Иммунологические аспекты антифосфолипидного синдрома тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.46, кандидат биологических наук Новиков, Александр Александрович

• Новиков, Александр Александрович
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Новиков, Александр Александрович

Список основных обозначений и сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

II. 1. Общая клиническая характеристика больных ПАФС, СКВ с АФС и СКВ.

II.2. Методы исследования.

II.2.1. Методика выделения рг-ГГП.

И.2.2. Методика синтеза пептидных фрагментов Рг-ГГП.

11.2.3. Методика измерения кофакторной активности рг-ГГП.

11.2.4. Определение IgG антител к рг-ГГП.

И.2.5. Методы определения IgG и IgM антител к кардиолипину.

И.2.6. Методика определения рР-селектина.

И.2.7. Методика определения рЕ-селектина.

И.2.8. Методика определения pVCAM-1.

И.2.9. Методика определения С-реактивного белка.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

III. 1. Пептидные фрагменты рг-ГП!.

Ш.2. ДО антитела к р2-ГП1.

Ш.З. Антитела к кардиолипину.

Ш.3.1. антитела к кардиолипину.

Ш.3.2.1дМ антитела к кардиолипину.

Ш.З.З. Чувствительность и специфичнось методов определения аФЛ.

Ш.4. Молекулы адгезии.

Ш.4.1. рЕ-селектин.

Ш.4.2. рР-селектин.

Ш.4.3. рУСАМ-1.

Ш.4.4. Комплексная клинико-лабораторная характеристика больных АФС в зависимости от уровня аФЛ и рКМА.

Ш.5. СРБ.

Ш.6. Корреляционные зависимости.

IV. ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунологические аспекты антифосфолипидного синдрома»

Актуальность проблемы

В настоящее время клиническая медицина обогатилась большой группой новых лабораторных методов, позволяющих более полно оценить характер патологических изменений иммунной системы при аутоимунных ревматологических заболеваниях. К наиболее информативным иммунологическим маркерам в ревматологии относятся: органонеспецифические аутоантитела и иммунные комплексы, белки острой фазы воспаления, маркеры активации клеточного иммунитета и дисфункции эндотелия [1,2, 3,4].

В последние годы особое внимание уделяется исследованию антител (АТ) к фосфолипидам (аФЛ) - большой группы органонеспецифических аутоантител, реагирующих с антигенными детерминантами фосфолипидов и/или фосфолипидсвязывающих белков. Гиперпродукция аФЛ ассоциируется с развитием антифосфолипидного синдрома (АФС), характеризующегося тремя клинико-лабороторными признаками: рецидивирующие венозные или артериальные тромбозы, акушерская патология в виде привычного невынашивания беременности и внутриутробной гибели плода, тромбоцитопения [3, 5, 6]. Лабораторными критериями АФС являются и ^М антитела к кардиолипину (аКЛ), выявляемые иммуноферментным методом (ИФМ) и волчаночный антикоагулянт (ВА), определяемый с помощью фосфолипидзависимых коагулогических тестов. При АФС аКЛ наиболее эффективно связываются с кардиолипином (КЛ) в присутствии белка плазмы рг-гликопротеина-1 (Рг-ГП1). Фактически аКЛ реагируют с антигенными детерминантами не кардиолипина, а конформационнами эпитопами Рг-ГШ, экспрессирующимися в процессе взаимодействия Рг-ГП1 и КЛ. Мишенью аФЛ аутоимунного происхождения в настоящее время считают либо белок р2-ГП1, либо его комплекс с анионными фосфолипидами [7]. Обнаружение антигенных эпитопов Рг-ГШ, распознаваемых аутоиммунными аФЛ с использованием соответствующих синтетических пептидов, имеет важное значение для уточнения молекулярных механизмов патогенеза АФС. Поскольку в фетальной сыворотке использующейся для определения аКЛ, содержится Рг-ГШ, полагают, что с помощью стандартного ИФМ можно выявить как аРг-ГШ, так и антитела, реагирующие собственно с КЛ. Более специфичный метод определения аРг-ГШ, основан на использовании "иммобилизированного" на твердой фазе Рг-ГШ в ИФМ [8, 9]. По данным литературы, аКЛ обладают более высокой "чувствительностью", а аРг-ГШ — "специфичностью" [9, 10, 11], однако результаты исследований противоречивы, что связано с отсутствием стандартизованного на международном уровне метода определения аРг-ГШ.

Существенное значение в иммунопатогенезе АФС придают цитокин-индуцированной гиперэкспрессии клеточных молекул адгезии (КМА) [12]. Установлено, что аФЛ обладают способностью индуцировать экспрессию некоторых форм КМА, в том числе Е-селектина, Р-селектина, межклеточной молекулы адгезии (1САМ-1) и сосудистой клеточной молекулы адгезии 1 (УСАМ-1) на поверхности эндотелиальных клеток (ЭК) [13]. Прогресс в изучении КМА при заболеваниях человека во многом связан с открытием методов определения растворимых изоформ КМА (рКМА) и разроботке методов их определения в биологических жидкостях. Установлена связь между синтезом рКМА и выраженностью экспрессии КМА на клеточных мембранах. Повышение концентрации рКМА в сыворотке крови наблюдается при многих воспалительных, аутоиммунных, инфекционных, опухолевых заболевания, атеросклеротическом поражении сосудов и при системных васкулитах [2, 14, 15, 16, 17]. Однако данные касающиеся клинического значения рКМА при АФС весьма немногочисленны [18].

