иммуномодулятора гаммаА-глутамилА-триптофана (бестим) при консервативной терапии гипертрофии миндалин лимфоидного глоточного кольца у детей раннего и дошкольного возраста / Е. В. Шабалдина, Н. П. Крекова, В. П. Тихонюк [и др.] // Российская оториноларингология. - 2012. - № 6. - С. 154-163.

117. A high frequency of MDSCs in sepsis patients, with the granulocytic subtype dominating in gram-positive cases / H. Janols, C. Bergenfelz, R. Allaoui [et al.] // Journal of leukocyte biology. - 2014. - Vol. 96. - P. 685-693.

118. A proposed role for neutrophil extracellular traps in cancer immunoediting / S. Berger-Achituv, V. Brinkmann, U. Abu Abed [et al.] // Frontiers in immunology.

- 2013. - Vol. 4. - P. 1-5.

119. Activation of neutrophils by autocrine IL-17A-IL-17RC interactions during fungal infection is regulated by IL-6, IL-23, RORyt and dectin-2 / P. R. Taylor, S. Roy, S. M. Leal [et al.] // Nature immunology. - 2014. - Vol. 15, №. 2. - P. 143151. - URL: https://doi.org/10.1038/ni.2797 (accepted: November 25, 2013).

120. Adrover J. M. Aging: a temporal dimension for neutrophils / J. M. Adrover, J. A. Nicolás-Ávila, A. Hidalgo // Trends in immunology. - 2016. - Vol. 37.

- P. 334-345. - DOI 10.1016/j.it.2016.03.005.

121. Anderson-Berry A. L. Neonatal Sepsis / A. L. Anderson-Berry, L. L. Bellig, B. L. Ohning // Medicine. Medscape. - 2011. URL: http://emedicine. medscape.com/article/9783 52-overview.

122. Arumugham V. B. Intravenous immunoglobulin (IVIG) / V. B. Arumugham, A. Rayi // StatPearls [Internet]. - StatPearls Publishing, 2021. URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK554446/ (accepted: December 12, 2021).

123. Asvadi K. I. Laboratory diagnosis of Myeloperoxidase deficiency: A case report / K. I. Asvadi, B. Nejati, R. Chapari // Shiraz E Medical Journal. - 2012. - Vol. 13, №. 1. - P. 40-45.

124. B cell-helper neutrophils stimulate the diversification and production of immunoglobulin in the marginal zone of the spleen / I. Puga, M. Cols, C. M. Barra [et al.] // Nature Immunology. - 2011. - Vol. 13 (2). - P. 170-80. - DOI 10.1038/ni.2194.

125. Bartlett J. G. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections / J. G. Bartlett // Topics in HIV medicine: a publication of the International AIDS Society, USA. - 2008. - Vol. 16, № 5. - P. 151-155.

126. Bengtsson A. A. Neutrophil FcyRIIA availability is associated with disease activity in systemic lupus erythematosus / A. A. Bengtsson, H. Tyden, C. Lood // Arthritis research & therapy. - 2020. - Vol. 22, № 1. - C. 1-8.

127. Bobrysheva I. V. Immunomodulator Imunofan affects cell profile of morphofunctional zones of rat thymus and delays its age-related involution / I. V. Bobrysheva // Bulletin of Russian State Medical University. - 2016. - Vol. 3. - P. 3438.

128. Borregaard N. Neutrophils, from marrow to microbes / N. Borregaard // Immunity. - 2010. - Vol. 33. - P. 657-670. - DOI 10.1016/j.immuni.2010.11.011.

129. Bournazos S. Fcy receptor pathways during active and passive immunization / S. Bournazos, J. V. Ravetch // Immunological reviews. - 2015. - Vol. 268 (1). - P. 88-103.

130. Bournazos S. The role and function of Fcy receptors on myeloid cells / S. Bournazos, T. T. Wang, J. V. Ravetch // Microbiology spectrum. - 2016. - Vol. 4 (6). - P. 10. - DOI 10.1128/microbiolspec.

131. Brinkmann V. Neutrophil extracellular traps: is immunity the second function of chromatin? / V. Brinkmann, A. Zychlinsky // The Journal of Cell Biology. -2012. - Vol. 198. - P. 773-783.

