Синтез катионных амфифилов липидной природы и создание на их основе липосомальных систем доставки нуклеиновых кислот тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, доктор химических наук Маслов, Михаил Александрович

• Маслов, Михаил Александрович
• доктор химических наук
• 2012

Оглавление диссертации доктор химических наук Маслов, Михаил Александрович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.;.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Основные стадии транспорта нуклеиновых кислот с участием катионных липосом.

1.2. Внеклеточные и внутриклеточные барьеры.

1.3. Модульные системы доставки НК.

1.4. Катионные амфифилы - основные компоненты модульной системы доставки НК.

1.4.1. Моно- и дикатионные амфифилы с длинноцепными алкильными или ацильными заместителями.

1.4.2. Катионные производные фосфатидилхолина.

1.4.3. Амфифильные производные имидазола и пиридина.

1.4.4. Монокатионные липиды холестеринового ряда.

1.4.5. Поликатионные амфифилы.

1.4.6. Катионные амфифилы на основе аминокислот.

1.4.7. Гемини-амфифилы.

1.5. Стратегии по увеличению эффективности доставки.

1.5.1. Клеточное нацеливание катионных липосом с использованием различных лигандов.

1.5.1.1. Углеводные лиганды для нацеливания на гепатоциты.

1.5.1.2. Фолиевая кислота для нацеливания на опухолевые клетки.

1.5.1.3. Другие лиганды.

1.5.2. Улучшение интернализации систем доставки.

1.5.3. Увеличение высвобождения НК.

1.5.3.1. рН-чувствительные линкеры.

1.5.3.2. Линкеры, чувствительные к действию внутриклеточных восстановителей.

1.5.3.3. Другие подходы к увеличению высвобождения НК.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез катионных амфифилов липидной природы и создание на их основе липосомальных систем доставки нуклеиновых кислот»

Актуальность проблемы. Быстрое развитие технологии рекомбинантных ДНК и выяснение молекулярных основ многих заболеваний привело к возникновению новой области медицины — генной терапии. Этот метод лечения наследственных и приобретенных заболеваний основан на доставке терапевтических нуклеиновых кислот (НК) в клетки (трансфекция) с целью направленного устранения генетических дефектов или придания клеткам новых функций [1]. Биофармацевтические препараты на основе НК могут контролировать развитие болезни на уровне активации или ингибирования действия генов, ответственных за ее развитие. Такие препараты включают плазмидные ДНК, антисмысловые олигонуклеотиды, малые интерферирующие РНК, рибозимы, ДНК-энзимы и аптамеры.

Плазмиды - высокомолекулярные ДНК-конструкции, содержащие трансгены, кодирующие специфические белки [2]. На молекулярном уровне плазмиды можно рассматривать как про-лекарства, которые при проникновении внутрь клетки и последующей экспрессии будут оказывать терапевтическое воздействие на организм [2].

Олигонуклеотиды - короткие одноцепочечные фрагменты ДНК, способные при проникновении в клетку избирательно подавлять экспрессию специфического белка [3]. Олигонуклеотиды обеспечивают ингибирование транскрипции при взаимодействии с молекулой геномной ДНК (антигенные олигонуклеотиды), либо ингибирование трансляции целевого белка при взаимодействии с мРНК-мишенями (антисмысловые олигонуклеотиды). Узнавание и связывание антисмысловых последовательностей обеспечивается комплементарным взаимодействием молекул олигонуклеотида с целевой мРНК или образованием триплекса с двухцепочечной геномной ДНК [3].

Малые интерферирующие РНК (siRNA) могут быть использованы для подавления экспрессии дефектных генов за счет механизма РНК-интерференции. siRNA представляет собой короткий двухцепочечный фрагмент РНК (21 - 23 пар оснований), комплементарный последовательности мРНК белка, синтез которого должен быть заблокирован [4]. При попадании в клетку siRNA образует РНК-белковый комплекс RISC (RNA-induced silencing complex), который связывается с целевой мРНК и вызывает ее расщепление рибонуклеазами. Использование siRNA в качестве терапевтической НК имеет ряд преимуществ перед использованием плазмидных ДНК и антисмысловых олигонуклеотидов: более высокая специфичность к молекулам мРНК, отсутствие иммуногенности и необходимости проникать через ядерную мембрану для оказания терапевтического воздействия. siRNA не встраивается в геном, поэтому она более безопасна по сравнению с плазмидными ДНК. Кроме того, существует возможность единовременно доставить в клетки разные siRNA с помощью одной транспортной системы для ингибирования экспрессии сразу нескольких дефектных генов.

Рибозимы представляют собой молекулы РНК, которые содержат антисмысловые участки для связывания с последовательностями мРНК и участки, осуществляющие их расщепление, в результате чего прекращается биосинтез белка [5]. Недостатком рибозимов является их низкая химическая устойчивость in vivo. ДНК-энзимы являются аналогами рибозимов, обладающие большей биологической стабильностью [6]. Благодаря своей высокой каталитической активности ДНК-энзимы являются мощным инструментом для молекулярной биологии и имеют высокий потенциал терапевтического применения [7].

На 2004 год известно два препарата на основе НК официально разрешенных к применению: Gendicine (рекомбинантный аденовирусный противораковый препрат) [8] и Vitravene (антисмысловой олигонуклеотид для подавления цитомегаловирусной инфекции у пациентов, инфицированных вирусом ВИЧ) [6]. Более 27 антисмысловых олигонуклеотидов проходят разные стадии клинических испытаний по лечению различного рода заболеваний, в том числе раковых заболеваний различной этиологии [9]. Также в настоящее время проводится более 650 клинических испытаний, связанных с доставкой терапевтических ДНК [9].

Основными проблемами успешной коррекции генетического отклонения являются эффективная доставка НК в нужное место в необходимом количестве, а также создание условий для их длительного функционирования [1, 10-12].

Генетическая модификация соматических клеток может проводиться методами in vivo либо ex vivo. Исторически в генной терапии существует три различных подхода. Первый заключается в использовании незащищенной ДНК, прямая инъекция которой в клетку приводит к высокому уровню экспрессии. Простота этого подхода обуславливает его использование в ряде экспериментальных протоколов [1, 13]. Однако применение незащищенных НК ограничивается легкодоступными для непосредственной инъекции тканями (кожа или мускулы) и совершенно не подходит для системной доставки из-за наличия внеклеточных нуклеаз. Поэтому были разработаны подходы, в которых для переноса НК используются «транспортные контейнеры», защищающие НК от разрушительного воздействия ферментов и способствующие ее проникновению внутрь клетки, а в некоторых случаях и дальнейшей экспрессии в ядре.

Один из таких подходов включает использование генетически измененных вирусов [1, 12, 14]. Вирусные системы доставки НК - это биологические системы, происходящие из нативных вирусов, способных переносить собственный генетический материал в клетки хозяина. Многие вирусы, включая ретровирусы, аденовирусы, аденоассоциированные вирусы и вирус герпеса, были лишены своей высокой токсичности с сохранением высокой способности транспортировать гены [1]. Вирусные векторы очень эффективны с точки зрения доставки НК и последующей экспрессии трансгена. Однако использование вирусов ограничивается их иммуногенностью, онкогенностью, ограниченным размером переносимой НК и высокой стоимостью.

Начиная с 90-ых годов, разрабатываются невирусные системы доставки НК на основе катионных амфифилов и полимеров, которые являются альтернативой вирусным системам доставки [1, 10, 15-21]. Среди прочих в последнее десятилетие стал широко изучаться метод липофекции, использующий катионные липосомы как средство доставки НК [1, 15, 18-21]. Катионные амфифилы и липосомы имеют ряд преимуществ по сравнению с вирусными системами доставки: они защищают молекулы НК от инактивации под действием клеточных ферментов, не обладают инфекционностью и иммуногенностью, способны переносить НК любого размера. Катионные липосомы легко получать, они стабильны при хранении и экономически доступны. Совокупность вышеперечисленных свойств делает липосомы перспективными транспортными системами для доставки НК в эукариотические клетки. Липосомальные ДНК/РНК-препараты рассматриваются как перспективные фармакологические агенты для лечения онкологических заболеваний, неврологических расстройств (болезнь Паркинсона и Альцгеймера), а также терапии сердечно-сосудистых заболеваний [1, 13].

Однако, для известных на сегодняшний день липосом характерна низкая эффективность доставки НК, обусловленная наличием внеклеточных и внутриклеточных биологических барьеров, которые должен преодолеть НК-липосомальный комплекс (липоплекс), прежде чем НК осуществит терапевтическое воздействие. К таким барьерам относят компоненты крови и белки иммунной системы, которые дестабилизируют липоплекс и вызывают преждевременное высвобождение и разрушение НК, а также клеточную, эндосомальную и ядерную мембраны.

