Иммунофенотип и функциональная активность лимфоцитов, выделенных из печени, пораженной опухолевым процессом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Кузовлев, Евгений Николаевич

• Кузовлев, Евгений Николаевич
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Кузовлев, Евгений Николаевич

1. Введение.

2. Обзор литературы.

3. Материалы и методы.

4. Результаты.

4.1. Морфологическая характеристика мононуклеарных лейкоцитов, инфильтрирующих опухоли печени у мышей.

4.2. Изучение иммунофенотипа мононуклеарных лимфоцитов печени мышей, пораженной опухолевым процессом.

4.3. Цитотоксическая активность лимфоцитов, выделенных из печени.

4.4. Особенности инфильтрации мононуклеарными лейкоцитами метастатических узлов печени онкологических больных.

4.5. Киллерная активность лимфоцитов, выделенных из параметастаических и интактных участков печени онкологических больных.

4.6. Изучение имунофенотипа монуклеарных лейкоцитов печени.

4.7. Генерация ЛАК из лимфоцитов, выделенных из печени онкологических больных.

5. Обсуждение.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунофенотип и функциональная активность лимфоцитов, выделенных из печени, пораженной опухолевым процессом»

Актуальность темы Заболеваемость злокачественными новообразования в последние десятилетия в России постоянно возрастает и, как показывают расчеты, прирост числа онкологических больных в XXI веке будет постоянно увеличиваться. На современном этапе, несмотря на развитие медицины, по-прежнему основными методами лечения рака остается хирургический и химиотерапевтический. При основных локализациях неоплазий показатель резектабельности по отношению к числу заболевших не превышает 20 а около 50 оперированных больных умирают в первые два года от прогрессирования заболевания. После радикальных и условно-радикальных операций больные умирают не столько от рецидива опухоли, сколько от отдаленных метастазов, что свидетельствует о необходимости проведения системного лечения даже при местно- распространенных формах злокачественных новообразований. Современные схемы химиотерапии оказываются недостаточно эффективными, прежде всего, при так называемых иммуночувствительных формах неоплазий (меланома, рак почки) и ряде относительно химиорезистентных форм рака (немелкоклеточный рак легкого, рак желудка, метастатические поражения печени и т. п.). Поэтому поиск методов, направленных на стимуляцию противоопухолевого иммунитета и повышение распознаваемости опухолевых антигенов, представляется перспективным [Давыдов М. И. с соавт., 2000]. Опухолевое поражение печени может быть как самостоятельным заболеванием, так и метастатическим, и отмечается при многих онкологических заболеваниях. Но и в том и в другом случае развитие как первичного, так и метастатического узла в печени указывает на резкое ухудшение прогноза в течении заболевания. Такое ухудшение прогноза связывают с тем, что развитие онкологического процесса в печени может наблюдаться на фоне практически полного истощения иммунной системы организма и, в частности, иммунной системы этого органа. Иммунная система печени; включает в себя* большинство компонентов врожденной иммунной системы: натуральные киллеры (НК), натуральные киллеры-Т-клетки (НКТ-клетки), дендритные клетки, макрофаги и др: и небольшую часть эффекторов; специфического* иммунитета (Т-клетки) [Beaudoih L. et al., 2002] i Взаимосвязь между этими двумя звеньями иммунной защиты печени доконца не изучена. О-роли специфического иммунного ответа известно достаточно много- гораздо меньше сведений, посвящено, другим субклассам мононуклеарных клеток печени;, особенно об; их участии- в инициации иммунного ответа. НКТ-клеткш печени составляют основную часть Т-клеточной популяции этого органа: Информация о популяции*НКТ-клеток в* печени человека весьма малочисленна и противоречива; Практически все сведения об их внутрипечёночной активации и взаимодействии с другими звеньями иммуннош системы, печени-были получены в эксперименте на мышах.. Однако участие НКТ-клеток печени в противоопухолевом иммунитете остается мало изученным [Berzins S.P: et-ali, 2004]i Очевидным является что НКТ-клетки охватывают более гетерогенную популяцию Т-лимфоцитов, чем считалось изначально; [Fuji N.. et al., 2000]. Дальнейший анализ функций НКТ-клеток печени и исследование их иммунофенотипа, является крайне важным в оценке роли НКТ-клеток в противоопухолевом иммунитете. Цель исследования Изучение иммунофенотипа и функциональной активности мононуклеарных лейкоцитов, выделенных из печени онкологических больных, пораженной опухолевымепроцессом.Задачи исследования 1. Изучить содержание лимфоцитов в пораженных метастазами, и интактных участках печени. 2. Исследовать морфологические особенности лимфоцитов печени, пораженной опухолевым процессом. 3. Оценить цитотоксическую активность лимфоцитов из паратуморальной> области и периферической крови онкологических больных. 4. Провести сравнительный иммунофенотипический анализ мононуклеарных лейкоцитов паратуморальной области и интактных участков печени. 5. Исследовать особенности иммунофенотипаи киллерных свойств лимфокинактивированных киллеров, генерированных из мононуклеарных лейкоцитов паратуморальной области, интактного участка печени и периферической крови. Научная новизна Впервые в сравнительном аспекте исследованы морфологические иммунофенотипические и функциональные свойства лимфоцитов, выделенных из параметастатического, интактного участков печени и периферической крови, онкологических больных. Установлено, что особенностью иммунного процесса при онкологических заболеваниях печени является формирование лимфоидных инфильтратов в паратуморальной области. Впервые установлено, что лимфоциты параметастатической области печени обладают высокой спонтанной цитотоксической и НК активностью, сопоставимой с таковой для ЛАК. Впервые показана возможность получения из лимфоцитов печени онкологических больных ЛАК, способных эффективно лизировать аутологичные опухолевые клетки. Впервые установлено, что в области опухолевых узлов образуютсялимфоидные инфильтраты, состоящие из Т-лимфоцитов, НК и НКТ, характеризующихся высоким уровнем экспрессии молекул адгезии и маркера пролиферации Ki-67. Исследованы иммунофенотипические и функциональные свойства ЛАК, генерированных из лимфоцитов, инфильтрирующих печень. Получены новые данные о соотношении субпопуляции лимфоцитов в различных участках печени на фоне опухолевой прогрессии. Научно-практическая значимость Полученные в работе данные расширяют представления о механизмах местного противоопухолевого иммунитета. В ходе исследования отработан алгоритм экстракорпоральной генерации из лимфоцитов, выделенных из пораженной киллерной опухолевым процессом активности печени, ЛАК с высоким к аутологичным уровнем по отношению клеткам. ЛАК, генерированные из лимфоцитов печени, могут быть локорегионарной радикально адоптивной иммунотерапии с целью использованы для и условнорецидивов радикально оперированных больных профилактики метастазирования в печени.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Кузовлев, Евгений Николаевич