132. Calcium activity in response to nAChR ligands in murine bone marrow granulocytes with different Gr-1 expression / D. Serov, I. Tikhonova, V. Safronova, M. Astashev // Cell Biol Int. - 2021. - Vol. 45 (7). - P. 1533-1545.

133. CD64 and Group II Secretory Phospholipase A2 (sPLA2-IIA) as Biomarkers for Distinguishing Adult Sepsis and Bacterial Infections in the Emergency Department / T. L. Tan, N. S. Ahmad, D. N. Nasuruddin [et. al.] // PLoS One. - 2016. - Vol. 11, №. 3. - P. e0152065.

134. Christoffersson G. The neutrophil: one cell on many missions or many cells with different agendas? / G. Christoffersson, M. Phillipson // Cell and Tissue Research. - 2018. - Vol. 371. - P. 415-423. - DOI 10.1007/s00441-017-2780-z.

135. Coagulation induced by C3aR-dependent NETosis drives protumorigenic neutrophils during small intestinal tumorigenesis / S. Guglietta, A. Chiavelli, E. Zagato [et al.] // Nature Communications. - 2016. - Vol. 7. - P. 11037. - DOI 10.1038/ncomms11037.

136. Comparison of l-Selectin and CD11b on Neutrophils of Adults and Neonates during the First Month of Life / S. Kim, S. Keeney, S. Alpard [et al.] // Pediatric Research. - 2003. - Vol. 53. - P. 132-136. - URL: https://doi.org/10.1203/00006450-200301000-00022 (accepted: July 30, 2002).

137. Complete myeloperoxidase deficiency: beware the "false-positive" dihydrorhodamine oxidation / K. L. Milligan, D. Mann, A. Rump [et al.] // The Journal of Pediatrics. - 2016. - Vol. 176. - P. 204-206.

138. Cowland J. B. Granulopoiesis and granules of human neutrophils / J. B. Cowland, N. Borregaard // Immunological reviews. - 2016. - Vol. 273, № 1. - P. 1128.

139. Critical but overlapping role of FcyRIII and FcyRIV in activation of murine neutrophils by immobilized immune complexes / Z. Jakus, T. Nemeth, J. S. Verbeek, A. Mocsai // Journal of immunology. - 2008. - Vol. 180. - P. 618-629.

140. Cross-linking of neutrophil CD11b results in rapid cell surface expression of molecules required for antigen presentation and T-cell activation / G. P. Sandilands, Z. Ahmed, N. Perry [et al.] // Immunology. - 2005. - Vol. 114. - P. 35468.

141. Davis B. H. Comparison of neutrophil CD64 expression, manual myeloid immaturity counts, and automated hematology analyzer flags as indicators of infection or sepsis / B. H. Davis, N. C. Bigelow // Laboratory hematology: official publication of the International Society for Laboratory Hematology. - 2005. - Vol. 11 (2). - P. 137-147.

142. Deniset J. F. Neutrophil heterogeneity: Bona fide subsets or polarization states? / J. F. Deniset, P. Kubes // Journal of Leukocyte Biology. - 2018. - Vol. 103, № 5. - P. 829-838.

143. Diagnostic accuracy of CD64 for sepsis in emergency department / S. T. Dal Ponte, A. P. Alegretti, D. A. Pilger [et al.] // Journal of global infectious diseases. - 2018. - Vol. 10 (2). - P. 42-46.

144. Different faces for different places: heterogeneity of neutrophil phenotype and function / P. Yang, Y. Li, Y. Xie, Y Liu. // Journal of Immunology Research. -2019. - Vol. 2019. - P. 8016254. - URL: https://doi.org/10/1155/2019/8016254(accepted:03 Jan,2019)

145. Dinauer M. C. Disorders of neutrophil function: an overview // Neutrophil Methods and Protocols. - 2014. - C. 501-515. - DOI 10.1007/978-1-62703-845-4_30.

146. Diurnal fluctuation of leukocyte G6PD activity. A possible explanation for the normal neutrophil bactericidal activity and the low incidence of pyogenic infections in patients with severe G6PD deficiency in Israel / B. Wolach, M. Ashkenazi, R. Grossmann [et al.] // Pediatric Research. - 2004. - Vol. 55. - P. 807813. - DOI: 10.1203/01 .PDR.0000120680.47846.47.