Липосомы для доставки НК создаются на основе катионных амфифилов (КА), структура которых является одним из важных факторов, определяющих эффективность липофекции. На сегодняшний день накоплено большое количество данных по синтезу КА, однако, для направленного поиска новых амфифилов необходимо выработать структурные требования, которые должны базироваться на понимании клеточных механизмов генного транспорта и определении лимитирующих стадий процесса липофекции. От этого также зависит разработка рациональных подходов к синтезу КА и созданию липосомальных систем доставки, и проверка гипотез, связанных с клеточными и молекулярными механизмами протекания трансфекции.

В настоящее время для трансфекции эукариотических клеток in vitro используются несколько зарубежных коммерчески доступных липосомальных систем доставки НК. Их применение in vivo ограничено высокой токсичностью, либо потерей активности в присутствии сыворотки крови или ее компонентов. Кроме того, высокая стоимость данных систем доставки НК и отсутствие отечественных аналогов сдерживает развитие и интенсивное использование как самого метода липофекции, так и генной терапии в российских научно-исследовательских организациях и биотехнологических компаниях.

Таким образом, создание отечественных липосомальных систем доставки НК становится актуальной междисциплинарной задачей, лежащей на стыке биоорганической, биологической химии и молекулярной биологии. Поиск таких систем представляет собой комплексное исследование, которое включает разработку и оптимизацию подходов к синтезу новых КА, получение на их основе липосом и комплексов с НК, изучение физико-химических характеристик комплексов, а также установление зависимости эффективности трансфекции от структуры КА.

Основной целью работы является создание эффективных и безопасных липосомальных систем доставки, способных переносить терапевтические НК в клетки млекопитающих, для лечения наследственных и приобретенных заболеваний. Для достижения поставленной цели, в первую очередь, было необходимо предложить дизайн и разработать современные подходы к синтезу малотоксичных положительно заряженных амфифильных молекул - основных компонентов липосом - с различной компоновкой структурных доменов, после чего изучить физико-химические и биологические свойства супрамолекулярных структур, образуемых катионными амфифилами с НК. На основании результатов биологических исследований требовалось установить связь между структурой КА и его активностью, выработать требования к молекуле КА как эффективному трансфектанту и предложить липосомальную транспортную систему, способную переносить различные НК в условиях in vitro и in vivo.

Научная новизна. В данной работе сформировано новое междисциплинарное направление по конструированию липосомальных систем доставки НК, которое включает разработку синтетических подходов к получению КА с различной компоновкой структурных доменов, создание на их основе катионных липосом и установление связи между структурой амфифила и его биологическими свойствами:

- Предложен дизайн новых моно- и поликатионных амфифилов и разработаны новые подходы и стратегии синтеза амфифилов с различной компоновкой структурных доменов и способом их связывания. Синтезированы амфифилы с линкерными группами, способными разрушаться под действием внутриклеточных стимулов. Совокупность всех разработанных подходов представляет собой общую технологическую платформу, которая позволяет на основе унифицированных блоков в короткие сроки получать КА, отличающиеся типами структурных элементов и способом их компоновки.

- Впервые предложены новые эффективные подходы к получению углеводсодержащих КА с линейной и разветвленной компоновкой структурных доменов, а также амфифилов, содержащих в качестве спейсерной группы остаток 1)-глюкозы, связанный с гидрофобным доменом с помощью биодеградируемой гликозидной связи.

- Для создания многокомпонентных транспортных систем, в которых функции связывания НК и ее доставки в клетки-мишени разделены между двумя амфифильными компонентами, получены нейтральные амфифилы с адресными лигандами на основе галактозы и фолиевой кислоты.

- Сформирована библиотека микроэлектронных фотографий, полученных с помощью трансмиссионной электронной микроскопии, для 33 образцов комплексов катионных липосом с НК (более 500 изображений). Анализ изображений позволил выявить общие закономерности образования комплексов и показал, что вне зависимости от структуры КА и формы липосом при взаимодействии с НК формируются комплексы с ламеллярной структурой.

- Установлена связь между структурой КА и трансфицирующей активностью, что позволило впервые сформулировать требования к структуре амфифила, которые должны учитываться при создании новых эффективных трансфицирующих реагентов. Показано, что важными элементами структуры, которые позволяют достичь высокой эффективности трансфекции, являются два гидрофобных домена, гексаметиленовый спейсер и линкер карбамоильного типа.

- Впервые с помощью разработанных липосомальных систем осуществлена доставка мРНК, кодирующей опухоль-ассоциированные антигены, в трудно трансфицируемые дендритные клетки.

Практическая значимость работы. Липосомальные системы доставки НК находят широкое применение в научно-исследовательских организациях и коммерческих компаниях, работающих в области биотехнологии, молекулярной и клеточной биологии, а также генной терапии. В настоящее время потребности научных учреждений и компаний России в таких реагентах удовлетворяются исключительно за счет импортных препаратов, которые, наряду со своей высокой стоимостью, проявляют значительную токсичность, а их применение ограничено типом переносимой НК. Это делает использование данных препаратов невыгодным как с терапевтической, так и с коммерческой точки зрения. В настоящей диссертационной работе, используя синтезированные катионные амфифилы, впервые получены отечественные высокоэффективные липосомальные системы доставки НК, не уступающие по своим характеристикам зарубежным коммерческим препаратам, и показана принципиальная возможность создания на их основе онковакцин нового поколения. Результаты исследований in vitro и in vivo, позволяют рассматривать разработанные липосомальные системы доставки НК в качестве перспективных отечественных трансфицирующих препаратов для нужд молекулярной и клеточной биологии, генной терапии, биотехнологии и медицины. По результатам исследований получено 3 патента на изобретение.

Основные положения выносимые на защиту.

1. Разработка новых подходов и синтетических стратегий, позволяющих получать модификационные ряды катионных амфифилов, отличающихся строением структурных элементов и способом их компоновки;

2. Выявление общих закономерностей образования комплексов катионных амфифилов с НК на основании изучения их физико-химических характеристик;

3. Создание эффективных и универсальных липосомальных систем доставки НК, способных переносить различные типы НК in vitro и in vivo. Выявление связи между структурой катионного амфифила и его биологическими свойствами.

4.

Апробация работы. Основные результаты диссертации были представлены на Менделеевских съездах по общей и прикладной химии (2003, Казань; 2007, Москва; 2011, Волгоград), Международных конгрессах «Биотехнология - состояние и перспективы развития» (2002, 2005, 2006, 2009, 2011, Москва), Съездах Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (2002, С.-Петербург; 2008, Новосибирск), Международной конференции по органической химии "Органическая химия от Бутлерова и Бейлыптейна до современности" (2006, С.-Петербург), Международных научно-технических конференциях «Наукоемкие химические технологии» (2001, Ярославль; 2002, Уфа; 2004, Волгоград; 2006, Самара; 2008 Волгоград; 2010, Суздаль), International conference on chemical biology "ICCB 2005" (2005, Новосибирск), International Symposium on Advanced Science in Organic Chemistry (2006, Судак, Украина), 1st Russian-Hellenic symposium "Biomaterials and bionanomaterials: recent advances and safety - toxicology issues" (2010, Heraklion, Greece), XIX International Round Table on Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids (2010, Lyon, France), International conference "Liposomes in Jerusalem" (2011, Jerusalem, Israel)

Публикации. Основные результаты исследований, полученные при выполнении диссертации, изложены в 1 монографии, 1 обзоре, 3 патентах, 21 оригинальных статьях (в том числе 8 в зарубежных журналах), более 50 тезисах докладов на российских и международных конференциях.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Заключение диссертации по теме «Биоорганическая химия», Маслов, Михаил Александрович

ВЫВОДЫ

1. Предложен дизайн и разработаны новые подходы и стратегии синтеза моно-и поликатионных амфифилов на основе унифицированных блоков. Совокупность всех разработанных подходов представляет собой общую технологическую платформу, которая позволяет путем направленных модификаций гидрофобного и катионного доменов, а также изменения длины спейсера и типа линкера получать различные типы КА, отличающиеся не только строением структурных элементов, но и способом их компоновки.

2. С использованием разработанных подходов синтезированы моно- и поликатионные амфифилы, в которых остатки гетероциклических, алифатических оснований и спермина связаны с гидрофобным доменом с помощью карбамоильного, сложноэфирного, ацетального или дусульфидного линкера. Использование методов, позволяющих проводить синтез в мягких условиях, и эффективных активирующих агентов, позволили получить амфифилы с высокими выходами.

3. Разработаны рациональные подходы к получению углевод со держащих катионных амфифилов с линейной и разветвленной компоновкой структурных доменов, в том числе, содержащих в качестве спейсерной группы остаток Э-глюкозы, связанный с гидрофобным доменом с помощью биодеградируемой гликозидной связи. В ходе синтеза были успешно реализованы региоселективные подходы, позволяющие модифицировать незащищенные молекулы гликозидов по С(6) атому углеводного остатка.

4. Для создания многокомпонентных липосомальных систем доставки НК, в которых функции связывания НК и ее доставки в клетки-мишени разделены между двумя амфифильными компонентами, разработаны методы получения нейтральных амфифилов с адресными лигандами на основе галактозы и фолиевой кислоты.