1. В паренхиме печени экспериментальных животных с имплантированной опухолью и онкологических больных с метастазами отмечается лимфоидная инфильтрация наиболее выраженная в паратуморальных участках.2. По своим морфологическим свойствам печень-ассоциированные лимфоциты могут быть отнесены к активированным формам типа иммунобластов и пролимфоцитов.3. Инфильтрирующие пораженную опухолевым процессом печень лимфоциты представлены тремя основными субпопуляциями: Т-клетками (CD3*), НК (CD16+, CD56+, CD574) и НКТ (CD3+/CD56+).4. Мононуклеарные лейкоциты печени больных, выделенные из параметастатических участков, характеризуются высоким уровнем экспрессии антигенов натуральных киллеров (CD57) и молекул адгезии (CD58), а также активационных молекул (CD38) по сравнению с мононуклеарами крови тех же больных.5. Мононуклеарные лейкоциты паратуморальных участков печени обладают более высокой НК-активностью и цитотоксичностью по отношению к аутологичным клеткам, по сравнению с мононуклеарными лейкоцитами интактных участков печени и мононуклеарными клетками периферической крови.6. При инкубации мононуклеарных лейкоцитов, выделенных из параметастатических участков печени, с ИЛ-2, могут быть получены ЛАК клетки, характеризующиеся более высокой цитотоксической активностью, чем ЛАК, генерированные из мононуклерных клеток периферической крови.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Кузовлев, Евгений Николаевич, 2008 год

1. Давыдов М. И., Нормантович В. А., Киселевский М. В., Волков М. и др. Адоптивная иммунотерапия при опухолевых плевритах: клинико-лабораторное исследование Российский онкологический 14—17.

2. Новиков В. И. и др. Иммунотерапия при злокачественных новообразованиях В. И. Новиков, В. И. Карандашов, И*. Г. Сидорович. М.: Медицина, 2002.

3. Окулов В. Б., Громов А., Войтенков Б. О. Модуляции функции макрофагов противоопухолевыми препаратами и-модификаторами биологического1 ответа Актуальные вопросы иммунотерапии опухолей: Тез. докл. Всесоюз. журнал. 2000. 6 симпозиума. Рига, 1988. Т. 2. 42—43.

4. Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Основные свойства дендритных клеток Иммунология. 2001. 22. 7—16.

5. Яршгин А. А. Основы иммунологии. Москва: Медицина, 1999. 216 с.

6. Akbari О. et al. Essential role of NKT cells producing DL-4 and IL-13 in the development of allergen-induced airway hyperreactivity Nature Medicine. 2003. Vol. 9. P 582—588. 8. Ali Tahir S. M. et al. Loss of IFN-gamma production by invariant NK T cells in advanced cancer The Journal of Immunology. 2001. Vol. 167. P. 4046— 4050.

7. Andrews D. M., Andoniou C.K, Scalzo A. A., van Dommelen S. L., Wallace M. E., Smyth M. J., Degli-Esposti M. A. Cross-talk between dendritic cells and* natural killer cells in viral infection Molecular immunology. 2005. Vol. 42. 4 P 547—555.

8. Apostolou I. et al. Murine natural killer T (NKT) cells contribute to the granulomatous reaction caused by mycobacterial cell walls Proceedings of the

9. Ardavin C Martinez del Hoyo G., Martin P., Anjuere F., Arias C. F., Marin A. R., Ruiz S., Parrillas V., Hernandez H. Origin and differentiation of dendritic cells Trends in immunology. 2001. Vol. 22. 12. P. 691-700.

10. Arrunategui-Correa V., Lenz L., Kim H. S. CD Id-independent regulation of NKT cell migration and cytokine production upon Listeria monocytogenes infection Cellular immunology. 2004. Vol. 232. 1—2. P. 3 8 8

11. Baxter A. G., Kinder S. J., Hammond K. J., Scollay R., and Godfrey D. I. Association between alphabetaTCR+CD4-CD8- T-cell deficiency and IDDM in NOD/Lt mice Diabetes. 1997. Vol. 146. P. 572—582.

12. Beaudoin L., Laloux V., Novak J., Lucas B. and Lehuen A. NKT cells inhibit the onset of diabetes by impairing the development of pathogenic T cells specific for pancreatic beta cells Immunity. 2002. Vol. 7. P. 725—736.

13. Benlagha K., Weiss A., Beavis A., Teyton L., and Bendelac A. In vivo identification of glycolipid antigen-specific T cells using fluorescent CD Id tetramers The Journal of Experimental Medicine. 2000. Vol. 191. 11. P. 18951904.

14. Bernsen M. R., Van der Velden A. W., Everse L. A., Dullens H. F. et al. Interleukin-2: hope in cases of cisplatin-resistant tumours Cancer immunol. Immunother. 1998. Vol. 46. P. 41—47.

15. Berzins S. P. et al. Systemic NKT cell deficiency in NOD mice is not detected in peripheral blood: implications for human studies Immunology and Cell Biology. 2004. Vol. 82. P 247—252.

16. Boon Т., van der Bruggen P. Human tumor antigens recognized by T lymphocytes J Exp Med. 1996. Vol. 183. P. 725—729.

17. Brigl M., Bry L., Kent S. C Gumperz J. E. and Brenner M. B. Mechanism of CD Id-restricted natural killer T cell activation during microbial infection Nature Immunology. 2003. Vol. 4. P. 1230—1237.

18. Brossay L. et al. GDId-mediated Recognition- of an a-Galactosylceramide by Natural Killer T. Cells Is Highly Gonserved through Mammalian Evolution// Journal of Experimental Medicine: 1998. —Vol. 188. 8. P; 1521—1528.