147. Early diagnosis of intra-abdominal inflammation and sepsis by neutrophil CD64 expression in newborns / H. S. Lam, S. P. S Wong, H. M. Cheung [et al.] // Neonatology. - 2011. - Vol. 99 (2). - P. 118-124.

148. Emergence of Low-density Inflammatory Neutrophils Correlates with Hypercoagulable State and Disease Severity in COVID-19 Patients / S. M. Morrissey, A. E. Geller, X. Hu [et al.] // medRxiv. - 2020. - URL https://doi.org/10.1101/2020.05.22.20106724 (accepted: May 26, 2020).

149. Endocytosis of soluble immune complexes leads to their clearance by FcyRIIIB but induces neutrophil extracellular traps via FcyRIIA in vivo / K. Chen, H. Nishi, R. Travers [et al.] // Blood. - 2012. - Vol. 120, № 22. - P. 4421-4431.

150. Examining the utility of the CD64 index compared with other conventional indices for early diagnosis of neonatal infection / M. Zhong, H. Yang, Y. Xu [et al.] // Scientific Reports. - 2018. - Vol. 8 (1). - URL: https://doi.org/10.1038/s41598-018-28352-7 (accepted 20 June, 2018).

151. FcyR engagement reprograms neutrophils into antigen cross-presenting cells that elicit acquired anti-tumor immunity / V. Mysore, X. Cullere, J. Mears [et al.] // Nature communications. - 2021. - Vol. 12, №. 1. - P. 1-23.

152. Fetz A. E. Human neutrophil FcyRIIIb regulates neutrophil extracellular trap release in response to electrospun polydioxanone biomaterials / A. E. Fetz, M. Z. Radic, G. L. Bowlin //Acta Biomaterialia. - 2021. - Vol. 130. - P. 281-290.

153. Flow cytometry of CD64, HLA-DR, CD25, and TLRs for diagnosis and prognosis of sepsis in critically ill patients admitted to the intensive care unit: a review article / A. Mahmoodpoor, S. Paknezhad, K. Shadvar [et. al.] // Anesthesiology and pain medicine. - 2018. - Vol. 8, №. 6. - DOI 10.5812/aapm.83128.

154. Garley M. Heterogeneity Among Neutrophils / M. Garley, E. Jablonska // Archivum immunologiae et therapiae experimentalis. - 2018. - Vol. 66, № 1. - P. 2130.

155. Global Antimicrobial Resistance and Use Surveillance System (GLASS) Report 2022 / World Health Organization. - Geneva, 2022. - 71 p. - ISBN 978-92-4006270-2.

156. Gombart A. F. Neutrophil specific granule deficiency and mutations in the gene encoding transcription factor C/EBPs / A. F. Gombart, H. P. Koeffler // Current opinion in hematology. - 2002. - Vol. 9, №. 1. - P. 36-42.

157. Haplotypes of FcyRIIa and FcyRIIIb polymorphic variants influence IgG-mediated responses in neutrophils / J. van der Heijden, S. Nagelkerke, X. Zhao, // The Journal of Immunology. - 2014. - Vol. 192, № 6. - P. 2715-2721.

158. Hong C. W. Current understanding in neutrophil differentiation and heterogeneity / C. W. Hong // Immune Network. - 2017. - Vol. 17 (5). - P. 298-306.

159. Human inborn errors of immunity: 2019 update on the classification from the international union of immunological societies expert committee / S.G. Tangye, W. Al-Herz, A. Bousfiha [et al.] // Journal of Clinical Immunology. - 2020. - Vol. 40, № 1. - P. 24-64.

160. Human neutrophils in the saga of cellular heterogeneity: insights and open questions / P. Scapini, O. Marini, C. Tecchio, M. A. Cassatella // Immunological Reviews. - 2016. - Vol. 273, № 1. - P. 48-60.

161. Identification of an ADAM17 Cleavage Region in Human CD16 (FcyRIII) and the Engineering of a Non-Cleavable Version of the Receptor in NK Cells / Y. Jing, Z. Ni, J. Wu [et al.] // PLoS ONE. - 2015. - Vol. 10 (3). - P. e0121788. - URL: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0121788 (accepted: March 27, 2015).

162. Immune complex-induced apoptosis and concurrent immune complex clearance are anti-inflammatory neutrophil functions / U. Karmakar, J. Y. Chu, K. Sundaram // Cell death & disease. - 2021. - Vol. 12, №. 4. - P. 1-13.

