Иммунолипосомальные системы направленного транспорта малых интерферирующих РНК в клетки-мишени тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат химических наук Цибулькина, Елена Арнольдовна

• Цибулькина, Елена Арнольдовна
• кандидат химических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат химических наук Цибулькина, Елена Арнольдовна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 11 Доставка малых интерферирующих РНК в клетки-мишени

1.1. Механизм РНК-интерференции

1.2. Внутриклеточная интерналтзация миРНК

1.3. Вирусные системы доставки миРНК

1.3.1. Ретровирусные векторы

1.3.2. Аденовирусные векторы

1.3.3. Векторы на основе аденоассоциированных вирусов

1.3.4. Векторы на основе вируса простого герпеса

1.3.5. Векторы на основе пара- и ортомиксомирусов

1.3.6. Недостатки вирусных систем доставки препаратов

1.4. Невирусные системы доставки миРНК

1.4.1. Физические методы

1.4.2. Электрохимические методы

1.4.3. Полимеры и дендримеры

1.4.4. Биодеградабельные полимеры

1.4.5. Системы доставки миРНК на основе циклодекстрана

1.4.6. Катионные липосомы

1.4.7. Пенетрирующие клетку пептиды

1.4.8. Белковые системы доставки миРНК

1.5. Биораспределение миРНК in vivo

1.6. Способы введения миРНК in vivo

1.6.1. Системное введение миРНК

1.6.2. Локальное введение миРНК в органы и ткани

Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Приборы и материалы

2.2. Методы исследования

2.2.1. Методика приготовления ПЭГилированных 55 иммунолипосом, загруженных миРНК

2.2.2. Характеристика полученного препарата иммунолипосом

2.2.3. Исследование специфичности ПЭГилированных 67 иммунолипосом на культуре шванновских клеток

2.2.4. Оценка эффективности иммунолипосомальной доставки 71 миРНК в шванновские клетки

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ 75 ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Получение препарата ПЭГилированных иммунолипосом, 75 загруженных миРНК

3.2. Характеристика полученного препарата иммунолипосом

3.2.1. Определение размера липосом

3.2.2. Количественное определение фосфолипидов в водных 83 эмульсиях

3.2.3. Определение общего белка с бицинхониновой кислотой

3.2.4. Определение стабильности липосом в сывороточной среде

3.2.5. Определение срока сохранности липосом

3.3. Исследование специфичности ПЭГилированных 88 иммунолипосом на культуре шванновских клеток

3.3.1. Иммунопероксидазный анализ культуры шванновских 88 клеток

3.3.2. Оценка специфичности связывания препарата 89 иммунолипосом со шванновскими клетками

3.3.3. Иммунолипосомальная доставка миРНК, подавляющих 92 синтез ОБМ, в шванновские клетки

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунолипосомальные системы направленного транспорта малых интерферирующих РНК в клетки-мишени»

Актуальность темы

Специфичная пост-транскрипционная деградация матичной РНК (мРНК), происходящая при РНК-интерференции (РНКи), представляет собой новый многообещающий подход для направленного ингибирования экспрессии генов в клеточных культурах и in vivo. Эффекторами этого процесса являются дуплексы малых интерферирующих РНК (миРНК) длиной около 21-26 п.н., которые непосредственно отвечают за специфичный распад целевой мРНК. Метод РНКи считается весьма перспективным в качестве новой технологии функциональной геномики, а миРНК — потенциальными терапевтическими агентами при лечении болезней генетической этиологии [1-3]. Однако из-за большого молекулярного веса 13 кДа) и полианионной структуры 40 отрицательно заряженных фосфатных групп) свободные миРНК не проникают через клеточную мембрану, что является главным препятствием широкого применения РНКи in vivo. В связи с этим разработка систем направленного транспорта и доставки внутрь клеток-мишеней миРНК приобретает особую актуальность в современной медицине [4, 5].

В настоящей работе при выборе объекта исследования (культуры клеток-мишеней) основным доводом была возможность решить одну из первостепенных проблем нейрофармакологии — создание систем, способных осуществлять специфический направленный транспорт лекарственных средств из системного кровотока к клеткам центральной и периферической нервных систем [6].

Поскольку ОБМ является главным структурным компонентом мембраны миелинобразующих клеток, этот белок рассматривают в качестве ведущего маркера состояний, сопровождающихся нарушением целостности миелиновой оболочки [7, 8], таких как острый демиелинизирующий процесс, рассеянный склероз, травматические повреждения головного мозга, опухолевые процессы в ЦНС, затрагивающие ее глиальный компонент [9].

Для диагностики и регуляции демиелинизации или детектирования патологического процесса можно использовать транспортные системы, специфически направленные к миелинобразующим клеткам, в частности, к шванновским клеткам.

В настоящее время одним из наиболее популярных и эффективных методов контролируемого направленного транспорта миРНК и других биологически активных веществ к местам их специфического действия является использование липосом, или липидных везикулярных систем. Важным достоинством таких транспортных средств является возможность продления их срока жизни в кровотоке посредством введения в состав липосомных мембран конъюгатов липидов с полиэтиленгликолем, т.е. ПЭГилирование липосом, в результате чего происходит значительное замедление системной элиминации таких стерически стабилизированных липосом ("stealth" - липосом) [10].

Специфичность липосомальных транспортных систем обусловливается наличием в их структуре векторных молекул (МАТ к антигенам клеток-мишеней или белка-лиганда). Вектор является своего рода «троянским конем» [11] - он взаимодействует с клеточными мишенями (белковыми и иными антигенами, рецепторами, липопротеидными комплексами и т.п.), что может приводить к поглощению содержимого липосомы клеткой. В частности, для селективного векторного транспорта к миелинобразующим клеткам оптимальной мишенью представляется ОБМ.

Все это дает иммунолипосомальному транспорту миРНК неоценимые преимущества по сравнению с другими системами доставки нуклеиновых кислот в шванновские клетки-мишени. В свете вышеизложенного актуальность выбранной темы исследования определяется крайней необходимостью в создании иммунолипосомальных систем селективной доставки миРНК, способных подавлять синтез целевого белка в шванновских клетках.

Работа является, частью научных исследований, проводимых на кафедре биотехнологии МИТХТ в рамках госбюджетной темы № 1Б-5-356 "Исследования липидов, нуклеозидов, пептидов, ретиноидов методами биотехнологии и химического синтеза с целью создания препаратов медицинского назначения (онкологические и вирусные болезни, возрастные патологии)", а также по проекту № 3243' аналитической ведомственной программы Рособразования "Развитие научного потенциала высшей школы, 2006-2008".

Цель и задачи исследования

Целью данной работы являлось создание ПЭГилированных иммунолипосомальных систем, способных специфически связываться со шванновскими клетками и осуществлять доставку внутрь клеток миРНК, блокирующих синтез целевого белка.

В соответствии с поставленной целью в процессе работы предстояло решить следующие основные задачи:

1. Разработка способа получения ПЭГилированных липосом;

2. Разработка способа загрузки миРНК в синтезированные липосомы;

3. Подбор и тестирование иммунохимического вектора для " конструирования транспортной системы;

4. Конъюгация полученных липосом с моноклональными антителами;

5. Исследование специфичности полученных иммунолипосомальных транспортных систем на фиксированной и нативной культурах клеток in vitro\

6. Оценка эффективности доставки миРНК внутрь клеток-мишеней.