19. Brummer E., Stevens D. A. Mechanisms in opposite modulation of spleen cell and lymph node cell responses to mitogens following muramil dipeptide treatment in vitro II Cell. Immunol: 1985. Vol. 91. 2. P. 505—514:

20. Carnaud- G. et al:. Gutting edge: cross-talk between; cells of the innate immune system: NKT cells rapidly activate NK cells The Journal of Immunology.— 1999. Vol 163: №9« P: 4647-1650; 26: Chamoto K., Kosaka A., Tsuji Т., Matsuzaki J:, Sato Т., TakeshimaT., Iwakabe: K.,.Togashi Y., KodaT., Nishimura T. The critical role of Thl/Tcl circuit for the generation of tumor-specific CTL during tumor eradication in vivo by Thl-cell therapy Cancer Sci. 2003: Vol. 94, P. 924—928. 21. Chan О; T. et a l Deficiency in beta(2)-microglobulini but nofcGDI, accelerates spontaneous lupus skin disease while inhibiting nephritis in MRE-Fas(lpr) nice: an1 example of disease regulation at the organ level The Journal of Immunology. 2001. Vol 167.— P. 2985—2990; 28: Ghiba: A. et al Suppression of collagen-induced arthritis by natural killer T cell activation with OCH a sphingosine-truncated analog of alpha-galactosylceramide Arthritis Rheumatism. 2004. Vol. 5 0 P: 305—313.

22. Clemente G, Mihm M. C Bufalino R., Zurrida S., Collini P., Cascinelli N. Prognostic value of tumor infiltrating lymphocytes in the vertical growth phase of primary cutaneous melanoma Cancer. 1996. Vol. 77. P. 1303—1310.

23. Colonna M., Trinchieri G., Liu Y. J. Plasmacytoid dendritic cells in immunity Nature immunology. 2004. Vol. 5. 12. P. 1219—26.

24. Cretney E., Takeda K., Yagita EL, Glaccum M., Peschon J. J., Smyth M.J. Increased susceptibility to tumor initiation and metastasis in TNF-related apoptosisinducing ligand-deficient mice J Immunol. 2002. Vol. 168.— P. 1356— 1361.

25. Crowe N. Y. et al. Glycolipid Antigen Drives Rapid Expansion and Sustained Cytokine Production by NK T Cells The Journal of Immunology. 2003. Vol. 171. P 4020—4027.

26. Crowe N. Y., Smyth M. J. and Godfrey D. I. A critical role for natural killer T cells in immunosurveillance of methylcholanthrene-induced sarcomas The Journal of Experimental Medicine. 2002. Vol. 196. 1. P. 119—127. 34. Cui J. et al. Requirement for Valphal4 NKT cells in IL-12-mediated rejection of tumors Science. 1997. Vol. 278. 5343. P. 1623—1626.

27. Dellabona P., Padovan E., Casorati M., Brockhaus M. and Lanzavecchia A. An invariant Voc24-JaQ/V[311 T cell receptor is expressed in all individuals by clonally expanded CD48 T cells Journal of Experimental Medicine. 1994. Vol. 180. P. 1171—1176.

28. Dhodapkar M. V. et al. A reversible defect in natural killer T cell function characterizes the progression of premalignant to malignant multiple myeloma The Journal of Experimental Medicine. 2003. Vol. 197. 12. P. 1667— 1676.

29. Dunn G.P., Brace А. Т., Ikeda H., Old L. J., Schreiber R. D. Cancer immunoediting: from immunosurveillance to tumor escape Nat Immunol. 2002. Vol.3. P 991—998.

30. Dunn G. P., Old L. J., Schreiber R. D. The three es of cancer immunoediting Annu Rev Immunol. 2004. Vol. 22. P. 329—360.

31. Eberl G. et al. Tissue-Specific Segregation of CD Id-Dependent and CDldIndependent NK T Cells The Journal of Immunology. 1999. Vol. 162. P. 6410—6419.

32. Emoto M., Kaufmann S. H. Liver NKT cells: an account of heterogeneity Trends Immunology. 2003. Vol. 24. 7. P. 364—369.

33. Engel A. M., Svane I. Ml, Rygaard J., Werdelin O. MCA sarcomas induced in scid mice are more immunogenic than MCA sarcomas induced in congenic, immunocompetent mice Scand J Immunol. 1997. Vol..45. P. 463—470.

34. Enzler Т., Gillessen S., Manis J. P., Ferguson Di, Fleming J., Alt F. W., Mihm M., Dranoff G. Deficiencies" of GM-CSF and interferon у link inflammation and cancer//J Exp Med. 2003. Vol. 1 9 7 P 1213—1219.

35. Exley M. A. et al. Cutting edge: compartmentalization of ТЫ-like noninvariant CDld-reactive T cells in hepatitis С virus-infected Immunology. —2002. —Vol. 168. P 1519—1523.

36. Faradji A., Bohbot A., Frost H., Schmitt-Goguel M., Siffert J. C DufoimP., Eber M., ballot C Wiesel ML L., Bergerat J. P. et al. Phase I study of liposomal MTP-PEactivated autologous monocytes administered intraperitoneally to patients with peritoneal carcinomatosis Journal of clinical oncology: official journal of the American Society of Clinical Oncology. 1991. Vol. 9. 7. P. 1251— 1260.

37. Fischer K. et al. Mycobacterial phosphatidylinositol mannoside is a natural liver The Journal of antigen for CD Id-restricted T cells Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2004. Vol: 10685—10690.

38. Fuji N., Ueda Y., Fujiwara H. et al. Antitumor effect of a-galactosylceramide (KRN7000) on spontaneous hepatic metastases requires endogenous interleukin 12 in the liver Clinical Cancer Research. 2000. Vol. 6. 8. P. 3380—3387. 101. 29. P.

39. Fujii S. Application of natural killer T-cells to posttransplantation immunotherapy //Int J Hematol. 2005. Vol. 81. P. 1—5.

40. Fujii S., Shimizu K., Kronenberg M; and Steinman R. M: Prolonged IFN-gammaproducing NKT response induced with alpha-galactosylceramide-loaded Nature Immunology. 2002. Vol. 3. P. 867—874.

41. Giaccone G. et al; A phase:- F study of the natural killer T-cell ligand; alphaGalactosylceramide (KRN7000)* in patients with solid tumors Clinical Cancer Research.—2002. Vol; 8; PI 3702—3709!