5. Проведено изучение физико-химических характеристик супрамолекулярных структур КА и их комплесов с НК, сформулированы общие закономерности образования комплексов между НК и катионными липосомами и показано, что при взаимодействии липосом с НК происходит образование комплексов с ламеллярной структурой.

6. Результаты биологических испытаний по доставке различных типов НК в клетки позволили установить связь между структурой КА и его трансфицирующей активностью, а также сформулировать структурные требования, которыми должны учитываться при создании новых КА. Важными элементами структуры, которые позволяют достичь высокой эффективности трансфекции, являются два гидрофобных домена, гексаметиленовый спейсер и линкер карбамоильного типа.

7. В экспериментах in vitro только липосомы на основе гемини-амфифила 36с обеспечивают эффективную доставку и выполнение биологических функций различных типов НК не зависимо от наличия сыворотки крови в клеточной среде.

8. С помощью разработанных катионных липосом осуществлена эффективная доставка иммуностимулирующих РНК в условиях in vivo, приводящая к селективной индукции интерферона-a. Для создания противоопухолевых вакцин нового поколения проведена трансфекция дендритных клеток комплексами катионных липосом и мРНК, кодирующей опухоль-ассоциированные антигены, и показано, что ингибирование развития метастазов в легких мышей связано с числом трансфицированных дендритных клеток и уровнем экспрессии трансгена. Разработанные липосомальные системы могут служить заменой коммерческих трансфицирующих систем и перспективными кандидатами для дальнейших медицинских исследований по созданию новых технологически доступных средств для терапии социально значимых заболеваний.

Список литературы диссертационного исследования доктор химических наук Маслов, Михаил Александрович, 2012 год

1. Gene and cell therapy: therapeutic mechanisms and strategies (Ed. Templeton N. S.). -Boca Raton 2009. - CRC Press.

2. Uherek C, Wels W. DNA-carrier proteins for targeted gene delivery. // Adv Drug Delivr

3. Rev. 2000. - V. 44. - P. 153-166.

4. Crooke S.T. Molecular mechanisms of action of antisense drugs. // Biochim. Biophys. Acta.- 1999.-V. 1489.-P. 31-43.

5. Scherr M., Morgan M.A., Eder M. Gene silencing mediated by small interfering RNAs in mammalian cells. // Curr Med Chem. 2003. - V. 10. - P. 245-256.

6. Stull R.A., Szoka F.C. Antigene, ribozyme and aptamer nucleic acid drugs: progress and prospects. // Pharm. Res. 1995. - V. 12. - P. 465-483.

7. Akhtar S., Hughes M.D., Khan A., Bibby M., Hussain M., Nawaz Q., Double J., Sayyed P. The delivery of antisense therapeutics. // Adv. Drug Deliv. Rev. 2000. - V. 44. - P. 3-21.

8. Zhang L, Gasper W.J., Stass S.A., Ioffe O.B., Davis M.A., Mixson A.J. Angiogenic inhibition mediated by a DNAzyme that targets vascular endothelial growth factor receptor 2. // Cancer Res. 2002. - V. 62. - P. 5463-5469.

9. Wilson J. M. Gendicine: the first commercial gene therapy product. // Hum. Gene Ther. -2005.-V. 16-P. 1014-1015.

10. Rayburn E.R., Zhang R. Antisense, RNAi, and gene silencing strategies for therapy: mission possible or impossible? // Drug Discov. Today. 2008. - V. 13. - P. 513-521,

11. Nucleic acid transfection (Eds. Biekle W., Erbacher C.) Berlin. - 2010. - Springer.

12. Blau H.M., Springer M.L. Gene therapy a novel form of drug delivery. // N. Engl. J. Med. - 1995. - V. 333. - P. 1204-1207.

13. Verma I.M., Weitzman M.D. Gene therapy: twenty-first century medicine. // Ann. Rev. Biochem. 2005. - V. 74. - P. 711-738.

14. Huang L., Hung M.C. Wagner E. Non-viral vectors for gene therapy. 2nd ed. Part 2. //. Advances inGenetics. V. 53 - Amsterdam. - 2005. - Elsevier Academic Press.

15. Lundstrom, K. Latest development in viral vectors for gene therapy. // Trends biotechnol. -2003.-V. 21.-P. 117-122.

16. Huang L., Hung M.C., Wagner E. Non-viral vectors for gene therapy. 2nd ed. Part 1. //. Advances inGenetics. V. 53 - Amsterdam. - 2005. - Elsevier Academic Press.

17. Lv H.T., Zhang S.B., Wang B., Cui S.H., Yan J. Toxicity of cationic lipids and cationic polymers in gene delivery. // J. Control. Release 2006. - V. 114. - P. 100-109.

18. Morille M., Passirani C., Vonarbourg A., Clavreul A., Benoit, J.-P. Progress in developing cationic vectors for non-viral systemic gene therapy against cancer. // Biomaterials. 2008. - V. 29. - P. 3477-3496.

19. Karmali P.P., Chaudhuri A. Cationic liposomes as non-viral carriers of gene medicines: resolved issues, open questions, and future promises. // Med. Res. Rev. 2007. - V. 27. -P. 696-722.

20. Non-viral gene therapy (Ed. X. Yuan). -Rijeka. 2011 - InTech.

21. Mahato R.I. Water insoluble and soluble lipids for gene delivery. // Adv. Drug Del. Rev. -2005. V. 57.-P. 699-712.

22. Tseng Y.-C., Mozumdar S., Huang L. Lipid-based systemic delivery of siRNA. // Adv. Drug Deliv. Rev.-2009. -V. 61. P. 721-731.

23. Wasungu L., Hoekstra D. Cationic lipids, lipoplexes and intracellular delivery of gene. // J. Control. Release. 2006. - V. 116. - P. 255-264.

24. Hui S.W., Langner M., Zhao Y.L., Hurley E., Chan K. The role of helper lipids in cationic liposome-mediated gene transfer. // Biophys. J. 1996. - V. 71. - P. 590-599.

25. Mok K.W.C., Cullis P.R. Structural and fusogenic properties of cationic liposomes in the presence of plasmid DNA. // Biophys. J. 1997. - V. 73. - P. 2534-2545.

26. Zuidam N.J., Barenholz Y. Electrostatic and structural properties of complexes involving plasmid DNA and cationic lipids commonly used for gene delivery. // Biochim. Biophys. Acta. 1998,-V. 1368.-P. 115-128.

27. Zuidam N.J., Hirsch-Lerner D., Margulies S., Barenholz Y. Lamellarity of cationic liposomes and mode of preparation of lipoplexes affect transfection efficiency. // Biochim. Biophys. Acta, 1999. - V. 1419. - P. 207-220.

28. Liu Y., Mounkes L.C., Liggitt H.D. Brown C.S., Solodin I., Heath T.D., Debs R.J. Factors influencing the efficiency of cationic liposome-mediated intravenous gene delivery. // Nat. Biotech. 1997. - V. 15. - P. 167-173.

29. Sternberg B., Hong K., Zheng W., Papahadjopoulos D. Ultrastructural characterization of cationic liposome-DNA complexes showing enhanced stability in serum and high transfection activity in vivo. II Biochim. Biophys. Acta. 1998. - V. 1375. - P. 23-35.

30. Simberg D., Weisman S., Talmon Y., Faerman A., Shoshani T., Barenholz Y. The role of organ vascularization and lipoplex-serum initial contact in intravenous murine lipofection. // J. Biol. Chem. 2003. - V. 278. - P. 39858-39865.

31. Crook K., Stevenson B.J., Dubochet M., Porteous D.J. Inclusion of cholesterol in DOTAP transfection complexes increases the delivery of DNA to cells in vitro in the presence of serum. // Gene Ther. 1998. - V. 5. - P. 137-143.

32. Zuhorn I.S., Engberts J.B.F.N., Hoekstra D. Gene delivery by cationic lipid vectors: overcoming cellular barriers. // Eur. Biophys. J. 2007. - V. 36. - P. 349-362.

33. Rao N.M., Gopal V. Cell biological and biophysical aspects of lipid-mediated gene delivery. // Biosci. Rep. 2006. - V. 26. - P. 301-324.

34. Passirani C. Complement activation by injectable colloidal drug carriers. In "Biomaterials for delivery and targeting of proteins and nucleic acids" (Ed. Mahato R.I.). 2005. - CRC Press. - P. 187-230.

35. Vonarbourg A., Passirani C., Saulnier P., Benoit J.P. Parameters influencing the stealthiness of colloidal drug delivery systems. // Biomaterials. 2006. - V. 27. - P. 4356-4373.

36. U'Ren L., Kedl R., Dow S. Vaccination with liposome-DNA complexes elicits enhanced antitumor immunity. // Cancer Gene Ther. 2006. - V. 13. - P. 1033-1044.

37. Whitmore M., Li S., Huang L. LPD lipopolyplex initiates a potent cytokine response and inhibits tumor growth. // Gene Ther. 1999. - V. 6. - P. 1867-1875.