163. Inhibitory affinity modulation of FcyRIIA ligand binding by glycosphingolipids by inside-out signaling / K. Okubo, M. D. Brenner, X. Cullere [et al.] // Cell reports. - 2021. - Vol. 35, №. 7. - P. 109-142.

164. Is neutrophil CD11b a special marker for the early diagnosis of sepsis in neonates? A systematic review and meta-analysis / X. Qiu, J. Li, X. Yang [et. al.] // BMJ open. - 2019. - Vol. 9, №. 4. - P. e025222. URL: http://dx.doi.org/10.1136/bmjopen-2018-025222 (accepted: February 21, 2019).

165. Kobayashi S. D. Neutrophils and Bacterial Immune Evasion / S. D. Kobayashi, N. Malachowa, F. R. DeLeo // Journal of Innate Immunity. - 2018. - Vol. 10 (5-6). - P. 432-441. - DOI 10.1159/000487756.

166. Kolaczkowska E. Neutrophil recruitment and function in health and inflammation / E. Kolaczkowska, P. Kubes // Nature Reviews Immunology. - 2013. -Vol. 13. - P. 159-175. - URL: https://doi.org/10.1038/nri3399 (accepted: February 25, 2013).

167. Lebedev V. V. Hydrophilic hexapeptide imunofan as a hyperactive regulator of transport proteins for multiple drug resistance / V. V. Lebedev, S. A. Novikov // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2006. - Vol. 142, №. 6. - P. 693-695.

168. Leukocyte adhesion deficiency-I: a comprehensive review of all published cases / E. A. Novoa, S. Kasbekar, A. J. Thrasher [et al.] // The Journal of Allergy and Clinical Immunology: In Practice. - 2018. - Vol. 6, №. 4. - P. 1418-1420. - DOI e10. 10.1016/j.jaip.2017.12.008.

169. Liew P. X. The neutrophil's role during health and disease / P. X. Liew, P. Kubes // Physiological reviews. - 2019. - Vol. 99, №. 2. - P. 1223-1248. - URL: https://doi.org/10.1152/physrev.00012.2018 (accepted: December 12, 2019).

170. Longitudinal characterization of circulating neutrophils uncovers distinct phenotypes associated with disease severity in hospitalized COVID-19 patients / T. J. LaSalle, A. L. Gonye, S. Freeman [et. al.] // BioRXiv. - 2021. - DOI 10.1101/2021.10.04.463121.

171. Louis N. A. The Neutrophil / N. A. Louis, C. A. Parkos // Mucosal Immunology. - 2015. - Vol. 45. - P. 915-928.

172. Luzzatto L. Glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency / L. Luzzatto, C. Nannelli, R. Notaro // Hematology/Oncology Clinics. - 2016. - Vol. 30, №. 2. - P. 373-393.

173. Mayadas T. N. The multifaceted functions of neutrophils / T. N. Mayadas, X. Cullere, C. A. Lowell // Annual Review of Pathology: Mechanisms of Disease. -2014. - Vol. 9. - P. 181-218.

174. Mechanisms of inside-out signaling of the high-affinity IgG receptor FcyRI / A.M. Brandsma, S.L. Schwartz, M.J. Wester [et al.] // Science Signaling. -2018. - Vol. 11 (540). - DOI 10.1126/scisignal.aaq0891.

175. Mistry R. D. Skin and soft tissue infections / R. D. Mistry // Pediatric Clinics. - 2013. - Vol. 60, №. 5. - P. 1063-1082.

176. Mocsai A. Diverse novel functions of neutrophils in immunity, inflammation, and beyond / A. Mocsai // Journal of Experimental Medicine. - 2013. -Vol. 210 (7). - P. 1283-1299.

177. Molecular analysis of thymopentin binding to HLA-DR molecules / Z. Liu, X. Zheng, J. Wang, E. Wang // PLoS One. - 2007. - Vol. 2 (12). - P. e1348.

178. Mulcahy M. J. Granulocytes as models for human protein maker identification following nicotine exposure / M. J. Mulcahy, H. A. Lester // Journal of Neurochemistry. - 2017. - Vol. 142 (2). - P. 151-161.