42. Godfrey D. I., Hammond K. J:, Poulton L. D; et al; NKT cells: facts, functionsand fallacies Immunology Today. 2000: 21. P. 573—583.

43. Godfrey D.I., Pellicci D; G., Smyth M. J. Immunology. The elusive NKT cell antigen is the search over? Science. 2004. Vol. 306. P. 1687-1689.

44. Godfrey D. I MacDonald H. R., Kronenberg M., Smyth M; J; and Van Kaer L. NKT cells: whats in a name? Nature Reviews Immunology. 2004. Vol; 4. 3 P. 231—237.

45. Gombert J.M. etal. Early quantitative and functional deficiency ofNKl+-like thymocytes in the NOD mouse//European ournal of immunology. 1996; Vol; 2 6 1 2 P; 2989—2998.

46. Gonzalez-Asegumolaza G., VamKaer L., Bergmann G.C., Wilson J; M:, Schmieg J., Kronenberg M;, Nakayama Т., Taniguchi Mi, Koezuka Y., Tsuji M NaturaEkiller DCs

47. Groux H., OGarra A., Bigler M., Rouleau M., Antonenko S., de Vries J. E., Roncarolo M. G. A CD4+ T-cell subset inhibits antigen-specific T-cell responses and prevents colitis //Nature. 1997. Vol. 389. P 737—742.

48. Grubor-Bauk В., Simmons A., Mayrhofer G. and Speck P. G. Impairedclearance of herpes simplex virus type 1 from mice lacking CDld or NKT cells expressing the semivariant Val4-Ja281 TCR The Journal of Immunology. 2003. Vol. 170. P. 1430—1434.

49. Gumperz J. E.5 Miyake S., Yamamura T. and Brenner M. B. Functionally distinct subsets of CD Id-restricted natural killer T cells revealed by CDld tetramer staining The Journal of Experimental Medicine. 2002. Vol. 195. 5. P. 625— 636.

50. Hammond K. J. et al. CD Id-restricted NKT cells: an interstrain comparison The Journal of Immunology. 2001. Vol. 167. P. 1164—1173.

51. Hammond K. J. and Godfrey D. I. NKT cells: potential targets for autoimmune disease therapy? Tissue Antigens. 2002. Vol. 59. P: 353—363.

52. Hammond K. J. and Kronenberg Mi Natural killer T cells: natural or. unnatural regulators of autoimmunity? Current Opinion in Immunology. 2003. Vol. 15. P. 683—689.

53. Hammond K. J. et aL Alpha/beta-T cell receptor (TCR)+ CD4-CD8- (NKT) thymocytes prevent insulin-dependent diabetes mellitus in nonobese diabetic (NOD/Lt) mice by the influence of interleukin (IL)-4 and/or IL-10 The Journal of Experimental Medicine. 1998. Vol. 187. 7. P. 1047—1056.

54. Hammond K. J. et all NKT cells are phenotypically and functionally diverse European Journal of Immunology. 1999. Vol. 29. P. 3768—3781.

55. Hansen D. S., Siomos M. A., Buckingham L., Scalzo A. A. and Schofield L. Regulation of murine cerebral malaria pathogenesis by CD Id-restricted NKT cells

56. Hayakawa- Y. et al. Critical contribution of IFN-gamma and NK cells, but not perforin- mediated cytotoxicity, to anti-metastatic effect of alpha-galactosylceramide European journal of immunology. 2001. Vol. 31. 6. P. 1720—1727.

57. Hayakawa Y., Godfrey D. I. and Smyth M. J. Alpha-galactosylceramide: potential immunomodulatory activity and future application Current Medicinal Chemistry. 2004. Vol. 11. 2. P. 241—252.

58. Hayakawa Y., Rovero S., Forni* G. and Smyth M. J. Alpha-galactosylceramide (KRN7000) suppression of chemical- and oncogene-dependenf carcinogenesis Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2003. Vol. 100. 16. P. 9464—9469.

59. Hayes R. L., Arbit E., Odaimi M., Pannullo S., Scheff R., Kravchinskiy D., Zaroulis C. Adoptive cellular immunotherapy for the treatment of malignant gliomas Crit Rev Oncol Hematol. 2001. Vol. 39. P. 31—42.

60. Heath W., Belz G., Behrens G., Smith C Forehan S., Parish I., Davey G., Wilson N., Carbone F., Villadangos J. Gross-presentation, dendritic cell subsets, and the generationof immunity to cellular antigens Immunological reviews. 2004. 199. P 9—26.

61. Herberman R. B. Possible role of natural killer cell and other effector cells in immune surveillance against cancer J. Investigative Dermatology. 1984. Vol. 83. 1 P 137—140.

62. Hermon C Beral V. Breast cancer mortality rates are levelling off or beginning to decline in many western countries: analysis of time trends, age-cohort and ageperiod models of breast cancer mortality in 20 countries Br J Cancer. 1996. Vol. 73. 7. P. 955—960.

63. Hong S. et al. The natural killer T-cell ligand alpha-galactosylceramide prevents autoimmune diabetes in non-obese diabetic mice Nature Medicine. 200 V. Vol.7. P 1052—1056.

64. Hong S.M. et al. Lipid antigen presentation in the immune system; lessons learned from CD Id knockout mice Immunological Reviews. 1999. Vol. 169. 1 P. 31—44.

65. Hong S., Van Kaer L. Immune privilege: keeping an eye on natural killer T cells J Exp Med. 1999. Vol. 190. 9. P. 1197-1200. 76: Hori Т., 1С Mise, N. Kan, T. Okino, K. Satoh, S. Yamasaki et al. Therapeutic and life-prolonging effect of intrapleural injection with a streptococcal preparation, OK432, and IL2-cultured effusion lymphocytes to breast cancer patients with malignant pleural effusion Biotherapy. 1992. Vol. 5. 1. P. 21—29.

66. Ichinose Y., Yano Т., Asoh H., Yokoyama H., Fukuyama Y., Miyagi J., Kuninaka S., Terazaki Y. Intraoperative intrapleural hypotonic cisplatin treatment for carcinomatous pleuritis J Surg Oncol. 1997. Vol. 66. 3. P. 196— 200.