38. Romberg B., Hennink W.E., Storm G. Sheddable coatings for long-circulating nanoparticles. // Pharm. Res. 2008. - V. 25. - P. 55-71.

39. El Ouahabi A., Thiry M., Schiffmann S., Fuks R., Nguyen-Tran H., Ruysschaert J.M., Vandenbranden M. Intracellular visualization of BrdU-labeled plasmid DNA/cationic liposome complexes. // J. Histochem. Cytochem. 1999. - V. 47. - P. 1159-1166.

40. Xu Y., Szoka F.C. Mechanism of DNA release from cationic liposome/DNA complexes used in cell transfection. // Biochemistry. 1996. - V. 35. - P. 5616-5623.

41. Boussif O., Lezoualch F., Zanta M.A., Mergny M.D., Scherman D., Demeneix B. A versatile vector for gene and oligonucleotide transfer into cells in culture and in vivo: polyethylenimine. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - V. 92. - P. 7297-7301.

42. Wente S.R. Gatekeepers of the nucleus. // Science. 2000. - V. 26. - P. 1374-1377.

43. Lukacs G.L., Haggie P., Seksek O., Lechardeur D., Freedman N., Verkman A.S. Size-dependent DNA mobility in cytoplasm and nucleus. // J. Biol Chem. 2000. - V. 275. - P. 1625-1629.

44. Gorlich D., Mattaj I.W. Nucleocytoplasmic transport. // Science. 1996. - V. 271. - P. 1513-1518.

45. Bremner K.H., Seymour L.W., Logan A., Read M.L. Factors influencing the ability of nuclear localization sequence peptides to enhance nonviral gene delivery. // Bioconjugate Chem. 2004. - V. 15. - P. 152-161.

46. De Laporte L., Cruz Rea J., Shea L.D. Design of modular non-viral gene therapy vectors. // Biomaterials. 2006. - V. 27. - P. 947-954.

47. Kostarelos K., Miller A.D. Synthetic, self-assembly ABCD nanoparticles; a structural paradigm for viable synthetic non-viral vectors. // Chem. Soc. Rev. 2005. - V. 34. - P. 970-994.

48. Mintzer M.A., Simanek E.E. Nonviral Vectors for Gene Delivery. // Chem. Rev. 2009. -V. 109. -P. 259-302.

49. Martin B., Sainlos M., Aissaoui A., Oudrhiri N., Hauchecorne M., Vigneron J.-P., Lehn J.-M., Lehn P. The Design of Cationic Lipids for Gene Delivery. // Curr. Pharm. Design. -2005.-V. 11.-P. 375-394.

50. Guo X., Szoka F.C. Chemical approaches to triggerable lipid vesicles for drug and gene delivery. // Acc. Chem. Res. 2003. - V. 36. - P. 335-341.

51. Hyndman L., Lemoine J.L., Huang L., Porteous D.J., Boyd A.C., Nan X. HIV-1 Tat protein transduction domain peptide facilitates gene transfer in combination with cationic liposomes. // J. Control. Release. 2004. - V. 99. - P. 435^144.

52. Masson C., Garinot M., Mignet N., Wetzer B., Mailhe P., Scherman D., Bessodes M. pH-Sensitive PEG lipids containing orthoester linkers: new potential tools for nonviral gene delivery. // J. Control. Release. 2004. -V. 99, - P. 423^34.

53. Molas M., Gomez-Valades A.G., Vidal-Alabro A., Miguel-Turu M., Bermudez J., Bartrons R., Perales J.C. Receptor-mediated gene transfer vectors: progress towards genetic pharmaceuticals. // Curr. Gene Ther. 2003. - V. 3. - P. 468-485.

54. Carriere M., Escriou V., Jollet A., Scherman D., Azoulay M., Monneret C. New synthetic glycolipids for targeted gene transfer: synthesis, formulation in lipoplexes and specific interaction with lectin. // Drug Deliv. 2004. - V. 11. - P. 351-363.

55. Feigner P. L., Gadek T. R., Holm M., Roman R., Chan H. W., Wenz M., Northop J. P., Ringold G. M., Danielsen M. Lipofection: a highly efficient, lipid-mediated DNA-transfection procedure. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - Vol. 84. - P. 7413-7417.

56. Malon R. W., Feigner P. L., Verma I. M. Cationic liposome-mediated RNA transfection. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - Vol. 86. - P. 6077-6081.

57. Feigner, P. L., Ringold, G. M. Cationic liposome-mediated transfection. //Nature. 1989. -Vol. 337.-P. 387-388.

58. Gershon H., Ghirlando R., Guttman S. B., Minsky A. Mode of formation and structural features of DNA-cationic liposome complexes used for transfection. // Biochemistry. -1993.-Vol. 32.-P. 7143-7151

59. Liu F., Qi H., Huang L., Liu D. Factors controlling the efficiency of cationic lipid-mediated transfection in vivo via intravenous administration. 11 Gene Ther. 1997. - Vol. 4.-P. 517-523.

60. Zuidam N.J., Barenholz Y., Minsky A. Chiral DNA packaging in DNA-cationic liposome assemblies. // FEBS Lett. 1999. - Vol. 457. - P. 419-422.

61. Templeton N.S., Lais D.D., Frederik P.M., Strey H.H., Roberts D.D., Pavlakis G.N. Improved DNA: liposome complexes for increased systemic delivery and gene expression. // Nature Biotechnol. 1997. - Vol. 15. - P. 647-652.

62. Zabner J., Fasbender A.J., Moninger T., Poellinger K.A., Welsh M.J. Cellular and Molecular Barriers to Gene Transfer by a Cationic Lipid. // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270.-P. 18997-19007.

63. Bentz J., Ellens H., Lai M.Z., Szoka F.C. On the correlation between HII phase and the contact-induced destabilization of phosphatidylethanolamine-containing membranes. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - V. 82. - P. 5742-5745.

64. Wang J.K., Guo X., Xu Y.H., Barron L., Szoka F.C. Synthesis and Characterization of Long Chain Alkyl Acyl Carnitine Esters. Potentially Biodegradable Cationic Lipids for Use in Gene Delivery. // J. Med. Chem. 1998. - V. 41. - P. 2207-2215.

65. Ghosh Y.K., Visweswariah S.S., Bhattacharya S. Nature of linkage between the cationic headgroup and cholesteryl skeleton controls gene transfection efficiency. // FEBS Lett. -2000.-V. 473.-P. 341-344.

66. Aljaberi A., Spelios M., Kearns M., Selvi B., Sawa M. Physicochemical properties affecting lipofection potency of a new series of 1,2-dialkoylamidopropane-based cationic lipids. // Colloid. Surface B. 2007. - V. 57. - P. 108-117.

67. Solodin I., Brown C.S., Bruno M.S., Chow C.Y., Jang E.H., Debs R.J., Heath T.D. A novel series of amphiphilic imidazolinium compounds for in vitro and in vivo gene delivery. // Biochemistry. 1995. -V. 34. -P. 13537-13544.

68. McLean J.W., Fox E.A., Baluc P., Bolton P.B., Haskell A., Pearlman R., Thurston G., Umemoto E. Y., McDonald D.M. Organ-specific endothelial cell uptake of cationic liposome-DNA complexes in mice. // Am. J. Physiol. 1997. - V. 273. - P. 387-404.

69. Liu Y., Mounkes L.C., Liggitt H.D., Brown C.S., Solodin I., Health T.D., Debs R.J. Factors influencing the efficiency of cationic liposome-mediated intravenous gene delivery. // Nature Biotechnol. 1997. - V. 15. - P. 167-173.

70. Liang E., Hughes J.A. Characterization of a pH-sensitive surfactant, dodecyl-2-(l'-imidazolyl) propionate (DIP), and preliminary studies in liposome mediated gene transfer. // Biochem. Biophys. Acta. 1998. - V. 1369. - P. 39-50.

71. Van der Woude I., Wagenaar A., Meekel A.A.P., ter Beest M.B.A., Ruiters M.H.J., Engberts J.B.F.N., D. Hoekstra. Novel pyridinium surfactants for efficient, nontoxic in vitro gene□ delivery. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - V. 94. - P. 1160-1165.

72. Ilies M.A., Seitz W.A., Ghiviriga I., Johnson B.H., Miller A., Thompson E.B., Balaban A.T. Pyridinium Cationic Lipids in Gene Delivery: □ A Structure-Activity Correlation Study. // J. Med. Chem. 2004. - V. 47. - P. 3744-3754.

73. Hyvonen Z., Plotniece A., Reine I., Chekavichus B., Duburs G., Urtti A. Novel cationic amphiphilic 1,4-dihydropyridine derivatives for DNA delivery. // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - Vol. 1509. - P. 451 -466.

74. Gao X., Huang L. A novel cationic liposome reagent for efficient transfection of mammalian cells. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1991. - V. 179. - P. 280-285.