179. Myeloperoxidase deficiency manifesting as pseudoneutropenia with low mean peroxidase index and high monocyte count in 4 adult patients / S. Roh, J. Ham Y., K. E. Song [et al.] // Laboratory Medicine. - 2020. - Vol. 51, №. 2. - P. e16-e19.

180. Myeloperoxidase deficiency: the secret under the flag of unstained cell / T. Patiroglu, H. E. Güngör, J. S. Belohradsky [et al.] // Turkish Journal of Hematology. -2013. - Vol. 30, №. 2. - P. 232-233.

181. Myeloperoxidase mediates neutrophil activation by association with CD11b/CD18 integrins / D. Lau, H. Mollnau, J. P. Eiserich [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2005. - Vol. 102, №. 2. - P. 431-436.

182. Myeloperoxidase: a front line defender against phagocytosed microorganisms / S. J. Klebanoff, A. J. Kettle, H. Rosen [et al.] // Journal of leukocyte biology. - 2013. - Vol. 93, №. 2. - P. 185-198.

183. Nauseef W. M. Diagnostic assays for myeloperoxidase and myeloperoxidase deficiency / W. M. Nauseef // Neutrophil Methods and Protocols. -Humana Press, Totowa, NJ, 2014. - P. 537-546.

184. Nemeth T. Neutrophils as emerging therapeutic targets / T. Nemeth, M. Sperandio, A. Mocsai // Nature Reviews Drug Discovery. - 2020. - Vol. 19. -P. 253275.

185. Neutrophil ageing is regulated by the microbiome / D. Zhang, G. Chen, D. Manwani [et al.] // Nature. - 2015. - Vol. 525. - P. 528-532.

186. Neutrophil CD64 - a potential biomarker in patients with complicated intra-abdominal infections? - A literature review / E. Dimitrov, E. Enchev, K. Halacheva [et al.] // Acta microbiologica et immunologica hungarica. - 2018. - Vol. 23. - P. 1-10.

187. Neutrophil CD64 expression as a biomarker in the early diagnosis of bacterial infection: a meta-analysis / S. Li, X. Huang, Z. Chen [et al.] // International

Journal of Infectious Diseases. - 2013. - Vol. 17, № 1. - P. e12-e23. - URL: https://doi.org/10.1016/j.ijid.2012.07.017 (accepted: July 5, 2012).

188. Neutrophil CD64 expression as a longitudinal biomarker for severe disease and acute infection in critically ill patients / E. de Jong, D.W. de Lange, A. Beishuizen [et al.] // International Journal of Laboratory Hematology. - 2016. - Vol. 38, № 5. - P. 576-584.

189. Neutrophil diversity in health and disease / C. Silvestre-Roig, Z. G. Fridlender, M. Glogauer, P. Scapini // Trends in Immunology. - 2019. - Vol. 40, №. 7. - P. 565-583.

190. Neutrophil heterogeneity and its role in infectious complications after severe trauma / L. Hesselink, R. Spijkerman, K. J. P. van Wessem [et al.] // World journal of emergency surgery: WJES. - 2019. - Vol. 14. - P. 24.

191. Neutrophil subset responses in infants with severe viral respiratory infection / B. Cortjens, S. A. Ingelse, J. C. Calis [et al.] // Clinical immunology. -2017. - T. 176. - C. 100-106.

192. Neutrophils / E. Cruz Rosas, M. C. Souza, C. Rosales [et al.]. - London: Intechopen limited, 2019. - 85 p.

193. Neutrophils in local and systemic antibody-dependent inflammatory and anaphylactic reactions / F. Jönsson, D. A. Mancardi, M. Albanesi, P. Bruhns // Journal of Leukocyte Biology. - 2013. - Vol. 94 (4). - P. 643-656.

194. Neutrophils in the activation and regulation of innate and adaptive immunity / A. Mantovani, M. A. Cassatella, C. Costantini, S. Jaillon // Nature reviews. Immunology. - 2011. - Vol. 11 (8). - P. 519-31. - DOI 10.1038 / nri3024.

195. Neutrophils produce interleukin 17A (IL-17A) in a dectin-1-and IL-23-dependent manner during invasive fungal infection / J. L. Werner, M. A. Gessner, L. M. Lilly [et al.] // Infection and immunity. - 2011. - Vol. 79, №. 10. - P. 3966-3977. - URL: https://doi.org/10.1128/IAI.05493-11 (accepted: July 07, 2019).