67. Ikeda H., Old L. J., Schreiber R. D. The roles of EFN у in protection against tumor development and cancer immunoediting Cytokine Growth Factor Rev. 2002. Vol. 1 3 P 95—109.

68. Ishihara S. et al. CD8+NKR-PrA+ T cells preferentially accumulate in human liver European Journal of Immunology. 1999. Vol. 29. P. 2406—2413. 80: Jahng A. W. et al. Activation of natural killer T cells potentiates or, prevents experimental autoimmune encephalomyelitis The Journal of Experimental Medicine. 2001. Vol. 194. 12. P. 1789—1799.

69. Johnson T. R, Hong S. M., Van Kaer L., Koezuka Y. and Graham B. S. NK T cells contribute to expansion of CD8(+) T cells and amplification of antiviral immune responses to respiratory syncytial virus Journal of Virology. 2002. Vol. 76. 9. P. 4294—4303.

70. Jones P. D., Castro J. E. Immunological mechanisms in metastatic spread and the antimetastatic effects of C. parvum. British journal of cancer. 1977. Vol. 35. 5 P 519—527.

71. Kaplan D. H., Shankaran V., Dighe A. S., Stockert E., Aguet M., Old L. J., Schreiber R. D. Demonstration of an interferon y-dependent tumor surveillance system in immunocompetent mice Proc Natl Acad Sci USA. 1998. Vol. 95. P. 7556—7561.

72. Kasper H. U., Drebber U., Zur Hausen A. et al. Dominance of CD4+ alpha/beta T-cells and inferior role of innate immune reaction in the liver metastases Anticancer Research. 2003. Vol. 23. 4. P. 3175—3181.

73. Kaufmann S. H. New issues in tuberculosis Annals of the rheumatic diseases. 2004. Vol. 63. P. 50—56.

74. Kawakami K., Kinjo Y., Uezu K., Yara S., Miyagi K., Koguchi Y Nakayama Т., Taniguchi M., Saito A. Monocyte chemoattractant protein-1-dependent increase of V alpha 14 NKT cells in lungs and their roles in Thl response and host defense in cryptococcal infection. Journal of immunology (Baltimore, Md. 1950). 2001. Vol. 167. П P 6525—6532.

75. Kawano Т., Cui J., Koezuka Y., Toura I., Kaneko Y., Motoki K., Ueno H., Nakagawa R., Sato H., Kondo E., Koseki H., Taniguchi M. CD Id-restricted and TCR-mediated activation of valphal4 NKT cells by glycosylceramides Science (New York, N.Y.). 1997. Vol. 278. 5343. P. 1626—1629.

76. Kawano T. et al. Antitumor cytotoxicity mediated by ligand-activated human V alpha24 NKT cells Cancer Research. 1999. Vol. 59. P. 5102—5105.

77. Kawano Т. et al. CD Id-restricted and TCR-mediated activation of Val4 NKT cells by glycosylceramides Science. 1997. Vol. 278. 5343. P. 1626—1629.

78. Kemp R. A., Backstrom В. Т., Ronchese F. The phenotype of type 1 and type 2 CD8+ T cells activated in vitro is affected by culture conditions and correlates with effector activity Immunology. 2005. Vol. 115. 3. P. 315—324.

79. Kenna Т., Mason L. G., Porcelli S. A. et al. NKT cells from normal and tumorbearing human liver are phenotypically and functionally distinct from murine NKT cells Journal of Immunology. 2003. Vol. 166. 11. P. 6578—6584.

80. Kenna T. et al. NKT Cells from Normal and Tumor-Bearing Human Livers Are Phenotypically and Functionally Distinct from Murine NKT Cells The Journal of Immunology. 2003. Vol. 171. P. 1775—1779.

81. Kikuchi A. et al: In vitro anti-tumour activity of alpha-galactosylceramide- stimulated human invariant Valpha24+NKT cells against melanoma British Journal of Cancer. 2001. Vol. 85. P. 741—746.

82. Kita H. et al. Quantitation and phenotypic analysis of natural killer T cells in primary biliary cirrhosis using a human CDld tetramer Gastroenterology. 2002. Vol. 123. P 1031—1043.

83. Kitamura H., Iwakabe K., Yahata Т., Nishimura S., Ohta A., Ohmi Y., Sato M., Takeda K., Okumura K., Van Kaer L., Kawano Т., Taniguchi M., Nishimura T. The natural killer T (NKT) cell ligand alpha-galactosylceramide demonstrates its immunopotentiating effect by inducing interleukin (IL)-12 production by dendritic cells and IL-12 receptor expression on NKT cells The Journal of experimental medicine. 1999. Vol. 189. 7. P. 1121—1128.

84. Kosaka A., Wakita D., Matsubara N., Togashi Y., Nishimura S., Kitamura H., Nishimura T. AsialoGMl+CD8+ central memory-type T cells in unimmunized mice as novel immunomodulator of IFN-gamma-dependent type 1 immunity Int Immunol. 2007. Vol. 19. 3. 249—256.

85. Korsgren M. et al. Natural killer cells determine development of allergen-induced eosinophilic airway inflammation in mice The Journal of Experimental Medicine. 1999. —Vol. 189. P. 553—562.

86. Kronenberg M. Toward an understanding of NKT cell biology: progress and paradoxes Annual review of immunology. 2005. Vol. 23. P. 877—900.

87. Kronenberg M. and Gapin L. The unconventional lifestyle of NKT cells Nature Reviews Immunology. 2002. Vol. 2. 8. P. 557—568.

88. Krutzik S. R, Tan В., Li H., Ochoa M. Т., Liu P. Т., Sharfstein S. E., Graeber T. G., Sieling P. A., Liu Y. J., Rea T. H., Bloom B. R., Modlin R. L. TLR activation triggers the rapid differentiation of monocytes into macrophages and dendritic cells Nature medicine. 2005. Vol. 11. 6. P. 653—660. 103. Lee P. Т., Benlagha K., Teyton L. and Bendelac A. Distinct functional lineages of human V alpha-24 natural killer T cells The Journal of Experimental Medicine. 2002. —Vol. 195. 5. P 637—641.

89. Lehuen A. et al. Overexpression of natural killer T cells protects Val4-Ja281 transgenic nonobese diabetic mice against diabetes The Journal of Experimental Medicine. 1998. —Vol. 188. P 1831—1839.