Научная новизна

В ходе данной работы впервые была разработана иммунолипосомальная транспортная система, способная специфически связываться со шванновскими клетками. Важно отметить, что специфическое взаимодействие ПЭГилированных иммунолипосом, векторно ориентированных анти-ОБМ-антителами, с ОБМ клеток-мишеней 8 происходило как в условиях фиксации культуры, так и с нативными шванновскими клетками. Впервые была разработана и охарактеризована иммунолипосомальная система доставки миРНК, подавляющих синтез ОБМ в шванновских клетках. Для определения эффективности доставки миРНК в клетки-мишени впервые был разработан сэндвич-вариант твердофазного иммуноферментного анализа ОБМ в лизатах шванновских клеток.

Практическая значимость

Результаты настоящей исследовательской работы демонстрируют высокую специфичность сконструированных иммунолипосомальных контейнеров к ОБМ, презентированному на шванновских клетках. Это говорит о том, что разработанные ПЭГилированные иммунолипосомы в перспективе могут найти применение в качестве препарата для диагностики заболеваний, сопровождающихся нарушением миелинизации.

В ходе работы показано, что полученные иммунолипосомальные контейнеры способны селективно доставлять миРНК в нефиксированную культуру клеток, что в будущем может быть использовано при разработке терапевтических препаратов для лечения заболеваний различной генетической этиологии.

С помощью разработанного нами сэндвич-варианта иммуноферментного анализа ОБМ в биологических жидкостях (лизаты шванновских клеток) был подтвержден факт внутриклеточной доставки миРНК посредством ПЭГилированных иммунолипосом, что вносит определенный вклад в понимание до сих пор до конца неизученных основных механизмов проникновения содержимого компартмента иммунолипосом в клетки-мишени.

Апробация работы и публикации

Основные результаты исследований были представлены на I Международной конференции «Физико-химические методы исследования нанообъектов в химии, биологии и медицине» (Россия, Туапсе, 3—9 октября 2007), 6-ой Международной научно-практической конференции 9

Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Россия, Астрахань, 8 — 11 сентября 2008), а также на заседании кафедры биотехнологии факультета биоорганического синтеза и биотехнологии МИТХТ им. М.В. Ломоносова и на заседании Проблемного совета ФГУ «ГНЦССП им. В.П. Сербского». По материалам диссертации опубликовано семь научных работ, отражающих основное содержание проведенных исследований.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 125 страницах печатного текста; содержит 28 рисунков и 4 таблицы; состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, результатов и их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы, включающей 255 наименований.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Цибулькина, Елена Арнольдовна

выводы

1. Эмульсионно-экструзионная технология обработки липидной смеси из лецитина, холестерина, катионного липида, малеимидного производного фосфатидилэтаноламина и фосфатидилэтаноламина, конъюгированного с ПЭГ-2000, в молярном соотношении 23:16:4,4:1:1,6 позволяет создавать стерически стабилизированные катионные липосомы.

2. Введение в состав липосом малеимидного производного фосфатидилэтаноламина позволяет проводить его конъюгацию с тиолированными моноклональными антителами к основному белку миелина для получения иммунолипосомальных контейнеров.

3. Стерически стабилизированные иммунолипосомы, векторно-ориентированные моноклональными антителами к основному белку миелина, способны специфически связываться с эмбриональными шванновскими клетками крысы, что делает возможным их применение в качестве наноконтейнеров для векторной доставки биологически активных веществ в ОБМ-продуцирующие клетки центральной и периферической нервной системы.

4. Технология пассивной загрузки малых интерферирующих РНК позволяет ввести в иммунолипосомы не менее 0,714 мкг миРНК на 1 мг суммарных фосфолипидов (не менее 10 молекул миРНК на одну липосому).

5. Стерически стабилизированные иммунолипосомы, загруженные миРНК, способны осуществлять направленную доставку нуклеиновых кислот в шванновские клетки, что предполагает эффективность подобных систем для диагностики и лечения заболеваний, ассоциированных с патологией миелина, а также при заболеваниях различной генетической этиологии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Цибулькина, Елена Арнольдовна, 2008 год

1. Sioud М. Therapeutic siRNAs. //J. Trends Pharmacol. Sci. 2004. - V. 25.-Т. l.-P. 22-28.

2. Sontheimer E. J. Assembly and function of RNA silencing complexes. //J. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2005. - V. 6. - N. 2. - P. 127-138.

3. Gilmore I. R., Fox S. P., Hollinns A. J., Akhtar S. Delivery strategies for siRNA-mediated gene silencing. //J. Curr. Drug Deliv. 2006. - V.3. - P. 147-155.

4. Akhtar S., Benter I. F. Nonviral delivery of synthetic siRNAs in vivo. //J. Clin Invest. 2007. - Т. 117. - N. 12. - P. 3623-3632.

5. Pirollo K. F., Chang E. H. Targeted delivery of small interfering RNA: approaching effective cancer therapies. //J. Cancer Res. — 2008. V. 68. -N. 5.-P. 1247-1250.

6. Pardridge W. M. Blood-brain barrier drug targeting: the future of brain drug development.// J. Mol Interv. 2004. V. 3. - N. 2. - P. 90-105.

7. Чехонин В. П., Турина О.И., Дмитриева Т. Б. и др. Основной белок миелина. Строение, свойства, функции, роль в диагностике демиелинизирующих заболеваний.// Вопр. мед. химии. 2000. — Т. 46. — №6.-С. 549-563.

8. Lamers К. J., de Reus Н. P., Jongen P. J. Myelin basic protein in CSF as indicator of disease activity in multiple sclerosis //J. Mult. Scler. — 1998. — V. 4.-N.3. —P. 124-126.

9. Чехонин В. П., Турина О. И., Дмитриева Т.Б. Моноклональные антитела к нейроспецифическим белкам. —М.: Медицина, 2007, 344 с.10. basic D. D., Martin F. Stealth liposomes. Boca Raton: CRC Press, 1995.

10. Pardridge W. M. Molecular Trojan horses for blood-brain barrier drug delivery. //J.Curr. Opin. Pharmacol. 2006. - V. 6. - N. 5. - P. 494-500.

11. Waseem T. RNA interference: a potential revolution in disease therapy. // J. Coll. Physicians Surg. Pak. 2006. - V. 16. - N. 7. - P. 491-492.

12. Sah D.W. Therapeutic potential of RNA interference for neurological disorders. // J. Life Sci. 2006. - V. 79. - N. 19. - P. 1773-1780.

13. Lee Y. S., Dutta A. MicroRNAs: small but potent oncogenes or tumor suppressors. // J. Curr. Opin. Investig. Drugs. 2006. - V. 7. - N. 6. - P. 560-564.

14. Pirollo K. F., Rait A., Zhou Q., et al. Materializing the potential of small interfering RNA via a tumor-targeting nanodelivery system. //J. Cancer Res. 2007. - V. 67. - N. 7. - P. 2938-2943.

15. Liu С. C., Shen Z., Kung, H. F., Lin M. С. M. Cancer gene therapy targeting angiogenesis: An updated review. // World J. Gastroenterol. -2006.-V. 12.-N. 43.-P. 6941-6948.

16. Akhtar S., Hughes M. D., Khan A., et al. The delivery of antisense therapeutics. //J. Adv. Drug Deliv. Rev. 2000. - V. 44. - N. 1. - P. 3-21.

17. Hughes M. D., Hussain M., Nawaz Q., et al. The cellular delivery of antisense oligonucleotides and ribozymes. //J. Drug Discov. Today. -2001.-V. 6.-N. 6.-P. 303-315.

18. Napoli C., Lemieux C., Jorgensen R. Introduction of a Chimeric Chalcone Synthase Gene into Petunia Results in Reversible Co-Suppression of Homologous Genes in trans. //J. Plant Cell. 1990. - V. 2. - T. 4. - P. 279-289.

19. Fire A., Xu S., Montgomery M. K., et al. Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans. // J. Nature.-1998.-V. 391.-P. 806-811.