С-реактивный белок (СРБ) - классический острофазовый белок, синтезирующийся в ответ на воспаление и тканевое повреждение. Показано, что у больных системной красной волчанкой (СКВ) повышение СРБ ассоциируется с развитием тромботических осложнений и обнаружением aKJl [19]. По данным литературы, увеличение концентрации СРБ является предиктором тромботических осложнений у больных ишемической болезнью сердца [20]. Рг-ГШ-зависимое связывание аФЛ с ЭК, не только вызывает активацию эндотелия, проявляющуюся гиперэкспрессией КМА, но и индуцирует продукцию провоспалительных цитокинов ИЛ-6 и ИЛ-1 [21]. В свою очередь эти цитокины являются основными медиаторами, индуцирующими синтез СРБ. Имеются сведения о том, что СРБ может вызывать активацию ЭК "in vitro" [22]. Все это может свидетельствовать о патогенетической связи между аФЛ-зависимой активацией сосудистого эндотелия, субклинически текущем воспалением сосудистой стенки и развитием тромботических осложнений у больных АФС.

Оценка функционирования иммунной системы больных АФС на гуморальном уровне в комплексе с лабораторными и клиническими данными может иметь важное значение как с теоретических позиций в плане уточнения патогенетических механизмов АФС, так и с клинической точки зрения, для уточнения степени активности патологического процесса, диагностики, оценки результатов лечения и прогноза заболевания.

Цель исследования

Изучить диагностическое и патогенетическое значение аФЛ при АФС; характер взаимосвязи между гиперпродукцией аФЛ и клинико-лабораторными особенностями АФС.

Задачи исследования

1. Разработать ИФМ определения аРг-ГШ.

2. Изучить кофакторную активность пептидных фрагментов Рг-ГШ у больных АФС.

3. Исследовать "чувствительнось" и "специфичность" определения аКЛ и ^ арг-ГП1 при АФС.

4. Исследовать уровень маркеров активации эндотелия рКМА (рР-селектин, рЕ-селектин и рУСАМ-1) в сыворотке больных АФС.

5. Изучить концентрацию С-реактивного белка при АФС.

Научная новизна

Впервые проведено комплексное изучение иммунологических нарушений при АФС. Показано, что аРг-ГШ являются высокочувствительным и специфичным лабораторным маркером для верификации АФС и его основных проявлений, в том числе тромботических осложнений. Выяснено наличие кофакторной активности у пептидных фрагментов р2-ГП1: Р7, Р8, Р9, Р5. Исследование молекулярных механизмов взаимодействия аФЛ с ФЛ, позволило уточнить патогенетическое значение аФЛ в развитии артериальных и венозных тромбозов у больных АФС. Показано, что гиперпродукция аФЛ ассоциируется с повышением уровня рКМА и СРБ. Выявлена прямая корреляция между уровнем рЕ-селектина, рУСАМ-1 и концентрацией СРБ при АФС.

Практическая ценность

Полученные данные имеют важное значение для уточнения иммунологических критериев диагностики АФС, а так же для изучения роли иммунологических нарушений в патогенезе тромботических осложнений при АФС. Разработан ИФМ метод определения ар2-ГП1.

Внедрение в практику

Результаты диссертационной работы Новикова Александра Александровича "Иммунологические аспекты антифосфолипидного синдрома" применяются в работе лаборатории системных ревматических заболеваний с группами гемореологических и метаболичнских нарушений ГУ Института Ревматологии РАМН, что позволяет выявлять больных с первичным и вторичным антифосфолипидным синдромом и давать более точную клинико-лабораторную характеристику течению заболевания.

Публикации

По теме публикации опубликовано 6 печатных работ. Апробация работы

Работа апробирована на межотделенченской конференции НИИ кардиологии им. Мясникова А.Л. РКНПК МЗ РФ 5 июня 2002 г.

Объем и структура диссертации

Основной текст изложен на 144 страницах машинописного текста. Диссертация состоит из введения, 3 глав, обсуждения, выводов. Библиографический указатель включает 166 источников, из них 12 отечественных и 152 иностранных. Диссертация иллюстрирована 23 таблицами, 37 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Новиков, Александр Александрович

ВЫВОДЫ

1. При исследовании механизмов взаимодействия антител к фосфолипидам с фосфолипидами наибольшая связывающая активность выявлена для таких пептидных фрагментов V домена молекулы рг-ГП1 как: Р7, Р8, Р9 и Аг§Р5(Асш).

2. Средний уровень и ^М антител к кардиолипину, а также антител к р2-ГП1 при АФС достоверно превышал таковой у здоровых доноров. Наибольшее повышение уровня ^О и ^М антител к кардиолипину совместно с антителами к Рг-ГШ было выявлено при венозных тромбозах (р<0.05). Выявлена достоверная корреляция между антителами к кардиолипину и антителами к р2-ГП1 при ПАФС (г =0,85; р<0.0005) и АФС с СКВ (г=0,9; р<0.0005).

3. Чувствительность антител к кардиолипину и антител к р2-ГП1 для диагностики АФС бьша примерно одинаковой - 57,1% и 60,0% соответственно. Специфичность антител к р2ГП1 при АФС (83,8%) бьша выше, чем антител к кардиолипину (73,5%). При сравнении разработанного ИФМ метода определения антител к Р2ГШ с коммерческим, чувствительность и специфичность при АФС бьша примерно одинаковой (чувствительность 63,0/60.0%; специфичность 94,4/83.8%).

4. Выявлено достоверное повышение уровня рЕ-Селетина и рУСАМ-1 при АФС (р<0.05).