90. Levy O. et al. Disseminated varicella infection due to the vaccine strain of varicella-zoster virus, in a patient with a novel deficiency in natural killer T cells The Journal of Infectious Diseases. 2003. Vol. 188. P. 948—953.

91. Lisbonne M. et al. Cutting edge: invariant ValphaH NKT cells are required for allergen-induced airway inflammation and hyperreactivity in an experimental asthma model The Journal of Immunology. 2003. Vol. 171. P. 1637—1641. 107. Liu X., Li D., Zhang C Ba D. et al. Treatment of 121 patients with malignant effusion due to* advanced lung cancer by intrapleural transfer of autologus or allogenic LAK cells combined witbRIL-2 Med. Sc J. 1993. Vol. 8. P. 186—189.

92. Lucas M., Gadola S., Meier U. et al. Frequency and phenotype of Circulating Va24/Vbll double-positive natural killer Y cells during hepatitis С infection Journal of Virology. 2003. Vol. 77. 3. P. 2251—2257.

93. Matsuda J. L. et al. Mouse VI4i natural killer T cells are resistant to cytokine polarization in vivo Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2003. Vol. 100. 14. P. 8395—8400.

94. Matsuda J. L. et al. Tracking the Response of Natural Killer T Cells to a Glycolipid Antigen Using CD Id Tetramers The Journal of Experimental Medicine. 2000i Vol. 192. 5. P. 741—754.

95. Mempel M. et al. Natural killer T cells restricted by the monomorphic MHC class lb CDldl molecules behave like inflammatory cells The Journal of Immunology. 2002. Vol. 168. P. 365—371.

96. Metelitsa!X. S. et al: Human NKT cells mediate antitumor cytotoxicity directly by recognizing target cell CDld.with bound ligand or indirectly by producing IL-2 to activate NK cells The Journal of Immunology. 2001. Vol. 167. P. 3114— 3122.

97. Miyamoto K., Miyake S. and Yamamura T. A synthetic glycolipid prevents autoimmune encephalomyelitis by inducing TH2 bias of natural killer T cells Nature. 2001. Vol. 413. P. 531—534.

98. Mosmann T. R., Sad S. The expanding universe of T-cell subsets: Thl, Th2 and more. Immunol Today. 1996. Vol. 17. P. 138—146.

99. Motohashi S. et al. Preserved IFN-alpha production of circulating V alpha 24 NKT cells in primary lung cancer patients International Journal of Cancer. 2002. Vol. 1 0 2 2 P 159—165.

100. Mule J. J., Shu S., Schwarz S.I. Adoptive immunotherapy of established pulmonary metastases witrrLAK cells and recombinant interleukin-2 Science.. 1984. —Vol. 225. 4 6 6 9 P 1487—1489.

101. Nakagawa R., Nagafune I., Tazunoki Y. et al. Mechanisms of the antimetastatic effect in the liver and of the hepatocyte injury induced by a-galactosylceramide in

102. Naumov Y.N. et al. Activation of CD Id-restricted T cells protects NOD mice from developing diabetes by regulating dendritic cell subsets Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2001. Vol. 98. 24: P. 13838—13843.

103. Nieda M. et al. Therapeutic activation of V{alpha}24+V{beta}ll+ NKT cells in human subjects results in highly coordinated secondary activation of acquired and innate immunity Blood. 2004. Vol. 103. 2. P. 383—389.

104. Nieuwenhuis E. E., Neurath M. F., CorazzaN., Iijima H., Trgovcich J., Wirtz S., Glickman J., Bailey D., Yoshida M., Galle P. R., Kronenberg M., Birkenbach M., Blumberg R. S. Disruption of T helper 2-immune responses in Epstein-Barr virusinduced gene 3-deficient mice Proceedings of the NationalAcademy of Sciences of the United States of America. 2002. Vol. 99. 26. P. 16951—16956.

105. Nishikawa H. et al. CD4+ CD25+ T cells responding to serologically defined autoantigens suppress antitumor immune responses Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2003. Vol. 100. 19. P 10902—10906.

106. Norris S., Doherty D. G., Collins C. et al. Natural T cells in the human liver: cytotoxic lymphocytes with dual T cell and natural killer cell phenotype and function are phenotypically heterogeous and include Va24-JaQ and gdT cell receptor bearing cells Human Immunology. 1999. Vol. 60. P. 20—31.

107. Ohteki Т., Fukao Т., Suzue K., Maki C Ito M., Nakamura M., Koyasu. S. Interleukin 12-dependent interferon у production by CD8a+ lymphoid dendritic cells //JExpMed. 1999. Vol. 189. P 1981—1986. 124. Old L. J., Chen Y. T. New paths in human cancer serology J Exp Med. 1998.—Vol. 187. P 1163—1167.

108. Ortaldo J. R. et al. Dissociation of NKT Stimulation, Cytokine Induction, and NK Activation In Vivo by the Use of Distinct TCR-Binding Ceramides The Journal of Immunology. 2004. Vol. 172. P 943—953.

109. Ostrand-Rosenberg S. et al. Resistance to metastatic disease in STAT6-deficient mice requires hemopoietic and nonhemopoietic cells and is IFN-gamma dependent The Journal of Immunology. 2002. Vol. 169. P. 5796—5804. 127. Pal E. et al. Costimulation-Dependent Modulation of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis by Ligand Stimulation of V14 NK T Cells The Journal of Immunology. 2 0 0 1 Vol. 166: P 662—668.

110. Park S. H:, Kyin Т., Bendelas A., Carnaud G. The contribution of NKT cells, NK cells, and other gamma-chain-dependent non-T non-B cells to EL-12-mediated rejection of tumors The Journal of Immunology. 2003. Vol. 170. 3. P. 1197—1201.

111. Park S. H., Yang S. H., Lee С G., Youn J. W., Chang J., Sung Y. С Efficient induction of T helper 1 CD4+ T-cell responses to hepatitis С virus core and E2 by a DNA prime-adenovirus boost Vaccine. 2003. Vol. 21. P. 4555—4564.

112. Pejawar S. S., Parks G. D., Alexander-Miller M. Abortive versus productive viral infection of dendritic cells with a paramyxovirus results in differential upregulation of select costimulatory molecules Journal of virology. 2005. Vol. 79. 12. P. 7544—7557.