20. Hammond S. M., Bernstein E., Beach D., Hannon G. J. An RNA-directed nuclease mediates post-transcriptional gene silencing in Drosophila cells// J. Nature. 2000. - V. 404. - N. 6775. - P. 293-296.

21. Elbashir S. M., Harborth J., Lendeckel W., et al. Duplexes of 21-nucleotide RNAs mediate RNA interference in cultured mammalian cells. //J. Nature. -2001.-V. 411.-N. 6836.-P. 494-498.

22. Ambros V. The functions of animal microRNAs. //J. Nature. 2004. - V. 431.-N. 7006.-P. 350-355.

23. Martin S. E., Caplen N. J. Applications of RNA interference in mammalian systems. //J. Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. — 2007. V. 8. - P. 81— 108.

24. Parker J. S., Barford D. Argonaute: a scaffold for the function of short regulatory RNAs. //J. Trends Biochem. Sci. 2006. - V. 31. - P. 622-630.

25. Martinez J., Patkaniowska A., Urlaub H., et al. Single-stranded antisense siRNAs guide target RNA cleavage in RNAi. //J. Cell 2002. - V. 110. -N. 5. - P. 563-574.

26. Song J. J., Smith S. K., Hannon G. J., Joshua-Tor L. Crystal structure of Argonaute and its implications for RISC sheer activity.//.!. Science. 2004. - V. 305. - N. 5689. - P. 1434-1437.

27. Rand T. A., Ginalski K., Grishin N. V., Wang X. Biochemical identification of Argonaute 2 as the sole protein required for RNA-induced silencing complex activity. //J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004. - V. 101.-N. 40.-P. 14385-14389.

28. Kim D.H., Rossi J. J. Strategies for silencing human disease using RNA interference. //J. Nat. Rev. Genet. 2007. - V. 8. - P. 173-184.

29. Aigner A. Delivery systems for the direct application of siRNAs to induce RNA interference (RNAi) in vivo. //J. Biomed. Biotechnol. 2006. - V. 2006.-N. 4. -P.716-759.

30. Xie F. Y., Woodle M. C., Lu P. Y. Harnessing in vivo siRNA delivery for drug discovery and therapeutic development. //J. Drug Discov. Today. — 2006.-V. 11.-P. 67-73.

31. Aagaard L., Rossi J. J. RNAi therapeutics: principles, prospects and challenges. //J. Adv. Drug Deliv. Rev. 2007. - V. 59. - P. 75-86.

32. Gollob J. A., Schnipper C. P., Orsini E., et al. Characterization of a novel subset of CD8(+) T cells that expands in patients receiving interleukin-12. // J. Clin Invest. 1998. - V. 102. - N. 3. - P. 561-575.

33. Bridge A. J., Pebernard S., Ducraux, A. //J. Nat. Genet. 2003. - V. 34. -N. 3.-P. 263-264.

34. Sledz C. A., Holko M., de Veer M. J., et al. Activation of the interferon system by short-interfering RNAs//J. Nat. Cell Biol. 2003. - V. 5. - N. 9. -P. 834-839.

35. Persengiev S. P., Zhu X., Green M. R. Nonspecific, concentration-dependent stimulation and repression of mammalian gene expression by small interfering RNAs (siRNAs).//J. RNA. 2004. - V. 10. - N. 1. - P. 12-18.

36. Kim D. H., Longo M., Han, Y., et al. Interferon induction by siRNAs and ssRNAs synthesized by phage polymerase.//.!. Nat. Biotechnol. 2004. -V. 22.-N. 3.-P. 321-325.

37. Judge A. D., Sood V., Shaw J. R. I. Sequence-dependent stimulation of the mammalian innate immune response by synthetic siRNA.//J. Nat. Biotechnol. 2005. - V. 23. - N. 4. - P. 457-462.

38. Elbashir S. M., Martinez J., Patkaniowska, A., et al. Functional anatomy of siRNAs for mediating efficient RNAi in Drosophila melanogaster embryo lysate. //EMBO J. 2001. - V. 20. - P. 6877-6888.

39. Khvorova A., Reynolds A., Jayasena S. D. Functional siRNAs and miRNAs exhibit strand bias.//J. Cell. 2003. - V. 115. - P. 209-216.

40. Schwarz D. S., Hutvagner G., Du Т., et al. Asymmetry in the assembly of the RNAi enzyme complex.//! Cell. 2003. - V. 115. - P. 199-208.

41. Ui-Tei K., Naito Y., Takahashi F., et al. Guidelines for the selection of highly effective siRNA sequences for mammalian and chick RNA interference. //J. Nucl. Acids Res. 2004. - V. 32. - P. 936-948.

42. Reynolds A., Leake D., Boese Q., et al. Rational siRNA design for RNA interference.//!. Nat. Biotechnol. 2004. - V. 22. - N. 3. - P. 326-330.

43. Nykanen A., Haley В., Zamore P. D. ATP requirements and small interfering RNA structure in the RNA interference pathway.// J. Cell. -2001.-V. 107.-P. 309-321.

44. Kretschmer-Kazemi Far R., Sczakiel G. The activity of siRNA in mammalian cells is related to structural target accessibility: a comparison with antisense oligonucleotides.//.!. Nucl. Acids Res. 2003. - V. 31. - P. 4417-4424.

45. Xu Y., Zhang H. Y., Thormeyer D., et al. Effective small interfering RNAs and phosphorothioate antisense DNAs have different preferences for target sites in the luciferase mRNAs. // J. Biochem. Biophys. Res. Commun. — 2003.-V. 306. -P. 712-717.

46. Ryther R. C., Flynt A. S., Phillips J. A., Patton J. G. siRNA therapeutics: big potential from small RNAs. //J. Gene Ther. 2005. - V. 12. - N. 1. -P. 5-11.

47. Shoji Y., Akhtar S., Periasamy A., et al. Mechanism of cellular uptake of modified oligodeoxynucleotides containing methylphosphonate linkages.//! Nucl. Acids Res. 1991. - V. 19. - P. 5543-5550.

48. Hughes J., Astriab A., Yoo H., et al. In vitro transport and delivery of antisense oligonucleotides. //J. Methods Enzymol. 2000. - V. 313. - P. 342-358.

49. Yang G., Thompson J. A., Fang В., Liu J. Silencing of H-ras gene expression by retrovirus-mediated siRNA decreases transformation efficiency and tumorgrowth in a model of human ovarian cancer. //J. Oncogene. 2003. - V. 22. - N. 36. - P. 5694-5701.

50. Paez J., Montano R., Benatuil L., et al. High efficiency and long-term foreign gene expression in cultured liver sinusoidal endothelial cells by retroviral transduction. // J. Endothelium. 2006. - V. 113. — N. 4. - P. 279-285.

51. Maier P., Fleckenstein K., Li L., et al. Overexpression of MDR1 using a retroviral vector differentially regulates genes involved in detoxification and apoptosis and confers radioprotection. //J. Radiat Res. 2006. — V. 166. — N. 3. - P. 463^73.

52. Nienhuis A. W. Assays to evaluate the genotoxicity of retroviral vectors. //J. Mol Ther. 2006. - V. 14. - N. 4. - P. 459^60.

53. Мок Н. Р, Lever A. A method to estimate the efficiency of gene expression from an integrated retroviral vector. //J. Retrovirology. 2006. -V. 17.-P. 3-51.

54. Kinyanjui M. W., Ramos-Barbon D., Villeneuve A., Fixman E. D. Enhanced transduction of antigen-stimulated T lymphocytes with recombinant retroviruses concentrated by centrifugal filtration. // J. Immunol. Methods. 2006. - V. 314. - N. 2. - P. 80-89.