196. Neutrophils: New insights and open questions / K. Ley, H. M. Hoffman, P. Kubes [et al.] // Science Immunology. - 2018. - Vol. 3 (30). - P. eaat4579. - URL: https://doi.org/10.1126/sciimmunol.aat4579 (accepted: November 8, 2018)

197. Neutrophil- specific granule deficiency / L. Mc Ilwaine, A. Parker, G. Sandilands [et al.] // British journal of haematology. - 2013. - Vol. 160, № 6. - P. 735-735.

198. Neutrophil-surface antigens CD11b and CD64 expression: a potential predictor of early-onset neonatal sepsis / N. M. El-Raggal, M. N. El-Barbary, M. F. Youssef, H. A. El-Mansy // Egyptian Journal of Pediatric Allergy and Immunology (The). - 2004. - Vol. 2, № 2. - P. 90-100.

199. Nicamp F. P. Principles of Immunopharmacology / F. P. Nicamp, M. J. Parnham. - Springer, 2011. - 760 p.

200. Nicotinic acetylcholine receptors alpha4beta2 and alpha7 regulate myelo-and erythropoiesis within the bone marrow / L. M. Koval, A. S. Zverkova, R. Grailhe [et. al.] // The international journal of biochemistry & cell biology. - 2008. - Vol. 40, №. 5. - P. 980-990.

201. Nicotinic receptor involvement in regulation of functions of mouse neutrophils from inflammatory site / V. G. Safronova, C. A. Vulfius, I. V. Shelukhina [et. al.] // Immunobiology. - 2016. - Vol. 221, №. 7. - P. 761-772.

202. Owens C. D. Surgical site infections: epidemiology, microbiology and prevention / C. D. Owens, K. Stoessel // The Journal of hospital infection. - 2008. -Vol. 70 (2). - P. 3-10.

203. Pahwa R. Myeloperoxidase deficiency / R. Pahwa, P. Modi, I. Jialal // StatPearls. - 2021. - URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK470278/ (accepted: September 28, 2021).

204. Pattern of local immune alterations in the patients with chronic adenoiditis, and an opportunity of their correction with imunofan / R. N. Kuznetsova, K. A. Syssoev, V. V. Lebedev [et al.] // Medical Immunology. - 2014. - Vol. 10, №. 6. - P. 551-562.

205. Penaloza H. F. Interleukin 10 modulation of neutrophil subsets infiltrating lungs during Streptococcus pneumoniae infection / H. F. Penaloza, F. J. Salazar-Echegarai, S. M. Bueno // Biochemistry and biophysics reports. - 2018. - Vol. 13. -P. 12-16.

206. Phenotypic diversity and plasticity in circulating neutrophil subpopulations in cancer / J. Y. Sagiv, J. Michaeli, S. Assi [et al.] // Cell reports. -

2015. - Vol. 10, №. 4. - P. 562-573.

207. Rhythmic modulation of the hematopoietic niche through neutrophil clearance / M. Casanova-Acebes, C. Pitaval, L. A. Weiss [et al.] // Cell. - 2013. -Vol. 153. - P. 1025-1035. - DOI 10.1016/j.cell.2013.04.040.

208. Role of Neutrophils and NETs in Animal Models of Thrombosis // International Journal of Molecular Sciences / E. Carminita, L. Crescence, L. Panicot-Dubois [et. al.] // International Journal of Molecular Sciences. - 2022. - Vol. 23. - №. 3. - P. URL: 1411. https://doi.org/10.3390/ijms23031411 (accepted: January 24, 2022).

209. Rosales C. Neutrophil: a cell with many roles in inflammation or several cell types? / C. Rosales // Frontiers in physiology. - 2018. - Vol. 9. - P 113.

210. Rush J. Childhood skin and soft tissue infections: new discoveries and guidelines regarding the management of bacterial soft tissue infections, molluscum contagiosum, and warts / J. Rush, J. G. Dinulos // Current opinion in pediatrics. -

2016. - Vol. 28, №. 2. - P. 250-257.

211. Schymeinsky J. Neutrophil activation via P2 integrins (CD11/CD18): molecular mechanisms and clinical implications / J. Schymeinsky, A. Mocsai, B. Walzog // Thrombosis and haemostasis. - 2007. - Vol. 98. - P. 262-273.