113. Perm I. Malignant melanoma in organ allograft recipients Transplantation. 1996. Vol. 61. P. 274—278.

114. Porcelli S., Yockey C. E., Brenner M.B. and Balk S. P. Analysis of T cell antigen receptor (TCR) expression by human peripheral blood CD4-8- alpha/beta T cells demonstrates preferential use of several Vbeta genes- and an invariant TCR alpha chain. Journal of Experimental Medicine. 1993. Vol. 178. P. 1—16.

115. Poulton L. D. et al. Cytometric and functionalanalyses of NK and NKT cell deficiencies in NOD mice International Immunology. 2001. Vol. 13. №*7. P. 887—896.

116. Prell et al. Frequency of Valpha24+CD161+ natural killer T cells and invariant TCRAV24-AJ18 transcripts in atopic and non-atopic individuals Immunobiology. 2003. Vol. 208. 4. P. 367—380.

117. Prussin C. and Foster B. TCR V-alpha-24 and V-beta-11 coexpression defines a human NKl T cell analog containing a unique ThO subpopulation The Journal of Immunology. 1997. Vol. 159. P. 5862—5870.

118. Pulendran В., Banchereau J., Maraskovsky E., Maliszewski C. Modulating the immune response with dendritic cells and their growth factors Trends in immunology. 2001. Vol. 22. 1. p. 41—47.

119. Roberts T. J., UnY., Spence P. M., Van Kaer L. and Brutkiewicz R. R. CDldl- dependent control of the magnitude of an acute antiviral immune response The Journal of Immunology. 2004. Vol. 172. P. 3454—3461.

120. Rosenberg S. A., Lotze B:5 Muul L. et al. Observation in the systemic administration of autologous lymphokineactivate killer cells and recombinant interleukin-2 to patients with metastatic cancer N. Engl. J. Med. 1985. Vol. 314. P 1485—1492.

121. Rosenberg S. A., Lotze В., Yang J. C. et al. Prospective randomized trial of high dose of IL-2 alone and in conjugation with LAK for treatment of patients with advanced cancer J. Natl.Cancer Inst. 1993. Vol. 85. P. 662—632.

122. Rosenberg S. A. A new era for cancer immunotherapy based on the genes that encode cancer antigens Immunity. 1999. Vol. 10. P. 281—287.

123. Sakaguchi S., Sakaguchi N., Shimizu J., Yamazaki S., Sakihama T.,„Itoh M., Kuniyasu Y., Nomura Т., Toda M., Takahashi T. Immunologic tolerance maintained by CD25+ CD4+ regulatory T cells: their common role in controlling autoimmunity, tumor immunity, and transplantation tolerance Immunol Rev. 2001. Vol. 182. P. 18—32..

124. Sato K., Yamashita N., Yamashita N., Baba M., Matsuyama T. Regulatory dendritic cells protect mice from murine acute graft-versus-host disease and leukemia relapse Immunity. 2003. Vol. 18. P. 367—379.

125. Sato M., Chamoto К., Tsuji Т., Iwakura Y., Togashi Y., Nishimura T. Thl cytokine- conditioned bone marrow-derived dendritic cells can bypass the requirement for Th functions during the generation of CD8+ CTL. J Immunol. 2001. —Vol. 167. P 3687—3691.

126. Schmieg J., Yang G., Franck R. W. and Tsuji M. Superior protection against malaria and melanoma metastases by a C-glycoside analogue of the natural killer T cell ligand alpha-Galactosylceramide The Journal of Experimental Medicine. 2003. —Vol. 198. 11. P 1631—1641.

127. Schmieg J., Yang G., Franck R. W., Van Rooijen N., Tsuji M. Glycolipid presentation to natural killer T cells differs in an organ-dependent fashion Proc Natl Acad Sci USA. 2005. Vol. 102. 4 P. 1127-1132.

128. Shankaran V., Ikeda Hi, Brace А. Т., White J. M., Swanson P. E., Old L. J., Schreiber R. D. IFNy and lymphocytes prevent primary tumour» development and shape tumour, immunogenicity Nature. 2001. Vol. 410. P. 1107—1 111.

129. Sharif S. et al. Activation of natural killer T cells by alpha-galactosylceramide treatment prevents the onset and recurrence of autoimmune Type 1 diabetes Nature Medicine. 2001. Vol. 7. P. 1057—1062.

130. Shiiba K., Suzuki R., Kawakami K. et al. Interleukin-2-activated killer cells: generation in collaboration with interferon and with supressor in cancer patients Cancer Immunol. Immunother. 1986. Vol. 21. P. 119—128.

131. Sidobre S. et al. The V14 NKT Cell TCR Exhibits High-AfFmity Binding to a Glycolipid/CDld Complex The Journal of Immunology. 2002. Vol. 169. P. 1340—1348.

132. Singh A. K., Yang J. Q.," Parekh V. V., Wei J., Wang С R., Joyce S., Singh R. R., Van Kaer L. The natural killer T cell ligand alpha-galactosylceramide prevents or promotes pristane-induced lupus in mice. European journal of immunology. 2005.—Vol.35. 4 P 1143—1154.

133. Singh А. К. et al. Natural killer T cell activation protects mice against experimental autoimmune encephalomyelitis The Journal of Experimental Medicine. 2 0 0 1 —Vol. 194. 12. P 1801—1811.

134. Smiley S. Т., Lanthier P. A., Couper K. N., Szaba F. M., Boyson J. E., Chen W., Johnson L. L. Exacerbated susceptibility to infection-stimulated immunopathology in CD Id-deficient mice Journal of immunology (Baltimore, Md. 1950). 2005. Vol. 174. 12. P 7904—7911.

135. Smyth M. J., Thi K. Y., Street S. E., MacGregor D., Godfrey D. J:, Trapani J. A. Perforin-mediated cytotoxicity is critical for surveillance of spontaneous lymphoma J Exp Med. 2000. Vol. 192. P. 755—760.

136. Smyth. M. J., Thia K. Y., Street S. E., Cretney E., Trapani J. A., Taniguchi M., Kawano Т., Pelikan S. В., Crowe N. Y., Godfrey D. I. Differential tumor surveillance by natural killer (NK) and NKT cells J Exp Med. 2000. Vol 191. P. 661—668.