55. Menendez P., Wang L., Cerdan C., Bhatia M. Retroviral transduction of hematopoietic progenitors derived from human embryonic stem cells. // J. Methods Mol Biol. 2006. - V. 331. - P. 201-220.

56. Abramson J., Rozenblum G., Pecht I. Stable knockdown of MAFA expression in RBL-2H3 cells by siRNA retrovirus-delivery system. //J. Immunol. Lett. 2004. - V. 92. -N. 1, 2. - P. 179-184.

57. Barton G. M., Medzhitov R. Retroviral delivery of small interfering RNA into primary cells. //J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. - V. 99. - N. 23.-P. 14943-14945.

58. Devroe E., Silver P. A. Retrovirus-delivered siRNA. //J. BMC Biotechnol. — 2002. Y. 2.-P. 15.

59. Bunnell B. A., Morgan R. A. Gene therapy for HIV infection. //J. Drugs Today. 1996. - V. 32. - P. 209-224.

60. Lam P. Y. P., Breakefield X. O. Potential of gene therapy for brain tumors. //J. Human Mol. Genetics. 2001. - V. 10. - N. 7. - P. 777-787.

61. Storvold G. L., Gjernes E., Askautrud H. A., et al. A retroviral vector for siRNA expression in mammalian cells. //J. Mol. Biotechnol. — 2007. — V. 35.-N. 3.-P. 275-282.

62. Sun Y., Li Z., Li L. Effective inhibition of hepatitis В virus replication by small interfering RNAs expressed from human foamy virus vectors. // Int J. Mol. Med. 2007. - V. 19. - N. 4. - P.705-711.

63. Moms К. Y., Rossi J. J. Lentiviral-mediated delivery of siRNAs for antiviral therapy. //J.Gene Ther. 2006. - V. 13. - N. 6. - P. 553-558.

64. Schomber Т., Kalberer C. P., Wodnar-Filipowicz A., Skoda R. C. Gene silencing by lentivirus-mediated delivery of siRNA in human CD34+ cells. //J. Blood.-2004.-V. 103.-N. 12.-P. 4511-4513.

65. Li M., Rossi J. J. Lentiviral vector delivery of siRNA and shRNA encoding genes into cultured and primary hematopoietic cells. //J. Methods Mol. Biol.-2005. -V. 309. P. 261-272.

66. Short M. P., Choi В., Lee J., et al. Gene delivery to glioma cells in rat brain by grafting of a retrovirus packaging cell line. //J. Neurosci. Res. -1990. -V. 27. P. 427-439.

67. Mountain A. Gene therapy: the first decade. //J. Trends Biothechnol. -2000. -V. 18.-P. 119-128.

68. Caetano В. C., Bruna-Romero O., Fux В., et al. Use of adenoviral vectors as veterinary vaccines. //J. Gene Ther. 2005. - V. 12. - N. 1. - P. 73-83.

69. Sabbioni S., Callegari E., Spizzo R., et al. Anticancer activity of an adenoviral vector expressing siRNA against BK virus T-ag. //J. Cancer Gene Ther. 2007. - V. 14. - N. 3. - P. 297-305.

70. Cho-Rok J., Yoo J., Jang Y. J. Adenovirus-mediated transfer of siRNA against PTTG1 inhibits liver cancer cell growth in vitro and in vivo. //J. Hepatology. 2006. - V. 43. - N. 5. - P. 1042-1052.

71. Uchida H., Tanaka Т., Sasaki K., et al. Adenovirus-mediated transfer of siRNA against survivin induced apoptosis and attenuated tumor cell growth in vitro and in vivo. I I J. Mol. Ther. 2004. - V. 10. - N. 1. - P. 162-171.

72. Ghosh S.S., Gopinath P., Ramesh A. Adenoviral vectors: a promising tool for gene therapy. //J. Appl. Biochem. Biotechnol. 2006. - V. 133. - N. 1. - P. 9-29.

73. Shen C., Reske S. N. Adenovims-delivered siRNA. //J. Methods Mol. Biol. 2004. - V. 252. - P. 523-532.

74. Shen C., Buck A. K., Liu X., et al. Gene silencing by adenovirus-delivered siRNA.//FEBS Lett.-2003.-V. 539.-N. 1-3.-P. 111-114.

75. Benihound K., Yeh P., Perricaudet M. Adenovirus vector for gene delivery. //J. Curr. Opin. Biotech. 1999. - V. 10. - P. 440-447.

76. Mitani K., Graham F. L., Caskey С. Т., Kochanek S. Rescue, propagation, and partial purification of helper-dependent adenovirus vectors. //J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - V. 95. - P. 3854-3858.

77. Moore M. D., McGarvey M. J., Russell R. A. Stable inhibition of hepatitis В virus proteins by small interfering RNA expressed from viral vectors. //J. Gene Med.-2005.-V. 7.-N. 7.-P. 918-925.

78. Shvetsova Z., Malik J. M. I., Michel U., et al. Promotors and serotypes: targeting of adeno-associated virus vectors in the rat central nervous system. //J. Exp. Phisiol. 2004. - V. 90. -N. 1. - P. 53-59.

79. Kugler S., Kilic E., Bahr M. Human synapsin-1 gene promoter confers highly neuron-specific long-term transgene expression from an adenoviral vector in adult rat brain depending on transduced area. //J. Gene Ther. — 2003.-V. 10.-P. 337-347.

80. Kugler S., Lingor P., Scholl U., et al. Differential transgene expression in brain cells in vivo and in vitro from AAV-2 vectors with small transcriptional control units. //J. Virology. 2003. - V. 311. - P. 89-95.

81. Andreansky S. S., He В., Gillespie G. Y., et al. The application of genetically engineered herpes simplex viruses to the treatment of experimental brain tumors. //J. Proc. Netl. Acad. Sci. USA. 21996. - V. 93.-P. 11313-11318.

82. Latchman D. S. Herpes virus vectors for gene therapy in the nervous system. //J. Biochem. Soc. Trans. 1999. - V. 27. - P. 847-851.

83. Glorioso J. C., Bender M. A. Goins W. F., et al. Herpes simplex virus as a gene delivery vector for the central nervous system. //J. Viral Vectors. Academic Press. New York. 1995. - P. 1-23.

84. Moolnen F. L. Tumor chemosensivity conferred by inserted herpes thynidine kinase genes: paradigm for a prospective cancer control strategy. //J. Cancer Res. 1986. -V. 46.-P. 5276-5281.

85. Howard M. K., Coffin R. S., Maclean A. R., et al. Gene delivery to rat enteric neurons using herpes simplex vims-based vectors. // J. Mol. Neurosci. 1997. - V. 9. - P. 65-74.

86. Rainov N. G., Dobberstein K. U., Heidecke V., et al. Long-term survival in a rodent brain tumor model by bradykinin-enhanced intra-arterial delivery of a therapeutic herpes simplex virus vector. //J. Cancer Gene Ther. — 1998.-V. 5.-N. 3.-P. 158-162.

87. Palmer J. A., Branston R. H., Lilley С. E., et al. Development and optimization of herpes simplex virus vectors for multiple long-term gene delivery to the peripheral nervous system. // J. Virol. 2000. - V. 74. - N. 12.-P. 5604-5618.

88. Sabbioni S., Callegari E., Manservigi M. Use of herpes simplex virus type 1-based amplicon vector for delivery of small interfering RNA. //J. Gene Ther. 2007. - V. 14. - N. 5. - P. 459-464.

89. Kaneda Y. Applications of Hemagglutinating Virus of Japan in therapeutic delivery systems //J. Expert Opin. Drug Deliv. — 2008. — V. 5. — N. 2. — P. 221-233.