212. Severe glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency leads to susceptibility to infection and absent NETosis / U. Siler, S. Romao, E. Tejera [et al.] // Journal of Allergy and Clinical Immunology. - 2017. - Vol. 139. - P. 212-9.e3. -DOI: 10.1016/j.jaci.2016.04.041.

213. Silvestre-Roig C. Neutrophil heterogeneity: implications for homeostasis and pathogenesis / C. Silvestre-Roig, A. Hidalgo, O. Soehnlein // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 2016. - Vol. 127, №. 18. - P. 2173-2181.

214. Stanton R. C. Glucose- 6- phosphate dehydrogenase, NADPH, and cell survival / R. C. Stanton // IUBMB life. - 2012. - Vol. 64, №. 5. - P. 362-369. https://doi.org/10.1002/iub.1017 (accepted: February 07, 2012).

215. Tamassia N. Fast and accurate quantitative analysis of cytokine gene expression in human neutrophils / N. Tamassia, M. A. Cassatella, F. Bazzoni // Methods in molecular biology. - 2014. - Vol. 1124. - P. 451- 67. - DOI 10.1007/978-1-62703-845-4 27.

216. Targeting potential drivers of COVID-19: Neutrophil extracellular traps / Barnes B.J., Adrover J.M., Baxter-Stoltzfus A. [et al.] // Journal of Experimental Medicine. - 2020. - Vol. 217 (6). - P. e20200652. - URL: https://doi.org/10.1084/ jem.20200652 (accepted: April 13, 2020).

217. The diverse biological functions of neutrophils, beyond the defense against Infections / F. Yang, C. Feng, X. Zhang [et al.] // Inflammation. - 2017. - Vol. 40. -P. 311-323. - DOI 10.1007/s10753-016-0458-4.

218. The Dual NOD1/NOD2 Agonism of Muropeptides Containing a Meso-Diaminopimelic Acid Residue / Y. A. Dagil, N. P. Arbatsky, M. V. Pashenkov [et al.] // PLoS ONE. - 2016. - Vol. 11, № 8. - P. e0160784. - DOI: 10.1371/journal.pone.0160784.

219. The Human FcyRII (CD32) Family of Leukocyte FcR in Health and Disease / J. C. Anania, A. M. Chenoweth, B. D. Wines, P. M. Hogarth // Frontiers in Immunology. - 2019. - Vol. 10. - DOI 10.3389/fimmu.2019.00464.

220. The human NADPH oxidase: primary and secondary defects impairing the respiratory burst function and the microbicidal ability of phagocytes / E. B. de Oliveira-Junior, J. Bustamante, P. E. Newburger, A. Condino-Neto // Immunology. -2011. - Vol. 73, № 5. - P. 420-427. - DOI 10.1111/j.1365-3083.2010.02501.x.

221. The impact of disease severity, age and surgical approach on the outcome of acute appendicitis in children / A. L. Van den Boom, R. R. Gorter, P. M. M Van Haard [et al.] // Pediatric surgery international. - 2015. - Vol. 31, №. 4. - P. 339-345.

222. The influences of recombinant IFNa2b on the membrane CD16, CD66b, CD33, CD11b in non- transformed and in vitro experimental transformed neutrophilic granulocytes / I. V. Nesterova, G. A. Chudilova, S. V. Kovaleva [et al.] // Allergy: European Journal of Allergy and Clinical Immunology, Supplement. - 2019. - Vol. 74, № S106. - P. 0223.

223. The lung is a host defense miche for immediate neutrophil-mediated vascular protection / B. G. Yipp, J. H. Kim, R. Lima [et al.] // Science immunology. -2017 - Vol. 2 (10). - P. eaam8929. - URL: https://doi.org/10.1126/sciimmunol.aam8929 (accepted: April 4, 2017).

224. The regulatory roles of neutrophils in adaptive immunity / Li Y., Wang W., Yang F. [et al.] // Cell Commun Signal. - 2019. - Vol. 17, № 147. - URL: https://doi.org/10.1186/s12964-019-0471-y (accepted: October 25, 2019).