75. Litzinger D.C., Brown J.M., Wala I., Kaufman S.A., Van G.Y., Farrell C.L., Collins D. Fate of cationic liposomes and their complex with oligonucleotide in vivo. II Biochim. Biophys. Acta.- 1996,-V. 1281.-P. 139-149.

76. Song Y.K., Liu F., Chu S., Liu D. Characterization of cationic liposome-mediated gene transfer in vivo by intravenous administration. // Hum. Gene. Ther. 1997. - V. 8. - P. 1585-1594.

77. Rodríguez-Pulido A., Ortega F., Llorca O., Aicart E., Junquera E. A physicochemical characterization of the interaction between DC-Chol/DOPE cationic liposomes and DNA. // J. Phys. Chem. B. 2008. - V. 112. - P. 12555-12565.

78. Muñoz-Ubeda M., Rodríguez-Pulido A., Nogales A., Martin-Molina A., Aicart E., Junquera E. Effect of lipid composition on the structure and theoretical phase diagrams of DC-Chol/DOPE-DNA lipoplexes. II Biomacromolecules. 2010. - V. 11. - P. 33323340.

79. Farhood H., Bottega R., Epand R.M., Huang L. Effect of cationic cholesterol derivatives on gene transfer and protein kinase C activity. II Biochim. Biophys. Acta. 1992. - V. 1111.-P. 239-246.

80. Takeuchi K., Ishihara M., Kawaura C., Noji M., Furuno T., Nakanishi M. Effect of zeta potential of cationic liposomes containing cationic cholesterol derivatives on gene transfection. // FEBS Lett. 1996. - V. 397. - P. 207-209.

81. Kawaura C., Noguchi A., Furuno T., Nakanishi M. Atomic force microscopy for studying gene transfection mediated by cationic liposomes with a cationic cholesterol derivative. // FEBS Letters. 1998. -V. 421. - P. 69-72.

82. Okayama R., Noji M., Nakanishi M. Cationic cholesterol with a hydroxyethylamino head group promotes significantly liposome-mediated gene transfection. // FEBS Letters. 1997.-V. 408.-P. 232-234.

83. Hasegawa S., Hirashima N., Nakanishi M. Comparative study of transfection efficiency of cationic cholesterols mediated by liposomes-based gene delivery. // Bioorg. Medicinal Chem. Lett. 2002. - V. 12. - P. 1299-1302.

84. Hattori Y.W., Ding Y., Maitani J. Highly efficient cationic hydroxyethylated cholesterol-based nanoparticle-mediated gene transfer in vivo and in vitro in prostate carcinoma PC-3 cells. // J. Control. Release. 2007. - V. 120. - P. 122-130.

85. Kearns M.D., Donkor A.-M., Sawa M. Structure-transfection activity studies of novel cationic cholesterol-based amphiphiles. // Mol. pharm. 2008. - V. 5. - P. 128-139.

86. Briane D., Lesage D., Cao A., Coudert R., Lievre N., Salzmann J.L., Taillandier E. Cellular pathway of plasmids vectorized by cholesterol-based cationic liposomes. // J. Histochem. Cytochem. 2002. - V. 50. - P. 983-991.

87. Percot A., Briane D., Coudert R., Reynier P., Bouchema N., Lievre N., Hantz E., Salzmann J.L., Cao A. A hydroxyethylated cholesterol-based cationic lipid for DNA delivery: effect of conditioning. // Int. J. Pharm. 2004. - V. 278. - P. 143-163.

88. Ding W.X., Hattori Y., Higashiyama K., Maitani Y. Hydroxyethylated cationic cholesterol derivatives in liposome vectors promote gene expression in the lung. // Int. J. Pharm. 2008. - V. 354. - P. 196-203.

89. Ghosh Y.K., Visweswariah S.S., Bhattacharya S. Advantage of the ether linkage between the positive charge and the cholesteryl skeleton in cholesterol-based amphiphiles as vectors for gene delivery. // Bioconjugate Chem. 2002. - V. 13. - P. 378-384.

90. Han S.-E., Kang H., Shima G.Y., Suha M.S., Kimc S.J., Kimd J.-S., Oh Y.-K. Novel cationic cholesterol derivative-based liposomes for serum-enhanced delivery of siRNA. // Int. J. Pharm. 2008. - V. 353. - P. 260-269.

91. Gao H., Hui K.M. Synthesis of a novel series of cationic lipids that can act as efficient gene delivery vehicles through systematic heterocyclic substitution of cholesterol derivatives. // Gene Ther. 2001. - V. 8. - P. 855-863.

92. Bajaj A., Mishra S.K., Kondaiah P., Bhattacharya S. Effect of the headgroup variation on the gene transfer properties of cholesterol based cationic lipids possessing ether linkage. // Biochim. Biophys. Acta. 2008. -V. 1778. - P. 1222-1236.

93. Keller M., Jorgensen M.R., Perouzel E., Miller A.D. Thermodynamic aspects and biological profile of CDAN/DOPE and DC-Choi/ DOPE lipoplexes. // Biochemistry-US. 2003. - V. 42. - P. 6067-6077.

94. Geall A.J., Taylor R.J., Earll M.E., Eaton M.A.W., Blagbrough I.S. Synthesis of cholesterol-polyamine carbamates: pKa studies and condensation of calf thymus DNA. // Bioconjugate Chem. 2000. - V. 11. - P. 314-326.

95. Remy J.S., Sirlin C., Vierling P., Behr J.-P. Gene transfer with a series of lipophilic DNA-binding molecules. // Bioconjugate Chem. 1994. - V. 5. - P. 647-654.

96. Behr J.P., Demeneix B.A., Loeffler J.P., Perez-Mutul J. Efficient gene transfer into mammalian primary endocrine cells with lipopolyamine-coated DNA. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - V. 86. - P. 6982-6986.

97. Hawley-Nelson P., Ciccarone V., Gebeyehu G., Jesse J., Feigner P.L. Lipofectamine reagent: a new higher efficiency polycationic liposome transfection reagent. // Focus. -1993.-V. 15.-P. 73-79.

98. Dodds E., Dunckley M.G., Naujoks K., Michaelis U., Dickson G. Lipofection of cultured mouse muscle cells: a direct comparison of lipofectamine and DOSPER. // Gene Ther.- 1998.-V. 5.-P. 542-551.

99. Ahmed O.A.A., Adjimatera N., Pourzand C., Blagbrough I.S. N4,N9-Dioleoyl spermine is a novel nonviral lipopolyamine vector for plasmid DNA formulation. // Pharm. Res. -2005. V. 22. - P. 972-980.

100. Ahmed O.A.A., Pourzand C., Blagbrough I.S. Varying the unsaturation in N4,№-dioctadecanoyl spermines: Nonviral lipopolyamine vectors for more efficient plasmid DNA formulation. // Pharm. Res. 2010. - V. 23. - P. 31-40.

101. Spagnou S., Miller A.D., Lipidic M.K. Carriers of siRNA: Differences in the formulation, cellular uptake, and delivery with plasmid DNA. // Biochemistry. 2004. -V. 43.-P. 13348-13356.

102. Moradpour D., Shauer J.I., Zurawski V.R., Wands J.R., Boutin R.H. Efficient gene transfer into mammalian cells with cholesteryl-spermidine. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. - V. 221. - P. 82-88.

103. Ouderhiri N, Vigneron J.P., Peuchmaur M., Leclerc T, Lehn J.M., Lehn P. Gene transfer by guanidinium-cholesterol cationic lipids into airway epithelial cells in vitro and in vivo. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - V. 94. - P. 1651-1656.

104. Belmont P., Aissaoui A., Hauchecorne M., Oudrhiri N., Petit L., Vigneron J.P., Lehn J.M., Lehn P. Aminoglycoside-derived cationic lipids as efficient vectors for gene transfection in vitro and in vivo. II J. Gene Med. 2002. - V. 4. - P. 517-526.

105. Sainlos M., Hauchecorne M., Oudrhiri N., Zertal-Zidani S., Aissaoui A., Vigneron J.P., Lehn J.M., Lehn P. Kanamycin A-Derived Cationic Lipids as Vectors for Gene Transfection. // Chem. Biochem. 2005. - V. 6. - P. 1023 - 1033.

106. Fujiwara T., Hasegawa S., Hirashima N., Nakanishi M., Ohwada T. Gene transfection activities of amphiphilic steroid-polyamine conjugates. // Biochim. Biophys. Acta. -2000.-V. 1468.-P. 396-402.

107. Choi S., Lee E.J., Jang H.S., Park J.S. New cationic liposomes for gene transfer into mammalian cells with high efficiency and low toxicity. // Bioconjugate Chem. 2001. -V. 12.-P. 108-113

108. Ito A., Miyazoe R., Mitoma J., Akao T., Osaki T., Kunitake T. Synthetic cationic amphiphiles for liposome-mediated DNA transfection. // Biochem. Int. 1990. - V. 22. -P. 235-241.