5. При исследовании уровня С-реактивного белка выявлено повышение данного показателя у больных ПАФС и АФС с СКВ и достоверная корреляция с уровнем рУСАМ-1 при ПАФС (г=0,705; р<0,05) и рЕ-Селектина при СКВ (г=0,7; р<0,05).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Методы определения аФЛ могут быть рекомендованы к внедрению в лаборатории специализированного стационара, имеющего ревматологическое отделение для диагностики АФС. Результаты исследования целесообразно использовать для изучения роли иммунологических нарушений в патогенезе тромботических осложнений при АФС. Комплексное исследование аФЛ, рКМА и СРБ у больных АФС в сопоставлении с клиническими признаками может являться важным дополнительным методом диагностики и оценки течения заболевания.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Новиков, Александр Александрович, 2003 год

1. Matsuura E., Igarashi Y., Fugimoto M., et al. / Anticardiolipin cofacror(s) and different diagnosis of autoimmune disease // Lancet. -1990 vol. 336-p. 177-178.

2. Gearing A.J ., Newman W. / Circulating adhesion molecules in disease // Immunol. Today. — 1993-vol.14-p. 506-512.

3. Huges G.R.V./ The antiphospholipid syndrome: ten years later on // Lancet.- 1993- vol. 324 -p. 341-344.

4. Gabay C., Kushnewr I. / Acute-phase proteins and other systemic responses to inflammation // N. Engl. J. Med. -1999 vol. 340-p. 448-454.

5. Huges G.R.V. Gharavi A. E., Harris A.E. / The anticardiolipin syndrome // J. Reumatol. 1986 -vol. 13-p. 486-489.

6. Harris E.N. / A reassessement of the antiphospholipid syndrome //J. Reumatol. -1990 vol. 17 (6)-p. 733-735.

7. Roubey R.A. / Immunology of the antiphospholipid antibody syndrome // Arthr. Rheum. —1996-vol. 39-p. 1444-1454.

8. Amengual O, Atsumi T, Khamashta M.A. et al. / Specificity of ELISA for antibody to 02-glycoprotein I in patients with antiphospholipid syndrome // Br. J. Rheumatol. 1996 - vol. 35 -p. 1239-1243.

9. Tsutsumi A., Matsuura E., Ichikawa K., et al. / Antibodies to beta2-glycoprotein I and clinical manifestation in patients with systemic lupus erytematosus II Artr. and Rheum. 1996 - vol. 39 -p. 1466-1474.

10. D. Detkova, A Gil-Aguado, P Lavilla et al. / Do antibodies to p2-glycoprotein I contribute to the better characterization of the antiphospholipid syndrome ? // Lupus. 1999 -vol. 8 - p. 430-438.

11. Simantov R., Lo S. K., Gharavu A. E., et al. / Activation of cultured vascular endothelial cells by antiphospholipid antibodies II J. Clin. Invest. 1995 - vol. 96 - p. 2211- 2219.

12. Koch A.E., Burrows J.C., Haines G.K., Carlos T.M., Harlan J.M., Leibovich S.J. / Immunolocalisation of endothelial and leucocyte adhesion molecules in human rheumatoid and osteoarthritic synovial tissues II Lab Invest. 1991- vol. 64 - p. 313-320.

13. Pigott R., Dillon L.P., Hemingway I.H., Gearing A.J.H. / Soluble form of E-selectin, ICAM-1, and VCAM-1 are present in the supernatants of sytokine activated endothelial cells. // Biochem.Biophys.Res. Commun. 1992 - vol. 187 - p. 584-589.

14. Sfikakis P.P., Charalambopoulos D., Vayiopoulos G., et al. / Increased levels of intercellular adhesion molecule-1 in the serum of patients with systemic lupus erythematosus //

15. Clin.Exp.Rheumatol. 1994 - vol. 12 - p. 509.

16. Price D.T., Loscalzo J. / Cellular adhesion molecules and atherogenesis II Am. J. Med. 1999 -vol. 107-p. 85-97.

17. Клюквина Н.Г., Баранов А.А., Александрова Е.Н., Насонов E.JI. С-реактивный белок при сисстемной красной волчанке у мужчин: связь с тромботическими осложнениями.// Клин. Мед. -1997. №8. - С.24-27.

18. Насонов E.JL, Панюкова Е.Н., Александрова E.JI. С-реактивный белок-маркер воспаления при атеросклерозе (новые данные)// Кардиология. 2002.- №7.-С.53-62.

19. Del PapaN., Guidall L., Sala A., et al. / Endothelial cells as target for antiphospholipid antibodies //Arthritis Rheum. 1997 - vol. 40 - p. 551-561.

20. Pasceri V., Willerson J.T., Yeh E.T.H. / Direct proinflammatory effect of C- reactive protein on human endothelial cells // Circulation. 2000 - vol. 102 - p. 2165-2168.

21. Алекберова 3.C., Решетняк T.M., Кошелева H.M. и др. Антифосфолипидный синдром при системной красной волчанке: оценка диагностических и классификационных критериев // Клин. мед. 1996. - №6. - С.39-42.

22. Насонов E.JI., Алекберова З.С., Калашникова и др. Антифосфолипидный синдром (Синдром Huges): 10 лет изучения в России. // Клин.мед. -1998. №2-С.4-11.

23. Насонов ЕЛ., Баранов А., Шилкина Н.П., Алекберова З.Г. Патология сосудов при антифосфолипидном синдроме (клиника, диагностика, лечение) М.: Ярославль, 1995.

24. Carreras L.O., Forastiero R.R., Martinuzzo М.Е. / Wich are the best biological markers of the antiphospholipid syndrome ? // J.Autoimmunity. 2000 - vol. 15 - p. 163-172.

25. Lowy I./ Scientific facts and their public: the history of the diagnosis of syphilis // Rev Synth. — 1995-vol.ll6(l)-p. 27-54.