90. Ito M., Yamamoto S., Nimura K. Rad51 siRNA delivered by HVJ envelope vector enhances the anti-cancer effect of cisplatin. //J. Gene Med. 2005. - V. 7.-N. 8.-P. 1044-1052.

91. China О. K. Gene Therapy Drug. // J. Gen. Eng. News. 2003. - V. 6. - P. 22-30.

92. Kay M. A., Glorioso J. C., Naldini L. Viral vectors for gene therapy: the art of turning infectious agents into vehicles of therapeutics. // J. Nat. Med. -2001.-V. 7.-P. ЗЗ^Ю.

93. Favre D., Provost N., Blouin V., et al. Immediate and long-term safety of recombinant adeno-associated virus injection into the nonhuman primate muscle. //J. Mol. Ther. -2001. -V. 4. P. 559-566.

94. Aigner A. Nonviral in vivo delivery of therapeutic small interfering RNAs. //J. Curr. Opin. Mol. Ther. 2007. - V. 9. - N. 4. - P. 345-352.

95. Aoki M., Ishii Т., Kanaoka M., Kimura T. RNA interference in immune cells by use of osmotic delivery of siRNA. //J. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006. - V. 341. - N. 2. - P. 326-333.

96. Huang H., Zegarra-Moro O. L., Benson D., Tindall D. Androgens repress Bcl-2 expression via activation of the retinoblastoma (RB) protein in prostate cancer cells. //J. Oncogene. 2004. - V. 23. - N. 12. - P. 21612176.

97. Usui I., Imamura Т., Huang J., et al. Cdc42 is a Rho GTPase family member that can mediate insulin signaling to glucose transport in 3T3-L1 adipocytes. //J. Biol.Chem. 2003. - V. 378. - P. 13765-13774.

98. Ling X., Li F. Silencing of antiapoptotic survivin gene by multiple approaches of RNA interference technology. //J. Biotechniques. — 2004. -V. 36.-N. 3.-P. 450-460.

99. Prud'homme G.J., Glinka Y., Khan A.S., Draghia-Akli R. Electroporation-enhanced nonviral gene transfer for the prevention or treatment of immunological, endocrine and neoplastic diseases. //J. Curr. Gene Ther. -2006. V. 6. - N. 2. - P. 243-273.

100. Prechtel A.T., Turza N.M., Theodoridis A.A., et al. Small interfering RNA (siRNA) delivery into monocyte-derived dendritic cells by electroporation. //J. Immunol. Methods. 2006.-N. 311.-N. 1,2.-P. 139-152.

101. Bose A., Guilherme A., Robida S. I., et al. Glucose transporter recycling in response to insulin is facilitated by myosin Myolc. //J. Nature. — 2002. -V. 420.-P. 821-824.

102. North B. J., Marshall B. L., Borra M. Т., et al. The human Sir2 ortholog, SIRT2, is an NAD+-dependent tubulin deacetylase.// J. Mol. Cell. 2003. -V. 11.-P. 437-444.

103. Kakizawa Y., Furukawa S., Ishii A., Kataoka K. Organic-inorganic hybrid-nanocarrier of siRNA constructing through the self-assembly of calcium phosphate and PEG-based block aniomer. //J. Control Release. 2006. -V. 111.-N.3.-P. 368-370.

104. Porter L. A., Dellinger R. W., Tynan, J.A., et al. Human Speedy: a novel cell cycle regulator that enhances proliferation through activation of Cdk2. //J. Cell Biol. 2002. - V. 157. -N. 3. - P. 357-366.

105. Donze O., Picard D. RNA interference in mammalian cells using siRNAs synthesized with T7 RNA polymerase. //J. Nucl. Acids Res. 2002. - V. 30.-N. 10.: e46.

106. Kishida Т., Asada H., Gojo S., et al. Sequence-specific gene silencing in murine muscle induced by electroporation-mediated transfer of short interfering RNA.// J. Gene Med. 2004. - V. 6. - N. 1. - P. 105-110.

107. Golzio M., Mazzolini L., Moller P., et al. Inhibition of gene expression in mice muscle by in vivo electrically mediated siRNA delivery.// J. Gene Ther. 2005. - V. 12. - N. 3. - P. 246-251.

108. Akaneya Y., Jiang В., Tsumoto T. RNAi-induced gene silencing by local electroporation in targeting brain region. // J. Neurophysiol. 2005. - V. 93.-N. l.-P. 594-602.

109. Gary D. J., Puri N., Won Y. Y. Polymer-based siRNA delivery: perspectives on the fundamental and phenomenological distinctions from polymer-based DNA delivery. //J. Control Release. 2007. - V. 121. -N. 1,2.-P. 64-73.

110. Tsubouchi A., Sakakura J., Yagi R., et al. Localized suppression of RhoA activity by Tyr31/118-phosphorylated paxillin in cell adhesion and migration. //J. Cell Biol. 2002. - V. 159. - P. 673-683.

111. Huang Y. Z., Zang M., Xiong W. C., et al. Erbin suppresses the MAP kinase pathway.// J. Biol. Chem. 2003. - V. 278. - P. 1108-1114.

112. Duxbury M. S., Ito H., Benoit E., et al. RNA interference targeting focal adhesion kinase enhances pancreatic adenocarcinoma gemcitabinechemosensitivity.//J. Biochem. Biophys. Res. Commun. -2003. -V. 311. -P. 786-792.

113. Itaka K., Chung U.I., Kataoka K. Supramolecular nanocarrier for gene and siRNA delivery. //J. Nippon. Rinsho. 2006. - V. 64. - N. 2. - P. 253-257.

114. Jiang G., Park K., Kim J., et al. Hyaluronic acid-polyethyleneimine conjugate for target specific intracellular delivery of siRNA. //J. Biopolymers. 2008. - V. 89. - N. 7. - P. 635-642.

115. Swami A., Kurupati R. K., Pathak A. A. Unique and highly efficient non-viral DNA/siRNA delivery system based on PEI-bisepoxide nanoparticles. //J. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2007. - V. 362. -N. 4. - P. 835541.

116. Inoue Y., Kurihara R., Tsuchida A. Efficient delivery of siRNA using dendritic poly(L-lysine) for loss-of-function analysis. //J. Control. Release.- 2008. V. 126. - N. 1. - P. 59-66.

117. Grayson A. C., Doody A. M., Putnam D. Biophysical and structural characterization of polyethylenimine-mediated siRNA delivery in vitro. //J. Pharm. Res.-2006.-V. 23.-N. 8.-P. 1868-18676.

118. LeHoux J. G., Grondin F. Some effects of chitosan on liver function in the rat. J. Endocrinology. 1993; 132: 1078-1084.

119. Howard K. A., Rahbek U. L., Liu X., et al. RNA interference in vitro and in vivo using a novel chitosan/siRNA nanoparticle system. // J. Mol. Ther.- 2006. V. 14. - N. 4. - P. 476-484.

120. Yuan X., Li L., Rathinavelu A., et al. SiRNA drug delivery by biodegradable polymeric nanoparticles. //J. Nanosc Nanotechnol. — 2006. -V. 6. — N. 9, 10.-P. 2821-2828.

121. Khan A., Benboubetra M., Sayyed P. Z., et al. Sustained polymeric delivery of gene silencing antisense ODNs, siRNA, DNAzymes and ribozymes: in vitro and in vivo studies. //J. Drug Target. — 2004. V. 12. — N. 6.-P. 393-404.

122. Heidel J. D. Administration in non-human primates of escalating intravenous doses of targeted nanoparticles containing ribonucleotide reductase subunit M2 siRNA. //J. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2007. -V. 104.-P. 5715-5721.

123. Bartlett D. W., Davis M. E. Impact of tumor-specific targeting and dosing schedule on tumor growth inhibition after intravenous administration of siRNA-containing nanoparticles. //J. Biotechnol. Bioeng. 2008. - V. 99. -N.4.-P. 975-985.