109. Arima H., Aramaki Y., Tsuchiya S. Effects of oligodeoxynucleotides on the physicochemical characteristics and cellular uptake of liposomes. // J. Pharm. Sci. 1997. -V. 86.-P. 438-442.

110. Tana T., Watarai S., Onuma M., Ochiai K., Kakidani H., Yasuda T. In vivo antitumor effect of cationic liposomes containing diphtheria toxin A-chain gene on cells infected with bovine leukemia virus. // J. Vet. Med. Sci., 1997, 59, 617.

111. Obata Y., Suzuki D., Takeoka S. Evaluation of cationic assemblies constructed with amino acid based lipids for plasmid DNA delivery. // Bioconjugate Chem. 2008. - V. 19.-P. 1055-1063.

112. Zana R., Xia J. Gemini surfactants: synthesis, interfacial and solution-phase behavior, and applications. 2004. - Science.

113. Moss R.A., Li J.M. Bilayer-bridging bolaamphiphilic lipids. // J. Am. Chem. Soc. -1992. V. 114. - P. 9227-9229.

114. Rosenzweig H.S., Rakhmanova V.A., MacDonald R.C. Diquaternary Ammonium Compounds as Transfection Agents. // Bioconjugate Chem. 2001. - V. 12. - P. 258-263.

115. Biswas J., Bajaj A., Bhattacharya S. Membranes of cationic gemini lipids based on cholesterol with hydroxyl headgroups and their interactions with DNA and phospholipid. // J. Phys. Chem. B. 2011. - V. 115. - P. 478^86.

116. Bajaj A., Kondaiah P., Bhattacharya S. Synthesis and gene transfer activities of novel serum compatible cholesterol-based gemini lipids possessing oxyethylene-type spacers. // Bioconjugate Chem. 2007. - V. 18. - P. 1537-1546.

117. Sapra P., Allen T.M. Internalizing antibodies are necessary for improved therapeutic efficacy of antibody-targeted liposomal drugs. // Cancer Res. 2002. - V. 62. - P. 71907194.

118. Aneed A.E. Targeted Cationic Liposomes. // Pharm. Technol. 2003. - V. 27. - P. 5862.

119. Ashwell G., Harford J. Carbohydrate-specific receptors of the liver. // Annu. Rev. Biochem. 1982. -V. 51. - P. 531- 554.

120. Spiess M. The asialoglycoprotein receptor: a model for endocytic transport receptors. // Biochemistry. 1990. - V. 29. - P. 10009-10018.

121. Zhang Y., Rong X., Gao Q., Maitani Y., Nagai T. Mechanisms of co-modified liver-targeting liposomes as gene delivery carriers based on cellular uptake and antigens inhibition effect. // J. Control. Release. 2007. - V. 117. - P. 281-290.

122. Salvador F., Alin O., Benet M., Dasi' F., Crespo J. Asialofetuin Liposomes for Receptor-Mediated Gene Transfer into Hepatic Cells. // Method. Enzymol. 2003. - V. 373. - P. 0076-6879.

123. Wu G.Y., Wu C.H. Receptor-mediated gene delivery and expression in vivo. // J. Biol. Chem. 1988. - V. 263. - P. 14621-14624.

124. Kunath K., Von Harpe A., Fischer D., Kissel T. Galactose-PEI-DNA complexes for targeted gene delivery: degree of substitution affects complex size and transfection efficiency. // J. Control. Release. 2003. - V. 88. - P. 159-172.

125. Alino S.F., Benet M., Dasi F., Crespo J. Asialofetuin liposomes for receptor-mediated gene transfer into hepatic cells. // Method. Enzymol. 2003. - V. 373. - P. 399-421.

126. Kawakami S., Munakata C., Fumoto S., Yamashita F., Hashida M. Novel galactosylated liposomes for hepatocyte-selective targeting of lipophilic drugs. // J. Pharm. Sci. 2001. -V. 90.-P. 105-113.

127. Iters L.E., Ren T., Liu D. Synthesis of targetable cationic amphiphiles. // Tetrahedron Lett. 1999. - V. 40. - P. 7621-7625.

128. Ren T., Zhang G., Liu D. Synthesis of galactosyl compounds for targeted gene delivery. // Bioorgan. Med. Chem. 2001. - V. 9. - P. 2969-2978.

129. Fabio K., Gaucheron J., Di Giorgio C., Vierling P. Novel galactosylated polyamine bolaamphiphiles for gene delivery. // Bioconjugate Chem. 2003. - V. 14. - P. 358-367.

130. Connolly D.T., Townsend R.R., Kawaguchi K., Bell W.R., Lee Y.C. Binding and endocytosis of cluster glycosides by rabbit hepatocytes. Evidence for a short-circuit pathway that does not lead to degradation. // J. Biol. Chem. 1982. - V. 257. - P. 939945.

131. Lee Y.C., Lee R.T. Carbohydrate-Protein Interactions: Basis of Glycobiology. // Accounts Chem. Res. 1995. -V. 28. - P. 321-327.

132. Lee Y.C., Townsend R.R., Hardy M.R., Lônngren J., Arnarp J., Haraldsson M., Lônn H. Binding of synthetic oligosaccharides to the hepatic Gal/GalNAc lectin. Dependence on fine structural features. // J. Biol. Chem. 1983. - V. 258. - P. 199-202.

133. Y.C. Lee, R.T. Lee in "Carbohydrates in Chemistry and Biology" (Eds. Ernst B., Hart G.W., Sinay P.). Weinheim. - 2000. - V. 4. - Wiley-WCH. - P. 549-561.

134. Biessen E.A., Vietsch H., Van Berkel T.J. Cholesterol derivative of a new triantennary cluster galactoside lowers serum cholesterol levels and enhances secretion of bile acids in the rat. // Circulation. 1995. - V. 91. - P. 1847-1854.

135. Leamon C.P., Low P.S. Folate-mediated targeting: from diagnostics to drug and gene delivery. // Drug Discov. Today. 2001. - V. 6. - P. 44-51.

136. Wu M., Gunning W., Ratnam M. Expression of folate receptor type a in relation to cell type, malignancy, and differentiation in ovary, uterus, and cervix. // Cancer Epidem. Biomar. 1999. - V. 8. - P. 775-782.

137. Hattori Y., MaitaniY. Folate-linked lipid-based nanoparticle for targeted gene delivery. // Curr. Drug Deliv. 2005. - V. 2. - P. 243-252.

138. Kim S.H., Jeong J.H., Mok H., Lee S.H., Kim S.W., Park T.G. Folate receptor targeted delivery of polyelectrolyte complex micelles prepared from ODN-PEG-folate conjugate and cationic lipids. // Biotechnol. Prog. 2007. - V. 23. - P. 232-237.

139. Leamon C.P., Reddy J.A., Vlahov I.R., Vetzel M., Parker N., Nicoson J.S., Xu L.C., Westrick E. Synthesis and biological evaluation of EC72: a new folate-targeted chemotherapeutic. // Bioconjug. Chem. 2005. - V. 16. - P. 803- 811.

140. Lee R.J., Low P.S. Folate-mediated tumor cell targeting of liposome entrapped doxorubicin in vitro. // Biochim. Biophys. Acta. 1995. - V. 1233. - P. 134-144.

141. Leamon C.P., Cooper S.R., Hardee G.E. Folate-liposome-mediated antisense oligodeoxynucleotide targeting to cancer cells: evaluation in vitro and in vivo. // Bioconjugate Chem. 2003. - V. 14. - P. 738-747.

142. Guo W.J., Lee T., Sudimack J., Lee R.J. Receptor-specific delivery of liposomes via folate-PEG-Chol. // J. Liposome Res. 2000. - V. 10. - P. 179-195.

143. Gabizon A., Horowitz A.T., Goren D., Tzemach D., Shmeeda H., Zalipsky S. In vivo fate of folate-targeted polyethene-glycol liposomes in tumorbearing mice. // Clin. Cancer Res. 2003. - V. 9. - P. 6551-6559.

144. Xiang G., Wu J., Lu Y., Liu Z., Lee R.J. Synthesis and evaluation of a novel ligand for folate-mediated targeting liposomes. // Int. J. Pharm. 2008. - V. 356. - P. 29-36.

145. Leamon C.P., DePrince R.B., Hendren R.W. Folate-mediated drug delivery: eVect of alternative conjugation chemistry. // J. Drug Target. 1999. - V. 7. - P. 157-169.

146. Zhang Y., Guo L., Roeske R. W., Antony A.C., Jayaram H.N. Pteroyl-gamma-glutamate-cysteine synthesis and its application in folate receptor-mediated cancer cell targeting using folate-tethered liposomes. // Anal. Biochem. 2004. - V. 332. - P. 168177.

147. Laine C., Mornet E., Lemiegre L., Montier T., Cammas-Marion S., Neveu C., Carmoy N., Lehn P., Benvegnu T. Folate-equipped pegylated archaeal lipid derivatives: synthesis and transfection properties. // Chemistry. 2008. - V. 14. - P. 8330-8340.