26. Conley C.L., Hartmann R.C. / Hoemorragic disorders coused by circulating anticoagulant in patients with SLE // J Clin Invest. 1952.

27. Bowie E.J.M., Thompson J.H., et al. / Thrombosis in systemic lupus erythematosus despite circulating anticoagulant II Arthr Reumatol. 1963.

28. Alarcon-Segovia D, Osmundson P.J. / Peripheral vascular syndromes associated with systemic lupus erythematosus II Ann. Intern. Med. 1965 - vol. 62 - p. 907-917.

29. Huges G.R.V., Charavi A.E., Boey M.L., et al. / Anticardiolipin antibodies detection by radioimmunoassey with thrombosis in SLE // Lancet. 1983.

30. McNeil H.P., Chesterman C.N., Kliris S.A. / Immunology and clinical importance of antiphospholipid antibodies II Adv.Immunol. — 1991 vol.49 —p. 193-280.

31. Alarcon-Segovia D., Cabral A.R. / The concept and classification of antiphospholipid/cofactor syndromes // Lupus. 1996 - vol. 5 - p. 364-367.

32. Emlen W. / Antiphospholipid antibodies: new complexities and new assay // Arthr and Rheum. -1996-vol. 39-p. 1441-1443.

33. Del Papa N., Guidali L., Spatola L.,et al. / Relationship between anti-phospholipid and anti-endothelial cell antibodies III: beta2-glycoprotein I mediates the antibody binding to endothelial membrane and induces the expression of adhesion molecules //

34. Clin. Exp. Rheumatol. 1995 - vol. 13-p. 179-185.

35. Юну П., Саложин K.B., Насонов Е.Л., Насонова В.А. Клиническое значение антител к сосудистому эндотелиюПКлин.мед. 1995. - №5. - С.5-7.

36. Le Tonqueze М., Salozhin К., Dueymes М., Piette J.C., Kovalev V., Shoenfeld Y., Nassonov E, Youinou P. / Role of beta2-glycoprotein 1 in the antiphospholipid antibody binding to endothelial cells // Lupus. 1995 -vol. 4 - p. 179-186.

37. Guarnieri M., Eisner D. / A DNA antigen that reacts with antisera to cardiolipin // Biochem Biophis Res Commun. 1974 - vol. 58 - p. 374-353.

38. Fishman P., Falach-Vaknine E., Zigelman R., et al. / Prevention of fetal loss in experimental antiphospholipid syndrome by in vivo administration of interleukin-3. // J.Clin.Invest. 1993 — vol. 91-p. 1834-1837.

39. Pierangeli S.S., Wei Lei X., Colden-Stanfeld M., Harris E.N. / Antiphospholipid antibodies activate endothelial cells in vitro and in vivo // Arthritis Rheum. 1997 - 40 (suppl.):S103.

40. Wurm H. / Beta2-glycoprotein I (apolipoprotein H) interactions with phospholipid vesicles // Int.J.Biochem. 1984 — vol. 16-p. 511-515.

41. Harris E.N., Ghavari A.E., Loisou M.E., et al. / Crossreactivity of antiphospholipid antibodyes // J Clin Lab Immunol. 1985 - vol. 16 - p. 1 -6.

42. Alarcon-Segovia D. / Pathogenetic potential of antiphospholipid antibodies. // J. Rheumatol. — 1988-vol. 15-p. 890-893.

43. Carreras L.O., Defreyn G., Machin S.J.,et al. / Arteriai thrombosis, intrauterine death and "lupus" anticoagulant: detection of immunoglobulin interfering with prostacycline formation. // Lancet. 1981 - vol. 1 - p. 244-246.

44. Oosting J.D., Derksen R.H., Blokzijl L., Sixma J.J., de Groot P.G. / Antiphospholipid antibody positive sera enhance endothelial cell procoagulant activity: studies in a thrombosis model // Thromb.Haemost. 1992 - vol. 68 - p. 278-284.

45. Chamley L.W., McKay E.J., Pattison N.S. / Inhibition of heparin/antithrombin III cofactor activity by anticardiolipin antibodies: a mechanism of thrombosis // Thromb.Res. 1993 - vol. 71-p. 103-111.

46. Shibata S., Harpel P.,Gharavi A.E., et al. / Autoantibodies to heparin from patients with antiphospholipid antibody syndrome inhibit formation of -antithrombin III- thrombin complex //Blood. 1994-vol. 83 - p. 2532-2540.

47. Silver R.K., Adler L., Hageman J.R., Hickman A.R. / Anticardiolipin antibody-positive serum enhances endothelial cell platelet-activating factor production // Am. J. Obstet. Gynecol. 1991 — vol. 165-p. 1748-1752.

48. Casiolo-Rosen L., et al. / Surface bleds on apoptotic cells are sites of enhanced procoagulant activity-imolications for coagulation events and antigenic spread in systemic lupus erythematosus//Proc.Natl.Acad.Sci USA. -1996-vol. 93-p. 1624-1629.

49. Nakamura N., et al. / Lupus anticoagulant antibody induces apoptosis in umbilical vein endothelial cells: involvment of annexin V // Biochem.Biophys. Res.Commun. 1994 - vol. 205-p. 1488-1493.

50. Dueymes M., Levy Y., Jamin C., et al. / Anti-endothelial cell antibody bindind cause apoptosis of endothelial cells // Arthritis Rheum. 1997 - vol. 40 (suppl.):S103.

51. Price B.E., Rauch J., shia M.A., et al. / Anti-phospholipid autoantibodies bind to apoptotic, but not viable, thymocytes ib a beta2-glycoprotein I-dependent manner. // J.Immunol. — 1996 vol. 157-p. 2201-2208.