225. The sepsis seesaw: tilting toward immunosuppression / R. S. Hotchkiss, C. M. Coopersmith, J. E. Mc Dunn, T. A. Ferguson // Nature medicine. - 2009. - Vol. 15. - P. 496-497. - DOI 10.1038/nm0509-496.

226. TLR7/8 activation in neutrophils impairs immune complex phagocytosis through shedding of FcgRIIA / C. Lood, S. Arve, J. Ledbetter, K. B. Elkon // Journal of Experimental Medicine. - 2017. - Vol. 214 (7). - P. 2103-2119. - DOI 10.1084/jem.20161512.

227. Two new immature and dysfunctional neutrophil cell subsets define a predictive signature of sepsis useable in clinical practice / A. Meghraoui-Kheddar, B. G. Chousterman, N. Guillou [et. al.] // BioRXiv. - 2020. URL: https://doi.org/10.1101/2020.05.29.123992.

228. Two new neutrophil subsets define a discriminating sepsis signature / A. Meghraoui-Kheddar, B. G. Chousterman, N. Guillou [et al.] //American journal of

respiratory and critical care medicine. - 2022. - Vol. 205, №. 1. - P. 46-59. - URL: https://doi.org/10.1164/rccm.202104-1027OC (accepted: November 03, 2021).

229. Type I and type II Fc receptors regulate innate and adaptive immunity / A. Pincetic, S. Bournazos, D. J. DiLillo [et al.] // Nature immunology. - 2014. - Vol. 15.

- P. 707-716. - DOI 10.1038/ni.2939.

230. Ugonotti J. Structural and functional diversity of neutrophil glycosylation in innate immunity and related disorders / J. Ugonotti, S. Chatterjee, M. Thaysen-Andersen // Molecular aspects of medicine. - 2021. - Vol. 79. - P. 100882.

231. Update on neutrophil function in severe inflammation / E. Mortaz, S. Alipoor D., I. M. Adcock [et al.] // Frontiers in immunology. - 2018. - Vol. 9. - P. 2171. - URL: https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.02171(accepted:03 September,2018).

232. Venkatasubramanian K. Binding of thymopoietin to the acetylcholine receptor / K. Venkatasubramanian, T. Audhya, G. Goldstein // Proc Natl Acad Sci U S A. - 1986. - Vol. 83 (10). - P. 3171-3174.

233. Verdonk F. From Mass to Flow: Emerging Sepsis Diagnostics Based on Flow Cytometry Analysis of Neutrophils / F. Verdonk, J. L. Hsu, B. Gaudilliere // American journal of respiratory and critical care medicine. - 2022. - Vol. 205, №. 1.

- P. 2-4.

234. Visualizing the function and fate of neutrophils in sterile injury and repair / J. Wang, M. Hossain, A. Thanabalasuriar [et al.] // Science. - 2017. - Vol. 358. - P. 111-116. - DOI 10.1126/science.aam9690.

235. Von Vietinghoff S. Homeostatic regulation of blood neutrophil counts / S. von Vietinghoff, K. Ley // Journal of Immunology. - 2008. - Vol. 181. - P. 51835188. - DOI 10.4049/jimmunol.181.8.5183.

236. Von Vietinghoff S. IL-17A controls IL-17F production and maintains blood neutrophil counts in mice / S. von Vietinghoff, K. Ley // Journal of immunology. - 2009. - Vol. 183. - P. 865-873. - DOI 10.4049/jimmunol.0804080.

237. Wang J. Neutrophils in tissue injury and repair / J. Wang // Cell and Tissue Research. - 2018. - Vol. 371, № 3. - P. 531-539.

238. Wang Y. Expression, role, and regulation of neutrophil Fcy receptors / Y. Wang, F. Jonsson // Frontiers in Immunology. - 2019. - Vol. 10. - P. 1958. - DOI 10.3389/fimmu.2019.01958.

239. Whitman T. J. Community-associated methicillinresistant Staphylococcus aureus skin and soft tissue infections / T. J. Whitman // Disease-a-month: DM. -2008. - Vol. 54, № 12. - P. 780-786.

240. Winterbourn C. C. Redox reactions and microbial killing in the neutrophil phagosome / C. C. Winterbourn, A. J. Kettle // Antioxidants & redox signaling. -2013. - Vol. 18, №. 6. - P. 642-660. - URL: https://doi.org/10.1089/ars.2012.4827 (accepted: August 13, 2012).