137. Smyth M. J. et a l Sequential activation of NKT cells and NK cells provides effective innate immunotherapy of cancer The Journal of Experimental Medicine. 2005;—Vol.201.—№ 12. P 1973—1985.

138. Smyth M. J. and Godfrey D. Г. NKT cells and tumor immunity a doubleedged sword Nature Immunology. 2000. 1. P. 459—460.

139. Smyth M. J., Crowe N. Y., Takeda K., Yagita H. and Godfrey D. I. NKT cells conductors of tumor immunity? Current Opinion in Immunology. 2002. Vol 14. P 165—171.

140. Soda H., Koda K., Yasutomi J., Oda K., Takiguchi N., Saito N., Nakajima N. Adoptive immunotherapy for, advanced cancer patients using in vitro activated cytotoxic T lymphocytes J Surg Oncol. 1999. Vol 72. 4. P. 2 1 1 217.

141. Stanic A. K. et a l Another View of T Cell Antigen Recognition: Cooperative Engagement of Glycolipid Antigens by Val4Jal8 Natural TGR The Journal of Immunology. 2003. Vol 171. P. 4539—4551.

142. Stetson D. В. et al. Constitutive cytokine mRNAs mark natural killer (NK) and NK T cells poised for rapid1 effector function The Journal of Experimental Medicine. 2003. Vol. 198. 7. P. 1069—1076.

143. Stober D., Jomantaite I., Schirmbeck R., Peimann J. NKT cells provide help for dendritic cell-dependent priming of MHC class I-restricted CD8+ T cells in vivo The Journal of Immunology. 2003. Vol. 170. 5. P. 2540—2548.

144. Street S. E., Cretney E., Smyth M.J. Perforin and interferon-y activities independently control tumor initiation, growth, and,metastasis Blood. 2201. Vol.97.—P. 192—197. 163. Su Z., Segura M., Morgan K., Loredo-Osti J. C Stevenson M. M. Impairment of protective immunity to blood-stage malaria by concurrent nematode infection Infection and immunity. 2005. Vol. 73. 6. P. 3531—3539.

145. Svane I. M., Engel A. M., Nielsen M. В., Ljunggren H. G., Rygaard J., Werdelin O. Chemically induced sarcomas from nude mice are more immunogenicthan similar sarcomas from congenic normal mice Eur Jf Immunol. 1996. Vol. 26. P. 1844—1850.

146. Takeda A., Homma S., Okamoto Т., Kufe D., Ohno T. Immature dendritic cell/tumor cell fusions induce potent antitumour immunity European journal of clinical investigation. 2003. Vol. 33. 10. P. 897—904.

147. Takeda K., Kaisho Т., Akira S. Toll-like receptors Annu Rev Immunol. 2003. —Vol. 21. P 335—376.

148. Terabe M., Berzofsky J. A. NKT cells in immunoregulation of tumor immunity: a new immunoregulatory axis Trends Immunol. 2007. Vol. 28. 11. P. 491—496.

149. Terabe M: et al. NKT cell-mediated repression of tumor immunosurveillance by IL-13 and the IL-4R-STAT6 pathway Nature immunology. 2000. Vol. 1. 6 P. 515—520.

150. Thomas L. On immunosurveillance in human cancer Yale J Biol Med. 1982. —Vol. 55. P 329-333.

151. Trinchieri G. Interleukin-12 and the regulation of innate resistance and adaptive immunity Nat Rev Immunol. 2003. Vol. 3. P. 133—146.

152. Trobonjaca Z., Kroger A., Stober D. et al. Activating immunity in the liver. П. IFN-P attenuates NK cell-dependent liver injury triggered by liver NKT cell activation// The Journal of Immunology. 2002. Vol. 168. 8. P. 3763—3770.

153. Trobonjaca Z., Leithauser F., Moller P. et al. Activating immunity in the liver: L Liver dendritic cells (but not hepatocytes) are potent activators of IFN-a release by liver NKT cells The Journal of Immunology. 2001. Vol. 167. 3. P. 1413—1422. 173: Van der Vliet H. J. et al: Circulating V(alpha24+) Vbetall+ NKT cell numbers are decreased in a wide variety of diseases that are characterized by autoreactivetissue damage Clinical Immunology. 2001. Vol. 100. P. 144—148.

154. Varma T. K., Lin C. Y., Toliver-Kinsky Т. E. et all Endotoxin-induced gamma interferon- production: contributing cell types and key regulatory factors Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 2002. Vol: 9. 3. P. 530— 543.

155. Wang В., Geng Y B a n d Wang С R. CD 1-restricted NK T Cells Protect Nonobese Diabetic Mice from Developing Diabetes The Journal of Experimental Medicine. 2001. Vol. 194. 3. P. 313—320.

156. West W. H., Tauer K. W., Yanneli J. R. et al. Constant infusion EL-2 in adoptive immunotherapy of advanced cancer N. Engl. J.Mad.. 1987. Vol: 316. P 898—905.

157. Wilson S. B. and Delovitch T. L. Janus-like role of regulatory iNKT cells in autoimmune disease and tumour immunity. //Nature Reviews Immunology. 2003. 3 P. 211—222.

158. Yang Y., Huang Т., Huang X., Pardoll D. M: Persistent Toll-like receptor signals, are required for reversal of regulatory T cell-mediated CD8 tolerance Nat Immunol. 2004. Vol. 5. P. 508—515.

159. Yang J. Q. et al. Repeated alpha-galactosylceramide administration results in expansion of NK T cells and alleviates inflammatory dermatitis in MRL-lpr/lpr mice The Journal of Immunology. 2003. Vol. 171. P. 4439—4446.

160. Yang J. Q. et al. CD Id deficiency exacerbates inflammatory dermatitis in MRLlpr/lpr mice European Journal of Immunology. 2004. Vol. 34. P. 1723— 1732.

161. Zeng D., Lee M. K., Tung J., Brendolan A. and Strober S. Cutting edge: a role for CDl in the pathogenesis of lupus in NZB/NZW mice The Journal of Immunology. 2002. Vol. 164. P. 5000—5004.

162. Zeng D., Liu Y., Sidobre S., Kronenberg M. and Strober S. Activation of natural killer T cells in NZB/W mice induces Thl-type immune responses exacerbating lupus Journal of Clinical Investigation. 2003. Vol. 112. P. 1211—1222.