52. Matsuura E., Igarashi Y., Yasuda T., et al. / Heterogeneity of anticardiolipin antibodies defined by the anticardiolipin cofactor // J.Immunol. 1992 - vol. 148 - p. 3885-3891.

53. Wang M.X, Kandian D.A., Ichikawa K., et al. / Epitope specificity of monoclonal anti-beta 2-glycoprotein I antibodies derived from patients with the antiphospholipid syndrome // J. Immunol. — 1995 —vol. 155-p. 1629-1636.

54. Arvieux J., Roussel В., Jacob M.C., Colomb M.J. / Measurement of anti-phospholipid antibodies by ELISA using beta 2-glycoprotein I as an antigen II J. Immunol. 1991 - vol. 143 -p. 223-229.

55. Roubey R.A.S., Eisenberg R.A., Harper M.F., Winfield J.B. / "Anticardiolipin" antibodies recognize beta2-glycoprotein I in the absence of phospholipid. Importance of Ag density and bivalent binding II J.Immunol 1995 - vol. 154 - p. 954-960.

56. Hunt J., Krilis S. / The fifth domain of beta2-glycoprotein I containes a phosphilipid binding site (cys281-cys288), and region recognised by anticardiolipin antibodies // J.Immunol. 1994 - p. 152-vol. 653-659.

57. Kertesz Z., Yu В., Steinkasserer A., et al. / Characterization of binding of human beta 2-glycoprotein I to cardiolipin // Biochem J. 1995 - vol. 310 - p. 315-321.

58. Е.П. Евстигнеева, Ж.Д. Беспалова, М.П. Палькеева. Изучение антигенных свойств синтетических фрагментов гликопротеина Р2-ГП1И Доклады академии наук. Биохимия, биофизика и молекулярная биология. том 360. - №6. - с.829-833.

59. Pierangeli S.S., Harris E.N., Davis S.A., DeLorenzo G. / Beta2-glycoprotein I enhances cardiolipin binding activity, but is not antigen for antiphospholipid antibodies // Br. J.Haematol. -1992-vol. 82-p. 565-570.

60. Borchman D., Harris E.N., Pierangelli S.S., Lamba O.P. / Interactions and molecular structure of cardililin and beta2-glycoprotein (beta2-GPI) // Clin.Exp.Immunol. 1995 - vol. 102 - p. 373-378.

61. Eric M. Smith, Ed Victoria & David Marquis. San Diego, С A 92121, USA. 8 th International Symposium on Antiphospholipid Antibodies, Sapporo, Japan, Oct 6-9, 1998.

62. Matsuura E., Hasunuma Y., Makita Z., et al. / Oxidative modified LDL as a target for beta2-glycoprotein I and anti-beta2-glycoprotein I antibodies // Lupus. -1996 -vol. 5 p. 517(abst.).

63. Mori T., Takeya H., Nishioka J., et al. / Beta(2)-glycoprotein I modulates the anticoagulant activity of activared protein C on the phospholipid surface // Thromb.Haemost. 1996 - vol. 75 -p. 49-55.

64. Bancsi L.F.J.M.M., van der Linden I.K., Bertina R.M. / Beta2-glycoproteim I deficiency and risk of thrombosis // Thromb.Haemost. 1992 - vol. 67 - p. 649-653.

65. Hasselear P., Derksen R.H.W.M., Blokzij L., de Groot P.G. / Crossreactivity of antibodies directed against cardiolipin, DNA, endothelial cells and blood platelets // Thromb.Haem. -1990-vol. 63-p. 169-173.

66. Arvieux J., Jacob M.C., Roussel B., et al. / Anti-beta2 glycoprotein monoclonal antibodies induce neutrophil activation and could promote endothelial disfunction // Lupus. 1994 - vol. 3 - p. 333 (abst).

67. Arvieux J., Roussel B., Pouzol P., Colomb M.G. / Platelet activating properies of murine monoclonal antibodies to beta2-glycoprotein I // Thromb. Haemost. — 1993 — vol. 70 p. 336341.

68. Charavi A.E., Harris E.N., Asherson R.A., Huges G.R.V. / Anticardiolipin antibodies: isotype distribution and phospholipid specifiti // Ann Rheum Dis. 1987 - vol. 461 - p. 1-6.

69. Berger A., German J.B., Gershwin M.E. / Implication of modifying composition by diet.l. Cardiolipin acyl is an important determinant in the binding to antiphospholipid antibodies in SLE sera // JAutoim. 1992 - vol. 5 - p. 229-241.

70. Насонов E.JI., Алекберова З.С., Клюквина Н.Г., и соавт. Антифосфолипидный синдром при системной красной волчанке у мужчин // Клин, медицина. 1996. - № 4. - С. 18-22.

71. Cervera R., Khamashta М.А., Font J.,et al. / Antiendothelial cell antibodies in patients with the antiphospholipid syndrome// A utoimmunity— 1991 vol. 11 (1) —p. 1-6.

72. Adler Y.,Finkelstein Y., Zandeman-Goddard G., et al. / The presence of antiphospholipid antibodies in acute myocardial infarction // Lupus. 1995 - vol. 4 - p. 309-313.

73. Frances С., M., Salozhin, Le Tonqueze K., Kalashnikova, L.A., Piette, J.C.,Godeau P., Nassonov E.L., Youinou P. / Anti-endothelial cell antibodies (AECA) in large series of Sneddon's syndrome // J.Am.AcadDermatol. 1995 - vol. 33 - p. 64-68.

74. Adintug A.O., Tokgoz G., D'Cruz D.P. / Antibodies to endothelial cells in patients with Behcet's disease // Clin.Immunol.Immunopathol. — 1993 vol. 67 - p. 157-162.