124. Pardridge W. M. Drug deliveiy to the brain. //J. Cereb. Blood Flow Metab. 1997.-V. 17.-P. 713-731.

125. Pardridge W. M. Blood-brain barrier drug targeting: The future of brain drug development. //J. Mol. Interv. 2003. - V. 3. - P. 90-105.

126. Cerletti A., Drewe J., Flicker G., et al. Endocytosis and transcytosis of an immunoliposome-based brain drug deliveiy system. //J. Drug Target. — 2000. V. 8. - N. 6. - P. 435-446.

127. Gutman R. L., Peacock G., Lu D. R. Targeted drug deliveiy for brain cancer treatment.// J. Control. Release. 2000. - V. 65. - N. 1-2. - P. 3141.

128. Huwyler J., Wu D., Pardridge W. M. Brain drug delivery of small molecules using immunoliposomes. // J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1996.-V. 93.-P. 14164-14169.

129. Чехонин В. П., Жирков Ю. А., Дмитриева Т. Б. Направленная доставка лекарственных средств в мозг. // Вестник Российской АМН. -2006.-Т. 8.-С. 30-37.

130. Fattal E., Dubernet C., Couvreur P. Liposome-based fonnulations for the delivery of oligonucleotides. // J. S.T.P. Pharma Sciences. — 2001. — V. 11. -P. 31-44.

131. Дудниченко А. С., Краснопольский Ю. M., Швец В. И. Липосомальные лекарственные препараты в эксперименте и клинике. — Харьков.: Изд. «РА-Каравелла», 2001. 144 с.

132. Дудниченко А. С., Швец В. И., Темиров Ю. П., Краснопольский Ю. М. // Способ получения липосомальной формы противоопухолевого цитостатика. Патент Украины. — 1995; 6700.

133. Way К. J. Liposomal amphotericin В. //J. of Infection. 1994. -V. 28. -N. l.-P. 35-43.

134. Eckardt I. R., Campbell E., Burris H. A., et al. Phase II trial of Dauno Home, liposome-encapsulated daunomycin in patient with metastatic adenocarcinoma of the colon. // Amer. J. of clinical oncology. — 1994. — V. 17.-N. 6.-P. 498-501.

135. Lappalainen K., Jaaskelainen I., Syrjanen K., et al. Comparison of cell proliferation and toxicity assays using two cationic liposomes. //J. Pharm. Res. 1994.- V. 11.-P. 1127-1131.

136. Dokka S., Toledo D., Shi X., et al. Oxygen radical-mediated pulmonary toxicity induced by some cationic liposomes. //J. Pharm. Res. 2000. - V. 17.-P. 521-525.

137. Godbey W. Т., Mikos A. G. Recent progress in gene delivery using non-viral transfer complexes. //J. Control. Release. 2001. - V. 72. — P. 115125.

138. Feigner J. H., Kumar R., Sridhar C. N., et al. Enhanced gene delivery and mechanism studies with a novel series of cationic lipid formulations. //J. Biol. Chem. 1994. -V. 269. - P. 2550-2561.

139. Hofland H. E. J., Shephard L., Sullivan S. M. Formation of stable cationic lipid/DNA complexes for gene transfer. // J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1996. V. 93. - P. 7305-7309.

140. Riu E., Grimm D., Huang Z., Kay M. A. Increased maintenance and persistence of transgenes by excision of expression cassettes from plasmid sequences in vivo. II J. Hum Gene Ther. 2005. - V. 16. - N. 5. - P. 558570.

141. Filion M. C., Phillips N. C. Toxicity and immunomodulatory activity of liposomal vectors formulated with cationic lipids toward immune effector cells. //J. Biochim. Biophys. Acta. 1997. - V. 1329. - P. 345-356.

142. Greco O., Marples В., Dachs G. U., et al. Novel chimeric gene promoters responsive to hypoxia and ionizing radiation. // J. Gene Ther. 2002. - V. 9.-P. 1403-1411.

143. Huang L., Viroonchatapan E. Nonviral Vectors for Gene Therapy. //San Diego, CA: Academic Press. 1999. - P. 3-22.

144. Freimark B. D., Blezinger H. P., Florack V. J., et al. Cationic lipids enhance cytokine and cell influx levels in the lung following administration of plasmid: cationic lipid complexes. //J. Immunol. — 1998. -V. 160.-P. 4580-4586.

145. Han S. E., Kang H., Shim G. Y., et al. Novel cationic cholesterol derivative-based liposomes for serum-enhanced delivery of siRNA. //Int. J. Pharm. 2008. - V. 353. - N. 1-2 - P. 260-269.

146. Zhang C., Tang N., Liu X., et al. siRNA-containing liposomes modified with polyarginine effectively silence the targeted gene. // J. Control. Release. -2006.-V. 112.-N. 2.-P. 229-39.

147. Yang D., Buchholz F., Huang Z., et al. Short RNA duplexes produced by hydrolysis with Escherichia coli RNase III mediate effective RNA interference in mammalian cells.//J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. -V. 99.-P. 9942-9947.

148. Leirdal M., Sioud M. Gene silencing in mammalian cells by preformed small RNA duplexes./Л. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. - V. 295.-P. 744-748.

149. Zhang D., Li F., Weidner D., et al. Physical and functional interaction between myeloid cell leukemia 1 protein (MCL1) and Fortilin. The potential role of MCL1 as a fortilin chaperone. // J. Biol. Chem. 2002. — V. 277.-P. 37430-37438.

150. Troussard A. A., Mawji N. M., Ong C., et al. Conditional knock-out of integrin-linked kinase demonstrates an essential role in protein kinase B/Akt activation. //J. Biol. Chem. 2003. - V. 278. - P. 22374-22378.

151. Leu Y. W., Rahmatpanah F., Shi H., et al. Double RNA interference of DNMT3b and DNMT1 enhances DNA demethylation and gene reactivation. //J. Cancer Res. 2003. - V. 63. - P. 6110-6115.

152. Potente M., Fisslthaler В., Busse R., Fleming I. 11,12-Epoxyeicosatrienoic acid-induced inhibition of FOXO factors promotes endothelial proliferation by down-regulating p27Kipl. //J. Biol. Chem. 2003. - V. 278.-P. 29619-29625.

153. Gaggar A., Shayakhmetov D. M., Lieber A. CD46 is a cellular receptor for group В adenoviruses. //J. Nat. Med. 2003. - V. 9. - P. 1408-1412.

154. Sorensen D. R., Leirdal M., Sioud M. Gene silencing by systemic delivery of synthetic siRNAs in adult mice.//J. Mol. Biol. 2003. - V. 327. - P. 761-766.

155. Verma U. N., Surabhi R. M., Schmaltieg A. Small interfering RNAs directed against beta-catenin inhibit the in vitro and in vivo growth of colon cancer cells. //J. Clin. Cancer Res. 2003. - V. 9. - P. 1291-1300.

156. Cardoso A. L., Simoes S., de Almeida L. P. siRNA delivery by a transferrin-associated lipid-based vector: a non-viral strategy to mediate gene silencing. // J. Gene Med. 2007. - V. 9. -N. 3. - P. 170-183.

157. Sato A., Takagi M., Shimamoto A., et al. Small interfering RNA delivery to the liver by intravenous administration of galactosylated cationic liposomes in mice. //J. Biomaterials. 2007. - V. 28. - N. 7. - P. 14341442.

158. Drin G., Cottin S., Blanc E., et al. Studies on the internalization mechanism of cationic cell-penetrating peptides. //J. Biol. Chem. — 2003. — V. 278.-N. 33.-P. 31192-31201.