148. Yoshizawa T., Hattori Y., Hakoshima M., Koga K., Maitani Y. Folate-linked lipid-based nanoparticles for synthetic siRNA delivery in KB tumor xenografts. // Eur. J. Pharm. Biopharm. 2008. - V. 70. - P. 718-725.

149. Hattori Y., Maitani Y. Enhanced in vitro DNA transfection efficiency by novel folate-linked nanoparticles in human prostate cancer and oral cancer. // J. Control. Release. -2004.-V. 97.-P. 173-183.

150. Hofland H.E.J., Masson C., Iginla S., Osetinsky I., Reddy J.A., Leamon C.P., Scherman D., Bessodes M., Wils P. Folate-targeted gene transfer in vivo. II Mol. Ther. 2002. - V. 5.-P. 739-744.

151. Turk M.J., Breur G.J., Widmer W.R., Paulos C.M., Xu L.C., Grote L.A., Low P.S. Folate-targeted imaging of activated macrophages in rats with adjuvantinduced arthritis. // Arthr. Rheum. 2002. - V. 4. - P. 1947-1955.

152. Tros De Ilarduya C., Duzgune§ N. Efficient gene transfer by transferrin lipoplexes in the presence of serum. // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - V. 14. - P. 333-342.

153. Mendon9a L.S., Firmino F., Moreira J.N., Pedroso De Lima M.C., Simoes, S. Transferrin receptor-targeted liposomes encapsulating anti-BCR-ABL siRNA or asODN for chronic myeloid leukemia treatment. // Bioconjugate Chem. 2010. - V. 21. - P. 157-168.

154. Singh M., Hawtrey A., Ariatti M. Lipoplexes with biotinylated transferrin accessories: novel, targeted, serum-tolerant gene carriers. // Int. J. Pharm. 2006. - V. 321. - P. 124137.

155. Temming K., Schiffelers R.M., Molema G., Kok R.J. RGD-based strategies for selective delivery of therapeutics and imaging agents to the tumour vasculature. // Drug Resist. Update. 2005. - V. 8. - P. 381-402.

156. Suzuki T., Futaki S., Niwa M., Tanaka S., Ueda K., Sugiura Y. Possible existence of common internalization mechanisms among arginine-rich peptides. // J. Biol. Chem. -2002. V. 277. - P. 2437-2443.

157. Tyagi M., Rusnati M., Presta M., Giacca M. Internalization of HIV-1 tat requires cell surface heparan sulfate proteoglycans. // J. Biol. Chem. 2001. - V. 276. - P. 3254-3261.

158. Rajur S.B., Roth C.M., Morgan J.R., Yarmush M.L. Covalent protein-oligonucleotide conjugates for efficient delivery of antisense molecules. // Bioconjugate Chem. 1997. -V. 8.-P. 935-940.

159. Morris M.C., Vidal P., Chaloin L., Heitz F., Divita G. A new peptide vector for efficient delivery of oligonucleotides into mammalian cells. // Nucleic Acids Res. 1997. - V. 25. - P. 2730-2736.

160. Simeoni F., Morris M.C., Heitz F., Divita G. Insight into the mechanism of the peptide-based gene delivery system MPG: implications for delivery of siRNA into mammalian cells. //Nucleic Acids Res. -2003. -V. 31. P. 2717-2724.

161. Rudolph C., Plank C., Lausier J., Schillinger U., Muller R.H., Rosenecker J. Oligomers of the arginine-rich motif of the HIV-1 Tat protein are capable of transferring plasmid DNA into cells. // J. Biol. Chem. 2003. - V. 278. - P. 11411 - 11418.

162. Liu Z., Li M., Cui D., Fei J. Macro-branched cell-penetrating peptide design for gene delivery. // J. Control. Release. 2005. - V. 102. - P. 699-710.

163. Boomer J.A., Thompson D.H., Sullivan S.M. Formation of plasmid-based transfection complexes with an acid-labile cationic lipid: characterization of in vitro and in vivo gene transfer. // Pharm. Res. 2002. - V. 19. - P. 1292-1301.

164. Zhu M.Z., Wu Q.H., Zhang G., Ran T., Liu D., Guo Q.X. Synthesis and evaluation of cationic lipids bearing cholesteryl groups for gene delivery in vitro. II Bull. Chem. Soc. Jpn. 2002. - V. 75. - P. 2207-2213.

165. Zhu J., Munn R.J., Nantz M.H. Self-cleaving ortho ester lipids: a new class of pH-vulnerable amphiphiles. // J. Am. Chem. Soc. 2000. - V. 122. - P. 2645-2646.

166. Kuppusamy P., Li H., Ilangovan G., Cardounel A.J., Zweier J.L., Yamada K., Krishna M.C., Mitchell J.B. Noninvasive imaging of tumor redox status and its modification by tissue glutathione levels. // Cancer Res. 2002. - V. 62. - P. 307-312.

167. Tang F., Hughes J.A. Introduction of a disulfide bond into a cationic lipid enhances transgene expression of plasmid DNA. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. - V. 242.-P. 141-145.

168. Tang F., Hughes J.A. Use of dithiodiglycolic acid as a tether for cationic lipids decreases the cytotoxicity and increases transgene expression of plasmid DNA in vitro. // Bioconjugate Chem. 1999. - V. 10. - P. 791-796.

169. Huang Z., Li W., MacKay J.A., Szoka F.C. Thiocholesterol-based lipids for ordered assembly of bioresponsive gene carriers. // Mol. Ther. 2005. - V. 11. - P. 409-417.

170. Ferrer-Miralles N., Vázquez E., Villaverde A. Membrane-active peptides for non-viral gene therapy: making the safest easier. // Trend. Biotechnol. 2008. - V. 26. - P. 267275.

171. Мок H.J., Park T.G. Self-crosslinked and reducible fusogenic peptides for intracellular delivery of siRNA. // Biopolymers. 2008. - V. 89. - P. 881-888.

172. Gottschalk S., Sparrow J.T., Hauer J., Mims M.P., Leland F.E., Woo S.L., Smith L.C. A novel DNA-peptide complex for efficient gene transfer and expression in mammalian cells. // Gene Ther. 1996. - V. 3. - P. 448-457.

173. Mann A., Thakur G., Shukla V., Ganguli M. Peptides in DNA delivery: current insights and future directions. // Drug Discov. Today. 2008. - V. 13. - P. 152-160.

174. Torchilin V.P. Recent advances with liposomes as pharmaceutical carriers. // Nat. Rev. Drug Discov. 2005. - V. 4. - P. 145-160.

175. Nakamura Т., Akita H., Yamada Y., Hatakeyama H., Harashima H. A Multifunctional envelope-type nanodevice for use in nanomedicine: concept and applications. // Accounts Chem. Res. -2012 doi:10.1021/ar200254s.

176. Маслов M.A., Сычева E.B., Морозова Н.Г., Серебренникова Г.А. Синтез алкильных глицеролипидов с различными катионными группами, присоединенными непосредственно к глицериновому скелету. // Изв. АН. Сер. хим. 1999.-№7.-С. 1381-1384.

177. Pojer P.M., Angyal S.J. Methylthiomethyl ethers: their use in the protection and methylation of hydroxyl group. // Aust. J. Chem. 1978. -V. 31. - P. 1031-1040.

178. Cordes E.H., Bull H.G. Mechanism and catalysis for hydrolysis of acetals, ketals, and ortho esters. // Chem Rev. 1974. - V. 74. - P. 581-603.

179. Tolkach A.M., Polonik S.G., Uvarova N.I. USSR Inventor's certificate no. 1428755. // Byull. Izobret. 1988, - no. 37.

180. Mitsunobu O. in "Comprehensive Organic Synt." (Eds. Trost B.M., Fleming I.). 1991. - V. 6. - P.63. - Oxford: Pergamon.,

181. Fukuyama Т., Jow C.-K., Cheung M. 2- and 4-Nitrobenzenesulfonamides: Exceptionally versatile means for preparation of secondary amines and protection of amines. // Tetrahedron Lett. 1995. - V. 36. - P. 6373-6374.

182. Protective Groups in Organic Synthesis (Eds. P. G. M. Wuts, T. W. Greene). 1999. -Wiley-Interscience.

183. Broderick S., Davis A.P, Williams R.P. The "triamino-analogue" of methyl cholate; a facial amphiphile and scaffold with potential for combinatorial and molecular recognition chemistry. // Tetrehedron lett. 1998. - V. 39. - P. 6083-6086.

184. Li C., Rehman A., Dalley N.K., Savage P.B. Short synthesis of triamine derivatives of cholic acid. // Tetrahedron lett. 1999. - V. 40. - P. 1861-1864.

185. Vandenburg Y.R., Smith B.D., Perez-Payan M.N., Davis A.P. Non-leaky Vesicle Fusion and Enhanced Cell Transfection Using a Cationic Facial Amphiphile. // J. Am. Chem. Soc. 2000. - V. 122. - P. 3252-3253.