75. Unander A.M., Norberg R., Hahn L., Arfors L. / Anticardiolipin antibodies and complement in ninety-nine women with habitual abortion // Obstet. Ginecol. 1987 - vol. 156 - p. 114-119.

76. Kallunian K.C., Peter J.B., Middlekauff H.R., et al. / Clinical significance of single test for anticardiolipin antibodies in patients with systemic lupus erythematosus H Am. J. Med. — 1988 -vol. 85-p. 602-608.

77. Jude В., Goudemand J., Dolle I., et al. / A clinical and laboratory study of 100 cases. // Clin Lab Haematol. 1988 - vol. 10 - p. 41-51.

78. Pierangeli S.S., Wei Liu Z., Harris E.N., Gharavi A.E. / Murine monoclonal antibodies against phospholipid binding site of human beta2 glycoprotein I are thrombogenic and activated endothelial cells // Arthritis Rheum. 1997- vol. 40(suppl.):S103

79. Wagner D.D. / The Weibel-Palade body: the storage granule for von Willebrand and P-selectin // Thromb. Haemost. 1993 - vol. 70 - p. 1-5.

80. Liu C.C., Yong L.C.H., Young J.D.F. / Limphocyte-mediated cytolisis and disease // New Engl J Med. 1996-vol. 335-p. 1651-1659.

81. Thornhill M.H., Haskard D.O. / IL-4 regulates endothelial cell activation by IL-1, tumor necrosis factor, or IFN-gamma H J Immunol. 1990 - vol. 145 - p. 865-872.

82. Ruegg C., Postigo A.A., Sicorski E.E., Buther E.C., Pytela R., Erie D.J. / Role of integrin a4ß7/ a4ßP in Iymphocy adherence to fibronectin and VACM-1 and in homotypic cell clustering // J Cell Biol. 1992 - vol. 117 - p. 179-189.

83. Van Dinther-Janssen ACHM., Horst E., Koopman G., Newmann W., Scheper R.J., Meijer SJLM., Pals S.T. / The VLA-4/VCAM-1 pathway is involved in lymphocyte adhesion to endothelium in rheumatoid synovium H J Immunol. 1991 - vol. 147 - p. 4207-4210.

84. Frijns C.J., Kappelle L.J. / Inflammatory cell adhesion molecules in ischemic cerebrovascular disease. // Stroke. 2002 - vol. 33(8) - p. 2115-22.

85. Leeuwenberg J.F.M., Smeets E.F., Neefies J.J., et al. / E-selectin and intercelular adhesion molecules-1 are released by activated human endothelial cells in vitro. Immunol. II 1992 - vol. 77 - p.543-549.

86. Muller Kobold A.C., van der Geld Y.M., Limburg P.C., Choen Tervaert J.W., Kallenberg C.G.M. / Pathophysiology of ANCA-associated glomerulonephritis // Nephrol. DiaL .Transplant. 1999 - vol. 14 - p. 1366-1375.

87. Carson C.W., Beall L.D., Hunder G.G., et al. / Serum ELAM-1 is increased in vasculitis, scleroderma, and systemic lupus erythematosus II J. Rheumatol. 1993 - vol. 20 - p. 809814.

88. Boehme M.W.J., Schmitt W.H., Youinou P., et al. / Clinical relevance of elevated serum thrombomodulin and soluble E-selectine in patients with Wegener's granulomatosis and other systemic vasculitis//Am.J.Med. 1996-vol. 101-p. 387-394.

89. Blan A.D., McCollum C.N. / Circulating endothelial cell/leucocyte adhesion molecules in atherosclerosis // Thromb. Haemost. — 1994- vol. 72 p. 51.

90. Nash M.C., Shan V., Dillon M.J. / Soluble adhesion molecules and von Willebrand factor in children with Kawasaki disease // Clin.Exp.Imunol. 1995 - vol. 101 - p. 13-17.

91. Furukawa S., Imai K., Matsubara T., et al. / Increased levels of circulating intercellular adhesion molecule 1 in Kawasaki disease // Arthritis Rheum. — 1992 — vol. 35 — p. 672-677.

92. Cush J. J., Rothlein R., Lindsley H.B., et al. / Increased levels of circulating intercellular adhesion molecule 1 in the sera of patients with rheumatoid arthritis // Arthritis Rheum. 1993 -vol. 36-p. 519-527.

93. Steel D.M., Whitehead A.S. / The major acute phase reactants: C-reactive protein, serum amyloid P component and serum amyloid A // Immunology Today — 1994 vol. 15 - p. 1-10.

94. Woods A., Brull D.J., Humphries S.E., Montgomery H.E. / Genetics of inflammation and risk of coronary artery disease: the central role of interleukin-6 // Eur. Heart J., 2000 vol. 21- p. 1574-1583.

95. Wolbink G.J., Brouwer M.C., Buysmann S., et al. / CRP-mediated activation of complement in vitro // J.Immunol. 1996 - vol. 157 - p. 473-470.

96. Mold C., Gerwuz H., Du Clos T.W. / Regulation of complement activation by C-reactive protein // Immunopharmacology 1999 - vol. 42 - p. 23-30.

97. Lagrand W.K., Niessen H.W.M., Wolbink G-J., et al. / C-reactive protein colocalizes with complement in human heart during acute myocardial infarction // Circulation 1997- vol. 95 -p. 97-103.

98. Cermak J., Key N., Bach R., et al. / C-reactive protein induces human peripheral blood monocyte to synthesize tissue factor IIBlood. 1993 - vol. 82 - p. 513-520.