159. Richard J. P., Melikov K., Vives E., et al. Cell-penetrating peptides. A reevaluation of the mechanism of cellular uptake.//J. Biol. Chem. — 2003. — V. 278. -N. l.-P. 585-590.

160. Morris M.C., Vidal P., Chaloin L., et al. A new peptide vector for efficient delivery of oligonucleotides into mammalian cells. //J. Nucl. Acids Res. — 1997. -V. 25. P. 2730-2736.

161. Simeoni F., Morris M. C., Heitz F., Divita G. Insight into the mechanism of the peptide-based gene delivery system MPG: implications for delivery of siRNA into mammalian cells.//J. Nucl. Acids Res. 2003. - V. 31. - P. 2717-2724.

162. Zeng Y., Cullen B. R. RNA interference in human cells is restricted to the cytoplasm.//J. RNA. 2002. - V. 8. - N. 7. - P. 855-860.

163. Muratovska A., Eccles M. R. Conjugate for efficient delivery of short interfering RNA (siRNA) into mammalian cells. //J. FEBS Lett. 2004. -V. 558.-P. 63-68.

164. Chiu Y.L., Ali A., Chu C. Y., et al. Visualizing a correlation between siRNA localization, cellular uptake, and RNAi in living cells.//J. Chem. Biol. -2004. V. 11.-N. 8.-P. 1165-1175.

165. Davidson T. J., Harel S., Arboleda V. A., et al. Highly efficient small interfering RNA delivery to primary mammalian neurons induces MicroRNA-like effects before mRNA degradation. //J. Neurosci. 2004. — V. 24.-N. 45.-P. 10040-10046.

166. Minakuchi Y., Takeshita F., KosakaN., et al. Atelocollagen-mediated synthetic small interfering RNA delivery for effective gene silencing in vitro and in vivo .//J. Nucl. Acids Res. 2004. - V. 32. - N. 13: el 09.

167. Puebla I., Esseghir S., Mortlock A., et al. A recombinant HI histone-based system for efficient delivery of nucleic acids. // J. Biotechnol. — 2003. — V. 105.-P. 215-226.

168. Takei Y., Kadomatsu K., Yuzawa Y., et al. A small interfering RNA targeting vascular endothelial growth factor as cancer therapeutics. //J. Cancer Res. 2004. - V. 64.-N. 10.-P. 3365-3370.

169. Wang Y. H., Hou Y. W., Lee H. J. An intracellular delivery method for siRNA by an arginine-rich peptide. // J. Biochem. Biophys. Methods. — 2007. -V. 70. -N. 4. P. 579-586.

170. Merdan Т., Kopecek J., Kissel T. Prospects for cationic polymers in gene and oligonucleotide therapy against cancer. //J. Adv. Drug Deliv. Rev. -2002.-V. 54.-P. 715-758.

171. Yang R., Yang X., Zhang Z., et al.Single-walled carbon nanotubes-mediated in vivo and in vitro delivery of siRNA into antigen-presenting cells. //J. Gene Ther. 2006. - V. 13. - N. 24. - P. 1714-1723.

172. Derfiis A. M., Chen A. A., Min D. H., et al. Targeted quantum dot conjugates for siRNA delivery. // J. Bioconjug. Chem. 2007. - V. 18. -N. 5.-P. 1391-1396.

173. Moriguchi R., Kogure K., Akita H., et al. A multifunctional envelope-type nano device for novel gene delivery of siRNA plasmids. //Int J. Pharm. — 2005.-V. 301.-N. 1-2.-P. 277-285.

174. Kim S. H., Jeong J. H., Lee S. H., et al. PEG conjugated VEGF siRNA for anti-angiogenic gene therapy. //J. Control. Release. 2006. - V. 116. - N. 2.-P. 123-129.

175. Wen W. H., Liu J. Y., Qin W. J., et al. Targeted inhibition of HBV gene expression by single-chain antibody mediated small interfering RNA delivery. //J. Hepatology. 2007. - V. 46. - N. 1. - P. 84-94.

176. Braasch D. A., Jensen S., Liu Y., et al. RNA interference in mammalian cells by chemically-modified RNA.//J. Biochemistry. 2003. - V. 42. - P. 7967-7975.

177. Song E., Lee S. K., Wang J., et al. RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. //J. Nat. Med. 2003. - V. 9. - P. 347-351.

178. Lewis D. L., Hagstrom J. E., Loomis A. G., et al. Efficient delivery of siRNA for inhibition of gene expression in postnatal mice. //J. Nat. Genet. — 2002. V. 32.-P. 107-108.

179. McCaffrey A. P., Meuse L., Pham Т. Т., et al. RNA interference in adult mice. //J. Nature 2002. - V. 418. - N. 6893. - P. 38-39.

180. Zhang X., Shan P., Jiang D.,et al. Small interfering RNA targeting heme oxygenase-1 enhances ischemia-reperfusion-induced lung apoptosis.// J. Biol. Chem. 2004. - V. 279. - P. 10677-10684.

181. Massaro D., Massaro G. D., Clerch L. B.//Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol.-2004.-V. 287.-N. 5.-P. 1066-1070.

182. Bitko V., Musiyenko A., Shulyayeva O., Barik S. Inhibition of respiratory viruses by nasally administered siRNA. //J. Nat. Med. 2005. - V. 11.-N. 1.-P. 50-55.

183. Reich S. J., Fosnot J., Kuroki A., et al. Small interfering RNA (siRNA) targeting VEGF effectively inhibits ocular neovascularization in a mouse model.//J. Mol. Vis. 2003. -V. 9. - P. 210-216.

184. Nakamura H., Siddiqui S. S. Shen X., et al. RNA interference targeting transforming growth factor-beta type II receptor suppresses ocular inflammation and fibrosis. //J. Mol. Vis. 2004. - V. 10. - P. 703-711.

185. Pille J. Y., Denoyelle C., Varet J., et al. Anti-RhoA and anti-RhoC siRNAs inhibit the proliferation and invasiveness of MDA-MB-231 breast cancer cells in vitro and in vivo. //J. Mol. Ther. 2005. - V. 11. - N. 2. - P. 267274.

186. Dorn G., Patel S., Wotherspoon G., et al. siRNA relieves chronic neuropathic pain. //J. Nucl. Acids Res. 2004. - V. 32.: e49.

187. Tan P. H., Yang L. C., Shih H. C., et al. Gene knockdown with intrathecal siRNA of NMD A receptor NR2B subunit reduces formalin-induced nociception in the rat. //J. GeneTher. 2005. - V. 12. - N. 1. - P. 59-66.

188. MakimuraH., Mizuno Т. M., Mastaitis J. W., et al. Reducing hypothalamic AGRP by RNA interference increases metabolic rate and decreases body weight without influencing food intake. // BMC Neurosci. -2002. -V. 3. P. 18.

189. Thakker D. R., Natt F., Husken D., et al. Neurochemical and behavioral consequences of widespread gene knockdown in the adult mouse brain by using nonviral RNA interference. //J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004. -V. 101.-N. 49.-P. 17270-17275.

190. Duxbury M. S., Ito H., Benoit E., et al. RNA interference targeting focal adhesion kinase enhances pancreatic adenocarcinoma gemcitabine chemosensitivity. //J. Biochem. Biophys. Res. Commun. — 2003. V. 311. -P. 786-792.

191. Zender L., Hutker S., Liedtke C., et al. Caspase 8 small interfering RNA prevents acute liver failure in mice. // J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. —2003. V. 100. - P. 7797-7802.

192. Mohmmed A., Dasaradhi P. V., Bhatnagar R. K., et al. In vivo gene silencing in Plasmodium berghei—a mouse malaria model. //J. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. V. 309. - P. 506-511.