186. Davis A.P., Perez-Payan M.N. The "Triamino-analogue" of methyl cholate; a practical, large-scale synthesis // Synlett. 1999. - P. 991-993.

187. Anikin A., Maslov M., Sieler J., Blaurock S., Baldamus J., Hennig L., Findeisen M., Reinhardt G., Oehme R., Welzel P. Synthesis of a la-amino-l-deoxy analogue of forskolin. // Tetrahedron. 2003. - V. 59. - P. 5295-5305.

188. Hofmann A.F. The preparation of chenodeoxycholic acid and its glycine and taurine conjugates. // Acta Chem. Scand. 1963. - V. 17. - P. 173-186.

189. Riva S., Bovara R., Pasta P., Carrea G. Preparative-scale regio- and stereospecific oxidoreduction of cholic acid and dehydrocholic acid catalyzed by hydroxysteroid dehydrogenases. // J. Org. Chem. 1986. - V. 51. - P. 2902-2906.

190. Kuwada S., Furushiro S., Kawashima M. Partial oxidation of methyl cholate // Ann. Rep. Takeda Res. Lab. 1949. - V. 8. - P. 50-61.

191. Dueffels A., Green L.G., Ley S.V., Miller A.D. Synthesis of high-mannose type neoglycolipids: active targeting of liposomes to macrophages in gene therapy. // Chem. Eur. J. 2000. - V. 6. - P. 1416-1430.

192. Jacopin C., Hofland H., Scherman D., Herscovici J. Synthesis and transfecting properties of a glycosylated polycationic DNA vector. // Bioorg. Med. Chem. Lett. -2001.-V. 11.-P. 419-422.

193. Mukthavaram R., Marepally S., Venkata M.Y., Vegi G.N., Sistla R., Chaudhuri A. Cationic glycolipids with cyclic and open galactose head groups for the selective targeting of genes to mouse liver // Biomaterials. 2009. - V. 30. - P. 2369-2384.

194. Carbohydrate Chemistry (Ed. G.J. Boons). London. - 1998. - Blackie Academic and Professional.

195. Bergh A., Magnusson B.G., Ohlsson J., Wellmar U., Nilsson U.J. Didecyl squarate—A practical amino-reactive cross-linking reagent for neoglycoconjugate synthesis. // Glycoconjugate J. 2001. - V. 18. - P. 615-621.

196. Salvati A., Ciani L., Ristori S., Martini G., Masi A., Arcangeli A. Physico-chemical characterization and transfection efficacy of cationic liposomes containing the pEGFP plasmid. // Biophys. Chem. 2006. - V. 121. - P. 21-29.

197. Le D.T., Pardoll D.M., Jaffee E.M. Cellular vaccine approaches. // Cancer J. 2010. -V. 16.-P. 304-310.

198. Proudfoot O., Apostolopoulos V., Pietersz G.A. Receptor-mediated delivery of antigens to dendritic cells: anticancer applications. // Molecular Pharmaceutics. 2007. - V. 4. - P. 58-72.

199. Brossart P., Goldrath A.W., Butz E.A. Virus-mediated delivery of antigenic epitopes into dendritic cells as a means to induce CTL. // J. Immunol. 1997. - V. 158. - P. 3270-3276.

200. Metharom P., Ellem K.A., Scmidt C., Wei M.Q. Lentiviral vector-mediated tyrosinase-related protein 2 gene transfer to dendritic cells for the therapy of melanoma. // Hum. Gene Ther. 2001. - V. 12. - P. 2203-2213.

201. Andre F., Mir L.M. DNA electrotransfer: its principles and an updated review of its therapeutic applications. // Gene Ther. 2004. - V. 11. - P. 33-42.

202. Kim T.H., Nah J.W., Cho M.H., Park T.G., Cho N.S. Receptor-mediated gene delivery into antigen presenting cells using mannosylated chitosan/DNA nanoparticles. // J. Nanosci. Nanotechnol. 2006. - V. 6. - P. 2796-2803.

203. Weecharangsan W., Opanasopit P., Ngawhirunpat T., Apirakaramwong A., Rojanarata T., Ruktanonchai U., Lee R.J. Evaluation of chitosan salts as non-viral gene vectors in CHO-K1 cells. // Int. J. Pharm. 2008. - V. 348. - P. 161-168.

204. Streitz J., Tormo D., Schweichel D., Tuting T. Comparison of recombinant adenovirus and synthetic peptide for DC-based melanoma vaccination. // Cancer Gene Ther. 2006. -V. 13.-P. 318-325.

205. Murakami T., Tokunaga N., Waku T., Gomi S., Kagawa S., Tanaka N., Fujiwara T. Antitumor effect of intratumoral administration of bonemarrow-derived dendritic cells transduced with wild-type p53 gene. // Clin. Cancer Res. 2004. - V. 10. - P. 3771-3880.

206. Yuba E., Kojima C., Sakaguchi N., Harada A., Koiwai K., Kono, K. Gene delivery to dendritic cells mediated by complexes of lipoplexes and pH-sensitive fusogenic polymer-modified liposomes. // J. Control. Release. 2008. - V. 130. - P. 77-83.

207. Lu Y., Kawakami S., Yamashita F., Hashida M. Development of an antigen-presenting cell-targeted DNA vaccine againstmelanoma bymannosylated liposomes. // Biomaterials. 2007. - V. 28. - P. 3255-3262.

208. Foged C., Arigita C., Sundblad A., Jiskoot W., Storm G., Frokjaer S. Interaction of dendritic cells with antigencontaining liposomes: effect of bilayer composition. // Vaccine. 2004. - V. 2. - P. 15-16.

209. Van Driessche A., Ponsaerts P., Van Bockstaele D.R., Van Tendeloo V.F., Berneman Z.N. Messenger RNA electroporation: an efficient tool in immunotherapy and stem cell research. // Folia Histochem. Cytobiol. 2005. - V. 43. - P. 213-216.

210. Аникин М.В., Ушакова И.П., Серебренникова Г.А., Евстигнеева Р.П. Синтез 1,2-ди-О-алкилглицеринов с использованием аллильной защитной группы. Черкассы. - 1987. - Деп. ОНИИТЭИХим. - №915-хп87.

211. Miller К.А., Kumar E.V.K.S., Wood S.J., Cromer J.R., Datta A., David S.A. Lipopolysaccharide Sequestrants: Structural Correlates of Activity and Toxicity in Novel Acylhomospermines. // J. Med. Chem. 2005. - V. 48. - P. 2589-2599.

212. Dahmen J., Frejd T., Magnusson G., Noori G. Preparation and applications of 2-bromoethyl glycosides: synthesis of spacer-arm glycosides and agglutination inhibitors. // Carbohyd. Res. 1982. - V. 111. - P. CI-C4.

213. Hudson C.S., Johnson J.M. Isomeric Octaacetates of Lactose. // J. Am. Chem. Soc. -1915.-V. 37.-P. 1270-1275.

214. Boeckman R.K., Shao P., Mullins J.J. The Dess-Martin periodinane: 1,1,1-triacetoxy-1,1 -dihydro-1,2-benziodoxol-3( 1 H)-one. // Org. Synth. 2000. - V. 77. - P. 141-152.

215. Донсон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика. // Москва. -1991.-Мир.

216. Kritchevsky D., Kirk M.R. Detection of steroids in paper chromatography. // Arch. Biochem. Biophys. 1952. - V. 35.-P. 346-351.

217. Uvarova N.I., Atopkina L.N., Elyakov G.B. Synthesis of triterpene and steroid glycosides. // Carbohydr. Res. 1980. - V. 83. - P. 33-42.

218. Hardegger E.; de Pascual J. Glucoside und (3-1,3,4,6-Tetraacetyl-glucose aus Triacetyl-glucosan-a<l,2>p<l,5>. // Helvetica Chimica Acta. 1948. - V. 31. - P. 281-286.

219. Yuuki H., Michiko I., Toshiaki F. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003. - V. 13. - P. 905908.

220. Hill R.A., Kirk D.N., Makin H.L.J., Murphy G.M. Dictionary of Steroid. // London. -1991,-Chapman & Hall.

221. Proudnikov D., Mirzabekov A. Chemical methods of DNA and RNA fluorescent labeling. // Nucleic Acids Res. 1996. - V. 24. - P. 4535-4542.

222. Darnha M.J., Ogilvie K.K. Oligoribonucleotide Synthesis The Silyl-Phosphoramidite Method. // Methods Mol. Biol. 1993. - V. 20. - P. 81-114.

223. Donis-Keller H., Maxam A.M., Gilbert W. Mapping adenines, guanines, and pyrimidines in RNA. // Nucleic Acids Res. 1977. - V. 4. - P. 2527-2538.

224. Carmichael J., De Graff W.G., Gazdar A.F., Minna J.D., Mitchell J.B. Evaluation of tetrazolium based semi-automated colorimetric assay: Assessment of chemosensitivity testing. // Cancer Res. 1987. - V. 47. - P. 936-942.