99. Biasucci L.M., Vitelli A., Liuzzo G. / Elevated levels of IL-6 in unstable angina. // Circulation. 1996-vol. 94-p. 506-512.

100. Ridker P., Hennekens C., Buring J.E., Rifai N. / C-reactive protein and other markers of inflammation in the prediction of cardiovascular disease in women // N. Engl. J. Med. 2000 -vol. 342-p. 836-843.

101. Zwaka T.P., Hombach V., Torzewski J. / C-reactive protein-mediated low density lipoprothein uptake by macrophages// Circulation. 2001- vol. 103-p. 1194-1197.

102. Azar R.R., Waters D.D. / The Inflammatory etiology of unstable angina // Amer. Heart J. -1996.-Vol.l32.-p.l 101-1106.

103. Roubey R. A. S., Maldonado M.A., Byrd S.N. / Comparison of an enzimelinked immunosorbent assay for antibodies to p2-glycoprotein I and a conventional anticardiolipin immunoassay // Arthritis Rheum 1996 - vol. 39 - p. 1606-1607.

104. Harris T.B., Ferrucci I., Traxy R.P., et al. / Associations of elevated interleukin-6 and C-reactive protein levels with mortality in the elderly // Am J. Med., 1999 - vol. 106 - p. 506512.

105. Mendall M.A., Strachman D.P., Butland B.K., et al. / C-reactive protein: relation tototal mortality, cardiovascular mortality and cardiovascular risk factors in man // Eur. Heart J. -2000-vol. 21 p. 1584-1590.

106. Strandberg T.E., Tilvis R.S. C-reactive protein. / Cardiovascular risk factors, and mortality in the prospective study in the elderly // Artetioscler. Thromb. Vase. Biol 2000 - vol. 20 - p. 1057-1060.

107. Rifai N., Tracy R.P., Ridker P.M. / Clinical efficacy of an automated high-sensitivity C-reactive protein assay // Clin. Chem. 1999 - vol. 45 - p. 2136-2141.

108. Roberts W.L., Sedrick R., Moulton L., et al. / Evaluation of four automated high-sensitive C-reactive protein methods; implications for clinical and epidemiological applications // Clin. Chem. 2000-vol. 46-p. 461-468.

109. Roberts W.L. Moulton L., Law T.C., et al. / Evaluation of nine automated high sensitive C-reactive protein methods: implications for clinical and epidemiological applications // Clin. Chem. 2000 - vol. 47 - p. 418-423.

110. Ockene I.S., Mathews C.D., Rifai N., et al. / Validity and classification accuracy of serial highsensitive C-reactive protein measurements in healthy adults // Clin. Chem. 2001 - vol. 47 -p. 444-450.

111. Tan EM, Cohen AS, Fries JF, Masi AT, McShane DJ, Rothfield NF, et al. / The 1982 revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum. — 1982 vol. 25-p. 1271-1277.

112. Александрова Е.Н., Насонов E.JL, Ковалев В.Ю. Количественный иммуноферментный метод определения антител к кардиолипину в сыворотке крови. // Клиническая ревматология. -1986. № .4 - С.35-39

113. Highton J., Henessian P. / A Solid-Phase Immunoassay for C-Reactive Protein. Clinical Value and the Rhumatoid Factor. // Journal of Immunological Metods. 1984 - vol. 68 - p. 185-192.

114. Бета2-гликопротеин-1 зависимые антитела к кардиолипину при антифосфолипидном синдроме. Кузнецова Т.В., Тищенко В.А., Кобылянский А.Г., Палькеева М.Е., Новиков А.А., Решетняк Т.М., Клюквина Н.Г., Насонов E.JI.// Клиническая медицина. 1998-М 9. -С.9-14.

115. Lewis S, Keil L.B., Binder W.L., DeBari V.A. / Standardized measurement of major immunoglobulin class (IgG, IgA, and IgM) antibodies to beta2glycoprotein I in patients with antiphospholipid syndrome // J. Clin. Lab. Ana. -1998 vol. 12(5) - p. 293-7.

116. Pengo V., Biasolo A., Fior M.G. / Autoimmune antiphospholipid antibodies are directed against a criptic epitope expressed when (^-glycoprotein is baund to a suitable surface // Thromb. Haemost. 1995 - vol. 73 - p. 29-34.

117. Harris E.N., Gharavi A.E., Patel S. Et al. / Evaluation of the anti-cardiolipin antibody test: report of an international workshop held 4 April 1986. // Clin.Exp.Immunol.-1987.- vol.68 p. 215-222.

118. Vamvakas E.C. / Meta-analyses of studies of the diagnostic accuracy of laboratory tests: a review of the concepts and methods II Arch Pathol. Lab. Med. 1998 - vol. 122(8) - p. 67586.

119. Matsuura E., Igarashi Y., Yasuda T., Triplett D., Koike T. / Anticardiolipin antibodies recognize beta 2-glycoprotein I structure altered by interacting with an oxygen modified solid phase surface. // J.Exp.Med. 1994 - vol.179 - p. 457-462.

120. Jones J. / Antiphospholipid antibodies: new perspectives on antigenic specificity. II J.Rheumatol 1992 - vol. 19(11) - p. 1774-1777.

121. Giles I.P., Isenberg D.A., Latchman D.S., Rahman A./How do Antiphospholipid Antibodies Bind p2-Glycoprotein I? I I Arthritis & rheumatism-2003-\o\A8 -p. 2111-2121

122. Hunt J., Simpson R., Krilis S. / Identification of a region of beta 2-glycoprotein I critical forlipid binding and anti-cardiolipin antibody cofactor activity.