193. Hamar P., Song E., Kokeny G., et al. Small interfering RNA targeting Fas protects mice against renal ischemia-reperfiision injury. //J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA-2004.-V. 101. -N. 41. -P. 14883-14888.

194. Duxbury M. S., Matros E., Ito H., et al. Systemic siRNA-mediated gene silencing: a new approach to targeted therapy of cancer. //J. Ann. Surg. —2004. V. 240. - N. 4. - P. 667-674.

195. Contreras J.L., Vilatoba M., Eckstein C., et al. Caspase-8 and caspase-3 small interfering RNA decreases ischemia/reperfiision injury to the liver in mice. //J. Surgery 2004. - V. 136. - N. 2. - P. 390-400.

196. Soutschek J., Akinc A., Bramlage В., et al. Therapeutic silencing of an endogenous gene by systemic administration of modified siRNAs. //J. Nature. 2004. - V. 432. -N. 7014. - P. 173-178.

197. Yano J., Hirabayashi K., Nakagawa S., et al. Antitumor activity of small interfering RNA/cationic liposome complex in mouse models of cancer. //J. Clin. Cancer Res. 2004. - V. 10. - N. 22. - P. 7721-7726.

198. Schiffelers R. M., Ansari A., Xu J., et al. Cancer siRNA therapy by tumor selective delivery with Iigand-targeted sterically stabilized nanoparticle. //J. Nucl. Acids Res. -2004. -V. 32. -N. 19.: el49.

199. Zimmermann T. S., Lee А. С. H., Akinc A., et al. RNAi-mediated gene silencing in non-human primates. // J. Nature. — 2006. — V. 441. — P. 111114.

200. Miyawaki-Shimizu K., Presedscu D., Shimizu J., et al. siRNA-induced caveolin-1 knockdown in mice increases lung vascular prmeability via the junctional pathway. //Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2006. - V. 290.-N. 2.-P. 405-413.

201. Urban-Klein В., Werth S., Abuharbeid S., et al. RNAi-mediated gene-targeting through systemic application of polyethylenimine (PEI)-complexed siRNA in vivo. //J. Gene Ther. 2005. - V. 12. - N. 5. - P. 461-466.

202. Pardridge W. M. Brain drug targeting: The future of brain drug development. //Cambridge, Cambridge Univ. Press. 2001.

203. Chekhonin V. P., Ryabukhin I. A., Zhirkov U. A. et al. Transport of hydrophobized fragments of antibodies through the blood-brain barrier. //J. Neuroreport. 1995. -V. 7. - P. 129-132.

204. Мок Н. P., Lever A. A method to estimate the efficiency of gene expression from an integrated retroviral vector. //J. Retro virology. — 2006. -V. 3.-P. 51-54.

205. Kinyanjui M. W., Ramos-Barbon D., Villeneuve A., Fixman E. D. Enhanced transduction of antigen-stimulated T lymphocytes with recombinant retroviruses concentrated by centrifugal filtration. //J. Immunol. Methods.-2006.-V. 314.-N. 1-2.-P. 80-89.

206. Paez J., Montano R., Benatuil L., et al. High efficiency and long-term foreign gene expression in cultured liver sinusoidal endothelial cells by retroviral transduction. //J.Endothelium. 2006. - V. 13. - N. 4. - P. 279285.

207. Menendez P., Wang L., Cerdan C., Bhatia M. Retroviral transduction of hematopoietic progenitors derived from human embryonic stem cells. //J. Methods Mol. Biol. 2006. - V. 331. - P. 201-220.

208. Schule S., Steidl S., Panitz S., et al. Selective gene transfer to T lymphocytes using coreceptor-specific MLV(HIV). pseudotype vectors in a transgenic mouse model. //J. Virology. 2006. - V. 351. - N. 1. - P. 237-247.

209. Kramm C.M., Rainov N.G., Sena-Esteves M., et al. Long-term survival in a rodent model of disseminated brain tumors by combined intrathecal delivery of herpes vectors and ganciclovir treatment. //J. Hum Gene Ther. 1996. - V. 7. - N. 16. - P. 1989-1994.

210. Rainov N.G., Dobberstein K.U., Heidecke V., et al. Long-term survival in a rodent brain tumor model by bradykinin-enhanced intra-arterial deliveryof a therapeutic herpes simplex virus vector. //J. Cancer Gene Ther. — 1998.-V. 5.-N. 3.-P. 158-162.

211. Rainov NG, Ren H. Oncolytic viruses for treatment of malignant brain tumours. //J. Acta. Neurochir. Suppl. 2003. - V. 88. -P.l 13-123.

212. Caetano B.C., Bruna-Romero O., Fux В., et al. Use of adenoviral vectors as veterinary vaccines. //J. Gene Ther. 2005. - V. 1. — P. 73-83.

213. Pardridge W.M. shRNA and siRNA delivery to the brain. //J. Adv. Drug Deliv. Rev. 2007. - V. 59. - N. 2-3. - P. 141-152.

214. Xia C.F, Zhang Y., Zhang Y., et al. Intravenous siRNA of brain cancer with receptor targeting and avidin-biotin technology.// J.Pharm. Res. — 2007. V. 24. - N. 12. - P. 2309-1236.

215. Kay M. A., Glorioso J. C., Naldini L. Viral vectors for gene therapy: the art of turning infectious agents into vehicles of therapeutics. //J. Nat. Med. -2001.-V. 7.-P. 33-40.

216. Favre D., Provost N., Blouin V., et al. Immediate and long-term safety of recombinant adeno-associated virus injection into the nonhuman primate muscle. //J. Mol. Ther. 2001. - V. 4. - P. 559-566.

217. Kamps J.A.A.M., Konig G. A., Velinova M.J., et al. Uptake of long-circulating immunoliposomes, directed against colon adenocarcinoma cells, by liver metastases of colon cancer. // J. Drug Target. — 2000. — V. 8. -N. 4.-P. 235-245.

218. Shi N., Pardridge W. M. Noninvasive gene targeting to the brain. // J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - V. 97. - N. 13. - P. 7567-7572.

219. Kohler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity .//J. Nature. — 1975. — V. 256 P. 495497.

220. Benzinger P., Martiny-Baron G., Reusch P., et al. Targeting of endothelial KDR receptors with 3G2 immunoliposomes in vitro. // J. Biochim. Biophys. Acta. -2000. -V. 1466.-N. 1-2.-P. 71-8.

221. Stewart J.C.M. Colorimetric determination of phospholipids with ammonium ferrothiocyanate // J. Anal. Biochem. 1980. — V. 104. - P. 10-14.

222. Smith P.K., Krohn R.I., Hermanson G.T. et al. Measurement of protein using bicinchoninic acid // J. Anal. Biochem. 1985. - V. 150. - P. 76-85.

223. Brown R., Jarvis К., Ну land K. Protein measurement using bicinchoninic acid: elimination of interfering substances // J. Anal. Biochem. 1989. — V. 180.-P. 136-139.251. basic D.D. Liposomes in gene delivery. Boca Raton: CRC Press, 1997.

224. Brockes J.P., Raff M.C., Nishiguchi D.J., Winter J. Studies on cultured rat Schwann cells. III. Assays for peripheral myelin proteins // J. Neurocytol. — 1980. — V. 9(1). — P. 67-77.

225. Якушев B.A., Мансуров P.K. Токсичность катионных липосом in vivo. И Вестник РУДН. 2007. - Т. 3. - С. 11-12.

226. Pirollo К. F., Zon G., Rait A., et al. Tumor-targeting nanoimmunolipo-some complex for short interfering RNA delivery. //J. Hum Gene Ther. — 2006.-V. 17.-N. l.-P. 117-124.