123. Proc Natl Acad Sci USA. 1993 - vol. 90 - p. 2141-2145.

124. Chamley L.W., Duncalf A.M., Konakrowska B., Mitchell M.D., Johson P.M. / Conformational^ altered beta 2-glycoprotein I is the antigen for anti-cardiolipin autoantibodies.// Clin. Exp. /mwu«o/.-1999-vol.l 15-p.457-62

125. Subang R., Levine J.S., Janoff A.S., Davidson S.M., Taraschi T.F., Koike T., et al./Phosholipid -bound beta 2-glycoprotein I induces the production of anti-phospholipid antibodies.// J. Autoimmun.-2000-vol.l5-p.21-32.

126. Hammel M., Schwarzenbacher R., Gries A., Kostner G.M., Laggner P., Prassl R. / Mechanism of the interaction of beta(2)-glycoprotein I with negatively charged phospholipid membranes.// Biochemistry.-2001-vol.40-p. 14173-81.

127. Reddel S.W., Wang Y.X., Sheng Y.H., Krilis S.A. / Epitope studies with anti-beta 2-glycoproteinl antibodies from autoantibody and immunized sourse // JAutoimmun. 2000 -vol. 15(2)-p. 91-6.

128. McNeeley P.A., Dlott J.S., Furie R.A., et al. / Beta2-glycoprotein I-dependent anticardiolipin antibodies preferentially bind the amino terminal domain of beta2-glycoprotein I // Thromb Haemost. 2001 - vol. 86 - p. 590-5.

129. Bouma В., de Groot P.G., van den Elsen J.M., et al. / Adhesion mechanism of human P2-glycoprotein I to phospholipids based on its crystal structure // EMBOJ. 1999 - vol. 18 - p. 5166-5174.

130. Belmont H.M., Abramson S.B., Lie J.T. / Patology and pathogenesis of vascular injury in systemic lupus erythematosus // Arthr. and Rhum. 1996 - vol .39- p. 9-22.

131. Norden D., Ostrov B.E., Shafritz A.B., Feldt von J.M. / Vasculitis associated with antophospholipid syndrome // Semin. Arthr. and Rheum. 1995 - vol. 24 - p. 271-281.

132. Решетняк T.M., Дерксен P.B., Алекберова З.С, и др. Антитела к Р2- гликопртеину I при системной красной вролчанке: новый лабороторный маркер антифосфолипидного синдрома // Клин. Мед.-1998.-№3.- С.36-40.

133. Barka N., Regan К., Agopian М., Peter J.B. / Frequency of anticardiolipin and antiphosphatidylserine antibodies in patients with suspected antiphospholipid syndrome // Clin. Chem. 1995.- vol. 41.- p.41-45.

134. Martinuzzo ME, Forastiero RR, Carreras LO. / Anti p2-glycoprotein I antibodies: detection and association with trombosis // Br. J. Haematol. 1995 - vol. 89 - p. 397-405.

135. Najmey S.S., Keil L.B., Adib D.Y., DeBari V.A. / The association of antibodies to beta 2 glycoprotein I with the antiphospholipid syndrome: a meta-analysis // Ann. Clin. Lab. Sci. -1997- vol. 27(1)-p. 41-6.

136. Harris E.N., Pierangeli S.S., Gharavi A.E. / Diagnosis of the antiphospholipid syndrome a proposal for use of laboratory tests. // Lupus. -1998.-vol.7 (Suppl).- p. 144-148.

137. Asherson R.A., Cervera R. / 'Primary1, 'secondary' and other variants of the antiphospholipid syndrome. // Lupus.-1994.- vol. 3 p.293-298.

138. Pierangeli S., Colden-Stanfield M., Liu X., Barker J., Anderson G., Harris E. / Antiphospholipid Antibodies From Antiphospholipid Syndrome Patients Activate Endotelial Cells In Vitro and In Vivo // Circulation. 1999 - vol. 99 - p. 1997-2002.

139. Berlin C., Bargatza R.F., Cambell J.J., et al. / a4 Integrins mediate lymphocyte attachment and rolling under physiologic flow. // Cell. 1995- v ol. 80 - p. 413-422.

140. Ridker P., Buring J., Rifai N. / Soluble P-Selectin and the Risk of Future Cardiovascular Events // Circulation. 2002 - vol. 103 - p. 491-495.

141. Kling E., Bieg S., Boehme M., Scherbaum W.A. / Circulating intercellular adhesion molecule 1 as a new activity marker in patients with systemic lupus erythematosus // Clin. Investig. -1993 vol. 71(4) - p. 299-304.

142. Machold K.P., Kiener H.P., Graninger W., Graninger WB. / Soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) in patients with rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus // Clin Immunol Immunopathol. 1993 - vol. 68(1) - p. 74-8.

143. Meroni P.L., Del Papa N., Raschi E., Panzeri P., et al. / Beta2-glicopprotein I as a "Co-factor" for antiphospholipid reactivity with endothelial cells // Lupus. — 1998 — vol. 7 (suppl.2) p. 44-47.

144. Kornberg A, Renaudineau Y, Blank M, Youinou P, Shoenfeld Y. /

145. Anti-beta 2-glycoprotein I antibodies and anti-endothelial cell antibodies induce tissue factor in endothelial cells // Isr Med Assoc J. 2000 - vol. 2 (Suppl) - p. 27-31.

146. Lagrand W.K., Visser C.A., Hermens W.T. et al. / C-reactive protein as cardiovascular risk factor: more than epiphenomena // Circulation 1999 - vol. 1000 - p. 96-102.

147. Lie J.T. / Vasculitis in the antiphospholipid syndrome: culprit or consotr? // J.Rheum. 1994 -vol. 31-p. 397-398.